Metode spectrale de analiză-

Infraroşu

Farmacist rezident Condurache Mihaela-Cristina

 Cuprins

1.Metode sprectrale de analiză infraroşu – generalități

2.Aplicații practice
2.1 Comparație între comprimatele de furosemid de 40 mg originale și cele
generice folosind spectroscopie în infraroșu cu transformata Fourier
2.2 Monitorizarea Ibuprofenului în timpul şi după compresie utilizând
spectroscopie NIR
3. Concluzii
Bibliografie
 Metode sprectrale de analiză infraroşu – generalități

Radiația infraroşie (IR) reprezintă acea parte a spectrului electromagnetic, cuprinsă între regiunea vizibilă şi cea de
microunde, care este caracterizată prin lungimi de undă de ordinul a 10 -5 m.
Datorită faptului că domeniul lungimilor de undă acoperit de radiația infraroşie este mare, domeniul de frecvență în
infraroşu se împarte în trei subdomenii:
 infrarosu apropiat (NIR) absorb oscilații combinate;
 infraroşu mediu (MIR) absorb oscilații moleculare;
 infraroşu îndepărtat (FIR) absorb rotații ale moleculelor.

În practică spectrele IR pot fi înregistrate utilizând două tipuri diferite de spectrometre IR:
a)      aparate clasice cu fascicul dublu de radiație electromagnetică şi nul optic.
b)      aparate moderne cu iradiere în pulsuri şi transformata Fourier (FTIR),
Ambele tipuri de spectrometre IR se bazează pe acelaşi principiu de funcționare: radiația electromagnetică din domeniul
IR emisă de o sursă luminoasă este trecuta peste proba şi apoi este analizată radiația emergentă a carei intensitate apare
modificată de interacțiunea cu moleculele compusului organic.
 Ambele tipuri de spectrometre IR se bazează pe acelaşi principiu de funcționare: radiația electromagnetică din
domeniul IR emisă de o sursă luminoasă este trecuta peste proba şi apoi este analizată radiația emergentă a carei intensitate
apare modificată de interacțiunea cu moleculele compusului organic. În Figura de mai jos este prezentată schema generală
de principiu a acestor două tipuri de aparate.

Spectrometrul IR clasic este un aparat în care radiația electromagnetică furnizată de o sursă este ramificată
în două fascicule: un fascicul de referintă şi unul care trece prin probă. Rolul acestui spectrometru cu dublu
fascicul este de a măsura diferența intensităților celor două fascicule pentru fiecare lungime de undă în parte.
Spectromerele IR cu transformata Fourier se bazează pe operația matematică cunoscută sub numele de
transformata.Într-un aparat FTIR, radiația IR emisă de sursă (conținând toate frecvențele domeniului de analiză
de intensitate egala în timp), este mai întâi trecută printr-un interferometru, apoi traversează alternativ proba
sau referința şi în final interferogramele astfel obținute sunt transformate în spectre IR cu ajutorul transformatei
Fourier (care realizează transformarea domeniului de timp caracteristic interferogramei, în domeniul de
frecvențe caracteristic unui spectru).
 2.1 Comparație între comprimatele de furosemid de 40 mg originale și cele generice
folosind spectroscopie în infraroșu cu transformata Fourier

Scopul acestui studiu a fost nu numai de a compara ingredientul activ, ci și de a

include impactul excipienților medicamentului generic, știind că tipul, cantitățile și
puritatea acestora pot avea influențe asupra proprietăților fizico-chimice ale formulării
finale a medicamentului.
Studiul a fost efectuat folosind spectrometrul FTIR (Nicolet-380, Thermo
Scientific, Madison, WA, SUA) prevăzut cu atașament de reflectanță totală atenuată
(ATR).
A fost evaluată analiza testelor de dizolvare in vitro, de control al calității și de analiză
termică pe comprimate de 40 mg de furosemid (original vs generic). Valorile pH-ului și
temperaturii testate au fost similare cu procesul standard care a confirmat că medicamentul
generic propus nu numai că îndeplinește standardele, ci și cerințele privind stabilitatea și
compatibilitatea pe termen lung între medicament și excipienți. Acest studiu de comparație a
fost menit să investigheze posibilele modificări în ceea ce privește eliberarea
medicamentului, proprietățile fizico-chimice și parametrii termici în medicamentul generic
despre care s-a afirmat că este bioechivalent cu medicamentul original.

