Biologie celular

Histologie
Embriologie
Semestrul I
Biologie Celular
Embriologie

CUVNT NAINTE
Manualul de Biologie celular, Histologie,Embriologie
animal este destinat, n principal, studenilor n
medicin veterinar i n biologie, dar este util i altor
specialiti care se ocup de creterea, reproducerea,
exploatarea i pstrarea biosecuritii animalelor
domestice, precum medici veterinari, ingineri
zootehniti, biologi i biotehnologi.
Prelund datele de microscopie optic,
microscopie electronic, embriologie i mbinndu-le cu
rezultatele tiinifice obinute n activitatea, de peste
treizeci de ani din domeniul morfologiei normale (macroi microscopice) a autorului, s-a elaborat o lucrare

structurat logic, ancorat n realitile biologiei,

creterii, exploatrii i medicinei animalelor
domestice. Lucrarea prezint nivelul celular, tisular,
organic i sistemic de organizare a organismului
animal, mpreun cu noiunile de embriologie
aferente.
Se urmrete, astfel, ca instruirea actualilor
studeni s se realizeze metodic, de la simplu la
complex, nct nsuirea cunotiinelor s se fac
raional i gradual, rezultnd o baz solid de
cunotiine fundamentale, cu implicaii practice, care
s permit nelegerea, perfecionarea continu i
mbuntirea eficacitii activitilor viitorilor
absolveni.
Adresndu-se, n primul rnd, studenilor din anii
nceptori , lucrarea a fost conceput innd cont de
programa programa analitic a disciplinelor de
Biologie celular, histologie i embriologie de la
Facultatea de medicin veterinar din Bucureti i a

Celulele care intr n alctuirea unui organ

realizeaz o structur stabil, asemntoare la
specii diferite, fenomen cunoscut sub denumirea
de homeostazie structural. Pentru realizarea
unei astfel de structur coopereaz un mare
numr de celule de tipuri diferite, care comunic
ntre ele, i controleaz forma, mrimea, poziia,
orientarea n spaiu i activitatea n aa fel, nct
fiecare celul i structur, n ansamblul su, s
funcioneze optim, obinndu-se efecte maxime cu
minimum de cheltuieli materiale i energetice.
Funciile celulelor, esuturilor sau organelor
pot fi explicate numai dup cunoaterea n
profunzime, pn la nivelul molecular, a
structurilor, care formeaz baza lor material. A
nelege o structur, un ansamblu de fapte
observabile optic sau electronomicroscopic
nseamn s descoperi interrelaiile dintre
elementele componente.

Domeniul tiinific prezentat n manual

nregistreaz o gigantic explozie informaional, nct
a trebuit s selectez, din multitudinea de date recente,
numai pe acelea care prezint o importan major
pentru latura formativ, instructiv i tiinific a
pregtirii studenilor . Acest fapt limiteaz, de la
nceput orice pretenii asupra cartacterului exhaustiv al
lucrrii i al indicaiilor bibliografice.
Pentru a facilita nsuirea materialului teoretic,
autorul a desenat o serie de scheme dup preparate
histologice, iar alte scheme au fost preluate, prelucrate
i modificate din lucrri consacrate.
Mulumesc tuturor celor care mi vor adresa
sugestii i idei ce vor duce la mbuntirea acestui
material didactic, pe care l doresc a fi ct mai util
studenilor.
Autorul

1.1 Repere istorice n evoluia cunotiinelor despre

celule i esuturi
Descoperirea celulei a fost posibil dup
inventarea microscopului n anul 1590 de ctre doi
frai olandezi HANS i ZACHARIAS JENSSEN. n anul
1665, ROBERT HOOKE (1635-1703), fizician englez a
observat cu ajutorul microscopului, ntr-o bucat
subire de plut, o serie de caviti mici pe care le-a
denumit celule ( de la latinescul cella = cmru).
Mai trziu (1674), A. van LEEUWENHOEK (1632-1723)
descoper mai multe tipuri de celule libere (protiste,
globulele roii) , iar HAM LUDWIG (1650-1723) a
descoperit spermatozoizii, n 1677. Tot n secolul al
XVII-lea, MARCELLO MALPIGHI (1628-1694) a descris
pentru prima dat capilarele sanguine n peritoneul de
broasc i le-a denumit astfel dup latinescul
"capillus", care nseamn fir de pr. Totodat, Malpighi
a mai descoperit glomerulii renali, stratul intermediar
al epidermului, dar nu i-a dat sema c celula este
unitatea de baz a lumii vii. Olandezul REGNIER de
GRAAF (1641-1693) a descoperit foliculii ovarieni, n
anul 1672.

Astfel, Biologia celular ( citologia sau

organizarea celular) studiaz organizarea, structura,
ultrastructura i funcionarea celulelor animale,
permind cunoaterea substratului celular al
fenomenelor biologice, iar "Embriologia" se ocup cu
studiul dezvoltrii ontogenetice, din momentul
producerii gameilor, al apariiei zigotului i pn la
formarea ntregului organism animal. Formaiunile sunt
prezentate att cu denumirea n limba romn, ct i cu
denumirea internaional n limba latin, fapt ce are
menire de facilita reinerea lor de ctre studenii strini.
Organismul animalelor domestice conine o serie
de substane anorganice (ap, elemente i sruri
minerale, etc.) i organice (proteine, glucide, lipide,
enzime, acizi nucleici, etc.), care nu formeaz soluii
la ntmplare, ci sunt organizate cu mare precizie,
intracelular sau extracelular, sub forma unor structuri i
ultrastructuri, care ndeplinesc roluri bine definite. La
rndul lor, celulele sunt grupate, morfologic i funcional
n esuturi sau organe, rezultnd organismul, ca un tot
unitar.

La sfritul secolului al XVIII-lea, FRANCOIS MARIE

XAVIER BICHAT (1771-1802) a descris i a introdus
noiunea de esut, individualiznd 21 tipuri de
esuturi i descriind n mod magistral esutul osos,
cartilaginos i muscular.Pentru descoperirile sale
este considerat printele histologiei.
Un moment crucial n dezvoltarea
cunotiinelor despre celule l-a avut cristalizarea
teoriei celulare pe baza cercettilor i generalizrilor
efectuate de botanistul MATHIAS JACOB SCHLEIDEN
(1804-1880) i de zoologul THEODOR SCHWANN
(1810-1882). Ei au artat c celula nu este goal,ci
conine un "utricul azotat", cu caracter reticular, ce
se formeaz din citoblastem.
Teoria celular, elaborat de ei, susinea c:
1- corpul tuturor plantelor i animalelor este format
din celule; 2- celulele au o via proprie,
caracteristic fiecrei celule; 3- viaa individual a
celulelor este influenat de viaa n ansamblu a
organismului.

Mai trziu, RUDOLPH VIRCHOW (1821-1902)

a completat i mbuntit teoria celular, susinnd
c: 1) "Omnis cellula e cellula" -toate celulele provin
din celule preexistente, negnd n acest fel
generaia spontan din citoblastem; 2) "Omnis
vivum ex ovo" - tot ce este viu provine din
diviziunea i creterea unui ou fecundat, rezultat din
contopirea a dou celule diferite, ovulul i
spermatozoidul; 3) n afara celulelor nu exist
via, iar organismul este o confederaie de celule.
Microscopul optic modern a aprut n a doua
jumtate a secolului a XIX-lea ca urmare a
contribuiei unor fizicieni, printre care se disting doi
germani, mecanicul KARL ZEISS (1816-1888) i
profesorul ERNEST ABBE (1840-1905).

Primul microscop electronic a fost pus la punct

de germanii G.A. KAUSCHE i H. RUSKA n 1939,
cnd au reuit s observe i s fotografieze un virus.
n paralel cu perfecionarea microscopului optic,s-au
pus la punct tehnicile de colorare i impregnare cu
substane de contrast a componentelor celulare, n
acest domeniu remarcndu-se germanii G.H.
HOFMANN, R. HEIDENHEIM, C.WEIGERT, R. FEULGEN,
A. PAPPEMHEIM, P.EHRLICH, G.MANN, danezii M.G.
GRAM, italianul C. GOLGI, spaniolul RAMON Y.CAJAL,
romnii V.BABE, G.LEVADITI, D.VOINOV i alii.

n secolul XX, histochimia i histoenzimologia

modern au fost fondate i ilustrate de personaliti
ca: R. FEULGEN, J.VERNE, J.BRACHET, G.GMRI, A.
SELIGMAN, A.C.PEARSE i alii.

1.2. Contribuii romneti la studiul celulei i la

dezvoltarea histologiei
Constituirea unei discipline de histologie de
sine stttoare n nvmntul medical din Romnia
s-a realizat n anul 1873, la Iai de ctre profesorul
LEON SCULLY (1853-1912) i n anul 1881 la
Bucureti de ctre profesorul Mihail PETRINI de
GALATZ (1846-1926), elev a lui LOUIS-ANTOINE
RANVIER (1835-1922), prin separarea histologiei de
anatomie. nainte de aceste date, n 1839, NICOLAE
KRETZULESCU (1812-1900) i-a susinut teza de
doctorat privind structura microscopic a dinilor i
cristalinului, iar din 1859 ADOLF LUDOVIC FIALLA
(1831-1910) a predat un curs de Anatomia
microscopic i histologie, fiind primul profesor de
histologie la coala de medicin din Bucureti,
ctitorit de CAROL DAVILA (1828-1884).

La Facultatea de Medicin Veterinar din

Bucureti, n anul 1883,histologia figura printre
obiectele de studiu ale anului I, fiind predat de
profesorul Constantin Gavrilescu pn n anul 1899,
iar n continuare de profesorul Ion Athanasiu, n paralel
fiziologia animal. Din 1905 pn n 1923, cursul de
histologie a fost predat de profesorul Ion Drgoi, elev
al lui Ion Athanasiu, mpreun cu care a efectuat
cercetri remarcabile privind histofiziologia esutului
muscular, descriind sarcolema i tubii " T ". ntre anii
1923-1941, profesorul Drgoi a predat histologia la
Facultatea de medicin uman din Cluj. Dup 1923, la
conducerea disciplinei, s-au succedat profesorii: G.
NIKITA (ntre anii 1923-1928), I.T.NICULESCU (ntre
1928-1932)- un strlucit elev al lui G. MARINESCU
(fondatorul neurohistologiei romneti), ILIE BDESCU
(ntre 1932-1848), ILIE DICULESCU (ntre 1946-1962),
V.CIUREA(ntre anii 1948-1952) i GH.BORDA ( ntre anii
1962 -1985).

Profesorul ILIE DICULESCU, absolvent al

Facultii de medicin veterinar, a condus din anul
1962 disciplina de Citologie i histologie, de la
Facultatea de medicin uman din Bucureti,
impunndu-se ca un creator al colii de
histoenzimologie i citochimie ultrastructural. Un
merit deosebit n dezvoltarea biologiei celulare revine
savatului de origine romn, GEORGE EMIL PALADE
(1912 prezent), laureat al premiului Nobel pentru
medicin (n anul 1974), considerat principalul
cartograf al celulei.
n prezent, disciplinele de Biologie celular,
histologie i embriologie sunt predate la Facultile de
medicin veterinar din ar de: prof.dr. Corneliu
Cotea la Iai, prof.dr. IClaudiu Lizovschi-Cheleanu la
Cluj-Napoca, prof.dr. Mariana incai la Timioara i
prof.dr. Nicolae Cornil la Bucureti, continundu-se i
dezvoltndu-se tradiiile valoroase ale ntemeietorilor
i naintailor colii romneti de morfologie
microscopic.

1.3.Concepia actual despre biologia celular

Biologia celular sau citologia este o ramur a
tiinelor biologice, care studiaz structurile
funcionale i fenomenele biologice generale
comune tuturor celulelor, evideniind legile generale
de desfurare a proceselor vitale la nivelul celular
i molecular de organizare. Manifestndu-se ca o
tiin integrativ, ea folosete noiuni de
morfologie, biochimie molecular i celular,
fiziolgie celular i genetic molecular. Ultimul
deceniu se remarc prin intensificarea studierii
nivelului molecular al proceselor celulare. Celula
este considerat ,astfel, un microcosmos, n care
structurile i funciile interacioneaz armonios, fiind
determinate i reglate genetic, nct s se realizeze
o eficacitate maxim
Dezvoltarea biologiei celulare i moleculare se
datoreaz pe de o parte perfecionrii tehnicilor de
studiere a celulei, iar pe de alt parte progreselor
teoretice (conceptuale).

1.1 Repere istorice n evoluia cunotiinelor despre

celule i esuturi
Descoperirea celulei a fost posibil dup inventarea
microscopului n anul 1590 de ctre doi frai olandezi
HANS i ZACHARIAS JENSSEN. n anul 1665, ROBERT
HOOKE (1635-1703), fizician englez a observat cu
ajutorul microscopului, ntr-o bucat subire de plut, o
serie de caviti mici pe care le-a denumit celule ( de la
latinescul cella = cmru). Mai trziu (1674), A. van
LEEUWENHOEK (1632-1723) descoper mai multe tipuri
de celule libere (protiste, globulele roii) , iar HAM
LUDWIG (1650-1723) a descoperit spermatozoizii, n
1677. Tot n secolul al XVII-lea, MARCELLO MALPIGHI
(1628-1694) a descris pentru prima dat capilarele
sanguine n peritoneul de broasc i le-a denumit astfel
dup latinescul "capillus", care nseamn fir de pr.
Totodat, Malpighi a mai descoperit glomerulii renali,
stratul intermediar al epidermului, dar nu i-a dat sema
c celula este unitatea de baz a lumii vii. Olandezul
REGNIER de GRAAF (1641-1693) a descoperit foliculii
ovarieni, n anul 1672.

La sfritul secolului al XVIII-lea, FRANCOIS MARIE

XAVIER BICHAT (1771-1802) a descris i a introdus
noiunea de esut, individualiznd 21 tipuri de esuturi i
descriind n mod magistral esutul osos, cartilaginos i
muscular.Pentru descoperirile sale este considerat
printele histologiei.

Un moment crucial n dezvoltarea cunotiinelor

despre celule l-a avut cristalizarea teoriei celulare pe
baza cercettilor i generalizrilor efectuate de
botanistul MATHIAS JACOB SCHLEIDEN (1804-1880) i
de zoologul THEODOR SCHWANN (1810-1882). Ei au
artat c celula nu este goal,ci conine un "utricul
azotat", cu caracter reticular, ce se formeaz din
citoblastem.
Teoria celular, elaborat de ei, susinea c: 1corpul tuturor plantelor i animalelor este format din
celule; 2- celulele au o via proprie, caracteristic
fiecrei celule; 3- viaa individual a celulelor este
influenat de viaa n ansamblu a organismului.
Mai trziu, RUDOLPH VIRCHOW (1821-1902) a
completat i mbuntit teoria celular, susinnd
c: 1) "Omnis cellula e cellula" -toate celulele provin
din celule preexistente, negnd n acest fel generaia
spontan din citoblastem; 2) "Omnis vivum ex ovo" tot ce este viu provine din diviziunea i creterea unui
ou fecundat, rezultat din contopirea a dou celule
diferite, ovulul i spermatozoidul; 3) n afara
celulelor nu exist via, iar organismul este o
confederaie de celule.

Microscopul optic modern a aprut n a doua

jumtate a secolului a XIX-lea ca urmare a contribuiei
unor fizicieni, printre care se disting doi germani,
mecanicul KARL ZEISS (1816-1888) i profesorul
ERNEST ABBE (1840-1905).
Primul microscop electronic a fost pus la punct
de germanii G.A. KAUSCHE i H. RUSKA n 1939, cnd
au reuit s observe i s fotografieze un virus. n
paralel cu perfecionarea microscopului optic,s-au pus
la punct tehnicile de colorare i impregnare cu
substane de contrast a componentelor celulare, n
acest domeniu remarcndu-se germanii G.H.
HOFMANN, R. HEIDENHEIM, C.WEIGERT, R. FEULGEN,
A. PAPPEMHEIM, P.EHRLICH, G.MANN, danezii M.G.
GRAM, italianul C. GOLGI, spaniolul RAMON Y.CAJAL,
romnii V.BABE, G.LEVADITI, D.VOINOV i alii.
n secolul XX, histochimia i histoenzimologia
modern au fost fondate i ilustrate de personaliti
ca: R. FEULGEN, J.VERNE, J.BRACHET, G.GMRI, A.
SELIGMAN, A.C.PEARSE i alii.

1.2. Contribuii romneti la studiul celulei i la dezvoltarea

histologiei
Constituirea unei discipline de histologie de sine stttoare n
nvmntul medical din Romnia s-a realizat n anul 1873, la Iai de
ctre profesorul LEON SCULLY (1853-1912) i n anul 1881 la Bucureti de
ctre profesorul Mihail PETRINI de GALATZ (1846-1926), elev a lui LOUISANTOINE RANVIER (1835-1922), prin separarea histologiei de anatomie.
nainte de aceste date, n 1839, NICOLAE KRETZULESCU (1812-1900) i-a
susinut teza de doctorat privind structura microscopic a dinilor i
cristalinului, iar din 1859 ADOLF LUDOVIC FIALLA (1831-1910) a predat
un curs de Anatomia microscopic i histologie, fiind primul profesor de
histologie la coala de medicin din Bucureti, ctitorit de CAROL DAVILA
(1828-1884).
La Facultatea de Medicin Veterinar din Bucureti, n anul
1883,histologia figura printre obiectele de studiu ale anului I, fiind predat
de profesorul Constantin Gavrilescu pn n anul 1899, iar n continuare
de profesorul Ion Athanasiu, n paralel fiziologia animal. Din 1905 pn
n 1923, cursul de histologie a fost predat de profesorul Ion Drgoi, elev al
lui Ion Athanasiu, mpreun cu care a efectuat cercetri remarcabile
privind histofiziologia esutului muscular, descriind sarcolema i tubii " T ".
ntre anii 1923-1941, profesorul Drgoi a predat histologia la Facultatea de
medicin uman din Cluj. Dup 1923, la conducerea disciplinei, s-au
succedat profesorii: G. NIKITA (ntre anii 1923-1928), I.T.NICULESCU (ntre
1928-1932)- un strlucit elev al lui G. MARINESCU (fondatorul
neurohistologiei romneti), ILIE BDESCU (ntre 1932-1848), ILIE
DICULESCU (ntre 1946-1962), V.CIUREA(ntre anii 1948-1952) i
GH.BORDA ( ntre anii 1962 -1985).

Profesorul ILIE DICULESCU, absolvent al

Facultii de Medicin Veterinar, a condus din anul
1962 disciplina de Citologie i histologie, de la
Facultatea de medicin uman din Bucureti,
impunndu-se ca un creator al colii de
histoenzimologie i citochimie ultrastructural. Un
merit deosebit n dezvoltarea biologiei celulare
revine savatului de origine romn, GEORGE EMIL
PALADE (1912 prezent), laureat al premiului Nobel
pentru medicin (n anul 1974), considerat
principalul cartograf al celulei.
n prezent, disciplinele de Biologie celular,
histologie i embriologie sunt predate la Facultile
de medicin veterinar din ar de: prof.dr. Corneliu
Cotea la Iai, prof.dr. I Claudiu Lizovschi-Cheleanu la
Cluj-Napoca, prof.dr. Mariana incai la Timioara i
prof.dr. Nicolae Cornil la Bucureti, continundu-se
i dezvoltndu-se tradiiile valoroase ale
ntemeietorilor i naintailor colii romneti de
morfologie microscopic

1.4.1.Tehnicile de studiere a celulei.

Sunt reprezentate de tehnici de microscopie (optic sau
electronic) i de tehnici de cercetare ( fizice, biochimice,
debiologie celular i molecular , etc).
1.4.1. Tehnicile de microscopie optic i
electronic
Microscopia optic folosete fotonii pentru
realizarea imaginilor, asigurnd mriri de
1500-3000 de ori (n mod obinuit de
1400 ori), cu o putere de rezoluie
de 0,2 micrometrii (m).(Fig.1.1)

Fig.1.1 Formarea imaginii n microscopul optic

1.Sursa de lumin; 2.Dispozitiv de uniformizare i dozare a luminii;3.Condensor;4.Preparat;5.Lentil
obictiv;6.Imagine format n obiectiv;7.Lentil ocular;8.Imagine final.

Microscopia n contrast de faz, permite

examinarea celulelor vii. Utilizeaz: microscoape cu
interferen, pentru aprecierea cantitativ a masei
unor componente tisulare; - microscoape cu
interferen difereniat, pentru studierea suprafeei
celulelor.
Microscopia de fluorescen evideniaz
moleculele cu fluorescen natural ( vitamina A,
catecolaminele) sau fluorescena indus. Se
folosete n imunohistochimie pentru detectarea
reaciei antigen-anticorp.
Microscopia cu ultraviolete folosete lumina
ultraviolet pentru detectarea unor amino acizi sau a
acizilor nucleici.
Microscopia cu lumin polarizat pentru
studierea formaiunilor cristaline.

Microscopul confocal
Permite obinerea de imagini tridimensionale ale
structurilor din preparatele histologice.
Principiul de funcionare este asemntor cu cel
al microscopului de fluorescen. Sursa de lumin este
reprezentat de un laser a crei raz trece printr-o
diafragm cu deschidere punctiform, dup care este
reflectat de o oglind mobil spre lentila obiectiv.
Preparatul este situat la nivelul distanei focale a
obiectivului. In urma aciunii razei laser asupra
preparatului, acesta emite un fascicul de lumin
(eventual fluorescent) care este colectat de lentila
obiectiv i dirijat spre diafragma punctiform a
detectorului , situat confocal ( n focarul lentilei
obiectiv, opus focarului n care este situat preparatul),
rezultnd o imagine final, care este captat de un
detector (similar ocularului).

Razele luminoase emise de formaiuni situate n

alte planuri nu vor fi captate de detector, nct se obine
o imagine foarte"curat", neestompat de imagini ale
obiectelor situate proximal sau distal fa de planul
focal. Prin deplasarea n plan vertical a focarului lentilei
obiectiv, se pot obine imagini ale unor planuri
succesive, ca profunzime, realiznd "seciuni optice",
fr a fi nevoie de o resecionare a preparatului.
Imaginile planurilor succesive sunt stocate n memoria
unui computer, care le "ansambleaz" obinnd o
imagine tridimensional a preparatului examinat.

Microscopul confocal permite examinatorului s

obin "tomografia" unei structuri histologice, fiind
folosit pentru studirea citoscheletului, a dispunerii
cromozomilor n nucleu,etc. Dac este dotat cu lumin
flurescent se pot obine imagini confocale
fluorescente.
Microscopul electronic se bazeaz pe
utilizarea fluxurilor de electroni pentru realizarea
imaginilor, permind obinerea unor grosismente
teoretice mai puternice de 10.000 de ori dect n
microscopia optic. Se ajunge la o putere de
rezoluie egal cu 0,1 nanometri (nm).Exist
dou tipuri principale de microscoape electronice:
- microscopul electronic de transmisie
- microscopul electronic de baleaj (scanning).(Fig.1.2)

Fig.1.2 Formarea imaginii n microscopul electronic

1-Catod; 2-Anod; 3-Lentila (bobina)condensator;4-Preparatul; 5-Lentila

(bobina) obiectiv; 6-Imaginea primar; 7-Lentila (bobina) de proiecie; 8-Imagine final.

Microscopul electronic de transmisie (Transmission

electron microscope - TEM) poate fi: - convenional

(CTEM), cnd diferena de potenial ajunge pn la
100.000 voli; sau - de nalt voltaj (HVEM), cnd
diferena de potenial ajunga la 800.000 voli.

Componentele eseniale ale unui

microscop electronic de transmisie sunt:

Catodul sau sursa de electroni, reprezentat de un

filament de tungsten nclzit.

Anodul, care relizeaz diferena de

potenial.

Un sistem de electromagnei, care acioneaz ca

nite lentile condensator, lentile-obiectiv i lentile
de proiecie.

Un suport pentru preparat sau portobiect,

reprezentat de o gril metalic fin pe care se
fixeaz seciunea de esut, inclus n mas plastic.

Un ecran pe care se capteaz imaginea.

Un dispozitiv de fotografiere a imaginii.

Puterea de rezoluie este de 2 Angstromi(),

n practic ajungndu-se la 1,2 nanometri.

Fig.1.3 Formarea imaginii la microscopul de baleaj

(scanning)
1-Catod; 2-Anod; 3-Lentil (bobin) condensator; 4Bobin de scanare; 5-Preparat; 5-Detector de
electroni; 6-Amplificator electronic; 7-Ecran de
proiecie;8-Imagine final.

Ca fixatori se folosesc glutaralaldehida,

pentru constiutieni proteici i tetraoxidul de
osmiu pentru lipide i fosfolipide.
Se realizeaz seciuni de ordinul
nanometrilor cu ajutorul unor
ultramicrotoame, nzestrate cu cuite de
diamant.
Ultraseciunile sunt incluse n mase plastice
i ntise pe grile de cupru. Pentru realizarea
contrastului ntre diferite ultrastructuri se
folosesc substane precum citratul de plumb
i acetatul de uranil.

La examinare se observ c structurile cu

densitate mare disperseaz (mprtie)

electronii, aprnd de culoare nchis, n timp
ce structurile cu densitate mic, care permit
trecerea electronilor far a-i devia apar
clare.

n cazul microscoapelor electronice de nalt voltaj

( HVEM ), diferena de potenial atinge un milion de

voli. Electronii pot ptrunde prin celule ntregi sau
preparate de civa microni (cca. 2 microni). Se obine
o imagine detaliat a organizrii tridimensionale,
permindu-se vizualizarea texturii celulare interne i a
unor detalii de structur, cum arfi de exemplu
elemntele citoscheletului.

Microscopul electronic de scanning (Scanning

electron microscope SEM ) se carcterizeaz prin
faptul c electronii nu trec prin preparatul studiat, ci
mtur (terg) suprafaa acestuia, nct se va obine o
imagine tridimensional a accidentelor de suprafa.
Puterea de rezoluie este de cca. 100 Angstromi.

Cnd electronii folosii de TEM sau SEM

bombardeaz preparatul se produc radiaii X cu
lungimi de und caracteristice elementelor lovite de
electroni. Prin analiza acestor raze X cu aparate
adecvate se pot obine estimri calitative i cantitative
foarte exacte asupra elementelor cu numrul atomic
mai mare de 12.

1.4.2.Tehnici fizice .biochimice,de biologie celular i

molecular
Tehnici fizice:
- Fracionarea celulei prin centrifugare difereniat permite
obinerea n stare pur a unor componente celulare, precum complexul
Golgi, aparatul mitotic, ribozomi, etc.
O contribuie deosebit la perfecionare acestei tehnici a adus-o
G.Em.Palade care a pus la punct centrifugarea n gel de sucroz.
- Criofracturarea permite despicarea membranelor celulare
ngheate, la nivelul planului median al bistratului lipidic.
- Autoradiografia localizeaz materialul radioactiv din esut.
- Historadiografia
realizeaz o microradiografie cu raze X
a unui preparat histologic.
- Difracia razelor X, care a permis descifrarea structurii
spaiale a proteinelor i a acizilor nucleici.
- Difracia i dispersia de neutroni, prin care s-a descifrat
organizarea molecular a cromatinei.
- Rezonana magnetic nuclear de nalt rezoluie, ce se
utilizeaz pentru studierea interaciunilor moleculare n membranele
biologice.
- Rezonana magnetic n impulsuri, folosit la studiul
permeabilitii membranelor pentru ap i ioni.
- Rezonana electronic de spin, ce folosete ca markeri
specifici substane cu electroni impari care se ataeaz i evideniaz
molecule de ADN, de proteine,etc.
- Spectrofluorometria,ce permite studierea vscozitii
membranelor, difuziunea, rotaia proteinelor.

Tehnici biochimice
n biologia molecular se utilizeaz:
- Electroforeza n gel de poliacrilamid, pentru
studiiul proteinelor i acizilor nucleici.
- Marcrile bazate pe fotoafinitate a unor pri
din moleculelele integrate n structuri celulare.
- Reconstituiri de structuri i funcii celulare
din componentele purificate.
- Imunocitochimia evideniaz reaciile dintre
antigen i anticorp.
Tehnici complexe de biologie celular i
molecular
Sunt reprezentate de:
- Tehnica ADN-ului recombinat.
- Producerea de anticorpi monoclonali cu
ajutorul hibridoamelor, ce a permis descifrarea
mecanismelor care regleaz exprimarea genei.
- Sinteza artificial a genelor.
- Manipulri de gene, etc.

1.5. Progrese conceptuale.

Progresele teoretice sau conceptuale au permis

mbogirea, dezvoltarea i aprofundarea cunotiinelor

de biologie celular i molecular. Sunt reprezentate
de:

- Analiza i sinteza informaiilor obinute de

morfologia celular, biochimia i biofizica celular,
fiziologia celular, genetica molecular, imunologia
celular i molecular, virusologie,etc. n acest concept
se manifest dou tendine opuse: una de acentuare a
sintezei i alta de extindere a sferei de sintez.

- Molecularizarea informaiilor , care const n

descifrarea structurilor i funciilor pn la nivel
molecular. Acest fapt a dus la schimbarea denumirii
acestei ramuri a tiinelor biologice din "citologie
general" n "biologie celular" i apoi n "biologie
celular i molecular".

- Integrarea informaiilor obinute prin toate

metodele i de la toate nivelele ntr-un tot unitar, nct
biologia celular i molecular studiaz n mod complex
i complet aspectele morfofuncionale ale celululelor,
observabile la microscopul optic, ultrastructurile
relevate de microscopul electronic, organizarea i
fiziologia molecular, realiznd o imagine exhaustiv a
nivelului celular de organizare a materiei vii.

2. CELULA CA SISTEM BIOLOGIC

Prin sistem biologic se nelege un ansamblu de

elemente (componente) interconectate ntr-o

formaiune complex, relativ stabil, formaiune care
se comport ca un ntreg, cu proprieti i funcii
distincte cantitativ i calitativ de proprietile
elementelor componente.

Exist sisteme lipsite de via (abiotice),

precum particulele subatomice, atomii, moleculele i
sisteme dotate cu via ( biotice )cum ar fi celulele,
esuturile, organele, organismul, populaia, biocenoza
i biosfera.

Celula (cellula) este primul sistem biologic care

manifest cea mai important caracteristic a
materiei vii - capacitatea de auto reproducere.
Formele de "via molecular", identificate pn n
prezent, ca "prionii" (microorganisme patogene,
formate din particule proteice, far acizi nucleici) i
virusurile (microorganisme ce conin acizi nucleici i
proteine) sunt capabile s se reproduc numai n
interiorul celulei.

Celula, ca sistem, prezint urmtoarele

caracteristici:

Este un sistem deschis, pentru c are n

permanen schimburi de energie i substan cu
mediul extracelular.

Are un caracter istoric, aprnd la un anumit

moment al evuluiei materiei vii i putnd s dispar,
atunci cnd materia vie i va produce o alt form
mai eficient de organizare dect celula.

Are caracter informaional, deoarece

recepioneaz, acumuleaz, prelucreaz i transmite
informaii cu ajutorul codului genetic.

Prezint trei categorii de programe, legate de

capacitile sale structurale i funcionale: aprogramul " pentru sine", ce asigur autoconservarea
celulei ( de expl. n culturile de celule); b- programe
ale sistemelor componente, ca de exemplu
programele organitelor sau ale complexelor
moleculare; i c- programe superioare care asigur
existena sistemelor superioare ( esut, organ,
organism).

 Echilibrul dinamic, ce se manifest printr-o

"pendulare" continu, fa de o stare
morfofuncional optim, stabil.
Autoreglarea sau "feed back"-ul, prin care i
controleaz procesele interne, n funcie de relaiile
cu mediul prin mecanisme de tip cibernetic.
Heterogenitatea intern este nsuirea de a fi
alctuit din elemente componente mai mult sau
mai puin diferite ( de expl. mitocondrii, ribozomi,
microfilamente, microtubului,etc.)
Integralitatea, prin care celula ca sistem, nu se
reduce la suma nsuirilor elementelor componente,
ci prezint nsuiri noi (structurale i funcionale) pe
care nu le au aceste elemente considerate izolat.
Aceast nuire permite desfurarea funciilor
biologice fundamentale: metabolismul,
reproducerea, adaptarea, meninerea strii de
stabilitatea difereniat,etc.

Pe baza acestor caracteristici, concepia

actual despre celul o definete ca fiind: unitatea
elementar a lumii vii, produs al evoluiei, cu
structur complex, n relaie de autonomie i
echilibru dinamic cu mediul nconjurtor, avnd ca
proprieti eseniale metabolismul,
autoreproducerea, creterea i dezvoltarea.

2.1. Arhetipurile celulare

Exist dou arhetipuri (arhetip = model primar, dup

G.E.Palade) celulare: procariotele

(procariot =prenucleat, fr
nucleu distinct) i eucariotele (eukariot= cu nucleu distinct).
2.1.1. Procariotele
Sunt reprezentate, n principal, de bacterii i de algele albastre
verzi (denumite i cianobacterii).
Ele sunt mai mici (1-10 m) dect celulele eucariote i lipsite de
membrane intracelulare.

Organitele celulare sunt puine ( numai ribozomi) sau absente.

Nucleul nu apare distinct, genomul (totalitatea genelor)

nefiind separat de citoplasm.

Prezint un cromozom unic, dispus n citoplasm i

reprezentat de un ADn circular neconjugat cu proteine. ARN-ul i
proteinele sunt sintetizate n acelai compartiment, n citoplasm.
Nu au aparat mitotic, deoarece se nmulesc prin sciziparitate.
i realizeaz locomoia prin flageli simpli.
Au metabolism aerob sau anaerob.

Sunt delimitate de o membran plasmatic, ce trimite

prelungiri endocelulare, denumite mezozomi, dublat la exterior de
un perete celular.
Nu prezint citoschelet, nu au cureni citoplasmatici, iar endocitoza
i exocitoza sunt absente.

De obicei sunt monocelulare.

2.1.2.Eucariotele
Sunt reprezentate de protiste, fungi, plante i animale.
Au dimesiuni mai mari (5-100 m) dect procariotele.
Prezint un sistem complicat de membrane

intracelulare, care delimiteaz unele componenete

intracelulare (nucleul) i unele organite (mitocondriile,
reticulul endoplasmic,complexul Golgi,etc).
Au un nucleu distinct, n care este situat genomul, ce
cuprinde mai muli cromozomi. Molecula de ADn este
foarte lung i conjugat cu proteine.
ARN-ul este sintetizat i procesat n nucleu, n timp ce
proteinele sunt sintetizate n citoplasm.
Au citoschelet compus din proteine filamentoase,
cureni citoplasmatici i desfoar procese de
endocitoz i exocitoz.
Prezint aparat mitotic.Se divid prin mitoz i meioz.

2.2 Morfologia general a celulelor eucariote

Dimensiunile celulelor eucariote sunt extrem de variate. Ele se

exprim n urmtoarele uniti de msur: micrometrul, nanometrul i

angstromul.
Unitile de msur folosite n morfologia microscopic

Limita practic de rezoluie a ochiului uman este de cca. 0,1

mm, a microscopului optic de 0,2m, iar a celui electronic de 2
angstromi( ).
Pentru fiecare categorie de celule, dimensiunile sunt relativ
constante, indiferent de specie sau mrimea organului. Diferenele de
greutate a aceluiai organ la specii diferite sunt generate de numrul
de celule pe care l conin i nu de volumul celulelor.
Limita practic de rezoluie a ochiului uman este de cca. 0,1 mm, a
microscopului optic de 0,2m, iar a celui electronic de 2
angstromi( ).

 Pentru fiecare categorie de celule, dimensiunile

sunt relativ constante, indiferent de specie sau

mrimea organului. Diferenele de greutate a
aceluiai organ la specii diferite sunt generate
de numrul de celule pe care l conin i nu de
volumul celulelor.

De exemplu, nefrocitele i celulele musculare

cardiace au dimensiuni apropiate la hominide,

ecvine i canide.

Dimensiunile medii ale diametrului celulelor se ncadreaz ntre

10-30 m, dar n organismul animalelor exist i celule mai mici,

precum: neuronii din stratul molecular al scoarei cerebrale ( de
cca.4-4 m), eritrocitele (5-7 m), precum i celule ce ajung la
dimesiuni foarte mari, un exemplu constituindu-l ovulul ce atinge un
diametru de 150-200 m la mamifere, 3,5 cm la psri i 10 cm la
stru. Neuronii motori din coarnele ventrale ale mduvei spinrii au
un corp ce atinge un diametru de 200 m, iar dac se iau n
considerare i prelungirile ajung la o lungime de 1-1,5 m sau mai
mult, n funcie de talia animalului. Fibra muscular striat are un
diametru de ordinul micronilor, dar lungimea este foarte variat, de la
1 la 12 cm.

