Sunteți pe pagina 1din 191

Editura Amici

Lorentz JNTSCHI

Microbiologie i Toxicologie.
Studii Fitosanitare

Editura Amici
2003

Lorentz JNTSCHI

Lorentz JNTSCHI
Nscut la 8 Ianuarie 1973 n Fgra, Braov.
Absolvent n anul 1991 al Liceului Teoretic Radu Negru
Fgra al seciei cu profil Mecanic, Liceniat n
Informatic (1995), Chimie i Fizic (1997), Doctor n
tiine Exacte, Specializarea Chimie Organic i
Computaional (2000) la Universitatea Babe-Bolyai
Cluj-Napoca, Master n Ameliorarea Plantelor i
Controlul Calitii Seminelor i Materialului Sditor la
Universitatea de tiine Agricole i Medicin Veterinar din Cluj-Napoca
(2002). ef de lucrri la Universitatea Tehnic Cluj-Napoca.
http://lori.east.utcluj.ro, lori@lori.east.utcluj.ro

Descrierea CIP a Bibliotecii Naionale a Romniei


JNTSCHI, LORENTZ
Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare / Lorentz Jntschi
Cluj-Napoca: Amici, 2003
p. 186; 18.2 25.7 cm.
Bibliogr.
ISBN 973-85727-3-8

579

Editura Amici

Colecia
SCIENTIA

Aleea Micu nr. 15


3400 Cluj-Napoca
Tel. 0264 166548, Fax 0264 166548
Director: Prof. dr. LASZLO Alexandru
Redactor ef: Dr. Lorentz JNTSCHI

Copyright 2002 dr. Lorentz JNTSCHI


Toate drepturile asupra lucrrii aparin autorului. Reproducerea integral sau parial a
textului sau ilustraiilor este posibil numai cu acordul prealabil scris al autorului.
Tiparul executat la Atelerul de multiplicare al UTC-N.

II

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Prefa
Lucrarea Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare este
organizat pe dou seciuni, aa cum rezult de altfel i din titlu.
Prima seciune, cea de microbiologie i toxicologie prezint
conceptele i instrumentele specifice domeniului de interfa ntre biologie,
informatic, chimie i fizic.
Progresul realizat n ultimii 100 de ani, cnd practic s-a cldit aceast
disciplin, justific pe deplin apariia acestui material, care face o sintez a
celor mai noi tehnologii i sisteme de investigare celular. Lucrarea este bine
ilustrat, numai n aceast seciune a sa avnd 88 de figuri. Se pune accent pe
dezvoltarea capacitilor intuitive i deductive n domeniu.
A doua parte a acestei lucrri o reprezint contribuia personal a
autorului n acest domeniu, cu referine directe la publicaiile personale.
Aceast seciune reprezint lucrarea autorului de Masterat n Inginerie
Agricol susinut la Universitatea de tiine Agricole i Medicin Veterinar
din Cluj-Napoca n anul 2002.
Trimiterile la literatura de specialitate sunt bine reprezentate, cu
precdere n aceast a doua seciune, care refer rezultate comparative ale
multor autori.
n final doresc s mulumesc pentru ntelegerea de care au dat dovad
cu mine cei care s-au aflat n preajma mea pe parcursul redactrii acestui
material, care a cerut un volum foarte mare de munc, datorit unui volum
imens de informaie existent n domeniu.
Cluj-Napoca,
08.01.2003

Lorentz JNTSCHI

III

Lorentz JNTSCHI

Cuprins

1. Introducere ............................................................................................... 3
2. Biogeochimie ......................................................................................... 13
2.1. Biosfera........................................................................................... 13
2.2. Biomasa i Biosfera ........................................................................ 14
2.3. Migrarea Elementelor ..................................................................... 16
2.4. Circuitul Substanelor n Natur ..................................................... 17
2.5. Ciclurile Biogeochimice ................................................................. 19
2.6. Biocenoza........................................................................................ 21
2.7. Ecologia Omului ............................................................................. 23
3. Microbiologie......................................................................................... 33
3.1. Microbiologia i Biologia Celular................................................. 33
3.2. Legturile Chimice ......................................................................... 38
3.3. Biologia Celulei .............................................................................. 51
3.4. Genetic i Inginerie Genetic ........................................................ 58
3.5. Microbiologie Industrial ............................................................... 64
3.6. Ecologia Microbian....................................................................... 78
4. Biochimie ............................................................................................... 83
4.1. Chimia Celulei Vii .......................................................................... 83
4.2. Biomolecule .................................................................................... 84
4.3. Circuitul Informaiei ....................................................................... 86
4.4. Proteine ........................................................................................... 87
4.5. Metode de Analiz a Proteinelor .................................................... 90
4.6. Carbohidrai .................................................................................... 93
5. Toxicologie ............................................................................................ 97
5.1. Imunologie ...................................................................................... 97
IV

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

5.2. Imunologie Clinic i Diagnostic Microbiologic............................ 98


6. Studii Fitosanitare ................................................................................ 102
6.1. Introducere .................................................................................... 102
6.2. Aspecte de Sntate Public ......................................................... 103
6.3. Agrochimia Pesticidelor ............................................................... 105
6.4. Chimia Pesticidelor....................................................................... 108
6.5. Proprietile Fizico-Chimice ale Pesticidelor ............................... 112
6.6. Activitatea Biologic a Pesticidelor.............................................. 118
6.7. Metode Moderne n Studiul QSAR/QSPR ................................... 119
6.8. Utilizarea Pesticidelor n Cultur Exemplu Aplicativ ............... 128
6.9. Biotehnologiile i Agricultura ...................................................... 113
6.10. Studiu de Cultur la Cartof ......................................................... 145
7. Anexa. Dicionar de Termeni Tehnici Englez-Romn......................... 172
8. Referine............................................................................................... 175

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

1. Introducere

1.1. Organismul i Mediul


Organismele ntrein un schimb permanent cu mediul nconjurtor iar
legitile ce apar la interaciunea organismelor cu mediul sunt studiate de
ecologie.
Elementele mediului nconjurtor care exercit o anumit aciune
asupra organismelor sunt numite factori de mediu: abiotici, biotici i
antropogeni (in de particularitile mediului, prezena omului i activitatea
lui de munc).
Unii dintre factori au importan vital; acetia sunt factori limit.
Factorii abiotici au ca surs evoluia. Astfel, n procesul dezvoltrii
evolutive fiecare organism (specie) s-a adaptat la anumite condiii abiotice i
anume:

forma corpului le permite anumitor organisme deplasarea n ap, aer, sol;

compoziia chimic a mediului este un factor determinant, i anume exist


plante care cresc cu predilecie pe soluri saline iar altele au nevoie de
foarte mult ap;

temperatura mediului determin existena vieii i anume avem plante


tropicale, plante de clim temperat i plante care cresc la temperaturi
sczute (diferii arbuti);
La aciunea acestor factori limit fiecare specie i are limitele

extreme ale toleranei (minim, maxim, i optim). De exemplu oule de


ascarid au tolerana de 12C (minim), 40C (maxim) i optim la 25C, alga

Lorentz JNTSCHI

arctic Sphaerella nivalis poate crete la temperatura de 34C iar alte alge
cianofile vieuiesc n apa ghezerelor au temperatura de 85 sau mai mult.
Unele organisme pot suporta schimbri considerabile din mediul
nconjurtor numite euritopice, altele exist numai n limite restrnse de
oscilaie a lor (valena ecologic diferit), numite stenotopice. Organismele
care suport schimbri considerabile n ceea ce privete temperaturile se
numesc euritermice iar cele care nu suport variaii considerabile de
temperatur se numesc stenotermice. Relativ la rezistena la sruri, avem
organisme eurigalice i respectiv stenogalice.
Multe exemple de organisme stenotermice gsim printre animalele
nevertebrate marine care suport ridicarea temperaturii pn pe la 30C i mai
rar pn la 38C.
Dintre speciile euritermice se pot meniona animalele de ap dulce
care suport att nghearea bazinului i nclzirea la 41C-44C.
Relativ la comportarea organismelor fa de lumin, de exemplu oul
viermelui parazit fasciola larva lui miradiciu se poate forma numai la o
iluminare puternic iar pentru oule de broasc lumina nu este o condiie
necesar, dei accelereaz procesul de dezvoltare n timp ce oul unor specii
de molute se segmenteaz numai la ntuneric, i lumina frneaz acest
proces.
Prezena oxigenului pentru organismele aerobe e condiia obligatorie
de existen n timp ce pentru cele anaerobe este obligatorie lipsa lui.
Atitudinea fa de condiiile externe se poate schima la unul i acelai
organism n cursul existenei sale: oule de ascarid pentru dezvoltare
necesit oxigen, ns pentru ascarida matur el este toxic iar larvele narilor
se dezvolt n ap iar narii maturi (imago) triesc pe uscat.

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Temperatura la care se desfoare procesele activitii vitale la


majoritatea organismelor este n limitele de la 40C la 45C i aa se explic
caracterul srccios al vieii n regiunile arctice i n condiii aride.
Pentru multe specii de animale i plante foarte important este ciclul
anual de dezvoltare fotoperiodism (durata zilei lumin i regimul de
temperatur).
Supravieuirea

la

condiii

nefavorabile

(reducerea

umiditii,

temperatura nalt sau joas, lipsa hranei) la unele organisme are ca


manifestare

amorirea

(imobilitate,

ncetarea

alimentrii,

ncetinirea

schimbului de gaze, scderea brusc a altor procese fiziologice).


Astfel, temperatura ce provoac amorirea se ntlnete la unele
insecte, peti i amfibii la care amorirea se instaleaz la coborrea
temperaturii mai jos de +15C, la altele la +10C iar la unele doar n jurul lui
0C. Alte animale n stare de amorire nghea i la dezgheare se rentorc la
activitatea vital.
Cea mai profund amorire are loc n caz de anabioz. Anabioza este
o stare a organismului n care procesele vitale sunt att de ncetinite nct
lipsesc toate manifestrile vizibile ale vieii i se instaleaz la schimbarea
temperaturii sau a umiditii. De remarcat c n stare de anabioz sporete
rezistena organismului i la ali factori nefavorabili (hipoxie, aciunea
substanelor toxice, a radiaiei ionizante).
Factorii biotici ai mediului stabilesc relaii interspecifice i
intraspecifice care sunt exprimate prin legturi de nutriie (lanurile trofice),
concuren, antibioz i simbioz.
Relaiile reciproce dintre organisme ce in de nutriie duc la formarea
lanurilor trofice. Deoarece sursa de energie ce asigur existena tuturor
organismelor este Soarele, prima verig a oricrui lan trofic este
transformarea n procesul fotosintezei a energiei luminoase n energie
5

Lorentz JNTSCHI

chimic i formarea compuilor organici. Astfel, 0.1% din energia solar


primit de pmnt e utilizat n fotosintez, trecnd n energie potenial a
substanelor organice. Animalele erbivore disperseaz o parte considerabil a
energiei i numai o parte din ea este folosit la construirea protoplasmei. Mai
departe, animalele rpitoare se hrnesc cu cele erbivore.
Dou exemple de lanuri trofice sunt:

alge de plancton animale de plancton crustacee peti psri i


mamifere piscivore;

plante insecte psri insectivore psrile rpitoare;


Fiecare lan trofic cuprinde de regul nu mai mult de 4-5 verigi,

deoarece datorit pierderii de energie biomasa total a fiecreia din verigile


urmtoare este de aproximativ 10 ori mai mic dect a celei precedente;
aceast legitate se numete regula piramidei ecologice.
Concurena i antibioza sunt dou noiuni des ntlnite n studiile ce
privesc relaiile ce se stabilesc ntre organismele vii.
Concuren se numesc relaiile ce se stabilesc ntre organismele
aceleiai sau diferitelor specii care coexist n codiii identice ale mediului.
De exemplu acridienii, roztoarele i copitalele ce se hrnesc cu ierburi i
ntre ele se stabilesc relaii de concuren, n timp ce la plante apare
concurena pentru lumin i umiditate.
Antibioza este rezultatul aciunii inhibitoare a unui organism asupra
altuia, de cele mai multe ori n urma eliminrii unor substane speciale de
natur chimic divers cum sunt antibioticele. Sunt cunoscute antibioticele
produse de ciuperci, bacterii i alte organisme. Productori activi de
antibiotice s-au dovedit a fi ciupercile de mucegai, de exemplu Penicillinum
care elimin penicilina (fig. 1), nociv pentru multe bacterii. Seria de derivai
ai penicilinei, cu efect antibiotic este prezentat n fig. 2-8.

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

H3C
H2C

OCH3

HO
C

Fig. 1. Penicillic Acid


H H

CH3(CH2)3SCH2CONH

CH3
CH3
COOH

Fig. 2. Penicillin BT
H H

CH2CONH

CH3

CH3
COOK

Fig. 3. Penicillin G Potassium (Potassium penicillin G)


H2N

H H
CH(CH2)3CONH

HOOC

S CH3
CH3

COOH

Fig. 4. Penicillin N (Cephalosporin N, Adicillin)


H H
OCH2CONH
O

S CH3

CH3
COOH

Fig. 5. Penicillin V (Penicillin phenoxymethyl, Phenoxymethylpenicillin,


Phenoxymethylpenicillinic acid)
7

Lorentz JNTSCHI

H H
CH2CONH
O

CH2C6H5

CH3

H2N
CH3

COO

CH2CH2C6H5

Fig. 6. Penicillin G (Benethamine, Benethamine penicillin G, Benetolin)


H H
CH2

CHCH2SCH2CONH
O

S CH3
CH3
COOH

Fig. 7. Penicillin O (Penicillin AT)


Cl
CH3C

H H
CHCH2SCH2CONH
O

S CH3
CH3

COOK

Fig. 8. Penicillin S Potassium (Potassium penicillin S)


La antibioticele obinute din ciupercile de mucegai i bacterii se refer
gramicidina, streptomicina, biomicina, tetraciclina i altele (fig. 9-17).
Structurile i denumirile antibioticelor uzuale sunt redate mai jos:

CO
N
CH3O

Cl
CH3
CH2COOH

Fig. 9. Indomethacin (Argun, Artracin, Artrivia, Catolep, Confortid,


Dolcidium, Durametacin, Elmetacin, Indacin)
8

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

O
H3C
OH
H3C

CH3
OH
CH3

OH

O H3C
CH2
O
CH3

H3C

CH3
N

HO

CH3

OCH3

O
CH3
O

CH3

CH3
OH

Fig. 10. Erythromycin (Erythromycin A, Abomacetin, Eritrocina, Staticin,


Stiemycin Torlamicina)
CH3 CH3
HO
H3C
CH3COO
H3C
CH3O

OH O
CH3
OH OH

O
O
CH3

CH3
NH
CH N N

N CH3

OH

Fig. 11. Rifampicin (Rifampin, Rifaldazine, Rifamycin AMP, Rifaprodin,


Rifobac, Riforal, Rifoldin, Rifoldine, Rimactan)
H H
HO

CHCONH
NH2

CH3
CH3
COOH

Fig. 12. Amoxicillin (Amoxycillin, Amocilline)


9

Lorentz JNTSCHI

CH2NH2
O

HO
HO

H2N

NH2

NH2

O
HOH2C
HO
HO

HO

O
H

NH2 O
CH2NH2

OH

Fig. 13. Neomycin (Mycifradin, Myacyne, Fradiomycin, Neomin, Neolate,


Pimavecort, Vonamycin Powder V)

H H
CHCONH
NH2

CH3
CH3
COOH

Fig. 14. Ampicillin (Ay 6108, Adobacillin, Alpen, Ampicina, Ampilar,


Ampimed, Austrapen, Bonapicillin)

HO

CH3 H

N(CH3)2
OH
CONH2

OH

OH O
OH

Fig. 15. Tetracycline (Deschlorobiomycin, Tsiklomitsin, Abricycline,


Achromycin, Agromicina, Ambramicina, Ambramycin, Bio-Tetra,
Cyclomycin, Hostacyclin)
10

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare


CH2CONH2
H

H3C

CH3

NH2COCH2

NC
+
Co

N
H3C
NH2COCH2CH2 CH3 H
NH2COCH2

CH2CH2CONH2

CH3
N

N
H3C

CH2CH2CONH2

CH3

CH2

CH3

N
CH3

CH2
N

CH3

CO
NH

OH

CH2
H3C

CH

OH

O
O

CH2OH

P
O

Fig. 16. Duodecibin (Dodecavite, Dodecabee, Embiol, Emociclina, Fresmin,


Hepavis, Hemomin, Hepagon, Hepcovite, Megabion (Indian), Megalovel)

Cl
HO

CH3 H

N(CH3)2
OH
CONH2

OH

OH O
OH

Fig. 17. Biomycin (Chlortetracycline, 7-Chlorotetracycline, Biomitsin)


Relaiile intraspecifice (ntre membrii populaiei) pot fi pozitive
(provoac atracia reciproc i cooperarea), negative (agresive, ce
condiioneaz dispersarea) i indiferente.
11

Lorentz JNTSCHI

n cadrul aceleiai populaii, divizarea duce la separarea pe subuniti,


i anume individul, familia, reuniunea ntmpltoare a indivizilor i
comunitatea. Iat cteva exemple n cazul vertebratelor: bancuri de peti,
haite de lupi, turme de cerbi, colonii de psri. n comunitate n urma
ciocnirilor se stabilete individul dominant i rangul fiecruia din subalterni.

12

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

2. Biogeochimie

2.1. Biosfera
Biosfera reprezint o parte a nveliurilor globului pmntesc
(atmosfera, hidrosfera, litosfera) populat i transformat de fiinele vii.
Biosfera este format din totalitatea organismelor vii mpreun cu habitatele
lor.
Biosfera este un nveli termodinamic cu temperatura de la +50C
pn la -50C i presiunea n jurul unei atmosfere (101325 Pa); aceste
condiii constituie limita vieii pentru majoritatea organismelor; limita
superioar a biosferei este la 22 km deasupra nivelului mrii; n oceane,
limita inferioar a vieii o constituie la adncimea de 10 km; n scoara
terestr dur (litosfer) limita vieii este determinat de temperatura nalt i
organismele ptrund pn la 4-5 km.
Viaa n biosfer se menine datorit fluxului de energie radiant
folosit de plantele verzi n fotosintez, cnd energia luminoas se transform
n energie chimic. Transformrile complicate ale substanelor n organismele
vii pe contul energiei chimice acumulate n procesul de fotosintez sunt de
natur de natur biochimic i biogeochimic; practic toate substanele
scoarei terestre n cantiti diferite i cu o diferit intensitate sunt antrenate n
circuitul substanelor n natur i trec prin organismele vii.
Structura elementar a biosferei o constituie biocenoza, i anume
organisme cu diferite tipuri de schimb de substane. Bio(geo)cenozele
ncorporeaz

productorii

de

substane

organice

(fotosinteticii

hemosinteticii), consumatorii (care exist pe contul substanelor organice) i


13

Lorentz JNTSCHI

reductorii (ce mineralizeaz substanele organice). n aceste procese se


realizeaz transformarea energiei luminoase n diferite alte tipuri de energie.
Transformarea substanelor, energiei i informaiei n biogeocenoze i
n biosfer n ansamblu decurge continuu din momentul apariiei vieii, ceea
ce a modificat esenial aspectul planetei.
Studiul principiilor organizrii i reglrii transformrii substanelor,
energiei i informaiei n natura vie este obiectivul ciberneticii biosferei.
Toate organismele vii formeaz biomasa planetei. Ea constituie cca.
0.01% din masa scoarei terestre ns n pofida masei mici, rolul acestora n
procesele ce se desfoar n biosfer este enorm. Organismele vii au
transformat radical alte nveliuri ale planetei. Activitatea organismelor vii
condiioneaz compoziia chimic a atmosferei, concentraia srurilor n
hidrosfer, formarea unor roci i distrugerea altora n litosfer, formarea
nveliurilor de sol i altele.

2.2. Biomasa i Biosfera


n cadrul litosferei, organismele vii contribuie la crearea rocilor.
Origine organogenic au:

calcarurile ce se formeaz n mri din scheletele organismelor;

diatomitul din resturile algelor monocelulare;

crbunele, isturile combustibile, petrolul din resturile de esuturi moi


de plante i animale, supuse transformrilor chimice; rezervele de
substan organic din scoara terestr depesc de cteva ori cantitatea de
substan organic vie;
Organismele vii contribuie direct i indirect i la distrugerea rocilor:

14

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

lichenii distrug direct stncile chimic (cu ajutorul fermenilor) i mecanic


(rupnd buci de roci);

apele naturale ce conin n stare dizolvat oxigen i bioxid de carbon de


origine biogen i ali compui organici; datorit acestei compoziii
capacitatea de dizolvare a apei naturale sporete cu mult i astfel se
distrug multe roci;
Materialele iniiale pentru formarea solului sunt straturile superficiale

de roci iar sub aciunea microorganismelor, plantelor i animalelor se


formeaz nveliul de sol. n compoziia organismelor se concentreaz
elementele biogene; dup moartea plantelor i animalelor i descompunerea
acestora aceste elemente trec n compoziia solului; ca rezultat n sol se
acumuleaz elemente biogene i alte substane organice nedescompuse
complet. n sol se gsete un numr colosal de microorganisme; ntr-o ton de
cernoziom numrul de microorganisme se ridic la cifra de 25102, deci solul
are o origine biogen. n sol sunt compui organici, anorganici i organisme
vii i apariia i existena solului n absena biosferei este imposibil. Solul
este habitatul multor organisme; din el plantele absorb substane nutritive i
ap.
Compoziia chimic a atmosferei este reglat de activitatea
organismelor vii. Aerul uscat din stratul atmosferei de la suprafaa
pmntului conine:

Azot (7810-2 g/l);

Oxigen (0.210-2 g/l);

Argon (910-3 g/l);

Bioxid de carbon (3310-5 g/l);


Din cele 4 gaze care alctuiesc atmosfera numai argonul nu ine de

activitatea vital a organismelor; consumul i furnizarea oxigenului, azotului


i bioxidului de carbon este reglat de organisme. n straturile superioare ale
15

Lorentz JNTSCHI

troposferei din oxigen se formeaz ozonul; moleculele de ozon absorb razele


ultraviolete care sunt nocive pentru via.
Datorit stratului de ozon, care este rezultatul aciunii vitale a
organismelor este posibil existena vieii pe uscat i n straturile superioare
ale apelor oceanelor.
n concluzie, viaa singur i-a creat mediul su de via.
n cadrul hidrosferei, compoziia chimic a apelor naturale se
formeaz direct i indirect sub aciunea organismelor. De asemenea,
organismele vii i produsele activitii lor vitale contribuie la splarea unui ir
de substane; aceste substane, apoi dizolvate n apele rurilor i apoi n apele
marine se concentreaz de ctre multe organisme. De exemplu fierul ajunge
n mare sub form de compui cu substanele organice; o parte din acest fier
se depune pe cale biogen: se acumuleaz n scheletele echinodermelor,
sarcodinelor i n algele marine.
n concluzie biosfera include:

Substana vie (totalitatea organismelor vii);

Substana biogen ce se formeaz ca rezultat al activitii organismelor


vii:
o Gazele din atmosfer;
o Rocile de origine organic: crbunele, petrolul, calcarul, etc;
o Substana inert (aprut fr participarea organismelor vii) cum ar fi
rocile expulzate i meteoriii.

2.3. Migrarea Elementelor


Fiinele vii realizeaz migrarea elementelor n litosfer, hidrosfer i
sol, schimbul de elemente ntre hidrosfer, sol i atmosfer, dintre uscat i
16

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

mare, circuitul apei, carbonului, oxigenului i altor elemente ce intr n


compoziia substanei vii.
Pe suprafaa terestr nu-i o alt for chimic care s-ar caracteriza
printr-o aciune mai continu (de zeci de milioane de ani) i de aceea mai
puternic (dup rezultatele finale) dect organismele vii, luate n ansamblu.
Anual pe pmnt se formeaz 41011 tone de substan organic. n
biosfer practic atomii tuturor elementelor au trecut prin starea de substan
vie.
Elemente ca iodul, fosforul, sulful, potasiul aproape complet sunt
concentrate n substana vie, circulnd continuu n organismele vii.
Oxigenul i azotul atmosferei, tot acidul carbonic sunt de origine
organogen. Rolul organismelor vii n biosfer este determinat de capacitatea
lor de acumulare i transformare a energiei solare, de a se reproduce,
asigurnd continuitatea activitii i acumularea i de a efectua reacii
chimice cu o aa vitez care de cteva ori depete viteza reaciilor din
natura nevie.

2.4. Circuitul Substanelor n Biosfer


Toate organismele n procesul activitii lor vitale consum
substanele din mediul nconjurtor. Fiecare specie de organisme le
prelucreaz n felul su i le ntoarce n mediu n alt form. n aceast form
substana nu poate fi folosit de indivizii aceleiai specii sau de organismele
altor specii cu schimb de substane identic.
Produsele activitii vitale a unor organisme se consum de altele care
au caracter diferit al metabolismului i n cele din urm n lanul metabolic
sunt antrenate toate speciile.
17

Lorentz JNTSCHI

Ca rezultat aceeai substan este folosit multiplu pentru formarea


materiei vii.
Un astfel de exemplu este faptul c nutriia organismelor heterotrofe
depinde de cele autotrofe i necesitatea tuturor aerobilor de oxigen subliniaz
dependena acestora de plantele verzi.
Nici organismele autotrofe nu pot exista fr organismele heterotrofe
cci cantitatea de substan neorganic necesar pentru sinteza substanelor
organice de pe Tera este nelimitat. Drept surs de noi sinteze organice
servesc produsele descompunerii substanelor organice sintetizate anterior.
Aceste sinteze sunt realizate de unele organisme heterotrofe n principal de
bacterii astfel c plantele verzi pentru sinteza amidonului necesit CO2
expirat n atmosfer de organismele vii.
n concluzie rezult c n atmosfer se stabilete un echilibru ntre
organismele heterotrofe i autotrofe.
Mai mult, nutriia organismelor heterotrofe este ntotdeauna n
dependen de alte organisme, ceea ce condiioneaz apariia unor lanuri
trofice complexe. Astfel:

Animalele i omul consum substanele organice sintetizate de plante;

Plantele verzi n procesul fotosintezei utilizeaz bioxidul de carbon


expirat de organismele vii;

Bacteriile i fungiile descompun substanele organice.


Toate organismele vii sunt antrenate n circuitul substanelor n

natur. Produsele activitii vitale a unor organisme sunt necesare pentru


existena altora. Astfel se creeaz unitatea continu a naturii vii i nevii.
Procesul continuu de trecere a elementelor chimice dintr-un compus
n altul din componena scoarei terestre n organismele vii, scindarea lor
ulterioar n compui neorganici i elemente chimice i din nou trecerea n
componena scoarei terestre se numete circuitul substanei i energiei.
18

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Pe parcursul existenei biosferei componena specific a animalelor,


plantelor i microorganismelor ce nfptuiesc acest circuit continuu s-a
schimbat n repetate rnduri. ns ntotdeauna activitatea lor n comun
meninea regimul biogeochimic necesar pentru existena vieii.
Din totalitatea de elemente chimice cunoscute circa 40 sunt antrenate
de organismele vii n circuitul activ. Aceste elemente sunt numite ciclice sau
biogene.
Pentru organismele vii o importan mai mare o prezint circuitul
carbonului, azotului, oxigenului, hidrogenului, fierului, fosforului, sulfului,
potasiului, calciului, manganului, siliciului ns dou cicluri identice ale
aceluiai element nu exist. n fiecare ciclu nou apar cteva schimbri.

2.5. Ciclurile Biogeochimice


Carbonul intr n compoziia tuturor compuilor organici. n scoara
terestr coninutul lui nu depete 0.5%, n atmosfer dup mas este doar
0.008%, ns n masa uscat a animalelor se gsete circa 20% iar n cea a
plantelor pn la 45%. De aceea substana organismelor vii la temperatur
nalt se carbonizeaz. n aerul atmosferic exist permanent bioxidul de
carbon eliminat de organisme n procesul activitii vitale. Furnizorii
principali de CO2 n atmosfer sunt vulcanii i apele freatice saturate cu
carbonai.
Coninutul total de CO2 n atmosfer este de 2.11012 tone. Apa de
mare conine circa 50 cm3 CO2 n fiecare litru, deci n oceanul planetar
coninutul lui este de 161015 tone, de 8 ori mai mult dect n atmosfer.
n procesul de fotosintez plantele verzi asimileaz carbonul pe care
frunzele l primesc din aer sub form de bioxid de carbon i formeaz
19

Lorentz JNTSCHI

glucidele. n procesul respiraiei plantelor o parte din glucide se oxideaz i


bioxidul de carbon nimerete din nou n atmosfer. Cea mai mare parte din
glucide se acumuleaz n plante, n care se mai formeaz de asemenea
proteine, grsimi, vitamine.
Plantele sunt mncate de animalele erbivore i om. Astfel carbonul
trece n organismul animalelor i omului. n timpul respiraiei glucidele se
oxideaz. Pe contul energiei eliberate se desfoar toate procesele vitale iar
bioxidul de carbon se elimin n atmosfer.
Putrefacia se desfoar cu participarea bacteriilor de putrefacie. n
urma acestui proces de asemenea are loc oxidarea carbonului cu formarea de
CO2 ce se elimin n atmosfer. La descompunerea organismelor n lipsa
oxigenului adic fr oxidare (de exemplu pe fundul bazinelor) se formeaz
turba, crbunele de pmnt, petrolul i isturile. Omul le folosete drept surs
de energie iar bioxidul de carbon eliberat nimerete din nou n atmosfer.
Astfel un cerc se ncheie i ncepe un nou ciclu de antrenare a
carbonului n compui organici, sintetizai de plante.
Azotul este un element obligatoriu din compoziia proteinelor. Masa
principal de azot este coninut n atmosfer. ns plantele nu pot asimila
azotul liber. El este trecut n compui organici de ctre bacteriile
azotofixatoare.
Compuii cu sulf existeni n atmosfer cuprind n principal H2S, SO2,
SO3 i sulfai [1]. Ei intr n atmosfer pe o mare ntindere, prin activiti
umane. Se estimeaz c aproximativ 65 milioane de tone de sulf pe an intr n
atmosfer prin activiti antropologice, n principal la arderea combustibililor
[2]. Principalele aspecte ale ciclului global al sulfului n atmosfer sunt date
n fig. 18.

20

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Fig. 18. Ciclul sulfului n atmosfer ([3])

2.6. Biocenoza
Animalele vii nu sunt uniform repartizate pe suprafaa planetei. Exist
ns anumite sectoare omogene n ceea ce privete repartiia speciilor.
Un sector omogen conine o serie de biotipuri ale speciilor iar
comunitatea de populaii ce formeaz un biotip se numete biocenoz.
O biocenoz conine cteva specii care sunt factorii regulatori
principali. Astfel, biocenozele terestre au ca specii regulatori principali
plantele.
21

Lorentz JNTSCHI

Pe lng comembrii biocenozei (plante, animale, microorganisme)


natura nevie ce le nconjoar (sol, ape subterane, straturile inferioare ale
troposferei) formeaz biogeocenoza.
Biogeocenoza este un sistem unic, dinamic si stabil. Dimensiunile
unei biogeocenoze pot varia de la civa metrii pn la civa km i fiecare
biogeocenoz se caracterizeaz prin:

circuit specific al substanelor;

transformarea energiei solare;

productivitatea biomasei.
n biogeocenoze exist 3 grupe de comembrii:

sintetizatorii (productorii de substane organice) organisme autotrofe;

consumatorii (transform substanele organice);

distrugtorii (mineralizeaz substanele organice).


