23.2.2.

ADENOMATOZA PULMONAR OVIN (ADENOCARCINOMUL PULMONAR OVIN)

Adenomatoza pulmonar ovin (APO) este o boal progresiv, contagioas, cu evoluie cronic, tradus prin apariia carcinomului bronhoalveolar, ntlnit mai frecvent la ovine i mai rar la caprine. Istoric Prima semnalare a bolii dateaz din 1825, n Africa de Sud, de unde i denumirea de Jaagsiekte (boala deplasrii), datorit apariiei semnelor clinice preponderent n cursul deplasrii animalelor pe distane mai mari. Ulterior, a fost semnalat n diferite ri din Europa, inclusiv n Romnia, iar apoi i pe celelalte continente. ntrunirea care a avut loc recent la Missilac, n Frana, a decis adoptarea denumirii de adenocarcinom pulmonar ovin (APO), pentru a desemna boala. Rspndire i importan economic Boala natural este rspndit la populaia ovin din cele dou Americi, Europa, Africa i Asia. Uneori, repartiia la nivelul rii poate fi zonal. Australia, unde boala a fost eradicat n 1952 i Noua Zeeland sunt singurele ri unde adenomatoza nu exist. Caracterul endemic, imposibilitatea de a detecta animalele bolnave altfel dect pe baza simptomelor sau n urma examenelor necropsice, pot duce la pagube economice nsemnate, cuprinse ntre 5 i chiar 20% (25). Afeciunea este important economic n unele ri cu efective mari de ovine, cum este Africa de Sud sau Peru (7). Etiologie Primele cercetri referitoare la etiologia APO au reuit izolarea din leziunile pulmonare a unui herpesvirus, care ulterior s-a dovedit a nu fi agentul cauzal singular al bolii, reproducerea experimental prin utilizarea sa fiind imposibil (6). Din tumorile adenomatoase pulmonare ca i din culturile celulare rezultate din acestea s-au izolat apoi mai multe herpesvirusuri ovine nrudite serologic (36), considerate a fi doar asociate. Ulterior, a fost luat n considerare implicarea posibil a unui retrovirus. Virusul adenomatozei pulmonare de tip D, cunoscut i sub denumirea de Jaagsiekte Sheep RetroVirus (JSRV) este necesar i suficient pentru a reproduce boala la oile domestice sau slbatice. Studiul morfogenezei virale a demonstrat prezena n celulele tumorale a unor particule intracitoplasmatice, adesea asociate cu centriolii. JSRV a nmugurit din celulele tumorale cu un nucleoid complet format, care s-a maturat pe parcursul nmuguririi. n lumenul alveolar au fost puse n eviden i particule extracelulare, dar numrul celor imature a fost foarte redus. JSRV matur extracelular este legat de membran i prezint un nucleoid uor excentric, cu un spaiu perinucleoidal electrono-opac. n preparatele colorate negativ, nveliul JSRV este acoperit de spini. Aceast structur este caracteristic JSRV, care difer morfologic de toate retrovirusurile cunoscute (22). Att la animalele sntoase, ct i la cele bolnave sunt prezente n genom 15-20 de copi ale unor virusuri endogene nrudite, denumite JSRV (enJSRV), inclusiv n celulele critice pentru dezvoltarea sistemului imun (29), prezente att la animalele bolnave ct i la cele sntoase. JSRV este un virus cu potenial carcinogen demonstrat prin studii experimentale, inducnd tumori terminale la vrsta de 6 sptmni, n urma inoculrii intratraheale, la mieii nou-nscui. n ciuda oncogenezei rapide, n secvena viral nu sunt prezente oncogene clasice. Genomul viral codific o gen suplimentar, orf X, care se crede ca ar avea un rol n geneza tumorilor (2). S-a emis ipoteza c proteina de nveli este necesar pentru replicarea i potenialul transformant al virusului in vivo (9). n tumorile rezultate sunt prezeni produi omologi proteinelor structurale ale virusurilor de tip D i B dar nu s -a reuit izolarea unui retrovirus infectant (12). Rolul precis al acestui virus n inducerea genezei tumorale n u este clar, datorit lipsei unui sistem tisular de propagare a virusului i a unor clone infectante moleculare (20). n lipsa unor sisteme de propagare a virusului in vitro, materialul viral pentru cercetri ulterioare a fost obinut prin inoculri intratraheale la miei nou nscui. Apoi s-au obinut anticorpi poli- i monoclonali fa de fraciunile purificate de virus, care ns nu au avut o specificitate strict.