Volumul celulelor variaz n limite foarte largi de la 200

la15000 micrometri cubi (m3), menndu-se constant pentru un
anumit tip de celul, independent de mrimea organului, aspect
cunoscut sub denumirea de "legea constanei volumului".

Vrsta i funcia determin variaii n mrimea celulelor. Se

observ o reducere a volumului celular n cursul embriogenezei
timpurii, n cursul mbtrnirii i o cretere volumetric n timpul
dezvoltrii postnatale. Se stabilete un raport nucleo/citoplasmatic
optim, un raport al suprafeei celulei fa de volum i un raport ntre
metabolism i volumul celulei.

Masa (greutatea) unei celule este de aproximativ 10-12 g, iar

cea a unui ovocit uman de 10 -8 g.

Fig.2.2. Forma celulelor

1-Ovula; 2-Hematie de mamifer; 3-Eritrocit de
pasre; 4-Neutrofil de mamifer; 5-Spermatozoid; 6-Celule
poliedrice;7-Celule pavimentoase; 8-Celule cubice; 9-Leiocit;
10-Neuron piramidal; 11-Neuron piriform; 12-Celul
mezenchimal; 13-Fibroblast;14-Melanocit,15-Adipocit alb;
16-Histiocit; 17-Celul prismatic cu platou striat; 18-Celul
caliciform.

Forma celulelor, inial sferic se modific n cursul

diferenierii i maturrii celulelor. Forma celulelor este

controlat att de factori externi ca presiunea i
vscozitatea mediului, ct i de factori interni ca
activitatea funcional, vrsta, vscozitatea citoplasmei,
structura intern i caracteristicile suprafeei.(Fig.2.2 )

Forma celulelor se adapteaz la funcie,

respectndu-se o lege general a biologiei, conform
creia se obine maximum de randament funcional cu
minimum de cheltuieli materiale i
energetice.Astfel,celulele contractile sunt fuziforme sau
cilindrice, iar celulele specializate n conductibilitate
prezint numeroase prelungiri.

Numrul celulelor este extrem de mare, ajungnd

la ordinul de milioane de miliarde (1014).
Celulele sanguine reprezint populaia cea mai
numeroas, reprezentat de mai multe zeci de miliarde.
Numrul hepatocitelor i al neuronilor este de circa 100
de miliarde, iar cel al nevrogliilor este de aproximativ 10
ori mai mare dect numrul neuronilor.

Durata vieii celulei sau ciclul celular reprezint

intervalul de la apariia unei celule pn i termin
propria sa diviziune.
Variaz de la 10-20 minute pn la 109 minute.
Celulele bacteriene triesc cteva zeci de minute,
celulele epiteliale 1-2 zile, hematiile 127 zile, iar unele
celule musculare i nervoase toat viaa individului.

La om, n fiecare secund au loc peste 4 milioane

de diviziuni celulare, ntr-o zi au loc cca. 350 bilioane

diviziuni, iar ntr-un an 1014 diviziuni, numr egal
practic cu numrul total al celulelor ce alctuiesc
corpul omului adult.

2.3. Compartimentarea celulelor eucariote

Celula eucariot prezint trei componenete

principale: membrana, nucleul i citoplasma.

(Fig.2.3)

Membrana poate fi situtat la periferie,

realiznd pe de o parte delimitarea celulei de mediul
extracelular, sau poate fi dispus n citoplasm,
unde formeaz un sistem de membrane
intracelulare cu o suprafa deosebit de activ
biologic, de 10-20 ori mai mare dect cea a
membranei periferice.

Fig.2.3. Schema unei celule eucariote ideale

1-Membrana celular;
2-Nucleul;
3-Citoplasm;
4-Lizozom primar;
5-Poliribozomi liberi;
6-Reticul endoplasmic rugos;
7-Reticul endoplasmic neted;
8-Complex Golgi;
9-Microfilamente;
10-Microtubuli;
11-Centrioli;
12-Corpuscul bazal;
13-Microvili;
14-Cil;
15Fagozom;
16-Peroxizom;
17-Caveol acoperit;
19-Nucleoli;
20-eterocromatin;
21Cistern perinuclear;
22-Por nuclear;
23-Mitocondrie;
24-Corp rezidual;
25-Granule de secreie;
26-Pictur de lipide;
27-Granule de glicogen;
28-Pseudopode.

Membranele intracelulare, endomembranele

sau citomembranele difer ntre ele prin

structur, compoziie chimic i funcie.
Ele mpart celula n dou compartimente:
compartimentul matriceal sau plasmatic "P" i
compartimentul intracisternal sau "E". Exist i
un compartiment secundar sau de tip "C",
reprezentat de matricea mitocondrial i a
cloroplastelor.
Totodat endomembranele delimiteaz
nucleul i unele organite celulare (lizozomii,
reticulul endoplasmic,complexul Golgi). Exist
i organite nedelimitate de membrane
(ribozomii,centriolii, corpusculii bazali,
microfilamentele, filamentele intermediare i
microtubulii).

3. Membranele celulare

Membranele celulare (membrana celullaris)

sunt structuri moleculare complexe care marcheaz

limita celulei sau a unui teritoriu intracelular.

Exist trei categorii principale de membrane

celulare:

1.Membrana plasmatic sau plasmalema, ce

confer individualitate celulei i particip la
interaciunile dintre celule sau la cele cu mediul
extracelular.

2.Citomembranele sau endomembranele,

reprezentate de membrana nucleului, membranele
reticulului endoplasmic, membranele complexului
Golgi, membranele mitocondriilor, lizozomilor i
peroxizomilor.

3. Membranele speciale reprezentate de

membranele tecilor de mielin i de membranele
discurilor din segmentul extern al celulelor vizuale
din retin.

3.1 Organizarea molecular a membranelor

n evoluia cunotiinelor despre

organizarea molecular a membranelor se

disting mai multe modele: iniial,
paucimolecular, unit, mozaicul fluid i
modelul actual.

Fig.3.1 Modelul paucimolecular.

1-Bistratul lipidic; 2-Stratul proteic extern;

3-Stratul proteic intern.

Modelul iniial (elaborat de OVERTON n
1895) a sugerat prezena lipidelor n
membranele celulare, observnd c solvenii
organici difuzeaz mai rapid prin membrane
dect n ap. Lipidele din membrane sunt
dispuse n strat dublu ( n bistrat ), pentru c
suprafaa filmului lipidic din hematii este
dubl fa de suprafaa acestora. ( dup
GRTER i GRENDEL 1925 )

Modelul paucimolecular a fost elaborat ( n 1930

de DANIELLI i DAVSON ) , dup msurarea

tensiunii superficiale a membranelor celulare,
cnd au gsit aproximativ o din/cm2 , fa de 5
dine ct reieea din calcule.
Asfel, ei au dedus c bistratul lipidic (stratul lipidic
dublu) este tapetat pe ambele fee de straturi de
proteine, care reduc tensiunea superficial. Totodat
au demonstrat experimental acest fapt, adugnd
proteine, ce au produs reducerea tensiunii
superficiale. Tot ei au elaborat modelul
paucimolecular (paucus = puin numeros), dup
care membranele celulare au un centru lipoid
"lamina intermedia", ( format din fosfolipide,
dispuse n strat dublu, cu capetele polare orientate
spre exterior ), tapetat cu proteine, care formeaz
o lamin extern i alta intern.(Fig.3.1)

Modelul "UNIT" a fost elaborat ( de

ROBERTSON, ntre 1958-1960 ), dup cercetri

efectuate la microscopul electronic ( cu
grosisment de 100.000), efectuate pe
membrana tecii de mielin. Dup acest model,
membranele celulare au o ultrastructur
trilaminar, prezentnd dou benzi dense (de
2,5 nm), ce delimiteaz ntre ele o band clar (
de 3 nm), format dintr-un ax lipidic
hidrofobAcest model confirm modele
anterioare i le dezvolt, adugnd dou noi
concepte: - universalitatea bistratului lipidic i asimetria chimic, dup care glucidele sunt
ataate numai pe faa extern, lipsind pe faa
intern. Modelul este incomplet pentru c
ignor dinamismul moleculelor componente.
(Fig.3.2).

Modelul"mozaicului fluid", (elaborat de

SINGER i NICOLSON n 1972 ) susine c

moleculele componente ( de lipide i de
protide) se mic n mod ntmpltor n
bistratul lipidic.
Cercetrile ulterioare au artat c micrile
moleculelor sunt controlate de citoschelet i
sunt limitate la anumite poriuni ale suprafeei
membranei. Exist i zone ale feei externe a
bistratului lipidic neacoperite de proteine.

Modelul actual susine c: - bistratul lipidic

este asimetric, fluid i reprezint axul

ntregului edificiu molecular al membranelor; pe feele hidrofile, proteinele sunt distribuite
asimetric, n aranjamente caracteristice.

3.2. Ultrastructura membranei periferice

Membrana periferic are trei componente

ultrastructurale: plasmalema,
glicolema,citoscheletul membranei.

Glicolema

Componenta
intern

20 nm

Puin dens
la
fluxul
de
elecron
i

Conine:
Galactoza
Galactozamina
Manoza,
Fucoza,
Glucoza

(50 nm)

Componenta
extern

30 nm

Mai dens
la
fluxul
de
electro
ni

Glucozamina,
Acidul sialic

2,5

Band
dens
la
fluxul
de
elecron
i

Conine:
Gruprile polare
hidrofile ale
fosfolipidelor
Proteine extriseci

Lamina externa

n
m

Membrana
celular
periferic

Plasmalema
(7- 8 nm)

Lamina
intermedia

3 nm

Band clar
la
fluxul
de
electro
ni

Conine:
Fosfolipide 70%
Colesterol-25%
Glicolipide-5%

Lamina interna

2,5

Band
dens
la
fluxul
de
electro
ni

Conine:
Gruprile polare
hidrofile ale
fosfolipidelor
Proteine
extrinseci

n
m

Citoscheletul

5-9

Conine:

3.2.1. Plasmalema

Plasmalema (plasmalemma) reprezint structura de baz a

tuturor membranelor celulare ( periferice sau endomembrane), fiind
alctuit din bistratul lipidic asociat cu proteine. Are o grosime de
cca. 7,5 nm.

La un
grosisment redus (de 10.000 ori ) apare ca o linie
unic elecronodens. La o mrire de 100.000 ori, dac planul
seciunii a czut perpendicular pe membran, plasmalema prezint
un aspect caracteristic, trilaminar, cu dou benzi dense (de 2,5 nm),
separate de o band clar ( de 3 nm).
Endomembranele au ,n general, acelai aspect
electronomicroscopic, respectnd modelul unit. (Fig.3.3)
Banda luminoas, clar (lamina intermedia) corespunde radicalilor
de acizi grai hidrofobi din fosfolipidele bistratului, iar benzile dense
(lamina externa et interna) cuprind gruprile polare hidrofile ale

fosfolipidelor i parial proteinele asociate membranei.

Fig.3.3 Componentele membranei celulare periferice

I-Glicolema;
II-Plasmalema;
III-Citoscheletul membranei

Compoziia chimic a plasmalemei cuprinde: lipide complexe,

proteine i glucide.

LIPIDELE sunt coninute n bistratul lipidic, fiind reprezentate de

fosfolipide (70%), colesterol (25%) i glicolipide (5%).

Fig.3.4. Tendina de organizare a moleculelor de fosfolipide

A-Monostrat; B,C- Micelii
1-Lauri de acizi grai; 2-Grup polar; 3-Ap; 4-Aer

Fosfolipidele i glicolipidele sunt molecule complexe cu

caracter amfofil (=amfipatice=bimodale), prezentnd un

"cap" hidrofil (sau grupare polar) i o "coad"hidrofob, ce
cuprinde fragmente de acizi grai esterificai.Ele au tendina
de a se organiza n pelicule sau micelii, deoarece cozile
trebuie s se dispun n afara contactului cu apa.Meninerea
moleculelor n pelicule sau micelii se realizeaz prin legturi
hidrofobe ce nu implic cheltuieli de energie.

n cazul fosfolipidelor i glicolipidelor din membran,

forma cea mai stabil a miceliilor este reprezentat de stratul
lipidic dublu n care gruprile polare sunt dispuse la exterior
n contact cu apa, iar lanul de acizi grai se afl la interior.
Asfel, se formeaz un bistrat sau continuum lipidic.

Fosfolipidele din plasmalem sunt reprezentate de

fosfogliceride (ca de exemplu: fosfatidilcolin,
fosfatidiletanolamina, fosfatidilserina, fosfatidilinozitolul) i
de sfingolipide ( dintre care cea mai rspdit este
sfingomielina. Molecula de fosfatidilcolin, denumit i
lecitin, are aspectul unui "cui", n care "capul" (alctuit din
radicali de colin i fosfat) este hidrofil, poart sarcini
electrice i este numit grup polar. Radicalii de acizi grai sunt
hidrofobi i formeaz segmentul apolar al moleculei.

Glicolipidele pot fi simple ( de expl. cerebrozidele)

sau complexe (de expl.gangliozidele). Au asarcin

electric negativ. Gangliozidele conin unul sau mai
multi radicali de acid sialic (numit i acid Nacetilneuraminic sau NANA) care le confer sarcin
electric negativ.

ncrctura electric negativ a suprafeelor

celulare este conferit n mare parte de gruprile
polare ale fosfolipidelor, ale glicoproteinelor sulfatate
i ndeosebi de radicalii carboxilici ai acidului sialic.

Colesterolul se gsete n proporie mai mare n

membranele la care predomin funcia de barier, dar

scade n membranele intracelulare.

Exist o asimetrie n dispunerea lipidelor n

bistratul membranei eritrocitare. Astfel,glicolipidele se
gsesc numai n stratul extern, la nivelul cruia este
abundent i colesterolul. n stratul intern al bistratului
lipidic sunt mai frecveni acizii grai nesaturai, n timp
ce n stratul extern se ntlnesc n proporie mai mare
acizii grai saturai cu lanuri lungi.

Lipidele sunt repartizate neuniform pe suprafaa membranei

celulare, putndu-se grupa n "petice" sau "calote", cu implicaii

funcionale speciale, ndeplinind rol de receptori.

Fluiditatea lipidelor. La temperatura corpului, toate lipidele din

membran se gsesc n stare fluid. Ele pot executa dou tipuri de
micri: 1- micri n interiorul unei molecule, precum micri ale
atomilor de carbon n lanurile de acizi grai i n gruparea polar; 2micri ale ntregii molecule, ce pot fi: - de translaie sau de difuziune
lateral; - de rotaie n jurul axei longitudinale a moleculei i cmicri de difuziune transversal (flip-flop).(Fig.3.5)

Fig.3.5.Micrile lipidelor n
bistrat
1-Gruparea hidrofil; 2-Gruparea hidrofob; 3-Difuziune lateral; 4-Rotaie; 5-Flip-flop;6-Flexie.

Moleculele de lipide se deplaseaz mai uor prin micri laterale n

acelai strat i trec foarte greudintr-un strat n altul.

Unele lipide (expl. cardiolipina) sunt capabile, n prezena

ionilor de calciu, s se detaeze din straturile lipidice i s se dispun
n form hexagonal, n cilindri de lipide, care delimiteaz canale, ce
permit schimburi selective prin bistratul lipidic.

PROTEINELE plasmalemei formeaz dou straturi asimetrice,

ce tapeteaz bistratul lipidic sau pot traversa bistratul lipidic, unde
execut micri de translaie (difuziune lateral) i de rotaie.
(Fig.3.6).
Prin electroforez n gel de poliacrilamid au fost identificate 15
proteine majore, cu greuti moleculare ntre 15.000-250.000 daltoni.
Trei din aceste proteine (spectrina, glicoforina i proteina benzii 3)
ocup mai mult de 60% din greutatea proteinelor membranare.
Fig.3.6.Formarea porilor
hidrofili
1-Lipide - grupri hihrofobe;
2-Lipide - grupri hidrofile;
3-Proteine;
4-Por hidrofil.

S-au identificat dou grupuri de proteine ( prin metode de cogelare-

fracionare i fracionare - purificare ):

-a) proteine transmembranare (intriseci sau integrale),

cuprinse n bistratul lipidic ca nite cuburi de ghea, legate hidrofil i
hidrofob de lipide. Se extrag foarte greu i servesc ca dispozitive de
recepie-transducie.

-b) proteine membranare periferice (sau extrinseci), situate

de o parte i de alta a bistratului lipidic, de care se ataeaz prin
slabe legturi hidrofile.(Fig.3.7)

Fig.3.7. Dispunerea proteinelor n

plasmalem
1-Bistratul lipidic;
2- Proteine extrinseci externe;
3-Proteine extrinseci interne;

Proteinele extrinseci sunt distribuite pe o

fa sau alta a bistratului lipidic i i se leag

de capatele hidrofile ale lipidelor.
Sunt mai numeroase pe fa intern unde
particip la realizarea citoscheletului
membranei celulare.

Proteinele de pe faa extern a bistratului

lipidic sunt glicoproteine i se prelungesc pe
distane mai scurte sau mai lungi n glicolem,
atand pe lanul lor polipeptidic fragmente
de oligozaharide.
Compoziia, ordinea moleculelor i
dispunerea lanurilor de de oligozaharide fa
de proteinele transmembranare determin
specificitatea funcional i identitatea fiecrui
tip de celule.

 3.2.2. Glicolema sau glicocalixul

Glucidele plasmalemei sunt reprezentate de hexoze,

hexozamine i acid sialic. Fragmentele de acid sialic ocup ntotdeuna

extremitile periferice ale lanurilor de oligozaharide i confer
sarcin electric negativ suprafeei celulelor eucariote.(Fig.3.8)

Fig.3.8. Organizarea glicocalixului

A-Glicocalix;
B-Bistratul lipidic.
1-Rest glucidic;
2-Glicolipid;
3-Glicoprotein adsorbit;
4-Protein transmembranar

Lanurile de oligozaharide sunt ancorate pe versantul extern al

plasmalemei, formnd un nveli al suprafeei celulare, numit
glicocalix (nveli dulce) sau glicolem. Nu exist o delimitare net
ntre glicocalix i substana vie din spaiul extracelular, cunoscut sub
numele de matrice extracelular.

Glicolema sau glicocalixul (glicocalyx) este o

componenta extern, de natur glicoproteic a

membranei celulare periferice (cu grosimea medie de
50 nm) .

Glicocalixul prezint dou zone: - o zon intern, denumit

i nveli de suprafa, mai puin dens, (cu grosimea de 20 nm) i
o zon extern mai dens ( cu grosimea de 30 nm).
Grosimea glicocalixului apare variat. Este mult redus la
celulele n culturi; - subiat (pna la 20-30 nm), cnd ocup spaiul
dintre celulele nvecinate; - crescut (pn la 50 nm) la celulele
libere sau pe polul apical al celulelor intestinale.
Din punct de vedere chimic, glicocalixul este alctuit dintr-o
estur delicat de de lanuri proteice, pe care sunt ancorate
fragmente de glucide.
Dintre monozaharide, n glicoproteinele i glicolipidele de la
nivelul membranelor i din glicocalix, cele mai importante sunt:
galactoza, galactozamina, manoza,fucoza, glucoza, glucozamina i
acidul sialic.
Raportul strns, de continuitate, dintre glicolem i
plasmalem se datoreaz glicolipidelor i glicoproteinelor
componente, nveliul de suprafa devennd parte integrant a
membranei celulare.
Glicocalixul confer individualitate biochimic celulei,
comportndu-se ca o "carte de identitate a celulei", datorit
numeroaselor variante moleculare pe care le realizeaz cu ajutorul
monozaharidelor componenete. Intre moleculele membranei,
oligozaharidele induc o variabilitate periferic pronunat, n
contrast cu varibilitatea redus a lanului polipeptidc. Astfel, trei
aminoacizi diferii pot da natere la ase tripeptide, n timp ce trei
monozaharide pot genera 1056 trizaharide diferite.

Funciile glicocalixului sunt :

Particip, alturi de matricea extracelular, la

realizarea adezivitii intercelulare;

Asigur specificitatea i individualitatea

biochimic tipului de celule.Astfel grupele sanguine
sunt determinate de gruprile glucidice terminale aflate
pe glicoproteinele i glicolipidele din membrana
eritrocitelor.

Conine gruprile glucidice ale proteinelorreceptori din membran, dar i ale unor proteine
implicate n fenomenele de transport.

Depoziteaz ionii de calciu (Ca2+)datorit

sarcinilor electrice negative i intervine n controlul
schimburilor ionice transmembranare.

Particip la transmiterea informaiei despre

celul.
Astfel, unele celule din ficat i din splin recunosc cu
ajutorul receptorilor de membran glicoproteinele i
glicolipidele de pe suprafaa eritrocitelor uzate, care au
pierdut acidul sialic i prezint descoperit galactoza,
ce ocup penultimul loc din lan. Galactoza este
recunoscut de receptorii macrofagelor din ficat
(celulele Kupffer), nct hematiile uzate sau mbtrnite
sunt imobilizate, fagocitate i lizate.

3.2.3. Citoscheletul

Citoscheletul (cytoscheleton) membranei celulare este o

reea de proteine extrinseci (cu grosimea de 5-9 nm), situate pe faa
intern a membranei periferice. Citosheletul este legat de
plasmalem prin intermediul captului intern al proteinelor
transmembranare, iar spre interiorul celulei se continu cu
citoscheletul din matricea citoplasmatic.
La microscopul electronic, citoscheletul membranei apare ca o
reea de microfilamente proteice orientate neregulat, n nodurile
reelei fiind prezente proteine globulare. (Fig.3.9)
Datele referitoare la citoscheletul mebranei au fost obinute n

urma cercetrilor efectuate pe membranele globulelor roii, ulterior

fiind considerate valabile i pentru membranele altor tipuri de celule.

n membrana hematiilor, citoscheletul nglobeaz circa 60%

din masa proteinelor ntregii membrane. Principalele tipuri de
proteine citoscheletale sunt: spectrina,anchirina, actina,glicoforina i
o protein care n cursul electroforezei n gel de poliacrilamid
migreaz n banda 4-1. Mai sunt prezente i alte proteine
neidentificate, ce au mase moleculare diferite. Prin extragerea
spectrinei i actinei, citoscheletul membranei se dezintegreaz,
piezndu-i forma i structura.

Spectrina (sau tectina) este proteina care predomin n citoschelet.

Moleculele solitare de spectrin sunt foarte flexibile.

Apare sub forma a doi dimeri (unul de 240.000daltoni i altul de
220.000 daltoni). Dimerii de spectrin au o form de bastona cu o
lungime de 100 nm i o grosime de 5 nm. Ei se pot lega cap la cap
formnd tetrameri, hexameri, octameri.

Fig.3.9.Schema citoscheletului
membranei
A-Complexul spectrin, anchirin, protein
integral;
B-Complexul spectrin, actin,proteina benzii
4-1;
1-Protein transmembranar;
2-Anchirin;
3-Filamente scurte de actin;
4-Proteina benzii 4-1;

Anchirina (nectina sau sindeina) este un polipeptid, cu form sferic

sau piramidal ce leag spectrina la captul citoplasmatic al proteinei
benzii 4,1.
Are o greuate molecular de 200.000 daltoni,. Intr-o hematie de la
om exist cca. 120.000 de molecule de anchirin, ntr-un neutrofil 600.000, ntr-un trombocit - 3.000, iar ntr-un fibroblast - 30.000.
Actina se gsete sub forma de mici fragmente de actin fibrilar,
ce conin 13 monomeri.
Lungimea fragmentelor de actin variaz n funcie de numrul
moleculelor de spectrin pe care le leag prin capetele lor, fapt ce poate
explica plasticitatea citoscheletului membranei, in vivo i aspectul lax al
acestuia la microscopul electronic.
Proteina benzii 4-1 are aspect globular ( cu diametru de 6 nm) .
Laturile ochiurilor din reeaua citoscheletului membranar sunt
alctuite din dimeri de spectrin, iar nodurile reelei (complexele
joncionale) sunt formate din dou tipuri de complexe moleculare: - un
complex ce conine spectrin, anchirin i o protein transmembranar, ce
realizeaz legtura cu membrana plasmatic; - i un alt complex format
din spectrin, actin, proteina benzii 4-1 i adducin, prezent n nodurile
propiu zise ale reelei. Proteinele citoscheletului membranei, mpreun cu
lipidele i proteinele de pe faa intern a plasmalemei prezint numeroi
radicali hidrofili electronegativi, nct ncrctura electric negativ este
mai puternic dect pe faa extern.
Totodat, n citoscheletul membranei, se gsesc unele proteine cu locusuri
de legare a calciului, denumite calmoduline, ce joac un rol important n
reglarea proceselor intracelulare. Legturile dintre diferitele tipuri de
proteine din citoschelet sunt realizate prin procese de fosforilare, n care
intervine o protein reglatoare, gelsolina, dependent de calciu.
Citoscheletul confer membranei:
1) elasticitate, prin dispunerea n reea a proteinelor;
2) rezisten, prin complexele proteice de la nivelul nodurilor.

3.3.Diferenieri de suprafaa ale membranei celulare periferice.

Sunt neregulariti ale citoplasmei periferice, cu caracter

tranzitoriu sau permanent, delimitate de membran.
Diferenieri ale membranei celulare periferice

Diferenieri
tranzitorii

Invaginri

Cripte
Canalicule
intracelulare

Expansiuni
sau

Pseudopode

procese

Diferenieri

permanente

Expansiuni

Filiforme
Digitiforme

Procese lamelare

Vluri
Membrane ondulante

Microviloziti

Platou striat
Margine n perie

Cili

Flageli

Diferenierile tranzitorii apar i dispar n raport

cu anumite momente funcionale ale celulei, avnd
aspectul unor nvaginri (invaginatiocellularis) ale
plasmalemei (n endocitoz), sau al unor expansiuni
(processus celularis), cum ar fi pseudopodele sau
vlurile ondulante, prin care se realizeaz deplasarea
celulelor.
Pseudopodele (processus amoeboideus) sunt
expansiuni cu form de conuri (processus filiformis)
sau degete (processus digitiformis), cu ajutorul
crora leucocitele ader de suporturi, deplasndu-se
n timpul diapedezei. Ele conin organite celulare,
precum mitocondrii, ribozomi, lizozomi.
Vlurile i membranele ondulante (processus
lamellosus) sunt expansiuni lamelare, foarte mobile,
ce se formeaz n mediul lichid. Nu conin organite i
nu ader la suporturi. Apar n urma unor modificri
ale tensiunii superficiale i se ntlnesc la histiocitele
implicate n fagocitoz.

ale membranei celulare

1-Capilar sanguin;
2-Neutrofile;
3-Pseudopod;
4-Nucleu de histiocit;
5-Vluri ondulante;
6-Macrofag cu vluri;
7-Enterocit;
8 -Microvili;
9-Glicocalix;
10-Lumenul nefronului;
11-Margine n perie;
12-Celul prismatic
ciliat;
13-Cili;
14-Axonema;
15-Corpuscul bazal;
16-Rdcina cilului;
17-Seciune transversal
prin tija cilului;
18-microtubuli centrali i
periferici;
19-Stereocili pe celule
epiteliale din epididim;
20-Flagelul
spermatozoidului

Expansiunile
permanente
sunt cilindrice,
reprezentate
Microvilii (microvillus,
i ) sunt expansiuni
delimitatede
de
membrana polului
(apex cellularis).Ele intervin n procesele de
microvili,
cili iapical
flagel.

absorbie prin mrirea suprafeei de contact a celulei cu substanele ce

vor fi absorbite i prin concentrarea unui numr mare de receptori. Pot
fi dispuse grupat sau solitar. Microvilii solitari sunt inegali, cu forme i
dimensiuni variabile, distanate unele de altele, formnd marginea n
perie ( de expl.la nefrocite, din tubii contori ai nefronului).
Platoul striat cuprinde numeroi microvili (300-3000/enterocit)
uniformi ca lungime (0,6-0,8m) i diametru (200 nm), mbracati n
glicocalix. Plasmalema microvililor conine ATP-az i un numr mare
de transportori. Citoplasma microvililor cuprinde n zona central
microfilamente (10-40) de actin, dispuse paralel cu axul lung al
microvilului.(Fig.3.11)

Fig.3.11.Dispunerea microfilamentelor n microvilul

1-Microvili;
2-Microfilamente de actin;
3-Microfilamente de miozin;
4-Zonula adherens.

Microfilamentele de actin se inser cu un

capt pe plasmalema polului apical al

microvilului, iar la polul bazal al acestuia se
termin ntr-o reea perpendicular de
filamente de actin i miozin, denumit buton
terminal, ce are rolul de a menine poziia
microvilului. Mnunchiul de microfilamente din
microvil este legat de plasmalem, din loc n
loc,printr-o protein, denumit fimbrin. Aceste
legturi formeaz o scar, n spiral, de-a
lungul microvilului.

Fig.3.12.Cili- aspect, structur i ultrastructur

A-Epiteliu pseudostratificat prismatic cilat;
B-Celule prismatice ciliate,polul apical;
C-Seciune transversal prin cil.

Cilii (cilium,a) pot fi mobili (sau vibratili) i rigizi (sau stereocili).

Cilii mobili (kinetocilii) sunt prezeni la polul apical al celulelor
epiteliale din mucoasa aparatului respirator sau a oviductului. Au o
lungime de 5-15 m, o grosime de 0,2 m. unt formai din trei poriuni: - tija
sau poriunea liber, -corpusculul bazal i rdcina.
Tija (pars extracellularis) conine o matrice electrono -dens,
plasat la periferie i un complex filamentos axial (sau axonema)
(filamentum axiale), format din 10 perechi de tubuli longitudinali: -o
pereche central (microtubulus centralis) i - nou perechi periferice
(diplomicrotubulus periphericus), dispuse n jurul perechii centrale.
Corpusculul bazal (corpusculum basale) are un aspect cilindric i
cuprinde n structura sa nou dublete sau triplete (triplomicrotubulus)
periferice de microtubuli, lipsndu-i perechea central. Coordoneaz
micarea cililor.(Fig.3.12)
Rdcina (radix basalis) cilului este format din dubletele sau
tripletele periferice ale corpusculului bazal care ajung n citoplasma
polului apical al celulei ciliate. Are rolul de a ancora cilul n citoplasm,
prezint proprieti contractile i particip la conducerea stimulilor
recepionai de poriunea liber.
Stereocilii sunt cili rigizi, n structura crora lipsete perechea de
microtubuli centrali, avnd numai cele nou dublete periferice. Se
ntlnesc pe polul apical al celulelor din epiteliul epididimului.
Flagelul (flagellum) are n axonem o pereche central i nou
perechi periferice de microtubuli. Este prezent n alctuirea
spermatozoidului.

3.4. Jonciunile celulare

Jonciunile celulare (junctio intercellulares) sunt structuri stabile prin care plasmalemele

celulelor interacioneaz specific.

Tipuri de jonciuni celulare

Spaii intercelulare
A. Jonciuni simple

Jonciuni denticulate
Jonciuni digitiforme

B.Jonciuni complexe

Jonciuni de adezivitate

Desmozomi n pat
Desmozomi n band
Hemidesmozomi

Jonciuni impermeabile

Jonciuni focale

Jonciuni de comunicare
C. Complexe
joncionale

Fig.3.13.Tipuri de jonciuni celulare

A-Jonciuni impermeabile - zonula occludens;
B-Desmozomi n band - zonula adherens;
C-Desmozomi n pat - macula adherens;
D-Jonciuni permeabile -gap.

In raport cu structura lor, se descriu jonciuni

simple, jonciuni complexe i complexe joncionale

(jonctio intercellularis complex). n cazul jonciunilor
simple (junctio intercelluaris simplex), ntre
plasmaleme exist un spaiu (de cel puin 30 nm)
prin care pot trece toate tipurile de molecule
existente n mediul intercelular. Dup aspectul lor,
jonciunile simple sunt de trei feluri : - spaii
intercelulare, - jonciuni intercelulare denticulate
(junctio intercellularis denticulata), i - jonciuni
intercelulare digitiforme (junctio intercelluaris
digitiformes).
n raport cu funciile lor , se disting trei categorii
de jonciuni complexe: -de adezivitate, impermeabile i -de comunicare.(Fig.3.13)

3.4.1.Jonciunile de adezivitate sau dezmozomii.

Desmozomii (desmosoma) sunt jonciuni ce confer o

mare rezisten mecanic unor esuturi i organe, solicitate

n acest sens . Se prezint sub trei forme, toate ntlnite n
esuturile epiteliale: 1-desmozomi n pat; 2-desmozomi n
band; 3-hemidesmozomi.

Desmozomii n pat (macula adherens) .Se mai

numesc i desmozomi n "spot", n "nit", sau macula
adherens (macula = pat, n limba latin). Sunt prezeni mai
ales n esuturile epiteliale de acoperire. n alctuirea lor
intr urmtoarele componente: 1- plasmalemele adiacente,
dispuse paralel, la o distan de 25-30 nm; 2-un material
proteic, intercelular dens la fluxul de electroni, cu aspect
filamentos, bisectat de o densificare central,bogat n
glucide i calciu; 3-densificri intracelulare, n form de disc,
ataate de plasmalele joncionate; 4-dispozitive de legtur
sau linkeri, reprezentai de microfilamente, ce se detaeaz
din materialul dens intercelular, strbat plasmalemele i
apoi discurile intracelulare, pentru a se ancora la
microfilamentele citoscheletului;
5-elemente citoscheletale, respectiv microfilamente de
actin sau filamente intermediare de cheratin, care se
numesc tonfilamente.(Fig.3.14)

Fig.3.14 Desmozom n pat-schem

1 - Plasmalemele adiacente;
2- Spaiu i material intercelular;
3-Discuri intracelulare;
4-Linkeri;
5-Tonofilamente.

Desmozomii n band (zonula adherens) sau n panglic

(zonula=panglic, n latin) sunt prezeni la polul apical al celulelor epiteliale

i la nivelul segmentelor transversale ale discurilor intercalare cardiace.
Prezint o structur asemntoare cu cea a desmozomilor n pat, cu
urmtoarele deosebiri: -spaiul intercelular, de 15-25 nm este mai srac n
material electronodens; -densificrile intracelulare, de pe faa intern a
plasmalemelor joncionate, nu au form de disc, ci de band sau panglic.
(Fig.3.15)

Fig.3.15. Schema desmozomilor

n band (zonula adherens)

A - Densificri intracelulare n band

B - Spaiul intracelular.

Hemidesmozomii (sau semidesmozomii)

(hemidesmosoma) reprezint o variant a

desmozomilor n pat, prin care se leag
celulele epiteliale de membranele bazale.
Prezint numai jumtate din structura
desmozomului n pat, n sensul c, pe frotul
citoplasmatic al plasmalemei exist un disc,
care se leag de membrana bazal prin
filamente.

3.4.2.Jonciunile impermeabile
Sunt dispuse n panglic, fapt pentru care se mai

numesc zonula occludens ( sau jonciuni strnse).

Se caracterizeaz prin obliterarea spaiului intercelular,
deoarece membranele adiacente se apropie complet sau
se sudeaz pentru a forma structuri pentalaminate sau
heptalaminate. La realizarea acestor jonciuni particip
proteine transmembranare, care se dispun n iruri
gemene pentru a construi dispozitive ce se conecteaz "n
fermoar" pe feele externe ale membranelor adiacente. Pe
feele interne , proteinele transmembranare sunt
"ancorate" prin intermediul unor microfilamente la
citoscheletul matricei

Fig.3.16.Schema jonciunilor
impermeabile
A-,B-Plasmalemele adiacente;
C-Proteine transmembranare;
D-Spaiu intercelular;
E-Enterocit;
F-Citoscheletul matricei.

Aceste jonciuni mpiedic scurgerea fluidelor printre celule, inclusiv a

micromoleculelor, care sunt obligate s treac prin celul. Sunt ntlnite la
poriunile apicale ale celulelor care delimiteaz lumenul intestinului. Astfel,
glucoza este pompat activ din lumenul intestinal n celul prin suprafaa
polului apical, dup care trece n snge prin difuziune facilitat mediat de
transportorii situai n zonele bazo-laterale ale plasmalemei, pe care o
polarizeaz funcional ntr-un domeniuapical i altul latero-bazal.Totodat,
jonciunile strnse mpiedic Retrodifuziunea glucozei din spaiul intercelular
n lumenul intestinului.(Fig.3.16).