O biogeocenoz este un sistem deschis i ntre toi componenii

biogeocenozei se stabilete un echilibru dinamic homeostaza ecologic.


Evoluia fiecrei specii de organisme se desfoar n condiiile unei
anumite biogeocenoze i ca rezultat a aprut adaptarea reciproc a speciilor.
Productivitatea biologic a biogeocenozei este un element important
n caracterizarea sa. Se definete productivitatea primar ca biomasa plantelor
ce se formeaz ntr-o unitate de timp.
Omul creeaz agrobiocenozele artificiale (cpiile, ogoare, puni,
livezi, plantaii forestiere, rezervoare de ap). Acestea sunt cu mult mai
productive dar nu pot exista fr ngrijirea omului. Mai mult, spre deosebire
de biogeocenozele naturale, agrobiocenozele artificiale se caracterizeaz prin
omogenitatea componenei specifice.
Este important de reinut c folosirea neraional a resurselor naturale
duce de multe ori la dereglarea echilibrului n comunitile biologice.

22

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

2.7. Ecologia omului


n cadrul ecologiei omului se studiaz relaiile cu mediul nconjurtor
(condiiile biotice, abiotice i sociale).
Aciunea mediului natural asupra omului este mai mult sau mai puin
estompat prin folosirea de mbrcminte, foc i construcia de locuine.
Mediul nconjurtor din imediata vecintate este modificat prin
construcii locative, gospodreti, industriale, plantaii de arbori, terenuri
agricole, funcionarea ntreprinderilor industriale i agricole i transportului.
Spre deosebire de orice alt organism viu, ce populeaz doar un anumit
areal, ce ine seama de anumite condiii naturale, omul s-a stabilit cu traiul pe
toat planeta, avnd astfel cel mai ntins areal cosmopolit.
Interaciunea omului cu factorii biogeografici i antropogeni ai
mediului se face la diferite moduri de organizare:

organismic;

populaional;

specific;

biocenotic;

biosferic.
La nivelul organismic se desfoar procese ontogenetice i

fiziologice; pentru realizarea lor omul necesit anumite condiii de hran,


ap, lumin, temperatur.
Reaciile individuale ale organismului la factorii mediului se
evideniaz n condiiile provinciilor geochimice (n care se constat
insuficiena sau surplusul unor elemente chimice, ce provoac boli endemice
(locale). De exemplu, insuficiena de Co se rsfrnge negativ asupra sintezei
cianocobalaminei (vitamina B12); are ca efect diminuarea metabolismului

23

Lorentz JNTSCHI

nucleic i micorarea capacitilor de adaptare la factorii nefavorabili ai


mediului.
Alt exemplu, insuficiena de Cu duce la diminuarea metabolismului
lipidic i ncetinirea maturizrii eritrocitelor n timp ce surplusul de Mo
favorizeaz dereglarea metabolismului purinic, de care este legat sinteza
acidului uric; acesta, fiind un compus puin solubil se depune n articulaii
provocnd o boal asemntoare cu podagra, denumit podagr endemic
molibdenic.
La un surplus de Sr se poate declana condrodistrofia, ce duce la
nanism, picioare i mini scurte, brahidactilie iar n provinciile cu
insuficien de iod este rspndit gua endemic, ce ine de mrirea glandei
tiroide.
Reacia individual a organismului se manifest cel mai bine la
schimbarea mediului de trai, i mai ales atunci cnd omul nimerete n
condiii extreme de mediu.
Adaptarea (aclimatizarea) este condiionat de rezervele fiziologice
ale organismului. Astfel, la schimbarea temperaturii mediului ncep s
funcioneze mecanismele de termoregulare. La trecerea ntr-o nou zon
orar sau la urcarea n muni pentru aclimatizare se cer uneori cteva zile iar
mutarea n alte condiii climatice uneori sptmni sau chiar luni sau s nu
se stabileasc deloc.
La nivel populaional specific se poate spune c n epoca
paleolitului superior (n zorii istoriei umane) s-au format principalele trsturi
de ras, ce poart un caracter adaptiv (fig. 19).

24

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Fig. 19. Era paleozoic i cenozoic

Fig. 20. Caricaturi ale evoluiei umane (Vanity Fair Newspaper, 1920)
Astfel, pielea ntunecat a rasei ecuatoriale mpiedic trecerea
radiaiei UV, prul crlionat prin neaderarea lui strns la pielea capului
servete drept barier pentru razele solare, buzele subiri, tietura ngust a
ochilor, epicantusul rasei mongoloide s-au format drept adaptare la clima rece
25

Lorentz JNTSCHI

i uscat a stepelor i pustiurilor de N-V, unde praful i frigul pot vtma


membrana mucoas a ochiului, forma plat a feei (din experiment)
micoreaz pericolul suprarcirii n timp ce pielea alb a rasei europoide s-a
format n rezultatul acomodrii la clima nordic unde insuficiena de
calciferol n hran duce la rahitism. Sub aciunea razelor solare, aceast
vitamin se poate sintetiza n grosimea pielii, ns nu e necesar ca pielea s
fie aprat de pigment ntunecat.
Trsturile adaptive sunt reaciile care apar convergent n diferite
populaii ce se gsesc n condiii de trai identice independent de rudenia lor
genetic sau apartenena la ras. Astfel, un complex apropiat de trsturi
caracteristice pentru zona tropical se observ la populaia europoid din
India, aborigenii din Australia i negroizii din Africa i analog, un tip adaptiv
arctic ntlnim la saami europoizi, nenii mongoloizi, ciuccia, eschimoii.
Dac trsturile de ras s-au format n zorii istoriei umane, tipurile
adaptive se formeaz pe tot parcursul istoriei umanitii.
La nivelul biocenotic, ca parte a biocenozei, omul intr n anumite
relaii cu alte organisme. Cu unele specii ntreine o legtur permanent i
strns ntruct el singur reprezint o biocenoz, n care vieuiesc bacteriisimbioni (bacilul coli componentul florei intestinale normale) i endo- i
ectoparazii.
Tot mediul ce nconjoar pe om constituie practic fie cenoze
(biocenoze) artificiale create de om fie biogeocenoze naturale modificate ntro oarecare msur de activitatea omului iar biogeocenoze absolut
neschimbate nu mai exist practic pe planet. n aceste biogeocenoze (numite
i antropobiogeocenoze) decurge viaa, desfoar activitatea gospodreasc
i de toate zilele, de acestea in factorii de sntate i restabilire a capacitii
de munc.

26

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Din punct de vedere medicobiologic biogeocenozele se mpart n 3


grupe:

biocenoze naturale, nc puin supuse aciunii omului;

comuniti steti;

comuniti oreneti i industriale.

Fig. 21. Biocenoz natural


Biocenozele naturale (fig. 21) se caracterizeaz printr-o varietate mai
mare de plante i animale i se ntlnesc n diferite zone landaftogeografice
i n aceast privin reprezint o mare varietate (pustiuri arctice, tundra,
silvotundra, taigaua, pdurile mixte i de foioase, stepa, semipustiurile,
pdurile subtropicale, pdurile musonice i mixte. De acestea ine existena
bolilor cu focalitate natural; aceste focare puteau s existe n natur pe
27

Lorentz JNTSCHI

parcursul mai multor secole independent de om, ns intervenia omului n


focarele strvechi ale bolilor este deseori cauza izbucnirii morbiditii.
Transformarea naturii poate duce la stingerea i lichidarea focarelor,
propagarea infeciei n afara focarelor primare, sau la apariia focarelor noi,
ce in de activitatea omului. Astfel au fost lichidate focarele naturale ale
pestei n Europa i Transbaicalia, focarele leishmaniozei n Turcmenia; pe de
alt parte nlocuirea landafului de pdure n zona central a Rusiei prin
lanaft de fnee de cmp a generat modificarea componenei roztoarelor
murine i apariia unor noi focare de tularemie. n Africa lrgirea reelei
anurilor de irigare a dus la apariia unor noi focare de schistomiaz,
deoarece s-a mrit suprafaa biotipurilor populate de molute, care sunt
gazdele intermediare ale trematodului; pe teritoriile pustiurilor din trecut n-au
fost nregistrate mbolnviri locale de ascaridoz ntruct din cauza
insuficienei de umiditate din sol oule de ascarid nu supravieuiau; n
rezultatul construciei sistemelor de irigare clima n aceste locuri s-a
schimbat, apropiindu-se de cea subtropical umed, i concomitent au aprut
focarele locale de ascaridoz. Febra galben se ntlnea iniial doar n Africa
Central i de Vest, unde era boala primatelor, transmis de narii ce
vieuiau n jungl; ulterior, cnd una din speciile de nari de transmiteau
virusul febrei galbene, Aedes Aegypti, a nceput s trisc n apropierea
locuinelor omeneti, devenind n rezultat o specie sinatrop (din greac: sin
= mpreun, antropos = om). Astfel au aprut focare intraoreneti de febr
galben. Odat cu Europenii i robii negri au ptruns n america tropical
agentul patogen al febrei galbene i narul Aedes Aegypti, ceea ce a generat
izbucnirea mai nti a focarelor intraoreneti iar apoi i a celor secundare
suburbane; n cele secundare gazde ale agentului patogen s-au dovedit a fi
maimuele americane (cu nasul lat), iar vectori speciile americane de nari.

28

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Comunitile steti (agrocenozele) se caracterizeaz prin resturi


nensemnate de plante i animale slbatice, teritorii imense ocupate de plante
de cultur, un numr mare de animale domestice (componena specific a
acestora este limitat). Componena specific i particularitile activitii
gospodreti contribuie la rspndirea unor specii de zoonoze (echinococoza
i tularemia) i altele. n rile cu clim cald i agricultur irigat contribuie
la rspndirea biohelmiilor (schistosomozelor). Activitatea gospodreasc n
aceste cenoze are ca scop sporirea recoltei culturilor agricole i a
productivitii animalelor domestice (fig. 22).

Fig. 22. Agrocenoz


Ocrotirea mediului nconjurtor trebuie s se orienteze la folosirea
raional a ngrmintelor chimice, pesticidelor, efectuarea msurilor
profilactice pentru ntmpinarea zoonozelor i helmiilor.

29

Lorentz JNTSCHI

Cenozele oreneti i industriale (urbanocenozele) se caracterizeaz


prin aglomerri mari de oameni, suprafee nensemnate de vegetaie plantat
artificial, faun srccioas, poluarea frecvent a mediului ambiant cu
deeuri industriale i de transport. Poluarea mediului i factorii industriali pot
fi cauza bolilor profesionale i alergice i a traumatismelor; promiscuitatea,
factorii profogeni, ritmul ncordat al vieii oreneti, hipodinamia creeaz
premisele pentru bolile de nervi, psihice i cardiovasculare (fig. 23).

Fig. 23. Urbanocenoz


Sarcina medicosanitar n urbanocenoze const n prentmpinarea
polurii mediului nconjurtor, introducerea n producie a circuitelor nchise,
fr deeuri, combaterea zgomotului, traumatismului rutier i de producie,
crearea zonelor verzi n orae i n jurul lor, propagarea modului de via
sntos, culturii fizice i sportului.

30

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Cosmocenozele (fig. 24) sunt un tip special de biocenoze, care a


aprut odat cu navele cosmice. Biologia cosmic este cea mai tnr ramur
a tiinelor biologice, care studiaz aciunea factorilor spaiului cosmic asupra
organismelor terestre. Una din sarcinile biologiei cosmice este i studierea
formelor posibile de via extraterestre.

Fig. 24. Instalarea primei structuri (din 4) n interiorul laboratorului U. S. A.


de pe Staia Spaial Internaional (10 Decembrie 1997)
Problema principal este crearea sistemelor nchise ce asigur
existena omului n spaiul cosmic. Posibilitatea principal de creare a unui
spaiu nchis se bazeaz pe constatarea c substanele consumate de
31

Lorentz JNTSCHI

organismele mature sunt eliminate n mediul nconjurtor n strict


conformitate cu cantitatea consumat. ntrebarea principal este aici cum pot
fi reintroduse n circuit produsele activitii vitale.
n condiiile biocenozelor terestre circuitul substanelor se realizeaz
datorit activitii a 3 grupe de organisme (productori, consumatori,
distrugtorii). Sarcina habitatului ntr-un sistem artificial nchis se reduce la
crearea unui circuit asemntor al substanelor; ntruct la baza circuitului
substanelor stau dou procese diametral opuse (sinteza autotrof a
substanelor organice i scindarea acestor substane).
Revenind la cosmobiocenoze, n nava cosmic pe lng om mai
trebuiesc introduse i aceste dou grupe de organisme; sinteza substanelor
organice cu acumularea n ele a energiei poate fi nfptuit de organismele
fotoautotrofe (plantele superioare, algele unicelulare). Hrana animal
(aminoacizii metioninei i cistinei) poate fi asigurat prin introducerea
crustaceelor de plancton (artemiile, dafniile) sau a speciilor de molute fr
cochilie. La baza metodei biologice de mineralizare a deeurilor organice pot
fi puse procesele de oxidare aerob n reactoarele utilizate pentru purificarea
apelor de menaj. n prezent se creeaz noi metode de mineralizare, ntruct
astfel de produse finale s corespund mai bine necesitilor plantelor.
n timpul zborului cosmic omul suport aciunea diferiilor factori:
vibraii, suprasarcini, imponderabilitate.
Unul dintre efectele nedorite ale zborului care trebuiesc compensate
este c n stare de imponderabilitate greutatea corpului este nul, presiunea
hidrostatic a sngelui n vase se niveleaz, sngele este repartizat uniform n
toate prile corpului i starea de repleiune sangvin a prii superioare a
trunchiului este mai mare i se intensific procesul de eliminare a lichidelor
din organism precum i a ionilor de Na+ i Ca2+.

32

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

3. Microbiologie

3.1. Microbiologia i Biologia Celular


Toate organismele vii sunt compuse din celule. Cele cinci
caracteristici importante ale celulelor sunt:

auto-hrnirea sau nutriia (funcia main, fig. 25);

auto-replicarea sau creterea (funcia de codificare, fig. 26);

divizarea (formarea unei noi celule iar sporificarea este parte a propriului
su mod de via, fig. 27);

Mediu

Celula

Fig. 25. Auto-hrnire (nutriie)

Spor
Fig. 26. Autoreplicare (cretere)
33

Lorentz JNTSCHI

Fig. 27. Divizare

Fig. 28. Comunicarea cu alte celule prin semnale chimice

transmiterea de semnale chimice (comunicarea cu alte celule, fig. 28);

evoluia (schimbri care duc la apariia unor noi proprieti biologice, fig.
29).
Aparent, celulele par a nu respecta legile fizicii fiind structuri cu grad

nalt de ordine ntr-o lume n care trendul general este de a deveni mai puin
ordonat n timp. ntrebarea care se pune este "Cum reuesc acestea s
menin ordinea?" i rspunsul: prin generarea continu de energie i o parte
din aceasta este folosit pentru a menine structura celulei.
34

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Celula originar
Nou cod
Fig. 29. Evoluie (apariia de modificare n codul genetic)
Generarea energiei este o caracteristic important a metabolismului.
Alte caracteristici ale metabolismului sunt reaciile chimice prin care se
sintetizeaz compui i se formeaz structura celulei.
Reaciile chimice sunt catalizate de ctre molecule de proteine numite
enzime. Enzimele trebuie s posede o anumit structur pentru a funciona;
astfel, ele trebuie s nglobeze un set de informaii (gene) care codific
structura fiecrei proteine din celul. Setul de instruciuni este codificat n
DNA, materialul genetic al celulei. Exist de asemenea un sistem de
transformare, RNA, care convertete informaia codificat n DNA n proteine.
Cteva tipuri de molecule RNA (RNA mesager, RNA ribozom i RNA de
transfer) sunt eseniale pentru acest proces.
Rezultatul biosintezei este creterea celulei. Pentru ca celula s se replice, ea
trebuie s sintetizeze mai mult de 1000 de molecule diferite de proteine.
35

Lorentz JNTSCHI

Celulele au informaie genetic pentru a produce aproximativ 3000 de


proteine diferite iar genele pe care aceasta le conin sunt cele care sunt
capabile s codifice proteinele cele mai utile pentru supravieuire i cretere
n condiiile de mediu existente.
Celula trebuie de asemenea s i copieze fidel informaia genetic
atunci cnd o pune ntr-o nou celul. Greelile n copiere sunt fcute
ocazional; aceste mutaii sunt n general duntoare i ucid celula. Oricum,
ele asigur un mecanism prin care celula achiziioneaz noi proprieti. Acest
fenomen apare dac proteina codat de gena mutant catalizeaz o reacie
diferit fa de proteina originar. n condiii favorabile de mediu, aceast
celul mutant poate avea un avantaj selectiv (care const n faptul c se
poate replica mai rapid dect competitorii). Principiul seleciei naturale este
subliniat de teoria evoluiei a lui Darwin.
Sunt dou tipuri structurale de celule: celulele procariote sunt relativ
simple n structur; eucatiotele n schimb sunt mai complexe n sensul n care
conin organite, care sunt compartimente pentru funcii metabolice speciale.
Aceste organite includ un nucleu adevrat, mitocondrii i cloroplasma. n
plus, biologii opereaz cu viruii, care sunt entiti necelulare care folosesc
instrumentul metabolic al celulelor pentru a se replica.
Dihotomia ntre tipurile structurale de celule nu red cu fidelitate
evoluia relaiilor dintre organisme. Analiza secvenelor de nucleotide ale
RNA ribozom au artat c exist dou grupuri de procariote: Archaea i
Bacteria. Aceste grupuri nu mai sunt acum apropiate unul fa de altul aa
cum sunt ele apropiate de Eucaria (vezi fig. 30).
Microorganismele triesc n habitate n care creterea lor este afectat
de interaciunile cu populaiile altor microbi ca i de proprietile fizicochimice ale mediului. nelegerea interaciunilor ecologice n comunitile
microbiene este esenial n stabilirea rolului microbilor n natur. Este dificil
36

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

de studiat microbii n natur. De aceea, tot ceea ce cunoatem despre microbi


s-a nvat de la culturile pure.

Originea vieii
Archaea

Eucaria

Bacteria

Plante i animale
Fig. 30. Evoluia relaiilor dintre organisme
Cteva specii de microbi pot avea efecte devastatoare asupra omului,
cauzndu-i boli infecioase. Un mare succes al microbiologiei a fost
controlul bolilor infecioase letale n rile n curs de dezvoltare. Oricum,
aceste boli sunt nc importante cauze de deces n zonele mai puin dezvoltate
ale lumii. Lsnd aceste aprecieri asupra anumitor specii, cea mai mare parte
a microorganismelor sunt benefice. Funcionarea corespunztoare a biosferei
i a solului depinde de activitatea acestora. De mult mai mare impact asupra
oamenilor se bucur industria productoare de antibiotice, de produse
alimentare, compui organici i biomas. O descoperire recent o reprezint
industria biotehnologiilor care folosete microbii ca fabrici pentru a produce
proteine din gene de plante i animale prin introducerea lor n bacterii ADN.
Microbii sunt de asemenea importani n agricultur i biodegradarea
alimentelor.
Microbii au fost descoperii acum 300 de ani de microscopistul van
Leeuwenhoek dar cea mai mare parte a descoperirilor din microbiologie au
fost fcui n ultimii 100 de ani. Louis Pasteur i Robert Koch sunt doi lideri
n dezvoltarea disciplinei. Printre alte multe realizri, Pasteur a contrazis
teoria generaiilor spontane definitiv. Foate important este demonstraia c
37

Lorentz JNTSCHI

experimentele cu microbi sunt reproductibile i nu este o consecin a


apariiei unei noi viei. Koch a descoperit criterii ferme pentru a demonstra c
o boal specific este cauzat de o bacterie specific (postulatele lui Koch).
Obinerea culturilor pure a fost esenial pentru succesul criteriilor lui Koch i
utilizarea culturilor pure rmne i azi un instrument esenial n studierea
bolilor infecioase.

3.2. Legturile Chimice


Toate formele de via conin tipuri similare de molecule i muli
dintre aceti compui biochimici nu sunt gsii n materialele care nu sunt de
natur biologic. Chiar dac ele sunt unice, moleculele celulare respect
legile fizicii i chimiei. Aceste molecule sunt compuse din atomi ai a 92 de
elemente naturale de pe pmnt i doar 6 dintre acestea sunt componente
majore ale biomasei (H, C, N, O, P, S).
Carbonul este cel mai important dintre acestea. El poate stabili
legturi chimice cu ali atomi n mai multe moduri pentru a produce molecule
complexe i diverse. Atomul const dintr-un nucleu care conine protoni
ncrcai pozitiv i neutorni i un numr de electroni ncrcai negativ care
orbiteaz n jurul nucleului. Punerea n comun de electroni constituie o
legtur chimic. Dac electronii sunt pui n comun n mod egal, legtura
este covalent i este una relativ puternic. Legturile covalente pot fi
formate sau rupte n celule doar de reacii specifice catalizate de enzime.
Cteva alte interaciuni necovalente sunt de asemenea biologic importante n
determinarea formei moleculelor, sau n legarea macromoleculelor de ali
compui.

38

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Legturile de hidrogen (vezi fig. 31-33) sunt formate prin atracia


spontan a atomilor ncrcai slab pozitiv de atomii ncrcai slab negativ din
molecule.
H

H
O

H
O H

H
O

H
O
H
Fig. 31. Legturi de hidrogen ntre molecule de ap

CH2

HC

C O H N
N H O C
CH2

CH2

C O H N
N H O C
CH

H2C

Fig. 32. Legturi de hidrogen ntre aminoacizi n lanurile proteice


O legtur simpl de hidrogen este mult mai slab dect o legtur
covalent, dar cnd un mare numr de legturi de hidrogen sunt formate n
sau ntre molecule, acestea pot avea un efect semnificativ.
n legturile hidrofobe molecule care intr n contact cu apa formeaz
o asociere.
39

Lorentz JNTSCHI

H
N H O

O H N

N H N
N
H

N H N

O H N

O
H
Timin

H
Citozin

Guanin

Adenin

Fig. 33. Legturi de hidrogen ntre bazele din DNA


Natura vieii pe pmnt este determinat nu numai de chimia atomului
de carbon ci i de proprietile de solvent ale apei. Cea mai mare parte a
greutii unei celule (70 - 90%) este format de ap, i reaciile biochimice nu
au loca dac nu exist o cantitate suficient de ap. Moleculele de ap sunt
slab polare (tendina ca sarcinile + i s se separe n molecule).

O
H

Fig. 34. Molecula de ap


Consecinele acestei polariti sunt:

moleculele biochimice polare importante (ca proteine, acizi nucleici,


moleculele mici folosite ca nutrieni i elemente de construcie) sunt
solubile n ap;

moleculele nepolare (ca lipidele) nu sunt solubile n ap i formeaz


agregate sau se aglomereaz.

40

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Agregatele de lipide formeaz bariere ca membranele i afecteaz micarea


moleculelor polare nspre sau n afara celulelor.
Macromoleculele formeaz structura celulei, catalizeaz reaciile
metabolice i conin codul informaiei de replicare a celulei. Sunt 4 tipuri
importante de macromolecule celulare: acizi nucleici, proteine, polizaharide
i lipide. Fiecare molecul este un polimer compus dintr-o secven de
blocuri constructive legate prin legturi covalente. Este important de
cunoscut caracteristicile fiecrui bloc constructiv pentru fiecare tip de
macromolecul.
n funcie de natura lanului macromolecular polimerii se mpart n:

carbocatenari (cu lan alctuit numai din atomi de carbon: policlorur de


vinil, polietilen, polibutadien);

heterocatenari (lan alctuit i din ali atomi: oxigen, azot, sulf, siliciu pe
lng cei de carbon: poliamide, poliuretani, poliesteri, polizaharide).
Dup tipul reaciilor prin care se obin polimerii sintetici, ei se

clasific n:

polimeri obinui prin reacii de policondensare;

polimeri obinui prin reacii de poliadiie.


Polimerizarea a dou specii diferite A i B se numete copolimerizare

i se poate efectua dup una din schemele:

alternativ: ABABABABABAB

ntmpltor: ABBAABBBABAAB

bloc: AAAAAABBBB
B

A A A A A A A A

ramificat:

B
B
41

Lorentz JNTSCHI

Polimerul obinut prin copolimerizare prezint numai n cazuri rare o


alternare regulat a celor doi monomeri i, mai mult, raportul de monomeri n
caten nu corespunde de obicei cu raportul de monomeri din amestecul de
reacie. Din acest caz copolimerii sunt n general substane amorfe.
n acizii nucleici i proteine secvena blocului constructiv variaz de
la o molecul la alta; aceast secven este cea care determin activitatea
biologic a macromoleculei n celul.
Polizaharidele sunt lanuri de carbohidrai variind n lungime de la
100 la cteva mii de uniti. Carbohidraii coninnd 4-7 atomi sunt cei mai
frecveni n celule. Molecule diferite de carbohidrai pot fi formate prin
substituia gruprilor chimice de pe structura de baz a moleculei de zaharoz
i de asemenea prin stereoizomerism, care este obinut prin variaia spaial a
gruprilor OH n lanul carbonic. Unitile de zaharoz n polizaharide sunt
legate ntre ele prin legturi glicozidice. Molecule diferite de polizaharide pot
fi formate prin variaia orientrii legturii glicozidice, variaia monomerului
carbohidrat sau prin folosirea a 2 sau mai muli monomeri ntr-o polizaharid.
Cele mai importante polizaharide sunt celuloza, glicogenul, amidonul i
peptidoglicolul.
CH2OH
H

CH2OH
H
HO

O
H
OH

OH

O
H
OH

OH

OH
H

Fig. 35. Celobioza, structura repetitiv n molecula de celuloz


42

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Fig. 36. Parte din structura glicogenului (G glicogenina, A, B, C izomeri


de structur ai glucozei) primele 5 inele din totalul de 12 [4]

Fig. 37 Glicogenina (proteina situat n centrul structurii de glicogen)


43

Lorentz JNTSCHI

CH2OH
H
H O

O
H
OH

H
O H

Fig. 38. Glucoza, structura repetitiv n molecula de glicogen i amidon [5]


CH2OH
H
H O

CH2OH
O

H
OH
H

H
H3C

O H

HN C O
CH3

HC O
O C
OH

O
H
OH
H

H
O H

HN C O
CH3

Fig. 39. Cele 2 monozaharide aminice ce intr n componena


peptidoglicolului (acizii N-acetil glucozamin i N-acetil muramic)

membran de lipide

peptidoglican

citoplasm

Fig. 40. Membrana celular


Lipidele sunt componeni ai membranelor, bariera permeabil a
celulelor. Natura lor chimic le recomand pentru aceast folosin. Acizii
grai pe care acestea i conin au n componen grupri hidrofobe care
previn ca moleculele ncrcate electric sa traverseze membrana (fig. 40).
44

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Sunt dou tipuri de acizi nucleici (DNA i RNA). Amndou sunt compuse
din blocuri constructive de nucleotide. Unele nucleotide au de asemenea i
alte funcii n metabolismul energetic (ATP). Toate nucleotidele conin un
zahar (glucoz, fructoz, .a.), un fosfat, i o baz azotat. Cei doi acizi
nucleici difer unul de cellalt prin zaharul din blocul constructiv. n
amndoi, polimerul se formeaz prin legturi covalente ntre zahar i
gruprile fosfat ntre nucleotidele adiacente. Acest cuplaj zahar-fosfat este
regula general pentru toate moleculele de acizi nucleici. Trei baze sunt
comune pentru RNA i DNA: adenina, guanina i citozina (fig. 33). A patra
baz n RNA este uracil (fig. 41) iar n DNA este timina (fig. 33).
O
NH
O
NH

Fig. 41. Uracil, a patra baz n RNA


DNA conine puni duble zahar-fosfat care sunt legate ntre ele prin
legturi de hidrogen ntre baze prin perechi de puni. Aici exist preferin
pentru perechi de baze n formarea legturilor de hidrogen. Cele 4 baze se
combin i compuii rezultai se mpart n dou clase: purine i pirimidine.
Purina este format din asocierea adeninei i timinei (fig. 33) n timp ce
pirimidina se formeaz din guanin i citozin (fig. 33).
Dou puni de DNA au o secven complementar. Dac se tie o
punte, se poate construi secvena celeilalte prin respectarea regulii de perechi.
Acest principiu furnizeaz celulei o cale comod pentru a copia cu acuratee
secvena DNA, care este informaia genetic.
RNA difer de DNA prin faptul c sunt n mod obinuit formate din
puni simple. Mai mult, moleculele de RNA au cel mult cteva mii de
45

Lorentz JNTSCHI

nucleotide, n timp ce DNA poate conine milioane de nucleotide. Sunt 3


clase de RNA, care sunt importante n conversia secvenei de nucleotide
DNA din gen n secven de aminoacizi n protein.
Proteinele sunt iruri de aminoacizi legate prin legturi peptidice
covalente. Legturile se formeaz ntre o grupare amino a unui aminoacid i
o grupare carboxil a unui alt aminoacid. Sunt 20 de aminoacizi, care difer
prin proprietile chimice ale lanurilor lor (tabelul 1). Caracteristicile prilor
de molecul de protein (de exemplu hidrofobicitatea i hidrofilicitatea) sunt
determinate de tipurile de aminoacizi care se afl n acea parte de molecul.
Diversitatea de proprieti n ceea ce privete aminoacizii este realizat
practic de un numr nelimitat de proteine care pot fi construite prin variaia
secvenei de aminoacizi.
Tabelul 1. Cei 20 de aminoacizi eseniali

46

hidrofob

hidrofob

carbohidratul poate fi
legat covalent de
gruparea sa NH

moderat hidrofil

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

gruparea liber amino


face ca el s fie bazic i hidrofil

puternic bazic i hidrofil

gruparea liber carboxil


l face acid i hidrofil
gruparea liber carboxil
l face acid i hidrofil

hidrofob
oxidarea gruprii
sale sulfhidril (-SH)
poate lega dou Cys (S-S)

47

Lorentz JNTSCHI

absent n cea mai mare parte


a proteinelor din plante

foarte mic i amfil,


poate exista n orice vecintate

Bazic i hidrofil
provoac torsiuni n lan

hidrofob

48

hidrofob

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

gruparea OH l face
moderat hidrofil
foarte hidrofob

carbohidratul se poate lega


covalent cu gruparea sa -OH
carbohidratul se poate lega
covalent cu gruparea sa -OH

Proteinele nu exist ca polimeri liniari. Mai mult, ele capt forme


foarte diferite. Biochimitii definesc 4 nivele ale structurii proteice. Structura
primar este dat de secvena de aminoacizi. Structura secundar refer
formarea unei spirale sau a unei foi de irul de polipeptide ca rezultat al
legturilor de hidrogen ntre atomi. O pliere i mai mare care este realizat de
legturile covalente sau necovalente (-SH) se numete structura teriar. n
cele din urm, mai multe polipeptide se pot asocia pentru a forma o protein
funcional. Aceste aranjamente formeaz structura cuaternar.
Proprietile de pliere sunt eseniale n stabilirea formei proteinei i
selecia moleculelor care pot ataa prin legturi covalente sau necovalente de
49

Lorentz JNTSCHI

aceasta. Demonstraia acestui fapt se face pe cale experimental, cnd prin


deplierea structurii teriare, folosind cldura, acizi sau baze (denaturarea unei
proteine) proprietile sale originare (n special activitatea biologic) sunt
diminuate sau eliminate. Astfel, aceasta i pierde calitatea de a cataliza o
anumit reacie sau capacitatea de a forma structura celulei.
Cnd 4 entiti diferite sunt legate de un atom de carbon, acele molecule pot
exista ca stereoizomeri (fig. 42). Aceste molecule au aceeai formul
structural dar una este imaginea n oglind a celeilalte. La zaharuri i
aminoacizi, aceste forme se numesc D i L (de la dextrogir - rotete planul de
polarizare al luminii spre dreapta i levogir - rotete planul de polarizare al
luminii la stnga). Zaharurile D predomin n sistemele biologice iar formele
L predomin n aminoacizi.

