ODAK Blood Grouping Gel Systems

ODAK - Sistem de determinarea a grupei sanguine cu carduri cu gel

OBG DAT Screen

Nr. REF: OBGDAT‐12, OBGDAT‐48 CE 1023

SCOPUL UTILIZARII
Acest test distinge eritrocitele sensibilizate in-vivo de imunoglobuline tip IgG sau de complement C3d prin
tehnica coloanelor de gel.

INTRODUCERE

Screening-ul anticorpilor este metoda cea mai sigură și sensibilă de detectare a unui anticorp semnificativ
clinic. Acest test conține anticorpi la IgG uman și un anticorp monoclonal murinic la C3 (clasa IgG).
Testul antiglobulina umana este utilizat în numeroase moduri, în pretransfuzie și teste de compatibilitate.
Testul antiglobulinic direct (DAT) este utilizat pentru a detecta sensibilizarea in vivo și detectează anticorpii
pe eritrocitele unui pacient. Alloanticorpii produc distrugerea eritrocitelor activand complementul, ceea ce
produce liza.

PRINCIPIUL TESTULUI
Testul conține 8 microtuburi:2x IgG, 2 x C3d, 2x AHG, si 2 x Gel Neutru in matrice de gel.
Eritrocitele vor aglutina în prezența anticorpului direcționat față de antigen. Celulele aglutinate care
formează un buton roșu pe suprafața gelul sau aglutineaza dispersat în gel este un rezultat pozitiv și indică
prezența anticorpului corespunzător.

CONTINUTUL KITULUI
12 sau 48 OBG Carduri DAT Screen. 1 card gel contine 8x1 microtuburi
IgG C3d AHG Ctl IgG C3d AHG Ctl
Produse gata de utilizare. Contine azida de sodium ca si conservant.
Fiecare microtub contine matrice de gel cu conservant si diferiti reactivi dispersati in gel.
‐ microtuburile IgG  : Anti-IgG Monospecific
‐ microtuburile C3d : Anti Human C3 
‐ microtuburile AHG : (AHG) Globulina anti umana polispecifica 
‐ microtuburile Ctl : Gel neutru fara anticorpi. 
MATERIALE NECESARE DAR NEINCLUSE
‐ Ppipete automate de 10 μl, 50 μl si 1000 μl.
‐ Varfuri de pipeta.
‐ Tuburi de testare.
‐ Diluent LISS
‐ Centrifuga si incubator pentru sistemul de determinare a grup sanguin in gel.

CONDITII DE PASTRARE SI STABILITATE

‐ Pastrati cardurile cu gel la 2‐8°C in pozitie verticala.
‐ Nu congelati.
‐ Evitati expunerea cardurillor la orice sursa de caldura, in dreptul aerului conditionat sau in lumina directa a
soarelui.
‐ Nu folositi reactivii dupa data expirarii.
Toate componenetele kitului sunt stabile pana la data expirarii inscrise pe eticheta, depozitate la 2‐8°C.
NU indepartati folia pana cand sunteti gata de utilizarea testelor. Dupa edschiderea, gelul poate sa inceapa
sa se usuce, ceea ce ar putea afecta rezultatele.
Folositi cardul in decurs de 2 ore dupa ce ati indepartat folia de aluminiu. Dupa de aceasta perioada a trecut,
nu mai utilizati cardul. Stabilitatea gelului fara folie este de 2 ore.

PRECAUTII si AVERTIZARI
Acesti reactivi sunt numai pentru diagnostic in vitro, pentru uz profesional.
Toate produsele din sursa umana (anticorpi monoclonali) sunt testate pentru HBsAg, HCV si HIV.
Totusi, toate materialelel de origine unmana arre trebui considerate potential infeectioase si se recomanda
sa fie utilizate conform practicilor estabilite de pentru activitatea in laborator.
- Toate componentele kit-ului și probele trebuie considerate ca potențiale pericole pentru sănătate. Ar
trebui să fie utilizate și eliminate în conformitate cu procedurile de siguranță proprii laboratorului.
COLECTAREA PROBELOR
Pentru testare se prefera folosirea eritrocitelor proaspat recoltate. Folosi eritrocite recoltate cu
anticoagulante pentru determinarea antigenelor. Dacă este necesar, probele sunt depozitate la temperatura
de 2-8 ° C si pot fi utilizate până la 48 de ore.
Eritrocitele colectate în ACD, DPC, SAGM și PAGGSM pot fi, de asemenea, utilizate până la data de expirare
indicată pe eticheta pungii la 2-8 °C.
Plasma și serul trebuie să fie eliminate. Reziduurile de fibrină pot interfera cu modelul de reacție.