Jonciunile strnse au aspecte diferite, n funcie de esutul

epitelial n care sunt prezente. Astfel, jonciunile strnse de la

polul apical al celulelor din tubul contort proximal al nefronului
au o rezisten relativ sczut, fiind formate numai din unul sau
dou iruri de proteine transmembranare. La nivelul celulelor
epiteliale din mucoasa vezicii urinare, jonciunile strnse conin
ase sau mai multe iruri de proteine transmembranare, nct
se realizeaz o jonciune puternic, extrem de greu de
traversat. La nivelul barierei hematoencefalice, jonciunile
strnse existente ntre celulele endoteliale ale vaselor din
encefal realizeaz o protecie eficient pentru esutul nervos,
permind ns trecerea glucozei (principala surs de energie)
din snge n creier i trecerea, n sens invers a bioxidului de
carbon, rezultat din respiraia celulelor nervoase.

Jonciunile celulare strnse se caracterizeaz prin:

-flexibilitate i siguran; - formarea unor bariere chimice i
fizice intercelulare; - conferirea unei polariti a celulelor
angajate n jonciuni; -apariia de timpuriu, ntre celulele
embrionare, iniial sub form de macule, care se extind treptat,
lund form de zonule.

Jonciunile focale reprezint o variant a jonciunilor strnse,

n care membrana celulei se apropie de substratul de

adezivitate pn la 10-15 nm. Pe faa extracelular a
membranei sunt prezente filamente glicoproteice de
fibronectin, iar pe faa intracelular se aglomereaz fascicule
de microfilamente de actin i vinculin, care se leag de
plasmalem prin intermediul unor densificri adiacente
membranei. ntre filamentele de fibronectin i microfilamentele
de actin i vinculin se realizeaz dispozitive transmembranare
de legtur (de 8-20 nm), denumite fibronexuri.

3.4.3.Jonciunile de comunicare

Permit trecerea unor

molecule mici dintr-o celul n alta

i sunt de de dou tipuri:
jonciunile permeabile i sinapsele.

Jonciunile permeabile, de
tip gap, nexus sau macula
comunicans sunt realizate prin
structuri proteice, denumite
conexoni, ce strbat plasmalema,
proeminnd de o parte i de alta a
bistraturilor lipidice ale
membranelor adiacente. Sunt
rspndite n diferite tipuri de
esuturi, reprezentnd principala Fig.3.17Schema jonciunii permeabile (gap)
1-Plasmalemele adiacente;
cale de comunicare intercelular.
2-Spaiu intercelular;
Permit schimburi rapide de
3-Conexoni;
molecule, fcnd posibil o
4-Canale intercelulare.
cooperare metabolic
eficient.Spaiul intercelular
(spatium intercellulare) este foarte
ngust (2-4nm). n momentul
realizrii jonciunii permeabile,
conexonii din cele dou
plasmaleme se aeaz cap la cap,
formnd canale directe de
comunicare ntre citoplasmele
Fig.3.18.Diagrama
celor dou celule, fr deschideri
schimburilor
n spaiul intercelular.(fig.3.18).
moleculare

prin

Un conexon are o form de prism hexagonal cu

diametrul de 7-8 nm i este alctuit din 6 subuniti

proteice (oligomeri). Subunitile delimiteaz un canal
hidrofil cu diametrul reglabil. Ionii de calciu intracelular
(Ca2+) modific diametrul canalului, controlnd astfel
comunicarea intercelular.

Canalul hidrofil al jonciunii gap permite trecerea

dintr-o celul n alta a ionilor i a unor molecule cu
greutate sub 1.000-1500 daltoni, precum: glucide,
aminoacizi, nucleotide, hormoni, vitamine,etc. Nu pot
s treac macromoleculele (proteine, acizi nucleici,
etc.), dar sunt de 10.000 ori mai permeabile pentru
ionii metalici dect restul suprafeei membranei.

n culturile de celule, jonciunile de tip gap se

organizeaz foarte rapid, din proteinele existente n
plasmalem, care se grupeaz n conexoni. Ele permit
schimbul unor molecule de mrimi medii, ca nucleotizii.

Jonciunile gap sunt necesare mai ale n situaiile

n care celulele trebuie s acioneze simultan, n grup,
cum este cazul celulelor embrionare, pe cale de
difereniere sau ntre celulele musculare (cardiace i
netede), nervoase i endocrine.

3.4.4.Complexele joncionale

Cuprind jonciuni strnse spre frontul luminal i

desmozomi spre frontul latero-bazal. Sunt ntlnite,

mai ales, ntre celulele din epiteliile intestinale i
renale. n complexele joncionale sunt prezente toate
tipurile de legturi intercelulare necesare pentru
ndeplinirea funciilor specifice esuturilor
respective.
Fig.3.19. Complexe
joncionale
(fig.3.19)
n epiteliul intestinului
subire.
A-Micvrovili;
B-Jonciuni impermeabile;
C-Desmozomi n band;
D-Desmozomi n pat;
E-Filamente din citoschelet;
F-Jonciuni permeabile;
G-Hemidesmozomi;
H-Mebrana bazal.

 3.5. Receptorii din membrane

Receptorii din membrane sunt dispozitive moleculare proteice intramembranare, cu

ajutorul crora se intercepteaz semnalele, ce sosesc pe cale nervoas sau umoral.

Denumire

Liganzi
= mesageri
extracelulari (de
ordinul I)
Mediatori chimici locali

Receptori
pentru:

Mediatori chimici locali

Hormoni hidrofili (insulina,glucagonul,etc)

A. Receptori
pentru
substane
endogene

B. Receptori
pentru
substane
exogene

Hormoni

Hormoni hidrofobi (Hormoni steroizi sexuali)

Neurotransmittori

Acetil colina
Adrenalina
Noradrenalina
Dopamina, serotonina
GABA= Acidul gama aminobutiric
Acidul aspartic

Subst. imunogene

Antigene endogene
Anticorpi
Componentele complementului

Virusuri
Antigene non self
Toxine microbiene
Lectine, etc

Adenovirusuri
Mixovirusuri
Antigene nonslef
Toxine microbiene

 Toate substanele care se leag de receptori i moduleaz (modific)

funcia celular se numesc liganzi. Liganzii sunt substane, produse

de celule specializate, care acioneaz n mod specific asupra unui
grup de celule "int", producnd-le modificri ale activitii . Ei sunt
denumii i mesageri extracelulari sau mesageri de ordinul I, cei mai
cunoscui fiind hormonii i neurotransmitorii.
Liganzii acioneaz n cantitate foarte mic (10-8 M), iar receptorii i
leag cu o constant de afinitate mare (K=108 litri/mol).
Exist dou mari categorii de receptori n membrane: receptori
pentru substane endogene i receptori pentru substane exogene.
3.5.1. Receptorii pentru substane endogene
Se cunosc mai multe categorii de molecule semnal (de liganzi)
de natur endogen (produse de organism): 1-mediatori chimici
locali; 2-hormoni; 3-neurotransmitori; 4-substane imunogene.
Mediatorii chimici locali sunt secretai de unele tipuri de celule
i acioneaz numai asupra celulelor din imediata lor vecintate. Ei
sunt rapid captai i distrui.(Fig.3.20).
Hormonii sunt substane endogene produse de celulele
glandelor endocrine. Pe cale sanguin, ajung la celulele int din
diferite organe, acionnd la distane mari de locul de producere.
Neurotransmitorii sunt substane endogene produse de
neuroni i eliberate la nivelul sinapselor chimice. Ei acioneaz
numai asupra neuronilor agajai n sinaps.
Hormonii i neurotransmitorii sunt considerai mesageri de ordinul
I. Hormonii au o compoziie chimic variat, putnd fi substane
steroide (hormonii sexuali) sau polipeptide ( ca de expl. hormonii
pancreatici i tiroidieni). Hormonii steroizi ptrund n celul,
traversnd bistratul lipidic, pe cnd cei polipeptidici se cupleaz cu
receptorii specifici din membran, acionnd de la acest nivel.

Substanele imunogene sunt reprezentate

de : -antigene endogene; - anticorpi; componentele complementului.

Receptorii pentru neurotransmitori sunt

situai n membrana postsinaptic a celulelor
nervoase, n membrana celulelor musculare
sau a altor celule efectoare. Ei recepioneaz
acetilcolina, noradrenalina, dopamina,
serotonina, adrenalina, histamina, acidul gamaaminobutiric, acidul aspartic, encefalina,etc.

Fig.3.20. Molecule semnal endogene.

Receptorii pentru hormoni au o
localizare diferit n celul, n funcie de tipul
hormonului, hidrofil sau hidrofob.
Hormonii hidrofili (insulina, glucagonul,
adrenalina, hormonii hipofizari,
parathormonul,etc.) se ataeaz de
receptorii din membrana periferic,
transmind celulei informaia necesar
pentru a-i modula activitatea. Dintre
receptorii hidrofili, cei mai bine studiai sunt
receptorii pentru insulin din membrana
hepatocitelor i adipocitelor.
Ei au o mas molecular de 300.000 daltoni,
iar n membrana unei celule exist circa
10.000 receptori pentru insulin.
Hormonii hidrofobi (steroizi i tiroidieni)
traverseaz membrana celulei int i se
leag de receptorii membranelor
intracelulare.

 Receptorii pentru substanele imunogene sunt de trei

feluri:
1-pentru antigene endogene;
2- pentru anticorpi;
3- pentru complement.

Receptorii pentru antigene endogene sunt mai

numeroi pe membrana limfocitelor T, sunt codificai
genetic i au capacitatea s recunoasc structurile
moleculare "self" (proprii organismului respectiv).Ei pot fi
prezeni i n membrana unor celule neimunogene (expl.
n membrana enterocitelor.)

Receptorii pentru anticorpi sunt receptori Fc, pentru

fraciunea cristalizabil a imunoglobulinei G. Ei sunt

prezeni n membrana celulelor din sistemul fagocitelor
mononucleare. n membrana bazofilelor i mastocitelor se
gsesc receptori pentru imunoglobulina E.

Receptorii pentru complement leag cea de a treia

component a complementului de suprafaa celulei, fiind

caracteristici celulelor din sistemul fagocitelor
mononucleare.

3.5.2.Receptorii pentru substane exogene

Sunt receptori pentru:

- virusuri, capabili s recunoasc

adenovirusuri, mixovirusuri,etc.;

- antigene nonself (strine de organism); sunt

prezeni pe suprafaa limfocitelor B i au o structur
molecular asemntoare imunoglobulinelor.Aceti
receptori determin transformarea blastic a
limfocitelor B, dup contactul cu antigenul.

- toxine microbiene. Sunt prezeni n

membrana celulelor imunocompetente.

- lectine. Lectinele sunt substane proteice

sau glicoproteice, extrase din esuturi vegetale sau
animale, capabile s formeze puni ntre
glicoproteinele membranare.

3.5.3.Mecanismul de aciune al receptorilor.

Receptorii din membranele de suprafa sunt activai n

majoritatea cazurilor de molecule semnal (liganzi)

hidrofile.

Moleculele semnal hidrofile nu pot strbate

membrana celular dect dup ce se leag de receptorii
specifici. Sub influena diferiilor liganzi se produc
modificri metabolice n celulele int. Ataarea liganzilor
de receptori se realizeaz prin legturi hidrofobe i legturi
de hidrogen ( ca de exemplu legarea insulinei de
receptori ). Legturile sunt labile i strict dependente de
concentraia liganzilor din mediul extracelular.

Efectele aciunii complexului ligand-receptor asupra

celulelor constau n: modificri structurale ale membranei
celulare i modificri funcionale ale membranelor.

Modificrile structurale ale membranei celulare se

manifest prin redistribuirea receptorilor, rspndii la
ntmplare nainte de interaciunea ligand receptor. Dup
contactul ligand-receptor, receptorii se grupeaz la
suprafaa membranei n zone delimitate sau "plaje".
(Fig.3.21)

Acest lucru se poate realiza datorit fluiditii

bistratului lipidic, nct mai multe molecule de ligand pot
aciona asupra mai multor receptori nvecinai. Astfel n
limfocitele B, lectinele pot induce formarea unor agregate
receptor-ligand de dimensiuni mari, denumite cupole, unde
se declaneaz un proces de endocitoz.

3.5.3.Mecanismul de aciune al receptorilor.

Receptorii din membranele de suprafa sunt activai n

majoritatea cazurilor de molecule semnal (liganzi) hidrofile.

Moleculele semnal hidrofile nu pot strbate membrana

celular dect dup ce se leag de receptorii specifici. Sub
influena diferiilor liganzi se produc modificri metabolice n
celulele int. Ataarea liganzilor de receptori se realizeaz
prin legturi hidrofobe i legturi de hidrogen ( ca de
exemplu legarea insulinei de receptori ). Legturile sunt
labile i strict dependente de concentraia liganzilor din
mediul extracelular.

Efectele aciunii complexului ligand-receptor asupra

celulelor constau n: modificri structurale ale membranei
celulare i modificri funcionale ale membranelor.

Modificrile structurale ale membranei celulare se

manifest prin redistribuirea receptorilor, rspndii la
ntmplare nainte de interaciunea ligand receptor. Dup
contactul ligand-receptor, receptorii se grupeaz la
suprafaa membranei n zone delimitate sau "plaje".
(Fig.3.21)
Acest lucru se poate realiza datorit fluiditii bistratului

lipidic, nct mai multe molecule de ligand pot aciona

asupra mai multor receptori nvecinai. Astfel n limfocitele
B, lectinele pot induce formarea unor agregate receptorligand de dimensiuni mari, denumite cupole, unde se
declaneaz un proces de endocitoz.

Fig.
3.21.
Redistribuirea
membrana celular

receptorilor

din

Modificrile funcionale ale membranelor constau n:

1- Modificri de permeabilitate a membranei, caracteristice pentru

liganzi de tipul neurotransmitorilor. n acest sens, acetilcolina se leag de

receptorii din membranele postsinaptice ale fibrelor musculare, determinnd
creterea permeabilitii membranei pentru ionii din mediul extracelular.

2- Inducerea de endocitoz, care se produce cnd ligandul este o

substan endogen, vehiculat pe cale umoral.

3- Ptrunderea din mediul extracelular a unor ioni cu funcie de

mesageri de ordinul II. Astfel, ionii de calciu ptrund n celul dup ce
neurotransmitorii se leag de receptorii din membranele post sinaptice ale
jonciunii neuromusculare.

4- Activarea unor enzime din membrana celular. Se produce cnd

liganzii sunt hormoni hidrofili. Asfel se activeaz adenilat ciclaza ce va
cataliza sinteza, pe faa intern a membranei, a adenozin 3 - 5
monofosfatului ciclic (AMP-c) sau va determina fosforilarea proteinelor
celulare. Activarea adenilat ciclazei se realizeaz cu ajutorul unor proteine
reglatoare.(Fig.3.22)

Dup activarea adenilat ciclazei, n citosol crete cantitatea de

AMP-c (considerat mesager de ordinul II) , amplificndu-se

semnalul hormonal. Totodat se activeaz i o proteinkinaz care
controleaz fosforilarea mai multor molecule proteice, stimulnd
procesele metabolice din celul. Sinteza de AMP-c poate fi blocat
de unele prostaglandine care acioneaz prin inhibarea aciunii
adenilat ciclazei.

n unele maladii este implicat, n mod direct disfuncia

receptorilor din membran. Astfel, n "miasthenia gravis" este
inactivat receptorul pentru acetilcolin de la nivelul plcii
neuromusculare, iar n hipercolesterolemia genetic sunt abseni
sau nefuncionali receptorii pentru colesterol.
Exist afeciuni ale receptorilor care constau n blocarea funciei
autoimune prin autoanticorpi antireceptori.
Asfel, autoanticorpii pentru receptorii de insulin pot aciona ca
insulinomimetici (activnd receptorii) sau ca blocani ai acestora
(n diabetul insulinorezistent). Autoanticorpii care stimuleaz
receptorii dopaminei pot constitui cauze ale scizofreniei, iar
imunoautoanticorpii beta adrenergici sunt implicai n afeciunile
asmatice. n procesul de mbtrnire i n unele boli neuropsihice
(la om) s-a observat o modificare a densitii receptorilor

3.6.Schimburile prin membran

Prin membrana celular se efectueaz schimbul de substane, fie prin

traversarea diferitelor structuri ale acesteia, sau pe calea transportului n

mas, cu ajutorul veziculelor, furnizate de membrana celular.

Bistratul lipidic funcioneaz ca o barier de difuziune pentru ap

i alte molecule hidrofile, n timp ce moleculele liposolubile, oxigenul i
dioxidul de carbon l trec cu uurin.

3.6.1.Transportul transmembranar

Realizeaz schimburile de molecule mici i ioni (de unde i

denumirea de microtransport) ntre celul i mediul extracelular.
ndeplinete urmtoarele funcii:

Preia din mediul extracelular o serie de combustibili

metabolici necesari meninerii vieii celulei i activitilor ei metabolice;

Elimin n mediul extracelular compui fiziologici necesari

organismului (substane secretate), precum i substane toxice toxice ,
rezultate din activitatea celulei;

Regleaz volumul celulelor;

Asigur meninerea ph-ului intracelular i compoziia ionic la

valori ct mai favorabile desfurarii activitii metabolice celularte;

Produce diferene de concentraii (gradiente ionice), care

permit desfurarea unor activiti biologice complexe, cum snt
excitabilitatea nervului i a muchiului.

n funcie de mecanismele care intervin n

micarea moleculelor prin membrana celular

se deosebesc dou forme de transport : atransportul activ i b- transportul pasiv. (Fig.3.23). 3.6.11.Transportul
pasiv

Realizeaz trecerea moleculelor mici n sensul gradientului

de concentraie, iar a ionilor n sensul gradientului electrochimic. Se
face fr consum de energie, fiind independent de metabolismul
celular.

Exist dou modaliti de realizare a transportului pasiv prin:

difuziune simpl i prin difuziune facilitat.

Transportul pasiv prin difuziune simpl.

Se face lent,
ntruct restructurarea permanent a membranelor biologice este o
dificultate pentru difuziune.Este supus legilor difuziunii i osmozei,
fiind dependent numai de fore fizice.

Fig.3.23. Transportul transmembranar.

1-Bistrat lipidic;
2-Proteine transmembranare;
3-Molecule transportate;
4-Difuziune simpl;
5-Difuziune facilitat;
6-Transport activ;
7-Sensul gradientului electrochimic

Moleculele mici liposolubile difuzeaz prin bistratul lipidic, iar cele

hidrosolubile trec prin orificii mici canale sau pori hidrofili situati n
bistrat, delimitai de proteine transmembranare. Canalele
transmemebranare au un diametru de 1 nm, fiind specializate i
selective. Vasopresina stimuleaz transportul prin canale i pori
mrindu-le diametrul pn la 2-3 nm. (Fig.3.24)

Fig.3.24. Transportul prin canale i po

1-Por;
2-Bistrat lipidic;
3-Proteine transmembranare;
4-Ion.

Transportul prin difuziune faciliat. Este

mult mai rapid (de

cca.100.000 ori) dect cel prin difuziune simpl, permind trecerea
prin membran a unor substane greu solubile n lipide i cu o mas
molecular relativ mare.
Se ntlnete frecvent la hepatocite,unde, n acest mod, se transport
glucoza,aminoacizi,etc.(Fig.3.25.)

Fig.3.25.Tranportori de tip canal

cru.
1 - Bistrat lipidic;
2 - Canal;
3 - Cru sau tranportor mobil.

Se realizeaz cu ajutorul unor molecule proteice din compoziia

membranei cu rol de crui.
Astfel, pe membrana hepatocitului exist 800.000 de crui, iar
fiecare cru transport 100 molecule de glucoz pe secund.

Transportul prin difuziune facilitat se efectueaz n sensul gradientului de

concentraie i duce la echilibrarea concentraiilor pe ambele fee ale membranei,

ns viteza de transport este direct proporional cu concentraia lor. n raport cu
numrul speciilor transportate exist transport uniport, simport i antiport.
(Fig.3.26.)

Fig.3.26. Tipuri de transport,

n funcie de sens i numrul
speciilor
transportate
1-Bistrat lipidic;
2-Protein transportor;
3-Molecule transportate;
4-Uniport:
5-Sinport;
6-Antiport.

3.6.1.2.Transportul activ

Se realizeaz mpotriva gradientelor de concentraie sau a

gradientelor electrochimice, producnd o cretere a concentraiei pe o fa a

membranei. Solicit cheltuial de energie, care este furnizat de
metabolismul celular, fiind metabolic dependent. Unele celule nalt
difereniate (fibre musculare, neuroni) i procur energia necesar
transportului pe cale aerob, prin producere de ATP. Hematiile i produc
moleculele de ATP necesare pentru transport prin glicoliz.

Exist mai multe tipuri de transport activ, n funcie de modul n care

este folosit energia:

1-Tranportul activ prin pompe ionice, n care proteinele ce efectuiaz

transportul folosesc direct energia din ATP, avnd proprieti ATP-azice ( de
descompunere a ATP-ului).

2-Trasportul cuplat (sau cotransportul), n care se folosete energia

gradientelor ionice, substanele de transportat (glucide, aminoacizi) fiind
cuplate cu unii ioni (Na).

3-Translocarea de grup, ntlnit la unele bacterii, care folosesc ca

surs de energie fosfoenolpiruvatul.

Transportul prin pompe ionice.

Pompele ionice sunt protein-enzime din compoziia plasmalemei care

transport ionii ntr-o direcie termodinamic nefavorabil, mpotriva
gradientului electrochimic sau de concentraie.

n organism se cunosc pompe transportoare pentru ioni sau

cationi,existnd pompe pentru un singur ion (Ca2+sau Mg2+) sau pentru doi
ioni (pompa de Na+i K+).

Pompa de Na+ - K+ este ce a mai bine cunoscut.(Fig.3.27)

Fig.3.27. Organizarea molecular a pompei ionice de Na+ - K+

1-Plasmalema;
,beta-Proteine transmembranare

 n condiii normale, ionul de potasiu (K+) se gsete

ntr-o concentraie mai mare (de cca. 15

ori)intracelular, n timp ce ionul de sodiu (Na+) are o
concentraie mai mare extracelular. Gradientele ionice
(diferenele de concentraii) sunt meninute printr-un
sistem special de transport, denumit pompa de Na+K+.

Pompa de Na+-K+ a fost studiat pe

membranele hematiilor, unde s-a constatat o deplasare
concomitent a Na+ extracelular (spre o concentraie
mai mare), iar a K+ intracelular (tot spre o concentraie
mai mare), contrar gradientelor de concentraie.
Energia necesar acestui transport se obine prin
hidroliza ATP-ului, care este realizat de ctre o enzim
din plasmalem, denumit Na+-K+-ATP-az, deoarece
acioneaz numai n prezena ionilor de Na+,K+ i a
unei concentraii favorabile de Mg2+.
Aceast enzim este o glicoprotein mare, un
tetramer cu o greutate molecular de 270.000 daltoni.
Fig.3.28.Transportul cuplat prin pompare molecular.

Pompa de Ca2+ sau Ca2+-ATP-aza asigur transportul

ionilor de Ca2+ prin sistemul de membrane ale

reticulului endoplasmic din fibrele musculare.

Exist i pompe pentru anioni, precum pompa de

clor (Cl-) din celulele parietale ale glandelor gastrice
sau pompa de iod (I-) din tiroid.

Transportul cuplat (sau mecanismul de pompare

molecular) utilizeaz, pentru transportul unor
molecule (glucoz, aminoacizi), energia care rezult din
micarea Na+ mpotiva gradientului de concentraie i
al gradientului electric. Aceast energie poate fi folosit
pentru introducerea n celul a unor substane
nutritive. (Fig.3.28).

Glucoza este pompat din mediul extracelular n celule

(enterocite sau nefrocite) odat cu ionii de Na + cu

ajutorul unei uniti proteice de transport. Dup
ptrunderea n celul, glucoza se decupleaz de ionii de
Na+ , care sunt pompai n afara celulei printr-o Na+K+-ATP-az.
3.6.2. Transportul n mas

Este procesul prin care celulele preiau din mediul

extracelular particule de natur diferit, prin formarea
de vezicule pe seama membranei celulare. n funcie de
direcia n care se deplaseaz veziculele deosebim trei
tipuri de transport n mas: 1-exocitoza; 2-endocitoza; i
3-transcitoza.

3.6.2.1. Exocitoza

Exocitoza este procesul prin care celulele i descarc n

mediul extracelular produsele secretate sau alte materiale pemtru

export. Produsele pentru export se colecteaz n vezicule
intracitoplasmatice (vesicula cytoplasmatica, care se deplaseaz
dinspre complexul Golgi spre membrana celular, fie n mod spontan,
fie dup stimularea celulei de ctre unii factori secretagogi (hormoni,
neurotransmitori, factori de eliberare). Deschiderea veziculelor i
eliminarea coninutului n spaiul extracelular se datorete contraciei
microfilamentelor, n prezena moleculelor de ATP , de AMP-c ia
ionilor de Ca2+.n celulele exocrine, exocitoza este limitat la
domeniul apical (luminal) al plasmalemei.

Fig.3.29.Transportul prin vezicule (n m

A-Endocitoza; B-Exocitoza; C-Transcito
1-Plasmalema;
2-Fagozom;
3-Lizozom primar;
4-Lizozom secundar;
5-Vezicule de secreie;
6-Vezicule de transport.

Exocitoza este prezent i la nivelul sinapselor, unde

veziculele ce conin mediatori chimici (acetilcolin,

noradrenalin) fuzioneaz cu membrana presinaptic.
Mediatorii sunt eliberai n spaiul sinaptic, dup care se
leag de receptorii specifici din membrana postsinaptic,
producnd depolarizarea ei i transmiterea influxului
nervos.

3.6.2.2. Endocitoza

Endocitoza este procesul prin care celulele preiau din

mediul extracelular molecule mari ( cu greutate molecular
mai mare de 10.000 daltoni), prin intermediul unor vezicule,
care se formeaz din membrana celular. n acest fel se
poate realiza nutriia celulei, purificarea mediului
extracelular i unele procese de aprare imunitar.

Dup natura materialului endocitat i dup

modaliatea de ingestie se disting dou tipuri de endocitoz:
1-fagocitoza (de la grecescul phagein = a mnca) sau
endocitoza de molecule i particule solide,microorganisme
(bacteriene sau virale), macromolecule alterate, detritus
celular, celule ntregi, etc. nensoite de fluid; 2- pinocitoza (
de la grecescul pinein = a bea) sau endocitoza de fluid, ce
conine molecule sau particule.

3.6.2.2.1.Fagocitoza

n condiii normale i patologice, pot participa la fagocitoz

un mare numr de tipuri celulare, denumite generic fagocite. n
funcie de mrimea particulelor pe care sunt capabile s le
nglobeze, se disting microfage, care nglobeaz numai particule
mici (exemplu neutrofilele) i macrofage, care nglobeaz particule
mari, existnd macrofage mobile ( monocitele circulante) sau
macrofage fixe (histiocitele din esutul conjunctiv, celulele Kupffer
din ficat, celulele capilarelor sinusoide din splin, unele celule din
mduva osoas hematogen, din limfonoduri, din pulmon,etc.).

Fagocitele prezint pe suprafaa membranei regiuni

specializate purttoare de receptori, cu ajutorul crora recunosc
ceea ce este "self" (macromoleculele proprii organismului) de ceea
ce este ""non self", adic macromoleculele strine de organism,
denumite generic antigen. Dintre macromoleculele self, receptorii
pentru fagocitoz rercunosc ceea ce este sntos de ceea ce este
alterat ( self alterat: celule degenerate, celule maligne, celule
mbtrnite, resturi tisulare). n unele situaii patologice, receptorii
celulelor ce intervin n fagocitoz pierd capacitatea de a diferenia
self-ul de non-self , acionnd, asfel, mpotriva proteinelor din
organismul propriu i determinnd apariia reaciilor autoimune,
care pot genera o serie de entiti patologice.

Recunoaterea antigenilor n organism este nlesnit de

prezena n mediul extracelular a unor proteine, denumite

opsonine. Opsoninele sunt proteine extracelulare care
mediaz i faciliteaz legtura ntre receptorii membranei
fagocitelor i antigenele ce vor fi fagocitate, formnd
complexe antigen-opsonine.

Se cunosc mai multe tipuri de receptori ai complexelor

antigen-opsonin, precum: - receptorii Fc, care leag de
suprafaa membranei antigenele opsonizate cu
imunoglobuline G ( Ig G), dup ce au recunoscut fraciunea
cristalizabil (Fc) a imunoglobulinei G.; - receptorii C3, care
reconosc i fixeaz antigenii opsonizai cu cel de al treilea
component al complementului.

n membrana fagocitelor, n afar de receptoriii pentru

complexe opsonizate, s-au mai descris receptori nespecifici
care recunosc i fixeaz selful alterat, reprezentat de resturi
celulare sau celule maligne.

Fagocitoza se desfoara n patru

etape:chemotaxia,opsonizarea, ingestia i digestia.

Chemotaxia este proprietatea unei celule mobile (n cazul de fa a

neutrofilelor) de a se deplasa prin esuturi ctre particule int, ca

rspuns la diveri stimulli dup ce inta a fost recunoscut.
Semnalele chemotactice sunt reprezentate de: substane bacteriene
(proteine, lipide), proteine serice, componente ale complementului
(15 proteine serice, care amplific rspusul imun), produse ale
limfocitelor (limfokine), factori eliberai de neutrofile.

Fig.3.30. Opsonizarea i fagocitarea

 Opsonizarea const n acoperirea bacteriilor

sensibilizate de anticorpi pentru a fi fagocitate.

Principalele opsonine sunt anticorpii, n special
imunoglobuline (Ig1, Ig3) i componente ale
complementului (C3, C5). Fraciunea cristalizabil (Fc) a
imunoglobulinei G este recunoscut de receptorii Fc de
pe suprafaa neutrofilelor. (Fig.3.30)

Ingestia microorganismelor are loc dup ce acestea

au fost opsonizate. Complexul antigen-opsonine este
recunoscut de receptorii de la suprafaa fagocitelor i
legat de membrana celular, determinnd activarea
receptorilor. n urma activrii receptorilor, actina din
citoscheletul membranei,se contract, determinnd
emiterea de pseudopode. Pseudopodele nconjoar
strns particula i n acest fel se realizeaz interaciuni
receptor- particul pe toat suprafaa ei. Mecanismul de
fixare a particulei de membrana psedupodelor este
comparat cu nchiderea unui fermoar. Extremitile
pseudopodelor nconjoar particula i formeaz o
vezicul, denumit fagozom.(Fig.3.30.)

n citoplasm, fagozomul se unete cu un lizozom , formndu-se un

fagolizozom, n care hidrolazele acide vor aciona asupra particulei

strine, producnd digestia acesteia. n cazul neutrofilellor,
contopirea granulelor azurofile primare (a lizozomilor) cu fagozomul
i eliberarea coninutului lor n fagolizozom (sau vezicula digestiv)
se manifest prin dispariia granulelor din citoplasm,fenomen
cunoscut ca degranularea neutrofilelor.

Fig.3.31.Mecanismele fagocitozei;
A-Mecanisme moleculare; Realizarea
fagozomilor.
1-ImunoglobulinaG;
2-Receptor inactiv;
3-Receptor activat;
4-Protein contractil din citoschelet;
5-Pseudopode;
6-Fagozom.

Digestia intracelular a particulelor fagocitate are loc n lizozomi i se

produce prin: -sisteme dependente de oxigen, mediate de enzime

(mieloperoxidaz, superoxidismutaz); i - prin sisteme independente de
oxigen ,ce presupun aciunea lizozimului, a lactoferinei,etc..

3.6.2.2.2.Pinocitoza
Pinocitoza sau endocitoza particulelor n faz fluid reprezint
procesul de transport n mas a unei cantiti variabile de fluid tisular,
mpreun cu particulele pe care le conine, prin intermediul unor vezicule
(vezicula pinocitocica), denumite pinozomi.
Se ntlnete la toate tipurile de celule, aprnd ca o modaliatate
mportant prin care celulele capteaz din lichidul intercelular
substanele necesare metabolismului lor.

Se deosebesc dou forme de pinocitoz n funcie de

mecanismele care intervin n procesul de preluare a sustanelor: pinocitoza far receptori i - pinocitoza mediat de receptori.

Pinocitoza fr receptori este endocitoza cea mai frecvent

ntlnit la acele celule din organism, care folosesc pentru transport
suprafee mari nespecializate din membrana plasmatic.. Preluarea
substanelor cu ajutorul veziculelor se face fr o legare prealabil a lor
de membrana celular prin receptori.

Pinocitoza se desfoar n mai multe etape:

1-Contactul particulelor din fluidul tisular produce activarea

unor puncte de pe suprafaa celulei , denumite situsuri anionice.
Acest proces induce agregarea microfilamentelor din citoscheletul
membranei, producnd creterea flexibilitii membranei celulare.

2-Membrana celular se invagineaz formnd cripte sau

canale intracelulare (invaginatio cellularis), n care intr lichid
extracelular, mpreun cu particulele prezente n el.

3-Membranele din vecintatea extremitii profunde a

canalului se alipesc,fuzioneaz i apar pinozomii (vesicula
pinocytotica), vezicule ce se desprind de canal i sunt antrenate de
curenii intracitoplasmatic.

4-Pinozomii fuzioneaz cu lizozomii, formnd

pinolizozomii, n care enzimele lizozomale produc digestia
materialelor preluate din exteriorul celulei.

n funcie de mrimea particulelor nglobate prin pinocitoz

se distinge o micropinocitoz i o-macropinocitoz.

Macropinocitoza este modalitatea de transport a unor particule mari vizibile la

microscopul optic. Poate fi studiat prin injectarea in vivo de colorani vitali, care se
fixeaz de proteinele serice. Complexele formate din proteine serice i coloranii vitali
coloidali sunt introduse n citoplasm mpreun cu mici cantiti de lichid extracelular,
fiind utilizate ca indicator de recunoatere a celulelor care manifest proprietate de
pinocitoz la nivelul organelor i esuturilor.

Micropinocitoza reprezint modalitatea de transport a moleculelor mici cu

ajutorul veziculelor , vizibile numai la microscopul electronic.

Urmrindu-se soarta veziculelor pinocitate, s-a observat c acestea pot: 1- rmne n

citoplasm, unde fuzioneaz cu lizozomii, n care sunt digerate, iar dup ce i-au
descrcat coninutul, membranele lizozomale sunt reintegrate n membrana celular; 2traversa citoplasma fr a fuziona cu lizozomii, descrcndu-i coninutul pe cealalt
fa a citoplasmei.

Pinocitoza mediat de receptori.

Se mai numete i pinocitoz absorbtiv, selectiv sau concentrativ. Este
modalitatea de preluare din mediul extracelular a unor materiale diferite, prin folosirea
unor zone specializate ale membranei celulare, prevzute cu receptori.

Receptorii recunosc i leag de membran particule diferite. Fiind mobili receptorii

se grupeaz la nivelul unor zone specializate ale membranei celulare, care se

invagineaz formnd caveolele (vesicula superficialis s. caveola) acoperite, deoarece
sunt acoperite pe versantul citoplasmatic de o reea de microfilamente, formate dintr-o
protein, denumit clatrin. Reeua de clatrin stabilizeaz poziia receptorilor i
menin caveolele n comunicare cu mediul extracelular.(Fig.3.32.)

Caveolele acoperite care fixeaz

complexele particul-receptor (sau

ligand-receptor) sunt nglobate
rapid mpreun cu o cantitate mic
de fluid extracelular sub form de
vezicule care pot s-i pstreze
mantaua de clatrin pe faa lor
extern (vezicule acoperite) sau
microfilamentele de clatrin se
desprind la nivelul membranei, n
acest caz aprnd vezicule netede
sau receptozomi.

Particulele nglobate prin

pinocitoza mediat de receptori
pot fi degradate n lizozomi sau n
unele cazuri, receptozomii
traverseaz citoplasma fr s
interacioneze cu lizozomii, fiind
eliminate pe cealalt fa a
celulelor.

Fig.3.32. Pinocitoza mediat de receptori.

1-Plasmalema;
2-Receptori mobili;
3-Ligand;
4-Complex ligand receptor;
5-Caveol acoperit cu clatrin;
6-receptozom;
7-Nucleu;
8-Complex Golgi;
9-Lizozom.

Spre deosebire de pinocitoza fr receptori, n care

concentraia substanelor n veziculele endocitate este

aceeai ca n lichidul extracelular, n veziculele
acoperite , ce apar n pinocitoza mediat de receptori,
concentraia substanlelor este mult mai mare dect n
lichidul extracelular, datorit capacitii receptorilor de
a lega selectiv un numr mare de particule.

Implicaii patologice. Pinocitoza mediat de receptori

este o modalitate folosit pentru preluarea din lichidul
extracelular i din snge a colesterolului, o
lipoprotein cu densitate mic. n situaii normale,
celulele prevzute cu receptori pentru proteine cu
densitate mic preiau colesterolul din mediul
extracelular. Lipsa acestor receptori, ntlnit n unele
deficiene genetice, face imposibil preluarea
moleculelor de colesterol din snge, determinnd o
cretere a concentraiei acestuia (hipercolesterolemie)
i apariia de plci aterosclerotice n peretele vascular.