Fig. 43. Rotaia luminii polarizate de ctre stereoizomeri

50

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

3.3. Biologia Celulei


Celulele microbilor sunt prea mici pentru a fi vzute direct. n
consecin, pentru studiul morfologiei celulare, sunt utilizate microscoapele.

Fig. 44. Microscop optic


Microscoapele optice (fig. 44) sunt utilizate frecvent pentru a
determina morfologia celulei. O varietate de tehnici optice (cmp luminos,
fluorescen de contrast de faz) au fost perfecionate pentru aplicaii
specifice i sunt folosii marcheri pentru sporirea vizibilitii i mrirea
contrastului unor structuri anume ale celulei. Limita de rezoluie pentru
microscopul optic este de circa 0.2 m.
Cea mai important tehnic de marcare este marcarea Gram,
deoarece difereniaz organismele pe baza structurii peretelui celular.
Rezult astfel dou grupuri de bacterii: Gram-pozitive i Gram-negative.
Detaliile fine ale structurii celulare se pot decela cu ajutorul microscopului
electronic (fig. 45).

51

Lorentz JNTSCHI

Fig. 45. Microscop electronic


Att celulele de Bacteria ct i cele de Archaea pot fi descompuse
ntr-un numr de structuri care efectueaz funcii specifice (fig. 46). Este
important de tiut funciile acestor structuri i compoziia lor chimic. Cteva
structuri de baz se regsesc n toate celulele procariote i eucariote. Acestea
sunt membrana citoplasmatic, ribozomii i genomul.

spaiu periplasmic

racem

plasmid

cromozom

membrana citoplasmatic
Fig. 46. Structura celulei

52

peretele celular

ribozom

perior

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Cteva forme de bacterii sunt frecvente (fig. 47) : forma sferic


(coccus), cilindric (rod) i elicoidal (spirilla).

Fig. 47. Forme de bacterii (coccus, rod, spirilla)


n contrast cu celulele procariote, celulele eucariote sunt mult mai
mari i mult mai complexe. Nucleele lor se afl n interiorul unei membrane
i sunt organizate n molecule de DNA distincte numite cromozomi. De
asemenea n celulele eucariote conin o structur secundar numit organele.
Aceste organele includ mitocondrii i cloroplastul (n
organismele fotosintetice). Dimensiunea mic a microbilor are cteva
implicaii. Dimensiunea bacteriilor variaz de la 0.1-0.2 m pn la 50 m n
diametru. n general, celulele mici cresc mai rapid dect celulele mari.
Aceasta este o consecina a faptului c un raport suprafa / volum mare le
permite un schimb rapid cu mediul exterior i a faptului c nutrienii care
sunt supui metabolismului n citoplasm trebuie s fie traversai prin
membrana celular. Raportul suprafa / volum este o msur a ct suprafa
de membran este disponibil pentru a asigura nutrieni pentru proteinele din
unitatea de volum de citoplasm. Odat cu creterea dimensiunii celulei,
volumul crete mai repede dect suprafaa. Membrana citoplasmatic este o
barier selectiv n separarea citoplasmei de mediul exterior. Pentru ca s
existe ordine, trebuie ca s fie meninut controlul asupra la cine intr i cine
iese din celul. Aceasta este de fapt funcia membranei celulare. Bariera
pentru traversarea necontrolat a membranei este asigurat de un strat dublu
53

Lorentz JNTSCHI

de fosfolipide. Gruprile hidrofile de glicerol ale lipidelor sunt aliniate la


periferia membranei n timp ce acizii grai hidrofobi sunt plasai n interior.
Interiorul hidrofob previne ca moleculele ncrcate pozitiv sau negativ s
traverseze membrana. Aceste molecule pot traversa membrana numai cu
ajutorul unor proteine transmembran specifice care sunt nglobate i divid
matricea lipidei. Elementul important este c celulele pot tipurile i
activitile de transport a proteinelor de control care la rndul lor controleaz
micarea moleculelor nspre

i dinspre celul. Dei toate celulele au

membrane plasmatice formate din lipide, tipul lipidelor difer. Eucariote i


steroli se regsesc n membrane. Una din calitile Archaea-ei, comparat cu
Bacteria sau Eukaria o reprezint legturile eterice ntre glicerol i regiunea
hidrofob a lanului lipidic comparativ cu legturile esterice prezente n alte
organisme. Ca rezultat, lipidele archae-lei au regiuni de lan compuse din
lanuri de legturi de izopren. Membrana lipidic este o barier pentru
traversarea moleculelor dinspre i nspre celul. Membrana de proteine
citoplasmatice este responsabil pentru activitile metabolice asociate
membranei. Exteriorul membranei este asociat cu transportul nutrientelor n
timp ce transportul electronic prin membran este iniiat de faa interioar.
Membrana exterioar este mult mai permeabil dect membrana plasmatic
interioar. Ea conine peri, proteine care formeaz mici guri n membran.
oricum, macromoleculele nu pot ncape prin aceste guri. Existena
membranelor celulare se justific i altfel; concentraia de solut este n
general mult mai mare n interiorul celulei dect n exteriorul membranei
plasmatice. Dezechilibrul se corecteaz prin traversarea apei prin membran
spre celul (osmoz). Oricum, prea mult ap poate provoca blocajul celulei.
Tria mecanic a pereilor celulei rezist ns presiunii osmotice. Acest fapt
este atestat de didroliza peptidoglicanului de ctre enzima numit lizozim.
Multe bacterii mobile au un sistem de echilibru care le permite s-i regleze
54

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

deplasarea n funcie de concentraia atractanilor chimici. Senzorii care


regleaz acest echilibru sunt numii chemoreceptori. Trei importante organele
prezente n celulele eucariote sunt mitocondrii, cloroplastele i nucleul. Toate
3 sunt nconjurate de membrane de lipide dar n toate cazurile, membranele
acestora sunt mult mai permeabile dect membrana plasmatic. Nucleul
conine materialul genetic al eucariotelor. Genomul este coninut ntr-un
numr de molecule de DNA numite cromozomi. Mitocondrii sunt sursele de
energie.

Moleculele

cu

mas

mic

pot

uor

traversa

membrana

mitocondriilor. Exist de asemeni nite membrane interne numite cristai, care


sunt implicate n conversia energiei. Matricea mitocondriilor conine enzime
care metabolizeaz compuii organici. Cloroplastele conin la rndul lor
membrane interioare (tilacoizi) bazate pe pigmeni i proteine necesare pentru
transportul enegiei fotosintetice capturate. Energia i puterea de reducere
generate de fotosintez sunt folosite n esuturile de legtur pentru conversia
CO2 la carbon organic. Mitocondriile i cloroplastele sunt de dimensiunea
celulelor procariote, i din acest motiv se justific explicaia c aceste
organele apar cnd celulele procariote invadeaz celulele mai mari i devin
simbioi ai acestora.
Microorganismele sunt mprite n clase metabolice n funcie de
sursa lor de energie. Fototropele i obin energia din lumin, n timp ce
chemotropele i obin energia pe cale chimic. Chemoorganotropele folosesc
compui organici n timp ce chemolitotrofele folosesc compui anorganici.
Compoziia chimic a celulei este un element important de analiz. Celulele
sunt bogate n proteine i n instrumente de producere a acestora (ribozomii).
Astfel, proteinele i acizii nucleici sunt cantitativ cele mai importante
componente. La asigurarea unui nutrient pentru creterea unei celule trebuie
s se in seama de ponderea elementelor chimice n celule. Heterotrofele
necesit carbon organic pentru susinerea biosintezelor de lanuri carbonice i
55

Lorentz JNTSCHI

necesarul de energie de sintez. Azotul, cel mai frecvent asimilat sub form
de amoniac, este constituentul esenial al proteinelor i acizilor nucleici.
Fosfaii sunt utilizai uzual ca surse de fosfor pentru sinteza acizilor nucleici
i a fosfolipidelor. Sulful, asimilat sub form de sulfai, este esenial pentru
sinteza a 2 aminoacizi. Prin convenie, nutrienii sunt mprii n
macronutrieni (C, H, O, N, P, S, K, Mg, Na, Ca i Fe) i micronutrieni (Cr,
Co, Cu, Mn, Mo, Ni, Se, W, V i Zn).
Metabolism este termenul care cuprinde toate reaciile chimice din
celul. Se pot mpri aceste reacii n reacii care sintetizeaz nou material
celular (anabolism) i reacii al cror scop este asigurarea energiei din energie
chimic (catabolism). Aceste dou categorii de reacii sunt legate ntre ele, n
sensul n care reaciile catabolice asigur energia necesar pentru
desfurarea reaciilor anabolice de cretere (vezi fig. 48).

sursa de
energie

nutrieni
reziduuri
din
catabolism

catabolism

energie
pentru
cretere

anabolism

componeni
celulari

energie
pentru
deplasare

nutrieni
pentru
cretere

Fig. 48. Metabolismul celular


56

reziduuri

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Celulele au pus la punct un mecanism prin care captureaz energia


eliberat cnd substanele sunt oxidate n timpul catabolismului. Energia se
definete n acest caz ca abilitatea de a efectua lucru. Cantitatea de energie
(lucru) eliberat este cuantificat ca schimbare n energia liber (G). Dac
este eliberat energie ntr-o reacie, atunci G calculat ca energia liber din
produi minus energia liber din reactani este mai mic ca 0, deci o variaie
de energie liber negativ. Aceasta este natura reaciilor catabolice. n
reaciile de biosintez (anabolice), variaia de energie liber este mai mare
dect 0 i celula trebuie s contribuie cu energie pentru ca reacia s decurg
n sensul dorit.
Oricum, reaciile controlate termodinamic nu au loc totdeauna imediat
ce reactanii sunt amestecai. Legturile trebuie rupte pentru ca moleculele s
se recombine, i aceasta necesit o energie de activare. Aceast energie poate
fi asigurat prin nclzirea reactanilor, dar aceasta nu este posibil n celule.
n celule, enzimele funcioneaz ca i catalizatori diminund energia de
activare a reaciei pn la punctul la care aceasta decurge la temperatur
normal. Catalizatorul (enzima) rmne neschimbat de reacie (fig. 49).
E(J)

Ea

R*
? EaC
R*,C

EaC

t(s)

Fig. 49. Tunelarea energetic cu ajutorul catalizatorilor enzimatici


57

Lorentz JNTSCHI

Enzimele sunt catalizatori biologici; ele sunt foarte specifice i pot


avea efect spectaculos asupra reaciilor pe care le controleaz. Energia de
activare pentru hidroliza acid a zaharozei este de 107 kJmol-1; n prezena
enzimei zaharaz energia se reduce la 36 kJmol-1 i procesul de hidroliz
este accelerat de 1012 ori la temperatura corpului (310 K).

3.4. Genetic i Inginerie Genetic


Chiar dac genomul celulei posed toate instruciunile necesare
pentru construcia multor proteine, nu toate acestea se exprim n acelai
timp. Mai mult, cnd o enzim este prezent n celul, poate s nu fie activ
datorit condiiilor de mediu prezente n celul.
Chiar dac multe reacii enzimatice au loc ntr-un singur ciclu al
celulei, nu toate au aceeai amploare. Unii compui sunt necesari n cantiti
mari, n timp ce alii sunt necesari, dar n cantiti mici. Mai mult, unele
proteine sunt necesare n cantiti mari n anumite condiii, n timp ce altele
n cantiti mai mici, iar la altele trebuie asigurat o cantitate constant i
acesta este cazul celor mai multe dintre procesele de cretere. Deoarece
celula trebuie s foloseasc la maxim resursele sale, aceste procese trebuiesc
regulate.
Cile biosintetice pot fi controlate cu ajutorul inhibiiei de reacie
invers, ceea ce nseamn c produsul final al ntregului lan metabolic
inhib activitatea primei enzime din lan (nu din gen). Dac prima reacie nu
mai are loc, enzimele urmtoare sunt "nfometate" de substrat, i produsul
final nu mai este sintetizat. Produsul final se aeaz pe prima enzim ntr-o
cavitate diferit de cavitatea activ. Aceast a doua regiune se numete
cavitate alosteric. Aezarea efectorului alosteric schimb structura
58

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

tridimensional a proteinei i n special conformaia cavitii active. Astfel,


substratul nu se mai poate aeza n cavitatea activ i reacia enzimatic este
inhibat pn cnd inhibitorul de reacie invers nu prsete cavitatea
alosteric (fig. 50).

Enzima

Cavitatea
activ

Cavitatea
alosteric

Substrat

Efector
alosteric
Datorit
schimbrii
conformaionale
a cavitii active
reacia enzimatic
este inhibat

Are loc reacia


enzimatic
Legarea
substratului
Absena
reaciei
enzimatice

Reacia
enzimatic

Nu se poate
lega substratul

Fig. 50. Mecanismul enzimatic celular


A doua modalitate de a altera activitatea enzimei este prin modificare
covalent. O enzim modificator catalizeaz adiia (prin legtur covalent) a
unei grupri fosfat, metil sau a unei nucleotide la o enzim biosintetizatoare.
Aceast adiie altereaz conformaia cavitii active a enzimei biosintetice i
prin aceasta i activitatea ei. Gruparea modificatoare poate apoi fi extras cu

59

Lorentz JNTSCHI

ajutorul altei enzime modificator i astfel se restaureaz activitatea iniial a


enzimei biosintetice.
Viruii sunt elemente genetice necelulare care conin acid nucleic
nconjurat de un scut proteic. Ei sunt mai mici dect celula i dimensiunile
acestora variaz de la 0.02 m la 0.03 m. Spaiul dintre scutul proteic i
virus este metabolic inert iar forma "dezbrcat" a virusului (de peretele
proteic) se numete virion (fig. 51). Deoarece viruii nu posed instrument
metabolic, aceste elemente genetice trebuie s invadeze (infecteze) celulele i
s foloseasc ribozomii, enzimele i potenialul catabolic al celulei gazd
pentru a se putea reproduce.
Bacteriile, animalele i plantele sunt susceptibile la anumii virui.
Genomul viral este mult mai mic dect sistemele bacteriene. Unul dintre cei
mai mari genomi virali are 190 de kilobaze comparativ cu 590 de kilobaze,
ct are cel mai mic sistem bacterian.1
Viruii nu sunt restricionai la prezena lanurilor duble de DNA ca
material genetic. DNA-ul viruilor poate fi un lan simplu n timp ce RNA, ca
lan simplu sau dublu poate servi ca material genetic. Materialul genetic viral
este localizat n interiorul unei proteine numite nucleocapsid (fig. 51).
Aceast form neobinuit de material genetic creeaz probleme unice n
replicarea genomului i producerea de mRNA. Genomul poate de asemenea
s fie segmentat n mai multe molecule n interiorul cutii proteice. Cuca
proteic const dintr-un numr de subuniti proteice (capsomere) care
fiecare formeaz cte o spiral sau o structur cu 20 de fee (icosaedru) n
1

Kilobaz unitate de lungime pentru fragmente de DNA egal cu 1000 de

nucleotide;
Nucleotid subunitate de DNA sau RNA format dintr-o baz azotat
(purin, adenin, guanin, pirimidin, timin, citozin, uracil i o molecul de
zahar (dezoxiriboz sau riboz);
60

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

jurul acidului nucleic. Aceste aranjamente sunt cele mai eficiente din punct
de vedere geometric deoarece minimizeaz numrul de capsomere necesare
pentru a acoperi genomul i permit ca s aib loc interaciuni similare cu
interaciunile protein-protein ntre subunitile proteice identice i de aceea
se pot autoasambla.
capside
nucleocapside

nveli proteic
acid nucleic

virus gol

virus nvelit
capsomer
Fig. 51. Structura unui virus

Acestea sunt elementele minimale pentru un virion. Unii virui pot


avea alte structuri, cum ar fi cozi sau periori, care sunt importante n infecia
celulelor. Alii, cu precdere civa virui animali, au anvelope membranoase
care nconjoar nucleocapsida. Acestea sunt adugate ca particule florale pe
membrana celular. Astfel, aceste lipide din anvelop sunt derivate din
celul, dar proteinele pot avea cod de virus nglobat n ele pe perioada
multiplicrii virusului.
Obiectivul programului de inginerie genetic este de a izola i
purifica gene ntr-un proces numit clonare de gene. Strategia urmrit n
clonare este de a izola i recupera gene specifice de la un genom mare i
complex i de a-l insera ntr-o gen simpl i uor de manipulat. t-DNA
61

Lorentz JNTSCHI

(total) este izolat de la un organism i este decupat n piese mai mici folosind
o endonuleaz de restricie specific. Enzima de restricie realizeaz o tiere
a lanului dublu de DNA ntr-o secven specific (palindrom). Astfel, la
sfritul tierii moleculei, se obin secvene simplu nlnuite. Dac aceast
preparare a fragmentelor de restricie este amestecat cu un vector de clonare
i tierea se face cu aceeai enzim de restricie, moleculele hibride se obin
dintr-un fragment de origine DNA inserat ntr-un vector de clonare DNA.
Amestecul de molecule recombinate este introdus ntr-o bacterie gazd pentru
a genera librria DNA. Aceasta nseamn c clonele bacteriene individuale
conin molecule de r-DNA (recombinant). Dac vom examina suficiente
clone, probabilitatea ca s gsim toate fragmentele de restricie n sursa de
DNA exist.
Proiectul Genomul Uman, un efort de a colecta i secvenializa
ntregul genom uman a dus la crearea primului cromozom artificial (YAC).
Vectorul YAC este de aproximativ 10 kilobaze i accept de la 200 la 800 de
kilobaze pereche de DNA i a fost construit n prim faz la fel cu un
cromozom eucariotic obinuit.
Cea mai studiat gazd de microorganisme pentru r-DNA este
Esterichia coli (E. coli). Potenialul su de patogenez uman aduce cteva
neajunsuri n producia industrial, iar inabilitatea sa de a secreta enzime face
ca metodele de purificare s fie greu de aplicat la scar industrial.
Domeniile principale de interes comercial pentru tehnologia de
sintetizare de r-DNA este pentru producerea de:

produi microbieni ca antibioticele;

vaccinuri care protejeaz mpotriva viruilor;

proteine mamaliene;

plante i animale transgenice.

62

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Aceste tehnici sunt de asemenea folosite pentru studiul bacteriilor


care produc degradarea poluanilor mediului ca o metod de a trata bolile
genetice.
Multe proteine mamaliene care au importan medical sunt produse
numai n cantiti mici, deoarece este dificil de a fi obinute. Prin clonarea
acestor gene, bacteriile pot fi uor utilizate pentru a obine largi cantiti din
acestea. Insulina uman, factorul uman de cretere, hormonul paratiroidei i
atriopeptina sunt exemple de aceste tipuri de proteine. Tehnologia de
producere a insulinei ilustreaz c n afara problemelor ridicare de
exprimarea genei i ali pai trebuie considerai cu atenie pentru a produce
un produs biologic funcional. Alte produse mamaliene obinute prin
inginerie genetic sunt: esutul activator plasminogen (utilizat pentru a
dizolva coagulrile din snge), eritropoietina (stimuleaz producerea de
celule roii), un numr considerabil de interferoni (compui antivirali) i
interleucina (stimuleaz limfocitele T), pentru a meniona doar civa dintre
acetia.
Vaccinurile virale sunt imperfecte deoarece constau din virui mori.
Dac nu toi viruii sunt mori, inocularea vaccinului poate cauza infecie.
Sistemul nostru imunitar rspunde doar la schelete proteice. Astfel, dac
clonm gena proteic viral i producem doar aceast protein, riscul infeciei
de pe urma vaccinului poate fi evitat. n unele cazuri, un vaccin efectiv
poate fi obinut prin producerea proteinei virale n bacterii. Oricum, n alte
cazuri, este ineficient deoarece proteina viral este modificat chimic (de
exemplu prin adiia de zaharuri) dup producerea ribozomilor lor. Acest
proces nu apare ns n gazde bacteriene. Pentru aceste cazuri, este produs o
subunitate de vaccin, n care gena pentru esutul proteic al virusului
patogenic este clonat ntr-un virus inofensiv, cum ar fi vaccinia.

63

Lorentz JNTSCHI

Tehnicile de recombinare a DNA sunt utilizate pentru a produce


modificri n plante (plante transgenice). Un DNA strin poate fi introdus n
plant prin metode fizice, ca electroforeza sau tunul cu particule sau pe cale
biologic cu ajutorul bacteriei Agrobacterium tumefaciens. Cest patogen de
plant induce formarea tumorii n plante prin inserarea prii sale de plasmid
Ti DNA n cromozomii plantei. Plasmidul Ti poate apoi servi ca vector
pentru inserarea lui DNA strin n celula plantei. La unele specii, celulele
plantei crescute n cultur pot fi utilizate pentru regenerarea ntregii plante.
Animalele transgenice pot fi produse prin injectarea lui r-DNA n ou
fertilizate. Noile descoperiri n cercetarea biomedical se ateapt ca s fie
fcute prin aceast tehnic. n plus, aceasta poate avea aplicaii comerciale,
deoarece proteinele umane produse prin introducerea de gene clonate n
animale poate ntrzia procesul care are loc dup translaie, n timp ce aceste
modificri nu apar cnd gena este format n bacterii.
Terapia genetic este o metod terapeutic care permite modificarea
unei gene disfuncionale direct la pacient. Prima boal care a fost tratat pe
aceast cale a fost deficiena de deaminaz adenozinic.

3.5. Microbiologie Industrial


n ultimii 100 de ani, culturile pure de microbi au fost utilizate pentru
a se obine produi cu valoare comercial.
Termenul de ferment, cnd este folosit n contextul microbiologiei
industriale desemneaz o gam variat de procese microbiene desfurate n
condiii aeroba sau anaerobe. Mai recent, bacteriile produse pe calea
ingineriei genetice au fost crescute la scar industrial pentru a produce
substane care acestea nu le produc n mod uzual.
64

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

De notat c microbiologii folosesc termenul de fermentaie n dou


contexte diferite. n contextul metabolismului fermentarea refer creterea n
absena unui receptor electronic extern, n timp ce n contextul microbiologiei
industriale, acest termen refer creterea unor mari cantiti de celule.
Microorganismele industriale sunt selectate iniial din probe naturale sau
luate dintr-o colecie de cultur deoarece ele nu arat capacitatea de a
sintetiza produsul dorit.
Oricum, conformaia este modificat pentru a mrii randamentul
produsului. Aceasta presupune un ntreg lan de mutaii, cu selecia atent a
clonelor rare care sintetizeaz un mai mult sau mai bun produs. Conformaia
aleas este puin probabil s supravieuiasc n natur, deoarece procesul de
selecie a alterat controlul regulator al celulei pentru a produce dezechilibrul
metabolic.
Caracteristicile urmrite sunt:

cretere rapid;

stabilitate genetic;

absena toxicitii umane;

dimensiune mare a celulei, pentru extragere simpl din mediul de cultur.


Exist cteva colecii de culturi importante care depoziteaz i menin

material genetic de la cele mai importante microorganisme.


n Statele Unite, American Type Culture Collection (ATCC) este
probabil cea mai cunoscut, ns de asemenea Northern Regional Research
Laboratory (NRRL) este de asemenea bine cunoscut. n Romnia exist de
asemenea o banc de gene la Suceava (Suceava Gene Bank, fig. 52),
specializat n depozitarea i conservarea de gene de plante (fig. 53).
Microbiologii din industrie trebuie s fie capabili s produc:

masa microbian propriu zis;

enzime specifice;
65

Lorentz JNTSCHI

metabolii.

Fig. 52. Banca de Gene din Suceava (aprilie 2001)

Fig. 53. Depozitarea genelor la Banca de Gene din Suceava (aprilie 2001)
Metaboliii pot fi produsele majore ale catabolismului sau compui
produi normal n cantiti mici de speciile naturale. Industria microbiologic
depinde de scara la care se practic. Altfel, microbiologii din industrie cultiv
organismele n multe moduri, la fel ca i ceilali microbiologi, iar obiectivul
66

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

este de a produce cantiti foarte mari, uneori msurate n milioane de litrii


odat.
Industria farmaceutic este un important utilizator de microbi. Pentru
muli ani, antibioticele i hormonii steroizi au fost produi de microbi.
Ingineria genetic a fcut posibil ca bacteriile s produc o mare varietate de
substane mamaliene care sunt importante din punct de vedere medical.
n agricultur bacteria din genul Rizobium a fost adugat seminelor
de legume unde, urmnd formarea nodulilor din planta gazd, ea captureaz
sau fixeaz azotul atmosferic i astfel reduce cantitatea de ngrminte pe
baz de azot necesare pentru plant.
Cteva substane speciale sunt mult mai economicos de produs de
microbi. Acestea includ civa aminoacizi i vitamine (fig. 54-60).
CH3
CH3

CH3

CH3

CH3

H3C
CH3

CH3

CH3

CH3
Fig. 54. -Carotene (Provatene, Carotaben, Solatene)

CH2OH
HCOH O
O

HO

OH

Fig. 55. Vitamin C (Ascorbic Acid, Cevitamic Acid, Testascorbic)

67

Lorentz JNTSCHI

CH3
CH3

H3C
H3C

CH3

H
CH2

HO
Fig. 56. Vitamin D2 (Calciferol, Ergocalciferol, Radsterin)

H3C

CH3

CH3

CH3
OH

CH3
Fig. 57. Vitamin A (Biosterol, Acon, Afaxin, Apostavit, Atav)
O
CH3

O
Fig. 58. Vitamin K3 (Menadione, Vitamin K2(0), Panosine)

HO
H3C

CH2OH
CH2OH
N

Fig. 59. Vitamin B6 (Pyridoxine)


68

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

CH2CONH2
H

H3C

CH3

NH2COCH2

NC
Co+

N
H3C
NH2COCH2CH2 CH3 H
NH2COCH2
H

CH2CH2CONH2

CH3
N

N
H3C

CH2CH2CONH2

CH3
CH2

CH3

N
CH3

CH2
N

CH3

CO
NH

OH

CH2
H3C

CH

OH

O
O

CH2OH

P
O

Fig. 60. Vitamin B12 (Cyanocobalamin, Antipernicious anemia principle)


Solvenii industriali, cum sunt alcoolii i acetona se pot produce prin
fermentaie microbian. Oricum, n prezent este mai ieftin s se obin
acestea pe baz chimic din petrol.
Muli dintre cei mai importani metabolii industriali sunt metabolii
secundari, produi n faza staionar a culturii dup ce producia de biomas a
fost epuizat. Aceti compui nu sunt eseniali pentru creterea microbului.
Sinteza lor este n mod obinuit n mare msur regulat de celul. n
consecin, pentru a obine randamente mari, condiiile de mediu care
afecteaz mecanismele regulatoare ca inhibiia de represiune i de reacie
69

Lorentz JNTSCHI

invers trebuie s fie evitate. n plus, descendenii mutanii care asigur o


producie superioar a compusului sunt selectai.
n metabolismul secundar, se pot distinge 2 faze: trofofaza2 i
idiofaza3. Trofofaza este faza de cretere a culturii iar idiofaza este timpul n
care metaboliii secundari se formeaz. Succesul idiofazei depinde de
trofofaz (fig. 61-63).

creterea
substratului

celule

metabolitul
primar

Fig. 61. Celulele i metabolitul sunt produse (aproape) simultan


Dup ce un microorganism corespunztor a fost identificat din studii
de laborator pentru un proces industrial, nc mai sunt un numr de probleme
de trecere de la faza de laborator la faza de producie industrial. Acestea
includ asigurarea unei aerri corespunztoare ncontinuu n masa din vasul de
fermentare. Dificultile sunt implicate de volumul enorm de amestec, de

trofo-: cu semnificaia "(referitor la) nutriie, hrnire"

idio-: cu semnificaia "propriu"

70

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

zonele unde amestecarea este mai puin eficient i de coninutul mare de


biomas din vasul de fermentare.

creterea
substratului

metabolitul
primar

celule

metabolitul
secundar

Fig. 62. Dup ce celulele i metabolitul primar sunt produse celulele


convertesc metabolitul primar n metabolitul secundar
Biomasa mare este de ateptat s creasc cantitatea de produs format,
dar creeaz necesitatea asigurrii unei enorme cantiti de oxigen. n plus,
descendentul care a lucrat bine la scar mic poate nu va lucra eficient la
scar mare, sub condiiile de mediu diferite din vasul de fermentare.
71

Lorentz JNTSCHI

creterea
substratului

metabolitul
primar

celule

metabolitul
secundar

Fig. 63. Dup ce celulele i metabolitul primar sunt produse, creterea de


substrat este folosit pentru sintetizarea metabolitului secundar
Pentru producia industrial se folosesc vase de fermentare cu
capacitate mai mare de 400.000 litrii (fig. 64).
Procesul poate fi aerob sau anaerob. n general, procesele aerobe sunt
mult mai dificil de realizat, datorit necesitii aerrii unei volum mare de
amestec i cu o biomas foarte concentrat.
Vasele de fermentare sunt construite din oel inoxidabil i au o
cma exterioar prin care se asigur rcirea n timpul fermentrii.
72

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

dispozitiv de
etanare steril

motor

regulator
de pH

rezervor
i pomp
acid/baz

nclzire
cu aburi
cma
de rcire

evacuare

ieire ap
de rcire
mediul de
cultur

intrare ap
de rcire
pulverizator
nclzire
cu aburi

aer sterilizat

recoltare

Fig. 64. Schema constructiv a unui vas de fermentare


Pulverizatoarele i agitatoarele din vas sunt folosite pentru aerarea i
amestecarea coninutului. Vasul poate conine diferite instrumente pentru
monitorizarea condiiilor de mediu din cultur, astfel nct aceti factori pot fi
optimizai pentru a se obine randamente mari de producie.
Organismele utilizate n procesele industriale trebuie s fie conservate
cu atenie astfel nct calitile genetice s nu fie alterate datorit mutaiei. Se
poate recurge la depozitarea n form ngheat n azot lichid sau liofilizarea.
Antibioticele sunt de departe cei mai importani compui produi de
microbi pe cale industrial. Foarte utili sunt metaboliii secundari produi de
fungii filamentari i bacteriile sunt clasificate ca actinomicete. Noile
antibiotice sunt descoperite prin vizualizarea microbilor izolai din probe
73

Lorentz JNTSCHI

naturale pentru producia de substane care inhib anumite bacterii de test.