Figura alăturată prezintă eliberarea Furosemidului din tablete originale și generice în

medii pH diferite (pH 6,5, pH 3,0 și pH 1,2). Mai mult de 85% din Furosemid a fost
eliberat din ambele produse în toate mediile de pH examinate în mai puțin de 30 min.
Prin urmare, produsele au trecut testul standard de dizolvare conform cerințelor USP
pentru tabletele Furosemid (adică Q < 80% în 60 min). Cu toate acestea, eliberarea
medicamentului din ambele produse s-a dovedit a fi dependentă de pH. Eliberarea
medicamentului în mediu cu pH 6,5 a fost considerată mai rapidă decât eliberarea
medicamentului în medii cu pH 3 și, respectiv, cu pH 1,2
Studiul a fost efectuat folosind spectrometrul FTIR (Nicolet-380, Thermo Scientific, Madison, WA, SUA) prevăzut cu atașament de reflectanță
totală atenuată (ATR). Atașamentul Thermo Smart Orbit ATR a fost prevăzut cu un cristal de diamant având o singură reflexie într-o
configurație orizontală. Scanarea probelor a fost efectuată cu o rezoluție de 4 cm -1 de la 500 la 4000 cm-1, de 64 de ori. Pe suprafața cristalului
ATR, s-au plasat 0,5 g de probă și s-au colectat spectre la 20°C-22°C. Intruziunea de fundal a fost încheiată, iar software-ul OMNIC
Professional, versiunea 8.3, a fost utilizat pentru analiza spectrelor înregistrate. O medie a datelor spectrale a fost obținută prin colectarea a
patru măsurători din probe duplicate.
2.2 Monitorizarea Ibuprofenului în timpul şi după compresie utilizând spectroscopie NIR

Materialele utilizate în acest studiu au cuprins pelete acoperite de

ibuprofen,mannitol, celuloză microcristalină (Avicel® PH 101), amidon glicolat de
sodiu, dioxid de siliciu coloidal (Aerosil® ) și stearat de magneziu.
Compoziția tabletelor din prezenta lucrare constă în pelete de diferite
concentrații de ibuprofen acoperite cu gelatină şi acetat ftalat de celuloză. Au fost
preparate cinci amestecuri cu conținut diferit de ibuprofen. Concentrațiile
excipienților au variat proporțional cu nivelul de ibuprofen al amestecului respectiv,
în timp ce stearatul de magneziu a fost menținut la aceeași concentrație în toate
amestecurile. Mărimea lotului a fost de 12,0 kg din cauza capacităților
echipamentului, rata de compresie dorită a tabletei și timpul necesar pentru
stabilizarea concentrației în interiorul cadrului.
Materiale şi metode
O sondă NIRS (Viavi PAT-U) a fost plasată deasupra celei de-a doua roți chiar
înainte de punctul în care pulberea iese din cadrul de alimentare și intră în cavitățile
matriței pentru compresie. Vârful sondei NIR a fost poziționat cu un micrometru la 6
mm deasupra roții cu palete pentru a asigura contactul acesteia cu pulberea.
Tabletele au fost comprimate cu o viteză de 23.460 tablete/h. Rotațiile pe minut a
roții cu palete a cadrului de alimentare a fost ajustat la 13 rpm pentru a obține o
greutate constantă a tabletei.
Monitorizarea tabletelor (în linie)