Fig.3.33. Schematizarea modalitilor de transport prin celula endotelial.

(dup SIMIONESCU-1981)

Transcitoza sau citopemsis reprezint o form aparte a

transportului prin vezicule, prin care se realizeaz transportul
macromoleculelor prin celule endoteliului capilar. A fost studiat de
Palade (1953), care a observat, cu ajutorul microscopului electronic,
vezicule ce traverseaz celulele endoteliale, realiznd schimburi ntre
plasm i lichidul interstiial.(Fig.3.33)
Transportul veziculelor pinocitate se poate realiza prin dou
modaliti: 1-transcitoza distributiv, n care trecerea se face sub forma
unor iruri de vezicule intracitoplasmatice, ce se ntind de la faa
luminal la faa bazal, fr a ajunge n contact cu lizozomii; i 2transcitoza conectiv, n care transportul se face prin canale ce se
formeaz fie prin fiziunea veziculelor, fie prin invaginarea plasmalemelor.

4.Nucleul
Nucleul (lat. nucleus i gr. karion = smbure)

(nucleus) este o component esenial

caracteristic celulelor eucariote. ndeplinete
ca funcii principale: -stocarea informaiei
genetice n ADN-ul nuclear , reglarea i
controlul tuturor activitilor celulare. n
organismele animale, exist i celule
anucleate (hematiile, trombocitele), care sunt
incapabile s sintetizeze proteine, activitiile
lor metabolice fiind foarte restrnse.

Nucleul a fost descoperit de

FONTANA, n 1831, care a observat o

formaiune ovoid n celulele
epidermice. Ulterior, BROWN (1833) a
fost primul care a enunat conceptul
de celul nucleat, ca unitate
structural, care intr n alctuirea
plantelor, concept ce a fost extins i
la alcturiea corpului animalelor.

n alctuirea nucleului intr:

nucleolema sau membrana nuclear,
nucleoplasma (matricea sau sucul
nuclear), nucleolii i cromatina sau
cromozomii.

Nucleul reprezint centrul de

comand, control i de coordonare a
celulei eucariote, funcionnd ca un
computer chimic prevzut cu un
program (ADN-ul) i o memorie (ARNul). n calitate de centru informaional
al celulei, nucleul coordoneaz toate
reaciile chimice legate de
desfurarea proceselor vitale,
contrlnd att sinteza proteinelor
enzime din celul, ct i sinteza
proteinelor de structur. (Fig.4.1.)

Fig.4.1. Rolul nucleului n circulaia

informaiei genetice n celula eucariot.

Nucleul conine genomul (totalitatea genelor) celulei,

format dintr-un numr precis de gene. O gen este o

secven de nucleotide (500-1500), care determin o
secven de aminoacizi, mpreun cu elementele de
control (un promotor, o secven lider i un terminator. La
animalele domestice, gena ocup un loc specific n
molecula de ADN care ntr n compoziia cromozomului.
ntr-o celul uman, lungimea total a moleculelor de
ADN este de cca. 1,6 m coninnd un potenial
informaional imens, estimat la aproximativ 9 X 1011 bii,
ce corespunde informaiilor cuprinse ntr-o bibliotec cu
180.000 volume (considerndu-se c un cuvnt este
evaluat n medie la 36 bii, iar n fiecare volum se gsesc
150.000 cuvinte).
Totodat nucleul conine echipamentul enzimatic
necesar pentru: repararea genomului, replicarea sa,
transcrierea mesajului n ARN i prelucrarea ARN-ului ( n
ARN mesager, ARN de transfer i ARN ribozomal.

Fig.4.2. Forme de nuclei

1-Veziculos (n neuron);
2-Multilobat (neutrofil);
3,11-Bilobat (eozinofil, pseudoeozinofil de pas
4-Aplatizat (adipocit);
5-Reniform (monocit);
6-Ovoidal (eritrocit);
7-Discoidal (celula caliciform);
8-Alungit (leiocit);
9,10-Sferoidal sau ovoidal (limfocit)

4.1. Caracterele morfologice ale nucleului

Rspndire. Majorittea celulelor organismului

prezint nucleu. Exist i excepii (hematiile,celulele

cristaliniene, trombocitele), care reprezint stadii
finale, n evoluia unui tip celular, cu existen
limitat n timp, stadii specializate la funcii pasive.
Celulele fr nucleu nu pot crete i nu se mai divid.
Forma nucleilor este foarte variat,indicnd,
de regul, pe cea a celulei. Nucleul apare: - sfericovoidal (nucleus sphericus- ovoideus), n celulele
izodiametrice (sferice,cubice,poliedrice);- alungit
(bacilliformis,fusiformis), n celulele fusiforme
(musculare) sau columnare (prismatice); turtit,aplatizat (planus) n celulele pavimentoase
(endoteliale),n adipocite, n celulele caliciforme;
lobat (segmentalis s. moniliformis)), n celulele care
trebuie s se modeleze rapid.(Fig.4.2.)

Forma nucleului este influenat de activitatea celulei. Devine

neregulat n celulele foarte active. n acest mod se produce o

cretere a suprafeei prin care se realizeaz schimburile dintre
nucleu i citoplasm. Totodat nucleul prezint o oarecare
plasticitate (deformabilitate) care i permite ca, n anumite
condiii spaiale intracelulare, s i modifice forma. Asfel, n
monocite nucleul apare reniform , dei celula este sferic,
deformarea datorndu-se prezenei centriolului.

Fig.4.3. Poziia nucleului n diferite celu

1-Central;
2-Periferic;
3-Mediobazal;
4,5-Bazal

Poziia. n cele mai multe cazuri, nucleul ocup o poziie central,

strategic pentru rolul de coordonator al activitii celulare.
Totodat exist numeroase excepii, n care nucleul ocup o poziie:
excentric, n adipocite (celule care acumuleaz grsimi n
citoplasm); medio-bazal, n celulele secretoare din pancreas sau
parotid; bazal, n secretoare de mucus, n celulele caliciforme. n
general n celulele secretoare.(Fig.4.3.)

Numr. Ca regul general, o celul prezint un nucleu.

Excepiile sunt ns numeroase. Astfel, hepatocitele sunt

binucleate n proporie de 7-8%, osteoclastele au 30-40 nuclei, iar
fibra muscular striat (rabdocitul) prezint ntre 20-40 nuclei
pentru fiecare centimetru.

n condiii patologice, mai muli nuclei apar n:- celulele

gigante Langhans (prezente n tuberculoz, au cva zeci de
nuclei, dispui la periferia celulei, n coroan sau potcoav);
-celulele gigante de corp strin, care apar n cazul ptrunderii n
organism a unor particule strine, nedigerabile de ctre celule; celulele tumorale.

Multinuclearitatea se produce n dou moduri: 1- prin

multiplicare nuclear repetat (cariokinez), fr diviziunea
citoplasmei (citodierez),rezultnd un plasmodiu; 2-prin fuzionarea
mai multor celule mononucleate, rezultnd un sinciiu (cum este
cazul osteoclastelor, rabdocitelor,celulelor Langhans,etc.)

Fig.4.4. Variaia dimensiunilor nucleului n funcie de gradul de poliploidie

Dimensiunile nucleului. Variaz n limite mai strnse (ntre 5-

15 ) dect dimensiunile celulelor, diversitatea dimensiunilor

celulelor din organismul animal realizndu-se pe baza variaiei
de volum a citoplasmelor.

Msurarea dimensiunilor nucleului se numete

cariometrie i reprezint un domeniu de mare interes pentru
biologia i patologia celular. Nucleii prezint variaii
dimensionale funcionale i patologice.

Variaiile funcionale ale dimensiunilor nucleului sunt n

legtur cu: Vrsta, nucleul fiind mai mare n celula tnr,
dect n celula mbtrnit, n cazul aceluiai tip celular;

Bioritmul, existnd diferene de volum de pn la 20%,

ntre zi i noapte, la hepatocite,neuroni, nefrocite,etc.;

Gradul de poliploidie (numrul de seturi cromozomale

prezente n nucleu). Cu ct gradul de poliploidie este mai mare
cu att nucleul este mai mare. Astfel, nucleii megacariocitelor
sunt mult mai voluminoi dect cei a hepatocitelor. Din acest
punct de vedere n hepatocite se pot ntlni : 1 - nuclei mici (cu
diametru de 10 m), diploizi (2n), ntlnii la cca.80% din
hepatocite; 2 - nuclei medii (cu diametru de 15 m); - tetraploizi
(4 n), ntlnii la 16% din hepatocite i uneori octaploizi. S-a
constatat c suprafaa nuclear

crete proporional cu gradul de poliploidie, fapt ce explic nmugurirea

nucleilor poliploizi.

n patologie, variaii ale dimensiunilor nucleului se ntlnesc n

toxicoze, n boala de iradiere i n cancer. n celulele neoplazice, nucleii
apar de talie mare, cu morfologie extrem de variat n acelai cmp
microscopic, putnd prezenta uneori aspect monstruos.

ntre volumul nucleului i volumul citoplasmei se stabilete un

raport nucleo-citoplasmatic (N/C), a crei valoare variaz n limite foarte
largi (1/3 - 1/20), de obicei situndu-se ntre 1/7 - 1/10.

Atunci cnd volumul citoplasmei crete mai mult dect volumul

nucleului, raportul N/C va fi refcut fie prin diviziune celular, fie printr-o
cretere a volumului nuclear. n cazul n care volumul nu poate fi refcut,
funcionarea normal a celulei este perturbat. n condiii patologice,
raportul N/C poate fi complet modificat, ajungndu-se la inversarea
raportului, n celulele tumorale.

Vscozitatea nucleoplasmei este mai mic dect a citoplasmei,

excepie fcnd ovocitul. Greutatea specific a nucleului este influenat
de coninutul n ap i de starea fiziologic a celulei, descrescnd n
urmtoarea ordine: nucleol, cromatin, nucleoplasm.

Ph-ul nuclear este uor alcalin (7,4-7,5). Totodat, n nucleu se

realizeaz diferene de potenial ntre membrana nuclear (cu sarcini
electrice negative) i nucleoli sau cromozomi, ce au sarcini electrice
pozitive.

Componentele nucleului sunt: membrana nuclear,

nucleoplasma,cromatina i nucleolul.

4.2. Membrana nuclear

Membrana nuclear (nucleolema sau carioteca)

(nucleolemma s. karyoteca) este o structur lipoproteic, cu
o grosime de civa zeci de nanometri, caracteristic
eucariotelor care mparte celula n dou compartimente: nucleul ce conine genomul, structurile implicate n
transcripie i n prelucrarea produsului transcriptic; citoplasma ce cuprinde organitele celulare. n celulele vii,
apare ca o pelicul fin, cu indice de refracie i densitate
mai mare dect restul nucleului. n celulele fixate, se
coloreaz bazofil, iar vizibilitatea cromatic se datorete
condensrii i coagulrii unor componente ale carioplasmei
care se depoziteaz pe faa intern a membranei.

La microscopul electronic, nucleolema apare format din

dou foie (una intern i alta extern), fiecare trilaminat,
lipoproteic, groase de 60-100 , separate printr-un spaiu
perinuclear sau cisterna perinucleara,de 150 300 A, cu o
substanta amorfa

Fig.4.5.Membrana (MN) nuclear -

reprezentare tridimesional
1-MN i relaiile sale cu reticulul
endoplasmic (RE);
2-MN, la microscopul electronic,
cu grosisment redus;
3-Trilaminaritatea celor dou MN;
4-Organizarea molecular a MN;
5-Ultrastructura MN .
a-Nucleul; b-Membrana nuclear; cCitoplasma; d-Por; e-Reticul
endoplasmic; f-ribozomi.

Membrana nuclear extern (membrana nuclearis

externa) prezint o fa citoplasmatic, ornat cu

ribozomi, are un contur mai flexibil i zone active de
formare a veziculelor.

Membrana nuclear intern (mebrana

nuclearis interna) este lipsit de ribozomi i ader
fie la nucleoplasm, care poate diferenia o lamin
dens, fie la cromatin.

Cisterna perinuclear (cisterna

nucleolemmae) apare ca un spaiu tridimensional,
aflat n continuitate cu spaiul reticulului
endoplasmatic. n acest spaiu s-au pus n eviden
proteine, enzime.Ca2+.(Fig.4.5)

Nucleolema sau nveliul nuclear este ntrerupt (fenestrat) de orificii

circulare, denumite pori circulari, la nivelul crora cele dou membrane se

afl n raporturi de continuitate. Numrul de pori de pe o unitate de suprafa
este legat de intensitatea schimburilor nucleo-citoplasmatice. Asfel, la
celulele n cretere pot exista 10 pori/ m2. Se ntlnesc variaii n numrul,
frecvena i distribuia porilor de la un tip de nucleu la altul. Porii sunt n fapt
"porile" folosite de macromolecule i de ansamblurile macromoleculare
(proteine, ARN m, subuniti ribozomale,etc.) pentru a intra sau iei din
nucleu. (Fig.4.6)

Fig.4.6. Structura porului nuclear.

Porul mpreun cu structurile adiacente formeaz

complexul porului.
Complexul por cuprinde: a - dou inele sau anuli , asezate
pe ambele fee ale porului (nuclear i citoplasmatic),
fiecare inel fiind compus din granule proteice sferoide cu
diametrul de 10-25 nm, care sunt dispuse n form de
octogon; b - opt conuri, orientate dinspre peretele porului
ctre lumenul su, considerate a fi agregate de fibrile; c - o
particul central, n form de granul sau bastona,
inconstant prezent; d - pachete de filamente
nucleoplasmatice de 4-8 nm, care se inser cu
oextremitate de inelul intern, iar cu cealalt extremitate se
prinde pe formaiuni intra nucleare (eventual pe nucleol).

Dup unii autori, diferitele structuri care apar n

centrul porului (diafragma porului, granula central,
filamentele) par a fi mai curnd materiale surprinse n
timpul trecerii prin por dect structuri pemanente.

Fig.4.7.Schema complexului por.

1-MN extern;
2-MN-intern;
3-Spaiu cisternal;
4-Filament intern;
5-Formaiune conic;
6-Granul-anulus extern;
7-Granul-anulus intern;
8-Granul central.

Funciile membranei nucleare sunt: 1 delimiteaz coninutul nucleului de cel al

citoplasmei;2 - regleaz schimburile dintre
nucleu i citoplasm; 3 - formeaz membranele
reticulului endoplasmic, reprezentnd rezerva
de citomembrane n celule care se divid rapid; 4
- menine i stabilizeaz cromatina, care se
ataeaz de faa sa intern; 5 - rol mecanic n
susinerea organitelor, acestea fiind legate de
faa sa extern prin fibrile de 18 nm.(Fig.4.8.)
Fig.4.8. Diagrama cilor de translocare a matrialului din nucleu (A) n citoplasm (B).
1-Transport prin microvezicule;
2-Transport transmembranar
3-Transport combinat;
4-Translocare prin pori;
5-Extruzare prin delimitarea unor saci din nveliul nuclear.

 4.3.Nucleoplasma

Nucleoplasma, matricea nuclear sau sucul nuclear

(nucleoplasma) reprezint acea parte a nucleului, aparent lipsit de
structuri (la microscopul optic i la cel electronic,de grosisment redus).
La nivelul molecular apare structurat, nct denumirea de suc nuclear
apare impropie, fiind mai adecvat denumirea de matrice nuclear.
Nucleoplasma se prezint ca un mediu de natur proteic care n care
"plutesc" nucleolii i cromatina. Are rol esenial n organizarea nucleului,
determinndu-i forma, n sinteza de ADN i ARN, n medierea semnalelor
hormonale (ale steroizilor).Conine diverse enzime, ce intervin n
glicoliza anaerob i n realizarea unor legturi macroergice.

Matricea nuclear cuprinde dou componente: matricea nuclear

propiu-zis i fraciunea labil a matricei.

Matricea nuclear propiu-zis sau scheletul nuclear reprezint

echivalentul citoscheletului la nivel nuclear,fiind format dintr-o reea de
proteine stabile cu greutatea molecular mare.Se poate izola dup
extragerea cromatinei i nucleolului. Este format din trei componente:
matricea fibrilar, componentele fibrilare (nemembranoase) ale
nveliului nuclear i componenta fibrilar a nucleolului.

Matricea fibrilar apare ca o reea de fibrile intranucleare, ntins

n toat masa nucleului. Este format din granule sau particule
matriceale, electronodense, cu diametru de 15-20 nm i din fibrile
matriceale (sau matrixin), cu diametru de 5 nm,dispuse n pachete.
Matricea fibrilar conine proteine (20% din totalul proteinelor nucleare),
ADN (1,2%), ARN (0,5%) i fosfolipide, n cantitate redus. Lipsesc
proteinenele histonice, n timp ce proteinele nonhistonice ocup 18,2%,
predominnd cele acide.

Componentele fibrilare (nemembranoase) ale nveliului nuclear sunt o form

specializat a citoscheletului nuclear,fiind reprezentate de lamina dens intern

(sau lamina fibrosa) i de complexul por.
Lamina dens intern este situat pe faa nuclear a membranei interne
a nveliului nuclear. Are aspectul unei reele de fibrile legate pe de o parte la
reeaua matricei nucleare i pe de alt parte la componentele fibrilare ale
complexului por. Complexul por este format din structuri inelare (matricea
anular sau anulii), din granule centrale i din filamente radiare.

Lamina dens intern mpreun cu complexul por formeaz o

component a scheletului nuclear, denumit complex lamina-por. Acest complex
conine 2-3% din totalul proteinelor din nucleu (95% din ele fiind nehistonice,
predominent acide). Pe faa intern a complexului lamina-por a fost identificat o
nucleozid trifosfataz, implicat n transportul ARN ctre citoplasm.

Componenta fibrilar nucleolar (matricea nucleolilor) este reprezentat

de o reea de filamente ce ocup aria ce corespunde prii fibroase i prii
granuloase din nucleol.Este format din polipeptide asemntoare celor din
scheletul nuclear i are rol de suport pentru depozitarea granulelor ribozomale.

Funciile matricei nucleare sunt: 1- menine forma nucleului i stabilitatea

acestuia n interfaz; 2-asigur flexibilitatea nucleului, fapt ce permite realizarea
unor modificri structurale legate de organizarea cromatinei, replicarea ADN,
transcripia i transportul intranuclear de ARN; 3- contractilitatea, independent
de ATP, dar influenat de ionii bivaleni (Ca2+,Mg2+) ce permite realizarea unor
variaii ale volumlui nuclear; 4- suport pentru depozitarea granulelor ribozomale.

4.4. Cromatina
Cromatina nu este o substan chimic, ci o noiune

biologic, fiind reprezentat de materialul intranuclear care se

evideniaz cu colorani bazici. Este forma de existen a
cromozomilor n interfaz , n celula aflat ntre dou diviziuni.
Cromatina i cromozomii sunt dou forme de organizare ale
unuia i aceluiai material genetic (ADN-ul).

Compoziia chimic a cromatinei cuprinde ADN, proteine

histonice, mici cantiti de ARN i proteine nehistonice.

Cantitatea de ADN din nucleu este constant pentru o

anumit specie i reprezint genomul speciei respective. Este
dat de numrul i dimensiunile moleculelor de ADN.

Histonele sunt proteine bazice, prezente numai n

genomul eucariotelor. n funcie de coninutul n arginin i
lizin exist cinci tipuri de histone, denumite H1, H2A, H2B,
H3, H4. La rndul su fiecare tip prezint mai multe subtipuri.

Histonele prezint mai multe particulariti: 1- au mas

molecular mic; 2- sunt puternic bazice, datorit coninutului
mare (10-20%) de aminoacizi bazici (lizine i arginine); 3sunt purttoare de sarcini electrice pozitive, care le permit s
se lege de sarcinile negative ale gruprilor fosfat din ADN; 4sunt proteine cu evoluie filogenetic molecular definitiv.

Histonele ndeplinesc un rol major n mpachetarea ADN-ului n nucleu, n

realizarea organizrii supramoleculare a ADN-ului sub form de nucleozomi.

n cursul ciclului celular, histonele sufer o serie de modificri chimice
( acetilri,fosforilri, metilri).

n spermatozoid, histonele sunt nlocuite de protamine. Protaminele

au o greutate molecular foarte mic (4200 daltoni), o lungime medie de
numai 33 aminoacizi i sunt foarte bazice, coninnd mult arginin.
nlocuirea histonelor are loc n timpul trecerii de la spermatid la
spermatozoid, permind realizarea unui nalt grad
de condensare
Fig.4.9.
Aspecte i
ale
compactare a cromatinei, pentru mpachetarea ADN-ului ntr-un volum foarte
mic, cum este cel al capului spermatozoidului.cromatinei nucleare
I. La microscopul optic:
1-Cruste;
2-Granule;
3-Nevuri;
4-Nucleu hipercromatic;
5-Nucleu hipocromatic.
II. La microscopul electronic:
1- Cromatin periferic;
2-Cromatin insular;
3-Cromatina asociat nucleolui;
4-Nucleol;
5-Membran nuclear;
6-Spaiu perinuclear;
7-Pori.

Aspectele histologice ale cromatinei. Datorit

coninutului bogat n ADN,complexat cu

histone, cromatina se coloreaz ntens cu
colorani bazici (hematoxilin,albastru de
tripan), putnd prezenta aspecte variate:
granule, grmezi neregulate, reele de
filamente, corpusculi cromocentrici (sau
cariozomi). Aspectul morfologic al cromatinei
este asemntor n nucleii aparinnd aceluiai
tip celular, dar variaz n funcie de tipul
celular i de stadiul funcional,fiind un criteriu
important pentru identificarea celulelor la
microscopul optic.

4.4.1. Eucromatina
Eucromatina (euchromatinum) reprezint cromatina
funcional, activ, purttoare de gene structurale, pe care se
face transcripia mesajului genetic. Poate fi de dou feluri: 1eucromatin activ, pecare transcripia se efectueaz continuu,
asigurndu-se defurarea normal a vieii celulei; 2eucromatin permisiv , potenial activ, devenind activ n
momentul n care acioneaz semnale specific modulatoare (de
exemplu: hormonii).

Reglarea conformaiei genetice se realizeaz pe

eucromatin, prin intervenia unor ageni biochimici, n principal
proteine nehistonice, ce pot aciona ca represori sau derepresori,
modulnd transcriptibilitatea materialului genetic activ i nu
structura acestuia.

Raportul dintre eucromatin i heterocromatin se exprim

funcional prin raportul dintre transcriptibil i netranscriptibil,
permind, n fapt, realizarea relaiei dintre genotip i fenotip.
Astfel, prin genotip se nelege totalitatea materialului genetic
cuprins n cromatina interfazic, deci eucromatina mpreun cu
heterocromatina. Fenotipul reprezint expresia unei pri din
genotip, care a fost transcris din eucromatin n interfaz,
totalitatea trsturilor (nsuirilor morfologice,fiziologice,etc.)
exprimate din noianul de informaii nscrise n genotip.

4.4.2. Heterocromatina
Heterocromatina este cromatina condensat, netranscriptibil, inactiv

metabolic.Exist dou tipuri de heterocromatin: constitutiv i

facultativ.

Heterocromatina constitutiv este genetic inactiv, lipsit de gene

structurale. Pe ea nu se face transcripie niciodat, rmnd ntotdeuna
condensat n interfaz. Conine ADN repetitiv sau satelit, un ADN n care
anumite secvene nucleotidice sunt repetate de un numr foarte mare de
ori. La mamifere, ADN-ul repetitiv reprezint 15% din cantitatea total de
ADN. Exist dou tipuri de ADN repetitiv:1- ADN nalt repetitiv (10%), n
care secvenele se repet de sute de mii de ori; 2-ADN mediu repetitiv (5
%), n care secvenele se repet de 100 ori, de 1000 ori sau de zeci de mii
de ori.
Pe cromozomii omologi (care formeaz o pereche), heterocromatina
constitutiv se localizeaz identic, de regul, n imediata vecintate a
centromerului, putnd fi detectat prin tehnica de bandare a
cromozomilor.

Rolul heterocromatinei constitutive este incomplet elucidat,

atribuindu-se o semnificaie de "protecie" sau de "suport", sugerndu-se
ipoteza c ea determin specificitatea centromeric, respectiv poziia
centromerului n cromozomi.

Heterocromatina facultativ este o cromatin condensat, care

conine gene structurale represate (inactive) pe care nu se face
transcripia. Pe aceste gene, transcripia s-a efectuat sau nu ntr-o
perioad anterioar, sau se va putea efectua, dac se transform n
eucromatin, sub influena unui agent derepresor. Astfel, transformarea
unei pri din heterocromatina autozomal n eucromatin determin
sinteza de imunoglobuline i transformarea limfoblastic a limfocitelor.

n funcie de

cromozomi n care se
gsete, heterocromatina
poate fi: 1-autozomal
(autosoma), prezent n
perechile de cromozomi
autozomi, sub forma
poriunilor condensate,
heterocromatice, ce
conin lanuri de gene,
inactive transcripional;
2-gonozomal
(gonosoma), prezent
numai n cromozomii ce
determin sexul ,
reprezentat de
cromatina X, la femel i
de corpusculul Y, la
mascul

Fig.4.10. Aspectele cromatinei X

1-Satelit nucleolar;
2-Drumstick;
3-Corpuscul cromocentric

Cromatina X sau corpusculul Barr a fost descris

de M.L.BARR i de E.G.BERTRAM n 1949, n

neuronii din nucleul nervului hipoglos la pisic.
Este folosit ca marker genetic pentru
recunoaterea sexului genetic. In mod normal este
prezent numai n nucleii celulelor somatice ale
femelelor sub forma unui corpuscul cromatidian,
denumit corpuscul Barr. Acesta reprezint
condensarea interfazic a unuia din cei doi
gonozomi X. Prin condensare, eucromatina se
transform n heterocromatin facultativ inactiv.
n situaia n care ambii gonozomi X ar fi activi
(transcripionabili), n celulele femelei ar trebui s
existe o cantitate dubl de enzime, controlate de
genele situate pe cromozomul X.

Cromatina X este prezent i detectabil la

toate femelele mamiferelor, cu excepia femelei de
opussum (mamifer marsupial), unde este prezent
la ambele sexe. Lipsete la toi masculii normali.

Corpusculul Barr are un diametru de cca. 1m i poate

prezenta forme diferite: plan-convex, convex-concav,

biconvex, triunghiular. Poziia sa variaz dup tipul celular,
aprnd situtat adiacent membranei nucleare interne ( n
celulele epidermale i ale epiteliului mucoasei bucale) sau
ataat nucleolului (n unii neuroni). n neutrofilele femelelor
este prezent o formaiune echivalent corpusculului Barr,
denumit, dup aspectul su "b de tob" (drumstick),
format dintr-un cap cu diametrul de 1,5 m, ataat printrun filament cromatic extrem de subire la unul din lobii
nucleului. Frecvena drumstick-ului est de 7/500 neutrofile,
sau chiar mai mult.

Cromatina Y sau corpusculul F se poate observa n

nucleii celulelor provenite de la masculii normali, examinate
n lumin ultraviolet, dup colorare cu fluorocrom. Are
aspectul unui corpuscul intens fluorescent. A fost
descpoperit de PEARSON, n 1970 i reprezint expresia
citologic a cromozomului Y. La indivizii ce prezint doi
cromozomi Y se observ doi corpusculi F. n acest mod se pot
diagnostica unele anomalii cromozomiale (trisomia XXY) la
masculi, care predispun la un comportament dur, nrit.

4.4.3. Cromozomii

Cromozomii sunt structuri celulare cu numr,

forme i mrimi caracteristice pentru fiecare specie. Ei

devin vizibili la microscopul optic n celulele care se
pregtesc pentru diviziune sub forma unor filamente
lungi, cu mare afinitate pentru colorani bazici, de unde
i trag denumirea, croma nsemnnd n limba greac
culoare, iar soma - corp. (Fig.4.11.)

n funcie de posibilitile de a fi observai la

microscopul optic, cromozomii pot fi clasificai n : cromozomi interfazici, necondensai i neobservabili la
microscop; -cromozomi mitotici, uor observabili la
microscop, mai ales n cursul metafazei i de aceea
denumii cromozomi metafazici. Structura cromozomilor
metafazici cuprinde: cromatidele, centromerul,
kinetocorii, constriciile secundare i sateliii.

Cromatidele sunt cele dou jumti

longitudinale, genetic identice ce formeaz fiecare
cromozom metafazic. Fiecare cromatid corespunde
unei molecule de ADN.

Fig.4.11. Cromozomi interfazici i cromozomi mitotici

Extremitile terminale ale cromatidelor se numesc

telomere (telomerus) i sunt absolut necesare pentru

structura i funcionarea normal a cromozomilor,
deoarece previn fuziunea i menin o anumit ordine a
cromozomilor interfazici n interiorul nucleului prin
ataarea lor la membrana nuclear intern.
Centromerul (centromerus ) sau constricia primar este
regiunea cea mai ngust din lungimea cromozomului,
unde cele dou cromatide se unesc. Centromerul este
slab colorat sau acromatic, avnd un coninut sczut de
ADN. n vecintatea centromerului se gsete
heterocromatina constitutiv. Cei mai muli cromozomi
sunt monocentrici ( cromosoma monocentricum),
prezentnd un singur centromer. n cazul unor anomalii
cromozomiale apar cromozomi dicentrici ( cromosoma
dicentricum) sau policentrici (cromosoma polycentricum).

Kinetocorii (kinetocorus, i) sunt n numr de doi

pentru un cromozom i reprezint locul prin care fiecare
cromatid se ataeaz de microtubulii fusului de
diviziune. La microscopul electronic un kinetocor are
forma unui oval cu dimensiunile de 5/25 nm. (fig.4.12.)

Fig.4.12.Ultrastructura cromozomului
1-Centromer; 2-Cromatide; 3-Cromoneme; 4-Cromomere.

Satelitul este un corpuscul sferic, cu diametrul egal cu al

cromozomului sau mai mic, ataat de restul cromozomului printr-un
filament subire de cromatin de lungime variabil. Cromozomii ce
prezint satelit se numesc SAT-cromozomi.

n funcie de poziia centromerului, cromozomii se clasific n: 1telocentrici, la care centromerul este situat la o extremitate a
cromozomului,lipsindu-i braele scurte; 2-acrocentrici, cu brae scurte
abia vizibile, centromerul fiind situat n apropierea extremitii
cromozomului;3-submetacentrici, la care centromerul este situat n
apropierea mijlocului lungimii cromozomului, prezentnd un bra scurt i
un bra lung; 4- metacentrici, cu braele aproximativ egale, centromerul
fiind situat la mijlocul lungimii cromozomului.
Constriciile secundare sunt zone ale cromozomilor ce nu rein
colorantul bazic. Servesc drept criteriu morfologic de indiviudalizare a
cromozomilor. n comparaie cu constriciile primare, la nivelul
costriciilor secundare nuse produc deviaii angulare ale segmentelor pe
care le unesc. Unele din zonele de constricie secundar sunt legate de
formarea nucleolilor i se numesc zone nucleolare sau organizatori
nucleolari. iar cromozomii care particip la formarea nucleolilor sunt
denumii cromozomi nucleolari.

Fig.4.13. Schema unui cromozom.Tipuri de

cromozomi.
1-Centromer:
2-Constricie secundar;
3-Satelit;
a-Cromozom telocentric;
b-Cromozom acrocentric;
c-Cromozom submetacentric;d-Cromozom metacentric.

Dimensiunile cromozomilor sunt cuprinse ntre 1,5-10 m, lungime i

0,2-2 m diametru, putndu-se ntlni cromozomi gigani i cromozomi

pitici.
Numrul cromozomilor apare constant pentru aceiai specie,
existnd: 60 cromozomi la bovine, 54 la ovine, 38 la suine, 64 la
cabaline, 63 la catr, 38 la felide, 78 la canide i 46 la primate.

Celulele sexuale sau gameii sunt haploide (haplos= simplu),

coninnd un singur set de cromozomi, notat cu "n",fa de celulele
somatice care sunt diploide (diplos=dublu) i conin dou seturi (2n) de
cromozomi (un set matern i altul patern). Fiecare cromozom dintr-un
set are n setul opus un cromozom complementar, identic structurat
morfologic i genetic, alctuind o pereche de cromozomi omologi. Asfel,
taurinele prezint 58 cromozomi autozomi (29 perechi) i 2 cromozomi
de sex ( heterocromozomi sau gonozomi). Taurinele femele au n
celulele somatice doi cromozomi X, ,iar formula cromozomial este
60,XX. Masculii taurinelor au formula cromozomial 60,XY i prezint n
celulele somatice un cromozom X i altul Y. n formula cromozomial,
prima cifr indic numrul total de cromozomi, dup virgul fiind
indicai cromozomii de sex (gonozomii). La taurine, fiecare din cele 29
perechi de cromozomi autosomi este format din 2 cromozomi omologi,
cu aceiai morfologie i dispunere a genelor. Heterocromozomii
( gonozomii) nu sunt omologi. La taur, diferena de form ntre
cromozomul X i cel Y este evident, cromozomul Y fiind un cromozom
submetacentric mic. La vaci, cei doi cromozomi X submetacentrici nu
sunt omologi, deoarece numai unul este activ genetic, iar cellalt este
inactiv, rmne condensat n interfaz i formeaz cromatina sexual
(corpusculul Barr). Diferenierea celor doi cromozomi X n unul activ i
altul inert genetic se face ntr-un stadiu precoce al dezvoltrii
embrionare.

Compoziia chimic a cromozomilor include ADN, proteine (histonice i

nonhistonice) i o cantitate redus de ARN

Histonele sunt proteine cu greutate molecular redus (10.00020.000 dal), cu coninut mare (10-20%) de aminoacizi bazici (lizin i
arginin), purttori de sarcini electrice pozitive, ce le permite s se lege de
sarcinile negative ale gruprilor fosfat din ADN. La eucariote exist cinci
clase de histone, ce difer dup coninutul lor n lizin i arginin: H1,
H2A, H2B, H3 i H4.. n timp ce histonele H2A, H2B, H3 i H4 sunt cele mai
constante din punct de vedere al secvenei aminoacizilor la diverse specii,
histonele H1 prezint o variabilitate a secvenelor.

Proteinele nonhistonice sunt de foarte multe tipuri, de la proteine

ce intr n structura cromozomilor sau care se leag de ADN, intervenind
n exprimarea genelor i pn la proteine enzime ce intervin n sinteza de
ADN i ARN sau n scindarea lor.

Proteinele ce intervin n reglarea exprimrii genelor sunt rare,

aprnd ntr-un exemplar la 3000 de nucleozomi. Exist, ns i proteine
nehistonice mult mai abundente, precum grupul de proteine cu mobilitate
mare (HMG-higt mobility group), care fiind mici i cu multe sarcini
electrice migreaz rapid n cursul electroforezei. Din acest grup, proteinele
HMG14 i HMG17 se gsesc n toate celulele de la mamifere, legndu-se
de nucleozomii asociai cu genele active.

ARN-ul se gsete n cantitate redus n cromozomi, fiind

reprezentat de ARN-ul nascent, care se formeaz pe matria de ADN n
procesul de transcriere.

4.4.3.1. Cariotipul

Cariotipul este reprezentat de totalitatea caracterelor

morfologice (numr, mrime, form, poziia centromerului,

constriciile ) ale cromozomilordintr-o celul diploid. Grafic
poate fi prezentat printr-o "hart" numit cario- sau
idiogram, n care perechile de cromozomi omologi sunt
aezai n ordinea descrescnd a lungimii. Cromozomii
sexuali sunt cromozomi X submetacentrici i cromozomul Y,
submetacentric mic.

Cariotipul unei specii se obine prin fotografierea

cromozomilor metafazici, obinui din metafazele
limfocitelor din culturi, stimulate s se divid cu
fitohemaglutinine i blocate n metafaz prin adaus de
colchicin, un alcaloid ce mpiedic asamblarea fusului de
diviziune. Din fotografiile obinute se decupeaz cromozomii
i se aranjeaz n cariotip, putndu-se identifica grupele de
cromozomi, fra a se putea preciza cu certitudine perechea.

Identificarea fiecrei perechi se face prin folosirea

tehnicilor de bandare, tehnici care permit punerea n
eviden a unor benzi transversale de-a lungul
cromozomilor, benzi care sunt caracteristice pentru fiecare
cromozom.

Se folosesc dou categorii de tehnici de bandare:

1- tehnici cu fluorescen prin care se obin benzile "Q" ( de la

quinacrin) fluorescente;
2 -tehnici bazate pe tratarea cromozomilor cu diferii ageni fizici i
chimici, urmate de coloraia Giemsa prin care se evideniaz trei feluri
de benzi : benzile G (Giemsa), care apar intens colorate i corespund
benzilor fluorescente Q; -benzile R (reverse band), cu o dispunere
invers benzilor G, nct benzile R intens colorate, corespund benzilor
G palide;- benzile C, apar numai n regiunea centromerului sau n
apropiere ei i corespund localizrii heterocromatinei constitutive.

