Sunteți pe pagina 1din 21

PN-II-PT-PCCA Nr.

116/2012
Evaluarea genetic i monitorizarea factorilor moleculari i biotehnologici care influeneaz
performanele productive la speciile de sturioni de Dunre crescute n sisteme intensive recirculante
- AQUASTUR ETAPA 1. Identificarea tehnicilor moleculare de evaluare genetic i proiectarea unui model
experimental de cretere i monitorizare a sturionilor n acvacultur n scopul mbuntirii
performaelor productive.
Activitatea 1. Evaluarea statusului actual al populaiilor de sturioni din Romnia n mediul natural i n sistemele de
acvacultur.
Activitatea 2. Descrierea metodelor experimentale pentru studiul diversitii genetice folosind microsatelii i markeri
mitocondriali.
Activitatea 3. Selectarea markerilor moleculari de interes pentru identificarea speciilor de sturioni i hibrizilor
interspecifici.
Activitatea 4. Identificarea stadiului actual de cunoatere privind implicarea mecanismelor moleculare de rspuns la stres n
condiiile de cretere n acvacultur a sturionilor.
Activitatea 5. Descrierea metodologiilor de lucru pentru analiza genelor hsp i a proteinelor codificate de acestea.
Activitatea 6. Adaptarea facilitilor tehnologice experimentale de producere i cretere a sturionilor de Dunre de la
sistemul de cretere intensiv deschis la sistemul de cretere intensiv recirculant pentru realizarea unui model experimental
care s asigure monitorizarea sturionilor din acvacultur n vederea mbuntirii performanelor productive.
Activitatea 7. Estimarea capacitii portante a sistemelor recirculante experimentale destinat creterii intensive a sturionilor.
Activitatea 8. Analiza bilanului de mas a sistemelor recirculante experimentale n conformitate cu ipotezele asumate.
Activitatea 9. Elaborarea unor standarde minime de management tehnologic i operaional pentru sistemele recirculante
experimentale.
Activitatea 10. Elaborarea modelului tehnologic experimental de producere, cretere i monitorizare a sturionilor de cultur
i stabilirea variantelor de testare a ipotezelor asumate.
Activitate 11. Elaborarea protocolului experimental, stabilirea parametrilor de calitate a apei i a indicatorilor performanei
de cretere care vor fi monitorizai la speciile de pstrug, morun i ceg de Dunre.
Activitatea 12. Organizare workshop pentru diseminarea rezultatelor.
Activitatea 13. Conceperea i initierea paginii Web destinate proiectului.
Activitatea 14. Diseminarea rezultatelor la conferine naionale i internaionale i publicare de articole tiinifice.
Evaluarea statusului actual al populaiilor de sturioni din Romnia
Din aprilie 1998 toate speciile de sturioni au fost considerate ca fiind ameninate cu dispariia datorit comerului
exterior i au fost incluse n Anexa II a Conveniei privind Comerul Internaional cu Specii Ameninate de Faun i Flora
Slbatic (Washington 1973, ara depozitar a Conveniei este Elveia). Aceast Convenie adopt cu ocazia Conferinelor
Prilor (o data la doi ani, ultimele au fost la Santiago de Chile si Bangkok ) prin votul a 2/3 din rile Parte (exist 166 ri
Parte la CITES) Decizii i Rezoluii care sunt obligatorii pentru toate rile Parte la Convenie care vor s fac comer
exterior cu specii din Anexa II a CITES.
Administrarea naional a speciilor de sturioni protejate de CITES se face prin:
Autoritatea Naional de Management CITES (Direcia de Biodiveristate din MMP)
Autoritatea tiinific CITES (din anul 2003 INCDPM Subunitatea - INCDDD Tulcea a fost desemnat de MAPM ca
Autoritate tiinific pentru sturioni a Romniei)
Administraiile pescriilor din Romania (ANPA Bucuresti, ARBDD Tulcea).
n Romnia, producia actual de pete de consum se realizeaz n principal n exploataii de tip extensiv i
semiintensiv n care se practic, n special, creterea n policultur a crapului i a ciprinidelor asiatice. Produciile obinute
variaz ntre 3001.200 kg/ha, n funcie de tehnologiile aplicate, de productivitatea biologic natural a bazinelor piscicole
i de disponibilitile financiare ale agenilor economici.
n secolul trecut, Romnia reprezenta a treia ara din lume productoare i exportatoare de sturioni i icre negre. La
nceputul secolului XX, capturile de sturioni nregistrau aproximativ 1000 t/an comparativ cu anul 1992 cnd s-a raportat o
cantitate de circa 20 t/an, (Nvodaru, 1991).

Regresul capturilor totale de sturioni se datoreaz ndeosebi reducerii capturilor de morun. Barajele hidroelectrice
Porile de Fier I i II mpiedic migraia sturionilor spre locurile naturale de reproducere. nc din anii 1970, specialitii au
propus repopularea Dunrii cu puiet pentru refacerea stocurilor de sturioni (Manea, 1980).
Se impune reconstruirea habitatelor naturale pentru creterea stocurilor de sturioni din Dunre. Protejarea i
mbogirea fondului de sturioni din Dunrere se poate realiza printr-un program de repopulare cu puiet, obinut prin
reproducere artificial, la care s participe toate rile riverane (Cristea et al., 2011).
Din cele aproximativ 27 de specii de sturioni existente, pe teritoriul Romniei populaiile de sturioni sunt constituite
de 4 specii din 6, se presupune c ipul i viza sunt specii extirpate. Exploatarea intensiv n vederea aprovizionrii pieei
cu caviar a fcut ca populaiile de sturioni s fie n declin. Numai cteva specii mai prezint populaii numeroase i nu sunt
periclitate sau n declin. Continuarea pescuitului intensiv i distrugerea habitatelor lor naturale ar putea transforma existena
acestor specii n legende. (Patriche N., 2002)
Dezvoltarea produciei de acvacultur a avut un efect pozitiv asupra pescuitului de sturioni din habitatele naturale.
Ca urmare a repopulrii bazinelor hidrografice endemice sturionilor se indic o uoar cretere n multe ri, de exemplu, n
Ungaria captura total de la ceg a atins o valoare de vrf de aproximativ 30 t (Andras, 1995).
n Romnia, programele de repopulare a Dunrii cu sturioni autohtoni pentru protecia i conservarea speciilor aflate
n diferite categorii de suprimare au fost implementate ncepnd cu anul 2006 de ctre Ministerele Agriculturii si Dezvoltarii
Rural (MADR) i cel al Mediului si Padurilor: (MMP). Categoriile de risc ale speciilor de sturioni din bazinul hidrografic al
Dunrii sunt urmtoarele: Acipenser nudiventris - pe cale de dispariie/dispariie; Huso huso, Acipenser gueldenstaedti i
Acipenser stellatus - pe cale de dispariie, Acipenser ruthenus - specie vulnerabil, (Cristea et al., 2005).
Cu o lungime de 2857 km, Dunrea este al doilea fluviu ca mrime din Europa. Fluviul este divizat n trei regiuni:
Dunrea superioar (de la izvoare pna la Viena) 890 km, Dunrea mijlocie (de la Viena pn la Barajul Porile de Fier I)
993 km i Dunrea inferioar (de la Porile de Fier I pn la vrsarea n Marea Neagr) 942 km.
Construirea i punerea n funciune n anul 1974 a barajului de la Porile de Fier I a reprezentat o grea lovitur pentru
toate speciile de sturioni care se reproduceau n bazinul Dunrii. Practic, din acel moment, migraia acestor peti a fost
limitat pn n acea zon. Toate locurile i habitatele de reproducere situate n amonte de baraj au devent inacesibile,
devenind pierdute, iar specii precum morunul, nisetrul sau pstruga sunt considerate extincte n amonte de Drobeta TurnuSeverin. Totodat, zona n care a fost construit barajul i lacul de acumulare al acestuia (defileul Dunrii din aval de Belgrad
i pn la Drobeta Turnu-Severin) era un habitat important pentru depunerea icrelor pentru specii precum nisetrul sau
morunul, fiind o regiune cu fund pietros, cureni rapizi i adncimi relativ mari. De asemenea, construcia barajului a afectat
puternic i specificul habitatelor de reproducere din Dunrea Inferioar. Astfel, ncepnd cu 1974, cursul inferior al fluviului
a fost regularizat prin controlarea debitelor de ap cu ajutorul hidrocentralei Porile de Fier I. Ciclurile naturale ale
inundaiilor de primvar au fost practic stopate i controlate, la fel i sezoanele secetoase care conduceau la niveluri
sczute ale apelor n lunile august-septembrie. Toate acestea au condus la modificarea i alterarea unor ntregi habitate i
lanuri trofice din care speciile de sturioni erau parte component. Un efect nociv asupra habitatelor din Dunrea Inferioar
l-a avut i politica conducerii Romniei din anii 70 care a decis asanarea salbei de lacuri i a zonei inundabile de pe cursul
inferior al fluviului (din judeul Dolj pn la vrsarea n Marea Neagr) i ndiguirea acestor zone pentru redarea lor
agriculturii. Aceste msuri au condus la declinul accentuat al multor specii de plante i animale i s-au soldat cu dispariia
unor ecosisteme ntregi, afectnd puternic i sturionii. Nu este de neglijat nici efectul nociv al defririlor masive efectuate
n ultima sut de ani de-a lungul albiei Dunrii, dar i n tot bazinul su hidrografic. Diminuarea continu a zonelor
mpdurite din toate rile riverane fluviului a avut drept consecin creterea aluviunilor i a turbiditii apei, afectnd astfel
situsurile de reproducere ale speciilor de sturioni.
O alt cauz care a afectat dramatic populaiile de sturioni a fost suprapescuitul industrial i braconajul. Datorit
dimensiunii lor mari, dar i specificului de migrare previzibil, sturionii sunt uor de capturat. Pescuitul sturionilor din
motive comerciale, pentru carne i caviar, reprezint o afacere foarte prosper, avnd n vedere preul foarte mare al
caviarului. De exemplu, un kilogram de icre de morun se vinde pe pieele occidentale cu preturi foarte mari, fiind considerat
o delicates. Capturarea fiecrei femele adulte, apte de reproducere, n timpul migrrii pentru reproducere reprezint o
lovitur puternic dat speciilor respective. Pierderea unor astfel de indivizi aduli nu poate fii susinut la nesfrit de
populaie, totul sfrindu-se n final prin mpuinarea dramatic a exemplarelor reproductoare urmat de scderea
variabilitii genetice i, posibil, chiar de extincie.
Poluarea joac i ea un rol destul de important n reducerea numrului de sturioni. De exemplu, pentru speciile
longevive, cum ar fi morunul (poate tri pn la 100 de ani i peste), a fost pus n eviden acumularea de pesticide la
nivelul organelor interne i a muchilor. Folosirea abuziv i necontrolat a acestor substane chimice n agricultur poate
conduce n viitor la modificri importante n biologia acestei specii. De asemenea, n cazul nisetrilor, poluarea excesiv din
zona Mrii Negre a condus la dezechilibre hormonale majore i la apariia multor exemplare hermafrodite.
Un alt factor mai nou care a condus la reducerea efectivelor este practica din ce n ce mai rspndit de repopulare a
bazinelor naturale cu indivizi reprodui n mediu artificial i crescui n condiii de acvacultur. Repopularea necontrolat a
redus semnificativ diversitatea genetic a speciilor, n special datorit scderii numrului de indivizi nativi din mediul

natural. De asemenea, o alt practic cu implicaii dezastruoase pentru acest grup de peti este reprezentat de repopularea
cu hibrizi etichetai greit drept indivizi ai speciilor native.
Pe lng factorii descrii mai sus se adaug i unele aspecte particulare legate de biologia speciilor de sturioni. De
exemplu, una dintre principalele surse de hran pentru ceg, pe zona cursului inferior al Dunrii, era reprezentat de larvele
nevertebratului Palingenia longicaudata. La nceputul anilor 70, n urma msurilor de ndigurire, a polurii i a construciei
barajului de la Porile de Fier, aceast specie de efemerid a disprut afectnd puternic populaia de ceg din zon.
Din cauza pescuitului intensiv i a braconajului, ncepnd cu secolul al XIX-lea a fost observat un declin al
populaiilor de acipenseride. n secolul al XX-lea, capturile de sturioni din Romnia au sczut dramatic; de exemplu, n
1994 au fost capturate numai 11,5 tone comparativ cu aproximativ 200 tone/an n anii 1960 (Bacalbaa-Dobrovici, 1997).
Un impact foarte mare asupra acestor specii l-a avut pe lng supraexploatarea prin pescuit, construcia barajelor
hidroenergetice de pe Dunre.
Dup schimbarea regimului comunist, din decembrie 1989, timp de un deceniu a urmat o perioad de pescuit intens
i necontrolat al sturionilor din Dunrea inferioar, datorit lipsei cadrului legislativ care s reglementeze situaia acestor
specii de peti (Nvodaru et al., 1999a; Nvodaru et al., 1999b; Suciu, 2008). Conform datelor prezentate de Oel, 2007,
pentru perioada 1920-2005, capturile de sturioni din Romnia au sczut dramatic (Figurile 6-10).
Ca urmare a situaiei critice a efectivelor, n anul 2006, a fost emis Ordinul Nr. 262 al Ministerului Agriculturii,
Pdurilor i Dezvoltrii Rurale, mpreun cu Ministerul Mediului i Gospodririi Apelor (Nr. 330), prin care se interzice
ferm pescuitul tuturor celor 5 specii de sturioni (ceg, viz, morun, nisetru i pstrug) pe teritoriul Romniei, pe o durat de
10 ani. Prezentul Ordin permite pescuitul sturionilor numai pentru acvacultur, n scopul reproducerii artificiale i
repopulrii habitatului natural cu puiet.
O analiz mai amnunit a speciilor de sturioni din Dunre a artat ca Huso huso este considerat o specie extinct
n Dunrea superioar, critic periclitat n Dunrea mijlocie i vulnerabil n Dunrea inferioar (Hensel & Holcick, 1997;
CITES, 2000). Dup ali autori aceast specie este extinct n regiunile superioar i de mijloc i rar n Dunrea inferioar
(Suciu, 2008). Acipenser gueldenstaedtii este considerat o specie critic periclitat n toate zonele fluviului, iar Acipenser
stellatus este considerat o specie disprut din Dunrea superioar i din prima parte a Dunrii de mijloc. n Dunrea
inferioar, populaia de pstrug a fost dramatic redus din punct de vedere numeric, iar efectivele de nisetru se afl la
limita extinciei ca urmare a unui efect Allee (Suciu et al., 2008). Argumentele care vin n sprijinul acestei afirmaii sunt
declinul capturilor (Figurile 6-10), structura discontinu a categoriilor de vrst, lipsa recrutrii naturale sau recrutare
natural sczut.
Teoria elaborat de Warder Clyde Allee susine c n cazul populaiilor foarte mari, reproducerea i rata de
supravieuire scade cu densitatea populaiei. Aceast situaie este opus celei ntlnite n populaiile reduse numeric, unde o
densitate redus ncetinete rata de cretere datorit competiiei intraspecifice. n cazul sturionilor, densitatea sczut a
populaiei este corelat cu creterea negativ i n aceste condiii populaia este condamnat la dispariie. Un alt exemplu de
efect Allee este cel care a condus la dispariia Acipenser sturio din fluviile din vestul Europei, proces care s-a petrecut pe
durata a numai 10 ani.