Bacteriile de test refer patogenii bacterieni. Multe rezultate bune sunt la fel
cu cele pe care le dau antibioticele cunoscute pn acum, dar cteva sunt nc
nedescoperite. Noile substane sunt testate pentru toxicitate i efect n
animale infectate nainte ca producia comercial s se desfoare. Cele mai
multe substane noi se dovedesc a fi toxice pentru animale sau relativ
ineficiente n omorrea patogenilor din organism. Astfel, o foarte mare
cantitate de energie trebuie cheltuit pentru a gsi substanele rare care sunt
noi i eficiente. Dup ce se valideaz aceste noi substane, se pune la punct
tehnologia de obinere a unui randament ridicat i este stabilit metoda de
purificare. Antibioticele sunt sintetizate pe ci biochimice complexe. Un
important obiectiv al cercetrii este de a nelege aceste ci, pentru ca apoi s
se poat indica cile de selecie ale descendenilor cu productivitate ridicat.
Antibioticele lactamice includ peniciline (fig. 1-8) i cefalosporine.
Acestea sunt deosebit de utile deoarece inta lor de aciune sunt compuii care
nu sunt coninui n eucariote peptidoglicanul din peretele celular. Acetia
inhib sinteza sa prin inhibiia reaciei de transpepdidizare.
Streptomicina (fig. 65), un antibiotic aminoglicozidic, ilustreaz c
chiar dac antibioticele sunt gndite a fi antibacteriene, totui ele pot cauza
efecte secundare n animale. Astfel de compui sunt inui n rezerv, pentru a
fi utilizai n tratament doar n cazurile n care alte antibiotice eueaz.
Tetraciclina (fig. 15) este un antibiotic cu spectru larg de aciune
efectiv mpotriva speciilor Gram pozitive i Gram negative. Acesta, i
antibioticele pe baz de lactam sunt foarte utile medical. Au fost folosite n
aplicaii medicale, cum ar fi suplimente pentru animale, dar ele favorizeaz
instalarea genelor ncriptate de rezisten la antibiotice i fac terapia cu
antibiotice mai puin efectiv.

74

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

NH
NH H
H2NCNH
OH
H
H
H
H3C

O
CHO
OH

H
HO

H
OH

H
O

OH
H

NHCNH2

CH2OH
H CH3NH
OH

Fig. 65. Streptomycin (Streptomycin A)


Vitaminele (fig. 54-60) i aminoacizii (tab. 1) sunt utilizate ca
suplimente n hrana uman i animal. Unii dintre aceti produi sunt
sintetizai cel mai economic de ctre bacterii, dac se obin descendeni cu
nalt randament i superproducie. n general, aceasta implic inactivarea
mecanismelor regulatoare, care in de biosinteza substanelor, n aceeai
msur n care celulele i formeaz elementele constructive. Un scop este de
a gsi mutanii care cresc n prezena analogilor chimici ai aminocidului.
Acestea ofer ns un slab control de ntoarcere al activitii enzimei.
n anumite procese industriale microbii sunt utilizai doar pentru a
conduce doar anumite reacii biochimice. Mecanismul de formare a

75

Lorentz JNTSCHI

produsului respect cu strictee regulile chimice. Un exemplu de acest tip este


bioconversia n etape a hormonilor steroidici.
Cea mai mare parte a enzimelor microbiene implic prezena
enzimelor hidrolitice care diger materialele insolubile. Acestea sunt utilizate
pentru industria detergenilor. O serie de trei enzime sunt utilizate pentru
producerea ndulcitorilor din amidon. Siropul de cereale cu foarte mare
concentraie de fructoz este produs prin hidroliza amidonului la glucoz
izomerizarea glucozei ntr-o molecul mai dulce, fructoza.

Fig. 67. Renina (Chymosin)


O alt enzim microbian important este renina (fig. 67), care este
foarte folosit n producia de brnz. Oetul poate fi produs de bacteria
acidului acetic, dac oxigenul este asigurat. Sunt mai multe metode
industriale de a realiza reacia aceasta.
76

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

CH2COOH
HOCCOOH
CH2COOH
Fig. 68. Acidul citric
Acidul citric (fig. 68) este produs de fungul Aspergillus niger.
Fermentaia industrial a fungilor poate s apar la suprafaa unui lichid sau
n masa de lichid. n procesele de suprafa mediul poate fi att solid ct i
lichid.
Celulele de drojdie4 sunt cei mai folosii microbi n industrie. n
condiii anaerobe, ei fermenteaz zaharurile la alcool, i sunt la baza
industriei vinului i berii. Vinul este sucul fermentat al fructelor, de obicei
struguri. Mustul este produs prin strivirea fructelor i drojdia vinului este
adugat. Dup tratamentul cu bioxid de sulf, drojdia vinului este omort.
Dup aproximativ 2 sptmni fermentarea produce aproximativ 10-12%
alcool. Berea este produs din grunele de mal (orz, orzoaic, . a.). Boabele
sunt zdrobite, dup care sunt coapte i aruncate n ap. Enzimele din mal
convertesc amidonul la zaharuri, care pot fi fermentate de drojdie. Amestecul
rezultat este fiert pentru a steriliza soluia.

drojdie = orice fungus unicelular al genului Saccharomyces, n special S.

cerevisiae, ce se reprodce prin construcia de ascospori i capabil s


fermenteze carbohidraii.
77

Lorentz JNTSCHI

3.6. Ecologia Microbian


Microorganismele sunt responsabile pentru multe reacii eseniale
pentru buna funcionare a biosferei. n mediul natural, interaciunea
microbului cu caracteristicile fizice i chimice ale mediului ct i cu alte
organisme i determin succesul de cretere aici. Reciclarea nutrienilor din
compui organici n compui anorganici pot fi folosite de organismele
fotosintetizatoare este o funcie special important fcut de microbii
descompuntori.
Ecologia microbian este un mare i variat domeniu, dar este posibil
s facem cteva generalizri. Astfel:

condiiile fizice i chimice n micromediul n care organismele


microscopice se afl poate s difere de ceea ce noi n mod obinuit
msurm n unitatea de prob pe care o colectm;

exist limite de rat de cretere n cele mai multe medii naturale; mai
mult, asigurarea nutrienilor poate s nu fie continu, poate surveni n
pulsuri, astfel nct creterea apare numai n anumite momente de timp
ntre care sunt perioade de nfometare;

cel mai des microbii se gsesc lipii de suprafee deoarece n medii


limitate nutriional concentraia nutrientului este mare aici;

speciile microbiene concureaz pentru nutrientul din mediu.


Speciile de succes sunt acelea care pot crete cel mai rapid cu minim

de concentraie de nutrient, atta timp ct un competitor nu produce o


substan care s-i inhibe creterea.
Producerea materiei organice n habitatele acvatice este fcut n
primul rnd de microorganismele fotosintetice, productorii primari. Rata
produciei primare este determinat de condiiile fizice din mediu i de
resursa de nutrieni anorganici. De exemplu, sunt puini nutrieni disponibili
78

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

n largul oceanului i producia primar este n general foarte mic n


comparaie cu zonele de coast. Mediile acvatice n care apar gradieni de
densitate verticali datorit stratificrii termice pot deveni anaerobi n
straturile inferioare. materia organic produs prin fotosintez n apele
superioare circul ctre adncime, unde bacteriile heterotrofe consum
oxigen pentru a o mineraliza. Dac sunt suficiente sedimente de materie
organic n adncime, tot oxigenul este consumat de acest proces i viitoarele
metabolisme chemoheterotrofe trebuie s foloseasc procese anaerobe.
Condiiile anaerobe exclud animalele mari din strat.
Formarea solului implic procese fizice, chimice i biologice.
Microbii contribuie la acestea prin producerea de materie organic care este
convertit la acid carbonic care dizolv mineralele din roci. Formarea solului
din roci expuse poate dura sute de ani. Microbii din sol controleaz prezena
multor nutrieni pentru plante. Ca rezultat, funciile microbiene n sol este
cheia productivitii solului. Activitatea microbilor n sol este limitat de
activitatea apei (att n condiii umede ct i n condiii uscate) i de starea
nutrienilor.
Lucrri recente sugereaz c microbii pot exista la mai multe sute de
metrii adncime n sol, ns nu este clar care este nivelul activitii acestora n
aceste medii de sub suprafa.
Producia primar n largul oceanului este mic. Astfel, doar o mic
cantitate de materie organic poate ajunge n adncul oceanului la adncimi
mai mari de 1000 de metri. n plus, temperatura n aceste zone este mai mic
de 4 C i presiunea hidrostatic depete 100 de atmosfere. n consecin,
este foarte puin activitate biologic n aceste regiuni [6]. Exist totui
cteva regiuni n adncul oceanului care prezint o nalt activitate biologic.
Acestea sunt niele hidrotermale din care se eman ape calde bogate n
minerale (fig. 69).
79

Lorentz JNTSCHI

Fig. 69. O ni oceanic n erupie


Apa conine compui de sulf redus care servesc ca surs de energie
pentru chemolitotrofii S-oxidani. Aceste bacterii autotrofe execut aceleai
funcii pe care le ndeplinesc organismele fotosintetice de la suprafaa
pmntului, ele fiind astfel productorii primari ai ecosistemului. O mare
densitate de animale nevertebrate sunt n vecintatea nielor. Oricum, ele nu
mnnc bacteriile de sulf, dar formeaz asociaii simbiotice cu ele (fig. 70).
Viermele tub Riftia conine o modificare a tubului intestinal numit
trofozom care este umplut cu aceti microbi (fig. 71). Bacteriile oxidatoare
de sulf sunt localizate n branhiile scoicilor i midiilor. Animalele pot tri pe
excreiile de materie organic i celule bacteriene moarte. Viermii tub conin
o hemoglobina neobinuit care poate transporta H2S la bacteriile din
trofozom fr s omoare animalul. Din studiile fcute pe sursele de ap din
zone n care temperatura poate ajunge la 380 C, rezult c cea mai mare
temperatur la care exist organisme vii este de 150 C.
80

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Fig. 70. Limpet5 (Clypeosectus Curvus),


unul dintre animalele gazd ale bacteriilor chemolitotrofe S-oxidante

Fig. 71. Viermi tub (genul Ridgeia Piscesae)

limpet: una dintre numeroasele molute marine gasteropode din familiile

Acmaeidae i Patellidae, cu un perete conic caracteristic i care ader la


rocile din zonele tidale.
tidal: o variaie periodic n nivelul suprafeei oceanelor, mrilor, bazinelor,
golfurilor i estuarelor cauzat de atracia gravitaional a soarelui i lunii.
81

Lorentz JNTSCHI

Transformrile carbonului conduc ciclul tuturor celorlalte elemente,


deoarece toate acestea necesit energie produs prin fotosintez sau
catabolismul compuilor organici. Cele mai importante fluxuri de carbon sunt
ctre bioxidul de carbon atmosferic i materia organic vie sau nevie. Fixarea
dioxidului de carbon prin fotosintez i producerea sa prin respiraie sunt
mecanisme prin care aceste fluxuri apar.
Descompunerea anaerob a carbonului organic necesit participarea a
4 grupuri metabolice de bacterii:

bacteriile cu hidroliz extracelular rup polimerii cu mas molecular


mare ca polizaharidele sau proteinele n constituenii lor monomeri;

bacteriile fermeni convertesc aceti monomeri n acizi organici, H2 i


CO2;

bacteriile oxidatoare cu acizi grai convertesc acizii grai la acetai, H2 i


CO2;

compuii rezultai sunt folosii ca substrat de ctre bacteriile


metanogenice pentru a produce CH4.
Oricum, produii finali ai descompunerii anaerobe sunt gazele CO2 i

CH4. Bacteria oxidatoare cu acizi grai poate s creasc numai dac


hidrogenul pe care ea l produce este consumat ntr-o alt reacie. Aceste
organisme depind prin transferul de hidrogen ntre specii de alte bacterii, ca
metanogenele care metabolizeaz rapid orice hidrogen pe care acestea l
genereaz. Metanogeneza apare n medii de ap dulce, cum sunt sedimentele
din lacuri, maluri i mlatini, tot aa cum i n rumen6.

rumen: prima diviziune a stomacului animalelor rumegtoare n care cea

mai mare parte a mncrii este colectat imediat ce a fost nghiit i din care
este mai trziu ntoars n gur pentru o mai ndelungat mestecare.
82

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

4. Biochimie

4.1. Chimia Celulei Vii


Biochimia poate fi mprit n dou nivele de studiu:

conformaional: care vizeaz structura i aranjamentele tridimensionale


ale moleculelor;

informaional: care vizeaz limbajul de comunicare nuntru i n afara


celulelor;
n 1828 are loc prima sintez organic (biochimic) de ctre Friedrick

Wler:
NH3 + NCOH NCO-NH4+ (H2N)2CO
acid cianic

cianat de amoniu

uree

Se poate porni n studiul biochimiei pe cale fizic i chimic uznd de


caracterizarea structural sau din perspectiv biologic prin caracterizarea
celulelor i organismelor vii. Oricum aceste dou ci au convers spre acelai
punct odat cu caracterizarea DNA de ctre Watson i Crick n 1952.
n tabelul 2 sunt redai aceti pai majori fcui n biochimie pn n
era biochimiei moderne.
Tabelul 2. Cile ctre biochimia modern
Biologie

Anii

Chimie i Fizic

Nucleul celular

1830-

Sinteza ureeei

Teoria celulei

1849
1850-

Chimia este folosit pentru

1869

caracterizarea biologiei
83

Lorentz JNTSCHI

Descoperirea genetic a DNA

18701889

Genetica drosofilei
Microscopie electronic

1890-

Descrierea fermentaiei

1909

Cristalizarea ureazei

1910-

Caracterizarea glicolizei

1929
Funciile DNA

1930-

Descrierea ciclului acidului

1949

citric

Analiza de raze X a cristalelor de

1950-

Lanul dublu de DNA

protein din enzime de restricie

1969

Codul genetic

RNA catalitic

1970-

DNA recombinant

Terapia genetic

1989

Reacia n lan a polimerazei

4.2. Biomolecule
Sunt o mare varietate de compui utilizai n sistemele vii. Cteva
exemple sunt:

carbohidrai: asigur energia celulei, structura i servesc la recunoaterea


molecular;

lipide: asigur energia celulei, constituent de baz al membranei celulare,


intr n compoziia hormonilor;

vitamine: amestec de compui care joac multe roluri i sunt pri


eseniale ale altor biomolecule;

aminoacizi: blocurile constructive din proteine;

inele de porfirin: specii ca hemul i clorofila;

84

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Hemul (fig. 72) are ionul de Fe2+ n centrul su care formeaz un


complex cu oxigenul i este folosit de celule pentru transportul oxigenului.

Fig. 72. Hemul


Dintre polimerii sistemelor vii se pot enumera:

acizii nucleici, care stocheaz i transfer informaia i sunt construii din


zaharuri, fosfat i baze azotate;

proteinele, care asigur transportul, structura i sistemul regulator n


celul i sunt construite din aminoacizi;

polizaharidele care sunt folosite pentru realizarea structurii, stocarea


energiei i sunt construite din simple zaharuri;

iar dintre asocierile organizate de macromolecule, numite i ansambluri


supramoleculare:

membranele celulare, alctuite din lipide i proteine;

cromatinul, format din DNA i proteine;

ribozomii, formai din RNA i proteine;

citoscheletul, o structur proteic fibroas;

viruii, ansambluri de lanuri DNA i RNA mpachetate ntr-o protein.


85

Lorentz JNTSCHI

Este foarte important de reinut c nici una dintre cele enumerate mai
sus nu sunt considerate vii.
4.3. Circuitul Informaiei
Se poate schematiza transferul informaiei biologice prin:
DNA RNA Protein Structura i funciile celulei
Dintre structurile elementare enunate, cele responsabile cu stocarea i
prelucrarea informaiei sunt:

DNA stocheaz informaia;

RNA extrage informaia stocat;

Proteinele proceseaz informaia;


Comunicarea ntre celule se face prin intermediul substanelor. Una

sau mai multe substane sunt eliberate n mediu de ctre organismul viu. Alte
organisme pot detecta aceste substane chiar i n cantiti foarte mici.
Feromonii sunt un astfel de exemplu:
CH3

CHCH2CH2OCCH3
CH3

Fig. 73. Izoamilacetat (alarma albinelor)

O
CH3CH2CH=CH(CH2)9CH2OCCH3

Fig. 74. Tetradecenilacetat (feromonul sexual al moliei porumbului)

86

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

4.4. Proteine
Dup cum s-a vzut, proteinele sunt construite din aminoacizi. La
formarea unei proteine se elibereaz o molecul de ap:
H

HO

H2NCCOOH + H2NCCOOH
R

H2NC-C- N-CCOOH + H2O

H R

Fig. 75. Formarea proteinelor prin nlnuirea aminoacizilor


Aminoacizi n proteine se leag n succesiuni variate (vezi tabelul 1):
ala

arg

asn

asp

cys

gln

glu

gly

his

ile

leu

lys

met

phe

pro

ser

thr

trp

tyr

val

Fig. 76. Secven de lan de aminoacizi ntr-o protein


Odat ncorporat n protein, un aminoacid se numete reziduu. O
polipeptid se numete un lan format din pn la 100 de reziduuri iar
proteina conine mai mult de 100 de reziduuri. Ca ordin de mrime, este de
reinut c cele mai multe peptide i proteine izolate de la celule conin de la 2
la 2000 de reziduuri. Dac folosim valoarea masei moleculare medii a
aminoacizilor (220 g/mol) rezult pentru proteine o valoare a masei molare
cuprins ntre 200 g/mol i 220 kg/mol.

87

Lorentz JNTSCHI

Analiza proteinelor a dus la stabilirea structurii acestora. Ca i la


acizii nucleici, proteinele se caracterizeaz folosind 4 nivele structurale (fig.
77):

HO

HO

H2N-C-C-N-C-C- N-C-COOH
R1

H R2

R3

Fig. 77. Structura primar, secundar, teriar i cuaternar a unei proteine


Cteva exemple de proteine sunt regate n fig. 78-80.

Fig. 78. Permeaza, proteina care asist transportul cellular


88

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Fig. 79. Insulina uman (51 reziduuri, 3 legturi ncruciate S-S)


Un exemplu interesant este hormonal creterii umane (fig. 80), care
originar a fost obinut de la cadavre pentru ca astzi s se produc pe calea
ingineriei genetice:

Fig. 80. Hormonul de cretere uman (596 de reziduuri)


Dimensiunile ctorva proteine importante sunt redate n tabelul 3:

89

Lorentz JNTSCHI

Tabelul 3. Dimensiuni proteice


Protein

Mas molar Reziduuri

Insulina

6000

51

Citocromul C

16000

104

Hemoglobina

65000

574

Gama globulina

176000

1320

Miosina

800000

6100

4.5. Metode de Analiz a Proteinelor


Cromatografia de afinitate dateaz dinainte de anul 1910, iar metoda
modern de cromatografie de afinitate a fost publicat prima dat n 1967 de
Axen i alii n lucrarea Metoda bromitului de cianogen pentru imobilizarea
liganzilor pe agar. Ohlson (1978) a fost primul care a demonstrat eficiena
utilizrii unui suport rigid microparticulat i acesta a fost nceputul metodelor
instrumentale.
Metoda implic interacia dintre un ligand i solutul de interes. Acest
fapt poate fi privit asemntor cu cromatografia de schimb ionic.
Sunt astfel dou tipuri de liganzi:

specifici, cei care leag doar o specie anume (modelul anticorp / antigen);

generali, care formeaz legturi cu grupri specifice de specie int;


Elementele cromatografiei de afinitate sunt:

suportul: materialul pe care ligandul este fixat; ideal este ca acesta s fie
rigid, stabil i s aib o suprafa mare; agarul este cel mai cunoscut
suport, de asemenea se mai folosete celuloza, dextranul i
poliacrilamida;

90

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

ligandul, gelul de agaroz este un polimer al D-galactozei i al 3,6anihidro-L-galactozei i poate fi folosit la o presiune de 1 atm. i ntr-un
interval de pH de la 4 la 9;

introducerea probei este ilustrat n fig. 81, cnd trebuie s se aib grij ca
coloana s aib capacitatea adecvat;

ligand

spaiator

matrice

Fig. 81. Cromatografia de afinitate

Fig. 82. Eluarea i splarea de impuriti n cromatografia de afinitate


91

Lorentz JNTSCHI

Adsorbia se realizeaz utiliznd un debit mic, i eluentul ajut


direcionarea moleculelor din prob ctre zonele libere (fig. 82). Odat fixate,
se pot spla impuritile prin traversarea unei cantiti de solvent prin
coloan.
La final, componentul de interes trebuie s fie nlturat i colectat.
Aceast operaiune este de fapt regenerarea coloanei.
Electroforeza este o metod de separare care ine seama att de
dimensiunea ct i de sarcina particulelor. n aceast metod probele sunt
supuse unui cmp electric i unde acestea au tendina de migra pe poziii
anume n cmp (fig. 83).

Fig. 83. Migrarea speciilor ncrcate electric n electroforez


Interpretarea unei electroforegrame se face prin comparare cu o prob
etalon iar liniile lsate de prob se pot folosi att calitativ (poziia acestor linii
dau originea proteinei iar limea benzii indic cantitatea de aminoacizi de
unde se obine masa proteinei (fig. 84).
Cu electroforeza de gel un polimer ncruciat se comport ca o sit
molecular astfel nct moleculele mici se mic mai repede dect cele mai
mari.
92

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Etalon

Proba
mm
Fig. 84. Interpretarea unei electroforegrame

4.6. Carbohidrai
Carbohidraii sunt compui ce conin C, H i O, i au formula
general Cx(H2O)y avnd toi grupri C=O i OH. Se clasific dup:

dimensiunea bazei carbonice din ir;

numrul de uniti de zahar;

localizarea legturii C=O (aldoze, cu legtura C=O la capt de ir i


cetoze, cu legtura C=O n mijlocul lanului carbonic);

stereochimie.
Tipuri de carbohidrai:

monozaharide, cu o singur unitate de zahar;

dizaharide, cu dou uniti de zahar;

oligozaharide, cu de la 2 la 10 uniti de zahar;

polizaharide, cu peste 10 uniti de zahar.


Legturile se realizeaz prin intermediul atomilor de oxigen O

numite legturi glicozidice.


Cele mai importante monozaharide sunt:

D-gliceraldehida, cel mai simplu zahar;

D-glucoza, cel mai important zahar n diet;


93

Lorentz JNTSCHI

D-fructoza, cel mai dulce dintre toate zaharurile;

D-galactoza, parte a zaharului din lapte;

D-riboza, folosit n construcia RNA.


Litera D denot faptul c fiecare dintre compui este un D-enantiomer

(rsucete lumina polarizat spre dreapta).


Au loc frecvent nchideri de ciclu n zaharurile liniare, cum este cea
prezentat n fig. 85:

HOH2C

HOH2C
OH
HC O

O
OH

Fig. 85. Ciclicizare intramolecular


-D-glucoza
H
H

HO

CH2OH
O
H
HO

H
OH

OH

H C OH
HO C H
H C OH

CH2OH

H C OH
CH2OH

H
HO

O
H
HO

-D-glucoza
Fig. 86. Ciclicizarea D-glucozei
94

H
OH

OH
H

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Reaciile pe care le dau monozaharidele sunt specifice i cuprind:

Oxidoreducerea, necesar pentru descompunerea lor complet:


O-

H
C O
H C OH

+ 2 Cu2+ + 5 OH-

C O
H C OH

CH2OH

+ 2 Cu2O + 3 H2O

CH2OH

Esterificarea, producere de esteri fosfai:


O

R-OH + C-R1

R-O-C-R1 + H2O

OH

Derivarea aminic, utilizat pentru a produce componeni structurali ca


glicoproteinele;

Legarea

glicozidic,

legarea

monozaharidelor

pentru

forma

polizaharide.
n tabelul 4 sunt redate calitile gustative ale monozaharidelor:
Tabelul 4. Ct de dulci sunt zaharurile
Zahar

Dulcea relativ la sucroz

lactoz

0.16

galactoz

0.32

maltoz

0.33

sucroz

1.00

fructoz

1.73

aspartam

180

zaharin

450
95

Lorentz JNTSCHI

Metabolismul zaharurilor n organism este extrem de esenial pentru


via. n figura urmtoare este redat metabolismul glucozei:
Dizaharide

anabolism

Glicogen (animale)
Amidon (plante)

Lactat
glucogenez

anaerobic, n muchi
aerobic

Glucoz

catabolism
calea fosfogluconatului

Piruvat

glicoliz

Acetil-CoA

anaerobic, n drojdie

ATP + NADH + H+

Riboz-5-fosfat + NADPH + H+

Fig. 87. Metabolismul energetic al glucozei

96

Etanol

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

5. Toxicologie

5.1. Imunologie
Imunologia se ocup cu identificarea principiilor care stau la baza
funcionrii sistemului imunitar la animalele vertebrate. Rspunsul sistemului
imunitar este un sistem sofisticat de a neutraliza i nltura substanele strine
din corpul animalelor. Poate s fie unul foarte specific, posed o memorie
astfel nct rspunsul este mult mai rapid dup prima experien cu un
material strin i poate face distincia ntre moleculele strine i moleculele
proprii.

Proteina
Anticorp

Determinant
antigenic
Fig. 88. Mecansimul de aciune al anticorpilor

Definiiile pentru antigen i anticorp sunt circulare (una este definit


n termenii celeilalte). Un antigen (sau mai specific un imunogen) induce un
rspuns imunitar care include formarea de anticorpi (proteine serice),
activarea de celule T (trombocite) sau ambele. Anticorpii se pot lega la
97

Lorentz JNTSCHI

antigen. Doar moleculele mari pot genera un rspuns imun. Proteinele sunt
foarte efective n a face asta, dar i alte macromolecule sunt de asemenea
imunogenice. n ciuda dimensiunii sale mari, un anticorp specific
reacioneaz numai cu o mic parte a moleculei imunogenice (fig. 88).
Aceast regiune determinant a antigenului poate conine doar 4-5
aminoacizi. Astfel, o protein poate avea un mare numr de determinani
antigenici astfel nct rspunsul imunitar poate consta dintr-un numr mare
de anticorpi cu diferite specificiti.

5.2. Imunologie Clinic i Diagnostic Microbiologic


Aceast seciune descrie principiile clinice i diagnosticarea
microbiologic care sunt folosite la izolarea i identificarea bolilor cauzate de
agenii patogeni.
Diagnosticul i tratamentul bolilor infecioase pot fi soluionate prin
rapida identificare a microbului responsabil. Tehnicile tradiionale de izolare,
identificare i testare a susceptibilitii la antibiotice dureaz aproximativ 72
de ore. Oricum, mult mai rapide sunt procedeele moderne care au fost puse la
punct n scopul reducerii acestui timp.
Probele care sunt colectate de la esutul infectat i fluide trebuie luat
ct se poate de aseptic i trebuie analizat prompt pentru a preveni schimbrile
chimice sau biologice care pot avea loc n timpul depozitrii. Totdeauna
exist posibilitatea ca probele care sunt recoltate din organism s fie
contaminate n timpul colectrii. Aceste instane pot fi identificate prin
selectarea speciilor care se dorete a fi izolate, prevenind astfel ca ele s fie
contaminate cu flor normal. Dac sunt membrii ai florei normale care se
afl n esutul care face parte din prob, probabil acesta o contamineaz.
98

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Metode speciale sunt folosite pentru a lua probe de snge, urin, materiale
fecale i de alte organite sau esuturi.
Poate cel mai important instrument n izolarea patogenilor din probe
luate de la indivizi infectai este folosirea condiiilor restrictive de cretere.
De exemplu, probele incubate n condiii anaerobe n mod evident vor
preveni creterea bacteriilor aerobe. Dac anumite caracteristici unice ale
patogenului sunt cunoscute, acestea pot fi ncorporate n construcia mediului
de incubaie.
De exemplu, Martin-Thayer Agar conine cteva antibiotice la care
Neisseria gonorroeae este rezistent. Acesta este un exemplu de mediu
selectiv care conine compui care inhib microbii nedorii, dar nu i bacteria
de interes. Mediile difereniate sunt utile pentru identificarea bacteriilor
izolate deoarece acestea permit reacii ca producerea de acid, hemoliza
celulelor roii ale sngelui, sau producerea de hidrogen sulfurat. n practica
actual multe medii au att proprieti selective ct i difereniate.
Pentru a finaliza identificarea unui izolat, o banc de medii
difereniate i teste biochimice pot fi folosite. Aceste teste decurg n prezena
unei enzime specifice n condiiile de cretere care sunt asigurate. Prin
compararea rezultatelor obinute de la un izolat necunoscut i datele de la
speciile cunoscute identificarea poate fi fcut. Cele mai utile teste pentru
prelevarea patogenilor sunt comercializate n pachete de kituri, astfel nct
laboratoarele mici s nu fie obligate s prepare o varietate de medii speciale.
Sensibilitatea unui patogen izolat la un anume tip de antibiotic este
stabilit prin metoda Kirby-Bauer. O cultur de bacterii este mprtiat pe o
plcu de agar plan i discurile coninnd diferite antibiotice sunt plasate pe
platan. Antibioticul difuzeaz pe agar. dac bacteria este rezistent la
antibiotic, o serie de descendeni se vor dezvolta pe disc. dac nu, dicul va
rmne gol n acea poriune. Dimensiunea zonei "moarte" este proporional
99

Lorentz JNTSCHI

cu eficacitatea antibioticului. Concentraia minim de inhibiie a unui


antibiotic pentru o specie bacterian este determinat prin inocularea unei
serii de tuburi coninnd diferite concentraii de antibiotic i observarea celei
mai mici concentraii la care nu are loc creterea.
Dac o metod imunologic poate fi utilizat direct pe un specimen
clinic, patogenul poate fi identificat fr a fi cultivat. Aceasta necesit
prepararea unui antiser de referin mpotriva patogenilor cunoscui.
Anticorpii fluoresceni pot fi vizualizai microscopic dup ce se leag
de un specimen. Oricum, specificitatea anticorpilor policlonali poate fi o
problem. Membrii florei bacteriilor normale pot avea o suprafa a
antigenilor similar cu a patogenului i reacioneaz ncruciat cu antiserul de
referin. aceast problem poate s apar din nou la utilizarea anticorpilor
monoclonali. Dac un anticorp monoclonal reacioneaz numai cu un anumit
component de suprafa, el poate detecta un lan particular al bacteriei. n
contrast, civa determinatori antigenici au efecte similare pentru specii
diferite. Un anticorp monoclonal care reacioneaz cu acest determinant poate
fi folosit ntr-un sistem de vizualizare pe ecran.
Testul ELISA a devenit popular n diagnosticarea de laborator
deoarece poate fi automatizat i utilizat n afiarea programatic a masei.
Testul direct ELISA este folosit pentru a detecta antigenii ntr-un specimen
pacient n timp ce testele indirecte ELISA detecteaz anticorpii specifici n
serul pacientului.
Testele de aglutinare pot fi fcute rapid i necostisitor. Prin
amestecarea unui antigen sau anticorp, se poate observa imediat reacia
pozitiv a acestuia. Tehnica este necostisitoare, i este folosit n special pe
scar larg sau n rile n curs de dezvoltare n care aparatura complex este
dificil de ntreinut.

100

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Specimenele clinice conin un amestec complex de antigeni. Pentru a


detecta o protein specific antigenic, estul Western blot poate fi aplicat. n
aceast tehnic, proteinele sunt separate pe baza dimensiunii prin
electroforez de gel pe poliacrilamid.

