Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
a
c PROIECT BIOCHIMIE
ă
PROFESOR:CROITORU LUCIA
r
CUPRINS:
Metode mecanice :
-separarea sub lupa sau microscop
-sedimentare si decantare
-centrifugare
-filtrare
Metode fizice :
-distilare si rectificare
-extractie
-absorbtie
-adsorbtie
-sublimare
Metode chimice :
-precipitare
-cristalizare.
Materialele filtrante utilizate trebuie sa retina cat mai complet faza solida a
suspensiei,sa permita viteze mari de filtrare, sa nu se infunde porii,sa ctiunea coroziva
a suspensiei si sa permita evacuarea completa a prcipitatului. Alegerea materialului
filtrant se face in functie de diametrul particulelor de faza solida de separat,astfel ca
aceste particule sa nu treaca prin porii materialului filtrant.
Dintre aceste materiale , cele mai folosite sunt carbunele animal sau
vegetal ,folosit pentru purificarea si decolorarea prin adsorbtie a lichidelor nepolare,dar
si compusi silicici folositi la filtrarea uleiurilor siropurilor si eztractelor vegetale.
Pentru grabirea filtrarii se poate realiza in unele cazuri o prefiltrare care consta in
separarea particulelor mari de faza solida,fie folosind filtre rare,fie folosind substante
coagulante(gelatina,tanin,albus de ou ),sau substante care sa modifice pH-
ul ,imbunatatindu-se astfel viteza de filtrare si calitatea fazelor separate.
2.Metode de purificare a substantelor chimice
Recristalizarea
Substanţele organice pe care le obţinem prin sinteză sau cele extrase din produşi
naturali sunt amestecuri complexe din care izolăm, de obicei, componentul care ne
interesează.
Pentru a avea un compus unitar, este necesar să-l separăm de impurităţile ce-l
însoţesc sau de alte substanţe care ne interesează în mod egal.Se pune problema
separării amestecului de substanţe în substanţe chimice individuale pure. Pentru a realiza
acest aspect, avem la îndemână două metode de separare eficiente: recristalizarea şi
distilarea.
Principii generale.
Metodele de purificare depind de starea de agregare a componentelor ce se separă din
amestecul respectiv. Purificarea substanţelor solide se face, de obicei, folosind diferenţa de
solubilitate a substanţei respective într-un dizolvant dat, la cald şi la rece şi anume
substanţa se dizolvă în cantitate mai mare la cald, iar prin răcire precipită cantitativ.
Un factor esenţial în recristalizare este alegerea solventului. Acesta trebuie să
îndeplinească o serie de condiţii, ca de exemplu: să dizolve o cantitate de substanţă mai
mare de substanţă la cald, decât la temperatura obişnuită.
Deoarece la dizolvarea unei substanţe pentru recristalizare, lichidul se încălzeşte la
fierbere, la alegerea solventului trebuie avut în vedere ca punctul său de fierbere să fie mai
coborât decât punctul de topire al suubstanţei de purificat. În caz contrar, substanţa se
poate separa sub formă de ulei, ceea ce dăunează purificării. Solvenţii dfe laborator uzuali
sunt : apa, alcoolul etilic, alcool metilic, eter etilic, benzenul, cloroformul, sulfura de carbon,
tetraclorura de carbon etc.
Sublimarea
Prin sublimare se înţelege transformarea unei substanţe din stare solidă în stare de
vapori.Sublimarea poate avea loc atât la temperatura camerei – mai lent, cât şi la
temperatură ridicată, prin încălzirea substanţei – mai rapid.
Unele substanţe solide pot fi purificate datorită proprietăţilor de a se transforma direct din
stare de vapori în stare solidă. Această proprietate poartă numele de sublimare. Substanţele
rezultate prin sublimare sunt foarte pure. La cele mai multe substanţe, punctul de sublimare
se găseşte deasupra punctului de topire şi substanţa se topeşte înainte de a sublima. Pentru
unele substanţe, punctul de sublimare este mai scăzut decât cel de topire. (naftalină, iod).
În laborator, sublimarea se poate executa aşezând substanţa pe o sticlă de ceas care se
acoperă cu o hârtie de filtru, iar deasupra se aşează o pâlnie de sticlă. Se incălzeşte foarte
uşor pe sită. Substanţa solidă se transformă în vapori care condensează pe pereţii reci
pâlniei sub formă de cristale. Impurităţile, având alt punct de sublimare, vor rămâne pe sticla
de ceas. În felul acesta se poate sublima naftalina, acidul benzoic etc.
Puritatea substanţei purificate prin sublimare se verifică prin determinarea punctului de
topire, care este o constantă caracteristică.
Extracţia cu solvenţi
Extracţia este o operaţie cu multiple aplicaţii la purificarea substanţelor solide sau
lichide. Operaţia constă în dizolvarea, cu ajutorul solvenţilor, a uneia sau a mai multor
substanţe dintr-un amestec. Extracţia se bazează pe diferenţa de solubilitate a
componentelor amestecului într-un anumit solvent. Pentru efectuarea extracţiei, se alege
de obicei un solvent care să dizolve una dincomponentele amestecului, iar soluţia se
separă de componenta insolubilă cu ajutorul unei pâlnii de separare, prin filtrare, sau cu
ajutorul unui aparat de extracţie.
Solvenţii cei mai utilizaţi pentru extracţie sunt: eterul etilic, eterul de petrol benzenul,
cloroformul, tetraclorura de carbon, etc.. Operaţia are largi aplicaţii în practică, de
exemplu la obţinerea unor substanţe naturale din regnul animal sau vegetal.
Substanţele organice pot fi conţinute în ţesuturile vegetale sau animale de unde
urtmează a fi extrase cu ajutorul solvenţilor potriviţi. Substanţele pot exista în amestec
sau pot fi chiar amestecuri de substanţe organice cu substanţe anorganice, în care caz,
de asemenea este necesară o separare bazată pe diferenţa de solubilitate.
Aparatele folosite permit un contact îndelungat între substanţă şi dizolvant. De cele
mai multe ori se folosesc aparatele de tip Soxhlet, unde substanţa este acoperită treptat
de solventul care curge prin refrigerentul ascendent; extractul se scurge printr-un sifon în
balonul în care iniţial a fost introdus solventul.
Aparatul Soxhlet se compune din trei părţi: un balonaş (1), un extractor (2) şi un
refrigerent ascendent (3).
Distilarea
Distilarea fracţionată la presiune normală (atmosferică)
Distilarea este operaţia de purificare a substanţelor organice lichide, care se bazează
pe diferenţa dintre punctele de fierbere ale componentelor unui amestec.
Când avem un amestec de două sau mai multe substanţe lichide cu presiuni de
vapori diferite, care au puncte de puncte de fierbere diferite, le putem separa prin distilare
fracţionată sau succesivă.
În cazul unui amestec de două substanţe cu puncte de fierbere foarte îndepărtate,
fierberea incepe la o temperatură apropiată de temperatura de fierbere a componentei
mai volatile şi apoi urcă până atinge punctul de fierbere al componentei mai puţin volatile.
În felul acesta se culege o fracţiune corespunzătoare compusului cu punct de fierbere
mai scăzut, o fracţiune corespunzătoare compusului cu punct de fierbere mai ridicat şi
una sau mai multe fracţiuni intermediare. Acestea din urmă se supun din nou distilării,
când iarăşi se separă două fracţiuni intermediare, iar operaţia se repetă până la obţinerea
substanţelor unitare.
Această operaţie se simplifică mult prin folosirea coloanelor de fracţionare, numite şi
deflegmatoare sau rectificatoare.Coloanele de fracţionare sunt de diferite forme, toate se
bazează însă pe acelaşi principiu, de a realiza un contact intim între vaporii care urcă în
coloană şi lichidul care coboară, provenit din condensarea parţială a vaporilor în partea
de sus a coloanei.
O coloană de fracţionare constituie un sistem de dispozitive de condensare prin care
trebuie să treacă vaporii înainte de a ajunge în refrigerent. Datorită mediului ambiant, mai
rece, are loc o condensare parţială a vaporilor, iar în consecinţă se formează o pătură de
˝condensat˝ prin care care vor trebui să treacă vaporii care vin în coloană din vasul în
care fierbe amestecul de substanţe. Trecând prin pătura de ˝condensat˝, vaporii
componentelor mai puţin volatile se condensează, în timp ce componentele mai volatile
din ˝condensat˝ se evaporă. Fenomenul se petrece ca şi cum în coloana de fracţionare ar
avea loc mai multe distilări fracţionate.
Distilarea simplă
Distilarea este una din metodele de purificare a substanţelor lichide. Ea se bazează
pe transformarea substanţelor lichide în vapori, pe baza diferenţei dintre punctele lor de
fierbere, condensarea acestora şi culegerea lor într-un recipient. În stare pură lichidele
fierb la o anumită temperatură bine determinată care se menţine constantă pe tot timpul
fierberii (la presiune constantă). Punctul de fierbere variază într-un anumit interval, după
natura şi cantitatea impurităţilor.