Figura 6. Statistica capturilor de ceg din Romnia n perioada 1920-2005 (Oel, 2007).

Figura 7. Statistica capturilor de morun din Romnia n perioada 1920-2005 (Oel, 2007).

Figura 8. Statistica capturilor de nisetru din Romnia n perioada 1920-2005 (Oel, 2007).

Figura 9. Statistica capturilor de pstrug din Romnia n perioada 1920-2005 (Oel, 2007).

Figura 10. Statistica capturilor de viz din Romnia n perioada 1920-2005 (Oel, 2007).
Construirea i punerea n funciune n 1972 a barajului hidroenergetic Porile de Fier I a avut un impact devastator
asupra tuturor speciilor de sturioni care se reproduc n Dunre. Acest baraj este localizat la 862 km n amonte de gurile de
vrsare ale fluviului n Marea Neagr i mpiedic migraia sturionilor ctre situsurile de reproducere situate n amonte de
baraj. Cu cteva sute de ani nainte sturionii de pe Dunre ajungeau pn la Bratislava, Budapesta i Viena, dar astzi aceti
peti i-au limitat arealul doar la apele mrii i cursului inferior la fluviului (Kiss, 1997).
Cmpiile indundate ale Dunrii s-au schimbat semnificativ cnd barajele i digurile au fost construite. n trecut, zona
inundabil a Dunrii reprezenta 573.000 ha i delta fluviului 524.000 ha. La ora actual aproximativ 85% din zonele
inundabile au fost ndiguite. Delta Dunrii a fost de asemenea ndiguit, dar ntr-o proporie mai mic i acest lucru a fost
stopat dup cderea regimului comunist n 1989 din motive ecologice. Aproximativ 300 de lacuri de acumulare au rezultat
n urma ndiguirilor. Aceste lacuri rein anumite depozite aluviale, n special particule de dimensiuni mari i afecteaz
nivelul apei din Dunre. Astfel, barajele i digurile construite au determinat modificarea i alterarea unor ntregi habitate i
lanuri trofice din care speciile de sturioni erau parte component.
Un impact negativ l-au avut i irigaiile din agricultur i excavaiile de materiale din albia fluviului. n Romnia,
irigarea celor trei milioane de hectare de teren arabil a condus la scderea fluxului de ap. Pompele de irigaii ucid larvele i
juvenilii. De asemenea, a crescut poluarea cu pesticide i fertilizante folosite n agricultur. Excavaiile de nisip i pietri din
albia fluviului au distrus locurile de reproducere din fluviu din apropiere de Clrai.
Poluarea apei reprezint un factor cu un impact deosebit asupra tuturor speciilor din ntreg ecosistemul Dunrii.
Poluarea cu metale grele i pesticide este relativ ridicat la nivelul Dunrii inferioare (Oksiyuk et al., 1992) i afecteaz
biotopul n totalitate. Nivelul polurii cauzeaz probleme importante i n Marea Neagr, unde populaiile de sturioni i

desfoar ciclul trofic. Studiile realizate n aceast regiune (Zaitsev, 1992, 1993) au artat c poluarea n aceast regiune
este de cteva zeci pn la sute de ori mai mare comparativ cu Oceanele Atlantic i Pacific sau Marea Mediteran.
Concentraii mari de toxine din iei i diferite deeuri industriale, modific echilibrul hormonal al petilor, perturb
metabolismul i provoac creterea numrului de peti hermafrodii.
Eutrofizarea apelor de coast a avut un impact puternic asupra Mrii Negre. n perioda 1950-1980 cantitatea de
nutrieni i substane organice adus de principalii aflueni Dunrea, Nistru i Nipru a crescut cu 400-500% (Zhuravleva
& Grubina, 1993), determinnd o cretere accentuat a fitoplanctonului. Biomasa meduzei de ap rece Aurelia aurita a
crescut enorm de la 1 milion de tone metrice n 1960 la 500 milioane de tone metrice n 1980. Simultan, a avut loc o scdere
a crustaceelor planctonice i a petilor planctofagi, inclusiv a sturionilor (Zaitsev, 1992).
Pentru salvarea speciilor de sturioni din bazinul Dunrii au fost adoptate diferite msuri care vizeaz monitorizarea
populaiilor naturale, demararea unor programe eficiente de repopulare i exploatare durabil pe termen lung a stocurilor
existente. Romnia se numr printre cei 167 de semnetari ai conveniei i mpreun cu ri din regiunea Mrii Negre, sub
patronajul CITES, a pus bazele n 2001 a BSSMAG (Black Sea Sturgeon Mangement Action Group). n 2003, specialiti
din Romnia, Bulgaria, Serbia i Ucraina au pus la punct o strategie regional pentru protecia acestor specii, urmrind
anumite aspecte cum ar fi: meninerea diversitii genetice n cadrul populaiilor, refacerea populaiilor sntoase, apte de
reproducere, reconstruirea habitatelor de reproducere i dezvoltarea fermelor piscicole care s creasc sturionii pentru
consum i icre, saturnd piaa i eliminnd astfel braconajul i pescuitul din mediul natural al acestora. n dezvoltarea unor
programe eficiente de management al acestor resurse naturale deosebit de valoroase s-au implicat i diferite organizaii nonguveramentale. Astfel, International Association for Danube Research a adoptat n 2006 un plan de aciune pentru
conservarea speciilor de acipenseride din bazinul Dunrii (Action Plan for the Conservation of the Sturgeons
(Acipenseridae) in the Danube River Basin).
Selectarea markerilor moleculari de interes pentru identificarea speciilor de sturioni i hibrizilor interspecifici.
Descrierea metodelor experimentale pentru studiul diversitii genetice la sturioni.
Dezvoltarea markerilor ADN a avut un impact puternic asupra geneticii animalelor. Tehnologiile bazate pe markeri
ADN au revoluionat modul n care sunt conduse cercetrile asupra petilor, i implicit asupra sturionilor. Cu ajutorul
markerilor moleculari este posibil s observm i s exploatm corespunztor variaia genetic la nivelul ntregului genom.
n cazul geneticii petilor, n general, au fost i sunt utilizai cu succes mai multe tipuri de markeri moleculari, precum ADN
mitocondrial, RFLP, RAPD, AFLP, microsatelii sau EST. Markerii moleculari au permis progrese rapide n studiile de
acvacultur asupra variabilitii genetice i ncrucirilor selective, identificrii speciilor, populaiilor i subpopulaiilor.
Tipuri de markeri ADN
Toate organismele sunt supuse mutaiilor ca rezultat al proceselor celulare normale sau a interaciilor cu mediul, fapt
ce conduce la variaia genetic. mpreun cu selecia i driftul genetic, mutaiile determin variaia genetic intra- i interindividizi, specii sau ordine taxonomice superioare. Pentru ca aceast variaie s fie util geneticienilor, trebuie s manifeste
proprietile de a fi motenit i identificabil, fie ca o variaie fenotipic uor de recunoscut, fie ca o mutaie ce poate fi
identificat prin tehnici moleculare. La nivelul ADN, tipurile de variaie genetic se refer la substituia unei baze, numit i
SNP (Single Nucleotide Polymorphism), inserii sau deleii de secvene nucleotidice la nivelul unui locus i rearanjamentul
segmentelor de ADN la locusul repectiv. Prin acumularea lor n cursul evoluiei, mutaii de diverse tipuri exist n diferite
specii i numrul i gradul acetor mutaii definete variaia genetic n cadrul speciei. Tehnologia bazat pe markeri ADN se
aplic cu scopul de a evidenia aceste mutaii.
Markerii moleculari pot fi clasificai n markeri de tip I, asociai cu gene cu funcie cunoscut i markeri de tip II
asociai cu segmente genomice necunoscute (OBrien, 1991). Markerii de tipul I nu au fost iniial apreciai n studiile de
genetic la peti, dar n timp a devenit foarte clar c aceti markeri sunt foarte importani att n ceea ce privete studiile la
populaiile slbatice, ct i la cele de acvacultur. n plus, fa de rolul lor n studiile populaionale, markerii de tip I au
devenit foarte importani pentru studierea linkage- ului i pentru cartarea QTL (Quantitative Trait Loci). Astfel, acest tip de
markeri poate fi utilizat n studii de genomic comparativ, evoluia genomului sau identificarea de gene candidate pentru
dezvoltarea unor programe de acvacultur la diferite specii.
Comparaii interspecifice se pot face i cu ajutorul markerilor de tip II, dar acestea sunt limitate la taxoni foarte
apropiai, o cerin foarte important n cazul acestor comparaii constnd n conservarea secvenelor. Tipul II de markeri sa dovedit util n identificarea speciilor, populaiilor i subpopulailor, dar i a hibrizilor obinui ntre diferite specii de
sturioni, iar, mai recent, acest markeri pot fi corelai cu studiul QTL.
ADN mitocondrial (ADNmt)
Studiile de la vertebrate au artat c divergena de secven se acumuleaz mai rapid n ADN mitocondrial dect n
cel nuclear (Brown, 1985). Acest fenomen a fost atribuit unei rate a mutaiilor mai rapid n ADN mitocondrial care poate fi
rezultatul lipsei mecanismelor de reparare n timpul replicrii. Totodat constituie un avantaj, faptul c genomul
mitocondrial haploid se motenete exclusiv pe linie matern, este mai mic i astfel poate fi mai uor de manipulat, este
uniform ca mrime (1518 kb la peti). Datorit moteniriii pe cale matern, secvena ADN mitocondrial este nalt
conservat i astfel este posibil identificarea relaiilor de paternitate n cadrul unei populaii de interes (Ferris & Berg,

1982). Molecula de ADN mitocondrial este transcris aproape n ntregime, cu excepia unei regiuni de control de
aproximativ 1 kb (Dloop), la nivelul crei se iniiaz replicarea i transcrierea moleculei. n general, segmente necodante
de tipul Dloop manifest un nivel crescut de variaie comparativ cu secvenele codificatoare, de exemplu, gena pentru
citocromul b, posibil datorit reducerii constrngerilor funcionale i unei presiuni de selecie mai mici. Analiza ADNmt a
fost utilizat intensiv pentru a investiga structura populaiilor i relaiile filogenetice dintre speciile de sturioni.
ADN mitocondrial conine informaie genetic care permite cercettorilor s deduc relaiile ntre speciile nrudite i
istoria unei specii. Majoritatea studiilor de polimorfism a ADNmt la sturioni au artat nivele mici de divergen molecular
ntre speciile analizate comparativ. Totodat este posibil folosirea ADNmt ca marker pentru identificarea speciilor de
sturioni, de aici rezultnd i importana practic n identificarea provenienei diferitelor loturi de caviar. Metoda utilizat n
acest sens se bazeaz pe diferenele nucleotidice existente la nivelul secvenei nucleotidice i care constituie o caracteristic
de specie (Birstein et al., 1998). n aceste studii, apariia unui produs amplificat prin PCR cu un set de primeri specifici
speciei se consider concludent pentru diagnosticul molecular al speciei respective. Neajunsul metodei const n faptul ca
uneori pot fi necesare pn la 25 de reacii PCR diferite pentru o identificare exact a speciei de provenien a unei probe.
Cu toate acestea, metoda prezint avantajul de a fi ieftin i destul de simpl n identificarea celor mai importante trei specii
de sturioni productoare de caviar (H. huso, A. gueldenstaedtii i A. stellatus). Dei aceast tehnic se bazeaz pe diferenele
nucleotidice interspecifice, pot aprea rezultate fals pozitive, deoarece, n principiu ultimul nucleotid al unui primer este
responsabil cu identificarea speciei. Pentru a exclude rezultatele fals pozitive este necesar includerea unor probe standard
n fiecare analiz. Astfel, substituiiile nucleotidice folosite pentru diferenierea speciilor A. gueldenstaedtii i A. persicus
(Birstein et al., 1998) nu au fost susinute de studii ulterioare (Ludwig et al., 2002). Cu toate acestea, metoda de identificare
a speciilor de sturioni folosind ADNmt poate fi util i de ncredere dac reacia PCR se desfoar corect.
Microsateliii
Microsateliii (VNTR - Variable Number of Tandem Repeats) sunt secvene repetitive scurte, de 2-9 pb, dispersate
n ntregul genom i cu un nalt grad de polimorfism. Microsateliii reprezint markeri moleculari de tip II (necodani i cu
capacitate de selecie) cu o lungime total variind ntre 20 i cteva sute de perechi de baze (OBrien, 1991).
Aceti markeri sunt numeroi la toate speciile de vertebrate, iar la peti apar la fiecare aproximativ 10 kpb (Wright,
1993). Microsateliii sunt distribuii omogen n genom pe toi cromozomii i pe toate regiunile cromozomale. Astfel,
markerii de acest tip au fost identificai n interiorul unor regiuni codante (Liu et al., 2001), n introni sau n regiuni
necodificatoare. La eucariote motivele di- si tetranucleotidice sunt organizate n clustere n regiunile necodante.
Majoritatea locilor microsatelitari sunt relativ mici i acest aspect este foarte important pentru amplificarea cu
uurin prin reacia PCR. Majoritatea microsateliilor (3067%) sunt repetiii dinucleotidice. Trstura caracteristic a
microsateliilor este gradul de hipervariabilitate n cadrul speciilor i populaiilor. Se consider c, n general, microsateliii
care prezint un numr mare de repetiii au i un grad ridicat de polimorfism, dei aceast regul nu se respect ntotdeauna.
Polimorfismul acestor markeri este bazat pe diferena de mrime datorat numrului variabil de repetiii la un anumit locus.
Aceti markeri prezint o evoluie extrem de rapid, cu o rat a mutaiilor 10 -210-6 mutaii/generaie (Goldstein et al., 1995;
Ellegren, 2000), rat ce este cu cteva ordine de mrime mai mare dect cea pentru markeri nerepetitivi (10 -9) (Li, 1997). Se
presupune c aceste mutaii sunt datorate alunecrii polimerazei de pe catena matri n timpul replicrii ADN, fapt care
determin apariia unor diferene n ceea ce privete numrul de repetiii (Tautz, 1989). Analiza microsateliilor de tipul
(AC)n la 5 clase de vertebrate (mamifere, psri, reptile, amfibieni i peti) au artat c lungimea este factorul major care
influeneaz rata mutaiilor. Totui, la anumite specii de peti au fost observate alele cu mari diferene n ceea ce privete
numrul de repetiii care corespund unui model. Indiferent de mecanismul specific, modificrile care afecteaz numrul de
uniti repetitive conduc la apariia ntr-o populaie a unui numr mai mare de alele pentru fiecare locus microsatelitar.
Prin anumite caracteristici pe care le posed cum ar mrimea relativ redus, uurina cu care pot fi amplificai prin
PCR, modul de motenire codominant i gradul nalt de polimorfism, microsateliii se dovedesc markeri utili i pot fi
utilizai ntr-un numr mare de studii n domenii variate ale biologiei moleculare, incluznd epidemiologia molecular,
genetica populaiilor i cartarea genetic. n studiile de acvacultur i genetica petilor, microsateliii sunt utilizai pentru
caracterizarea genetic a stocurilor, selecia indivizilor n vederea reproducerii, construirea harilor de linkage, cartarea i
identificarea genelor pentru QTL i aplicaii n programele de reproducere asistat.
Prin analiza microsateliilor se realizeaz profilul genetic individual (amprenta genetic), se pot stabili interrelaiile
dintre diferii indivizi i se evalueaz frecvena alelic a acestora n cadrul populaiilor. Lund n considerare metodele
moleculare disponibile la ora actual este posibil evaluarea polimorfismelor de lungime la un numr mare de indivizi
pentru analize genetice intra- i interpopulaionale. Unii microsatelii posed un numr foarte ridicat de alele pentru un locus
i sunt foarte potrivii pentru identificare genitorilor, respectiv descendenilor acestora n populaiile mixte, n timp ce alii
au un numr mai mic de alele i sunt recomandai n studiile de genetic a populaiilor i filogenie (Estoup & Angers, 1998).
Primerii dezvoltai pentru amplificarea locilor microsatelitari la o specie pot conduce de cele mai multe ori la amplificarea
locilor similari de la specii strns nrudite (Estoup & Angers, 1998), acesta reprezentnd un avantaj n special n analiza
populaiilor reduse numeric sau aflate n pragul extinciei.
n ciuda numeroaselor avantaje pe care le ofer n studii moleculare diverse, microsateliii prezint ns i unele
neajunsuri. Una dintre problemele cele mai importante legate de aceti markeri este prezena alelelor nule (O'Reilly &
Wright, 1995; Dakin & Avise, 2004). O alel nul este o alel care dei este prezent la un individ/populaie nu poate fi

