Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Mure
MANUALUL RECOLTRII
pag. 1/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure
Se face conform unor protocoale graduale de evaluare ale diverselor grupe de patologie, emis de
conducerea fiecrei clinici/secii (fig.1).
pag. 2/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure
pag. 3/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure
1.2.1 Colectoare
Tabel 1. Tipuri de colectoare i aditivi
pag. 4/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure
= fluide biologice (snge, urin, LCR, lichid amniotic, aspirate), colectate evitnd riscul
contaminrii (vezi 1.2.2)
Se recolteaz din venele antecubitale (sau din v. jugular sau venele epicraniene la copiii mici
sau din alte vene superficiale de la bolnavi, la care este imposibil de gsit o ven accesibil la
plica cotului).
Se aplic garoul la cel puin 2-3 laturi de deget (3-5 cm) deasupra locului de nepare
(Maximum 1 MINUT nainte de recoltare). Bolnavul va strnge pumnul pentru a creea o
presiune venoas crescut i o distensie maxim a venelor acelui segment de membru.
Se dezinfecteaz cu un tampon cu alcool 70% sau cu tinctur de iod.
Se ptrunde cu un ac steril cu calibru adecvat cantitii de snge necesar s fie recoltat, cuplat
apoi la un container vidat, etan, cu marcher de nivel indicat (Fig. 2).
Sngele se recolteaz ca atare (fr aditivi) pentru testele de biochimie, imunologie, serologie,
hormoni, toxicologie i pe anticoagulani pentru testele de coagulare i VSH.
Pentru testele de coagulare, este preferabil s se ndeprteze garoul dup puncionarea venei
(nainte de recoltarea n vacutainer), iar dac se recolteaz mai multe tuburi, cel pentru
hemostaz va fi al doilea n care se recolteaz.
Evitarea hemolizei
Majoritatea cazurilor de hemoliz pot fi evitate dac se respect urmtoarele:
1. Folosii un ac standard nu mai mic de 21-22 G (uneori poate fi necesar s se foloseasc ace
de mrimea 22-23 G pentru pacieni vrstnici sau copii, cu vene dificil de puncionat).
2. Dac aerul poate intra pe lng ac sau n tubul de recoltat, nlocuii vacutainerul.
3. Dac folosii propriul echipament de recoltare i nu cel furnizat de laborator, asigurai-v
c folosii materiale curate, uscate, sterile (tuburi, seringi, ace).
4. Recoltai sngele n vacutainere inute la temperatura camerei.
5. Cnd vacutainerul se umple prea greu cu snge datorit unei venopuncii dificile, acest fapt
poate determina spargerea hematiilor. Alegei un alt loc de recoltare i un alt vacutainer i
recoltai al doilea specimen.
6. Nu retragei acul din ven pn n momentul n care vacutainerul nu este complet umplut.
Retragerea prematur a acului poate determina intrarea aerului n tub cu distrugerea
hematiilor.
7. Executai manevre ct mai blnde cu putin n timpul recoltrii sngelui.
8. Permitei uscarea dup dezinfectarea locului de recoltare.
9. Nu recoltai snge dintr-o zon cu hematom.
10. Cnd folosii vacutainere cu substane anticoagulante sau diferii aditivi, percutai uor
tubul imediat sub capac pentru a nu lsa aditivul s adere de pereii vautainerului sau de
capac.
11. Permitei tubului s se umple complet pentru a fi asigurat proporia corect ntre sngele
recoltat i aditivul din vacutainer.
12. Asigurai-v c s-a produs amestecul sngelui cu anticoagulantul / conservantul / aditivul,
rotind uor vacutainerul cu o micare de rotaie din ncheietura minii sau agitai uor pe
vertical tubul de 5-6 ori. Agitarea energic poate determina hemoliza sau formarea de
cheaguri.
13. Verificai dac aditivul / anticoagulantul s-a dizolvat. Dac mai este vizibil, continuai
agitarea blnd pn este complet dizolvat.
14. Pentru vacutainerele fr anticoagulant, lsai proba s sedimenteze cca. 30-45 minute
inainte de centrifugare. Aceasta permite coagulului s se formeze.
15. Centrifugai proba folosind centrifugi calibrate, n conformitate cu instruciunile de durat
i vitez cerute de centrifugare (de obicei 10-15 minute).
(Punctele 14 si 15, vor fi respectate de laborator)
pag. 6/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure
pag. 7/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure
Aportul de lichide n timpul recoltrii trebuie s fie normal (cu excepia cazurilor cnd
medicul curant face recomandri specifice n acest sens).
n unele cazuri se recomand ntreruperea medicaiei care poate induce interferene, cu cel
puin 12 ore (de preferat 48-72 ore) naintea nceperii recoltrii.
Unele alimente pot influena anumii compusi chimici, astfel c uneori, la sfatul medicului,
pacientul trebuie s in o anumit diet naintea acestei analize.
Se pot recolta mai multe tipuri de probe de urin (tabel 2), n funcie de examinrile ce trebuie
efectuate:
pag. 8/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure
3. Ataai ferm de zona genito-urinar punga pediatric de recoltare a urinei, astfel: dezlipii
banda protectoare din jumtatea inferioar a pungii i fixai poriunea adeziv la nivelul
perineului; cnd jumtatea de jos a pungii este fixat, dezlipii partea superioar a benzii i
continuai aplicarea poriunii adezive, asigurndu-v c orificiul urinar a fost inclus n
pung.
4. Imediat dup ce copilul urineaz n punga de recoltare, aceasta se dezlipete i se
transport la laborator n condiii corespunztoare.
Foarte important!
Evitai contaminarea probei de urin la transferul ei n recipientul de plastic; avei
grij s nu atingei containerul.
Refrigerai proba imediat dup recoltare i trimitei-o la laborator n aceeai zi.
1.3.4 LCR
Recoltarea lichidului cefalorahidian se realizeaz de ctre medic, prin puncie lombar (sau din
alte regiuni ale coloanei vertebrale este important s se specifice pe biletul de trimitere regiunea
din care s-a recoltat), utiliznd preferabil recipiente sterile (obligatoriu sterile, dac se solicit i
determinri bacteriologice) i anunnd telefonic laboratorul cu 30 minute n prealabil (int. 148
pentru teste bacteriologice, 149 pentru biochimie sau 131 pentru determinri ntre orele 13,00-
08,00).
Exist mai multe tipuri de transport al probelor, n funcie de natura produsului i de stabilitatea
analiilor care trebuie testai:
- transport n condiii ambientale;
- transport la rece (probe refrigerate la 4-12 oC, prin poziionarea in cutiile de transport
termoizolatoare a unor baterii refrigerabile care vor fi reincarcate zilnic);
Reguli generale:
- n cazul unui timp de transfer scurt sau mediu, toate probele de snge vor fi transportate
ambiental n containere/genti speciale (dac nu exist recomandri specifice de refrigerare
a probelor);
- probele transportate ambiental trebuie protejate de temperaturi extreme, prin ambalarea n
materiale termoizolante (containere de polistiren);
- probele refrigerate trebuie plasate n apropierea bateriei refrigerabile i nu direct pe
acestea;
- vor fi folosite dispozitive de monitorizare a temperaturii pe durata transportului.