Distilarea se poare realiza la presiune atmosferică sau la presiune redusă. Se distilă,
în general, la presiune atmosferică compuşii organici relativi simpli şi cu punct de fierbere
scăzut, ca de exemplu: hidrocarburile, alcoolii, esterii, acizii inferiori, aminele.
Pentru substanţele care se descompun usor şi pentru acelea a căror temperatură de
fierbere este prea ridicată, se coboară temperatura de fierbere prin scăderea presiunii în
timpul distilării.
Distilarea, fie la presiune atmosferică, fie la presiune redusă, nu se face numai în
scopul de a obţine un produs pur prin eliminarea impurităţilor solide, ci foarte des se
întrebuinţează pentru separarea unui amestec de substanţe volatile, utilizând puntele lor
de fierbere diferite. (este cazul distilării fracţionate).
Uscarea şi calcinarea
Uscarea este o operaţie frecvent utilizată, ce are ca scop îndepărtarea umidităţii
substanţelor obţinute în laborator prin sinteză, fără ca acestea să sufere
transformări.Operaţia de uscare se poate face la temperatura mediului ambiant şi la cald.
Uscarea la temperatură obişnuită se poate face utilizând următoarele procedee:
a) substanţa solidă separată prin filtrare se întinde în strat subţire pe o hârtie de
filtru; se reînnoiesc hârtiile de filtru până ce nu se mai umezesc.
b) hârtia de filtru cu substanţa separată prin filtrare se aşează pe o sticlă de ceas şi
se lasă să se usuce la aer;
c) substanţa se întinde în strat subţire pe o placă de porţelan poros, se presează cu
o spatulă de sticlă sau porţelan să se lasă să se usuce.
Substanţele higroscopice se usucă în exicator, aşezate pe o sticlă de ceas sau
cristalizator. În exicator se introduce un agent deshidratant (acid sulfuric concentrat,
clorură de calciu anhidră), astfel încât să nu reacţioneze cu substanţa ce trebuie uscată.
Dacă substanţa nu este volatilă la temperatura obişnuită, pentru a accelera uscarea,
se poate utiliza un exicator de vid, din care aerul se evacuează cu ajutorul trompei de apă
sau pompei de vid.
Uscarea la cald se efectuează în etuve încălzite electric, prevăzute cu termometru.
Se utilizează etuve termoreglabilecare permit o încălzire până la 200-250ºC.
Nu este permisă uscarea în etuvă a substanţelor care conţin urme de solvenţi
inflamabili.
Calcinarea
În analiza calitativă se face calcinarea reziduurilor, în vederea îndepărtării sărurilor de
amoniu sau a distrugerii unor substanţe sau impurităţi organice. Operaţia se execută în
capsule sau creuzete de porţelan, prin încălzire direct la flacăra becului de gaz. După
răcire, reziduul se reia cu apă sau cu o soluţie acidulată, în funcţie de împrejurări.
În cazul determinărilor gravimetrice, se calcinează precipitatele până la obţinerea
unei mase constante. Calcinarea precipitatelor se poate face la flacăra unui bec de gaz
sau în cuptoare speciale de calcinare, cu temperatură reglabilă.
Cuptoarele de calcinare sunt căptuşite cu materiale refractare şi se utilizează, mai
ales, pentru calcinări la temperaturi ridicate (500-1200ºC).
Atât după calcinare cât şi după uscare, creuzetele se aduc în exicator, se lasă să se
răcească şi apoi se cântăresc. În partea de jos a exicatorului se pun substanţe cu
proprietăţi absorbante (deshidratanţi).
Substanţele deshidratante, după capacitatea lor de a reţine apa, se clasifică în:
- substanţe cu capacitate absorbantă ridicată (clorura de calciu anhidră, percloratul
de magneziu, acidul sulfuric concentrat);
- substanţe cu capacitate absorbantă moderată (clorura de calciu tehnică, oxidul de
calciu, sulfatul de calciu, sulfatul de cupru, oxidul de bariu, oxidul de magneziu,
hidroxidul de sodiu);
- substanţe cu capacitate absorbantă scăzută ( oxidul de aluminiu, pentaoxidul de
fosfor, gel de siliciu).
PROTEINE
Proteinele sunt constituent chimici ai organismelor vii cu cel mai inalt grad de
complexitate,de varietate molecular si care prezinta specificitate de specie,de
organ.Denumirea lor deriva de la cuvantul grecesc “proteios” care inseamna “de prim
rang,cel dintai”.
Proteinele sunt substante macromoleculare de natura polipeptidica.La constructia
proteinelor participa 20 de aminoacizi functionali,aceiasi la toate vietuitoarele,de la cea mai
simpla bacteria pana la om.Prin legare in lanturi polipeptidice variate ca lungime si
succesiune a unitatilor se poate obtine un numar nesfarsit de combinatii.Cu toata
multiplicitatea posibilitatilor de combinare a aminoacizilor in lanturi peptidice,la un anumit
organism nu se realizeaza decat anumite secvente,acelea care sunt specificate de
materialul genetic,de AND parental.Proteinele sunt macromolecule informationale,cu
secvente specific de aminoacizi,sunt expresia epigenetica a genomului cellular.
Proteinele indeplinesc functii fundamentale,specific organismelor vii.
Proteinele au un rol structural major,ele constituie materialul din care sunt construite
toate structurile celulare,membrane,organite celulare ca si materialul intercelular al
tesuturilor si organelor. Proteinele exista intr-o varietate molecular foarte mare si ele asigura
diversitatea si specificitatea de forma a tuturor fiintelor vii.
Proteinele exercita actiuni catalitice,determinand varietatea nesfarsita de reactii
biochimice si specificul transformarilor chimice din organismele vii.
Proteinele indeplinesc functii reglatoare,ele pot stoca si transmite mesaje chimice
diverse.
Proteinele indeplinesc functii de transport si de depozitare a unor compusi chimici cu ioni
metalici,vitamine,oxygen,dioxid de carbon.
Proteinele au sarcina de a apara organismul impotriva unor corpi
straini,macromoleculele,virusuri,bacteria.Reactiile imunologice sunt mediate de o clasa de
proteine specializate-imunoglobulinele.
CLASIFICAREA PROTEINELOR
Dupa natura gruparii prostetice se deosebesc urmatoarele clase de proteine:
-Fosfoproteine,grupare prostetica,este constituita din restul fosforil (-POᶾ H₂) legatesteric
la grupari hidroxilici ale resturilor seril,treonil,tirozil.
Glicoproteine,proteine ce cuprind unitati monozaharidice sau oligozaharidice atasate de
lantul polipeptidic.
Lipoproteinele sunt asociatii intre proteine (apolipoproteine) si una sau mai multe grupe
de lichide amfipatice.
Cromoproteinele sunt proteine colorate din cauza gruparii prostetice pe care o cuprind.
Metaloproteinele,proteine care cuprind ioni metalici sau combinatii simple ale metalelor
associate direct cu apoproteina.
Nucleoproteinele sunt alcatuite din acizii nucleic si proteine ,in general proteine bazice
associate prin legaturi saline.
AMINOACIZI
Aminoacizii sunt compusi cu functiune mixta (compusi care au grupe functionale diferite
in molecula lor) care contin in molecula gruparile -NH₂ si –COOH.
Sunt cei mai important nutrient din corp,de multe ori mentionati ca “elemete care
neformeaza viata”.Acest lucru se datoreaza faptului ca aminoacizii stau la baza formarii
tuturorproteinelor.
Corupul este alcatuit in proportie de 75% din proteine-nelind in considerare apa si
grasimea,proteinele reprezinta 3 sferturi din ceea ce tamane.
Aminoacizii suntin vintaminele si mineralele pentru a functiona corect si eficient in
organismul uman.Daca aminoacizii lipsesc,alimilarea si utilizarea altor nutrienti vor avea de
suferit.Daca aportul orcaruia dintre aminoacizi este prea mic pentru a indeplini nevoile
corpului,niciunul dintre ceilalti aminoacizi nu poate fi folosit pentru dezvoltarea si mentinerea
sanatatii tesuturilor.
Toti aminoacizii sunt esentiali pentru o sanatate optima.Lipsa chiar si a unui aminoacid
poate duce la aparitia anumitor afectiuni.Cateva dintre efectele unei diete deficitare in
aminoacizi include nivel scazut de energie,insomnia,oboseala cronica,afectiuni
digestive,caderea parului,dar si schimbari de natura psihologica precum
nervozitate,anxietate,depresie,iritabilitate,scaderea capacitatii de concentrare.
Proteinele sunt formate din aminoacizi,in numar,asezare diferita,ordine pentru fiecare
proteina.Aminoacizii sunt baza constructiei (“caramiziile”),insa constructia finala a unei
proteine cuprinde nu doar o insiruire de aminoacizi,ci mai multe elemente de structura
care ii cofera calitatea de proteina.