detectat. Acest tip de alele apar cnd se produc mutaii n zona de hibridizare a primerilor (localizat naintea repetiiilor n
tandem) i nu la nivelul microsateliilor propriu-zii. Prezena alelelor nule la un locus poate determina apariia unor
rezultate eronate, mai ales dac este vorba de analiza unui individ din punct de vedere al paternitii i, astfel, majoritatea
cercettorilor prefer s renune la analiza unor astfel de loci (Hansen, 2003).
La sturioni studiile bazate pe analiza markerilor microsatelitari au fost iniiate la speciile nord-americane i n
prezent, fiecare dintre aceste specii au fost studiate din punct de vedere al diversitii genetice, n ciuda dificultilor de
colectare a probelor biologice reflectate n numrul redus de indivizi analizai. O alt aplicaie a microsateliilor la sturioni a
urmrit utilizarea acestor markeri pentru identificarea provenienei caviarului. Jenneckens et al. (2001) a demonstrat c
locusul LS39 prezint o alel unic n cazul speciei A. stellatus care nu a fost identificat i la celelalte specii de sturioni.
Implicarea mecanismelor moleculare de rspuns la stres n condiiile de cretere n acvacultur a sturionilor
Organismele rspund la o varietate de factori de stres prin prin sinteza rapid a unui set de proteine de oc termic
(Heat Shock Proteins hsp). Funciile precise ale proteinelor hsp sunt nc necunoscute, dar exist o serie de dovezi c
aceste proteine sunt eseniale pentru supravieuirea n condiiile variaiilor de temperatur, jucnd un rol esenial n
dezvoltarea termotoleranei. Proteinele de oc termic sunt ubiquitare, fiind ntlnite la o serie larg de organisme, de la
bacterii i drojdii, la mamifere. Proteinele Hsp sunt sintetizate n organism ca rspuns la o varietate de factori de stres (Deng
et al., 2009). Exist mai multe tipuri de proteine hsp, clasificate pe baza greutii lor moleculare n proteine de tip Hsp90,
Hsp70, Hsp60 i proteine Hsp cu greutate molecular mai mic. Aceste familii de proteine sunt constituite din mai multe
izoforme exprimate constitutiv sau induse. Printre funciile exercittate de aceste proteine la nivel celular se numr:
repararea, mpachetarea corect i translocarea protteinelor intracelulare, supresia agregrii proteinelor i reactivarea
proteinelor denaturate (Feige et al., 1996). De asemenea, joac un rol esnial n activarea receptorilor hormonilor nucleari i
a diferitelor componente ale sistemului imunitar i interacioneaz cu molecule de semnalizare din ciclul celular i diverse
ci prin care se declaneaz moartea celular.
Dintre proteinele de oc termic, Hsp70 este cel mai mult conservat, fiind distribuit n special n citoplasm, dar
fiind ntlnit i la nivelul altor componente celulare. Proteinele Hsp60 prezint funcii similare cu Hsp70, fiind implicate n
translocarea i asamblarea proteinelor i prevenirea formrii de agregate proteice (Hartl & Hayer-Hartl, 2002). Forma
indus a Hsp60 este localizat, n principal, n matricea mitocondrial. La peti, nivelul de expresie a proteinelor de tip Hsp
a fost corelat cu expunerea la diferii factori de stres ntlnii n mod obnuit n cadrul uni sistem ecologic, iar rezultatele
obinute au sugerat c rspunsul la stress la nivel celular poate juca un rol important n creterea ratei de supravieuire a
indivizilor (Iwama et al., 1998). Asfel, proteinele Hsp au fost propuse ca biomarkeri ai stresului celular sau ca indicatori
nespecifici ai expunerii la diferii factori cu efect toxic asupra organismului.
n condiii de acvacultur, petii sunt supui diferitor factori de stres care pot afecta creterea i starea de sntate a
acestora (Iwama et al., 1997). Majoritatea cercetrilor asupra efectului diferiilor factori de stres au fost efectuate pe specii
de peti telosteeni, existnd mult mai puine date cu privire la rspunsul sturionilor la stres. Informaii despre modul n care
sturionii rspund la factori de stres similari celor ntlnii n condiii de acvacultur sunt eseniale pentru a nelege cum
anumite practici din cresctorii le afecteaz performanele de cretere i starea de sntate, att n condiii de acvacultur ct
i dup eliberarea acestora n fluviu n cadrul unor programe de repopulare.
Cunoaterea mecanismelor ce stau la baza adaptrii fiziologice a sturionilor la condiiile de mediu este foarte
important, n special n stadiile timpurii de dezvoltare. Pentru ca dezvoltarea i creterea sturionilor n acvacultur s se
desfoare cu rezultate optime se impune respectarea unor condiii referitoare la calitatea apei, substratului, bazinului,
hranei, etc. Toi factorii enumerai anterior trebuie s se gseasc ntre anumite limite preferate de anumite specii de
sturioni. Din acest motiv cunoterea unor metode de evaluare a efectelor pe care anumii factori de stres le produc n special
asupra strii de sntate i a performanelor de cretere n captivitate este indispensabil pentru dezvoltarea sturionculturii.
Rspunsurile petilor la stresul din mediu de via au fost grupate ntr-un sens larg n prmare i secundare. n cazul
rspunsurilor primare, axa hipotalamic-pituitar-suprarenal este stimulat conducnd la un rspuns hormonal manifestat
prin secreia de hormoni corticosteroizi n circulaie (Iwama et al., 2006). Sinteza de cortizol i eliberarea acestuia de la
nivelul corticosuprarenalelor dureaz cteva minute, n timp ce eliberarea de catecolamine se produce fooarte rapid, ntr-un
interval de ordinul secundelor (Barton, 2002). Astfel, concentraia plasmatic sau seric a corizolului reprezint un indicator
a stresului suferit de indivizi n diferite condiii de mediu (Lankford et al., 2005; Webb et al., 2007). Eliberarea imediat a
catecolaminelor conduce la transformarea rezervelor de glicogen n glucoz n cadrul glicogenolizei i determin o cretere
a concentraiei de glucoz circulant. Astfel, modificrile serice sau plasmatice ale glucozei reprezint de asemenea un
indicator util n evaluarea stresului la peti (Wedemeyer et al., 1990). Rspunsurile secundare includ modificri ale
concentraiilor ionilor n plasm i n esuturi, dar i a nivelului anumitor metabolii, proteinelor stres de tip Hsp, modificri
hematologice, etc. Corelate, aceste rspunsuri secundare conduc la modificri ale metabolismului, respiraiei, echilibrului
acido-bazic i mineral, funciei imune i rspunsurilor la nivel celular. n plus, se produc rspunsuri teriare la stres care se
refer la perturbri ale creterii, rezistenei la boli sau comportamentului (Wedemeyer et al., 1990).
La sturioni exist puine studii care urmresc rspunsul la stres prin monitorizarea nivelului seric al cortizolului sau
au unor metabolii. Falahatkar et al. (2009) au evaluat rspunsul fiziologic al speciei H. huso la plasarea n bazine speciale

la densiti diferite. Un studiu similar, a fost efectuat pentru a monitoriza stresul rezultat n urma transportului timp de 7,5
ore ntre dou ferme piscicole a unor indivizi aparinnd speciei nord-americane, Scaphirhynchus albus i pentru hibridului
acesteia cu S. platorynchus (S. albus X platorynchus) (Barton et al., 2000). Ca i indicatori de stres, au fost monitorizate
variaiile concentraiei cortizolului, glucozei, lactatului i ionului de Cl-, fiind nregistrate creteri semnificative ale acestora.
n ceea ce privete temperatura apei, sturionii sunt specii mai puin sensibile comparativ cu alte specii de
acvacultur, suportnd un spectru larg al temperaturii apei, ns pentru a obine performane de cretere trebuie respectate
anumite limite care depind de specie i de stadiul dezvoltrii acesteia. Limitele de temperatur compatibile cu supravieuirea
speciilor de sturioni sunt situate ntre 0C i 32C, ns se hrnesc n general ntre limitele de 6C i 26C. Optimul de
cretere este diferit penru fiecare specie i variaz n general ntre 16 i 24C. La ora actual, dei numrul de studii viznd
acest subiect este n cretere, exist un numr limitat de informaii n ceea ce privete rspunsul acestor specii la creterea
temperaturii, n special n timpul primelor stadii de via, cnd expunerea i vulnerabilitatea la influenele mediului este
crescut (Parsley et al. 2002).
Majoritatea studiilor au fost realizate la speciile de sturioni nord-americane, printre care Acipenser medirostris.
Astfel, Van Eenennaam et al., 2005 au studiat impactul variaiilor de temperatur a mediului asupra dezvoltrii embrionare
a acestei specii i au apreciat c limita superioar a temperaturii optime este de 17-18C. Embriogeneza i dezvoltarea
normal nu sunt afectate dac au loc n ape cu o temperatur mai mic dect cea optim. Temperaturile cuprinse n
intervalul 17.5-22C au mpiedicat dezvoltarea normal a embrionilor, iar n cazul unor temperaturi mai mari de 23C
supravieuirea embrionilor a ncetat n stadiul de gastrul. De asemenea, n cazul aceleiai specii a fost studiat impactul
temperaturilor constante de 18, 20, 22, 24 i 28C asupra supravieuirii larvelor (Linares-Casenave et al., 2005).
Temperatura a avut o influen semnificativ asupra larvelor, n sensul c expunerea la temperaturi cuprinse ntre 22-28C a
crescut riscul apariiei unor defecte, cum ar fi lordoza notocordului, iar temperaturile mai mari de 26C sunt letale.
Stresul termic a fost monitorizat pe baza expresiei proteinelor Hsp n cazul larvelor de sturioni expuse la temperaturi
variind ntre 18 i 28C. Expresia Hsp a crescut semnificativ la temperaturi mai mari de 22C. n general, n cazul larvelor
care au prezentat un nivel de expresie ridicat pentru Hsp a crescut mortalitatea i riscul apariiei unor defecte n cursul
dezvoltrii.
Descrierea metodologiilor pentru analiza genelor hsp i a proteinelor codificate de acestea
Tehnica Real-Time PCR
Prin tehnica PCR are loc copierea i amplificarea unor secvene specifice de ADN sau ADNc obinndu-se sute sau
chiar mii de copii. n cazul unei reacii PCR clasice, detecia i cuantificarea produilor amplificai se realizeaz la finalul
reaciei PCR, prin metode clasice de identificare a produilor amplificai cum este electroforeza n sistem submers.
ntr-o reacie Real-Time PCR cantitatea de produs PCR format este stabilit n timpul fiecrui ciclu, prin utilizarea
unor molecule fluorocrom numite molecule raportor. Aceste molecule raportor pot fi, n general, de dou tipuri: fluorocromi
raportor care se intercaleaz la nivelul ADN dublu catenar (ex.: SYBR Green) i fluorocromi care sunt ataai de sonde
specifice (sonde TaqMan, Molecular Beacons, etc.).
Moleculele de tip SYBR Green prezint o fluorecen sczut cnd se gsesc liberi n soluie dar emit un semnal
puternic fluorescent dup legarea la ADN dublu-catenar. Astfel, creterea semnalului fluorescent este direct proporional
cu numrul de molecule de ADN formate n timpul fiecrui ciclu al reaciei. Sondele TaqMan sunt sonde oligonucleotidice
de 18-22pb, complementare cu secvena ADN int, care au ataat la captul 5` o molecul raportor iar la captul 3` un
quencher. Fluorescena moleculei raportor este foarte slab deoarece se afl n proximitatea moleculei quenchercare i
anuleaz fluorescena. n timpul reaciei PCR sonda se ataeaz specific la molecula de ADN, ntre primerul sens i cel
antisens. n timpul amplificrii, ADN polimeraza (care prezint activitate 5` exonucleazic) scindeaz sonda TaqMan i
elibereaz molecula raportor i molecula quencher. Astfel, are loc separarea moleculei raportor de molecula quencher,
ceea ce determin creterea fluorescenei raportorului, proporional cu cantitatea de produs PCR.
Modificarea fluorescenei n timpul reaciei PCR (att n cazul utilizrii moleculelor de SYBR Green ct i a
sondelor TaqMan) este evaluat de un detector care msoar intensitatea fluorescenei. Prin reprezentarea intensitii
fluorescenei n funcie de numrul cicluri PCR, se obine un grafic de amplificare care reprezint acumularea ampliconilor
n timpul fiecrui ciclu al reaciei PCR. n cazul tehnici Real-Time RT-PCR se realizeaz o etap adiional de reverstranscriere, n care se sintetizeaz ADNc din ARN deoarece moleculele de ADN sunt mai stabile dect cele de ARN.
Tehnica Western-blotting
Western-blotting sau immunoblotting este o metod de identificare i cuantificare a unor proteine specifice dintr-un
extract proteic total. Proteina de interes este separat dintr-un extract proteic total prin electroforez, este imobilizat pe un
suport (membran) iar apoi membrana este incubat cu un anticorp specific. Complexul anticorp-protein format este n
continuare incubat cu un anticorp secundar ce prezint un sistem de detecie.
Dup obinerea extractului proteic total se realizeaz o separare a proteinelor din extract prin electroforez n gel de
poliacrilamid n prezen de sodiu dodecil sulfat (SDS-PAGE). Dup separare, proteinele sunt transferate pe o membran
de nitroceluloz, fluorur de poliviniliden sau nylon; iar, pentru a evita interaciile nespecifice, membrana este blocat cu
proteine neutre (albumin seric bovin). Dup blocare, membrana este incubat cu anticorp (mono- sau policlonal) specific

