Scribd
Încărcați
205 vizualizări3 pagini

LP 5 HB AMG

Documentul descrie metoda Drabkin pentru dozarea hemoglobinei. Metoda constă în oxidarea fierului din hemoglobină la Fe3+ și transformarea tuturor tipurilor de hemoglobină în met-hemoglobină. Aceasta se combină cu cianura de potasiu pentru a forma cianmet-hemoglobină, un compus stabil care poate fi măsurat la lungimea de undă de 540 nm pentru a determina concentrația de hemoglobină.

Încărcat de

fanel
Drepturi de autor
© © All Rights Reserved
Respectăm cu strictețe drepturile privind conținutul. Dacă suspectați că acesta este conținutul dumneavoastră, reclamați-l aici.
Formate disponibile
Descărcați ca DOC, PDF, TXT sau citiți online pe Scribd
205 vizualizări3 pagini

LP 5 HB AMG

Documentul descrie metoda Drabkin pentru dozarea hemoglobinei. Metoda constă în oxidarea fierului din hemoglobină la Fe3+ și transformarea tuturor tipurilor de hemoglobină în met-hemoglobină. Aceasta se combină cu cianura de potasiu pentru a forma cianmet-hemoglobină, un compus stabil care poate fi măsurat la lungimea de undă de 540 nm pentru a determina concentrația de hemoglobină.

Încărcat de

fanel
Drepturi de autor
© © All Rights Reserved
Respectăm cu strictețe drepturile privind conținutul. Dacă suspectați că acesta este conținutul dumneavoastră, reclamați-l aici.
Formate disponibile
Descărcați ca DOC, PDF, TXT sau citiți online pe Scribd

LP 5.

Dozarea hemoglobinei / 2 ore


Hemoglobina
Derivatii hemoglobinei
Hemoglobina reprezinta componentul principal al eritrocitelor (95 % din proteinele
citoplasmatice eritrocitare) si serveste ca vehicul pentru transportul oxigenului si
dioxidului de carbon.
Hemoglobina este o proteina conjugata constand dintr-un tetramer format din 2
perechi de lanturi polipeptidice (globine 96%), fiecare dintre acestea fiind conjugat cu
un grup hem (4%), un complex al unui ion de fier cu pigmentul rosu, porfirina, care
confera sangelui culoarea rosie. Fiecare gram de hemoglobina poate transporta 1.34
mL oxigen per 100 mL de sange.
Rol
Hemoglobina fixeaza reversibil oxigenul molecular la nivelul plamanilor, cu formarea
oxihemoglobina HbO2 si dioxidul de carbon cu formarea carbhemoglobinei HbCO2,
forma de transport a CO2 de la esuturi la plmni.
Dozarea Hb ca cianmethemoglobina prin metoda Drabkin
Este metoda standard de hemoglobinometrie.
Principiul metodei
Fericianura de K oxideaza Fe feros (2+) din Hb la Fe 3+ si toate tipurile de Hb se
transforma n metHb. Aceasta se combin cu cianura de K transformndu-se n
cianmetHb- compus stabil.
Reactivi
Reactiv Drabkin
- 0,14 g fosfat monopotasic
- 0,2 g cianura de potasiu
- ad pana la 1000 ml (pH 6,4)
Se filtreaza prin hartia de filtru, se pastreaza la frigider in flacoane de sticla bruna,
bine inchise, aprox 2 luni.
Parametri obligatorii pt rv Drabkin:
- pH 7,3 7,5
- claritate

stabilitate

Standard de cianmetHb
Proba
Sange capilar sau venos tecoltat pe anticoagulant EDTA
Tehnica de lucru
-

In 2 eprubete de hemoliza se adauga 5 ml rv Drabkin.


Intro eprubeta se pune cu o micropipeta de hemoglobina, 0,02 ml sange, al
carei exterior se sterge cu o hartie de filtru.
In cealalta eprubeta se adauga 0,02 ml standard.
Se lasa 30 min in repaus.
Se citesc Ep si Es fata de ap distilat la = 540 nm in cuve de 1 cm.

Calcul
Cp = Ep / Es x Cs (g Hb /100 ml ser)
Condiii de analiza
Spekol
-

se verific lungimea de unda


cuve de 1 cm

Standard
- se utilizeaza o singura data (fiola de standard are valabilitate 1 ora de la
deschidere)
- se pastreaza la rece
Reactiv Drabkin
- cianura de potasiu ,f toxica, daca este umeda se pastreaza in exicator 24 48
ore
- pH 7,3 7,5
- pH ap distilat 6 6,5
- pastrare la frigider in sticle brune cu dop de plastic sau sticla
Pipete
-

curate, uscate, intacte

Proba, esantion de sange


- se recolteaza fara bule de aer pana la semn

Tehnica de lucru
- micropipeta se introduce la fundul eprubetei cu rv
- nu se introduc bule de aer
- se spal micropipeta in rv de 2-3 ori
- omogenizarea rv se face printr-o singura scuturare
- se respecta cu strictete timpul de reactie 30 min.
Valori normale
nou nascut: 17 20 g/100 ml
copii 0 - 1 an: 12 - 19 g/100 ml
copii 1 - 15 ani: 11,2 - 13,4 g/100 ml
brbai: 14 18 g/100 ml
femei: 12 16 g/100 ml
Variaii patologice
Scderi anemii, hemoragii
Creteri poliglobulii, deshidratare, insuficien pulmonar i cardiac, tumori

S-ar putea să vă placă și