Genomul virusului exogen are 7462 de baze i prezint aranjarea clasic genomial gag, pol, env, flancat de o secven terminal lung la ambele capete. JSRV este clasificat drept un betaretrovirus cu secvenele gag i pol ndeaproape nrudite cu tipul D de retrovirus, n timp ce secvena env este nrudit cu a virusurilor B, cum ar fi retrovirusul uman endogen HERV-K. Virusurile exogene au corespondent endogen prezent n genomul tuturor ovinelor i caprinelor. Rezultatele analizelor de biochimie molecular sugereaz c receptorul pentru virusul adenomatozei este prezent pe numeroase tipuri celulare ovine i c restricia referitoare la malignizarea in vivo ar putea fi controlat de ali factori dect receptorii virali (21). JSRV a fost detectat numai n tractul respirator al oilor afectate de adenomatoza pulmonar, n mod particular la nivelul celulelor epiteliale transformate de la nivelul alveolelor (19). Caractere epidemiologice Boala se ntlnete cu predilecie la ovinele adulte, rar la tineretul de 3-6 luni i foarte rar la caprine, la care se poate transmite ns experimental, prin inoculri intrapulmonare sau i.v. Virusul este eliminat prin saliv i jetaj. Transmiterea natural se face prin aerosoli (35). Prevalena bolii, care poate ajunge pn la 25%, este dependent de rasa de ovine, tipul de efectiv i managementul efectivului. n creterea intensiv, unde contactul direct dintre animale este permanent, sau n cazul ovinelor n transhuman, apariia bolii este mai frecvent. Evoluia bolii este obinuit endemic, dar poate evolua i epidemic. Prezena concomitent n efectiv i a altor boli, ca de exemplu visna-maedi, amplific pierderile datorate insuficienei pulmonare. Nu este exclus intervenia factorului genetic (25). Utilizarea tehnicilor de biologie molecular (Southern blot) au relevat prezena a 15-20 benzi caracteristice nveliului sau capsidei la 13 rase de oi i 6 rase de capre (23). Rezultate similare s -au nregistrat cu 6 probe provenite de la ovine i caprine slbatice. La 22 genuri de bovidee, inclusiv bovinele domestice i la 7 familii din Artiodactyla incluznd fam. Cervidae, s-au gsit doar cteva benzi capsidale sau de nveli (13). Prevalena infeciei este 40%-80%, dei doar circa 30% dintre ovine prezint leziuni adenomatoase. Patogenez Virusul, ptruns n organism pe cale respiratorie, infecteaz pneumocitele de tip II i celulele Clara din epiteliul pulmonar. Dup o perioad de incubaie variabil, dar n general lung, infecia poate duce la creterea tumoral i secreia abundent de surfactant. Excesul de surfactant determin un aflux de macrofage. Proliferrile adenomatoase au tendina de a crete, ocupnd spaiul alveolar i inducnd astfel anoxia. Animalele sfresc prin exitus, dup cteva sptmni de la debut. Studii fcute n efective cu adenomatoz endemic au relevat prezena virusului n leucocitele periferice nainte de apariia bolii clinice i chiar n absena tumorilor pulmonare decelabile. Datele experimentale demonstreaz posibilitatea sinergismului patogenezic n inducerea proceselor tumorale, a virusului adenocarcinomului i a virusului pneumoniei interstiiale (7). O trstur particular a bolii o reprezint absena rspunsului umoral specific fa de JSRV, n ciuda tumorilor pulmonare multiple i a diseminrii infeciei limfoide. Animalele bolnave de adenomatoz nu prezint anticorpi circulani specifici. S-a sugerat c transcriptele endogene de virus, care sunt exprimate la vrste tinere, reprezint cauza eliminrii limfocitelor T specifice fa de virus pe parcursul ontogenezei celulelor T (38). Alterarea rspunsului la mitogene, care apare timpuriu n evoluia bolii i are caracter persistent, poate indica o influen direct a virusului asupra anticorpogenezei (30). Infecia esutului limfoid poate juca un rol important n patogeneza adenocarcinomului pulmonar ovin. Analiza tipurilor celulare infectate de virus a relevat prezena acestuia n limfocitele T CD4(+), T CD8(+), B i n celulele aderente (macrofage/monocite). La animalele cu infecie natural, celulele cu ncrctura maxim de provirus au fost cele aderente, urmnd n ordine limfocitele B cu Ig de suprafa, n timp ce limfocitele T CD4(+) i CD8(+) au coninut nivelele minime de provirus. Acesta a putut fi detectat n majoritatea cazurilor i n mononuclearele periferice, diseminarea celulelor infectate precednd f ormarea tumorilor (14). Tabloul clinic