proteinei de interes, numit anticorp primar. Dup splarea cu o soluie neionic de detergeni, membrana ce conine
complexul protein-anticorp primar, este incubat cu un anticorp secundar. Anticorpul secundar, cuplat cu o enzim
(peroxidaza din hrean - HRPO sau fosfataza alcalin - AP), interacioneaz cu anticorpul primar. n final membrana este
incubat cu substratul enzimei, iar proteina de interes se vizualizeaz sub forma unei benzi direct pe membran.
Adaptarea facilitilor tehnologice experimentale de producere i cretere a sturionilor de Dunre de la sistemul de
cretere intensiv deschis la sistemul de cretere intensiv recirculant. Estimarea capacitii portante a sistemelor
recirculante experimentale destinat creterii intensive a sturionilor.
Descrierea sistemului recirculant intensiv de tip acvariu: sistemul recirculant cu uniti de cretere tip acvariu va
fi utilizat pentru creterea stadiilor timpurii pn la talia de 100 g. Configuraia acestui sistem recirculant const n
conectarea unitilor de cretere la echipamente de condiionare a calitii mediului de cultur, corespunztor dimensionate
pentru a menine n ecart optim parametrii mediali critici.
Modulul de cretere este reprezentat de 12 acvarii realizate din sticl. Numrul unitilor de cretere asigur o
flexibilitate corespunztoare n ceea ce privete indicatorii biotehnologici urmrii, precum i posibilitatea efecturii
repetiiilor necesare experimentrii tehnologiei. Unitatea de condiionare a calitii apei are drept scop controlarea i
meninerea n domeniul optim, a principalilor parametri fizico-chimici ai apei: coninutul n oxigen dizolvat, concentraia n
azot amoniacal, concentraia n particule solide, valoarea de pH i dioxidul de carbon.
Pentru controlul particulelor solide sistemul de cretere este prevzut cu un filtru cu nisip sub presiune, pentru controlul
concentraiei de azot amoniacal sistemul este prevzut cu o unitate de filtrare biologic tip trickling alctuit dintr-o succesiune de
materiale filtrante, n care se realizeaz nitrificarea apei, iar pentru sterilizarea i dezinfectarea apei pe circuitul principal de alimentare
cu ap condiionat a acvariilor a fost montat o instalaie cu lamp UV. Caracteristica funcional de baz a instalaiei este puterea
nominal care asigur cantitatea de radiaii n gama de lungimi de und optime pentru procesul tehnologic. Pentru asigurarea
concentraiei de oxigen dizolvat la nivelul impus de gradul de intensivitate al populrii s-a prevzut o unitate de aerare-oxigenare,
format din compresoare Hagen cu debitul de 1,5 mc/h, montate la nivelul fiecrui acvariu. Instalaia de distribuie a apei i
aerului la modulul de cretere este alctuit dintr-un sistem de pompe, tuburi i armturi ce asigur debitul tehnologic
necesar pentru fiecare din unitile modului. Modul de distribuie al apei la fiecare compartiment al sistemului de cretere,
precum i evacuarea apei din acestea asigur o circulaie optim a apei n fiecare acvariu, aspect deosebit de important n
condiii de intensivitate cnd este necesar s fie valorificat integral volumul de cretere.
Descrierea sistemului recirculant intensiv pilot: din punct de vedere constructiv i funcional un sistem recirculant
din acvacultur poate fi asimilat, la modul principial, cu un sistem clasic de tratare a apei, de mici dimensiuni, particularizat
sub aspect funcional la cerinele tehnologice pentru creterea intensiv a unor specii de peti de cultur n spaii limitate.
Configuraia sistemului recirculant pilot de cretere intensiv a presupus integrarea unor echipamente de tratare a apei
tehnologice cu unitile de cretere, corespunztor dimensionate n raport cu tehnologia abordat.
Unitile de cretere ale sistemului sunt reprezentate de 4 bazine octogonale, a cror geometrie si hidraulic satisfac
exigena tehnologic in ceea ce privete randamentul eliminrii rapide a solidelor. Bazinele octogonale funcioneaz prin
injectarea tangenial a apei la nivelul peretelui bazinului. Modul specific de admisie a apei n bazin determin o micare
general a masei de ap n jurul axului vertical al acestuia sub forma unui aa numit curent primar de rotaie. Debitul de
recirculare, in funcie de care s-au dimensionat componentele sistemului recirculant, este 6m3/h, acesta asigurnd
preschimbarea ntregului volum de ap, dintr-un bazin de cretere, la fiecare h.
Modulul de condiionare a apei are urmtoarea componen: filtru mecanic cu tambur care are rolul de a realiza o
prim separare a solidelor reziduale pe baza procesului de filtrare mecanic. Filtrul axial cu sit rotativ este alctuit din
dou camere, la nivelul septului de compartimentare fiind amplasat sita. Fluidul, reprezentat de apa uzat, ptrunde n
prima camer, trece axial prin sit i ajunge, sub form filtrat, n cea de-a doua camer, de unde este prelevat. Micarea de
rotaie a sitei determin ca partea parial imersat a acesteia s treac intermitent prin faa unui mecanism de splare, unde,
un jet de ap pulverizat sub presiune pe faa aval a sitei, spal particulele solide reinute. Apa ncrcat cu material splat
este preluat de un jgheab dispus pe faa amonte a sitei i evacuat.
Estimarea capacitii portante n funcie de coninutul n oxigen dizolvat
Estimarea capacitii portante, n ipoteza funcionrii sistemului n regim stabil, presupune determinarea ratei
consumului de oxigen n sistem (RO) n baza ecuaiei urmtoare:

RO Q CO i CO PO

Ecuaia definete rata consumului de oxigen n cadrul sistemului ca sum a oxigenului necesar pentru respiraia
petilor, descompunerea deeurilor carbonatice i nitrificarea compuilor azotului (R O = Rr + RBOD + RNOD). n realitate,
nivelul fiecruia din aceti parametri (exceptnd rata respiraiei biomasei de cultur) este direct proporional cu cantitatea de
hran intrat n sistem ntr-o anumit perioad de timp. n aceste condiii, se poate simplifica i redefini rata consumului de
oxigen, sub forma:

RO FOC FR

unde: FOC = consumul de oxigen pe unitatea de mas de hran; FR = rata hrnirii [mas/timp], unde:

FR

FA
t

unde, FA reprezint cantitatea de hran administrat n perioada de timp t [mas/timp].


Combinnd ecuaiile se poate estima rata maxim a hranei suplimentare (FRm O):

FRm O

Q CO i CO PO
FOC

n sistemele de producie din acvacultur, pentru o anumit clas de mrime a unei specii de pete, raia furajer ntro unitate de timp se exprim procentual din masa corporal a materialului de cultur (% BW). Din acest considerent,
valoarea ratei hrnirii (FR) poate fi definit astfel:

FR

SBM %BW
100

unde, SBM = biomasa de cultur din sistem [mas]; %BW = raia furajer [mas furaj/mas pete x timp]
Capacitatea portant maxim a sistemului n funcie de consumul de oxigen se determin deci, cu relaia:

SBM

FR m O
% BW

Estimarea capacitii portante n funcie de concentraia admisibil n azot amoniacal total


Estimarea capacitii portante n funcie de concentraia admisibil n azot amoniacal total (TAN) presupune, n
primul rnd, determinarea ratei de producere a azotului amoniacal (P TAN), folosind ecuaia:

PTAN ATAN Q f E Q CTAN CTAN i


Rata maxim a hrnirii stabilit n funcie de coninutul optim de TAN (FR m TAN) se determin astfel:

FRm TAN

TAN

Q f E Q CTAN CTAN i
K PC

Cunoscnd corelaia dintre rata hrnirii i biomasa din sistemul de cultur, exprimat prin ecuatia FR = SBM x %
BW, se poate estima capacitatea portant maxim a sistemului n funcie de coninutul n TAN (SBM m TAN), cu relaia:

SBM m

TAN

FRmTAN
% BW

Analiza bilanului de mas al sistemelor recirculante experimentale n conformitate cu ipotezele asumate


n sistemele recirculante este necesar s se realizeze o corelaie optim ntre capacitatea portanta i cea de producie a
sistemului. n caz contrar, sistemul devine ineficient sub urmtoarele aspecte: ritm redus de cretere, conversie sczut a
hranei, incinden crescut a mbolnvirilor i mortaliti ridicate. De asemenea, subdimensionarea capacitii portante a
unui sistem determin exploatarea incomplet, respectiv ineficient, a acestuia. Din aceste considerente, pentru a se evita
supradimensionarea sau subdimensionarea capacitii portante, primul pas n proiectarea unui sistem recirculant const n
optimizarea bilanului material (bilan de mas). Metoda de rezolvare a problemelor tehnologice i tehnice cu ajutorul
analizei bilanului de masa se bazeaz pe legea conservrii masei, n sensul c masa n cadrul unui sistem nchis nu poate fi
creat sau distrus, ci doar transformat.
Efectuarea bilanului de mas n cadrul unui sistem recirculant din acvacultur presupune parcurgerea urmtoarelor
etape conceptuale: definirea limitelor sistemului; izolarea i identificarea debitelor afluente (input) i a celor efluente de
materie la nivelul sistemului; identificarea materiilor ce intr n bilanul de mas; identificarea proceselor de transformare
care au loc n interiorul limitelor sistemului cu efect asupra bilanului de mas.
n cazul de fa, pentru atingerea obiectivelor proiectului, se ntocmete bilanul de mas pentu speciile H. huso, A.
stellatus i A. ruthenus, n contextul creterii intensive n cadrul facilitilor tehnologice existente, deinute de partenerii
industriali, care vor fi completate astfel nct s fie utilizate la maxim capacitate. Analiza critic a intrrilor i ieirilor va
permite estimarea debitelor de operare a sistemului recirculant precum i dimensionarea echipamentelor de filtrare prin
operarea crora, parametrii limitativi sunt meninui n ecartul impus tehnologic. Pentru studiul experimental se propune
realizarea unui sistem recirculant nchis de acvacultur al crui volum recirculant reprezint 90% din volumul iniial de ap.
Analiza bilanului de mas pentru sistemul recirculant destinat creterii intensive a sturionilor
Dintre cele trei specii de sturioni care fac obiectul cercetrilor, morunul este specia cea mai robust, cu cel mai mare
ritm de cretere i potenial economic, acesta atingnd talia de comercializare dup doi ani. De asemenea, tolerana mai

ridicat a acestei specii la diferiii factori tehnologici permite practicarea unor densiti de stocare de pn la 60-70kg/m3
(Steven D., 2002). Din aceste considerente, dar i datorit fatului c morunul va fi montorizat pe ntregul ciclu de producie,
bilanul de mas a fost ntocmit lund ca model tehnologic, tehnologia pentru creterea intensiv a speciei H. huso.
ntocmirea bilanului de mas pentru sistemul recirculant destinat creterii n condiii de maxim densitate a
morunului implic, pe lng parcurgerea etapelor conceptuale amintite, ntocmirea unui plan de producie detaliat pentru a
se evita fluctuaiile n ceea ce privete inputul de hran i, deci, indirect, producia de reziduuri generate care afecteaz
performana echipamentelor de tratare a apei, n special eficiena filtrului biologic. De asemenea, planul de producie care,
n cazul de faa, este conceput pentru a asigura cadrul optim de desfurare a experimentrilor pe parcursul celor 2 ani, st la
baza dimensionrii judiciose a echipamentelor de filtrare n scopul reducerii la minimum a costurilor de operare.
Schema tehnologic a fost ntocmit cunoscnd indicatorii tehnologici specifici, obtinuti experimental n cadrul unor
cercetri desfurate anterior de ctre departamentul de Acvacultur, tiina Mediului i Cadastru n colaborare cu parteneri
industriali. De asemenea, menionm faptul c analiza lotului propriu deinut de fiecare dintre cei doi parteneri, Caviar
House i Osetra, prin evaluarea fenotipic i meristic la populaiile de acvacultur a stat la baza ntocmirii att a bilanului
de mas, ct i a proieciei tehnologice pe cei doi ani de experimentri.
Popularea sistemului recirculant se face cu 40.000 larve de morun, acestea fiind rezultatul nsumrii loturilor
experimentale care vor fi monitorizate pe parcursul celor doi ani de experimentri. Pentru a atinge obiectivele tiintifice ale
proiectului, sistemul recirculant va fi populat primvara, dup reproducerea artificial a morunului, att n primul an, ct i
n cel de-al doilea an de experimentri. n aceast situaie operarea sistemului la maxima capacitate va fi posibil numai la
finalul anului II, cand practic se cumuleaz producia de reziduuri generate de o biomas de morun cu vrsta de 1 an i a
celei cu vrsta de 2 ani. Pentru obinerea materialului biologic de pstrug i ceg, se vor urmri schemele de ncruciare
stabilite, larvele obinute fiind populate n sistemul recirculant unde vor fi meninute timp de 9 luni.
Pentru efectuarea bilanului de mas din cadrul sistemului recirculant destinat creterii intensive a sturionilor este
necesar definirea limitelor sistemului. Deoarece exigena tehnologic precum i cerinele privind calitatea mediului de
cultur sunt similare la cele trei specii de sturioni, se vor defini un singur set de limite care, prin designul sistemului
recirculant, vor permite creterea att simulant ct i alternativ a speciilor de sturioni autohtoni.
Bilanul produciei de reziduuri din sistemul recirculant destinat creterii intensive a morunului
Sintetic, principalele procese care au loc n sistemele recirculante de acvacultur sunt reprezentate de generarea de
reziduuri i tratarea sau purificarea apei tehnologice n vederea reutilizrii acesteia. Dac reziduurile produse de biomasa de
cultur s-ar acumula n sistem, mediul de susinere al acesteia, apa, s-ar transforma rapid ntr-un concentrat de metabolii
nociv chiar i pentru cele mai rezistente specii de cultur. Pentru ca apa tehnologic s poat fi reutilizat, metaboliii
trebuie s fie eliminai, fie convertii n produi mai puin toxici prin intermediul proceselor de tratare a apei. Virtual, toate
reziduurile formate ntr-un sistem recirculant provin din hran. Presupunnd o rat de conversie a hranei ce variaz ntre 1:1
i 2:1, circa 80 % din hrana consumat (greutate uscat) va fi eliminata sub form lichid, solid sau gazoas, fraciunea
solid (TSS) avnd ponderea cea mai mare (Cristea et al., 2002). Producia de suspensii solide dintr-un sistem de cretere
din acvacultur poate fi evaluat lund n considerare excreia petilor, hrana neconsumat i biomasa bacterian.
Rata producerii excrementelor este determinat de rata hrnirii i difer n funcie de specia de cultur. Astfel, pentru
acipenseride, se estimeaz c excrementele solide reprezint 2530% din hrana consumat. O a doua surs important de
particule solide n suspensie este reprezent de hrana neconsumat. Indiferent de modul de prezentare (granule, finuri,
etc.), de mrimea particulelor constituente i de gradul de umiditate, se apreciaz c, chiar dup 4 ore de la distribuire, doar
o mic parte (1525%) din hrana n stare uscat s-a dizolvat, restul rmnnd sub form de particule individuale.
Dezintegrarea acestora se realizeaz cu dificultate de la sine, fr a se interveni cu procedee mecanice sau biologice (Cristea
et al., 2002). n sistemele intensive de acvacultur, aproximativ 20 pn la 40% din materia uscat administrat biomasei de
cultur este incorporat n corpul petilor, restul regsindu-se sub form de reziduuri a cror cantitate depinde de numeroi
factori precum specia de cultur, compoziia furajului, temperatur, caracteristicile granulelor. Pentru meinerea n ecart
optim a principalilor parametrii limitativi pentru speciile de sturioni luate n studiu este necesar s se estimeze debitul de
recirculare i a ratei zilnice de mprosptare. Aceast estimare este posibil dup o cuantificare a principalelor fracii
reziduale pentru fiecare etap de cretere.
Elaborarea unor standarde minime de management tehnologic i operaional pentru sistemele recirculante
experimentale
Un sistem recirculant de acvacultur (RAS) poate fi definit drept un sistem acvacol ce ncorporeaz tratarea i
reutilizarea apei, n condiiile n care este nlocuit zilnic un procent de maxim 10% din volumul total al apei. Conceptul de
sistem recirculant de acvacultur const n reutilizarea unui volum de ap prin tratarea continu a acesteia. Componentelor
de tratare a apei utilizate ntr-un sistem recirculant de acvacultur trebuiesc calibrate n raport cu cantitile de hran
administrate, pentru a susine rate de cretere i densiti de stocare foarte mari, necesare pentru creterea eficienei
financiare.

