Curs XII

Metode spectrometrice
 Radiaţia electromagnetică

hc
E  h   h  c

E – energia (J)
h – constanta lui Planck (6,625 x 10-34J s)
ν – frecvenţa (Hz)
λ – lungimea de undă (m)
c – viteza luminii
  număr de unde (cm1).
Domeniile şi subdomeniile spectrului electromagnetic

Interval de
Domeniu Subdomenii Interval de Tip de
lungime de
spectral spectrale frecvenţă, ν (Hz) tranziţie energetică
undă (λ)
Raze gama < 0,05 Å > 6,0·1019 Nucleară
Raze X 0,05–100 Å 3,0·1016–6,0·1019 Electronică (electroni interiori)
Ultraviolet
Electronică (electroni din straturile
îndepărtat 10–180 nm 1,7·1015–3,0·1016
interne mijlocii)
Ultraviolet (de vacuum)
şi vizibil
Ultraviolet apropiat 180–360 nm 8,6·1014–1,7·1015 Electronică (electroni de valenţă)
Vizibil 360–780 nm 3,9·1014–8,6·1014 Electronică (electroni de valenţă)
Infraroşu apropiat 0,78–2,5 μm 1,2·1014–3,9·1014 Vibraţia şi rotaţia moleculelor
Infraroşu
2,5–50 μm 6,0·1012–1,2·1014 Vibraţia şi rotaţia moleculelor
Infraroşu fundamental
Infraroşu
50–1000 μm 3,0·1011–6,0·1012 Vibraţia şi rotaţia moleculelor
îndepărtat
Rotaţia moleculelor.
Microunde 1–300 mm 1,0·109–3,0·1011
Spin electronic în câmp magnetic
Unde radio > 300 mm < 1,0·109 Spin nuclear în câmp magnetic
Modalităţile de obţinere a informaţiei
spectrochimice se pot clasifica în patru categorii:
 absorbţie,
 emisie,
 luminiscenţă
 metode neabsorbtive
Schema de principiu a metodelor de a) absorbţie, b) emisie şi
c) luminiscenţă
a) 2
Po
Proba
PT 1 E2 = h2

0 E1 = h1
Radiaţie Radiaţie
incidentă emergentă

h
b)
h 2
1 E21 = h21
h
Proba
E2 = h2
0
h E1 = h1
Energie
termică

Radiaţie de
c) excitare
2
E21 = h21
1

E2 = h2
Proba
Luminiscenţă E1 = h1
0

Radiaţie
transmisă
Absorbţie

Sursă de Selector de Sistem de

radiaţie Probă Fotodetector măsurare şi
lungime de
undă afişaj

Fluorescenţă, Fosforescenţă, Difuzie,

Împrăştiere
Compartiment Selector de Fotodetector Sistem de
probă lungime de măsurare şi
undă afişaj

Sursa de
radiaţie

Emisie,
Chemiluminiscenţă
Sursă şi Selector de Fotodetector Sistem de
probă lungime de măsurare şi
undă afişaj
Legea Lambert-Beer

PT
T%  100
PO
PO PT

PO
A   log T  log
PT
C

A  lc
l
 Schema bloc a unui
spectrofotometru mono-fascicul

obturator
Sursa de Monocromator Soluţia de Sistem de Afişaj
radiaţii sau filtru analizat detecţie şi măsură

Soluţia de
referinţă
 Schema bloc a unui
spectrofotometru dublu-fascicul
disc
Sursa de Monocromator selector
radiaţii Proba

Sistem de detecţie
şi măsură

Referinţa
Afişaj
Aplicatii
 Cromofor
 Grupare auxocroma

 Dozare glucoza, proteine totale

 Studii cinetice enzimatice
 ….