NECESARUL DE PROTEINE:
Depinde de necesitatea organismului:
1.Cantitativ:
Copii: 0-6 ani:3-3g prot/kg corp/24h
7-12 ani:2-3 g prot/kg corp/24 h
12-20 ani:1,5-1,7 g prot/kg corp/24 h
Adulti: 1,2-1,5 g/kg c/zi (ex:75 kg: 85-105 g protein/zi)
Gravide si mame care alapteaza: 2g/kg c/zi
Sportivi,muncitori,refaceri muscular: 2-3 g/kgc/zi.
SURSE DE PROTEINE
PROTEINE ANIMALE
PROTEINE VEGHETALE
Globulinele vegetale sunt mult raspandite in natura,alaturi de albumine (de
exemplu:edesina din samanata de canepa,excelsina din nuca braziliana,amandine din
migdale si corilina din alone(,globuline din legume(de exeplu:faseolina din fasole,legumina
din mazare,globulinele din cartofi,tomate spana).Toate au configuratii globulare.
Proteine din cereal
Proprietatea graului de a da o faina panificabila se datoreaza caracterului special al
proteinelor din endospermul,bogat in amidon,al semintelor acestor cerale.Proteina din
rau,glutenul,se obtine prin framantarea fainei intr-un current de apa.Spre deosebire de
celelante proteine vegetale,glutenul este insolubil in aoa si in solutii saline.
Indicele glicemic este un indicator care arata cu cat creste nivelul zaharului din
sange(glucoza) la ingestia unei cantitati dintr-un alimnt,comparative cu o cantitate
similara de glucoza in solutie sau cu paine alba. Este un indicator al vitezei cu care un
anumit tip de carbohidrant ajunge in sange sub forma de glucoza.Cu cat se absoarbe
mai usor cu atat indicele glicemic este cat este mai mare,si invers.
Cu cat glucoza din sange creste mai mult si mai repede,cu atat corpul (pancreasul)
este obligat sa produca mau multa insulin.Pentru ca in sange avem doar cateva garme
de glucoza,excesul acestui nnutrient essential este toxic,in special pentru sistemul
nervos.
FRUCTOZA
Glucid present in organism si in alimente.Fructoza face parte din glucidele
simple,de tip hexoza.Ea poate exista ca atre sau sub forma de zaharoza,formata prin
asocierea de molecule de fructoza si a unei molecule de glucoza.
Fructoza adusa prin alimentative este continuta in zahar,in
fructe(mar,para,strugure),in miere.In organism,ea este transformata in glucoza.
FRUCTOZA,SOLUTIE INJECTABILA.
Compozitie:Fiole a 100ml solutie apoasa injectabila continand fructoza 20%.
Actiune terapeutica:Monozaharida asimilata si metabolizata cu usurinta,participa
la metabolismul glucidic chiar in absenta insulinei,se transforma in glycogen,reface
rezervele energetic,protejeaza proteinele de catabolizare.
Indicatii:Aport caloric in cadrul alimetatiei parentale.
Contraindicatii:Intolerenta la fructoza-sorbita,deficit de
fructoza,hiperlactemie,intoxicatie acuta cu alcool metilic;la diabetici trebuie stabilita in
prealabil tolerant la fructoza.
Reactii adverse:Congestia fetei,epigastralgii,sudoratie(dozele mari),in caz de
intolerant poate provoca hipoglicemie,leziuni hepatice si renale,tromboflebita locala.
Mod de administrare:In perfuzie intravenoasa lenta,dozata dupa caz(a nu se
depasi 800mg fructoza/kilocorp si ora).
GLUCOZA
Glucoza este compusul organic,apartinand clasei zaharidelor,care are formula
chimica C6H12O6.Desi are aceeasi formula chimica,fructoza este diferita fata de
glucoza prin modul de legare a atomilor.Astfel,glucoza are o singura grupare de alcool
primar,pe cand fructoza are doua grupari de alcool primar.
Exista mai multe forme de comercializare si folosire a glucozei,dintre care cele mai
importante sunt:
sirop de glucoza-contine glucoza in concentratie de 32,40%
glucoza tehnica-cu o concentratie de 75%
glucoza cristalizata(tablete)-concentartie de 99%
Glucoza este o substanta intalnita in mod natural in lichidul din jurul
articulatiilor.Este un compus format din glucoza si aminoacidul glutamine si produce o
molecula utilizata in formarea si repararea cartilajului,precum si al altor tesuturi.
Producerea de glucoza inceteaza odata cu varsta.Aceasta joaca un rol vital in ceea
ce priveste construirea cartilajului si poate fi consumata sub forma de subliment
alimentar de catre persoanele care sufera de osteoartrita.
Suplimentele pe baza de glucozamina sunt utilizate pe scara larga impotriva
osteoartritei.In ceea ce priveste osteoartrita,cartilajul care amortizeaza articulatiile
devine rigid di idi pierde elasticitatea.Astfel,devine predispus la umflare,deteriorare
etc.De vreme ce glucozamina intalnita in mod natural in organism repara cartilajul
articular,in momentul in care este administrate ca supliment alimentar ajuta la
aprovizionarea organismului.Exista dovezi conform carora glucozamina reduce
simptomele osteoarticulare la genunchi si incetineste progresia,reduce
rigiditatea,precum si umflarea articulatiilor.
GLUCOZA,SOLUTIE PERFUZABILA.
Compozitie:Fiole a 10 ml solutie apoasa injectabila de glucoza 33% si 40%;solutie
apoasa perfuyabila de glucoya 5%,10% si 20% in flacoane de sticla si saci de PVC a
120 si 500ml.
Actiune terapeutica:Monozaharida fiziologica,reprezinta o sursa de energie
disponibila;solutia irotona creste volemia si combate dezhidratrea;solutia
hipertona,injectata intravenos,realizeaza dezhidratrea tisulara.
Indicatii:Stari de denutritie,hipoglicemie,profilaxie si tratamentul cetozei;stari de
dezhidratare fara pierdere de electroliti;vehicul pentru medicamente in perioada pre si
postoperatorie.
Contraindicatii:Hiperglicemie,stari de hiperhidrare;solutiile concentrate dunt
contraindicate in coma hiperosmolara,in soc si in dezechilibre acido-bazice de cauza
metabolica;la bolnavii cu tulburari ale tolerantei la glucoza si pentru solutii concentrate
administrarea se face sub controlul glicemiei;atentie la eventuala suplimentare de
potasiu si insulina.
Reactii adverse:Perfuzia rapida poate declansa o diureza osmotica
nedorita;injectarea paravenoasa a solutiilor 20% sau mai concentrate provoaca iritatie si
necroza,iar injectarea intravenoasa de solutii concentrate poate fi cauza de
tromboflebita locala sau sclerozarea venei.
Mod de administrare:Intravenos,in ijectii lente sau perfuzii,pana la 1l/zi pentru
solutia 5%;pana la 550ml/zi pentru solutiile 33% si 40%
GLUCOZA,SOLUTIE INJECTABILA
Compozitie:Fiole continand solutie apoasa ijectabila 20%(glucoza pro.inj.
2g,clorura de sodiu 0,0026g,apa distilata pana la 10 ml),30%(glucoza pro,inj,
3,3g,clorura de sodiu 0,0026g,apa distilata pana la 10ml),40%(glucoza pro.inj. 4g,
clorura de sodiu 0,0026g,apa distilata pana la 10ml).
Actiune terapeutica:Monozaharida fizologica,reperzinta o sursa de energie
disponibila;solutia izotona creste volemia si combate dezhidratrea;solutia
hipertona,injectata intravenos,realizeaza dezhidratarea tisulara.
Indicatii:Stari de denutritie,hipoglicemie,profilaxie si tratamentul cetozei;stari de
dezhidratare fara pierdere de electroliti,vehicul pentru medicamente in perioada pre si
postoperatorie.
Contraindicatii:Hiperglicemie,stari de hiperhidratare,solutiile concentrate sunt
contraindicate in coma hiperosmolara,in soc si in dezechilibre acido-bazice de cauza
metabolica;la bolnavii cu tulburari ale tolerantei la glucoza si pentru solutii concentrate
administrarea se face sub controlul glicemie.
Reactii adverse:Injectarea paravenoasa a solutiilor 20% sau mai concentrate
provocarea iritatie si necroza,iar injectarea intravenoasa de solutii concentrate poate fi
cauza de tromboflebita locala sau sclerozarea venei.
Mod de administrare:Intravenos,in injectii lente pana la 550 mlpe zi pentru solutiile
33% si 40%
Dextran 70-glucoza 5%,solutie perfuzabila.
Forma de prezentare:Solutie perfuzabila cu solutie 6% dextran 70 in glucoza 5%;ct
x 6 fl.x500ml
Indicatii:Soc hipovolemic,insuficienta cirulatorie,arsuri intinse cu dezhidratare si
hemoconcentratie,profilaxia socului chirurgical,trombozelor postoperatorii.