Perioada de incubaie poate varia de la 5-12 luni la 1-3 ani, fiind cu att mai scurt cu ct animalele afectate sunt mai tinere. Debutul poate fi brusc la animalele gestante n ultima perioad. Simptomatologia bolii nu este aparent pn n momentul n care leziunile pulmonare sunt deja extinse. Animalele sunt afebrile (cu excepia celor la care apar suprainfecii bacteriene), primul semn putnd fi tusea, care apare ocazional i ndeosebi dup efort. Boala evolueaz insidios, cu tulburri respiratorii progresive, accese de tuse spasmodic, productiv. Animalele se emaciaz treptat, se observ epifor persistent i catar nazal seros abundent. La ascultaie, pe suprafaa pulmonar afectat se aud raluri umede. Acestea sunt sesizabile uneori chiar de la distan, astfel nct efectivul afectat produce un sunet similar celui de fierbere nceat (25). Fluidul n cantitate mare obstrueaz cile respiratorii, inducnd semne de hipoxie, apoi anoxie i animalul poate muri n criz. Exitusul se produce dup 6 sptm ni-4 luni de evoluie. Uneori simptomatologia pulmonar se agraveaz consecutiv suprainfeciilor bacteriene (cel mai frecvent pasteureloza). Tabloul morfopatologic Pulmonii sunt mult mrii n volum i greutate, pn la de trei ori dimensiunile normale ( 25). Uneori pot fi observate leziuni metastatice n limfonodurile bronhice i mediastinale (17). Bronhiile sunt pline de lichid, aspect considerat caracteristic. Sunt descrise dou forme lezionale de adenocarcinom pulmonar ovin: clasic i atipic. n forma clasic, leziunile sunt plasate ndeobte n poriunile cranio-ventrale ale tuturor lobilor pulmonari. Ele sunt difuze sau nodulare, de culoare cenuie deschis sau roz-deschis. Suprafaa de seciune este umed. n formele atipice, leziunile au un aspect mai degrab nodular, att n cazul leziunilor precoce ct i a celor vechi. Culoarea lor este alb perlat, consistena foarte ferm, sunt bine delimitate de parenchimul adiacent i au suprafaa de seciune cu aspect uscat. Din punct de vedere histologic, se observ prezena a numeroase focare de proliferare neoplazic epitelial att n regiunea alveolar ct i bronhiolar. Tumora are n general un aspect histologic benign, dar au fost observate i excepii. Histologia leziunilor atipice este similar celei constatate n boala clasic, cu o intensificare a reaciei stromale care nsoete proliferarea epitelial. Aceste leziuni sunt adenoame sau adenocarcinoame, rezultate prin transformarea neoplazic a celulelor epiteliale secretorii de tip II sau a epiteliului bronhiolar neciliat. Detaliile electronomicroscopice ale leziunilor confirm ca origine a neoplasmelor pneumocitele de tip II i celulele epiteliale bronhiolare Clara (5). Proeminenele intraalveolare sunt formate din celule cuboide i columnare (31). Studiile imunohistochimice efectuate pe leziunile pulmonare de la animale cu adenocarcinom au demonstrat corelarea leziunilor macroscopice cu cele histopatologice, att n cazurile tumorale clasice ct i n cele atipice. Proteina capsidal major a JSRV a fost depistat imunohistochimic n celulele epiteliale transformate, att n cazul tumorilor clasice ct i a celor atipice, dar reactivitatea imun a fost mai slab n cazul tumorilor atipice. Secvena proviral U3 a JSRV a fost depistat prin PCR specific n toate tumorile. Diseminarea JSRV n alte organe a fost mai pronunat n formele clasice dect n cele atipice (11). n cazul suprainfeciilor bacteriene, tabloul lezional se complic cu leziuni purulente (abcese pulmonare) i de pleurezie.

Diagnostic n perioada de evoluie clinic, un test de diagnostic extrem de simplu este ridicarea animalului de trenul posterior, astfel nct extremitatea cefalic s fie cobort. n caz de adenomatoz pulmonar, din nri sunt eliminate cantiti mari de mucus (pn la 200 ml). Examinarea microscopic a acestui mucus relev prezena unor grupri rotunde sau ovale de celule epiteliale i un numr crescut de macrofage (25). Diagnosticul se confirm histopatologic. Diferenierea de pneumonia progresiv cronic (maedi) se bazeaz pe aspectul lezional microscopic (8), n aceasta din urm aprnd hiperplazie peribronhiolar i perivascular precum i infiltrate leucocitare interstiiale heterogene (26). Prin aplicarea tehnicii PCR, virusul poate fi depistat n leucocitele circulante la animalele infectate natural anterior apariiei semnelor clinice sau chiar anterior apariiei tumorilor. Aceeai tehnic a evideniat faptul c forma exogen a JSRV

este prezent exclusiv i constant n tumori i secreiile pulmonare ale animalelor afectate. Mai mult chiar, provirusul JSRV exogen a fost detectat numai n ADN-ul din celulele tumorale i nu n esuturile atumorale de la acelai animal, demonstrnd asocierea dintre virus i adenocarcinomul pulmonar ovin (18). Diagnosticul diferenial are n vedere i alte pneumonii cronice: parazitare, supurative, limfadenita cazeoas, pneumonia enzootic i melioidoza. Tratamentul este inoperant. Profilaxie i combatere Boala nu poate fi prevenit prin msuri specifice, vaccinurile inactivate preparate din izolatele virale dnd rezultate incerte. Msurile de profilaxie mai eficiente sunt cele generale: evitarea contactului animalelor sntoase cu cele bolnave, controlul circulaiei efectivelor, n special n rile n care se practic transhumana, cu sacrificarea acelora n care apar cazuri pozitive. APO este o boal declarabil i carantinabil, nscris n lista B a OIE. Din efectivele infectate, animalele bolnave trebuie eliminate ct mai timpuriu posibil, dac n regiune exist i alte turme infectate. n cazul apariiei bolii ntr-o regiune indemn, este recomandabil lichidarea ntregii turme.