Petcu Florin-Raul

Master, Fizică Medicală Aplicată, Anul I

Trasarea curbei de supravieţuire in cazul microorganismelor

expuse la radiaţii

1. Scopul experimentului
Scopul acestui studiu este să evidențieze reducerea densității unei populații de
microorganisme sub influența radiațiilor ionizante. Se va efectua o analiză pentru
determinarea relației matematice dintre proporția de supraviețuire a microorganismelor și
doza la care acestea au fost expuse, folosind metodele de măsurare turbidimetrice.

2. Materiale şi dispozitive necesare

a) Suspensie stoc de celule de microorganisme dintr-o suşă controlată genetic

b) Bec de gaz pentru lucru la flacără, în zonă semisterilă
c) Eprubete şi pipete sterilizate termic
d) Sursă de radiaţii gamma
e) Spectrocolorimetru sau spectrofotometru pentru determinările turbidimetrice ale
densităţii de celule

3. Modul de lucru
a) Se pregătește suspensia de celule de microorganisme - drojdia de bere (Saccharomyces
cerevisiae) și se repartizează în 6-8 eprubete sterile cu mediu Sabouraud lichid.

b) Se determină densitatea suspensiei de microorganisme (exprimată ca proporție de

supraviețuire) prin măsurarea turbidității suspensiei (rezultată din extincția luminii,
neglijând absorbția) folosind un spectrocolorimetru (cu un filtru centrat pe o lungime de
undă cât mai mică în raport cu dimensiunile celulelor, pentru a evita fenomenele de
difracție care se suprapun peste fenomenul principal de dispersie a luminii, pe care se
bazează măsurarea turbidimetrică). De exemplu, se poate lucra cu o lungime de undă de
550 nm (recomandată).
 c) Eprubetele cu suspensie de celule sunt expuse la sursa de radiații pentru diferite perioade
de timp (care au fost testate anterior pentru a obține efecte măsurabile în funcție de doza
de radiații a sursei), iar apoi sunt menținute la temperatura constantă de 24 de grade
Celsius timp de 48 de ore.

d) După scoaterea din termostat, se măsoară din nou turbiditatea fiecărei probe.

e) Se evaluează rapoartele de supraviețuire pe baza citirilor turbidimetrice ale fiecărei probe

în comparație cu martorul de iradiere. Valorile sunt înregistrate într-un tabel.

f) Se reprezintă grafic logaritmul natural al fiecărui raport în funcție de doza de radiații

(care este proporțională cu durata de expunere).

g) Din panta porțiunii lineare a curbei semilogaritmice care descrie relația dintre efect și
doză, se determină radiorezistența 𝐷0 .

Tabel de cu rezultate experimentale

Timpul de
Raportul Logaritmul Doza absorbită
Proba iradiere Absorbanța
absorbanțelor raportului (mGy)
(ore)
Martor 0 0.0899 1 0 -

Proba 1 1 0.6141 6.830923 -0.4876 1.48

Proba 2 2 0.505 5.617353 -0.6832 2.96

Proba 3 3 0.4306 4.789766 -0.84258 4.45

Proba 4 4 0.2585 2.875417 -1.35286 5.93

Proba 5 5 0.1095 1.21802 -2.21183 7.42

Figură 1 - Graficul dependenței dintre logaritmul raportului absorbanțelor și doză
Figură 2 - Fitarea graficului dependenței dintre logaritmul raportului absorbanțelor și doză
 Figură 3 – Graficul rapoartelor de absorbanță N/N0 în funcție de doza absorbită

Din fitarea graficului dintre dependența logaritmului rapoartelor de absorbanță și doză, reiese
că panta graficului este 277.46.
Având în vedere că:
1
𝑡𝑔(𝛼) =
𝐷0
Putem scrie:
1 1
277.46 = => 𝐷0 = = 3.6 𝑚𝐺𝑦
𝐷0 277.46

Astfel, doza la care rata de supravețuire este redusă de 𝑒 ori este 𝐷0 = 3.6 𝑚𝐺𝑦.
4. Concluzii
Analizând Figura 1. - graficul dependenței dintre logaritmul raportului absorbanțelor,
pentru fiecare probă față de martor, față de doza absorbită, observăm o evoluție exponențială
a acestuia.
De asemenea, analizând același grafic, observăm că această evoluție devine exponențială
în jurul unei valori de peste 3 mGy.
Calculând panta și 𝐷0 , cu valoarea de 3.6 mGy, aflăm doza la care evoluția curbei de
supravețuire scade de e ori.
De asemenea, analizând graficul curbei, vedem că odată cu creșterea dozei, rata de
supravețuire scade cu aceasta, având în vedere că absorbanța scade, iar raportul N/N0, devine
din ce în ce mai mic.

5. Articole
- Luria, Salvador E., and Raymond Latarjet. "Ultraviolet irradiation of bacteriophage
during intracellular growth." Journal of Bacteriology 53.2 (1947): 149-163

- Sosnin, Edward A., et al. "The effects of UV irradiation and gas plasma treatment on
living mammalian cells and bacteria: a comparative approach." IEEE Transactions on
Plasma Science 32.4 (2004): 1544-1550.