Este foarte important ca separarea serului de pe cheag s se fac rapid (n 10 -15 minute dup
-laps,Calcitoninei, hormonului de cretere (GH) i
factorului de cretere Insulin-like (IGF).
Foarte important este ca prepararea frotiului de snge venos s fie fcut n maximum 3 ore de la
recoltarea sngelui.
De asemenea sngele recoltat pe citrat (pentru testele de coagulare) la pacienii care nu sunt
heparinizai este stabil timp de 8 ore la temperatura camerei pentru determinarea timpului de
protrombin, timpului de trombin, APTT, proteinei C i factorului V al coagulrii. Nu este
valabil ns pentru determinarea factorului VII i proteinei S care au o stabilitate mult mai redus.
n cazul pacienilor heparinizai sngele poate fi pstrat la temperatura camerei sau la frigider timp
de 4 ore din momentul recoltrii probelor. Dac acest lucru nu este posibil, plasmele se separ i
se stocheaz la -20C.
Dac nu se poate asigura transportul la laborator n acest interval, urina trebuie s fie pstrat la
frigider (4-8oC) sau tratat cu anumii conservani sau fixatori (vezi tabel 1). Aceste msuri
mpiedic sau ncetinesc multiplicarea bacterian pn n momentul efecturii testelor.
Pentru determinrile urinare cantitative ale diverilor analii urinari se recomand ca probele s fie
procesate imediat dup ce au ajuns la laborator. Dac acest lucru nu este posibil, probele vor fi
pstrate la frigider (4-8oC), dup ce n prealabil au fost adugai urmtorii stabilizatori: acid
clorhidric, pentru determinrile de calciu, magneziu, fosfor, acid vanilmandelic, metanefrine, i
hidroxid de sodiu, pentru determinrile de acid uric.
1.5 Triere prim ar i distribuie pe departam ente/com partim ente; criterii de respingere
Trierea primar se produce in cadrul dispeceratului, de catre dispeceri care verifica corespondenta
dintre Formularul de monitorizare a transportului probelor primare si probele aduse, precum i
integritatea recipientului, dac s-a recoltat n recipientul corespunztor i n cantitate suficient.
pag. 10/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure
Sngele pacientului, recoltat ntr-un tub fr substane anticoagulante, cu sau fr gel separator,
este lsat s sedimenteze/s coaguleze, dup care va fi centrifugat i se separ serul, care conine
toti componentii serici, mai puin fibrinogenul.
Plasma este obinut din sngele recoltat ntr-un tub cu anticoagulant i apoi centrifugat.
Anticoagulantul inhib formarea coagulului. Plasma conine toate tipurile de proteine.
Prin centrifugare se pot separa att plasm, ct i ser (vezi fig.3.). Diferena dintre plasm i ser
este c plasma reine fibrinogenul, care este nlturat din ser.
pag. 11/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure
SNGE
INTEGRAL
Anticoagulant Fr anticoagulant
Centrifugai
PLASM SER
Pentru anumii analii exist diferene semnificative ntre rezultatele obinute la testarea din ser i
cea din plasm: potasiu, magneziu, fosfor, proteine totale, lactat etc.
Diferenele dintre valorile obinute din ser i din plasm se datoreaz unor factori ca:
analitul poate fi consumat n timpul procesului de coagulare: fibrinogen, trombocite,
glucoz;
analitul poate fi eliberat din celule n timpul coagulrii: potasiu, LDH, fosfor, lactat;
anticoagulantul poate interfera cu metoda de determinare n cazul GGT, Li
pag. 12/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure
Faza pre-centrifugare
Serul sau plasma trebuie separate fizic de celulele sanguine ct mai repede posibil, pentru a nu
exista riscul producerii unor rezultate eronate; se recomand astfel o limit maxim de 2 ore din
momentul recoltrii probei.
Un contact mai redus cu celulele sanguine (2 ore) este recomandat pentru potasiu, glucoz,
ACTH, cortizol, catecolamine, acid lactic i homocistein.
Refrigerarea probelor de snge inhib metabolismul celulelor sanguine i stabilizeaz anumii
constitueni termolabili. Nu se recomand ca probele de snge integral s fie refrigerate dect dac
exist recomandri specifice n acest sens. Astfel, este contraindicat refrigerarea n cazul probelor
pentru determinarea potasiului, deoarece temperatura sczut inhib glicoliza i favorizeaz
eliberarea potasiului din celule, obinndu-se astfel rezultate fals crescute. Pe de alt parte, probele
din care se vor testa ACTH, PTH, acid lactic, catecolamine i gastrina vor fi rcite prin plasarea
ntr-un recipient ce conine un amestec de ap cu ghea.
Centrifugarea
Centrifugarea probei n vederea obinerii serului trebuie efectuat numai dup ce se constat c
sngele a coagulat complet. n mod normal coagularea se produce dup cca. 30 minute, ns n
cazul pacienilor care primesc tratament anticoagulant sau prezint defecte de coagulare aceasta se
produce cu ntrziere.
Centrifugarea probelor pentru obinerea de ser sau plasm se efectueaz n general la 3000 g timp
de 5 minute. Pentru obinerea unei plasme deplachetate este nevoie ca proba s fie centrifugat
timp de 15-30 minute la 2000-3000 g.
Dup separarea serului sau plasmei, probele nu vor mai fi recentrifugate (pentru a obine un volum
suplimentar de prob); de asemenea este contraindicat recentrifugarea n cazul probelor recoltate
n vacutainere cu gel separator.
Transferul probelor n tuburi secundare trebuie efectuat cu mare atenie, pentru a evita contactul cu
un material potenial infectant.
n cazul tuburilor cu gel se va verifica obligatoriu integritatea acestuia la sfritul centrifugrii.
pag. 13/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure
Dup ncheierea procesului analitic, o parte din probe vor fi pstrate o anumit perioad de timp
(vezi tabel 5), n condiii bine stabilite, astfel nct s permit confirmarea rezultatelor, verificarea
identitii probelor sau efectuarea unor teste suplimentare.
Reguli generale:
- procedura de stocare a probelor trebuie s in cont de stabilitatea analiilor;
- n congelatoare probele sunt pstrate de obicei n tuburi secundare; este posibil arhivarea
i n tuburile primare care conin gel, dac productorul specific acest lucru;
- se va evita pe ct posibil stocarea sngelui integral; oricum sngele integral destinat
obinerii serului/plasmei nu trebuie pstrat n frigider;
- intervalul de pstrare a probelor este cu att mai mare cu ct temperatura de arhivare este
mai sczut (excepii; probele pentru electroforeza lipoproteinelor i determinarea de
apolipoproteine A1 i B nu trebuie pstrate la congelator);
- dup decongelare proba trebuie omogenizat prin micri de inversiune a tubului, fr a se
produce spum;
- evitai decongelarea-recongelarea.
Probele de plasm destinate determinrii ncrcturii virale B i C, precum i probele de
toxicologie (metale) sunt consumate de obicei aproape integral n procesul analitic, de aceea nu
vor mai putea fi disponibile pentru retestri (se va solicita repetarea recoltrii).
Tabelul 5. Proceduri de arhivare a probelor
Probe pentru: Tipul Perioada Temperatura
probei arhivrii
Hematologie Snge pe 24 ore 19-23C
EDTA
Biochimie i imunochimie (excepie fac probele Ser 1 sptmn 2-4C
menionate mai sus)
Determinare hormoni i markeri tumorali Ser 2 saptamani -20C
Screening prenatal TORCH, serologie sifilis la Ser 1 luna -20C
care s-au obtinut rezultate pozitive
Alergologie si boli autoimune Ser 2 saptamani -20C
Incrctura viral HIV plasm indefinit -70oC
Determinri speciale studii, tulpini de control, Plasm, ser, Pn la -70oC
materiale de referin i control liofilizate utilizare
pag. 14/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure
Activitatea fizic intens naintea recoltrii poate duce la creteri ale transaminazelor, CPK, ureei,
glucozei.
pag. 16/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure
2.9.2 Cronic
Duce la creteri ale carboxihemoglobinei, antigenului carcinoembrionar (CEA+50%),
leucocitelor (+30-40%), fibrinogenului (+15-20%)
Duce la scderi ale prolactinei, carotenoizilor (-20%), HDL-C (-10-15%)
Medicamentele pot exercita att efecte in vivo (influene biologice), ct i in vitro (interferene
fizico-chimice). n tabelul 6 de mai jos sunt exemplificate cteva din principalele tipuri de
interferene medicamentoase:
pag. 17/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure
pentru anumii parametri testai n urina de 24 ore, este nevoie de adugarea unor conservani /
unui anumit pH (catecolaminele sau produii lor de metabolism, 2 microglobulina -
alcalinizare), sau necesit nclzirea urinei (i acidifiere n cazul determinrii Ca)
pentru determinrile corpusculare n LCR, se recomand evitarea recoltrii pe EDTA i
recoltarea/transportul LCR n recipiente nchise
tipul de anticoagulant folosit: pentru determinri corpusculare se recomand EDTA K3, ali
anticoagulani - oxalaii, citratul, etc - influennd forma, volumul, adezivitatea, dispunerea pe
frotiu a elementelor figurate.
este preferabil ca frotiurile de snge s se efectueze din snge capilar.
timpul de aplicare al garoului s nu depeasc 1 minut; garoul trebuie scos nainte de intrarea
sngelui n vacutainer
dac se recolteaz mai multe tuburi, cel cu citrat va fi recoltat al doilea
pentru recoltare se vor folosi ace 19-21 G pentru aduli i 22-23 G pentru copii
tipul de anticoagulant folosit i proporia cu sngele se recomand citratul de sodiu 3,8%
(0,109 mM/l) n proporie strict 1:9 cu sngele recoltat; oxalatul sau EDTA determin o mai
rapid inactivare a factorilor labili (V i VIII) ai coagulrii
se va evita formarea spumei la recoltare (agitarea tuburilor se va face delicat)
rezultatele din probe hemolizate, icterice sau lipemice vor fi compromise (se recomand
repetarea recoltrii)
3.1 Factori care influe neaz param etrii biochim ici-im unologici
pag. 18/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure
n recipiente nchise, componenii celulari i hemoglobina sunt stabile 1 zi, tuburile fiind
pstrate la temperatura camerei, n poziie orizontal.
se recomand prepararea frotiurilor n decurs de 3 ore de la recoltarea sngelui.
determinrile trebuie fcute ct mai repede posibil (dac nu este posibil, se recomand stocarea
plasmei srace n plachete imediat la 20oC).
plasma pentru determinarea timpilor Quick (PT), de trombin i a APTT, poate fi stocat 4 ore
la temperatura camerei sau mai corect n frigider (la 4 oC); determinrile mai tardive de 4 ore
conduc la scurtarea valorilor PT sau APTT.
pentru determinarea proteinei S i a factorilor V i VIII, plasma poate fi stocat maximum 4
ore.
pentru determinri de AT III, fibrinogen i protein C, plasma poate fi stocat 7 zile (la 4 oC).
obinerea corect a tipurilor de plasm:
bogat n plachete centrifugare 5 minute la 150-200 g
srac n plachete centrifugare 10 minute la 1000-2000 g
lipsit de plachete centrifugare 15-30 minute la 2000-3000 g
pag. 19/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure
4.1 Hemoliza
4.2 Hiperbilirubinem ia
4.3 Lipem ia
5.1 Vrsta
5.1.1 La nou-nscut
Hemoglobina, bilirubina i acidul uric (fig.4): concentraia Hb, este mult mai mare la nou-nscut
dect la adult; n zilele imediat urmtoare naterii hemoliza fiziologic (asociat imaturitii
funciei de glucuronoconjugare hepatic) duce la creteri nsemnate ale bilirubinei; concentraia
acidului uric la natere este similar cu a adultului, descrescnd semnificativ dup ziua a 2-a.
pag. 20/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure
5.1.3 La adult
Concentraia colesterolului total i a fraciunii din LDL crete cu vrsta (fig.4)
pag. 21/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
5.2 Sexul
n afara hormonilor sexuali, exist o serie de parametri de laborator (n special aceia care
depind de masa muscular), care difer la cele dou sexe. Figura 6 red civa dintre aceti
parametri, considernd 1 domeniul fiziologic la femeie, iar variaia la brbai fiind exprimat
ca i indice de multiplicare.
Fig 6. Diferene fiziologice legate de sex ale unor parametri de laborator (cifra 1
reprezint domeniul fiziologic la femei, variaiile n jurul acestei cifre reprezentnd
situaia parametrului la brbai)
22
5.3 Sarcina
23
Sideremie
CTLF
Feritina
Hemoglobina / /
Hematocrit / /
VEM
Numar eritrocite / /
Leucocite
Limfocite
Monocite
Neutrofile
Modificari comparativ cu femeile sanatoase negravide.
<2%-; 2-10%-,; 11-30%-,; 31-100%-,; >100%-,
n timpul ciclului menstrual FSH, LH, estradiol i progesteron prezint variaie ciclic. Fe i
fosforul scad la menstruaie iar colesterolul scade la ovulaie.
n faza postoperatorie imediat crete valorile de VSH, CRP, fibrinogen, uree, nr. leucocite i
scade albumina i colesterolul.
Se face conform unor protocoale de evaluare ale diverselor grupe de patologie, emis de
conducerea fiecarei clinic/sectii.
Cine solicita analiza?
Solicitarile se fac de catre medicii curanti.
24
- produse prelevate pe medii de transport sau produse refrigerate (+2-8C): pn la ora
13,30
- probe de urin: dimineaa pn la ora 9 - n cazuri justificate (urgene, pacieni
cateterizai) se accept urina recoltat n timpul zilei, numai dac durata transportului nu
depete 1 or sau dac se transport refrigerat (+2-8C)
- produse recoltate pe tampoane fr mediu de transport, nerefrigerate: se prelucreaz
doar n cazul n care transportul nu depete 1 or
- trimiterea lichidului cefalo-rahidian, pleural, ascitic, pericardic, secreii genitale se
anun laboratorului cu cel puin o jumtate de or nainte de puncie (recoltare) pentru
pregtirea mediilor de cultur
Urmtoarele produse care nu ajung pn la 13,30, vor fi trimise la Laboratorul de Urgen:
- lichid cefalo-rahidian, ascitic, pleural, pericardic,
- puroi,
- aspiraie gastric la nou-nscui,
- secreii genitale femei
6.1.1.1 Cum se solicita analizele de laborator?
In cazul sectiilor/clinicilor/cabinetelor interne solicitarea examinarilor paraclinice de
microbiologie se face electronic, prin emiterea setului de analize in Sistemul Informatic al
Laboratorului (Programul Hospital Manager) si completarea cererii de analiza microbiologica.
In cazul sectiilor/clinicilor externe solicitarea se face prin completarea cererii de analiza
microbiologica.
Cererea va fi completata obligatoriu cu datele cerute pe aceasta, si anume datele de identificare
ale pacientului, datele demografice, diagnosticul de baza si de infectie, data si ora recoltarii
probei si persoana care este responsabila de recoltare/instruire pacient. Se bifeaza felul probei,
examenul solicitat si se completeaza datele clinice despre pacient. Se mentioneaza in scris (la
observatii) toate acele date complementare care sunt considerate necesare de catre medicul
curant si care ar putea ajuta la interpretarea corecta a rezultatului (figura 1).
Recipientele se eticheteaza cu numarul de set si felul produsului patologic. Numarul setului se
inscriptioneaza si pe cererea de analiza.
Sectiile exterioare vor inscriptiona pe recoltor numele pacientului si felul produsului.
6.1.1.2 Cine anunta/pregateste pacientul pentru recoltarea probei?
Asistenta de salon/ambulator anunta bolnavul asupra:
- momentului/locului recoltarii
- dietei precedente
- tratamentului medicamentos care influenteaza rezultatul
- toaletei premergatoare anumitor recoltari
6.1.1.3 Cine face recoltarea?
Asistenta medicala: secretia faringiana, puroi, secretii din leziuni superficiale sau eliminate prin
tub de dren, sange pentru hemocultura, urina recoltata prin cateter permanent
Medicul curant: lichide sterile in mod normal (exceptie sange), probe intraoperatorii, urina prin
cateter nou introdus
Bolnavul (dupa instruire corespunzatoare): urina emisa spontan, materii fecale
n laboratorul de microbiologie nu se fac recoltari.
25
Figura 1. Cererea de analiza microbiologica
26
6.1.1.4 Recipiente utilizate pentru recoltarea probelor
Se utilizeaza recipiente sterile, lipsite de urme de substane antibacteriene, de unic folosin cu
capac nurubabil (exceptie tampoanele faringiene).
6.2.2 Cultivare:
- secreiile tractului respirator superior (secreii nazale, nazofaringene, orofaringene,
27
laringean, puroi sinuzal, otic)
- secreie conjunctival
- secreii tract respirator inferior (sput, aspirat, spltur bronic, lavaj bronhoalveolar)
- puroi (abcese, plgi superficiale, profunde)
- cultivare diferite secreii (LCR, lichid pleural, ascitic, pericardic, articular), bil
- urocultur
- secreii genitale la brbai: secreie uretral, prostatic, sperm
- secreii genitale la femei: secreie vaginal, col uterin, endometru
- hemocultur
- coprocultur
- aspirat gastric
- biopsii, piese intraoperatorii
- de pe suprafaa cateterelor
- exit site cateter
28
Staphylococcus saprophyticus (cauzeaz cistite la femei) izolat din urin este sensibil
la antibioticele folosite n tratamentul infeciilor tractului urinar
difterimorfi, streptococi grup viridans: rezultatele antibiogramei difuzimetrice pot fi
eronate
2. Determinarea concentraiei minime inhibitorii cu ajutorul automatului Vitek2 Compact
se efectueaza in urmatoarele situatii:
- tulpini izolate din produse in mod normal sterile, din produse ale cailor respiratorii inferioare,
puroi recoltat din abcese profunde, piese intraoperatorii
- germeni care nu pot fi testati difuzimetric : pseudomonade
- germeni multirezistenti testate difuzimetric
29
- exsudat faringian - o singur prob pe zi, recoltat dimineaa nainte de toaleta
gurii i ingerare de alimente, ap, fumat sau n cazuri excepionale (motivate n
bilet) dup 2-3 ore de la ingerare alimente
- urin o singur prob pe zi, se recolteaz urina de diminea sau la 3 ore dup
ultima miciune
- coprocultur: se recolteaz ct mai precoce dup debutul diareei, cnd numrul
de germeni este cel mai mare, repetarea examenului n 2 zile consecutive crete
ansa depistrii patogenilor
- se contraindic colectarea sputei, urinii de 24 de ore (multiplicarea
contaminanilor n produs)
6.3.5 Cantitate
Se preleveaz cantiti suficiente de produs, in functie de felul produsului.
30
clinic.
6.4 Msuri de protecie n cursul recoltrii produselor biologice n vederea exam enului
bacteriologic
31
o se indic folosirea mediilor de transport - probele recoltate pe acestea trebuie s
ajung la laborator n 4 ore
materii fecale: mediul Cary-Blair sau glicerin tamponat
tampoane: mediul Amies
cultivare Neisseria gonorrhoeae: mediul Amies cu crbune
o pentru produsele la care nu pot fi folosite medii de transport se recomand
refrigerare la 4-8C majoritatea germenilor supravieuiesc (excepii: Neisseria
meningitidis, Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, anaerobi), iar
multiplicarea lor este oprit, raportul dintre germenii patogeni i contaminani
rmne neschimbat
nu se refrigereaz: hemoculturile, lichidul cefalo-rahidian, pleural,
ascitic, pericardic, materiile fecale, produsele recoltate pentru cultivarea
anaerobilor
1. Lipsa cererii pentru analiz bacteriologic sau cerere completat parial, folosirea altor
bilete dect cele tipizate, concepute de ctre laboratorul de microbiologie.
2. Recipiente cu probe nemarcate, neidentificabile
3. Probe care se scurg din recipient nu se prelucreaz deoarece:
- constituie pericol de infecie
- proba poate fi contaminat din exterior, ceea ce reprezint surs de eroare n
diagnostic
Se anun telefonic secia i se cere repetarea probei. n cazul probelor nerepetabile
proba poate fi prelucrat cu consemnarea posibilei surse de eroare.
1. Probele necorespunztoare calitativ se pstreaz la 4C, se ia legtura cu medicul care
cere analiza pentru a afla, dac exist posibilitatea repetrii recoltrii
- dac poate fi repetat: proba se arunc
- dac nu poate fi repetat, proba se prelucreaz i se consemneaz posibilitatea unor
rezultate fals negative sau pozitive
32
Tabel 2. Criteriile refuzrii produselor biologice i procedura aplicat
33
Prelevat Analiz Criterii de respingere Se raporteaz
Sput C&M >25 celule epiteliale/cmp Peste 25 de celule
(x100) epiteliale pe cmp
microscopic produs
necorespunztor calitativ
pentru cultivare
Urin C&M Prob prelevat din pung de Produs inadecvat pentru
drenaj, vrf de cateter, analiza cerut din cauza
Volum insuficient; probe .
duble Se cere repetarea
Probe recoltate cu mai mult de recoltrii.
2 ore n urm!
34
6.7 Prelevarea diferitelor produse biologice n vederea examenului bacteriologic
6.7.2 Abcese
- din leziuni accesibile punciei puroiul se aspir cu un ac suficient de gros ataat de sering,
dup antisepsia corespunztoare a regiunii
- puroiul colectat cu seringa se transfer aseptic ntr-un tub i se nchide ermetic
- se transport imediat la laborator, mai ales n cazul n care se urmrete prezena
anaerobilor (20 de minute)
- n infeciile intraabdominale n cazul unor abcese multiple se recolteaz din fiecare colecie
separat
- puroiul poate fi steril n urma distrugerii germenilor, este recomandat excizie din peretele
abcesului
6.7.3 Fistule
- prelevatul de la orificiul fistulei nu conine ntotdeauna germenii ce cauzeaz supuraia!
- se spal i se antiseptizeaz tegumentele adiacente i se chiureteaz ct mai profund
traiectul fistulei
- dac este posibil, se aspir puroi, se transfer n recipient steril i se trimit la laborator
imediat
- dac recoltarea se face cu tampon, acesta se introduce n mediu de transport
35
6.7.4 Puroi prelevat din arsuri, plgi, leziuni superficiale (escare, ulceraii, episiotomie)
- suprafaa zonei de recoltare se spal cu soluie salin steril pentru ndeprtarea
exsudatului stagnant, prelevarea se face dintr-o zon a plgii lipsit de esut necrotic
- vrful unui tampon steril umectat n soluie salin steril se nvrte ferm pe o arie de 1 cm2
timp de 5 secunde, astfel nct s se obin o uoar sngerare;
- produsul se transfer n mediu de transport Amies; n lipsa mediului de transport materialul
obinut trebuie s ajung n cel mai scurt timp la laborator;
- dac se urmresc i germeni anaerobi, trebuie recoltat i cu un al doilea tampon i introdus
n mediu de transport (Amies sau Stuart)
- dac se anticipeaz ntrzierea transportului/prelucrrii, proba prelevat pentru cultivarea
germenilor aerobi se refrigereaz la 4C i se menioneaz pe bilet;
- prezena celulelor epiteliale n produsul recoltat poate indica faptul c prelevatul este
superficial, germenul izolat s nu aib rol etiologic; din leziunile superficiale cronice (ulcer
de gamb, picior diabetic) se recolteaz produs patologic n vedera examenului
bacteriologic doar n cazul unor semne de infecii clare, deoarece de regul exist o flor
de contaminare / colonizant bogat i mixt iar cultivarea nu ofer informaii pertinente
pentru a stabili rolul germenilor izolai.
36
(Streptococ grup A) i de streptococii grup C, G, Arcanobacterium hemolyticum
o n context clinic sugestiv, la cererea medicului curant, notat pe biletul de trimitere
se efectueaz diagnosticul altor faringite bacteriene (faringita gonococic), a
candidozei
o angina fuso-spiralara Panton-Valentine
- se preleveaz dimineaa nainte de toaleta gurii i a ingerrii de alimente, lichide, fumat
- n cazuri excepionale este acceptat recoltarea secreiei faringiene n timpul zilei, la
minimum 3 ore dup ultima ingerare de alimente, lichide, fumat
- pacientul se aeaz pe scaun cu faa spre o surs de lumin, gtul n uoar extensie, se
deprim baza limbii cu un apstor de limb steril n timp ce pacientul pronun vocala A;
se terge ferm cu tamponul steril amigdalele, peretele posterior al faringelui, orice zon
inflamat, ulcerat sau cu depozit purulent, fals membran, se ptrunde n criptele
amigdaliene; se evit atingerea tamponului de baza limbii sau de palatul moale
- tamponul se introduce n mediu de transport Amies; n caz de suspiciune de faringit
gonococic se folosete mediul de transport Amies cu crbune
37
6.8.4 Puroiul sinuzal
- indicaii: n sinuzite acute pentru depistarea germenilor ca: Streptococcus pneumoniae,
Moraxella spp., Haemophilus spp., Staphylococcus aureus, Burkholderia cepacia,
Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pyogenes, fungi)
- secreiile nazale i nazofaringiene nu sunt adecvate pentru diagnosticul sinuzitei, deoarece
germenii cultivai din aceste produse coreleaz slab cu sinuzita
- aspiratele sau lavajele se colecteaz aseptic n recipiente sterile
38
6.9 Recoltarea i transportul secreiilor cilor respiratorii inferioare
Secreiile tractului respirator inferior examinate bacteriologic includ sputa, aspirate (splturi)
bronice, lavaj bronhoalveolar, material bioptic.
Secreiile din tractul respirator inferior pot fi contaminate cu bacterii din tractul respirator
superior! Rezultatul bacteriologic se interpreteaz n context clinic, alturi de rezultatele altor
analize.
39
n cazul n care transportul ntrzie, probele se refrigereaz. Dac proba constituie vrf de
canul cu secreie, se acoper cu ser fiziologic steril i se refrigereaz. La predarea produsului
se menioneaz: prob refrigerat i durata refrigerrii. Prin refrigerare S. pneumoniae i H.
influenzae i pierd viabilitatea.
2. Biopsie tisular
Fragmentul de esut obinut intraoperator se introduce aseptic n recipient steril. Dac se
ntrzie transportul, se adaug 0,5 ml soluie salin steril i se refrigereaz.
Dac se cere cultivarea germenilor anaerobi, fragmentul se introduce n mediu de transport
pentru anaerobi.
40
n urma tratamentului diuretic se dilueaz urina, se obine numrul de germeni mai mic, care
ns vor fi considerat semnificativ i se va prelucra bacteriologic.
5. infecii cu microorganisme nedetectabile prin cultivare de rutin
ITU cauzate de virusuri, chlamydii, micoplasme, ureaplasme, M. tuberculosis necesit
investigaii suplimentare, acestea nefiind detectabili prin cultivare de rutin.
Procedura la brbai:
- pacientul se spal pe mini cu ap i spun, le usuc cu erveel
- cu o mn se retract prepuul pentru a decalota complet glandul
- se efectueaz toaleta riguroas a glandului cu ap i spun, cltire abundent cu ap
41
preferabil steril
- se usuc cu 2 tifoane sterile prin tergere dinspre meat spre fren
- meninnd prepuul retras se urineaz, primul jet se arunc (se numr pn la 3),
recoltndu-se din jetul mijlociu aprox. 10 ml n recipient steril
- se retrage recipientul nainte de ntreruperea miciunii
42
- trimiterea varfului de cateter pentru examen bacteriologic
- prelucrarea extensiv a acestor probe de urin recoltate incorect duce la consum de
materiale i timp nejustificat i implicit la tratamente antibiotice abuzive.
43
pacienii la care rezultatul ar putea modifica atitudinea terapeutic. La aduli, n majoritatea
cazurilor, pn la aflarea rezultatului coproculturii pacientul este vindecat (existnd i posibilitatea
de a deveni purttor sntos), ns n cazul n care se renun la aceast analiz, ar fi mpiedicat
urmrirea epidemiologiei gastroenteritelor.
Se recomand efectuarea coproculturii n urmtoarele situaii:
- gastroenterite de tip inflamator, n cazuri de gravitate medie (6-10 scaune/zi + alte
simptome) i crescut (peste 10 scaune/zi)
- gastroenterit prelungit peste 3 zile
- prezena unor factori ce favorizeaz agravarea:
o prematuri, nou-nscui, persoane n vrst
o imunodeficien, hypo- aclorhidrie (vagotomie, stomac operat, anemie pernicioas),
boli enterale cronice, anevrism de aort, boli valvulare, diabet, insuficien renal,
boli autoimune
o tratamente imunosupresive, steroizi administrai sistemic, diuretice, ACE ,
Examenul bacteriologic de rutin urmrete prezena patogenilor enterali comunitari: Salmonella
spp, Shigella spp. Escherichia coli enteroinvaziv, Campylobacter spp., E. coli O157/H7
(Escherichia coli enterohemoragic). La copii sub un an se caut de rutin prezena E. coli
enteropatogen. La copii sub 12 ani, in perioada iernii, se va cultiva Yersinia enterocolitica.
La cerere (manifestare clinic sugestiv) se investigheaz prezena Yersinia enterocolitica, Vibrio
cholerae, toxine de Clostridium difficile, antigene virale de rotavirus i adenovirus. Orice cerere n
afar de cele menionate mai sus, se noteaz n cerere!
Diareea aparuta dupa 48 de ore de la internare de regula nu se datoreaza patogenilor enterali
comunitari, cultivarea acestora nu este recomandata. Acestea fiind de obicei infecii post tratament
antibacterian, infecii nosocomiale sa va recomanda detectia toxinei A i B Clostridium difficile.
- Scaunul emis spontan se recolteaz ct mai precoce dup debutul bolii (n primele 3 zile de
boal germenii sunt prezeni n numr cel mai mare). Scaunul emis spontan se reine ntr-
un vas curat i uscat, avnd grij s nu se amestece cu urina. Se ridic cu ajutorul linguriei
coprorecoltorului cantiti mici de materii fecale, aproximativ egale cu cantitatea mediului
de transport, din mai multe locuri, mai ales din zonele ce prezint modificri (mucus,
snge, puroi), ce nu s-au atins de vasul colector i se introduc n coprorecoltoare cu mediu
de transport Cary-Blair. Materiile fecale trebuie s ajung n mediul de transport i s se
amestece cu acesta, materiile fecale s nu rmn pe suprafaa mediului de transport. Este
important, pentru c trecerea pe mediile de cultur trebuie fcut din mediul de transport i
nu din materiile fecale aflate deasupra (de multe ori este imposibil de scos din mediul de
transport produsul recoltat din cauza cantitii exagerate n aceste situaii produsul va fi
refuzat, practic mediul de transport nu i poate ndeplini rolul!).
- Pot fi cerute 2 examene bacteriologice n zile consecutive pentru a crete sensibilitatea
44
detectrii patogenilor (fiecare prob se trimite n ziua recoltrii, nu se adun!). Repetarea
coproculturii nu are sens naintea obinerii rezultatelor primelor dou analize.
- n cazul n care nu se poate obine scaun, se pot recolta materiile fecale cu ajutorul unui
tampon adecvat. Se introduce tamponul intrarectal la 10 cm de la orificiul anal, dup care
se introduce n mediu de transport Amies.
- Pentru cultivare de Neisseria gonorrhoeae se recolteaz produsul cu tampon inserat
intrarectal i se introduce n mediul de transport Amies cu crbune. Se noteaz pe cerere:
cultivare GC
- Pentru deetectare de toxine, antigene se recolteaza in coprorecoltor fara mediu de transport
(in jur de 1 ml)
45
puerperale, angio-colecistite, artrite septice, infecii ale arsurilor i plgilor)
- stri febrile dup intervenii chirurgicale pe intestin, focare infecioase cronice, cateterism
venos prelungit, dializ peritoneal.
Hemoculturile se efectueaz n sistem automat BactAlert. Recoltrile se efectueaz n flacoane
speciale:
1. Flacon BactAlert aerob pentru aduli, cod albastru
2. Flacon BactAlert anaerob pentru aduli, cod mov
3. Flacon BactAlert aerob pentru aduli cu inhibitor de antibiotic, cod verde
4. Flacon BactAlert anaerob pentru aduli cu inhibitor de antibiotic, cod portocaliu
5. Flacon Pedi-Bact pentru copii cu/fr tratament antibiotic, cod galben nu permite
detectarea germenilor strict anaerobi
Flacoanele se pstreaz la temperatura camerei, ferite de lumin. nainte de folosire se verific
data expirrii. Flacoanele cu inhibitor conine crbune, acestea se depun la fundul eprubetei,
lichidul de deasupra trebuie s fie limpede. La agitare crbunele tulbur mediul.
46
colonizat i se indic schimbarea acestuia. Pe flacon se noteaz, de unde s-a recoltat
sngele!
Metodologia recoltrii:
- Tegumentele se antiseptizeaz cu tinctur de iod, se ateapt s se usuce. Se terge
suprafaa iodat cu alcool 70%. Se las s se usuce.
- Se ndeprteaz protectorul de pe flacoane (BactAlert aerob i anaerob sau Pedi-Bact), se
dezinfecteaz cauciucul cu 70% alcool.
- Se recolteaz cu ac (19 sau 21G) i sering ntre 10-20 ml (ntre 5-10 ml pentru flaconul
aerob i tot att pentru cel anaerob) pentru aduli. Pentru copii se recolteaz 1-3 ml de
snge.
- Se evacueaz aerul din sering i se injecteaz aseptic coninutul n flacoanele de
hemocultur (la copii Pedi-Bact), avnd grij, s nu se introduc cantitate mai mare (exist
presiune negativ n flacon) dect cel recomandat. n cazul n care se recolteaz aerob i
anaerob, nti se introduce n flaconul anaerob i cu un ac schimbat n cel aerob (aerisire).
- Atenie! Nu se introduc cantiti mai mari de 10 ml n flacoanele pentru aduli i mai mult
de 3 ml n flacoanele pediatrice!
- Proba se transport imediat la laborator i se incubeaz nsoit de cererea de analiz
completat corespunztor, pe care se lipete codul de bare al flacoanelor.
- Menionai numr de telefon interior la care pot fi raportate rezultatele preliminare!
- n cazul n care transportul se prelungete, nu refrigerai flacoanele, acestea se pstreaz
la temperatura camerei (maximum 4 ore)! Hemoculturile recoltate n afara
programului de funcionare a laboratorului de microbiologie se trimit la laboratorul
de urgen.
Cereri speciale
- n cazuri speciale flacoanele PediBact pot fi folosite pentru cultivarea altor produse (lichid
cefalo-rahidian, lichid pleural, ascitic, secreii purulente) NOT: aceste medii de cultur
cresc sensibilitatea cultivrii ns nu ofer nici un avantaj privind identificarea germenilor,
nu reduce durata diagnosticului. Automatul doar semnaleaz creterea bacterian,
identificarea n continuare se face cu metode convenionale!
- n cazul n care se trimite alt produs dect snge, se noteaz pe bilet!
47
Vrfuri de catetere intravasculare
Catetere intravasculare: cateter venos central, CVP, Hickman, Broviac, arteriale, periferice,
ombilicale, de hemodializ, Swan-Ganz, port-a-cath.
Dup ndeprtarea cateterului cu o foarfec steril se secioneaz aprox. 4 cm din captul de
cateter i se las s cad ntr-un recipient steril (eprubet sau recipient de unic folosin cu capac
nurubabil), avnd grij s nu se ating de nimic.
Infeciile din jurul cateterelor inserate percutanat pot duce la bacteriemii, septicemii. n cazul unor
semne locale de inflamaie se terge marginea inflamat a orificiului cu un tampon steril, se
introduce n mediu de transport.
Secreia pleural
Lichidul pleural se recolteaz prin aspiraie percutanat. Lichidul pleural obinut prin drenaj se
prelucreaz diferit, de aceea trebuie menionat pe bilet, cum s-a efectuat recoltarea!
Se colecteaz n recipiente sterile, de preferin de unic folosin cu capac nurubabil.
48
Lichidul ascitic
Se recolteaz prin aspiraia percutanat n condiii aseptice sau n cursul laparatomiei n recipiente
sterile, de preferin de unic folosin cu capac nurubabil.
Recoltarea a peste 10 ml crete sensibilitatea detectrii bacteriilor.
49
5. Inflamaii pelviene
a. secreii obinute prin puncie (Douglas, anexe) sau intraoperator se introduc n
medii de transport pentru anaerobi i aerobi
b. pentru depistarea infeciei cu Actinomyces asociat cu sterilet se recolteaz aspirat
endometrial i se transport n mediu de transport pentru anaerobi; steriletul
eliminat se trimite de asemenea n mediu de transport pentru anaerobi.
6. Cereri speciale
a. Pentru evidenierea unei infecii cu Listeria se procedeaz n mod obinuit, probele
se pot pstra la frigider
b. Screening la gravide se noteaz pe bilet! Se urmrete colonizarea cu
Streptococcus agalactiae. Se recolteaz secreie anal i secreie vaginal din
treimea inferioar a vaginului.
Produse patologice recoltate n infeciile genitale la brbai
1. Uretrite
a. se recolteaz secreie uretral dimineaa, nainte de miciune cu tampon steril, se
introduce n mediu de transport
b. se efectueaz dou frotiuri, dup uscare se mpacheteaz
2. Prostatite
a. se antiseptizeaz glandul
b. se recolteaz secreie uretral dup masaj prostatic
c. sperm colectat n recipient steril
3. Orhite, epididimite
a. punctate
b. produse obinute intraoperator (recipient steril, mediu de transport)
Detectarea unor bacterii greu cultivabile sau necultivabile
1. Detectare de antigene Chlamydia (n perspectiv)
- se recolteaz din canalul cervical sau uretr
- pacientul i ine urina 1-2 ore
- cu un tampon steril se terge mucusul de la orificul cervical/uretral
- tamponul special de recoltare se introduce la 1-1,5 cm intracervical / la 2-4 cm intrauretral
i se rotete 5-10 secunde (este esenial s se obin celule epiteliale, Chlamydia fiind un
germen intracelular!)
- se extrage uor tamponul, evitnd contactul cu regiunile adiacente
- tamponul se introduce n mediul de transport special
2. Mycoplasma, Ureaplasma (n perspectiv) pot fi detectate din secreie cervical, secreie
prostatic, urin. Recoltarea se face n mediu de transport adecvat.
50
3. Neisseria gonorrhoeae s ecolecteaz secreie cervical, produsul se trimite n mediu de
transport la laborator. n lipsa mediilor de transport produsul se nsmneaz la locul
recoltrii pe medii speciale prenclzite la 37C i trimise la laborator.
4. Mycobacterium tuberculosis se colecteaz snge menstrual sau secreii de 24 de ore,
raclaj uterin produsele se trimit la laboratorul BK de la Clinica de Pneumoftiziologie.
6.Secreii oculare
6.12.1.1.1 Conjunctivit
1. Se terge cu un tampon mucoasa conjunctival, innd pleoapele deschise i evitnd
atingerea genelor. Se recomand recoltarea a dou probe.
2. Raclaj conjunctival
6.12.1.2 Dacrocistita acut
1. Cu un tampon umed se terge conjunctiva.
2. n caz de aspiraie percutanat, sau se efectueaz incizie se recolteaz secreie cu ac i
sering.
7 Referine bibliografice
Frances Fischbach A Manual of Laboratory Diagnostic Tests, Ed. II-A, Lipincott, 1984, p.4-
6, 110-113, 207-209.
RoEQALM Al 2-lea seminar privind Asigurarea i Controlul Calitii n Medicina de
Laborator, Bucureti, Nov 2003.
W.G. Guder Samples: from the Patient to the Laboratory - The impact of preanalytical
variables on the quality of laboratory results, GIT VERLAG, 1996.
L.A. Kaplan, A.J.Pesce Clinical Chemistry: Theory, analysis and correlation, Mosby
Company, 2012.
