Lucrare editat cu avizul I.S.J.

Mehedini

Autori:
Prof.gradul I, Lucian Cpitnescu, I.S.J. Mehedini, inspector colar general
Prof.gradul I, Dumitru Gingu, Liceul Teoretic Gheorghe ieica
Prof.definitiv, Adriana Giuic, Grupul colar Decebal
Referent tiinific:
Conf. univ. dr.Aurel Faur, Universitatea de Vest din Timioara, Facultatea de
Chimie-Biologie-Geografie
Coordonare metodic:
Prof.Maria Diaconu, inspector colar, specialitatea biologie
Redactor
Prof. Laurean Crciunescu, director C.C.D.
Coperta:
Prof. Dumitru Gingu
Revizie text
Prof. Ana Miloev, Liceul Teoretic Gheorghe ieica
Rezumat n limba englez:
Prof. Florentina Popa, Grupul colar Decebal
Tehnoredactare computerizat:
Mihai Tudoroniu, informatician C.C.D.

ISBN

Tipografia: Casa Corpului Didactic Mehedini

Lucrarea urmrete formarea i dezvoltarea deprinderilor de observare i

experimentare ale elevilor.
Prezentarea are la baz relaia comunicare-aprofundare, sintez-evaluare.
Lucrrile practice propuse pot fi realizate individual sau n grup, iar
bogatul coninut tiinific sporete atractivitatea lucrrii.
S-ar putea aprecia c adevratele tiine ale naturii au aprut datorit
metodei experimentale. Experimentul nu a fost strin de progresele spectaculoase
n domeniul cunoaterii.
nsi civilizaia uman este produs al experimentului.
Cauzele i legile naturii le putem cunoate, n primul rnd, cu ajutorul
metodei experimentale.
Experimentul permite individului sau grupului s intervin activ n
cunoatere.
Experimentul n biologie apare ca expresie a necesitii de explicare
cauzal i legic a proceselor i fenomenelor.
Experimentul nu ne ofer adevruri, ci date pentru elaborarea
adevrurilor. El permite celui care l folosete s angajeze un dialog activ cu
natura.
Inspector colar General,
Prof. LUCIAN CPITNESCU

Biologia, ramur de tiin cu caracter prin excelen experimental,

presupune realizarea unui numr mare de experimente i observaii prin care s se
consolideze nivelul teoretic de pregtire al elevilor.
Elaborarea unui ndrumtor de lucrri practice vine n ntmpinarea
acestui deziderat, fiind un instrument de lucru util elevilor i profesorilor din
nvmntul preuniversitar.
Prezenta lucrare este n conformitate cu curricula colar, are o ilustraie
bogat i atractiv. Suntem convini c acest ndrumtor de lucrri practice va fi
bine apreciat de ctre toi cei ce vor s se specializeze n domeniul tiinelor
biologice.
Conf. Dr. AUREL FAUR
Universitatea de Vest din Timioara

Introducere
Biologia este cea mai fascinant dintre tiinele care se predau n coal Viaa este subiectul care
se studiaz cu interes i plcere ncepnd cu cei mai tineri discipoli i continund n toat ierarhia
vrstelor. Pentru individ limitat, pentru lume infinit, viaa ca subiect de studiu n biologie se detaeaz
de austeritatea i relativa rceal a obiectului de studiu al celorlalte tiine ale naturii.
Lucrrile practice se pot efectua cu aparatura i instrumentarul existente n coli, materialele
consumabile putnd fi procurate din natur i din comer.
Programele colare prevd obiectivele i competenele care pot fi realizate cu ajutorul lucrrilor
practice, al cror rol i loc n desfurarea procesului didactic l stabilete fiecare cadru didactic n
concordan cu cerinele programei.
Efortul depus pentru pregtirea lucrrilor practice este laborios, dar rezultatele obinute de elevi i
participarea lor activ i afectiv rspltesc orice efort.
Mediul de lucru, atmosfera fizic i comunicarea adecvat cu elevii n cadrul leciilor n care sunt
prevzute lucrri practice, contribuie la creterea interesului elevilor pentru obiectul biologie. Tratarea
individual a elevilor, dirijarea discret a activitilor, crearea unor situaii problem, stimularea gndirii
elevilor pentru a formula ipoteze, rezolvarea prin descoperire cu ajutorul unor lucrri practice a
problemei, sunt modaliti de activitate didactic eficiente care permit o formare complex i o evaluare
mai bun a elevilor.
Lucrrile practice la biologie prezint particulariti metodice n funcie de obiectul didactic
principal urmrit, de modalitile de organizare i n funcie de activitatea care predomin.
De exemplu, experimentul cu scop de investigare sau cercetare este desfurat n cadrul unei lecii
de descoperire i cuprinde urmtoarele etape principale: stimularea interesului pentru efectuarea
experimentului (crearea unei motivaii), punerea unei probleme, emiterea unor ipoteze, stabilirea
modalitilor de verificare a ipotezelor (etapa desfurrii experimentului), prelucrarea datelor
obinute,verificarea rezultatelor, stabilirea concluziilor.
n cazul leciilor de recapitulare i atunci cnd experimentul este utilizat n etapa de fixare sau
evaluare din cadrul unei lecii, se poate folosi fia de lucru care cuprinde probleme i sarcini de lucru
pentru elevi.
Sub aspectul modalitilor de organizare a experimentului, de cele mai multe ori, acesta se poate
desfura sub form de activitate independent individual, de activitate organizat pe grupe cu sarcini
comune sau pe grupe cu sarcini difereniate.
Desfurarea experimentului ca activitate independent individual necesit material natural,
substane, materiale i aparatur necesare efecturii experimentului, elevii lucrnd n ritmul lor propriu,
cu ajutorul fiei de lucru (exemplu- o lucrare practic de microscopie).
Desfurarea experimentului pe grupe cu sarcini comune sau pe grupe cu sarcini difereniate
necesit mprirea clasei n grupe de elevi. Grupele este bine s fie eterogene- formate din elevi mai bine
sau mai slab pregtii, elevi mai interesai sau mai puin interesai n studiul biologiei; n cadrul acestor
echipe elevii lucreaz pe rnd i colaboreaz n gsirea soluiilor i realizarea sarcinilor nscrise n fi, n
stabilirea concluziilor.
n toate lucrrile practice, de mare importan este s fie stabilite modaliti de comunicare ntre
membrii grupelor de elevi , ntre grupele de elevi i profesor pentru a preveni dezordinea.
Interveniile profesorului n activitatea unei grupe se vor face n caz de necesitate sau la cererea
elevilor i nu pentru rezolvarea sarcinilor, ci pentru a depi eventualele blocaje. Comunicarea cu elevii se
cere s fie tonic, dominat de calm i stpnire de sine, chiar dac elevii merg la o anumit grup pe un
drum greit. nvarea prin ncercare i eroare poate fi temeinic i creeaz o mobilizare mai bun a
elevilor, o depire a tracului, creterea capacitii de decizie i a curajului n rezolvarea sarcinilor.
Autorii

Foreword
Life is the most complex, the most miraculous and the most beautiful phenomenon in the
Universe.
The birth of any creature is a cosmic event because it reflects the handwork of the whole
Universe. So let us all le happy for our existence as there is live in ourselves.
The knowledge of nature in all its complexity becomes an essential issue for les, people, as we are
gifted with the power of science, of knowledge of language and of feelings which gives us great
advantages in the struggle for existence in comparison with other biological species.
A foolish behavior of man for the environment may turn against him. Man has to know the
living natures, to respect it, otherwise he endangers his own existence and evolution.
Biology, the science of live, helps us to know and to cherish the living nature.
Florentina Popa

BIOLOGIE- CLASA A IX-A

Metode de sterilizare utilizate n microbiologie

Sterilizarea este operaia de distrugere a microorganismelor prezente ntr-un mediu sau pe

instrumentarul de laborator. Cunoaterea metodelor de sterilizare este necesar pentru desfurarea
corect i reuita oricrei lucrri de microbiologie. Exist numeroase metode. Alegerea metodei potrivite
depinde de natura materialului care va fi sterilizat (sticlrie, cauciuc, metal).
Clasificarea metodelor de sterilizare se face n funcie de natura operaiilor efectuate:

Metode care utilizeaz ageni fizici: cldura ( uscat, umed), radiaii UV, filtrarea, ultrasunetele.
Metode care utilizeaz ageni chimici: substane antiseptice, substane dezinfectante.
Metode care utilizeaz cldura uscat: incinerarea, nclzirea la rou, flambarea, sterilizarea cu
ajutorul aerului cald.
Metode care utilizeaz cldura umed: fierberea, pasteurizarea, tindalizarea, autoclavarea

Principul metodelor care se bazeaz pe cldur- n cursul operaiei are loc degradarea proteinelor
microbiene pn la calcinarea materialului biologic. Cldura realizeaz distrugerea formelor vegetative la
temperatura de 50- 60o C cam n 30 de minute. Dac se crete temperatura la 70o C formele vegetative
sunt distruse n 10 minute. La 20o C cu cldur umed i la 100o C cu cldur uscat sunt distrui sporii.
Incinerarea const n arderea materialului biologic n cuptoare speciale sau crematorii. Prin
aceast metod sunt distruse cadavrele animalelor scoase din exploatare ca i vata i tifoanele infectate.
nclzirea la rou este folosit pentru ansele bacteriologice care sunt meninute n flacra becului
de gaz pn la rou, mai nti la baza flcrii, apoi la vrf. Ansa se sterilizeaz obligatoriu nainte i dup
utilizare.
Flambarea const n trecerea prin flacra becului de gaz de cteva ori a obiectului care se
sterilizeaz- lame de sticl, pipete gradate, pipete Pasteur, nainte de sterilizare, idem mnerul ansei i
gtul eprubetelor i baloanelor nainte i dup utilizare.
Sterilizarea cu aer cald este cea mai eficient msur de sterilizare cu cldur uscat.
Carbonizarea materiei vii se face n etuve la 180o C timp de o or. Este o metod de sterilizare complet:
se sterilizeaz sticlria de laborator, instrumentarul chirurgical. Nu se pot steriliza seringile cu armtur
metalic i obiectele de cauciuc. Obiectele se pregtesc pentru sterilizare astfel: sticlria s fie bine
splat i perfect uscat. Se mpacheteaz n hrtie de ambalaj fiecare obiect n parte. Toate eprubetele i
baloanele se astup cu dopuri de vat nvelite n tifon, se leag cu sfoar i li se aplic un capion de
hrtie. Pipetele se ambaleaz individual, sau n cilindrii metalici. Vata, compresele, pansamentele se
sterilizeaz n casonete speciale (cutii de tabl cu perei dubli) peretele intern prezint orificii i peste el
se afl o centur metalic ce astup orificiile dup ncetarea sterilizrii. Controlul sterilizrii la etuv se
face amplasnd pe lng materialele de sterilizat, tubuoare de sticl care conin zaharoz al crei punct
de topire este de 170o C Dac zaharoza este caramelizat nseamn c s-a atins temperatura necesar.
Temperatura nu trebuie depit pentru c vata i hrtia ard producnd substane inhibitoare pentru
microorganisme.
Cldura umed are o putere de penetrare mai mare- distruge microorganismele hidratate n timp
mai scurt i la o temperatur mai sczut dect cldura uscat.
Fierberea const n fierberea instrumentelor chirurgicale, seringilor la 100o C timp de 20- 30
minute. Fierberea nu este o metod complet, sporii nu sunt distrui. Se face n fierbtoare electrice sau
cu gaze i se recomand s se foloseasc ap distilat pentru a evita depunerea srurilor. Se recomand
adugarea a 4- 5% carbonat de sodiu sau borax care ridic cu cteva grade punctul de fierbere i
mpiedec ruginirea. Teoretic obiectele sterilizate pot fi utilizate 24 de ore. Se recomand folosirea lor
imediat.
Pasteurizarea este sterilizare incomplet, sunt distruse numai formele vegetative, nu i sporii.
Este folosit la stilizarea laptelui i a berii. Se face prin nclzirea produsului la 56- 90o C timp de 30
7

minute. nclzirea se face pe baie de ap. Produsele astfel sterilizate se pstreaz ambalate ermetic la 4o C
pn la momentul folosirii pentru a mpiedeca germinarea sporilor.
Tindalizarea este o pasteurizare repetat de 3 ori la intervale de 24 de ore. Se face la sterilizarea
mediilor de cultur care conin diferite substane organice: glucide, gelatin, ser sanguin care se
degradeaz la temperaturi mai mari.. n intervalul dintre sterilizri se pstreaz la temperatura camerei
pentru ca sporii rmai nedistrui s evolueze la forme vegetative care vor fi distruse la viitoarea nclzire.
Tindalizarea este o sterilizare complet.
Autoclavarea este sterilizarea cu vapori de ap sub presiune. Este cea mai folosit n practica
microbiologic,. este o sterilizare complet i sigur. Cu vapori de ap sub presiune se obin temperaturi
peste 100o C.
La 0,5 atmosfere temperatura este de 115o C
La 1 atmosfer temperatura este de 121o C
La 2 atmosfere temperatura este de 134o C
nclzirea se face timp de 20 de minute. Materialele sterilizate sunt materialele infectate, culturile
microbiene vechi, casonete cu instrumentarul medical, medii de cultur, obiecte din cauciuc.
Sterilizarea se face n autoclav care este un cazan de tabl cu pereii dubli cei interni prezentnd orificii
prin care trec vaporii.
Antisepticele substane care mpiedec multiplicarea microorganismelor. Aceste substane au n
general, aciune microbiostatic, acioneaz n concentraii mici i pentru timp scurt pot fi aplicate pe
esuturi vii. Exemplu. Alcoolul etilic de 70o ,KMnO4 0,1%, tinctura de iod, acidul boric , H2O2
,detergenii cationici de tip bromocet 0,1%.
Dezinfectanii sunt substane care au n general, aciune microbicid, care distrug microbii de pe
diferite obiecte neanimate. Exemple: formol, fenol, cloramina. Alcoolul absolut de 96o este un
dezinfectant foarte slab, el acioneaz prin coagularea proteinelor.

Tipuri morfologice de baz la bacterii

Forma bacteriilor este controlat genetic, ele ncadrndu-se ntr-un anumit tip morfologic i
anumite dimensiuni. Forma poate fi influenat i de condiiile de mediu, totui polimorfismul este
limitat- domin forma tipic pentru specia dat. Convenional forma bacteriilor se apreciaz pe bacterii
din culturi tinere, aflate n cretere activ, cultivate pe medii corespunztoare i n condiii optime de
temperatur, PH i presiune de oxigen adecvat. Dup form deosebim 5 tipuri:
Bacterii sferice- coci, aproape izodiametrice, uor ovalare, poliedrice, reniforme. Dup modul de
grupare la sfritul diviziunii
-coci izolai
-grupate cte dou
Diplococcus pneumonie
-tetrada
- sarcina

Micrococcus tetragenes (4 celule)

Sarcina lutea (8 celule)

-streptococ

- stafilococi

Streptococcus pyogene (celule n lan)

Staphylococcus aureus (ciorchine)

Bacterii cilindrice ( bacili )- celule alungite- bastona, dar sunt i forme de tranziie, ntre coci i
bastonae- cocobacili. Capetele bacililor pot fi:
- rotunjite
-

tiate drept

ascuite

picot

-izolai
grupai cte-doi

Pot fi:

- n palisad

diplococi

Corynebacterium diphteriae

-streptobacili

- n rozet

Lactobacillus sp.

Agrobacterium stellatum

-grupri neregulate

3.Bacterii spiralate (elicoidale)

Dup numrul spirelor i dup aspect sunt mai multe subtipuri:
-vibrion

Vibrio cholerae

- spirili cu ture de spir rigide

Spirillum volutans

-spirochetele cu ture de spir flexibile:

-strnse
- relaxate

Treponema pallidum
Leptospira sp.

5. Bacterii ptrate.
Descoperite n 1980 n Sinai de Walsby. Aparin genului Qadra, grupul Arhebacteriilor.
n afara tipurilor de baz sunt i forme rare de bacterii: bacterii pedunculate, bacterii care
nmuguresc, bacterii cu apendici acelulari rezultai din produi de excreie, bacterii care formeaz
trichoame (lanuri de bacterii reunite de o teac polizaharidic comun, dar pot tri i izolat).
Minicelulele- sunt corpusculi mici, sferici care nu cresc, ei se formeaz printr-o septare
neobinuit a celulelor bacteriene. Se formeaz la extremitatea unor bacterii- Escherichia coli, Bacillus
subtilis, Salmonella i Vibrio. Aceste minicelule nu au material nuclear, nu cresc i nu se divid, au totui
metabolism propriu (cu enzime) sunt rezistente la radiaii ionizante. Sunt importante pentru cercetare, vor
fi folosite ca vaccinuri vii.

10

Studiul mediilor de cultur utilizate n bacteriologie

Mediul de cultur este un produs nutritiv preparat artificial n laborator n vederea cultivrii
microorganismelor. Mediul de cultur trebuie s ndeplineasc urmtoarele condiii:
Compoziia chimic s fie corespunztoare pentru dezvoltarea microorganismelor
S asigure sursa de C, N ,srurile minerale i vitaminele
PH-ul ntre 7- 7,5 pentru bacterii i 5,5- 6 pentru drojdii
Mediul s fie steril
Umiditatea mediului s fie corespunztoare
S se asigure protecia fa de lumin
S se asigure cerinele pentru oxigen n funcie de tipurile de microorganisme: aerobe,
microaerofile, anaerobe
Asigurarea temperaturii de dezvoltare de 25- 28oC pentru germenii saprofii i 37oC pentru
germenii patogeni.
Cele mai utilizate medii de cultur sunt mediile uzuale sau simple. Mediile uzuale pot fi lichideexemplu bulionul simplu de carne, sau solide- exemplu geloza nutritiv.
Etapele preparrii unui mediu de cultur:
Stabilirea compoziiei chimice a mediului n funcie de tipul de microorganisme
Cntrirea substanelor n ordine din reet i dizolvarea lor n ordine n din cantitatea de ap, se
adaug restul de ap, se corecteaz PH-ul fie cu HCl 10% fie cu NaOH .
Dac este cazul se filtreaz
Sterilizarea mediului printr-o metod adecvat- filtrare, tindalizare, autoclavare
Reete pentru mediul de cultur:
-mediu lichid
Extract de carne- 3g
Pepton- 5g
NaCl 5g
Ap distilat pn la 1000 ml
-mediu solid
Extract de carne 3g
Pepton 5g
NaCl -5g
Agar 20g
Ap distilat pn la 1000 ml

11

Tehnici de nsmnare utilizate n microbiologie

nsmnarea este trecerea unei culturi microbiene sub form de inocul care conine microorganisme,
pe un mediu de cultur favorabil dezvoltrii speciei microbiene. Condiia esenial de lucru este asepsia.
Sunt mai multe tehnici n funcie de consistena mediului i de tipul de cultur pe care vrem s o
nsmnm.
nsmnarea n medii lichide
1. nsmnarea unui mediu lichid cu o cultur microbian dezvoltat n mediu lichid- se
realizeaz cu pipeta gradat (pentru un volum fix) i pipeta Pasteur (pentru un volum oarecare)
2. nsmnarea unui mediu lichid cu o cultur microbian dezvoltat pe mediu solid cu ajutorul
ansei bacteriene.
Tehnica de lucru. Se recolteaz aseptic o poriune de cultur microbian n bucla ansei. Se
introduce ansa n mod aseptic n eprubeta cu mediu lichid, se depune materialul pe peretele eprubetei, la
nivelul interfeei cu mediul lichid, apoi se spal peretele eprubetei cu cteva picturi din mediul de
cultur. Se omogenizeaz inoculul cu mediul de cultur prin rsucirea eprubetei ntre palme .Pe gtul
eprubetei se noteaz numele culturii i data incubrii. Se termostateaz la temperatura optim de incubaie
de 28- 37oC .

Dop

Sarcina lutea

15.08.2001

Geloz

Temperatura optim
timp de 24 de ore

Mediu
lichid

Dup inoculare se observ tulburarea mediului de cultur datorit multiplicrii celulelor

bacteriene. Se obine o cultur bacterian n mediu lichid.
nsmnarea mediilor solide.
Sunt dou variante:
nsmnarea mediilor solide nclinate cu o cultur microbian dezvoltat n mediu lichid.
nsmnarea se face cu pipeta.
nsmnarea mediilor solide nclinate, cu o cultur microbian dezvoltat pe mediu solid se face
cu ansa bacteriologic
Tehnica de lucru. Se recolteaz aseptic n bucla ansei o poriune de cultur (inocul) . Se introduce
ansa n mod aseptic n eprubeta cu mediu nclinat steril, pn la fundul eprubetei unde este o pictur de
ap de condensare. Se omogenizeaz inoculul n aceast pictur, apoi se traseaz pe suprafaa gelozei
striuri n zigzag de la fundul spre gura eprubetei.
12

inocul

pictur de lichid
de condensare

striuri n zig-zag

Se incubeaz la temperatura de
dezvoltare a germenului 24-48 ore

cultur bacterian

nsmnarea mediilor solide repartizate n plci (pe geloz plci)

Tehnica de lucru din cultura care trebuie nsmnat se face o suspensie foarte dens n ap
fiziologic steril, indiferent dac nsmnm cu un produs solid sau lichid. Sunt dou variante n funcie
de obiectul utilizat

13

- Tehnica nsmnrii n pnz prin inundare: se aspir cu pipeta 2-3 ml din suspensia bacterian
dens, se las s se scurg tot volumul de lichid pe suprafaa gelozei astfel ca s fie acoperit toat

inocul
exces de
inocul
mediu
suspensie bacteriologic dens
n ap fiziologic steril
suprafaa cu inocul, se nclin placa i cu aceeai pipet se extrage excesul de inocul. Se noteaz pe
capacul plcii numele culturii i se incubeaz la temperatura optim 24- 48 ore.
-nsmnarea cu ajutorul tamponului de vat
Se mbib tamponul n suspensia bacterian, se preseaz de pereii interiori ai eprubetei pentru a
ndeprta excesul de inocul pe suprafaa plcii cu geloz se traseaz striuri foarte apropiate n zig- zag pe
toat suprafaa plcii nti pe o direcie, se rotete placa cu 90o, se traseaz din nou striuri foarte apropiate,
apoi un striu marginal. Dup incubare se va observa c ntreaga suprafa a mediului de cultur este
acoperit cu un strat uniform de celule- se obine o cultur n pnz. nsmnarea n pnz se face pentru
obinerea de mas celular bogat, pentru realizarea tehnicii autobiogramei i n cazul culturii
bacteriofagilor.

Tampon
de vat

Se noteaz numele culturii nsmnate, data i se incubeaz la temperatura

optim de dezvoltare 24- 48 de ore
Metode de examinare a microorganismelor la microscop.
I. n stare vie, pe preparate proaspete ntre lam i lamel. Examinarea preparatelor proaspete se
face pentru evidenierea mobilitii germenilor, se dau puine detalii de structur, dar mobilitatea este un
caracter care poate servi la identificarea unei specii de bacterii alturi de alte caracteristici studiate:
structura, morfologia, proprieti biochimice, proprieti serologice, de patogenitate ca i reactivitatea
germenilor pentru diferii colorani- activitate tinctorial. Se examineaz pe viu: bacili, spirili, leptospire,
spirochete.
Materiale necesare: Lame cu lamele curate i degresate, culturi microbiene n mediu lichid sau
suspensie n ap fiziologic steril, sau mediu natural, pipete Pasteur, vas cu amestec sulfocromic.
Mod de lucru: Se recolteaz cu pipeta Pasteur o cantitate mic de cultur, se depune o pictur pe
lam, apoi lamela la 45o se aeaz pe marginea picturii i se las s cad uor fr s prind aer.
Observarea preparatelor lam- lamel se face la microscopul optic cu obiectiv uscat (40x), dar pot fi
observate ui la microscopul cu fond negru i la microscopul cu contrast de faz. Microorganismele
14

efectueaz micri active, datorit prezenei flagelilor, n toate direciile cmpului- naintare, rsucire,
rostogolire; micri pasive- datorate nclinrii platinei- sunt micri ntr-un singur sens. Dup examinare
preparatul se pune ntr-un cristalizor cu soluie desinfectant- clorur mercuric 2 %.
II. Germeni omori prin diferite procedee de fixare i colorare pe preparate fixe numite frotiuri.
Examinarea frotiurilor permite studierea morfologiei germenilor, evidenierea unor structuri intra i
extraparietale. Frotiul este un preparat microbiologic etalat pe lame microscopice. Pot fi executate din
culturi microbiene dezvoltate pe mediu solid cu ajutorul ansei, sau din cultur lichid cu pipeta Pasteur.
Materiale necesare : Culturi microbiene, ap fiziologic steril, ans bacteriologic, stative de
colorare, creion de scris pe sticl, lame curate i degresate. nainte de efectuarea frotiului lamele se
flambeaz pe faa pe care se va efectua frotiul.
Timpii de lucru.
1. Etalarea. ntr-o pictur de ap fiziologic steril luat n bucla ansei i pus pe lam se
omogenizeaz o cantitate mic de cultur recoltat n bucla ansei. Etalarea se face cu ajutorul ansei
prin micri circulare concentrice. Frotiul trebuie s fie subire i uniform pentru a mpiedica
suprapunerea germenilor. Suprafaa de etalare se mrete, frotiul nu trebuie s depeasc marginile
lamei.
2. Uscarea. Se face la temperatura camerei, nu se recomand agitarea n aer .
3. Fixarea. Se face cu cldur sau ageni chimici. Se trece lama cu faa opus frotiului prin flacra
becului de gaz de cteva ori. Fixarea este ncheiat cnd lama frige. Se controleaz temperatura
trecnd-o pe dosul palmei stngi. Fixarea cu ageni chimici- metanol, etanol, sau alcool- eter. n
cursul operaiei de fixare, germenii sunt omori. Se nltur posibilitatea infectrii, preparatul ader
mai bine la lam, se mrete i afinitatea pentru colorani. Pentru efectuarea frotiului din mediu
lichid se procedeaz la fel, dar se folosete pipeta Pasteur.
4. Colorarea. Se datoreaz reaciei de combinare ntre anumii colorani i unii constitueni ai celulelor
bacteriene. Coloranii utilizai sunt substane organice din grupul anilinei, extrai din gudroanele de
huil sau substane chimice de tipul srurilor cu caracter bazic sau acid: fucsina bazic, violet de
genian, albastru de metilen, fucsina acid, eozina
Metode de colorare utilizate.
Simple, cnd se folosete aciunea unui singur colorant.
Difereniale, cnd acioneaz 2 sau mai muli colorani
Speciale sau selective, se utilizeaz colorani selectivi care evideniaz anumite structuri celulare.
Coloraia simpl cu fucsina. Frotiul se fixeaz la flacr. Colorarea cu soluie de fucsina bazic
soluie 1% hidroalcoolic fenicat din care se prepar soluia de lucru 1/10. fucsina se menine pe lam un
minut. Se spal cu ap de robinet, se usuc la aer, se examineaz la microscop cu obiectivul de imersie
ntr-o pictur de ulei de cedru. Bacteriile sunt colorate uniform, ceea ce constituie un artefact datorat
faptului c diferite componente celulare, dei au structuri diferite au afinitate aproape egal pentru
coloranii bazici. coloraia simpl se face n scop orientativ. Dac e vorba de o cultur pur se poate
observa tipul morfologic al germenilor i confirmarea puritii culturii. Dac frotiul este fcut din preparat
natural se poate constata prezena, microorganismelor, tipul i densitatea lor.
Coloraia Gram.
A fost introdus n practica microbiologic de Gram. Se utilizeaz aciunea a doi colorani:
fucsin bazic i violetul de genian, este o coloraie diferenial- difereniaz toate bacteriile n dou
grupe: Gram pozitive i Gram negative, care se bazeaz pe diferenele structural biochimice i biologice,
dar n special pe structura diferit a peretelui celular. Este o coloraie cu valoare taxonomic, descrierea
ncepnd cu caracterul Gram .Descrierea metodei. Frotiul este fixat la flacr. Se coloreaz cu soluie de violet de genian 1%
care se menine pe lam 1-2 minute, apoi colorantul se scurge i preparatul se spal cu ap. Toate
bacteriile se coloreaz n violet.
Mordansarea cu soluie Lugol 1:2:300 iod, iodur de potasiu, ap distilat. Soluia se menine pe
lam 2-3 minute. Preparatele nu se spal. n timpul acestei operaii iodul formeaz cu violetul de genian
un complex iodat cu greutate molecular mare care la unele bacterii este stabil, la altele este instabil.
Decolorarea cu alcool aceton (3-1) se menine 5- 7 secunde pe lam, apoi se face o splare
abundent cu ap pentru a opri aciunea decolorantului.
15

Recolorarea cu soluie de fucsin bazic 1%, 1/10. se menine pe lam un minut. Preparatul se
spal cu ap, sunt uscate i se examineaz la microscop cu obiectivul de imersie. Celulele la care
complexul este instabil se decoloreaz i vor fi recolorate cu fucsin n rou, celelalte rmn colorate n
violet .
Interpretarea observaiilor. Dac preparatul este dintr-un amestec de germeni- unele bacterii vor
fi colorate violet- Gram +, altele n rou- Gram .
Principiul coloraiei Gram. Coloranii bazici au mare afinitate i reacioneaz cu componentele
acide din citoplasma bacteriilor, iar dup tratarea cu soluia Lugol se formeaz un complex iodat stabil.
La Gram pozitive i instabil la Gram negative care trebuie colorate apoi cu un colorant de contrast pentru
evideniere. Ipoteza acceptat este c un rol esenial n colorare l are peretele celular. Coloraia Gram
depinde foarte mult de vrsta culturii bacteriene. Numai culturile tinere permit o coloraie i o interpretare
corect. Pe msur ce mbtrnesc i schimb comportamentul- bacteriile Gram pozitiv se coloreaz ca i
cele Gram negativ.
Bacterii Gram pozitive. Bacilii sporulai- Bacillus subtilis, Bacillus aureus, specii ale genurilor
Staphylococcus, Streptococcus, bacteriile lactice- Lactobacillus.
Bacterii Gram negative. Escherichia coli, Proteus, Salmonella, gonococul- Neisseria, se
comport la fel toate celulele eucariote, cu excepia drojdiilor.

16

Virusuri

Structura celulei bacteriene

cili

capsul
perete celular
citoplasma (conine
acid nucleic,
glicogen, grsimi i
uneori un pigment

flagel

Un model al unui virus icosaedric

(cu 20 de laturi). nveliul exterior
const din molecule proteice, iar miezul
are o singur molecul de ADN sau
ARN

O bacterie tipic. Procesele

eseniale ale vieii, precum i producerea
energiei, au loc n citoplasm. Peretele
celular este rigid i capsula este vscoas
(groas i lipicioas) pentru a preveni
uscarea celulei. Cilii i flagelii sunt pentru
locomoie.
Bacteriile se numr printre cele mai mici
organisme vii. Aceti Bacillus proteus au fost
colorai cu argint i mrii de aproximativ
2500 de ori pentru a deveni vizibili.

Acest virus bacteriofag T-2

atac bacterii. Capul su este ca
o prism hexagonal. Un tub
ngust ntr-o teac spiralat iese
din baza prismei
Din teac ies ase picioare
proteice.

17

Celula animal i celula vegetal (dup Enciclopedia Encarta)

reticul
endoplasmatic
rugos

por nuclear
nucleol

nucleu

nveli
nuclear

ribozom

aparat Golgi
centriol
lizozom

citoplasm

reticul
endoplasmatic
neted

membran celular

mitocondrie

Celula animal

por nuclear

lizozom

nveli nuclear

nucleu

aparat Golgi
nucleol

ribozom
membran
tilacoidal
grana

reticul
endoplasmatic rugos
reticul endoplasmatic
neted

vacuol

plasmodesme
citoplasm
membran celular

perete celular

Celula vegetal

18

mitocondrie

cloroplast

Tipuri de celule eucariote

Tipuri de celule
vegetale:
A,B
i
Cfibre
sclerenchimatice: A i B
vedere longitudinal; Cseciune transversal; D
i E colenchim: D n
seciune longitudinal;
E- seciune transversal;
F i H- sclereide; Gparenchim; I- celul de
parenchim lemnos

Forme de
celule animale

19

Observaii asupra structurii unor alge unicelulare i pluricelulare

ncrengtura Chlorophyta
Algele verzi constituie o grupare polimorf, cu forte muli reprezentani,rspndit n mediul
acvatic,iar unii pe soluri umede sau pe alte substraturi,de regul tot umede. Cloroplastele de forma variat
cte una sau mai multe n celul conin clorofilele a i b, care predomin,de aceea aceste alge au culoarea
verde. Clorofitele se caracterizeaz printr-un aparat vegetativ foarte variat, dar foarte puin difereniat,
fiind reprezentat prin alge unicelulare, izolate sau reunite in colonii sau cenobii sau pluricelulare, lamelare
sau filamentoase, simple sau ramificate. La unele alge verzi, talul alctuiete filamente tubulare
(sifonalele), plurinucleare, simple sau ramificate. Clorofitele unicelulare au forme si dimensiuni foarte
variate, putnd fi: ovale, sferice, stelate, cilindrice, poliedrice etc.
Organizarea celulei. n celul se afl citoplasma, un nucleu (sau mai muli), cromatofori, vacuole,
stigma, pirenoizi etc. Membrana celular de cele mai multe ori este celulozic. Uneori, peretele celular
este alctuit n parte i din substane pectice, acestea intrnd de obicei n alctuirea pturii externe, care
adeseori se gelific. Exist si cazuri, mai rare, cnd celula este delimitat de o pelicul citoplasmatic. La
unii reprezentani, membrana celular este impregnat cu sruri de calciu. Celula posed unul sau civa
cromatofori mari (bandiformi, stelai, n forma de inel etc.) sau mai muli si mici (ovali, lenticulari) de
culoare verde .
Ordinul Volvocales.Unicelulare, flagelate, izolate sau formnd colonii sau cenobii. La aceste
alge, att celulele vegetative ct i elementele de reproducere, au cte doi i au patru flageli egali, foarte
rar mai muli. Organizarea celulei este asemntoare celei de la euglenofite. Celula conine citoplasma, un
nucleu, cloroplast mare n form de clopot sau cup, prevzut de obicei cu un pirenoid, vacuole etc.
Membrana celular adeseori este celulozic, la unele specii celulozo-pectic, iar la altele este nlocuit cu
un nvelii subire citoplasmatic (periplast), care le permite schimbarea formei.

Cylindromonas
fontinalis

Platydorina caudata

Basichlamys sacculifera

Ordinul Chlorococcales. Sunt alge unicelulare, solitare, coloniale sau cenobiale, imobile
deoarece sunt lipsite de
flageli.
Alctuirea
celulei se aseamn cu
cea de la volvocale.
Majoritatea lor conin
n celula un singur
nucleu, dar sunt i
puine
excepii
multinucleate. Cele mai
Scenedesmus quadrispina
Coelastrum astroideum
multe sunt rspndite
n ape dulci.
20

Ordinul Ulotrichales. Grup mare de alge verzi cu tal pluricelular, filamentos, uneori lamelar sau
cilindric i ntodeauna fixat de substrat. Talul filamentos poate fi simplu sau ramificat. La aceste alge se
difereniaz o parte bazala fixata printr-o celula bazala rizopodial i alta superioar sau terminal.
Creterea talului se realizeaz prin diviziunea tuturor celulelor sau numai a celor din partea apical.
Celulele sunt uninucleate, coninnd cte un cloroplast mare, parietal pe care se afl pirenoizi. Triesc n
ape dulci sau marine,unele fiind adaptate la viaa de uscat.

Gloeotila contorta

Stichococcus bacillaris

Ordinul Zygnematales. Alge pluricelulare cu celule dispuse n serie, alctuind filamente simple
libere. Cloroplatii axiali sau parietali, de form variat.

Zygnemopsis
decussata

Zygnema
circumcarinatum

Zygopodium
ericetorum

Ordinul Desmidiales.Alge unicelulare izolate,form variat (oval, stelat, cilindric)

Celulele lor sunt alctuite din dou jumti simetrice distincte, separate printr-o strangulaie. Cloroplatii
sunt axiali. Membrana celulei este neted sau ornamentat, prevzut cu pori i uneori impregnat cu
sruri de fier.

1. Micrasterias tropica ; 2. Micrasterias denticulata ; 3. Micrasterias

rotata; 4. Euastrum oblongum.

