DETERMINARE Rh

Metoda clasica pe placa

( screening):

placa de opalin
pipete de unica folosinta
cristalizoare
agitator
solutie salina izotonica 0,9% (SF)
ser Anti-D Ig G+ Ig M contine albumina bovina < 6% si conservant NaN3
< 0.1%
ser Rh-control

1. Screening:
- Se aleg probele conform protocolului de laborator
- Se aduc reactivii la temperatura mediului ambiant ( 18 – 25 o C )
- Se degreseaza placa de opalin
- Se pipeteaza pe placa de opalin o picatura de singe total
- Se adauga o picatura de ser Anti-D
- Se amesteca incet
- Se roteste placa cu miscari circulare 1-2 min.
- Se face citirea
-.Se noteaza pe eprubeta rezultatul in vederea validarii.

Citirea se face fata de martor si fata de 2 esantioane cunoscute Rh + si Rh-

Biolog Pr. Alexandra Zagrean

2. Confirmare prin Testul Coombs ( micrometoda)

( confirmare D slab prinTest Coombs ) :

pipeta automata -ID DiaMed
conuri- ID
eprubete dilutie
dispensor -ID
stativ -ID DiaMed
incubator -ID DiaMed 37oC
centrifuga- ID DiaMed

- Se aleg probele conform protocolului de laborator (Rh negative )

- Se aduc reactivii la temperatura mediului ambiant ( 18 – 25 o C )
- Se prepara suspensia de eritrocit din proba: 1ml ID- Diluet 2 +10ul
sediment eritrocitar proba
- Nu se folosesc cartele cu gelul deshidratat sau cu bule de aer
- Se identifica fiecare proba cu o coloana di cartelela -ID
- Se inlatura folia de aluminiu
- Se pregateste suspensia hematiilor de testat 0,8 % in ID Diluent 2
- Se distribuie 50 μl suspensie de eritrocit in microtub cu pipeta -ID
- Se adauga 50μl reactiv ID- Anti-D pentru D slab
- Se incubeaza 15 min la 37o C in ID –incubator
- Se centrifugheaza 10 min in ID-centrifuga
- Se citesc rezultatele si se inregistreaza
-
Fina aglutinare indica prezenta unui D partial sau D slab !

Biolog Pr. Alexandra Zagrean