Sistemele recirculante de producie trebuie s fie proiectate astfel nct s cuprind un numr de procese
fundamentale de tratare a apei. Aceste procese, denumite i procesele unitare includ: eliminarea deeurilor solide (att
fecale ct i hrana neconsumat), conversia amoniacului i a nitriilor, adaosul de oxigen dizolvat n masa apei, precum i
eliminarea dioxidului de carbon din ap. n cazul unor specii mai puin robuste i n funcie de volumul de ap folosit, un
proces de eliminare a solidelor fine i a celor dizolvate, precum i un proces de control din punct de vedere bacterian, a
populaiilor piscicole, pot reprezenta o necesitate.
Standarde minime privind proiectarea unui RAS
Analiza bilanului de mas: n proiectarea sistemelor moderne de acvacultur se folosesc, n general, calculele de
bilan masic care identific i totodat cuantific intrrile, ieirile i modificrile interne (conversii i consumuri) ale
sistemului. Astfel, n procesul de proiectare a acestor sisteme, trebuie luat ca reper nivelul maxim de ncrcare (rata de
stocare, rata de hran, etc.), presupunnd c sistemul va opera ntr-o "starea de echilibru" n care biomasa stocat nu variaz
considerabil n timp (Losordo i Westers, 1994).
n scopul de a duce la bun sfrit o analiz de bilan masic, capacitatea de producie a sistemului trebuie s fie bine
definit, fapt ce conduce la determinarea cantitii maxime de furaj care poate intra n sistem, la un moment dat. Valorile
nitrailor (NO3), ale azotului amoniacal total (TAN = NH3 + NH4), ale oxigenul dizolvat (DO) i ale bilanului masic al
solidelor pot fi deduse din sistem, cu scopul de a estima:
nivelurile oxigenului dizolvat necesare pentru creterea materialului piscicol, pentru procesele biologice de
filtrare i pentru degradarea deeurilor
cerinele legate de debitul de curgere a apei, unitile de cretere i totalitatea componentelor de tratare a apelor
specificaiile de performan exacte pentru toate componentele de tratare a apei.
Estimarea capacitii portante n funcie de concentraia admisibil n azot amoniacal total
Azotul amoniacal total este generat atunci cnd se administreaz petelui un furaj cu un coninut ridicat de protein,
dar i atunci cnd are loc degradarea deeurilor i a resturilor de hran neconsumat. TAN generat n cadrul unui sistem
recirculant este o funcie a cantitii de hran care intr n sistem (1-5% biomas/zi) i a coninutului n protein al acesteia
(30-60%). Eficiena filtrului biologic i de generare de TAN pot fi utilizate pentru a determina debitul zilnic de ap necesar,
astfel nct filtrul biologic s poat menine un nivel de dorit al TAN. n plus, poate fi calculat i schimbul zilnic de ap
necesar pentru a menine un nivel acceptabil al nitrailor, n cadrul sistemului.
Estimarea capacitii portante n funcie de coninutul de oxigen dizolvat (DO)
Componente eseniale n cadrul RAS trebuie s furnizeze o cantitate de oxigen necesar pentru:
Creterea materialului piscicol: consumul de oxigen de ctre petele crescut n RAS depinde de o multitudine de
factori precum mrimea materialului piscicol sau temperatura apei. Oxigenul se consumat n timpul digestiei hranei i
cantitatea de oxigen necesar poate fi calculat n funcie de cantitatea de hran introdus n sistem. Biomasa materialului
piscicol, rata de administrare a hranei (% biomas/zi) i consumul de oxigen pe un kilogram de furaj (n general 200-500g
O2/kg hran) sunt utilizate pentru a calcula consumul de oxigen al materialului piscicol n cadrul RAS.
Procesul de nitrificare al amoniacului: acest proces consum oxigen la o rata de 4,57 grame pe gram de TAN
oxidat n nitrat. Producia de TAN poate fi calculat n funcie de biomasa piscicol i de rata de administrare a furajului i
folosit pentru a determina cantitatea de oxigen consumat n urma procesului de nitrificare.
Degradarea dejeciilor i a cantitii de hran neconsumat: materia organic consum oxigenul pe msur ce
carbonul se divide (cererea de oxigen-carbon), n timpul proceselor biologice. Prin urmare, deeurile reinute n cadrul
sistemului contribuie la determinarea coninutului total de oxigen, n cazul n care nu sunt ndeprtate eficient. Aceast
cerere de oxigen biologic (BOD) poate fi semnificativ mai mare dect cea atribuit materialului piscicol din cadrul
sistemului. Eficien filtrrii mecanice poate minimaliza sursa consumului de oxigen.
Componentele unui RAS

Componente eseniale: n aceasta categorie sunt incluse mecanismele de alimentare i filtrare a apei,
mecanismele de filtrare biologic, UV, unitile de cretere, pompele, fitingurile, elementele legate de controlul mediului,
elementele ce asigur managementul gazelor dizolvate (oxigen i dioxid de carbon) i sistem electric de back-up.

Suport infrastructur i echipament: Aceast categorie include hala, echipamentele de monitorizare a apei,
sistemul de alarm, sistemul automate de administrare a hranei, zonele destinate depozitrii, zonele destinate cazrii
personalului i zona de lucru.

Sistemele adiionale necesare creterii produciei: Aceasta categorie poate include sistemele destinate
carantinei, sistemele de dezinfecie, sistemele de automonitorizare i de control.
Managementul gazelor dizolvate
a) Oxigenul. n general, sistemele acvacole intensive ncearc s menin un nivelul al oxigenului dizolvat aproape
saturaie (100%), pentru a optimiza creterea i performana acestuia. La nivele mai ridicate dect cel de saturaie, pierderea
n atmosfer a oxigenului dizolvat poate fi semnificativ (Parker et al., 2002). Un avantaj al folosirii oxigenului pur este
reducerea costurilor legate de pompare, prin introducerea apei n sistem, la nivele de saturatie mai mari de 100%.
RAS sunt divizate n dou nivele de intensificare bazate pe metodele de aprovizionare cu oxigen:


Sisteme cu o densitate mic (<30-40 Kg/Kl) sunt oxigenate prin aerare, asigurat de ctre
suflante/compresoare i componente de reaerare.

Sisteme cu o densitate mare (>60 100+ Kg/Kl) primesc oxigen n form pur.
Necesarul de oxigen al petilor variaz n funcie de rata metabolic (fiind oarecum influenat de consumul de
hran), talia petilor i condiiile de mediu. Alte informaii necesare a fi luate n seam includ biomasa total la capacitate
maxim de stocare, debitul apei, concentraia dorit de oxigen dizolvat, concentraia minim de oxigen dizolvat la evacuare
(de obicei 80-100% saturaie) i eficiena echipamentului de transfer al oxigenului.
Filtrarea biologic i descompunerea deeurilor i a hranei neconsumate au un impact asupra nivelelor oxigenului
dizolvat i trebuiesc luate n seam n calcului bugetul de oxigen al oricrui sistem. O regul relativ stabilete faptul c
pentru fiecare kilogram de hran, aproximativ 0,50,56 kg de oxigen vor fi consumate de ctre peti i bacterii (Parker et
al., 2002). Oxigenul produs de generatoare conine aproximativ 10% azot. Acest fapt limiteaz selecia de echipamente de
transfer folosite mpreun cu generatoarele de oxigen, din cauza posibilitii atingerii unui nivel de supra-saturaie n azot.
Rata cu care se face admisia de oxigen n sistem definete intensitatea acvaculturii practicate (kg pete/m3 unitate
cretere). Termenul de ,,aerare se refer la adiia de oxigen atmosferic n ap (aerul are 21% oxigen). Termenul de
oxigenare se refer la adiia de oxigen gazos (95-100% oxigen). Oricare dintre aceste metode poate fi folosit, ns pot
exista mai multe riscuri asociate acestui proces de aerare, deoarece nivelele de oxigen dizolvat nu pot fi la fel de mari ca n
cazul folosirii sistemelor de oxigenare. Aerarea se realizeaz, de obicei, prin intermediul unor difuzoare de aer. Sistemele
formate din difuzoare de aer ofer o presiune sczut de la un ventilator la un anumit tip de difuzor de aer situat pe fundul
unui bazin de cretere. Aceste difuzoare produc mici bule de aer care se ridic n unitatea de cretere. Cu ct bulele sunt mai
mici i unitatea de cretere mai adnc, cu att mai mult oxigen este transferat. Din acest motiv, majoritatea unitilor de
cretere au cel puin un metru adncime. Cele mai eficiente difuzoare sunt cele cu membrane.
n sistemele intensive de producie, rata consumului de oxigen de ctre peti i bacterii depete posibilitile de
oxigenare ale instalaiei de aerare. La densiti mari de stocare, se folosete oxigen pur. Folosirea acestuia ofer posibilitatea
oxigenrii rapide a apei, chiar i atunci cnd concentraiile n oxigen dizolvat ale unitii de cretere se apropie de saturaie
(cca. 7mg/l). n cazul folosirii de oxigen gazos, pur, un echipament de oxigenare trebuie s transfere ntre 80 i 95% oxigen
n ap, pe cnd echipamentul de oxigenare cu difuzoare de aer poate atinge o eficien maxim de 30%.
b) Dioxidul de carbon. Dioxidul de carbon este un produs secundar al procesului de respiraiei al petilor i
bacteriilor din cadrul RAS i cantitatea produs este direct proporional cu cantitatea de oxigen consumat astfel: pentru
fiecare gram de O2 consumat, se produce 1,27g CO2. Dioxidul de carbon reacioneaz cu apa, formnd acid carbonic, care
reduce valoarea de pH n interiorul unui sistem recirculant. Nivele nalte de CO2 circulant conduc la o scdere a pH-ului
sngelui petilor, reducnd abilitatea hemoglobinei de a transporta oxigenul, chiar i n cazul unor saturaii ridicate.
Dioxidul de carbon nu se acumuleaz n sistemele cu densiti mici de stocare, deoarece acestea folosesc o rat de
schimb a apei i de asemenea o rat de aerare ridicat. Acumularea are loc n cazul sistemelor unde se gsesc densiti mari
de populare i care folosesc injecie de oxigen. n aceste sisteme, dioxidul de carbon trebuie monitorizat atent, astfel nct
nivelul acestuia s nu depeasc 20mg/l.
Dioxidul de carbon este de multe ori mai solubil n ap dect oxigenul, n consecin, este mult mai greu de
ndeprtat. Astfel, echipamentele tip ,,gas-stripping trebuie s ofere un flux de aer foarte ridicat, de 3 pn la 10 ori mai
mult volum de aer dect volumul de ap tratat. Acest lucru se reuete folosind o turbin care foreaz circulaia aerului prin
coloanele pline de medii plastice, degazoare. Aceste instalaii au nevoie de spaii bine ventilate sau au nevoie s fie
conectate cu exteriorul cldirii.
Dioxidul de carbon este ndeprtat din ap printr-o form sau alta de schimb de gaze. Fie apa este expus aerului
printr-un echipament de tip cascad, fie se introduce aer n ap prin intermediul difuzoarelor de aer, pentru a se elimina
excesul de CO2. O metod des ntlnit de ndeprtare a CO2 n cadrul sistemelor recirculante de acvacultur este cea care
presupune folosirea coloanelor de aerare. Aceste dispozitive sunt similare unui biofiltru trickling i constau ntr-un mediu
plastic i un sistem de distrubuire a apei montat deasupra reactorului. Un aerator de mic presiune este folosit pentru a
introduce aer n partea de jos a coloanei, ndeprtnd astfel CO 2 din acesta.
Sisteme adiionale pentru sporirea produciei
Sisteme de carantin i tratament: este prudent ca petii noi sosii s fie izolai de sistemul recirculant principal pn
cnd starea lor de sntate poate fi determinat. Unul sau mai multe sisteme mici pot fi instalate n acest scop, fiecare avnd
echipamente diferite de dirijare i testare. Faciliti i protocoale de igienizare a personalului care intr n contact direct cu
petii, trebuiesc de asemenea implementate. Dac este posibil, aceste structuri trebuie amplasate ntr-o ncpere separat de
cea n care se afl unitile de cretere. Sunt necesare de asemenea i zone pentru stocarea chimicalelor i a deeurilor
biologice.
Sisteme de triere: trierea este o etap important n a obine un gust bun al produsului finit (o parte important a
procesului de asigurare a calitii produsului finit) i n consecint, n mrirea profitului. Sistemul trebuie s aib capacitatea
necesar de a stoca cantitile estimate de material piscicol, n special dac petii vor fi nfometai nainte de vnzare, pentru
a micora cantitatea de grsime i a asigura un esut muscular ferm, potrivit pentru comercializare.