PREPARAREA PROBELOR DE SANGE

0.8 % suspensie eritrocitatra:

Nu utilizați probe hemolizate, tulburi sau contaminate sau cele care conțin cheaguri
1- Aduceti diluentul LISS la temperatura camerei înainte de utilizare
2- Puneti 1 ml de diluent LISS într-un tub curat.
3 Se adaugă 20 ul de sânge integral sau 10 ul de eritrocite și se amestecă ușor.
Plasma sau Serul :
În cazul în care este necesar, probele depozitate la 2-8 ° C, pot fi utilizate până la 48 de ore după recoltare
lor; probele congelate (intre -20 ° C - -70 ° C) până la momentul efectuarii testului.

PROCEDURA TESTARII
Permitetii cardului si eritrocitelor sa ajunga la temperatura camerei inainte de utilizare.

Testul Antiglobulinic Direct (DAT)

1‐ Omogenizati eritrocitele.
2‐ Etichetati cardul cu gel cu numele pacientului sau numarul de identificare.
Inlaturati cu grija folia de aluminiu.
3‐ Pipetati 50μl de solutie eritrocitara 0.8% recoltata de la pacient sau donator in microtubul respectiv.
4‐Centrifugati cardul cu gel timp de 10 minute.
5‐ Cititi rezultatele.

Testul Antiglobulinic Indirect /Screening anticorpi (IAT)

1‐ Omogenizati eritrocitele.
2‐ Etichetati cardul cu gel cu numele pacientului sau numarul de identificare.
Inlaturati cu grija folia de aluminiu.
3‐ Pipetati 50μl de solutie eritrocitara 0.8% recoltata de la donator intr-un microtub.
4‐ Cand se include un autocontrol, pipetati 50μl de solutie eritrocitara 0.8% recoltata de la pacient in alt
microtub.
5‐ Adaugati 25 µl de ser sau plasma recoltate de la pacient respectiv donator in fiecare microtub.
6‐ Incubati cardul cu gel 15 minute la 37 °C.
7‐Centrifugati cardul cu gel 10 minute in centrifuga pentru carduri gel(3 minute 700 rpm si 7 minute
1100rpm).
8‐ Cititi rezultatele.

Testul de Compatibilitate
1‐ Omogenizati eritrocitele.
2‐ Etichetati cardul cu gel cu numele sau informatiile pacientului.
Inlaturati cu grija folia de aluminiu.
3‐Pipetati 50μl de solutie eritrocitara 0.8% recoltata de la donator in microtubul respectiv.
4‐ Cand se include un autocontrol, pipetati 50μl de solutie eritrocitara 0.8% recoltata de la pacient in alt
microtub.
5‐ Adaugati 25 µl de ser sau plasma recoltate de la pacient in microtuburi.
6‐ Incubati cardul cu gel 15 minutela 37 °C.
7‐Centrifugati cardul cu gel 10 minute in centrifuga pentru carduri gel.
8‐ Cititi rezultatele.
Negativ Banda eritrocitelor este la fundul coloanei fara vreo aglutinare vizibila in coloana de gel
+/‐ Agglutinari limitate de mici dimensiuni în jumătatea inferioară a coloanei
+1 Cateva aglutinari de mici dimensiuni in coloana de gel
+2 Aglutinari mici sau medii localizate in coloana de gel.
+3 Cea mai marea aglutinarilor sunt localizate in jumatatea superioara a coloanei de gel
+4 Aglutinarile de eritrocite formeaza o banda in partea superioara a coloanei de gel

Stabilitatea rezultatelor:
Se recomandă o citire imediată a rezultatelor după centrifugare. Nu lăsați cardurile prelucrate în poziție
orizontală. Dacă este necesar, o citire întârziată poate fi făcută până la 24 de ore după procesarea cardurilor
dacă sunt păstrate în poziție verticală, la frigider (2-8 ° C) și etanșat cu parafilm sau un material similar
pentru a evita evaporarea supernatantului.
Interpretarea rezultatelor:

Testul Antiglobulinic Direct (DAT)

- O reacție negativă indică absența anticorpilor IgG detectabili sau a componentei C3d a complementului pe
eritrocite.
- O reacție pozitivă (de la ± la ++++), indică faptul că eritrocitele pacientului sunt sensibilizate (eritrocite
acoperite cu anticorpi IgG și / sau C3d).