21

Comparaie ntre celula vegetal i animal

Studiul celulei se poate face n laborator, prin observarea la microscop a preparatelor din colecia
colii sau a celor pe care elevii i le pregtesc singuri, dup indicaiile i sub supravegherea profesorului.
Este necesar s se studieze paralel celula vegetal i cea animal, pentru a se vedea asemnrile i
deosebirile dintre ele. Dm mai jos o modalitate de desfurare a unei lucrri practice de studiu
comparativ al celulei vegetale i animale.
Material necesar: microscop, lame, lamele, bisturiu, bulb de ceap, albastru de metil n soluie de
1%, infuzie de fn, pipet efilat (Pasteur)
Mod de lucru.
a. Preparate proaspete din foi de ceap
De la un bulb de ceap se desprinde cu pensa un fragment din epiderma superioar (partea concav) a
frunzelor crnoase. Fragmentul epidermic se pune n cutia Petri: Se taie cu foarfecele sub ap o poriune
din acest fragment (circa 5x8 mm) i se pune ntr-o pictur de ap pe lam, n aa fel nct s fie bine
etalat. Epiderma se aeaz cu axa longitudinal paralel cu latura mic a lamei. Se aplic apoi lamela,
lsnd-o s cad uor peste materialul vegetal.
Examinarea la microscop. Preparatul se analizeaz mai nti cu obiectivul mic (7 sau 10). n
cmpul microscopului se observ un esut format dintr-un singur strat de celule. Pentru a putea s vedei
nucleul, colorai preparatul pe lam cu o pictur de iod n iodur de potasiu (soluie Lugol). Se aplic
pictura de soluie Lugol la o margine a lamelei, iar la marginea opus se absoarbe apa de sub lamel cu o
fie de hrtie de filtru. Putei apoi s examinai preparatul cu obiectivul 20x.
Peretele celular apare ca un nveli transparent cu poriuni mai subiri numite punctuaiuni; ntre
pereii a dou celule vecine se afl lamela mijlocie.
Citoplasma apare ca un strat subire, transparent, de-a lungul peretelui celular. Are aspect
granular, este incolor, dup colorare este glbuie.
Nucleul se poate afla n centrul celulei, la unul din capete sau poate avea poziie parietal. Este
invizibil nainte de colorare. Dup colorare cu iod devine vizibil avnd o culoare galben strlucitor i
aspect granular.
b. Preparate proaspete cu protozoare
Despre celula animal, elevii pot dobndi o reprezentare satisfctoare examinnd preparate
microscopice cu protozoare. Unele se pot obine din infuzii care se pregtesc astfel: se iau paie de orz,
orez sau fn, care provin din locuri umede; se taie mrunt i se aeaz pe fundul unui vas de sticl ntr-un
strat de 2-3 cm. Peste ele se toarn ap cldu. Vasul se ine descoperit i la un loc cu o temperatur de
200C, luminat, dar ferit de contactul direct cu razele de soare. Dup cteva zile se observ c la suprafa
se formeaz o pojghi cu un luciu metalic, iar apa devine opalescent. n ap se gsesc acum nenumrate
protozoare al cror numr i varietate cresc pe zi ce trece, atta timp ct infuzia ofer condiii prielnice de
dezvoltare. Protozoarele se strng sub pelicula gelatinoas. Se ia cu o pipet o pictur de ap din acest
loc, se pune pe o lam de sticl, se acoper cu lamela i se observ la microscop; se vd micile organisme
unicelulare: protozoare, alge, bacterii, dezvoltate din sporii de rezisten ce se gsesc pe paiele de fn,
provenite din locurile bltoase.
Pentru a obine o cultur pur numai de parameci, folosim o infuzie steril preparat astfel: ntr-un
balon de sticl se fierbe fnul n ap curat timp de 30 minute. n aceste condiii sunt omorte toate
microorganismele din infuzie, cu excepia sporilor de Bacillus subtilis cu care se hrnete parameciul. n
cteva zile, acest bacil se nmulete intens, ceea ce se poate observa prin formarea la suprafaa lichidului
din balona unei pojghie gelatinoase, i astfel este asigurat hrana paramecilor. Cu o pipet curat, se ia
din infuzia pregtit anterior o cantitate mic ce conine parameci i se nsmneaz noua infuzie. Se
astup balonul cu un dop de vat steril. n aceste condiii, paramecii se nmulesc cu repeziciune; acum
n infuzie se gsesc numai parameci.
Se poate obine i o cultur de amibe. Astfel, ntr-un borcan de sticl cu o capacitate 500 cm3 se
introduc mai nti 2-3 lame de sticl, apoi un strat de 2-3 cm paie de fn de mlatin, tiate n buci mici.
Peste acestea se toarn ap de balt, atta ct s mbibe bine toctura de fn. Se acoper vasul cu o plac
de sticl i se aeaz la lumin, la o temperatur de 20o, dar nu n btaia razelor de soare. Dup 2-3 zile ,
22

peste coninutul borcanului se adaug o cantitate de ap murdar dintr-un an sau balt, n care se gsesc
frunze i rmurele n descompunere. Se adaug i puin ml de pe fund, pn cnd borcanul se umple trei
sferturi din capacitatea sa.. dup 8- 10 zile, vom gsi amibe pe fundul vasului, i pe lamele de sticl ce au
fost aezate la nceput. Pe lamele de sticl scoase i puse la microscop se observ amibele.
ectoplasm
endoplasm
membran
cili
vacuol pulsatil

peristom
macronucleu
micronucleu
membranel
citostom
citofaringe
vcuol digestiv

Celule din epiderma de ceap

Paramoecium caudatum

Bacterii, alge verzi, fotosinteza-lucrare de laborator din recapitulare

Material necesar: microscoape, truse de disecie, lame, lamele, mtasea broatei, cultur de
Bacillus subtilis.
Modul de lucru. Cu 3-4 zile nainte de desfurarea lucrrii elevii vor fi solicitai s prepare
culturi de Bacillus subtilis, iar cu o zi nainte s recolteze alge verzi pluricelulare: mtasea broatei i lna
broatei.
Prepararea culturii de Bacillus subtilis. ntr-un borcan de sticl se introduc boabe de fasole pn la
o treime din capacitatea sa. Se adaug ap cldu pn la trei sferturi, apoi se ine la o temperatur de 20o
timp de 48 de ore. Lichidul din vas se tulbur, iar la suprafa se formeaz o pelicul bogat n bacterii.
Efectuarea preparatelor microscopice cu Bacillus subtilis
Pe o lam de sticl flambat n flacra unei spirtiere, se depune cu ajutorul unei pipete Pasteur, o pictur
din cultura de Bacillus subtilis. Bacteriile se recolteaz din pelicula de la suprafaa borcanului, unde se
afl n numr foarte mare. Se aplic lamela i se examineaz la microscop cu obiectivul 10x i apoi cu
20x. Se poate observa o distribuie relativ uniform a bacteriilor n cmpul microscopului. Datorit
transparenei lor, forma bacteriilor nu este vizibil, ele se pot remarca datorit micrilor n valuri pe care
le efectueaz
Efectuarea preparatelor cu alge verzi pluricelulare.
Se aleg filamente de mtasea broatei, care sunt alunecoase la pipit i se aeaz pe lama de sticl
ntr-o pictur de ap. n mod asemntor se procedeaz i cu filamente de lna broatei. Se etaleaz bine
preparatele, n aa fel nct s nu fie suprapuse talurile, se acoper cu lamela i se examineaz la
microscop cu obiectivele 6x i 10x.
Se identific cele dou alge i dup forma cromatoforilor. Se deseneaz imaginile observate pe
caiete.
Efectuarea unor preparate combinate.
Se monteaz pe lama de sticl un filament de mtasea broatei. Peste filament, n pictura de ap
se adaug o pictur din cultura de Bacillus subtilis. Se acoper cu lamela. Se las preparatul timp de 10
minute la lumin puternic, apoi se examineaz la microscop. Se observ c bacteriile sunt aezate numai
23

n jurul filamentului de alg verde. Se las preparatul timp de 10 minute la ntuneric, apoi se examineaz
din nou la microscop. Se observ c bacteriile sunt rspndite uniform sub lamel.
Concluzii .
Bacteriile din specia Bacillus subtilis respir aerob, ele au nevoie de oxigen. O dovad n acest
sens este pelicula care se formeaz la suprafaa culturii. n preparatul combinat inut la lumin, oxigenul
din apa de sub lamel este consumat rapid de ctre bacterii. Singura surs de oxigen sub lamel este
filamentul de mtasea broatei care face fotosintez. Bacteriile atrase de oxigen se orienteaz n jurul
filamentului de alg.
La ntuneric fotosinteza nceteaz. Att bacteriile, ct i alga verde respir i consum tot oxigenul
de sub lamel. n aceast situaie, bacteriile, care sunt mobile, se ndeprteaz de filamentul de alg i se
ndreapt spre marginile lamelei unde se dizolv oxigen din aer.
Cloroplastele i micrile citoplasmatice n celulele frunzelor
de ciuma apelor (Elodea canadensis)
Matricea celular (citosolul) reprezint compartimentul cel mai frmntat al celulei, cuprins de o
permanent micare frenetic cunoscut sub numele de dinez. Uneori aceste micri intracelulare au o
mare amplitudine, determinnd deplasarea componenilor citosolici i odat cu aceasta a tuturor
organitelor celulare, ntr-un singur sens sau n mai multe sensuri..
Dineza poate fi observat n toate celulele vii, dar mai uor, datorit amplitudinii sale particulare
n celulele plantelor acvatice (ex. ciuma apelor -Elodea canadensis, srmulia apelor- Valisneria spiralis,
mrarul de balt- Miriophylum spicatum)
Material necesar. Microscop cu condensator i iluminare electric, lam de sticl, lamele, trus
de disecie, frunze de Elodea canadensis sau Valisneria spiralis.
Modul de lucru.
Se detaeaz o frunz de ciuma apei din vrful vegetativ al tulpinii i se pune pe o lam de sticl
(cu vrful spre observator) ntr-o pictur de ap; se acoper cu lamela. Dup cteva minute, stimulat de
lumin i de cldura degajat de lampa microscopului, vei observa micarea citoplasmatic, n special, n
celulele situate n zona median a frunzei. Celulele avnd pereii subiri, permit observarea a numeroase
cloroplaste de form oval, lenticular sau sferic, dup cum sunt privite lateral sau din fa. Cloroplastele
sunt antrenate ntr-o micare de rotaie de-a lungul pereilor celulari.
Observaiile se fac cu obiectivele 20x i 40x. Se deseneaz pe caiete.

24

Evidenierea plasmalemei i a tonoplasmei

Plasmalema ca i tonoplasma sunt citomembrane cu grosimi de circa 8- 10 nm, dimensiuni ce se
situeaz cu mult sub puterea de rezoluie a microscopului fotonic; ca urmare ele nu pot fi vizionate dect
la microscopul electronic. Prezena lor poate fi demonstrat prin plasmoliz, fenomen ce const n
desprinderea (parial sau total) a protoplastului de perete. Plasmoliza nu poate fi neleas dect prin
prisma permeabilitii selective i dinamice a acestor citomembrane.
Materiale biologice: Bulbi de Allium cepa, frunze de Elodea canadensis.
ntocmirea preparatului: Se desprinde un fragment din epiderma superioar a frunzelor crnoase
ce intr n constituia bulbului de Allium cepa ( o frunzuli
de Elodea sau un fragment din frunza de Valisneria) i se
monteaz ntr-o pictur de ap. Se analizeaz la microscop
i se constat starea de turgescen a celulelor. Pe una din
laturile lamelei se depun 2-3 picturi de soluie concentrat
de NaCl ( 1M de KNO3 sau 5-7% de zaharoz), iar pe latura
opus o bucic de hrtie de filtru. Pe msur ce apa este
absorbit de hrtia de filtru soluia salin (sau de zaharoz)
penetreaz ntre lam i lamel, crend un mediu hipertonic
n jurul materialului biologic. n consecin apa din vacuol
trece n mediul extracelular (fenomen numit exosmoz),
vacuola i micoreaz treptat volumul, iar celula ncepe s
se plasmolizeze. Plasmoliza ncepe la colurile celulei i se
extinde treptat, trecnd de la forma concav (incipient) la
cea convex (final).
Fenomenul este reversibil dac plasmoliza a fost
indus de o soluie fiziologic i n-a depit un prag critic.
Deplasmoliza se poate realiza prin nlocuirea treptat ( ca
mai sus, dar n sens invers) a mediului hipertonic cu apa.
Reversibilitatea fenomenului demonstreaz c
plasmoliza i deplasmoliza sunt nu numai procese fizicochimice, ci i fiziologice.
Morfologia cromoplastelor
Cromoplastele sunt plastide colorate n galben, portocaliu, rou sau n nuane intermediare. Se
gsesc n petalele florilor, n fructe, frunze i chiar n rdcini.
Cromoplaste la morcov. (Daucus carota)
Materiale necesare: Rdcini tuberizate de morcov, lame i lamele de sticl, brici anatomic (lam
de ras nefolosit), vas Petri cu ap.
Mod de lucru: Se fac seciuni transversale prin rdcina tuberizat de morcov. Seciunile trebuie
s fie foarte fine. Imediat dup secionare se pun
n vasul Petri cu ap. Dup ce am efectuat un
numr mai mare de seciuni, alegem pe cea mai
fin, de dimensiunile unei lamele i o punem pe
lam ntr-o pictur de ap. Se acoper cu
lamela.
Cu obiectivul mic prindem o poriune de
esut ct mai clar. esutul respectiv,
parenchimul de depozitare, se analizeaz cu
obiectivul 40x.
citoplasm
n cmpul microscopic se vor observa
cromoplast
nucleu
celule poligonale prozenchimatice n care se afl
cte un nucleu i numeroase cromoplaste.
25

Cromoplastele au form acicular, dreptunghiular sau paralelipipedic. Ele sunt nconjurate de

citoplasm abundent.
Cromoplaste la tomate (Lycopersicum esculentum)
Materiale necesare: Fructe coapte de tomate, lame i lamele de sticl, bisturiu, brici anatomic, ac
spatulat.
Mod de lucru: Fructul se spal cu ap de robinet; cu ajutorul unui bisturiu se ndeprteaz
peretele extern pe o anumit poriune, dup care se face o seciune foarte fin prin partea crnoas a
fructului.
Se pune seciunea pe
lam, ntr-o pictur de ap, apoi
se aeaz lamela. Cu obiectivul
nuclei
40x vom observa un numr mare
de celule mezoendocarpice, n
majoritate izolate, care conin
cte un nucleu, numeroase
cromoplaste i granule de
l
amidon.
Cromoplastele sunt roiiportocalii, de form sferic sau
ovoidal.
Pe msura maturizrii fructului, carotina trece n izomerul su numit licopin, care cristalizeaz sub form
de cristale aciculare.
Incluziuni ergastice
Amidonul
Amidonul care se formeaz n cloroplaste este cunoscut sub numele de amidon autohton. Cea mai
mare cantitate de amidon se gsete ns n organele plantelor (semine, tulpini i frunze normale sau
metamorfozate etc.). Acesta este amidonul de rezerv.
Forma pe care o
mbrac amidonul de
hil
hil
hil
rezerv este cea de
gruncioare,
caracteristice fiecrei
4
plante.
3
Materiale
necesare: Cariopse de
gru
(Triticum
aestivum), porumb (Zea
mays), orez (Oryza
sativa), ovz (Avena
sativa), semine de
fasole
(Phaseolus
vulgaris), tubercul de
cartof
(Solanum
tuberosum), lam i
lamele
de
sticl,
bisturiu, ac spatulat, iod
n iodur de potasiu.
Mod de lucru:
Cu
ajutorul
unui
bisturiu sau ac spatulat

2
sc

5
6

gp

8
9
7

Diferite granule de amidon: simple: 1 i 4 la Solanum tuberosum;

compuse: 8-la Oryza sativa; 9- la Avena sativa; gp.- granule
pariale; sc.- straturi concentrice de depunere.
26

se rade puin din endospermul de analizat (gru, porumb, orz, ovz, fasole) sau din esutul de depozitare
(cartof). Masa obinut se pune pe lam ntr-o pictur de ap.
Recomandm ca masa de amidon s nu fie prea dens pentru c granulele se suprapun i
ngreuiaz analiza.
La unul din capetele lamei punem o pictur de iod n iodur de potasiu (soluie Lugol), apoi cu
ajutorul lamelei sau al acului spatulat se aduce spre masa de amidon o uvi de colorant. Se amestec
bine cu materialul pn cnd se coloreaz omogen, dup care se acoper cu lamela.
Excesul de colorant se ndeprteaz cu o bucic de hrtie de filtru.
Colorarea nu trebuie s fie intens, deoarece aceasta ar ngreuia analiza granulelor de amidon.
Colorarea materialului se poate face i altfel: inem o fie de hrtie de filtru pe una din laturile
lamelei, n timp ce pe latura opus punem o pictur de colorant puternic diluat.
Hrtia de filtru absoarbe apa de sub lamel, care este nlocuit de soluia de iod n iodur de
potasiu.
Acesta ptrunde pe sub lamel colornd n albastru granulele de amidon.
Din categoria granulelor de amidon simplu vom analiza la microscop urmtoarele tipuri:
La cartof, granulele au forma variat, dar cele mai multe sunt ovale. Hilul este sferic, foarte mic i
excentric. Strat urile mai ntunecate, care alterneaz cu cele mai deschise la culoare, conin o cantitate mai
mare de ap.
Adesea, pe lng granule simple, vom observa granule compuse i semicompuse (1,2,3 i4)
La gru, granulele sunt sferice, cu hilul aezat central.
La fasole se vd granule elipsoidale, ovale sau mai mult sau mai puin sferice. Hilul este alungit i
ramificat.
La porumb, granulele sunt poligonale, cu hilul aezat n centrul granulului.
Amidonul compus poate fi analizat la urmtoarele specii:
La orez, granulul de amidon este alctuit din 4 pn la 100 de granule pariale. Acestea sunt tot de
form poligonal. Hilul se observ mai greu dect n exemplul precedent.
La ovz, granulul este compus din circa 300 de granule pariale. Forma granulului compus este
oval sau mai mult sau mai puin sferic, iar a granulelor pariale, de obicei, poligonal.
Grsimile
Una dintre cele mai frecvente incluziuni ergastice din celulele vegetale o constituie grsimile.
Ele se gsesc sub form de corpusculi sferici n celulele muchilor hepatici, n seminele plantelor
oleaginoase etc.
Materiale necesare: Semine de dovleac (Cucurbita pepo) sau floarea soarelui (Helianthus
annuus), lame i lamele de sticl, bisturiu i ac spatulat, Sudan III, tinctura de Alcanna sau OsO4.
Mod de lucru: Cu ajutorul bisturiului se detaeaz un fragment de esut endospermatic din
smna de dovleac sau de floarea soarelui. Acesta se pune pe lam, se coloreaz cu unul din coloranii
menionai, dup care se acoper cu lamela.
Deasupra lamelei se pune o fie de hrtie de filtru, apoi se apas cu degetul pentru
omogenizarea materialului dintre lam i lamel.
La microscop se observ n celulele separate sau n gruprile de celule, numeroase formaiuni
mai mult sau mai puin sferice de culoare galben (dac am folosit Sudan III), roie (dac am utilizat
tinctur de Alcanna) sau neagr (dup tratarea cu OsO4). Aceste formaiuni reprezint grsimile.
Cristalele de oxalat de calciu
Cristalele care se ntlnesc frecvent n celulele plantelor sunt formate din oxalat de calciu. Ele
se gsesc ca formaiuni ergastice, de obicei n vacuole.
Materiale necesare: Catafile de pe bulbul de ceap (Allium cepa), peioluri de begonie
(Begonia semperflorens), tulpini metamorfozate de linti (Lemna trisulca) frunze de vi de vie (Vitis
vinifera), brici anatomic sau lam de ras.
27

Mod de lucru: 1.Se desprind de pe bulbul de ceap cteva catafile (frunze externe de culoare
galben-brun), se pun ntr-o soluie de 10-15% glicerin n ap i se fierb n flacra unui bec Bunsen sau
spirtier.
u
Se detaeaz
dintr-o catafil un
fragment i se pune pe
cr
lam ntr-o pictur de
ap glicerinat i se
u
acoper cu lamela.
m
r
n catafilele
de ceap se observ
celule, n general,
u
prozenchimatice n care
1
2
3
se pot vedea numeroase
Substane ergastice solide: 1. celule dintr-o catafil de ceap; 2. celule din peiolul de
cristale
prismatice,
Begonia sp.; 3. celul din tulpina de Lemna trisulca; cr.-cristale prismatice de oxalat de
lungi,
incolore, calciu, m-macle; u- ursini de oxalat de calciu; ra- rafide
strlucitoare.
De cele mai
multe ori cristalele sunt izolate; uneori se ntlnesc i cristale concrescute numite macle sau druze.
2. n cazul peiolului de begonie i al frunzei de vi de vie se fac seciuni transversale ct mai
fine, se pun ntr-o pictur de ap pe lam i se acoper cu lamela.
La preparatele de begonie se observ la microscop druze de oxalat de calciu de diferite forme
i mrimi.
3.Tulpinile metamorfozate de linti se secioneaz sau se fragmenteaz. Se pune cte o
seciune sau un fragment pe lam ntr-o pictur de ap, dup care se acoper cu lamela.. n preparatele
fcute, se observ fascicule de cristale aciculare numite rafide.
Epiderma i formaiunile epidermice
Materiale necesare:Frunze modificate din bulbul de ceap (Allium cepa), fragmente din
frunze de varz (Brassica oleracea), proaspete sau conservate n alcool, rou de Congo i
crisoidin, brici anatomic, lame i lamele de sticl.
Mod de lucru: Se vor efectua preparate
proaspete sau permanente, executnd seciuni
tangeniale i transversale prin tipurile de frunze
amintite.
Seciunile se javelizeaz, se spal i se
coloreaz.
Epiderma i stomatele la ceap.

Epiderma i stomate la Allium cepa: n- nucleu; mm- perete celular; v- vacuol;; st- stomata; cicitoplasm

Analiznd apical (de sus) epiderma

superioar a frunzei bulbului de ceap observm c
este alctuit dintr-un singur strat de celule
prozenchimatice foarte strns alipite unele de altele,
fr a lsa spaii intercelulare.
Pereii celulelor sunt subiri, celulozici.
De-a lungul acestora se pot observa cu obiectivul
40x, punctuaiuni simple, prin care celulele
comunic ntre ele. Din loc n loc se observ celule
mai mici, reniforme care reprezint stomatele. n
28

fiecare celul stomatic se afl un nucleu nconjurat de citoplasm. ntre cele dou celule stomatice se afl
ostiola.
Epiderma i stomatele la varz.

Stomate n epiderma de la varz: cs- celule

stomatice; ca- celule anexe inegale; cecelule epidermice; cl- cloroplati

Analiznd epiderma apical, vom observa n

cmpul microscopului numeroase celule mai mult
sau mai puin heterodiametrice, cu pereii uor
ondulai, subiri, celulozici. Celulele epidermei sunt
strns unite ntre ele, fr a lsa spaii intercelulare.
Stomatele sunt dispuse neregulat printre celulele
epidermei. n jurul celulelor stomatice se afl trei
celule anexe, dintre care una este mult mai mic
dect celelalte. Stomata mpreun cu celulele anexe
alctuiesc aparatul stomatic. n afara nucleului n
celulele stomatice se mai afl numeroase
cloroplaste.

esuturi mecanice sau de susinere

Acestea sunt esuturi specializate care au rol de susinere. Se cunosc dou esuturi de
susinere: colenchimul i sclerenchimul.
Materiale necesare: fragmente de tulpin de dovleac (Cucurbita pepo), soc (Sambucus
nigra), in (Linum usitatatissimum), ap de Javel, rou de Congo i crisoidin, lame i lamele, gelatin
glicerinat, brici anatomic.
Modul de lucru: Se fac seciuni transversale prin tulpinile plantelor menionate, n
vederea efecturii de preparate proaspete sau permanente.
Colenchimul .

Colenchimul angular la dovleac. n seciuni

transversale efectuate prin tulpina de dovleac se
observ, de la interior spre exterior, urmtoarele
esuturi:
pp.
epiderma alctuit dintr-un singur strat de
celule relativ mici, acoperit de o cuticul
evident. Din loc n loc, unele celule
epidermice sunt transformate n peri simpli,
rigizi, unicelulari.
Imediat sub epiderm, n anumite puncte, se
observ un esut alctuit din celule
ngroate numai la unghiurile acestora.
v
Acesta este colenchimul angular, care intr
Fragment de esut colenchimatic, din
n structura scoarei.
tulpina de dovleac: pp- protoplasm
Colenchimul
tabular la soc. Pe seciuni transversale
parietal cu nucleu; v- vacuol
se observ la exterior epiderma unistratificat
alctuit din celule mari, cu pereii externi uor bombai, protejat la exterior de cuticul. Urmeaz
cteva straturi de suber, apoi felogenul i n sfrit esutul mecanic numit colenchim tabular.
29

Acesta este alctuit din celule heterodiametrice cu pereii ngroai inegal: pereii tangeniali
externi sunt mai groi dect pereii tangeniali interni, iar cei radiali sunt uor ngroai.
Sclerenchimul

Sclerenchimul la in. n seciuni

transversale efectuate prin tulpin de in se
observ de la exterior spre interior urmtoarele
esuturi:
epiderma unistratificat alctuit din
celule strns unite ntre ele, protejate
de cuticul;
scoara,
alctuit
din
celule
parenchimatice
sub endodermul, care nu ntodeauna
poate fi identificat, se afl pachete de
celule cu lumen mic, uniform
ngroate. Acestea sunt celule
sclerenchimatice,
de
origine
floematic. Ele reprezint fibrele
textile ale inului.

Seciune transversal prin tulpina de in: ctcuticul; ep- epiderm; sc- scoar; ta- teac amilifer; fscfibre sclerenchimatice; fl- floem; xl- xilem

Osmoza
Prin osmoz se nelege difuziunea dintre dou soluii separate de o membran poroas.
Materiale necesare: osmometru Dutrochet, membran degresat de intestin, soluie de
zaharoz 10% sau NaCl 20%, cristalizor, grtar-grilaj de sticl.
Mod de lucru:La partea lit a osmometrului se fixeaz
cu ajutorul unui fir de a, membrana, bine umectat n prealabil.
Dup ce membrana este bine ntins i legat, se toarn n
osmometru, printr-o plnie, o soluie osmotic activ de zaharoz. Se
va evita umplerea complet a osmometrului. Dup aceast operaie,
osmometrul se introduce ntr-un vas cu ap distilat, n aa fel nct
captul cu membrana s se sprijine pe grtarul de sticl. Se noteaz
nivelul lichidului din osmometru cu tu sau cerneal pe tubul de
sticl. Se va observa, dup un timp, c nivelul lichidului din
osmometru crete. Aceast cretere se datoreaz moleculelor de ap
distilat din cristalizor, care traverseaz membrana intestinal,
ptrunznd n soluia mai concentrat. Acest proces fizico-chimic
reprezint curentul endosmotic (endosmoza). Dup un timp, datorit
faptului c membrana este permeabil, substana dizolvat din a- ap distilat b- soluie de
osmometru (zaharoza) difuzeaz i ea spre exterior printr-un curent zaharoz
exosmotic (exosmoza), pn cnd se ajunge la echilibrul de
concentraie. Se observ o scdere a nivelului lichidului n tub.

30

Tehnica evidenierii cromozomilor

Materiale: Bulbi (semine) de ceap, boabe (cariopse) de secar,, alcool etilic absolut, acid acetic
glacial, acid clorhidric 1N, carmin acetic, reactiv Schif, (fucsin bazic decolorat), lame, lamele, etuv
termostatat, microscop fotonic.
Mod de lucru:
Pentru obinerea probelor biologice (radicele) se procedeaz astfel:
bulbii de ceap se suspend pe gura unor borcane pline cu ap
boabele de secar (gru, porumb) se ordoneaz n cutii Petri, pe hrtie de filtru umectate, la distane
de circa 1 cm
vasele se depoziteaz ntr-un loc ntunecos. Dup 3-5 zile bulbii, ca i boabele, germineaz, formnd
radicele. n momentul n care acestea au atins lungimea de 0,5- 1 cm, se recolteaz i se prelucreaz
pentru obinerea de preparate.
Prelucrarea probelor biologice prin metoda Feulgen
se toarn peste radicele un amestec de alcool etilic- acid acetic glacial n raport de 3 la 1 pentru
fixarea probelor. Operaia este finit dup 12- 24 ore. Probele se in la frigider.
Se ndeprteaz fixatorul, iar peste radicele se toarn acid clorhidric 1N, cald la 600 . probele se in n
etuv la 60o timp de 5 minute, cele de ceap, respectiv 10 minute cele de secar. Prin acest tratament
acid se distruge (hidrolizeaz) lamela mijlocie i n acest fel celulele, devenite libere, pot fi etalate
ntr-un singur strat.
Se ndeprteaz acidul clorhidric i se adaug colorant (fucsina bazic decolorat, reactivul Schif).
Dup circa 30 minute colorarea probelor biologice este optimal.
ntocmirea preparatului
Pe o lam se pune o pictur de carmin acetic n care se introduce vrful colorat al radicelei. Se
acoper cu o lamel. Peste lamel se depune o bucat de hrtie de filtru. Se apas puternic cu degetul
peste hrtia de filtru pentru a extrage excesul de colorant dintre lam i lamel i pentru a realiza o prim
etalare a materialului biologic. Se continu etalarea prin bti cu un beior n lamel, pn cnd
materialul biologic este uniform distribuit.
Analiza microscopic.
Preparatele ntocmite se analizeaz la microscop. Sunt selectate metafazele n care cromozomii
sunt bine etalai i individualizai. Se numr i se deseneaz.

INTERFAZ

PROFAZ

METAFAZ

ANAFAZ

TELOFAZ

CELULE- FIICE

31

Studiul meiozei la plante

Materiale necesare: Spice de graminee cerealiere (secar, orz, gru, porumb) aflate n stadiul de
burduf, conservate n soluia Carnoy (alcool etilic absolut i acid acetic glacial 3 la 1), carmin acetic,
lame, lamele, microscop.
ntocmirea preparatului.
Se depun pe o lam pentru microscop 2 picturi de carmin acetic.
Se desprinde din spic un spicule care se depune pe colul lamei.
Se scot din fiecare floare fertil a spiculeului cele trei stamine (antere), care se introduc n picturile
de carmin i se secioneaz de cte 2-3 ori transversal, pentru a facilita golirea sacilor polinici. Se
preseaz cu acul spatulat asupra fragmentelor de anter, pentru a determina ieirea n afar a esutului
microsporogen din sacii polinici.
Se nclzete lama la flacra unei lmpi cu spirt, pn la emisia de vapori; operaia se repet de 2-3
ori; se evit evaporarea complet a colorantului
Materialul de pe lam, imersionat n carmin se acoper cu o lamel; peste lamel se aeaz o hrtie de
filtru, se apas uor cu degetul pentru extragerea restului de carmin.
Se analizeaz la microscop cu obiectivele 10x i 20x. Se vor observa diferite faze ale meiozelor I i II.

Reprezentarea schematic a ciclului meiotic (meioza)

32

Structura organelor vegetative-observaii

epiderma cu peri sugtori
scoara
exoderma
endoderma
periciclu

fascicul lemnos
mduva
fascicul liberian
Structura primar a
rdcinii n seciune
transversal

Presiunea osmotic exprimat n atmosfere

epiderm

scoar
fascicul liberolemnos

stomat
lacun medular

33

Structura
primar a
tulpinii de
Ranunculus
repens
(piciorul
cocoului) n
seciune

Structura frunzei

sclerenchim

epiderm
superioar
esut palisadic

seciune
tangenial
a celulelor
n palisad

colenchim
lemn

lacun

liber

stomat
epiderma
inferioar
seciune
tangenial a
esutului lacunos

lemn

parenchim

lacun

liber
teac parenchimatic

colenchim
stomat

seciune
transversal

seciune
longitudinal

34

parenchim lacunos
parenchim palisadic

Cript cu peri
protectori

stomat

35

Structura organelor vegetative- lucrri practice de microscopie

Structura primar a rdcinii de Ranunculus repens
Materiale necesare: Rdcini de piciorul cocoului trtor, mduv de soc, lam de sticl, lam
de ras , microscop.
ntocmirea preparatului: Se include rdcina n mduva de soc i se efectueaz seciuni
transversale care se aeaz pe lama de sticl ntr-o pictur de ap. Se examineaz cu obiectivul 6x sau
10x.

rz.
ex.
sc.
pc.

Structura primar a rdcinii de Ranunculus repens: 1seciune transversal; 2- seciune longitudinal; cc- cilindru
central, end- endoderma, ex- exoderma, fl (lib)- floem, mparenchim medular meristematic; pa- pr absorbant, pcparenchim cortical, per (p)- periciclu; rm- raze medulare
primare; rz- rizoderm; sc- scoar; xi- xilem (dup N. Toma)

36

Structura primar a tulpinii de Ranunculus repens

Materiale necesare: Tulpin de piciorul cocoului trtor, mduv de soc, lam de sticl, lam de
ras , microscop.
ntocmirea preparatului: Se include tulpina n mduva de soc, se efectueaz seciuni
transversale care se javelizeaz, apoi se coloreaz cu albastru de metilen, se spal cu ap, se coloreaz din
nou, cu soluie Lugol i se aeaz pe lama de sticl ntr-o pictur de ap. Se examineaz cu obiectivul 6x
sau 10x.

Structura primar a tulpinii de Ranunculus

repens:1- fragment structural din tulpin; 2fascicul libero-lemnos colateral deschis; cacelule anexe, cb- cambiu intrafascicular; ctcuticul; ec- elemente ciuruite, ep- epiderm;
fl- floem; fp- fie de pasaj; mf-metafloem;
mx- metaxilem, pf- protofloem; plparenchim lemnos; pr- protoxilem; scscoar; scl- sclerenchim; tr-trahee; xlxylem (dup N. Toma)

37

Structura intern a frunzei de ridiche-Raphanus sp.

Materiale necesare: Frunz matur de ridiche, ap de Javel, rou de Congo, crisoidin, lame,
lamele, lam de ras, microscop.
ntocmirea preparatului. Se include frunza n mduva de soc, astfel ca s fie prins i nervura
principal sau o nervur secundar i se efectueaz o seciune transversal. Se monteaz ntr-o pictur de
ap pe lama de sticl, se acoper cu lamela. Se examineaz la microscop cu obiectivul 6x sau 10x.

