Sunteți pe pagina 1din 1

PROTEINE TOTALE

(COLORIMETRIC)

PRINCIPIUL METODEI
Compusii cu legaturi peptidice (cel mai simplu compus fiind biuretul:
NH2-CO-NH-CO-NH2) formeaza cu ionul Cu+2 un complex colorat violet care poate
fi colorimetrat. Reactia este specifica pentru proteine, polipeptide si peptide.
Ureea, acizii aminati, amoniacul si alti compusi din lichidele biologice, nu interfereaza.

PREZENTAREA TRUSEI
Trusa contine reactivi ce se pot folosi pentru 20 sau 40 determinari.
REACTIV 1 : REACTIVUL BIURET STOC (2 fiole de 10 respectiv 20 ml.) care
contin tartrat de Na si K, sulfat de cupru, iodura de potasiu si hidroxid de
sodiu.
REACTIV 2 : DILUANT PENTRU REACTIVUL 1: (2 flacoane de 50 respectiv 100 ml.)
contine iodura de potasiu dizolvat în solutie de hidroxid de sodiu.
Se poate pastra la rece, întuneric si etans, timp de 3 luni.
REACTIVUL DE LUCRU(R1+R2) : 10 ml. din REACTIV 1 se dilueaza cu
40 ml. REACTIV 2. Solutia obtinuta se pastreaza la rece si întuneric bine
etansata timp de o saptamâna.
REACTIV 3 : SOLUTIE DE NaCl (2 fiole de 10 ml. respectiv 20 ml.)

TEHNICA DE LUCRU
Se pipeteaza în eprubete:PROBA(P), MARTOR PROBA(MP), MARTORREACTIV(MR)
REACTIVI U. M. P MP MR
SER, LCR ml. 0.1 0.1 -
REACTIV DE LUCRU (R1 + R2) ml. 3.5 - 3.5
REACTIV 3 ml. - 3.5 0.1
Continutul eprubetelor se omogenizeaza si dupa un repaus de 30 minute, se masoara
extinctia probei (EP) fata de extinctia martorului probei (EMP) si a extinctiei martorului
reactivului (EMR), în cuva de 1 cm la λ = 546 nm.

OBSERVATII: MP se executa, numai pentru seruri lipemice, icterice sau hemolitice.

CALCUL
g. PT / 100 ml. SER; LCR = (EP / a)x(VF / VI)

a = 2,77 coeficientul procentual al extinctiei ( ) pentru ? = 546 nm.


VF = 3,6 ml volum final
VI = 0,1 ml volum initial
Deci: g. PROTEINE TOTALE / 100 ml. SER ; LCR = EP x 13
Respectiv : g. PROTEINE / 100 ml. SER ; LCR = [EP – (EMP - EMR)] x 13
OBSERVATII
Determinarea PT în urina se face ca si dozarea în SER dar în plus se foloseste
ca precipitant acid percloric 0,66 N, iar precipitatul rezultat este apoi analizat.

VALORI NORMALE
SER:
Nou nascuti: 5,2 – 9,0 g. PT / 100 ml. SER
Copii sub 3 an: 5,5 – 8,6 g. PT / 100 ml. SER
Adulti si copii peste 3 ani: 6,6 – 8,6 g. PT / 100 ml. SER
LCR:
Nou nascuti: pâna la 0,09 g. PT / 100 ml. LCR
Copii si adulti: 0,015 – 0,045 g. PT / 100 ml. LCR

BIBLIOGRAFIE:
1.Reinhold J. G., Standard Meth. Chem. 1953. 1. 88.
2.Richterich R., Klinische Chemie, Basel, 1968.
3.Min. Sanatatii **”Metode curente pentru analize de laborator clinice”
Ed. Medicala 1982
4.Pesce I. A. and KAPLAN, A. I., “Methods in Clinical Chemistry,
The C. V. Mesby Company, Washington D. C. (1987).