ANALIZA PESTICIDELOR DIN LEGUME I

FRUCTE

Studeni: Sndulescu Sandra Coordonator: Mihali Cristina

Cetean Ioana
Ce sunt pesticidele ?
Pesticidele sunt produse chimice (exceptnd medicamentele) folosite
pentru combaterea duntorilor plantelor i a produselor agricole stocate,
precum i pentru combaterea vectorilor biologici ai bolilor omului i
animalelor. Duntorii includ microbi, plante sau animale care concureaz cu
omul pentru hran, distrug proprietatea, difuzeaz boli sau reprezint o
calamitate.
Pesticidele sunt substane sau amestecuri de substane ce conin
ingrediente biologic active mpotriva duntorilor. Ingredientele biologic
active sunt, n general, substane toxice cu potenial de degradare a
mediului. Multe pesticide sunt toxice i pentru om. Din aceste motive
producerea, ambalarea, depozitarea, transportul i utilizarea pesticidelor
sunt reglementate prin lege.
 Termenul de pesticide este adesea utilizat ca sinonim cu
produsele pentru protecia plantelor (plant protection products-PPP), care
sunt utilizate, n principal, n agricultur pentru a preveni i combate
mbolnvirea i infestarea culturilor.
Regulatorii de cretere (utilizai pentru influenarea procesului de cretere
a plantelor) i erbicidele (care controleaz plantele nedoriteburuienile)
sunt cuprini i ei n categoria PPP din punctul de vedere al legislaiei UE.
Pesticidele utilizate la protecia culturilor, nainte i dup recoltare, pot fi
regsite ca reziduuri n produsele finale. Reziduurile de pesticide
reprezint orice substan sau amestec de substane existente n hrana
pentru oameni sau animale, rezultate din utilizarea pesticidelor.
Termenul include derivai specifici ai pesticidelor, cum sunt produi de
transformare sau degradare, metabolii, produi de reacie i impuriti, cu
semnificaie toxicologic.
Este necesar ca aceste reziduuri de pesticide s nu fie gsite n produse de
origine vegetal, alimente sau furaje la nivele care s reprezinte un risc de
mbolnvire pentru om.
 MATERIALE I METODE

Evoluia tehnicilor de analiz permite detectarea din ce n ce mai

uoar a moleculelor aflate n cantiti infinitezimale. Peste 800 de
substane active sunt formulate n mii de pesticide, aceste substane
formnd peste 100 de clase chimice dintre care cele mai importante
ar fi: benzoilureati, carbamai, compui organofosforici (OP),
organoclorurai (OC), piretroizi (PYR), sulfonilureai, triazine,
ditiocarbamai , azoli, fenoxi acizi. Proprietile lor fizice i chimice
difer foarte mult , fapt pentru care determinarea reziduurilor acestor
pesticide devine destul de dificil din orice matrice i cauzeaz
probleme n dezvoltarea unei metode universale de determinare
analitic a reziduurilor, ceea ce ar fi cel mai dorit lucru.
 A) EXTRACIA PESTICIDELOR DIN PROBELE DE ANALIZAT
Cele mai multe metode de pregtire a probelor pentru
determinarea gaz cromatografic (GC) i lichid cromatografic
(LC) include urmtorii pai:
1. Proba este omogenizat sau amestecat pentru a obine o
matrice uniform.
2. Aceasta va fi urmat de extracia cu solveni a reziduurilor de
pesticide.
3. O etapa de purificare este necesar uneori pentru a elimina
interferenele componentelor matricei Igienizator pe baza de
ozon pentru
4. Eluarea i / sau fracionarea analiilor extrai indepartarea
5. Concentrarea eluentului i reconstituirea ntr-un solvent care pesticidelor,
este compatibil condiiilor GC sau LC. microorganismelor etc.
6. n cele din urm, soluia care conine pesticide poate fi
introdus n
GC sau LC.
Primul pas n procesul de pregtire a probelor pentru analiz este obinerea unei
probe omogene i a unui amestec omogen.
Conform reglementrilor n vigoare legumele i fructele proaspete trebuie s fie
mrunite cel puin 5 minute ntr-un mixer vertical. Numeroase studii demonstreaz
ca omogenitatea probei i cantitatea probei supus analizei (10-25g) are influen
asupra reproductibilitii rezultatelor.
Numeroi solveni organici sau amestecuri de solveni sunt utilizai
pentru a extrage o mare varietate de pesticide cu proprieti fizico-
chimice diferite. Predominant n analizele multireziduale cei mai
utilizai solveni de extracie sunt acetonitrilul, acetona i acetatul de
etil, fiind utilizai att la nceputurile analizelor de reziduuri de
pesticide ct i n publicaii recente pentru extracia att a pesticidelor
nepolare ct i a celor polare dintr-o mare diversitate de matrici
agricole.Din fericire noile tehnologii dezvoltate reduc aceste deficiene
ale metodelor de extracie, parametrul de care se ine cont n
elaborarea acestora i care este essential este selectivitatea.
Dac iniial majoritatea pesticidelor erau analizate prin tehnica GC, n
ultimii ani tehnica LC ctig tot mai mult teren, iar detectorii clasici,
selectivi sunt nlocuii cu un detector universal, spectrometrul de
mas, care prezint caliti selective i de confirmare.
B) METODE DE ANALIZ A REZIDUURILOR DE PESTICIDE DIN PLANTE
I PRODUSE VEGETALE