101

Lorentz JNTSCHI

6. Studii Fitosanitare

6.1. Introducere
Caracterul universal al aplicrii pesticidelor adesea fr cunoaterea
suficient a aciunii lor i a modului de asigurare mpotriva efectului lor toxic
a influenat n mare msur opinia public. ngrijorarea a crescut datorit, mai
ales constatrii c aciunea negativ a pesticidelor asupra mediului i omului
se manifest timp ndelungat [7].
Pierderile provocate agriculturii pe plan mondial de diferitele
organisme duntoare se ridic anual la 35% din recolte, ceea ce corespunde
cu aproximativ 100 miliarde de dolari. Din aceste pierderi, insectelor le revin
13.8%, ciupercilor 11.6%, buruienilor 9.5% i altor organisme 0.1%. Aceste
pierderi variaz n diferite regiuni ale lumii n funcie de condiiile climatice
i numeroi ali factori ecologici.
Astfel, lucrarea [8] trateaz schimbrile din sol datorit climei n
depozitele glaciale. Aici se remarc c cronofunciile solului sunt adesea
cvasiliniare, dar aceste relaii sunt adesea valabile doar grosier, generalizri
fortuite care ignor schimbrile n soluri datorate climei i altor cicluri
externe, influene care guverneaz formarea i degradarea solului. Lucrarea
prezint aspecte legate de aceste influene asupra munilor Rocky (U.S.A.) i
aici analiza solului a permis estimarea anilor de sedimentare. ntr-un detaliat
studiu al solurilor din Wind River Range i Wind River Basin s-au relevat
caracteristici ale straturilor de suprafa care nu urmeaz trendul anual.
Oricum, urmrind compoziia n carbonai a straturilor se obin caracteristici
corelate anual.
102

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

n mare msur pierderile reflect i posibilitile de a controla


mrimea produciei agricole pe diferite teritorii. Astfel, pierderile provocate
de insecte constituie 5% din producia potenial agricol n Europa, 7% n
Oceania, 9% n america de Nord i Central, 10% n America de Sud, Rusia
i China, 13% n Africa i 21% n restul Asiei. Cele mai evidente i mai
palpabile sunt de obicei pierderile n producia de cereale [9]. Un important
aspect al produciei agricole este pentru sntatea public [10].

6. 2. Aspecte de Sntate Public


Numeroase studii i cercetri, finalizate prin conferine tiinifice i
articole se fac relativ la influenele pesticidelor i altor tratamente chimice
asupra ecosistemului.
Astfel, lucrrile conferinei [11] trateaz aspectele legate de efectele
asupra sntii umane n ecosistemele din vecintatea Marilor Lacuri i
bazinului St. Louis Lawrence River (U.S.A.). S-a relevat o impresionant
cantitate de noi cunotine i instrumente de aplicare a acestor cunotine doar
n anii 1994-1996, de cnd o ntlnire similar a avut loc n Detroit (U.S.A.).
Pentru o analiz corect, trebuiesc luate n considerare parametrii ca
aria de expunere, creterea demografic i n general efectele asupra sntii
furnizeaz informaii complexe.
Se poate spune c n domeniul expunerii sunt informaii linititoare
aa cum o dovedesc studiile nivelelor pentru poluanii toxici persisteni care
au deczut dramatic, cu precdere din anii 1970 ctre anii 1980, care arat c
trendul n timp al acestor poluani a sczut. Acest declin n nivelele de
contaminare n U.S.A. reprezint un succes n prevenirea primar, care se
coreleaz ns cu aciunile n parteneriat ale ageniilor de mediu, ageniilor de
103

Lorentz JNTSCHI

reglementare, care au fcut ca industria s-i adapteze tehnologiile pentru a


reduce emisiile n mediu. S-a artat c datele msurate dovedesc c nu este
nici o diferen semnificativ n ceea ce privete concentraia poluanilor n
bazinul Marilor Lacuri dect n alt parte [12].
Oricum, interpretarea exclusiv pe baza acestor niveluri de poluare
ofer o slab nelegere asupra potenialului de toxicitate al poluanilor.
n termeni demografici, sunt populaii care sunt expuse la risc datorit
unor anume categorii de poluani care se pot decela n mediu. Se pot produce
efecte secundare ale expunerii, cum ar fi sensibilizarea psihologic. De
exemplu, creterea ftului este n special sensibil la efectele substanelor
toxice persistente i ofer o fereastr ctre studii n ceea ce privete efectele
acestora pe termen lung, n generaiile urmtoare (transgeneraional). Sunt
necesare astfel studii care s-i deplaseze atenia de la efectele pe termen
scurt la efectele pe termen lung. Categorii de populaie consumatoare de
pete, de exemplu, pot fi expuse la riscuri suplimentare fa de cele relevate
de trenduri. Studii n acest sens arat c aceast categorie, de exemplu, este
supus la riscuri de 2-3 ori mai mari dect restul populaiei [13] i n acelai
sens, copii alptai pot cpta rate de expunere de 40-50 de ori mai mari dect
restul populaiei.
n termeni de sntate uman, studii arat c funciile neuromotorie i
reproductiv sunt cele mai n suferin [14-,15,16]. Ceea ce este de remarcat
este c aceste deficiene odat aprute, nu mai pot fi reparate, ca un deficit
bugetar, de exemplu.
Opiniile sunt mprite n ceea ce privete implicaiile studiilor de
sntate obinute prin intermediul analizelor epidemiologice. Diferene sunt
remarcate n ceea ce privete concepia studiului care conduce la rezultatele
care au fost raportate. Oricum, trebuie s recunoatem remarcabila paralel
care ceste studii o relev. Fiecare dintre aceste studii, fie c provin din studii
104

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

epidemiologice, studii de laborator sau din studii de genetic, ele pot fi


comparate cu lentilele unui microscop, i, ca i lentilele microscopului, ele
variaz n ceea ce privete puterea de rezolvare i calitatea. Un fir logic care
trebuie urmrit este situat dincolo de aceste cutri i relev tentativa de a
cuprinde implicaiile pentru sntatea public. Lucrarea [17] caracterizeaz
foarte bine acest numitor comun, i anume n ce msur se rspunde la
ntrebarea: "Care este expresia cantitativ a implicaiei n sntatea
public?", identificnd foarte bine legtura lips ntre tiin i politica n
tiin. Este destul de greu deseori de trecut de la tiin la servicii n termenii
practici ai sntii publice. Gilbertson sugereaz [17] c motivul pentru care
avem aceast dificultate este pentru c ncercm s identificm cauzaliti,
cauzaliti care sunt foarte dificil de stabilit. O cantitate considerabil de
informaie [18-,19,20] refer vecintatea domiciliului persoanelor la care se
manifest efecte de malformaii congenitale la natere, ca dovad a legturii
ntre cauz i efect.
Toate acestea vin s ntreasc importana studiului pesticidelor, sub
toate aspectele sale, mai ales sub aspectul sntii publice.

6.3. Agrochimia Pesticidelor


Pesticidele, n accepiunea general se mpart n:

chimice care sunt compui chimici cu efecte nefavorabile asupra


insectelor, bolilor sau duntorilor plantelor de cultur;

fizice, ca de exemplu iradierea ce provoac sterilitatea la insecte;

biologice, ca de exemplu preparatele de Bacillus thuringiens;


Pesticidele chimice sunt deci un bun exemplu de compui a cror

aplicare este riscant. Totui, principalul beneficiar al acestora este


105

Lorentz JNTSCHI

agricultura. Aici ele se aplic n scopul proteciei plantelor n timpul


vegetaiei dar i n scopul proteciei plantelor dup recoltare n mijloacele de
transport i depozite.
Pesticidele se caracterizeaz prin lipsa aciunii selective; ele pot s
provoace intoxicaii acute oamenilor, mai ales celor care lucreaz la
producia i aplicarea lor.
De asemenea, sub influena pesticidelor, pe lng insectele care
distrug plantele n timpul vegetaiei i dup recoltare, pot s piar sub
influena pesticidelor i albinele folositoare, iar la combaterea buruienilor pot
s sufere chiar plantele a cror protecie se urmrete. Asemenea situaii sunt
agravate de aplicarea incorect a pesticidelor.
Termenul de pesticide cuprinde toate substanele sau amestecurile de
substane folosite pentru:

prevenirea dezvoltrii sau combaterea oricrui organism vegetal sau


animal nedorit;

reglarea creterii plantelor, defolierea i uscarea lor.


Aplicarea pesticidelor n agricultur, medicina veterinar, diferite

industrii (textil), gospodrie casnic i ocrotirea sntii populaiei are ca


scop mbuntirea cantitativ i calitativ a alimentelor, nutreurilor i
produselor industriale, asigurarea lor n timpul pstrrii fa de duntori i
boli, ocrotirea animalelor contra paraziilor precum i distrugerea insectelor i
altor transmitori de boli la oameni i animale. Lista acestor boli cuprinde:
malaria, tifosul exantematic, ciuma, febra galben, filarioza, afeciuni virotice
ale creierului, febrele transmise de pduchi i acarieni, febra de tranee,
amoebiazele, leischmaniozele, onchocercozisele, trypanosomiosisele, bolile
papataci,

frambezia,

inflamarea

conjunctivitelor,

boala

lui

Chagas,

rickettsiozele i tularemia. n lupta cu aceste boli rolul cel mai important l-au
avut insecticidele organoclorurate, iar dintre acestea DDT, folosite nc n
106

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

continuare n anumite ri.


n funcie de destinaia pesticidelor, acestea pot fi mprite n
urmtoarele grupe:

zoocide pentru combaterea duntorilor animali


o insecticide: combaterea insectelor;
o rodenticide: combaterea roztoarelor;
o moluscocide: combaterea molutelor;
o nematocide: combaterea nematozilor;
o larvicide: combaterea larvelor;
o aficide: combaterea afidelor;
o acaricide: combaterea acarienilor;
o ovicide: distrugerea oulor de insecte i acarieni;

fungicide i fungistatice, bactericide i virocide: combaterea ciupercilor i


ciupercostaticelor;

erbicidele: combaterea buruienilor;

regulatori de cretere: mijloace care inhib sau stimuleaz procese de


cretere la plante:
o defoliante: mijloace de defoliere a plantelor;
o desicante: mijloace de uscare a plantelor nainte de recoltare;
o deflorante: mijloace de nlturare a cantitii excesive de flori;

atractante: mijloace de ademenit;

repelente: mijloace pentru respingere.


Pesticidele sunt aplicate sub diferite forme: prafuri, pulberi, granule,

capsule, soluii, suspensii, aerosoli, spume, gaze, vapori, paste, iar forma de
utilizare este dictat de particularitile duntorului combtut, considerentele
tehnice i economice ale aplicrii preparatului.

107

Lorentz JNTSCHI

6.4. Chimia Pesticidelor


Caracteristica toxicologic a pesticidelor difer n funcie de clasa
structural i funcional la care aparin. Cteva clase sunt prezentate n
continuare:
6.4.1. Insecticidele
Hidrocarburile organoclorurate cuprind compuii ciclodienici: DDT,
HCH, lindan, metoxiclor, Keltan, aldrin, dieldrin, clordan, endrin,
endosulfan, heptaclor, Kelewan, toxafen. Trstura comun este afinitatea
pentru esutul adipos i o mare stabilitate. Ptrund n organismul omului prin
piele, tubul digestiv i cile respiratorii. Se acumuleaz n special n esutul
adipos, ficat, creier, muchi, rinichi i inim. Aciunea toxic n intoxicaiile
acute se manifest printr-o excitare iniial puternic i apoi paralizarea
sistemului nervos central. n intoxicaiile subacute apar perturbri ale auzului,
dereglarea coordonrii micrilor, atrofia esutului muscular, leziuni ale
ficatului i rinichilor. n prezent au fost scoase din uz n multe ri.
Compuii organofosforici sunt cel mai frecvent esteri ai acizilor:
fosforic, tiono-, tiolo-, tionotiolo-fosforic i pirofosforic. Cea mai larg
aplicabilitate o au compuii cu formula general:
R O

X
P

R O

R1

unde X, Y = O, S i R, R1 = radical alchilic cnd:

X = Y = O : fosfai (clorfenwinfos, diclorfos, dimefox, fosdrin,


fosfamidon, monocrotofos, triclorfon);

X = O, Y = S : tiofosfai (demeton-S);

X = S, Y = O : tionofosfai (bromofos, demeton, etilpirimifos,

108

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

metilopirimifos,

clortion,

diazinon,

fention,

folition,

paration,

metiloparation, fenclorfos, fenitrotion);

X = Y = S : ditiofosfai (formotion, dimetoat, disulfoton, fostion, gution,


malation, tiometon, metidation);

X = S, Y = R : tionofosfai (EPN).
Toxicitatea acut a acestor compui se msoar n uniti per os LD50

care reprezint doza care a provocat moartea a jumtate din animalele din
grupa experimental. Toxicitatea depinde pronunat de structura chimic.
Astfel, s-a constat experimental c compuii care conin radicalul metilic (R
= CH3) au o toxicitate mai mare dect cei care conin radicalul etilic (R =
CH2CH3). Derivaii care conin sulf sunt mai puin toxici dect cei care conin
oxigen.
Intoxicaiile sunt foarte periculoase, se caracterizeaz printr-o
ngreunare accentuat a vorbirii, pierderea capacitii de a coordona
micrile, inhibarea reflexelor i com. Moartea intervine n urma paraliziei
muchilor respiratorii i oprirea funcionrii inimii. Majoritatea compuilor
sunt supui n organism unei activri n prezena oxidazelor microsomale a
NADPH2 (nicotinamid adenin dinucleotid fosfat redus) i a oxigenului
molecular.
Compuii carbamici sunt esteri N-substituii ai acidului carbamic iar
cei folosii frecvent sunt carbarilul, cartapul, pirimicarbul, propoxurul,
carbofuranul, Temik-ul. Mecanismul de aciune este acelai ca la
organofosforici: inhibarea esterazelor, i n special a esterazei acetilcolinei.
Complexul enzimo-carbamat este mai instabil ns i se deblocheaz esteraza
acetilcolinei si se revine la funciile normale. Cazurile de intoxicaii acute
sunt mai rare i au evoluie mai atenuat. Carbarilul s-a dovedit toxic pentru
cobai i hrciogi [21].

109

Lorentz JNTSCHI

6.4.2. Fungicidele
Compuii

organomercurici

cuprind

ndeosebi

metil

mercur

cianoguanidina, p-toluensulfonamida etilomercuric i acetatul fenilmercuric. Ptrund n organism prin tubul digestiv i sistemul respirator, ns
n anumite condiii se pot adsoarbe i prin piele. n tubul digestiv metilmercurul este adsorbit n proporie de 95% iar n plmni n proporie de
80%. n intoxicaii, organele critice sunt rinichii i sistemul nervos central i
periferic pentru vaporii de mercur i sistemul nervos central pentru metilmercur. S-a putut constata c 10% din doza de metilmercur se acumuleaz n
creier, i dispare din organism extraordinar de ncet: 50% n decurs de 70-90
zile.
Ditiocarbamaii sunt derivai ai acidului ditiocarbamic, care nu apare
n stare liber i sunt compui ca: Nabam, Maneb, Zineb, Mancozeb, Ziram,
Ferbam, Tiram, Polyram. Gruparea activ care condiioneaz aciunea
fungicid i toxic este:
S
N C

n care azotul aminic este legat cu radicali alifatici iar sulful cu metalul.
Ditiocarbamaii pot s acioneze asupra ADN indirect prin transformai
metabolic

ca

N-hidroxicarbamaii.22

Derivaii

ditiocarbamici

se

caracterizeaz prin proprieti puternice de iritare i sensibilizare.


Ali compui derivai halogenai ca pentaclorfenolul (PCP),
cvintocenul (PcNB), Captanul, Folpetul, Difolatanul influeneaz transportul
de electroni n lanul respirator, duce la perturbarea celular a respiraiei.
6.4.3. Erbicidele
Se aplic cu succes peste 500 de diferii compui chimici sau
combinaii ale acestora n combaterea buruienilor. Dup modul de aciune
110

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

erbicidele se clasific n:

de contact (distrug plantele n urma contactului direct cu ele);

sistemice (se adsorb prin frunze i rdcini i sunt transportate n


esuturile ntregii plante).
Derivaii carboxilici aromatici au aciune variat n funcie de

structura chimic i modul de aplicare. Cele mai importante sunt: derivaii


acidului fenoxiacetic (2,4-D, 2,4,5-T, MCPA, diclorprop, mecoprop) i
derivaii acidului benzoic (Dikamba, 2,3,6-TBA), clase care se denumesc
deseori i erbicide auxinice, au efecte secundare de ptrundere n organismul
oamenilor i animalelor pe cale digestiv i respiratorie i pot provoca alergii
i erupii pe piele i iritarea mucoaselor ochiului. Dioxinele pot lua natere
din clorfenoli, materialul iniial n producerea multor pesticide clorurate.
Derivaii acizilor alifatici cuprind n principal Dalaponul i acidul
tricloracetic.

Erbicidele

din

aceast

grup

combat

buruienile

monocotiledonate.
Fenolii substituii ca Dinosebul (DNBP), pentaclorfenolul (PCP),
DNOC, DNPP acioneaz prin contact asupra buruienilor dicotiledonate i
pot fi aplicai ca fungicide sau acaride i insecticide. n afar de PCP toi
conin dou grupri nitrice care decid caracterul aciunii toxice.
Derivaii azotai heterociclici sunt derivai triazinici i triasolici ca:
antrazina, simazina, prometrina, propazina, prometonul, amitrolul i
manifest o sfer larg de aciune att n raport cu plantele monocotiledonate
ct i dicotiledonate. Toxicitatea acestor compui se manifest n special prin
aciunea asupra ficatului.
Derivaii azotai alifatici se pot mpri n 3 subgrupe:

derivai ai ureei: diuron, linuron, monuron, fluorometuron, clortoluron,


cloroxuron;

carbamai: IPC, CIPC, barban, diallat;


111

Lorentz JNTSCHI

compui amidici: difenamid, cipromid, propanil.


Erbicidele pe baz de uree se folosesc la combaterea buruienilor

dicotiledonate n plantaiile pomicole i legumicole iar aciunea toxic se


manifest prin modificri hematologice.
Erbicidele carbamice se aplic pentru distrugerea selectiv a plantelor
monocotiledonate din culturile dicotiledonate.
Compuii amidici au un caracter mai puin toxic [23].

6.5. Proprietile Fizico-Chimice ale Pesticidelor

Proprietile fizico-chimice ca punctul de fierbere, refracia molar,


presiunea critic, viscozitatea i retenia cromatografic sunt cele mai simple
proprieti fizico-chimice experimentale ale compuilor chimici.
De cele mai multe ori, aceste valori sunt tabelate i pot fi folosite n
proiectarea instalaiilor industriale de producere i separare [24]. Sunt ns
cazuri n care nu se dispune de date pentru un anumit compus, cazuri n care
se apeleaz la studiile de corelaie pentru a regsi valorile dorite [25].
Amestecurile complexe de pesticide pot ridica dificulti n separarea
cromatografic [26] O soluie este utilizarea de modele matematice capabile
s optimizeze faza mobil pentru a asigura o bun separare [27]. Acestea pot
da rezultate superioare altor metode atunci cnd se aplic amestecurilor
complexe de compui cu structur asemntoare [28]. n cazul cel mai
general se consider funcii de optim cumulat provenit din mai multe modele
[29]. Corelarea proprietilor fizico-chimice cu structura este un instrument
puternic, capabil de a furniza soluii atunci cnd ne confruntm cu lipsa de
date preliminare [30], de a furniza explicaii de natur structural i chiar de a
modela proprietatea pe clase de compui, descompunnd-o pe aceasta n
112

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

elementele sale intrinseci: tipul interaciei intramoleculare predominante,


tipul proprietii atomice responsabile de manifestarea proprietii msurabile
i modelul descriptorului de proprietate [31].
Iat cteva rezultate de acest tip, pentru modelarea refraciei molare i
indicelui de retenie cromatografic la pesticide pe o clas de 10 compui
organofosforici, i o clas de 10 erbicide preluate din [30].
Gutman a introdus indicele Szeged ca un indice pur topologic pe baza
formulelor (V(G) - lista atomilor, D operatorul de distan topologic [32]):
SZe = e Ni,(i,j)Nj,(i,j), Ni,(i,j) = | { v V(G), D(i,v) < D(j,v) } |,
Nj,(i,j) = | { v V(G), D(i,v) > D(j,v) } |;

Rezultatele obinute pentru refracia molar MR i indicele SZe calculat


sunt redate n tabelul 5:
Tabelul 5. Valori SZe i MR
pentru clasa de compui organofosforici n studiu
Structur compus

O
P

35.808

193

40.524

108

34.911

O
O

146
O

O
O

Indice Szeged, SZe Refracie molar, MR

Cl

113

Lorentz JNTSCHI

O
P

186

43.005

290

52.029

360

49.971

78

30.030

108

29.222

360

58.323

88

31.636

O
P

O
O

O
O

Cl

O
P

P
O
P
O

114

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Modelul matematic al refraciei molare MR i reprezentarea grafic a


dependenei sunt redate n figura:

60

y = 0.089x + 23.479

55

R2 = 0.9192

50
45
40
35
30
25
20
70

120

170

220

270

320

370

Fig. 89. Ecuaia de regresie ntre MR i SZe


pentru clasa de compui organofosforici n studiu

Diudea a nlocuit operatorul de cardinalitate din ecuaiile (1b,c) cu


operatori specifici de proprietate atomic (mas i electronegativitate), pe
baza formulelor [33]:
PMi,(i,j) = v M(v), v V(G), D(i,v) < D(j,v),
1
PEi,(i,j) = v v E( v) , v V(G), D(i,v) < D(j,v),

M(v) masa atomului v,


E(v) electronegativitatea Sanderson;
cnd au rezultat indicii SZeM i SZeE corespunztori.

Indicii de retenie cromatografic ICHR i Szeged calculai pe


electronegativiti Sanderson SZeE sunt redai n tabelul urmtor:

115

Lorentz JNTSCHI

Tabelul 6. Valori ICHR i SZeE pentru clasa de erbicide n studiu


Erbicid [24]

Structur

ICHR

SZeE

Cl

MCPA

11.5 17.620

H3C
O

CH2COOH

Cl
Cl
2,4,5-T

14.3 20.991

Cl
O

CH2COOH
COOH

Acid 3,5diclorbenzoic

7.4
Cl

15.956

Cl
Cl

14.6 20.745

2,4-DB
Cl
O

(CH2)3COOH

Cl

Diclorprop

11

Cl
O

CH

COOH

CH3
116

19.535

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Cl

2,4-D

11.8 18.810

Cl
O

CH2COOH

Cl

MCPP (Mecoprop)

10.3 18.373

H3C
O

CH

COOH

CH3
O
N

Bentazon
NH

CH(CH3)2

18.5 24.957

SO2

COOH

Dicamba

Cl

OCH3

9.8

18.614

Cl

18.324

OH
Cl

Cl

pentaclorofenol

12.4
Cl

Cl
Cl

Modelul matematic al indicelui de retenie cromatografic ICHR i


reprezentarea grafic a dependenei sunt redate n figura:

117

Lorentz JNTSCHI

25
y = 0.7472x + 10.307
23

R = 0.8814

21
19
17
15
7

11

13

15

17

19

Fig. 90. Regresia ntre ICHR i SZeE pentru clasa de erbicide n studiu

6.6. Activitatea Biologic a Pesticidelor


n literatura de specialitate este greu de gsit valoarea activitii
biologice a unei anumite pesticide pentru un anumit proces biologic. Din
acest motiv sunt foarte utile relaiile structur proprietate i activitate
proprietate pe clase de compui [34].
Un exemplu de aplicare cu succes a descriptorilor de substituent n
predicia activitii erbicide a triazinelor unei clase de 30 de derivai ai 2difluorometiltio-4,6-bis(monoalchilamino)-1,3,5-triazine
general:
SCHF2
N
A
118

N
N

cu

formula

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

unde A i B sunt substituenii: NH2, NHCH3, NH-i-C3H7, NHC2H5, NHC4H9,


NH-i-C4H9, NH-s-C4H9, NH-t-C4H9, NH-C5H11, NH-C6H13, NHC7H15, NHC8H17 este prezentat n lucrarea [35], unde s-au folosit descriptori de
substituent ca XLDS (indicele de centrocomplexitate) WS (indice de drumuri
calculat pe matricea L3W), volume fragmentale V i numr de atomi N pentru
a prezice activitatea erbicid exprimat prin pI50, logaritmul cu semn
schimbat al concentraiei necesare pentru inhibiia n procent de 50% a
reaciei Hill.
Modelarea matematic s-a fcut innd seama de simetria
substituenilor i s-au mediat valorile obinute pentru descriptorii de
substituent folosind media aritmetic (A), geometric (G) i armonic (H).
Cea mai bun ecuaie de regresie n 3 variabile descriptoare pentru
modelarea activitii biologice s-a obinut pentru un coeficient de corelaie
ntre valoarea calculat i valoarea estimat de r = 0.9807:
pI50 = 10.202 119.5(1/V(H)) 0.097X(H) 0.047W(H)
medierea armonic (H) dnd cele mai bune rezultate n corelaie.

6.7. Metode Moderne n Studiul QSAR/QSPR


n ultima perioad de timp, indicii structurali utilizai studii
QSPR/QSAR (quantitative structure-property/activity relationship) sunt tot
mai frecvent calculai din considerente sterice (geometrice) i/sau
electrostatice (sarcini pariale) [36-,37,38] n comparaie cu vechile
consideraii topologice [39].
Sunt preferate calculele structurale semi-empirice i cuantice
efectuate de programe ca: Hondo95, Gaussian94, Gamess, Icon08, Tx90,

119

Lorentz JNTSCHI

Polyrate,

Unichem/Dgauss,

Allingers

MM3,

Mopac93,

Mozyme,

HyperChem [40].
n analiza de regresie proprietate/indice structural sunt folosite
metode clasice de regresie liniar, regresie liniar multipl, regresie neliniar,
sau, n cazul bazelor de date mari, sistemele expert sau reelele neuronale
[41,42]
Ca metod preliminar analizei, unii autori aliniaz setul de molecule
[43]. Mai mult, metoda CoMFA [44] introduce un algoritm n 6 pai pentru
analiza QSAR [45]:
(A) contruiete setul de molecule cu activitate cunoscut i genereaz
structura 3D a moleculelor (eventual cu unul din programele: Mopac, Sybyl
[46,47], HyperChem [48,49], Alchemy2000 [46] MolConn [46,50]);
(B) alege o mettod de suprapunere (suprapunere de fragmente alese din
molecule [46,51,52] sau suprapunere grupri farmacofore [53]) i suprapune
virtual coordonatele spaiale;
(C) construiete o reea de puncte ce nconjoar moleculele suprapuse la (B)
n mod standard (grid [44]) sau n form modificat (curbiliniu [54]) i alege
un atom de prob pentru interacia cu punctele reelei [55,56].
(D) folosete o metod empiric (Hint [57]), un model specific (suprapunere
farmacofor [58]), energia potenial clasic (Lennard-Jones, Coulomb [44]),
potenialul legturilor de hidrogen [59], cmpuri generate de orbitalii
moleculari [60,61] sau orice alt cmp definit de utilizatorul modelului [55] i
calculeaz valorile de interacie ale cmpului indus n reeaua (C) de cmpul
de interacie ales cu un atomul de prob (C) plasat n punctele reelei;
(E) folosete valorile calculate ale interaciei (D) ntre punctele reelei i
atomul de prob i efectueaz predicia QSAR a activitii cunoscute;

120

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

(F) folosete parametrii QSAR obinui (E) i efectueaz predicia activitii


la molecule care se preteaz la acelai tip de suprapunere cu cele ale setului
coal (A).
Metoda CoMFA este un instrument bun n predicia unui variat tip de
activiti biologice cum sunt: citotoxicitate [62], inhibiie [56,60], proprieti
de formare [63,64]. De asemenea, metoda se folosete n modelarea
compuilor cu efect farmaceutic [53,65] i analiza inhibitorilor HIV [66].
O important problem n modelarea QSAR este cutarea n
moleculele active biologic a substructurilor active care dau cea mai mare
parte a rspunsului biologic msurat [67].
Cutarea invarianilor moleculari este deosebit de util n studiul de
caz. Metoda WHIM (Weighted Holistic Invariant Molecular) calculeaz n
acest sens un set de indici statistici derivai din proprieti sterice i
electrostatice ale moleculelor [68-,69,70]. Metoda original a fost modificat
i i s-a atribuit numele MS-WIHM (Molecular Surface Weighted Holistic
Invariant Molecular) i a fost aplicat cu succes n analiza suprafeei
moleculare [71]. MS-WHIM este o colecie de 36 de indici statistici derivai
din proprieti sterice i electrostatice i orientai ctre parametrizarea
suprafeei moleculare [72].
Jntschi i Diudea propun un nou model structur proprietate bazat
pe topologia molecular obinut din formula structural i topografia
molecular obinut din calcule cuantice [27,31]. Pentru modelarea
molecular este folosit o nou clas de indici: FPIF (fragmental property
index family) ce conine un numr de 61440 indici membrii calculai pe baza
a:

8 metode de fragmentare topologic denumite MI, MA, SzDi, SzDe,


CfDi, CfDe, CjDi, CjDe;

4 modele de interaciune fizic denumite RG, DG, RT, DT;


121

Lorentz JNTSCHI

8 descriptori de proprietate p n funcie de distana d: p, d, 1/p, 1/d, pd,


p/d, p/d2, p2/d2;

5 modele de suprapunere a interaciilor fragmentale: S, P, A, G, H;

4 tipuri de indici sumativi pe matricile cu proprieti fragmentale


rezultate: P_, P2, E_, E2;

3 operatori de scalare a indicilor: id, 1/, ln;

4 proprieti p implicite: C, M, E, Q

i se genereaz ntregul set de 61440 indici pentru o molecul dat pe baza


structurii topologice (atomi i legturi) i topografice (coordonate spaiale i
sarcini pariale).
Nu toi indicii obinui sunt distinci n general. Degenerri apar din
degenerarea valorilor proprietilor atomice i ale descriptorilor alei. n urma
eliminrii identitilor din ntregul set rmn aproximativ 15000 de indici
distinci.
Rezultate deosebite se obin la recunoaterea modelelor de
proprietate. Construcia indicilor permite n urma seleciei fcute n corelaie
s se identifice cauza structural a proprietii macroscopice msurate sau
calculate.
Un exemplu este analiza QSAR i QSPR a unui set de 17 compui de
substituie ai 3-(ftalimidoalchil)-pirazolin-5-onei cu activitate inhibitoare
asupra Lepidium sativum L. (Creson), rezultate superioare celor obinute n
lucrarea [73].
Setul de inhibitori este:

122

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

HO

O
O

H N
N

N
N

3
H

HO

HO

N
O

H N

HO

N
N

O
N

O
O

HO

N
N

N
O

O
O

9
123

Lorentz JNTSCHI

HO

HO

H N

H N
N

N
N

O
N

10

HO

N
N

N
N

O
N

13

O
O

14

12

HO

11

H
HO

O
O

15

HO
O
N

N
O

16
17
Fig. 91. 17 compui de substituie ai 3-(ftalimidoalchil)-pirazolin-5-onei
124

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Cei 17 compui de substituie ai 3-(ftalimidoalchil)-pirazolin-5-onei


cu activitate inhibitoare n soluie de 0.05 g/l asupra Lepidium sativum L.
(Creson) au proprietile:
Tabelul 6. Sum of One-Electron Energy Calculated at Single Point SemiEmpirical Extended-Huckel and the Inhibitory Activity on Lepidium
sativum L. (Cresson)
Molecula

Energia

Inhibiia

nr.