Determinarea cariotipului are o mare importan n practica

medical, pentru: a-diagnosticul unor boli congenitale, precum trisomia
perechiii 21, care produce boala Down (idioia mongoloid); b- sfatul
genetic i dirijarea mperecherilor la animale; c-aprecierea statusului
genetic la populaiile cu mare risc genetic; d-diagnosticul diferenial al
unor anomalii sexuale, cu determinare genetic, precum sindromul
Turner (XO, n loc de XX), ce produce sterilitate, ovare vestigiale i
sindromul Kleinfelter (XXX, n loc de XY), ce se manifest prin testicule
atrofiate, sterilitate, ginecomastie; e-diagnosticul unor boli ale
sngelui, precum leucemia mieloid, unde apare un cromozom marker
anormal (cromozomul Ph-Philadelphia); f - pentru diagnosticul de
paternitate, prin msurarea lungimii cromozomului Y, care trebuie s
fie aceiai la ft ca i la presupusul tat; g- pentru diagnosticul
diferenial ntre unele tumori benigne i alte maligne, ce modific
cariotipul. De asemenea stabilirea locusului pe care l ocup ogen ntrun cromozom permite realizarea hrilor cromozomiale, un domeniu de
cercetare de mare actualitate.

4.3.2. Organizarea molecular i supramolecular a

cromozomilor la eucariote.

La microcopul electronic, cromozomii metafazici apar ca nite

gheme de cromatin, nfurate foarte neregulat. Fiecare cromatid
conine o singur molecul de ADN ce se organizeaz sub forma unei
fibre de cromatin, cu grosimea de 10 nm, foarte sinuoas,
mpachetat compact, prezentnd zone de eucromatin i
heterocromatin. mpachetarea ADN-ului i a histonelor n cromozom
este absolut necesar pentru ca o molecul de ADN cu o greutate
molecular de 610 daltoni i o lungime de 3 cm s ncap ntr-un
cromozom lung de 5 m ( 0,0005 cm). mpachetarea se facecu
ajutorul nucleozomilor, care sunt uniti fundamentale repetitive de
organizare a complexului ADN -histone, deci a cromatinei. (Fig.4.14).
Fig.4.14.Modaliti de
plicaturare a
fibrei de cromatin n
cromozom
1-Plicaturare transversal;
2-Plicaturare longiutdinal;
3-Plicaturare combinat;
4-Structur cuaternar.

4.4.3.3. Nucleozomii

Conceptul de nucleozom a fost elaborat de KRNBERG, n

anii 1975-1977. Un nucleozom este un octamer histonic de

forma unui cilindru scurt , cu un diametru de 11 nm i o
nlime de 5,5 nm, pe care duplexul de AND l nconjoar de
dou ori.(Fig.4.15.)

Fig.4.15.Alctuirea nucleozomului

Fig.4.16.Poziia histonei H1

Octamerul histonic este format din opt molecule de histone, cte

dou molecule de H2A, H2B, H3 i H4. Tetramerul de histone (H3)2 i (H4)2 - bogate n arginin formeaz miezul
nucleozomului i determin nfurarea duplexului de ADN. Cei doi
dimeri de histone bogate n lizin, - (H2A)2 i (H2B)2 - sunt
ataai miezului nucleozomului. Nucleozomul nu conine proteine
nonhistonice.

Histona H1 nu intr n structura nucleozomului, fiind siutat

lateral de acesta, n contact cu intrarea sau ieirea ADN-ului din
nucleozom. Histona H1 se leag de ADN-ul linker prin fore ionice,
prezentnd o poriune C (carboxil) terminal, legat direct de ADN i
o poriune N (amino-), ce nu se ataeaz de ADN, dar ofer locusuri
de legare pentru proteinele nehistonice HMG1 i HMG2. Histona H1
este implicat n spiralizarea Fibrei de cromatin.(Fig.4.16).

Molecula de ADN este continu de-a lungul cromozomului,

prezetnd poriuni nfurate pe nucleozomi i poriuni ce fac
legtura dintre doi nucleozomi succesivi, denumite ADN-linker sau
internucleozomic. De ADN-ul linker se leag o molecul de histon
H1, amplasat ntre doi nucleozomi. Se realizeaz, asfel, o niruire a
nucleozomilor unul dup altul, ca mrgele pe a, formndu-se
filamentul subire de cromatin, cu diametrul de 11 nm, care se
poate observa la microscopul electronic, numai dac cromatina este
"ntins" n mod artificial. n celula vie, fibra de cromatin are un
diametru de 30 nm, rsucit ntr-o structur helicoidal (un solenoid
sau o bobin) cu pasul elicei de 11 nm. La fiecare tur de spir se
inser ase nucleozomi.

Rata de mpachetare a ADN-ului pe nucleozom este de circa 10/1.

aproximativ 60 nm de ADN fiind nfurai pe un cilindru

nucleozomic nalt de 5,5 nm. Apoi, dispunerea nucleozomilor sub
form de bobin (solenoid) cu diametru de 30 nm permite
realizarea unui raport de mpachetare de cca. 50/1. Eucromatina
corespunde filamentului de cromatin de 10 nm, iar
heterocromatina corespunde solenoidului (bobinei) de 30 nm.
(Fig.4.17)

Fig.4.17.Formarea filamentului
subire de cromatin
A-Histona H1; B-Nucleozom; C-Filamentul
de cromatin;
1-Poriunea globular a histonei.

mpachetarea duplexului de ADN pe nucleozom i a

nucleozomilor n fibra de cromatin de 30 nm ar

permite ca ntr-un cromozom ipotetic de 1 mm
lungime, s ncap un ADN lung de 3 cm. La rndul ei,
fibra de cromatin de 30 nm se pliaz formnd bucle
de mrimi variabile, ce permite s se reduc lungimea
"firului" de ADN de la 1 mm la 100 m .
Pentru a "ncape" n cei 5 m lungime ai unui
cromozom metafazic sunt necesare nc dou ordine
de condensare a cromatinei, care se realizeaz probabil
prin mpachetarea elicoidal a buclelor de cromatin,
nct aglomerarea lor n anumite zone determin
apariia benzilor vizibile n cromozomul metafazic. Se
pare c superspiralizarea solenoidului se realizeaz cu
ajutorul unor proteine nehistonice. Astfel, fosforilarea
proteinelor nehistonice ar declana superspiralizarea
solenoidului, n momentul trecerii de la G2 la mitoz,
iar defosforilarea lor ar induce despiralizarea, n
momentul trecerii de la mitoz la G1. Alturi de
histone, n procesele de mpachetare a nucleozomilor n
fibra de cromatin, ntervine ionul de Mg2+.(Fig.4.18.)

Fig.4.18.Structura fibrei de cromatin de 30 nm (A) i

nucleozomului (B).
1- Miezul histonic;
2- ADN linker.

In timpul diviziunii celulare, condensarea cromatinei

corespunde mpachet-rii compacte n spaiu a fibrei de

cromatin de 30 nm, odat cu realizarea structurii
cromozomului metafazic. (Fig.4.19.)

S-a calculat c, ADN-ul nfurat pe un nucleozom

este prea scurt pentru a corespunde unei gene
structurale, nct nu exist o concordan ntre o gen,
ca unitate de informaie genetic i un nucleozom, ca
unitate de mpachetare a ADN-ului.

Gena este format din aproximativ 1000 perechi de

nucleotide (perechi de baze), n timp ce ADN-ul nfurat
pe un nucleozom are 200 perechi de baze. Unele gene
de la eucariote apar discontinui, prezentnd secvenele
din ADN care codific aminoacizi (exoni), separate ntre
ele prin secvene de ADN care nu codific aminoacizi
(introni).(fig. 4.19)

Fig.4.19.Eucromatina i heterocromatina
realizrii
structurilor cromozomilor eucariotici
1-ADN linker
1+2Eucromatin;
3-Solenoid de 30 nm - heterocromatin

Fig.4.20.Etapele
A-Duplex de ADN;
B-Filament de cromatin;
C-Fibra de cromatin;
D-Bucle de cromatin;
E-Band condensat;
F-Cromozom n metafaz.

Exist mai multe ipoteze asupra mecanismului prin

care genele structurale din ADN-ul nfurat pe

nucleozom sunt activate pentru transcripie. Cea mai
larg acceptat ipotez (emis n 1982) susine c
activarea genelor se face ca urmare a interveniei
proteinelor nehistonice HMG14 i HMG17, care fie c
nlocuiesc proteinele HMG1 i HMG2 de pe locurile lor
de legare pe histona H1,fie c nlocuiesc nsi histona
H1 de pe ADN-ul linker internucleozomic.(Fig.4.20.)
In acest fel, regiunile din filamentul nucleozomic n
care intervin proteinele HMG14 i HMG17 i vor
modifica conformaia biochimic, devenind regiuni
active transcripional.

Nucleolul
Nucleolul este o component intranuclear, cu aspect

corpuscular intranuclear, prezent n interfaz, a crei

funcie principal const n biogeneza ribozomilor (cu
excepia ribozomilor mitocondriali. Ocup o poziie
cheie n circuitul intracelular al informaiei, fiind sediul
unui considerabil trafic de molecule. n el se
desfoar principalele procese care au loc n nucleu
(replicare, transcripie, transport), jucnd rolul unui
intermediar ntre cromozomi i citoplasm. Este
prezent (vizibil sau nu ) n toate celulele eucariote. Nu
exist nucleu fr nucleol, iar celulele care i perd
nucleolii nu mai sunt viabile.

n timpul diviziunii celulare se dezintegreaz i reapare dup terminarea acesteia. n

structurarea nucleolului, un rol deosebit revine organizatorilor nucleolari, prezeni n

unii cromozomi, adiacent constriciei secundare.
Dei a fost observat nc din 1836 de ctre VALENTIN, ca o granul dens n
interiorul nucleului, rolul su a fost dezlegat mult mai trziu, abia n 1960,
precizndu-se rolul esenial pe care l are n biogeneza ribozomilor

Examinat la microscopul prezint un aspect omogen, puternic bazofil, bine

delimitat. Prin impregnri argentice, au fost evideniate dou componente n
structura nucleolului: 1-nucleolonema o formaiune filamentoas, rsucit ca un
ghem; i 2- o component astructurat sau amorf. Nu este delimitat de o
membran.

n celulele vii, examinate n contrast de faz, nucleolul apare ca un corpuscul

puternic refringent, datorit coninutului redus de ap, heterogen i cu contur
neregulat
.

Numrul nucleolilor. n nucleii celulelor somatice exist, n mod obinuit doi

nucleoli, cte unul pentru ,fiecare set cromozomial. Numrul nucleolilor crete n
raport direct cu gradul de poliploidie. Astfel, n hepatocite exist 2 nucleoli, n celulele
diploide, 4 n cele tetraploide i 8 n cele octaploide.

Dimesiunile nucleolilor sunt ntre 1-2 m, ocupnd circa 30% din volumul
nucleului. Ele variaz n funcie de implicarea celulelor n sinteza de proteine. Celulele
care sintetizeaz cantiti mari de proteine (neuronii, celulele embrionare, limfocitele
stimulate antigenic) au nevoie de muli ribozomi,ceea ce face ca nucleolii s aib
dimensiuni mari. n celule n care sinteza de proteine este redus (n spermatozoizi),
nucleolii au dimensiuni mai mici. Nucleolul apare hipertrofiat n anabolism, n
perioada de difereniere embrionar i se reduce n catabolism i n inaniie.

Raportul nucleolo / nuclear. Numrul i volumul

nucleolilor depind de starea funcional a celulei. Cu ct

celula este mai activ n sinteza proteinelor, cu att
raportul nucleolo/nuclear este mai mare. Acest raport
este folosit drept criteriu pentru aprecierea vrstei
celulelor. Astfel celula tnr prezint un nucleu mare
eucromatic, cu un nucleol mare, cu o citoplasm redus i
bazofil, iar o celul adult prezint un nucleu mai mic,
hipercrom, cu nucleoli mici i o citoplasm abundent.

Fig.4.21. Forma i poziia nucleolului

A-Forma: 1-Sferoidal-ovoidal;
2-Discoidal;
3-Triunghiular;
4-Neregulat.
B-Poziia: 1-Alipit membranei nucleolare;
2-Central;
3-Excentric.

Forma nucleolilor. Nucleolii prezint, de cele mai multe ori,

o form sferic-ovoidal, care pe msura mbtrnirii celulei

devine neregulat.

Densitatea nucleolilor este mare (1,35), nucleolul fiind

cea mai dens structur din celul, datorit concentraiei
ridicate n substan uscat i a cantitii foarte mici de ap.

Dispunerea nucleolilor n nucleu este n majoritatea

cazurilor central sau paracentral, putnd varia n raport cu
mometul funcional. S-au observat i descris micri ale
nucleolului n interiorul nucleului i stabilirea unor contacte
cu nveliul nuclear, localizare eficient pentru descrcarea
de material biologic n citoplasm.

4.5.1. Ultrastructura nucleolului

Ultrastructura nucleolului evideniaz patru

componente(sau pri) n alctuirea nucleolului: componenta
filamentar, componenta granular, componenta
cromozomial i componenta astructurat .

Componenta filamentar cuprinde filamente de 5nm

grosime i 30-40nm lungime, dispuse n pachete ntretiate,
formnd o reea. Conine ADN-ul pe care se sintetizeaz
ARN-ul ribozomal i produsul primar al acestei sinteze (ARN
de 45 S). (Fig.4.22.)

Componenta granular este dominant,

fiind alctuit din granule cu diametru de 1520 nm, asemntoare, dar nu identice cu
ribozomii citoplasmatici. Aceste granule
reprezint precursorii ribozomilor.

Componenta cromozomial, dispus la

periferia nucleolului (cromatina perinucleolar)
sau avansnd spre interiorul nucleolului sub
form de benzi (cromatin intranucleolar)
este alctuit din filamente de 10 nm.

Fig.4.22.Ultrastructura nucleolului.
1-Componenta filamentar;
2-Componenta granular;
3-Componenta cromozomial;
4-Componenta astructurat.

Componenta astructurat apare omogen i cu densitate medie la

fluxul de electroni. Umple spaiul dintre granule i fibre, fiind

considerat, de unii autori, cariolimf, iar de ali autori un gen de
matrice pentru celelalte componente nucleolare.

Cele patru componente nucleolare se pot distinge n acelai

nucleol numai n cazuri rare. Raporturile cantitative i topografice
dintre ele variaz n funcie de tipul celulei i de momentul funcional
al acesteia. Asfel, n hepatocitul uman, componentei filamentoase i
revine 15 %, celei granulare 70%, iar componentei cromozomiale 5%
din volumul nucleolului. n celulele active, componenetele nucleolare
pot segrega, dnd natere unui corpuscul nucleolar (corpusculum
nucleare).

Nucleolul nu conine membrane i nu este delimitat de

membrane.Componenta filamentoas i ce granular se pot asocia
formnd benzi ce apar, la microscopul optic, ca nucleolonem. iar
poriunea periferic a componentei cromozomiale corespunde
cromatinei asociate nucleolului.

n funcie de criteriile ultrastructurale, exist mai multe tipuri

de nucleoli: nucleoli reticulari, cei mai comuni, cu cele patru
componente distincte; nucleoli compaci, n care nu se disting
componentele, ntlnii la cteva tipuri celulare, ca de exemplu la
limfocite; nucleoli inelari, n care componenetele filamentoas i
granular formeaz un inel periferic, care nconjoar o lacun central.

Compoziia chimic a nucleolului variaz n funcie de

tipul celular i de momentul funcional, principalele

componente chimice fiind: ADN-ul (3 %), ARN-ul (7%) i
proteinele (90% din greutatea uscat). La aceasta se mai
adaug cantiti mici foarte mici de lipide i minerale
(magneziu, calciu, zinc, cobalt, etc.).

ADN-ul din nucleol este reprezentat de organizatorii

nucleolari ce ptrund ca nite bucle de ADN n nucleol.

ARN-ul din nucleol este n principal ARN ribozomal aflat n

diverse faza de maturare. Se presupune c nucleolul este o staie
intermediar obligatorie n tranzitul spre citoplasm al ARN-ului
mesager i al celui de transfer.n nucleol exist diferite tipuri de ARN,
ce difer dup coeficentul lor de sedimentare (exprimat n uniti
Svedberg), precum ARN 45 S, ARN 41 S, ARN 20 S, ARN 28 S, ARN 32
S. Aceste tipuri corespund diferitelor etape de maturare a ARN-lui.

Proteinele nucleolare provin din citoplasm i sunt repezentate

n cea mai mare parte de enzime implicate n sinteza i maturarea
ARN r (ribozomal), precum ARN-polimeraza-ADN dependent (sau ARNpolimeraza I), convertaza, metilaza,etc.

Bazofilia nucleolului reprezint principala sa caracteristic ,

vizibil la microscopul optic i se datorete coninutului

relativ mare de ARN i ADN.

 4.5.2.Biogeneza nucleolilor

Nucleolul este vizibil numai n

interfaz,disprnd n profaz i reaprnd n

interfaz. Un rol esenial n biogeneza nucleolului i
revine organizatorului nucleolar,care este o zon
cromozomial distinct, slab colarabil
(heteropicnoz negativ), situat n vecintatea
constriciei secundare, avnd un grad mai redus de
nfurare a fibrei de cromatin. Numrul
cromozomilor care prezint organizatori nucleolari
este limitat i variabil n funcie de specie. La
hominide exist cinci perechi de cromozomi
autuzomi, purttori de organizatori nucleolari
(perechile 13, 14, 15,21 i 22 ). (Fig.4.23.)

La microscopul optic, organizatorii nucleolari

corespund cromatinei asociat nucleolului, ce poate
fi evideniat prin reacia Feulgen, aprnd colorat
rou-violaceu. La microscopul electronic,
organizatorii nucleolari corespund componentei
cromozomiale, iar funcional cu ADN r (genele care
codific ARN r) ce cuprinde cistronii responsabili de
transcripia ARN r.

Fig.4.23. Organizatorii nucleolari.

1-nveliul nuclear;
2-Nucleol;
3- Cromozomi cu oranizatori nucleolari;
4-Bucle de cromatin cu gene pentru ARN r.

Ipotezele clasice susin: a- continuitatea sau persistena nucleolului sub

form de granule sau filamente fine (denumite corpusculi nucleolari), ataate

de cromozomi, mpreun cu care se repartizeaz n celulele fiice, dup care
sunt asamblai de organizatorii nucleolari; b-formarea de novo, deoarece
materialul nucleolar se dezintegreaz complet n cursul mitozei, fr a fi
incorporat n noii nucleoli.

Concepia actual a realizat un compromis raional din punct de

vedere molecular, ntre ipotezele clasice (a continuitii i a formrii de novo),
n sensul c componeneta cromozomal respect continuitatea, iar celelalte
componente (filamentoas, granular i amorf) sunt neoformate rapid n faza
G1 a ciclului celular, cnd cistronii sunt reactivai pentru transcripie.
4.5.3. Funciile nucleolului

Nucleolul ndeplinete funcii legate de: - sinteza ARN r i biogeneza

ribozomilor; -reglarea sintezei de ARN r; - transferul ARNm i ARNs n
citoplasm; pregtirea mitozei.

n sinteza de ARNr, ADN-ul nucleolar joac rolul de matri,

reprezentnd organizatorul nucleolar. ADN nucleolar conine cistroni, denumii
ADNr, responsabili pentru transcripia ARNr, separai ntre ei prin segmente de
spaiere i terminare, formate din ADN care nu codific. ADNr este transcris
prin intervenia ARN-polimerazei I, rezultnd un ARN de 45 S care reprezint
precursorul ARN-ribozomal. n nucleolii hepatocitelor se sintetizeaz 1000 de
molecule de ARN-45S pe minut. O parte din molecula de ARN de 45 S este
ndeprtat de o endonucleaz i

apare un ARN de 41 S, care prin intervenia unei convertaze este

scindat n ARN de 20 S i ARN de 32 S. (Fig.4.24.)

Nucleol -funcii

Fig.4.24.Rolul nucleolului n sinteza de

ARNr i n biogeneza ribozomilor

ARN-ul de 20 S - intervenia unei metilaze, care

ndeprteaz un fragment molecular, transformndu-se n

forma matur de 18 S. ARN-ul de 18 S prsete
nucleolul - se combin cu proteine venite din citoplasm,
dup care este trecut prin porii membranei nucleare sub
form de particule ribonucleoproteice, care reprezint
subunitatea ribozomal mic de 40 S, ce apare n
citoplasm la 30 minute de la nceperea sintezei.

ARN-ul de 32 S este metilat i se transform n

forma
matur de ARN de 28 S, dup ce a pierdut un fragment
din molecul. ARN-ul de 28 S mpreun cu ARN-ul de 5 S
( de origine nuclear, dar extranucleolar) i cu proteine
formeaz o particul ribonucleoproteic, care reprezint
subunitatea ribozomal mare (de 60 S). Subunitatea
ribozomal mare trece prin porii nveliului nuclear,
aprnd n citoplasm la o or de la debutul sintezei. Cele
dou subuniti ribozomale se ataeaz de ARNm, n
momentul nceperii sintezei de proteine, formnd
ribozomii. Fibrilele din componenta filamentoas sunt
filamente de ARN de 45 S, iar granulele din componenta
granular sunt subuniti ribozomale mari.

Reglarea sintezei de ARNr n nucleol se realizeaz printr-un mecanism de feed-

back. Existea unui exces de ribozomii acioneaz ca inhibitor al genelor care

determin sinteza de ARNr. Invers, distrugerea ribozomilor va declana
ncetarea inhibiiei i creterea sintezei de ARNr, cu formarea de noi ribozomi.

Transferul de ARN mesager (ARN m), deci a mesajului genetic i de ARN

de transport (ARN t) din nucleu n citoplasm nu poate avea loc dect n
prezena unui nucleol funcional, fapt demonstrat experimental prin distrugerea
selectiv a nucleolului cu un fascicul laser.
Nucleolul joac rolul de staie intermediar n tranzitul ARN m-ului i ARN tului spre citoplasm.
Pregtirea i desfurarea mitozei nu pote avea loc fr prezena nucleolului
n interfaz. Distrugerea acestuia produce blocarea celulei n faza G2, care
precede mitoza.
4.5.4. Implicarea nucleolului n citopatologie.

Aspectul nucleolului este folosit pentru recunoaterea celulelor

canceroase, unde nucleolul prezint modificri de volum, numr i form, care
sunt o consecin a malignizrii i nu cauza acesteia.

Hipertrofia nucleolar apare ca o caracteristic aproape constant n

celulele neoplazice (canceroase),iar creterea numrului de nucleoli i
neregularitile de form sunt relativ frcvente. Hipertrofia nucleolar nu este
acompaniat i de o hipertrofie proporional a nucleului nct valoarea
raportului nucleolo-nuclear este mai ridicat n celulele neoplazice fa de cele
normale (depind valoarea de 1/3). Gradul de hipertrofie a nucleolului reflect
capacitatea proliferativ a celulei fiind proporional cu gradul de malignitate a
tumorii.

Numrul nucleolilor este mai mare n celulele

maligne dect n celulele normale, fiind uneori

proporional cu gradul de malignitate a tumorii.
Asfel, n unele adenocarcinoame din ovar, au
putut fi observati 24 nucleoli ntr-o celul.

Forma nucleolilor este neregulat n

celulele maligne, ea putnd varia de la o celul
la alta n cadrul aceleiai tumori.

Citoplasma

Citoplasma reprezint acea component a celulei

situat ntre plasmalem i nucleolem. Cuprinde n
volumul su : - o matrice citoplamatic ( hialoplasm
sau citoplasma fundamental) ce corespunde prii din
citoplasm, care nu este cuprins n compartimentele
delimitate de membranele intracelulare; - organite
celulare sau intracitoplasmatice ; i - incluziuni celulare.

5.1. Matricea citoplasmatic

Matricea citoplasmatic se prezint ca un mediu

intern al celulei n care sunt "gzduite" organitele

celulare. O lung perioad de timp s-a considerat
c matricea citoplasmatic este omogen,
nestructurat (amorf), fapt pentru care a fost
denumit hialoplasm.

Fig.5.1. Ultrastructura citoplasmei

1-Membrana celular; 2-Citoscheletul membranei; 3- Microtubuli; 4Microtrabecule; 5-Mitocondrie; 6-Reticul endoplasmic rugos; 7-Polizomi; 8-Fibre de stress;
9-Ribozomi.

La microscopul optic apare astructurat, cu grade diferite de acidofilie

sau bazofilie. n celula vie prezint vscoelasticitate, aprnd mai frecvent

cu aspect de gel dect de sol, n funcie de echilibrul dinamic dintre
procesele de polimerizare i depolimerizare, echilibru determinat de
momentul funcional al celulei, de condiiile mediului intracelular si
extracelular.

Cu ajutorul microscopiei electronice (de transmisie i de nalt voltaj)

s-a observat, n hialoplasm, citoscheletul matriceal, format din
microfilamente i microtubuli, precum i dintr-o reea de
microtrabecule.n acest fel matricea citoplasmatic, prezint dou faze
sau componente: -o component (faz) fluid,denumit citosol, ce
conine ap, aminoacizi,enzime,electrolii, ioni i gaze; - o component
(faz) solid, polimerizat, sub forma unei reele bogat n proteine
structurale i n enzime.(Fig.5.1.)

Matricea citoplasmatic ndeplinete mai multe roluri: - menine

forma celulei i o adapteaz la necesitile funcionale ale celulei prin
componentele citoscheletului; - este sediul de desfurare a unor procese
metabolice, precum glicoliza, gluconeogeneza, glicogenoliza,
glicogenogeneza, biosinteza acizilor grai, a nucleotidelor, etc.; - conine
sau depoziteaz glicogen (n ficat i muchi), lipide (n corticosuprarenal),
ioni, pigmeni, ribozomi liberi, 15% din ARN-ul celular (sub form de ARN
mesager i ARN de transport); adpostete organitele celulare i
incluziunile citoplasmatice.

Organitele citoplasmatice au diferite mrimi, unele de ordinul

micrometrilor, fiind observabile la microscopul optic (complexul Golgi,

mitocondriile, centrul celular,ergastoplasma) iar altele sunt mai mici,
de ordinul nanometrilor, putnd fii observate numai la microscopul
electronic (ribozomii, lizozomii, peroxizomii, reticulul endoplasmic
neted i rugos, microtubulii i microfilamentele). Unele organite sunt
delimitate de membrane (complexul Golgi, mitocondriile,
peroxozomii, lizozomii, reticulul endoplasmic), n timp ce altele sunt
lipsite de membrane (ribozomii, centriolii, microtubulii i
microfilamentele).

Organitele delimitate conin n structura membranelor unele

enzime caracteristice, denumite enzime marker, ce pot fi evideniate
prin metode histochimice. De exemplu, mitocondria se caracterizeaz
prin prezena monoaminoxidazei, citocromoxidazei i a enzimelor
ciclului Krebs.Lizozomii au ca enzime marker fosfataza acid i aril
sulfataza, peroxizomii au catalaza i urat oxidaza, iar reticulul
endoplasmic glucozo-6-fosfataza.
Membranele ce aparin reticulului endoplasmic, complexului Golgi i
nveliului nuclear se afl n continuitate structural i funcional,
formnd un sistem al endomembranelor. Acest sistem poate stabili
conexiuni temporare cu unele organite ca mitocondriile, peroxizomii,
unele vacuole i cu membrana periferic.

Organitele celulare ndeplinesc diferite funcii: 1-

micarea intracelular (microfilamentele, microtubulii,

centriolii); 2- deplasarea celulei n mediu extracelular
(cilii i flagelul); 3- producerea de energie
(mitocondriile); 4-digestia intracelulular (lizozomii,
peroxizomii); 5-dezintoxicare (reticulul endoplasmic
neted, peroxizomii); 6- sinteza de molecule necesare
celulei sau destinate exportului (ribozomii, reticulul
endoplasmic rugos i neted, compexul Golgi); 7- unele
funcii speciale n celulele musculare (miofilamentele),
n celulele epiteliale (tonofilamentele), n celulele
nervoase (neurofilamentele) i nevroglice
(gliofilamentele).

5.2.Citoscheletul

Citoscleletul este o reea n spaiu (tridimensional) de

filamente proteice i microtubuli care strbat ntreaga matrice
citoplasmatic, ntretindu-se n toate direciile.
Citoscheletul ndeplinete funcii variate: - menine forma

celulei i o adapteaz la necesitile funcionale; - particip la

realizarea micrilor celulei; - ia parte la formarea citoscheletului
membranei;- interacioneaz cu nucleul i cu organitele celulare
(mitocondriile,veziculele sinaptice), participnd la meninerea lor
n poziie i la deplasarea lor n celul (mitocondriile i lizozomii
efectund o micare saltatorie); - interacioneaz cu
macromoleculele din citosol, evideniindu-se enzime glicolitice
legate de filamentele de actin; - particip la transportul
proteinelor n lungul axonului.

Citoscheletul se modific n celulele maligne. Astfel,

fibroblastele transformate malign i pierd fibrele de stress din
citoschelet i devin sferice.

n compunerea citoscheletului intr microfilamentele,

microtubulii, microfilamentele intermediare i microtrabeculele.

 5.2.1. Microfilamentele i microtubulii

Microfilamentele sunt componente ale citoscheletului, prezente

n citoplasma tuturor celulelor, aprnd mai abundente n
celulele care prezint micri de deplasare n esuturi sau
micri active intracitoplasmatice. Au lungimi variate i un
diametru de 5-7 nm, putnd apare izolate sau grupate. Sunt
orientate pe direcii diferite i formate din molecule proteice, n
special din actin i miozin, asemntoare celor din celulele
musculare.
Microtubulii sunt componente ale citoscheletului cu aspect
cilindric, cu diametrul cuprins ntre 20-30 nm, formai prin
polimerizarea unor molecule proteice, denumite tubuline. Pot
apare grupai sau izolai.

Microfilamentele i microtubulii sunt ultrastructuri cu

caracter dinamic, deoarece procesele de polimerizare i
depolimerizare se desfoar concomitent i continuu. Ele se
asambleaz i dezasambleaz rapid n celul, n citoplasm
existnd un depozit permanent de monomeri de actin i de
dimeri de tubulin.

Microtubulii i microfilamentele prezint polaritate,

nct polimerizarea i depolimerizarea se desfoar

cu viteze diferite la cele dou extremiti. La
extremitatea pozitiv (notat cu +), viteza polimerizrii
este mult mai mare dect cea a depolimerizrii, nct
microfilamentul sau microtubulul se alungete. La
extremitatea negativ (notat cu -), viteza de
depolimerizare este mai mare, determinnd scurtarea.
Pentru o anumit concentraie de monomeri liberi n
citosol, microfilamentul sau microtubulul se afl ntr-o
stare de echilibru, n care la extremitatea negativ se
pierd molecule, iar la extremitatea pozitiv se ataeaz
molecule. n acest fel, un grup de molecule ataate la
captul pozitiv (+), se deplaseaz de-a lungul
filamentului sau microtubulului, de la extremitatea
pozitiv spre extremitatea negativ. (Fig.5.2.)

 n cazul cnd se protejeaz captul negativ (-) i se mpiedic depolimerizarea, se produce

creterea n lungime. Din acest motiv, microtubulii liberi au captul negativ inserat n
centrul celular sau n corpusculii bazali.

Fig.5.2. Polilerizarea i depolimerizarea microtubulului.

Dinamismul citosheletului este influenat foarte mult de cationii bivaleni. Astfel,
modificarea concentraiei ionilor de calciu ( Ca2+) induce polimerizarea sau
depolimerizarea microtubulilor i regleaz interaciunile dintre actin i miozin. Ionul de
calciu i exercit efectele sale prin intermediul unor proteine ce leag calciul, ca de
exemplul calmodulina, o protein format din 148 aminoacizi, cu secvene de aminoacizi
asemntoare cu troponina C. Calmodulina a fost detectat n toate celulele animale i
vegetale, nct este considerat a fi un receptor intracelular pentru calciu.

Dinamismul citosheletului este influenat foarte mult de

cationii bivaleni.Modificarea concentraiei ionilor de calciu

( Ca2+) induce polimerizarea sau depolimerizarea
microtubulilor i regleaz interaciunile dintre actin i
miozin. Ionul de calciu i exercit efectele prin intermediul
unor proteine ce leag calciul -calmoduline. Calmodulina a
fost detectat n toate celulele animale i vegetale, nct
este considerat a fi un receptor intracelular pentru calciu.
Unele proteine ca profilina,vilina, gelsolina, filamina, alfaactinina, fibrina, miozina influeneaz polimerizarea i
depolimerizarea microfilamentelor de actin. n
polimerizarea i depolimerizarea microtubulilor intervin i
proteinele tau( ) i proteinele asociate microtubulilor.

Un alt factor care moduleaz dinamismul

citoscheletului l reprezint nucleotidele. Adenozin
monofosfatul ciclic (AMPc) favorizeaz polimerizarea
citoscheletului i determin aglomerarea microfilamentelor i
a microtubulilor, modificnd forma i mobilitatea celulelor.

5.2.2.Microfilementele intermediare

Microfilamentele intermediare au fost descrise i investigate

intens dup anul 1978. Sunt denumite astfel, deoarece au diametrul
de 10 nm, cuprins ntre cel al microfilamentelor de actin (6 nm) i cel
al microtubulilor (25 nm).

La microscopul electronic apar sub forma unor filamente rectilinii

sau uor curbate, prezente n endoplasm, la periferia celulei (n

desmozomi sau n prelungiri). Sunt structuri mult mai stabile dect
filamentele de actin i dect microtubulii, nct odat asamblate nu
se mai depoliomerizeaz.

Sunt formate din molecule filiforme de proteine. Polimerizarea lor se

face prin alturarea i mpletirea monomerilor, ca ntr-o frghie i nu

prin niruirea monomerilor. Rezult astfel, structuri rezistente, ce pot
fi ntrite la nevoie i prin legturi covalente ntre subuniti.
Proteinele ce alctuiesc filamentele intermediare variaz dup tipul
de celul n care apar i dup specie. n compoziia unui filament
intermediar pot intra mai multe polipeptide diferite, cu greuti
moleculare ce variaz n limite largi.

n funcie de proteinele componenete, exist

urmtoarele tipuri de filamente intermediare: filamentele de cheratin sau tonofilamentele,

caracteristice pentru celula epitelial, formate din
proteine (citokeratine) asemntoare keratinei
din pr i ongloane; -neurofilamentele,
caracteristice neuronului, prin asociere cu
microtubulii strucutreaz neurofibrilele ce au un
diametru de 1-2 m; - filamentele de vimentin,
caracteristice celulelor de origine mezodermic
(fibroblaste, condroblaste, macrofage, celule
endoteliale, leiocite, astrocite, celulele Sertoli).
(Fig.5.3.)

Aplicaii medicale. Identificarea tipului de filament

intermediar cu ajutorul anticorpilor monoclonali, permite

diagnosticarea tumorilor maligne, deoarece: carcinoamele
au filamente de cheratin, sarcoamele de vimentin, iar
rabdomiosarcoamele de desmin. Glioamele au filamente
gliale, iar neuroblastoamele au neurofilamente.
5.2.3.Microtrabeculele.

Microtrabeculele au fost descrise n celule examinate

prin microscopie electronic de voltaj supranalt, la mriri de
300.000 ori. Sunt structuri fibrilare mai subiri de 4-6 nm,
dect microfilamentele.

Microtrabeculele formeaz o reea ce strbate ntreaga

citoplasm, nterconectnd microfilamentele,microtubulii,
practic toate componentele subcelulare prezente n celula
animal. Pot fi considerate ca fiind expresia fenomenului de
gelificare, dei uneori se contest realitatea lor biologic,
fiind considerate un artefact.

 Microtrabeculele menin poziia n spaiul intracelular a

citoscheletului i organitelor,fiind considerate suportul matricii

biostructurate. De reeaua microtrabecular se leag enzimele din
citosol, asigurndu-se trecerea substratului de la o enzim la alta
n mod coordonat. n ochiurile reelei se gsete ap i ioni , nct
microtrabeculele protejeaz celula n cazul fluctuailor coninutului
n ap. Atunci cnd apa ptrunde n celul, spaiile se dilat, n
timp ce n cazul deshidratrii celulei, spaiile se contract. Un alt
rol al reelei de microtrabecule constp n micarea intracelular a
granulelor de pigment.
5.3.Organitele micrii celulare

Organitele micrii celulare sunt: -microfilamentele de actin,

microfilamentele de miozin i microtubulii.