Distribuitoare de hran: n cazul sistemelor recirculante de acvacultur se folosesc dou tipuri de hrnitoare:
Hrnitoarele mecanice, care pot fi programate pentru a asigura administrarea unor cantiti prestabilite de
hran, pe durate de timp variabile, determinate, de un numr de ori pe zi.
Hrnitoarele automate ofer avantajul de a permite un numr des de hrniri, asigurnd o ncrcare mult mai
constant a proceselor de filtrare mecanic i biologic.
Controlul valorii de pH: dac alcalinitatea nu este restituit, valoarea de pH apei va scdea. O metod pentru a-l
ridica este adugarea de bicarbonat de sodiu n sistem, n doze de 250g pentru fiecare kilogram de hran administrat
(Wheaton et al., 2002). Unele sisteme folosesc sonde de pH i injecteaz soluii alcaline pentru meninerea pH-ului ntre
limitele normale. Apa care este puternic alcalin tinde s se opun schimbrilor de pH, ceea ce este un lucru de dorit.
Procesul de nitrificare produce acizi i scade alcalinitatea.
Sisteme de alarm, monitorizare i control: experiena general n domeniul sistemelor recirculante de acvacultur
industrial arat c sistemele de alarm vor alerta operatorul n aproximativ 50% din cazurile n care se prezint o problem
(Timmons, 2002). n mod obinuit, aceste sisteme utilizeaz robinei electrici, senzori de control a nivelului apei, senzori de
presiune, echipamente de control al sursei de energie i a cantitii de oxigen dizolvat precum i a temperaturii, cu scopul
transmiterii informaiilor ctre sistemele de monitorizare i control.
Configurarea facilitilor: configuraia, din punct de vedere fizic, a unui sistem recirculant de acvacultur trebuie
integrat ct mai bine n regimul de ntreinere al fermei. Astfel, se va asigura folosirea sistemului la capacitate maxim i
evitarea suprapopulrii cu exemplare n perioada premergtoare atingerii dimensiunii de comercializare.
Folosirea unui singur sistem recirculant de acvacultur pentru a susine economic ntreaga ntreprindere, prezint un
risc foarte mare. Se recomand folosirea a cel puin patru astfel de sisteme, independente unul de altul, astfel nct n caz de
pierdere total, doar 25% din producie s fie afectat.
Managementul produciei
Exista diferite ci de cretere a materialului piscicol, fiecare cu avantaje i dezavantaje, create de limitrile unui
sistem recirculant de acvacultur industrial. Dac sistemul este populat peste capacitatea optim i petii sunt hranii cu un
necesar optim de hran, sistemele de tratare a apei vor fi depite i petii vor avea un ritm sczut de cretere din cauza
calitii sczute a apei. n acelai timp, n condiiile acelorai densiti de stocare, dac operatorul este limitat de capacitile
sistemelor de tratare a apei i administreaz o cantitate de hran sub cerinele minime ale respectivei specii, ei vor avea din
nou un ritm de cretere lent, pn la atingerea dimensiunii propice comercializrii.
Densitatea de stocare: densitatea de stocare a materialului piscicol (peti/m3) i densitatea absolut (kg/m3) trebuie s
fie stabilite n concordant cu rata maxim de hrnire (kg hran/or sau zi) pe care sistemul o poate suporta, fr pierderi
semnificative de hran sau suprasolicitarea sistemelor de tratare a apei. Aceasta este n funcie de designul sistemului,
speciile de peti i tipul de hran administrat.
Managementul tehnologiei de producie: n mod normal, petii sunt crescui pn la o talie medie, dup care sunt
recoltai din unitile de cretere, de cele mai multe ori gradai, sortai i depozitai din nou n aceeai unitate de cretere sau
n unele cazuri, n mai multe. Separarea pe mrimi a materialului piscicol, aflat la vrste fragede, previne dominaia petilor
mai mari n lupta pentru hran. De asemenea, implementarea unui sistem de carantin este obligatorie.
Sisteme de administrare a hranei: folosirea unei diete de nalt calitate, care s confere pierderi minime, poate
mbunti calitatea apei i rata maxim de hrnire pe care sistemul de tratare a apei o poate suporta. Hrnirea petilor de
dou-trei ori pe zi, timp de 15-20 de minute, va oferi un ritm de cretere excelent. Cu toate acestea, acest stil de hrnire
poate suprasolicita sistemul de tratare a apei i poate reduce cantitatea de oxigen din ap. Este de preferat ca administrarea
hranei s se realizeze pe o perioad mai ndelungat de timp, n doze mai mici. Acest lucru devine realizabil, de obicei, prin
folosirea aparatelor automate de administrare a hranei.
Elaborarea modelului tehnologic experimental de producere, cretere i monitorizare a sturionilor de cultur i
stabilirea variantelor de testare a ipotezelor asumate
Indiferent de scopul pentru care se aplic programul de reproducere artificial (repopulare sau comercial), obiectivul
principal ce se impune este cel de conservare a diversitii genetice la nivelul progeniturilor deoarece ei constituie viitorul
lot de remoni i reproductori propriu al fermei, ceea ce ar permite, pe termen lung, consecinele genetice ale
consangvinitii cu afectarea valorilor caracterelor i nsuirilor cantitative, adic acele nsuiri morfoproductive urmrite n
practica tehnologic.
n vederea obinerii unor loturi utile pentru atingerea obiectivelor proiectului privind monitorizarea att a factorilor
biomoleculari ct i a celor biotehnologici cu potential de influenare a performanelor productive la sturioni ne propunem
s inem cont de recomandrile fcute de ordinul MO nr. 385/04.05.2006 privind folosirea reproductorilor de sturioni
utilizai la reproducerea artificial corelat, ns, i cu posibilitile reale de capturare a reproductorilor .
n funcie de numrul de reproductori capturai (/) pentru fiecare specie se va realiza o schem multifactorial
de ncruciare astfel nct rata de consangvinizare/generaie s fie ct mai mic (preferabil F 0,5%) ceea ce i va permite

partenerului Kaviar House s i realizeze n pe termen lung lotul necesar de remoni i reproductori cu o diversitate
genetic adecvat. Din perspectiva bazei materiale existente la nivelul staiei de reproducere a partenerului Kaviar House
este posibil realizarea unei combinaii minime de de 2x2 factorial att pentru morun, ct i pentru pstrug.
Succesiunea fazelor pentru modelul tehnologic experimental de producere, cretere i monitorizare a
sturionilor de cultur
Verificarea calitii reproductorilor: n cazul sturionilor migratori anadromi exist dou ecotipuri fiziologice sau
poate dou variaii genetice intrapopulaionale cu cerine diferite pentru atingerea maturitii definitive, ceea ce i determin
s migreze fie toamna, fie primvara. De regul, reproductorii diferitelor specii de sturioni sunt procurai n perioada de
maxim migraie spre locurile de reproducere, cnd gonadele se afl n faze premergtoare stadiului de maturare ceea ce
determin, de cele mai multe ori, s fie favorizate la reproducere formele de primvara.
n acest scop se prevede pescuirea timpurie a reproductorilor (nainte ca apa s ating temperatura optim pentru
reproducere) sntoi, bine dezvoltai i fr nici un fel de traumatisme. Bazinele n care vor fi parcai reproductorii,
separai pe specii i sexe, trebuie s asigure o bun oxigenare a apei, un debit de primenire a apei de 0,02 l/s/mp i
meninerea unor condiii de temperatur cu 2-4 grade sub cea normal de reproducere, n cazul n care se impune pstrarea
lor pe o perioad mai mare (2 sptmni).
Caracteristicile pe care trebuie s le avem n vedere la alegerea reproductorilor sunt:
n cazul femelelor - abdomenul mare, moale la apsare, botul mai ascuit dect de obicei, spinii, mai ales cei
laterali i ventrali, mai puin proemineni, pe suprafaa corpului o mare cantitate de mucus i porul genital roiatic;
n cazul masculilor, care au corpul mai suplu i mai alungit dect femelele, abdomenul apare de asemenea
moale la palpare i porul genital mai colorat.
Stimularea maturrii gameilor: Metoda unanim folosit n stimularea i declanarea procesului de maturaie a
celulelor sexuale este cea a administrrii de doze suplimentare de hormon gonadotrop.
Prelevarea/colectarea gameilor: Femelele sunt anesteziate prin introducerea lor ntr-o soluie tranchilizant i se
extrag ovulele fie prin mulgere, fie prin practicarea interveniei chirurgicale. Reproductorii folositi sunt pstrai ntr-un
bazin n cadrul staiei de incubaie pentru a putea fi urmrit evoluia lor.
Fecundarea: Dac procesul de maturare a ovocitelor decurge normal, icrele posed mari posibiliti de fecundare.
Dup ovulaie, durata n care icrele pot fi fecundate depinde direct de mediul n care se pstreaz. Pentru fecundarea icrelor
de sturioni pe cale artificial s-au folosit diferite metode, dintre care, metoda semiuscat s-a dovedit a fi cea mai eficient.
Incubaia: n prezent instalaiile cu cele mai bune rezultate n procesul de incubare sunt incubatoarele ZugWeiss.
n mod curent pentru incubarea icrelor de sturioni, se introduc 200-250 g de icre. n incubatoare, icrele trebuiesc antrenate
n masa apei, dar curentul nu trebuie s fie prea mare pentru a nu traumatiza icrele sau pentru a nu fi evacuate o dat cu apa.
Debitul de alimentare trebuie s fie cam 6-8 l/min. Durata de incubare este dependent de temperatur i variaz i cu specia
dar nu foarte mult. n general timpul de incubare este cam 3 zile. Un alt factor important pentru procesul de incubaie este
oxigenul din ap. Cea mai mic cantitate admisibil este de 5-6 mg/l, de aceea se impune un control permanent al circuitului
apei i al puritii ei. Pe perioada incubaiei vor fi monitorizate aspectele calitative ale dezvoltrii embrionare n urmtoarele
momente: fecundarea, segmentarea, gastrulaia, neurulaia.
Eclozarea: Cum eliberarea embrionilor se face treptat i este influenat de condiiile de temperatur, procesul se
realizeaz ntr-un interval de timp variabil (circa 1-2 zile). Eclozarea se va face n incubatorele ZugWeiss iar transvazarea
larvelor eclozate se va face separat pe loturi (provenind de la diferiii reproductori) n bazinele din incinta staiei de
reproducere care funcioneaz n sistem deschis.
Creterea larvelor n perioada de hrnire endogen: Asigurarea dezvoltrii normale a larvelor n primele stadii
de dezvoltare postembrionar i n special n etapa de trecere la hrnirea activ s-a dovedit a fi o peroad dificil, esenial
n reproducerea artificial a sturionilor. Prima etap (care dureaz circa 3 zile) ncepe cu eclozarea i continu pn la
trecerea larvei la stadiul n care respiraia se face prin branhiile externe. Aceast etap se caracterizeaz prin: slaba
difereniere a tuturor sistemelor i organelor i n special a tubului digestiv; hrnirea este endogen, cu vitelus; slaba
intensitate a folosirii oxigenului. Datorit acestor trsturi care i ofer o rezisten mare la condiiile nefavorabile de mediu
se recomand transportul larvelor ctre staia de cretere intensiv cu ap recirculat (sistemul recirculant) acesta fcndu-se
cu pierderi minime.
Popularea bazinelor sistemului recirculant de acvacultur: Cea de-a doua etap de dezvoltare larvar dureaz
pn la 9 zile, aproape de sfritul perioadei de hrnire endogen. Caracteristic pentru aceast etap sunt: formarea
primordiilor nottoarei dorsale i anale, formarea primordiilor spinilor dorsali, dezvoltarea reelei de vase sanguine n
franjurii branhiilor, respiraia prin branhiile externe, fapt ce determin creterea necesarului de oxigen, dezvoltarea ochilor;
activitate intens a tiroidei i continuarea dezvoltrii tubului digestiv. Hrnirea este endogen i se realizeaz prin
fagocitarea vitelusului, funcie ndeplinit de toate prile componente ale tubului digestiv. Funcia primitiv a fagocitrii
vitelusului ngreuneaz procesul histogenetic al aparatului digestiv, viteza de dezvoltare fiind mai mare n zona valvulei
spirale dect n direcia sacului vitelin.
Creterea larvelor n perioada de hrnire exogen: Urmtoarea etap ncepe cu momentul n care larvele folosesc
hrana exogen, paralel cu cea endogen (hrnire mixt) si dureaz cca 5-7 zile.Comportamentul larvelor n etapa de trecere

