PROTEINE SERICE.
Electroforez
CONINUTUL KITULUI
25 folii Cellogel (5,7 x 14 cm)
Tampon Tris-hipurat pH 8,8 (2 x 100 ml)
Soluie de colorare Ponceau S (200 ml)
3 plicuri substan de decolorare - pudr
Soluie de transparentizare (200 ml)
STABILITATEA REACTIVILOR
Toi reactivii se pstreaz la temperatura camerei, ferii de
aciunea direct a soarelui (dac nu se specific altfel).
MATERIALE NECESARE NEINCLUSE N KIT
Hrtie de filtru
Ap distilat pentru pregtirea tamponului i
a soluiei de decolorare
Cilindru gradat
Pensete pentru manipularea foliilor de Cellogel
Pipet automat (de 40 l i 20 l)
Tvie pentru tamponare, colorare, splare i
transparentizare
COLECTAREA PROBELOR
Dac se dorete evaluarea componentei C3 se folosesc
probe de ser foarte proaspete. S se evite folosirea plasmei
pentru c fibrinogenul poate disturba interpretarea zonei
gamma.
PRINCIPIUL TESTULUI
La pH 8,8 toate proteinele sunt ncrcate negativ, unele
mai puternic dect altele, migrnd astfel n cmp electric
spre anod.
MODUL DE LUCRU
se prepar soluiile. Soluia tampon pentru
metoda semimicro (4 probe) se va prepara la
concentraia 100:900, iar pentru metoda micro (8
probe) concentraia va fi de 100:700.
se echilibreaz foliile Cellogel timp de 10-15 min
n soluia tampon;
se ndeprteaz excesul de tampon prin
tamponare ntre dou foi de hrtie de filtru;
se plaseaz folia pe punte i se introduce n baia
de migrare;
se ncarc aplicatorul i se aplic probele la
captul catodic (la 2 cm de margine);
se acoper baia i se conecteaz la sursa de
tensiune. Voltajul i timpul de migrare sunt: 130
V, 25 min (130 V, 35 min pentru electroforeza
semimicro).
dup expirarea timpului de migrare se ntrerupe
sursa de tensiune. Se ndeprteaz folia de
pe punte i se imerseaz n soluia de colorare
Ponceau S timp de 10 min.
se decoloreaz de preferin n acid acetic 5%
(neinclus n kit) sau n acid citric (inclus n kit).
Sunt necesare trei bi succesive.
se imerseaz folia decolorat n soluia de
transparentizare timp de 4 minute;
PROTEINE SERICE. Electroforez
se plaseaz folia pe un film Mylar i se
ndeprteaz bulele de aer i excesul de soluie
cu ajutorul unei baghete de sticl;
se usuc la 80 oC timp de 10 minute sau cu
ajutorul unui usctor de pr;
se scaneaz i se interpreteaz.
VALORI NORMALE
Proteine totale n ser normal: 6 8 g/dl. Acestea sunt
reprezentate de albumina seric i o varietate de
globuline serice.
Albumin: 54 66% (3,6 5,2 g/dl)
Alfa-1 globulin: 1,5 4,5% (0,15 0,4 g/dl)
Alfa-2 globulin: 5,5 10% (0,5 1,0 g/dl)
Beta globulin: 8 13% (0,6 1,2 g/dl)
Gamma globulin: 11 20% (1,1 1.6 g/dl)
Aspectul normal al migrrii proteinelor serice se prezint
astfel:
Un grafic detaliat al reprezentrilor diverselor
componente migrate electroforetic este prezentat la
sfritul acestui capitol.
INTERPRETAREA REZULTATELOR
Pre-Albumin
Existena unor valori crescute ale pre-albuminei se poate
datora sarcinii sau unui sindrom nefrotic, iar lipsa total a
acestei zone poate indica malnutriie, afeciuni hepatice
sau un proces inflamator acut.
Albumin
Valori ridicate:
deshidratarea organismului
Valori sczute:
malnutriie
boli hepatice cronice
malabsorbie
sindrom nefrotic
SLE (Systemic Lupus Erythematosus)
arsuri
Cazuri speciale:
Bis-albuminemia
Specificul acestei reprezentri este detaarea unei
fracii mai lente fa de albumina normal.
Acest fapt nu este legat de nici un fel de condiii
patologice specifice.
pagina 1
PROTEINE SERICE. Electroforez
Valori ridicate:
infecii acute i cronice - indicaie tipic
reacii febrile
inflamaii
Valori sczute:
emfizem pulmonar
deficien de -1 antitripsin
nefroz
Alfa-2 globuline (haptoglobin, ceruloplasmin, 2
macroglobulin, HDL-High Density Lipoprotein)

Analbuminemia
Este o reprezentare a unei alterri congenitale a
sintezei albuminei. Aceasta poate fi n cantiti
foarte sczute sau total absent (sub 1%). Cu
toate c nivelul sczut de albumine este o
caracteristic a mai tuturor condiiilor patologice,
pacienii cu analbuminemie sunt relativ sntoi.