5.3.1.Microfilamentele de actin

Microfilamentele de actin sunt formate din molecule de

actin i au diametrul de 6 nm. La eucariote, actina ocup 10% din

totalul proteinelor din celulele nemusculare.

n citoplasm, moleculele de actin se pot gsi fie sub form

monomeric ( actin globular sau actin G), fie sub form
polimerizat, filamentoas ( actin filamentoas sau actin F).

Microfilamentele de actin (denumite, pe scurt , filamente) se

formeaz prin polimerizarea actinei globulare. Un filament cuprinde

dou lanuri de actin nfurate unul n jurul celuilalt, formnd
dublu helix rsucit spre dreapta avnd pasul spiralei de 70-80
nm.Fiecare molecul de actin din microfilament este capabil s
lege cte un cap al moleculei de miozin.

n celulele eucariote, cu excepia celulelor musculare,

microfilementele se pot gsi izolate sau grupate n mnunchuri,
dispuse la periferia citoplasmei, imediat sub plasmalem, formnd
fibrele de stress n cazul celulelor n culturi sau intnd n structura
inelelor contractile. Inelul contractil poate fi: - tranzitoriu, cnd
apare n telofaza diviziunii celulare indirecte, producnd
strangularea citoplasmei i separarea celulelor fiice; - permanent, ca
de exemplu n zona apical a celulelor epiteliale, unde formeaz
dezmozomul n band. Mnunchiuri de filamente de actin exist i
n microvili, n stereocili, n prelungirile filiforme temporare ale
celulelor din culturi.

n alte tipuri de celule dect cele musculare, microfilamentele de

actin ndeplinesc att un rol structural sau de susinere, formnd

suportul prelungirilor (al microvililor, ct i un rol dinamic n
realizarea micrilor bazate pe mecanismul actin-miozin.
Exist un echilibru dinamic ntre filamentele de actin i
monomerii de actin din citoplasm, ntre polimerizare i
depolimerizarea actinei, echilibru ce joac un rol esenial n
micrile celulare. Polimerizarea actinei este nsoit de o cretere
a vscozitii citoplasmei, iar depolimerizarea se asociaz cu
scderea vscozitii.Ambele procese joac un rol principal n
trecerea de la starea de gel la cea de sol a citoplasmei.

Polimerizarea actinei este inhibat de unele

substane (citocalazine) secretate de mucegaiuri,
producndu-se oprirea micrii de locomoie
ameboidal.

n celulele musculare, moleculele de actin mpreun

cu proteinele reglatoare formeaz miofilamentele subiri

(miofilamentum tenue) din sarcomere. Astfel, pe toat
lungimea miofilamentului de actin se gsete o
protein tropomiozina, pe care se nir 7 monomeri de
actin. Tropomiozina are att un rol structural, ntrind
flilamentul subire, ct i un rol funcional n realizarea
contraciei. Din loc n loc, de-a lungul filamentului de
actin se gsete o alt protein, troponina, care este un
complex de trei polipetide - troponinele T,I i C.Troponina
T este strns ataat de tropomiozin, troponina C leag
ionii de calciu, iar troponina I inhib interaciunea actinmiozin. Tropomiozina are att un rol structural,
participnd la structurarea filamentului subire, ct i un
rol funcional mediind reglarea contraciei. (Fig.5.4).

Filamentele subiri se gsesc numai n miofibrilele

din muchii scheletici i muchiul cardiac unde sunt
dispuse ordonat, paralel cu filamentele groase de
miozin.

 i n alte tipuri de celule dect cele musculare au fost

evideniate proteine reglatoare ale interaciunii actinmiozin,asemntoare tropomiozinei, dar acestea sunt
mai scurte, permind ataarea a numai 6 monomeri de
actin, n loc de 7 cum apare n celulele musculare. n
celulele nemusculare, nu a fost bine precizat existena
troponinelor T i I, dar au fost identificate proteine
reglatoare, asemnotare troponinei C, carer leag ionii
de calciu i au fost denumite proteine modulatorii sau
calmoduline.

n afara proteinelor reglatoare amintite

(tropomiozina,troponinele i calmodulina), n celule se mai
pot gsi i alte proteine reglatoare ce se leag de actin,
ca: -filamina, prezent mai abundent n leiocite;
-spectrina, ce se gsete n citoscheletul membranei
celulare.

Fig.5.4. Organizarea molecular a filamentului subire de

actin

5.3.2.Microfilamentele de miozin
Formate prin polimerizarea proteinelor denumite
miozine, miofilamentele de miozin au un diametru de
10 nm. Miozinele se gsesc n cantitate mai mic dect
actinele n toate celulele eucariote, cu excepia celulelor
musculare.

Molecula de miozin are aspectul unui bastona lung i subire

(coada),prevzut la una din extremiti cu o regiune globular (capul).

Capul moleculei de miozin este bipartit (iar molecula este bicefal),
fiind alctuit din dou subuniti sau lobi. Polimerizarea se produce
prin agregarea cozilor moleculelor de miozin, n timp ce capetele
rmn la exterior. n acest fel, mio-filamentul de miozin prezint o
zon "nud" (neted) la mijloc, unde se gsesc cozile i dou zone
mai groase la extremiti n care proemin de jur mprejurul
filamentului capetele globulare ale miozinelor.(fig.5.5.)

n alte celule dect cele musculare, filamentele de miozin

sunt agregate mici, labile, greu observabile, formate prin
polimerizarea a 10-20 molecule.
n celulele musculare, polimerizeaz sute de molecule de miozin
(200-500), formnd miofilamente groase cu diametrul de 10-20 nm,
ce se dispun paralel cu filamentele subiri de actin.Miofilamentele
sunt dispuse ntr-o reea hexagonal, la un miofilament gros revenind
6 miofilamente subiri.

Alctuirea moleculei de miozin cuprinde dou lanuri

polipeptidice grele, i patru lanuri uoare. Lanurile

grele se ntind pe toat lungimea moleculei, n timp ce
lanurile uoare sunt localizate la capul moleculei de
miozin, cte dou pentru fiecare lob. Fiecare lan greu
are dou poriuni: - o poriune alungit alfa - helicoidal
(coada) i un cap globular. Poriunile alungite ale
lanurilor grele sunt rsucite n spiral, pe cnd capetele
globulare rmn separate. De fiecare cap sau lob se
leag cte o pereche de lanuri uoare.

Pentru studierea alctuirii moleculei de miozin sa efectuat proteoliza moleculei cu ajutorul tripsinei. Din
molecula de miozin se formeaz dou fragmente,
denumite meromiozine: - o meromiozin uoar, L
meromiozina (de la light = uor n englez) i o
meromiozin grea, H - meromiozina (de la heavy =
greu).

L meromiozina (LMM) are aspectul unui bastona (cu

lungimea de 80 nm i grosimea de 2 nm), este lipsit de

activitate ATP-azic i nu interacioneaz cu actina.
H meromiozina (HMM) are o poriune linear (de 60
nm), care se termin cu o poriune globular (de 20/5
nm). Sub aciunea papainei, HMM poate fi scindat n
dou subuniti, subfragmentul 1 i subfragmentul 2.

Subfragmentul 1(S -1) are o greutate de 120 KD i

corespunde poriunii globulare a H meromiozinei, prezint
activitate ATP-azic i poate interaciona cu actina.

Subfragmentul 2 (S - 2) are o greutate milecular

de 60 KD, i lipsete activitatea ATP-azic i capacitaea de
a interaciona cu actina.

n ntregul ei, poriunea liniar a moleculei de

miozin este format din L meromiozin i subfragmentul
2 al H meromiozinei, iar capul moleculei de miozin este
reprezentat de subfragmentul 1 al H meromiozinei.

 5.3.2.1.Funciile microfilamentelor de actin i miozin.

Microfilamentele de actin i miozin sunt implicate:- n

micrile celulare de locomoie (deplasarea fibroblastelor n culturi,

micarea ameboidal prin emiterea de pseudopode, micrile
morfogenetice din embrion);- i n micrile intracitoplasmatice
(migrarea granulelor de secreie, a granulelor pigmentare,
deplasarea organitelor celulare, mobilitatea microvililor).
Participarea microfilamentelor n aceste fenomene celulare este
influenat de concentraia n citosol a ionilor de calciu, a
moleculeor de ATP i de AMP-ciclic, de ph, etc.
n celulele musculare, actina i miozina intr n alctuirea unor
ultrastructuri stabile, denumite microfilamente sau miofilamente
(myofilamentum) de actin i de miozin. Miofilamentele se dispun
ordonat, n sensul lungimii, paralele ntre ele i formeaz
miofibrilele, cu un diametru de 1-2 m. Un miofilament de actin
este alctuit din 600 molecule de actin, n timp ce un miofilament
de miozin conine numai 200 molecule de miozin.


Cea mai precis organizare i dispunerea a
moleculeor de actin i miozin se ntlnete n
miofilamentele i miofibrilele muchiului striat (scheletic i
cardiac), care sunt orientate paralel cu axul mare al fibrei
musculare. (Fig.5.7.) n fibra muscular scheletic exist
cca. 1000 miofibrile ,dispuse n pachete longitudinale
(colonete Leydig), ce apar pe seciune transversal sub
forma unor grupri de 30-50 miofibrile ( cmpurile
Cohnheim).

La microscopul optic, miofibrilele apar

striate,prezentnd o succesiune alternant de benzi sau
discuri. O band A (stria A), denumit i disc ntunecat, de
1,5 nm, anizotrop (discus anizotropicus) n lumin
polarizat, ntunecat n contrast de faz, mai intens
colorabil, alterneaz cu o band clar (stria I) de 0.8 nm,
izotrop (discus isotropicus) n lumin polarizat, clar n
contrast de faz, mai slab colorabil.

Fig.5.7.Organizarea dispozitivului
contractil n fibra muscular striat

 Discul ntunecat (banda A) este transversat, prin mijlocul lui

de zon clar (zona lucida s. stria H) care este strbtut de

o linie ntunecat, numit linia M (linea M) sau mesofragm.

Discul clar (banda I) este i el traversat de o linie

ntunecat, denumit linia Z (linea Z), telofragm sau stria
AMICI, ce se prelungete transversal, de o parte i de alta, n
toate miofibrilele dintr-o fibr muscular. n fibrele
musculare mai intens solicitate, discurile clare (I) pot fi
traversate i de o fina linie accesorie, linia N.
ntre dou telofragme (strii Amici sau linii Z) sucesive se
delimiteaz un sarcomer sau un miomer, care reprezint
unitatea fundamental de structur i funcie a miofibrilei.
Un sarcomer are o lungime de 2,5 m i cuprinde un disc
ntunecat ( o band A) i cele dou jumti de benzi clare
(I) adiacente. ntr-o mifobril se gsesc cteva zeci de mii de
sarcomere aezate cap la cap. ntr-un rabdocit cu lungimea
de 5 cm sunt 20.000 de sarcomere, nct 20.000 x 2,5 m =
50.000 = 5 cm.

Fig.5.8. Organizarea ultrastructurilor din banda M

a.Seciune transversal
b. Reprezentare tridimensionala, FG-filament gros de
miozin;FM-filamente M ale citoscheletului endosarcometric
enodsarcomeric; PM-puni M

Ultrastructura sarcomerului a fost investigat prin studii de microscopie

electronic nc din anul 1953, reprezentnd primele aplicaii ale
electronomicroscopiei n biologie. S-a constatat c filamentele groase, de
miozin (cu diametrul de 15 nm i lungimea de 1,6 nm) sunt dispuse n mijlocul
sarcomerului n zona ocupat de discul ntunecat ( banda A) n timp ce la
nivelul discului clar (banda I) se gsesc numai filamente subiri, de actin (cu
diametrul de 6 nm i lungimea de 1nm), care pornesc de o parte i de alta a
benzii Z i ptrund n discul ntunecat (A) pn n apropierea zonei H, n care se
gsesc numai filamente groase. n restul discului ntunecat (A) se produce o
interdigitare a filamentelor groase i subiri, nct pe o seciune transversal la
acest nivel, ficare filament gros are n jurul su 6 filamente subiri, realiznduse un model hexagonal. (Fig.5.8.)
Pe suprafaa filamentelor groase proemin capetele moleculelor de miozin
sub forma unor puni transversale. Pe imaginile electronomicroscopice,
punile transversale apar ca proeminene laterale, perpendiculare pe axa
filamentelor groase, extinse spre filamentele subiri pe care tind s le ating.
S-au numrat 200-220 puni transversale pentru un filament gros, dispuse
regulat urmnd un traiect spiralat de-a lungul filamentului. Punile
transversale conin HMM (H meromiozin) ce are activitate ATP-azic i
interacioneaz cu actina.(Fig.5.9)

Fig.5.9. Dispunerea punilor

transversale la nivelul filamentului

5.3.2.2. Micri celulare bazate pe sistemul actinmiozin

Pe baza sistemului molecular actin-miozin se realizaez mai
multe categorii de micri celulare: -micrile din timpul contraciei
musculare; -micarea de locomoie ameboidal; - micrile din microvili;
i curenii citoplasmatici
Interaciunile actin-miozin se desfoar dup acelai mecanism
molecular att n celulele musculare, ct i n cele nemusculare: Ele se
stabilesc ntre filamentele subiri de actin i capete globulare ale
moleculelor de miozin din punile tranversale. Micarea se produce prin
alunecarea filamentelor de actin i miozin, unul peste altul. Pentru
aceasta se desface puntea dintre miozin i actin i se restabilete puntea
cu monomerul urmtor din filamentul de actin, antrennd deplasarea
filamentului. Energia necesar este furnizat de hidroliza ATP-ului, iar
deplasarea se face dup mecanismul "roii cu clichei" de la ceasornicele
mecanice.Relaxarea se produce prin desfacerea simultan a tuturor
punilor dintre filamentele de actin i miozin, ceea ce permite glisarea
filamentelor.(fig.5.10)

5.3.2.2.1. Contracia fibrelor musculare striate

Contracia muscular reprezint forma cea mai

perfecionat de micare bazat pe sistemul actinmiozin. Se produce prin alunecarea (glisarea)

filamentelor de actin printre cele de miozin, fr a
se modifica lungimile lor. Mecanismul glisrii a fost
propus de HUXLEY n 1954 i apoi demonstrat
experimental. Ca rezultat al glisrii se scurteaz
lungimea sarcomerului, iar prin nsumarea scurtrii
tuturor sarcomerelor se ajunge la scurtarea fibrei
musculare n ntregul ei. De exemplu, o scurtare a
sarcomerului de la 2,5 la 2 m (deci cu 20%),
nsumat pentru 20.000de sarcomere produce o
scurtare de la 5 cm la 4 cm. n timpul contraciei,
discul ntunecat (banda A) nu se modific,
scurtndu-se doar discul clar (banda I) (fig.5.11.)

Aspectul sarcomerului
Fig.5.11. Aspectul
sarcomerului
a-n muchiul contractat;
b- n muchiul relaxat;
c-n muchiul ntins.

Glisarea se datoreaz faptului c fiecare cap al moleculelor de

miozin "pete" n lungul filamentului de actin, de pe un monomer

pe urmtorul "trgnd" filamentul de actin pas cu pas.
Contracia muchiului scheletic se declaneaz n momentul n care
excitarea nervului motor al muchiului determin apariia unui
potenial de aciune n sarcolem ( plasmalema fibrei musculare
striate), la nivelul jonciunii neuromusculare. Semnalul electric se
transmite rapid n jurul fiecrei miofibrile prin tubii transveri ce se
ntind de la sarcolem la miofibril. n acest fel, semnalul electric
ajunge la reticulul sarcoplamic ( o form specific a reticulului
endoplasmic n fibra muscular), producnd eliberarea din cisternele
reticulului n citosol, a unei cantiti mari de ioni de calciu
( Ca2+).Creterea brusc a concentraiei de ioni de calciu declaneaz
contracia miofibrilei, datorit efectului pe care Ca 2+ l produc asupra
troponinei i tropomiozinei. n repaus, tropomiozina se interpune ntre
actin i capul miozinei, blocnd interaciunea dintre ele. Troponina C
leag ionul de calciu i prin aceasta modific poziia tropomiozinei,
fcnd posibil interaciunea actinei cu miozina. (Fig.5.12).

Fig.5.12. Relaiile actin- miozin- tropomiozin

a - n repaus; b- n activitate;
1- miozina; 2- actina; 3 tropomiozina

n momentul n care capul miozinei atinge actina este eliberat ADP i gruparea fostfat,
ceia ce determin o flexare a capului miozinei care trage de filamentul de actin,
rezultnd glisarea filamentului i contracia muscular. Dup acest moment, de capul
miozinei se leag o molecul de ATP, producndu-se desprinderea miozinei de
actin.Miozina hidrolizeaz ATP-ul n ADP i gruparea fosfat, iar capul miozinei i
recapt conformaia iniial, dup capul se repet.
Miscrile de "psire" a capetelor de miozin n lungul filamentelor subiri (de
actin) sunt efectuate de ctre fiecare molecul i de ctre fiecare lob al capului. ntrun muchi n contracie, la un moment dat exist capete ale moleculelor de miozin
care sunt ataate de actin, iar altele sunt detaate. ntr-o contracie rapid, fiecare din
cele 500 capete de miozin ale unui filament gros parcurge ciclul de 5 ori ntr-o
secund

Dup terminarea contraciei, ionii de calciu sunt recaptai n cisternele

reticulului sarcoplasmic printr-o enzim (Ca2+ - ATP - az), ceea ce

produce relaxarea muchiului.
Pe lng actin i miozin, n miofibrile se mai gsesc proteine

accesorii cu rol structural. Astfel, n stria Z, se gsesc proteine ( -actina

i desmina) ce ancoreaz filamentele de actin i aliniaz miofibrilele
adiacente, asigurnd contracia sincronizat a miofibrilelor. Alte proteine
accesorii ndeplinesc un rol funcional mediind efectul pe care Ca2+ l
are n contracia muscular.
n muchiul cardiac, filamentele de actin i miozin prezint o
dispunere asemntoare cu din muchiul scheletic, fiind evidente
striaiile.
Muchiul neted este lipsit de striaii, iar filamentele de miozin i de

actin nu formeaz miofibrile, nefiind dispuse strict ordonat ca n

muchii striai, dei, n general, sunt orintate paralel cu axul lung al
celulei. Miozina din celulele musculare netede (leiocite) se deosebete
de cea din fibrele musculare striate (rabdocite) prin dou caractere:
1-activitatea ATP-azic este de zece ori mai mic, fiind mult mai direct

legat de ionii de calciu; 2- n leiocite, miozina poate interaciona cu

actina numai dac lanuriile uoare sunt fosforilate.

Muchiul neted este lipsit de striaii, iar filamentele de miozin i de actin nu

formeaz miofibrile, nefiind dispuse strict ordonat ca n muchii striai, dei, n
general, sunt orintate paralel cu axul lung al celulei. Miozina din celulele
musculare netede (leiocite) se deosebete de cea din fibrele musculare striate
(rabdocite) prin dou caractere:
1-activitatea ATP-azic este de zece ori mai mic, fiind mult mai direct legat de
ionii de calciu; 2- n leiocite, miozina poate interaciona cu actina numai dac
lanuriile uoare sunt fosforilate.

Fosforilarea i defosforilarea lanurilor uoare ale miozinei din leiocit sunt

efectuate de enzime specifice. Enzima de fosforilare este kinaza lanurilor uoare
i este activat de complexul Ca2+- calmodulin. Kinaza activat fosforileaz
lanurile uoare din molecula de miozin, permind interaciunea cu actina.
(Fig.5.14.)
Kinaza miozinei este activat de influxul de Ca2+, rezultat n urma
excitrii sistemului neurovegetativ, dar i prin AMP-ul ciclic al crui nivel n
celul este legat de hormoni. Contracia muchiului neted poate fi produs prin
aciune nervoas sau hormonal. Contracia muchiului neted este mai lent
deoarece activarea miozinei prin sistemul calmodulinei este lent. n muchiul
striat, unde se realizeaz o contracie rapid este prezent o form specializat a
calmodulinei, troponina C.
n celulele nemusculare, miozina se aseamn cu cea din muchiul neted
prin faptul c activarea ei (dobndirea capacitii de a se lega de actin) depinde
de fosforilarea lanurilor uoare,care este stimulat de complexul Ca2+calmodulin.Fosforilarea induce asamblarea miozinei n agregate mici bipolare,
formate din 10-20 molecule de miozin, legate prin cozile lor. Aceste agregate pot
produce deplasarea filamentelor de actin prin mecanismul interaciunii actinmiozin. Contracia complexului acto-miozinic produce trecerea citoplasmei n
starea de gel, iar relaxarea determin trecerea n stare fluid, cum se ntmpl n
micarea ameboidal i n motilitatea microvililor. (Fig.5.15.)

Fig.5.15. Agregarea miozinei n celulele

nemusculare.
1-Molecule de miozin;
2-Agregate moleculare.

Alte micri bazate pe sistemul actin-miozin sunt micarea ameboidal, micrile

din microvili i curenii citoplasmatici.
5.3.2.2.2. Micarea de locomoie ameboidal
Micarea de locomoie ameboidal prezint o importan deosebit pentru
organisme, deoarece prin acest mecanism leucocitele ies din vasele sanguine i se
deplaseaz la locul infeciilor, iar fibroblastele se deplaseaz pe suprafaa rnilor
depunnd colagen, cu rol n formarea cicatricei.

Emiterea de pseudopode se ntlnete la deplasarea leucocitelor, care

se face lent. Fibroblastul emite pe direcia micrii prelungiri lite,
lamelipode, care formeaz o muchie de naintare. Procesul de emitere a
acestor prelungiri este continuu, unele prelungiri adernd la substrat
prin una din feele lor cu plci de adeziune, n timp ce alte prelungiri,
desprinse de pe faa opus, se rentorc spre corpul celulei, formnd
ondulaii de suprafa. Pe msur ce are loc naintarea celulei, rmne o
coad n interiorul creia se gsesc fibre de retracie, iar din aceast
coad se desprind fragmente pe care celula le las n urm. La micarea
fibroblastelor se produc treceri succesive i reversibile ale citoplasmei
din starea de gel n cea de sol, ajungndu-se la o vitez de 40 nm/or.

Micarea ameboidal

Micarea ameboidal nu se face la ntmplare, fibroblastele

manifestnd o preferin pentru suprafeele pe care pot adera.
Prelungirile subiri, epii observai pe lamelipode acioneaz ca antene
de explorare a suprafeei. Forma suprafeei influeneaz micarea
ameboidal, fibroblastele migrnd pe direcia curburii minime ( n
sensul lungimii cilindrului de sticl). (Fig.5.16)
Emiterea pseudopodelor i deplasarea celulei se face spre un
stimul chimic, fenomen cunoscut sub denumirea de chemotactism.S-a
dovedit c leucocitele sunt atrase de molecule "atractante" eliberate n
focarul inflamator. Aceste molecule produc metilarea unor grupri
carboxil din proteinele din membran. Dac metilarea este blocat,
chemotactismul este inhibat.

Micrile din microvili

n alctuirea unui microvil exist filamente de actin

(cca.40), dispuse longitudinal i paralele ntre ele, avnd toate
aceeai polaritate. O extremitate a filamentelor ajunge al vrful
microvilului, ntr-o regiune amorf, cu o compoziie chimic
insuficient precizat, ce ancoreaz filamentele de membran.
Extremitatea opus ajunge la polul bazal al microvilului,
terminndu-se ntr-o reea perpendicular de filamente de
actin, denumit buton terminal, ce conine i miozin, avnd
rolul de a menine n poziie microvilul. Mnunchiul de
filamente din microvil este legat, din loc n loc, ntre ele i cu
plasmalema prin fimbrin, ce realizeaz o "scar " n spiral n
lungul microvilului. (Fig.5.16.)

Fig.5.16.Diagrama ultrastructurii
microvililor

Curenii citoplasmatici
sunt micri ce realizeaz o deplasare a organitelor i componenetelor n
interiorul celulei. Se manifest sub form de: 1 - scurgere a citoplasmei
fluidifiate n prelungirile celulere n timpul micrii ameboidale; 2 - micare
saltatorie a
organitelor, n care pe filamentele de actin situate la
periferia celulei se deplaseaz filamente de miozin pe care sunt ancorate
organite celulare; 3 -cicloza, o micare n jurul nucleului, vizibil n celule
vegetale sau n algele verzi unicelulare.
Curenii citoplasmatici sunt caracteristici celulelor eucariote vii,
disprnd odat cu moartea acestora. Transportul axoplasmatic din neuroni
reprezint o form specializat de cureni citoplasmatici n care intervin
microtubulii.
5.3.3. Microtubulii i micrile bazate pe sistemul
microtubul - dinein
5.3.3.1. Microtubulii
Microtubulii sunt formaiuni rectiliniii cu lungimi variabile (pn la
civa micrometri) i cu un diametru mediu de 25 nm. Pot apare grupai
sau singulari n citoplasm. Peretele microtubulului este format din 13 iruri
lineare, drepte sau spiralate, formate din molecule proteice globulare, cu
diametru de 5nm, cu o greutate molecular de 50-60 Kdal., denumite
tubuline.
Tubulinele polimerizeaz rezultnd dimeri de tubulin, alctuii dintr-

n peretele microtubulilor, dimerii de tubuline formeaz protofilamente sau

protofibrile (protofibrila) cu diametrul de 5 nm. n protofibrile, dimerii formeaz se
dispun n aa fel, nct alfa-tubulina de la un dimer de leag de beta-tubulina de la de
la dimerul din rndul vecin. Protofibrilele, n numr de 13 se dispun sub forma unui
cilindru, structurnd un microtubul cu diametrul de 25 nm constant n toate
cazurile.Energia necesar asamblrii microtubulilor este furnizat de moleculele de
guanizin-trifosfat (G.T.P.) i nu de cele de A.T.P.
Microtubulii prezint polaritate, adaugarea de dimeri, avnd lo intensitate
mai mare la captul pozitiv, producndu-se creterea, n n timp ce la captul opus
(negativ) predomin pierdera de dimeri, avnd loc scurtarea. Exist un echilibru
dinamic ntre microtubuli i dimerii de tubulin din citosol. Polimerizarea se petrece
spontan la temperatura de 370 C, n timp ce depolimerizarea are loc la 00 . Cationii
bivaleni de calciu i magneziu n concentraie mic (micromolar) sunt necesari
pentru polimerizare, care este mult accelerat n prezena proteinelor asociate
microtubulilor (MPAs), care pot fi: - proteine cu greutate molecular mare (HMW =
Hight Molecular Weight ) i proteine tau (). De asemenea, calmodulina controleaz
procesul de asamblare - dezasamblare, iar colchicina, un alcaloid blocheaz
polimerizarea tubulinelor, prin legarea unei molecule de colchicin de un dimer de
tubulin. Pe aceast proprietate se bazeaz folosirea colchicinei la blocarea
metafazelor n culturile de celule, pentru studierea cromozomilor. Unele
medicamente,folosite ca citostatice (vinblastina, vincristina) distrug fusul de diviziune
i oar celulelele maligne, care se divid intens.

n celul, microtubulii ndeplinesc att un rol structural, ct i un rol dinamic.

Rolul strucutural const n: 1- meninerea formei celulelor i a
prelungirilor sale (axon,dentrite, cili, flageli); 2-determinarea i pstrarea
dispunerii spaiale a organitelor; 3- organizarea citosheletului, determinnd
distribuia filamentelor intermediare n celul; 4- dispunerea filamentelor de
actin, ce structureaz inelul contractil, ntre cei doi poli ai celulei; 5formarea unor "schele temporare" pe care celula s-i dispun unele
componente, ca de exemplu n cursul spermatogenezei, cnd microtubulii
formeaz o "schel" n spiral pe care se sprijin mitocondriile.
Rolul dinamic const n: 1- particip la realizarea micrilor
celulare ce au la baz mecanismul microtubul-dinein, precum micarea
cililor i flagelilor; 2- asigur o serie de micri intracitoplasmatice, precum
micarea granulelor de melanin n melanocite; 4- asigur transportul unor
molecule i substane; 5- realizeaz transportul axonal rapid (200 nm/ 24
ore) i lent (24 nm/ 24ore); 5- particip la eliberarea proteinelor i
lipoproteinelor sintetizate n hepatocite.
n citoplasm, microtubulii sunt prezeni n alctuirea unor structuri stabile,
cum sunt centriolii, fusul de diviziune, cilii i flagelii.

5.3.3.2. Centriolii
Centriolul este o structur microtubular stabil ce intr n
componena centrului celular .
n majoritatea celulelor, centrul celular este situat juxta nuclear, n
apropierea complexullui Golgi i conine unul sau doi centrioli, ce sunt
nconjurai de o zon citoplamatic clar, denumit material pericentriolar.
Centrul celular lipsete n celulele nalt specializate (eritrocit,
rabdocit, neuron), iar cnd este prezent coordoneaz mobilitatea celular n
timpul diviziunii. (Fig.5.20.)

La microscopul electronic, fiecare centriol apare ca o structur cilindric (n

lungimre de 0,5 m i cu diametrul de 0,11 m), dispus perpendicular pe
congenerul su. Fiecare centriol este format din 9 triplete
(triplomicrotubulus) de microtubuli, notai de la interior spre exterior cu
A,B,C i mbrcai ntr-o mas de substan dens. Centrul cilindrului este
lipsit de microtubuli, realizndu-se o structur de tipul "9+0", diferit de
structura axonemei cililor i flagelului, care este de tipul "9+2".(Fig.5.22)

Centrul celular (sau centrozomul ) joac rolul de organizator al

microtubulilor, datorit faptului c materialul pericentriolar format din
proteine i ARN, determin polimerizarea tubulinelor i asamblarea
microtubulilor, care au captul negativ ( - ) n materialul pericentriolar
din centrozom, n timp ce captul pozitiv
( + ) dispus distal prezint o cretere intens.
Datorit funciei sale de organizator temporar, spaial i
vectorial al microtubulilor, centrul celular este implicat n toate
procesele n care acetia apar ca organizatori ai citoscheletului.
Centrul celular intervine i n direcionarea micrilor de
locomoie ameboidal ( a fibroblastelor i leucocitelor), situndu-se
naintea nucleului pe direcia micarii celulelor.Tot odat, centrul
celular particip i definirea polaritii celulei, dispunndu-se ca i
complexul Golgi, apical fa de nucleu n celulele epiteliale.

Fusul de diviziune
5.3.3.3. Fusul de diviziune

Fusul de diviziune (fusus mitoticus) este o structur intra

celular, format din microtubuli (microtubuli fusalis) ce

realizeaz o legtur ntre centriolii care se despart i migraz
la cei doi poli ai celulei, n timpul diviziunii celulare.

n interfaz, centrozomul este situat n vecintatea

nucleului i din el pleac microtubuli n toat citoplasma. n
timpul fazei "S" a ciclului celular ncepe dublarea centrului
celular prin separarea centriolilor, n vecintatea fiecruia din
centriolii vechi producndu-se asamblarea unui centriol, nou
perpendicular pe cel vechi. Concomitent cu deplasarea spre
polii celulei a centrilor celulari, microtubulii formeaz filamente
ce se dispun sub forma unui fus de diviziune.

Fiecare filament este alctuit din circa

100 microtubuli i proteinele asociate
lor.ntre microtubuli din fus i
moleculele de tubulin din citosol se
stabilete un echilibru dinamic.
(Fig.5.22)
Fig.5.22.Participarea microtubulilor la formarea fusului de
diviziune
3-Centrioli; 2-Microtubuli;3-Fibrele fusului de diviziune; 4Cromozomi.

5.3.3.4. Cilii i flagelul

Cilii (cilium,a) i flagelul (flagellum) sunt expansiuni celulare
permanente, formate din citoplasm i membran celular, dispuse la
polul apical al celulei.
n structura lor, microtubulii sunt prezeni, n axul citoplasmatic ciliar,
denumit axonem (axonema), fiind dispui ordonat, paraleli ntre ei i cu
axul longiutudinal al formaiunii. La baza fiecrei axoneme se afl cte un
corpuscul bazal (corpusculum basale), ce are organizarea unui centriol.
Cilii pot fi vibratili ( sau kinetocili) i nevibratili (sau stereocili).
La cilii vibratili (din mucoasa traheal, nasal), axonema este
format din doi microtubuli axiali, nconjurai, la periferie de nou dublete
de microtubuli. Fiecare dublet cuprinde un microtubul complet sau
subfibra A, format din 13 protofilamente i un microtubul incomplet sau
subfibra B, format din 10 sau 11protofilamente. Tubulinele alfa ( ) i beta

De la fiecare subfibr A pornesc nspre subfibra B din dubletul vecin

dou brae simetrice n form de clete formate din molecule de
dinein, care este o protein-enzim bogat n ATP-az. Braele de dinein
sunt dispuse n lungul microtubulului la intervale regulate de 24 nm. La
intervale mai mari de 24 nm exist, din loc n loc, la o distan de 86,5
nm legturi elastice, formate dintr-o alt protein, denumit nexin.

De la subfibra A pleac spre

centrul axonemei cte un bra de
legtur (sau spi), ce se termin
printr-o poriune globular, n
vecintatea tecii interne ce nconjoar
cei doi microtubuli centrali.(Fig.5.25).
Flagelul (flagellum), de obicei,
unul singur pentru fiecare celul (expl.
la spermatozoid) prezint o structur
asemntoare cu a cilului, dar mai
complex. Axonema sa este
structurat dup tipul "9+2",
prezentnd n jurul su o coroan de
mitocondrii ce a asigur ATP-ul necesar
micrii.
Cilii nevibratili sau stereocilii
( de exempl. cei din epididim i din
urechea intern) au aceiai structur
ca i cilii mobili, cu deosebirea c
lipsesc cei doi microtubuli centrali din
axonem.
Micrile celulare ce au la baz
sistemul microtubul-dinein sunt pe
deoparte micrile caracteristice cililor

Micarea cililor i flagelilor se realizeaz prin alunecarea unui dublet

periferic n raport cu dubletul vecin lui.Alunecarea depinde de legarea
ciclic a dineinei subfibrei A dintr-un dublet de subfibra B a dubletului vecin,
nct braele de dinein "pesc " de-a lungul dubletelor, producnd
energia necesar btilor cilului sau a flagelului.Se realizeaz astfel glisarea
dubletelor unul peste altuli ncovierea cilului i flagelului.
Dineina prezint o funcie similar cu a miozinei, prezentnd
activitate ATP-azic, nct prin scindarea ATP-ului furnizeaz energia
necesar micrii. ATP-ul provine din glicoliz i difuzeaz prin citoplasm n
axonema cililor, pe cnd, n flageli, ATP-ul este generat de mitocondriile ce
nconjoar axonema.
Legturile radiare (spiele) dintre teaca intern i dubletele
periferice, precum i teaca intern au rolul de a controla activitatea braelor
de dinein, nct s se produc o und coerent de micri de la baz spre
vrf. Astfel cilii au micri ciclice n doi timpi (btaie - revenire), ce dureaz
0,1-0,2 secunde, n timp ce flagelul are o micare ondulatorie sinusoidal
sau elicoidal.(Fig.5.26).

n condiii patologice, pot aprea tulburri funcionale ale

cililor datorit unor anomalii localizate fie la nivelul

corpuisculului bazal (centriol incomplet), fie la nivelul
axonemei (complexe tubulare supranumerare, sau cu
aranjament dezorganizat) ,fie n pri componente ale
cilului.

De asemenea, absena dineinei produce sindromul

cililor imobili (o boal genetic), care se caracterizeaz
prin infecii respiratorii cronice (datorit incapacitii cililor
de a curii cile respiratorii sau prin sterilitate
(spermatozoizii fiind imobili).

5.4.Mitocondriile organite generatoare de

energie
Mitocondriile (mitochondrion gr.= filament,granul) sunt organite
specializate n producerea de energie necesar activitii celulelor
eucariote, comportndu-se ca nite centrale energetice, in care
energia este eliberat prin oxidarea unor substrate i transformat n
energie chimic (ATP) prin procesul de fosforilare oxidativ. Sunt
fabricile de energie ale celulei.
Mitocondriile sunt prezente n toate tipurile de celule cu
excepia eritrocitului adult, n care lipsesc. Au fost observate la
microscopul optic n a II-a jumtate a secolului XIX de ctre ALTMAN1890, prin coloraie cu verde Janus i de BENDA-1897, care afolosit
coloraia cu hematoxilin feric Regaud.
Enzimele marker pentru mitocondrii sunt: monoaminoxidaza,
citrocromoxidaza i enzimele ciclului Krebs.
.