Doze si mod de administrare:Perfuzabila intravenos initial 500-1500 ml/zi si apoi
500ml/zi sau la 2 zile.
Contraindicatii:Trombocitopenie marcata,IC congestiva grava,IR,EP.
Atentionari:Nefropatii cu scaderea filtratului glomerular.
Reactii adverse:Rar,inrosirea fetei,ueruptie urticariana,frison.Exceptional,spasm
bronsic sau HTA.
5.Importanta lipidelor in alimentatie
LDL si HDL
Lipide
Lipidele sunt constituent ai organismelor vii,plante sau animale,care se
aseamana prin caractere commune de solubilitate,sunt greu solubile in apa
dar se dizolva usor in solvent nepolari (eter,benzen etc).Aceasta insusire
este datorita prezentei in moleculele lipidelor a unor intinse regiuni
hidrocarbonate,hidrofobe.
Sunt compusi foarte raspanditi in lumea vie si indeplinesc functii
importante:
-sunt principal forma de depozitare si de transport a rezervelor energetic
ale organismelor
-au rolul de izolatori electrici,termici si mecanici
-unele lipide au roluri importante in procesele de comunicare si
recunoastere intercelulara
-sunt vitamine,hormone etc.
Lipidele confera rezistenta membranelor celulare,capacitatea
elastic,permeabilitate selective data de interactiunea cu substantele.Pe
langa rol structural lipidele mai indeplinesc si un rol de rezerva
energetic.Acestea poseda cea mai mare densitate caloric,in comparative
cu celeante principia nutritive.
Jumatate din lipide se gasesc in tesutul subcutanat,restul fiind
depozitat in jurul sau in interiorul organelor interne.
Alimentatia omului modern a inregistrat modificari serioase in ceea ce
priveste lipidele,prin cresterea procentului de calorii provenite din pricina
calitatilor gustative ale produselor bogate in grasimi,cresterea consumului
de produse rafinate lipidice de natura vegetala (uleiuri) si animala
(unt,branza,smanatana),cresterea consumului de colesterol ca urmare a
cresterii consumului de grasimi animale.
Solubilitatea in alcool si esteri si insolubilitatea in apa sunt
caracteristici care defines cel mai bine lipidele.Lipidele mai sunt
denumite si corpi grasi sau substante organice grase.Lipidele au un
continut energetic mare in raport cu greutatea lor.
Inca nu a fost stabilit cu exactitate necesarul de lipide in
alimentai.Este firesc ca in perioada de crestere ,perioada in care
necesarul caloric este foarte crescut,si aportul caloric al lipidelor sa fie
crescut.La fel ca in cazul adultului,daca vorbim de o activitate fizica mai
semnificativa,poate creste procentul caloric al lipidelor.
Nu este bine ca lipidele sa lipseasca din alimentatia zilnica.O
cantitate care sa asigure aportul de acizi grasi esntiali si de vitamine
liposolubile este nesesara,deoarece organismul nu este capabil sa
sintetizeze singur o cantitate suficienta.Se apreciaza ca aportul de lipide
la un adult este bine sa fie in jur de 30% din aportul energetic total.
TIPURI DE LIPIDE
LDL SI HDL
Exista doua tipuri de lipoproteine ce sunt de interes pentru subiectul tratat
in acest articol si anume LDL “lipoproteine cu densitate scazuta” si HDL” lipoproteinecu
densitate ridicata”. Dupa cum observati, diferenta intre cele doua substanteeste
reprezentata de densitatea acestora. Densitatea lor este data de raportuldintre
proteine si lipide compusii ce contin mai multe lipide decat proteine au o
densitate mai mica decat cele ce au un continut mare de proteine.
COLESTEROL VALOARE
Colesterol total 190-200 mg/dl
LDL colesterol Mai mic de 115 mg/dl
HDL colesterol Mai mare de 40 mg/dl
VITAMINE LIPOSOLUBILE
Vitamina A:oua,carne,lapte,branza,smantana,viscere(ficat,rinichi),peste(cod),ulei
de peste.
Vitamina D:branza,unt,margarina,lapte fortificat,peste,stridii,cereale.
Vitamina E:grau,cereale(seminte),porumb,nuci,masline,spanac,ulei vegetal,paine
neagra,fasole uscata,mazarea.
Vitamina K:legume verzi(salata verde,ceapa
verde,ierburi:marar,patrunjel,leustean),cereal,galbenus de ou.
VITAMINE HIDROSOLUBILE
Folat:legume Frunze verzi,alimente suplimentare,viscere(ficat),carne,paine neagra.
Niacina:produse lactate,carne de pasare,peste si preparate din
peste,oua,legume,nuci,cereal imbogatiote cu B3
Acidul pantotenic si biotina:oua,peste,lactate,cereal
integrale,legume,dtojdie,broccoli si alte legumedin aceasta familie:varza,salata.
Tiamina:cereal,paste,paine neagra si intermediara,preparate din carne de
porc,fasole usca,mazare,peste,soia,produse lactate,fructe (mai ales banana),drojdie de
bere.
Vitamina B2:cereal pentru micul dejun,paste,branzeturi,lactate fortificate,sucuri de
fructe,bauturi energizante.
Vitamina B12: carne,in special viscere(ficat),produse de origine
animala(oua,lapte,carne de pasare,si peste).
Vitamina B6:vegetale,in special avocado,nuci,drojdie,fasole verde,produse
animale-carne de pui,peste si ficat.
Vitamina C:citrice,capsuni,rosii,broccoli,napi,ceapa verde,cartofi.
Principala sursa este reprezentata de fructe si legume,continutul vitaminic al
acestora depinzand in functie si de partea consumata(Frunze,radacina,tubercul).
Viatmina A-este un nutrient essential si se gaseste in natura sub mai multe forme
chimice,in functie de compozitie si structura indeplinesc anumite functii.In general,se
considera ca vitamina A intra in structura pigentiilor retinieni responsabili de vederea la
lumina slaba si distingerea culorilor.Este esentiala pentru mentinerea integritatii si
sanatatii tegumentelor si mucoaselor,dar are si importanta in metinerea sanatatii
oaselor,dintilor.Studii recente au demonstrate ca are roluri trofice genital.
Vitamina B12-se mai numeste ciancobalamina si,ca si restul vitaminelor din grupul
B,indeplinesc roluri in complexe enzimatice asociate diverselor metabolisme.De
asemenea,promoveaza reepitelizarea mucoasei digestive, stimuleaza dezvoltarea si
intretine activitatea maduvei hematoformatoasre.
Vitamina D-forma naturala a vitaminei apare prin actiunea razelor ultraviolet asupra
unui constituient al sebumului secretat de piele.Expertii sunt de parere ca expunerea de
3ori/saptamana la soare timp de 10-15 minute,este suficienta pentru a stimuli sinteza
aceste vitamine,cu asigurarea cantitatii neceasre organismului.Vitamina D faciliteaza
absorbtia calciului si depunerea sa in oase si dinti si intervine in hemostazia fosforului.
Biotina-sau Vitamina B7,face parte din grupul vitaminei B si are rol esential in
metabolismul proteinelor si carbohidrantilor,in process de gluconeogeneza,precum si in
producerea unor hormone si sinteza de cholesterol si acizi grasi.Alte functii importante
ale biotinei sunt:mentinerea in limite normale a glicemiei si promovarea sanatatii
fanerelor.
7.ENZIME DIGESTIVE
(tratamente de substitutie)
EVALUARE
Enzimele digestive sunt fermenti de natura proteica si structura coloidala complexa,
specifici plantelor si animalelor, necesare pentru digestie deoarece au roluri importante
in transformarea alimentelor ingerate in substante primare necesare nutritiei, precum
minerale, vitamine,aminoacizi.
enzime exogene sau enzime propriu-zise, care trebuie procurate din mediul
exterior, prin consumul de alimente de originevegetala sau animala.
In organism, enzimele exogene se gasesc in cantitati foarte mici, dar fara prezenta
lor activa nu pot avea loc procesele chimice de metabolizare (transformare), la nivelul
celulelor, tesuturilor si diferitelor organe, nu se poate produce inmultirea celulelor si nici
cresterea si dezvoltarea plantelor si animalelor.
ceapa spanacul
usturoiul lucerna (care contine un numar
de 8 enzime esentiale)
taratele de grau,
ouale
mierea,
carnea
pestele
Aceste substante au un rol foarte bine determinat, fiecare actionand asupra unui
anumit component din alimente, neputandu-se inlocui una pe cealalta. Prin urmare, o
cantitatea insuficienta, sau absenta unei singure enzime poate determina imbolnavirea.
Exista cateva suplimente alimentare care contin toata gama de enzime digestive
necesare organismului uman cum ar fi: Ac- Zymes, Digest Ease, etc.