Aspectul stomatei la
dicotiledonate:
1- celule stomatice; 2- celule
epidermice, 3- ostiol; 4nucleu;
5-citoplasm;
6cloroplaste

Structura frunzei de ridiche:

1- cuticula; 2- epiderma superioar;
3- epiderma inferioar; 4- esut
palisadic; 5- esut lacunar; 6fascicul libero-lemnos; 7- lemn; 8liber; 9- sclerenchim; 10- stomate,
11- camer substomatic

38

Organe de reproducere la plante

pistil
stamin

ovar
petale

Structura florii

sepale
ovul
receptacul
peiol

Structura
ovulului
la
Polygonum
divaricatum: an-antipode; ch-chalaz; cl-calot;
fll-fascicul libero-lemnos; fn-funicul; h-hil; ineintegument extern; ini- integument intern; mmicropil; ns-nucleu secundar al sacului embrionar;
nu-nucel; o-oosfer; se-sac embrionar; sisinergide (dup I. Grinescu)

Granule de polen: Mentha aquatica(1-3); 3- seciune optic prin acelai granul

de polen, 4- Jussteua erecta; 5- Rhododendron hirsutum; 6- Calliandra laxa;
7- polinii de Orchis maculata; 8- polinii de Asclepias floribunda: cg- celul
generativ; ex- exin; int- intin; nv- nucleu vegetativ; (dup I. Grinescu)

39

Observaii microscopice asupra unor protozoare

1. Clasa Flagelate (Flagellata) cuprinde protozoare prevzute cu unul sau mai muli flageli. Noi
studiem Euglena viridis i Trypanosoma equiperdum, prima fiind specie liber, cea de-a doua fiind
parazit.

flagel

infundibul
stigm
blefaroplast

vezicul contractil

pelicul

cromatofor

paraglicogen

nucleu
nucleol

Euglena viridis

40

Euglena viridisspecie foarte comun, se

colecteaz de pe fundul
anurilor i al blilor,
din lacuri, smrcuri i
fntni. La microscop se
studiaz ntr-o pictur
de ap ntre lam i
lamel. Pentru studierea
animalului
efectuai
preparatul microscopic i
studiai desenul alturat.

flagel
Trypanosoma equiperdum.
Se poate obine n stare vie
de la institutele medicoveterinare, se inoculeaz n
mamifere mici (cobai). Din
sngele
acestora
se
efectueaz frotiuri pe lam.
La
microscop,
printre
elementele figurate ale
sngelui se pot observa
paraziii cu corp foarte mic,
ca nite virgule ngroate,
spiralate, ascuite la ambele
capete.
Pentru
studiul
detaliilor
se
studiaz
preparatul cu obiectivul cu
imersie.
nucleu

membrana ondulat

blefaroplast

41

Clasa Rizopode (Rhizopoda) cuprinde protozoare care se deplaseaz i se hrnesc cu ajutorul unor
pseudopode. Vom studia specia Amoeba proteus.
Amoeba proteus este specie comun n apele dulci putnd fi colectat de pe partea inferioar a
frunzelor plantelor acvatice. Triete la suprafaa apelor stagnante i infuziilor, hrnindu-se cu organisme
mici, vegetale i animale. Msoar pn la 500 microni. n cmpul microscopului apare ca o mas
vscoas, refringent, care n micare i schimb mereu forma prin emiterea de pseudopode scurte,
digitiforme din care unul este anterior, mai mare i aplatizat.

vacuol digestiv

ectoplasm
endoplasm

vacuol pulsatil

nucleu

pseudopod

Amoeba proteus

42

Clasa Ciliofore (Ciliophora) cuprinde protozoare prevzute cu cili vibratili. Vom studia
speciile Paramoecium caudatum, form liber i Vorticella microstoma, form fixat.
Paramoecium caudatum se gsete n numr mare n infuzii, ape stttoare, pmnt umed.
Are corpul oval alungit, de 0,25 mm lungime, mai gros la o extremitate. Pe latura stng are o adncitur.

ectoplasm
endoplasm
membran
cili
vacuol pulsatil

peristom

macronucleu
micronucleu
membranel
citostom
citofaringe
vacuol digestiv

Paramecium caudatum

43

Vorticella microstoma se obine din aceleai medii ca i parameciul prin raderea

superficial a diferitelor suporturi submerse din ap: frunze, crengue, pietre pe care aceast specie
triete fixat. La microscop apare ca un clopot lung de 0,2 mm, sprijinit pe un peduncul.

zon adoral
peristom
vestibul
macronucleu
micronucleu
vacuol pulsatil
citostom
vacuol digestiv

mioneme

peduncul
Vorticella lutea

Vorticella microstoma

44

Spongieri
Buretele de ap dulce (Spongilla lacustris).
Forma corpului la aceast specie este foarte variat. n
general, mbrac suportul pe care se fixeaz, sub
forma unei pojghie subiri i moi. De obicei se
ntlnete nfurat ca un manon n jurul tulpinilor
de trestie sau al altor plante acvatice. Uneori st
ntins pe suprafaa pietrelor, scndurilor i altor
obiecte submerse. ntodeauna ns prezint ramificaii
caracteristice. Este o specie colonial, colorat cenuiu
sau galben, cu nuane de brun i verde, atingnd
lungimea de aproximativ 20 cm. Scheletul su este
format din spiculi silicioi, ale cror extremiti dau
suprafeei coloniei un aspect rugos. Din loc n loc se
observ osculi, iar cu ajutorul lupei i pori inhalani.
Triete i la noi n ar, n bli, lacuri i uneori n
apele care curg lin.
Spongilla se poate ine vie n acvariu. Se aduce
animalul cu suport cu tot ntr-un borcan cu ap i se
pune ntr-un acvariu dinainte pregtit. Trecerea n
acvariu se face sub ap. Nu se ine mpreun cu alte
animale, iar apa trebuie schimbat des. Pentru a o
pstra fixat, se face un preparat lichid n alcool 80%
sau formol 4%. Lichidul conservant se schimb de
mai multe ori, deoarece esuturile spongierului sunt
mbibate cu mult ap i se dilueaz.

oscul

pori inhalani

suport
spicul
monaxon

Spiculii spongierilor pot avea un

singur ax, atunci se numesc monaxoni, trei
axe principale, triaxoni, sau patru axe
principale, tetraxoni.
Spiculii se studiaz la microscop n
preparate fixate. Pentru a face un preparat
microscopic, se ia o bucic dintr-un
spongier calcaros i o alt bucic dintr-un
spongier silicios, se pun ntr-o eprubet
peste care se toarn o soluie slab de
hidrat de potasiu. Se nclzete coninutul
pn la fierbere, distrugnd n acest fel
toat partea crnoas. Coninutul se spal
de cteva ori cu ap, iar din spiculii rmai
se face un preparat permanent.

45

spicul triaxon
spicul tetraxon

Cnidari. Structura.
Cnidarii sunt animale cu simetrie radiar, segmentate i care prezint dou straturi celulareectodermul (stratul extern) i endodermul (stratul intern). ntre cele dou straturi se afl o lamel mai mult
sau mai puin structurat- mezogleea. Endodermul delimiteaz cavitatea intern a corpului (cavitatea
gastric) care are o singur deschidere- orificiul buco-anal. Capsulele urzictoare se gsesc n interiorul
celulelor urzictoare; ele folosesc pentru capturarea hranei i pentru protecie mpotriva altor animale.
Cnidarii prezint esuturi simplificate alctuite din diferite tipuri de celule (celule nervoase,gamei, celule
digestive, celule mioepiteliale).
Clasa Hidrozoare (Hydrozoa)-hidre.Triesc individual sau n colonii; majoritatea se fixeaz de
substrat; ventuze slab dezvoltate; tentacule cu numeroase celule urzictoare; cavitatea digestiv fr perei
despritori, alternan de generaii; au mare capacitate de regenerare.

endoderm
ectoderm mezoglee
nematocyst (celul
urzictoare)
celul glandular
nematocist

celul nervoas
celul senzitiv

Structura unui polip i a unei meduze (seciune longitudinal)

talp
mezoglee
cavitate digestiv
ectoderm
endoderm

orificiu
buco-anal

tentacul

46

bra bucal

tentacul
canal circular

orificiul pungii
subgenitale
gonad
orificiul
bucal

canal radiar
simplu
canal radiar
ramificat
ropalie
Clasa Scifozoare (Scyphozoa)meduze. Form de clopot sau
umbrel. Tentacule parial cu
celule urzictoare; mezoglee
gelatinoas mult mai groas;
alternan de generaii (meduze
mari, libere, polipi mici)
cenosarc

sifonozoid

polip
retractat
polip n
extensiune

schelet

canale
endodermice
47

Clasa Antozoare (Anthozoa)- corali

Adesea foarte colorai, de unde le
vine i numele de animale-flori;
triesc individual sau n colonii;
cavitate
digestiv
cu
perei
despritori subiri (septe); nu
prezint alternan de generaii (nu
prezint forma de meduz, ci numai
cea de polip). La multe specii apare
un schelet calcaros n jurul polipului;
formeaz recife i atoli. Sunt exclusiv
marine (madreporarii, coralul rou)

musculatura longitudinal a corpului

epiteliu ciliat

Viermi

lumenul tecii faringiene

musc. circular a corpului

lumenul faringelui

parenchim

musc. circ. a faringelui

testicule

musculatura dorso-ventral

cordoane nervoase

cecumii tubului digestiv

Dendrocoelum lacteum. Seciune transversal

ochi

cili vibratili
ramura anterioar
a intestinului

rabdite
nucleu
m. bazal
musculatura
circular

musculatura
longitudinal
parenchim

faringe
orificiu bucal

Dendrocoelum lacteumtegumentul

Dendrocoelum
lacteum.
Morfologie extern.
Tub digestiv
ramurile posterioare ale
intestinului

Dendrocoelum lacteum are corpul oval alungit, turtit dorso-ventral, lung de aproximativ 3 cm. Este de
culoare alb, de unde i numele ce i se d de planarie alb. La extremitatea anterioar este trunchiat transversal i
are patru lobi. Pe partea dorsal a regiunii anterioare se observ dou pete mici, rotunde, de culoare neagr: ochii.
n treimea posteriooar a feei ventrale, pe linia median, se gsete situat orificiul bucal, n vrful unui tub
musculos exertil, care este faringele. Prin transparena corpului se observ c de la faringe pornesc trei ramuri
digestive longitudinale: o ramur se ndreapt spre partea anterioar (ramura anterioar) i dou ramuri spre partea
posterioar a corpului ( posterioare).

48

orificiu bucal
ventuz bucal

faringe
orificiu genital
ventuza ventral

ramurile
longitudinale ale
tubului digestiv

diverticule
intestinale

Distomum hepaticum. Morfologia

extern i tubul digestiv

Clasa Trematode .Fasciola hepatica (Distomum hepaticum), glbeaza. Are corpul oval i
puternic turtit dorso-ventral, mai lat la captul anterior i mai ngust la cel posterior,
semnnd n ansamblu cu un smbure de dovleac. Lungimea corpului este de 20-50 mm. n
vrful extremitii anterioare se gsete ventuza bucal, care are n mijlocul ei orificiul bucal.
n apropierea ventuzei bucale se gsete ventuza ventral.. Ventuza ventral nu are nici un
orificiu i mpreun cu ventuza bucal reprezint organele de fixare ale acestui parazit de
pereii canalelor biliare ale gazdei. Aproximativ la jumtatea distanei dintre cele dou
ventuze este situat orificiul genital. La extremitatea posterioar a corpului se gsete un por
mic, orificiul excretor.
Prin transparena corpului se observ tubul digestiv, constituit dintr-un faringe i dou
ramuri digestive, care se termin nfundat, fr orificiu anal. Ramurile digestive au o mulime
de diverticule laterale

49

ramificaiile
uterului
proglote
tinere

proglote
mature

rostru

crlige
ventuze

papil
genital

scolex
gt

canale
excretoare

Clasa Cestoidee. Taenia solium, panglica. Paraziteaz n intestinul subire la om. Are corpul lung de 2-4,
rareori 8 m, de culoare alb, puternic turtit dorso-ventral, de forma unei panglici. Partea anterioar a corpului este
subire ca un fir de a i se termin cu o umfltur globuloas mic, ct o gmlie de ac, cu diametrul de 1 mm,
numit scolex. La microscop, n partea anterioar a scolexului, se observ o proeminen scurt, numit rostru, iar
la baza acestuia dou coroane de crlige. Pe cele patru laturi ale scolexului se disting patru ventuze rotunde. Cu
ajutorul rostrului, croetelor i al ventuzelor, tenia se fixeaz temporar de peretele intestinului. Dup scolex
urmeaz o poriune filiform, ngust, nedivizat n segmente, numit gt, iar dup aceasta, corpul propriu-zis,
numit strobil. Strobilul este constituit din 800-900 de segmente, care se numesc proglote. Proglotele din apropierea
gtului sunt cele mai tinere, mici i mai late dect lungi. nspre partea mijlocie a strobilului, ele devin tot att de
lungi ct sunt de late, iar poriunea terminal a acestuia, unde proglotele sunt mari i mature, lungimea lor ntrece
pn la de dou ori limea. Pe una din laturi, fiecare proglot are cte o ridictur, numit papil genital, n
mijlocul creia se gsete orificiul genital. La un studiu mai amnunit, fcut pe proglote mature i mai tinere
nefecundate, se pot studia organele interne.

50

Clasa Rotifere. Epiphanes senta triete

n ape dulci, alturi de infuzori. Are
corpul lung de 0,5 mm, mprit n trei
pri distincte: una anterioar, numit
regiune cefalic sau cap, una mijlocie,
numit trunchi i una posterioar numit
picior sau coad. Pe partea ventral a
extremitii cefalice se gsete gura.
Aceast extremitate are forma unui disc,
nconjurat de o coroan de cili, numit
cingulum. Pe faa ventral, coroana de
cili trece pe marginea posterioar a gurii
i se nvrtete n jurul discului ca o
roat, fapt pentru care se numete aparat
rotator. Micarea cililor ajut la
antrenarea alimentelor spre orificiul
bucal i la deplasarea animalului dintr-un
loc n altul. Regiunea trunchiului are
aspect de butoia i este acoperit de o
cuticul slab dezvoltat, cu uoare
inelaii, care permit animalului s se
lungeasc sau s se scurteze. Piciorul sau
coada este reprezentat prin extremitatea
posterioar, ngustat a corpului. El este
scurt, conic, cu cuticula inelat i se
termin cu dou prelungiri, numite
degete. La extremitatea lor se deschide
cte o gland, numit gland cimentar.
Cu secreia acestor glande se poate fixa
temporar pe suport. Prin transparena
tegumentului se observ i organizaia
intern.

Clasa Nematode Ascaris suis (limbricul). Seciune transversal prin corp

linie median
dorsal
cordon nervos dorsal

fibre musculare

uterus cu ou
linie lateral
canal excretor
ovar

oviduct

epiteliu intestinal
lumenul intestinului
intestin
cordon nervos
ventral

cuticul
linie median ventral

51

faringe
intestin
ovar
testicul
ovar

vagin

oviduct
canal
deferent

uterus
vezicul seminal

cloac

Ascaris suum, limbricul porcului. Are corp lung, cilindric, de culoare alb lptoas, ascuit la
ambele capete, nesegmentat i acoperit cu o cuticul chitinoas. Pe laturile corpului se observ de la
un capt la cellalt al viermelui dou dungi longitudinale de culoare roz, numite linii laterale. Sexele
sunt separate i prezint un dimorfism sexual accentuat. Masculul are corpul lung de 15-17 cm.
Extremitatea anterioar a corpului este dreapt, iar cea posterioar ndoit ca un crlig. Examinnd cu
o lup extremitatea anterioar, se observ orificiul bucal, iar n jurul acestuia trei buze. La extremitatea
posterioar, subterminal, se distinge orificiul cloacal. Din acesta proemin la exterior doi epi, organe
de copulaie care se numesc spiculi. Femela este mai mare dect masculul, avnd o lungime 20-25 cm.
Ambele extremiti ale corpului sunt drepte. Orificiul bucal este aezat ca la mascul, la extremitatea
anterioar a corpului i nconjurat de cele trei buze. Orificiul anal se gsete la extremitatea
posterioar, subterminal. n treimea anterioar a corpului, pe partea ventral, se poate observa cu lupa
porul genital. Ceva mai sus nspre partea anterioar, se poate observa un alt por, porul excretor.

52

Capul, vzut dorsal cu trompa evaginat

cngi

anten
cap

palp
tromp
faringian

ciri tentaculari

parapode

tentacule
segmente

palpi
prostomiu
ciri tentaculari

parapode
ochi

trunchi
peristomiu

parapodii
primul inel somatic
an
intersegmentar

Nereis diversicolor. Morfologia

extern

Anelide. Clasa Polichete. Nereis diversicolor Este un vierme de mrimea unei rme obinuite, cu corpul
viu i diferit colorat, fapt ce a sugerat denumirea sa de diversicolor. Triete n Marea Mediteran, Marea Neagr i
n lacurile litorale ale Mrii Negre, n nisip, pe sub pietre, n crpturi de roci sau pe fundul acoperit cu alge. Are
corpul cilindric, uor turtit dorso-ventral, constituit din trei regiuni distincte: regiunea anterioar, cefalic sau
capul, regiunea mijlocie, trunchiul sau soma i regiunea posterioar sau pigidiul. Capul este constituit din dou
pri. Prima poriune este ngust i alungit, de forma unui triunghi rotunjit, numit lob cefalic sau prostomiu. La
extremitatea anterioar a acestuia spre mijloc, se disting dou prelungiri subiri i scurte, antenele. La baza
prostomiului, de o parte i de alta a sa, se observ i cu ochiul liber cte dou puncte proeminente, care sunt ochii.
Din aceeai regiune pornesc dou prelungiri mai groase i mai lungi dect antenele, palpii, care sunt organe
senzitive. Dup prostomiu urmeaz a doua poriune a capului, mult mai lat, care se numete peristomiu. Pe partea
ventral a capului, n mijlocul peristomiului, este situat orificiul bucal. Trunchiul sau soma este constituit dintr-un
numr mare de segmente homonome. Segmentele sunt delimitate unul de cellalt prin nite anuri
intersegmentare, care dau animalului un aspect inelat. Fiecare segment poart pe laturile sale cte o pereche de
expansiuni laterale, numite parapode; cu ajutorul lor animalul se trte sau noat. Pigidiul este ultimul segment al
corpului. El este mai ngust i mai alungit dect segmentele care-l preced. Nu are parapode, dar poart dou
prelungiri terminale lungi, filamentoase, care se numesc ciri anali. La partea posterioar a pigidiului se gsete
orificiul anal.

53

prostomiu
ganglioni cerebroizi
faringe
nefridii
inimi contractile
esofag
receptacule
seminale

vezicule seminale

glande
calcifere
ovar
oviduct

gu (stomac
glandular)

canal
deferent

stomac musculos
vas de snge
dorsal

nefridie

diafragme

intestin

vas de snge
ventral

tiflosolis
lan nervos

tiflosolis

Clasa Oligochete. Lumbricus

terrestris- rma
Organizaia intern. Pentru studiul
organizaiei interne se face
disecia animalului. ntr-o tav de
disecie plin cu ap pn la
jumtate,
se
aeaz
rma
anesteziat, n poziie orizontal,
cu partea ventral n jos. Ambele
capete se fixeaz de fundul tvii
cu cte un ac cu gmlie. La
fixarea extremitii anterioare se
are grij ca s se nfig acul puin
lateral, pentru a nu deranja
ganglionii cerebroizi. Cu o
foarfec de disecie se taie
tegumentul ct mai superficial pe
linia median, de la clitel pn la

vas de snge dorsal

epiderm

epiteliu intestinal

musculatur circular
musculatur
longitudinal
peri
nefridie
cavitate
celomic

celule clorogene

orificiu
excretor
lan nervos

vas de snge ventral

Lumbricus terrestris-seciune transversal printr-un segment

extremitatea anterioar a corpului. n continuare se prinde cu o pens marginea tegumentului tiat, iar cu ajutorul unui
bisturiu foarte ascuit se desprinde cu grij, fr s se deterioreze organele interne. Dup ce s-a terminat aceast
operaie, se rsfrnge tegumentul pe fundul tvii, de o parte i de alta a animalului, i se fixeaz pe tav cu ace de
gmlie mplntata oblic. Primul lucru care se observ dup deschiderea rmei este segmentarea ei intern; la limita
dintre inele se disting membrane subiri transversale, numite disepimente, care mpart interiorul rmei n tot attea
segmente cte se observ i la exterior.

54

Molute

cochilie
pneumostom
brul mantalei
tentacule
mari

ochi
tentacul
mic
cap
picior

orificiu bucal
orificiu genital
hermafrodit

Clasa Gasteropode. Studiul melcului cu cochilie. Corpul este format din cap, picior i mas
visceral. Capul nu este delimitat net de picior. El poart o pereche de tentacule mici, aezate n partea
anterioar i o pereche de tentacule mari situate n urma acestora i dorsal. n vrful fiecrui tentacul
mare se observ cte un ochi, ca o pat mic neagr. La baza tentaculului mare de pe latura dreapt i
puin n urma lui se gsete orificiul genital hermafrodit. Sub tentaculele mici, la extremitatea anterioar
a capului, se gsete orificiul bucal, mrginit de 3 buze, dou laterale i una ventral. Capul se continu
cu piciorul n form de talp. Pe partea dorsal a piciorului se ridic masa visceral, acoperit de manta,
peste care este dispus cochilia. Mantaua formeaz n jurul deschiderii cochiliei o ngroare crnoas,
numit brul mantalei. Pe latura dreapt a brului mantalei se afl un orificiu numit pneumostom.
apex

apex
linie de sutur
columel

striuri de
cretere

ultima
spir
ombelic
marginea columelar a
peristomului

apertur
peristom
holostom

cavitatea
cochiliei
ombelic

Studiul cochiliei. Pentru a orienta o cochilie se procedeaz astfel: se aeaz cochilia ntre
degetul mare i cel arttor, cu apexul n sus, i se nvrtete n jurul axei sale pn cnd peristomul
vine n faa examinatorului. Cnd peristomul se gsete asimetric n dreapta cochiliei, este o
cochilie dextr. Dac peristomul se gsete n stnga, cochilia respectiv se numete senestr
(Planorbis, Clausillia). Pe cochilia secionat longitudinal se observ n interior o ax median
calcaroas numit columel. La captul inferior al columelei, peretele extern al columelei are o
nfundtur, numit umbilic.

55

orificiu genital

brul mantalei
pneumostom

gland
albuminipar
hepatopancreas
inim

organul lui
Bojanus

Corpul fr cochilie cu indicarea liniilor de incizie

Organizaia
intern.
Cu
ajutorul unui foarfece se execut mai
multe tieturi dup cum urmeaz: se
introduce foarfeca n pneumostom, se
taie brul mantalei, iar apoi mantaua n
lungul brului, continundu-se de la
dreapta la spre stnga, conform liniei
indicatoare A-B. Marginea mantalei
eliberat de masa visceral se
rsfrnge spre dreapta i se fixeaz cu
ace cu gmlie n tava de disecie, pe
un dop de plut nalt ct corpul
animalului. Se constat c sub manta
exist o cavitate larg, numit camer
paleal. A doua incizie, C- D, se face
tind tegumentul pe linia mediandorsal a piciorului, din mijlocul
brului mantalei pn la extremitatea
anterioar a capului. Dup aceast
operaie, se continu incizia din
punctul C spre partea posterioar a
corpului, apoi n lungul spirelor, pn
se
izoleaz
hepato-pancreasul,
intestinul,
canalul
glandei
hermafrodite i glanda genital
hermafrodit care este mplntat n
pancreas. Dup efectuarea celei de-a
doua tieturi, tegumentul se rsfrnge
n tava de disecie cu ap pn la
jumtate i se prinde de fundul ei cu
ace de gmlie.

Studiul melcului fr cochilie. Acest

studiu necesit n primul rnd
ndeprtarea cochiliei care se poate
face n dou moduri:
a. se ine piciorul melcului n mna
stng, iar cu mna dreapt se
nvrtete cochilia de la dreapta la
stnga, deurubnd-o ncet i cu
mare atenie, pentru a nu se
distruge masa visceral.
b. n cazul cnd cochilia nu se
desprinde de masa visceral, se
ndeprteaz prin tierea ei cu un
foarfece. Tierea se face de-a
lungul turelor de spir, pe linia de
sutur, ncepnd de la peristom i
naintnd spre apex. Dup
ndeprtarea complet a cochiliei,
apare masa visceral ,nvrtit de
asemenea n spiral i acoperit de
o membran subire care este
mantaua.
Prin
transparena
mantalei se pot observa unele
organe, ca: hepatopancreasul, care
ocup aproape n ntregime masa
visceral, plmnul, inima, glanda
albuminipar
i
glanda
hermafrodit.

faringe
esofag
gland salivar
brul mantalei

mas
visceral

pneumostom
orificiu anal
orificiu excretor
ureter
rectum
plmn
organul lui Bojanus
auricul

hepato
pancreas

pericard
ventricul

Helix pomatia-organele din cavitatea paleal

56

faringe
ganglioni cerebroizi
canalele
glandelor salivare
esofag
glande
salivare

ganglioni pedioi i viscerali

nervi
muchi retractori ai
piciorului
orificiu anal
orificiu excretor
plmn

Helix pomatia- Organizaia

intern: aparatul digestiv,
nervos i muscular.

canal excretor
stomac

inim
organul lui Bojanus

hepatopancreas
intestin

flagelul penisului

orificiu genital
masculin i feminin
glande
multifide

Penis

Helix pomatia- aparatul

reproductor.

muchiul retractor al
penisului

sacul sgeii
vagin
oviduct

canal deferent
esofag secionat
canalul receptaculului
seminal

receptacul
seminal
gland
albuminipar
canalul glandei
hermafrodite

gland hermafrodit
hepatopancreas
intestin secionat

57

impresia muchiului
retractor anterior

impresia muchiului
adductor anterior

impresia muchiului
retractor posterior

impresia muchiului
protractor

impresia muchiului
adductor posterior
impresia paleal

Anodonta cygnea-valva dreapt vzut pe partea sa intern

Anodonta cygnea-vzut la exterior pe partea stng
dorsal

umbone

apex

ligament
sifon cloacal
sifon branhial
anterior

posterior

cochilie
striuri de cretere

picior
ventral

Clasa Lamelibranhiate. Anodonta cygnea- scoica de balt. Studiul cochiliei. Cochilia acoper n
ntregime corpul scoicii. Ea are form oval, convex spre mijloc, mai lat i rotunjit la un capt, ceva mai
ngust la captul opus. Mrimea ei variaz ntre 8 i 19 cm. Este constituit din dou buci simetrice, una
dreapt i alta stng, care se numesc valve. Ele sunt prinse una de alta prin intermediul unei fii cornoase de
culoare brun-negricioas care poart numele de ligament. Deoarece ligamentul se gsete la exterior se numete
ligament extern. Regiunea de pe valv n dreptul creia ele se articuleaz se numete n. Valvele au cte o
poriune mai proeminent care se numete umbone. Vrful umbonelui se numete apex. De jur mprejurul
acestuia, spre marginea cochiliei i paralel cu ea, se observ, sub forma unor dungi mai ntunecate, striurile de
cretere. Captul mai lit i rotunjit al cochiliei reprezint partea anterioar, cel opus, partea posterioar. Pentru
a studia suprafaa intern a cochiliei trebuie detaat de corpul animalului. Se introduce vrful unui bisturiu ntre
cele dou valve prin regiunea ventral, n aa fel ca lama s ptrund ntre cochilie i manta. Se desprinde
mantaua pe toat ntinderea sa de suprafaa intern a valvei, dup care muchii adductori se desprind de cochilie.
ndat ce aceast operaiune a fost efectuat, se ridic valva ca un capac, rmnnd fixat de cealalt valv
numai prin ligament. Dup eliberarea unei valve, se desprinde prin acelai procedeu cealalt valv.

58

orificiul glandei genitale

ventricul
stomac

canal excretor
hepatopancreas

Anodonta

auricul stng

pericard

organul lui
Bojanus

ganglion
cerebroid

muchi adductor
posterior
rectum
sifon
cloacal
anus

gur
sifon branhial
ganglion
pedios
conectiv
cerebro
visceral

conectiv cerebro
pedios
gland genital

intestin

Scoica
de
balt.
Organizaia
intern
vzut pe partea stng.
Animalul eliberat de
cochilie, se aeaz cu
partea dorsal pe fundul
unei tvi de disecie. Se
rsfrng lateral lobii
mantalei i se fixeaz cu
ace de fundul tvii. Cu
un bisturiu foarte bine
ascuit, se taie piciorul n
lungul su, n dou
jumti simetrice. Se
continu aceast operaie
i prin corpul animalului,
obinnd dou jumti
egale. Se studiaz apoi
suprafaa de seciune a
uneia din cele dou
jumti ale corpului.

branhie

muchi retractor anterior

Anodonta cygnea.
Organele din
cavitatea paleal
vzute pe partea
stng.

ganglion
visceral

cygnea-

muchi protractor

muchi adductor
anterior

muchi retractor posterior

muchi adductor
posterior
sifon cloacal

picior

sifon branhial
palpi labiali
manta
lamele
branhiale

59

lam branhial extern

lam branhial intern

Artropode
chel
anten

rostru
1,2,3,4,5=
pereiopode

antenul
ochi

segmente
abdominale

uropode

telson
Astacus fluviatilis. Morfologia extern vzut dorsal

60

antene
antenule
orificiu excretor
orificiu bucal

apendice bucale

pereiopode

orificiu genital

pleopode
ou

orificiu anal
uropode

Astacus fluviatilis. Un individ femel. Morfologia extern vzut ventral.

61

orificiu excretor
orificiu bucal
apendice bucale

pereiopode

orificiu genital
mascul

gonopode

pleopode

orificiu anal
stomat
Astacus fluviatilis. Un individ mascul. Morfologia extern vzut ventral

62

ganglioni cerebroizi
muchi cardiaci anteriori
ai stomacului

gland verde

stomac
muchi cardiaci
posteriori ai stomacului

muchi mandibulari
arter oftalmic

arter antenar

hepatopancreas
extremitatea dorsal a
testiculelor

inim

osteole

canal deferent

intestin
arter abdominal

muchi abdominali

Astacus fluviatilis- racul. Disecie. Se aeaz racul n tava de disecie, cu partea

dorsal n sus i se fixeaz de fundul tvii cu ace cu gmlie, care se nfig n cletele
primei perechi de pereiopode i n telson. Cu un foarfece bine ascuit se fac dou incizii
n lungul corpului, pe prile sale laterale. Operaia se ncepe de la nivelul articulaiei
segmentului ase cu telsonul, se taier carapacea dorsal a segmentului ase, iar apoi
succesiv, urmnd marginea corpului, cea a segmentelor urmtoare i n cele din urm
carapacea cefalotoracelui, pn napoia ochiului. Cele dou incizii longitudinale se
unesc printr-o incizie transversal. Cu ajutorul unei pense se ridic i se ndeprteaz
poriunile dorsale ale carapacei tiate, detandu-le cu un bisturiu de muchii sau
membranele care ader la ele.

63

Astacus fluviatilis. Apendicele .

testicule

ovar

canal deferent

oviduct

orificii genitale

orificii genitale

Astacus fluviatilis. Aparatul

genital mascul

Astacus fluviatilis. Aparatul

genital femel
64

Arahnide pianjeni. Organizare intern

Arahnidele au corpul format din cefalotorace i abdomen.

Majoritatea au patru perechi de picioare prinse de cefalotorace. Nu au
antene, majoritatea speciilor au respiraie traheal

Insecte . Organizare intern

Insectele au corpul format din cap, torace i abdomen. Cele trei

perechi de picioare articulate sunt prinse de torace. Au dou perechi de
aripi, reduse la unele specii. Aparatul bucal este difereniat n funcie de
grup.

65

Echinoderme. Structura schematic a unui arici de

mare i a unei stele de mare

Echinoderme. Structura . Corpul echinodermelor este cel mai adesea

cilindric, sferic sau aplatizat n form de stea. Ele prezint un schelet de origine
dermic alctuit din numeroase plci calcaroase. Plcile calcaroase sunt libere sau
sudate; majoritatea poart spini. Caracteristic echinodermelor este sistemul lor de
tuburi, cu rol n special n locomoie (sistemul ambulacrar). Acesta este alctuit
dintr-un inel tubular de la care pornesc cinci canale radiare. Sistemul ambulacrar
este legat printr-unul din aceste cinci canale radiare de placa madreporic (plac
ciuruit de numeroi pori). De la sistemul radiar sau ambulacrar pornesc numeroase
tubuoare elastice prevzute cu ventuze (picioruele ambulacrare).

66

BIOLOGIE CLASA A X- A

Experiene de evideniere, msurare i nregistrare a excitabilitii neuromusculare

Preparate neuromusculare.
Pentru demonstrarea proprietilor muchilor se folosete preparatul neuromuscular. Preparatele
neuromusculare sunt ansambluri de uniti funcionale reprezentate prin muchi i nervii lor motori.
Preparatele neuromusculare pot fi detaate complet din organism sau pot fi lsate n continuare n
organism, respectnd relaiile vasculare i relaia nervului cu centrii medulari. Astfel de preparate sunt
denumite in situ. Pe asemenea preparate excitarea muchiului se face indirect, adic prin excitarea
nervului corespunztor. Acest mod de excitare are avantajul c transmite excitaia la toate unitile
musculare i se obin rezultate mai bune. Preparatele neuromusculare obinute de la animalele
poichiloterme i pstreaz timp ndelungat viabilitatea fr s fim nevoii s asigurm pe durata
experienei temperatura constant, egal cu cea corporal, aa cum ar fi cazul preparatelor
neuromusculare obinute de la homeoterme.
Material necesar: broasc, instrumente de disecie, planet sau cuv de disecie, ace de disecie,
ace cu gmlie, baghete de sticl cu vrful bont, lam de sticl, ser fiziologic, vat, dispozitiv pentru
excitaie electric (de la reea, de la acumulator sau de la o baterie electric de buzunar), fire de a.
Modul de lucru. Se paralizeaz broasca prin distrugerea axului cerebrospinal i se fixeaz cu faa
ventral pe planet, cu membrele n extensie, cu ajutorul unor ace cu gmlie. Se ndeprteaz
tegumentul unui membru posterior, apoi se disociaz masa muscular a coapsei n plan axial , cu ajutorul
unei baghete de sticl cu vrf bont. Se disociaz nervul sciatic situat ntre muchiul triceps i
semimembranos. Nervul este flancat de artera i vena femural de care trebuie degajat. Dup ce a fost
izolat, nervul se secioneaz ct mai aproape de regiunea coccigian. Disociem acum muchiul
gastrocnemian inserat la captul su inferior prin tendonul lui Ahile. Cu ajutorul unei baghete de sticl cu
vrf bont se introduce un fir de a pe sub tendon i se leag strns, apoi se
secioneaz tendonul sub aceast legtur. inndu-se de capetele firelor
de a ale legturii se ridic muchiul i se detaeaz prin secionarea
piciorului deasupra i sub articulaia tibiofemural. n acest fel se pstreaz
inseria proximal a muchiului gastrocnemian pe o poriune de os
femural. Aceast articulaie fixat cu ace n msua miografului, va
constitui todeauna captul fix al preparatului neuromuscular, iar tendonul,
prin firul de a conectat la prghie, constituie captul mobil. Se va evita
lezarea nervului prin ntindere, ciupire, presare. S-a obinut astfel
preparatul neuromuscular gastrocnemian-sciatic. Se aeaz preparatul pe o
lam curat de sticl i se acoper cu un tampon de vat mbibat cu ser
fiziologic, pentru a evita deshidratarea nervului. n acest mod preparatul va
rezista un timp oarecare
2
n

Preparat neuromuscular
gastrocnemian-sciatic
1 i 2 fire de a; n- nerv sciatic

67

Excitabilitatea muscular.
Excitani mecanici. Se penseaz cu vrful pensei nervul la extremitatea distal fa de muchi. Se
observ c determin o contracie. Dac se repet aceast pensare n acelai loc nu se mai obine un
rspuns din cauz c s-a produs degradarea nervului n locul respectiv. Pentru a obine o nou excitare
mecanic prin pensare este necesar s pensm pe traseul nervului alturi de locul primei excitri, dar
nspre muchi unde nevul este nelezat. De fiecare dat vom constata c dup o prim pensare, pe
acelai loc, nu se mai poate obine excitarea nervului. Rezult c integritatea anatomic i fiziologic
a nervului sunt condiii eseniale, pentru ca s se produc o excitaie prin aplicarea oricrui excitant.
Suprimarea posibilitii de transmitere a excitaiilor de la centrii motori pe traseul unui nerv lezat
determin pierderea tonusului muscular, urmat de paralizia muchiului.
Excitani termici. Se aplic pe suprafaa de seciune a nervului un corp metalic cald sau un cristal de
ghea. Se observ c n ambele cazuri muchiul rspunde prin contracie
Excitani chimici. Pe un alt preparat neuromuscular se aplic un cristal de NaCl pe suprafaa de
seciune a nervului i, dup puin timp, se obine contracia muchiului. Prin aplicarea clorurii de
sodiu se produce deshidratarea nervului, timp n care are loc un fenomen de excitaie. Acelai efect se
obine prin atingerea suprafeei de seciune a nervului, cu o baghet nmuiat n acid clorhidric sau
acetic.
Excitani electrici. n experienele de fiziologie se ntrebuineaz n mod frecvent curentul electric
continuu sau alternativ cu voltaj mic, deoarece acesta poate fi dozat n intensitate i durat, nu
deterioreaz muchiul n timpul trecerii lui prin esutul muscular, nu produce modificri ireversibile
care ar mpiedica repetarea excitaiei n acelai loc. Pentru ca muchiul s reacioneze, excitantul
trebuie s ating o intensitate prag de excitabilitate. Instalaia electric pentru efectuarea unei excitaii
se realizeaz astfel: cu srme subiri de cupru, izolate se face un circuit electric ntre sursa de curent,
cheia ntreruptoare i excitator. Capetele terminale ale srmelor se ndoaie puin pentru a se aeza
nervul. ntreruptorul este folosit pentru stabilirea i ntreruperea circuitului. Sursa de curent folosit
poate fi i cea din reeaua oraului care se trece printr-un transformator de sonerie de 5-8 voli. Dac
intensitatea curentului a atins valoarea medie, att la stabilirea ct i la ntreruperea circuitului , adic
de fiecare dat cnd n circuitul electric se produce o variaie brusc de intensitate a stimulului, se
obine o excitaie care determin contracia muchiului.
Contractilitatea muscular.
Este proprietatea fiziologic fundamental caracteristic muchilor. n funcie de frecvena i
intensitatea stimulilor, se pot distinge: contracii simple sau secuse, contracii susinute sau tetanosul i
contracii tonice. n funcie de tensiunea care se dezvolt n muchi n timpul contraciilor deosebim
contracii izotonice i contracii izometrice. Contracia izotonic se realizeaz fr efectuarea unui lucru
mecanic atunci cnd muchiul ridic propria lui greutate. n acest caz el nu dezvolt nici un fel de
tensiune sau dezvolt una foarte slab. Cnd ns muchiul trebuie s efectueze un lucru mecanic se
dezvolt o tensiune corespunztoare ca intensitate cantitii de lucru mecanic ce trebuie efectuat. n cazul
n care lucrul mecanic depete ca intensitate tensiunea maxim n muchi, acesta nu se mai poate
scurta. n consecin, cu toate c s-a dezvoltat o tensiune maxim, muchiul rmne la aceeai lungimeizometric. Tensiunea maxim dezvoltat n condiii de contracie izometric este msurabil.
Contracia izotonic. Cnd muchiul care se scurteaz are tot timpul o tensiune constant,
reprezentat prin fora care se dezvolt pentru ridicarea propriei greuti, rezult o contracie izotonic
este cazul contraciei simple (secusa) a muchilor.
Contracia izometric.
n cazul cnd n muchi se dezvolt starea de tensiune maxim, fr s se poat scurta din cauz c
rezistena care se opune, adic ncrctura muchiului depete tensiunea maxim dezvoltat, se produce
o contracie izometric care nu se exteriorizeaz printr-un lucru mecanic dinamic, nu se produce o
micare. i acest fel de contracii pot fi experimentate de elevi, de pild un elev mpinge cu mna i cu
toat puterea de care este capabil, peretele clasei i nu-l poate deplasa. Alt elev ncearc s deplaseze o
greutate pe care nu o poate urni. n ambele cazuri, tensiunea muscular se dezvolt progresiv; la
intensitatea maxim, lungimea fibrelor musculare rmne aceeai.