n funcie de scopul determinrii, coninutul de pesticide poate fi o

analiz intit sau neintit. Un exemplu de analiza intit este
inspecia LMA-urilor n legume , fructe i alimente ; analiii relevani
sunt fixai a fi determinai n funcie de definirile date de
reglementrile LMA (limita maxim admis). Aceste definiri ale
pesticidelor trebuie s includ i metaboliii relevani sau produii de
degradare ai pesticidelor, ceea ce n regulamentele UE pentru fructe
i legume dar i pentru alimente nu sunt realizate n toate cazurile.
In cromatografia de gaze numit i gazcromatografie eluentul (un gaz inert din punct de vedere
chimic, ex. azot, heliu, hidrogen, .a.) trece prin dispozitivul de introducere a probei (unde proba
este volatilizat), o preia i o introduce n coloana cromatografic, care este sediul procesului de
separare.
Datorit interaciunilor dintre componenii probei, cu faza staionar i/sau faza mobil, acetia
rmn n urma eluentului, migrnd prin coloan cu viteze diferite ,datorit diferenelor dintre
coeficienii de repartiie ai celor 2 faze. Astfel se produce o diferen a vitezelor de migrare a
componenilor , suficient de mare pentru ca la ieire, acetia s fie separai, apoi dui de ctre
eluent la detector.
Spre deosebire de cromatografia de gaze n care faza mobile (gazul) joac rol doar de
cru n transportul componenilor prin coloan , n cazul Cromatografiei de lichide,
faza mobil (un lichid) particip la procesul de separare, prin interaiuni mult mai
complexe (adsorbie , repartiie, schimb ionic, excluziune steric).
Pe de alt parte, faza mobil lichid particip nemijlocit la selectivitatea procesului de
separare .
n determinarea reziduurilor de pesticide cromatograful de lichide sau lichid
cromatograful ( LC) poate fi cuplat cu detectori UV-VIS (HPLC UV-VIS) sau cuplat cu
spectrometru de mas(cu triplu cuadrupolQQQ, trapa ionic sau TOF timp de zbor).
Cele trei funcii eseniale ale
spectrometrului de mas , i
componentele rspunzatoare
pentru ndeplinirea acestora
sunt:
1. O mic cantitate de prob este
ionizat prin bombardare cu
electroni , formndu-se ,de
obicei, cationi prin pierderea unui
electron . Sursa de Ioni
2. Ionii sunt sortai i separai n
funcie de mas i
ncrcare. Analizorul de mas Schema de principiu a unui spectrometru de mas
3. Ionii separai sunt detectai i
nregistrai, iar rezultatele sunt
afiate
sub forma unor grafice.
Detectorul
Spectrul de mas reprezint nregistrarea maselor i a abundenelor
relative ale ionilor obinui. Semnalele ionilor sunt prezentate sub form de
linii verticale aflate la valorile m/e corespunztoare i a cror nlime este
proporional cu intensitile (abundenele) ionilor. Din motive practice,
aceste abundene sunt recalculate funcie de semnalul cel mai intens
(numit i pic de baz, base peak), cruia i se atribuie valoarea de 100 % .
n ceea ce privete rezoluia unui spectrometru de mas, din construcie
spectrometrele de mas pot determina valoarea raportului m/z cu o
precizie de 4 zecimale, astfel ca pot face diferenta intre formulele care au
aceeasi masa nominala.
Cel mai adesea un spectru de mas se prezint sub forma unei histograme de forma :