O mașină de sortat tablete Teonys (Proditec, Pessac, Franța) echipată cu o

cameră de scanare în linie a asigurat monitorizarea. A fost adaptată pentru a ține o
sondă NIRS (VisioNIR, Visiotec GmbH, Laupheim, Germania) pentru scanarea
tabletelor.
Tabletele au fost trecute sub sonda NIRS pe o bandă transportoare. Rata de scanare a
tabletei depinde de distribuția lor de-a lungul benzii transportoare de către sistemul de
distribuție și de dimensiunea tabletei. Viteza benzii a fost stabilită la 350 mm/s în
lucrarea de față, rezultând o scanare NIRS de 10.800 tablete/h.
Spectrele NIR colectate în interiorul cadrului de alimentare conțin informații despre
concentrația de ibuprofen. În plus, au fost influențate de alte variabile, cum ar fi
mișcarea materialului și diferențele de dimensiune a particulelor. Spectrale NIR sunt
influențate de forma și suprafața tabletei (alungite sau concave) precum și de mici
variații de duritate.
Acest studiu a evaluat diferite regiuni ale spectrelor NIR pentru a fi incluse în analiza
cantitativă a conținutului de ibuprofen. Spectrele de reflectare NIR ale peletelor de
ibuprofen, amestec Placebo (toate componentele compoziției tabletei cu excepția
Ibuprofenului) și amestecuri de ibuprofen 18% g/g au fost înregistrate folosind sonda
NIR Viavi PAT-U. Reprezentate grafic împreună, spectrele au arătat vârfuri
caracteristice ale granulelor de ibuprofen pur și ilustrarea lor în măsură diferită în
placebo și amestec de ibuprofen 18% g/g (Figura 8). Picurile caracteristice ale
granulelor de ibuprofen pur au fost mascate semnificativ în amestecul compozit.
Spectrele în intervalul 1100-1250 și 1350-1700 nm au prezentat diferențe pentru
placebo și amestecuri de ibuprofen 18%.
Spectrele de cadru de alimentare în linie ale diferitelor amestecuri de
ibuprofen au fost reprezentate grafic în intervalul 915-1701 nm. Aceasta a
arătat o separare spectrală în intervalul 1100-1701 nm (Figura c), cu
diferențiere notabilă în jurul valorii de 1100-1250 nm (Figura d). Pentru
tableta in-line NIRS, intervalul spectral între 1101-1252 nm a fost selectat pe
baza evaluării spectrale a datelor NIRS off-line anterioare. Graficul spectral
din Figura 3e a arătat diferențe spectrale clare în 1101-1252 intervalul nm
pentru spectrele NIR ale tabletelor cu concentrații diferite de ibuprofen. Au
fost raportate benzi puternice de reflectanță pentru ibuprofen în intervalul de
la 1122 la 1235 nm, care au confirmat variațiile spectrale actuale ca urmare a
diferitelor concentrații de ibuprofen în amestecuri/comprimate.
Răspunsurile NIRS la modificări subtile de concentrație în interiorul unui
cadru de alimentare și în tablete în timpul procesului de compresie au fost
evaluate printr-o serie de modificări controlate ale etapei de concentrare în
interiorul matriței de presare. Modelele cu cele mai mici pătrate (PLS) au fost
utilizate pentru a prezice concentrațiile de ibuprofen în interiorul cadrului de
alimentare și a tabletelor. Aceste modele au fost comparate cu testele UV ale
tabletelor colectate la diferite momente în timpul compresiei. Cinetica
procesului, în ceea ce privește viteza cu care concentrațiile de ibuprofen s-ar
modifica în pulberea care curge, precum și în tablete, au fost măsurate și
comparate.
Spectre NIR în intervalul selectat de 1100-1250 nm pentru analiza off-line a
tabletei (a-b), analiza în cadrul alimentării (c-d) și, respectiv, analiza tabletei
în linie (e-f). (culori verde, roz, albastru, galben și roșu,respectiv spectrele
NIR de 0, 2, 8, 15,8 și 18% g/g ibuprofen)
 Rezultatele evidențiază fezabilitatea NIRS de a analiza diferite forme fizice de mostre, adică pulberi și
tablete. O diferență de concentrație de până la 1,7% g/g ibuprofen a fost detectată cu succes, în ciuda faptului că
ibuprofenul este prezentat sub formă de particule acoperite.Modificările concentrației de ibuprofen, atât în ​
cadrul de alimentare, cât și în tablete, ar putea fi modelate folosind cinetica de ordinul întâi. Cu toate acestea, a
fost observată o diferență de aproximativ 1,25 min, tabletele au prezentat începutul tranziției cu 1,25 min
înaintea cadrului de alimentare.Acest rezultat indică faptul că poziția sondei NIR în interiorul cadrului de
alimentare trebuie aleasă pe baza geometriei cadrului de alimentare care se corelează mai bine cu dinamica
concomitentă a concentrației tabletei sau o întârzie pentru a vedea schimbarea concentrației în cadrul
amestecului pe baza locației sale în interiorul cadrului de alimentare. NIRS a arătat, de asemenea, sensibilitate
nu numai pentru modificări de concentrație, dar și pentru schimbările de nivel în interiorul cadrului de
alimentare (adică spațiul gol), care ar putea fi util atunci când se încearcă controlul unei prese comerciale. În
cele din urmă, monitorizarea combinată a cadrului de alimentare și a tabletei s-ar putea dovedi benefică în
testarea eliberării în timp real a amestecurilor de substanțe
 Concluzii