68

Tipuri de aparat locomotor la nevertebrate i la vertebrate

Saltul la nevertebrate
Membrele posterioare ale unei lcuste exercit o presiune brusc asupra solului i n urma
destinderii brute a acestora corpul insectei este proiectat n sus i nainte. Pe parcursul efecturii
saltului se observ o succesiune de flexiuni i extensii ale membrelor posterioare.
Descrierea membrului posterior al lcustei. Este lung, format din segmente articulate ntre ele,
dispuse n forma literei Z. Coapsa este cea mai voluminoas. La extremitatea membrului se observ
dou gheare. Acestea se fixeaz de neregularitile substratului i se evit astfel alunecarea n
momentul decolrii
Seciune longitudinal a unui membru posterior la nivelul coapsei i gambe

perete
chitinos

membran fin i
flexibil

muchi
extensori

muchi
flexori ai
gambei

Fiecare segment este alctuit la exterior dintr-un perete rigid bogat n chitin care joac rolul unui
schelet extern. Articulaiile la nivelul peretelui rigid sunt suple permind micrile unui segment n
raport cu segmentul vecin. Coapsa voluminoas conine la interior muchi dezvoltai care se inser pe
peretele rigid al gambei. Cnd se contract muchii flexori are loc flectarea gambei. Cnd se contract
muchii extensori se produce extensia gambei. Flexiunile i extensiile succesive ale membrului
posterior care determin efectuarea saltului se datoreaz contraciilor muchilor interni care se inser
pe un schelet extern.

Saltul la vertebrate
Iepurele se deplaseaz prin salturi. Membrele posterioare se fixeaz pe sol i exercit o presiune
asupra acestuia. Membrele posterioare flectate, pliate, se destind brusc. Aceast extensie brusc
propulseaz corpul animalului nainte. Iepurele nu atinge solul, el este pentru un timp suspendat n
aer. Aterizarea se face pe membrele anterioare care amortizeaz ocul atingerii solului prin replierea
lor cu suplee. n timpul saltului se observ o succesiune de flexiuni i extensii ale membrelor
posterioare. Vom cuta relaia dintre funcionarea membrelor posterioare i alctuirea lor.
Descrierea membrului posterior la iepure.
Membrele posterioare ale iepurelui sunt mult mai lungi dect membrele anterioare i sunt pliate n
forma literei Z n timpul repausului. Coapsa este bogat n musculatur. Destinderea brusc a
membrelor posterioare la iepure este responsabil de deplasarea ntregului corp al animalului.

69

Studiul membrului posterior care realizeaz saltul.

muchi extensori ai
gambei
muchi flexori
ai gambei

genunchi
gamb

picior

Scheletul mparte membrul posterior n segmente care se mic la nivelul unei articulaii.
Micrile de flectare a gambei pe coaps sunt asigurate de muchii coapsei situai sub femur. Aceti
muchi se inser pe oasele gambei pe de o parte i de coaps i bazin pe de alt parte. Cnd se
contract, ei apropie oasele gambei de osul coapsei. Ei se numesc muchi flexori ai gambei. Micrile
de extensie ale gambei sunt asigurate de muchii situai n coaps deasupra femurului. Aceti muchi
se inser pe oasele gambei la un capt i pe coaps i bazin la cellalt capt. Cnd se contract, ei
determin extensia gambei. Aceti muchi se numesc extensori ai gambei.
Muchii sunt organe active ale micrii, oasele sunt organe pasive, iar articulaiile permit micrile
unui segment n raport cu altul.

70

notul i echilibrul pstrvului n ap.

Dac se imobilizeaz nottoarele unui pete, el se ntoarce cu partea ventral n sus. nottoarele
asigur deci, prin micrile lor echilibrul petelui n ap.
Observaii asupra structurii unei nottoare. Evidenierea cauzelor supleei i comitent a rigiditii
acesteia.

radii osoase
membran fin

O nottoare este constituit din radii osoase articulate ntre ele, reunite printr-o membran fin
care confer supleea. Musculatura asigur mobilitatea sa.
Echilibrul n ap este deci un fenomen determinat de micrile nottoarelor.
notul ondulatoriu.
Un pstrv de 20- 30 cm poate parcurge 12 km ntr-o or. Examinarea unor fotografii succesive
ale micrilor arat c notul rapid al pstrvului este datorat btilor apei de ctre coad i nottoarea
codal care lovesc apa lateral n dreapta i n stnga. Aceste bti provoac ondulri ale corpului care
exercit o presiune asupra apei.
notul rapid este notul ondulatoriu.

notul ondulatoriu la pstrv

71

Observarea unei seciuni transversale prin coada de pstrv

muchi

coloana
vertebral

Coada este constituit din muchi care se inser pe o coloan vertebral n acelai timp rigid i
supl. Contracia muchilor din partea dreapt, apoi a celor din partea stng provoac btile cozii.
Coada supl i musculoas este deci, principalul organ propulsor al pstrvului . Forma
hidrodinamic a corpului, modul de dispunere a solzilor, prezena mucusului, favorizeaz alunecarea
corpului n ap i ajut la nvingerea rezistenei mediului acvatic

72

Separarea pigmenilor asimilatori prin metoda cromatografiei pe hrtie

Plantele fotoautotrofe, adaptate la ndeplinirea procesului de fotosintez conin un ansamblu de
pigmeni ce intervin n acest proces, ansamblu cunoscut sub numele de pigmeni asimilatori. Acetia se
mpart n trei grupe i anume: pigmeni clorofilieni, pigmeni carotenoizi i pigmeni ficobilinici. Cu
excepia pigmeilor ficobilinici ( ce pot fi extrai n ap distila) toi ceilali pigmeni asimilatori pot fi
extrai cu ajutorul unor solveni organici (alcool etilic, alcool metilic, aceton etc.) prin mojarare la rece
sau prin fierbere.
Separarea pigmenilor asimilatori din extractul de clorofil brut prin metoda cromatografic se
bazeaz pe capacitatea acestora de a fi absorbii n mod diferit de ctre anumite substraturi.
Modul de lucru. Se extrag pigmenii asimilatori din frunze prin una din metodele amintite mai
sus obinndu-se un extract de clorofil brut.
Pentru separarea pigmenilor asimilatori din soluie se procedeaz n felul urmtor: pe o fie de
hrtie de filtru, lat de 3 cm i lung de 15- 20 cm, se traseaz cu ajutorul unei pipete Pasteur, la unul din
capete, la o distan de 2 cm, o dung transversal de soluie de pigmeni. Dup ce se usuc, se repet
operaia de 10- 12 ori, pentru a obine o band intens colorat. Dup fiecare trasare este necesar uscarea
hrtiei de filtru. Se introduce apoi hrtia de filtru ntr-un cilindru de sticl fixndu-se de crligul baghetei
ce strbate dopul cu partea opus dungii colorate, astfel ca hrtia de filtru s nu ating pereii cilindrului i
nici amestecul format din 30 pri benzin, o parte aceton i 0,3 pri alcool metilic, care se gsete pe
fundul cilindrului. Se ine hrtia suspendat deasupra amestecului 15- 20 minute pentru ca n interiorul
cilindrului s se formeze o atmosfer saturat n vaporii celor trei substane din amestec dup care prin
apsarea baghetei se introduce captul inferior al hrtiei de filtru n amestec pe o distan de 0,5 cm.
Solventul se va ridica prin capilaritate de-a lungul hrtiei antrennd cu el pigmenii, care datorit gradului
diferit de absorbie se vor repartiza astfel: la partea superioar carotina, marcat printr-o dung portocalie,
apoi xantofila de culoare galben, clorofila a de culoare verde- albstruie i clorofila b de culoare glbuie.

frunze+aceton+
nisip
caroten
hrtie
cromatografic

xantofile

clorofila a
pat de
clorofil

clorofila b

soluie de
clorofil

solvent
pat
iniial

73

Influena factorilor externi asupra fotosintezei

Dintre factorii externi care influeneaz intensitatea fotosintezei cei mai importani sunt lumina,
concentraia de CO2, i temperatura. Influena acestor factori se poate evidenia experimental, n condiii
de laborator cu ajutorul plantelor acvatice superioare folosind metoda bulelor.
Influena intensitii luminii
Materiale necesare: Eprubet mijlocie, stativ pentru eprubete, lamp reflector, plant acvatic,
postament, muf dubl, muf, tij scurt.
Modul de lucru: Se tie c fotosinteza ncepe la cele mai mici intensiti de lumin, crete n
intensitate o dat cu creterea intensitii luminii pn la o anumit intensitate luminoas dup care
rmne relativ constant pentru ca la intensiti mari de lumin intensitatea fotosintezei s scad.
Modul de lucru. Se iau ramuri de plante acvatice submerse (Elodea, Miriophyllum, Ceratophyllum
etc.), se secioneaz oblic cu o lam de ras astfel nct s aib o lungime de 6-10 cm dup care se introduc
cu vrful n jos n cte o eprubet umplut cu ap, avnd grij ca suprafaa de seciune s nu ating pereii
eprubetelor. Eprubetele astfel pregtite se introduc ntr-un stativ i se aeaz la lumina unui bec electric,
la o distan de aproximativ 20 cm de acesta i se ateapt pn cnd ncep s se degaj bule de oxigen.
Pentru experien se alege o ramur care degaj un numr constant de bule, cuprins ntre 20- 40 pe minut.
Punerea n eviden a influenei intensitii luminii asupra intensitii fotosintezei se face plasnd
stativul cu eprubeta ce conine ramura aleas pentru determinri la distane diferite de sursa de lumin
(20, 30, 40, 50 i 60 cm) i numrnd bulele emise pe minut, pentru fiecare dintre aceste distane. Se va
constata c numrul de bule degajate ntr-un minut scade pe msur ce stativul este ndeprtat de sursa de
lumin datorit scderii intensitii luminii. Dac pe parcursul determinrilor degajarea de bule de ctre
ramur se deregleaz sau emisiunea de bule nceteaz, experiena trebuie reluat cu o nou ramur.
Influena compoziiei spectrale a luminii
Fotosinteza este influenat de radiaiile spectrului vizibil pe care plantele le absorb cu ajutorul
pigmenilor asimilatori, pigmeni caracteristici diferitelor grupe de plante fotoautotrofe. Evidenierea
influenei diferitelor radiaii ale spectrului asupra
intensitii fotosintezei se poate face cu ajutorul
unor filtre de sticl, de celofan colorat sau cu
ajutorul unor soluii colorate ale cror culori
corespund culorilor spectrului vizibil.
Materiale necesare: Postament, eprubet
mare, lamp reflector, ecran din sticl, filtre
colorate, plant acvatic, muf dubl, tij lung,
tij scurt, clem susinere tuburi, suport filtru,
baghet din sticl.
Modul de lucru. Pentru determinare se
folosesc ramuri de plante acvatice submerse,
pregtite dup procedeul prezentat n experiena
anterioar. Stativul cu eprubeta cu planta aleas pentru determinri se aeaz la 20- 30 cm de sursa de
lumin. ntre sursa de lumin i eprubet se intercaleaz pe rnd filtrele colorate, numrnd de fiecare
dat numrul de bule degajate pe minut. Dup fiecare determinare nainte de a schimba filtrul se verific
dac n lumina becului ramura degaj numrul iniial de bule i numai dup aceea se schimb filtrul cu
unul de alt culoare. Rezultatele se noteaz ntr-un tabel iar la sfritul experienei se pot reprezenta
grafic.

74

Influena temperaturii asupra fotosintezei

Materiale necesare: Eprubet mare, pahar Berzelius, plant acvatic, postament, muf dubl,
clem susinere tuburi, tij lung, sit cu azbest, termometru, lamp reflector, lamp cu spirt.
Modul de lucru: Folosim tot eprubeta cu Elodea care se ine tot timpul experienei la aceeai
distan fa de sursa de lumin.
Urmrim degajarea de bule n eprubeta cu ap la temperatura camerei i apoi degajarea de bule ce
are loc la o temperatur ntre 30-35oC. Apa se nclzete n paharul Berzelius, pn la temperatura de
35oC i se toarn n eprubeta cu Elodea. Se constat astfel c prin ridicarea temperaturii crete i
intensitatea fotosintezei.
Evidenierea necesitii prezenei pigmenilor asimilatori pentru desfurarea procesului de
fotosintez
Materiale necesare: Spirtier, alcool medicinal, pahar Berzelius, trus de disecie, soluie Lugol,
sit cu azbest, cutie Petri.
Modul de lucru: Pentru evidenierea necesitii prezenei pigmenilor asimilatori n procesul de
fotosintez, se folosesc frunze de Coleus. Frunzele acestor plante se caracterizeaz prin aceea c n partea
central a limbului conin pigmeni antocianici i nu pigmeni asimilatori.
Se detaeaz o frunz de pe o plant care a fost inut n prealabil cteva ore la lumin, se
introduce ntr-un pahar Berzelius cu ap i se fierbe pentru a omor celulele i pentru a extrage pigmenii
antocianici. Apoi se procedeaz la extragerea pigmenilor asimilatori prin fierberea frunzei n alcool.
Dup extragerea pigmenilor asimilatori se spal frunza cu ap i se trece ntr-o cutie Petri cu soluie
Lugol care coloreaz amidonul n albastru. Dup 2-3 minute se scoate frunza, se spal cu ap i se
etaleaz pe o foaie alb. Limbul s-a colorat n albastru numai n zonele care au posedat pigmeni
asimilatori (zonele marginale) nu i n zona central lipsit de pigmeni asimilatori. Aceasta ne
demonstreaz c amidonul se sintetizeaz la lumin doar n prezena pigmenilor asimilatori.
Punerea n eviden a fotosintezei prin metoda bulelor
Materiale necesare: Eprubet mare, muf dubl, clem susinere tuburi, tij lung, baghet de
sticl, plant acvatic, lamp reflector.
Modul de lucru: O ramur de Elodea se secioneaz oblic la partea bazal i se introduce cu
vrful n jos ntr-o eprubet cu ap de conduct. Pentru a observa mai uor
eliberarea oxigenului, ramura se fixeaz de bagheta de sticl n aa fel ca
partea secionat s se gseasc la 2-3 cm sub nivelul apei i s nu ating
pereii. Eprubeta cu ramura se aeaz la lumin natural sau n faa unui bec de
100- 150W. Dup 2-3 minute prin partea secionat ncep s se degaje bule de
gaz. Dac degajarea de bule nu are loc dup expunerea la lumin, se face o
secionare mai oblic; dac bulele sunt prea numeroase, secionarea se face mai
puin oblic. Eliminarea oxigenului se explic astfel: oxigenul care se formeaz
n procesul fotosintezei, difuzeaz n spaiile intercelulare i se degaj sub
form de bule prin partea secionat unde spaiile intercelulare comunic cu
exteriorul. n afar de oxigen, aceste bule mai conin azot i chiar dioxid de
carbon.

75

Evidenierea oxigenului eliminat n fotosintez

Materiale necesare:Vas anatomic, suport pentru plnie, plnie transparent, eprubet mijlocie,
postament, tij lung, lamp reflector, muf dubl, soluie carbonat de sodiu, Elodea sp.
Modul de lucru: n vasul anatomic plin cu ap curent se pun ramuri de Elodea, Ceratophyllum
sau Myriophyllum i se acoper cu o plnie aezat cu gura n jos. Plnia se sprijin pe un suport metalic.
Peste gtul plniei se aeaz o eprubet plin cu
ap. Pentru a fixa eprubeta trebuie ca nivelul
apei din vas s treac peste partea superioar a
plniei. Experiena montat se aeaz la lumina
direct a soarelui sau la lumina reflectorului.
Oxigenul care se degaj n urma procesului de
fotosintez se culege n partea superioar a
eprubetei.
Pentru a ne convinge c gazul degajat n
eprubet este oxigen acoperim gura eprubetei cu
degetul, o ridicm din ap, o ntoarcem cu gura
n sus i introducem repede n interiorul ei un
b de chibrit care arde fr flacr. Observm
c bul de chibrit arde cu flacr vie. Gazul
acumulat n eprubet, nu arde, dar ntreine arderea. Acesta este oxigenul. Pentru ca fotosinteza s fie mai
evident i apa din vas s fie mai bogat n dioxid de carbon se adaug o cantitate de aproximativ 0,1%
carbonat acid de sodiu.

Asimilaia CO2 n timpul fotosintezei

Materiale necesare: Eprubet mare, plant acvatic, stativ pentru eprubete, muf dubl, lamp
reflector, postament, tij lung, NaHCO3.
Modul de lucru: Se dovedete necesitatea CO2 n fotosintez lund o eprubet cu ap n care se
introduce ramura de Elodea. Aezm eprubeta n faa luminii i numrm bulele degajate ntr-un minut.
nlocuim apa din eprubet cu ap fiart i rcit.
Prin fierbere apa pierde CO2 dizolvat. Urmrind degajarea de bule, constatm c este foarte lent.
Dac adugm o cantitate mic de NaHCO3, dup scurt timp observm degajarea unui numr mare de
bule, deoarece NaHCO3 prin disociere, pune n libertate CO2.
2NaHCO3 CO2 +Na2CO3 +H2O

Evidenierea cilor de conducere a apei n corpul plantelor

Materiale necesare: Eprubet mijlocie, stativ pentru eprubete, ramuri tinere de soc, cristalizor, flori
albe cu tije, eozin soluie 0,1%, frunze cu nervuri paralele.
Modul de lucru. Evidenierea cilor de conducere a apei n corpul plantelor se poate face prin mai
multe metode:
- Se iau flori de lcrmioare sau mueel ai cror pedunculi au fost tiai sub ap; se introduc n
eprubeta ce conine eozin 0,1%. Dup ctva timp se constat c nervurile petalelor se coloreaz n
rou. Soluia de eozin urc prin vasele lemnoase i coloreaz nervurile petalelor. O seciune n
peduncul observat la microscop evideniaz coloraia vaselor de lemn.
76

- Se iau fragmente de frunz, cu nervaiunea paralel. Un fragment se aeaz la suprafaa apei,

nervurile fiind paralele cu apa, iar cellalt fragment se aeaz perpendicular pe suprafaa apei. Dup
ctva timp se constat c fragmentul de frunz aezat perpendicular pe suprafaa apei i menine
turgescena, iar cellalt se ofilete, nemaifiind aprovizionat cu ap.
- Se iau cinci fragmente de ramuri de soc la care se fac seciuni n urmtoarea ordine:
1. se ndeprteaz scoara;
2. se ndeprteaz mduva
3. se ndeprteaz scoara i mduva
4. pe anumite poriuni de 2-3 mm se
ntrerup toate esuturile
5. se las ramura intact
Se introduc toate fragmentele n ap i se schimb
apa zilnic. Pentru a urmri efectul secionrilor,
ramurile vor avea deasupra seciunilor muguri.
Dup ctva timp se constat c la fragmentele
nr.1,2,3 i 5 se deschid mugurii i chiar se pot
dezvolta frunze. La ramura nr.4 mugurii se usuc.
n acest caz vasele lemnoase fiind secionate, apa nu ajunge s alimenteze mugurii i acetia se
usuc.

Evidenierea rolului forei de suciune a frunzelor n conducerea apei n corpul plantelor

Materiale necesare. Tub scurt, tub n form de U cu brae
inegale, dop de cauciuc cu o gaur, postament, dop de cauciuc crestat,
muf dubl, tij lung, clem de susinere, ramur cu frunze.
Modul de lucru. Se realizeaz montajul din figur.
La partea inferioar a tubului de sticl se monteaz dopul de
cauciuc prin orificiul cruia trece tubul de sticl n form de U. la
partea superioar a tubului, n dopul de cauciuc perforat i prevzut cu
o cresttur se fixeaz o ramur cu frunze. Se toarn ap n tubul de
sticl care va trece i n tubul U pe care cu un marcher se noteaz
nivelul lichidului. Dup 1-2 ore se noteaz din nou nivelul apei. Diferena de nivel reprezint fora de
suciune a celulelor frunzelor.

Micrile plantelor

Evidenierea geotropismului tulpinilor i rdcinilor

Geotropismul face parte din categoria micrilor de curbare efectuate de organele vegetale pe cale
de cretere sub influena gravitaiei. Orientarea micrii este determinat de direcia excitantului i poate
fi pozitiv i negativ.
Materiale necesare: Postament, eprubet mare, muf dubl, clem susinere tuburi, tij lung,
semine de fasole, gru, mazre, cristalizor, rumegu de lemn, nisip.
Modul de lucru. Evidenierea geotropismului se poate face cu urmtorul montaj: se iau trei
plantule (de mazre, porumb sau lupin) crescute n rumegu de lemn, cu rdcinile puternice, drepte i
77

lungi de 2-3 cm. Se aeaz n trei eprubete mari n care am pus ,de asemenea, rumegu umezit. Eprubetele
se aeaz n trei poziii diferite, dar se in n condiii favorabile de cretere. Poziiile celor trei eprubete
vor fi:
a. poziia normal, cu rdcina vertical ndreptat cu vrful n jos.
n aceast poziie nu are loc nici un impuls geotropic.
b. Poziia orizontal, cnd rdcina formeaz cu verticala un unghi
de 90o. n aceast poziie, excitaia geic atinge mrimea
maxim.
c. Poziie inversat- planta se aeaz cu vrful rdcinii n sus i cu
tulpina n jos.
La plantele tinere se observ c n decurs de 1-4 ore, sub aciunea
gravitaiei, organele axiale (rdcina i tulpina) se orienteaz n
direcie vertical, dar n sens opus, tulpina n sus i rdcina n jos.
Cele dou laturi din regiunea de cretere a tulpinilor aflate ntr-o
poziie nclinat fa de vertical cresc inegal sub efectul excitaiei
gravitaiei. Latura dinspre Pmnt a tulpinii, crete mai puternic
dect cea opus, ca urmare vrful su se ndreapt n sus (geotropism
negativ). Rdcina reacioneaz invers, faa sa dinspre Pmnt se
alungete mai puin dect cealalt, de aceea vrful ei se ndreapt ctre pmnt (geotropism pozitiv).
Experiment cu tulpini articulate de graminee.
Cnd o tulpin de graminee este orizontal, n dreptul unui nod se produce o curbur n form de
genunchi i paiul se ridic vertical.
Se scot din pmnt i se sdesc n tuburi graminee tinere avnd cteva internoduri , se ud
pmntul i se aeaz tubul n poziie orizontal. n curs de 24 de ore se vor produce curburile geotropice
la noduri. Se taie segmente tinere din tulpin de graminee, n aa fel ca s aib la mijloc un nod. Se pune
ntr-un cristalizor nisip umed, formnd n centru un mic muuroi. n acesta se fixeaz cu un capt
segmente de pai n poziie orizontal. Se pstreaz la ntuneric meninnd umed nisipul. Dup o or paiul
curbeaz n dreptul nodului, ca urmare internodul se ndreapt n sus. Curburile geotropice ale tulpinilor
articulate se observ bine la Tradescantia. Punerea n eviden a factorilor fizici ai naturii i a legilor care
stau la baza producerii i dirijrii acestor fenomene, se realizeaz cu ajutorul clinostatului.

Micri prin imbibiie

Micrile de imbibiie au loc n esuturile moarte ale plantelor, n urma uscrii sau umezirii
Materiale necesare: Conuri uscate de conifere, psti uscate de leguminoase, cutie Petri.
Modul de lucru. Conurile uscate de conifere (Picea, Pinus, Larix) au solzii ndeprtai. Dac se
mbib cu ap, acetia se curbeaz spre ax, acoperindu-se. Prin mbibare partea extern a solzului se
lungete mai mult dect partea sa intern, fiindc are fibrele orientate transversal n timp ce partea intern
are fibrele orientate longitudinal. Efectul este bine vizibil dac se scufund numai jumtate din con. Solzii
din ap se strng, iar cei din aer rmn ndeprtai, ceea ce face ca partea mbibat s par mult mai mic.
Mrirea i micorarea dimensiunii fibrelor vegetale prin mbibare i desimbibare este mai accentuat de-a
curmeziul dect n lungul lor.
Curburi de torsiune au loc la uscarea pstilor multor leguminoase, datorit faptului c fibrele
sclerenchimatice suprapuse sunt aezate perpendicular ntre ele i oblic fa de axa longitudinal a pstii.
Dac o pstaie se scufund n ap cald se observ c ea se ndreapt. Cnd se pune la uscat pstaia se
rsucete din nou.

78

Evidenierea respiraiei celulare

Materiale necesare: Cristalizor, infuzie de fn bogat n infuzori,lame pentru microscopie,
lamele, sering, paie uscate de graminee, parafin sau cear, pens, lamp de spirt.
Modul de lucru. Pe o lam curat se pregtete o camer de observaie, care se realizeaz astfel:
cu ajutorul a trei fragmente de pai lungi de 1,2- 1,5 cm, impregnate cu cear topit sau parafin, se
ncadreaz un spaiu pe trei laturi ale unui ptrat. Se obine o camer ptrat avnd o latur liber. n
camer se introduce lichid de infuzie i se acoper cu o lamel, avnd grij s nu se introduc bule aer. Se
observ la microscop i dac exist un numr mare de infuzori, se consider preparatul corespunztor.
Dup 15 minute, se introduce sub lamel, cu ajutorul acului seringii, n centrul camerei, una sau
dou bule de aer. Se las n repaus 10 minute, dup care se examineaz din nou preparatul la microscop.
Se constat c infuzorii s-au ngrmdit n jurul bulelor de aer, din necesitatea de a respira, ntruct n
bulele de aer se gsete O2 mai mult dect n lichidul cuprins n spaiul limitat de sub lamel. Fenomenul
se numete oxitactism pozitiv i este determinat de posibilitatea unor schimburi respiratorii mai
avantajoase dect n restul camerei.
Evidenierea respiraiei tisulare
Respiraia n intimitatea ei este un proces complex, dar n ultim analiz el se exprim prin
consum de oxigen i eliberarea de CO2. Sub aceste aspecte respiraia poate fi pus n eviden la diferite
esuturi animale.
Materiale necesare: Broasc, trus de disecie, eprubet mijlocie, soluie salin de albastru de
metilen n concentraie de 1%, cloroform, ser Ringer, ulei vegetal, baie cu ap, termometru.
Modul de lucru. Se sacrific o broasc prin decapitare, apoi se ndeprteaz tegumentul de pe
membrele posterioare, prin jupuire. Se cur instrumentele i se separ din masa muscular circa 2 g de
esut. Se depun ntr-o cutie Petri i se taie foarte mrunt cu foarfeca. esutul mrunit este viu i capabil
de activitate metabolic. Se mparte n dou pri egale i se introduce n cte o eprubet peste care se
toarn ser Ringer. Se agit bine, apoi una din eprubete se las la temperatura camerei, iar cealalt se
scufund ntr-o baie de ap avnd temperatura peste + 50o C. la aceast temperatur enzimele care
intervin n procesele metabolice sunt inactivate.
Dup 15 minute, se scoate eprubeta din baie i se rcete n ap la temperatura camerei. Apoi se
adaug n fiecare eprubet cte 5 ml dintr-o soluie izotonic salin (NaCl 0,7%) cu albastru de metilen n
concentraie de 1.
Se agit i se las n repaus. Se prelinge ulei pe peretele eprubetelor n aa fel ca la suprafaa
lichidului s fie un strat de 1 cm. Se examineaz din cnd n cnd i se constat c n eprubeta care a stat
la temperatura camerei, se produce o uoar decolorare a albastrului de metilen, care ncepe la suprafaa
de contact cu esutul i se extinde n 15-20 minute n toat masa lichidului. n eprubeta inut la
temperatura ridicat albastrul de metilen nu se decoloreaz.
Albastrul de metilen este o substan care prezint proprietatea de a putea fi uor oxidat si redus.
n prezena oxigenului se gsete forma oxidat, ntruct oxigenul molecular desprinde i capteaz doi
atomi de hidrogen de pe fiecare molecul de albastru de metilen. n aceast experien esutul viu
consumnd oxigenul din soluie, permite reducerea albastrului de metilen, adic redobndirea atomilor de
hidrogen pierdui i transformarea sa ntr-o form incolor (leucoderivat). n acest mod se dovedete c
esutul viu consum oxigen, iar cel mort nu.

79

Disecii la vertebrate
Tema lucrrii: Disecia la petii osoi (Perca fluviatilis -bibanul)
Este o specie de ap dulce cu corpul alungit, uor comprimat lateral. Gura cu poziie terminal,
poart dini puternici i numeroi. Ochii situai pe laturile capului sunt mari, turtii i fr pleoape i
glande anexe. Pe faa dorsal a capului, spre vrful botului, se gsesc narinele. Trunchiul este acoperit de
solzi ctenoizi. Pe laturile corpului se gsete linia lateral, organ principal de orientare al petilor. Coada
este alctuit dintr-un peduncul caudal i nottoarea propriu-zis de tip homocerc, cu cei doi lobi
simetrici susinui de lame dermice.
napoia operculelor se inser cele dou nottoare pectorale, iar ventral, cu poziie toracic, se
gsesc situate nottoarele ventrale. napoia acestora, spre partea posterioar a corpului, se inser
nottoarea anal. Median i dorsal se gsesc dou nottoare dorsale apropiate, prima cu raze epoase, a
doua cu raze moi. Anterior nottoarei anale, ntr-o invaginare comun, se gsesc 3 orificii: anal, genital i
excretor.
Material necesar: Pete proaspt, truse de disecie, tav de disecie, ace pentru fixat.
Tehnica de lucru. Se ia petele cu mna stng, iar cu foarfeca se face o incizie pe linia medioventral, de la orificiul anal pn la cap, tind i centura scapular. Nu se introduce foarfeca prea profund,
pentru a nu afecta organele interne. Se aeaz petele pe latura dreapt ntr-o tav de disecie, cu fundul
acoperit de un strat de cear de albine n amestec cu parafin i smoal. Cu ajutorul acelor cu gmlie se
fixeaz petele de stratul de pe fundul vasului. nainte de a deschide cavitatea corpului, se secioneaz
tegumentul de pe flancul expus i se nltur pentru a scoate n eviden musculatura. Se observ, c pe
fiecare latur a corpului, se ntinde un muchi lateral, de la cap pn la coad. Muchii laterali sunt
alctuii din benzi transversale numite miomere, al cror numr este egal cu cel al vertebrelor, separate de
perei conjunctivi numii miosepte. Pentru a pune n eviden branhiile se ndeprteaz operculele. Pentru
deschiderea cavitii abdominale se secioneaz peretele lateral al corpului, dup o linie curb, ce pornete
de la orificiul anal n sus, apoi paralel cu coloana vertebral pn la opercul. Peretele secionat se nltur
pentru a pune n eviden organele interne.

Disecia la biban: 1. limb; 2. narine; 3. faringe i branhii; 4. vertebre; 5. coaste; 6.

stomac; 7. aorta ventral; 8. inima; 9. ficat; 10. vezica biliar; 11. celom, 12. cecumi
1 pilorici, 13. splin; , 14. intestin, 15. gonad; 16. vezica urinar; 17. rinichi, 18. vezica
urinar; 19. anus; 20. desch. uro-genit.;21. not. dorsale; 22. not. codal; 23. not. anal;
24. not. ventral.

80

Tema lucrrii: Disecia la broasca de lac ( Rana ridibunda)

Broasca de lac are corpul robust, turtit dorso-ventral, alctuit din cap i trunchi, lipsit de coad.
Capul voluminos se prinde direct de trunchi, deoarece nu se difereniaz un gt. Gura are deschiderea
larg, iar pe maxilarul superior se gsesc dini numeroi i mruni. Pe laturile capului se gsesc ochii
proemineni, protejai de dou pleoape i de o membran nictitant. Glandele lacrimale i Harder sunt
prezente. Pe faa superioar a capului, ctre vrful botului, se gsesc nrile, deschiderile sacilor olfactivi.
napoia ochilor se gsesc membranele timpanice, cu contur circular. Membrele anterioare sunt scurte, slab
dezvoltate, prevzute cu patru degete. Membrele anterioare servesc la susinerea corpului pe sol i ca
frn dup un salt. Membrele posterioare mult mai dezvoltate, sunt adaptate pentru not i srit. Ele sunt
prevzute cu 5 degete lungi prinse ntr-o palmatur interdigital. Tegumentul broatei se mic uor fa
de corp datorit prezenei unui numr mare de saci limfatici.
Material necesar. Broate vii, truse de disecie, tav de disecie, ace pentru fixat.
Tehnica de lucru.
Broasca se sacrific prin spinalizare sau prin anestezie cu eter sau cloroform. Dup sacrificare se
aeaz ntr-o tav de disecie cu abdomenul n sus. Se fixeaz cu ace maxilarul superior i membrele n
extensie. nainte de a deschide cavitatea corpului se desprinde pielea pentru a pune n eviden
musculatura. n acest scop se face o incizie n tegument pe linia median a feei ventrale a corpului,
ncepnd de la orificiul cloacal pn la mandibul. Apoi se mai fac alte dou tieturi transversale,
perpendiculare pe prima, ce se vor ntinde i de-a lungul picioarelor. Cu pensa se prinde tegumentul i se
desprinde uor de corp. Operaia nu este dificil deoarece la amfibieni tegumentul nu ader pe toat
suprafaa la muchi, ci doar n anumite puncte. Ea rmne separat de ptura de muchi prin nite spaii,
sacii limfatici. Pe faa intern pielea este foarte bine vascularizat, deoarece ndeplinete i funcia
respiratorie. Prin ndeprtarea pielii apare musculatura difereniat n muchi specializai pentru realizarea
anumitor funcii. Ventral se observ muchiul drept abdominal, deo parte i de alta a liniei albe. Pe
mijlocul acestui muchi se ntinde vena abdominal, care nu trebuie secionat pentru a evita hemoragia.
Pe laturile abdomenului se ntind muchii oblici externi, care prin contracie micoreaz cavitatea
abdominal. Anterior dreptului abdominal se gsete muchiul pectoral, al crui tendon se inser pe
humerus, fiind un adductor al braului. Pe faa dorsal se disting: muchiul dorsal care acoper omoplatul,
muchiul latul dorsal, n form de evantai, care rotete braul, muchiul lungul dorsal, care se ntinde de-a
lungul coloanei vertebrale, precum i ali muchi mai mici i mai puin evideni. Este de asemenea bine
dezvoltat musculatura membrelor posterioare. Pentru deschiderea cavitii corpului se taie cu un foarfece
peretele muscular ventral,
stomat
pe linia median, de la
orificiul cloacal pn la
mandibul. Se taie cu
grij centura scapular
pentru a nu atinge inima.
Pereii laterali ai cavitii
abdominale se rsfrng
de-o parte i de alta a
corpului i se fixeaz cu
ace de substratul tvii de
disecie. Preparatul se
spal cu ap i tot sub ap
se observ organizaia
intern.

