Etapa preanalitică.

Recoltarea și prelucrarea primară a probei biologice

4. Recoltarea adecvată a probei biologice

Recoltarea materialului biologic primar pentru investigare. În calitate de material

biologic pentru investigaţiile clinice de laborator cel mai frecvent este utilizat sângele.
Recoltarea sângelui se efectuează prin:
• Venepuncţie;
• Recoltarea sângelui capilar.
Sângele venos constituie materialul biologic preferenţial pentru investigaţiile
biochimice, hormonale, serologice, imunologice, precum şi pentru investigaţiile
hematologice.

Recoltarea sângelui venos trebuie să se efectueze cu ajutorul unor sisteme

speciale cu vacuum, care:
• exclud complet contactul cu materialul biologic şi asigură securitatea atât a
pacientului, cât şi a personalului medical,
• exclud contactul sângelui cu mediul extern,
• preîntâmpină destrucţia celulelor sanguine,
• asigură un raport optim sânge/stabilizator,
 Aceasta permite de a evita defecte ale materialului biologic, contribuie la
stabilitatea analiţilor şi obţinerea unui rezultat corect al testului de laborator.

Sistemul cu vacuum constă din trei componente :

1. Ac special bidirecţionat cu
o supapă protectoare

2. Holder

3. Eprubetă sterilă cu conţinut

dozat de vacuum.

Priorităţile sistemului cu vacuum faţă de sistemele deschise:

• durata recoltării sângelui se reduce cu 30-40%, constituind doar 7-10 sec.
• se reduc cazurile de hemoliză (de la 5-8 la 2%) datorită evitării destrucţiei
mecanice a eritrocitelor .
• Se minimizează formarea micro-cheagurilor, deoarece sângele contactează
imediat cu anticoagulantul.
• Perioada de timp între recoltarea sângelui şi contactului său cu anticoagulantul
este întotdeauna constantă;
• Este constant şi raportul sânge/anticoagulant deoarece:
- volumul anticoagulantului este dozat exact în procesul de producere a
eprubetei;
- volumul sângelui recoltat este determinat de volumul dozat de vacuum din
eprubetă
• Reducerea timpului de aplicare a garoului, deoarece la recoltarea în eprubete cu
vacuum garoul se poate scoate foarte rapid.
• Sterilitate.

Influenţa duratei de aplicare a garoului la venepuncţie asupra rezultatelor testelor

de laborator

Parametrul Durata aplicării garoului, min.

0 2 4 6
Calciu, mmol/l 2,38 2,45 2,52 2,58
Proteina totală, g/l 72 74 77 80

Albumina, g/l 39 40 42 43
 5. Prelucrarea primară a probei, transportul şi păstrarea ei

In dependență de investigațiile preconizate, sangele se recoltează în eprubete

corespunzătoare. Capacele şi etichetele eprubetelor sunt colorate în diferite culori în
dependenţă de tipul eprubetei.

№ Eprubeta Material biologic Investigaţiile Culoarea

Eprubetă fără aditivi, cu aditivi biochimice,

1.
sau cu activatori ai coagulării
Ser
serologice Roşie
2. Eprubetă cu citrat de Na Plasma coagulograma Albastră
Eprubetă cu Li-heparină sau Sânge integru imunologice,
3.
heparină /plasma electroliţi, EAB Verde
Sânge integru Hematologice,
4. Eprubetă cu EDTA
/plasma PCR Violetă
Eprubetă cu inhibitor al
5.
glicolizei
Plasma glucoza, lactat Sură

Aditivi polimeri pentru separarea serului:

• Granule de polisterol pentru coagularea rapidă a sângelui şi formarea unui cheag
compact
• Gel polietesteric pentru separarea elementelor figurate ale sângelui şi serului la
centrifugare

Aditivii polimeri (granulele de polisterol şi gelul poliesteric) uşurează separarea

serului/plasmei
Durata şi condiţiile de păstrare a sângelui recoltat:

Fără a separa serul sau plasma

pentru investigații biochimice, imunologice,
determinarea grupelor sanguine :

2-7 zile
După separarea serului sau a plasmei
pentru investigații biochimice, cuagulogramă
– până la 4 săptămâni

Fără a separa serul sau plasma

pentru investigații hematologice - 1 zi,
pentru cuagulogramă – până la 4 ore

• Se permite doar un singur ciclu de congelare-decongelare a serului

• Se interzice congelarea sângelui integru
• Materialul biologic se păstrează cu atât mai bine cu cât este mai joasă temperatura
de păstrare

Factori externi, ce influențează stabilitatea probei biologice.

Factorii Analiții, supuși modificărilor maximale

Timpul și temperatura Toți analiții
Deschiderea eprubetei Etanolul, pCO2, pO2
Anticoagulantul Coagulograma
Lumina Bilirubina
Înghețare-dezghețare Enzimele; Calciu și fosfații
Amestecare după dezghețare Toți analiții

Cele mai frecvente cauze ale alterării materialului biologic după recoltare:
– Hemoliza
– Metabolismul celulelor sanguine
– Reacţiile chimice din ser/plasmă
– Acţiunea microorganismelor
– Evaporarea apei/sublimarea
– Procese osmotice
– Acţiunea luminii
– Difuzia gazelor