la hrnirea activ este diferit.Paralel cu dezvoltarea aparatului digestiv este grbit simitor i dezvoltarea sistemelor nervos,
circulator i respirator.Larvele de morun ncep s se deplaseze rapid n cutarea hranei, fr a mai atinge substratul. La fel
ca i celelalte specii, larvele de morun se hrnesc n prima etap cu microplancton dar pentru puin timp, deoarece ele devin
repede capabile s prind organisme mult mai mari. n acelai timp ele apuc cu plcere larvele altor specii de peti i chiar
larvele aceleiai specii, de dimensiuni mai mici, fapt care face imposibil popularea combinat n bazinele de cretere. Cnd
sunt total lipsite de hran, larvele noat continuu n masa apei, de-a lungul pereilor bazinului sau a juvelnicului i se ntorc
pe spate. Morunul are deci un comportament diferit, manifestndu-se ca un tip rpitor, din cele mai timpurii stadii.
Larvele de pstrug i ceg se afl tot timpul n micare. Ele noat la suprafaa substratului i a pereilor bazinului,
manifestnd ns preferin fa de substrat. Pot, de asemenea, s se ridice cu uurin n straturile superioare ale apei pentru
a vna plancton. n perioadele ulterioare, larvele de pstrug i ceg se deosebesc de celelalte specii prin faptul c petrec din
ce n ce mai mult vreme n masa apei. Trecerea la hrnirea exogen este o perioad foarte critic pentru sturioni deoarece
au nevoie de o hran adecvat care s corespund cerinelor lor biologice. n primele etape de hrnire se administreaz
nauplii de Artemia care se distribuie din trei n trei ore, avnd n vedere faptul c acest crustaceu rezist n ap dulce cam
trei ore. Cantitatea administrat este n funcie de specie i de densitatea de populare.
Pn la conturarea caracterelor exterioare asemntoare adulilor mai trec 20-25 de zile ajungnd la perioada de pui.
n aceast perioad larvele sunt capabile s consume o hran mult mai variat i devin polifage. Trsturile
comportamentului larvelor de sturioni se menin aceleai i n etapele urmtoare ale dezvoltrii ontogenetice - perioada de
pui. n aceast perioad se acord o atenie deosebit calitii i cantitii de hran, a apei i a oxigenului din ap. Pe msur
ce acetia cresc se pot ditribui exemplare mai mari de Artemia sau o past de Tubifex. S-au obinut rezultate bune i
utiliznd furaje de o calitate superioar cu un coninut ridicat de proteine 52-57%.
Creterea puilor de sturioni 0+ (I an de via): Puii de sturioni la vrsta de 40-60 de zile prezint caracterele
generale ale petelui adult, au capacitatea de a alege condiiile de via specifice stabilite n cursul evoluiei i se pot salva
de urmrirea rpitorilor. n principiu ajung la o mas corporal de 1,5-3 g, moment n care pot fi repartizai i n alte sisteme
de cretere.
Creterea puilor de sturioni 1+ (al II lea an de via): Trsturile comportamentului puilor de sturioni se menin
aceleai i n etapele urmtoare ale dezvoltrii ontogenetice.
Elaborarea protocolului experimental, stabilirea parametrilor de calitate ai apei i a indicatorilor performanei de
cretere care vor fi monitorizai la speciile de pstruga, morun i cega de Dunre
Pe modelul tehnologic propus se grefeaz, n succesiunea fazelor, monitorizarea unor parametri fiziologici,
tehnologici, fizico-chimici de calitate ai apei, monitorizare ce se va face fie continuu pentru unii, fie vor fi determinai
pentru o anumit faz tehnologic. Aa cum este sugerat la nivelul modelului experimental propunem parcurgerea
urmtorilor pai:
Anestezierea petilor: este necesar n cazul manipulrilor la reproducere. Dintre anestezicele folosite n
acvacultur se poate meniona MS 222 (20-25 mg/l apa), propiscin (1 ml/l apa) sau clove oil (25-30mg/l ap). Se verific
constant reproductorii pe parcursul anestezierii pentru a menine starea optim de narcoz.
Sexarea i aprecierea maturitii sexuale la peti: Metoda cea mai folosit este biopsia gonadelor cu ajutorul unei
sonde special conceput pentru extragerea ovocitelor sau spermei, prin penetrarea lateral a peretelui abdominal, spre zona
posterioar (se ine cont de poziionarea anatomic a gonadelor). O alt metod propus este cea de a extrage celulele
sexuale prin inserarea n papila genital a unui cateter cu diametrul adecvat taliei pestelui (diametrul extern variaz ntre
13,8 10 mm la femele, 5 mm la masculi) urmat de o uoar aspirare sau masare pe abdomenul reroductorului.
a) Pe ovocitele extrase putem realiza o serie de analize, cum ar fi:
determinarea diametrului mediu al ovocitelor aflate n stadii avansate de maturare;
determinarea indicelui de polarizarea al ovocitelor.
n ceea ce privete determinarea gradului de maturare al ovocitelor n vederea utilizrii reproductorilor la
reproducere, se vor face urmatoarele ddeterminri:
observaii privitoare la omogenitatea, dimensiunea, culoarea i forma ovocitelor;
determinarea diametrului mediu al ovocitelor prin msurarea ovocitelor imediat prelevate sau fierte uor (2-4
minute) la micrometrul ocular al unei lupe binoculare; diametrul mediu se determin la min. 30 ovocite pentru fiecare
exemplar femel studiat;
determinarea indicelui de polarizare al ovocitelor (IP). Specialitii apreciaz c la valori mai mici de 0,1 ale
indicelui de polarizare, femelele pot fi supuse reproducerii artificiale fiind necesare doar una sau dou injecii de stimulare
hormonal pentru atingerea ovulaiei.
competena la maturarea in vitro incubarea unui numr de ovocite prelevat prin biopsie ntr-o soluie salin la
care se adaug progesteron (P) sau 17,20 -dihidroxiprogesteron (DP) (10 g/ml soluie) la o temperatur constant, egal
cu temperatura din care provin petii eantionai. Dac 24 h mai trziu ovocitele sunt mature ntr-un procent mai mare de
90% atunci femela de sturion este apt de ovulaie.

b) Pe proba de fluid seminal se determin:


calitatea dup aspect i culoare: optim dac aspectul este consistent i culoarea alb - crem; apoas, cu tent
albstruie, conine puini spermatozoizi i este de proast calitate.
motilitatea la microscop (50-100x), nregistrarea i cronometrarea dinamicii spermatozoizilor n ap i
aprecierea calitii dup o scar n 5 trepte propus de Persov (1975). La contactul cu apa, spermatozoizii se activeaz, apar
(15 sec) micri active, orientate, care treptat (dup 60 sec) se ncetinesc i sunt nlocuite de micri oscilatorii ale cozii
spermatozoidului, din ce n ce mai slabe pn la oprire.
densitatea spermatozoizilor /mm3. dup metoda clasic de numrare a celulelor
Este foarte important ca prelevarea lichidului seminal de la masculi s se fac fr orice urm de ap, mai ales n
cazul folosirii lui ulterioare (prin pstrare n seringile de prelevare la 4oC, pentru 12 ore, i n atmosfer de oxigen dac se
dorete stocarea ei pe o perioad mai lung, cca 2 sptmni) deoarece o pictur de ap va compromite ntregul lot extras.
Realizarea msurtorilor fenotipice i meristice: Se fac msurtorile de lungime, se nregistreaz greutatea, se
extrage prima radie din nottoarea pectoral pentru determinarea vrstei. Se numr scuturile pe cele cinci rnduri (dorsal,
ventrale, pectorale), se numr radiile din nottoarele pereche. Cu ajutorul lor se vor determina:
indicatori statistici (media, deviaia, variana, coeficientul de variaie, etc.) pentru caracterele msurate;
indici i coeficieni tehnologici: indici de profil, circumferin, coeficient de ngare, coeficient de fertilitate,
raport gonosomatic (n anumite situaii);
asimetria fluctuant este o metod care se bazeaz pe determinarea diferenelor fenotipice ntre structurile
simetrice omoloage (diferenele dintre stnga i dreapta a structurilor bilaterale) ceea ce indic rspunsul dezvoltrii
indivizilor (care au acelai genotip) la condiii particulare de mediu.
Stimularea hormonal a maturrii celulelor sexuale: Administrarea hormonilor gonadotropi se va face atunci
cnd temperatura apei este optim pentru reproducere, pentru fiecare specie n parte (12-14oCmorun, 17-23oCpstrug,
13-21oCceg).
hipofiza de crap: 3,5-7 mg hipofiz de crap/kg mas corporal femel (funcie de calitatea hipofizei);
administrarea de hormon sintetic LH-RHa 0,1 mg/kg mas corporal femel.
Doza practicat pentru stimularea femelelor este administrat, de regul, n dou trepte. Doza se stabilete n funcie
de gradul de maturare al femelelor i de temperatura apei. Prima doz reprezint 5-10% din cantitatea total de hormon care
trebuie administrat. Cu ct temperatura este mai ridicat cu att se reduce doza. Intervalul dintre cele dou injecii este de
12-24 de ore, n funcie de temperatura apei. Dup 500 grade ore controlul femelelor se face din 30 n 30 minute, minuios
(Patriche, 2001). n momentul cnd sunt verificate primele icre se verific si intervalul de timp dup care devin lipicioase
dup expunerea la ap. Un interval de 6-12 minute este acceptat pentru pstrug indicnd maturarea complet a icrelor.
Dac timpul este mai lung atunci poate fi o indicatie a ntrzierii ovulaiei, dac este mai scurt indic supramaturarea lor.
La masculi cantitatea de hormon reprezint 1/2 sau 1/3 din doza administrat femelelor, ntr-o singur doz, odat cu prima
doz a femelelor.
Prelevarea/Colectarea gameilor: Se realizeaz prin dou proceduri.
Procedura prin mulgere: se maseaz abdomenul femelelor n sens antero-posterior iar ovulele mature curg n
recipienii de colectare. Sperma se colecteaz prin masarea abdomenului sau curbarea corpului masculului. Aceast metod
se practic n special la exemplarele de dimensiuni mai mici. Pentru exemplare mari colectarea spermei se realizeaz cu
ajutorul unui tub, care se introduce 5 - 10 cm pe orificiul.
Procedura prin practicarea interveniei chrurgicale: se practic o incizie local n partea posterioar a
abdomenului de la porul genital, de cca 5-7 cm (n funcie de talia exemplarului). Icrele sunt colectate progresiv, prin
masarea uoar a reproductorului pe abdomen. Dup colectarea icrelor se realizeaz sutura incizei i se face tratament cu
antibiotice.
Se va aprecia/estima prolificitatea absolut i relativ pentru fiecare femel, prin numrarea ovocitelor dintr-un
eantion de icre cntrit (se va repeta pentru minim 3 eantioane, obinnd o medie), valoarea extrapolndu-se la masa
total de icre extras i cntrit.
Fecundarea (separat pe specie): Ponta fiecrei femele de sturion se va mpri ntr-un numr de porii egal cu
numrul de masculi i va fi fecundat separat doar cu sperma unui mascul, realizndu-se o ncuciare multifactorial a
reproductorilor disponibili i api pentru reproducere. n funcie de numrul de reproductori capturai (/) se va realiza
o schem multifactorial de ncruciare astfel nct rata de consangvinizare/generaie s fie ct mai mic. Fertilizarea icrelor
trebuie s se realizeze n maxim o or de la colectarea lor.
O metod folosit la fecundare este metoda semi-uscat care, se apreciaz, reduce fenomenul de polispermie.
Fiecare porie de ovule extrase de la femele se va va fecunda cu sperma unui singur mascul diluat cu ap n proporie 1:200
preparat extemporaneu i imediat transvazat peste vasul cu icre, deoarece spermatozoizii au o activitate optim, activ,
pentru scurt timp dup adaosul apei. Proporia de amestec recomandat este 1 kg icre la 2 litri de suspensie, n situaia n
care se folosete sperm de calitate, se amestec uor, se las timp de 3 -5 minute, dup care se trece la descleierea icrelor.

O alt metod folosit la fecundare este metoda uscat, n care poria de 200g icre se amestec cu 2 ml sperm, se
amestec uor adugnd 250ml ap. Se continu amestecarea pn cnd icrele devin adezive (cca 3 min). Se ia ca reper
acest moment, cand apar primele icre lipite. Un timp mai lung de pentru manifestarea adezivitii icrelor de pstrug dup
fertilizare indic o ntrziere n ovulatie iar unul prea scurt indic supramaturarea femelei.
Descleierea icrelor
Pentru aceast operaie se utilizeaz o suspensie fin de nmol. Concentraia mlului trebuie s fie de aa natur ca
icrele s nu pluteasc. La 1 kg de icre se adaug, dup scurgerea surplusului de lichid, a 4-5 l de suspensie. ntregul coninut
al vasului se amestec uor cu mna de 3-4 ori/minut. Treptat, la suprafaa icrelor se ataeaz particule fine de mmol, care
mpiedic lipirea acestora de substrat sau ntre ele. Procesul de descleiere dureaz 20-30 de minute. Pentru ndeprtarea
particulelor de nmol se adaug treptat ap curat i se scurge surplusul, prin nclinarea vasului. Operaiunea de splare se
realizeaz pn cnd se ndeprtez ntreaga catitate de nmol i o dat cu aceasta i substanele cleioase de pe suprafaa
icrelor. n acest moment icrelor pot fi introduse n incubator. Operaia este foarte important, descleierea insuficient
afectnd succesul ebriogenezei i obinerea unei rate mici a supravieuirii.
Fecundare: Evaluarea succesului la fecundare se realizeaz dup introducerea diferitelor loturilor de icre n
incubatoare, la cca 8 ore dup fecundare (stadiul cu 4 blastomere). Se extrag cte 100 de icre i se analizeaz la binocular
procesul de embriogenez, se numr icrele fecundate, nefecundate i polispermate i se determin procentul de fecundare.
Anomaliile cele mai frecvente sunt cauzate de:
a. polispemia - segmentarea atipic a oului care determin o dezvoltare anormal sau moarte la eclozare;
b. dereglarea procesului de gastrulaie apare n condiii neprielnice de temperatur sau la icrele de slab calitate.
Monitorizarea parametrilor tehnologici
La sfritul experimentelor dup ce petii sunt evaluai biometric se calculeaza urmtorii parametri:
Sporul real de cretere [Sr] se calculeaz ca diferen ntre biomasa final i biomasa iniial.
[Sr] = (Bf) (Bi) [g], unde Bf - Biomasa final; Bf - Biomasa iniial.
Ritmul zilnic de cretere [GR] se determin prin raportarea diferenei dintre biomasa final (Bf) i biomasa
iniial (Bi) la timpul de cretere (t) exprimat n numr de zile.
[GR] = (Bf - Bi)/t [g/zi], unde t numr de zile.
Factorul de conversie al hranei [FCR] se calculeaz prin raportarea cantitii de furaje distribuite la sporul de
cretere al petelui.
[FCR] = Q/Sr [g furaj/g spor biomasa], unde FCR coeficient de conversie; Q cantitate de furaje administrate;
Sr sporul real de cretere.
Rata specific de cretere [SGR] se determin conform relaiei:
[SGR] = 100 x (ln Bf - ln Bi)/t [%/zi]
Factorul de conversie al proteinei [PER] se calculeaz cu ajutorul relaiei:
[PER] = Sr/F* Pb [g/g], unde Sr- spor de cretere (g); F cantitatea de furaje ingerate (g);
Monitorizarea parametrilor hidrochimici
Dei mediul acvatic reprezint un complex sistem de variabile, numai o parte din acestea joac un rol decisiv n
meninerea echilibrului fizico-chimic al apei de cultur. Parametrii critici sunt reprezentai de temperatur, solidele n
suspensie, pH, concentraia oxigenului dizolvat, amoniac, nitrii, CO 2 i alcalinitate. Evoluia fiecrui parametru din lista
celor enumerai anterior este important dar, n cele mai multe cazuri, interdependena dintre ei este cea care influeneaz
starea de sntate i ritmul de cretere a petilor.
Aceste reacii afecteaz fiecare aspect al tehnologiei acvacole, de la rata de supravieuire i rata de cretere pn la
performana filtrrii biologice i de eliminare a solidelor. Cunoaterea acestor reacii este esenial pentru succesul oricrei
producii intensive. Pe parcursul experimentrilor, monitorizarea parametrilor fizico-chimici ai apei din sistemele
recirculante se va face cu o frecven variabil n funcie de parametrul urmrit i, n situaii limit, de condiiile tehnologice
specifice.
Monitorizarea parametrilor fiziologici: Datele examenului hematologic sunt utilizate corelativ, pentru evaluarea
strii fiziologice a organismului dar i pentru diagnosticul unor boli ale organelor hematopoietice. Examinarea seriei
eritrocitare i leucocitare presupune recoltarea probelor biologice de snge (cca. 0,5-2 ml, n funcie de talia petelui). La
peti exist mai multe metode de recoltare a sngelui: puncie cardiac la peti de dimensiuni mari, puncie din vena
caudal la peti de diferite dimensiuni, tierea pedunculului caudal la peti de dimensiuni mici.
BIBLIOGRAFIE SELECTIV
Andras, R.L. (1995). Production of aquatic animals. World Animal Science, C8, Chapter 5, 95-108.
Bacalbasa-Dobrovici N. (1997) Endangered migratory sturgeons of the lower Danube River and its Delta. In: (EditE.K.
Balon) Envinronmental Biology of Fishes, 48 (1 4): 201- 207.
Bharadwaj S., Pangle K.L., Sutton T.M., Brown P.B., 2008. Nitrogen Excretion in Fed and Fasted Lake Sturgeon, North
American Journal of Aquaculture, 70:2,132-137

