L6 (An1-sem1) Specimene biologice.

Pregătirea materialului biologic în vederea

analizelor de laborator. Centrifugarea în laboratorul clinic
 In cartea de lucrari practice Centrifugarea este la pg. 53, iar Specimene biologice.Pregătirea
materialului biologic în vederea analizelor de laborator la pg.170.

 Obţinerea plasmei sanguine:

 Plasma este un lichid de culoare alb-gălbuie care se obţine prin centrifugarea sângelui proaspăt
recoltat prin punctie venoasa intr-un vacuteiner cu anticoagulant (citrat de sodiu 3,8% sau
heparinat de litiu 75mUI/mL, in raport anticoagulant/sange=1/9).
 Centrifugarea se face:
- 5-10 min la 2000-2500rpm (pentru BCH) si
- 15-20 min la 1500rpm (pentru Coagulare = plasma bogata in trombocite)!
 Se obtine: supernatantul = PLASMA si sedimentul este constituit din elementele figurate ale
sangelui:
PLASMA = sânge - elemente figurate
 Obţinerea serului sanguin:
- Serul este un lichid limpede de culoare galben aurie.
- Sângele recoltat intr-un vacuteiner fără anticoagulant, lăsat la temperatura camerei
(salonului, laboratorului) aprox. 20-30 min, coagulează spontan.
- Se formează cheagul (gelul de fibrinogen) care include şi elementele figurate. Cheagul se
desprinde cu o baghetă de sticlă de pe pereţii eprubetei pentru ca are loc retracţia cheagului.
- Centrifugarea se face 5-10 minute la 2000-2500 rpm
- Se obtine: supernatantul = SER si sedimentul este constituit din elementele figurate şi fibrina.
- Spre deosebire de plasmă, serul NU conţine fibrinogen.
SER = PLASMA - fibrinogen
Vacutainere pentru recoltarea probelor de sange.
Nr. Tipul de dop Caracteristici Utilizare
crt. (culoare)
1. VERDE - cu subst. Anticoagulanta Plasma - BIOCHIMIE URGENTA (toti
Heparinat de Litiu metabolitii, electrolitii si toate enzimele cu
(75mUI/mL) exceptia amoniacului si a fosfatazei acide)
- SE CENTRIFUGHEAZA
5min/2500rpm
2. ALBASTRU - cu subst. Anticoagulanta Plasma ,,bogata in trombocite’’ - FACTORI
Citrat de Na 3.8% AI COAGULARII (FIB, TQ, INR, APTT, PT)
- SE CENTRIFUGHEAZA
15min/1500rpm
3. MOV - cu subst. anticoagulanta Sange – HEMATOLOGIE- Hemoleucograma
EDTANa2 (sau K3) HLG si HbA1c-Hemoglobina glicozilata)
- NU SE CENTRIFUGHEAZA
4. ROSU; - fara subst. Anticoagulanta ± Ser - BIOCHIMIE (uree, creatinina, acid uric,
GALBEN gel accelerator de fibrina bilirubina, glucoza, colesterol, trigliceride, etc.).
- SE CENTRIFUGHEAZA - IMUNOLOGIE (markeri imunologici,
5min/2500rpm tumorali, hormoni)
5. NEGRU - cu subst. Anticoagulanta Sange - VSH
Citrat de Na 3.8%
- NU SE CENTRIFUGHEAZA
6. GRI - cu subst. Anticoagulanta Plasma – BIOCHIMIE: det. Glicemiei atunci
Florura de Na 1% cand trec mai mult de 3 ore de la recoltare pana
- SE CENTRIFUGHEAZA la determinare)
5min/2500rpm

1
Lucrare practica:
1. Vizualizarea vacuteinerelor cu sange pacienti (fara deschiderea dopurilor)!
2. Deproteinizarea plasmei cu TCA (acid tricloracetic 1%):
Scopul: determinarea aminoacizilor pentru diagnosticarea bolilor metabolice congenitale:
Tehnica de lucru:
- intr-o eprubeta de centrifugare se pipeteaza: 3 mL plasma + 0.5mL TCA 1%;
- se omogenizeaza;
- apoi se echilibreaza la balanta cu o alta eprubeta de centrifugare cu apa;
- se centrifugeaza 10 min la 2000 rpm in echilibru;
- se obtine: sediment (lipoproteinele si proteinele plasmatice precipitate) + supernatant =
plasma deproteinizata care va fi folosita in diagnosticarea unor boli metabolice congenitale.

In atentia cadrelor didactice!

 Toate vacuteinerele si materialele de recoltare se predau dupa terminarea lucrarilor la d-na
laboranta!
 NU se deschid dopurile vacuteinerelor cu sange de la pacenti!
 Pentru lucrarea practica deproteinizarea plasmei cu acid tricloracetic 1%: plasma este pipetata 3mL
in fiecare eprubeta de centrifugare urmand ca studentii sa adauge 0.5mL TCA 1% cu PIPETA
AUTOMATA!!, sa echilibreze si sa centrifugheze probele!
 Pentru fiecare grupa de studenti exista 1 proba de plasma!