Spectrul de masa al malationului

Clasele de pesticide care care se pot determina prin:gazcromatografie
sunt compuii organofosforici (OP), organoclorurai (OC), piretroizii (PYR),
triazinele i cloroacetanilidele. Deasemenea pot fi determinai prin GC i
unii produi de transformare ai OP, PYR i erbicidelor fenoxiacide.
Un mare numr de clase de pesticide n general foarte polare, sunt dificil
de analizat pe GC datorit performanelor cromatografice slabe, ionizrii
slabe din sursa MS sau instabilitii n injectoarele GC, coloane sau n
spectrometrul de mas. Pentru aceste pesticide ct i pentru a elimina
derivatizrile n metodele GC, s-au dezvoltat metodele
lichidcromatografice (LC) cuplate cu spectrometru de mas.
Principalele clase de pesticide care pot fi analizate prin LC-MS includ erbicidele
fenoxiacide i erbicidele cu N substituit( bromoxinil) care adesea sunt folosite n
formulri cu carbamai, piretroizi, fenilureai, sulfonilureai i o ntreag list de
ditiocarbamai.
Pe lng azoli, erbicidele fenoxiacide ,carbamaii, PYR i OP pot fi determinate att
prin
GC-MS ct i prin LC-MS.
Efectele nocive ale pesticidelor asupra
organismului
Cele mai folosite pesticide cu efect dezastruos asupra ecosistemului si
sanatatii
1. DDT (diclor-difenil-tricloretan)
Acest compus se prezinta sub forma de cristale sau pudre de culoare alba, inodore
sau cu miros slab, insolubile in apa, solubile in solventi organici, produs cunoscut sub
urmatoarele denumiri comerciale: Agritan, Anofex, Arkotine, Azotox. DDT-ul este un
pesticid care a fost mult utilizat in cazul culturilor agricole, mai ales la cele de
bumbac, pentru controlul unor boli (malarie, tifos) transmise prin intermediul unor
insecte ca vectori (tantari, purici, paduchi).
De regula, efectele acute pe termen scurt ale DDT-ului asupra organismului uman
sunt relativ limitate, dar expunerile pe termen lung au fost asociate cu boli cronice si
cu risc de cancer la san. De asemenea, expunerea la DDT poate apare si prin
consumul anumitor alimente, pesticidul fiind detectat pretutindeni in hrana (oua,
legume, fructe, carne) si chiar in laptele sugarilor.
2. Heptaclorul
In stare tehnica acest pesticid se prezinta sub forma de cristale
albe, moi ca ceara, insolubile in apa, dar solubile in solventi
organici si inflamabile. In comert este cunoscut sub denumirile de
Drinox, Heptamak si Heptam.
Heptaclorul este o substanta cu efecte toxice, periculoase
asupra organismului uman, fiind absorbit prin ingestie si contact
dermic si regasindu-se, in principal, in tesuturile adipoase. O cale
importanta de eliminare a reziduurilor de heptaclor din organism o
reprezinta laptele mamar. Heptaclorul a fost identificat ca un
posibil cancerigen care afecteaza sistemul imunitar
Fiind destul de volatil pentru a se distribui in atmosfera, se
fixeaza rapid in sedimentele acvatice si se bioconcentreaza in
grasimile organismelor vii.
n anul 2013 au fost analizate 470 probe: 113 probe fructe, 321 probe legume i 36
probe cereale. Din cele 321 probe de legume, 22(6.85%) au avut reziduuri de
pesticide, dar sub limita maxim admis.
Un numr de 2 probe de spanac au fost neconforme din punct de vedere al
recepiei acestora (probe deteriorate care nu au putut fi analizate).