Naturali
-Estriadol
-Estriol
-Estrona
Dintre aceşti hormoni naturali doar Estriolul poate fi folosit în tratament, pe cale
orală. Ceilalţi doi hormoni administraţi pecale orală nu au nici un efect iar dacă sunt
administraţi pe cale injectabilă se metabolizează foarte repede, efectul lor fiind
ineficient. Din acest motiv, sunt folosiţi estrogeni sintetici ( fie prin esterificare a
hormonului natural, fie prin substituirea lor cu derivaţi care vor fi metabolizaţi mai încet
în organism)
-în sânge hormonii estrogeni sunt legaţi de o proteină şi transportaţi către diferite
organe ( sâni şi uter ) unde ei suntdirecţionaţi către nucleul celulelor din organul
respectiv şi astfel influenţează activitatea celulară, -spre deosebire de alţi hormoni ( ex.
Adrenalina), aceşti hormoni sexuali (steroizi), nu pot să-şi exercite acţiunea decâtdacă
pătrund în interiorul celulei ţintă unde se leagă de un receptor ( proteina sus
menţionată) şi pătrunde astfel în nucleu unde va sintetiza proteine.
-acţiunea hormonilor începe doar după câteva ore după ce a pătruns în celulă, prin
intermediul acestor proteine sintetizate.
•dezvoltarea colului
•„informează” hipofiza când ovulul este matur şi astfel declanşează în mod indirect
ovulaţia,
•ei intervin în timpul ciclului menstrual, în prima fază a acestuia, prin creşterea şi
dezvoltarea mucoasei uterine (
endometrul),
•secreţia de estrogeni este stimulată de către hipofiză prin intermediul unor hormoni:
FSH şi LH,
•în timpul sarcinii nivelul estrogenilor creşte de 10-100 de ori; din ziua a 8-a după
concepţie placenta va secretahormonul hCG ( hormon gonadotrop) şi o cantitate
crescută de estrogeni; din acest motiv, hipofiza nu mai poate primi „semnalul”
(când scade estrogenul) şi trebuie eliminat ovulul, deci nu mai are loc ovulaţia.
Sintetici:
● Etinilestradiol
● Mestranolul
Estradiolul,
-hormonul sintetic
-modificările, respectiv conjugările care se fac acestor hormoni, fac însă foarte dificilă
metabolizarea lor de către ficat
-după administrare pe cale orală, estrogenii sintetici, datorită modificărilor chimice din
structura lor, au o durată şi un potenţial de acţiune mult mai mare decât a celor naturali,
fiind mult mai greu metabolizaţi de către ficat, motiv pentru care crescînsă mult şi
efectele lor secundare, etabolice inhibă ovulaţia
Acest lucru poate duce la distrugerea lui datorită faptului că ovocitul rezultat după
fecundare mai rămâne în mod normal pe loc câteva ore , timp în care se divizează. Apoi
începe migrarealui prin trompă către uter. În tot acest timp el se hrăneşte din secreţiile
de la nivelul trompei. Dacă transportul lui este foarte mult accelerat de către estrogenii
sintetici, riscă să nu se termine diviziunea, nu se mai hrăneşte, deci va fi distrus şi
eliminat ( avortat )
-estrogenii sintetici stimulează sistemul imun, motiv pentru care un tratament estrogenic
poate induce boli autoimune
precum Lupus Eritematos Sistemic, Eritem nodos precum şi reacţii autoimune ca: prurit,
eczeme, etc.
– estrogenii sintetici pot avea efecte negative asupra psihicului precum depresii, şi
insomnii.
2. Stomac
3. Intestine subtire
4. Intestin gros
1. Gura
Rolul mecanic:
-masticatia
-deglutitia
Rolul chimic:
-secretia salivara
De fapt,in cavitatea bucala,nu are loc nimic mai important decat formarea bolului
alimentar.Singurul care isi incepe transformarea aici,sub efectul ptialinei,este
amidonul.De unde rezulta importanta unei masticatii suficiente si a unei dentitii
sanatoase.
2.Stomacul
Rolul mecanic.
Rol chimic
3.INTESTINUL SUBTIRE
Actiune mecanica
-peristaltica
Actiune chimica
Daca totul s-a petercut bine in intestinal subtire,substantele nutritive prelucrate vor
putea fi direct asimilate de catre organism.
Actiune mecanica
-peristaltica
Actiune chimica
Amestecurile alimentare.
Cand sunt asociate cu o alta hrana ,fructele perturba efectiv digestia intregului si,cu
aceeasi ocazie,isi pierd proprietatile benefice pentru care au fost integrate
Bolile metabolismului glucidic
Diabetul zaharat
Pe plan mondial, diabetul afecteaza peste 250 milioane persoane, dintre care peste
50 milioane insulinotratate. La acestea se adauga un procent de 8.2% de persoane cu
GBM. In Romania prevalenta in populatia generala este de ~4.2% (prevalenta din cele
mai scazute in Europa). In 2005 erau inregistrate 450.000 persoane cu diabet, numarul
real fiind probabil aproape 1 milion. Dintre acestea, ~90% reprezinta tipul 2. Diabetul tip
1 are in Romania o incidenta mică: 3/100.000 (Epidiab, 1990, grupa de varsta 0-14 ani).
Diabetul are un impact epidemiologic, biologic, socio-profesional, economic, politic
deosebit de important. Este a 5-a cauza de mortalitate, explicand ~5% din totalul
deceselor (pondere subevaluata datorita modalitatii de completare a certificatelor de
deces). In cadrul diabetului, 50-80% din mortalitate se datorează bolilor
cardiovasculare. Chiar la diagnosticul diabetului, afectiunile associate sunt prezente
intr-o pondere mare: HTA ~50%, dislipidemii ~50%, suprapondere/obezitate ~90%, boli
aterosclerotice ~33%. Economic, diabetul consuma 5-10% din bugetele de sanatate in
tarile dezvoltate. Politic, se recunoaste prin rezolutia ONU din 2006 amenintarea
globala a unei boli neinfectioase cu consecite devastatoare. Pe perioada urmatoare se
estimeaza o crestere a numarului cazurilor de diabet pe plan mondial (cu ~50% pana in
2025) (cu ~50% pana in 2025).
-rol de materii prime utilizate în scopul biosintezei unor substante liposolubile biologic
active (hormoni steroizi).
-secretia biliară, răspunzătoare (prin sărurile biliare) de emulsionarea lipidelor din ratia
alimentară si facilitarea digestiei acestora
-rol energetic, prin utilizarea aminoacizilor: -în sens energogenic; -în sens
neoglucogenic sau lipogenic.
-hrana, care furnizează: -proteine, digerate succesiv sub influența enzimelor proteolitice
din sucurile gastric (pepsina și gelatinaza), pancreatic (tripsina, chimotripsina, elastaza
și carboxipeptidazele) și intestinal (enterochinazele, aminopeptidazele tri și
dipeptidazele);
-vitaminici, precum vitaminele hidrosolubile din complexul B (B2, B6, B12) și PP,
precum și vitaminele liposolubile (A,D,E,K) care se implică în metabolismul intermediar
al proteinelor;
-alcaptonuria,
-leucinoza,
-cistinuria;
digestivă
celulară
excretorie.
Greutatea ideala(kg)=(inaltimea-100)+varsta/10x0,9
10.EXEMPLE DE PH-METRE,
SPECTROFOTOMETRE, CROMATOGRAFE SI
ELECTROFOREZE UTILIZATE IN LABORATOARE MEDICALE
SI DE REVOLUTIE .
Hartia indicatoare de ph
Fabricata prin impregnarea hârtiei de filtru de calitate ridicată cu soluţii indicatoare sau
soluţii indicatoare mixte.
Aparatura pH-metru, echipat cu electrod de calomel (electrodul de referinta) si electrod
de sticla (electrodul de masurare). In stare de repaus electrodul de calomel se
pastreaza cufundat intr-o solutie saturata de KCl, iar cel de sticla in apa distilata. Daca
inainte de utilizare se constata ca in interiorul electrodului de referinta exista bule de
aer, se completeaza lichidul din interiorul acestuia cu solutie saturata de clorura de
potasiu
Mod de lucru
Pentru etalonarea aparatului se folosesc de obicei doua solutii tampon care au pH-
ul cel mai apropiat de cel presupus la proba ce se analizeaza. Cu 10-15 minute inainte
de determinare, se deschide aparatul. Se aduce la zero, conform instructiunilor
insotitoare. Se aduce solutia tampon la temperatura de 20°C, regland si aparatul pentru
aceasta temperatura (din butonul de reglarea temperaturii). Se introduc electrozii in
solutia tampon; daca acul indicator nu arata exact pH-ul acelei solutii, se aduce la acea
valoare (conform instructiunilor aparatului). Se indeparteaza solutia tampon, se spala
electrozii cu apa si se tamponeaza usor cu hartie de filtru. Se introduc apoi electrozii in
extractul apos al probei de cercetat; dupa 1-2 minute se masoara temperatura lichidului,
se regleaza aparatul la acea temperatura si se citeste pH-ul. Dupa efectuarea
determinarii electrozii se spala cu apa apoi cel de calomel se introduce in solutia
saturata de dorura de potasiu, iar cel de sticla in apa distilata
SPECTROFOTOMETRE
Metoda a fost utilizata initial de botanistul rus Mikhail Tsvett pentru separarea de
produsi intens colorati, de unde denumirea de cromatografie. Cromatografia in coloana
implica o faza mobila (lichid sau gaz) care curge peste o faza stationara (solida sau
lichida). In cromatografia in coloana un amestec de molecule este separat pe baza
afinitatii fiecarei molecule pentru faza mobila sau stationara: daca o molecula are o
afinitate mai mare pentru faza stationara decat o alta molecula, atunci cea din urma va
migra prin coloana mai rapid decat prima molecula. Solutia de analizat este adaugata
prin partea superioara a coloanei si este apoi eluata cu solvent; fractiunile sunt
colectate prin partea inferioara a coloanei. Exista mai multe varietati de cromatografie in
coloana: cromatografia cu gel filtrare (excludere moleculara), cromatografia cu schimb
de ioni, cromatografia cu faza inversa, cromatografia cu gaz-lichid, cromatografia cu
interactiuni hidrofobe, cromatografia cu afinitate, cromatografia cu separare.