(kcal/mol)

(%)

50978.19

28.4

51000.36

28

53441.43

30.4

53416.95

27.7

38604.68

14.3

62330.33

68.3

64752.65

49.4

64751.09

65.2

50012.42

46.9

10

53424.19

29.3

11

55729.99

28.9

12

55832.12

32.6

13

41020.54

12.2

14

43473.37

18.2

15

64701.39

71.7

16

67104.64

50.6

17

41057.46

15.1

125

Lorentz JNTSCHI

Indicii de structur au fost generai i sortai dup scorul n corelaia


monovariat, dup care li s-a aplicat regresia bivariat. Cele mai bune
rezultatele sunt prezentate n tabelul urmtor:
Tabelul 7. Scoruri n corelaia structur - proprietate
Indice Proprietate

Nume indice

Intercepia Pante

energie

lnDGjDeE_p/d2PE_ 0.9997

5370

3.76e3

492

energie

idRTjDeM_p/d2SP_ 0.9999

5.62e4

47.8

1737
1

(bivariat) 1/RTsDeM_p/d2AP2
inhibiie

-7.1e5

lnDGsDeC_1/p_SE_ 0.9538

-3.3e2

96.3

4304

inhibiie idDTsDiM_p*d_HP_ 0.9926

-26.8

1.56

7649

(bivariat)

idDGjDeE_p/d2SE2

-1.70

Concluziile pentru clasa de compui analizat sunt:

Cel mai bun indice n regresia monovariat (lnDGsDeC_1/p_SE_ pe


inhibiie) nu furnizeaz cea mai bun corelaie n regresia bivariat;

Cea mai bun pereche de indici n corelaia bivariat nu se obine din


ortogonalizare aa cum reclam metoda PCA[74,75] sau DCA[76,77] ci
se obine prin traversarea ntregii familii i efectuarea de perechi;

Suma energiilor de un electron este modelat cel mai bine de perechea de


indici (idRTjDeM_p/d2SP_, 1/RTsDeM_p/d2AP2) cu un scor r = 0.9999;
aceasta justific dependena Sum of One-Electron Energy, Extended
Hckel Model, Single Point Calculation de topologia molecular cum era
de ateptat pentru o mrime calculat; n plus, masa se identific n
expresia indicilor, cum era de ateptat; superpozarea se face sumativ aa
cum se ntmpl de altfel i n calculul energiei;

Inhibiia activitii mitodepresive pe soluia de Lepidium sativum 0.05


mg/ml este prezis cel mai bine de perechea (idDTsDiM_p*d_HP_,
idDGjDeE_p/d2SE2) cu un scor r = 0.99; prezena electronegativitii E

126

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

i masei M sugereaz interaciunile de natur electric i impedimentele


sterice de mas i volum care au loc la inhibiie; modelul de descriptor de
interaciune este p/d2, specific unui cmp electric; prezena descriptorului
de interaciune p*d la mas sugereaz forele elastice care apar la
oscilaiile armonice n jurul poziiilor de echilibru ale atomilor n
structur;

Analiza de corelaie Energie Inhibiie demonstreaz c cele dou


mrimi sunt slab corelate (r = 0.78) ceea ce demonstreaz c modelul a
fost capabil s explice dou mrimi care nu sunt intercorelate.
Ulterior, n lucrrile [78,79] a fost testat puterea de predicie a FPIF

pe un set de 58 de dipeptide cu activitate inhibitoare a ACE, exprimat n


logIC50 (vezi anexa 2), caz n care s-a dovedit nc o dat puterea de
discriminare (idDTsDeEp2/d2SP2, idDGjDiPp/dGP_) i corelare (r = 0.89).
De asemenea, n lucrarea [80] mai multe seturi de molecule cu
activitate biologic inhibitoare au fost considerate. Astfel, 10 derivai de
diclorofenil metan inhibitori ai aromatazei (aromatizarea enzimatic a
androgenilor este implicat n biosinteza estrogenilor i n bolile cauzate de
dependena de estrogen), 90 de compui cu azot, 25 de nitrofenoli cu
activitate erbicid.
De fiecare dat FPIF a dovedit o abilitate superioar de predicie fa
de modelele raportate n literatura de specialitate pe seturile considerate.
Astfel, de exemplu pentru cei 10 inhibitori ai aromatazei, lucrarea
[81] raporteaz o corelaie de R2 = 0.89 n timp ce membrii clasei FPIF
genereaz un model al proprietii care se coreleaz cu mrimea observat cu
scorul R2 = 0.9716.

127

Lorentz JNTSCHI

6.8. Utilizarea Pesticidelor n Cultur Exemplu Aplicativ


Urmtorul tabel clasific pesticidele prin aciunea lor asupra
insectelor duntoare culturii de cartof aprobate pentru folosin n S.U.A. i
folosite n cultur n statul Ohio [82]:
Tabelul 8. Pesticide i aciunea lor biologic

disulfoton
(Di-Syston)
Organofosfai

fonofos
(Dyfonate)
azinfosmetil
(Guthion)
fosmet
(Imidan)
malation
(Cythion)
etoprop
(Mocap)
metamidofos
128

sfredelit.
cereale

(Cygon)

afide

dimetoat

purici
frunze

(D-Z-N)

gndac
purice

diazinon

gndac
Colorado

Pesticid

viermi
tietori

Duntor

viermi
srm

Clasa

asupra duntorilor n regiunea statului Ohio

NS

B/S
*
B/S
*

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

(Monitor)
metil paration
(Penncap-M)
forat
(Thimet)
carbofuran
(Furadan)

Carbamai

metomil
(Lannate)
carbaril
(Sevin)
oxamil
(Vydate)
metoxiclor

Organoclorine

(Marlate)
diclorpropen
(Teleone)
endosulfan
(Thiodan, Phaser)
permetrin
Piretroizi

(Ambrush, Pounce)
esfenvalerat
(Asana)
ciflutrin
(Baythorid)

NS

NS

NS

NS
**
S/

NS
**

NS

B/S
*
B/S
*
B/S
*
B/S
*

129

Lorentz JNTSCHI

FB

NS

piretrine(Pyrenone)

spinosad (Spin Tor)

ocazional

ocazional

anual

ocazional

anual

imidacloprid
Alte otrvuri nervoase

(Admire)
abamectin
(Agri-Mek)
pimetrozin(Fulfill)
imidacloprid
(Provado)

bacillus
thuringensis
caterpillar
Strains (DiPel)
bacillus

Necunoscut

thuringensis
coleoptera
Strains (M-Trak)
criolit
(Krydocine)
azadiractin
(Neem, Azatin)
rotenon
(Rotenox,

130

Tip
tratament

Pesticid

Clasa

Soap (M-Pede)

ocazional
ocazional

Rotacide)

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Legend:
FB: aciune biologic de combatere foarte bun;
B: aciune biologic de combatere bun;
S: aciune biologic de combatere satisfctoare;
NS: aciune biologic de combatere nesatisfctoare;
?: aciune biologic de combatere necunoscut;
-: fr aciune biologic de combatere;
*: cteva populaii sunt ns rezistente;
**: majoritatea populaiilor sunt ns rezistente.
n protecia plantelor mpotriva bolilor, duntorilor i buruienilor se
practic din ce n ce mai mult administrarea pesticidelor n amestec din
urmtoarele motive:

pentru a se combate concomitent mai muli parazii, duntori sau specii


de buruieni, cnd se lrgete spectrul de aciune biologic al
tratamentului;

pentru a se combate simultan bolile i/sau duntorii i/sau buruienile;

pentru a se proteja cultura i n acelai timp administra ngrminte


foliare i/sau regulatori de cretere;

pentru a se preveni formarea de rase rezistente la pesticide.


Pentru ca dou sau mai multe pesticide s fie aplicate n amestec

acestea trebuie s fie compatibile fizic, chimic i biologic, adic:

fizic: n amestec nu produc precipitate, aglomerri de particule, spum


persistent, separare de faze, depuneri;

chimic: nu reacioneaz ntre ele, adic nu pun n libertate compui de


degradare ai substanelor active i variaia n timp a pH-ului este
nensemnat;

131

Lorentz JNTSCHI

biologic: i pstreaz eficacitatea iniial, nu produc efecte secundare


(arsuri sau alte fenomene de fitotoxicitate).

132

Formul
Cod LMS
C12H10O3
334
C8H5Cl3O3
312
C8H6Cl2O3
026

C7H3Cl3O2
319

Toleran
revocat, utilizare
extern
utilizare
extern
180.142, utilizare
extern

utilizare extern

Utilizare
regulator de cretere
erbicid
erbicid, reglator de
cretere

erbicid

2,4,5-T
2,4-D

2,3,6-TBA

(2-naphthyloxy)
acetic acid

Denumire

Tabelul 9. Extras de catalog pentru cteva pesticide

Alte denumiri
9CI: (2naphthalenyloxy)acetic acid
ISO: (2-naphthyloxy) acetic
acid
Other: 2-naphthoxyacetic
acid BNOA naphthoxyacetic
acid, beta

9CI: 2,3,6-trichlorobenzoic
acid
ISO: 2,3,6-TBA
Other: trichlorobenzyl
chloride metabolite
Trade Benzac, Trysben ,
Zobar
9CI: (2,4,5trichlorophenoxy) acetic
acid
ISO: 2,4,5-T
Trade: Weedone
9CI: (2,4-dichlorophenoxy)
acetic acid
ISO: 2,4-D
Other: 2,4-DB metabolite
Trade: Weed B Gon

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

De cele mai multe ori pentru a referi un pesticid nu se folosete


denumirea tiinific ci cea uzual sau comercial. n acest caz sunt utile
cataloagele de pesticide ce cuprind informaii complete despre acestea, aa
cum este cazul [83] care conine peste 1022 de pesticide din care am extras
cteva pesticide (tabelul 9).
Compatibilitatea pesticidelor este prezentat de regul n tabele. Cel
mai simplu caz este al amestecurilor binare. Un exemplu de compatibilitate
fizic i biologic a unor pesticide (insecticide cu erbicide) n amestec binar
experimentate n protecia grului este [84]:
Tabelul 10. Exemplu de interaciune ntre insecticide i erbicide
Erbicide 2,4-D (sare
Icedin
Insecticide
DMA 50 LS) forte 33
Carbetox 37 CE
Sinoratox 35 CE
+
+
Onefon 80 PS
+
+
Clorofos
+
+

6.9. Biotehnologiile i Agricultura


6.9.1. Concepte specifice
Biotehnologiile constau n utilizarea bacteriilor, levurilor i celulelor
animale i vegetale de cultur al cror metabolism i capacitate de biosintez
sunt orientate ctre fabricarea substanelor specifice.
Aplicate pe scar larg, biotehnologiile cuprind activiti industriale
n cadrul crora biotehnologiile pot nlocui tehnologiile folosite n mod
curent i activitile industriale n care biotehnologiile au un rol promotor
esenial.
133

Lorentz JNTSCHI

Utilizeaz biotehnologii industria chimic, sinteza substanelor


aromatice i de stimulare a gustului, producia maselor plastice i a
produselor pentru industria textil.
Sunt implementate biotehnologii n domeniul energiei la producia de
etanol, metanol, biogaz i hidrogen, n domeniul biometalurgiei la extracia
anumitor metale.
n industria alimentar regsim biotehnologii la producia masiv de
levuri, alge i bacterii n vederea furnizrii proteinelor, aminoacizilor,
vitaminelor i utilizarea enzimelor, iar n domeniul creterii productivittii
agricole biotehnologii servesc la clonaj i selecie varietal pornind de la
culturi de celule i esuturi, fabricarea de bioinsecticide.
Industria farmaceutic utilizeaz biotehnologii la prepararea de
vaccinuri, sinteza hormonilor, interferonilor i antibioticelor.
Nici protecia mediului nu las biotehnologiile n afara domeniului de
preocupare. Astfel, ele se aplic la tratarea apelor uzate i transformarea
resturilor menajere, compostarea i fabricarea compuilor biodegradabili.
n 1953, structura complet a unei proteine, insulina, era stabilit de
Sanger, n timp ce Crick i Watson artau c acidul dezoxiribonucleic (ADN)
are o structur dublu elicoidal.
n 1963, Niremberg a descifrat codul genetic al crui caracter general
se aplic de la bacterie pn la om. Deveneau astfel accesibile mesajul
ereditar i semnificaia sa, i anume relaia ntre codul genetic i structura
proteinelor.
O a doua etap a fost parcurs de-a lungul anilor 60 atunci cnd se
determina n mod automat structura proteinelor, ca urmare a ameliorrii
tehnicilor de analiz ale lui Sanger i a metodelor de degradare ale lui Edman
i Begg (1967).

134

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Au fost apoi comercializate aparate capabile s determine secvena


aminoacizilor proteinelor. n 1978 secvenele (structura primar) a peste 500
de proteine au fost n felul acesta stabilite i stocate pe ordinator sub forma
unui atlas de proteine (Dayhoff i Erk, 1978).
Dup proteine, a venit rndul acizilor nucleici iar n 1976, Gilbert i
Maxam de la Universitatea Harvard i Sanger au pus la punct o metod
rapid de analiz chimic a ADN. Se puteau astfel determina secvene de
1000 de nucleotide pe sptmn cu ajutorul unui manipulator (Gilbert,
1981). Au fost deci puse bazele lansrii pe pia, ntre 1982 i 1985 a unei
maini automate de analiz a acizilor nucleici i a genelor. Ca urmare a
analizei ADN se putea deduce graie codului genetic secvena proteinelor a
cror sintez este guvernat de gene.
Perfecionrile aduse analizei proteinelor, datorate punerii la punct a
microanalizatorului lui Hood i Hunkapiller, de la Institutul de Tehnologie
din California, n 1980 permiteau stabilirea secvenei de 100 pn la 200 de
aminoacizi pe zi, pornind de la numai 10 ng de proteine.
Dup analiz, a treia etap este sinteza. Studiile lui Merrifield (1963)
au fcut posibil construirea i comercializarea primelor maini automate
pentru sintetizarea polipeptidelor. Acestea sunt utilizate n laboratoarele de
cercetare i n industria farmaceutic.
Dup ce determinase secvena i structura ARN-ului de transfer
(ARNt) al fenilalaninei, Khorana a reuit s sintetizeze ntre 1970 i 1972
ADN-ul (adic gena) corespunztoare acestui ARNt [85]. S-au fcut apoi
progrese n sintetizarea genei precursorului ARNt-ului tirozinei de Esterichia
coli [86].
Itakura (City of Hope National Medical Center, Duarte, California) a
reuit n 1977 i 1979 s sintetizeze genele somatostatinei i insulinei umane.
Aceste gene au fost introduse n celulele de Esterichia coli prin tehnici de
135

Lorentz JNTSCHI

recombinare genetic puse la punct de Boyer (Genentech). Aceasta reprezint


prima expresie a genelor umane n celule bacteriene. n 1980, Itakura pune la
punct primul asamblor de gene iar societatea Bio-Logicals din Toronto pune
n vnzare o main capabil s sintetizeze n 6 ore un dodecanucleotid cu
ordinea dorit a nucleotidelor.
Sinteza de acizi nucleici s-a ameliorat rapid. Dac n 1979 era nevoie
de 2 ani pentru sintetizarea unei gene de 120 de nucleotide, n 1981 erau
suficiente 3 zile.
Dayhoff de la National Biomedical Research Foundation din
Washington a realizat un atlas al secvenelor de proteine pe ordinator, care n
anul 1980 coninea peste 350000 de secvene de gene (virusuri, bacterii, om)
preluate din revistele tiinifice internaionale.
Progresele spectaculoase ale biologiei aa cum se exprim ele n
realizrile ingineriei genetice sunt strns legate de perfecionarea tehnicilor
analitice ca ultracentrifugarea, marcarea moleculelor cu izotopi radioactivi,
electroforeza, cromatografia de afinitate (de exemplu a tehnicii separrii
moleculelor complexe cu ajutorul anticorpilor monoclonali corespunztori),
electrofocalizarea bidimensional (ce permite analiza a peste 50000 de
proteine a unei celule), microanaliza.
S-au obinut succese notabile prin recombinare genetic, folosirea
enzimelor, celulelor i organismelor imobilizate.
ADN recombinat sunt molecule de ADN sintetizate n afara celulelor
vii prin legarea unor segmente de ADN natural sau sintetic cu molecule care
pot s se replice ntr-o celul vie. Principiul const n a reuni un ADN nativ
cu un ADN strin ntr-un vector care este un plasmid bacterian sau genom
viral i a-l introduce apoi ntr-o celul gazd, unde se va putea nmuli.
Rezultatul este un clon de celule transformate.

136

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Unul dintre obiectivele bioindustriei este de a avea la dispoziie celule


transformate n stare s exprime mesajul genetic strin pe care ele l-au
integrat i deci apte s produc molecule proteice specifice n cantitate mare
[87].
Pentru descoperirea enzimelor de restricie n 1972 de ctrea Arber,
Smith i Nathans se acord Premiul Nobel n 1978, marcnd astfel importana
acestora n dezvoltarea biotehnologiilor. Aceste enzime secioneaz acidul
dezoxiribonucleic (ADN) n situsuri specifice i ca urmare a caracterizrii
ligazelor care leag fragmentele de ADN i transcriptazei inverse care
sintetizeaz ADN-ul pornind de la acidul ribonucleic (ARN) mesager.
Enzimele sau endonucleazele de restricie precum i ligazele sunt
indispensabile operaiei de inserie a uneia sau mai multor gene n ADN-ul
vector care la rndul su servete la introducerea acestei gene n genomul
unui microorganism:

DNA
vector

endonucleaz
de restricie

genom microorganism
gen

Fig. 92. Ilustrarea mecanismului inseriei de gene n microorganisme


Tehnica enzimelor imobilizate (vezi fig. XX) este folosit cu succes
n producia penicilinelor semisintetice, a fructozei plecnd de la amidonul de
porumb i n testele biochimice simple. Celulele sau organitele celulare
137

Lorentz JNTSCHI

imobilizate au avantajul c ele conin secvene complete de enzime


indispensabile sintezei compuilor compleci [88].
La controlul genetic sunt implicate toate tipurile de determinani
genetici din genotip i toate tipurile de interaciuni aleice i genice [89].
Astfel, sunt implicate gene majore, gene minore i gene citoplasmatice.
6.9.2. Gene i Interaciunile acestora
Genele majore (mendeliene) controleaz caracteristici calitative,
practic neinfluenate de condiiile de mediul de cretere al plantei. n
controlul caracteristicilor calitative, genele majore pot manifesta:

aciune monogenic, univoc (monotrop) sau pleiotrop iar relaiile


intragenice heterozigote pot fi de:

1. dominan recesivitate;
2. semidominan;
3. codominan;
4. supradominan.

interaciuni genice, digenice sau multigenice cnd se formeaz sisteme


seriale de gene, independente sau legate i controleaz etapele succesive
dintr-o secven metabolic pentru a produce o caracteristic particular;
relaiile intergenice pot fi:

1. reciproce: complementaritatea, epistasia, genele duplicate, triplicate;


2. inhibitoare: gene inhibitoare i gene supresori;
3. modificatoare: gene intensificatori (plus modificatori), gene reductori
(minus modificatori).
Genele minore controleaz caracteristici cantitative: productivitate,
reproductibilitate, adaptabilitate (rata creterii, mrimea i greutatea,
capacitatea de a produce o anumit cantitate de semine, fructe, mas

138

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

vegetativ, substane utile, densitatea pigmentaiei. Aciunea genelor minore


este mult influenat de condiiile de mediu.
Controlul caracteristicilor cantitative este realizat de 2 sau mai multe
gene minore nealele care acioneaz n cadrul unor sisteme de gene numite
gene multiple. Un sistem de gene multiple acioneaz asupra dezvoltrii unei
singure caracteristici ereditare, cnd efectele locilor minori individuali
asupra fenotipului pot fi:

aditive, cnd efectele asupra fenotipului sunt:

1. echivalente sau egale;


2. isomerice sau polimerice;
3. anisomerice (neechivalente sau neegale);

antagonice (opoziionale) cnd unele gene individuale din sistemul de


gene multiple au o aciune n opoziie negativ, scztoare comparativ cu
alte gene din sistem care au o aciune aditiv;

multiplicative cnd aciunile genelor individuale din sistemul de gene se


combin intensificndu-i sau diminundu-i reciproc activitatea;
Membrii sau locii sistemelor de gene multiple sunt independeni, fiind

situai n cromozomi nehomologi. Ca urmare, aceste gene se comport


independent n segregare.
Dovada independenei genelor minore este fenomenul de segregare
transgresiv.
Genele citoplasmatice (plasmidele) sunt secvene de ADN din
plastide (plastogene) i din mitocondrii (mitogene). Ele controleaz procesele
biochimice implicate n realizarea unei ci metabolice din dezvoltarea
componentelor morfofiziologice ale produciei sau nsuirilor de adaptare.
Aciunea plasmagenelor poate fi:

139

Lorentz JNTSCHI

autonom n realizarea funciilor proprii ale organitelor, pe baza aciunii


plasmaalelelor [90] i a interaciunii unor plasmagene care concur sau
interfer la formarea unei caracteristici citoplasmatice;

corelat, n sisteme de gene nucleare i gene citoplasmatice care


determin interaciuni nucleo citoplasmatice (genice plasmagenice).
9.3 Informaia Genetic
Molecula

care

stocheaz

informaia

genetic

este

acidul

dezoxiribonucleic (DNA) iar subunitile sunt nucleotidele care l compun


[91]. Acestea sunt de 4 tipuri i conin bazele azotate adenin (A), guanin
(G), citozin (C) i timin (T) i ntr-o exprimare plastic sunt literele
alfabetului cu care este scris informaia genetic:

Fig. 93. DNA i informaia genetic


Dintre cei 64 de codoni care constituie codul genetic, 61 codific cei
20 de aminoacizi ai moleculelor proteice, iar 3 sunt semnale stop, care
marcheaz sfritul unei informaii.
Codul genetic este universal, sistemul de codificare a informaiei
genetice fiind acelai la toate vieuitoarele. Dar este ns i degenerat, pentru
c exist 61 de codoni i numai 20 de aminoacizi, adic mai muli codoni
codific acelai aminoacid.
DNA este singura molecul autoreplicativ cunoscut. Ea este
format din 2 catene (lanuri) polinucleotidice asociate conform principiului
complementaritii, secvena nucleotidelor dintr-o caten dictnd secvena
140

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

nucleotidelor n cealalt caten. Astfel, adenina se leag totdeauna cu timina


iar citozina cu guanina.

Fig. 94. Codul genetic al ARNm


Legend:
Fen fenilamin; Leu leucin; Ser serin;Cis cistein; Tir
tirozin; Trp triptifan; Pro prolin; His histidin; Gli glicin; Arg
arginin; Ile izoleucin; Met metionin; Trn treonin; Glu glutamin;
Liz lizin; Val valin; Ala alanin; Asp acid aspartic; Asn
asparagin.
141

Lorentz JNTSCHI

DNA este o molecul informaional, complementaritatea fcnd


posibil conservarea, copierea i transmiterea informaiei la celulele fiice
rezultate din diviziunea celular.
Cnd DNA se replic, cele dou catene ale sale se separ i servesc ca
matrie pentru sintetizarea unor catene complementare.
Rezultatul const n formarea a dou molecule noi alctuite fiecare
din cte o caten veche (matria) i o alta nou sintetizat.
Moleculele noi care vor conine aceeai informaie deoarece
succesiunea identic a bazelor (literelor) va forma ntotdeauna aceeai codoni
(cuvinte) care vor constitui aceeai gen (propoziie) aa cum se exemplific
n figura urmtoare:

Fig. 95. Replicarea codului DNA


142

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

6.9.4. Mutageneza rezistenei la erbicide i insecte


Principalul obiectiv al agricultorilor este obinerea de producii mari i
de calitate, prin valorificarea deplin a potenialului plantelor cultivate i a
resurselor pedoclimatice [92]. Aceasta presupune, nu n ultimul rnd
eliminarea concurenei buruienilor. n consecin, erbicidarea a devenit o
practic curent n agricultura convenional.
Tolerana speciilor cultivate la erbicide nu este un caracter nou, marea
majoritate a erbicidelor fiind concepute astfel nct s distrug numai anumite
plante.
Astfel, exist erbicide care se folosesc n culturile de cereale i
acestea distrug buruienile dicotiledonate. Alte erbicide sunt aplicate n cultura
speciilor cu frunza lat, cnd distrug buruienile monocotiledonate.
Cazuri de toleran a unor specii cultivate sau slbatice la erbicide au
aprut uneori n mod spontan, sub presiunea tratamentelor, caz n care s-a
efectuat o selecie natural. Amelioratorii uneori obin soiuri de plante
tolerante la anumite principii active erbicide prin metode care nu implic
manipularea genetic.
Logic, nu este nici un motiv s se cread c tolerana la erbicide ar
avea un impact mai mic asupra mediului dac este aprut n mod spontan
sau dac este obinut prin metode de ameliorare dect atunci cnd este
rezultatul unor manipulri genetice.
Plantele de interes economic tolerante la erbicide sunt aflate deja n
culturi comerciale ce se ntind pe milioane de hectare, n diverse ri.
n Romnia sunt nregistrate la Institutul de Stat pentru Testare i
nregistrarea Soiurilor:

soia Round Ready, produs de compania Monsanto;

hibrizii de porumb Liberty Link, produi de compania Pioneer.

143

Lorentz JNTSCHI

Varieti transgenice de porumb, cartof i bumbac rezistente la


atacurile unor duntori ocup deja suprafee foarte mai de teren n culturi
comerciale. Rezistena la atacurile insectelor fitofage este obinut prin
intermediul unor gene obinute de la Bacillus thrrigensis (Bt) [93].
Construciile genetice sunt mrci nregistrate ().
Compania Monsanto comercializeaz porumb Bt sub denumirea
YieldGard, cartof Bt sub denumirea NewLeaf i bumbac Bt sub denumirea
BollGard, n timp ce compania Pioneer comercializeaz porumb Bt sub
denumirea MaisGard iar compania Novartis comercializeaz linii de
porumb sub denumirea de KnockOut i YieldGard.
Companiile urmresc o valorificare ct mai larg a construciilor
genetice pe care le posed prin realizarea de varieti transgenice la ct mai
multe specii n cadrul firmelor productoare de semine pe care le controleaz
sau prin concesionarea licenelor de utilizare unor tere firme din ct mai
multe ri.
Principalul avantaj al cultivrii plantelor rezistente la atacul unor
duntori const n reducerea consumului de insecticide, benefic pentru
calitatea produciei agricole, mediu i conservarea biodiversitii.
Absolut specifice endotoxinele Bt nu ar trebui s aib nici un efect
asupra polenizatorilor (bondari, albine) sau altor insecte nevizate (prdtori i
parazii ai duntorilor) care ajung n culturile plantelor transgenice [94].
Evident ns c acest risc trebuie practic evaluat de la caz la caz [95].
n Romnia sunt nregistrate la ISTIS i au primit aprobarea pentru
introducerea deliberat n mediu cartoful NewLeaf, rezistent la atacul
gndacului de Colorado i liniile de hibrizi de porumb MaisGard i
YieldGard rezistente la sfredelitorul porumbului.

144

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

6.10. Studiu de Cultur la Cartof


n aceast seciune prezint date recomandate de Buletinul de producie
vegetal al statului Ohio n ceea ce privete cultura cartofului [96]. Pentru
conversia unitilor de msur americane la unitile de msur europene am
folosit lucrarea [97].
Cartoful este o important plant de cultur n Ohio i este
comercializat pe piaa liber, standurile legumicole i ctre procesare.
Cantitatea produs pe hectar variaz n funcie de varietate, data de
nsmnare, condiiile meteorologice, tehnologiile aplicate i data de
recoltare de la 25 t/ha pn la peste 50 t/ha.
Costurile de producie pot depi 2500 $/ha. Noi productori trebuie
s studieze cu atenie solul, sursele de ap pentru irigare, varietile alese
pentru producere i punctele de vnzare pentru produse. Dac producia este
destinat procesrii, este necesar stabilirea de relaii cu partenerii de resort
sau alte persoane familiarizate cu domeniul industrial pentru sugestii
specifice n ceea ce privete alegerea cultivarelor sau altor practici de cultur,
n special n legtur cu tratamentele pe baz de pesticide.
Productorii din Ohio sunt ntr-o zon strategic pentru producia
cartofului pentru o pia n extindere. Dar, pentru a avea succes ntr-o astfel
de regiune unde temperatura pe timpul sezonului de cretere este poate nu
tocmai satisfctoare pentru cartofi, productorii trebuie s urmreasc
practici de cultur bune, incluznd selecia cmpului i a cultivarului pentru
un sol specific i de asemenea s in seama de condiiile climatice i piaa de
desfacere.
Cartofii necesit un teren bine drenat, fertil, sol nisipos argilos pn
la noroios argilos. Solurile grele necesit integrarea n rotaie cu legume,

145

Lorentz JNTSCHI

cultivarea acoperit i practici speciale de mecanizare. O rotaie la 2 sau 3 ani


cu culturi ca porumbul sau legumele ajut de asemenea.
6.10.1. Practici de cultur pentru combaterea apariiei gndacului
de Colorado
Urmtoarele practici de cultur pot ajuta prevenirea problemelor cu
gndacul de Colorado. Aceste practici sunt importante deoarece apar
probleme de rezisten la insecticide dac chimicalele sunt utilizate singure
pentru combaterea proliferrii gndacului:

promoveaz ncolirea i creterea rapid a cartofilor prin selectarea celui


mai bine adaptat cultivar pentru areal, deoarece plantele mari sunt mai
rezistente la defoliere fa de plantele mici;

nsmneaz cartofii n prima parte a lui aprilie ca s permii plantelor s


treac de perioada de nflorire nainte ca gndacii s vin n for;

plantnd cartofii la nceputul sau mijlocul lui Iunie permite gndacului de


Colorado s prseasc arealul nainte ca plantele s devin atacabile;

varietile cu maturizare rapid trebuie s fie plantate sau foarte devreme


sau foarte trziu pentru a evita stricciunile produse de gndac;

prin folosirea cultivarelor cu maturizare rapid i recoltarea imediat dup


ajungerea la maturitate vei reduce sursa de hran pentru gndaci mai
trziu n sezon, ceea ce va slbi gndacii la intrarea n faza de hibernare;

minimizeaz cartofii voluntari prin evitarea arturii de toamn sau prin


artura de toamn urmat de o cultur de ser legumicol care va scoate
din competiie cartofii sau prin folosirea postrecoltare a unui inhibitor de
cretere pentru cartofi;

gndacii aduli pot fi concentrai n timpul toamnei prin nerecoltarea a 2-4


rnduri de cartofi la fiecare 100 de rnduri n cmp. Gndacii vor

146

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

converge ctre acestea i atunci se pot omor cu un insecticid care ns nu


se va folosi i n anul urmtor.
6.10.2. Varieti
Cultivarele crescute n Ohio vor fi descrise n continuare. De notat c
unele dintre aceste varieti (marcate cu *) sunt acum disponibile ca soiuri
transgenice de cartof. Soiurile transgenice sunt la fel cu celelalte varieti dar
cu un atribut suplimentar: nalta rezisten la gndacul de Colorado. Acestea
sunt descrise ntr-o alt seciune (9.4).
Exist ns un pericol: n 4 locaii n statul Ohio n 1996 a fost plantat
soiul transgenic Superior ns calitatea obinut pe pia nu a fost acceptat.
Dac productorii doresc s ncerce cultivarele transgenice, ei i asum acest
risc. Mai multe studii sunt necesare pentru a evalua calitatea comercial.
Varieti cu maturizare timpurie
Irish Cobbler este o varietate cu maturizare rapid cu o excelent
calitate la gtit dar cu slab trecere pe pia datorit formei foarte
neconvenabile. El este produs pentru vnzarea la pia i pentru consum
propriu.
Jemseg este din Canada. El este caracterizat printr-o cretere rapid a
tulpinii i mrirea tubercului. Este recomandat pentru vnzarea pe piaa
liber, dar este dificil de crescut. Alegerea terenului poate fi dificil.
Fertilizatorii cu azot trebuie redui cu aproximativ 25% fa de doza normal.
El trebuie plantat devreme potrivit pentru soluri nisipoase pietroase. Poate
fi utilizat pentru grdinile de lng cas, piee sau pentru folosin
comercial.
Norland este o varietate cu coaja roie, dar este fosrte sensibil la
poluarea aerului, n special cu ozon. Este crescut pentru vnzarea pe pia.
147

Lorentz JNTSCHI

Noile subvarieti de Norland cu o mai bun coloraie roie sunt acum


disponibile.
Superior* se potrivete cel mai bine pe solurile bine drenate,
nisipoase argiloase pn la soluri pietroase argiloase. Este crescut att
pentru pia ct i pentru fabricarea chips-urilor.
Conestoga este o varietate timpurie din Canada. Este raportat c are o
anumit rezisten la rsucirea frunzelor i scabie. Tuberculii sunt rotunzi,
albi i au tendina de se zdrobi uor. n testele efectuate n Ohio, densitatea a
fost gsit identic cu a soiului Norchip, dar n alte state se nregistreaz o
densitate mare. Plantarea timpurie este esenial. Varietatea pare c d
maximum de productivitate n soluri uoare i n regim de irigaie. Blocarea
creterii i crparea pot fi serioase dac varietatea este crescut pe soluri grele
sau lipsa de ap apare n timpul creterii tuberculului. Este recomandat pentru
comercializare direct, grdinrit i comercializare pe pia.
Varieti cu maturizare la mijloc de sezon
Monona este o varietate precoce de mijloc de sezon crescut n
special pentru industria chips-urilor. Este n decdere n industria chips-urilor
datorit densitii reduse i formei proaste a tuberculului n unele condiii de
cretere. Este nlocuit de alte cultivare.
Shurchip, realizat n Nebraska, este o varietate medie timpurie.
Tuberculul este rotund i uor rocat. Este purttor de toleran la scabie i se
adapteaz slab texturate. Ofer o mare eficacitate sub irigaie. Este produs n
principal pentru comercializarea imediat. Tuberculii pot avea o form
proast dac a suferit temperaturi nalte sau lips de umiditate.
Norchip este o varietate medie timpurie cu tuberculi rotunzi care se
pot crpa sub condiii de lips de ap. Este purttor de rezisten la scabie.