Ponderea pesticidelor sub LMA identificate n legume

n cazul probelor de fructe analizate un procent de 25.66% (29 de probe) au
avut reziduuri de pesticide sub limita maxim admis.

Ponderea pesticidelor sub LMA identificate n fructe

La probele de cereale analizate nu s-au gsit
reziduuri de pesticide dintre pesticidele cutate. Nu
au fost detectate depiri ale limitelor maxime
admise stabilite n conformitate cu legislaia n
vigoare.
In anul 2013, au fost analizate un numr de 19 probe
ecologice, respectiv 6 legume (mazre uscat,
cartofi, roii ,soia, morcovi), 8 fructe (mere i pere) i
5 cereale (gru i ovz). Toate probele ecologice au
fost libere de pesticide.
 Concluzii
Din cele prezentate putem desprinde urmtoarele concluzii:
Determinarea reziduurilor de pesticide din legume i fructe presupune ca
laboratoarele care efectueaz aceste analize s aib un personal nalt calificat i s
fie dotate cu echipamente performante capabile s detecteze reziduurile de pesticide
la nivel de urme
Prezena pesticidelor n legume i fructe in concentratii peste limitele maxime
admise indic faptul c nu au fost respectate anumite aspecte legate de timpul de
pauz, doz de aplicare recomandata sau faptul c s-a utilizat un produs neomologat
pentru
cultura respectiv
Obinerea unor legume i fructe libere de pesticide are efect asupra asigurrii
strii de sntate a populaiei, astfel c se impune respectarea legislaiei n vigoare
referitoare la utilizarea pesticidelor
 Bibliografie
1. E.Grou, M.Cicotti, L.Ghinea, V.Rdulescu, E.Goga, Metode pentru determinarea reziduurilor
de produse fitofarmaceutice, Editura Ceres, Bucureti, 1979
2. SANCO 12571/2013, Guidance document on analytical quality control and validation
procedures for pesticide residues analysis in food and feed, Supersedes SANCO/12495/2011,
Implemented by 01/01/2014, European Commission, Brussels, Belgium
3. Directorate General for Health & Consumers, Pesticide EU-MRLs Regulation (EC) No
396/2005
4. Directorate General for Health & Consumers, Active substances Regulation (EC) No
1107/2009
5. F.Moraru, A.Meghean- Breja, Solul Mediu Ecologic, Editura Universitii Petru Maior,
Trgu Mure , 2011
6. A. MegheanBreja, Tez de doctorat, Contribuii la determinarea reziduurilor de pesticide
din legume i fructe prin diferite tehnici cromatografice, 2014
7. Raport privind Programul Naional de Monitorizare a reziduurilor de pesticide din fructe,
legume i cereale, al Romniei pe 2013, n concordan cu Regulamentul 326/2005 cu
modificrile i completrile ulterioare, LZDRPPPV Mure , 2014
8. L.M.L Nollet, H.S.Rathore , Handbook of Pesticides, Methods of Pesticides Residues
Analysis, CRC Press, Taylor &Francis Group, 2010
Va multumim !