-2 macroglobulina poate fi prezent n serul copiilor n

Zon intermediar (alfalipoprotein) cantiti duble sau triple fa de aduli datorit faptului
Dac ntre albumin i -1 apare o zon mai pronunat c aceasta transport hormoni (hormoni de cretere,
aceasta poate fi alfalipoproteina care denot o insulin, estrogeni). Prin urmare, n sarcin i la copii
hiperlipidemie crescut. valorile ridicate pot fi prezente fr s ofere indicaii ale
unor afeciuni.
Alfa-globuline
Haptoglobina, componenta catodic a -2 globulinei este
Alfa-1 globuline. Conin -1 antitripsin, -1glicoprotein un indicator al sintezei hepatice.
acid sau orosomucoid i alfalipoprotein. Coloranii Valori ridicate:
convenionali evideniaz puternic -1 antitripsina i
ciroz biliar
aproape deloc -1 glicoproteina acid.
mielom multiplu (rar)
colite ulcerative
boli neoplazice
icter obstructiv
inflamaii
infecii
boli nefrotice
Valori sczute:
anemie hemolitic acut
deteriorare hepatocelular sever

pagina 2
 PROTEINE SERICE. Electroforez
Beta-globuline (transferin, -lipoprotein sau LDL-Low Valori ridicate:
Density Lipoprotein, C3, plasminogen) infecii cronice
boli hepatice
boli autoimune
boala colagenului vascular
mielom multiplu
macroglobulinemie Waldenstrom
leucemie

Valori sczute:
La persoanele n vrst
agammaglobulinemie
hipogammaglobulinemie
sindrom nefrotic
ca efect secundar al unei medicaii
Studiul imunoglobulinelor poate oferi indicaii importante
astfel:
Dac variaiile cantitative indic sporirea cantitilor
de imunoglobuline nseamn c organismul a
fost supus unor ageni patogeni care au declanat
hipergamaglobulinemia. IgG este crescut n infecii
acute i cronice, IgA predomin n afeciunile hepatice iar
IgM este specific mai ales infeciilor produse de parazii.
O cretere general, lent, a nivelului hemoglobinelor este
n general, pe acetatul de celuloz nu se separ cele dou o indicaie a unei hipergamaglobulinemii policlonale.
componente 1 - mai rapid i 2 - mai lent. Oricum, un Ciroza hepatic
nivel crescut al fraciunii indic afeciuni asociate cu Un aspect tipic este n ciroza hepatic:
deficienele de fier prin componenta anodic a acesteia,
transferina.
Valori ridicate:
hipotiroidism
ciroz hepatic
icter obstructiv
mielom multiplu (ocazional)
Diabetes Mellitus
Valori sczute:
hipocolesterolemie
nefroz

Gamma-globuline (anticorpii)
Dup o sintez crescut de IgA, alura specific
a curbei curbei reflect o punte ntre beta
i gamma, odat cu scderea procentului de
albumine.
Hipogamaglobulinemia
Poate fi congenital sau dobndit i se detecteaz
uor prin electroforeza proteinelor serice datorit
nivelului foarte sczut al fraciei gamma. Este un
indice al unor afeciuni imunodegenerative,
dar necesit investigaii suplimentarepentru
confirmare:

pagina 3
PROTEINE SERICE. Electroforez
Gamapatii monoclonale Erori de interpretare
Se evideniaz prin detectarea unui component
monoclonal. Sunt specifice unei largi patologii, n Factori care duc la erori de interpretare a electroforezei
funcie de componentul detectat, cu manifestri proteinelor serice:
clinice i biologice foarte diferite: analbuminemia
bis-albuminemia
heterozigoi ai -1 antitripsinei
alfafetoproteina prezent n cantiti mari
hemoglobina liber datorat unei hemolize
masive
fibrinogenul
proteina C-reactiv
lizoenzimele
Bibliografie
1 M.A.L.T.A. Italia - Cellogel Clinical Electrophoresis
Booklet
2 M.A.L.T.A Italia - Product leaflet for Serum
Proteins
3 Indiana University - Virtual Laboratory Medicine
Index
4 Interlab Italia - Serum Protein Electrophoresis
leaflet, Release 09, 19 Oct. 2001
5 Associated Regional and Universal Pathologists
Laboratories Technical Bulletins, 2001-2002

Aspectul tipic l d concentrarea uneia sau a mai

multor benzi n zona gamma.

pagina 4