Raport de practic

Numele i prenume studentului: Petenciuc Elena Diana

Universitatea/Facultatea: Universitatea de tiinte Agronomice i Medicin Veterinar / Facultatea
de Biotehnologii, Bucureti
Instituia i departamentul n care a desfsurat stagiul de pregtire practic: Compania de
Cercetri Alimentare i Investiii (C.C.A.I), Bucureti
Domeniul de activitate: Microbiologie Alimentar
Date de contact instituie: Str. Spl. Independenei, nr 202, Sector 6, Bucureti
Perioada i durata stagiului de pregtire practic: 9-27 Iulie 2012, 90 ore
Tutore desemnat: Vtuiu Daniela
Responsabil de practic: Dnil Guidea Silvana

Structura raportului de practic

1. Obiectivele de practic
2. Activitile desfaurate
3. Observaii personale
4. Concluzii

1. Obiectivele de practic
a) Pregtire profesional n domeniul microbiologiei alimentare;
b) nsuire cunotiine microbiologice;
c) Preparare i sterilizare medii de cultur i reactivi;
d) Analize microbiologice conform standardelor n vigoare.

2. Activitile desfaurate
n aceast perioada de practic am avut ocazia de a m familiariza cu termenii
microbiologiei alimentare i de a efectua analize n acest domeniu. De asemenea, am avut ocazia
de a aplica toate cunotiinele nsuite n timpul anilor de studiu, sub ndrumrile profesorilor.
n continuare voi prezenta analizele efectuate n cadrul acestui laborator sub
supravegherea tutorelui i studierea acestora conform standardele n vigoare.
a) Repartizarea serului fiziologic n eprubete cu ajutorul Dispenserului (9 ml) i efectuarea
unor diluii zecimale.

b) Am efectuat

din

piept de pui expirat urmtoarele analize: NTG (Numr total de

germeni) i Escherichia coli.

Mod de lucru:
-

Se cntresc 10 g piept de pui peste care se adaug 90 ml ser fiziologic.

Se omogenizeaz cu ajutorul aparatului Smasher.

Se fac diluii zecimale ( E.coli 10-4 i NTG 10-4)

Se nsmneaz n plci cte 1 ml din fiecare diluie peste care se adaug mediu de

cultur pentru E.coli- TBX i NTG- PCA (cte 15 ml n fiecare plac)

Plcile pentru E.coli se incubeaz la 44C timp de 24 h, iar cele pentru NTG 37C timp
de 72 h.
Rezultat: E.coli: sub 10 colonii => ABSENT

Rezultat NTG (este admis pn la 300 de colonii): 10-3: 58 colonii i 10-4: 25 colonii

c) Am efectuat analize din carne tocat pentru: E.coli i Bacterii sulfitoreductoare.

Mod de lucru:
Pentru E.coli se efectueaz acelai n mod de lucru ca la proba de piept de pui dar s-au
fcut 3 diluii zecimale (10-3). Plcile pentru E.coli se incubeaz la 44C timp de 24 h.
Rezultat E.coli: 10-1: 11 colonii, iar la diluiile 10-2 i 10-3 nu s-au dezvoltat (culoare
verde-albastru)

Pentru bacterii sulfitoreductoare:

-

Se fac diluii zecimale 10-2 (1 g prob cu 9 ml ser).

Se inoculeaz n eprubete cu mediul ISA peste care se pune 1 ml prob din fiecare dilu ie

i o pictura de ulei de parafin.

Inactivarea eprubetelor: la 75C timp de 20 minute.
Incubare: 37C timp de 48 h.
Rezultat: Bacterii sulfitoreductoare: 1 colonie prezent (culoare neagr)

d) Am efectuat analize din ecler pentru: Staphylococ coagulazo - pozitiv, Bacillus cereus,
drojdii i mucegaiuri.
Mod de lucru:
- gri)

Pentru Staphylococ coagulazo pozitiv:

Se fac diluii zecimale (10-1)
Se nsmneaz n 3 plci, pe suprafaa mediului de cultur (Baird - Parker) cte 0,33 ml
din fiecare diluie zecimal (etalare cu ajutorul baghetei Drigalski)
Se incubeaz plcile la 37C timp de 48 h.
Rezultat: prezena unor colonii tipice i atipice pe suprafaa mediului selectiv (negre

Pentru confirmare:
De pe suprafaa fiecrei colonii selectate, se preia un inocul cu o ans steril ntr-o

eprubet cu bullion creier-inim (5-10 ml) i se las la incubat 24h la 37C.