In cromatografia cu gel-filtrare (excludere moleculara) moleculele dintr-o solutie
sunt separate in functie de marimea lor pe masura ce trec printr-o coloana de bile
legate intre ele intr-o retea tridimensionala. Aceste bile polimerice (dextran, agaroza sau
acrilamid) prezinta pori de anumite dimensiuni. Pe masura ce o proba trece prin
coloana, moleculele mai mari decat dimensiunile porilor nu vor patrunde in ochiurile
retelei ramanand in solutie, astfel incat ele vor elua primele din coloana. Moleculele mai
mici vor patrunde prin pori in ochiurile retelei si astfel se vor deplasa mai lent prin
coloana si vor elua ultimele din solutie. Pe masura ce proba elueaza la capatul coloanei
fractiunile sunt colectate in tuburi. Fractiunile eluate sunt apoi testate pentru
determinarea compozitiei si cantitatii componentelor respective prin spectrofotometrie,
electroforeza sau teste functionale. Cromatografia cu gel filtrare este utilizata in primul
rand pentru a purifica proteine sau alte molecule si poate fi utilizata pentru estimarea
marimii unor proteine necunoscute (coloane calibrate cu proteine cu GM cunoscuta). In
cromatografia cu schimb de ioni moleculele sunt separate pe baza incarcaturii lor
ionice. Faza stationara este reprezentata de o rasina cu incarcatura fixa; daca aceasta
incarcatura este negativa (carboximetil celuloza), procesul se numeste cromatografie cu
schimb de cationi, iar daca incarcatura este pozitiva (dietilaminoetil celuloza), este
cromatografie cu schimb de anioni. Faza mobila este reprezentata de o solutie tampon.
Atunci cand o proteina trece prin coloana se poate lega de matrice si poate fi in
continuare eluata prin cresterea concentratiei ionice a solutiei tampon (elutia poate fi
privita ca o competitie pentru situsurile de legare ale matricei; pe masura ce puterea
ionica a tamponului creste, o sare ionica din tampon va ocupa un situs al matricei si
proteina va fi eluata din coloana). pH-ul solutiei tampon este critic in cromatografia cu
schimb de ioni.
Exista doua cai de efectuare a elutiei: prin gradient, in care concentratia salina
creste constant si gradual in timpul procesului de elutie si elutia brusca, in care
modificarea in concentratia salina este abrupta. Electroforeza, ca si cromatografia cu
schimb de ioni, poate fi utilizata ca un instrument eficient pentru analiza unui amestec
de ioni. O fasie de hartie sau gel polimeric saturata cu un electrolit este asezata astfel
incat sa traverseze doua solutii care contin electrozi. Amestecul de analizat este aplicat
pe hartie/gel si cei doi electrozi sunt conectati la o sursa de inalta energie (~5000 volti).
Ionii pozitivi vor migra intr-o directie, iar cei negativi in cealalta directie. Cu cat este mai
mare incarcatura ionului, cu atat va migra mai departe.
Metoda este in mod special utila pentru separarea amestecurilor proteice. In
cromatografia cu faza inversa moleculele sunt legate de o matrice hidrofoba
(hidrocarburi cu lant lung legate de o matrice de silicon) intr-un tampon hidrofil.
Moleculele pot fi apoi eluate prin scaderea polaritatii tamponului, de exemplu prin
cresterea concentratiei de alcool sau alt solvent nepolar din tampon. Cromatografia cu
afinitate este utilizata mai mult in scop de cercetare; moleculele sunt separate pe baza
unor aspecte specifice ale structurii si activitatii lor biologice. Sunt utilizati liganzi care
sunt imobilizati intr-o matrice de suport, din care este efectuata o coloana; peste
coloana se toarna proba care contine proteina de interes si care se leaga de liganzii
continuti in coloana; proteina este apoi eluata, fie prin modificarea conditiilor din coloana
(modificarea pH-ului sau concentratiei saline), fie prin utilizarea unei alte molecule care
va intra in competitie cu molecula de interes pentru situsurile de legare ale liganzilor.
Exemple de liganzi in functie de substanta de purificat: substrat, inhibitor, cofactor
(pentru enzime), antigene (pentru anticorpi), secvente de baze complementare (pentru
acizi nucleici). Cromatografia lichida de inalta performanta utilizeaza pompe care
furnizeaza presiuni inalte care imping solventii prin coloane metalice. Aceasta creste
viteza procesului de separare si previne raspandirea solutiilor care poate aparea in
cromatografia in coloana gravitationala. Separarea are loc in minute in loc de ore si este
net superioara. Utilizand cromatografia cu faza inversa pot fi separate doua proteine a
cate 100 aminoacizi fiecare care difera printr-un singur aminoacid.
Cromatografia cu gaz utilizeaza un lichid cu punct de fierbere inalt impregnat intr-un
suport solid inert ca faza solida si heliu ca faza mobila, intregul sistem fiind incalzit.
Solutul este injectat in coloana si se volatilizeaza imediat, heliul indepartand
componentele din coloana, fiecare component fiind inregistrat de un detector care
determina cantitatea relativa a acestuia. Polaritatea si volatilitatea componentelor
determina timpul cat acestea sunt retinute de coloana. Capacitatea coloanei in
cromatografia cu gaz fiind foarte mica, aceasta este utilizata in principal ca un
instrument analitic.
In cromatografia in strat subtire si cromatografia cu hartie coloana este inlocuita cu
un strat adsorbant (silicon, aluminiu, celuloza) aplicat pe un suport de sticla/plastic/folie
de aluminiu. Solutul este aplicat cu un tub capilar, iar solventul este lasat sa se evapore.
Apoi componentele sunt eluate cu un solvent care este lasat sa urce pe placuta prin
actiune capilara, antrenand componentele amestecului in grade diferite. In final se
aplica un agent oxidant, astfel incat fiecare component apare ca o pata intunecata pe
placuta, localizarea si marimea fiecareia dintre acestea servind pentru identificarea si
masurarea cantitatii relative a componentelor
ELECTROFOREZA
Electroforeza proteinelor serice reprezinta separarea electroforetica a fractiunilor
proteice din serul sanguin si evaluarea concentratiei componentilor prin metoda
fotometrica.Proteinele totale din ser sunt descompuse in 5 categorii de substante
numite fractiuni proteinice.
Valorile medii normale ale acestor fractiuni (care se refera la persoanele de varsta
adulta si normal hranite) pot sa varieze pana la 10% in plus sau in minus, in special la
copii, varstnici sau la persoane care nu se alimenteaza normal.
Valori normale
Hematocritul
Reprezinta masa de hematii (globule rosii) dintr-un anumit volum de sange.
Procedeul consta in recoltarea sangelui dintr-o vena, apoi acesta se combina cu o
substanta antiocoagulanta si se repartizeaza intr-un tub de sticla foarte ingust, care se
centrifugheaza puternic la o centrifuga. In urma acestei operatii se observa separarea
sangelui in stratul superior (plasma) si stratul inferior, format din globule rosii, care
constituie hematocritul.
Hematocritul se poate defini ca fiind volumul stratului de globule rosii (in procente)
fata de volumul total al sangelul din tubul de sticla.
Valori normale ale hematocritului:
- la barbati = 40-48%
- la femei = 36-42%
Hemoglobina
Numaratoarea trombocitelor
Trombocitele cele mai mici elemente solide ale sangelui, au rolul important de a
produce coagularea (inchegarea) sangelui. In caz de hemoragie, prin leziuni ale vaselor
sanguine, trombocitele se aduna in gramezi si contribuie, pe langa alte mecanisme la
formarea cheagului si inchiderea ranii si deci la oprirea hemoragiei.