81

Tema lucrrii: Disecia la oprla cenuie (Lacerta agilis)

Corpul oprlei este difereniat n cap, gt, trunchi i coad i este acoperit de solzi epidermici.
Forma solzilor variaz chiar la acelai animal n diferite regiuni ale corpului. Suprafaa dorsal a
capului este acoperit de plci cornoase al cror numr i poziie constituie un criteriu taxonomic. Ctre
vrful botului, tot pe faa dorsal a capului, se gsesc nrile. Lateral sunt plasai ochii protejai de dou
pleoape i o membran nictitant. La partea posterioar a capului se afl deschiderile auditive cu
membranele timpanice situate mai n profunzimea acestora. Trunchiul alungit este acoperit pe spate de
solzi mruni, iar pe partea ventral de solzi mai mari dispui n iruri longitudinale. n dreptul gtului
solzii formeaz un gulera festonat. La limita dintre trunchi i coad se gsete orificiul cloacal, o fant
transversal. Coada este lung, cilindric i acoperit cu solzi dispui n verticile. Membrele sunt bine
dezvoltate, terminate cu 5 degete i prevzute cu gheare. Pe partea intern a coapselor se gsesc porii
femurali.
Material necesar. oprle vii, truse de disecie, tav de disecie, ace pentru fixat.
Tehnica de lucru. Se sacrific animalul prin narcotizare cu cloroform sau eter etilic. Dup
sacrificare se aeaz animalul cu abdomenul n sus. Se fixeaz membrele cu ace i se secioneaz
tegumentul medio-ventral, de la cloac pn la mandibul. La nivelul membrelor se fac seciuni
transversale pe prima. Tegumentul se rsfrnge lateral i se fixeaz cu bolduri, scondu-se n eviden
musculatura ventral. Se taie apoi peretele muscular al corpului, pe aceeai linie de disecie. Se
secioneaz cu atenie centura pelvian i scapular. Se rsfrng pe laturi lambourile musculare punnduse n eviden organizaia intern a oprlei.

Disecia la femel de oprl

cenuie (Lacerta agilis)
1. trahee; 2. timus; 3. artere
carotide; 4. canal carotidian; 5.
crje aortice(dreapt i stng);
6. atrii (drept i stng); 7.
ventricul; 8. plnia oviductului;
9. oviduct; 10. plmn; 11.
ficat; 12. vena suprahepatic;
13. ou; 14. stomac; 15.
pancreas; 16. intestinul subire;
17. ovar, 18. intestinul gros; 19.
deschiderea rectului; 20. vezica
urinar; 21. orificiul ureterelor;
22. orificiul oviductelor; 23.
deschiderea cloacal.

82

Disecia la masculul de oprl

cenuie (Lacerta agilis)
1. os hioid; 2. trahee; 3. tiroid;
4. timus; 5. plmn; 6. ven
jugular; 7. arter carotid; 8.
arc aortic; 9. atriu; 10. ventricul;
11. vena hepatic, 12. aorta; 13.
ficat; 14. vezica biliar, 15.
artera
mezenteric;
16.
pancreas, 17. intestin; 18.
splin, 19. testicul stng, 20.
testicul drept; 21. epididim; 22.
suprarenale; 23. canalul lui
Muller, 24. rinichi; 25. rect; 26.
vezica urinar; 27. corp adipos,
28. cloac, 29. orificiul urinar i
genital mascul, 30. penis; 31.
muchi retractori ai penisului;
32. pori femurali.
Tema lucrrii: Disecia la porumbel ( Columba livia)
Porumbelul are capul oval, ciocul mic i drept. Partea bazal a ciocului este acoperit de o cerom,
o membran moale, pigmentat i bogat n corpusculi tactili.
La baza ciocului, la nivelul ceromei, se gsesc nrile nguste. Ochii sunt mari, protejai de dou
pleoape mobile i o membran nictitant transparent. napoia ochiului se gsete orificiul conductului
auditiv extern, puin vizibil, fiind acoperit cu pene modificate.
Gtul este relativ lung i mobil, iar corpul scurt, ovoid, terminat cu o coad. La baza cozii, pe faa
inferioar, se afl orificiul cloacal, o fant transversal limitat de o proeminen tegumentar. Tot corpul,
cu excepia ciocului i a membrelor posterioare, este acoperit de pene, care dup structura, locul de
inserie i locul pe care l au aparin urmtoarelor categorii: pene de contur (remige, rectrice, tectrice),
fulgi, puf, pene filiforme, pene modificate (ornamentale, cili, vibrize). Penele se inser pe anumite zone
ale corpului numite pterii, mrginit de zone golae- apterii. Aripile sunt mari i ascuite asigurnd un zbor
rapid. Picioarele sunt scurte i terminate cu 4 degete prevzute cu gheare, dintre care primul orientat
posterior, iar celelalte trei orientate anterior. Faa plantar a degetelor este acoperit cu scuturi cornoase.
Material necesar: cloroform, trus de disecie, tav de disecie.
Tehnica de lucru. Se sacrific porumbelul prin cloroformizare i apoi se fixeaz pe o tav de
disecie cu abdomenul n sus. Aripile se ntind pe laturi, iar picioarele se extind napoi i puin lateral. Se
smulg penele de pe faa ventral a trunchiului i gtului (exceptnd coada i aripile). Se taie cu o foarfece
tegumentul pe linia medio-ventral, de la orificiul cloacal pn la baza ciocului. Se mai fac nc dou
tieturi transversale pe prima; una n dreptul aripilor, alta n dreptul membrelor posterioare. Se desprinde
cu grij pielea, mai ales pe partea ventral a gtului pentru a nu se rupe gua, care este subire i aderent.
Se ndeprteaz lateral lambourile de piele i se fixeaz cu ace. Se observ musculatura ventral care
poart amprenta unei adaptri profunde la zbor. Cei mai dezvoltai muchi sunt cei pectorali, care au rol
n coborrea i n ridicarea aripilor. Marele pectoral este cel mai activ dintre toi muchii, el se inser cu
un capt pe stern, iar cu cel opus pe creasta humeral. La aciunea marelui pectoral se adaug cea a
micului pectoral, care se inser pe coracoid i humerus. Antagonist celor doi muchi care coboar aripile
este muchiul supracoracoid, mai puin voluminos, care ridic aripile. Se secioneaz musculatura
pectoral, paralel cu carena, pn ce apare sternul. Cu o pens se prinde sternul i se ridic uor, iar cu un
foarfece se taie coastele. Se desprind din articulaie coracoidele i toracalele (claviculele) i se
83

ndeprteaz toate aceste pri scheletice. Se face apoi o incizie n musculatura abdomenului pn la
orificiul cloacal. Astfel se pune n eviden dispoziia in situ a tuturor organelor interne. Se spal bine de
snge cavitatea visceral pn ce apa rmne clar iar organele se disting bine.

Disecia la porumbel.
1. esofag; 2. gu; 3. trahee; 4.
sirinx; 5. timus; 6. vena
jugular;
7.
tiroida;
8.
paratiroide; 9. atriu drept; 10.
atriu stng; 11. ventricul drept;
12. ventricul stng; 13. trunchi
brahiocefalic;
14.
arter
subclavicular;
15.
artera
carotid;
16.
vena
subclavicular; 17. vena cav
inferioar; 18. ficat; 19. stomac
triturator(pipot);
20.
ans
duodenal; 21. pancreas; 22.
intestin;
23.
deschiderea
cloacal.

Tema lucrrii: Disecia la iepurele de cas (Oryctolagus cuniculus)

Iepurele de cas prezint capul mare n raport cu trunchiul, cu o regiune anterioar (facial) i o
regiune posterioar (cranial) distincte. Orificiul bucal este mrginit de dou buze. Cea superioar este
despicat, fiecare jumtate avnd pe marginea inferioar cte un lob acoperit de peri. Buza inferioar
prezint i ea lobi, dar de dimensiuni mai mici. La vrful botului exist o zon lipsit de peri numit
rhinarium, iar la partea superioar a acesteia se disting nrile ca dou fante. Pe bot poart vibrize bine
dezvoltate (musti). ochii sunt mari, protejai de dou pleoape mobile, care poart pe margini peri lungi
(gene). Membrana nictitant este rudimentar, ea se menine sub forma unei cute mici n unghiul intern al
ochiului. Lateral i posterior se gsesc pavilioanele auditive bine dezvoltate, cu numeroase vase sanguine,
care se observ prin transparena tegumentului. Gtul, dei nu este lung, prezint o mare mobilitate.
Trunchiul alungit se termin cu o coad scurt. Membrele sunt inegale, cele posterioare fiind mai lungi, n
legtur cu deplasarea n salturi. La membrele anterioare prezint 5 degete, iar la cele posterioare 4
degete, degetul 1 fiind redus. Degetele sunt prevzute cu gheare.
Tot corpul (excepie rhinarium) este acoperit de blan format din peri scuri i dei i puf moale
la baz. Glandele sudoripare sunt puin dezvoltate i prezente numai n zona inghinal. Glandele mamare,
3-5 perechi, au poziie abdominal.
Material necesar. Iepure viu, truse de disecie, tav de disecie, cloroform, ace pentru fixat.
Tehnica de lucru. Animalul sacrificat prin cloroformizare, ntr-un vas mai mare de sticl nchis
etan cu capacul, se aeaz cu abdomenul n sus ntr-o tav de disecie sau pe o planet de lemn.
Membrele se pot fixa de suport cu mici cuie. Se ud cu ap blana pe linia median a prii ventrale dnd
84

prul de o parte i de alta. Cu pensa se apuc pielea n partea posterioar a abdomenului i cu o foarfece
se face o incizie pn la unghiul mandibulei. La nivelul membrelor se fac seciuni transversale pe prima.
Se jupoaie pielea de pe faa ventral i de pe laturile corpului i se fixeaz de suport prin ace, scond n
eviden musculatura.
Pe linia median a prii ventrale, apare o linie alb, aponevroza fibroas. Pe aceast linie se
secioneaz peretele muscular al abdomenului, de la orificiul urinar pn la xifistren. De la acest punct se
face seciunea pe limita inferioar a toracelui. Se mai face o seciune la nivelul membrelor posterioare.
Lambourile musculare se ntind lateral i se fixeaz cu ace. n acest fel se pune n eviden dispoziia
organelor abdominale.
Pentru evidenierea organelor cavitii toracice se fac dou seciuni oblice prin coaste. Se taie i
claviculele. Se prinde sternul cu o pens i se ridic o dat cu coastele secionate (la limita dintre partea
cartilaginoas i cea osoas). Se nltur aceste pri osoase lsnd descoperit cavitatea toracic. Aceasta
este separat de cea abdominal prin diafragm, un muchi circular i subire, dar cu rol deosebit n
respiraie. Se secioneaz apoi musculatura gtului.

Disecia la iepurele de cas

(Oryctolagus cuniculus):
1. arterele carotide comune; 2.
anastomoza jugular; 3. vena
jugular extern; 4. arc aortic; 5.
artera i vena subclavicular; 6.
vena cav anterioar; 7. atriul
drept; 8. ventriculul drept; 9.
artera pulmonar; 10. atriul stng;
11. ventriculul stng; 12. plmn;
13. vena cav posterioar; 14.
ficat; 15. vezica biliar; 16. ductul
biliar, 17. esofag; 18. stomac; 19.
splin; 20. pilor; 21. pancreas; 22.
ductul pancreatic; 23. duoden, 24.
artera i vena renal; 25. rinichi;
26. ureter; 27. ileum; 28. colon;
29.
cecum,
30.
apendice
vermiform; 31. vezica urinar, 32.
coarda spermatic(artera, vena i
nervul); 33. rectum; 34. capul
epididimului; 35. testicul; 36.
canal deferent.

85

Organizaia intern la iepure

86

ANATOMIA I FIZIOLOGIA OMULUI-CLASA A XI-A

Morfologia, structura i compoziia chimic a oaselor

1. Structura macroscopic a oaselor
Material necesar: oase de mamifer luate de la abator, din menaj sau de la animale sacrificate n
laborator, instrumente de disecie, ferstru mic de mn (eventual de traforaj), tav de disecie, surs de
cldur, mojar sau piuli, sod caustic.
Mod de lucru:
Se cur oasele cu ajutorul instrumentelor de disecie pn cnd se ajunge la periost. Se
examineaz acesta, se analizeaz epifizele cu cartilajele articulare, ligamentele, se analizeaz aspectele
morfologice ale diferitelor tipuri de oase. Se secioneaz longitudinal i transversal prile cele mai
importante ale fiecrui tip de os lung, lat, scurt. Se examineaz corpul osului lung cu mduva lui (alb i
roie), materia osoas compact din diafiz, spongioas din epifize i fibroas din tbliile de la suprafaa
unui os lat sau scurt. Se discut despre orientarea lamelelor osoase din epifize i despre modul n care
aceast orientare este determinat de forele mecanice ce acioneaz asupra osului, despre structura
oaselor n raport cu rolul pe care l au de ndeplinit. Dup aceasta se ndeprteaz mduva, se spal bine
corpul osului cu ap i se terge cu o crp curat, pentru a vedea lumenul canalului medular din diafiz.
Pe un os lung secionat longitudinal i fiert timpdeor n ap cu NaOH (pentru ca s se
distrug esuturile moi i mduva roie din epifize) se observ cu lupa foarte clar textura spongioas a
epifizelor. ncercnd rezistena la presiune, folosind o lam metalic, se constat c osul compact din
diafiz este mult mai dur dect osul spongios epifizar
Concluzie. Oasele sunt piese dure, solide, a cror constituie corespunde rolului de susinere,
aprare, locomoie.
2.Compoziia chimic a osului.
Prin analize chimice au fost determinate calitativ i cantitativ diferite substane minerale i
organice care intr, n compoziia osului, att n starea normal ct i n cazul unor tulburri patologice ce
afecteaz acest sistem.
Pentru punerea n eviden a componenilor minerali i organici se pot face mai multe experiene.
Material necesar. Fragmente de oase degresate de mamifer sau de pasre, capsul de calcinat,
mojar cu pistil sau piuli, sod caustic, benzin, soluie de acid clorhidric 5- 15%, eprubet cu dop
perforat, prin care trece un tub de sticl lung de 10 cm cu diametrul 0,5 cm, un pahar, ap de var, fin de
os calcinat, lame de sticl, microscop, acid azotic 5%, molibdat de amoniu 1%, surs de cldur.
Mod de lucru.
a. Identificarea substanelor organice din os
Se ine la flacr o bucat de os i se constat c o parte din materia sa constitutiv arde, degajnd
un fum i un miros caracteristic. Totodat se desprind i cad picturi de grsime. Materia care arde
reprezint substana organic a osului- oseina. Prelungind aceast ardere ntr-o flacr puternic sau
punnd osul pe jratic ncins se ajunge s se distrug ntreaga materie organic. n cursul acestui proces se
trece printr-o faz de carbonizare, cnd, prin coloraia negricioas caracteristic, se poate recunoate
modul cum este distribuit substana organic.
Dac se cntrete osul nainte de calcinare i dup ce toat substana organic a fost ars se
constat c osul a pierdut 1/3 din greutatea lui, ceea ce nseamn c 2/3 din greutatea osului o constituie
substanele minerale i 1/3 substanele organice.
Osul calcinat i pstreaz forma, dar devine extrem de fragil. Poate fi spart uor dac este lovit cu
ciocanul i prin mojarare poate fi transformat n pulbere.
Pentru o mai bun cercetare a alctuirii substanei organice fundamentale-oseina- se procedeaz n
felul urmtor: se ia un os subire de pasre, de miel sau de iepure, se cur bine i se fierbe timp de 1-2
ore n ap n care se adaug sod caustic. Prin acest procedeu se ndeprteaz substanele grase.
87

Degresarea se poate obine i prin extracie cu benzin, n care osul se ine mai multe ore. Dup degresare
se spal bine piesa i se introduce ntr-un vas de sticl adecvat n care se gsete o soluie de acid
clorhidric n concentraie de 10-15%. Se las n contact cu acesta timp de 12 ore, dup care se rennoiete
soluia de acid clorhidric. Dup alte 12 ore se repet operaia. Astfel, n timp de 36-48 de ore de la
nceperea experienei se obine dizolvarea n acid a tuturor substanelor minerale din os, rmnnd numai
substana organic. Osul i conserv forma, dar este foarte flexibil; dac este un os lung se poate chiar
nnoda. Oasele demineralizate pot fi pstrate ca oricare pies anatomic, n formol 5%. Ele pot fi cu
uurin tiate i disociate, iar dac se introduc ntr-o flacr ard complet.
b. Evidenierea substanelor minerale din os.
Evidenierea carbonului. Se pregtete o eprubet cu dop perforat prin care trece un tub de sticl
recurbat ce se prelungete la captul care rmne n afar cu un tub de cauciuc sau de material plastic. n
aceast eprubet se introduc fragmente uscate i mojarate dintr-un os degresat. ntr-o alt eprubet se
introduce Ca(OH)2. Peste pulberea de os se toarn aproximativ 5 ml HCl 15%, se pune repede dopul i
captul liber al tubului de cauciuc se introduce n apa de var. Sub aciunea HCl, n eprubet se dezvolt
bule de CO2, care barbotnd n apa de var o tulbur, deoarece se formeaz carbonat de calciu.
Evidenierea calciului. Un vrf de cuit de pulbere de os se pune ntr-o eprubet cu puin HCl 15%
pentru dizolvarea srurilor minerale. Se filtreaz. La filtrat se adaug o cantitate potrivit de H2SO4 15%.
Se amestec i se las cteva minute n repaus. Dup aceasta se ia cu o pipet efilat de sticl puin lichid
din fundul eprubetei. Se aeaz pe o lam de sticl, se acoper cu lamela i se examineaz la microscop.
Se observ cristale de sulfat de calciu (aciculare, prismatice, macle n form de fier de lance).
Evaporndu-se soluia la aer se mai formeaz numeroase alte cristale caracteristice .S-a demonstrat astfel
prezena calciului. n oase, acesta se gsete sub form de carbonat de calciu, fosfat tricalcic, fluorur de
calciu etc.
Evidenierea fosfatului se face astfel: se demineralizeaz un os cu acid azotic 5%. Soluia obinut
se filtreaz i filtratul se trateaz cu o soluie de molibdat de amoniu. Se obine colorarea soluiei n
galben i, prin nclzire uoar, i face apariia un precipitat de aceeai culoare. Este fosfatul de amoniu
care demonstreaz existena unui fosfatfosfatul tricalcic-hidratat din compoziia mineral a osului.
Adugm c printre substanele minerale din os se mai gsesc i sruri de magneziu. Datorit tuturor
acestor sruri minerale, osul are duritatea sa specific, iar rezistena la traciune este determinat de
fibrele care intr n constituia lamelor osoase, orientate n raport cu direcia aciunii forelor mecanice, a
marilor solicitri.
Concluzii. Osul este alctuit din substane organice- oseina (substan proteic) i grsimi- i din
substane anorganice, reprezentate prin carbonat de calciu, fosfat tricalcic hidratat, fluorur de calciu i
unele sruri de potasiu. Componentele chimice se pot separa prin calcinare i prin demineralizare cu acizi
anorganici slabi. Prin diferite tehnici de laborator pot fi evideniai ioni de Ca++, Mg++, carbonat, fosfat.
3.Structura microscopic a osului
Material necesar. Oase late i foarte subiri, de exemplu caren sternal de la o pasre,
lame, lamele, alcool, polizor cu piatr foarte fin, lame de ras sau bisturiu foarte bine ascuit, foarfece.
Mod de lucru: exist posibilitatea de a se obine uor preparate pentru observarea la
microscop a structurii osului.
n acest scop se pot utiliza cu succes buci mici cu suprafee de 1 cm2 dintr-o caren de pui de
gin. Se taie cu foarfecele poriunea translucid, care este i cea mai subire din caren i se cur cu
bisturiul sau cu lama esutul conjunctiv adiacent i periostul. Apoi cu bisturiul sau cu lama se rade pn
cnd osul devine att de transparent nct se poate citi prin el un text aezat dedesubt. Pentru a realiza o
subiere mai grabnic se umezete piesa cu o pictur de ap. La sfrit se spal preparatul cu ap i
alcool, apoi se aeaz pe lam n cteva picturi de ap, se acoper cu lamela i se examineaz la
microscop.
O metod pentru obinerea unei seciuni prin diafiza unui os lung este urmtoarea: se taie cu
fierstrul o poriune mic din diafiz i, dup ce se cur bine de mduv, periost, se degreseaz prin
inere n alcool, eter, benzen sau toluen. Fragmentul de diafiz se polizeaz cu rbdare pe o piatr fin
pn se obine o foi osoas transparent; aceasta se aeaz pe lam n cteva picturi de ap i se
acoper cu lamela.
88

Examinate la microscop, n ambele seciuni se pot vedea canalele Hawers i osteoplastele dispuse
n rnduri concentrice n jurul canalelor, precum i unele canalicule comunicante dintre osteoplaste.
Osteocitele nu se vd, ele au fost distruse prin autoliz, dar osteoplastele reproduc fidel forma
osteocitelor. Pentru a se vedea osteocitele trebuie s se realizeze o seciune foarte fin ntr-o poriune de
os care a fost, n prealabil, complet demineralizat. Seciunea se coloreaz.
Observarea la microscop a osteoplastelor se poate face i ntr-un fragment subire de opercul de la
un pete mic, care se pune ntre lam i lamel cu o pictur de ap.
Fragmentele foarte subiri de os pot fi incluzionate n balsam de Canada ntre lam i lamel.
Piesele se spal cu ap, apoi cu benzin, se las cteva zile s se usuce dup care se aeaz pe lam n
balsam.
Pentru a observa structura epifizelor se procedeaz astfel: se ia un os lung, se secioneaz epifiza
i o parte din diafiz cu fierstrul. Se cur de esuturile moi i se calcineaz la o flacr puternic. Cu
ochiul liber sau cu lupa se observ dispoziia substanei minerale rmase n epifiz. Acesta se prezint
format din trabecule orientate n evantai i ntretiate n corpul epifizei. Orientarea determin formarea
unei structuri adaptate pentru rezisten la traciune i presiune n direcia solicitrilor mecanice.
2

4
3

7
1

8
9
10
esut osos compact: 1. cavitate medular; 2. periost; 3.osteon; 4. arteriol; 5. venul; 6. nerv; 7. lamele osoase, 8. trabecule;
9. osteocit; 10. canal central

Studiul carbohidrailor
ntr-o eprubet pipeteaz 10 picturi de soluie de nitrat de argint 1% i tot attea picturi de
hidroxil de amoniu. Dup ce precipitatul format n eprubet s-a dizolvat adaug glucoz i nclzete
soluia.
Ce crezi c s-a format pe pereii eprubetei? ncearc s explici fenomenul!

89

Studiul enzimelor
a). Pregtete lucrarea de laborator cu ajutorul tabelului de mai jos! Numeroteaz eprubetele de la
1 la 4.

Materiale necesare: soluie de pepsin, burete din albu de ou, acid clorhidric 0,3% i 10%,
soluie diluat de carbonat de sodiu, baie de ap, stativ de eprubete, eprubete.
Pregtirea buretelui de albu de ou: se bate albuul de ou i se aeaz deasupra unui vas cu ap
cald. Dup cteva minute albuul se ntrete. Albuul de ou ntrit este lsat s se usuce.
Eprubeta
Soluie de pepsin
Burete din albu de ou
HCl 0,3%
HCl 10%
Soluie diluat de carbonat de sodiu
Aeaz cele 4 eprubete timp de 40 de
minute ntr-o baie de ap la
temperatura de 37C
Gradul de dizolvare al albuului de ou

1
3 ml
+
3 ml
-

2
3 ml
+
3 ml
-

3
3 ml
+
3 ml

4
3 ml
+
-

Completeaz propoziia de mai jos!

.este o enzim prezent n sucul gastric. Care este pH-ul sucului gastric?
b). Numeroteaz eprubetele de la 1 la 6 i cu ajutorul tabelului pregtete lucrarea de laborator!
Materiale necesare: soluie de amidon, saliv, iod-iodur de potasiu, soluie Fehling I. i II., stativ,
eprubete, baie de ap.
Eprubeta
1
2
3
4
5
6
Soluie de amidon
3 ml
3 ml
3 ml
3 ml
3 ml
Amilaz salivar
1 ml
1 ml
1 ml
1 ml
1 ml
Baie de ap
37C
37C
37C
20C
10C
Ghea
Rezultatul probei Lugol
Rezultatul probei Fehling
Dup 10-15 minute:
Proba Lugol: pipeteaz pe o sticl de ceas o pictur din fiecare eprubet. Adaug la fiecare prob
soluie de iod-iodur de potasiu.
Proba Fehling: ntr-o eprubet pipeteaz 10 picturi de soluie Fehling I. dup care adaug tot
attea picturi de soluie Fehling II. Din soluia obinut pipeteaz cte o pictur n fiecare din cele 6
eprubete.
Concluzii:
Cu proba Lugol se pun n eviden.
Cu proba Fehling se pun n eviden..
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Pe baza observaiilor asupra eprubetelor 1,2 i 3 ncearc s descoperi care sunt condiiile necesare
activitii amilazei salivare!
Pe baza observaiilor asupra eprubetelor 4,5 i 6 ncearc s determini care este temperatura
optim pentru activitatea enzimei salivare!
c). Pe baza observaiilor anterioare realizeaz graficele!
90

Activitatea amilazei salivare

Activitatea pepsinei din sucul gastric
Evidenierea lecitinei din ou
a).1/4 din glbenu pune ntr-un vas, peste care printr-o permanent amestecare, pe baie de ap,
torni 15 ml de etanol fierbinte.
De ce este etanolul util n extragerea lecitinei?
Ce substane se gsesc n suspensie?
Dup rcire, filtreaz soluia ntr-o eprubet. Aceast operaiune se repet, de attea ori, pn cnd
se obine o soluie transparent.
Emulsia conine
Filtratul conine
b) ntr-o eprubet pune 2 ml aceton, peste care pui cteva picturi de filtrat. Peste filtratul rmas
punei ap distilat.
Cum se comport lecitina n:
- aceton
- ap..
Scrie formula lecitinei! Scrie prile cu polaritate i fr polaritate ale moleculei.
Ce fel de solvent este apa?
Se dizolv n ea lecitina? De ce? S iei n considerare i mrimea moleculei.
Lecitina se dizolv n solveni care dizolv lipidele?
Face excepie lecitina?
Ce rol are lecitina n glbenuul de ou?
Maioneza se prepar prin adaos de ulei, ap, glbenu de ou i condimente. De ce trebuie uleiul
adugat sub form de picturi?
Analiza rezultatelor: datorit existenei prilor cu polaritate i fr polaritate, lecitina se dizolv n
etanol (excepie acetona), dar i n ap. Sub aciunea etanolului fierbinte, proteinele precipit i lecitina
ajunge n solvent. La fel precipit n aceton, iar n ap formeaz o soluie coloidal opalescent. Lecitina
din glbenuul de ou fixeaz att lipidele fr polaritate ct i cele cu polaritate. Cnd preparm
maioneza, lecitina emulsioneaz uleiul i creeaz o punte ntre suprafaa de contact ulei-ap.

Evidenierea vitaminei C
ntr-o eprubet pune 5 ml suc de lmie. Adaug tot atta acid acetic glacial peste care 4-5 picturi
de indicator de metil. Ce culoare va avea soluia?
nclzete soluia la 40-50C, dup care adaug KBrO3 (bromat de potasiu) de 0,01 mol. Ce
observi?
Vitamina C (acidul ascorbic) are legtur dubl, care sub aciunea oxidanilor se oxideaz (O2 din
aer, KBrO3).
Aceast metod se folosete i pentru stabilirea cantitii de vitamina C.
Ce boal apare n lipsa vitaminei C?
Analiza rezultatelor: soluia roie cu vitamina C sub aciunea bromatului de potasiu devine
treptat incolor. Lipsa vitaminei C produce scorbutul. Hidrosolubile sunt vitaminele B,C, iar liposolubile
vitaminele A,D, E, K. Datorit alimentaiei variate omul primete necesarul de vitamine/zi, dar cele
hidrosolubile trebuie asigurate zilnic pentru c nu se depoziteaz n organism

91

FIZIOLOGIE
Animale de experien
n cercetrile de fiziologie utilizarea animalelor este indispensabil. Se folosesc cini, iepuri,
cobai, oareci, obolani, pisici, maimue, broate. Dintre acestea cel mai frecvent se recurge la broate.
Prinderea animalului.
Broasca este un animal uor de prins:
-nu se ncearc prinderea de partea posterioar,
- la apropierea minii de partea posterioar animalul rspunde prin salturi, iar urmrirea este dificil;
- se recomand ca o mn s fie aezat n faa animalului, iar cealalt va prinde partea dorsal a broatei.
oarecele se prinde de coad cu mna liber.
obolanul este prins de pielea cefei cu o pens Kocker i cu mna stng de coad.
Imobilizarea
Broasca se imobilizeaz pe planeta confecionat din lemn moale sau o plac de lemn pe care se
lipete un strat subire de plut, care permite nfigerea uoar a acelor de laborator.
Fixarea se face prin introducerea acelor n membrele anterioare i posterioare n decubit dorsal sau
ventral, conform necesitilor de lucru. De obicei nainte de imobilizare se spinalizeaz broasca
(distrugerea mduvei spinrii) sau se decapiteaz.
Cnd experiena necesit integritatea sistemului nervos animalele sunt narcotizate cu uretan sau
cloroform i apoi sunt fixate pe planet. Cnd se folosete uretan 25%, acesta se injecteaz n sacii
limfatici ai broatei n cantitate de 0,2-0,8 ml. Dac se folosete cloroform se creeaz o atmosfer de
cloroform sub un clopot de sticl.
Spinalizarea
Se prinde broasca n palma stng i cu indexul se flecteaz capul n unghi de 45 de grade cu
trunchiul.
- ntre indexul i policele minii drepte se ine un ac care este lsat s alunece pe linia median a
capului n direcie caudal;
- ~ la 3mm n spatele liniei ce unete marginile posterioare ale timpanelor se simte un an
transversal ce corespunde cu articulaia occipito-vertebral;
- se neap cu acul pielea din aceast regiune pn se ajunge n canalul rahidian, apoi se orienteaz
acul n direcie caudal i se ptrunde n canalul vertebral;
- cnd se simte o rezisten nseamn c acul nu se afl n canal;
- prin rotirea acului n canalul vertebral se distruge mduva, avnd loc extensia puternic a
membrelor;
- n acest moment rspunsul motor la ciupire lipsete.
Decapitarea
Este necesar pentru a menine integritatea mduvei:
- broasca se ine cu partea dorsal n palm, iar degetul arttor prinde mandibula i o coboar;
- se ptrunde cu foarfeca n cavitatea bucal i se secioneaz de-a lungul liniei retro-oculare.
Analiza arcului reflex
Materiale necesare: broasc, trus de disecie, crlig pentru suspendat broasca, CH3-COOH,
soluie 5%, vat, excitator electric.
Mod de lucru:
- se decapiteaz broasca i se suspend de un stativ cu ajutorul unui crlig, apoi se ateapt 10-15
minute pentru a trece ocul operator, cauzele acestuia fiind traumatismul suferit i deconectarea
mduvei de centrii nervoi superiori.
1. Se introduce degetul labei posterioare n soluie de CH3-COOH 5% i asistm la retracia labei
(reflex de flexie), rezultnd c toate elementele arcului reflex sunt intacte;
92

2. Se evideniaz nervul sciatic pe sub care se trece un fir de a fr a-l lega, apoi se nfoar laba
broatei cu vat mbibat n cloroform sau novocain. Dup ~ 15 minute se ndeprteaz vata i se
introduce laba n CH3-COOH 5%. Reflexul nu mai are loc pentru c au fost anesteziai receptorii.
Se spal apoi 15 minute laba anesteziat, rezultnd reluarea reflexului;
3. Sub nervul sciatic, ct mai aproape de genunchi se introduce un tampon mbibat n novocain,
- se noteaz momentul dispariiei reflexului, stimulnd din minut n minut,
- dispariia reflexului se datoreaz anestezierii fibrelor senzitive ale nervului sciatic (nerv mixt),
- se stimuleaz tegumentul deasupra nivelului tamponului i se observ prezena reflexului
- dup un timp nici aceast stimulare nu mai declaneaz rspunsul reflex pentru c au fost
anesteziate i fibrele motorii ale nervului sciatic,
- aceste efecte pot fi obinute mai simplu, prin secionarea nervului sciatic
4. Cu ajutorul acului de spinalizat se distruge mduva i se constat dispariia tuturor reflexelor.
Concluzie:
Condiia esenial pentru producerea actului reflex este integritatea arcului reflex. ntreruperea lui
duce la dispariia reflexului.
Oboseala sinaptic
Noiunea de sinaps a fost introdus n fiziologie de Sherrington i se refer la locul de contact
ntre dou celule nervoase.
Ulterior noiunea de sinaps a fost extins i la jonciunile neuro-efectoare (placa motorie), sinapsa
reprezentnd poriunea cea mai fatigabil a unui circuit nervos.
Materiale necesare:broasc, trus de disecie, excitatoare, bobin de inducie, redresor,
ntreruptor Morse, soluie Ringer, cloroform.
Mod de lucru:
I.
1. - se decapiteaz broasca i se evideniaz cei doi nervi sciatici;
2. - sub sciaticul stng se plaseaz un excitator electric,
- se ndeprteaz la maxim cele dou bobine i apoi se crete intensitatea curentului electric prin
apropierea bobinelor,
- se excit sciaticul stng,
- cnd intensitatea curentului este suficient de mare pentru a determina i contracia reflex a labei drepte,
se stimuleaz n continuare pn cnd membrul posterior drept nu se mai contract;
3. se ateapt 30 de secunde pentru a fi convini c laba nu se mai contract,
- se stimuleaz sciaticul stng n continuare, astfel nct laba respectiv se contract
Interpretare:
Dup ce se plaseaz i sub sciaticul drept un al doilea excitator, se observ c de data aceasta,
membrul posterior drept, care fusese obosit, i reia activitatea. Explicaia const n instalarea
fenomenului de oboseal la nivelul sinapselor medulare.
II.
1. cu ajutorul acului de spinalizat se distrug centrii medulari,
2. - sub sciaticul stng se introduce un tampon de vat mbibat cu cloroform i se ateapt 5 minute
pentru ca acesta s-i fac efectul (blocheaz conductibilitatea nervoas),
- se stimuleaz ambii nervi sciatici prin impulsuri date cu ntreruptorul Morse i se constat c numai
laba dreapt prezint contracii reflexe deoarece sciaticul stng este scos din funciune.
3. se continu stimularea pn ce membrul posterior drept nu mai rspunde deoarece s-a instalat
fenomenul de oboseal,
- se scoate tamponul din partea stng i pe msura restabilirii funcionalitii nervului se constat
c laba stng i reia activitatea.
4. cu un excitator de mn se stimuleaz direct gastrocnemianul drept care fusese obosit,
- n acest caz are loc contracia gastrocnemianului, ceea ce arat c la nivelul muchiului nu s-a
instalat fenomenul de oboseal muscular,
93

- pe tot parcursul experienei nervii sciatici se umecteaz cu soluie Ringer.