Se adaug aseptic 0,1 ml din fiecare cultura la 0,3 ml plasm iepure n eprubete sterile de
i se incubeaz la 37C timp de 4-6 h.
Rezultat: prin rsturnarea eprubetei, se

constat nchegarea plasmei => pozitiv

-

Pentru Bacillus cereus:

Se nsmneaz pe 3 placi cte 0,33 ml din
fiecare diluie zecimal (10-1) pe mediul de
cultur selectiv MYP i se etaleaz cu ajutorul

baghetei Drigalski.
Se incubeaz plcile la 37C timp de 48 h.
Rezultat: absent

Pentru drojdii i mucegaiuri:

-

Se nsmneaz pe 2 placi cte 0,5 ml din fiecare

diluie zecimal (10-3) pe mediul de cultur selectiv

DG18 i se etaleaz cu ajutorul baghetei Drigalski.

Se incureaz plcile la 25C timp de 7 zie.
Rezultat:10-1: 508, 10-2: 63, 10-3:5 colonii

e) Am efectuat analize din mrar pentru Enterobacteriaceae

Mod de lucru:
- Se prepar suspensia iniial i diluiile specifice.
- Se inoculeaz n plci suspensia peste care se
-

toarn 15 ml mediu de cultur VRBG.

Se amestec cu grij mediul cu inoculul prin

nglobare.
Dup ce se rcete primul strat de mediu se mai toarn nc unul pentru a se creea

anaerobioz.
Dup solidificare, plcile se introduc n termostat la 37C timp de 24 h.

Apariia unor colinii roz spre rou sau purpuriu (cu /fr halouri)
Rezultat: 10-1 i 10-2 culturi atipice, 10-3: 70 colonii, 10-4: 15 colonii.

Pentru confirmare:
-

Din fiecare plac (diluiile -3 i -4) se aleg la ntmplare 5 astfel de colonii i se trec pe
mediu neselectiv.

Plcile se termostateaz.

Test de fermentaie:
-

Cu ajutorul ansei, cultura se racleaz i se rensmneaz n eprubete care conin agar cu

glucoz.

Eprubetele se incubeaz la 37C timp de 24 h.

Se confirm atunci cnd culoarea mediul din eprubete se schimb din mov n galben.

f) Am efectuat analize din ap de reea pentru: E.coli, Pseudomonas aeruginosa i

-

Enterococci intestinali.
Se filtreaz 100 ml ap de reea prin filtrul Milipore i o diluie cu 10 ml ap de reea.
Filtrul se aeaz pe mediul de cultur ( E.coli- Champan, Pseudomonas aeruginosa-

Pseudomonas agar i Enterococci intestinali- SLALENTZ i BARTLEY )

- Incubare 36C timp de 48 h.
Rezultat: absent

3. Observaii personale
Laboratorul de microbiologie se remarc prin organizarea i seriozitatea personalului,
care d dovad de o permanent implicare profesional i perseveren n realizarea analizelor de
microbiologie alimentar.
Laboratorul realizeaz ntreaga gam de analize microbiologice conform standardelor n
vigoare, pentru produsele agroalimentare i pentru ap. De asemenea acest laborator efectueaz
teste de sanitaie necesare n toate unitaile de producie dar i testarea microaeroflorei din
spaiile de producie.
Laboratorul de microbiologie este alctuit din :
-

Camera preparare medii de cultur

Camera sterilizare medii de cultur
Camera nsmnare
Camera nsmnare (hote, termostate)
Camera sterilizare infecte
Camera sterilizare sticlrie
Camera recepie marf
Camera de cntrire a probelor

4. Concluzie
Acest stagiu de practic efectuat la ICA Research & Development a fost foarte benefic n
dezvoltarea mea profesional i am reuit s-mi fixez cunotiine n domeniul microbiologiei
alimentare. De asemenea, am reuit s vd cum se desfoar activitatea din acest domeniu, ntrun colectiv cu personal calificat, foarte primitor i dornic de a m iniia ct mai mult n vederea

pregtirii mele profesionale. Prin urmare, am realizat faptul c mi-a dori s am o carier n acest
domeniu.