Spectroscopia în domeniul infraroşu (IR) se bazează pe fenomenul de absorbţie a radiaţiei infraroşii de către
molecule, având ca urmare schimbarea energiei vibraţionale a legăturilor interatomice. Este considerată cea
mai potrivită metodă de identificare a
prezenţei grupărilor funcţionale din structura moleculelor compuşilor organici. Pentru analiza structurală se
foloseşte doar domeniul infraroşu propriu-zis. În domeniul IR sunt observate numai acele vibraţii care
presupun o modificare a momentului de dipol al moleculei.
 Identificarea formelor polimorfe reprezintă una dintre cele mai importante aplicaţii ale spectrofotometriei în
IR. Fiecare polimorf are parametrii săi fizici proprii, care determină diferenţele dintre ei în stare solidă. De
aceea, metodele de determinare au la bază tocmai aceste diferenţe existente în stare solidă.
 Deoarece benzile de absorbţie în infraroşu sunt mult mai înguste decât cele obţinute în vizibil sau ultraviolet,
spectrul IR permite o identificare mult mai sigură. Chiar dacă numărul mare al benzilor fundamentale
complică analiza spectrului, acestea reprezintă însă avantaje în diferenţierea şi identificarea unor substanţe.
 În concluzie spectroscopia IR se utilizează frecvent într-o gamă de aplicaţii diverse din domeniul medical şi
farmaceutic, cum ar fi: cercetările din domeniul radiologiei cardiovasculare, analize clinice, diagnosticul
unor boli, procesul de formulare şi control al medicamentelor, etc.
 Bibliografie

1. Barbara Stuart, Infrared spectroscopy: fundamentals and applications, Analytical techniques in the
sciences, pg 1-13; Himmat Dalvi, Alyssa Langlet, Marie-Josee Colbert, Antoine
2. Cournoyer, Jean-Maxime Guay, Nicolas Abatzoglou and Ryan Gosselin, In-line monitoring of Ibuprofen
during and after tablet compression using Near Infrared spectroscopy, Talanta, 2018;
3. Mosab Arafat, Khairi M. Fahelelbom, Muhammad K. Sarfraz, Mohammad F. Bostanudin, Qurat-ul-Ain
Sharif, Anna Esmaeil, Othman A. AL Hanbali, and Salahdein Aburuz, Comparison between Branded and
Generic Furosemide 40 mg tablets using thermal gravimetric analysis and Fourier Transform Infrared
Spectroscopy,2020;
4. Farmacopeea Română, ediția X, Editura Medicala-Bucureşti,2009;
5. https://www.scritub.com/stiinta/fizica/SPECTROSCOPIE-IR24166.php
Vă mulțumesc pentru atenție!