Interpretare:
n cazul experimentului II se deduce instalarea fenomenului de oboseal la nivelul plcii motorii.
Oboseala se datoreaz epuizrii rezervelor de mediator chimic din butonul sinaptic; n cazul plcii
motorii mediatorul chimic este acetilcolina.
Ordinea instalrii fenomenului de oboseal este urmtoarea:
- la nivelul centrului nervos,
- la nivelul plcii motorii,
- la nivelul fibrei musculare.
Fiziologia muchilor: preparate neuromusculare, contracia muscular, .
Preparate neuromusculare.
Pentru demonstrarea proprietilor muchilor se folosete preparatul neuromuscular. Preparatele
neuromusculare sunt ansambluri de uniti funcionale reprezentate prin muchi i nervii lor motori.
Preparatele neuromusculare pot fi detaate complet din organism sau pot fi lsate n continuare n
organism, respectnd relaiile vasculare i relaia nervului cu centrii medulari. Astfel de preparate sunt
denumite in situ. Pe asemenea preparate excitarea muchiului se face indirect, adic prin excitarea
nervului corespunztor. Acest mod de excitare are avantajul c transmite excitaia la toate unitile
musculare i se obin rezultate mai bune. Preparatele neuromusculare obinute de la animalele
poichiloterme i pstreaz timp ndelungat viabilitatea fr s fim nevoii s asigurm pe durata
experienei temperatura constant, egal cu cea corporal, aa cum ar fi cazul preparatelor
neuromusculare obinute de la homeoterme.
Material necesar: Broasc, instrumente de disecie ,planet sau cuv de disecie, ace de disecie, ,
ace cu gmlie, baghete de sticl cu vrful bont,, lam de sticl, ser fiziologic, vat, dispozitiv pentru
excitaie electric (de la reea, de la acumulator sau de la o baterie electric de buzunar), fire de a.
Modul de lucru. Se paralizeaz broasca prin distrugerea axului cerebrospinal i se fixeaz cu faa
ventral pe planet, cu membrele n extensie, cu ajutorul unor ace cu gmlie. Se ndeprteaz
tegumentul unui membru posterior, apoi se disociaz masa muscular a coapsei n plan axial, cu ajutorul
unei baghete de sticl cu vrf bont. Se disociaz nervul sciatic situat ntre muchiul triceps i
semimembranos. Nervul este flancat de artera i vena femural de care trebuie degajat. Dup ce a fost
izolat, nervul se secioneaz ct mai aproape de regiunea coccigian. Disociem acum muchiul
gastrocnemian inserat la captul su inferior prin tendonul lui Ahile. Cu ajutorul unei baghete de sticl cu
vrf bont se introduce un fir de a pe sub tendon i se leag strns, apoi se secioneaz tendonul sub
aceast legtur. inndu-se de capetele firelor de a ale legturii se ridic muchiul i se detaeaz prin
secionarea piciorului deasupra i sub articulaia tibiofemural. n acest fel se pstreaz inseria proximal
a muchiului gastrocnemian pe o poriune de os femural. Aceast articulaie fixat cu ace n msua
miografului va constitui todeauna captul fix al preparatului neuromuscular, iar tendonul, prin firul de a
conectat la prghie, constituie captul mobil. Se va evita lezarea nervului prin ntindere, ciupire, presare.
S-a obinut astfel preparatul neuromuscular gastrocnemian sciatic. Se aeaz preparatul pe o lam curat
de sticl i se acoper cu un tampon de vat mbibat cu ser fiziologic, pentru a evita deshidratarea
nervului. n acest mod preparatul va rezista un timp oarecare.
Contracia simpl sau secusa
Este contracia unic a unui muchi determinat de excitarea lui cu un excitant care acioneaz o
singur dat, indiferent dac se aplic direct sau indirect.
Material necesar: O broasc, instrumente de disecie, kinograf, miograf, band de hrtie, lamp
cu motorin, surs de curent continuu, ntreruptor.
Mod de lucru. Mai nti se monteaz o instalaie electric necesar excitrii. Se izoleaz apoi un
preparat gastrocnemian-sciatic. Prin dispozitivul de nregistrat se asigur nscrierea curbelor caracteristice
tipurilor de contracie. Cnd se apas pe butonul ntreruptor, se stabilete circuitul electric, se produce o
variaie brusc a intensitii excitantului ceea ce are ca efect declanarea contraciei. Muchiul se
scurteaz repede, apoi se relaxeaz revenind la starea de repaus, adic recapt lungimea de la nceput.
Penia nscrie pe suprafaa de nregistrare o urm- miograma. Cnd se ridic degetul de pe ntreruptor, se
produce din nou o variaie brusc a intensitii excitantului, care determin o nou secus, de intensitate
94

mai mic. Atta timp ct prin muchi continu s treac curent electric de intensitate constant, nu apar
fenomene vizibile. Rezult c muchiul rspunde prin contracii att la stabilirea curentului ct i la
ntreruperea lui pentru c, n ambele cazuri, se produc variaii brute ale intensitii curentului. Se obin
deci dou secuse, ambele putndu-se nregistra succesiv. Subliniem c pentru obinerea celei de-a doua
secuse nu se ntrerupe circuitul nainte ca muchiul s se fi relaxat complet, dup prima excitare.
Analiznd miograma obinut n condiiile de mai sus putem delimita:
1) perioada de contracie marcat prin traseul ascendent al curbei;
2) perioada de relaxare marcat prin traseul descendent
Contracia susinut sau tetanosul fiziologic.
Dac mai multe excitaii se succed la intervale mai scurte dect durata unei secuse se obine o
contracie susinut prelungit sau tetanic. Att timp ct dureaz aciunea repetat a excitaiilor, cea de-a
doua excitaie acionnd n timpul fazei de relaxare a muchiului, relaxarea nu se mai continu i se
produce o nou contracie, pe miogram traseul este din nou ascendent. Dac urmeaz excitaii, distanate
n acelai fel, se obin rezultate asemntoare celor precedente; ntregul traseu apare ca o linie sinuoas.
S-a obinut astfel o fuziune incomplet de contracii, adic un tetanos fiziologic incomplet. Deci n
tetanosul incomplet, dup fiecare contracie are loc un nceput de relaxare, care nu se definitiveaz
datorit excitaiei succesive
A. Kimograful i nregistrarea secusei i
tetanosului:
ce determin o nou stare de
1. cilindru inscriptor
contracie. Dac excitaiile se
2. peni
3. gastrocnemian de broasc
petrec cu o frecven mai
4. dispozitiv electric pentru nregistrarea
mare, cea de-a doua i
timpului
5. pil electric
urmtoarele
acioneaz
6. bobin de inducie
asupra muchiului n timpul
B. Graficul i analiza unei secuse
musculare
fazei de scurtare sau la finele
a-b perioada latent
acestei stri; se observ c
b- c- perioada de contracie
c- d- perioada de relaxare
muchiul rmne contractat
tot timpul ct se produc
aceste
excitaii.
Traseul
miogramei n continuare este
o linie orizontal. S-a obinut
astfel un tetanos fiziologic
complet. n strile de tetanos
complet, succesiunea mare a impulsurilor determin meninerea total i permanent a muchiului n stare
de contracie. n organism datorit frecvenei mari a impulsurilor nervoase motoare (200-300 pe sec.)
muchiul este meninut n stare de contracie tot timpul ct dureaz un travaliu. n concluzie, succesiunea
rapid a impulsurilor determin meninerea total i permanent a muchiului n stare de contracie.
Demonstrm tetanosul fiziologic incomplet i complet folosind curentul continuu de 3-5 voli, cu condiia
s acionm ntreruptorul cu o frecven corespunztoare, provocnd minimum 20 excitaii pe secund.
Pentru nregistrare ne servim de aceeai instalaie cu care am fcut nscrierea unei contracii simple.
Singura deosebire este viteza cu mult mai mic de rotire a cilindrului. Pentru nregistrare se aduce penia
n contact cu hrtia kimografului, care se deplaseaz i, dup ce penia a nscris pe hrtie o mic poriune
de linie dreapt, apsm brusc pe butonul ntreruptorului de 3-4 ori la intervale rare i se constat c se
obin tot attea secuse, nregistrate numai n intensitate. Se mrete frecvena excitaiilor i se
nregistreaz un traseu care prezint platoul dinat al tetanosului incomplet. Se mrete acum i mai mult
frecvena excitaiilor (20- 30 pe secund) i se obine o curb cu un platou neted al tetanosului complet.

95

Legile reflexelor
Se ia o broasc spinal (broasca decapitat cu centrii medulari intaci). Dup 10 minute, pentru
depirea ocului spinal, broasca decapitat se suspend pe un stativ cu o srm introdus prin planeul
bucal. Stimulai pielea gambei, prin aplicarea unor buci de hrtie de filtru mbibate cu acid sulfuric de
concentraii diferite: 0,1- 0,3, 0,5; 0,7; 1 i 2%. Dup fiecare testare, splai gamba cu ap i uscai-o
prin tamponare cu hrtie de filtru. Se obin reacii de rspuns tot mai ample, proporionale cu concentraia
acidului sulfuric folosit, potrivit legilor lui Pfluger:
Legea localizrii. La excitarea cu concentraia slab de acid sulfuric (0,1- 0,3 %) se observ o uoar
schi a labei piciorului.
Legea unilateralitii. La concentraii de 0,5% , obinem flexia ntregului membru posterior.
Legea simetriei. La o,7% se constat c broasca flecteaz puternic membrul posterior respectiv, i
concomitent, flecteaz membrul posterior de partea opus.
Legea iradierii. Utiliznd o
hrtie de filtru mbibat cu
A.
Demonstrarea
acid sulfuric 1% se obin
legilor lui Pflger:
a- broasc decerebrat
contracii
ale
tuturor
b- vas cu ap acidulat
extremitilor.
1legea localizrii
Legea generalizrii. La o
2- legea unilateralitii
concentraie de 2% se produc
3- legea simetriei
convulsii generalizate ale
4- legea iradierii
5- legea generalizrii
musculaturii membrelor i
6- legea coordonrii
trunchiului.
B. Schema reaciei
n locul acidului se poate folosi,
conform legilor lui
ca stimul, un curent de inducie a
Pflger
crui intensitate va fi crescut
progresiv.

96

ANALIZATORI

1.Analizatorul cutanat
Analizatorul cutanat este ansamblul morfofuncional prin care organismul obine: a) senzaii
tactile, de pipit, presiune; senzaii termice; senzaii dureroase. Receptorii cutanai sunt localizai n
tegument, unii liberi, alii ncapsulai. Cei specializai pentru excitaiile tactile i termice se gsesc n
epiteliul de acoperire al tegumentului i mucoaselor. Receptorii tactili i termici au o densitate mai mare
variabil dintr-un loc n altul, determinnd diferenieri n gradul de acuitate tactil i termic pe diferite
suprafee tegumentare.
Determinarea sensibilitii tactile.
Esteziometria este o metod de msurare a sensibilitii tactile pe suprafaa tegumentului.
Sensibilitatea tactil este cu att mai fin, cu ct n regiunea tegumentar cercetat sunt prezeni mai muli
corpusculi tactili.
Material necesar . Esteziometrul este un aparat alctuit dintr-o rigl metalic gradat, susinut
de un mner plasat n mijlocul ei. Pe rigl se gsesc doi cursori, situai de o parte i de alta a mnerului i
care pot fi deplasai de la mijlocul la extremitile riglei.
Distana cu care se deplaseaz un cursor se citete pe rigl.
La capetele inferioare ale cursorilor se pot aplica dou
vrfuri ascuite, din os, sau dou butoane metalice, dup
cum dorim s msurm sensibilitatea tactil sau la presiune.
Pentru msurarea acesteia din urm, pe fiecare cursor se
afl i o gradaie, care indic valoarea presiunii. n absena
esteziometrului poate fi folosit un compas sau un ubler.
Mod de lucru.
Determinarea sensibilitii la contact. Un elev servete drept subiect. El trebuie s nchid ochii pentru
a nu vedea deplasarea cursorilor i, atunci cnd se aplic cele dou vrfuri pe o regiune tegumentar,
s declare cte contacte simte. Un cursor rmne la zero, cellalt se deplaseaz progresiv n lungul
riglei. n felul acesta se mrete spaiul dintre cele dou vrfuri i se citete pe rigl distana la care se
gsesc cnd subiectul declar c simte dou puncte de contact. Astfel se exploreaz mai multe regiuni
tegumentare pentru a se vedea diferenele de sensibilitate. Cu ct mai mare este distana ntre cele
dou vrfuri, aplicate pe o regiune tegumentar n momentul cnd subiectul percepe dou contacte, cu
att sensibilitatea tactil este mai mic, fiind dependent de numrul de corpusculi tactili repartizai n
acea regiune tegumentar. Dm cteva valori medii pentru mai multe regiuni:
Vrful limbii= 0,5 mm, buza inferioar 1,5 mm, buza superioar 1 mm, brbie 7 mm, frunte 4 mm,
obraji 4,5 mm, tmpl 7 mm, ceaf 20 mm, dosul minii 6 mm, palma 4 mm, antebra 15 mm, coaps
7 cm, vrful degetelor 1-2 mm, spate 5-6 cm.
Determinarea sensibilitii la presiune. Se nlocuiesc vrfurile ascuite ale cursorilor cu butoni
metalici. Se apas cu aceti butoni pe o regiune
tegumentar pn cnd subiectul declar c
simte presiunea exercitat. Se citete pe rigla
Experiena lui Aristotel:
vertical, gradat a cursorului valoarea presiunii
1- contactul cu bila avnd
exprimate n mg.
degetele alipite
2- contactul unei singure
bile cu degetele ncruciate
3- teritoriile tegumentare
receptoare excitate n (2)
sunt suficient de distanate
pentru a determina senzaia
dubl

Experiena lui Aristotel. Regiunile tegumentare

au n scoara cerebral zone de proiecie bine
precizate, ale cror raporturi spaiale reproduc pe
acelea ale regiunilor tegumentare luate n
consideraie. Aceasta poate fi demonstrat prin
clasica experien a lui Aristotel.
Se procedeaz n felul urmtor: se aeaz o
bil cu diametrul de 0,5 cm ntre vrfurile degetului arttor i celui mijlociu . Se capt senzaia unei
97

singure bile deoarece proiecia cortical a regiunii interne a degetului arttor i cea a regiunii
tegumentare externe a degetului mijlociu sunt foarte apropiate. Dac subiectul ncrucieaz cele dou
degete i palpeaz bila, va avea senzaia a dou bile deoarece, de data aceasta, au fost excitate terminaiile
tactile de pe suprafaa extern a degetului arttor i cele de pe suprafaa intern a degetului mijlociu, iar
aceste dou regiuni tegumentare se proiecteaz pe scoar n dou puncte diferite, mai ndeprtate. n
consecin de formeaz senzaii separate de atingere a bilei, n fiecare zon cortical.
Observaie. Sensibilitatea de contact i de presiune are ca excitant un agent mecanic care prin apsare
mai slab sau mai puternic determin o deformare a tegumentului i ca urmare excitarea receptorilor
tactili Meissner i de presiune Vater-Pacini. Cnd presiunea se exercit cu aceeai intensitate pe o
suprafa mare de tegument, ea nu se simte dect la marginea zonei de contact. Aa de pild, cnd ne
aflm cu tot corpul n ap nu simim presiunea exercitat asupra tegumentului de masa de ap. Tot aa
dac ntr-un vas cu mercur vrm mna n metalul lichid, nu simim presiunea la suprafaa de contact cu
mercurul. Simim ns presiune i ntr-un caz i n altul la marginile zonei de contact. Avem impresia c
numai n acel loc se exercit fora de apsare.
De asemenea nu simim presiunea exercitat de sus n jos cnd stm n picioare cu tlpile aezate pe o
suprafa neted, ns prezena pe aceast suprafa a unui grunte ct de mic este simit, datorit forei
de apsare, deci de deformare a tegumentului i implicit a excitrii receptorilor cu o intensitate mai mare
la locul unde se afl asperitatea respectiv.
Receptorii tactili se adapteaz uor la presiune, de aceea contactele permanente nu sunt percepute. Aa
face ca mbrcmintea, nclmintea, inelul din deget nu se fac simite.
Acuitatea tactil crete la orbi nu printr-o mrire a densitii corpusculilor tactili n tegumentul de la
vrful degetelor, ci printr-o perfecionare compensatorie, realizat prin exerciiu care duce la o capacitate
de analiz crescut n segmentul cortical al analizatorului cutanat tactil.
2 .Analizatorul olfactiv
Analizatorul olfactiv este ansamblul morfofuncional prin intermediul cruia se formeaz senzaia
olfactiv. Excitanii adecvai ai receptorilor olfactivi sunt substane chimice ce se gsesc n stare volatil,
n aerul inspirat. Receptorii olfactivi sunt situai n epiteliul senzorial al mucoasei nazale olfactive din
cornetul superior. n respiraia curent aerul atinge doar marginea anteroinferioar a cornetului nazal
superior i astfel, mucoasa olfactiv nu vine n contact cu aerul proaspt. Datorit difuziunii aerului
expirat n interiorul spaiului cornetului superior se produce senzaia olfactiv. Prin adulmecare aerul
inspirat este antrenat mai intens spre cornetul nazal superior i astfel excitarea chemoreceptorilor olfactivi
se face mult mai repede cu laten mai mic. Pragul de excitare al receptorilor olfactivi este variabil cu
starea fiziopatologic a subiectului i cu durata de aciune a substanei mirositoare.
n legtur cu fiziologia analizatorului olfactiv propunem urmtoarele experiene:
Se vor pregti sticlue cu substane odorante : benzen, toluen sau alt substan volatil, n
concentraia cea mai mic care poate fi perceput i se va cere unui elev s identifice mirosul. Se va
observa c el va face o inspiraie profund sau inspiraii scurte, repetate, de adulmecare. Dup
cteva exerciii reuete s identifice dup miros substana odorant.
Se va da unui elev s mnnce, de pild, un mr cu o anumit arom i i se va cere s spun dac
simte mirosul deosebit. Se va observa c acesta, triturnd mrul n cursul masticaiei, expir aerul
din cavitatea bucal, prin coane, spre cavitile nazale. Acest procedeu al degustrii este folosit n
aprecierea aromelor substanelor alimentare.
Se d unui elev s inspire timp ndelungat aer n care se gsete o cantitate crescut de substane
odorante. Elevul declar dup un timp c nu mai simte mirosul respectiv. nlocuind substana
odorant, elevul declar c simte mirosul noii substane.
Explicaie. n primul caz s-a produs oboseala receptorilor olfactivi pentru acea substan,
receptorii rmnnd totui sensibili pentru o nou substan.

98

Olfactometria.
Gradul de olfacie poate fi apreciat prin msurarea minimului de substan odorant identificabil,
echivalent cu pragul de percepere. Metoda de msurare a acuitii olfactive este olfactometria. n acest
sens se folosete olfactometrul
Zwaardemacker
sau
unul
improvizat. Acest aparat const
dintr-un tub de sticl lung de
Olfactometrul
3
circa 40 cm cu un capt ndoit
Zwaardemacker:
pentru a putea fi introdus n
1- tub de sticl gradat
2 1
narin. Cellalt capt prezint
2- tub poros
gradaii, la intervale de 0,5 cm.
3- paravan
Poriunea gradat a tubului de
sticl alunec n interiorul unui
alt tub din material poros sau n
interiorul unui tub de cauciuc.
Dac acest al doilea tub este scos
din tubul 1 (gradat) se poate citi
pe acesta din urm distana cu care tubul 2 depete tubul 1.
Mod de lucru. se impregneaz tubul poros cu o substan odorant dup care se introduce n
interiorul lui tubul de sticl gradat, potrivindu-se cap la cap. Se aplic un paravan de hrtie n apropierea
captului ndoit al tubului gradat pentru ca subiectul s nu vad cu ct alunec tubul poros n afar.
Subiectul este invitat s inspire puternic i scurt de cteva ori. Cnd cele dou tuburi se gsesc cap la cap,
aerul inspirat nu vine n contact cu substana odorant din tubul poros i n consecin subiectul nu are
nici o senzaie olfactiv. Dup aceasta, experimentatorul face s alunece ncet tubul poros de pe tubul de
sticl pn cnd subiectul declar c a simit mirosul substanei cu care a fost impregnat tubul poros. Cu
ct suprafaa tubului poros care vine n contact cu aerul inspirat este mai mare, cu att numrul
particulelor mirositoare antrenate de aer este mai mare i acuitatea olfactiv este mai mic i invers. Dup
10 minute se utilizeaz un alt tub poros impregnat cu o alt substan i se cerceteaz acuitatea olfactiv
n raport cu acesta. Se constat c acuitatea olfactiv variaz n funcie de substana mirositoare cercetat.
Sensibilitatea olfactiv variaz n funcie de umiditate, temperatur, presiune atmosferic (factori externi),
precum i n funcie de starea fiziologic (factori interni). Astfel, n strile emotive acuitatea olfactiv
crete. Starea de inflamaie a mucoasei nazale micoreaz sensibilitatea olfactiv. Adaptarea la un anumit
miros duce la diminuarea acuitii olfactive pentru acesta.
Concluzii. Analizatorul olfactiv este un analizator chimic, exteroceptorii olfactivi sunt excitai de
substane odorante din mediu. Importana biologic a sensibilitii olfactive const n decelarea prezenei
n aer a unor substane chimice dintre care unele ar putea fi nocive. mpreun cu simul gustului are rol n
controlul calitii alimentelor.
3 .Analizatorul optic
Analizatorul optic este ansamblul morfofuncional prin care se formeaz i se analizeaz senzaiile
luminoase. Studiul anatomic al organului de sim se poate face pe ochi de bou luat din abator sau pe ochi
neenucleai, atunci cnd dispunem de capul unui mamifer, pentru a studia organele anexe.
Mod de lucru. In situ putem observa organele de protecie, pleoapele care delimiteaz fanta
palpebral. n structura pleoapei se afl o lam scheletic- tarsul- format din esut fibroelastic, care poate
fi palpat cu uurin. Apucnd cu pensa o pleoap i rsfrngnd-o se observ conjunctiva care
cptuete faa intern a pleoapelor i faa extern a globului ocular pn la limita corneei. n unghiul
intern, nazal, al ochiului vedem pliul semilunar, vestigiu al celei de-a treia pleoape existente la psri,
reptile, batracieni. Secionnd pleoapa superioar n unghiul extern observm glanda lacrimal.
Secionnd apoi conjunctiva de jur mprejur se ptrunde n cavitatea orbital. Pentru a scoate afar globul
99

ocular secionm inseriile muchilor de pe ecuatorul globului ocular i nervul optic. Examinnd spaiul
orbital observm c este umplut cu grsime, c cei ase muchi ai globului ocular formeaz un con prin
mijlocul cruia trece nervul optic i sunt inserai la cealalt extremitate, n fundul peretelui orbital.
Disecia globului ocular. ncepe cu curirea lui de grsime, esut conjunctiv, muchi pn se
ajunge la prima tunic- sclerotica. Aceasta este o membran de culoare alb- cenuie, fibroas, opac
bombat i transparent anterior- corneea transparent, iar la polul posterior al globului ocular, strbtut
de nervul optic. Cu un bisturiu ascuit sau cu o lam de ras se face o incizie n sclerotic, pe linia
ecuatorial, evitnd ptrunderea n cavitatea globului ocular. Cnd se ajunge la coroid se nceteaz
secionarea n profunzime. Cu o foarfece curb orientat cu vrful n sus, introdus n incizia nceput cu
bisturiul, se continu selecionarea scleroticii pe linia ecuatorial Plecndu-se de la marginile seciunii se
fac alte seciuni orientate spre emergena nervului optic. Sclerotica fiind uor aderent de coroid,
lambourile scleroticii se detaeaz n evantai i se fixeaz cu ace pe planet. Se observ ochiul delimitat
de coroid, membran de culoare brun pe faa dinspre sclerotic i neagr pe faa dinspre retin cci
desprinzndu-se de retin de care e lipit, ia cu sine i ptura pigmentar neagr a retinei (care nu-i
aparine dar care e intim aderent de coroid). Procedm apoi la ndeprtarea jumtii anterioare a
scleroticii, pentru care facem o seciune cu foarfecele, pn la cornee i o ndeprtm mpreun cu
aceasta. Globul ocular rmne astfel fr sclerotic i cornee, delimitat numai de coroid. Astfel s-a
deschis camera anterioar din care se scurge umoarea apoas. Verificm rezistena la traciune a
scleroticii, se examineaz irisul care are la mijloc un orificiu circular- pupila. Irisul detaat este pus pe o
lam de sticl, cu partea intern n sus pentru a fi observat. ndeprtnd irisul descoperim faa anterioar
cristalinului. Prin transparena cristalinului, cu rol de lentil, se poate examina fundul ochiului. Se vd
retina cu pata oarb i cu pata galben, vasele de snge. Se desprinde acum cristalinul i i se examineaz
proprietile optice: se citete prin el un text de ziar i se observ c literele apar foarte mrite. Lund
cristalinul ntre degete pentru a aprecia gradul de consisten la o uoar presiune se desprinde uor o
membran fin, denumit capsula cristalinului. Dup ndeprtarea cristalinului apare umoarea vitroas
care formeaz un corp transparent, omogen, cu o consecin caracteristic. Dup golirea camerei
posterioare de corpul vitros se poate observa direct retina.
Concluzie. Corneea ,umoarea apoas, cristalinul, umoarea sticloas sunt medii transparente cu o
consisten diferit, ceea ce confer variate grade de refracie i realizeaz n ansamblu un sistem dioptric
adecvat formrii imaginii pe retin. n repaus acest sistem dioptric are aproximativ 60 dioptrii.
Acomodarea ochiului
Capacitatea ochiului de a vedea obiectele clar n spaiu se datorete proceselor de adaptare care au
loc la nivelul irisului, cristalinului i al retinei. Aceast adaptare poart numele de acomodare i poate fi
demonstrat astfel:
Reflexul pupilar pentru dozarea intensitii luminii
Este un reflex fotomotor de acomodare. Datorit variaiei diametrului pupilei, ochiul are capacitatea
de a regla cantitatea de lumin ce ptrunde n interiorul lui. Mrirea sau micorarea spaiului pupilar este
determinat de starea de contracie sau relaxare a fibrelor musculare din iris, dispuse radiar i circular.
Cnd fibrele musculare radiare se contract, cele circulare se relaxeaz, spaiul pupilar crete, fenomen
denumit midriaz, iar cantitatea de lumin ce ptrunde n ochi este mai mare. Cnd fibrele musculare
circulare se contract, cele radiare se relaxeaz, spaiul pupilar se micoreaz, fenomen denumit mioz.
Mioza i midriaza sunt reflexe fotomotorii coordonate de sistemul nervos vegetativ.
Este aezat un elev n faa unei surse de lumin, i se acoper ochii cu palma i se ine astfel 2-3
minute. I se atrage atenia elevului c la descoperire s priveasc cu ochii larg deschii spre sursa de
lumin. Se ndeprteaz palma i i se privesc pupilele . Se constat c la nceput acestea sunt mult
mrite, dar c ele se micoreaz treptat i destul de repede, devenind punctiforme, dac sursa de
lumin este puternic. La ntuneric s-a produs midriaz, la lumin mioz.
Procednd ca n cazul precedent se ridic palma de pe un singur ochi, care astfel este expus direct
luminii. De pe cellalt ochi palma se ridic puin, fr a da posibilitatea luminii s acioneze direct
asupra irisului, dar permind observarea ochiului. Se observ c i acest al doilea ochi prezint
100

reflexul pupilar de mioz dei el nu a fost expus direct aciunii luminii. Fenomenul se explic prin
aciunea constrictoare sinergic a muchilor iridoconstrictori inervai de parasimpatic
Acomodarea pentru vederea obiectelor situate la distane diferite.
Vederea clar a obiectelor situate la distane diferite ntre punctele remotum i proximum se realizeaz
prin activitatea reflex a muchilor ciliari, care determin modificarea curburii suprafeei cristalinului, cu
intensitatea necesar focalizrii razelor de lumin pe retin. Demonstrm aceasta prin urmtoarele
experiene:
Imaginile lui Purkinje. ntr-o camer obscur aezm n faa ochiului unei persoane care privete n
deprtare, puin lateral fa de axul ochiului, o lumnare aprins i din partea cealalt, din acelai
unghi, privim spre pupila respectiv. Vom observa trei imagini oglindite ale fcliei lumnrii, dintre
care dou sunt drepte i una rsturnat. Cea mai luminoas este cea reflectat de faa anterioar a
corneei, care se comport ca o oglind convex i este o imagine dreapt. A doua imagine, cea
mijlocie, este de asemenea dreapt, dar ceva mai mare i mai puin luminoas i este reflectat de faa
anterioar a cristalinului, care se comport tot ca o lentil convex. A treia imagine este mai mic,
rsturnat, i reprezint imaginea reflectat de faa posterioar a cristalinului care joac rolul unei
oglinzi concave. Dup observarea celor trei imagini invitm subiectul s priveasc un obiect apropiat.
Se constat c imaginile date de feele cristalinului s-au micorat. Mai evident este micorarea celei
de-a doua imagini, dat de faa anterioar a cristalinului. n timpul acomodrii pentru vederea
obiectului apropiat, convexitile suprafeelor anterioar i posterioar ale cristalinului se mresc prin
micorarea razelor de curbur, aceast convexitate fiind mai intens pentru suprafaa anterioar.
Imaginile lui Purkinje:
A- ochiul neacomodat
B- ochiul acomodat
1, 1I- imagini formate pe faa anterioar a
corneei
2, 2I- imagini formate pe faa anterioar a
cristalinului
3, 3I- imagini formate pe faa posterioar a
cristalinului

Mecanismul acomodrii pentru distan poate fi pus n eviden i n felul urmtor: subiectul fixeaz
cu privirea un obiect pe care-l ine cu mna sa avnd braul ntins. Observatorul st ntr-o parte , cu
faa spre subiect i-i privete acestuia ochiul. Se comand subiectului s apropie obiectul din ce n ce
mai mult. Ochiul se acomodeaz pentru distane din ce n ce mai mici. Dou fenomene sunt
perceptibile observatorului: mai nti o variaie a diametrului pupilar care devine mai mic pe msura
apropierii obiectului, apoi o uoar deplasare nainte a irisului, provocat de bombarea feei anterioare
a cristalinului.
Cristalinul nu se poate acomoda n acelai timp dect pentru o singur distan. Prin experiena
urmtoare se poate face dovada acestui fapt.
Material necesar. O planet de desen sau tabla clasei, un text tiprit, o bucat de tifon sau o sit
metalic.
Mod de lucru. Se aeaz pe planet sau pe tabl textul tiprit, iar n faa lui la o oarecare distan se
ntinde tifonul sau sita. Privind prin sit de la oarecare distan se constat c se poate citi textul, dar nu se
distinge clar reeaua sitei. Dac se fixeaz ns privirea asupra reelei sitei, caracterele textului se vd
difuz i nu se pot citi. Aceeai experien se poate face i mai simplu innd un vrf de creion ntre textul
tiprit i ochi. Dac se fixeaz textul, vrful de creion se vede difuz, iar dac se fixeaz privirea asupra
vrfului de creion textul nu se mai vede clar.
Concluzii. Pentru ca imaginea unui obiect privit s fie clar, razele ce vin de la el trebuie s
focalizeze pe retin. Datorit elasticitii sale i activitii motoare reflexe a muchiului ciliar,
convergena feelor cristalinului variaz focaliznd pe retin. Ca urmare n acelai moment pe retin se
formeaz imagini clare numai pentru obiectele ce se gsesc n acelai plan, restul apar cu imagini neclare.
Sistemul de acomodare al cristalinului funcioneaz n mod reflex sub control nervos vegetativ. n
101

hipermetropie i presbitism se face corectarea forei de refracie a cristalinului cu lentile convergente, iar
n miopie cu lentile divergente.
Punerea n eviden a petei galbene i a punctului orb.
La polul posterior al ochiului, n depresiunea numit fovea centralis retina are acuitate vizual
maxim. La 3,5 mm mai jos de fovea central, ctre unghiul intern al orbitei, este locul pe unde fibrele
nervului optic prsesc globul ocular. Aici nu se gsesc elemente receptoare i deci nu se formeaz
imagine, fapt pentru care se numete punctul orb. Experimental putem pune n eviden rolul acestor dou
regiuni retiniene astfel:
Material necesar. Soluie de alaun de crom 5%, flacon cu pereii plani de aproximativ 5 cm grosime,
ecran alb luminat puternic.
Mod de lucru. Experiena lui Maxwell pentru punerea n eviden a petei galbene. Dup ce s-a
dizolvat alaunul de crom se filtreaz soluia albastr- verzuie astfel obinut i se umple cu ea flaconul,
care apoi se astup. O astfel de soluie nu las s treac prin ea dect radiaiile albastre, verzi i pe cele
roii, cu lungime mare de und. Subiectul ine ochii nchii timp de un minut. n acelai timp,
experimentatorul aranjeaz flaconul n faa ochilor subiectului i comand acestuia s deschid ochii
pentru a privi prin soluie un ecran alb, puternic luminat. Subiectul declar c vede un punct rou, oval
sau rotund, pe fondul albastru- verzui. Este imaginea petei galbene.
Mod de lucru. Experiena lui Mariotte pentru punerea n eviden a punctului orb.
Pe o bucat de hrtie de 20/15 cm se deseneaz dou repere (o cruciuli i un disc negru) la o distan de
7- 10 cm (reprezint distana aproximativ dintre cele dou pupile). Ochiul stng fiind nchis, se privete
cu ochiul drept reperul care este aezat n stnga (cruciulia). Acest reper se vede clar, n timp ce reperul
din dreapta (discul negru) se vede difuz. Se apropie hrtia cu cele dou repere, privindu-se mereu acelai
reper (cruciulia). Se observ c la
o distan de circa 15 cm de ochi
Experiena lui
reperul- discul negru nu se mai
Mariotte:
vede deloc. Fenomenul
se
1- pata galben
datorete faptului c la aceast
2- punctul orb
distan, imaginea reperului negru
3- discul negru
se proiecteaz pe retin n dreptul
4- cruciulia
petei oarbe, adic acolo unde
lipsesc elementele fotosensibile i
nu se formeaz imaginea.
Culori complementare. Sinteza luminii
Prin amestecul n proporii egale a celor apte culori se poate face sinteza luminii albe. Acest fapt se
demonstreaz cu discul lui Newton cruia i se dau 30- 40 de turaii pe secund. Se mai poate obine
lumin alb i prin amestecul numai al unor culori, care au fost numite culori complementare, ca de
exemplu rou + verde-albastru; portocaliu + albastru; galben + albastru-indigo; galben- verde + violet.
Printr-o experien simpl se pot pune n eviden culorile complementare.
Materialul necesar. Ptrate de hrtie de culori pure (rou, verde , albastru i galben) cu latura de 2
cm, o coal mare de hrtie alb pe care se aeaz aceste ptrate.
Mod de lucru. Subiectul privete intens timp de 5 minute de la o distan de 2 m un ptrat colorat, de
exemplu cel rou, dup care deplaseaz foarte repede privirea pe fondul alb. Va constata c pe acest fond,
i apare un ptrat de aceeai mrime dar de culoare verde. Dac procedeaz invers, i anume privete
iniial ptratul verde, se constat c la deplasarea privirii pe fondul alb vede un ptrat de culoare roie.
Culoarea care apare pe fondul alb este complementar culorii privite iniial. Explicaia fenomenului este
urmtoarea: n timp ce se privete atent culoarea roie, elementele fotosensibile ale acestei culori obosesc,
aa c, atunci cnd deplasm privirea pe fondul alb, elementele fotosensibile retiniene pentru culoarea
complementar, adic acelea pentru verde sunt excitate de lumina alb i ca urmare, apare lumina verde.
La fel se ntmpl i pentru celelalte culori complementare menionate mai sus.
102

Percepia micrii
Senzaia de micare se produce n condiii diferite dup cum ochiul:
- percepe deplasarea unui mobil cnd poziia sa este fix i imaginea se deplaseaz pe retin.
- cnd ochiul urmrete mobilul n deplasare atunci senzaia de micare depinde de reflexele cu punct
de plecare n muchii oculomotori, determinate de modificrile de orientare ale ochilor.
Materialul necesar . Aparat de proiecie, ecran alb, un carton de 5 cm lime, prevzut cu dou orificii
a i b (avnd diametrul de 2-3 mm) i meninut n poziie vertical, o limb de carton n forma unui T
fixat printr-o caps O, putnd s fie astfel deplasat n arc de cerc. Limitarea deplasrii se face prin nite
susintori t i . Pe latura mic a T-ului se afl un F cu diametrul de 0,5 cm, care trebuie s se gseasc
la acelai nivel cu orificiile de carton. Experiena se face n camer obscur.
Mod de lucru
Senzaia de micare produs prin
deplasarea imaginii pe retin. Se proiecteaz
pe ecran prin cele dou orificii ale cartonului
un fascicul de lumin. Se vd dou puncte
luminoase. Micnd limba de carton de la
dreapta la stnga i invers cele dou orificii a
i b vor fi acoperite alternativ i astfel n acest
timp pe ecran se vede n permanen numai un
Dispozitiv pentru punerea n eviden a rolului deplasrii
singur punct luminos. Dac frecvena
imaginii retiniene n percepia micrii:
deplasrii este de una pe secund, cele dou
C- cartonul prevzut cu cele dou orificii a i b
puncte luminoase care apar n mod succesiv
L- limb de carton n forma unui T
O- caps de fixare
dau impresia unui singur punct luminos animat
t i - susintori pentru limitarea deplasrii
de o micare de dute-vino. Aceasta se
F- orificiul de pe latura mic a T- ului
datorete formrii succesive a imaginilor, n
dou puncte retiniene diferite dar apropiate .