Numrul mitocondriilor difer de la o celul la alta n funcie de intensitatea

activitii acestora, fiind mai mare n celulele mai active. Astfel, n hepatocite exist
1000-3000 de mitocondrii n citosol, n nefrocite-300, n spematozoizi 20-24, n timp
ce n eritrocite lipsesc.Numrul mitocondriilor este mai redus n celulele cu activitate
metabolic redus
Poziia mitocondriilor n celul este diferit.Ele pot fi rspdite,
reletiv uniform, n ntreaga citoplasm ( de expl. n hepatocit) sau
localizate n celul, n locurile unde ATP-ul este necesar n cantitate
mai mare. Astfel: - n muchiul scheletic, mitocondriile sunt dispuse
ntre miofibrile; -n spermatozoid, sunt aranjate helicoidal n jurul
axonemei flagelului; - n neuroni, n regiunea sinaptic; - n
panceasul endocrin, mitocondriile sunt alturate reticulului
endoplasmic rugos, genernd ATP-ul necesar biosintezei
proteinelor. Mitocondriile se concentreaz la polii activi ai celulelor
polarizate funcional: - la polul bazal, n nefrocite; - la polul apical, n
enterocite;- perinuclear, n momentele de intens activitate de
sintez, dup care se rspdesc n citoplasm. Mitocondriile i
schimb mereu poziia, putndu-se altura temporar unor organite
aflate n intens activitate, n special reticulului endoplasmic.

5.4.1.Morfologie,structur i ultrastructur
Dimensiunile mitocondriilor sunt variabile de la o celul la alta,
ajungnd pn la 7 m lungime i 0,5 m grosime. n general, cu ct o
celul este mai activ, cu att mitocondriile sunt mai mari. n celule
aflate n repaus, dimesiunile sunt mai mici.

La microscopul optic, mitocondria se poate prezenta sub trei aspecte:granule ( granulum mitochondriale),mitocondrii individualizate ,
diseminate n citoplasm; -granule nirate ca nite mrgele pe a
(condriomite)i filamente (filamentum mitochondriale) sau virgule
(condrioconi ) (Fig.5.27).

Mitocondriile,
Fig.5.27. Mitocondriile

A. Aspecte la

microscopul optic: 1Condrioconte; 2-Bastonae

Heidenhein; 3-Mitocondrii;
4-Condriomite; 5-Condrioconi,
localizai bipolar.

B.Aspecte la microscopul
electronic: 6-Organizarea
spaial a mitocondriei;

7-Ultrastructura
membranelor; 8-Aspecte ale
cristelor; 9-Ultrastructura
cristelor;

10-Seciune transversal
printr-o crist.

Ultrastructura mitocondriilor a fost elucidat de PALADE i

SJSTRAND-1952, pe seciuni de ficat examinate electronomicroscopic. n
ultrastructura mitocondriei intr dou membrane (membrana mitochondrialis),
cu grosimea de 6 nm fiecare, ce delimiteaz dou compartimente.
Membrana extern (membrana mitochondrialis externa) este neted,
n timp ce membrana intern (membrana mitocondrialis interna) dei
urmrete conturul celei externe prezint din loc n loc pliuri sau invaginri
denumite criste (latinescul crista= creast) mitocondriale cu grosimea de 25
nm, de forme variate.
Numrul, dispoziia i dimensiunea cristelor variaz n raport cu tipul
activitii metabolice i necesitile energetice ale celulei.
Numrul cristelor este mai mare atunci cnd activitatea celulelor este mai
intens. Cristele mitocondriale au forme variate, putnd aprea lamelate sau
septate (sub form de foie sau septe) i tubulare ( tubulus),sub form de
cilindri sau veziculare (vesicula).
Cristele pot fi orientate perpendicular sau paralel cu axul longitudinal
al mitocondriei. Ele pot fi rectilinii,ramificate sau ncruciate n reea,
compartimentnd matricea mitocondriei. (Fig.5.28).

Fig.5.28.Ultrastructur

a
mitocondriei
1-Crist; 2-ADNmitocondrial;3-F1-ATPaz; 4-Membrana
extern; 5-Membrana
intern;6-Spaiul
intermembranar; 7Ribozomi; 8-Incluziuni; 9Matrice; 10-Particul
elementar(F1): a-piesa
bazal,b-piesa
intermediar,c-piesa
superioar.

ntre cele dou membrane (extern i intern) se delimiteaz un compartiment

extern (spatium intermembranosum) de 7-8nm. Membrana intern delimiteaz un
compartiment intern sau matricea mitocondrial (matrix mitochondrialis). La nivelul
membranei interne, prin tehnici adecvate (coloraie negativ cu acid fosfotungtic,
pentru a obine un contrast mai mare la microscopul electronic) s-au evideniat
subuniti de membran sau particule elementare (particule F1) (particula elementaria
s. spherula s.sphaerula membrane).
O particul elementar apare ca o proeminen de 10 nm, format din trei
piese: bazal, intermediar i superioar. Particulele elementare conin o enzim, F1 ATP-az, ce face parte din complexul enzimatic ce particip la sinteza ATP-ului.
(Fig.5.29)
Membrana mitocondrial intern este mai puin permeabil dect membrana
mitocondrial extern, comportndu-se ca un fel de barier ntre matricea
mitocondrial i restul mitocondriei. Prin ea trec spre spaiul intern: -ioni de calciu
(Ca 2+) i magneziu (Mg2+), necesari activitii enzimelor cuprinse n matricea
mitocondrial; - molecule de ADP i ATP, necesare desfurrii procesului de
fosforilare activ; -acizi grai i unii aminoacizi (glutamatul i apartatul). Transportul
prin membran a acestor produi se realizeaz cu ajutorul unor proteine din
membran,care servesc ca transportori sau crui (translocazele i permeazele).

5.4.2. Matricea mitocondrial.

Matricea mitocondrial conine enzime, vitamine (B,A,C), acizi nucleici (ADN i
ARN), ioni ( K+, Na+, Ca 2+, Mg2+) i granule de glicogen, lipide, riboproteine
(ribozomi).
Enzimele matricei aparin la urmtoarele sisteme: -sistemul enzimatic al
ciclului acidului citric (Krebs); - sistemul enzimatic al beta oxidrii acizilor grai;
-sistemul enzimatic de fosforilare oxidativ; enzime care intervin n sinteze specifice;
-enzime proteolitice.
Acizii nucleici mitocondriali sunt reprezentai de ARN ribozomal, ARN
mesager, ARN de transfer i ADN. Molecula de ADN mitocondrial (cu lungimea de
20m) este circular, asemntoare cu cea a procariotelor. Replicarea ADN-ului
mitocondrial nu se produce sincron cu replicarea ADN-ului nuclear i nici n mod
continuu. Sinteza ADN-ului mitocondrial se produce mai lent dect n cazul ADNului nuclear i independent de acesta. ADN-ul mitocondrial este sintetizat
independent n matricea mitocondrial,fapt demonstrat prin evidenierea n matrice a
enzimei care catalizeaz biosinteza ADN-ului, enzim denumit ADN-polimeraza.

Particula elementar

Fig.5.29. Organizarea

particulelor
elementare

1-Factorul de cuplare;

2-Citocromi;

3-Succinat
dehidrogenaza.

Ribozomii mitocondriali au diametrul de 15 nm i sunt

asemntori celor de la procariote, de tip 70 S, cu cele dou
subuniti: mare, de 50S i mic, de 30S.
Mitocondria are autonomie genetic parial, ntruct
posed un cromosom (cromosoma mitochondrialis) ce conine
programul genetic (ADN-ul mitocondrial), i este capabil s-i
sintetizeze singur, fr ajutorul nucleului unele protein-enzime
(datorit nzestrrii cu ribozomi proprii, ce biosintetizeaz
proteine).Codul
folosit
de mitocondrie difer parial de
5.4.3.Procesele genetic
metabolice
mitocondriale
codul genetic
Aparin nuclear.
pe de o parte metabolismului energetic, iar pe de alt
parte metabolismului sintetetic.
Mitocondria este sediul metabolismului celular aerob,
dependent de oxigen, care include: 1- ciclul acidului citric (KREBS);
2- oxidarea acizilor grai i 3-fosforilarea oxidativ. Prin aceste
procese, n mitocondrii se produce ntreaga cantitate de energie
(sub form de ATP) necesar creterii,funcionrii i vieii celulei,
nct mitocondriile se comport ca nite centrale energetice
celulare.
ntr-un caz ipotetic, n care celulele animale ar fi lipsite de
mitocondrii, producerea de energie ar depinde de glicoliza
anaerob, n care fiecare molecul de glucoz genereaz dou
molecule de ATP.
n realitate, n mitocondrii, metabolismul
glucozei este complet, oxidarea mergnd pn la CO2 i H2O, nct
fiecare molecul de glucoz produce 36 molecule de ATP.Prin

n cazul acizilor grai, acetia trec din citosol n matricea

mitocondrial, unde intr n ciclul beta-oxidrii,pierznd n mod
repetat cte doi atomi de carbon de la captul carboxil i rezultnd
o molecul de acetil-coenzim A. Totodat, n urma glicolizei ce are
loc n citosol,rezult dou molecule de piruvat, care n matricea
mitocondrial este convertit de ctre complexul piruvat
dehidrogenaz n acetil coenzima A.
Acetil coenzima A, rezultat din acizii grai sau din glucoz
intr n ciclul acidului citric (ciclul KREBS), ce are loc n matricea
mitocondrial.La acest nivel cu ajutorul oxigenului molecular,
produs de respiraia celular, au loc oxidri n urma crora rezult
energie ce este folosit pentru sinteza de ATP, de ctre complexul
ATP- sintetazei, prezent n membrana mitocondrial intern.
Celulele dispun de depozite de lipide (trigliceride) n esutul
adipos i de glucide (glicogen), n ficat i muchi, prin care se
asigur o surs continu de piruvat.
Participarea mitocondriilor la efectuarea unor procese
metabolice este posibil datorit existenei unui mozaic complex
de enzime,localizate n diferite structuri mitocondriale, precum
membrana extern, membrana intern cu criste i particule
elementare, compartimentul extern (sau spaiul intermembranar)
i compartimentul intern (sau matricea mitocondrial).Astfel,
enzimele care intervin n ciclul acidului citric i n beta -oxidarea

Enzimele i ali factori care particip la procesul de

fosforilare oxidativ (generatoare de ATP) sunt localizate n
membrana intern,respectiv n criste.n particulele elementare ale
membranei interne se afl localizat enzima denumit factorul de
cuplare F1, care posed activitate ATP-azic i catalizeaz ultima
etap a formrii ATP-ului.
Procesele metabolice biosintetice pot avea loc, datorit
faptului c mitocondriile conin ADN, ARN, ribozomi i toate
enzimele necesare exprimrii genelor mitocondriale.n mitocondrii
se desfoar unele etape din sinteza hemului i a hormonilor
steroizi, ca de exemplu n celulele interstiiale din ovar i testicul,
n corticosuprarenal.
Structura chimic a mitocondriilor cuprinde 65-70% proteine
(din care 30% structurale i 70% enzime), 25-28% lipide
(fosfolipide, lecitine, trigliceride, cardiolipin), 0,5% ARN, AND (n
cantitate mic),glucide,ioni,ap i uneori vitamina c. ntr-o
mitocondrie, toate proteinele, ca i toate lipidele sunt n locuite la
aproximativ 20 de zile, nct mitocondria se renoiete continuu, iar
cnd iese din funcie, este ndeprtat prin autofagie cu ajutorul

5.4.4. Originea mitocondriilor

n celul, noile mitocondrii apar prin condrodierez
(clivaj,despicare), nct dintr-o mitocondrie funcional
rezult dou organite asemntoare. Se menioneaz i
posibilitatea de formare a mitocondriilor din molecule
proteice i lipidice sintetizate n celul sau din alte
citomembrane, n special din cele ale reticulului endoplasmic.
n filogenez, primele mitocondrii au aprut n celulele
animale prin transformarea unor bacterii care, odat ptrunse
n celul animal i-au pierdut virulena, i-au structurat o a
doua membran (membrana mitocondrial extern), i-au
adoptata metabolismul la celula gazd, devenind un organit
endo-simbiont. Mitocondria,ca i bacteriile prezint o
molecul de AND circular, iar unele enzime sunt prezente att
n bacterii, ct i n mitocondrii.
5.4.5. Funciile mitocondriilor
Mitocondriile ndeplinesc un rol esenial n
metabolismul energetic al celulelor vii, producnd energia
necesar desfurrii oricrei activiti celulare
(diviziune,difereniere,secreie, contracie muscular,
transmitere nervoas).Energia este generat prin aciunea
enzimelor oxido-reductorii mitocondriale i prin procesul

n cursul desfurrii reaciilor enzimatice oxidative i ale cuplrii

oxidrii cu fosforilarea, mitocondria sufer o serie de modificri de
form i strucutur, ce formeaz un ciclu fiziologic de umflare
contracie. n acest ciclu, membrana extern rmne nemodificat,
n timp ce membrana intern permite micri ale apei i ionilor cu
ajutorul translocatorilor specifici.(Fig.5.30)

n stare de contracie,datorit proteinelor contractile pe care le

conine, mitocondria i micoreaz mult volumul, spaiul
intermembranar se reduce, iar cristele mitocondriale se taseaz,
organitul, n totalitatea sa, aprnd electronodens.
n starea
de balonare, mitocondria acumuleaz o cantitate mrit de ap, i
mrete volumul, se sterg cresteler mitocondriale, iar cele dou
membrane ajung n contact una cu cealalt. Aceste modificri pot fi
fiziologice i reversibile. Balonarea se datorete pe de o parte
modificrii raportului ATP/ADP de la suprafaa extern a

 5.5.Organitele de sintez i secreie ale celulei

Sunt reprezentate de:

ribozomi,

reticulul endoplasmic
complexul Golgi.

5.5.1. Ribozomii
Ribozomii (ribosoma) sau granulele Palade
sunt
organite celulare intracitoplasmatice prezente n toate
celulele cu excepia eritrocitelor . (Fig.5.31).

Ribozomii
Fig.5.31. Ribozomii - aspect,

ultrastructur i biogenez:

1-Ribozomi liberi;
2-Ribozomi ataai la RE;
3-Poliribozomi;4-Subunitate
mic; 5-Subunitate mare;
6-Ribozom funcional;
7-Dimer;8-Protein
ribozomal structural;

9-ARN ribozomal dublu

elicoidal;10-ARN ribozomal
monocatenar;11-Nucleu;

12-Nucleol;13Ribozom;14-citoplasm,15membran celular.

Ribozomii pot fi liberi n citoplasm , solitari sau

grupai sub form de poliribozomi (polyribosoma). De

asemenea,se pot ataa de membranele reticulului
endoplasmatic (structurnd reticulul endoplasmic
granular) sau de faa extern a membranei nucleare.

Numrul ribozomilor variaz n funcie de tipul

celulei i de momentele funcionale ale acesteia ,
fiind foarte mare i ataai reticulului endoplasmic n
celulele care sintetizeaz proteine de export (celulele
acinoase, limfocit i plasmocit). n celulele care
secret hormoni steroizi (din glandele suprarenale ,
din gonade ) numrul este foarte mic, ribozomii
aprnd liberi, n citoplasm (Fig.5.32).

Diametrul ribozomilor este de 15-30nm, avnd

aspectul unor granule sferice, cu constana de
sedimentare de 80S la eucariote i de 70S (uniti
Svedberg) la procariote.

Fig.5.32.Aspecte ale ribozomilor examinai cu microscopul

optic
1-Ergastoplasm; 2-Corpusculi Nissl; 3-Grupri bazofile n
celulele secretorii din glanda mamar; 4-Corpi Berg n
hepatocit.

Organizarea ultrastructural. La
eucariote, un ribozom este
format din dou subuniti
inegale, ca dimensiuni
asimetrice: a) o subunitate mare
(cu diametrul de aproximativ
30nm), de form sferoidal, cu
constan de sedimentare de
60S. ; b) o subunitate mic,
ribozomilor i a formelor lor de
alungit, cu o constant de Fig.5.33.Schema
organizare
sedimentare de 40S.(Fig.5.33).1-Subunitatea mic; 2-Subunitatea mare; 3Ribozomi; 4-Dimer; 5-Poliribozomi.

Ribozomul de la procariote este asemntor cu

ribozomul mitocondrial de la eucariote, avnd o

constant de sedimentare de 70S, cu o subunitate
mic, de 30S i o subunitate mare, de 50S.

Cele dou subuniti ribozomale sunt

separate atunci cnd nu particip la sinteza de
proteine sau cnd, n citoplasm, concentraia
ionilor de magneziu (Mg2+) scade sub 10-3 sau n
prezena unor inhibitori ai sintezei de proteine ca
puromicina sau etionina. Atunci, cnd concentraia
ionilor de magneziu crete peste 10-3 se produce
agregarea ribozomilor n grupuri denumite polimeri
(di, tri, tetra) care nu au o funcie special n celul.
Odat cu revenirea la normal a concentraiei ionilor
de magneziu n citoplasm se produce desfacerea
polimerilor i individualizarea ribozomilor.

n cursul proceselor de biosintez a proteinelor mai muli

ribozomi se dispun de-a lungul unei molecule de ARN

mesager (ARNm), formnd cu un poliribozom (polirybozoma),
sau un polizom. ARNm se amplaseaz n spaiul dintre cele
dou subuniti ale ribozomului i introduce mesajul genetic
n secvena de aminoacizi a proteinelor ce se sintetizeaz.
Numrul de ribozomi ce se grupeaz variaz n funcie de
mrimea moleculei proteice ce urmeaz a fi sintetizat, fiind
necesari 100 ribozomi pentru o molecul de colagen i de 5
ribozomi pentru o molecul de globin din hemoglobin.
Molecula de ARN mesager are forma unui filament sinuos,
gros de 2nm, ce nir ribozomii, precum mrgelele pe a,
trecnd prin fiecare ribozom, printre subunitatea mic i cea
mare. Dup ce proteina a fost sintetizat, lanul poliribozomal
se rupe, iar ribozomii se disperseaz n citoplasm.

Compoziia chimic a ribozomilor cuprinde ARN

ribozomal (ARNr) i proteine n pri aproximativ egale,
cantiti mici de ap i diferii ioni metalici (de magneziu i
calciu).

Molecula de ARN ribozomal prezint segmente bicatenare elicoidale,

dispuse la suprafaa subunitilor ribozomale, ce alterneaz cu segmente
monocatenare nespiralate, dispuse n interiorul subunitilor, unde sunt
situate i proteinele ribozomale. Prin coninutul lor n ARNr, ribozomi confer
bazofilia celulelor. (Fig.5.34).
n subunitatea mare de 60S sunt prezente 3 specii de ARNr (de 5,8S, de 28S
i de 5S), n timp ce, subunitatea mic conine numai o singur specie de
ARNr (de 18S). n moleculele de ARNr, bazele apar asimetrice, fiind
reprezentate de baze purinice (guanin i adenin) mai abundente i de baze
pirimidinice (uracil i citozin).
Proteinele ribozomale sunt legate mai strns sau mai lax de ARNr i
ndeplinesc un rol structural, unele intervenind n asamblarea unitilor
ribozomale, iar altele sunt implicate n realizarea funciilor specifice
ribozomilor. Proteinele ribozomale sunt bogate n radicali specifici de tipul

Biogeneza ribozomilor ncepe n nucleol, la nivelul moleculelor de AND

nucleolar din componenta cromozomal, unde pe o poriune a cromozomului
denumit organizator nuclear se gsesc genele pentru producerea ARNr.
Iniial se produce un precursor al ARNr cu constant de 45S ce se localizeaz
n componenta fibrilar a nucleolului. O parte din ARNr 45S d natere la
ARNr 28S i ARNr 18S, care trece n componenta granular a nucleolului, iar
cealalt parte de ARN 41S se transform sub aciunea exonucleazelor n ARNr
28S i ARNr 20S (din care rezult rapid un ARNr 18S). ARNr 28S i ARNr 18S,
mpreun cu o parte din proteinele ribozomale venite n nucleu din
citoplasm, migreaz separat n citoplasm prin porii membranei nucleare.
ARNr 58S se sintetizeaz n afara nucleolului n nucleoplasm dup tiparul

Odat trecute n citoplasm, cele dou subuniti,

nc imature se matureaz foarte repede, se

asambleaz i se asociaz cu proteine citoplasmatice
specifice ribozomului, structurnd n final ribozomii.
Funcia ribozomilor const n sinteza proteinelor.
Ribozomii ataai membranelor reticulului
endoplasmic sintetizeaz proteinele de export
(enzime, hormoni, anticorpi, tropocolageni- ca n
cazul celulelor seroase din pancreas, limfocitelor,
plasmocitelor i fibroblastelor), n timp ce
poliribozomii liberi neataai sintetizeaz proteine de
structur (ce se consum n diviziune i cretere, n
nlocuirea organitelor uzate), precum i unele
proteine speciale (proteine contractile, proteinele din
mioglobin i hemoglobin

5.5.2.RETICULUL ENDOPLASMIC

Reticulul endoplasmic (reticulum

endoplasmaticum s.cytoplasmaticum) este un
organit intracelular implicat n activitile de sintez
i secreie celular, format dintr-un complex de
membrane intracelulare ce delimiteaz un sistem
de canalicule (tuburi, cisterne) care strbat ntreaga
citoploasm a celulei eucariote. Este prezent n
toate tipurile de celule, cu excepia eritrocitului
adult. (Fig.5.36).

A fost observat n secolul trecut la microscopul optic sub forma unor

granulaii bazofile n neuron (unde formeaz substana tigroid sau

corpusculii Nissl), n hepatocit (sub forma unor zone sferice, corpii
Berg) i n pancreas (unde formeaz o zon bazofil cu striaii
longitudinale numit ergastoplasm).

Reticulul endoplasmic este mai bine reprezentat n celulele

active n sinteze (de proteine, de glucide, de lipide) i foarte dezvoltat
n celulele secretorii exo- i endocrine. n interiorul celulei este situat
cu precdere n zona intern i mijlocie a citoplasmei, ce formeaz
endoplasma (endoplasma) i mai puin n zona extern. Este separat de
plasmalem printr-un strat subire de ectoplasm, ce conine
infrastructurile fibrilare ale citoscheletului. Contactul cu plasmalema
sau continuitatea membranei reticulului cu plasmalema este extrem de
rar i poate fi considerat accidental (sau artefacte datorit preparrii).

Ultrastructura reticulului endoplasmic cuprinde saci , cisterne , tubi i vezicule

anastomozate ntre ele i delimitate de o endomembran groas de 6 nm, cu

organizare molecular , comun tuturor membranelor interne. Lumenul formaiunilor
reticulului endoplasmic variaz ntre 25-500 nm, n raport de momentul funcional al
celulei, iar coninutul lor poate apare la M.E. clar sau ntunecat, mai des omogen i
amorf dect heterogen.

Unele poriuni ale reticulului endoplasmic prezint ribozomi ataai de

endomembrane i poart numele de reticul endoplasmic rugos (RER) sau granulos
(reticulum endoplasmaticum granulosum), n timp ce alte poriuni sunt lipsite de
ribozomi i formeaz reticulul endoplasmic neted (REN) (reticulum
endoplasmaticum nongranulosum).

Membrana REN se continu cu membrana RER, dar n RER predomin

cisternele, pe cnd n REN sunt mai frecvente tuburile i canalele interconectate n
reea. Membrana RER se continu cu foia extern a nveliului nuclear, iar lumenul
RER comunic cu spaiul perinuclear. REN se ntinde spre periferia celulei fr a
atinge plasmalema. Cele dou poriuni ale reticulului endoplasmic, rugos i neted,
prezint interconexiuni morfologice i funcionale.

Reticulul endoplasmic rugos prezint pe faa extern a endomembranei sale

ribozomi individualizai sau grupai n poliribozomi. Ribozomii se leag de
membranele reticulului prin subunitatea mare, care este strbtut de un canal ce se
deschide n lumenul reticulului i prin care trec lanurile polipeptidice, ce se
formeaz n ribozomi. Legarea ribozomilor se face cu ajutorul unor glicoproteine
transmembranare denumite riboforine (I i II). Ribozomii ataai confer o puternic
bazofilie celulei respective.

R.E.R. prezint o mare plasticitate i o mare putere de

adoptare n raport cu vrsta sau starea funcional a celulei. n
situaii patologice ale celulei se observ mari variaii morfologice
ale organitului, precum: fragmentri, dilatri, acumulri de
materiale n cisterne i vezicule, proliferri ale formaiunilor
reticulului.

R.E.R. este specializat n sinteza proteinelor.

Reticulul endoplasmic neted (R.E.N.) nu prezint ribozomi

pe membrana sa limitant. Este alctuit mai mult din formaiuni
tubulare cu diametrul de 30nm, ce comunic prin canale de
legtur cu R.E.R. Este prezent n citoplasma tuturor celulelor, dar
mai puin reprezentat cantitativ dect cel rugos.

REN apare mai dezvoltat n celulele care: - sintetizeaza hormoni

steroizi (glandele suprarenale, celulele interstitiale din ovar si testicul);

- produc glucide n cantitate mare (hepatocite, celule musculare); formeaza pigment (melanoblaste) si - elaboreaz acid clorhidric
(parietale din glandele fundice).

n celula musculara, REN se numeste reticul sarcoplasmic

prezentnd un aspect morfologic si functional particular si ndeplinind
un rol esential n cuplarea excitatiei cu contractia. n celulele
pigmentare ale retinei, REN apare si sub forma unor corpi nucleoizi,
biconvexi, PAS pozitivi cu rol n procesele de fotoreceptie.

Compoziia chimica a reticulului endoplasmic a fost studiat

dupa centrifugarea diferentiata a omogenatului celular, cnd s-au
obtinut microzomii.

Microzomii nu sunt organite celulare, ci fractiuni subcelulare, ce

cuprind portiuni de reticul endoplasmic,membrane golgiene i
fragmente de membrane celulare. Se pot obtine i separa microzomii
rugosi si netezi, atunci cnd se desprind ribozomii de RER. n
microzomi se pastreaza orientarea membranei reticulului endoplasmic
din celula, prezentnd o fata externa, ce corespunde fetei
citoplasmatice a reticulului endoplasmic, iar continutul lor este identic
cu cel din lumenul reticulului endoplasmic.

In compozitia chimica a reticulului endoplasmic intra proteine

(60%) si lipide (40%). O parte din proteine sunt incluse n

structurile organitului (proteine structurale), iar alta parte sunt
proteine de export (hormoni, enzime). Dintre lipide, predomina
fosfolipidele, lecitinele si cefalinele, iar colesterolul este n cantitate
mica (mai ales n RER). Acizii grasi din fosfolipide sunt foarte
nesaturati, ceea ce confera o mare fluiditate membranei reticulului
endoplasmic.

Enzima marker pentru reticulul endoplasmic este glucozo 6

fosfataza, dar n membranele reticulului endoplasmic se mai
gasesc si alte enzime legate de transferul de electroni, precum si
enzime hidrolitice sau de dezaminare.

Originea reticulului endoplasmic este nca discutabila, el

parnd sa se formeze fie din membranele nucleare, fie de novo
prin sinteza macromoleculelor caracteristice n membrane si
asamblarea lor. Membranele reticulului endoplasmic se rennoiesc
cu viteze diferite de la un segment la altul (unele dupa 40-60 de
ore, iar altele dupa 16 zile).

Functiile comune ale reticulului endoplasmic sunt:

1) RE realizeaza un vast sistem microcirculator

intracitoplasmatic, prin care sunt vehiculate n permanent
substante n toata citoplasma sau n alte structuri cu care RE
comunica (precum complexul golgian sau spatiul perinuclear).

2) RE formeaza un suport intracitoplasmatic att pentru

celelalte organite, ct si pentru mentinerea formei celulei.

3) RE participa prin citomembranele sale, dotate cu

permeabilitate selectiva, la realizarea unor schimburi active ntre
continutul formatiunilor componente si citosol.

Fig.5.37 - Participarea RER la

sinteza proteinelor

Functiile specifice difera la RER la REN.

Reticulul endoplasmic rugos (RER) are ca functie de baza sinteza

proteinelor de export, dar si sinteza proteinelor de membrana destinate diferitelor

membrane ale organitelor si plasmalemei.
Astfel, RER apare foarte bine dezvoltat n: a) celulele seroase ale pancreasului
exocrin ce secreta enzime digestive; b) n plasmocitele ce sintetizeaza
imunoglobuline; c) n hepatocite care produc albumine si alte proteine serice; d) n
neuroni, unde ndeplineste rolul unei fabrici de membrane, care produce si
ntretine o suprafata mare de membrane, datorita prelungirilor. n general, RER este
fabrica de membrane a celulei eucariote. (Fig.5.37)

Reticulul endoplasmic neted ndeplineste mai multe functii specifice n

celule:
1) participa la sinteza hormonilor steroizi (n celulele corticosuprarenalei, precum
si n celulele glandei interstitiale din ovar si testicul;
2) participa la metabolismul glucidelor, intervin att n glicogeneza (n
hepatocite), ct si n glicogenolliza (prin glucozo-6-fosfataza pe care o contine);
3) intervine n metabolismul lipidelor, participnd la sinteza unor lipoproteine
(trigliceride sau complexe lipoproteice). Astfel, n celulele intestinale, REN este
foarte dezvoltat i sintetizeaza trigliceride (din substante absorbite), ce pot fi
evidentiate n REN sub forma de chilimicroni (picaturi de grasime);

4) intervine n procesele de detoxifiere, prin metabolizarea

unor substante toxice endo- si extracelulare, datorita

enzimelor localizate n citomembranele sale (de exemplu,
metabolizeaza sarurile biliare, hormonii steroizi, colesterolul,
hemoglobina, precum si unele medicamente);
5) participa la realizarea contractiei musculare, conducnd,
prin sistemul tubilor transversi, excitatia de la suprafata
plasmalemei la miofilamentele contractile;
6) intervine n biosinteza acidului clorhidric n celulele
parietale ale glandelor fundice;
7) participa la fotoreceptie, n celulele pigmentare din retin

5.5.3.COMPLEXUL GOLGI

Complexul Golgi s. apparatul reticular intern este

un organit celular comun, prezent n toate tipurile de
celule, cu exceptia hematiei adulte. A fost descoperit n
1898 de catre Camillo Golgi, n neuronii piriformi din
cerebel. La microscopul optic, n celula proaspata poate
fi evidentiat prin colorare cu rosu neutru, iar n celula
fixata prin impregnare cu saruri de metale grele (osmiu,
argint etc.), aparnd sub forma unei retele, formata din
canalicule anastomozate, vacuole de diverse marimi
sau bastonase (dictiozomi). (Fig.5.38)

Pozitia complexului Golgi n celula variaza dupa tipul si activitatea

celulei. Astfel, n neuroni este dispus perinuclear, pe cnd n celulele

secretorii exocrine (de exemplu n celulele acinilor serosi din
pancreas) ocupa o pozitie supranucleara, fiind situat ntre nucleu si
polul apical al celulei. n celulele cu dubla polaritate functionala
(exemplu celula tiroidiana si adamantoblastul), complexul Golgi se
deplaseaza frecvent ntre cei doi poli, n functie de activitatea
metabolica predominanta a unuia sau altuia.

n celule, complexul Golgi se poate gasi n mai multe

exemplare distincte.

Organizarea ultrastructurala a complexului Golgi cuprinde

trei elemente componente: a) pachete de saci turtiti sau cisterne
asezate n stiva; b) microvezicule si c) macrovezicule. Aceste
elemente componente sunt delimitate de endomembrane
(citomembrane), groase de 6-8 nm, netede, fara ribozomi atasati de
suprafetele lor.

Sacii sau cisternele golgiene sunt polarizate morfologic si

functional, prezentnd:

a) o fata cis sau proximala sau convexa sau imatura,

formatoare, n strnsa relatie cu RER. (Fig.5.39)

b) o fata trans sau distal, concav sau matur, ndreptat catre membrana

celular, unde se formeaz veziculele de secretie. Membrana sacilor si veziculelor

este mai subire (6 nm, ca la RE) pe fata CIS si mai groasa (10 nm, ca la
plasmalema), pe fata TRANS, tranzitia de la un tip de membrana la altul facnduse la nivelul cisternelor.

Structurile complexului Golgi se gsesc n micare continu, n sensul

migrarii lor de la fata imatura spre fata de maturare a organitului, nct
microveziculele vor forma sacii Golgieni, iar din acestia vor lua nastere
macroveziculele si apoi veziculele secretorii.

Microveziculele (sau veziculele de transfer) (vesicula) sunt cavitati

sferoidale (de 20-80 nm), delimitate de o membrana de 6 nm, sunt dispuse de obicei
pe fata imatura CIS sau se gsesc ntre RER si sacii Golgieni. Se formeaza prin
gtuirea capetelor dilatate ale RER, de care se desprind pierzndu-si ribozomii de pe
fata externa. Unele dintre microvezicule prezinta o membrana mai groasa dect a
primilor saci golgieni si sunt pozitive la reactia pentru fosfataza acida, nct sunt
interpretate a fi lizozomi primari formati n complexul GERL (Golgi - endoplasmic
reticulum - lysosome). Restul microveziculelor fuzioneaza, formnd astfel noi saci
golgieni. (Fig.5.40)

Cisternele (sacii) golgieni (sacculus lamelliformis) formeaza

componenta major a complexului Golgi, avnd un aspect de

saci turtii, usor curbati si dispusi paralel unii fata de altii si
separati ntre ei prin spatii regulate de 20-30 nm. Fiecare sac
(cisterna) se aseamana cu o farfurie, avnd regiunea centrala
mai subtire (1-7 nm) si periferia mai groasa. Numarul sacilor
este variat (ntre 3-12) putnd sa ajunga n unele celule
secretorii pna la 20. Extremitatile laterale ale sacilor pot
prezenta pori sau prelungiri care sa anastomozeze sacii ntre
ei sau sa-i lege de RE.

Macroveziculele sunt cavitati sferoidale sau ovoidale, cu diametrul ntre

200-600 nm, delimitate de o citomembrana groasa (8 nm), cu un continut

amorf sau granular-heterogen, cu material mai condensat si inegal la
fluxul de electroni. Ele sunt situate de obicei pe fata de maturare - TRANS
- a complexului Golgi si sunt interpretate ca fiind vacuole de secretie sau
corpi de condensare a produsului secretat de celula.

Macroveziculele se formeaza din dilatatiile laterale ale sacilor

golgieni, de care se desprind si se individualizeaza.

Numarul veziculelor de secretie difera de la un tip de celula la

altul, fiind mai numeroase n faza de maxima activitate a celulelor
secretorii exocrine si endocrine.

Compozitia chimica a complexului Golgi contine 60% proteine de

structura si protein-enzime si 40% fosfolipide si colesterol.

Enzimele marker pentru complexul Golgi sunt: a)

tiaminpirofosfataza (TPP), localizata mai ales n interiorul sacilor golgieni
de pe fata trans; b) nucleoziddifosfataza (NDP) prezenta n interiorul
sacilor golgieni intermediari si c) unele glicoziltransferaze. Totodata
complexul Golgi este bogat n sulfatotransferaza, care intervine activ n
sulfatarea polizaharidelor. De asemenea mai contine: citocrom-reductaza
(ca si RE) 5 nucleotidaza (ca si membrana plasmatica), adenilat ciclaza,
fosfataza acida (n veziculele sistemului GERL), ubiquinona, vitamina A si
vitamina K.

Originea complexului Golgi. Structurile complexului Golgi se

formeaza din membranele preexistente ale sacilor golgieni. Nucleul
controleaza sinteza proteinelor specifice din endomembrane si deci
indirect influenteaza formarea complexului Golgi.

Functiile complexului Golgi sunt reprezentate de:

1) Functii legate de procesul de secreie intracelular, aparatul

Golgi fiind implicat n: a) concentrarea produsilor sintetizati n RE; b)

prelucrarea produsilor sintetizati n RE prin procese biochimice; c)
sinteza de noi componente; d) stocarea si segregarea produsilor de
secretie; e) ambalarea produsilor sub forma de vezicule; f) livrarea
produsilor spre plasmalema. Produsul de secretie elaborat n RE ajunge
la formatiunile golgiene prin microvezicule ce se detaseaza din capetele
reticulului endoplasmic rugos, functionnd ca o naveta (suveica) cu
frecvente deplasari dus-ntors ntre RE si sacii golgieni. (Fig.5.41).

2) Fabricarea de endomembrane pentru veziculele secretorii si din

acestea mai departe pentru plasmalema. n acest mod, membrana

veziculelor de secretie se ncorporeaza n plasmalema, compensnd
astfel pierderile de plasmalema prin endocitoza. Complexul Golgi
participa la reciclarea (reutilizarea) membranelor veziculelor
secretoare, ale veziculelor sinaptice si ale veziculelor de endocitoza.
Prin acest proces, unele componente ale plasmalemei ca receptori,
enzime sau unele molecule informationale din mediul extracelular
(hormoni peptidici, cotecolamine) sunt introduse n celula pe calea
complexului Golgi, unde sunt modificate (glicozilate, sulfatate,
fosforilate) sau reparate. n acest mod, complexul Golgi ndeplineste
rolul de a fi principala statie de rennoire a endomembranelor si a
plasmalemei.