Birstein V.J. & DeSalle R. (1998). Molecular phylogeny of Acipenserinae. Mol. Phylogenet. Evol., 9, 141-155.
Brown W.M. (1985). The mitochondrial genome of animals. In: MacIntyre, R.J. (Ed.), Molecular Evolutionary Genetics.
Plenum, New York, NY, pp. 95130.
Chen, S., Timmons, M.B., Aneshansley, D.J., Bisogni, Jr., J.J., 1993. Suspended solids characteristics from recirculating
aquacultural systems and design implications. Aquaculture, 112, 143-155.
Ciolac A., Patriche N. 2004. Biological aspects of main marine migratory sturgeons in Romanian Danube River migration
of fishes in Romania Danube River, Applied Ecological and Enviromental Research 3 (2), pp. 101106.
Cristea V., Iorga V. (2011). State of the Sturgeon Stocks in the Danube River Journal of environmental protection and
ecology (JEPE). 12 No4.
Cristea V., Talpes M. et al. (2005). Creterea sturionilor n sistem superintensiv recirculant. Ed. Didactica si Pedagogic,
Bucureti, p. 287.
Cristea, V., Grecu, I., Ceap, C., 2002. Ingineria sistemelor recirculante din acvacultura, Editura Didactica si Pedagogica,
Bucuresti; 342
Dakin E.E. & Avise J.C. (2004). Microsatellite null alleles in parentage analysis. Heredity 93: 504509.
Ellegren H. (2000). Heterogeneous mutation processes in human microsatellite DNA sequences. Nat. Genet. 24: 400402.
Estoup A. & Angers B. (1998). Microsatellites and minisatellites for molecular ecology: theoretical and empirical
considerations. In: Carvalho G, editor. Advances in molecular ecology. Amsterdam: IOS Press. p. 5586.
Gershanovich, A.D., Pototskij I.V., 1995. The peculiarities of non-faecal nitrogen excretion in sturgeons (Pisces;
Acipenseridae) - Effects ofwater temperature, salinity and pH, Comp. Biochem. Physiol. 111A, 2, 313-317.
Ghomi M., Shahriari R., Langroudi H, Mehdi N., Eric von Elert. 2012. Effects of exogenous dietary enzyme on growth,
body composition, and fatty acid profiles of cultured great sturgeon Huso huso fingerlings Aquacult Int. 20:249254
Goldstein D.B., A.R. Linares, L.L. Cavalli-Sforza, M.W. Feldman. (1995). An evaluation of genetic distances for use with
microsatellite loci. Genetics 139:463-471.
Hansen M.M. (2003). Application of molecular markers in aquaculture. World Journal of Microbiology and Biotechnology,
13: 405-413.
Hensel K. & Holik J. (1997): Past and current status of sturgeons in the upper and middle Danube. Sturgeon biodiversity
and conservation. Kluwer Academic Publishers, Dordrecht.
Jenneckens I., Meyer J.N., Hrstgen-Schwark G., May B. (2001). A fixed allele at microsatellite LS-39 is characteristic for
the black caviar producer Acipenser stellatus. Journal of Applied Ichthyology 17: 39-42.
Kamler E., 1992. Early life history of fish. An energetic approach. Chapman & Hall, Londra, pp. 266.
Kapuscinski, A.R. & Miller, L.M. 2007. Genetic guidelines for fi sheries management [online]. 2nd Edition. The University
of Minnesota Sea Grant Program. www.seagrant.umn.edu/downloads/f22.pdf
Kieffer J. D., Wakefield A. M., Litvak M.K., 2001. Juvenile sturgeon exhibit reduced physiological responses to exercise.
The Journal of Experimental Biology 204, 42814289.
Kiss J.B. (1997) Cartea Deltei. Editura Fundatiei Aves, Odorheiul Secuiesc.
Kynard, B., Suciu, R., Horgan, M. 2002. Migration and habitats of diadromous Danube River sturgeons in Romania: 19982000. Proceedings of The 4th International Symposium on Sturgeon, Oshkosh, WI, J. Appl. Ichthyol. 18: 529 - 535
Lawson, T.B., 1995. Fundamentals of Aquaculture Engineering, Chapman & Hall, New York, pp. 355.
Li W. (1997). Molecular Evolution. Sinauer Associates, Inc., Sunderland MA.
Liu V.W., Shi H.H., Cheung A.N., Chiu P.M., Leung T.W., Nagley P., Wong L.C., Ngan H.Y. (2001). High incidence of
somatic mitochondrial DNA mutations in human ovarian carcinomas. Cancer Res 61: 59986001.
Losordo, T. M., Masser, M., Rakocy, J., 1992. Recirculating aquaculture tank production systems: An overview of critical
considerations, Southern Regional Aquaculture Centre Publication 451.
Losordo, T.M. 2003, Recirculating Aquaculture Systems: Planning and Managing for a Sustainable Future. Proceedings of a
workshop at Deakin University, Warrnambool, 14-15 June, 2003.
Losordo, T.M., Hobbs, A.O. 2000, Using computer spreadsheets for water flow and biological filter sizing in recirculating
aquaculture production systems. Aquaculture Engineering 23, pp. 95-102.
Losordo, T.M., Westers H. 1994. System carriyng capacity and flow estimation. In Timmons, M.B., Losordo, T.M. (Eds.),
Aquaculture Water Systems: Engineering Design and Management. Elsevier, New York: 9-60
Ludwig A., Debus L., Jenneckens I. (2002) A molecular approach for trading control of black caviar. International Review
of Hydrobiology 87: 661-674.
Manea, G. (1980). Sturionii (Acipenseridae) Taxonomie, Biologie, Sturionicultur i Amenajri sturionicole. Ceres.
Nvodaru I., A. Constantinescu, I. Munteanu (1999). Reproducerea speciilor comerciale de peti de ap dulce n zona Deltei
Dunrii. Analele tiinifice ale Institutului Naional de Cercetare-Dezvoltare Delta Dunrii, VII, pp. 159-164.
Navodaru I., M. Staras & R. Banks (1999). Management of sturgeon stocks of the lower Danube River system. In: The
Delta`s: State-of art protection and management. Conference Proceedings, Tulcea, Romania 26-31 July 1999: 229-237.
Nvodaru I., Stara, M. & Banks, R. 1999. Management of sturgeon stocks of the lower Danube River system. In: tiuc &
Nichersu (ed.): The Deltas: State of art, protection and management. Conference Proceedings, Tulcea, 26-31 July 1999:
229-237.

OBrien S.J. (1991). Molecular genome mapping: lessons and prospects. Curr. Opin. Genet. Dev. 1, 105 111.
OReilly P. & Wright J.M. (1995). The evolving technology of DNA fingerprinting and its application to fisheries and
aquaculture. J. . Fish Biol., 47 (SupplA. ): 29-55.
Oksiyuk, O. P., L. A. Zhuravlev, A. V. Lyashenko, I. Kh. Bashmakova, Yu. I. Karpezo, A. I. Ivanov (1992). Water
pollution of the Danube River in the Ukraine: general indices. Gidrobiologicheskiy Zhurnal 28: 311. (in Russian; English
translation: Hydrobiol. J. 29: 110 (1993)).
P Jatteau, 1997. Daily patterns of ammonia nitrogen output of Siberian sturgeon Acipenser baeri (Brandt) of different body
weights. Aquaculture Research Volume 28, Issue 7, pages 551557,
Paraschiv, M., Suciu, R., Suciu, M. 2006. Present state of sturgeon stocks in the lower Danube River, Romania. In:
Proceedings 36th International Conference of IAD.Austrian Committee Danube Research / IAD, Vienna: 152 158
Parker, E., Couturier, M., Benfey, T., 2002. Oxygen management at a commercial aquaculture farm producing Atlantic
Salmon (Salmo salar) smolts. In: Proceedings of the third International conference on recirculating aquaculture (Editors)
Libey, G.S., Timmons, M.B., Flick, G.J., Rakestraw, T.T., Sea Grant Publication VSG 00 09.
Patriche N., Gessner J., Wirth M., Kirschbaum F., Krger A., (2002). Caviar composition in wild and cultured sturgeons
impact of food sources on fatty acid composition and contaminant load, Journal of Applied Ichthyology Volume 18, Issue
4-6, pages 665672, 2002.
Randall D.J., Wright P.A., 1987. Ammonia distribution and excretion in fish. Fish. Physiology and Biochemistry vol. 3 no.
3 pp 107-120.
Secor, D., Gunderson T., 1998. Effects of hypoxia and temperature on survival, growth and respiration of juvenile Atlantic
sturgeon, Acipenser oxyrinchus. Fishery Bulletin 96 : 603-613.
Steven D. Mims, Andrew Lazur, William L. Shelton, Boris Gomelsky, Frank Chapman, 2002, Production of Sturgeon,
Southern Regional Aquaculture Centre Publication.
Suciu R. (2008). Sturgeons of the NW Black Sea and Lower Danube River countries. At: International Expert Workshop on
CITES Non-Detriment Findings 17-22 November 2008, Cancun, Mexico.
Suciu Radu, Onr Dalia, Paraschiv Marian, Holostenco Daniela, Iani Marian,Taflan Elena, Hon Stefan. 2011.
Anadromous sturgeons species of the Lower Danube River system: status, monitoring and management. Oral presentation
in International Conference -Deltas and Wetlands, Tulcea, 1416 Sept 2011, http://deltanet-project.eu/
filemanagermodule/file/id/202/src/documents/.
Summerfelt, S.T., Hochheimer, J.N., 1997. Review of ozone processes and applications as an oxidizing agent in
aquaculture. The Progressive Fish Culturalist 59, pp. 94 105.
Tautz D. (1989). Hipervariability of simple sequences as a general source for polymorphic DNA markers. Nuc. Acids Res.
17: 6463-6471.
Thomas S.L., Piedrahita R.H., 1998. Apparent ammonia-nitrogen production rates of white sturgeon (Acipenser
transmontanus) in commercial aquaculture systems. Aquacultural Engineering 17, 45-55
Timmons M., Thomas M. Losordo, 1994. Aquaculture Water Reuse Systems: Engineering design and management.
Developments in Aquaculture and Fisheries Science, Elsevier, Vol. 27. 346 p.
Wright, J.M. 1993. DNA fingerprinting in fishes. In: Biochemistry and Biology of Fishes, Vol. 2 (ed. P.W. Hochachka,
T.Mommsen), pp. 57-91. Elsevier, Amsterdam.
Zaitsev Yu.P. (1993) Impact of eutrophication on the Black Sea fauna. pp. 6386. In: Studies and Reviews 64, Part 2.
General Fisheries Council for the Mediterranean.
Zaitzev Yu. P. (1992) Ecological status of the Ukranian zone of the Black Sea shelf: a survey. Gidrobiologicheskiy Zhurnal
28: 3 18 (in Russian; English translation: Hydrobiol. J. 29: 422 (1993)).
Zhuravleva L.A. & N.A. Grubina (1993). Phosphorus regime of the lower Danube and addition of phosphorus to the Black
Sea. Gidrobiologicheskiy Zhurnal 29: 8188 (in Russian; English translation: Hydrobiol. J. 31: 92101 (1995)).
OM MAPDR/MMGA nr. 262/330/2006 (MO nr. 385/04.05.2006) privind conservarea populaiilor de sturioni din apele
naturale i dezvoltarea acvaculturii de sturioni din Romnia http://www.mmediu.ro/legislatie/biodiversitate.htm
***WWF-Save the Danube Sturgeons. An action plan for the recovery, protection and conservation of endangered
sturgeons in the Danube River Basin. 2011. http://wwf.panda.org/ what_we_do/ where_we_work/black_sea_basin/
danube_carpathian/our_solutions/freshwater/danube_sturgeon/
***WWF-The sturgeons Danubes endangered flagship species. 2011. http://awsassets.panda.org/downloads/
wwf_factsheet_sturgeons.pdf

PUBLICAII
ARTICOLE ISI
Andreea Dudu, Sergiu Emil Georgescu, Patrick Berrebi, Marieta Costache, 2012. Site heteroplasmy in the mitochondrial
cytochrome b gene of the sterlet sturgeon Acipenser ruthenus. Genetics and Molecular Biology, Vol. 35(4), in press,
http://dx.doi.org/10.1590/S1415-47572012005000058.
L. Dediu, V. Cristea, A. Docan, 2012. Bioremediation of Recirculating Systems Effluents as a Method to Obtain Highquality Aquaculture Products. Journal of Environmental Protection and Ecology, Vol. 13(1), pp. 275-288.
ARTICOLE BDI
V. Cristea, Maria Desimira Dicu, Lorena Dediu, Marilena Mereanu, M.T. Coad, 2012. The influence of feeding intensity
on growth performance of Acipenser stellatus (Pallas 1771) juvenils. Lucrri tiinifice Seria Zootehnie, Vol. 58(2), pp.
219-224.
Angelica Docan, Victor Cristea, Lorena Dediu, 2012. Effect of feeding with different dietary protein level on leukocytes
population in juvenile Siberian sturgeon, Acipenser baeri, Brandt, in press, Arhiva Zootehnica.
PARTICIPRI LA CONFERINE
Andreea Dudu, Sergiu Emil Georgescu, Alexandru Burcea, Neculai Patriche, Marieta Costache Microsatellite DNA
variation in the Russian Sturgeon, Acipenser gueldenstaedtii from the Lower Danube, Annual Zoological Congress of
Grigore Antipa Museum, Book of Abstracts, Bucureti, 21-23 Noiembrie 2012, p. 208.
Sergiu Emil Georgescu, Andreea Dudu, Iulia Elena Florescu, Neculai Patriche, Marieta Costache Analysis of the
microsatellite variation in the Beluga sturgeon, Huso huso from the Lower Danube, Annual Zoological Congress of
Grigore Antipa Museum, Book of Abstracts, Bucureti, 21-23 Noiembrie 2012, p. 209.