Din contra, cresterea numarului de trombocite, peste 400 000 poate predispune
coagularea accentuata a sangelui chiar in interiorul corpului, impiedicand circulatia in
vase, cu producerea de cheaguri, infarcte, tromboflebite, accidente vasculare cerebrale,
etc. Timpul de coagulare (T.C.)
Clasic pentru a aprecia puterea de coagulare a sangelui in cazul unei hemoragii sau
in vederea unei operatii chirurgicale, se determina t.c. dupa cum urmeaza: se
recolteaza o picatura de sange din pulpa degetului, se pune pe o lama de sticla si se
cronometreaza timpul care a trecut pana la coagularea sangelui.
Valori normale ale timpului de coagulare sunt de: 8-12 minute. Depasirea acestui
timp (T.C. crescut) arata ca, coagularea sangelui se face cu intarziere, fapt ce poate
predispune la sangerari, la hemoragii.
Un T.C. scazut (sub cinci minute) indica o coagulare anormal de rapida a sangelui
putand duce la coagularea sangelui chiar in vasele sanguine, asa cum se intampla in
unele infectii microbiene.
Timpul de sangerare (T.S.) Este o analiza care se efecteaza tot in scopul cercetarii
puterii de coagulare a sangelui. Analiza nu se face pe lama, in afara corpului ci chiar pe
organismul omului. Cu un ac se inteapa usor lobul urechii astfel incat sa iasa o picatura
de sange, apoi se cronometreaza timpul care trece pana cand intepatura nu mai
sangereaza.
Globulele rosii (eritrocitele) din sangele uman difera din punct de vedere
imunologic. Ele se deosebesc de la o persoana la alta prin prezenta sau absenta unor
substante chimice speciale, care se regasesc atat pe suprafata eritrocitelor cat si in
serul sanguin. Pe baza acestor deosebiri in compozitia sangelui, oamenii au fost
impartiti in mai multe grupe sanguine. Dar in mod obisnuit, in laborator se analizeaza
numai doua sisteme de grupe sanguine sistemul OAB si sistemul RH.
Sistemul OAB
Sistemul OAB cuprinde patru grupe sanguine. Cu exceptia grupei 0(1) globulele
rosii contin o substanta cu rol de antigen numita aglutinogen. Pe de alta parte, serul
oamenilor, cu exceptia grupei AB(IV), contine alta substanta cu rol de anticorpi
(aglutinina). Exista doua aglutinine: anti-A si anti-B. Venirea in contact a antigenelor A si
B cu aglutininele respective (anti-A si anti-B) produce aglutinarea (alipirea una de alta)
globulelor rosii. Este deci foarte important ca atunci cand se fac transfuzii de sange sa
nu se intalneasca antigenul A cu anticorpii anti-A si antigenul B cu anticorpii anti-B.
Sangele persoanelor din grupa sanguina 0(I) neavand antigene (aglutinogene) i s-a
spus si gange de grupa zero (0). De aceea aceste persoane au fost numite "donatori
universali" de sange, pentru ca sangele lor poate fi donat la subiectii care poseda alte
grupe sanguine de sange, fara teama de a se produce accidente de transfuzie. Iar
persoanele care apartin grupei de sange AB (IV) neposedand in serul lor anticorpi
(aglutinine) care sa se uneasca cu aglutinogenele, pot primi sange de la subiectii cu alte
grupe de sange, de aceea au fost numiti "primitori universali" de sange. Stabilirea
grupelor sanguine este necesara pentru a se putea sti in cazuri de boli si accidente
grave, ce grupa de sange are bolnavul sau accidentatul pentru a i se face transfuzia cu
sange din grupa potrivita. Transfuzia sanguina facuta cu sange nepotrivit cu grupa
persoanei tratate poate produce accidente grave de transfuzie. Grupa sanguina cea mai
intalnita la noi in tara este AII urmata in ordine descrescatoare de 0I, BIII si ABIV.
Grupele umane sanguine in sistemul OAB
Sistemul Rh
Analiza urinii
Recoltarea urinii
In vederea efectuarii unui examen de urina este necesar ca aceasta sa fie corct
recoltata si conservata.
Recoltarea probelor de urina se face in functie de felul urinei.
Pentru recoltarea sumarului de urina se recolteaza prima urina de dimineata intr-un vas
curat,la barbate,in special la cei in varsta,in ortostatism,iar la femei dupa o perfecta
toaleta vaginala.Recoltarea urinii prin sondaj se va face numai in cazuri de stricta
necessitate (adenoma si prostata) si in conditii de perfecta sterilitate.
Analiza se poate efectua si pe urina de 24 de ore pentru determinari cantitative.In acest
scop recoltarea urinii se face astfel:prima urina de dimineata se arunca,se recolteaza
apoi urina din 24 de ore cu exceptia urinii de a doua zi dimineata care se recoleaza in
vas separate si pe aceasta se va determina sumarul de urina.
In cazul in care se lucreaza pe urina de 24 de ore este necesar sa se adauge un
conservant (timol 1-2 g,chloroform 5-10 ml).
Daca se determina glicozuria sau acetonuria se evita adaugarea
cloroformului.CARACTERISTICI GENERALE FIZICE SI CHIMICE ALE URINII
In conditii normale in urina din 24 ore se elimina aproximativ 35 g substante
oragnice si 25 g substante minerale. Alaturi de acestea in conditii special sau patologice
mai pot apare: medicamente,metabolite ai acestora sau o serie de elemente patologice.
Volumul urinar
Volumul de urina emis in 24 ore este curins intre limite destul de largi si depinde de
asntitatea de lichide ingerate,de pierderile de apa prin transpiratie,de temperature
mediului ambient,activitatea fizica,de starile psihice.
Uneori dupa mictiune ,prin racirea urinii apare un nor numit “nubeculm”,alcatuit din
mucus si cellule epiteliale descuamate.Acesta nu prezinta semnificatie patologica.
Dupa mictiune urina este tulbure,aceasta se poate datora fie prezentei in cantitate
mare a unor saruri,fie prezentei puroiului in cazul infectiilor urinare.
Culoarea
Urina normal prezinta o culoare galben-deschis pana la galben-auriu datorita prezentei
unor pigmenti ca: urocromul,urobilina si profirina.Dintre acestia urocromul reprezinta
factorul principal de culoare.Culoarea urinii depinde si de concentratia si de natura
substantelor dizolvate in ea.Astfel,prima urina de dimineata fiind mai concentrate are o
culoare mai inchisa.Culoarea galben-inchis mai prezinta si urinele dupa afectiuni febrile
acute sau transpiratii profuse.
O urina incolora sau aproape incolora intalnim in: diabetul insipid,diabetul
zaharat,scleroza renala,faza poliurica a insuficientei renale acute.
Culoarea brun-verzuie in afectiuni hepato-colecistice; rosu-brun in prezenta
eritocitelor,hemoglobinei,mioglobinei; brun-inchis in alcaptonurie; verde dupa ingestia
de albastru de metal.
Mirosul
Mirosul urinii normale este “sui generis”.El se poate schimba in cursul infectiilor urinare
cand este amoniacal,in stari de cidoza si diabet zaharat miros de acetone.Mirosul poate
fi modificat si prin ingestia unor alimente ca:sparanghel,usturoi,hrean sau prin
administrarea de substante ca eucalyptol,terebentina etc.
Densitatea
Densitatea urinara are valori dependente atat de factorii fiziologici cat si patologici,fiind
invers proportional cu columul,cu exceptia urinii provenite de la diabetic care au poliurie
si elimina in acelasi timp cantitati mari de glucoza. Limitele normale sunt cuprinse intre
1015-1030-normostenurie-fiind dependente de cantitatea de substante dizolvate.
In conditii patologice,rinichiul poate pierde capacitatea de concentrare cu scaderea
densitatii-hipostenurie (diureza apoasa) caracterizata prin elaborarea unei urini cu o
concentratie mai mica decat a plasmei asa cum se intalneste in hiperhidratari,diabet
insipid,insuficienta renala acuta (reluarea diurezei),insuficienta renala cronica (faza
compensate). Pierzand apoi si capacitatea de diluare,densitatea urinii oscileaza in jurul
valorii 1010- izostenurie-corespunzatoare densitatii sangelui dezalbumina,intalnita in
insuficienta renala cronica.
Reactia urinii
Reactia urinii (pH-ul) se determina pe urina proaspata care are in general o reactive
slab acida, 5,0-7,0.
Reactia urinii depinde de alimentaie.Un regim bogat in proteine scade pH-ul urinar,iar
un regimm predominant vegetarian creste pH-ul.
In conditii patologice pH-ul urinar se modifica.El devine puternic acid in cursul
diabetului,insuficientei renale grave si puternic alcalin in:infectii urinare,dupa varsaturi,in
perioade de reabsorbtie a edemelor.