148

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Este crescut n special pentru comercializarea sub form de chips-uri i


pentru stocarea pentru aceast destinaie.
Atlantic* este un cartof de mare productivitate i densitate, dar este
predispus la decolorarea intern i gurirea mijlocului. Aceast varietate este
recomandat pentru condiiile din Ohio doar dac productorul are un
contract cu o companie de chips-uri. Nu este considerat o varietate care s fie
stocat sub condiiile din Ohio. Decolorarea intern este o serioas problem
sub condiii de stres. Gurirea mijlocului de asemenea. Nu ar trebui s fie
crescut pentru comercializarea direct pe pia.
Varieti de sezon mediu pn la trziu
Katahdin este introdus de Departamentul de Agricultur al S.U.A. i
este o varietate folosit n special pentru stocarea n vederea consumului de
mas dar este folosit uneori i pentru chips-uri. Tuberculii rotunzi, netezi i
albi sunt atractivi. Gaura n mijloc poate fi o problem i este uor susceptibil
la scabie. Plantarea pe rnduri apropiate ajut la controlul mrimii
tuberculului. Movilirea este esenial n controlul nverzirii. Este nlocuit
treptat cu noi varieti cu o calitate comercial superioar i productivitate
mrit.
Kennebec este o varietate nalt productiv cu o excelent calitate la
gtit. Este ns susceptibil la boli variate, incluznd vetejirea verticillium i
putrezirea datorat bacteriilor uoare la depozitare. Este susceptibil la
nverzire. Datorit acestor probleme, nu este potrivit pentru producerea
pentru comercializare. Continu s fie popular pentru vnzrile la marginea
oselei i pentru plantarea n grdin. Este n declin ca varietate comercial
datorit dezavantajelor menionate.

149

Lorentz JNTSCHI

Tabelul 10. Precocitatea la varietile de cartof semnate n Ohio


Cultivar

Durat aproximativ pn la maturizare (zile)

Jemseg

75-85

Norland

80-90

Conestoga

90-100

Superior

90-100

Monona

100-120

Shurchip

110-120

Norchip

100-110

Atlantic

100-115

Katahdin

120-150

Kennebec

130-135

Russet Norkotah este o varietate promitoare n condiiile de mediu


din Ohio. Tuberculii au o tendin de uniformitate i form atractiv. Necesit
irigare i nalt grad de fertilizare. Are maximum de eficien pe soluri slab
texturate i nalt grad de fertilizare, n special azot. Are slab eficien pe
soluri grele.
Red Pontiac este o varietate cu coaj roie i maturizare trzie folosit
n grdin sau pentru vnzarea la osea. Este o varietate cu nalt
productivitate, dar tuberculul poate crpa i forma are probleme.
Tabelul XX conine durata pn la maturizare a varietilor descrise.
Varieti pentru plantarea n regim de testare
Multe noi cultivare sunt scoase pe pia, dar ele trebuie testate pentru
cel puin 2 ani pe ferme individuale nainte ca ele s fie plantate pe suprafee
extinse.

150

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

n timpul ultimilor ani, mai mult de 200 de cultivare au fost evaluate


anual n Ohio n regim de testare la Ohio Agricultural Research,
Development Center i n fermele individuale n Ohio. Dintre cultivarele cu
rezultate promitoare menionm:

Norwis (FL 657) a fost inclus n testri din 1990. Tuberculii sunty rotunzi
la uor ovali cu o culoare crem deschis. Aspectul este bun i varietatea
este potrivit pentru comercializarea pe pia. Teste limitate arat o mare
capacitate productiv, dar trebuie crescut pe soluri uor texturate. Dac
este crescut pe soluri argiloase capt o form neregulat. Decojirea
suprafeei poate fi o problem. Tuberculii cresc rapid i ofer posibilitatea
comercializrii timpurii pe pia. Se dezvolt pe soluri uor texturate
(nisipoase i pietroase);

Snowden este realizat la Universitatea Wisconsin i a fost evaluat la


condiiile din Ohio. Tuberculii sunt rotunzi cu o culoare cafenie pn la
cafeniu deschis i ochiurile n suprafa sunt adnci. Are tendina de a
forma tuberculi mici i are o capacitate productiv mare dac mrimea
tuberculului poate fi mrit. Rdcinile au tendina de a fi adnci.
Distana de semnare de 30 cm poate ajuta mrirea tuberculului. Ceva
probleme interne au fost observate. Recomandat la pieele de prelucrare;

Langlade a fost creat de amelioratorii de la Universitatea Wisconsin.


Tuberculii sunt rotunzi la oval cu o uoar coloraie maroniu deschis. Are
o mare capacitate productiv dar are tendina de a forma tuberculi mari.
Spaierea la 20 cm sau mai aproape poate controla mrimea tuberculului
i gaura din mijloc. Aceast varietate pare a se adapta bine pe o larg
gam de texturi la sol. Potribit pentru grdinrit i comercializare.

151

Lorentz JNTSCHI

Cartofi transgenici
Cteva varieti transgenice sunt acum disponibile sub numele generic
New Leaf. Acestea sunt identice cu varietile normale dar cu o calitate
suplimentar: rezistena la gndacul de Colorado. Rezistena a fost obinut
cu ajutorul adiiei de gene care produc toxina B.t. B.t. este abrevierea pentru
o bacterie numit Bacillus thuringiensis care produce o toxin proteic care
omoar cea mai mare parte a insectelor dac acestea se hrnesc cu esut de
plant tratat cu B.t. B.t. este disponibil ca spray de mult vreme.
Plantnd varietile New Leaf este mult mai eficient dect spray-ind
B.t. deoarece concentraia de protein toxic este mult mai mare i este
rspndit n toat planta, n special n terminaii i persist toat perioada
sezonului de cretere. n contrast, spray-ul B.t. se degradeaz la lumina solar
dup ploaie. Un avantaj al controlului cu B.t. este c el nu este toxic pentru
inamicii naturali ai afidelor i altor duntori ai cartofului, aa nct utilizarea
B.t. ncurajeaz controlul biologic natural.
Managementul rezistenei: cercettorii din domeniul cartofului au
studiat posibilitatea ca gndacul de Colorado s devin rezistent la B.t. i au
elaborat o serie de recomandri n ceea ce privete utilizarea cartofilor din
varietile New Leaf care minimizeaz capacitatea de dobndire a rezistenei.
Astfel:

nu mai mult de 50% din fermele productoare de cartofi ar trebui s fie


plantate cu varieti New Leaf;

nu mai mult de 80% din fiecare cmp individual ar trebui s fie plantate
cu varieti New Leaf;
Motivul pentru care se las cel puin 20% din fiecare cmp susceptibil

la gndaci este de a lsa civa gndaci susceptibili la B.t. s supravieuiasc


pentru ca acetia s se ncrucieze cu orice gndaci rezisteni la B.t. i astfel
s pstreze gena de sensibilitate la B.t. n populaie. Cea mai bun cale este
152

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

de a planta n suprafaa de 20% rmas aceeai varietate de cartof, ns fr


rezistena la gndacul de Colorado indus de B.t. n aceast suprafa sunt
ns necesare tratamente cu pesticide mpotriva gndacului, tratamente care
nu sunt ns necesare pe restul suprafeei. Cel mai bine este ca s nu se
foloseasc tratamentul preventiv cu insecticidul Admire n aceast situaie
pentru c el va duce la dispariia gnacilor sensibili la B.t.
6.10.3. Rotaia culturilor, vegetaia i fertilizarea
Rotaia culturilor este una dintre cele mai importante metode de a
evita i reduce problemele cu gndacul de Colorado. Rotaia cartofului cu
plante altele dect cartofi, roii, ardei, vinete poate ntrzia i chiar reduce
infestarea prin pui de gndaci. Noile cmpuri trebuie ct este posibil s fie
mai departe de cmpurile din anul anterior, ideal la cel puin 400 m. Altfel
gndacii vor zbura ctre aceste cmpuri i metode suplimentare de control al
infestaiei sunt necesare i este deci mai simplu ca alegerea terenului s se
fac ct mai departe de terenul semnat cu cartofi n anul anterior.
Deoarece scabia poate fi o problem, menine pH-ul solului la 5.4 sau
uor mai acid. Varietile rezistente la scabie, ca Superior, pot tolera soluri
mai alcaline (pH mai mare). Ct timp pH-ul este sub 5, nu aplica ngramnt
imediat dup plantare; aplic dup recoltare. ngrmntul dolomitic este
utilizat dac nivelul magneziului este mic, n special n estul statului Ohio. n
aceste zone, utilizeaz o surs de magneziu, cum ar fi sulfatul de magneziu n
fertilizarea aplicat la plantare. Unde magneziu este necesar, aplic 30-45 kg
MgO pe hectar. O rotaie la 3 ani va ajuta i va reduce scabia. O rotaie de 3
ani fr cartofi ajut la minimizarea problemelor cu scabia dup o moderat
fertilizare cu ngrminte. Cmpurile cu antecedente de scabie trebuie s fie
evitate.

153

Lorentz JNTSCHI

La soluri minerale aplic 110-160 kg/ha N pentru solurile argiloase i


190-200 kg/ha N pentru solurile cu textur dur (nisipoase, pietroase, etc.).
Fosforul i potasiul de fertilizare este exprimat cel mai bine de testele
efectuate asupra solului.
Un insuficient tratament cu azot va reduce producia, n timp ce un
exces de azot va reduce calitatea tuberculilor, parametrii de conservare i
potenialul de vnzare. Ratele de azot depind de varietate. Ratele de azot
tabelate trebuiesc ajustate n funcie de experiena anterioar. Aplic 2/3 din
fertilizator n artur la plantare. Artura trebuie s aib 5-8 cm de la
suprafa i sub suprafaa solului. O fertilizare adiional de 30-45 kg N este
necesar pentru consolidarea texturii solului dup ce plantele au 10-15 cm
nlime.
La solurile cu blegar aplic 80-110 kg/ha N, 110-170 kg P2O5 i 110170 kg/ha K2O. Utilizeaz teste de sol pentru a afla exact ct fosfor i potasiu
este necesar.
Cteva valori de fertilizare cu N sunt redate n tabelul urmtor:
Tabelul 11. Valori de fertilizare cu N la varieti cultivate n Ohio
Varietatea

pentru consum

pentru chips-uri

kg/ha N

kg/ha N

Katahdin

170-190

Kennebec

120-135

Superior

180-210

Norland

180-200

Jemseg

100-110

Norchip
Monona
Atlantic
154

180-200
120-150
170-200

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

6.10.4. Manipularea seminei, nsmnare i spaiere, date de


nsmnare
Multe schimbri pot apare n variatele regiuni n care smna
certificat este produs. n funcie de regiune, pot fi mai mult de 5 sau 7
generaii de smn de la laborator la cmp. Productorii trebuie s trateze
cu furnizorii astfel nct s cumpere smna n funcie de informaiile
publicate de ageniile de certificare cu privire la valoarea cultural a seminei.
Succesul producerii de cartofi depinde de buna i certificata smn i
manipularea corect a acesteia n fermele individuale.
Urmtorul tabel conine valori specifice pentru tehnologia de
nsmnare:
Tabelul 12. Necesarul de smn la hectar
Spaierea
ntre cuiburi
n rnd

Rnduri la 85 cm

Rnduri la 90 cm

Greutatea tuberculilor de smn (g)


43

50

57

43

50

57

(cm)

necesar (kg/ha)

20

1118 1270 1473 1016 1219 1372

25

864

1016 1168

813

965

1118

30

711

864

965

711

813

914

38

559

711

813

559

660

711

Experiena anterioar poate fi un foarte bun ghid pentru spaierea ntre


cuiburi. Spaiile mici sunt benefice cnd se folosesc varieti cu tendine ca
gurirea mijlocului, mrirea excesiv a tuberculului, sau cnd se folosesc
tuberculi ce au tendina de a lua o form neconvenabil. Una dintre deciziile
majore care le ia productorul este distana ntre cuiburi. Muli comerciani

155

Lorentz JNTSCHI

penalizeaz productorii dac tuberculii au dimensiuni mai mari de 8 cm.


Urmtorul tabel poate fi un ghid pentru distane de spaiere:
Tabelul 13. Distane de spaiere ntre cuiburi
pentru principalele varieti cultivate n Ohio
Varietate

Distana (cm)

Jemseg

23-25

Superior

23-30

Norland

25-30

Shurchip

23-30

Monona

20-23

Atlantic

20-25

Katahdin

20-23

Kennebec 20-23
25-30
Norchip
Langlade

15-20

Datele de nsmnare variaz de la sezon la sezon i n funcie de


compoziia solului i varietatea cultivat. nsmnarea trebuie s se ncheie
ct mai curnd posibil, ct timp condiiile solului permit. Urmtoarele valori
sunt specifice pentru Ohio:

Sudul statului Ohio: de la sfritul lui Martie pn la sfritul lui Aprilie;

Centrul statului Ohio: de la nceputul lui Aprilie pn la mijlocul lui Mai;

Nordul statului Ohio: de la sfritul lui Aprilie pn la mijlocul lui Iunie.

156

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

6.10.5. Cultivarea, movilirea, controlul n vegetaie i nainte


de recoltare
Prin utilizarea erbicidelor recomandate, intrarea n cultur poate fi
ntrziat pn cnd plantele s-au instalat pe sol. Se pot aplica tratamente de
rupere a crustei solului i mbuntire a aerrii.
Operaia de movilire trebuie s se ncheie nainte ca plantele s
nceap tuberculizarea. O movilire bun ajut n controlul buruienilor, a
tierilor ulterioare i previne nverzirea. Movilirea pare c este util pentru
majoritatea varietilor n condiiile din Ohio, dar este n special benefic
pentru Katahdin, Shurchip, Norchip i Kennebec.
Hidrazina maleic (Royal MH-30 sau Super Sprout-Stop) este
acceptat pentru utilizarea n cmp n controlul vegetaiei. A se aplica acolo
unde cei mai muli tuberculi au cel puin 5 cm n diametru sau 1-2 sptmni
dup oprirea nfloririi. Tulpinile trebuie s fie verzi i n cretere. Se aplic
dac nu se face irigaie sau nu se ateapt ploi n urmtoarele 24 de ore. S se
consulte reeta produsului nainte de folosire.
Retezarea tulpinii este un element esenial n producerea de cartofi. Pe
lng efectele benefice asupra calitii la depozitare, retezarea tulpinii
uureaz recoltarea i previne posibilele boli. Decolorarea interioar a
tuberculilor poate apare dac tierea se face prematur, n special cnd
temperatura este mare i solul este uor noroios. Pentru a minimiza
decolorarea, folosete cantiti mici de chimicale sau dac se taie, s se fac
pe vreme cald i uscat. Folosete cantiti mai mari pe vreme mai rece.
Dintre chimicalele folosite n procesul de nlturare a tulpinii, Diquat
a dat rezultate bune n Ohio. Se aplic cu cel puin 7 zile nainte de recoltare.
Pentru cartofii cu cretere rapid a tulpinii, poate fi un avantaj utilizarea unui
chimical ca endotal (Desicate II).

157

Lorentz JNTSCHI

6.10.6. Recoltarea i depozitarea


Productorii din Ohio au o substanial experien a pierderilor de
recolt n timpul recoltrii mecanizate, ngherii cmpului sau putrezirii n
silozuri. O mare parte a acestor pierderi poate fi pus pe seama lipsei de
atenie la detalii n recoltare i manipulare. Cteva sugestii:

tuberculii trebuie s fie maturi i tulpinile s fie moarte la uscare; prea


mult azot poate ntrzia maturizarea;

ncearc a evita recoltarea ct timp temperatura solului este sub 10 C;


dac apare ngheul n cmp i timpul permite, las cteva zile tuberculii
ngheai s-i manifeste simptoamele astfel nct s poi s vezi dac se
pot depozita sau nltura;

menine o pern de sol ct mai sus fa de primul lan de spare, ct timp


nc mai este o bun separare; aceasta implic reducerea sau mrirea
vitezei mainii de recoltat sau reducerea turaiei n soluri nisipoase sau
uscate; opereaz maina de recoltat la capacitate tot timpul;

nainte de a pune cartofii n siloz, cur silozul n ntregime; pornete


sistemul de ventilare timp de 2-3 cicluri de ventilare recirculare
uscare aa nct s te asiguri c toate controalele funcioneaz
corespunztor nainte ca primul transport de cartofi s vin pentru
depozitare; dezinfecteaz silozul dac o boal semnificativ a aprut n
anul precedent;

trateaz ambele categorii de cartofi: pentru consum i pentru chips-uri la


13-16 C i umiditate relativ ridicat (90-95 %) pentru 10 zile dup
recoltare pentru a favoriza nsntoirea tieturilor i rnilor; circulaia
corespunztoare a aerului este esenial pe parcursul acestei perioade;
dup aceea, rcete treptat silozul pn la 3-4 C i menine umiditatea
ridicat (90-95%); pstreaz cartofii pentru prelucrare n chips-uri la 13-

158

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

16 C, dac experiena cu varietatea dat nu menioneaz c o temperatur


mai sczut trebuie meninut;

cartofii cu severe afeciuni de tiere sau nghe sunt dificil de pstrat cu


succes i trebuie separai de rest i stocai ntr-o alt cldire; acetia
trebuie comercializai ct mai curnd posibil; tuberculii trebuie rcii la 34 C prin circulaia aerului (5 l/mint) prin siloz; umiditatea relativ
trebuie redus dac se dorete uscarea cartofilor mai rapid.
6.10.7. Controlul bolilor
Putrezirea
Utilizeaz smn certificat liber de boli. Cnd tai cartofii de

smn, cuitul trebuie periodic curat i dezinfectat. Sub nici o form nu


trebuie ca la schimbarea unui lot de smn cuitul s nu fie curat i
dezinfectat.
Putrezirea este cauzat de o bacterie care este foarte contagioas.
Oricum, bacteria nu va supravieui n sol mai mult de 1 an n sol i
perpetuarea poate fi mpiedicat prin rotaia culturilor. O ferm care a fost
infestat trebuie s suporte o procedur de curire nainte ca s se fac
nsmnarea n noul an de cultur. Organismul bacteriei poate supravieui
uor iernii n soluri umede noroioase sau n solurile din vecintatea
silozurilor, echipamentelor de lucru sau a recipientelor de transport i
depozitare. Dac smna neinfestat intr n contact cu aceste surse de
contaminare, pot s reapar problemele.
Primul pas este curirea tuturor suprafeelor contaminate cu ap cald
cu spun pentru a ndeprta toate urmele de sol i impuriti. Utilizeaz jet
sau ap sub presiune. Oricum, acestea singure nu pot s elimine bacteria.
Suprafeele trebuie apoi tratate cu un dezinfectant. Muli dezinfectani sunt
disponibili pe pia. Tabelul urmtor cuprinde civa dintre acetia, la care
159

Lorentz JNTSCHI

ratele recomandate au fost testate. Dezinfectanii trebuie s fie lsai s stea la


suprafaa aplicat timp de 15-20 minute sau mai mult i apoi ndeprtai cu
ap curat.
Tabelul 14. Eficacitatea dezinfectanilor
dup 15-20 min. la eradicarea bacteriei putregaiului
Dezinfectant
Betadine
(utilizat n spitale)
Chlorine bleach
(10%)
Coal Tar
DeBac
(pe baz de NH4+)

Metal

Lemn

Mase
plastice

foarte bun foarte bun foarte bun


bun

bun

foarte bun

foarte bun foarte bun foarte bun


foarte bun foarte bun foarte bun

Ethyl alcohol (95%)

bun

foarte bun foarte bun

Formaldehyde (1%)

bun

foarte bun

bun

Formaldehyde (2%) foarte bun foarte bun foarte bun


Formaldehyde (4%) foarte bun foarte bun foarte bun
Vesphene
(utilizat n spitale)
Zephiran
(pe baz de NH4+)
Lysol concentrate

160

ineficient

ineficient

bun

foarte bun foarte bun foarte bun


excelent

excelent

bun

Lysol spray

bun

foarte bun

bun

Phenol (5%)

bun

bun

bun

Water

ineficient

ineficient

ineficient

Soapy water

ineficient

ineficient

ineficient

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Scderea germinaiei, mbtrnirea i putrezirea cartofilor de


smn
Muli cultivatori au avut succes dac au tratat cartofii de smn cu
fungicide. Trateaz cartofii de smn cu unul dintre:

Maneb 8% n cantitate de 9 kg/t;

Tops 2.5% n cantitate de 9 kg/t.


Tietoarea

precoce

(Alternaria)

tietoarea

ntrziat

(Phytophthora)
ncepnd cu plantele care au peste 20-25 cm aplic una dintre
urmtoarele fungicide la interval de o sptmn. Pe vreme rece i umed
este necesar aplicarea la fiecare 5 zile. Urmrete instruciunile din reet,
inclusiv restriciile de rotaie:

Bravo 720 (6F) 1.2-1.7 l/ha;

Bravo 500 (4.17F) 1.7-2.4 l/ha;

Bravo (90 DG) 0.8-1.25 kg/ha;

Mancozeb (80W) 1.7-2.2 kg/ha;

Mancozeb (4F) 2.8-3.7 l/ha;

Utilizarea sezonal a Dithane M-45 a fost redus la 15.7 kg/ha;

Rovral (4F) 1.1-2.2 l/ha; Maximum 4 aplicri.


Putregaiul tulpinii (Botrytis)
Aceast boal apare n general n culturile sub irigaie. Dac apare o

infestare semnificativ aplic:

Bravo 500 (4.17 F) 1.7-2.4 l/ha;

Bravo 720 (6 F) 1.2-1.7 l/ha;

Bravo (90 DG) 0.9-1.4 kg/ha.

161

Lorentz JNTSCHI

Scabia
Menine pH-ul solului sub 5.5 i nu aplica ngrmnt natural.
Varietile difer semnificativ n susceptibilitatea la scabie. Cunoate
varietatea i istoria terenului nainte de plantare.
Dac irigaia este posibil, aplic o soluie adecvat pe timpul
formrii tuberculilor.
Putregaiul umed al tuberculilor n siloz (fusarium)
Evit lovirea i excesul de sol pe tuberculi. Cnd pui producia n
siloz, aplic Mertect 340-F ca pulbere fin pe cartofi cnd acetia trec prin
ncrctor sau transportor. Urmrete instruciunile de pe etichete. Evit
tierea, lovirea i excesul de sol pe tuberculi i n siloz. Menine un mediu
propice de conservare n siloz.
Mozaic, rsucirea frunzelor, purple top i alte boli virotice
Folosete doar smn certificat. Controleaz afidele i puricii de
frunze.
Nematode
Arderea solului nainte de nsmnare poate fi util n unele situaii.
Urmtoarele pot fi aplicate la nsmnare:

Vydate L 9-19 l n 190 l ap/ha;

Mocap 10G 34 kg/ha;

Mocap EC 2 5.6 l/ha.

162

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

6.10.8. Managementul insectelor


Controlul biologic
Inamicii naturali pot furniza un control biologic adecvat al afidelor
dac insecticidele cu spectru larg nu sunt folosite, mai ales dup mijlocul lui
Iulie. Inamicii naturali comuni n Ohio sunt lady beetle adults, lady beetle
larvae, lacewing larvae, hover fly larvae, damsel bugs, minute pirate bugs, i
parasitic wasps. Civa inamici naturali ai gndacului de Colorado pot
diminua populaia, dar nici unul nu a fost descoperit nc care singur s fac
un control adecvat asupra populaiei acestui duntor. O specie de lady beetle
se hrnete cu oule gndacului i civa parazii zburtori i un fungus poate
ataca populaia. Aceti inamici naturali pot fi conservai prin plantarea
cartofilor din varietatea New Leaf sau de insecticide microbiene ca B.t. care
sunt toxice pentru gndacul de Colorado dar nu i pentru insectele benefice.
Cercetri sunt n desfurare pentru a vedea avantajul folosirii paraziilor
exotici care pot fi crescui n laborator i apoi eliberai n cmpuri
experimentale de cartofi, dar nc nici unul nu a fost gsit a fi suficient de
efectiv pentru a fi produs pentru folosin comercial.
Controlul mecanic
Aspiratoare de volum foarte mare pot fi folosite pentru a absoarbe
larvele i adulii gndacului de pe plante. n forma lor comercial, aceste
aspiratoare special construite pulverizeaz gndacii nainte de ieirea din
camera depresurizat.
Arztoarele cu propan pot fi folosite pentru a ucide gndacii aduli de
pe plantele mici pe perioada primverii i de pe tulpinile supraterane pe
perioada toamnei. Temperatura flcrii de peste 100 C cauzeaz uciderea a
peste 80% din gndaci la un cost redus de propan la hectar. Arztoarele cu
163

Lorentz JNTSCHI

propan sunt oricum, utile doar dup ce plantele au aproximativ 20 cm


nlime i la momentul distrugerii tulpinilor. Gndacii sunt ndeosebi
concentrai la marginea unui nou cmp pe perioada primverii dac
nsmnarea a fost fcut relativ timpuriu i aproape de cmpul folosit n
anul precedent.
Cnd sunt concentrai, gndacii aduli pot fi ari sau aspirai eficient.
Gndacii se concentreaz ctre orice plant verde dup ce n cmp a fost
aplicat distrugerea tulpinilor i pot fi mult mai eficient ari sau aspirai
atunci.
Insecticide
Rotaia insecticidelor previne ca gndacul de Colorado s devin
rezistent la insecticide. n zonele de producie intensiv a cartofului, unde
insecticidele sunt utilizate n cantiti mari, populaiile de gndaci sunt
rezistente la aproape toate insecticidele.
Rezistena la un anume compus chimic este deseori nsoit de
rezistena la compuii chimici nrudii. Pentru a evita sau ntrzia apariia
rezistenei n populaiile de gndaci de Colorado, clasele de insecticide
trebuie rotite ntre generaiile de gndaci. Pentru aceasta este necesar
cunoaterea compoziiei pesticidelor (descrise n seciunea 8).
Cteva reete pentru insecticide tipice pentru cultura cartofului sunt
descrise n continuare:
Tabelul 15. Doze la insecticide pe hectar
Tratamentul nainte de plantare

164

Insecticid

Arie de aplicare

Diazinon

viemi tietori,

Denumire

Doza

comercial

min. max.

u.m.

Diazinon AG500 2.2 4.5 kg/ha

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

(4EC)
srmoi

D-Z-N AG600

36

72

l/ha

Diazinon 50WP

4.5

9 kg/ha

Diazinon 14G

16

31 kg/ha

Telone (94% a.i.) 168 337 l/ha


viermi srmoi,
Diclorpropen symphylan-ul de
grdin

Vorlex (40% a.i.)


symph.
Vorlex (40% a.i.)
wiref.

Disulfoton

Ethoprop

Fonofos

94 140 l/ha
234 561 l/ha

afide,

Di-Syston 15G

gndacul purice,

Di-Syston 8EC

puricii de frunze

(doar afide)

viermi srmoi,

Mocap 6EC

symphylan

Mocap 10G

45

67 kg/ha

viermi srmoi,

Dyfonate 4EC

symphylan-ul de

Dyfonate II 15G

15

15 kg/ha

grdin

Dyfonate II 15G

30

30 kg/ha

Vydate 2SL

19

37

22

30 kg/ha

3.5 4.5 l/ha


l/ha
l/ha

gndacul purice i
Oxamyl

de Colorado afide,

l/ha

puricii de frunze
Tratamente ademenitoare pentru duntori
Carbaryl

Metaldehyde

viermi tietori,
armyworms

limaxuri

Sevin 5B

22

45 kg/ha

11

22 kg/ha

Deadline MP (4B) 22

45 kg/ha

Prozap Sevin
10% Bait Granules
Prozap Snail and
Slug AG (3.5B)

27

45 kg/ha

165

Lorentz JNTSCHI

Pentru tratamentul la nsmnare


afide, gndacul
Disulfoton

Di-Syston 15G

1.4 2.1 kg/km

Di-Syston 8EC

0.2 0.3 kg/km

viermi srmoi,

Mocap 6EC

0.4 0.4 kg/km

symphylan

Mocap 10G

3.1 3.1 kg/km

Admire 2F

0.8 1.2 l/km

purice, Colorado,
puricii de frunze

Ethoprop

Colorado, afide,
Imidacloprid

puricii de frunze,
gndacul purice
gndacul purice,

Oxamyl

Colorado, puricii de

Vydate 2SL

19

l/ha

larvele gndacului

Rampart 10G

3 kg/km

purice, Colorado,

Thimet 15G

puricii de frunze,

Thimet 20G

1.6 kg/km

viermi srmoi

Phorate 20G

1.6 kg/km

frunze, afide

Phorate

1.3 2.1 kg/km

Tratamente foliare
Abamectin

Azadirachtin
(neem)

Colorado

Agri-Mek 0.15EC 5.6 22

l/ha

Neemix 0.25% a.i. 5

l/ha

larvele gndacului Neemix 4.5 (4.5%


de Colorado,

a.i.)

leafhopper nymphs

Azatin EC
(0.265 lb a.i./gal)

0.15 1.15 l/ha


7

15

l/ha

gndacul purice,

Guthion 50WP

1.1 1.7 kg/ha

Colorado, purici de

Sniper 50W

1.1 1.7 kg/ha

Azinphosmethyl frunze, sfredelitorii Gowan Azinphosporumbului

166

19

M 50W

1.1 1.7 kg/ha

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

European

Guthion 2S

1.7 3.5

l/ha

Sniper 2E

1.7 3.5

l/ha

Raven (10% a.i.) 1.2

l/ha

3.5

l/ha

2.3

l/ha

M-Trak
B.t.