TESTUL ANTIGLOBULINIC INDIRECT Screening Anticorpi (IAT)

-O reacție negativă indică absența anticorpilor iregulari detectabili în serul sau plasma pacientului sau
donatorului.
-O reacție pozitivă indică prezența anticorpilor iregulari.
- După modelul de reacție și configurația de antigen, se poate indica tipul de anticorpi prezenți.
-O reacție pozitivă cu unele celule de testare și un Autocontrol negativ sugerează prezența unui anticorp
specific.
- O reacție pozitivă cu toate celulele test și un Autocontrolului pozitiv se poate datora unui auto-anticorp.
‐ O reactie pozitiva la toate celule si autocontrol pozitiv, dar cu reactie mai puternica decat la autocontrol la
unele eritrocite, proba pacientului va trebui investigat pentru auto-anticorpi.

Testul de Compatibilitate
-O Reacție negativă indică compatibilitatea sângelui donatorului cu destinatarul.
-O Reacție pozitivă indică incompatibilitatea sângelui donatorului cu primitorul, datorită prezenței
anticorpilor la antigenele eritrocitelor donatorului.
Trebuiesc efectuate investigații suplimentare pentru a identifica specificitatea anticorpilor.

LIMITARI
‐ Folia de aluminium de pe matricea de gel trebuie inlaturata cu grija.
‐ Nu folositi carduri cu gel cu semne de uscare.
‐ Cardurile cu bule de aer in gel sau picaturi in partea superioara a microtubului si/sau pe sigiliu, trebuiesc
centrifugate inaintea utilizarii.
‐ Nu atingeti cu varful de pipeta gelul din card. Se poate produce contaminare.
‐ Nu folositi probe hemolizate, tulburi, cu cheaguri sau contaminate.
‐ Utilizarea altor solutii decat Diluentul recomandat pot modifica reactiile.
‐ Concentratii anormale ale seroproteinelor, prezenta solutiilor macro moleculare in ser pot determina
aglutinari nespecifice ale eritrocitelor.
Se recomenda spalarea eritrocitelor inaintea efectuarii testului.

CARACTERISTICI DE PERFORMANTA
Sensibilitatea diagnostică și specificitatea DAT Screen:
Nu există nici o procedură descrisă sau tehnici capabile să detecteze toti anticorpii posibili prezenti într-o
probă.
Noi am efectuat studiul nostru de performanță.
Detectarea anticorpilor a fost studiata pe 240 de probe și s-au obținut rezultate comparabile cu alte produse
echivalente.
Precizia:
Reproductibilitatea inter teste si intra test. Nu s-au semnalat rezultate fals pozitive sau fals negative.
Variabilitatea dintre aspectul aglutinarilor in probele pozitive a fost de cel mult 1 unitate de aglutinare.

Simbolul etichetei
Lot            Dispozitiv medical de
diagnostic in vitro
Data expirari Cod rodus 

Temperatura stocare Producator

Consultati instructiuni utilizare Pericol

BIBLIOGRAFIE
1‐Marion E. Reid Christine Lomas‐Francis THE BLOOD GROUP ANTIGEN Facts Book 2004, Elsevier Ltd.
2‐Geoff Daniels, Imelda Bromilow, Essential Guide to Blood Groups , Blackwell   Publications 2010
3‐Harvey G. Klein MD,  David J. Anstee ,Mollison’s Blood Transfusion in Clinical Medicine 11TH EDITION
Blackwell Publishing Ltd
4‐Michael F. Murphy , Derwood H. Pamphilon , Practical Transfusion Medicine Third Edition 2009 Blackwell
Publishing Ltd
5‐Neil D. Avent and Marion E. Reid , The Rh blood group system: Blood 2000 95: 375‐387
6‐  Christopher D. Hillyer … BLOOD BANKING AND TRANSFUSION MEDICINE, Second Edition, Churchill
Livingstone 2007
7‐Lapierre Y., Rigal D., Adam J. et al.: The gel test; A new way to detect red cell antigen‐antibody reactions .
Transfusion 1990; 30: 109 –113.

Denumire produs:  OBG DAT Screen

                     1x12  REF - OBGDAT‐12          
4x12  REF - OBGDAT‐48