Micarea consecutiv
Dac, dup ce am fixat cu privirea cteva momente un obiect mobil, ducem privirea asupra unui
obiect imobil, vom avea impresia c i acesta din urm se deplaseaz.
Se poate face urmtoarea experien: se deseneaz cu tu
pe un disc de carton alb de 30 cm diametru o spiral regulat,
traseul avnd o grosime de 8 mm. Discului i se imprim micri
de rotaie uniforme , cnd ntr-un sens cnd n cellalt. Viteza de
rotaie trebuie s fie aceea ce d impresia c spirele se
ndeprteaz sau se apropie de centru. Se privete discul n
Micarea
micare timp de 10 sec., apoi se privete cu ambii ochi un obiect
consecutiv
fix aezat pe un fond uniform (de pild o pasre mpiat). Dup
sensul de rotaie al spiralei, se pare c pasrea se ndeprteaz sau
se apropie. Faptul se explic astfel: ca urmare a persistenei
imaginilor luminoase, ochiul compar poziia imaginii fixe cu cea
a imaginii mobile i o raporteaz la aceasta. Uneori perceperea micrii este fals, de exemplu: avem
impresia c se mic trenul n care ne gsim i care staioneaz, dei n realitate, se mic trenul de pe
linia vecin la care noi privim pe fereastr.

103

FUNCII DE NUTRIIE
Aciunea digestiv a amilazei salivare
Procesul de digestie cu efect chimic n gur, se realizeaz prin intermediul enzimei din saliv care
are o aciune hidrolitic asupra amidonului.
Material necesar. Eprubete, plnie i hrtie de filtru, hrtie de turnesol, amidon, vase de fiert.
Mode de lucru. Recoltarea salivei la om se face astfel: se spal bine gura cu ap cldu, apoi se
excit secreia glandelor salivare, mestecnd o bucat de gum. Saliva ce se formeaz se colecteaz ntr-o
eprubet prin plnia n care se gsete vat de sticl sau tifon. Ca s ndeprtm mucusul din saliv, acesta
se precipit cu acid acetic 3% i dup ce se agit se filtreaz. Un masaj energic asupra gingiilor
stimuleaz secreia salivar i se obine astfel o saliv fluid fr spum.
Proprietile salivei. Saliva este un lichid clar, care rezult din amestecul lichidului secretat de
glandele parotide, srac n mucin i ca atare de o consisten fluid, cu lichidul secretat de glandele
submandibulare i sublinguale, bogat n mucin i cu o consisten vscoas..
Cu o hrtie de turnesol se demonstreaz reacia alcalin a salivei, datorit bicarbonailor de sodiu
i fosfailor disodici. Aceste sruri au rolul de a facilita aciunea enzimelor.
Prepararea soluiei de amidon. Asupra amidonului crud, aciunea amilazei salivare este slab i
ntrziat din cauza stratului de celuloz ce acoper granulele de amidon. Mai repede are loc reacia
asupra amidonului fiert sau copt; pentru aceasta este nevoie s preparm soluia de amidon fiert. ntr-un
pahar cu ap se pune o linguri de amidon pur i se amestec s nu se fac aglomerri. Totul se toarn
peste ap care clocotete timp de 5-10 minute. Se las s se rceasc i s se decanteze 24 de ore. Se
separ supernatantul cu care se realizeaz urmtoarele probe:
Se toarn 5 ml soluie de amidon ntr-o eprubet i se adaug o pictur de I +IK. Se produce o
coloraie albastr caracteristic.
ntr-o alt eprubet, la aceeai cantitate de amidon, se introduce 1 ml saliv, se agit i se adaug o
pictur de I+IK. Se observ aceeai coloraie albastr, ceea ce dovedete c un contact de scurt durat
cu saliva nu modific structura chimic a amidonului.
Se ia alt eprubet i se repet experiena precedent cu deosebire c soluia de I+IK se adaug
mai trziu (dup 35 min.). n acest caz nu se mai obine coloraia albastr, ci una violacee, rocat sau
glbuie, fapt ce demonstreaz c amidonul a fost hidrolizat prin contactul mai prelungit cu saliva,
trecnd prin stadii de dextrine.
Se face contraproba, care const n inactivarea salivei prin fierbere (n baia de ap), timp de 30
minute sau meninerea la 0o. Saliva se inactiveaz ireversibil sub aciunea temperaturilor ridicate i se
inactiveaz n mod reversibil sub aciunea temperaturilor sczute. Numai eprubeta cu saliv inut la 0o,
readus la temperatura camerei, dup circa o or, redobndete fora de hidroliz a amidonului.
Adugnd saliv inactivat prin fierbere la soluia de amidon proaspt, se constat c n acest caz
amidonul nu este hidrolizat i se coloreaz cu I+IK n albastru, chiar dup mai multe ore de contact cu
saliva fiart.
Se toarn n dou eprubete aceeai cantitate de soluie de amidon i, apoi, ntr-una din ele se
adaug saliv activ, iar n cealalt aceeai cantitate de saliv inactivat. Se las n contact aproximativ
10 minute, apoi se adaug n fiecare puin licoare Fehling i se nclzete la fierbere. Se observ c n
eprubeta cu saliv activ are loc reducerea licoarei Fehling, pe cnd n cealalt, nu.
Concluzie. Descompunerea amidonului n zaharuri mai simple, reductoare, ncepe n gur i se
face datorit amilazei salivare. Pn la faza final de maltoz, descompunerea trece prin stadii
intermediare- dextrinele. Activitatea enzimei se desfoar cu randament optim ntre 37-40o C i n
mediu alcalin. Prin fierbere, enzima este distrus i hidroliza nu mai are loc.

104

Stomacul
Aciunea digestiv a sucului gastric
De la om i de la animale, sucul gastric poate fi recoltat cu ajutorul sondelor (tuburi subiri de
cauciuc care pot fi introduse n stomac); de la animale se recolteaz sucul gastric i prin fistule. Aceste
procedee de recoltare sunt greu realizabile n coal. Este posibil ns obinerea unui extract de mucoas
gastric, din stomac de porc, care conine enzimele secretate de glandele gastrice.
Pentru a evidenia aciunea pepsinei asupra proteinelor se procedeaz astfel:
Materiale necesare: Stomac proaspt de porc, instrumente de disecie, mojar, soluie de HCl 0,4%,
pahare Berzelius, un ou, vas de fiert, fibrin, ap distilat, soluie de NaOH 20%, eprubete.
Mod de lucru:
I. Dup ce stomacul a fost deschis i bine splat se desprinde de pe regiunea fundic o suprafa
de 10-20 cm ptrai mucoas i se mojareaz. Dup mojarare se adaug pictur cu pictur soluia de
HCl 0,4% i se las n repaus 15-20 de minute, dup care se filtreaz printr-un tifon dublu.
Se folosete ca substrat proteic fibrina care este mai digerabil la aciunea pepsinei sau cubulee de
albu de ou fiert. Fibrina se poate obine de la centrele de colectare a sngelui sau se poate pregti n
laborator. Se iau 10-15 cm cubi de snge proaspt prin extracie din vena unui animal. Din sering,
sngele se vars ntr-un pahar i cu o baghet de sticl se agit pentru a aduna filamentele de fibrin.
Fibrina se spal sub curent de ap pentru a ndeprta hematiile lizate; fibrina splat are culoare alb.
Filtratul obinut dup triturarea de mucoas gastric se separ n dou poriuni, din care una se
inactiveaz prin fierbere (n baie de ap).
n dou eprubete se introduc cteva cubulee de albu sau fibrin. ntr-o eprubet se toarn extract
gastric nefiert, iar n cealalt, extract gastric inactivat. Ambele eprubete se in la o temperatur ntre 37 40 timp de mai multe ore. Se constat c n vasul cu extract activ s-a produs digerarea marginilor
cuburilor (fibrinei), deci un nceput de digestie, pe cnd n cellalt acestea au rmas intacte. Pepsina
hidrocloric din extractul de mucoas are aciune digestiv asupra proteinelor.
Folosind extract obinut din material mojarat, dar neutralizat cu o baz slab, sau extract de
mucoas creia nu i-am adugat HCl diluat, chiar dac se ine n contact cu proteina la
37 -40 timp
ndelungat, digestia nu are loc; demonstrm astfel rolul HCl ca activator al pepsinei.
II. n patru phrue se repartizeaz cantiti egale de fibrin sau cubulee de albu de ou: n vasul
1 se pun 5ml soluie de extract de mucoas gastric i 5 ml HCl 0,4%; n vasul 2 se pun 5 ml soluie de
extract de suc gastric i 5 ml ap; n vasul 3 se pun 5 ml soluie de extract de suc gastric, inactivat prin
fierbere, apoi rcit, i 5 ml HCl 0,4%; n vasul 4 se pun 5 ml de ap i 5 ml HCL 0,4%. Toate cele 4
pahare se introduc n baie de ap cald ntre 37-40 i se in 30 de minute.
n vasul 1, fibrina se umfl, devine translucid, se dizolv, deoarece n prezena HCl pepsina
devine proteolitic i transform fibrina n polipeptide. n vasul 2 , pepsina nefiind activat nu se observ
nici o modificare. n vasele 3 i 4, fibrina a devenit translucid, dar nu s-a dizolvat. Inactivarea pepsinei
prin cldur n vasul 3 i absena pepsinei n vasul 4 probeaz c HCl nu este suficient singur pentru a
realiza aciunea hidrolizant asupra proteinelor.
Concluzii. Experienele de mai sus au demonstrat c mucoasa gastric conine enzime
proteolitice. Glandele gastrice secret o proenzim pepsinogenul care devine activ n prezena HCl.
Este bine s se reaminteasc elevilor i despre rolul celorlalte enzime gastrice, labfermentul i
lipaza gastric. Faptele trebuie interpretate n sensul c stomacul este n primul rnd un organ de depozit
i numai n mod secundar un organ de digestie.
Emulsionarea grsimilor cu ajutorul bilei
Materiale necesare: eprubete mijlocii, pipet medical, stativ pentru eprubete, hrtie de filtru,
lame de sticl, ulei, vezic biliar de porc sau de vit.
Modul de lucru.
Se iau dou benzi de hrtie de filtru din care una mbibat cu ap, iar cealalt cu bil. Se pune apoi
fiecare hrtie ntr-o eprubet cu ulei pn se realizeaz contactul cu uleiul. Se observ c uleiul ptrunde
n hrtia mbibat cu bil, pe cnd n cea mbibat cu ap nu ptrunde.
105

Pe dou lame de sticl se pune cte o bucic de hrtie de filtru mbibat una cu ap, cealalt cu
bil. Se las s cad dintr-o pipet cte o pictur de ulei pe fiecare hrtie. Pictura de ulei de pe hrtia
mbibat cu ap i menine forma, pe cnd cealalt pictur se aplatizeaz i se ntinde pe suprafaa
hrtiei mbibat cu bil.
n dou eprubete se pune puin ulei i ap. n una din ele se mai adaug 5-6 ml bil i se agit. Se
observ formarea unei emulsii temporare n eprubeta fr bil i a unei emulsii durabile n eprubeta cu
bil. Srurile biliare coboar valoarea tensiunii superficiale a solventului la o valoare apropiat de cea a
grsimii. Astfel, nemaifiind diferene mari de tensiune superficial ntre cele dou lichide n contact,
suspensia uneia n cealalt poate da o emulsie permanent.
Concluzie. Prin aciunea tensioactiv a srurilor biliare, emulsiile grsimilor se menin, ceea ce
confer o suprafa mai mare de contact cu enzima specific- lipaza pancreatic i intestinal.
Grsimile compacte (slnina) nu pot fi scindate de lipaz dect n partea lor de contact.. ca urmare,
durata de digestie a acestora este de circa 12-15 ore n funcie de cantitatea consumat la prnz.
Sngele
Recoltarea sngelui. Observarea elementelor figurate. Frotiul de snge.
Pentru studiul morfologic al elementelor figurate ale sngelui se fac frotiuri pe lame i se
cerceteaz la microscop.
Recoltarea sngelui pentru efectuarea unui frotiu se face la om din pulpa degetului. La iepure,
cobai i alte animale mici de laborator, din pavilionul urechii, la psri, din creast sau membrana
interdigital (la palmipede), la broasc, direct din inim, absorbind prin acul unei seringi.
Materiale necesare: Vat, alcool, eter, ac sterilizat, lame i lamele, albastru de metil i soluia
May-Grunwald-Giemsa.
Mod de lucru.
Se dezinfecteaz pulpa degetului cu tampoane de vat
mbibate n alcool i eter. Cu acul sterilizat prin flambare sau
fierbere 30 de minute se face o neptur. Primele picturi de
snge se terg cu tamponul de vat, apoi se aplic marginea
lefuit a unei lame de sticl lng pictura de snge, care ader
de marginea lamei.
Se aeaz marginea lefuit cu pictura de snge pe
suprafaa unei alte lame, aproape de captul ei, n poziie oblic
(cu un unghi de 30-40) i printr-o micare de translaie rapid,
dar uoar, sngele este mpins prin spaiul capilar de la
contactul celor dou lame. ntinderea trebuie fcut ntr-un strat
ct mai subire ca globulele s nu se suprapun.
Se usuc frotiul prin agitarea lamei n aer, astfel pelicula ader
de lam i
globulele i
pstreaz
leucocit
forma
.
Stadii succesive de ntindere a unui
Fixarea mai
frotiu de snge(I, II i III). 1 i 2
lame de sticl; 3 pictur de snge.
bun se face
cu amestec
de eter i alcool n pri egale din care se pun deasupra
peliculei de snge cteva picturi i se las timp de 15hematie
20 de minute.
plachet sanguin
Urmeaz colorarea. Cea mai simpl colorare se
face cu soluie de albastru de metil (1%). O colorare
Frotiu de snge de om
mai bun se obine folosind colorani specifici, cum
este soluia May-Grunwald-Giemsa. Cu cteva picturi
106

de soluie se acoper lama, se in pe preparat 2-3 minute, apoi se spal cu ap curat la robinet, se terge
lama pe faa ei inferioar, se las s se usuce n suport, se privete la microscop, de preferin cu
obiectivul de imersie.
Este bine s se fac dou preparate, unul cu snge de om sau alt mamifer i altul cu snge de
broasc sau alt vertebrat, la care globulele roii sunt nucleate i de forme diferite i astfel s se studieze
comparativ. n cmpul microscopic, eritrocitele de om apar de forma unor discuri biconcave, anucleate,
cele de broasc de form eliptic, biconvexe, nucleate.
Leucocitele sunt mai puine, mai mari, cu contur neregulat i nucleu colorat n mov. Se vor
identifica diferitele feluri de leucocite, dup aspectul nucleului.
Se pot obine preparate bogate n leucocite n modul urmtor: se injecteaz n sacii limfatici
dorsali ai unei broate o suspensie concentrat de carmin. Dup cteva ore se secioneaz tegumentul cu
un foarfece i se recolteaz limfa din saci, cu o sering. Se pune o pictur pe lam, se ncadreaz cu
vaselin i se aplic lamela. Se realizeaz astfel o camer umed n care se poate pstra ctva timp
limfa. SE fac observaii la microscop i se vd leucocitele a cror citoplasm este plin cu granule de
carmin. A fost pus n eviden astfel i aciunea fagocitar a leucocitelor.
Determinarea grupelor sanguine
Grupele sanguine au fost descoperite n anul 1901 de Landsteiner i Moss. Ei au constatat c n
membrana eritrocitelor exist substane de natur mucopolizaharidic cu valoare de antigene denumite
aglutinogene A i B.
n plasm sunt prezente simultan substane de natur globulinic denumite anticorpi (alfa) i
(beta) sau aglutinine. Niciodat n acelai snge nu pot coexista aglutinogenul cu aglutinina
corespunztoare; nu pot exista cuplurile A cu i B cu pentru c are loc aglutinarea hema tiilor, ducnd
la hemoliz.
Pe baza repartiiei aglutinogenilor i aglutininelor au fost stabilite cele 4 grupe sanguine ale
sistemului ABO.
n cazul transfuziei nu trebuie s se ntlneasc aglutinogenul donatorului cu aglutinina
corespunztoare din sngele primitorului.
Denumirea grupei vine de la aglutinogen. Grupa O este donator universal, iar grupa AB este
primitor universal.
Grupa sanguin
OI
AII
BIII
ABIV

Aglutinogen
(n eritrocite)
A
B
A,B

Aglutinin
(n plasm)
,

Primete de la

Doneaz la

O
O,A
O,B
O,A,B,AB

O,A,B,AB
A,AB
B,AB
AB

Grupa sanguin este ereditar i nu se schimb nici n cazul transfuziilor masive de snge.
Transmiterea ei se face n conformitate cu legile lui Mendel.
Metode de determinare
1. Determinarea aglutinogenelor prin metoda Beth-Vincent cu ajutorul serurilor hemotest;
2. Determinarea aglutininelor prin metoda Simoniu cu ajutorul eritrocitelor-test.
Determinarea aglutinogenelor
Metoda utilizeaz serurile hemotest O (alfa, beta), A (beta), B (alfa).
Materiale necesare: seruri hemotest,, spirt medicinal,, eter, ace, sering, vat, pipete Pasteur, lame cu
godeu, lame simple.
Mod de lucru:
- pe suprafaa unei lame cu godeu bine degresat cu alcool i eter se aplic cu pipete diferite cte o
pictur de ser hemotest de la stnga spre dreapta n ordinea urmtoare:
107

n stnga OI, la mijloc AII, n dreapta BIII;

- se degreseaz pulpa degetului i se neap cu acul de sering; prima pictur se terge i din a
doua pictur se recolteaz cu ajutorul unei lame microscopice 3 picturi de snge cu ajutorul
colurilor lamei;
- trebuie procedat n aa fel nct pictura de snge s fie aproximativ 1/20 din pictura de ser;
- se amestec pictura de snge n pictura de ser hemotest;
- se ateapt 3-4 minute, meninnd lamele la temperatura camerei i apoi se face citirea.
Interpretarea rezultatelor
Sunt posibile 4 combinaii:
1. dac aglutinarea nu are loc n nici una din cele 3 picturi, ele rmnnd uniform colorate n roz,
sngele aparine grupei OI

2. dac aglutinarea are loc n prima i a treia pictur i lipsete n mijloc, sngele
aparine grupei AII

3. dac aglutinarea are loc n prima i a doua pictur, lipsind n pictura a treia, sngele aparine
grupei BIII;

4. dac aglutinarea are loc n toate cele trei picturi sngele aparine grupei ABIV.

Erori ce pot falsifica rezultatele:

- nu se pstreaz raportul 1/20 ntre cele dou picturi;
- folosirea unor seruri hemotest vechi
- citirea se realizeaz imediat dup realizarea combinaiilor, deci nu se las s se nvecheasc
combinaia, deoarece prin evaporare apar erori de interpretare.

108

Observaia circulaiei capilare

Capilarele reprezint segmentul vascular prin care are loc schimbul de substane ntre snge i
esuturi. Diametrul unui capilar fiind extrem de mic, de ordinul micronilor, circulaia sngelui n acesta se
vede numai la microscop n membrane subiri ca: membrana interdigital la broasc, la nivelul limbii, n
mezenter i n plmni.
Materiale necesare: Microscop, broasc, planet ce prezint un orificiu cu un diametru de circa
2 cm, instrumente de disecie, ace, tifon, vat, ser fiziologic.
Mod de lucru:
- dup spinalizare broasca se aeaz n decubit ventral, iar membrana iterdigital dintre degetele 3-4
se aplic pe orificiul planetei cu condiia s nu fie prea ntins pentru a nu stnjeni circulaia;
- se va observa circulaia sngelui n artere (cu vitez mare), iar la nivelul capilarelor deplasarea
eritrocitelor ca nite monede, observndu-se i deformarea acestora;
- se poate observa circulaia capilar i n limb, dup ce aceasta s-a fixat cu un ac pe suprafaa
orificiului planetei.
Observarea circulaiei n membrana interdigital. Cu ajutorul unor fii de tifon umede, se
imobilizeaz o broasc pe planet, cu faa dorsal n sus, avnd extremitatea piciorului posterior n
dreptul orificiului, astfel ca membrana interdigital s poat fi ntins deasupra orificiului. Degetele se
fixeaz etalate deasupra orificiului cu ace cu gmlie introduse n lauri de
a legate pe fiecare deget. Se umezete membrana cu ap i se potrivete
planeta pe msua microscopului, astfel ca membrana s se gseasc n
dreptul obiectivului. Se lumineaz puternic i se observ cum circul
sngele n arteriole, venule i mai ales n reeaua capilar. Coloana de snge
la nivelul capilarelor este att de subire nct nu se identific dect prin
deplasarea evident a hematiilor. La broasc, hematiile au form eliptic,
sunt mari i nucleate, deci uor de urmrit n deplasarea lor de ctre coloana de lichid circulant.
Observarea circulaiei n limba de broasc. Se poate lucra cu acelai
animal schimbndu-i doar poziia pe planet., n sensul c n dreptul
orificiului s se etaleze limba. Se observ la microscop. n limb se poate
remarca densitatea capilarelor cu mult mai mare dect n membrana
interdigital.
Observarea circulaiei n mezenter. Se pregtete o broasc spinal
prin distrugerea encefalului, mduva lsndu-se intact. Se fixeaz pe o
planet cu faa dorsal n sus. Se face o incizie
lateral n peretele abdominal drept. Se introduce
prin incizie o pens i se apuc o ans intestinal care se trage n afar. Se
etaleaz cu grij ansa deasupra orificiului i se fixeaz pe margine cu ace nfipte
n peretele intestinului. Se umezete cu ser fiziologic i se observ la microscop,
dup 5 minute, timp necesar pentru trecerea ocului spinal i restabilirea
tonusului vascular. Se pot observa vase de calibre diferite, arteriale i venoase
cu traseu paralel, ns cu deplasarea n sens contrar a coloanei de snge. De
remarcat c viteza de curgere n vasele arteriale este cu mult mai mare dect n
cele venoase. De observat modul de distribuire a vaselor arteriale i de confluere a vaselor venoase. n
vasele de calibru mai mare se observ deplasarea sngelui cu vitez mai mare n regiunea axial a vasului
i cu mult mai lent pe lng pereii vasului. n capilare cu lumenul mic (sub dimensiunile hematiilor),
hematiile se deplaseaz una cte una lent i la o ramificaie trebuie chiar s se deformeze pentru a trece
mai departe. Dac se aplic o pictur de ser Ringer cu adrenalin sau acetilcolin, viteza de curgere a
sngelui se modific n funcie de intensitatea reaciei vasomotorii- vasoconstricie sau vasodilatare.
Observarea circulaiei n plmnul de broasc. La o broasc spinal se face o incizie lateral la
baza membrului anterior. Se introduce n laringele broatei captul unui tub de sticl. La capt este
conectat cu un tub de cauciuc prin care se sufl ncet. Se observ c plmnul se umple cu aer i se
exteriorizeaz prin incizia lateral. Se aranjeaz preparatul astfel ca plmnul s vin n dreptul orificiului
plutei, peste care s-a aezat o lam de sticl. Se umecteaz cu ser i se observ la microscop. n plmn se
poate identifica grosimea peretelui pulmonar, structura lui i densitatea extrem de mare a reelei capilare.
109

Concluzii. n artere, viteza sngelui e mai mare dect n vene. Sngele circul sub forma unui
curent continuu, elementele figurate fiind antrenate n micare de presiunea sngelui. Capilarele sunt vase
cu calibrul cel mai mic n care sngele circul foarte ncet, iar eritrocitele trec chiar cte una, din cauza
lumenului mic al acestor vase.
Structura inimii
Materiale necesare: o inim de viel, de porc sau oaie (este necesar ca trunchiurile marilor vase
s fie secionate ct mai departe de inim), trus de disecie, ser fiziologic pentru homeoterme, vat,
alcool., microscop.
Modul de lucru. Se vor observa anurile longitudinal i transversal cu ramurile arterelor
coronare. Se examineaz prile externe ale ventriculelor i se compar cu descrierea din manual. Se trece
apoi la secionarea inimii deschiznd pe rnd fiecare camer. Incizia atriului drept trebuie s mearg
rectiliniu, ncepnd de la mijlocul spaiului dintre cele vene cave, pn la baza ventriculului
corespunztor. Atriul stng se deschide printr-o incizie care ncepe ntre rdcinile drepte i stngi ale
venelor pulmonare i merge, de asemenea, pn la baza ventriculului corespunztor.
Ventriculele se deschid prin seciuni n form de V cu vrful n jos. Pentru ventriculul drept,
incizia ncepe de la baza arterei pulmonare i merge paralel cu anul anterior (n care se gsete artera
coronar anterioar) pn aproape de vrful ventriculului, iar de
acolo, se ndreapt din nou n sus, fcnd un unghi de aproape
60o cu prima incizie. n acest mod s-a decupat peretele anterior
al ventriculului drept i apucnd cu pensa de vrful lamboului se
ridic pentru a se putea observa interiorul cavitii: muchii
papilari, cordoanele tendinoase, valvulele atrioventriculare i
valvulele sigmoide. Pentru ventriculul stng se procedeaz
similar, fcnd prima incizie paralel cu acelai an anterior, iar
a doua, de la vrful ventriculului spre baza sa. Ridicnd i aici
lamboul se poate vedea interiorul. Se observ: structura peretelui
inimii cu endocardul, miocardul, i epicardul su. Se va compara
grosimea miocardului atrial cu a celui ventricular i a
miocardului celor dou ventricule. Se vor examina la microscop
lame cu esut miocardic. n atrii se vor observa orificiile prin
care acestea comunic cu venele i cu ventriculele respective. n
ventricule se vor observa orificiile de comunicare cu atriile i cu
arterele respective. Atenia elevilor trebuie s fie ndreptat cu
deosebire asupra aparatelor valvulare: valvulele tricuspid i
bicuspid cu corzile lor tendinoase, muchii papilari i valvulele
sigmoide.

110

Observarea activitii cardiace

Explorarea funcional a inimii n laborator se face foarte uor pe inim de broasc.
Materiale necesare: Broate de talie mai mare, plac de plut i instrumente de disecie, sticle de
ceasornic, ser Ringer, pahar Berzelius, biuret, canul Straub sau pipet instilatoare.
Mod de lucru.
I. Observarea activitii inimii de broasc in situ
Se paralizeaz o broasc prin distrugerea mduvei spinrii, se fixeaz pe planet cu faa ventral
n sus i membrele n extensie. Se face o
incizie a tegumentului pe linia median, se
prinde cu pensa apendicele xifoid i se taie cu
foarfecele de o parte i de alta claviculele,
pentru a se ndeprta ntregul plastron sternal.
Trebuie s se evite secionarea venei
abdominale i a arterelor brahiale. Cu o pens
fin se apuc membrana pericardic i se
secioneaz, degajnd inima.
Inima broatei este tricameral, avnd
dou atrii i un ventricul i un sinus venos n
care se deschid venele. Atriul drept este de
culoare mai nchis deoarece conine snge
venos, pe cnd cel stng, de culoare mai
deschis, deoarece conine snge arterial,
oxigenat. Se palpeaz cu vrful degetului
ventriculul pentru a intui gradul de duritate al
miocardului n timpul sistolei i diastolei.
Izolarea inimii de broasc: 1-ventriculul; 2- serfin
Se prinde vrful inimii cu o serfin i
metalic; 3- vrful canulei de sticl introdus n sinusul
se
orienteaz
rostral. Se va remarca
venos i fixat cu firul de a (4)
confluarea marilor vase venoase n sinus i
delimitarea lui fa de atrii prin linia alb
Cnd se ridic vrful inimii se observ o fie de esut conjunctiv care se secioneaz cu un
foarfece fin pentru a nlesni astfel rsturnarea ventriculului peste atrii i meninerea lui n aceast poziie
timp mai ndelungat. Sinusul venos se contract n acelai ritm cu inima. De fapt, de aici iau natere
impulsurile care se propag la atrii i apoi la
ventricul.
n cazul cnd nu dispunem de o serfin,
inima se conecteaz prin intermediul unui fir de
a legat de vrful ei cu o prghie uoar din pai,
avnd la vrf un stegule Se poate urmri
alternana strilor de contracie sistol i de
relaxare diastol. Frecvena acestor revoluii
cardiace este de 15-30 de minute, dependent de
Instalaie pentru demonstrarea contraciilor cordului de
broasc. 1-inim; 2- serfin, 3- fir de a; 4- axul care fixeaz
numeroi factori, ntre care variaiile de
prghia;
5- furc; 6- prghie amplificatoare; stegule.
temperatur. Picurnd pe inim ser cald (28-30)
sau ser rece ),(10frecvena se modific
accelerndu-se la cald i moderndu-se la rece. Pipind inima se pot percepe modificri de consisten din
timpul sistolei i al diastolei. Culoarea variaz, n sistol ventriculul este palid i roz n diastol. Diferena
de culoare se datoreaz faptului c n cordul de broasc nu exist o vascularizaie coronar.
II. Automatismul cardiac este proprietatea inimii de a-i menine activitatea ritmic n afara relaiilor sale
cu organismul. Se poate pune n eviden pe cordul izolat.
De la o broasc spinalizat se detaeaz inima de corp, secionnd crosele aortice i vasele
venoase. Dup izolare se pune inima pe o sticl de ceas, n ser fiziologic pentru a evita deshidratarea.
Activitatea inimii dureaz n afara organismului cca. 30 de minute datorit existenei n structura sa a unui
111

sistem excitoconductor, capabil s genereze impulsurile necesare determinrii contraciilor succesive. Se

observ i se cronometreaz contraciile ritmice i regulate ale inimii izolate de organism. Activitatea
dureaz timp ndelungat, dac se primenete din cnd n cnd serul care o scald. Activitatea ritmic
poate fi influenat n sensul unei reduceri adugnd ser rece (la 5) sau intensificri prin adugarea de ser
cald (cca. 25-30).
Cordul izolat poate fi meninut n stare de activitate timp ndelungat, cu condiia de a fi perfuzat
cu ser Ringer.
Pentru realizarea unei perfuzii a cordului izolat, acesta trebuie s fie conectat cu o canul Straub,
prin intermediul creia lichidul de perfuzie ptrunde n cavitile inimii. Fixarea inimii pe canul se face
astfel:
Se sacrific o broasc i i se descoper inima. Dup ce ventriculul a fost rsturnat peste atrii, se introduce
pe sub sinus un fir de a. Se face o incizie n form de V cu vrful foarfecelui (prin ciupire), n peretele
sinusului, n afara locului de unire a acestuia cu atriile.
Prin aceast incizie se introduce vrful unei canule Straub sau al unei pipete instilatoare de sticl
procurat de la farmacie. Vrful canulei trebuie s conin soluie Ringer, pentru a evita formarea de
coaguli. Firul de a introdus n prealabil sub peretele sinusului este nnodat acum deasupra vrfului
canulei. Astfel ntregul perete sinusal este legat de vrful canulei. Se are n vedere ca legtura s nu
depeasc limita liniei albe unde este localizat ganglionul Remak, prin a crui izolare se produce oprirea
activitii cardiace. n cazul cnd se folosete pipeta instilatoare, firele de a se fixeaz pe peretele de
sticl al canulei cu o bucic de leucoplast; n caz contrar, inima alunec n afar i cade de pe canul.
Se secioneaz crosele aortice i vasele venoase sub nivelul ligaturii; inima este detaat din corp
i rmne fixat de canul. Se fixeaz canula pe suport cu ajutorul unei cleme, cu deschiderea n sus. Se
las s curg n canul lichid Ringer dintr-o biuret sau un alt rezervor cu un debit de 20 de picturi pe
minut. Din canul Lichidul trece n inim i apoi este expulzat prin crosele aortice.
Modificm debitul de perfuzie reducnd sau crescnd numrul de picturi pe minut. Vom observa
c frecvena i fora de contracie se schimb n raport direct cu volumul de lichid perfuzat pn la o
anumit limit maxim cnd inima se gonfleaz, deoarece fora cu care preseaz lichidul depete fora
de contracie. Creterea forei de contracie proporional cu volumul de lichid perfuzat se face pe seama
forei de rezerv a inimii i ne demonstreaz c presiunea ce se exercit pe faa intern a cavitii cardiace
constituie un excitant. Cnd volumul de lichid perfuzat este redus la 2-3 picturi pe minut, deci cu debit
mic, amplitudinea i frecvena cardiac scad.
Perfuzm inima cu soluie Ringer cu debit constant variind numai temperatura:10
, 15,
20,25,30 i notm frecvena contraciilor n unitatea de timp, precum i amplitudinea contraciei. Vom
constata o accelerare de ritm la temperaturi ridicate (tahicardie) i ncetinirea de ritm la temperaturi
sczute (brahicardie).
Concluzii: Inima are o activitate ritmic, automat; ritmicitatea i amplitudinea contraciilor sunt
influenate de factori termici i de presiune, precum i de impulsurile nervoase.
Respiraia
Organele respiratorii asigur trecerea O2 din aerul alveolar n snge i a CO2 din snge n aerul
alveolar.
Mecanica respiratorie.
Reprezint ansamblul proceselor prin care se asigur primenirea aerului alveolar. Aceasta se face
prin trecerea aerului atmosferic n spaiul alveolar i din spaiul alveolar n atmosfer. Deplasarea aerului
este condiionat de variaiile de presiune dintre aerul atmosferic i cel alveolar. Variaia de presiune n
sensul unei sau al unei creteri n spaiul alveolar este realizat de prin micrile efectuate de pereii cutiei
toracice, ca urmare a contraciei muchilor inspiratori i expiratori. Respiraiile normale (eupneice) ,
accelerate (polipneice), forate (dispneice) i suprimate (apneice) sunt coordonate de centrii nervoi, n
diferite condiii fiziologice ale organismului, dup nevoile acestuia n oxigen. Amplitudinea i frecvena
celor dou faze (inspiraia i expiraia) n diferite situaii pot fi studiate n primul rnd prin autoobservare,
apoi prin experienele pe care le propunem n continuare.
112

Material necesar. Un metru de croitorie, un ceasornic cu secundar sau cronometru.