Colorado

(10% a.i.,
encapsulated)
Novodor FC (3%
a.i.)
Agree WG (3.8%
a.i.)
Biobit XL FC
(2.1% a.i.)
CryMax WDG

noduli, armyworms,
B.t.

(15% a.i.)

viermi tietori, ali DiPel DF (10.3%


caterpilari

a.i.)

1.1 2.2 kg/ha


1.7 4.6

l/ha

0.5 1.7 kg/ha


0.3 1.1 kg/ha

MVP
(10% a.i.,

l/ha

encapsulated)
XenTari WDG
(10.3% a.i.)

0.6 2.2 kg/ha

6.10.9. Controlul buruienilor


Preplant incorporated
Aceast categorie grupeaz erbicidele pe baz de EPTC. Acestea
acioneaz asupra ierburilor anuale, anumitor buruieni cu frunz mare i
suprim quackgrass i yellow nutsedge. Dou dintre formele sale comerciale
167

Lorentz JNTSCHI

sunt Eptam 7 E i Genep 7 E la care doza de administrare este de 5.2-7.9 l/ha.


Utilizeaz o doz de 7.9 l/ha doar dac nutsedge este o problem.
Preemergente
Linuron inhib plantele tinere cu frunz mare i ierboasele. Trebuie
aplicat ca preemergent la cultura cartofului chiar nainte de nsmnare. Nu
rscoli solul pn cnd nu rsar buruieni. Variante comerciale ale acestui
erbicid sunt Drexel Linuron 4L, Linex 4L (1.7-4.6 l/ha) i Drexel Linuron
DF, Linex 50DF, Lorox DF (1.7-4.5 kg/ha). Dual magnum inhib germinaia
ierboaselor anuale, anumitor buruieni cu frunza mare i suprim yellow
nutsedge. Se aplic n doz de 1.7-2.3 l/ha. Este bine dac ulterior aplicrii
tratamentului cu Dual Magnum se aplic un tratament de preemergen
ntrziat a linuronului sau metribuzinului.
Metribuzin controleaz buruienile mici tinere mai nalte de 3 cm.
Biotipuri cu rezisten la triazine (lambsquarters, pigweed) au aprut n Ohio
i nu pot fi controlate. Nu recolta cartofii mai repede de 60 de zile de la
nsmnare sau de 40 de zile de la aplicarea ultimului tratament i nu utiliza
erbicidul pe soluri nisipoase sau noroioase. Aplicarea sa la Atlantic, Shepody,
Chip Bell, Bell Chip, i varietilor de Centennial poate afecta producia.
Variantele comerciale sunt Sencor 75DF i Lexone 75DF (0.7-1.1 kg/ha).
Turbo 8 EC este un amestec de erbicide (metolaclor + metribuzin) care se
administreaz cu aceleai precauii n doz de 2.3-4 l/ha.
Matrix 25DF este folosit pentru inhibiia ierboaselor anuale i
buruienilor cu frunza lat i se aplic dup movilire n doz de 0.07-0.1
kg/ha. Activarea sa necesit ns ploaie sau irigaie n 3 zile de la aplicare. El
poate fi amestecat nainte de mprtiere n cmp cu Lexone, Eptam, Prowl,
Lorox, sau Dual pentru a mri spectrul de aciune asupra buruienilor.

168

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Dual Magnum n doz de 1.1-2.3 l/ha mpreun cu 1.1-2.8 kg/ha de


Lorox 50 DF, chiar nainte de emergena cartofilor este eficient n inhibiia
buruienilor anuale, ca i amestecul Dual Magnum (1.1-2.3 l/ha) i Sencor
75DF sau Lexone DF 75 (0.7-1.1 kg/ha).
Postemergente
Aplic postemergena dup curirea mecanic sau n timpul acesteia.
Aplic-o prin pulverizare direct. Cartofii trebuie s fie de 30-46 cm mrime
cnd aceast procedur este efectuat. Nu aplica mai mult de 7 kg a.i./ha n
nici un sezon de cultur. Variantele comerciale sunt Eptam 7 E i Genep 7 E
iar doza recomandat este de 5.2 l/ha.
Metribuzinul n postemergen controleaz ierboasele anuale i
anumite ierboase perene. Aplic tratamentul cnd plantele sunt mai mari de 3
cm. Un erbicid din clas structural chimic diferit trebuie utilizat pentru a
inhiba biotipurile rezistente la triazin. Nu aplica tratamentul dup 3 zile reci
i ploioase consecutive i ateapt pn cnd plantele ating 30-38 cm pentru a
evita stricciunile. Produsele comerciale sunt Sencor 4 (1.2-2.3 l/ha), Sencor
75DF, Lexone 75DF, Solupak DF (0.7-1.5 kg/ha).
Matrix 25DF singur aplicat inhib anumite ierboase anuale i buruieni
cu frunza lat i elimin quackgrass, Canada thistle, i yellow nutsedge.
Aplic Matrix n doz de 0.07-0.1 kg/ha asupra buruienilor n cretere mai
mici de 3 cm nlime. Include un surfactant neionic n doz de 1.2-2.5 l/m3
de ap. Buruienile perene necesit o a doua aplicare la 28 de zile de la prima
aplicare pentru a inhiba rsririle ntrziate. Nu utiliza mai mult de 0.18 kg/ha
de Matrix pe sezon. Ploaia sau irigaia n interval de 5 zile de la aplicare este
necesar pentru a obine instalarea inhibiiei la buruienile anuale. Aplicarea
postemergent a lui Matrix poate fi fcut n amestec cu anumite fungicide i

169

Lorentz JNTSCHI

cu Lexon sau Eptam. nglbenirea temporar a plantelor poate apare cnd


planta este supus la condiii de mediu vitrege imediat dup aplicare.
Poast inhib ierboasele anuale perene emergente i cele perene. Doza
de aplicare este de 1.1-1.7 l/ha. Adaug 2.3 l/ha de concentrat de ulei
nefitotoxic. Doza exact este dependent de specia de ierboas i stadiul de
dezvoltare. Se mai poate adug UAN sau sulfat de amoniu pentru a crete
inhibiia quackgrass i a altor buruieni. Timpul n care inhibiia se instaleaz
este de 30 de zile.
Distrugerea tulpinilor cartofilor nainte de recoltare
Se poate aplica Diquat n doz de 1.1 l/ha la tulpinile mature. F o a
doua aplicare n interval de 5 zile dac tulpinile sunt nc n vigoare. Pentru
Russet Burbanks utilizeaz 2.2 l/ha n prima aplicare i 1.1 l/ha n a doua
aplicare. Introdu un surfactant neionic n doz de 2.5 l/m3 de ap. Timpul n
care uscarea se produce este de 7 de zile.
Desicate II se folosete n doz de 3.5-4.5 l/ha n 20-80 l de ap.
Utilizeaz doze mai mari pentru tulpini verzi i puternice. Efectul se
manifest n 10 zile.
Gramoxone Extra se aplic n doz de 0.9-1.7 l/ha n cel puin 80 l
ap pentru tulpini mature. Utilizeaz 1.7 l/ha pentru o rapid distrugere. F
dou aplicri la 5 zile distan pentru tulpini viguroase. Nu folosi pentru
cartofii de nsilozat. Efect n 3 zile.

170

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Anexa. Dicionar de Termeni Tehnici Englez Romn

Cuvintele prezentate n aceast seciune au fost folosite pentru a


exprima termenii tehnici din engleza american n romn pe parcursul
studiului bibliografic care a fcut obiectul prezentei lucrri. Sunt prezentai
termenii cu semnificaii variate n dicionarele uzuale i a cror conotaie
contextual a fcut atribuirile de fa. De asemenea, o serie de termeni nu
sunt prezeni n dicionarele englez romn uzuale i a fost necesar
folosirea de surse alternative, cum ar fi baza de date de sinonime a
programului Microsoft Word XP7 (Microsoft), motorul de cutare Google8,
The American Heritage Dictionary of the Enlish Language: Fourth Edition
(2000)9, Translatorul Online WorldLingo (WorldLingo Inc.)10 dicionarul
de neologisme al limbii romne i diferite alte surse de termeni tehnici, cum
ar fi glosarul de microbiologie ntreinut de firma Dyer Laboratories Inc.11.

http://www.microsoft.com

http://www.google.com

http://www.bartleby.com/61

10

http://www.worldlingo.com

11

http://www.dyerlabs.com/glossary/microbiology
171

Lorentz JNTSCHI

Dicionar de termeni tehnici englez (american) romn


aphids afide
bait ademenitor
bare suprateran
barley orz
beetle gndac
bin loader ncrctor
blight tiere
blossom nflorire
broadleaf frunz mare
broad-spectrum spectru larg
bruising lovirea
burlap mase plastice
chlorosis nglbenire
clots coagulat
conveyor transportor
cooked copt
crop recolt
decay mbtrnire
dried umed
drop oprirea
feedback reacie invers
fermentor vas de fermentare
flamer arztor
flea purice
frost nghe
fumigation ardere
172

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

greening nverzire
handling manipulare
harvesting recoltare
hilling movilire
impeller agitator (mecanic)
injury stricciune
issue of scale scara la care se practic
leafhopper purici de frunze
malt mal
marsh mal
mist pulbere
moisture noroios
organelles organite
pilus perior
racking separarea vinului de drojdie (pritocire)
ragellum racem
reared crescut
residual instalare
rot putrezire
scale-up trecere de la laborator la producie
seed smn
seedling puiet
shout rsrire
slime noroi
slug limax
spore spori
sprout vegetaie
173

Lorentz JNTSCHI

stain marker
starch amidon
strain conformaie
strain descendent
vacuum aspirator
vine tulpin
vinegar oet
weed buruian
yeast drojdie

174

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

Referine

[1] Atanasova P., Lopez R., Palacios J., Agudo A., Journal of Catalysis, 328338, 1999.
[2] Manahan S. E., Environmental Chemistry, 327-336, 1992.
[3] Unguresan Mihaela, Delia Dicu, Lorentz Jntschi, Desulfuration of Gases.
Chemical Methods, Oradea University Annals, Chemistry Fascicle, 2001,
VIII, 19-24, ISSN 1224-7626.
[4] E. Melndez-Hevia, R. Melndez and E. I. Canela, Glycogen Structure:
an Evolutionary View, p. 319326 in Technological and Medical
Implications of Metabolic Control Analysis, ed. A. Cornish-Bowden and M.
L. Crdenas, Kluwer Academic Publishers, Dordrecht, 2000.
[5] Harvey Lodish, Arnold Berk, Lawrence S. Zipursky, Paul Matsudaira,
David Baltimore, James Darnell, Molecular Cell Biology (Fourth Edition),
W. H. Freeman and Company, New York (USA) and Houndsmills (UK),
ISBN 0-7167-3136-3.
[6] German C. R., Parson L. M. and Mills R. A., Mid-Ocean Ridges and
Hydrothermal Activity, 152-164, in Oceanography, Eds. C. P. Summerhayes
and S. A. Thorpe, John Wiley & Sons, New York, 1996.
[7] Maksym Nikonorow, Pesticidele n lumina toxicologiei mediului, Praca
zbiorowa, Varovia, 1979.

175

Lorentz JNTSCHI

[8] Robert D. Hall, Effects of Climate Change on Soils in Glacial Deposits,


Wind River Basin, Wyoming, Quaternary Research, Vol. 51, No. 3, p. 248261, May 1999.
[9] H. H. Cramer, Plant protection and world crop production,
Pflanzenschutz-Nahr., Berlin, 1, 1, 1967.
[10] Barry L. Johnson and Christopher T. De Rosa, Public Health
Implications, Environmental Research Section A, 80, S246S248, 1999.
[11] Z. A. Rosemond, C. T. De Rosa, W. Cibulas, and H. E. Hicks,
Proceedings of the Great Lakes Human Health Effects Research Symposium,
Toxicol. Ind. Health, 12(3/4), 814-823, 1996.
[12] M. J. DeVito, L. S. Birnbaum, W. H. Farland, and T. A. Gaslewicz,
Comparisons of estimated human body burdens of dioxin-like chemicals and
TCDD body burdens in experimentally exposed animals, Environ. Health
Perspect, 103(9), 820831, 1995.
[13] S. L. Schantz, A. M. Sweeney, J. C. Gardiner, Neuropsychological
assessment of an aging population of Great Lakes fisheaters, Toxicol. Ind.
Health, 12(3/4), 403417, 1996.
[14] T. Darvill, E. Lonky, J. Reihman, and P. Stewart, Effect of recency of
maternal consumption of Lake Ontario sport fish on neonatal coping
behavior and infant temperament, Environ. Res., 81(3), S316-326, 1999.
[15] J. A. Dellinger, S. L. Gerstenberger, L. K. Hansen, and L. L. Malek,
Ojibwa health study: Assessing the health risks from consuming
contaminated Great Lakes fish, Environ. Res., 83(5), S514-S520, 1999.

176

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

[16] J. E. Vena, G. M. Buck, P. Kostyniak, The New York Angler Cohort


Study: Exposure characterization and reproductive and developmental
health, Toxicol. Ind. Health, 12(3/4), 327334, 1996.
[17] M. Gilbertson, Guest commentary. Great Lakes Res. Rev., 1(2), 34,
1995.
[18] M. Berry, and F. Bove, Birth weight reduction associated with residence
near a hazardous waste landfill, Environ. Health Perspect., 105(8), 856861,
1997.
[19] L. A. Croen, G. M. Shaw, L. Sanbonmatsu, S. Selvin, P. A. Buffler,
Maternal residential proximity to hazardous waste sites and risk for elected
congenital malformations, Epidemiology, 8(4), 347354, 1997.
[20] B. L. Johnson, Hazardous waste: Human health effects, J. Clean Tech.
Environ. Tox. Occupat. Med., 7, 351375, 1998.
[21] J. F. Robens, Teratologic Studies of Carbaryl, Diazinon, Norea,
Disulfiram and Thiram in Small Laboratory Animals, Toxicol. Appl.
Pharmacol., 15, 152-156, 1970.
[22] ***, Report of the secretarys commission on pesticides and their
relationship to environmental health, U. S. Dept. of Health Education and
Welfare, 1969.
[23] G. T. Brooks, T. R. Roberts, Pesticide Chemistry and BioScience: The
Food-Environment Challenge, The Royal Society of Chemistry, Cambridge,
U.K., 438 p., 1999, ISBN 0-85404-709-3.
[24] ***, 1995/1996 HP Environmental Solutions Catalog.
[25] Costel Srbu, Lorentz Jntschi, Validarea i Evaluarea Statistic a
Metodelor Analitice prin Studii Comparative. I. Validarea Metodelor
177

Lorentz JNTSCHI

Analitice folosind Analiza de Regresie, Revista de Chimie, Bucureti, p. 1924, 49(1), 1998.
[26] A. Garrido Frenich, J. L. Martnez Vidal, and M. Martnez Galera, Use
of the Cross-Section Technique Linked with Multivariate Calibration
Methods To Resolve Complex Pesticide Mixtures, Anal. Chem., 71, p. 48444850, 1999.
[27] Lorentz Jntschi, Predicia proprietilor fizico-chimice i biologice cu
ajutorul descriptorilor matematici, Tez de doctorat, Univ. Babe-Bolyai
Cluj-Napoca, 2000.
[28] Claudia Cimpoiu, Lorentz Jntschi, Teodor Hodian, A New Method for
Mobile

Phase

Chromatography

Optimization
(HPTLC),

in
Journal

High-Performance
of

Planar

Thin-Layer

Chromatography,

11(May/June), p. 191-194, 1998.


[29] Claudia Cimpoiu, Lorentz Jntschi, Teodor Hodian, A New
Mathematical Model for the Optimization of the Mobile Phase Composition
in HPTLC and the Comparision with Other Models, J. Liq. Chrom. & Rel.
Technol., 22(10), p. 1429-1441, 1999.
[30] Lorentz Jntschi, Simona Murean, Mircea Diudea, Modeling molar
refraction and chromatographic retention by Szeged indices, Studia
Universitatis Babe-Bolyai, Chemia, XLV, 1-2, 313-319, 2000.
[31] Diudea Mircea, Gutman Ivan, Jntschi Lorentz, Molecular Topology,
Nova Science, Huntington, New York, 332 p., 2001, ISBN 1-56072-957-0,
http://www.nexusworld .com/nova/1271.htm.

178

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

[32] Ivan Gutman, A Formula for the Wiener Number of Trees and Its
Extension to Graphs Containing Cycles, Graph Theory Notes of New York,
27, p. 9-15, 1994.
[33] Mircea Diudea, Bazil Prv, Mihai Topan, Derived Szeged and Cluj
Indices, J. Serb. Chem. Soc., 62, 235-239, 1997.
[34] Diudea Mircea (Ed.), QSAR/QSPR Studies by Molecular Descriptors,
Nova Science, Huntington, New York, 438 p., 2001.
[35] Mircea Diudea, Lorentz Jntschi, Ovidiu Ivanciuc, L. Pejov, D. Plavic,
D. Viki-Topi, Topological Substituent Descriptors, Croat. Chem. Acta.,
submitted, 2001.
[36] M. Filizola, G. Rosell, A. Guerrero, J. J. Prez, Conformational
Requirements for Inhibition of the Pheromone Catabolism in Spodoptera
Littoralis, QSAR, 17(3), 205-210, 1998.
[37] E. Lozoya, M. Berges, J. Rodrguez, F. Sanz, M. I. Loza, V. M. Moldes,
C. F. Masauer, Comparison of Electrostatic Similarity Approaches Applied to
a Series of Kentaserin Analogues with 5-HT2A Antagonistic Activity, QSAR,
17(3), 199-204, 1998.
[38] D. A. Winkler, F. R. Burden, Holographic QSAR of Benzodiazepines,
QSAR, 17(3), 224-231, 1998.
[39] D. A. Wikler, F. R. Burden, A. J. R. Watkins, Atomistic Topological
Indices Applied to Benzodiazepines using Various Regression Methods,
QSAR, 17(1), 14-19, 1998.
[40] Jackson State University, Sixth Conference on Current Trends On
Computational Chemistry, Vicksburg, Mississippi, Nov 7-8, 2-178, 1997.

179

Lorentz JNTSCHI

[41] J. H. Wikel, E. R. Dow, M. Heathman, Interpretative Neural Networks


for QSAR, Network Science, 1996, Jan, http://www.netsci.org/Science/
Combichem/feature02.html.
[42] Valery Golender, Boris Vesterman, Erich Vorpagel; APEX-3D Expert
System for Drug Design, Network Science, http://www.netsci.org/Science/
Compchem/feature09.html.
[43] P. Zbinden, M. Dobler, G. Folkers, A. Vedani, PrGen: Pseudoreceptor
Modeling Using Receptor-mediated Ligand Alignment and Pharmacophore
Equilibration, QSAR, 17(2), 122-130, 1998.
[44] R. D. Cramer III, D. E. Patterson, J. D. Bunce, Comparative Molecular
Field Analysis (COMFA). 1. Effect of Shape on Binding of Steroids to
Carrier Proteins, J. Am. Chem. Soc., 110(18), 5959-67, 1988.
[45] Simon Seamus, CoMFA: A Field of Dreams?, Nova Science, Jan,
http://www.netsci.org/Science/Compchem/ feature11.html, 1996.
[46] ***, Unity Program for SIMCA (Soft Independent Modeling Class
Analogy), Tripos Associates, St. Louis, MO.
[47] Alfred Merz, Didier Rognan, Gerd Folkers, 3D QSAR Study of N2phenylguanines as Inhibitors of Herpes Simplex Virus Thymide Kinase,
Antiviral

and

Antitumor

Research,

http://www.pharma.ethz.ch

/text/research/tk/qsar.html.
[48] P. E. Gurba, M. E. Parham, J. R. Voltano, Comparison of QSAR Models
Developed for Acute Oral Toxicity (LD50) by Regression and Neural Network
Techniques, Conference on Computational Methods in Toxicology April,
1998, Holiday Inn/I-675, Dayton, Ohio, USA, abstract available at
http://www.ccl.net /ccl/toxicology/abstracts/abs9.html.
180

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

[49] ***, HyperChem, Molecular Modelling System, Hypercube Inc.


[50] ***, Molconn-Z, http://www.eslc.vabiotech.com/ molconn.
[51] C. L. Waller, S. D. Wyrick, H. M. Park, W. E. Kemp, F. T. Smith,
Conformational Analysis, Molecular Modeling, and Quantitative StructureActivity Relationship Studies of Agents for the Inhibition of Astrocytic
Chloride Transport, Pharm. Res., 11(1), 47-53, 1994.
[52] J. P. Horwitz, I. Massova, T. Wiese, J. Wozniak, T. H. Corbett, J. S.
Sebolt-Leopold, D. B. Capps, W. R. Leopold, Comparative Molecular Field
Analysis of in Vitro Growth Inhibition of L1210 and HCT-8 Cells by Some
Pyrazoloacridines, J. Med. Chem., 36(23), 3511-3516, 1993.
[53] G. B. McGaughey, R. E. MewShaw, Molecular Modeling and the
Design of Dopamine D2 Partial Agonists, (presented at the Charleston
Conference; march; 1998), sumitted may 1998, Network Science,
http://www.netsci.org/ Science/Compchem/feature20.html.
[54] H. Chuman, M. Karasawa, T. Fujita, A Novel Three-Dimensional QSAR
Procedure: Voronoi Field Analysis, QSAR, 17(4), 313-326, 1998.
[55] C. L. Walter, G. E. Kellogg, Adding Chemical Information of CoMFA
Models

with

Alternative

3D

QSAR

Fields,

Network

Science,

http://www.netsci.org/Science/ Compchem/feature10.htm, Jan, 1996.


[56] A. Merz, D. Rognan, G. Folkers, 3D QSAR Study of N2-phenylguanines
as Inhibitors of Herpes Simplex Virus Thymide Kinase, Antiviral and
Antitumoral Research, http://www.pharma.ethz.ch /text/research/tk/qsar.html.
[57] G. E. Kellogg, S. F. Semus, D. J. Abraham, HINT: a new method of
empirical hydrophobic field calculation for CoMFA, J. Comput.-Aided Mol.
Des., 5(6), 545-552, 1991.
181

Lorentz JNTSCHI

[58] A. M. Myers, P. S. Charifson, C. E. Owens, N. S. Kula, A. T. McPhail,


R. J. Baldessarini, R. G. Booth, S. D. Wyrick, Conformational Analysis,
Pharmacophore Identification, and Comparative Molecular Field Analysis of
Ligands for the Neuromodulatory .sigma.3 Receptor, J. Med. Chem., 37(24),
4109-4117, 1994.
[59] K. H. Kim, Use of the hydrogen-bond potential function in comparative
molecular field analysis (CoMFA): An extension of CoMFA, Quant. Struct.
Act. Relat., 12, 232-238, 1993.
[60] G. L. Durst, Comparative Molecular Field Analysis (CoMFA) of
Herbicidal Protoporphyrinogen Oxidase Inhibitors using Standard Steric
and Electrostatic Fields and an Alternative LUMO Field, Quant. Struct. Act.
Relat., 17, 419-426, 1998.
[61] C.L. Waller, G. R. Marshall, Three-Dimensional Quantitative StructureActivity Relationship of Angiotensin-Converting Enzyme and Thermolysin
Inhibitors. II. A Comparision of CoMFA Models Incorporating Molecular
Orbital Fields and Desolvation Free Energy Based on Active-Analog and
Complementary-Receptor-Field Alignment Rules, J. Med. Chem., 36, 23902403, 1993.
[62] M. Wiese, I. L. Pajeva, A Comparative Molecular Field Analysis of
Propafenone-type Modulators of Cancer Multidrug Resistance, Quant.
Struct.-Act. Relat., 17(4), 301-312, 1998.
[63] G. Klebe; U. Abraham, On the Prediction of Binding Properties of Drug
Molecules by Comparative Molecular Field Analysis, J. Med. Chem., 36(1),
70-80, 1993.

182

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

[64] K.-H. A. Czaplinski, G. L. Grunewald, A Comparative Molecular Field


Analysis Derived Model of Binding of Taxol Analogs to Microtubes, Bioorg.
Med. Chem. Lett., 4(18), 2211-2216, 1994.
[65] T. Akagi, Exhaustive Conformational Searches for Superimposition and
Three-Dimensional Drug Design of Pyrethroids, QSAR, 17(6), 565-570,
1998.
[66] C. L. Waller, T. I. Oprea, A. Giolitti, G. R. Marshall; Three-Dimensional
QSAR of Human Immunodeficiency Virus. (I) Protease Inhibitors. 1. A
determined Alignment Rules, J. Med. Chem., 36(26), 4152-4160, 1993.
[67] E. Thompson, The Use of Substructure Search and Relational Databases
for Examining the Carcinogenic Potential of Chemicals, Conference on
Computational Methods in Toxicology April, 1998, Holiday Inn/I-675,
Dayton,

Ohio,

USA,

abstract

available

at

http://www.ccl.net

/ccl/toxicology/abstracts/tabs6.html.
[68] R. Todeschini, M. Lasagni, E. Marengo, New Molecular Descriptors for
2D and 3D Structures. Theory, J. Chemometrics, 8, 263-272, 1994.
[69] R. Todeschini, P. Gramatica, R. Provenzani, E. Marengo, Weighted
Holistic Invariant Molecular (WHIM) descriptors. Part2. There Development
and Application on Modeling Physico-chemical Properties of Polyaromatic
Hydrocarbons; Chemometrics and Intelligent Laboratory Systems, 27, 221229, 1995.
[70] R. Todeschini, M. Vighi, R. Provenzani, A. Finizio, P. Gramatica,
Modeling and Prediction by Using WHIM Descriptors in QSAR Studies:
Toxicity of Heterogeneous Chemicals on Daphnia Magna, Chemosphere, 8;
1527-1533, 1996.
183

Lorentz JNTSCHI

[71] A. Zaliani, E. Gancia, MS-WHIM Scores for Amino Acids: A New 3DDescription for Peptide QSAR and QSPR Studies, J. Chem. Inf. Comput. Sci.,
39(3), 525-533, 1999.
[72] G. Bravi, E. Gancia, P. Mascagni, M. Pegna, R. Todeschini, A. Zaliani,
MS-WHIM. New 3D Theoretical Descriptors Derived from Molecular
Surface Properties: A Comparative 3D QSAR Study in a Series of Steroids, J.
Comput.-Aided Mol. Des., 11, 79-92, 1997.
[73] Sonia Nikoli, M. Medi-Sari, J. Matijevi-Sosa, A QSAR Study of 3(Phtalimidoalkyl)-pyrazolyn-5-ones, Croat. Chem. Acta, 66, 151-160, 1993.
[74] L. L. Thurstone, Multiple Factor Analysis, Psychological Review, 38,
406-427, 1931.
[75] L. L. Thurstone, Multiple Factor Analysis, University Chicago Press,
Chicago, 1947.
[76] Milan Randi, Search for Optimal Molecular Descriptors, Croat. Chem.
Acta, 64, 43-54, 1991.
[77] Milan Randi, Resolution of Ambiguities in Structure Property Studies
by Use of Orthogonal Descriptors, J. Chem. Inf. Comput. Sci., 31, 311-320,
1991.
[78] Lorentz Jntschi, Romeo Chira, Chimia i Biochimia Poluanilor.
Lucrri practice, U. T. Pres, 2000, ISBN 973-9471-46-3.
[79] Dorina Opris, Mircea Diudea, Peptide Property Modeling by Cluj
Indices, SAR/QSAR Environ. Res., 12, 159-179, 2001.
[80] Lorentz Jntschi, Gabriel Katona, Diudea Mircea, Modeling Molecular
Properties by Cluj Indices, Comun. Math. Comp. Chem., 41, 151-188, 2000,
ISSN 0340-6253, Bayreuth, Germany.
184

Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

[81] P.I. Nagy, J. Tokarski, A. J. Hopfinger, Molecular shape and QSAR


analysis of a family of substituted dichlorodiphenyl aromatase inhibitors, J.
Chem. Inf. Comput. Chem., 1994, 34, 1190-1197.
[82] ***, Date obinute prin amabilitatea Ministerului Agriculturii din
Canada, PDF, http source.
[83] Bernadette McMahon, Ann Marie Poulsen, John J. Jennings, Jr., Carolyn
Makov, Glosary of Pesticide Chemicals, FDA Division of Pesticides and
Industrial Chemicals, HFS-337, 200 C Street SW, Washington, U.S.A., PDF
http source, Creator: Adobe for Macintosh, Version: October 2001.
[84] A. Pucau, M. Baltac, Al. Al. Alexandri, T. Baicu, I. Miric, M.
Costache, Compatibilitatea Pesticidelor, Ministerul Agriculturii, Bucureti,
1987.
[85] H. G. Khorana, Total synthesis of a gene, Science, Washington, 203,
4381, 614-625, 1979.
[86] R. Toule, Les gnes artificiels, La recherch, Paris, 13, 131, 340-347,
1982.
[87] J. Abelson, E. Butz, Recombinant DNA, Science, Washington, 209,
4463, 1317-1438, 1980.
[88] A. Sasson, Biotehnologiile: sfidare i promisiuni, Ed. Tehnic,
Bucureti, 1988, dup Les biotechnologies: Dfis et promosses, Presses
Universitaires de France, Vendme, UNESCO, 1983.
[89]

T. Crciun, Geniul Genetic i Ameliorarea Plantelor, Ed. Ceres,

Craiova, 1987.

185

Lorentz JNTSCHI

[90] T. Crciun, M. Ptracu, Perspective de utilizare a culturilor de celule i


a protoplatilor, Lucrile celui de-al doilea Simpozion de Genetic, Piatra
Neam, 1979.
[91] V. Diaconu, Plante transgenice, Raport al Comisiei Naionale Pentru
Securitate Biologic, Bucureti, 2000.
[92] H. G. Baker, The evolution of weeds, Ann. Rev. of Ecol. and System, 5,
1-24, 1974.
[93] J. L. Dunwell, Transgenic crops: the next generation, or an example of
2020 vision, Ann. of Bot., 84, 269-277, 1999.
[94] J. L. Tynan, M. K. Williams, A. J. Conner, Low frequency of pollen
dispersal from a field of transgenic potatoes, J. of Genet. and Breed., 44,
303-306, 1990.
[95] P. J. Dale, The release of transgenic plants into agriculture, J. of Agric.
Sci., 120, 1-5, 1993.
[96] ***, Ohio Vegetable Production Guide, Bulletin 672-01, Bulletin
Extension, Ohio State University, 2001.
[97] Mircea Bejan, n lumea unitilor de msur, Ed. Agir, Bucureti, 2000,
ISBN 973-8130-01-8.

186

Lorentz JNTSCHI
Microbiologie i Toxicologie. Studii Fitosanitare

ISBN 973-85727-3-8

S-ar putea să vă placă și