Albumina sau proteinele urinare provine din albumina sanguina, si in mod normal ea nu
se gaseste in urina. Dar in bolile care altereaza porii din filtrul rinichilor sau in bolile care
produc sangerari pe traiectul cailor urinare, albumina trece in urina (albuminurie,
proteinurie). La unele persoane cu constitutie mai slaba a rinichilor urina poate contine
albumina in cantitate mai mica. Este vorba mai ales de tineri de 15-25 ani, de obicei
slabi si inalti, care dupa eforturi fizice, dupa mers, dupa statul indelungat in picioare
prezinta albuminurie tranzitorie in timpul zilei, care dispare noaptea si dupa repaus la
pat. Albuminurii tranzitorii se mai intalnesc dupa frig, stari emotionale, vaccinari si stari
alergice, dupa consumul de oua si medicamente in timpul sarcinii. Albuminurii
permanente si masive se intalnesc frecvent in cazul bolilor de rinichi si ale cailor urinare
(bazinet, uretere, vezica): glomerulonefrita, nefroza, cistita, pielocistita, tuberculoza
renala, calculi urinari etc. Si alte boli care pot atinge rinichiul se insotesc de albuminurie
cum sunt: hipertensiunea arteriala, diabetul, bolile de sange si de inima, infectii cu
microbi sau virusuri, intoxicatii cu substante minerale sau organice.
Deseori albuminuria se insoteste de hematurie. Dupa pierderea cronica de
albumina prin urina se produce o scadere a proteinelor corpului cu consecinte negative
asupra intregului organism. In marea majoritate a cazurilor albuminuria este moderata si
se apreciaza calitativ, in raport cu cantitatea de albumina, astfel:
- albumina=absenta; nor foarte fin; nor fin si dozabila.
In acest caz se face si dozarea albuminei din urina care se exprima in g/l.
Aprecierea se mai poate face si prin 1-3 plusuri.
Zaharul sau glucoza din urina (glucozuria sau glicozuria)
Medicii din antichitate au observat sa urina diabeticilor care este dulce, atragea furnicile
si albinele si au numit-o "urina de albine". Ei foloseau aceste insecte pentru
descoperirea diabetului, metoda aceasta fiind cea mai veche "analiza medicala" care se
cunoaste. Mai tarziu, medicii sau ajutoarele lor puneau rapid diagnosticul de diabet
zaharat chiar la patul pacientului prin simpla gustare a urinei. Asa cum s-a aratat la
analiza zaharului in sange, cand glicemia din diabet depaseste 150-200 mg/100 ml
sange, glucoza (zaharul) trece prin filtrul renal si se elimina prin urina, de unde poate fi
analizata.
De mentionat ca glicozuria nu se intalneste numai in diabet ci si in alte situatii, de
exemplu, dupa un consum exagerat de glucoza sau alte zaharuri, dupa diferite
medicamente, la femeile gravide si la persoanele care urmeaza tratamente cu hormoni.
Exista persoane care, fara sa aibe diabet zaharat, elimina permanent sau periodic
zahar prin urina (diabet renal). Acest fapt se datoreaza unui defect al filtrului renal care
permite trecerea glucozei in urina, care nu influenteaza starea de sanatate a persoanei
respective.
Corpii cetonici din urina (cetonuria)
Corpii cetonici nu se gasesc in urina normala. Dar dupa cum s-a aratat la diagnosticul
de laborator al diabetului, concentratia lor urinara creste foarte mult in diabetul zaharat
netratat. Si alte cauze pot sa creasca concentratia corpilor cetonici din urina: infectii
microbiene, intoxicatii grave, dupa un post prelungit sau dupa un regim alimentar sarac
in dulciuri si bogat in grasimi, in cursul sarcinii, dupa varsaturi prelungite. Unele
medicamente luate de bolnavi produc o reactie falsa pentru corpii cetonici. Prezenta
corpilor cetonici se noteaza cu 1-3 plusuri.
Pigmenti biliari
Pigmentii biliari sunt substante colorate care ii imprima bilei hepatice culoarea brun-
verzuie. In bolile de ficat insotite de icter, acesti pigmenti trec in sange dand culoare
galbena pielii, iar din sange trec in urina, colorand-o in brun. In mod normal, pigmentii
biliari sunt absenti in urina. Prezenta lor se notifica prin expresia "prezenti".
Urobilinogenul
Urobilinogenul este o substanta care se gaseste in cantitate mica in urina normala. Insa
in bolile de ficat cu sau fara icter (hepatita, insuficienta hepatica) in intoxicatiile care
ataca ficatul, in boli ale vezicii biliare (colecistita), in bolile intestinale cu tulburari de
digestie (enterita, colica, constipatie) urobilinogenul este foarte crescut. Prezenta sa in
urina se exprima calitativ prin 1-3 plusuri ori prin expresia "normal" sau "crescut".
Alte componente ale urinei
Mineralele urinare sunt aceleasi care au fost descrise si in sange, dar in urina
concentratia lor e mult mai mare, deoarece rinichii elimina prin urina orice exces de
minerale din sange si din organism.
Deseurile toxice rezultate din arderea proteinelor ca acidul uric, creatinina, ureea sunt,
de asemenea, eliminate in cantitati mari prin urina. Cercetarea lor in urina se face mai
rar, deoarece analiza sangelui ofera date mai precise.
Calculi urinari
Calculii sunt niste concretiuni ce se formeaza in rinichi sau in vezica urinara,
datorita solidificarii substantelor minerale sau organice, care se elimina in exces prin
urina. Calculii urinari produc dureri, hemoragii (hematurie) si infectii ale cailor urinare.
Analiza calculilor se face pentru stabilirea compozitiei lor chimice, cu scopul de a se
cunoaste masurile ce trebuie luate pentru prevenirea formarii de noi calculi. De aceea,
bolnavul care are o "criza de rinichi" (colica renala) trebuie sa fie atent cand urineaza
pentru a recupera eventualul calcul si a-l aduce la laborator ca sa fie analizat. In
vederea recuperarii calculului (mai ales daca este mic) bolnavul trebuie sa urineze timp
de 4-5 zile intr-un borcan de sticla. Apoi urina se filtreaza printr-o bucata de tifon, care
retine calculul. Prevenirea formarii calculilor se face in primul rand prin regim alimentar.
Astfel, persoanele care au facut calculi de fosfat de calciu vor evita alimentele bogate in
calciu si fosfor (lapte, branza) iar cele care au avut calculi de oxalat de calciu vor
consuma mai putine alimente care contin calciu si oxalat (spanac, cafea, ciocolata, ceai
etc.); persoanele care au avut calculi de acid uric sau urat vor reduce ratia de carne.
Indiferent de compozitia chimica a calculului urinar, pe langa aceste recomandari, la
indicatia medicului, bolnavii vor trebui sa ia si alte masuri de prevenire a calculozei
urinare.
Analiza microscopica a urinei
Elementele si formatiunile solide din urina cum sunt celulele, cristalele etc. se pot
observa numai la microscop. Cand aceste elemente sunt putine, nu au importanta
pentru sanatate, dar cand depasesc o anumita cantitate pot ajuta la punerea unui
diagnostic. La femei unele din aceste elemente pot proveni nu numai din urina ci si din
sfera genitala. De aceea pentru a evita unele confuzii, la femei se recomanda repetarea
examenului microscopic din urina recoltata dupa toaleta prealabila.
Celulele epiteliale sunt rare in mod normal, dar in infectiile vezicii urinare si ale
rinichiului pot deveni numeroase.
Leucocitele sunt celule sanguine albe, care au trecut in urina din sange
(leucociturie) de obicei cu ocazia unei infectii urinare acute sau cronice (puroi).
Hematiile (globulele rosii) provin din sange si indica o sangerare (hemoragie) la
nivelul cailor urinare sau ale rinichilor. Infectiile urinare acute (cistita, glomerulonefrita,
pielocistita), infectiile urinare cronice (pielonefrita, tuberculoza), calculii urinari, tumorile,
bolile de sange, hipertensiunea arteriala, etc., sunt insotite de eliminari de sange in
urina (hematurie). Uneori hematuria este asa de mare incat sangele care coloreaza
urina, producand cheaguri, se vede si cu ochiul liber. Dar sunt persoane care prezinta
hematurie fara a avea vreo boala oarecare ci datorita unei debilitati ereditare a rinichilor
(hematurie congenitala).
Cilindrii urinari sunt niste formatiuni cilindrice care apar numai in cazurile de boli are
rinichilor (glomerulonefrita, nefroza).
Cristalele urinare de natura minerala sau organica se gasesc la toate persoanele.
Insa sunt persoane care elimina aproape permanent cristale numeroase de acid uric si
de oxalat de calciu, mai ales cand urina este prea concentrata. In astfel de situatii exista
riscul de a se forma litiaza renala (piatra la rinichi). Si unele medicamente (sulfamildele)
pot sa se elimine sub forma de cristale, perturband filtrarea urinei la nivelul rinichiului.
Un consum mai crescut de lichide poate sa previna formarea de cristale in urina.
Microbii care se pot inmulti in urina si care sunt cauza infectiilor urinare, se observa
la microscop.
-www.scribd.com
: