Sunteți pe pagina 1din 54

Spitalul Clinic de Urgen Tg.

Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

MANUALUL RECOLTRII

Impactul variabilelor preanalitice asupra calitii rezultatelor de laborator

Calitatea unei analize de laborator ncepe de la corectitudinea recoltrii

pag. 1/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

1. Recoltarea probelor biologice pentru investigatii biochimice, hematologice,


imunologice si de biologie moleculara

1.1 Solicitarea analizelor

Se face conform unor protocoale graduale de evaluare ale diverselor grupe de patologie, emis de
conducerea fiecrei clinici/secii (fig.1).

1.1.1 Cine solicit analizele de laborator ?


Solicitarea examinrilor paraclinice se face de ctre medic:
medicul rezident poate solicita testele de rutin
medicul specialist i primar poate solicita teste complexe (imunologie, serologie, citologie) sau
poate delega medicul rezident cu care lucreaz, s fac aceast solicitare, superviznd
buletinul de analize

1.1.2 Unde se solicit analizele de laborator ?


1.1.2.1 n Laboratorul de urgen
pentru SMURD i toate Ambulanele de specialitate, indiferent de momentul solicitrii
pentru Cabinetele din Policlinic cu program dup masa
pentru bolnavii internai analizele urgente dup ora 11,00

1.1.2.2 n Laboratorul Amb de Specialitate I


pentru Cabinetele din policlinic cu program dimineaa
pentru Cabinetele medicilor de familie

pag. 2/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

1.1.2.3 n Laboratorul central


testele recoltate dimineaa pentru bolnavii internai
testele recoltate de urgen pentru bolnavii internai pn la ora 11,00
testele biochimice, imunologice, serologice, bacteriologice, recoltate n laboratoare policlinic

1.1.3 Cnd se solicit analizele de laborator ?

1.1.3.1 Testele solicitate n serviciul de urgen


n serviciul de urgen testele se pot solicita 24 de ore din 24, respectnd aceleai reguli de
solicitare ca i pentru bolnavii spitalizai (1.1.4)

1.1.3.2 Testele solicitate n serviciul de ambulator


n punctul de recoltare din ambulator analizele se recolteaz dimineaa (recoltri ntre orele 7,30
13,00)

1.1.3.3 Testele solicitate pentru bolnavii internai


Pentru bolnavii internai recoltarea se face:
a jeun (recoltri ntre orele 7,00 9,00 a.m.) pentru testele curente
24 de ore din 24, pentru bolnavii critici

1.1.4 Cum se solicit analizele de laborator ?


Solicitarea examinrilor paraclinice se face electronic, prin emiterea setului de analize in Sistemul
Informatic al Laboratorului (Progamul Hospital Manager) sau n scris, buletinul de solicitare
coninnd n mod obligatoriu urmtoarele date:
Clinica/salonul emitent
Laborator solicitat
Nume / Prenume / vrsta bolnavului
C.N.P.
Nr. FO. (numr contrat cu CJAS pentru Lab. Policlinica)
Diagnostic la internare
Tipul lichidului / probei biologice (snge, urin, lcr, lichid de puncie, sput)
Analize solicitate
Data recoltrii (i ora n cazul testelor solicitate de urgen i a celor bacteriologice)
Semntura i parafa medicului solicitant (tampila rotund a cabinetului, pentru Lab. Policlin.)
Numele persoanei care a recoltat proba biologic
Ora/minutul sosirii n laborator se noteaz pentru probele cu caracter de urgen, de ctre
persoana de serviciu n laborator la departamentul Primire probe biologice, proba fiind
preluat de la curier

1.1.5 Cine anun/pregtete pacientul pentru recoltarea probei biologice?


Asistenta de salon/ambulator anun bolnavul asupra:
momentului/locului recoltrii
dietei precedente
tratamentului medicamentos care influenteaza determinarea
toaletei premergtoare anumitor recoltri (de ex. pentru exudat faringian, urocultur)

pag. 3/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

1.1.6 Cine face recoltarea probei biologice ?


asistenta medical de salon / ambulan / laborator policlinic: snge venos sau capilar pentru
determinri serologice, hematologice, de hemostaz, frotiu periferic, determinri din urin,
sput, scaun
medicul: snge arterial, mduv osoas, lichid cefalorahidian, lichide de puncie

NU SE EFECTUEAZ RECOLTRI N LABORATOR (recoltarea se face pe sectii pentru


bolnavii internati si in punctele de recoltare din Ambulator I adulti si Copii pentru pacientii din
ambulator), exceptie testele de hemostaz sau efectuate in urgenta, din snge capilar pentru copii
(se recolteaza in Lab de urgenta pentru externi si la punctele de recoltare sau in salon la Ped 1,
Neonatologie).

1.2 Colectare - tehnic

1.2.1 Colectoare
Tabel 1. Tipuri de colectoare i aditivi

Proba Anticoagulant/ Vacutainer/container Mecanism Aplicaii


biologic aditivi volum snge/urin
Plasm Citrat Na3 3,2% 4,5 ml dop albastru Complex cu Coagulare
- 0,5 ml Ca2+
Snge Citrat Na3 3,2% 4 ml dop negru Complex cu VSH
- 1 ml Ca2+
Snge EDTA K3 2 ml dop roz-violet Complex cu Hemograma, citometrie n
Ca2+ flux, ncrcturi virale,
HbA1c
Ser - 7 ml dop rou - Biochimie, Hormoni,
Markeri tumorali, virali,
Imunologie
Urin - Recoltor urin ~ 15 ml - Sumar + sediment urinar
Urin 5 ml sol. Recoltor urin / Conservare Determinri biochimice din
Thymol 10% eantion de 10 15 ml urina de 24 ore
Urin Carbonat de Recoltor urin / Conservare Porfirine, UBG
sodiu 2g/l urin eantion de 10 15 ml
Urin HCl 6M/l, Recoltor urin / Conservare Catecolamine i metabolii
25 ml n recoltor eantion de 10 15 ml AVM, 5-HIAA, Ca, Mg,
mare fosfai
Urin NaOH 6M/l, Recoltor urin / Conservare
25 ml n recoltor eantion de 10 15 ml
mare

Recoltarea se face cu sistemul de vacuum, direct n vacutainer !


Nu se recolteaz n sering, pentru a transfera apoi n vacutainer ! Coagularea ncepe imediat
dup scoaterea sngelui din vase !
Atenie la proporia snge : anticoagulant ! Proportie incorecta modific rezultatele testelor
de coagulare i a testelor hematologice.

pag. 4/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

1.2.2 Tehnica recoltrii cu sistemul vacutainer (Fig.2)


Se noteaz pe eticheta recoltorului numele pacientului si numarul setului de analize !!!

1.3 Proba Biologic

= fluide biologice (snge, urin, LCR, lichid amniotic, aspirate), colectate evitnd riscul
contaminrii (vezi 1.2.2)

1.3.1 Sngele Explorarea matricei proteo-saline


Pregtirea pacientului

Pacientului i se explic procedura la care va fi supus i se obine ntreaga lui complian.


Recoltarea probelor se face cu pacientul n condiii bazale, naintea oricrei proceduri
diagnostice sau terapeutice (ideal ntre orele 7 i 9 dimineaa, n condiii a jeun pe
nemncate); pentru evaluarea metabolismului lipidic se recomand ca recoltarea s se
efectueze dup 12 ore de la ultima mas.
Cnd probele de snge nu sunt recoltate n condiii bazale, trebuie inut seama de efectele
adiionale pe care le pot produce efortul fizic (chiar i efortul fizic moderat poate determina o
cretere a glucozei, acidului lactic, proteinelor serice, CK), precum i a strii emoionale sau
ritmului circadian care poate afecta anumii parametri.
Recoltarea probelor biologice se poate face sub forma unei probe unice (de exemplu, pentru
determinarea glicemiei bazale) sau sub forma probelor multiple (de exemplu, testul de
toleran la glucoz).
Asigurai-v c pacientul st ntr-o poziie comod (n poziie eznd sau n decubit dorsal).
Verificai cu mare atenie ca toate datele demografice ale pacientului s fie corect scrise pe
formularul cu care este nsoit acesta la punctul de recoltare a sngelui i etichetai corect
recipientul de recoltare.

1.3.1.1 Tehnica recoltrii sngelui venos pentru determinri serologice /plasmatice


Recoltarea se face de regul dimineaa (intre orele 7,00-9,00), pe nemncate (a jeun) cu
excepia urgenelor medicale.
Se noteaz nr setului si numele bolnavului pe eticheta recoltorului
pag. 5/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

Se recolteaz din venele antecubitale (sau din v. jugular sau venele epicraniene la copiii mici
sau din alte vene superficiale de la bolnavi, la care este imposibil de gsit o ven accesibil la
plica cotului).
Se aplic garoul la cel puin 2-3 laturi de deget (3-5 cm) deasupra locului de nepare
(Maximum 1 MINUT nainte de recoltare). Bolnavul va strnge pumnul pentru a creea o
presiune venoas crescut i o distensie maxim a venelor acelui segment de membru.
Se dezinfecteaz cu un tampon cu alcool 70% sau cu tinctur de iod.
Se ptrunde cu un ac steril cu calibru adecvat cantitii de snge necesar s fie recoltat, cuplat
apoi la un container vidat, etan, cu marcher de nivel indicat (Fig. 2).
Sngele se recolteaz ca atare (fr aditivi) pentru testele de biochimie, imunologie, serologie,
hormoni, toxicologie i pe anticoagulani pentru testele de coagulare i VSH.
Pentru testele de coagulare, este preferabil s se ndeprteze garoul dup puncionarea venei
(nainte de recoltarea n vacutainer), iar dac se recolteaz mai multe tuburi, cel pentru
hemostaz va fi al doilea n care se recolteaz.

Evitarea hemolizei
Majoritatea cazurilor de hemoliz pot fi evitate dac se respect urmtoarele:
1. Folosii un ac standard nu mai mic de 21-22 G (uneori poate fi necesar s se foloseasc ace
de mrimea 22-23 G pentru pacieni vrstnici sau copii, cu vene dificil de puncionat).
2. Dac aerul poate intra pe lng ac sau n tubul de recoltat, nlocuii vacutainerul.
3. Dac folosii propriul echipament de recoltare i nu cel furnizat de laborator, asigurai-v
c folosii materiale curate, uscate, sterile (tuburi, seringi, ace).
4. Recoltai sngele n vacutainere inute la temperatura camerei.
5. Cnd vacutainerul se umple prea greu cu snge datorit unei venopuncii dificile, acest fapt
poate determina spargerea hematiilor. Alegei un alt loc de recoltare i un alt vacutainer i
recoltai al doilea specimen.
6. Nu retragei acul din ven pn n momentul n care vacutainerul nu este complet umplut.
Retragerea prematur a acului poate determina intrarea aerului n tub cu distrugerea
hematiilor.
7. Executai manevre ct mai blnde cu putin n timpul recoltrii sngelui.
8. Permitei uscarea dup dezinfectarea locului de recoltare.
9. Nu recoltai snge dintr-o zon cu hematom.
10. Cnd folosii vacutainere cu substane anticoagulante sau diferii aditivi, percutai uor
tubul imediat sub capac pentru a nu lsa aditivul s adere de pereii vautainerului sau de
capac.
11. Permitei tubului s se umple complet pentru a fi asigurat proporia corect ntre sngele
recoltat i aditivul din vacutainer.
12. Asigurai-v c s-a produs amestecul sngelui cu anticoagulantul / conservantul / aditivul,
rotind uor vacutainerul cu o micare de rotaie din ncheietura minii sau agitai uor pe
vertical tubul de 5-6 ori. Agitarea energic poate determina hemoliza sau formarea de
cheaguri.
13. Verificai dac aditivul / anticoagulantul s-a dizolvat. Dac mai este vizibil, continuai
agitarea blnd pn este complet dizolvat.
14. Pentru vacutainerele fr anticoagulant, lsai proba s sedimenteze cca. 30-45 minute
inainte de centrifugare. Aceasta permite coagulului s se formeze.
15. Centrifugai proba folosind centrifugi calibrate, n conformitate cu instruciunile de durat
i vitez cerute de centrifugare (de obicei 10-15 minute).
(Punctele 14 si 15, vor fi respectate de laborator)

pag. 6/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

1.3.2 Sngele - Explorarea elementelor celulare ale sngelui


1.3.2.1 Tehnica recoltrii sngelui venos
Sngele se recolteaz pe cantiti bine definite de substane sau soluii anticoagulante sau
inhibitoare (vezi 1.2.1), omogeniznd amestecul uor (agitarea energic produce hemoliz !).
Se recolteaz dup descrierea de la 1.3.1.1

1.3.2.2 Tehnica recoltrii sngelui capilar


Se recolteaz cu pipete sau recoltoare adecvate, din pulpa degetului sau lobului urechii (haluce
sau clci la sugari).
Pipetele i soluiile trebuie pregtite nainte de nepare.
Se noteaz numele bolnavului pe eticheta recoltorului
Recoltarea se face de regul dimineaa, pe nemncate a jeun - (n cazuri de urgen recoltrile
pentru leucocite sau pentru hemoglobin, hematocrit se fac la orice or);
Se dezinfecteaz pulpa degetului (de preferat degetul IV) sau lobulul urechii, prin badijonare
cu un tampon cu alcool 70% sau alt dezinfectant uzual (alcool iodat);
Se terge cu un tampon uscat (locul de nepat s fie uscat)
Se neap cu un ac steril n unghi de 45 o fa de linia median a pulpei degetului sau cu o
lanet special de singur folosin la lobulul urechii;
Prima pictur de snge se terge cu un tampon uscat;
Se recolteaz picturile urmtoare, care apar spontan sau prin uoar apsare (strngere) a
degetului pn la o distan de cel mult 2 cm de locul inepturii (pn la falanga a 2-a);
Este interzis strngerea energic i/sau pn la locul nepturii, pentru a nu dilua sngele cu
lichid interstiial (dac obinerea sngelui capilar este dificil se nclzete zona sau se las s
atrne extremitatea cteva minute).

1.3.2.3 Tehnica executrii frotiurilor de snge


Se pregtete ntocmai ca i pentru tehnica recoltrii sngelui capilar.
Se noteaz cu un creion grafit, numele pacientului i data recoltrii, pe marginea lefuit a
lamei
Se recolteaz din pictura de snge bine exprimat, cu marginea unei lame de sticl, de
preferat lefuit (lam de recoltare). Lama cu pictura de snge se aeaz oblic (in unghi de
45O) pe lama de frotiu, degresat n prealabil cu alcool-eter i uscat bine prin tergere cu un
tampon uscat i fluturare n aer. Se ine lama de recoltare cteva secunde pn pictura de
snge se etaleaz complet spre cele dou margini ale lamei de baz.
Se deplaseaz apoi lama de recoltare prin ntindere spre captul opus al lamei de frotiu, pn
pictura de snge se epuizeaz. Un frotiu corect trebuie s se termine nainte de captul opus al
lamei, s fie uniform i ct mai subire.
Frotiurile se usuc la temperatura camerei pe un rastel de lame. Se fixeaz i se coloreaz
ulterior dup diferite tehnici. Lamele de frotiu se pstreaz ferite de cldur, umezeal,
chimicale i insecte.

1.3.2.4 Tehnica recoltrii mduvei osoase


Recoltarea mduvei osoase se realizeaz de ctre medic, prin puncie sternal sau din creasta
iliac, utiliznd anticoagulani (heparin) n recoltoare sterile (cutii Petri sau tuburi nchise).

pag. 7/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

1.3.3 Recoltarea urinei


Pregtirea pacientului

Aportul de lichide n timpul recoltrii trebuie s fie normal (cu excepia cazurilor cnd
medicul curant face recomandri specifice n acest sens).
n unele cazuri se recomand ntreruperea medicaiei care poate induce interferene, cu cel
puin 12 ore (de preferat 48-72 ore) naintea nceperii recoltrii.
Unele alimente pot influena anumii compusi chimici, astfel c uneori, la sfatul medicului,
pacientul trebuie s in o anumit diet naintea acestei analize.

Tipuri de probe de urin

Se pot recolta mai multe tipuri de probe de urin (tabel 2), n funcie de examinrile ce trebuie
efectuate:

Tabel 2. Diferite specimene de urin i utilizarea lor n laborator


Nr Specimen Utilizare
1. Urin spontan Determinri chimice calitative sau cantitative i/sau
2. Urin de diminea constitueni celulari / cilindri
3. a 2-a urin (7-10 a.m.) Clearance de creatinin
4. Urin de 24 ore Determinri cantitative

1.3.3.1 Pentru examinri calitative


Dup toaleta minilor i a regiunii genito-urinare (splare cu ap i spun, tergere cu prosop curat
i clcat), se recolteaz ntr-un vas curat (steril pentru urocultur) prima urin de diminea (10-15
ml din jetul mediu). Se noteaz pe recoltor numele pacientului i data/ora recoltrii.
Este foarte important ca pacienii s cunoasc modul corect de recoltare al probelor de urin. Mai
jos sunt prezentate instruciuni pentru aduli/copii mari i sugari:
Instruciuni de recoltare la adult:
1. Curai zona genito-urinar cu ap i spun: la brbat se va asigura curarea meatului i
glandului; la femeie, n cazul n care este prezent o secreie abundent, alturi de toaleta
obinuit a vulvei, se va introduce n vagin un tampon steril.
2. Asigurai uscarea zonei anterior decontaminate cu ajutorul unor comprese sterile.
3. Urinai o cantitate mic n toalet i fr s v oprii, colectai n recipientul primit de la
laborator restul de urin (recoltare din jetul urinar mijlociu, ntr-un mod similar cu proba
pentru urocultur).
4. Pentru a preveni contaminarea probei, evitai s atingei recipientul de zona genital.
5. Etichetai recipientul de urin, preciznd data i ora recoltrii.
6. Refrigerai proba imediat dup recoltare: trimitei recipientul la laborator, respectnd
intervalul de timp menionat la fiecare tip de test.

Instruciuni de recoltare la sugar:


1. Curai aria genito-urinar a copilului cu ap i spun.
2. Nu tamponai zona curat pentru a accelera uscarea; nu aplicai creme, uleiuri sau pudre
pediatrice.

pag. 8/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

3. Ataai ferm de zona genito-urinar punga pediatric de recoltare a urinei, astfel: dezlipii
banda protectoare din jumtatea inferioar a pungii i fixai poriunea adeziv la nivelul
perineului; cnd jumtatea de jos a pungii este fixat, dezlipii partea superioar a benzii i
continuai aplicarea poriunii adezive, asigurndu-v c orificiul urinar a fost inclus n
pung.
4. Imediat dup ce copilul urineaz n punga de recoltare, aceasta se dezlipete i se
transport la laborator n condiii corespunztoare.
Foarte important!
Evitai contaminarea probei de urin la transferul ei n recipientul de plastic; avei
grij s nu atingei containerul.
Refrigerai proba imediat dup recoltare i trimitei-o la laborator n aceeai zi.

1.3.3.2 Pentru examinri cantitative


1.3.3.2.1 Urin de 24 ore
Dup toaleta matinal a regiunii genito-urinare, se arunc prima urin de diminea, se noteaz
ora, apoi se recolteaz ntr-un vas mai mare (2-3 litri), curat, volumele de urin rezultate pe
parcursul zile i nopii care urmeaz i prima urin din dimineaa urmtoare.
Pe parcursul recoltrii, vasul se ine la rece (uneori este nevoie s se adauge conservani, pentru
prevenirea descompunerii unor substane: 5-HIAA - se recomand ca bolnavul s nu foloseasc
nici un fel de medicaie dac este posibil in cele 3 zile premergtoare recoltrii; AVM:
acidifiere-25 ml HCl ~ -mg: alcalinizare - 25 ml NaOH ~6N; etc). Se msoar volumul
recoltat n cele 24 de ore (cu cilindru gradat), se noteaz numele pacientului i data recoltrii pe
recoltor, se omogenizeaz i se trimite n laborator un eantion de 10-15 ml.

1.3.3.2.2 Pentru determinarea Clearance-ului de creatinin


Se aplic frecvent metoda prescurtat de recoltare: se arunc prima urin de diminea, apoi se
recolteaz ntr-un vas volumele de urin rezultate pe parcursul a 3 ore (intre orele 7-10 a.m.). La
mijlocul intervalului de timp se recolteaz o prob de snge pentru determinarea creatininei serice.
Se msoar volumul recoltat n cele 3 ore, se noteaz, se omogenizeaz i se trimite n laborator un
eantion de 10-15 ml.

1.3.4 LCR
Recoltarea lichidului cefalorahidian se realizeaz de ctre medic, prin puncie lombar (sau din
alte regiuni ale coloanei vertebrale este important s se specifice pe biletul de trimitere regiunea
din care s-a recoltat), utiliznd preferabil recipiente sterile (obligatoriu sterile, dac se solicit i
determinri bacteriologice) i anunnd telefonic laboratorul cu 30 minute n prealabil (int. 148
pentru teste bacteriologice, 149 pentru biochimie sau 131 pentru determinri ntre orele 13,00-
08,00).

1.4 Transportul probelor biologice

1.4.1 Transportul probelor de snge


Timpul de transfer al probelor ctre laborator poate fi:
scurt, cnd locul de recoltare/clinica este n acelai loc cu laboratorul;
mediu, cnd locul de recoltare/clinica este n aceeai localitate cu laboratorul, dar nu n
acelai loc.
pag. 9/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

Exist mai multe tipuri de transport al probelor, n funcie de natura produsului i de stabilitatea
analiilor care trebuie testai:
- transport n condiii ambientale;
- transport la rece (probe refrigerate la 4-12 oC, prin poziionarea in cutiile de transport
termoizolatoare a unor baterii refrigerabile care vor fi reincarcate zilnic);
Reguli generale:
- n cazul unui timp de transfer scurt sau mediu, toate probele de snge vor fi transportate
ambiental n containere/genti speciale (dac nu exist recomandri specifice de refrigerare
a probelor);
- probele transportate ambiental trebuie protejate de temperaturi extreme, prin ambalarea n
materiale termoizolante (containere de polistiren);
- probele refrigerate trebuie plasate n apropierea bateriei refrigerabile i nu direct pe
acestea;
- vor fi folosite dispozitive de monitorizare a temperaturii pe durata transportului.
Este foarte important ca separarea serului de pe cheag s se fac rapid (n 10 -15 minute dup
-laps,Calcitoninei, hormonului de cretere (GH) i
factorului de cretere Insulin-like (IGF).
Foarte important este ca prepararea frotiului de snge venos s fie fcut n maximum 3 ore de la
recoltarea sngelui.
De asemenea sngele recoltat pe citrat (pentru testele de coagulare) la pacienii care nu sunt
heparinizai este stabil timp de 8 ore la temperatura camerei pentru determinarea timpului de
protrombin, timpului de trombin, APTT, proteinei C i factorului V al coagulrii. Nu este
valabil ns pentru determinarea factorului VII i proteinei S care au o stabilitate mult mai redus.
n cazul pacienilor heparinizai sngele poate fi pstrat la temperatura camerei sau la frigider timp
de 4 ore din momentul recoltrii probelor. Dac acest lucru nu este posibil, plasmele se separ i
se stocheaz la -20C.

1.4.2 Transportul probelor de urina

Pentru biochimia urinei i examenul microscopic al sedimentului urinar se recomand ca urina s


fie examinat n maximum 2 ore de la recoltare.
Cu ct urina este lsat mai mult timp la temperatura camerei, cu att devine mai puin valoroas
pentru aceast analiz.

Dac nu se poate asigura transportul la laborator n acest interval, urina trebuie s fie pstrat la
frigider (4-8oC) sau tratat cu anumii conservani sau fixatori (vezi tabel 1). Aceste msuri
mpiedic sau ncetinesc multiplicarea bacterian pn n momentul efecturii testelor.
Pentru determinrile urinare cantitative ale diverilor analii urinari se recomand ca probele s fie
procesate imediat dup ce au ajuns la laborator. Dac acest lucru nu este posibil, probele vor fi
pstrate la frigider (4-8oC), dup ce n prealabil au fost adugai urmtorii stabilizatori: acid
clorhidric, pentru determinrile de calciu, magneziu, fosfor, acid vanilmandelic, metanefrine, i
hidroxid de sodiu, pentru determinrile de acid uric.

1.5 Triere prim ar i distribuie pe departam ente/com partim ente; criterii de respingere

Trierea primar se produce in cadrul dispeceratului, de catre dispeceri care verifica corespondenta
dintre Formularul de monitorizare a transportului probelor primare si probele aduse, precum i
integritatea recipientului, dac s-a recoltat n recipientul corespunztor i n cantitate suficient.

pag. 10/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

1.5.1 Criterii de respingere a produselor patologice

Laboratorul i rezerv dreptul de a refuza specimenele recoltate i etichetate impropriu.


Laboratorul admite c exist situaii cnd unele specimene sunt mai puin obinuite, provin din
proceduri invazive sau nu au putut fi uor recoltate i n aceste cazuri se pot aplica excepii de la
regulile stricte ale respingerii probelor. Excepiile sunt aplicate n concordan cu procedurile de
lucru n uz. n general, probele biologice impropriu recoltate nu sunt aruncate pn n momentul n
care unitatea sau persoana care a recoltat proba nu sunt anunate.

1.5.1.1 Probe biologice neetichetate/fr set,-nume:


n cazul probelor biologice obinuite (snge, urin, materii fecale, sput etc.) care nu pot fi
identificate se recomand repetarea recoltrii;
n cazul unor probe biologice mai puin obinuite (lichide biologice, LCR, fragmente de
esut etc.) se solicit persoanei care le-a recoltat s se deplaseze la laborator, s identifice
specimenul i s semneze o not prin care i asum responsabilitatea identificrii
specimenului;
dac persoana responsabil de recoltarea specimenului nu este disponibil s identifice
proba, o persoan desemnat de medicul specialist o va nlocui n aceast procedur.

1.5.1.2 Probe biologice incorect etichetate:


pentru probele care sunt etichetate cu numele/iniialele greite ale pacientului, comparativ
cu ceea ce este scris pe formularul care nsoete proba se aplic aceeai regul ca mai sus;
pentru probele care au numele scris greit, dar numrul/codul pacientului este corect,
trimitorul va efectua o not de clarificare a greelii aprute.

1.6 Prelucrarea prim ar

Sngele pacientului, recoltat ntr-un tub fr substane anticoagulante, cu sau fr gel separator,
este lsat s sedimenteze/s coaguleze, dup care va fi centrifugat i se separ serul, care conine
toti componentii serici, mai puin fibrinogenul.
Plasma este obinut din sngele recoltat ntr-un tub cu anticoagulant i apoi centrifugat.
Anticoagulantul inhib formarea coagulului. Plasma conine toate tipurile de proteine.
Prin centrifugare se pot separa att plasm, ct i ser (vezi fig.3.). Diferena dintre plasm i ser
este c plasma reine fibrinogenul, care este nlturat din ser.

pag. 11/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

SNGE
INTEGRAL

Anticoagulant Fr anticoagulant

Centrifugare Stocai 30 minute la temperatura


imediat camerei i dac este posibil la ntuneric

Centrifugai

PLASM SER

Fig.3. Obinerea plasmei i serului prin centrifugare

Pentru anumii analii exist diferene semnificative ntre rezultatele obinute la testarea din ser i
cea din plasm: potasiu, magneziu, fosfor, proteine totale, lactat etc.
Diferenele dintre valorile obinute din ser i din plasm se datoreaz unor factori ca:
analitul poate fi consumat n timpul procesului de coagulare: fibrinogen, trombocite,
glucoz;
analitul poate fi eliberat din celule n timpul coagulrii: potasiu, LDH, fosfor, lactat;
anticoagulantul poate interfera cu metoda de determinare n cazul GGT, Li

Tabelul 4. Avantajele/dezavantajele determinrii n Plasm vs Ser

Plasm versus Ser


Avantaje Procesare accelerat: etapa formrii coagulului este eliminat; timpul de
centrifugare se poate scurta prin creterea vitezei de rotaie.
Cantitate mai mare: dintr- prob de snge se obine aprox. 15-20% mai mult
plasm dect ser.
Lipsa interferenelor legate de coagularea post-centrifugare: n ser se mai pot
produce coaguli dup o centrifugare precoce; acest lucru nu apare niciodat n
plasm.
Rezultatele obinute la testarea analiilor din plasm exprim mai fidel statusul
in vivo al pacientului comparativ cu cele din ser.
Risc mai mic de apariie n plasm a hemolizei i trombocitolizei dect n ser.
Dezavantaje Electroforeza proteinelor este alterat n plasm de prezena fibrinogenului
(pseudo-peak n regiunea -, ce poate mima un component M).
Anticoagulantul poate interfera cu metoda de determinare.
Interferen cationic: cnd se folosete plasm heparinizat, litiul sau amoniul
din anticoagulant pot interfera cu metodele de determinare a acestora.

pag. 12/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

Faza pre-centrifugare
Serul sau plasma trebuie separate fizic de celulele sanguine ct mai repede posibil, pentru a nu
exista riscul producerii unor rezultate eronate; se recomand astfel o limit maxim de 2 ore din
momentul recoltrii probei.
Un contact mai redus cu celulele sanguine (2 ore) este recomandat pentru potasiu, glucoz,
ACTH, cortizol, catecolamine, acid lactic i homocistein.
Refrigerarea probelor de snge inhib metabolismul celulelor sanguine i stabilizeaz anumii
constitueni termolabili. Nu se recomand ca probele de snge integral s fie refrigerate dect dac
exist recomandri specifice n acest sens. Astfel, este contraindicat refrigerarea n cazul probelor
pentru determinarea potasiului, deoarece temperatura sczut inhib glicoliza i favorizeaz
eliberarea potasiului din celule, obinndu-se astfel rezultate fals crescute. Pe de alt parte, probele
din care se vor testa ACTH, PTH, acid lactic, catecolamine i gastrina vor fi rcite prin plasarea
ntr-un recipient ce conine un amestec de ap cu ghea.

Centrifugarea
Centrifugarea probei n vederea obinerii serului trebuie efectuat numai dup ce se constat c
sngele a coagulat complet. n mod normal coagularea se produce dup cca. 30 minute, ns n
cazul pacienilor care primesc tratament anticoagulant sau prezint defecte de coagulare aceasta se
produce cu ntrziere.
Centrifugarea probelor pentru obinerea de ser sau plasm se efectueaz n general la 3000 g timp
de 5 minute. Pentru obinerea unei plasme deplachetate este nevoie ca proba s fie centrifugat
timp de 15-30 minute la 2000-3000 g.
Dup separarea serului sau plasmei, probele nu vor mai fi recentrifugate (pentru a obine un volum
suplimentar de prob); de asemenea este contraindicat recentrifugarea n cazul probelor recoltate
n vacutainere cu gel separator.
Transferul probelor n tuburi secundare trebuie efectuat cu mare atenie, pentru a evita contactul cu
un material potenial infectant.
n cazul tuburilor cu gel se va verifica obligatoriu integritatea acestuia la sfritul centrifugrii.

1.6.1 Criterii de respingere a produselor patologice la prelucrarea primara


1.6.1.1 Probe recoltate n recipiente improprii sau avnd conservani neadecvai:
n cazul probelor recoltate n recipiente improprii sau fr conservanii adecvai, care pot invalida
rezultatele, se va solicita repetarea recoltrii. Secia sau locul de unde s-au recoltat va fi anunat
ct se poate de repede de catre dispeceratul laboratorului, pacientul va fi contactat i chemat
pentru o nou recoltare a specimenului.

1.6.1.2 Cantitate insuficient a probei:


Dac va fi primit o cantitate insuficient de prob biologic (urin, materii fecale, snge etc.), se
va solicita repetarea recoltrii, avndu-se grij s fie respectate regulile de recoltare cu volumul
necesar de prob. Dac specimenul nu este uor de recoltat (LCR, fluide etc,) medicul care a
recoltat proba va fi contactat i se va stabili mpreun cu acesta un mod corect de solicitare a
parametrilor ce urmeaz a fi testai.

1.6.1.3 Specimen neadecvat recoltat:


Probele primite care nu sunt adecvate testrii de rigoare (ex.: urin pentru testele de snge etc.) vor
fi respinse. Secia sau locul de unde s-a recoltat proba va fi anunat i se cere s fie recoltat o
prob adecvat.

pag. 13/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

1.6.1.4 Specimen transportat/stocat inadecvat:


n cazul n care durata transportului probei la laborator a depit intervalul de timp admis
pentru a obine rezultate valide, aceasta va fi respins;
vor fi respinse de asemenea probele care necesit refrigerare i au fost transportate la
temperatura camerei, precum i probele care trebuie congelate i au ajuns la laborator
decongelate.

1.6.1.5 Probe hemolizate:


Anumite teste sunt invalidate n prezena hemolizei in vitro.
Dac serul este intens hemolizat (vezi PO-XX), se va lua legtura cu medicul trimitor/pacientul
i se va solicita repetarea recoltrii.
Informarea medicului trimitor, mai ales n cazul pacienilor spitalizai, este obligatorie pentru a
exclude cazurile rare de hemoliz in vivo, la care respingerea probei poate constitui o dovad de
malpraxis.

1.7 Stocarea probelor

Dup ncheierea procesului analitic, o parte din probe vor fi pstrate o anumit perioad de timp
(vezi tabel 5), n condiii bine stabilite, astfel nct s permit confirmarea rezultatelor, verificarea
identitii probelor sau efectuarea unor teste suplimentare.
Reguli generale:
- procedura de stocare a probelor trebuie s in cont de stabilitatea analiilor;
- n congelatoare probele sunt pstrate de obicei n tuburi secundare; este posibil arhivarea
i n tuburile primare care conin gel, dac productorul specific acest lucru;
- se va evita pe ct posibil stocarea sngelui integral; oricum sngele integral destinat
obinerii serului/plasmei nu trebuie pstrat n frigider;
- intervalul de pstrare a probelor este cu att mai mare cu ct temperatura de arhivare este
mai sczut (excepii; probele pentru electroforeza lipoproteinelor i determinarea de
apolipoproteine A1 i B nu trebuie pstrate la congelator);
- dup decongelare proba trebuie omogenizat prin micri de inversiune a tubului, fr a se
produce spum;
- evitai decongelarea-recongelarea.
Probele de plasm destinate determinrii ncrcturii virale B i C, precum i probele de
toxicologie (metale) sunt consumate de obicei aproape integral n procesul analitic, de aceea nu
vor mai putea fi disponibile pentru retestri (se va solicita repetarea recoltrii).
Tabelul 5. Proceduri de arhivare a probelor
Probe pentru: Tipul Perioada Temperatura
probei arhivrii
Hematologie Snge pe 24 ore 19-23C
EDTA
Biochimie i imunochimie (excepie fac probele Ser 1 sptmn 2-4C
menionate mai sus)
Determinare hormoni i markeri tumorali Ser 2 saptamani -20C
Screening prenatal TORCH, serologie sifilis la Ser 1 luna -20C
care s-au obtinut rezultate pozitive
Alergologie si boli autoimune Ser 2 saptamani -20C
Incrctura viral HIV plasm indefinit -70oC
Determinri speciale studii, tulpini de control, Plasm, ser, Pn la -70oC
materiale de referin i control liofilizate utilizare
pag. 14/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

Coagulare Plasma 8 ore 19-23C


Examen de urina Urina 5 ore 19-23C
Examen biochimic al LCR LCR 24 ore 2-4C

2 Factori care afecteaz rezultatul n faza de recoltare a lichidelor biologice

Recomandare: Pentru a evita interpretarea eronat a rezultatelor analizelor de laborator,


procedura standard de recoltare a probele de snge prevede 10-12 ore de repaus alimentar,
lipsa activitii fizice prealabile i poziia eznd.

2.1 Ingerarea de alim ente nainte de recoltare duce la valori crescute:

cu pn la 50% ale trigliceridelor;


pn la 15-20% ale glicemiei, transaminazelor, bilirubinei, fosfailor anorganici;
pn la 10% ale potasiului;
cu pn la 5% ale aminoacizilor, proteinelor, ureei, acidului uric, sodiului, calciului, fierului,
colesterolului (variaiile mai mici de 5 % pot fi considerate neglijabile, fiind irelevante clinic!)

2.2 nfom etarea

De scurt durat pn la 48 de ore duce la scderi uoare ale prealbuminei, proteinei


transportoare a retinolului i creteri uoare ale corpilor cetonici.
De durat medie dup 48 ore duce la creteri nsemnate ale corpilor cetonici, lactatului,
piruvatului i acizilor grai liberi (acidoz metabolic).
De lung durat sptmni duce la scderea semnificativ a: g-GT, trigliceridelor,
colesterolului, GPT, ureei, glucozei i creterea semnificativ a: GOT, creatininei, acidului
uric.

2.3 Ingestia de alcool

2.3.1 Ingestia acut de alcool (2-12 ore nainte de recoltare)


duce la creteri ale trigliceridelor i GT (pn la +50%), a aldosteronului (pn la +150%)
duce la scderi ale colesterolului (-10-20%), ADH, Cortizol, Prolactinei (-40-50%)

2.3.2 Ingestia cronic de alcool

duce la creteri ale activitiiGT (+1000%), GOT (+200-300%), trigliceridelor, GPT,


estradiol, cortizol (+50%), volumului corpuscular mediu (MCV) i colesterolului (+10%)
duce la scderi ale LDL-C (-20%) i acidului vanil mandelic (-15%)

2.4 Trecerea din clino- n ortostatism duce la creteri:

de pn la 15% ale parametrilor corpusculari - hematii, hemoglobin, hematocrit


pag. 15/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

de pn la 10% ale substanelor macromoleculare - proteine, lipoproteine, enzime


de pn la 5% ale leucocitelor, calciului total, imunoglobulinelor
Efectul poate fi mai accentuat la pacienii cu tendina de a face edeme (ciroza hepatic,
insuficiena cardiac).

2.5 Aplicarea prelungit a garoului nainte de recoltarea sngelui

Duce la creteri cu mai mult de 5% ale concentraiei: proteinelor, enzimelor, lipidelor,


parametrilor corpusculari
Duce la scderi cu pn la 5% ale parametrilor cu greutate molecular mic, nefixai pe
transportori: potasiul, clorul, creatinina, ureea, glucoza, fosfaii anorganici i cu mai mult de
10% ale timpilor de coagulare

2.6 Activitatea fizic

Activitatea fizic intens naintea recoltrii poate duce la creteri ale transaminazelor, CPK, ureei,
glucozei.

2.7 Variaii diur ne sem nificative se pot observa la determ inrile:

hormonale catecolamine, corticosteroizi, prolactina, aldosteronul, testosteronul, T4 (prezint


nivele maxime n general dimineaa orele 4,00-9,00 a.m.), n timp ce TSH i hormonul
somatotrop prezint concentraia maxim n timpul somnului (ntre orele 21,00 2,00)
electroliilor urinari concentraia sodiului urinar este cu 20-40% mai mic dup masa dect
dimineaa
fierului seric ntre orele 14,00-18,00 concentraia este cu 50-70% mai mare dect dimineaa
eozinofilele ntre orele 18,00-20,00 sunt cu 30-40% mai sczute dect dimineaa

2.8 Recoltri de pe catetere

se recomand a nu se recolta de pe catetere de perfuzie, preferndu-se braul opus


este preferabil s treac cel puin 1 or dup terminarea perfuziei i pn la recoltarea de snge
dac nu se poate punciona o alt ven, recoltrile de pe cateter se vor face cu aruncarea
primilor 5 ml de snge i abia apoi umplerea tuburilor de recoltare
pentru testele influenate de heparin (APTT, timp de trombin), nainte de recoltarea de pe
catetere heparinizate n tubul cu citrat, se recomand s se recolteze mai nti pentru alte
determinri (biochimie, hematologie)
se recomand de asemenea s nu se recolteze snge care a staionat n cateter

2.9 Fum atul

2.9.1 n dimineaa recoltrii


Duce la creteri ale concentraiei multor hormoni (adrenalin, aldosteron, cortizol), acizilor grai

pag. 16/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

2.9.2 Cronic
Duce la creteri ale carboxihemoglobinei, antigenului carcinoembrionar (CEA+50%),
leucocitelor (+30-40%), fibrinogenului (+15-20%)
Duce la scderi ale prolactinei, carotenoizilor (-20%), HDL-C (-10-15%)

2.10 Interferene m edicam entoase

Medicamentele pot exercita att efecte in vivo (influene biologice), ct i in vitro (interferene
fizico-chimice). n tabelul 6 de mai jos sunt exemplificate cteva din principalele tipuri de
interferene medicamentoase:

Tabelul 6. Influena diverselor medicamente asupra unor parametri de laborator


Categorie Mecanism Exemplu de Exemplu de analit
medicament modificat
Influen biologic in Inducie enzimatic fenitoin GGT
vivo Inhibiie enzimatic n allopurinol acid uric
ficat
Inhibiie enzimatic n ciclofosfamid colinesteraza
plasm
Creterea proteinelor de contraceptive orale cupru plasmatic
legare
Competiie cu procesul de novobiocin bilirubina indirect
glucuronidare
Efect antivitaminic warfarin proteina C
Citotoxicitate cisplatin creatinina
Interferene fizico- Interferen cu reacia teofilin bilirubina
chimice in vitro diazo
Interferen optic prin rifampicin bilirubina
culoarea galben
Interferen cu metoda metronidazol glucoza
hexokinazei

2.11 Aspecte particulare legate de tehnica de recoltare

2.11.1 Parametrii biochimici pot fi influenai de:

tipul de anticoagulant folosit - n determinarea glicemiei trebuie s se aib n vedere c fr un


inhibitor al glicolizei (fluorura de Na, Iodoacetat), rata acesteia este de 7% pe or la
determinrile glicemiei n ser, este important ca analiza s se efectueze n prima or dup
recoltarea probei
determinarea din ser sau plasm influeneaz rezultatele anumitor parametri - potasiul, fosforul
anorganic, LDH, fibrinogenul
n caz de trombocitoz (800.000/l) se recomand ca determinarea potasiului s se fac n
plasm (snge heparinizat) i nu n ser

pag. 17/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

pentru anumii parametri testai n urina de 24 ore, este nevoie de adugarea unor conservani /
unui anumit pH (catecolaminele sau produii lor de metabolism, 2 microglobulina -
alcalinizare), sau necesit nclzirea urinei (i acidifiere n cazul determinrii Ca)
pentru determinrile corpusculare n LCR, se recomand evitarea recoltrii pe EDTA i
recoltarea/transportul LCR n recipiente nchise

2.11.2 Parametrii hematologici pot fi influenai de:

tipul de anticoagulant folosit: pentru determinri corpusculare se recomand EDTA K3, ali
anticoagulani - oxalaii, citratul, etc - influennd forma, volumul, adezivitatea, dispunerea pe
frotiu a elementelor figurate.
este preferabil ca frotiurile de snge s se efectueze din snge capilar.

2.11.3 Testele de coagulare pot fi influenate de:

timpul de aplicare al garoului s nu depeasc 1 minut; garoul trebuie scos nainte de intrarea
sngelui n vacutainer
dac se recolteaz mai multe tuburi, cel cu citrat va fi recoltat al doilea
pentru recoltare se vor folosi ace 19-21 G pentru aduli i 22-23 G pentru copii
tipul de anticoagulant folosit i proporia cu sngele se recomand citratul de sodiu 3,8%
(0,109 mM/l) n proporie strict 1:9 cu sngele recoltat; oxalatul sau EDTA determin o mai
rapid inactivare a factorilor labili (V i VIII) ai coagulrii
se va evita formarea spumei la recoltare (agitarea tuburilor se va face delicat)
rezultatele din probe hemolizate, icterice sau lipemice vor fi compromise (se recomand
repetarea recoltrii)

3 Factori care afecteaz rezultatul n faza de transport i stocare a materialelor


biologice

Recomandm trimiterea probelor biologice n laborator pe msur ce sunt recoltate (n grupuri


de 10-20 tuburi) i a nu se colecta pe secii pn la terminarea tuturor recoltrilor. Prelucrarea
serului trebuie s se fac n maximum 1 or de la recoltare, pentru rezultate ct m ai corecte.

Se recomand centrifugarea n decurs de maximum 1 or a probelor pentru determinrile din ser


sau plasm, ns nu nainte de 30 minute de la recoltare (pentru a preveni hemoliza i formarea
tardiv a cheagului de fibrin n supernatant fenomen care CONDUCE LA ERORI DE
PIPETARE I LA BLOCAREA SISTEMELOR DE ASPIRARE ALE ANALIZOARELOR).
Utilizarea unor tuburi cu gel de separare a serului de elementele figurate antrenate n cheag (mult
mai costisitoare ns), previne eliberarea n ser a unor constitueni ai elementelor figurate.

3.1 Factori care influe neaz param etrii biochim ici-im unologici

cu excepia fosfatazei acide, amoniacului, gazelor sanguine i lactatului, restul parametrilor de


tip substrat sunt stabili n serul separat de pe cheag, 1 zi la temperatura camerei (la 4 oC
enzimele) i pn la 4 zile la 4 oC (activitatea enzimelor scade cu 5-10%/zi); pentru o mai lung

pag. 18/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

conservare se recomand congelarea la 20oC n recipiente nchise (cu excepia enzimelor, a


cror activitate se reduce cu 5-10%/zi de stocare).
pentru determinarea glicemiei, se recomand ca probele recoltate fr anticoagulani specifici
(fluorur, iodoacetat), s fie centrifugate i serul separat n decurs de 30 minute de la recoltare;
probele recoltate pe anticoagulanii amintii, pot fi stocate la 4oC, n recipiente nchise, pn la
7 zile.
sedimentul urinar se recomand a fi analizat n maximum 2-3 ore de la recoltarea urinei;
refrigerarea nu este recomandat, deoarece duce la precipitarea srurilor.
elementele celulare din LCR trebuie analizate pe parcursul a 1 or de la recoltare.
gazele sanguine trebuie determinate imediat (dac nu este posibil, se recomand ca probele s
fie colectate n recipiente de sticl i plasate la ghea, pn la 2 ore de la recoltare).
separarea serului de pe cheag s se fac rapid (n 10-15 minute dup recoltare), n cazul dozrii
PTH, Cross-laps, Calcitoninei, hormonului de cretere (GH) i factorului de cretere Insulin-
like (IGF).

3.2 Factori care influe neaz param etrii hem atologici

n recipiente nchise, componenii celulari i hemoglobina sunt stabile 1 zi, tuburile fiind
pstrate la temperatura camerei, n poziie orizontal.
se recomand prepararea frotiurilor n decurs de 3 ore de la recoltarea sngelui.

3.3 Factori care influe neaz param etrii hem ostazei

determinrile trebuie fcute ct mai repede posibil (dac nu este posibil, se recomand stocarea
plasmei srace n plachete imediat la 20oC).
plasma pentru determinarea timpilor Quick (PT), de trombin i a APTT, poate fi stocat 4 ore
la temperatura camerei sau mai corect n frigider (la 4 oC); determinrile mai tardive de 4 ore
conduc la scurtarea valorilor PT sau APTT.
pentru determinarea proteinei S i a factorilor V i VIII, plasma poate fi stocat maximum 4
ore.
pentru determinri de AT III, fibrinogen i protein C, plasma poate fi stocat 7 zile (la 4 oC).
obinerea corect a tipurilor de plasm:
bogat n plachete centrifugare 5 minute la 150-200 g
srac n plachete centrifugare 10 minute la 1000-2000 g
lipsit de plachete centrifugare 15-30 minute la 2000-3000 g

3.4 Stocarea (vezi tabelul 5)

Probele de ser pentru determinri biochimice de rutin se pstreaz 24 de ore la 4 oC.


Probele de snge integral se pstreaz 24 de ore la temperatura camerei, n poziie orizontal.
Probele de urin se pstreaz 24 de ore la 4 oC (obligatoriu cu aditivi).
Testele speciale (imunologice, hormonale, markeri virali, boli autoimune, tumorali) se
efectueaz n medie 1-2 ori / sptmn, serurile fiind congelate la -20o C se recomand
programarea testelor, pentru a se putea face determinarea din ser proaspt.

pag. 19/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

4 Factori care afecteaz rezultatul n faza de analiz propriu-zis

4.1 Hemoliza

determinarea LDH, potasiului, GOT i a CPK sunt influenate ( ) chiar i de o hemoliz


uoar; concentraia potasiului crete dup 1 or de la recoltare, chiar fr hemoliz
hemoliza scade concentraia fosfatazei alcaline, amilazei i GT.
hemoliza masiv (5g/l) influeneaz toate determinrile enzimatice, microelementele,
hormonii, markerii tumorali i serologici virali
!!! Absena culorii roii a serului nu nseamn lipsa hemolizei. n momentul n care serul apare
hemolizat cu ochiul liber, nivelul hemolizei este cel puin 300mg/l.

4.2 Hiperbilirubinem ia

influeneaz determinarea acidului uric (dac Bi 5 mg%), a trigliceridelor (dac Bi 10


mg%), a creatininei (dac Bi 25 mg%)
n determinarea creatininei, interferena poate fi prentmpinat prin determinarea n filtratul
rezultat n urma centrifugrii serului printr-o hrtie special de filtru

4.3 Lipem ia

serurile lactescente interfer cu toate determinrile fotometrice (enzime, substrate, elemente


minerale, proteine speciale - teste turbidimetrice) i testele de coagulare. Substanele hidrofile
(electrolii, substrate) vor apare n concentraii fals crescute, datorit efectului hidrofob al
lipidelor (nlocuitor de ap).

5 Influena unor factori biologici asupra rezultatelor

5.1 Vrsta

Cele mai nsemnate modificri fiziologice legate de vrst, le prezint:

5.1.1 La nou-nscut
Hemoglobina, bilirubina i acidul uric (fig.4): concentraia Hb, este mult mai mare la nou-nscut
dect la adult; n zilele imediat urmtoare naterii hemoliza fiziologic (asociat imaturitii
funciei de glucuronoconjugare hepatic) duce la creteri nsemnate ale bilirubinei; concentraia
acidului uric la natere este similar cu a adultului, descrescnd semnificativ dup ziua a 2-a.

pag. 20/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
Spitalul Clinic de Urgen Tg.Mure

Laborator de Analize Medicale Central MANUALUL RECOLTARII

5.1.2 n copilrie / adolescen


Modificri semnificative ale fosfatazei alcaline (fig.4) i imunoglobulinelor (fig.5 i tabelul 7):
activitatea fosfatazei alcaline serice n copilrie/adolescen, oglindete activitatea osteoblatilor
(spre deosebire de adult, unde predomin izoenzima secretat de epiteliile canaliculelor biliare),
fiind ceva mai sczut la sexul feminin.

Figura 4. Parametrii de laborator influenai de vrst

Concentraia imunoglobulinelor sufer


modificri dramatice, n special n primele
luni de via, Ig A fiind deficitar pn n
adolescen (fig.5 i tabelul 7).

Figura 5. Concentraia imunoglobulinelor


n viaa intrauterin i n primul an de
via

5.1.3 La adult
Concentraia colesterolului total i a fraciunii din LDL crete cu vrsta (fig.4)

pag. 21/54
LAMC-PT-07/A4, Ed4
5.2 Sexul

n afara hormonilor sexuali, exist o serie de parametri de laborator (n special aceia care
depind de masa muscular), care difer la cele dou sexe. Figura 6 red civa dintre aceti
parametri, considernd 1 domeniul fiziologic la femeie, iar variaia la brbai fiind exprimat
ca i indice de multiplicare.

Tabelul 7. Valorile normale ale imunoglobulinelor la copii, pe grupe de vrst

Vrsta IgG (g/ l) IgA(g/ l) IgM(g/ l) Ig totale


nou nscut 8,31-12,31 0,00-0,04 0,06-0,16 8,43-10,45
1-3 luni 3,10-5,50 0,08-0,44 0,19-0,41 3,54-6,08
4-6 luni 2,41-6,13 0,10-0,46 0,26-0,60 2,94-7,02
7-12 luni 4,42-8,80 0,19-0,55 0,31-0,97 5,10-9,94
13-24 luni 5,53-9,71 0,26-0,74 0,42-0,74 6,12-11,20
25-35 luni 7,09-10,75 0,34-1,08 0,42-0,80 8,19-12,29
3-5 ani 6,41-12,17 0,66-1,20 0,48-0,74 8,33-13,23
6-8 ani 6,67-11,79 0,79-1,69 0,40-0,90 8,19-14,05
9-11 ani 8,89-13,59 0,71-1,91 0,44-1,12 10,80-15,88
12-16 ani 8,22-10,70 0,85-2,11 0,39-0,79 9,84-13,22

Fig 6. Diferene fiziologice legate de sex ale unor parametri de laborator (cifra 1
reprezint domeniul fiziologic la femei, variaiile n jurul acestei cifre reprezentnd
situaia parametrului la brbai)

22
5.3 Sarcina

Interpretarea rezultatelor de laborator la femeia gravid trebuie s in cont de vrsta sarcinii:


Tabele 8 si 9 redau unele dintre diferene.
Tabel 8. Mecanisme care modific unii parametri plasmatici la femeia gravid
Nr Mecanism Teste modificate
1 Inducie Fosfataza alcalin, Factorul VII al
coagulrii
2 Creterea concentraiei plasmatice a Lipide, tiroxina, ceruloplasmina, cuprul
proteinelor transportori
3 Hemodiluie Proteine totale, albumina
4 Creterea masei corporale i a Clearance-ul de creatinin
metabolismului
5 Deficien relativ prin creterea Fe, Feritina
necesarului
6 Creterea proteinelor de faz acut VSH

Tabel 9. Modificarile parametrilor de laborator in cursul sarcinii normale


Denumire analiza Trimestrul I Trimestrul II Trimestrul III
Sodiu
Potasiu
Calciu
Magneziu
Clor
Creatinina
Uree
Acid uric /
Bilirubina
Glucoza (a jeun)
Glucoza (postprandial)
Proteine totale
Albumina
IgG
IgM
Fosfataza alcalina
ALT
AST
Amilaza
GGT
LDH
Colesterol
HDL-colesterol
Trigliceride

23
Sideremie
CTLF
Feritina
Hemoglobina / /
Hematocrit / /
VEM
Numar eritrocite / /
Leucocite
Limfocite
Monocite
Neutrofile
Modificari comparativ cu femeile sanatoase negravide.
<2%-; 2-10%-,; 11-30%-,; 31-100%-,; >100%-,

5.4 Ciclul m enstrual

n timpul ciclului menstrual FSH, LH, estradiol i progesteron prezint variaie ciclic. Fe i
fosforul scad la menstruaie iar colesterolul scade la ovulaie.

5.5 Intervenii chir urgicale

n faza postoperatorie imediat crete valorile de VSH, CRP, fibrinogen, uree, nr. leucocite i
scade albumina i colesterolul.

6 Recoltarea produselor biologice n vederea examenului bacteriologic

6.1 Solicitarea analizelor

Se face conform unor protocoale de evaluare ale diverselor grupe de patologie, emis de
conducerea fiecarei clinic/sectii.
Cine solicita analiza?
Solicitarile se fac de catre medicii curanti.

6.1.1 Programul de funcionare a compartimentului de microbiologie din cadrul


Laboratorului de Analize Medicale
Luni smbt: orele 7,30 14,30
Primirea probelor:
- secreii faringiene recoltate pe mediu de transport pn la ora 12

24
- produse prelevate pe medii de transport sau produse refrigerate (+2-8C): pn la ora
13,30
- probe de urin: dimineaa pn la ora 9 - n cazuri justificate (urgene, pacieni
cateterizai) se accept urina recoltat n timpul zilei, numai dac durata transportului nu
depete 1 or sau dac se transport refrigerat (+2-8C)
- produse recoltate pe tampoane fr mediu de transport, nerefrigerate: se prelucreaz
doar n cazul n care transportul nu depete 1 or
- trimiterea lichidului cefalo-rahidian, pleural, ascitic, pericardic, secreii genitale se
anun laboratorului cu cel puin o jumtate de or nainte de puncie (recoltare) pentru
pregtirea mediilor de cultur
Urmtoarele produse care nu ajung pn la 13,30, vor fi trimise la Laboratorul de Urgen:
- lichid cefalo-rahidian, ascitic, pleural, pericardic,
- puroi,
- aspiraie gastric la nou-nscui,
- secreii genitale femei
6.1.1.1 Cum se solicita analizele de laborator?
In cazul sectiilor/clinicilor/cabinetelor interne solicitarea examinarilor paraclinice de
microbiologie se face electronic, prin emiterea setului de analize in Sistemul Informatic al
Laboratorului (Programul Hospital Manager) si completarea cererii de analiza microbiologica.
In cazul sectiilor/clinicilor externe solicitarea se face prin completarea cererii de analiza
microbiologica.
Cererea va fi completata obligatoriu cu datele cerute pe aceasta, si anume datele de identificare
ale pacientului, datele demografice, diagnosticul de baza si de infectie, data si ora recoltarii
probei si persoana care este responsabila de recoltare/instruire pacient. Se bifeaza felul probei,
examenul solicitat si se completeaza datele clinice despre pacient. Se mentioneaza in scris (la
observatii) toate acele date complementare care sunt considerate necesare de catre medicul
curant si care ar putea ajuta la interpretarea corecta a rezultatului (figura 1).
Recipientele se eticheteaza cu numarul de set si felul produsului patologic. Numarul setului se
inscriptioneaza si pe cererea de analiza.
Sectiile exterioare vor inscriptiona pe recoltor numele pacientului si felul produsului.
6.1.1.2 Cine anunta/pregateste pacientul pentru recoltarea probei?
Asistenta de salon/ambulator anunta bolnavul asupra:
- momentului/locului recoltarii
- dietei precedente
- tratamentului medicamentos care influenteaza rezultatul
- toaletei premergatoare anumitor recoltari
6.1.1.3 Cine face recoltarea?
Asistenta medicala: secretia faringiana, puroi, secretii din leziuni superficiale sau eliminate prin
tub de dren, sange pentru hemocultura, urina recoltata prin cateter permanent
Medicul curant: lichide sterile in mod normal (exceptie sange), probe intraoperatorii, urina prin
cateter nou introdus
Bolnavul (dupa instruire corespunzatoare): urina emisa spontan, materii fecale
n laboratorul de microbiologie nu se fac recoltari.

25
Figura 1. Cererea de analiza microbiologica

26
6.1.1.4 Recipiente utilizate pentru recoltarea probelor
Se utilizeaza recipiente sterile, lipsite de urme de substane antibacteriene, de unic folosin cu
capac nurubabil (exceptie tampoanele faringiene).

Tabel 1. Tipuri de recipiente pentru recoltare si/sau transport


Recoltor Mediu de Proba biologica Aplicatii
transport
Tampon cu tub Da (Stuart, Secretie faringiana, secretii din leziuni Cultivare
(unica folosinta) Amies) superficiale
Tampon cu tub Da (Stuart, Secretii genitale, conjunctivale Cultivare
(unica folosinta) Amies, +
carbune)
Tampon cu tub Fara Secretie faringiana, secretii din leziuni Cultivare
(unica folosinta) superficiale durata de trensport sub 1 ora
Tampon Cu sau fara Secretia nazofaringiana, secretie uretrala Cultivare
nazofaringian
cu tija subtire
sau flexibila,
inserat in tub
Urorecoltor Fara Urina si alte produse lichide (aspirate), puroi, Cultivare,
steril varfuri de cateter, sputa, aspirate examen
traheale/bronsice, probe intraoperatorii microscopic
Tub de Fara LCR si alte produse lichide (aspirate) Cultivare,
centrifuga examen
Falcone steril microscopic

6.2 Lista exam inarilor efectuate n Laboratorul de Microbiologie

6.2.1 Examen microscopic:


- sput, spltur bronic, aspirat bronic
- lichid cefalorahidian, pleural, ascitic, pericardic, articular
- secreie vaginal, col uterin, secreie prostatic, uretral, sperm
- materii fecale (prezena leucocite)
- puroi
- suc gastric, bil

6.2.2 Cultivare:
- secreiile tractului respirator superior (secreii nazale, nazofaringene, orofaringene,

27
laringean, puroi sinuzal, otic)
- secreie conjunctival
- secreii tract respirator inferior (sput, aspirat, spltur bronic, lavaj bronhoalveolar)
- puroi (abcese, plgi superficiale, profunde)
- cultivare diferite secreii (LCR, lichid pleural, ascitic, pericardic, articular), bil
- urocultur
- secreii genitale la brbai: secreie uretral, prostatic, sperm
- secreii genitale la femei: secreie vaginal, col uterin, endometru
- hemocultur
- coprocultur
- aspirat gastric
- biopsii, piese intraoperatorii
- de pe suprafaa cateterelor
- exit site cateter

6.2.3 Testarea sensibilitii la antibiotice


Se testeaza susceptibilitatea fata de antibiotice a fiecarui izolat semnificativ clinic. La cele cu
valoare incerta responsabilul de analiza decide n funcie de natura produsului, a datelor clinice
comunicate n cererea de analiza i n consultan cu medicul curant necesitatea efecturii
antibiogramei.
Se efectueaz antibiogram difuzimetric (metod calitativ) in cazul izolatelor
urinare, faringiene, nazale, secretii genitale, secretii prin tuburi de dren, leziuni
superficiale, varf de cateter. Se poate efectua doar antibiograma difuzimetrica in cazul
tulpinilor de Haemophilus influenzae, Neisseria gonorrhoeae.
La decizia responsabilului de analiza se poate opta pentru antibiograma difuzimetrica si
in cazul altor produse biologice (motive finaciare, tehnice, particularitati ale germenului
testat).

NU se efectueaz antibiogram difuzimetric pentru urmtoarele bacterii:


Streptococi -hemolitici de grup A (S. pyogenes), B (S. agalactiae), C, G, exceptnd
cazul n care pacientul este alergic fa de -lactamine, fapt comunicat pe biletul de
trimitere. Aceste tulpini sunt sensibile in vivo fa de -lactamine.

28
Staphylococcus saprophyticus (cauzeaz cistite la femei) izolat din urin este sensibil
la antibioticele folosite n tratamentul infeciilor tractului urinar
difterimorfi, streptococi grup viridans: rezultatele antibiogramei difuzimetrice pot fi
eronate
2. Determinarea concentraiei minime inhibitorii cu ajutorul automatului Vitek2 Compact
se efectueaza in urmatoarele situatii:
- tulpini izolate din produse in mod normal sterile, din produse ale cailor respiratorii inferioare,
puroi recoltat din abcese profunde, piese intraoperatorii
- germeni care nu pot fi testati difuzimetric : pseudomonade
- germeni multirezistenti testate difuzimetric

6.3 Reguli generale de recoltare a produselor patologice i biologice n vederea


exam enului bacteriologic

Rezultatul examenului bacteriologic depinde de calitatea produsului prelucrat

6.3.1 Alegerea produsului corespunztor


Agentul etiologic al unei infecii poate fi detectat din: leziunile din poarta de intrare, organele
int afectate, cile de rspndire n organism, produsele prin care se elimin din organism.
nainte de a cere o analiz bacteriologic trebuie cntrit raportul risc/beneficiu al recoltrii
privind pacientul.

6.3.2 Momentul prelevrii


Se alege n funcie de infecie.
Recoltarea se face nainte de instituirea tratamentului antibacterian! n cazul n care bolnavul se
afl deja sub tratament antibacterian, se noteaz pe cererea de analiz bacteriologic i se
specific felul antibioticului sau antisepticului, durata i modul de administrare i momentul
administrrii ultimei doze.

6.3.3 Ritmul prelevrii


Se alege n funcie de prelevat, examenul solicitat i germenul urmrit:
- hemoculturi: 2-3 seturi de hemoculturi, nainte de instituirea tratamentului
antibiotic, sau dac tratamentul este deja introdus, se recolteaz nainte de
administrarea urmtoarei doze

29
- exsudat faringian - o singur prob pe zi, recoltat dimineaa nainte de toaleta
gurii i ingerare de alimente, ap, fumat sau n cazuri excepionale (motivate n
bilet) dup 2-3 ore de la ingerare alimente
- urin o singur prob pe zi, se recolteaz urina de diminea sau la 3 ore dup
ultima miciune
- coprocultur: se recolteaz ct mai precoce dup debutul diareei, cnd numrul
de germeni este cel mai mare, repetarea examenului n 2 zile consecutive crete
ansa depistrii patogenilor
- se contraindic colectarea sputei, urinii de 24 de ore (multiplicarea
contaminanilor n produs)

6.3.4 Recoltarea se face aseptic


Trebuie redus sau prevenit contaminarea probelor cu germeni din flora de asociaie. Prezena
contaminanilor ngreuneaz interpretarea corect a rezultatelor.

6.3.5 Cantitate
Se preleveaz cantiti suficiente de produs, in functie de felul produsului.

6.3.6 Instrumente de prelevare, recipiente pentru recoltare i transport


Se aleg n funcie de particularitile recoltrii, consistena, volumul produsului. Trebuie s fie
sterile i lipsite de urme de subsatane antibacteriene, de unic folosin cu capac nurubabil.
Se verific, capacul s fie etan, s nu curg. Se inscriptioneaza conform celor mentionate mai
sus. Transportul s nu depeasc timpul de 1 or de la recoltare, sau se folosesc medii de
transport.

6.3.7 Control dup instituirea tratamentului antibacterian


Recoltarea de produse patologice pe durata tratamentului antibacterian este indicat doar n caz
de eec terapeutic definit prin lipsa ameliorrii clinice dup 72 de ore de tratament sau
agravarea strii pacientului.
Controlul eficienei terapiei se recomand doar n cazul uroculturilor, la 10 zile dup
terminarea tratamentului.
Nu este necesar repetarea examenului bacteriologic dup faringite streptococice vindecate

30
clinic.

6.4 Msuri de protecie n cursul recoltrii produselor biologice n vederea exam enului
bacteriologic

toate produsele biologice trebuie considerate potenial infecioase, se manevreaz


respectnd regulile generale de prevenire a infeciilor
personalul care recolteaz, manevreaz produse biologice trebuie s foloseasc echipament
de protecie corespunztor (mnui, halat) completat cu masc, ochelari de protecie n
cazul n care produsul biologic s-ar putea disemina
s nu se contamineze cu produsul patologic exteriorul recipientelor sau biletele de trimitere
ce nsoesc produsele
pentru a asigura transportul adecvat al produselor se impune:
cererile de analiza microbiologica se transporta separat de recipientele cu produs pentru
a evita contaminarea acestora

6.5 Transportul i conservarea probelor

Trebuie avute n vedere:


- meninerea condiiei microbiologice iniiale a probei, a raportului dintre germeni
- meninerea viabilitii germenilor
- prevenirea rspndirii germenilor
n cazul transportrii necorespunztoare sau conservrii deficitare pot aprea rezultate incorecte
datorit:
- n cazul produselor cu coninut polimicrobian se schimb raportul dintre germeni
- creterii i multiplicrii germenilor contaminani cu modificarea raportului dintre
germeni
- distrugerii patogenului (deshidratare, modificri de pH, autoliz, contactul cu oxigenul
atmosferic n cazul anaerobilor)

Pentru a preveni aceste erori:


- probele recoltate trebuie s ajung ct mai repede la laborator
- dac nu pot fi transportate imediat:

31
o se indic folosirea mediilor de transport - probele recoltate pe acestea trebuie s
ajung la laborator n 4 ore
materii fecale: mediul Cary-Blair sau glicerin tamponat
tampoane: mediul Amies
cultivare Neisseria gonorrhoeae: mediul Amies cu crbune
o pentru produsele la care nu pot fi folosite medii de transport se recomand
refrigerare la 4-8C majoritatea germenilor supravieuiesc (excepii: Neisseria
meningitidis, Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, anaerobi), iar
multiplicarea lor este oprit, raportul dintre germenii patogeni i contaminani
rmne neschimbat
nu se refrigereaz: hemoculturile, lichidul cefalo-rahidian, pleural,
ascitic, pericardic, materiile fecale, produsele recoltate pentru cultivarea
anaerobilor

6.6 Criterii i procedura de respingere a probelor

1. Lipsa cererii pentru analiz bacteriologic sau cerere completat parial, folosirea altor
bilete dect cele tipizate, concepute de ctre laboratorul de microbiologie.
2. Recipiente cu probe nemarcate, neidentificabile
3. Probe care se scurg din recipient nu se prelucreaz deoarece:
- constituie pericol de infecie
- proba poate fi contaminat din exterior, ceea ce reprezint surs de eroare n
diagnostic
Se anun telefonic secia i se cere repetarea probei. n cazul probelor nerepetabile
proba poate fi prelucrat cu consemnarea posibilei surse de eroare.
1. Probele necorespunztoare calitativ se pstreaz la 4C, se ia legtura cu medicul care
cere analiza pentru a afla, dac exist posibilitatea repetrii recoltrii
- dac poate fi repetat: proba se arunc
- dac nu poate fi repetat, proba se prelucreaz i se consemneaz posibilitatea unor
rezultate fals negative sau pozitive

32
Tabel 2. Criteriile refuzrii produselor biologice i procedura aplicat

Criterii de respingere Comentarii raportate


Recipiente nemarcate, cerere de analiz Nu s-a primit produs cu acest numar de set. Cerem
completat repetarea prelevrii.
Produs nemarcat fr cerere de analiz Se noteaz prob nemarcat, se pstreaz
bacteriologic refrigerat timp de 48 de ore
Cerere de analiz parial completat Se solicita telefonic datele lipsa.
(lips: vrst, diagnostic, ora recoltrii,
etc.)
Un singur produs multiple analize Prelucrarea se temporizeaz pn la elucidarea
problemei
Mai multe produse cu o singur cerere Produsele se refrigereaz pn la obinerea cererilor
de analiz corespunztoare pentru fiecare produs
Produse scurse din recipient Se anun secia/medicul i se cere repetarea
recoltrii.
Dac nu este posibil repetarea, se prelucreaz
proba i se consemneaz: posibile erori de
diagnostic prin contaminare!
Recipient inadecvat Se anun secia/medicul i se cere repetarea
recoltrii.
Dac nu este posibil repetarea, se prelucreaz
proba i se consemneaz: posibile erori de
diagnostic datorate utilizarii unor recipiente
inadecvate pentru examen bacteriologic

Tabelul 3. Criterii de respingere ale diferitelor prelevate:


Prelevat Analiz Criterii de respingere Se raporteaz
Scaun C Prob trimis fr mediu de Prob primit fr mediu
transport de transport

Cantitate de scaun prea mare, Recoltare incorect


acoper n ntregime mediul de cantitate de produs prea
transport mare

Mai multe probe provenite de


la acelai pacient n aceeai zi Aceast prob nu se
prelucreaz, deoarece s-a
mai prelucrat o prob din
aceast zi
Diagnostic de boal diareic
acut: se primeste scaun Scaun format - produs
format patologic necorespunztor

33
Prelevat Analiz Criterii de respingere Se raporteaz
Sput C&M >25 celule epiteliale/cmp Peste 25 de celule
(x100) epiteliale pe cmp
microscopic produs
necorespunztor calitativ
pentru cultivare
Urin C&M Prob prelevat din pung de Produs inadecvat pentru
drenaj, vrf de cateter, analiza cerut din cauza
Volum insuficient; probe .
duble Se cere repetarea
Probe recoltate cu mai mult de recoltrii.
2 ore n urm!

Date incomplete privind felul


recoltrii (jet mijlociu, aspirat Se temporizeaz
suprapubian, prelevat prin prelucrarea pn la
cateter) obinerea datelor
complete.
Prezena a mai mult de un
morfotip bacterian pe frotiu
colorat Gram i numeroase Contaminare vaginal,
celule malpighiene prob inadecvat pentru
Leucocite i bacterii absente cultivare.
pe frotiul colorat Gram
Piuria absent.
Bacterioscopia negativ.
Cultivarea nu se justific.
Toate produsele C pentru Produse trimise fr mediu de Produs fr mediu de
patologice trimise anaerobi transport adecvat pentru transport inadecvat
pentru cultivare anaerobi pentru detectare anaerobi
anaerobi
(n afar de:
esut, fluide corporale
sterile,
abcese hepatice i
cerebrale, puroi
aspirat,
biopsii cu diagnostic
de gangren gazoas,
fasciit sau celulit
necrotizant )

Legend: C: cultivare, M: microscopie

34
6.7 Prelevarea diferitelor produse biologice n vederea examenului bacteriologic

6.7.1 Prelevarea puroiului


Produsul patologic cel mai adecvat prelucrrii bacteriologice este cel obinut prin aspiraie.
Cantitatea recoltat trebuie s fie ct mai mare (crete sensibilitatea detectrii patogenului).
Puroiul recoltat cu tampon prezint dezavantajul c ofer cantitate redus de produs patologic. Nu
se recolteaz cu tampon uscat de pe leziuni uscate! Dac leziunea este extins, se recolteaz din
mai multe pri.
Din leziuni deschise se recolteaz:
- prin aspiraie
- material bioptic
- cu ajutorul tamponului
Din leziuni nchise se recolteaz
- prin aspiraie
- secreii sau biopsii prin intervenie chirurgical
Din leziuni profunde se recolteaz:
- prin aspiraie percutanat
- secreii sau biopsii in cursul interveniei chirurgicale

6.7.2 Abcese
- din leziuni accesibile punciei puroiul se aspir cu un ac suficient de gros ataat de sering,
dup antisepsia corespunztoare a regiunii
- puroiul colectat cu seringa se transfer aseptic ntr-un tub i se nchide ermetic
- se transport imediat la laborator, mai ales n cazul n care se urmrete prezena
anaerobilor (20 de minute)
- n infeciile intraabdominale n cazul unor abcese multiple se recolteaz din fiecare colecie
separat
- puroiul poate fi steril n urma distrugerii germenilor, este recomandat excizie din peretele
abcesului

6.7.3 Fistule
- prelevatul de la orificiul fistulei nu conine ntotdeauna germenii ce cauzeaz supuraia!
- se spal i se antiseptizeaz tegumentele adiacente i se chiureteaz ct mai profund
traiectul fistulei
- dac este posibil, se aspir puroi, se transfer n recipient steril i se trimit la laborator
imediat
- dac recoltarea se face cu tampon, acesta se introduce n mediu de transport

35
6.7.4 Puroi prelevat din arsuri, plgi, leziuni superficiale (escare, ulceraii, episiotomie)
- suprafaa zonei de recoltare se spal cu soluie salin steril pentru ndeprtarea
exsudatului stagnant, prelevarea se face dintr-o zon a plgii lipsit de esut necrotic
- vrful unui tampon steril umectat n soluie salin steril se nvrte ferm pe o arie de 1 cm2
timp de 5 secunde, astfel nct s se obin o uoar sngerare;
- produsul se transfer n mediu de transport Amies; n lipsa mediului de transport materialul
obinut trebuie s ajung n cel mai scurt timp la laborator;
- dac se urmresc i germeni anaerobi, trebuie recoltat i cu un al doilea tampon i introdus
n mediu de transport (Amies sau Stuart)
- dac se anticipeaz ntrzierea transportului/prelucrrii, proba prelevat pentru cultivarea
germenilor aerobi se refrigereaz la 4C i se menioneaz pe bilet;
- prezena celulelor epiteliale n produsul recoltat poate indica faptul c prelevatul este
superficial, germenul izolat s nu aib rol etiologic; din leziunile superficiale cronice (ulcer
de gamb, picior diabetic) se recolteaz produs patologic n vedera examenului
bacteriologic doar n cazul unor semne de infecii clare, deoarece de regul exist o flor
de contaminare / colonizant bogat i mixt iar cultivarea nu ofer informaii pertinente
pentru a stabili rolul germenilor izolai.

6.7.5 Biopsii de tegument


- materialul bioptic se introduce ntr-un recipient steril cu ser fiziologic steril, se transport
imediat la laborator

6.7.6 Recoltarea puroiului prin tub de dren


- este acceptabil pentru examen bacteriologic puroiul aspirat n condiii aseptice prin

puncionarea tubului de dren al unui sistem de dren nchis!

n afara programului de funcionare puroaiele aspirate, cele recoltate pe tampon fr mediu de


cultur se trimit imediat la laboratorul de urgen.

6.8 Prelevarea i transportul exsudatelor cilor respiratorii superioare

6.8.1 Exudat faringian


- indicaii:
o diagnosticul faringitelor i anginelor cauzate de Streptococcus pyogenes

36
(Streptococ grup A) i de streptococii grup C, G, Arcanobacterium hemolyticum
o n context clinic sugestiv, la cererea medicului curant, notat pe biletul de trimitere
se efectueaz diagnosticul altor faringite bacteriene (faringita gonococic), a
candidozei
o angina fuso-spiralara Panton-Valentine
- se preleveaz dimineaa nainte de toaleta gurii i a ingerrii de alimente, lichide, fumat
- n cazuri excepionale este acceptat recoltarea secreiei faringiene n timpul zilei, la
minimum 3 ore dup ultima ingerare de alimente, lichide, fumat
- pacientul se aeaz pe scaun cu faa spre o surs de lumin, gtul n uoar extensie, se
deprim baza limbii cu un apstor de limb steril n timp ce pacientul pronun vocala A;
se terge ferm cu tamponul steril amigdalele, peretele posterior al faringelui, orice zon
inflamat, ulcerat sau cu depozit purulent, fals membran, se ptrunde n criptele
amigdaliene; se evit atingerea tamponului de baza limbii sau de palatul moale
- tamponul se introduce n mediu de transport Amies; n caz de suspiciune de faringit
gonococic se folosete mediul de transport Amies cu crbune

6.8.2 Secreie nazal


- indicaii: depistarea portajulul de Staphylococcus aureus
- pacientul se aaz pe scaun cu faa spre o surs de lumin, gtul n uoar extensie; cu
acelai tampon umectat cu ser fiziologic steril se terg pe rnd ambele camere nazale
anterioare; tamponul se rotete de cel puin 5 ori n fiecare nar, apsnd egal i ferm
peretele vestibulului nazal
- tamponul se introduce n mediul de transport Amies

6.8.3 Secreia nazo-faringian


- indicaii: depistarea unor bacterii mai frecvente la acest nivel dect n nas sau orofaringe,
depistarea portajului de Neisseria meningitidis, diagnosticul tusei convulsive, detectarea
prezenei n nazofaringe a germenului Moraxella catarrhalis asociat cu laringite
- se folosete tampon nazofaringian (montat pe un suport subire, preferabil flexibil)
- pacientul se aeaz pe scaun cu faa spre o surs de lumin, gtul n uoar extensie; se
introduce tamponul printr-o nar de-a lungul planeului nazal pn ce atinge peretele
posterior al nazofaringelui; se rotete uor tamponul, pentru a-l ncrca; nu este nevoie de
introducerea tamponului i prin cealalt nar; eventual pentru creterea cantitii
prelevatului, se poate retrage uor tamponul i reinserat pe acelai traiect (prima tamponare
stimuleaz secreia)
- tamponul se introduce n mediul de transport Amies

37
6.8.4 Puroiul sinuzal
- indicaii: n sinuzite acute pentru depistarea germenilor ca: Streptococcus pneumoniae,
Moraxella spp., Haemophilus spp., Staphylococcus aureus, Burkholderia cepacia,
Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pyogenes, fungi)
- secreiile nazale i nazofaringiene nu sunt adecvate pentru diagnosticul sinuzitei, deoarece
germenii cultivai din aceste produse coreleaz slab cu sinuzita
- aspiratele sau lavajele se colecteaz aseptic n recipiente sterile

6.8.5 Exudate otice


- indicaii: detectarea agentului etiologic al otitei medii (Streptococcus pneumoniae, S.
pyogenes, Moraxella catarrhalis., Haemophilus spp., Staphylococcus aureus, .a.)
- exsudatul se aspir prin timpanocentez
- n caz de otite externe se preleveaz exsudatul cu tampon steril i se introduce n mediu de
transport Amies;

6.8.6 Secreie epiglotic


- n epiglotite cel mai frecvent este implicat Haemophilus influenzae serotip b, urmat de
Staphylococcus aureus, streptococul de grup A
- se tamponeaz structura cartilaginoas a epiglotului
- tamponul se introduce n mediul Amies

6.8.7 Abcese ale cavitii bucale


- De obicei prezint etiologie polimicrobian, cu implicare germenilor aerobi i anaerobi din
cavitatea bucal. Cu toate acestea de rutin se testeaz prezena urmtoarelor specii
bacteriene: Staphylococcus aureus, streptococul de grup A, Haemophilus influenzae.
- recoltarea se face cu ajutorul unui tampon steril,
- tamponul se introduce n mediul de transport Amies

6.8.8 Tampoane orale


- tampoanele orale se recolteaz n special n vederea evidenieri unei micoze orale, sau mai
rar pentru diagnosticul anginei Plaut-Vincent
- leziunile din cavitatea bucal (i faringe n cazul anginei) se terg cu tamponul steril
- tamponul se introduce n mediul de transport Amies

38
6.9 Recoltarea i transportul secreiilor cilor respiratorii inferioare

Secreiile tractului respirator inferior examinate bacteriologic includ sputa, aspirate (splturi)
bronice, lavaj bronhoalveolar, material bioptic.
Secreiile din tractul respirator inferior pot fi contaminate cu bacterii din tractul respirator
superior! Rezultatul bacteriologic se interpreteaz n context clinic, alturi de rezultatele altor
analize.

6.9.1 Sputa (inclusiv probele obinute prin tub endotraheal, traheostomie)


Germenii asociai pneumoniei variaz n funcie de tipul pneumoniei:
- pneumonia comunitar: Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Mycoplasma
pneumoniae, Chlamydia pneumoniae, Legionella pneumophila, virusuri respiratorii
- pneumonia intraspitaliceasc (nosocomial): bacili Gram negativi, Staphylococcus aureus,
Streptococcus pneumoniae, a.
- pneumonia imunosupresailor: la cei de mai sus se adaug Pneumocystis jiroweczi, fungi
dimorfi, Cryptococcus spp.
- pneumonia de aspiraie: mixtur de germeni aerobi i anaerobi orali
Prin cultivare de rutin pot fi detectate doar o parte dintre aceti germeni!
Metodologia recoltrii:
Se explic pacientului diferena dintre sput, saliv i secreie rinofaringian nghiit i
expectorat.
Sputa emis spontan se recolteaz dimineaa, cnd schimbarea poziiei corpului din clino- n
ortostatism favorizeaz eliminarea secreiilor bronice. Pacientul elimin secreiile
nazofaringiene, se spal pe dini, cltete abundent gura cu ap i efectueaz gargar profund
cu ser fiziologic. Sputa se obine dup o tuse profund, se expectoreaz n recipient steril, cu
capac nurubabil.
De la pacieni cu tub endotraheal se aspir n condiii aseptice secreie n recipient steril.
Vrfurile de tuburi endotraheale obinute de la nou-nscui se plaseaz n recipiente sterile i
se transport imediat la laborator.
Nu se accept vrfuri de tuburi endotraheale de la aduli, deoarece acestea se contamineaz
frecvent, bacteriile izolate nu corespund cu adevratul agent etiologic.
n excepionale, cnd transportul ntrzie probele se refrigereaz. Prin refrigerare se pot
distruge unii patogeni (Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae)
Laboratorul respinge acele produse patologice care nu corespund calitativ pe baza aspectului
macroscopic (saliv) i microscopic (prezena a peste 25 de celule epiteliale pe cmp
microscopic).

1. Lavaj bronhoalveolar (BAL), aspirate, splturi bronice


BAL se efectueaz cnd examenul microbiologic al sputei nu evideniaz agentul etiologic al
unei pneumonii sau cnd pacientuol nu poate expectora sput. Lavajul este potrivit n special
pentru detectare de P. jiroweczi sau fungi.
Se recolteaz aprox. 15-20 ml secreie n recipiente sterile cu capac nurubabil.
n lipsa bronhoscopului se efectueaz lavaj bronic orb. n cazul n care nu se obine cantitate
suficient de lichid transferabil ntr-un recipient steril, se extrage canula i se taie vrful
acesteia coninnd o anumit cantitate de lichid i se transfer aseptic ntr-o eprubet sau
recipient steril. Se menioneaz pe bilet: lavaj/aspirat bronic.

39
n cazul n care transportul ntrzie, probele se refrigereaz. Dac proba constituie vrf de
canul cu secreie, se acoper cu ser fiziologic steril i se refrigereaz. La predarea produsului
se menioneaz: prob refrigerat i durata refrigerrii. Prin refrigerare S. pneumoniae i H.
influenzae i pierd viabilitatea.

2. Biopsie tisular
Fragmentul de esut obinut intraoperator se introduce aseptic n recipient steril. Dac se
ntrzie transportul, se adaug 0,5 ml soluie salin steril i se refrigereaz.
Dac se cere cultivarea germenilor anaerobi, fragmentul se introduce n mediu de transport
pentru anaerobi.

2. Prelevarea i transportul urinii


Prelevatele de urin pot fi mprite n categorii n funcie de criterii clinice, posibilitatea
contaminrii cu germeni i gradul de prelucrare microbiologic.
- urini emise spontan (nesterile):
a. jet mijlociu
b. reinute n saci sterili la nou-nscui i sugari
c. prin cateter Foley permanent, cateter suprapubian
- urin obinut prin sondaj vezical
- urin colectat n mod aseptic / alte urini
d. nefrostomie
e. puncie suprapubian
f. cistoscopie
Majoritatea infeciilor tractului urinar (ITU) sunt cauzate de germeni condiionat patogeni.
Implicarea acestora n ITU este susinut de creterea semnificativ pe diferite medii de cultur.
Criteriile care stabilesc pragul creterii semnificative variaz n funcie de tipul prelevatului.
Rezultatele uroculturii cantitative pot fi influenate de mai muli factori:
1. multiplicarea bacteriilor n urina recoltat
Urina fiind un bun mediu de cultur, dup recoltare bacteriile continu multiplicarea,
modificnd semnificativ cantitatea germenilor. Contaminanii prezeni de obicei n numr mic
pot atinge pragul semnificativ, rezultnd erori de diagnostic. Pentru a preveni aceste erori se
impune prelucrarea probei n cel mult 1 or de la recoltare. n cazul n care transportul se
prelungete, urina se refrigereaz la 4C.
2. recoltare incorect, contaminarea urinii
Peste 90% din ITU sunt infecii monobacilare. Detectarea a dou tipuri de germeni de cele mai
multe ori necesit repetarea uroculturii pentru confirmarea implicrii ambilor germeni.
Detectarea simultan a 3 sau mai multe tipuri de germeni din urina emis spontan nseamn
ntotdeauna contaminarea probei i n cazul unui context clinic sugestiv pentru ITU este nevoie
de repetarea probei respectnd riguros regulile de recoltare.
3. tratamente cu antibiotice
Recoltarea urinii se face naintea administrrii antibioticelor, sau n cazul unui eec terapeutic
constatat dup 48-72 de ore de la iniierea terapiei. Prezena antibioticelor n urin reduce mult
sensibilitatea uroculturii cantitative, scznd viabilitatea bacteriilor.
4. tratamente diuretice

40
n urma tratamentului diuretic se dilueaz urina, se obine numrul de germeni mai mic, care
ns vor fi considerat semnificativ i se va prelucra bacteriologic.
5. infecii cu microorganisme nedetectabile prin cultivare de rutin
ITU cauzate de virusuri, chlamydii, micoplasme, ureaplasme, M. tuberculosis necesit
investigaii suplimentare, acestea nefiind detectabili prin cultivare de rutin.

Pentru colectare se folosesc recipiente sterile, de unic folosin, cu capac nurubabil.


Criterii de respingere a probelor de urin: tabelul 3.
6.9.1.1
6.9.1.2 Reguli de recoltare

1. Recoltarea urinii emise spontan

a. Urina prins n zbor din jetul mijlociu


Pacientii vor fi instruit de asistenta medicala si li se vor imana materiale informative
scrise despre procedura de recoltare (appendix).
Procedura la femei:
- pacienta se spal pe mini cu ap i spun, le usuc
- cu o mn ndeprteaz labiile mici, efectueaz toaleta vulvar riguroas se cltete
abundent cu ap, preferabil steril nu se folosesc soluii antiseptice, deoarece pot fi
antrenate n urin, inactivnd germenii.
- se usuc zona vulvar decontaminat cu dou tampoane de tifon sterile (prosop curat,
clcat) prin tergere unic din fa nspre spate dac rmn pelicule de ap, germenii din
zonele nedecontaminate pot fi antrenate n jetul de urin.
- introduce un tampon intravaginal
- pacienta ndeprteaz cu dou degete labiile mici, trgnd uor anterior i ncepe s
urineze, avnd grij, ca urina s nu curg pe degete
- primul jet de urin, aproximativ 10 ml de urin se las s se scurg (numrare ncet pn la
3)
- se urineaz n continuare fr ntrerupere, se prinde cantitatea de urin necesar,
aproximativ 2-3 ml (nu mai mult de 5 ml) direct n recipientul steril, de unic folosin, cu
capac nurubabil
- se retrage recipientul nainte de ntreruperea urinrii;
- n caz de uretrite se reine primul jet de urin (detectare de Mycoplasma/Ureaplasma spp.,
Chlamydia necesit medii de transport speciale)

Procedura la brbai:
- pacientul se spal pe mini cu ap i spun, le usuc cu erveel
- cu o mn se retract prepuul pentru a decalota complet glandul
- se efectueaz toaleta riguroas a glandului cu ap i spun, cltire abundent cu ap

41
preferabil steril
- se usuc cu 2 tifoane sterile prin tergere dinspre meat spre fren
- meninnd prepuul retras se urineaz, primul jet se arunc (se numr pn la 3),
recoltndu-se din jetul mijlociu aprox. 10 ml n recipient steril
- se retrage recipientul nainte de ntreruperea miciunii

ATENIE la recoltarea urinii din jetul mijlociu:


o urina se recoltez n recipiente de unic folosin, cu capac filetat
o urina s nu se preling pe zonele nedecontaminate (se retrage recipientul nainte de
ntreruperea miciunii)
o orificiul recipientului s nu ating tegumentele, mucoasele, lenjeria!
o capacul, dopul recipientului s nu se desterilizeze

b. Prelevarea urinii de la nou-nscui, sugari


- se decontamineaz i usuc organele genitale externe i perineul
- se fixeaz n jurul penisului sau a vulvei orificiul unei pungi din material plastic sterile
- urina colectat se transfer aseptic ntr-un recipient steril cu capac nurubabil

c. Prelevarea urinii de la copiii mici (1-3 ani), care nu coopereaz


Olia proprie a copilului se spal bine, se dezinfecteaz i se aeaz recipientul colector
steril deschis n interior. Copilul s nu ating cu tegumentele recipientul.
Dac prin aceast metod n mod repetat se obin rezultate neconcludente se recomand
puncie suprapubian.

d. Prelevarea urinii prin cateter permanent


Recoltarea urinii la cei cu cateter permanent nu se efectueaz de rutin ci numai la pacienii
simptomatici, deoarece tratamentul antibacterian i antifungic la asimptomatici nu este indicat.
Candiduria la asimptomatici se rezolv la schimbarea cateterului. Tratamentul candiduriei este
necesar doar dac persist dup schimbul de cateter i pacientul este simptomatic.
Procedura recoltrii:
- nainte de recoltare cu 30 de minute se comprim tubul pentru a asigura umplerea vezicii
- se dezinfecteaz cateterul cu alcool 70 sau iod, se puncioneaz tubul
- se extrage cantitatea corespunztoare n sering, urina obinut se transfer n recipient
steril cu capac filetat, se transport la laborator.
Practici greite:
- colectarea urinii din punga cateterului
- recoltare prin captul drenului dup detaarea pungii poriunea distal a tubului de cele
mai multe ori este contaminat, cultivndu-se mai multe specii bacteriene, fr a fi asociate
cu ITU la bolnavul respectiv;

42
- trimiterea varfului de cateter pentru examen bacteriologic
- prelucrarea extensiv a acestor probe de urin recoltate incorect duce la consum de
materiale i timp nejustificat i implicit la tratamente antibiotice abuzive.

2. Urin obinut prin sondaj vezical


- se colecteaz urina ntr-un recipient steril imediat dup introducerea unui cateter nou
Dezavantaj: risc de infecie (1% pacieni n ambulator, pn la 10% la pacieni spitalizai)
Indicaie: pacieni necooperani, pacieni care nu micioneaz din cauze neurologice sau
urologice, pacieni cateterizai pentru explorri urologice.

3. Urin colectat n mod aseptic - Puncia suprapubian


Reprezint produsul optim pentru prelucrare bacteriologic, n urma punciei suprapubiene
se exclude contaminarea uretral. Ofer cea mai buna predicie pozitiv a ITU de la un numr
de germeni de 102 /ml n sus. Practic orice germen izolat din urina recoltata in acste mod poate
avea semnificaie clinic.
Indicaii:
- rezultate echivoce la examinarea repetat a urinii obinute din jetul mijlociu (nou-nscui,
sugari, femei adulte)
- detectarea germenilor anaerobi
- pacieni necooperani
Procedura:
- pacient hidratat corespunztor
- i reine urina pn cnd se detecteaz matitate vezical, palparea regiunii declaneaz
nevoia micionrii urgente
- pregtirea tegumentului: depilare (la nevoie), antisepsie
- puncionare deasupra simfizei pubiene (3,5 cm) cu sering de 10 ml i ac de 22G
- urina se transfer ntr-un recipient steril
Incidente posibile: hematurie de scurt durat

6.10 Dac se anticipeaz ntrzierea transportului/prelucrrii probelor de urin, se


refrigereaz la 4-8C!

Prelevarea i transportul materiilor fecale n vederea coproculturii

Gastroenterita acut infecioas poate fi cauzat de un numr mare de microorganisme: bacterii,


parazii, virusuri. Coprocultura nu reuete ntotdeauna s identifice patogenii enterali, de aceea se
ridic problema cost-eficienei acestei analize i se pune ntrebarea la ce categorie de pacieni
merit efectuat. Din considerente pur clinice ar fi indicat, s se efectueze coprocultur doar la

43
pacienii la care rezultatul ar putea modifica atitudinea terapeutic. La aduli, n majoritatea
cazurilor, pn la aflarea rezultatului coproculturii pacientul este vindecat (existnd i posibilitatea
de a deveni purttor sntos), ns n cazul n care se renun la aceast analiz, ar fi mpiedicat
urmrirea epidemiologiei gastroenteritelor.
Se recomand efectuarea coproculturii n urmtoarele situaii:
- gastroenterite de tip inflamator, n cazuri de gravitate medie (6-10 scaune/zi + alte
simptome) i crescut (peste 10 scaune/zi)
- gastroenterit prelungit peste 3 zile
- prezena unor factori ce favorizeaz agravarea:
o prematuri, nou-nscui, persoane n vrst
o imunodeficien, hypo- aclorhidrie (vagotomie, stomac operat, anemie pernicioas),
boli enterale cronice, anevrism de aort, boli valvulare, diabet, insuficien renal,
boli autoimune
o tratamente imunosupresive, steroizi administrai sistemic, diuretice, ACE ,
Examenul bacteriologic de rutin urmrete prezena patogenilor enterali comunitari: Salmonella
spp, Shigella spp. Escherichia coli enteroinvaziv, Campylobacter spp., E. coli O157/H7
(Escherichia coli enterohemoragic). La copii sub un an se caut de rutin prezena E. coli
enteropatogen. La copii sub 12 ani, in perioada iernii, se va cultiva Yersinia enterocolitica.
La cerere (manifestare clinic sugestiv) se investigheaz prezena Yersinia enterocolitica, Vibrio
cholerae, toxine de Clostridium difficile, antigene virale de rotavirus i adenovirus. Orice cerere n
afar de cele menionate mai sus, se noteaz n cerere!
Diareea aparuta dupa 48 de ore de la internare de regula nu se datoreaza patogenilor enterali
comunitari, cultivarea acestora nu este recomandata. Acestea fiind de obicei infecii post tratament
antibacterian, infecii nosocomiale sa va recomanda detectia toxinei A i B Clostridium difficile.

6.11 Mom entul, ritm ul i tehnica prelevrilor

- Scaunul emis spontan se recolteaz ct mai precoce dup debutul bolii (n primele 3 zile de
boal germenii sunt prezeni n numr cel mai mare). Scaunul emis spontan se reine ntr-
un vas curat i uscat, avnd grij s nu se amestece cu urina. Se ridic cu ajutorul linguriei
coprorecoltorului cantiti mici de materii fecale, aproximativ egale cu cantitatea mediului
de transport, din mai multe locuri, mai ales din zonele ce prezint modificri (mucus,
snge, puroi), ce nu s-au atins de vasul colector i se introduc n coprorecoltoare cu mediu
de transport Cary-Blair. Materiile fecale trebuie s ajung n mediul de transport i s se
amestece cu acesta, materiile fecale s nu rmn pe suprafaa mediului de transport. Este
important, pentru c trecerea pe mediile de cultur trebuie fcut din mediul de transport i
nu din materiile fecale aflate deasupra (de multe ori este imposibil de scos din mediul de
transport produsul recoltat din cauza cantitii exagerate n aceste situaii produsul va fi
refuzat, practic mediul de transport nu i poate ndeplini rolul!).
- Pot fi cerute 2 examene bacteriologice n zile consecutive pentru a crete sensibilitatea

44
detectrii patogenilor (fiecare prob se trimite n ziua recoltrii, nu se adun!). Repetarea
coproculturii nu are sens naintea obinerii rezultatelor primelor dou analize.
- n cazul n care nu se poate obine scaun, se pot recolta materiile fecale cu ajutorul unui
tampon adecvat. Se introduce tamponul intrarectal la 10 cm de la orificiul anal, dup care
se introduce n mediu de transport Amies.
- Pentru cultivare de Neisseria gonorrhoeae se recolteaz produsul cu tampon inserat
intrarectal i se introduce n mediul de transport Amies cu crbune. Se noteaz pe cerere:
cultivare GC
- Pentru deetectare de toxine, antigene se recolteaza in coprorecoltor fara mediu de transport
(in jur de 1 ml)

6.12 Determ inarea portajului e nteral al diferiilor germ eni

La laboratorul de microbiologie se urmrete de rutin portajul de Salmonella, Shigella.


La cerere se poate detecta portaj rectal de streptococ grup B la gravide, n completarea
screeningului portajului vaginal, recoltarea n acest caz se efectueaz cu ajutorul tamponului
inserat intrarectal.
n scop epidemiologic n cadrul supravegherii infeciilor nosocomiale poate fi urmrit la pacieni
portajul enteral de enterococ vancomicino-rezistent, enterobacterii (E. coli, Klebsiella spp)
productoare de -lactamaze cu spectru extins. Orice iniiativ privind aceste screeninguri trebuie
discutat cu SPCIN (Serviciul de Prevenire si Combatere a In fectiilor Nosocomiale) iar produsele
se direcioneaz ctre laboratorul de microbiologie SPCIN.
Pentru evidenierea portajului de Salmonella materiile fecale se recolteaz dup administrarea unui
purgativ. Se rein probe din materiile fecale de consisten lichid, pe mediu de transport.
Pentru evidenierea speciilor de Shigella, i a germenului Escherichia coli enteroinvaziv se
recolteaz materiile fecale cu ajutorul sondei Nelaton introdus intrarectal, peste 10 cm.

Prelevarea i transportul sngelui n vederea hemoculturii

Indicaii pentru efectuarea hemoculturii:


- nou-nscui, sugari, pacieni imunocompromii la orice vrst cu semne clinice sugestive,
chiar minime
- septicemie
- endocardit infecioas
- sindrom sugestiv pentru infecie sistemic cu germeni specifici (Salmonella Typhi, S.
Paratyphi, bruceloz)
- sindroame febrile cu etiologie neelucidat
- infecii care se asociaz cu bacteriemie (pneumonie, meningit, pielonefrite acute, infecii

45
puerperale, angio-colecistite, artrite septice, infecii ale arsurilor i plgilor)
- stri febrile dup intervenii chirurgicale pe intestin, focare infecioase cronice, cateterism
venos prelungit, dializ peritoneal.
Hemoculturile se efectueaz n sistem automat BactAlert. Recoltrile se efectueaz n flacoane
speciale:
1. Flacon BactAlert aerob pentru aduli, cod albastru
2. Flacon BactAlert anaerob pentru aduli, cod mov
3. Flacon BactAlert aerob pentru aduli cu inhibitor de antibiotic, cod verde
4. Flacon BactAlert anaerob pentru aduli cu inhibitor de antibiotic, cod portocaliu
5. Flacon Pedi-Bact pentru copii cu/fr tratament antibiotic, cod galben nu permite
detectarea germenilor strict anaerobi
Flacoanele se pstreaz la temperatura camerei, ferite de lumin. nainte de folosire se verific
data expirrii. Flacoanele cu inhibitor conine crbune, acestea se depun la fundul eprubetei,
lichidul de deasupra trebuie s fie limpede. La agitare crbunele tulbur mediul.

Momentul, ritmul recoltrii:


- Rezultatul este influenat de terapia cu antibiotice n curs. Recoltarea se efectueaz naintea
nceperii tratamentului, sau dac acest lucru este imposibil, recoltarea se face nainte de
doza urmtoare, n flacoane cu inhibitor de antibiotic. Meniune: n cazul recoltrii n
timpul antibioterapiei sensibilitatea detectrii germenilor din flacoanele cu inhibitor este
ceva mai mare dect din cele fr inhibitor, dar mai mic dect naintea nceperii
tratamentului!! Posibile rezultate fals negative!
- La pacienii febrili se recolteaz n perioada creterii temperaturii, nainte sau ct de repede
de la nceputul frisoanelor, cnd germenii sunt cel mai viabili i se gsesc cu mai mare
probabilitate n cantitate detectabil n snge. n endocardite infecioase recoltarea nu este
legat de un anumit moment al zilei (bacteriemie continu ) se recolteaz 3 seturi de
hemoculturi la intervale de 30-60 de minute.
- Un set de hemocultur const din recoltarea sngelui dintr-o singur puncie venoas,
repartizat n flacoanele aerob i anaerob. Recoltarea se repet dup 15-20 de minute. Se
recolteaz minimum 2, maximum 3 seturi de hemocultur naintea nceperii tratamentului
din locuri de puncie diferite. Recoltrile multiple cresc sensibilitatea detectrii iar n cazul
germenilor condiionat patogeni depistarea din dou seturi succesive confirm implicarea
lor n patologie. Poate fi indicat repetarea hemoculturii n cursul terapiei doar n cazul
unui eec terapeutic.
- n caz de bacteriemie legat de cateter se recomand recoltarea simultan din cateter i o
ven periferic pentru compararea rezultatelor. Dac se cultiv germeni numai din sngele
recoltat prin cateter septicemia legat de cateter este puin probabil, ns cateterul este

46
colonizat i se indic schimbarea acestuia. Pe flacon se noteaz, de unde s-a recoltat
sngele!

Metodologia recoltrii:
- Tegumentele se antiseptizeaz cu tinctur de iod, se ateapt s se usuce. Se terge
suprafaa iodat cu alcool 70%. Se las s se usuce.
- Se ndeprteaz protectorul de pe flacoane (BactAlert aerob i anaerob sau Pedi-Bact), se
dezinfecteaz cauciucul cu 70% alcool.
- Se recolteaz cu ac (19 sau 21G) i sering ntre 10-20 ml (ntre 5-10 ml pentru flaconul
aerob i tot att pentru cel anaerob) pentru aduli. Pentru copii se recolteaz 1-3 ml de
snge.
- Se evacueaz aerul din sering i se injecteaz aseptic coninutul n flacoanele de
hemocultur (la copii Pedi-Bact), avnd grij, s nu se introduc cantitate mai mare (exist
presiune negativ n flacon) dect cel recomandat. n cazul n care se recolteaz aerob i
anaerob, nti se introduce n flaconul anaerob i cu un ac schimbat n cel aerob (aerisire).
- Atenie! Nu se introduc cantiti mai mari de 10 ml n flacoanele pentru aduli i mai mult
de 3 ml n flacoanele pediatrice!
- Proba se transport imediat la laborator i se incubeaz nsoit de cererea de analiz
completat corespunztor, pe care se lipete codul de bare al flacoanelor.
- Menionai numr de telefon interior la care pot fi raportate rezultatele preliminare!
- n cazul n care transportul se prelungete, nu refrigerai flacoanele, acestea se pstreaz
la temperatura camerei (maximum 4 ore)! Hemoculturile recoltate n afara
programului de funcionare a laboratorului de microbiologie se trimit la laboratorul
de urgen.

Cereri speciale
- n cazuri speciale flacoanele PediBact pot fi folosite pentru cultivarea altor produse (lichid
cefalo-rahidian, lichid pleural, ascitic, secreii purulente) NOT: aceste medii de cultur
cresc sensibilitatea cultivrii ns nu ofer nici un avantaj privind identificarea germenilor,
nu reduce durata diagnosticului. Automatul doar semnaleaz creterea bacterian,
identificarea n continuare se face cu metode convenionale!
- n cazul n care se trimite alt produs dect snge, se noteaz pe bilet!

47
Vrfuri de catetere intravasculare

Catetere intravasculare: cateter venos central, CVP, Hickman, Broviac, arteriale, periferice,
ombilicale, de hemodializ, Swan-Ganz, port-a-cath.
Dup ndeprtarea cateterului cu o foarfec steril se secioneaz aprox. 4 cm din captul de
cateter i se las s cad ntr-un recipient steril (eprubet sau recipient de unic folosin cu capac
nurubabil), avnd grij s nu se ating de nimic.

Examinarea bacteriologic n infeciile orificiului percutanat al cateterelor


intravenoase, venoase centrale (probe exit site cateter)

Infeciile din jurul cateterelor inserate percutanat pot duce la bacteriemii, septicemii. n cazul unor
semne locale de inflamaie se terge marginea inflamat a orificiului cu un tampon steril, se
introduce n mediu de transport.

3. Prelevarea i transportul lichidului cefalorahidian


Diagnosticul bacteriologic al meningitelor bacteriene se bazeaz pe examinarea lichidului
cefalorahidian. Recoltarea lichidului cefalorahidian se face prin puncie lombar, n condiii stricte
de asepsie. Astfel se exclude pe de o parte contaminarea probei, pe de alt parte se previne infecia
nosocomial a pacientului.
n vederea examenului bacteriologic se colecteaz 4-5 ml de lichid cefalorahidian, preferabil n
recipiente sterile de unic folosin cu capac nurubabil.
Recoltarea se anun cu cel puin 30 de minute nainte pentru pregtirea mediilor de cultur.
Transportul probei se face imediat. Este interzis refrigerarea probelor. Crete sensibilitatea
detectrii bacteriilor, dac imediat dup recoltare se nsmneaz o pictur pe mediul de cultur
adecvat i prenclzit la 37C.

4. Prelevarea i transportul diferitelor exudate ale seroaselor n vederea


examenului bacteriologic
La recoltarea acestor produse trebuie respectate strict regulile de asepsie, antisepsie.
Probele nu se refrigereaz! Recoltarea se anun cu cel puin 30 de minute nainte pentru
pregtirea mediilor de cultur.

Secreia pleural

Lichidul pleural se recolteaz prin aspiraie percutanat. Lichidul pleural obinut prin drenaj se
prelucreaz diferit, de aceea trebuie menionat pe bilet, cum s-a efectuat recoltarea!
Se colecteaz n recipiente sterile, de preferin de unic folosin cu capac nurubabil.

48
Lichidul ascitic

Se recolteaz prin aspiraia percutanat n condiii aseptice sau n cursul laparatomiei n recipiente
sterile, de preferin de unic folosin cu capac nurubabil.
Recoltarea a peste 10 ml crete sensibilitatea detectrii bacteriilor.

Lichid articular, lichid pericardic


Se recolteaz prin aspiraie, n condiii aseptice.

5. Prelevarea i transportul secreiilor genitale


Produse patologice prelevate n infeciile genitale la femei
1. Vaginite
a. se aspir secreia din fundul de sac vaginal i se introduce n mediu de transport
pentru anaerobi, aerobi separat, sau
b. cu ajutorul unui tampon se colecteaz secreii din fundul de sac vaginal; tamponul
se introduce n mediu de transport Amies (dac se cere i cultivare de anaerobi, se
recolteaz 2 tampoane, ambele se introduc n mediu de transport Amies)
c. se efectueaz dou frotiuri, dup uscare se mpacheteaz n hrtie separat de biletul
de trimitere
2. Cervicite
a. se ndeprteaz cu un tampon steril mucusul de la nivelul cervixului, cu un al
doilea tampon se recolteaz produsul patologic prin introducerea i rotirea n
canalul cervical
b. se introduce n mediu de tranport Amies cu crbune (cultivare de Neisseria
gonorrhoeae)
! evitarea contaminrii probei cu flora vaginal
c. se efectueaz dou frotiuri
3. Recoltare de la fetie
a. un tampon subire de recoltare se introduce prin himenul vaginal, se introduce n
mediul de transport Amies
b. cu ajutorul unui cateter se spal cu 2 ml ser fiziologic steril, se colecteaz lichidul
de spltur
c. 2 frotiuri
4. Produse din endometrite, lohii, lichid amniotic
a. aspirat din endometriu (lohii, lichid amniotic) transferat n mediu de transport
pentru anaerobi; pentru aerobi se aspir n recipient separat
b. se transport imediat la laborator
c. lohiile recoltate cu tampon sunt adecvate numai cultivrii aerobilor

49
5. Inflamaii pelviene
a. secreii obinute prin puncie (Douglas, anexe) sau intraoperator se introduc n
medii de transport pentru anaerobi i aerobi
b. pentru depistarea infeciei cu Actinomyces asociat cu sterilet se recolteaz aspirat
endometrial i se transport n mediu de transport pentru anaerobi; steriletul
eliminat se trimite de asemenea n mediu de transport pentru anaerobi.
6. Cereri speciale
a. Pentru evidenierea unei infecii cu Listeria se procedeaz n mod obinuit, probele
se pot pstra la frigider
b. Screening la gravide se noteaz pe bilet! Se urmrete colonizarea cu
Streptococcus agalactiae. Se recolteaz secreie anal i secreie vaginal din
treimea inferioar a vaginului.
Produse patologice recoltate n infeciile genitale la brbai
1. Uretrite
a. se recolteaz secreie uretral dimineaa, nainte de miciune cu tampon steril, se
introduce n mediu de transport
b. se efectueaz dou frotiuri, dup uscare se mpacheteaz
2. Prostatite
a. se antiseptizeaz glandul
b. se recolteaz secreie uretral dup masaj prostatic
c. sperm colectat n recipient steril
3. Orhite, epididimite
a. punctate
b. produse obinute intraoperator (recipient steril, mediu de transport)
Detectarea unor bacterii greu cultivabile sau necultivabile
1. Detectare de antigene Chlamydia (n perspectiv)
- se recolteaz din canalul cervical sau uretr
- pacientul i ine urina 1-2 ore
- cu un tampon steril se terge mucusul de la orificul cervical/uretral
- tamponul special de recoltare se introduce la 1-1,5 cm intracervical / la 2-4 cm intrauretral
i se rotete 5-10 secunde (este esenial s se obin celule epiteliale, Chlamydia fiind un
germen intracelular!)
- se extrage uor tamponul, evitnd contactul cu regiunile adiacente
- tamponul se introduce n mediul de transport special
2. Mycoplasma, Ureaplasma (n perspectiv) pot fi detectate din secreie cervical, secreie
prostatic, urin. Recoltarea se face n mediu de transport adecvat.

50
3. Neisseria gonorrhoeae s ecolecteaz secreie cervical, produsul se trimite n mediu de
transport la laborator. n lipsa mediilor de transport produsul se nsmneaz la locul
recoltrii pe medii speciale prenclzite la 37C i trimise la laborator.
4. Mycobacterium tuberculosis se colecteaz snge menstrual sau secreii de 24 de ore,
raclaj uterin produsele se trimit la laboratorul BK de la Clinica de Pneumoftiziologie.

6.Secreii oculare
6.12.1.1.1 Conjunctivit
1. Se terge cu un tampon mucoasa conjunctival, innd pleoapele deschise i evitnd
atingerea genelor. Se recomand recoltarea a dou probe.
2. Raclaj conjunctival
6.12.1.2 Dacrocistita acut
1. Cu un tampon umed se terge conjunctiva.
2. n caz de aspiraie percutanat, sau se efectueaz incizie se recolteaz secreie cu ac i
sering.

7 Referine bibliografice

Frances Fischbach A Manual of Laboratory Diagnostic Tests, Ed. II-A, Lipincott, 1984, p.4-
6, 110-113, 207-209.
RoEQALM Al 2-lea seminar privind Asigurarea i Controlul Calitii n Medicina de
Laborator, Bucureti, Nov 2003.
W.G. Guder Samples: from the Patient to the Laboratory - The impact of preanalytical
variables on the quality of laboratory results, GIT VERLAG, 1996.
L.A. Kaplan, A.J.Pesce Clinical Chemistry: Theory, analysis and correlation, Mosby
Company, 2012.

51
Cuprins
1. Recoltarea probelor biologice pentru investigatii biochimice, hematologice, imunologice si
de biologie moleculara ......................................................................................... 2
1.1 Solicitarea analizelor ................................................................................ 2
1.1.1 Cine solicit analizele de laborator ? ........................................................ 2
1.1.2 Unde se solicit analizele de laborator ? .................................................... 2
1.1.3 Cnd se solicit analizele de laborator ? .................................................... 3
1.1.4 Cum se solicit analizele de laborator ? .................................................... 3
1.1.5 Cine anun/pregtete pacientul pentru recoltarea probei biologice? ................. 3
1.1.6 Cine face recoltarea probei biologice ? ..................................................... 4
1.2 Colectare - tehnic ................................................................................... 4
1.2.1 Colectoare ....................................................................................... 4
1.2.2 Tehnica recoltrii cu sistemul vacutainer (Fig.2) .......................................... 5
1.3 Proba Biologic ...................................................................................... 5
1.3.1 Sngele Explorarea matricei proteo-saline ............................................... 5
1.3.2 Sngele - Explorarea elementelor celulare ale sngelui .................................. 7
1.3.3 Recoltarea urinei ............................................................................... 8
1.3.4 LCR .............................................................................................. 9
1.4 Transportul probelor biologice .................................................................... 9
1.4.1 Transportul probelor de snge................................................................ 9
1.5 Triere primar i distribuie pe departamente/compartimente; criterii de respingere .....10
1.5.1 Criterii de respingere a produselor patologice ............................................11
1.6 Prelucrarea primar.................................................................................11
1.6.1 Criterii de respingere a produselor patologice la prelucrarea primara.................13
1.7 Stocarea probelor ...................................................................................14
2 Factori care afecteaz rezultatul n faza de recoltare a lichidelor biologice.....................15
2.1 Ingerarea de alimente nainte de recoltare duce la valori crescute:..........................15
2.2 nfometarea ..........................................................................................15
2.3 Ingestia de alcool ...................................................................................15
2.3.1 Ingestia acut de alcool (2-12 ore nainte de recoltare)..................................15
2.3.2 Ingestia cronic de alcool ....................................................................15
2.4 Trecerea din clino- n ortostatism duce la creteri: ............................................15
2.5 Aplicarea prelungit a garoului nainte de recoltarea sngelui ...............................16
2.6 Activitatea fizic ....................................................................................16
2.7 Variaii diurne semnificative se pot observa la determinrile: ...............................16
2.8 Recoltri de pe catetere ............................................................................16
2.9 Fumatul ..............................................................................................16
2.9.1 n dimineaa recoltrii ........................................................................16
2.9.2 Cronic ...........................................................................................17
2.10 Interferene medicamentoase ...................................................................17
2.11 Aspecte particulare legate de tehnica de recoltare ..........................................17
2.11.1 Parametrii biochimici pot fi influenai de: ................................................17
2.11.2 Parametrii hematologici pot fi influenai de: .............................................18
2.11.3 Testele de coagulare pot fi influenate de: .................................................18
3 Factori care afecteaz rezultatul n faza de transport i stocare a materialelor biologice .....18
3.1 Factori care influeneaz parametrii biochimici-imunologici ................................18
3.2 Factori care influeneaz parametrii hematologici .............................................19
3.3 Factori care influeneaz parametrii hemostazei ...............................................19

52
3.4 Stocarea (vezi tabelul 5) ...........................................................................19
4 Factori care afecteaz rezultatul n faza de analiz propriu-zis ..................................20
4.1 Hemoliza .............................................................................................20
4.2 Hiperbilirubinemia .................................................................................20
4.3 Lipemia ..............................................................................................20
5 Influena unor factori biologici asupra rezultatelor .................................................20
5.1 Vrsta .................................................................................................20
5.1.1 La nou-nscut ..................................................................................20
5.1.2 n copilrie / adolescen .....................................................................21
5.1.3 La adult .........................................................................................21
5.2 Sexul ..................................................................................................22
5.3 Sarcina ...............................................................................................23
5.4 Ciclul menstrual ....................................................................................24
5.5 Intervenii chirurgicale .............................................................................24
6 Recoltarea produselor biologice n vederea examenului bacteriologic ..........................24
6.1 Solicitarea analizelor ...............................................................................24
6.1.1 Programul de funcionare a compartimentului de microbiologie din cadrul
Laboratorului de Analize Medicale ...................................................................24
6.2 Lista examinarilor efectuate n Laboratorul de Microbiologie ...............................27
6.2.1 Examen microscopic: .........................................................................27
6.2.2 Cultivare: .......................................................................................27
6.2.3 Testarea sensibilitii la antibiotice .........................................................28
6.3 Reguli generale de recoltare a produselor patologice i biologice n vederea examenului
bacteriologic .................................................................................................29
6.3.1 Alegerea produsului corespunztor .........................................................29
6.3.2 Momentul prelevrii ..........................................................................29
6.3.3 Ritmul prelevrii ..............................................................................29
6.3.4 Recoltarea se face aseptic ....................................................................30
6.3.5 Cantitate ........................................................................................30
6.3.6 Instrumente de prelevare, recipiente pentru recoltare i transport .....................30
6.3.7 Control dup instituirea tratamentului antibacterian .....................................30
6.4 Msuri de protecie n cursul recoltrii produselor biologice n vederea examenului
bacteriologic .................................................................................................31
6.5 Transportul i conservarea probelor .............................................................31
6.6 Criterii i procedura de respingere a probelor ..................................................32
Tabel 2. Criteriile refuzrii produselor biologice i procedura aplicat ............................33
6.7 Prelevarea diferitelor produse biologice n vederea examenului bacteriologic ............35
6.7.1 Prelevarea puroiului ..........................................................................35
6.7.2 Abcese ..........................................................................................35
6.7.3 Fistule ...........................................................................................35
6.7.4 Puroi prelevat din arsuri, plgi, leziuni superficiale (escare, ulceraii, episiotomie) 36
6.7.5 Biopsii de tegument ...........................................................................36
6.7.6 Recoltarea puroiului prin tub de dren ......................................................36
n afara programului de funcionare puroaiele aspirate, cele recoltate pe tampon fr mediu de
cultur se trimit imediat la laboratorul de urgen. ....................................................36
6.8 Prelevarea i transportul exsudatelor cilor respiratorii superioare .........................36
6.8.1 Exudat faringian ...............................................................................36
6.8.2 Secreie nazal .................................................................................37
6.8.3 Secreia nazo-faringian .....................................................................37
6.8.4 Puroiul sinuzal .................................................................................38
6.8.5 Exudate otice ..................................................................................38

53
6.8.6 Secreie epiglotic.............................................................................38
6.8.7 Abcese ale cavitii bucale ...................................................................38
6.8.8 Tampoane orale ...............................................................................38
6.9 Recoltarea i transportul secreiilor cilor respiratorii inferioare ............................39
6.9.1 Sputa (inclusiv probele obinute prin tub endotraheal, traheostomie) .................39
2. Prelevarea i transportul urinii .........................................................................40
6.10 Dac se anticipeaz ntrzierea transportului/prelucrrii probelor de urin, se
refrigereaz la 4-8C! ......................................................................................43
Prelevarea i transportul materiilor fecale n vederea coproculturii ....................................43
6.11 Momentul, ritmul i tehnica prelevrilor .....................................................44
6.12 Determinarea portajului enteral al diferiilor germeni ......................................45
Prelevarea i transportul sngelui n vederea hemoculturii ..............................................45
Vrfuri de catetere intravasculare ...........................................................................48
Examinarea bacteriologic n infeciile orificiului percutanat al cateterelor intravenoase, venoase
centrale (probe exit site cateter) .............................................................................48
3. Prelevarea i transportul lichidului cefalorahidian ..................................................48
4. Prelevarea i transportul diferitelor exudate ale seroaselor n vederea examenului
bacteriologic ....................................................................................................48
Secreia pleural ............................................................................................48
Lichidul ascitic ..............................................................................................49
5. Prelevarea i transportul secreiilor genitale .........................................................49
6.Secreii oculare ..............................................................................................51
7 Referine bibliografice ..................................................................................51

54