Mod de lucru. Se msoar perimetrul toracic al unui elev direct peste cma sau bluz, n timpul
expiraiei i inspiraiei linitite. Se cronometreaz numrul de respiraii pe minut, iar prin calcul se
stabilete durata unei respiraii complete. Subiectul este invitat apoi s execute un efort fizic susinut
pentru o scurt durat de timp (s ridice de mai multe ori o greutate, s alerge timp de cteva minute pe
culoar etc.); se procedeaz n acelai fel la msurarea perimetrului toracic n inspiraie i n expiraie i la
nregistrarea ritmului respirator. Frecvena i amplitudinea au crescut. Se vor observa micrile ritmice ale
peretelui abdominal i se vor explica aceste fapte. Cu privire la ritmul i profunzimea respiraiilor se va
cere elevilor ca la situaii identice, s compare acestea pe organismul propriu i organismul unor persoane
naintate n vrst.
O experien uor de efectuat, care privete relaia dintre ritmul respirator i presiunea parial a
gazelor respiratorii n atmosfera intraalveolar, este cea care pune n eviden apneea i polipneea. Un
elev este invitat s-i rein pentru un moment respiraia apnee. Apneea voliional dup expiraie poate
dura circa 20 s, iar dup inspiraie poate fi prelungit pn la 30 s. Se produce n acest fel anoxia
esuturilor, care este urmat de imediat de o accelerare a frecvenei la 20- 25- 30 pe minut polipnee
compensatorie. Se vor crea discuii n legtur cu aceste observaii i se vor face referiri la respiraia la
nlimi (pe muni sau n atmosfera nalt) i n adncuri (scafandrii, mineri). Se mai pot face referiri la
accelerarea de ritm n cazul temperaturilor ridicate, la apneea reflex provocat de un jet de ap rece
proiectat neateptat pe tegument i la modificrile respiraiei n timpul strnutului, tusei, deglutiiei,
sughiului, vomei.
Demonstrarea
mecanicii
Experiena lui Donders:
respiratorii cu aparatul Donders.
A- expiraie
Experiena cu aparatul
B- inspiraie
Donders completeaz nelegerea
1. clopot de sticl
2. membran de cauciuc
rolului fiziologic al muchiului
3. dop prin care trec e tubul (T)
diafragmei n mecanica respiraiei
corespunztor traheii i un alt
i rolul esutului elastic pulmonar.
tub (V) care servete pentru a
Aparatul Donders se compune
face un vid parial;
dintr-un clopot de sticl prin al
4. manometru
5.
balonae
de
cauciuc
crui gt trece un dop strbtut de
conectate
la
captul
bifurcat
al
un tub. De tub se prinde traheea
tubului (T).
mpreun cu plmnii disecai de la
un mamifer- iepure sau cobai.
Partea de jos a clopotului este
nchis de o membran de cauciuc
ce are n mijlocul ei, n afar, un crlig de care se poate trage. Atragem atenia elevilor c analogia acestui
clopot de sticl cu cavitatea toracic nu este perfect deoarece in situ ntre cele dou foie pleurale un
spaiu real aa cum exist ntre plmni i peretele clopotului din experiena noastr. n aceast experien
nu se demonstreaz fora de adeziune dintre cele dou foie pleurale. Trgnd n jos membrana de
cauciuc, spaiul n clopot crete, se micoreaz presiunea, n plmni intr atunci aer din atmosfer i ei se
dilat. Membrana de cauciuc are rolul diafragmei, iar tragerea ei n jos reprezint contracia n cursul
inspiraiei, urmat de alungirea diametrului sagital. Dnd drumul membranei de cauciuc, aceasta revine.
Presiunea n cavitatea clopotului i n plmni crete peste valoarea presiunii atmosferice; plmnii sunt
comprimai i aerul intrat n ei este evacuat pn la egalarea presiunii (vezi fig.).
Experienei descrise i se poate crea o variant: n cazul cnd lipsesc plmnii naturali putem lua
dou balonae de cauciuc, pe care le prindem la captul bifurcat al tubului de sticl ce trece prin dop. Se
manevreaz n acelai fel i se obin rezultate similare.
n lipsa unui clopot utilizm o sticl creia i s-a tiat fundul. Prin gtul sticlei trece, ca i n cazul
precedent tubul, de care este fixat un balon de cauciuc sau plmn. Introducem parial sticla cu fundul
ntr-un vas cu ap; ridicarea i coborrea sticlei micoreaz sau mrete presiunea intern, balonaul se
umfl si se dezumfl. n acest caz membrana de cauciuc a fost nlocuit cu nivelul apei.
Se arat c fenomenele observate n acest mod sunt analoage fenomenelor care au loc n procesul
respiraiei. Se stabilesc urmtoarele corelaii:
113

1. prin micorarea spaiului cutiei toracice, ca urmare a coborrii coastelor i a boltirii n sus a
diafragmului, spaiul toracic se micoreaz, plmnii sunt comprimai, crete presiunea
intrapulmonar i aerul este eliminat- expiraia.
2. prin ridicarea cutiei toracice i contracia diafragmului, capacitatea toracic se mrete. Ca urmare
scade presiunea intrapulmonar, plmnii fiind obligai s urmeze pereii cutiei toracice i aerul din
afar intr- inspiraia.
Concluzii. Muchii respiratori toracici i diafragmul, prin contraciile i relaxrile lor, modific ritmic
cele trei axe ale cavitii toracice. Aceasta nu este ns suficient dect cu meninerea tensiunii superficiale
ntre cele dou pleure. Modificarea ntr-un sens i n cellalt a volumului toracic modific presiunea
intraalveolar i determin inspiraia i expiraia. esutul elastic din parenchimul pulmonar are rolul de a
facilita distensia plmnului n inspiraie i revenirea la forma iniial n expiraie.
Identificarea prezenei bioxidului de carbon n aerul expirat
Bioxidul de carbon care rezult din catabolizarea substanelor organice este transportat pe cale
sanguin de la esuturi la plmni, difuzeaz n aerul alveolar, iar de aici se elimin o dat cu aerul
expirat. Demonstrarea prezenei CO2 n aerul expirat se poate face astfel:
Material necesar: Cilindrii gradai, pahare Berzelius, eprubete , ap de var, hidroxid de sodiu n
soluie de 20%, fenolftalein, tub de sticl sau pipet, acid clorhidric n soluie de 10%.
Mod de lucru.
Cu o pipet se introduc ntr-o eprubet curat circa 10 ml de ap de var limpede. Se barboteaz n
apa de var, printr-un tub de sticl sau prin pipet aer de la sfritul unor expiraii profunde. Se constat c
apa de var se tulbur foarte repede. Se las n repaus i se observ c se depune la fund un precipitat alb
de carbonat de calciu. Se adaug acid clorhidric pictur cu pictur; soluia se limpezete deoarece
precipitatul se dizolv. n acest timp se degaj bule de gaze)
CaCO3 + H2O
Ca(OH)2+ CO2
CO2
CaCO3 + 2HCl
CaCl2 + H2CO3
H2O
se experimenteaz n acelai mod folosind n locul Ca(OH)2 hidroxid de sodiu sau potasiu. n
acest caz nu se observ un precipitat i de aceea pentru a putea urmri efectiv CO2 eliminat se adaug n
soluia alcalin un indicator (fenolftalein). Soluia se coloreaz n rou caracteristic, ns dup ce ncepe
barbotarea aerului expirat, se observ c ea se decoloreaz n mod treptat devenind pn la urm incolor,
fapt care denot c acidul carbonic eliminat a neutralizat tot hidroxidul.
Supapele lui Mller. Din experiena urmtoare ne vom da seama mai bine c aerul expirat conine
cu mult mai mult dioxid de carbon dect aerul inspirat. Ca i n cazul precedent, demonstraia supapelor
lui Mller se efectueaz o dat cu studiul schimbului de gaze la nivel pulmonar. Supapele lui Mller sunt
formate din dou flacoane de sticl alb n care se pune ap de var i se astup cu dopuri, prin care trec
dopuri de sticl sau de plastic ce se monteaz ca n figur. Se vede c din cele dou tuburi care strbat
fiecare dop, unul nu ajunge n lichid, iar cellalt ptrunde n apa de var pn aproape la fund.
Tubul scurt al unui flacon i tubul lung al
celuilalt sunt unite printr-un tub n T legat
cu tub de cauciuc. Braul liber al tubului n
Supapele lui Mller prin
T se prelungete cu un tub de cauciuc prin
care se demonstreaz
care subiectul respir. Pe traseul tubului n
prezena CO2 n aerul
T se pun dou cleme care au rol de supape.
expirat:
Unul din flacoane (1) servete ca vas
1 i 2 vase spltoare;
spltor pentru aerul inspirat din camer
3.- cleme
4. tubul prin care se
care trecnd prin vas se purific de CO2 iar
inspir i se expir
cellalt (2) ca vas spltor pentru reinerea
CO2 coninut n aerul expirat.. n timpul
inspiraiei se nchide clema dinspre vasul
2, iar n timpul expiraiei se nchide clema dinspre vasul 1. Subiectul face cteva inspiraii i expiraii
114

obinuite prin supapele lui Mller. Elevii vor observa c dup 2- 3 respiraii apa de var din flaconul 2,
prin care trece aerul expirat, se tulbur mult mai mult n comparaie cu apa de var din flaconul 1, care
rmne limpede sau se tulbur foarte puin. Concluzia care se desprinde este c aerul expirat conine mai
mult CO2 dect aerul inspirat.

Punerea n eviden a consumului de oxigen

Materiale necesare: o crati cu capacitatea de 2 l, un cilindru gradat de 1- 2 l (eventual o sticl
oarecare cu gtul larg), trei tuburi de cauciuc, un vas absorbant (poate fi nlocuit cu un borcan pentru
chimicale), un tub Y sau n T (din sticl
Experien prin care
sau metal), soluie de NaOH 40%, pense
se
demonstreaz
pentru rufe.
consumul de oxigen
Mod de lucru :
n respiraie:
1. cilindru gradat
Se face instalaia ca n figur.
2. tub de cauciuc
Se introduce soluia de NaOH n vasul
pentru inspiraie
absorbant. Se aplic bine dopul i se
3. tub n y
verific etaneitatea sa i a tuburilor de
4. tub de cauciuc
sticl sau de metal care trec prin el. se fac
pentru expiraie
5.vas cu NaOH
legturile tuburilor de cauciuc cu vasul
pentru absoria CO2
absorbant prin intermediul tubului Y. Se
6. tub de cauciuc
aplic pensele pentru dirijarea circuitului
pentru
nchiderea
nchis al aerului. Se pune ap n crati. Se
circuitului
introduc capetele libere ale tuburilor de
7.pens nazal
8. castron cu ap
cauciuc n cilindrul gradat pn aproape de
mijloc, apoi se potrivete gura acestuia n
ap i este meninut n poziie vertical de
un ajutor, astfel nct s nu comunice cu atmosfera. Subiectul trebuie s manevreze pensele de pe tuburile
de cauciuc i s respire, numai pe gur, prin tubul Y, n care scop i se va pensa nasul. I se atrage atenia c
n timpul inspiraiei trebuie s asigure venirea aerului din cilindru prin deschiderea pensei de pe tubul de
cauciuc direct (2), iar n expiraie nchide pensa (2) i trebuie s foreze trecerea aerului prin vasul
absorbant al bioxidului de carbon i s-l pompeze n cilindrul gradat, deschiznd cealalt pens. Se va
acorda o atenie deosebit manevrrii penselor spre a evita aspirarea de soluie caustic (NaOH) din vasul
absorbant i spre a se asigura reinerea n aceast soluie a ntregii cantiti de CO2 expirat. Se constat c
subiectul simte n scurt timp c nu mai are aer. Atunci (la sfritul unei expiraii) se nchid ambele pense
de pe tuburile de cauciuc i se scoate din gura subiectului tubul Y. Se observ c n timpul experienei a
ptruns o cantitate oarecare de ap n cilindru, care a nlocuit partea de aer consumat. Faptul este adevrat
dac s-a avut grij ca volumele de aer inspirat i expirat s fie aproximativ egale. Se demonstreaz c
partea din aer consumat era reprezentat de oxigen. Ridicnd ncet cilindrul i introducnd n el o
lumnare aprins se constat c flacra acesteia plete i se stinge imediat din cauza lipsei de oxigen,
care a fost consumat.

Demonstraia consumului de oxigen se mai poate face simplu i concludent dup cum urmeaz: Se
ia un cilindru de 1 l. Se lipete n lungul lui o band de hrtie care a fost, n prealabil, gradat. Se
parafineaz hrtia. Se pregtete un dop de plut avnd diametrul ceva mai mic dect al gurii cilindrului.
Se lipete pe dop, la mijloc, un capt de lumnare. Se ia un castron cu ap i se aeaz pe suprafaa
acesteia dopul cu lumnarea aprins. Se acoper cu cilindrul gradat i se observ c, dup cteva secunde,
flacra plete i apoi se stinge. n acest timp (circa20- 30 s) se urc ap n interiorul cilindrului. Volumul
de ap ne indic volumul de aer nlocuit.

115

Msurarea capacitii vitale

Sub denumirea de capacitate vital se nelege cantitatea maxim de aer pe care o poate expira o
persoan care la sfritul unei inspiraii forate. Msurtoarea capacitii vitale se face cu spirometrul.
Material necesar. Spirometru, alcool.
Mod de lucru: Se efectueaz o inspiraie forat, apoi aerul se elimin printr-o expiraie forat n
tubul spirometrului. Valoarea acestui volum de aer reprezint capacitatea vital care, care nsumeaz aerul
respirator curent + aerul inspirator de rezerv sau complementar + aerul expirator de rezerv. Capacitatea
vital variaz n funcie de talie, grad de dezvoltare al aparatului respirator, sex, antrenamentul realizat
prin exerciii de respiraie. Determinarea sa reprezint un real interes practic deoarece rezistena
organismului la diferite activiti fizice i n special cele sportive este condiionat de o capacitate vital
normal. Dm mai jos o formul, aceea a fiziologului West, dup care se calculeaz capacitatea vital
standard (C.V.S.) pe care trebuie s o aib o
persoan n funcie de nlime i sex:
- pentru femei C.V. = I x 20;
- pentru brbai C.V.= I x 25
- pentru atlei C.V. = I x 29
n care I este nlimea n centimetri. Valoarea
standard se compar apoi cu valoarea real obinut
prin determinarea capacitii vitale la aparat i se
apreciaz n procente la sut plusul sau minusul fa
de acest standard, de exemplu: o persoan de sex
Spirometru :
feminin are nlimea de 160 cm. Capacitatea vital
1- vas cu ap
standard este de 160 x 20 =3200 cm3. Dac n urma
2- clopot metalic
determinrii capacitii vitale reale (C.V.R.) s-au
3- rigl gradat
4- contragreutate pentru echilibrarea clopotului
gsit 3000 cm3 nseamn c exist o diferen de 200
5- tub de cauciuc care se adapteaz la cavitatea
cm3 ntre C.V.S. i C.V.R.(3200 3000= 200) . prin
bucal
calcul se stabilete n procente % minusul de 6,6%
6- indicator

116

CLASA A XII-a

Genetic
Modelarea structurii dublu catenare a ADN-ului
Materiale necesare: carton sau placaj, trus de traforaj, echer, compas, patru culori diferite,
srm de cupru sau aluminiu de diferite grosimi, ace cu gmlie.
Mod de lucru:
1. Desenarea pe carton sau pe placaj a modelului adeninei, guaninei, timinei i citozinei dimensiunea
5-10 cm (5 cm pt. pirimidine i 10 cm pentru. purine). fig. 1
2. Decuparea modelului fiecrei baze azotate i colorarea modelelor: A-galben, T-negru, G-rou, Calbastru. Se realizeaz circa 30-40 de copii pentru fiecare baz azotat.
3. Desenarea modelului dezoxiribozei sub forma unui hexagon ca cel din figur, cu stabilirea poziiei
carbonului 3 i 5 (care apare ca o prelungire a hexagonului la unul din capetele sale ascuite).
Efectuarea a 30-40 de copii.
4. Desenarea unui ptrat cu latura de 3-4 cm, reprezentnd radicalul fosforic. Efectuarea a 30-40 de
copii.

10 cm
purin

5cm
pirimidin

4cm
dezoxiriboz

2cm
radical fosforic

Fig. 1. Modelarea componentelor ADN-ului

5. Folosind fig. 1, stabilii o succesiune de baze azotate pentru una din catenele dublei elice ( de exemplu
A,G,C,T,T,A,A,G,C,T,T,A,A,T,A,T,T,A,G,G,G,C,C,A,A).
6. Pe principiul complementaritii, stabilii cu ajutorul decupajelor bazelor azotate succesiunea de pe
catena
complementar
(
n
cazul
de
mai
sus
ea
va
fi:
T,C,G,A,A,T,T,C,G,A,A,T,T,A,T,A,A,T,C,C,C,G,G,T,T).
7. Legai bazele azotate la cele dou catene complementare prin puni de hidrogen (duble ntre A i T i
triple ntre C i G), folosindu-v de srme mai groase dect cele folosite la legturile dintre celelalte
componente. Srmele le prindei n modelul bazelor azotate la locul potrivit, aa cum se vede n fig. 2
8. Stabilii legtura dintre modelul bazei azotate i acela al dezoxiribozei cu ajutorul srmei, fcnd un
orificiu n cele dou modele la locul potrivit conform Fig.2

117

9. Stabilii legtura dintre modelul dezoxiribozei i acela al radicalului fosforic, urmrind regula ca la o
caten aceast legtur s fie de la carbonul 5 la carbonul 3, iar la catena complementar de la 3 la
5, sugernd sensul opus al celor dou catene complementare.

Toate materialele indicate, ca i soluiile tehnice folosite sunt variabile n funcie de ingeniozitatea i
posibilitile fiecrui experimentator.

118

Evidenierea cromatinei sexuale

La mamifere, inclusiv la om, determinismul cromozomial al sexului este de tip Drosophila: XX pt.
femel i XY pt. mascul. Cromozomul Y a suferit n cursul evoluiei mamifer4lor o continu degradare
genetic, heterocromatinizndu-se. El poart doar gena sau genele care determin transformarea
progonadei n testicul. Rezult c femela mamiferelor, avnd doi cromozomi X, ar prezenta un numr mai
mare de gene dect sexul mascul. Aceast situaie ar fi incompatibil cu existena normal a speciilor. Din
aceast cauz i la femela mamiferelor unul din cei doi cromozomi X a suferit o heterocromatinizare
(inactivare genic). Acest cromozom X, heterocromatic apare n nucleul interfazic sub forma unui
corpuscul oval sau triunghiular lipit de membrana intern a nucleului i este numit cromatin sexual sau
corpuscul Barr.
Materiale necesare: soluie carmin-acetic, ac spatulat pstrat n condiii aseptice, lame i lamele
microscopice, hrtie de filtru.
Mod de lucru. Se colecteaz mucoasa bucal prin raclarea peretelui lateral al cavitii bucale cu
un ac spatulat steril sau cu o lam microscopic steril, ndeprtnd primul strat de celule epiteliale (care
sunt descuamate, moarte) i prelevnd un strat de celule vii. Se pune materialul pe o lam microscopic
mpreun cu o pictur de carmin-acetic. Se aplic lamela. Se las 2-3 minute. Se ndeprteaz excesul de
carmin, se apas puternic peste lamel cu degetul mare, pentru etalarea celulelor. Nucleul apare colorat n
rou. n cazurile normale, la femeie se identific n interiorul nucleului un corpuscul mic, mai puternic
colorat dect restul nucleului, care este corpusculul Barr. La brbai nu se identific cromatina sexual n
cazurile normale

Leucocit polimorfonuclear cu
corpuscul Barr

119

Tipuri particulare de cromozomi

n afara tipurilor obinuite de cromozomi au mai fost descrise i unele tipuri particulare. Astfel n
ovocitele de triton, deci n meioz, au fost descrii
cromozomii plumoi sau n perie de sticl de lamp
care prezint o ax central din care pornesc bucle
I
laterale. De asemenea, n glandele salivare de la
II
larvele musculiei de oet ( Drosophila
melanogaster) au fost descrii cromozomii uriai
IV
sau politeni (fig.1)
III

Fig.1

n
celulele
obinuite ale corpului drosofilei se afl cte 8 cromozomi care
formeaz patru perechi (I-IV); 3 perechi de autozomi i o
pereche de heterozomi (cromozomi ai sexului) (XX la femel,
la mascul) fig. 2

Fig.2

XY

Evidenierea cromozomilor uriai

Materiale necesare: lame i lamele microscopice, ac spatulat, soluie carmin-acetic, lam de
spirt, hrtie de filtru, larve de drosofil n stadiul III (nainte de mpupare).
Mod de lucru: Se folosesc larve n stadiul III
de Drosophila sau Chironomide, femele, care sunt mai
mari dect cele mascule. Glandele salivare sunt plasate
n partea anterioar a corpului larvei legate de
armtura bucal, care apare ca un punct negru prin
transparena tegumentului. Cu ajutorul acului spatulat
se face o incizie napoia acestui punct negru. Printr-o
Fig.3
micare de smulgere se detaeaz aceast parte
anterioar a corpului care se pune ntr-o pictur de
carmin-acetic n care st circa 3 minute. Se aplic
lamela, apoi hrtia de filtru. Se preseaz puternic cu
degetul mare pentru etalare. Se nltur excesul de
carmin i apoi se examineaz la microscop. Cele mai frumoase imagini se obin la cromozomii uriai de
la Chironomus (fig. 3)
Se recomand aceast insect ntruct larvele sale pot fi uor procurate. La nivelul cromozomului
uria de Chironomus se pot evidenia foarte uor i pufele (dezlnri locale ale cromozomului la nivelul
crora se sintetizeaz ARN-ul ribozomal)

120

Structura i morfologia cromozomilor. Cariotipul

La debutul diviziunii cromozomul prezint dou subuniti structurale longitudinale numite
cromatide, libere pe toat lungimea
lor, fiind unite numai la nivelul unei
constricii
primare
numit
centromer. Unii cromozomi pot
prezenta i constricii secundare la
nivelul crora se organizeaz
nucleolul la sfritul diviziunii, ca
i formaiuni heterocromatice, la un
Fig.1
capt, numite satelii. (fig.1)
Cea mai constant morfologie a cromozomilor se ntlnete n metafaz, cnd acetia ating cel mai
nalt grad de contractare-condensare.
n interiorul cromatidei se afl dou filamente spiralate numite cromoneme rsucite reciproc
helicoidal i prezentnd din loc n loc ngrori ca nite mrgele numite cromomere.
Dup poziia centromerului (fig. 2), cromozomul poate fi:
- metacentric (centromerul este situat la
mijlocul cromozomului, rezultnd dou
metacentric
brae egale);
submetacentric
- submetacentric
(centromerul
este
deplasat
fa
de
centru,
rezultnd
dou
acrocentric
brae inegale);
telocentric
acrocentric (centromerul este deplasat
Fig.2
spre un capt al cromozomului
rezultnd un bra foarte lung i unul foarte scurt, izodiametric);
- telocentric (centromerul este plasat pe captul cromozomului acesta avnd un singur bra)
Materiale necesare: preparate citologice cu cromozomi de Allium i Mesocricetus sau oricare
alt plant sau animal, microscop binocular cu obiectiv de imersie (x 90), ulei de imersie, micrometru
ocular i micrometru obiectiv, camer clar, foarfece, past de lipit, rigl de msurat.
Mod de lucru:
-Se vizualizeaz lamele microscopice cu preparate la obiectiv 40. Se aleg cele mai bune metafaze (fr
cromozomi suprapui, dar cu cromatide bine ndeprtate, n urma aciunii colchicinei). Se vizualizeaz la
obiectiv de imersie.
-Se numr cromozomii, se deseneaz la camera clar cromozomii din placa metafazic aleas.
-Se msoar cromozomii cu ajutorul micrometrului ocular dup o prealabil stabilire a echivalenei ntre
scala micrometrului ocular i a micrometrului obiectiv (de exemplu 10 gradaii din micrometrul ocular
intr n 8 gradaii ale micrometrului obiectiv). Dac nu dispunem de micrometru ocular i obiectiv
cromozomii se msoar pe desenul realizat la camera clar cu ajutorul riglei de msurat, asemenea
operaie servindu-ne numai pentru mperecherea cromozomilor, nu ns i pentru aprecierea dimensiunii
cromozomilor.
-Dup desenarea la camera clar i msurarea fiecrui cromozom se stabilete tipul morfologic pentru
fiecare cromozom i se scrie lng el, folosind simbolurile: m = metacentric; sm submetacentric; t
telocentric; ac acrocentric; st subtelocentric.
-Se detaeaz fiecare cromozom din placa metafazic desenat; folosind foarfecele, decuparea fcndu-se
cu pstrarea unui spaiu de civa milimetrii de jur mprejurul cromozomului.
-Se mperecheaz cromozomii, mai nti, considernd lungimea total a lor i poziia centromerului i mai
apoi, considernd raportul dintre brae pentru a stabili poziia precis a centromerului.
-Se lipesc cromozomii n perechi dup dimensiune i morfologie, alctuindu-se astfel cariotipul. Studiul
cariotipic al speciilor ne ajut s evideniem nrudirea sau nenrudirea dintre ele, precum i modificrile
121

care au loc la nivelul materialului genetic sub influena diferiilor factori nocivi. De asemenea, ne ajut s
elucidm cile pe care a mers evoluia speciei considerate.
Studiul cariotipului uman , ne ajut la stabilirea cu certitudine a naturii unor maladii ereditare care
au la baz modificri n numrul i structura cromozomilor (trisomia 21 un cromozom suplimentar la
perechea 21, sindroame cu defecte fizice i psihice remarcabile sindrom Klinefelter, sindrom Turner).

Cariotip
normal

Fig.3

Cariotip
patologic

122

Cariotipul uman a fost descoperit n 1956 de Tjia i Lenon cu ajutorul ocului

hipotonic. Cariotipul este aranjarea dup mrime i morfologie a cromozomilor. Cromozomii
umani sunt repartizai n 7 grupe A-G la care se adaug perechea de cromozomi de sex.
Grupele cuprind cromozomii astfel: A1-7; B4-5; C6-12; D13-15; E16-18; F1920; G21-22; perechea de sex.

123

CARIOTIPUL UMAN

124

Studiul aciunii unor ageni mutageni asupra materialului genetic la plante i la animale
Materiale necesare: dotare standard pentru aplicarea metodei Feulgen sau Giemsa, substane
chimice mutagene (dietilsulfat, etilmetansulfonat etc.), pesticide, raticide, diveri ageni poluani (SO2),
colchicin n concentraie de pn la 2%, acionnd statmochinetic i determinnd poliploidizarea.
Mod de lucru: Se folosesc soluii apoase 0,5-1% de dietilsulfat, procurate de la laboratoarele de
chimie sau genetic.
Se administreaz animalelor de laborator n hran sau se trateaz radicelele de ceap sau seminele
de secar, gru, orz, etc. cu asemenea soluii, n diluii succesive: 0,001, 0,01, 0,1, 1%, timp de 1-24 de
ore. Dup tratarea radicelelor cu substana mutagen, acestea se scot din fiolele n care s-a realizat
tratamentul i dup o atent splare cu ap de robinet i ap distilat sunt folosite n efectuarea
preparatelor citologice, n care se evideniaz modificri n structura materialului genetic i n
comportamentul cromozomilor n mitoz. Cele mai comune sunt fragmentarea cromozomilor, picnoza,
apariia de cromozomi inelari, dispunerea radiar a cromozomilor n metafaz i apariia de cromozomi
retardatari ntrziai (care nu migreaz spre poli n anafaz sau telofaz). Pe seama cromozomilor
ntrziai pot aprea la sfritul diviziunii micronuclei pe lng nucleii-fii obinuii.
Determinarea gradului de ploidie la plante
Prin metode directe: Se fac preparate citologice i se numr direct cromozomii n metafaz.
Prin metode indirecte:
a. Macroscopice. S-a constatat c exist o corelaie direct ntre gradul de ploidie i anumite caractere
morfologice sau productive, astfel:
- culoarea frunzelor este mai nchis la plantele poliploide dect la cele diploide corespunztoare;
- greutatea rdcinii i concentraia de zahr la sfecla triploid i tetraploid sunt mai mari dect la
plantele diploide;
- formele autotetraploide au un numr mai mic de fructe i de semine per plant dect formele diploide
corespunztoare.
b. Microscopice. Exist o corelaie direct ntre numrul de cloroplaste i numrul de stomate, pe de o
parte, i gradul de ploidie pe de alt parte. Numrul de stomate pe unitatea foliar este mai mic la
formele poliploide comparativ cu cele diploide corespunztoare.
Mod de lucru: Cu ajutorul unei pense se desprinde epiderma inferioar a frunzelor de sfecl de
zahr diploid, triploid i tetraploid, fixate n alcool acetic 3:1. Pe o lam microscopic se pune
epidrma ntr-o pictur de soluie de iod n iodur de potasiu, care coloreaz amidonul din
cloroplaste, evideniindu-le mai bine pe acestea. Se aplic lamela. Se numr cloroplastele i se
msoar cu ajutorul micrometrului ocular diametrul lung al stomatelor la 50-100 de stomate.

125

Exerciii de caracterizare genetic

Stabilire spectrului genetic individual (experimentatorul trebuie s-i cunoasc bunicii i eventual
strbunicii pot culege date de la prini , bunici, rude).
Materiale necesare: o coal de hrtie, compas, echer, rigl. Se iau n considerare urmtoarele
caractere individuale:
1. Culoarea ochilor: culoarea albastr este recesiv fa de alte culori
2. Culoarea prului: pr blond recesiv fa de cel nchis; pr rou recesiv fa de culorile mai nchise
3. Direcia de orientare a prului: vrtej n direcia mersului acelor de ceasornic dominant fa de vrtejul
n sens invers
4. Pr cre dominant fa de cel neted
5. Prezena prului pe segmentul mijlociu al degetelor (altele dect arttorul) dominant fa de absena
prului
6. Daltonismul (confuzia culorilor) recesiv fa de vederea normal
7. Chelia prematur sau regulat este motenit ca un caracter dominant care se manifest n jurul vrstei
de 34 de ani. Caracterul nu se manifest dect extrem de rar la femei (este un caracter limitat de sex).
Elevii pot s aprecieze situaia lor, judecnd pe cea a prinilor, dat fiind dominana caracterului.
8. Lobul aderent al urechii este recesiv fa de cel liber sau pendul
9. Posibilitatea de a da degetul mare pe spate dominant fa de condiia opus cu ligamente strnse
10. Capacitatea de a degusta unele substane precum tioureea sau feniltiocarbamida este dominant fa
de incapacitatea de a degusta aceste substane
11. Prezena gropiei n obraz este dominant fa de absena acesteia
12. Vrful vduvei prul de pe frunte extins n centrul ei ca un triunghi dominant fa de linia
dreapt a prului pe frunte
13. Capacitatea de a ndoi limba, astfel nct marginile laterale s formeze un U este dominant fa de
incapacitatea de ndoi astfel limba.
Mod de lucru: Se alctuiete o hart privind caracteristicile individuale ereditare ale fiecrui
individ dup modelul din figur.

126

Bibliografie selectiv

01
02
03
04
05
06
07
08
09
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20

Anghel I. i col.-Practicum de Biologie (vol.I i II), Societatea de tiine Biologice; Bucureti,

1989
Andrei M., Anghel I, Popescu I., Stoica E.- Lucrri practice de Biologie vegetal, EDP,
Bucureti,1981
Ciurchea M., Ciolac Russu A., Ion I- Metodica predrii tiinelor biologice,EDP, Bucureti,
1983
Ceuca T., Valenciuc N., Popescu A- Zoologia vertebratelor, EDP, Bucureti, 1983
Gavril L, Toma N- Biologie, Manual pentru clasa a IX-a, Editura Economica Preuniversitaria,
Bucureti, 2004
Cotuna D-Fiziologie, Editura Mirton, Timioara, 1998
Grinescu I.-Botanica, Editura tiinific i Enciclopedic, Bucureti, 1985
Kereke A. Biologie pentru grupele de performan, Editura Dacia Educaional, Cluj Napoca
2003
Lepi I.- Protozoologie, Editura Academiei R.S.R., 1965
Marinescu J., Drgnescu C.- Microbiologia produselor alimentare, EDP R.A., Bucureti, 1990
Matic Z, Drbanu C.- Lucrri practice de zoologia nevertebratelor, EDP, Bucureti, 1965
Matic Z. i col .- Zoologia nevertebratelor, EDP, Bucureti, 1983
Olteanu F. i col .- Trus de Biologie pentru elevi- liceu, ntreprinderea Didactica, 1981
Prvu C.- Universul Plantelor-mic enciclopedie, Editura Enciclopedic, Bucureti, 1997
Prvu C.-ndrumar pentru cunoaterea naturii, EDP, Bucureti, 1981
Popovici L., Moruzi C.,Toma I.- Atlas Botanic , EDP R.A., Bucureti, 1994
Raicu P-Genetica, EDP, Bucureti, 1992
Stoica M., Mihilescu I.-Lucrri practice de Anatomie i Fiziologie animal, EDP, Bucureti,
1974
Tavernier R. et. col.-Biologie-Geologie, Bordas, Paris, 1988
Wilkinson R. -Compendiu de Biologie, Editura ALL Educaional (traducere de Vasilescu S.).
Bucureti, 1999

127

CUPRINS
Argument ..
Introducere
Cuvnt limba englez.....
Biologie clasa a IX-a- Metode de sterilizare utilizate n microbiologie...
Tipuri morfologice de baz la bacterii....
Studiul mediilor de cultur utilizate n bacteriologie...
Tehnici de nsmnare utilizate n microbiologie
Metode de examinare a microorganismelor la microscop
Structura celulei bacteriene
Celula animal i celula vegetal...
Tipuri de celule eucariote
Observaii asupra structurii unor alge unicelulare i pluricelulare
Comparaie ntre celula vegetal i animal..
Bacterii, alge verzi, fotosinteza...
Cloroplastele i micrile citoplasmatice n celulele frunzelor de ciuma apelor...
Evidenierea plasmalemei i a tonoplasmei...
Morfologia cromoplastelor.
Incluziuni ergastice..
Epiderma i formaiunile epidermice.
esuturi mecanice sau de susinere
Osmoza..
Tehnica evidenierii cromozomilor.
Studiul meiozei la plante..
Structura organelor vegetative-observaii.
Structura frunzei..
Structura organelor vegetative- lucrri practice de microscopie
Structura primar a rdcinii de Ranunculus repens...
Structura primar a tulpinii de Ranunculus repens...
Structura intern a frunzei de ridiche-Raphanus sp..
Organe de reproducere la plante
Observaii microscopice asupra unor protozoare.
Spongieri...
Cnidari...................................................................................................................................................
Viermi ...
Molute .
Artropode .
Echinoderme..
BIOLOGIE CLASA A X- A.....
Experiene de evideniere, msurare i nregistrare a excitabilitii neuromusculare.
Excitabilitatea muscular.
Tipuri de aparat locomotor la nevertebrate i la vertebrate
notul i echilibrul pstrvului n ap.
Separarea pigmenilor asimilatori prin metoda cromatografiei pe hrtie..
Influena factorilor externi asupra fotosintezei.
Influena intensitii luminii
Influena compoziiei spectrale a luminii
Influena temperaturii asupra fotosintezei.
Evidenierea necesitii existenei pigmenilor asimilatori...
Punerea n eviden a fotosintezei prin metoda bulelor
Evidena oxigenului eliminat n fotosintez
Asimilaia CO2 n fotosintez...
128

3
5
6
7
9
11
12
14
17
18
19
20
22
23
24
25
25
26
28
29
30
31
32
33
34
36
36
37
38
39
40
45
46
48
55
60
66
67
67
68
69
71
73
74
74
74
75
75
75
76
76

Evidenierea cilor de conducere a apei n corpul plantelor

Evidenierea rolului forei de suciune a frunzelor n conducerea apei n .
Micrile plantelor
Evidenierea geotropismului tulpinilor i rdcinilor...
Micri prin imbibiie...
Evidenierea respiraiei celulare..
Evidenierea respiraiei tisulare..
Disecii la vertebrate.
Disecia la petii osoi (Perca fluviatilis bibanul.................................................................................
Disecia la broasca de lac ( Rana ridibunda)........................................................................................
Disecia la oprla cenuie (Lacerta agilis)..
Disecia la porumbel (Columba livia)...
Disecia la iepurele de cas (Oryctolagus cuniculus)...
ANATOMIA I FIZIOLOGIA OMULUI-CLASA A XI-A..
Morfologia, structura i compoziia chimic a oaselor..
Structura microscopic a osului..
Studiul carbohidrailor.
Studiul enzimelor..
Evidenierea lecitinei din ou.
Evidenierea vitaminei C..
Animale de experien..
Analiza actului reflex
Oboseala sinaptic
Fiziologia muchilor: preparate neuromusculare, contracia muscular...
Legile reflexelor.
ANALIZATORI..
Analizatorul cutanat.
Analizatorul olfactiv.
Olfactometria.
Analizatorul optic..
Acomodarea ochiului
Reflexul pupilar pentru dozarea intensitii luminii.
Acomodarea pentru vederea obiectelor situate la distane diferite.
Punerea n eviden a petei galbene i a punctului orb.
Culori complementare..
Percepia micrii..
Micarea consecutiv
FUNCII DE NUTRIIE
Aciunea digestiv a amilazei salivare
Stomacul
Emulsionarea grsimilor cu ajutorul bilei..
Sngele...
Recoltarea sngelui. Observarea elementelor figurate. Frotiul de snge
Determinarea grupelor sanguine.
Observaia circulaiei capilare.
Structura inimii
Observarea activitii cardiace
Respiraia...
Identificarea prezenei bioxidului de carbon n aerul expirat..
Punerea n eviden a consumului de oxigen..
Msurarea capacitii vitale
CLASA A XII-a..
Modelarea structurii dublu catenare a ADN-ului..
Evidenierea cromatinei sexuale..
129

75
76
77
77
78
79
79
80
80
81
82
83
84
87
87
88
89
90
91
91
92
92
93
94
96
97
97
98
99
99
100
100
101
102
102
103
103
104
104
105
105
106
106
107
109
110
111
112
114
115
116
117
117
119

Tipuri particulare de cromozomi

Evidenierea cromozomilor uriai...
Structura i morfologia cromozomilor. Cariotipul
Studiul aciunii unor ageni mutageni asupra materialului genetic la plante i la animale..
Determinarea gradului de ploidie la plante
Exerciii de caracterizare genetic..
Bibliografie ...
Cuprins .

130

120
120
121
124
125
126
127
128