51
Cuprins
1. Recoltarea probelor biologice pentru investigatii biochimice, hematologice, imunologice si
de biologie moleculara ......................................................................................... 2
1.1 Solicitarea analizelor ................................................................................ 2
1.1.1 Cine solicit analizele de laborator ? ........................................................ 2
1.1.2 Unde se solicit analizele de laborator ? .................................................... 2
1.1.3 Cnd se solicit analizele de laborator ? .................................................... 3
1.1.4 Cum se solicit analizele de laborator ? .................................................... 3
1.1.5 Cine anun/pregtete pacientul pentru recoltarea probei biologice? ................. 3
1.1.6 Cine face recoltarea probei biologice ? ..................................................... 4
1.2 Colectare - tehnic ................................................................................... 4
1.2.1 Colectoare ....................................................................................... 4
1.2.2 Tehnica recoltrii cu sistemul vacutainer (Fig.2) .......................................... 5
1.3 Proba Biologic ...................................................................................... 5
1.3.1 Sngele Explorarea matricei proteo-saline ............................................... 5
1.3.2 Sngele - Explorarea elementelor celulare ale sngelui .................................. 7
1.3.3 Recoltarea urinei ............................................................................... 8
1.3.4 LCR .............................................................................................. 9
1.4 Transportul probelor biologice .................................................................... 9
1.4.1 Transportul probelor de snge................................................................ 9
1.5 Triere primar i distribuie pe departamente/compartimente; criterii de respingere .....10
1.5.1 Criterii de respingere a produselor patologice ............................................11
1.6 Prelucrarea primar.................................................................................11
1.6.1 Criterii de respingere a produselor patologice la prelucrarea primara.................13
1.7 Stocarea probelor ...................................................................................14
2 Factori care afecteaz rezultatul n faza de recoltare a lichidelor biologice.....................15
2.1 Ingerarea de alimente nainte de recoltare duce la valori crescute:..........................15
2.2 nfometarea ..........................................................................................15
2.3 Ingestia de alcool ...................................................................................15
2.3.1 Ingestia acut de alcool (2-12 ore nainte de recoltare)..................................15
2.3.2 Ingestia cronic de alcool ....................................................................15
2.4 Trecerea din clino- n ortostatism duce la creteri: ............................................15
2.5 Aplicarea prelungit a garoului nainte de recoltarea sngelui ...............................16
2.6 Activitatea fizic ....................................................................................16
2.7 Variaii diurne semnificative se pot observa la determinrile: ...............................16
2.8 Recoltri de pe catetere ............................................................................16
2.9 Fumatul ..............................................................................................16
2.9.1 n dimineaa recoltrii ........................................................................16
2.9.2 Cronic ...........................................................................................17
2.10 Interferene medicamentoase ...................................................................17
2.11 Aspecte particulare legate de tehnica de recoltare ..........................................17
2.11.1 Parametrii biochimici pot fi influenai de: ................................................17
2.11.2 Parametrii hematologici pot fi influenai de: .............................................18
2.11.3 Testele de coagulare pot fi influenate de: .................................................18
3 Factori care afecteaz rezultatul n faza de transport i stocare a materialelor biologice .....18
3.1 Factori care influeneaz parametrii biochimici-imunologici ................................18
3.2 Factori care influeneaz parametrii hematologici .............................................19
3.3 Factori care influeneaz parametrii hemostazei ...............................................19
52
3.4 Stocarea (vezi tabelul 5) ...........................................................................19
4 Factori care afecteaz rezultatul n faza de analiz propriu-zis ..................................20
4.1 Hemoliza .............................................................................................20
4.2 Hiperbilirubinemia .................................................................................20
4.3 Lipemia ..............................................................................................20
5 Influena unor factori biologici asupra rezultatelor .................................................20
5.1 Vrsta .................................................................................................20
5.1.1 La nou-nscut ..................................................................................20
5.1.2 n copilrie / adolescen .....................................................................21
5.1.3 La adult .........................................................................................21
5.2 Sexul ..................................................................................................22
5.3 Sarcina ...............................................................................................23
5.4 Ciclul menstrual ....................................................................................24
5.5 Intervenii chirurgicale .............................................................................24
6 Recoltarea produselor biologice n vederea examenului bacteriologic ..........................24
6.1 Solicitarea analizelor ...............................................................................24
6.1.1 Programul de funcionare a compartimentului de microbiologie din cadrul
Laboratorului de Analize Medicale ...................................................................24
6.2 Lista examinarilor efectuate n Laboratorul de Microbiologie ...............................27
6.2.1 Examen microscopic: .........................................................................27
6.2.2 Cultivare: .......................................................................................27
6.2.3 Testarea sensibilitii la antibiotice .........................................................28
6.3 Reguli generale de recoltare a produselor patologice i biologice n vederea examenului
bacteriologic .................................................................................................29
6.3.1 Alegerea produsului corespunztor .........................................................29
6.3.2 Momentul prelevrii ..........................................................................29
6.3.3 Ritmul prelevrii ..............................................................................29
6.3.4 Recoltarea se face aseptic ....................................................................30
6.3.5 Cantitate ........................................................................................30
6.3.6 Instrumente de prelevare, recipiente pentru recoltare i transport .....................30
6.3.7 Control dup instituirea tratamentului antibacterian .....................................30
6.4 Msuri de protecie n cursul recoltrii produselor biologice n vederea examenului
bacteriologic .................................................................................................31
6.5 Transportul i conservarea probelor .............................................................31
6.6 Criterii i procedura de respingere a probelor ..................................................32
Tabel 2. Criteriile refuzrii produselor biologice i procedura aplicat ............................33
6.7 Prelevarea diferitelor produse biologice n vederea examenului bacteriologic ............35
6.7.1 Prelevarea puroiului ..........................................................................35
6.7.2 Abcese ..........................................................................................35
6.7.3 Fistule ...........................................................................................35
6.7.4 Puroi prelevat din arsuri, plgi, leziuni superficiale (escare, ulceraii, episiotomie) 36
6.7.5 Biopsii de tegument ...........................................................................36
6.7.6 Recoltarea puroiului prin tub de dren ......................................................36
n afara programului de funcionare puroaiele aspirate, cele recoltate pe tampon fr mediu de
cultur se trimit imediat la laboratorul de urgen. ....................................................36
6.8 Prelevarea i transportul exsudatelor cilor respiratorii superioare .........................36
6.8.1 Exudat faringian ...............................................................................36
6.8.2 Secreie nazal .................................................................................37
6.8.3 Secreia nazo-faringian .....................................................................37
6.8.4 Puroiul sinuzal .................................................................................38
6.8.5 Exudate otice ..................................................................................38
53
6.8.6 Secreie epiglotic.............................................................................38
6.8.7 Abcese ale cavitii bucale ...................................................................38
6.8.8 Tampoane orale ...............................................................................38
6.9 Recoltarea i transportul secreiilor cilor respiratorii inferioare ............................39
6.9.1 Sputa (inclusiv probele obinute prin tub endotraheal, traheostomie) .................39
2. Prelevarea i transportul urinii .........................................................................40
6.10 Dac se anticipeaz ntrzierea transportului/prelucrrii probelor de urin, se
refrigereaz la 4-8C! ......................................................................................43
Prelevarea i transportul materiilor fecale n vederea coproculturii ....................................43
6.11 Momentul, ritmul i tehnica prelevrilor .....................................................44
6.12 Determinarea portajului enteral al diferiilor germeni ......................................45
Prelevarea i transportul sngelui n vederea hemoculturii ..............................................45
Vrfuri de catetere intravasculare ...........................................................................48
Examinarea bacteriologic n infeciile orificiului percutanat al cateterelor intravenoase, venoase
centrale (probe exit site cateter) .............................................................................48
3. Prelevarea i transportul lichidului cefalorahidian ..................................................48
4. Prelevarea i transportul diferitelor exudate ale seroaselor n vederea examenului
bacteriologic ....................................................................................................48
Secreia pleural ............................................................................................48
Lichidul ascitic ..............................................................................................49
5. Prelevarea i transportul secreiilor genitale .........................................................49
6.Secreii oculare ..............................................................................................51
7 Referine bibliografice ..................................................................................51
54