Actiunea unor virusuri sau transformarea maligna a celulelor

poate altera fluxul membranelor, att n ceea ce priveste conexiunile
dintre formatiunile delimitate de endomembrane, ct si n ceea ce
priveste manifestarile functionale ale acestora.

3) Sinteza complexelor hidratilor de carbon. Complexul Golgi

participa la sinteza glicoproteinelor prin faptul ca n structurile
golgiene componenta primita de la RER se uneste cu moleculele de
hidrati de carbon, cu ajutorul unor enzime aflate n organit
(transferaze, glucozaminidaze). n complexul Golgi se desavrseste
procesul de glicozilare a glicoproteinelor. Glicoproteinele sintetizate
pot ramne intracelular ca enzime lizozomale sau pot forma
continutul veziculelor secretorii, care prin exocitoza ajung
extracelular.


4) Formarea proteoglicanilor sulfatati (condroitin
sulfatatilor) si a glicoproteinelor sulfatate (mucina) se
realizeaza prin procesul enzimatic de sulfatare a
glicoproteinelor cu ajutorul sulfotransferazei golgiene.

5) Maturarea lipoproteinelor si a albuminelor.

Lipidele sintetizate la nivelul reticulului endoplasmic
neted sunt transportate la complexul Golgian, unde are
loc procesul de maturare si complexare cu proteinele.

6) Formarea lizozomilor primari are loc pe fata

cis - imatura - sub forma unor microvezicule pozitive
pentru fosfataza acida. Enzimele lizozomale sintetizate n
RER sunt transportate si mpachetate fie n sistemul
GERL, fie n vezicule de condensare.

7) Formarea acrozomului. n spermiogeneza,

complexul Golgi ocupa o pozitie supranucleara, si
modifica forma si realizeaza acrozomul, care elibereaza
enzime litice la contactul cu ovulul.

5.5.4.Ciclul secretor

Ciclul secretor sau procesul secretor reprezint o succesiune de etape

pe care le parcurg proteinele de export din momentul sintezei si pna la

eliberarea lor n mediul extracelular. Se descriu cinci etape obligatorii:

1. Sinteza si segregarea proteinelor de export la nivelul RER. Initial

proteinele sunt sintetizate pe polizomii neatasati membranelor RE,

formati din ribozomi dispusi de-a lungul unei molecule de ARNm la
distante de 100 nucleotide. ntr-un polizom, fiecare ribozom
sintetizeaza independent cte un lant polipeptidic, care este
adapostit n tunelul subunitatii ribozomale mari. Atunci cnd lantul
polipeptidic a atind un anumit stadiu de formare, ribozomii se
ataseaza de membrana reticulului endoplasmic ntr-o anumita
pozitie care recunoaste o secventa specifica fiecarei proteine,
denumita secventa semnal, situata pe capatul terminal amino al
peptidei care ia nastere. Acest semnal este interceptat de proteine
specifice din membrana reticulului (denumite riboforine). n
momentul atasarii polizomilor se formeaza un orificiu n
membranele RER, n continuarea celui din subunitatea ribozomala
mare. Prin acest tunel trec n spatiul endoplasmic lanturile
polipeptidice nou-formate. (Fig.5.42)

2. Transportul intracelular al proteinelor prin formatiunile

reticulului endoplasmic rugos la complexul Golgi se realizeaza cu

ajutorul microveziculelor, care sunt ncarcate cu proteine sintetizate
de polizomi si se ndreapta spre sacii golgieni.

3. Condensarea si maturarea proteinelor n structurile golgiene.

Procesul de maturare sau condensare (cu durata de circa 1 ora)

desavrseste conformatia cuaternara a proteinelor, realizndu-se prin
interactiunea proteinelor cu un peptidoglican sulfatat sintetizat n
complexul Golgi. Din aceasta interactiune se formeaza agregate
osmotic inactive nsotite de eliberarea unor molecule de apa din
proteinele nou formate (deci de o concentrare a lor).
4. Depozitarea intracelulara se face sub forma veziculelor secretorii,
care ramn un timp n citoplasma, dupa care sunt trecute n
ectoplasma si mai departe n mediul extracelular, sub actiunea unor
hormoni sau neurotransmitatori.
5. Exocitoza este procesul prin care veziculele secretorii sunt
trecute n mediul extracelular. Este influentat de concentratia
intracelulara a ionilor de calciu, de prezenta moleculelor de ATP si
AMP-ciclic care provoaca contractia microfilamentelor care determina
deschiderea veziculelor si eliminarea continutului n spatiul
extracelular.
Prin exocitoza sunt eliberati din celula: hormonii, enzime,
imunoglobuline, lipoproteine, neurotransmitatori, constituenti ai
serului si laptelui, componente ale membranei celulare, glicocalixului
sau alti produsi sintetizati n reticulul endoplasmic si condensati n
complexul Golgi. Prin acelasi mecanism al exocitozei sunt eliminati si
unii produsi terminali, metabolic inerti, nefolositori sau daunatori
pentru celula.

5.6. ORGANITELE DIGESTIEI INTRACELULARE

Digestia intracelular cuprinde totalitatea fenomenelor care produc

degradarea biochimic a moleculelor ptrunse n citoplasm prin endocitoz, a

unor organite uzate, a unor fragmente de celul sau structuri celulare.

La procesul de digestie intracelular particip dou tipuri de organite:

lizozomii i peroxizomii.
5.61. Lizozomii
Lizozomii sunt organite celulare de form
sferic sau ovoidal (de 0,2 - 1 nm diametru), prezeni
n citoplasma tuturor celulelor animale, cu excepia
hematiilor adulte.
Lizozomii au fost descoperii n 1950, de ctre
DE DUVE prin tehnici de fracionare celular, ca
particule ce sedimenteaz ntre mitocondrii i
microzomi i conin enzime hidrolitice cu pH optim de
aciune acid. Organizarea lor ultrastructural a fost
descris de ctre NOVIKOFF n 1956. Au mai fost
denumii corpi litici, saci de sinucidere sau stomacul
celulei.
Organizarea ultrastructural a lizozomilor
cuprinde o membran lizozomal i matricea lizozomal
(Fig 5.43).

Membrana lizozomal delimiteaz lizozomii, prezentnd o

structur comun endomembranelor, lipoproteic, mozaicat, cu o
grosime medie de 6-8 nm. Membrana lizozomal poate fi dubl sau
unic, prevzut la exterior cu mici prelungiri numite spiculi. Ea
acioneaz ca o barier ntre enzimele digestive i citosol, mpiedicnd
ptrunderea acestor hidrolaze n matricea citoplasmatic. Hormonii
glucocorticoizi (cortizon, cortizol) i colchicina activeaz ca stabilizatori
ai membranei lizozomale, n timp ce vitaminele A, E, radiaiile X i
ultraviolete, endotoxinele, hormonii steroizi sexuali (testosteron,
progesteron), dezoxicorticosteronul, ocul osmotic, hipoxia, anoxia etc.
acioneaz ca destabilizatori ai membranei.

Matricea lizozomal prezint aspecte diferite la microscopul

electronic, putnd aprea omogen, fin granular sau heterogen nct
se recunosc dou tipuri majore de lizozomi: primari i secundari.

Lizozomii primari sunt de talie mic i au matricea omogen sau

fin granular fiind dotat cu un set incomplet de hidrolaze acide. Sunt
lizozomi tineri, cu o via scurt (de 24-48 ore), neangajai nc n
activitile de digestie intracelular. Coninutul enzimatic variaz n
raport cu specia, starea funcional i tipul celulei. Astfel, lizozomii
primari ai polimorfonuclearelor neutrofile (microfage mobile) conin o
mare cantitate de neuroaminidaz, care distruge membrana bacteriilor;
- lizozomii macrofagelor conin multe fosfataze acide.

Lizozomii secundari sunt heterogeni, coninnd n matrice structuri granulare i

membranoase i desfurnd activiti enzimatice digestive. Au o via mai lung

(de la cteva zile la cteva sptmni), talia mai mare i un set enzimatic complet.
Se formeaz din fuziunea lizozomilor primari, cu veziculele de endocitoz ce
conin substane fagocitate, endocitate sau degradate din celule. n funcie de
modul n care s-au format, exist mai multe tipuri de fagozomi secundari:
heterofagolizozomi (heterophagosoma s. phagolysosoma), autofagolizozomi
(autophagosoma), crinofagolizozomi, corpusculi reziduali (corpusculum residuale)
i corpi multiveziculari (corpus multivesiculare).
Organizarea chimic a
lizozomilor cuprinde un numr mare de hidrolaze acide (peste 50 enzime), care pot
degrada orice component a celulei: acizi nucleici (prin ribonucleaz acid),
proteinele (prin colagenaz, catepsin), glicogenul (prin alfa-glicozidaz),
mucopolizaharidele (prin alfa monozidaz). Enzimele lizozomale sunt active
numai la pH acid (4-6).

Enzimele marker pentru identificarea lizozomilor pe seciuni

de esuturi sunt fosfataza acid i arilsulfataza, iar n timpul fracionrii
celulare: fosfataza acid, catepsina C, N-acetil-beta-glucozaminidaza.
Niciodat un lizozom nu conine ntreg setul de enzime hidrolitice,
nct heterogenitatea lizozomilor este dat att de numrul, ct i de
concentraia unor enzime din matrice i membrana lizozomal. Cea
mai mare parte a enzimelor e localizat n matricea lizozomal,
existnd ns enzime localizate numai pe membrana lizozomal, ct i
enzime cu dubl localizare n matrice i n membran. (Fig. 5.44)
n afar de hidrolaze acide, lizozomii mai conin conponente de
origine extra sau intracelular, supuse digestiei i aflate n diferite
stadii de degradare. Datorit acestui aspect pentru identificarea
lizozomilor trebuie avute n vedere enzimele marker, att la
examinarea la microscopul electronic, ct i la examinarea prin
fracionare celular

Lizozomii pot fi comparai cu nite saci de sinucidere ce conin

enzime (hidrolaze acide) care sunt eliberate n mediul intracelular, fie
prin modificarea membranei lizozomale de ctre diferii ageni toxici,
chimici sau fizici (ca de exemplu: temperaturi foarte joase, raze
ultraviolete, vitamina K), fie de ctre detergeni care rup membrana.
Odat eliberate n citoplasm enzimele produc liza celulei. Eliberarea
poate avea loc i n mod normal n timpul unor fenomene de involuie
fiziologic (ca n evoluia uterin post partum, n glanda mamar n
perioada de post-lactaie).

Ph-ul optim (acid) pentru activitatea enzimelor lizozomale este

asigurat de membrana lizozomilor care conine o protein ce

grupeaz ionii de hidrogen n lumenul lizozomilor folosind energia
rezultat din hidroliza ATP. Alturi de enzimele hidrolitice acide, n
lizozomi se mai gsesc n cantiti reduse lipide i proteine de
structur, iar n proporii foarte reduse glicolipide, flavine, acid
hialuronic.

n funcie de natura (substratul) materialului asupra cruia

acioneaz lizozomii exist trei tipuri de digestie lizozomal: a)
heterofagia, cnd lizozomii acioneaz asupra materialelor exogene
nglobate prin endocitoz; b) autofagia, cnd lizozomii acioneaz
asupra propriilor constitueni citoplasmatici (exemplu: organite
degenerate), segregai n focare de citoliz; c) crinofagia, cnd
lizozomii diger unele materiale de secreie celular. (Fig. 5.45).

n heterofagie se diger intracelular, cu ajutorul lizozomilor

substanele nutritive, bacteriile, virusurile introduse prin endocitoz
(fagocitoz, pinocitoz). n urma proceselor de endocitoz se
formeaz: fagozomi (phagosoma) (sau heterofagozomi), n cazul
fagocitozei, pinozomi n procesul de pinocitoz fr receptori i
receptozomi n pinocitoza mediat de receptori. (Fig.5.46)

Fagozomii, pinozomii i receptozomii sunt antrenai prin

micrile din citoplasm, ctre interiorul celulei. Spre ei se

ndreapt chimiotactil lizozomii primari i prin fuzionare,
rezult o singur vacuol, denumit lizozom secundar sau
heterolizozom sau heterolizom.

n interiorul lizozomilor secundari, enzimele hidrolitice

lizozomale produc digestia n funcie de complexitatea
materialului endocitat. Ca urmare a aciunii enzimelor
lizozomale se obin produi de digestie micromoleculari
(aminoacizi, nucleotide, hidrai de carbon, lipide) ce vor
traversa membrana lizozomal, ajungnd n citoplasm, unde
sunt folosite ca materie prim pentru procesele biosintetice
sau ca surs de energie. Pe msur ce produii de digestie
prsesc lizozomul secundar, acesta i micoreaz volumul,
producndu-se simultan o invaginare a membranei lizozomale
cu formarea unor vezicule (ca la pinocitoz), care vor fi i ele
digerate. Prezena acestor vezicule mici n interiorul unui
lizozom secundari d aspectul de corp multivezicular (corpus
multiveziculare), observabill electro microscopic.

AUTOFAGIA este procesul de digestie intracelular, cu ajutorul

enzimelor lizozomale, a organitelor celulare epuizate sau uzate. n acest

mod, mitocondriile uzate, peroxizomii, poriuni uzate de reticul
endoplasmic sunt iniial nconjurate cu o membran, denumit nveli de
izolare provenit din reticulul endoplasmic sau din aparatul Golgi. Se
formeaz astfel vezicule (autofagozomi) sau vacuole autofagice, ce
conin materialul intracelular ce trebuie ndeprtat. Autofagozomii
fuzioneaz cu lizozomii primari, rezultnd lizozomi secundari n care se
produce digestia materialelor incluse. O parte din produsele rezultate din
digestie sunt eliberate n citoplasm pentru a fi reutilizate, iar ceea ce
rmne formeaz corpii reziduali. Prin autofagie, lizozomii asigur
rennoirea (turn-over-ul) componentelor citoplasmei, deoarece
mitocondriile au o via de circa 12 zile, peroxizomii de 2-3 zile, iar
ribozomii de 10 zile. n ficat se distrug mai mult de un miliard de
mitocondrii pe un gram de esut ntr-o or.

Procesele de autofagie sunt accelerate: a) n inaniie cnd se

remarc o cretere a numrului de vacuole autofagice (de exemplu n
ficat) sau b) n inactivitate ( n muchi). De asemenea, se intensific
funcia de autofagie n timpul morfogenezei ori de cte ori are loc
involuia unor esuturi.

n unele situaii, enzimele lizozomale sunt deversate n afara

celulei, producnd efecte litice, prin acest mecanism osteoclastele
digernd esutul osos.

CRINOFAGIA reprezint un aspect particular de autofagie observat

n celulele secretorii exocrine i endocrine, prin care lizozomii

intervin n reglarea cantitii de produi de secreie ai celulei. n
cazul n care n celul se acumuleaz un surplus de vezicule
secretorii, care nu ajung s fie exocitate, acest surplus va fi digerat
cu ajutorul lizozomilor primari care vor fuziona cu veziculele
secretorii, formnd crinofagolizozomii. Moleculele mici rezultate n
urma digestiei sunt trecute n citosol unde sunt reutilizate (Fig. 5.47).

Digestia n heterolizozomi i n autolizozomi este

incomplet, unele materiale nefiind digerabile. Lizozomii

care, dei i-au terminat funcia digestiv, conin nc
resturi nedigerabile se numesc lizozomi teriari, telolizomi
sau corpi reziduali i vor fi eliminai n cea mai mare parte
prin procesul de exocitoz. n cazul celulelor care nu se
divid (neuronii, celulele musculare) corpii reziduali se pot
ntlni n celulele n vrst, formnd granule de lipofuscin.
n corpii reziduali se mai pot ntlni: figuri mielinice, ce
reprezint produi de degradare a fosfolipidelor, pigmeni
hemoglobinici sub forma granulelor de hemosiderin,
substane injectate.

Biogeneza lizozomilor ncepe n reticulul endoplasmic

rugos, unde sunt sintetizate proteinele componente
(structurale i enzimatice) ale lizozomilor. Microveziculele
formate n RER i care transport hidrolazele acide pot fi
mpachetate n sistemul GERL (scurtcircuitnd structurile
golgiene) sau n veziculele de condensare. (Fig. 5.48)
Implicarea lizozomilor n patologie

Lizozomii pot fi implicai ntr-o serie de procese

patologice determinate de diverse substane
(medicamente, toxine microbiene), introduse n celul prin
endocitoz, sau de unele boli congenitale.

Biogeneza lizozomilor

Sunt descrise n aceste condiii:

modificri ale structurii i funciei lizozomilor precum: a) alterri

morfologice i funcionale (creteri n volum, intensificarea sau

reducerea funciei datorit acumulrii n exces a substanelor toxice
endocitate); b) alterri ale activitii, prin activarea sau inhibarea mai
multor hidrolaze acide; c) alterri ale stabilitii membranei, cu
eliberarea enzimelor lizozomale n citoplasm sau extracelular,
provocnd distrugerea matricei esuturilor.
Astfel, vitamina K i expunerea prelungit la soare produc ruperea
membranelor lizozomale cu distrugerea celulelor epidermice. Unele
bacterii vii (bacilul turbeculozei, al leprei) sau toxoplasma (un protozoor
parazit) inhib fuziunea lizozomilor primari cu veziculele de endocitoz,
permind acestor microorganisme s distrug celulele care le-au
fagocitat. Uneori fuziunea lizozomilor primari cu veziculele endocitate
are loc prematur, nainte ca membrana plasmatic s fi nchis complet
vezicula, nct coninutul enzimatic lizozomal este eliminat n spaiul
extracelular, producnd inflamaii (exemplu: n reumatism, n artrita
gutoas), afeciuni n care se folosete colchicina, care inhib fuziunea
lizozomilor cu veziculele de endocitoz, mpiedicnd trecerea enzimelor
lizozomale n mediul extracelular. n mucolipidoza II (sau boala cu
celule I), enzimele lizozomale sunt lipsite de semnalul de
recunoatere (manoz 6 P) i din acest motiv sunt eliminate i nu mai
pot fi recaptate, nefiind recunoscute.

Lipsa unei enzime din setul de hidrolaze acide se

datoreaz unui defect genetic i determin apariia bolilor de

depozit, denumite i tezaurimoze lizozomice, care se
manifest prin acumularea, n lizozomii deficieni, a
substanelor ce nu pot fi digerate din lipsa unei enzimei sau
mai multor enzime. Astfel se acumuleaz lipide sau poliozide
nedigerate, care, n final, ocup celula i compromit funcia
ei, afectnd organe precum creierul, ficatul, splina.

n ultimii ani se folosete terapia lizozomotropic, care

const n administrarea unor medicamente legate de un
vehicul transportor. Lizozomii desfac legtura dintre
medicament i vehiculul transportor, medicamentul trecnd
n citoplasma celulei bolnave, n timp ce transportorul este
digerat.

n orice necroz celular se distrug i lizozomii nct

trec n snge unele enzime, care permit precizarea
diagnosticului (exemplu n necroz hepatic sau miocardic).

5.6.2. PEROXIZOMII
Peroxizomii (peroxysoma) sunt organite celulare comune i

permanente, care se caracterizeaz printr-un bogat coninut n

peroxidaze, enzime care catalizeaz reacia de formare (oxidaza) i de
descompunere (catalaza) a peroxidului de hidrogen (sau a apei
oxigenate H2O2).

Au fost observai la microscopul electronic n 1954, n rinichi de

ctre RHODIN i denumii microbodies. Mai trziu, DE DUVE i
colaboratorii, n urma unor cercetri de fracionare a hepatocitului, leau considerat ca organite distincte, ce au ca enzime marker:
uratoxidaza, catalaza i D aminoacidoxidaza. n celulele din
cotiledoanele plantelor au fost descrii sub denumirea de glioxizomi,
deoarece conin glioxilat i particip la transformarea lipidelor n
carbohidrai. Denumirea de glioxizomi este acceptat i n cazul
celulelor animale, pentru acei peroxizomi care, pe lng alte enzime
peroxizomale, mai conin cel puin dou enzime ale ciclului glioxilat
(malat-sintetaza sau izocitrat-liaza).

Forma, dimensiuni i numr. Peroxizomii au o form sferic sau

oval, uneori neregulat cu prelungiri. Au dimensiuni de 0,5 - 1 nm,
variabile de la o celul la alta. n funcie de talia lor se deosebesc dou
categorii de peroxizomi: macroperoxizomi, cu diametrul de o,5 - 1,5 nm
i microperoxizomi, cu diametrul de 0,1 - 0,4 nm.

Fig.5. 49. Organizarea ultrastructural a

peroxizomului
1 - Reticul endoplasmatic rugos;
2 - Reticul endoplasmatic neted;
2 - Mitocondrie;
4- Peroxizom: a- membran,
b- matrice,
c- cristaloid

Organizarea ultrastructural a peroxizomilor cuprinde: o

endomembran, de 6,5 - 8 nm grosime i o matrice fin
granular, mai dens la fluxul de electroni dect matricea
lizozomal. La unii peroxizomi, n matrice se observ o zon
central dens, numit miez sau cristaloid, care la un
grosisment puternic apare format dintr-un mnunchi de tubuli
paraleli i deni la fluxul de electroni, care pe seciune
transversal dau imaginea unui fagure de miere. La unii
peroxizomi se mai observ n matrice prezena unei plci
marginale, cu aspect de regiune dens, ngroat la periferie, cu
funcie nc neelucidat. Cristaloidul nu apare dect la unele

Endomembrana peroxizomal, dei prezint o compoziie

asemntoare cu a membranei reticulului endoplasmic, difer de

aceasta prin unele polipeptide i enzime din structura sa. S-a putut
observa, n unele cazuri att o continuitate ntre membrana
microperoxizomilor i a reticulului endoplasmic neted, dar i o
continuitate a membranei de la un peroxizom la altul, formnd un
reticul peroxizomal, diferit de reticulul endoplasmic.

Biogeneza peroxizomilor se poate realiza direct din reticulul

endoplasmic prin dilatarea i desprinderea unor pri terminale ale
cisternelor, care sunt pozitive pentru catalaz. Mai frecvent,
peroxizomii se formeaz prin reticulul endoplasmic - complexul Golgi,
unele enzime peroxizomale sintetizndu-se n reticulul endoplasmic
rugos, iar altele (catalaza, uricaza) n ribozomii liberi, dup care sunt
dirijate spre peroxizomi direct prin citosol.

n compoziia chimic a peroxizomilor sunt prezente proteine,

lipide i enzime speciale, precum: catalaza (33% din proteinele
peroxizomale, enzim marker), uratoxidaza (uricaza), enzimele
ciclului glioxilat, D aminoacidoxidaza. Aceste enzime difer ca numr
i specificitate de la un peroxizom la altul. Astfel, peroxizomii renali
nu conin sistemul enzimatic al beta-oxidrii.

Funciile peroxizomilor sunt :

1. Intervin n metabolismul peroxidului de hidrogen, ntr-o prim

etap n producerea acestuia, cu ajutorul oxidazelor, care folosesc oxigenul
molecular pentru oxidarea unor substraturi variate, producnd peroxidul de
hidrogen ( H2O2 ), un produs toxic pentru celule. n etapa urmtoare,
peroxidul de hidrogen este descompus, cu ajutorul catalazei, n oxigen i
ap.

2. Intervin n metabolismul acizilor nucleici deoarece prin

uratoxidaz, particip la degradarea purinelor (adenina i guanina).

3. Particip la reglarea metabolismului glucozei, prin enzima

denumit alfa-hidroxiacidoxidaza, care catalizeaz oxidarea lactatului la
piruvat. Prin alfa-hidroxiacid-oxidaza i D-amino-acidoxidaza (sau
aminotransferaza), peroxizomii particip i la procesul de gluconeogenez
(prin care se sintetizeaz glucoz pe seama unor precursori neglucidici). Cu
ajutorul acestor enzime se realizeaz transferul ireversibil al gruprilor
amino de la unii aminoacizi (leucina, fenilalanina) formndu-se n acest fel
alfa-cetoacizii care reprezint substratul pentru gluconeogenez.

4. Particip la beta-oxidarea acizilor grai, mprind aceast funcie

cu mitocondria, fiind ns mai puin activi, nct numai 1/4 - 1/5 din totalul
oxidrii acizilor grai are loc n peroxizomi. Caracteristic apare faptul c
peroxizomii oxideaz acizii grai, cu lan lung de atomi de carbon pn cnd
lanul s a scurtat la 6 atomi de carbon, dup care oxidarea este realizat de
mitocondrii.

5. Produc acetil coenzima A i reduc NAD+ la NADH, ambele substane

fiind utilizate de mitocondrie pentru producerea de ATP.

6. Particip la detoxificarea unor molecule deoarece membrana

peroxizomilor este foarte permeabil pentru ioni i moleculele cu greutate
molecular mic. Astfel, jumtate din etanolul consumat este oxidat n
acetaldehid.

7. Sintetizeaz plasmalogenii (substane asemntoare cu

fosfolipidele), care intr n proporie de 10% n componena unor membrane.

8. Produc cldur, intervenind n termogenez. Astfel numrul lor e

crescut n esutul adipos brun.

Implicaii medicale. Peroxizomii sunt afectai n unele boli congenitale,

fie prin absena catalazei ( acatalasemie), fie prin reducere numeric i
alterarea coninutului enzimatic, n sindromul cerebro-hepato-renal
(Zellwegar). Este descris o reducere a funciei de oxidare a acizilor grai cu
lan lung de atomi de carbon n adreno-leuco-distrofii, boli genetice letale
caracterizate prin distrugerea progresiv a substanei albe din creier i a
corticosuprarenalei.

S-a observat o relaie ntre peroxizomi i cancer, peroxizomii lipsind

total n tumorile cu proliferare rapid.

Peroxizomii cresc numeric i n dimensiuni n unele infecii virale

(exemplu, n hepatit) sau dup administrarea de medicamente ce scad
lipemia. Hipertiroidia determin o proliferare hepatic a peroxizomilor i n
consecin o cretere remarcabil a activitii catalazei i a beta-oxidrii
acizilor grai cu lan lung de atomi de carbon.

5.7.INCLUZIUNILE CELULARE

Incluziunile (sau pseudoincluziile) celulare, sau citoplasmice sunt

formaiuni prezente n matricea citoplasmatic n care pot fi depozitai

temporar sau definitiv diferii produi ai metabolismului. Aceste
depuneri, denumite incluziuni pot conine: a) substane de rezerv
(proteine, glucide, lipide, vitamine, minerale, cristale i cristaloizi); b)
produi de elaborare (granule de zimogen, granule de mucus, de
pigment, hormoni); c) produi de dezasimilaie (pigmentul
lipofuscinic).

Proteinele se depoziteaz ca substane de rezerv n fibrele

musculare, hepatocite i n vitelusul oului, putndu-se prezenta ca
granule fine sau mase omogene. Se pot evidenia prin reacia MILLON
(cnd apar roii), prin reacia xantoproteic ( cnd apar galbene) i
prin impregnri argentice (cnd apar brune). (Fig.5.50)

Lipidele se prezint sub forma unor picturi sferice de diferite

mrimi. Ele se evideniaz n seciuni, obinute la criostat, unde se pot
colora n galben (cu Sudan III), n rou (cu SARLACH), n negru (cu
Sudan negru). Lipidele sunt frecvente n: hepatocite (n cantiti
diferite n funcie de diverse stri fiziologice i patologice); - n celulele
productoare de hormoni steroizi din corticosuprarenal, ovar, corp
galben, testicul, unde formeaz substratul n steroidogenez. n
lipocitele din esutul adipos alb, lipidele formeaz o bul mare, ce
ocup aproape n ntregime celula, pe cnd, n esutul adipos brun
apar forme de picturi mici, dispersate n citoplasm.

Glucidele se depoziteaz sub form de glicogen, n

special n hepatocite i n fibrele musculare. Histochimic

se evideniaz prin metoda PAS (periodic acid SCHIFF)
sau prin colorare cu carmin BEST, cnd apar sub form
de rou violaceu, grupate n grmezi sau plaje.
La electronomicroscop, glicogenul poate apare: a) sub
form de particule mari, neregulate sau n form de
rozet cu diametrul de 150 nm (particule alfa); b) cu
aspect de particule mici, cu form de bastonae lungi
de 20 - 30 nm (particule beta). n unele boli de depozit
sau n diabet, glucidele pot apare i n nucleu.

Denumire

Incluziuni
citoplasmatice

Conin:

Incluziuni cu substante de
rezerv

proteine,lipide, glucide,vitamine, minerale

Incluziuni cu produsi de
elaborare

hormoni,granule de zimogen, granule

mucigen, vezicule de secreie, etc.

Incluziuni cu pigmenti
endogeni

Pigmenti exogeni

de

a.Carotenoizi: lipocromi, luiteina, caroten

protidele (iodopsina, rodopsina, carotenalbumina);

b.Cromolipozi(de dezasimilaie): lipofuscina,

hemofuscina;

c.melanici: melanina

d.
cu
nucleu
tetrazolic:
hemoglobina,
mioglobina, hemosiderina;

Particule de crbune (n antracoz);

Particule de fier (n sideroz);
Particule de siliciu (n sideroz)

Vitaminele se pot evidenia n epitelii prin fluorescen natural

(vitamina A), sau prin impregnaie argentic (metoda Cater) n

corticosuprarenal, gonade, hepatocite i fibre musculare.

Incluziile minerale de fier, cupru, potasiu, calciu se prezint cu

aspect de granule, ce pot fi evideniate prin metode citochimice
specifice.

Incluziile cristaloide sunt prezente n citoplasma celulelor

interstiiale din testicul sub forma cristalelor REINKE, fine, polimorfe.

Produii de elaborare apar sub forma unor incluzii diferite

precum: granulele de zimogen (la polul apical al celulelor seroase din
pancreas); granulele de mucigen (la polul apical al celulelor mucoase
i n celulele caliciforme); hormonii (n celulele glandelor endocrine);
pigmeni (melanina n melanocite). Aceste incluzii se evideniaz prin
diferite metode histochimice: cu rou Magenta (zimogenul), cu
mucicarmin (mucusul) sau prin colorare natural proprie n cazul
pigmenilor.

Pigmenii pot fi de origine endogen sau exogen.

Pigmenii endogeni sunt reprezentai de: carotenoizi,

cromolipoizi, pigmeni melanici i pigmeni cu nucleu tetrazolic.

Carotenoizii sunt de obicei asociai cu lipidele i sunt

reprezentai de: lipocrom (pigmentul esutului adipos, la cabaline),
luteina (n celulele corpului galben din ovarul mamiferelor),
carotenproteidele (carotenalbumine, iodopsina i rodopsina din
celulele cu conuri i bastona din retin).

Cromolipoizii sunt: pigmeni de culoare brun sau neagr

(lipofuscina), rezultai n urma dezasimilaiei n neuroni, hepatocite, zona
reticular a corticosuprarenalei, miocard, celulele interstiiale Leydig, sau
hemofuscina ntlnit n focare hemoragice .

Pigmenii melanici sunt de culori diferite: neagr, brun sau

galben. Cel mai cunoscut este melanina, prezent n melanocitele pielii,
coroidei, proceselor ciliare, irisului i stratului pigmentar din retin.

Pigmenii cu nucleu tetrazolic sunt reprezentai de: hemoglobin (n

eritrocite), mioglobina (n muchi), hemosiderina (n celulele sistemului
macrofagic monocitar din mduva hematogen, ficat, pulmoni ).

Pigmenii de origine exogen provin din mediul extern i sunt

ncorporai prin aer sau prin furaje, producnd impregnarea esuturilor
crora le imprim devieri de la coloraia natural specific. Astfel,
impregnarea cu particule de praf (crbune) produce antracoza, cu
localizri mai frecvente n pulmoni la carnasiere, n limfocentrul bronic, la
rumegtoare i n mucoasa duodenal la psri; - impregnarea cu pulberi
de fier produce sideroza cu localizare predominant pulmonar;
impregnarea cu pulberi de siliciu (nisip) produce silicoza, frecvent la
ovinele ce pasc pe terenuri cu nisipuri foarte fine; furajele bogate n
caroten (exemplu morcovul) imprim o coloraie glbuie esuturilor la
suine i la psri datorit carotenilor din vitelus.

6. REPRODUCEREA CELULAR

Reproducerea celular este fenomenul prin care se

asigur continuitatea n timp a celulelor i const n esen n
faptul c dintr-o celul se obin dou celule. Acest proces are
loc n cursul diviziunii celulare, care devine posibil numai dup
ce a avut loc o reproducere biochimic sau molecular, care
necesit att materiale nutritive i energie, ct i informaie
genetic.
Reproducerea biochimic se produce n cel puin 4 faze: 1)
acumularea de substane anorganice; 2) sinteza enzimatic a
unor substane organice simple (aminoacizi, monozaharide
etc.); 3) sinteza proteinelor i 4) sinteza (sau replicarea) ADNului, care este esenial pentru declanarea diviziunii.
n cursul reproducerii biochimice are loc dublarea masei
celulare, duplicarea componentelor i se produce un complex
de evenimente ce se succed ciclic, realizndu-se un ciclu
celular.

6.1. Ciclul celular

Ciclul celular(cyclus cellularis) sau ciclul de via al unei celule este

perioada de timp cuprins ntre momentul apariiei unei celule i momentul

terminrii propriei diviziuni. Ciclul vieii celulare cuprinde dou mari perioade
sau faze: a) diviziunea celular (notat cu M de la mitoz) (periodus mitoticus)
i b) interfaza sau intercineza (periodus intermitoticus), perioada dintre dou
diviziuni succesive sau perioada ce precede diviziunea. Mult timp s-a considerat
n mod greit c n interfaz (n perioada situat n afara diviziunii) celula se
odihnete. Prin folosirea metodelor biologiei celulare, s-a observat c interfaza
este perioada din viaa celulei cu maxim activitate metabolic, deoarece n
cursul ei se produce sinteza ADN-ului, ARN ului i a proteinelor din celul.
Etapele ciclului celular

n timp ce sinteza ARN i a proteinelor are loc n toat interfaza,

sinteza ADN are loc numai ntr-o anumit perioad, numit perioada
sintetic (i notat cu S) care este precedat de o perioad presintetic
(notat cu G1) i succedat de o perioad postsintetic (notat cu G2).

Un ciclu celular complet (cu durata de circa 16 ore) cuprinde

patru perioade: 1) G1 (intervallum ambiguum s.postmitoticum))intervalul de timp de 5 ore de la sfritul mitozei pn la nceputul
sintezei de ADN; 2) S - perioada sintezei de AND( synthesis genomica)
de circa 7 ore; 3) G2 (intervallum premitoticum) - intervalul de timp de
la sfritul sintezei de ADN i nceputul diviziunii de circa 3 ore i 4) M diviziunea celular de circa 1 or.

La celulele eucariote ciclul celular dureaz 10-25 ore. Durata lui

variaz n funcie de specie, tip celular i chiar de la o celul la alta n
cadrul aceluiai esut. Dintre perioadele ciclului, perioada G1 are
durata cea mai variabil, putnd s difere, la unele celule, n timp ce
perioada S sau G2 este cea mai constant pentru un anumit tip celular.
Astfel exist celule care se divid foarte rapid, parcurgnd ciclul n 8 ore,
n timp ce altele se divid mai rar, avnd ciclul de 100 zile sau mai mult.
(Fig.6.1)

Fig.6.1. Diagrama ciclului

celular
G0_- Perioada de repaus
G1 Peroada presintetic
S perioada sintetic
G2 Perioada postsintetic

Exist dou momente denumite puncte de restricie a cror depire permite

parcurgerea etapelor urmtoare. Primul i cel mai important punct de
restricie este ntre perioadele G1 i S1, iar cel de-al doilea este ntre
perioadele G2 i M. ntr-o populaie de celule, momentul depirii punctului
de restricie (punctul R) difer de la o celul la alta, nct nu toate celulele
parcurg n acelai timp etapele ciclului celular, gsindu-se n diferite etape.
Datorit acestui aspect populaiile celulare sunt asincrome.
Nu se cunoate precis care este factorul care determin trecerea unei
celule de mamifer dincolo de punctul R. Practic se consider c depirea
punctului de restricie G1/S depinde de realizarea unei concentraii prag a
unei proteine instabile, denumit proteina U de la unstable. ntr o celul,
proteina U poate trece pragul concentraiei numai cnd este sintetizat
rapid. n momentul realizrii pragului de concentraie, proteina U determin
nceperea replicrii ADN i n consecin trecerea celulei din faza G1 n S.

Existena punctului de restricie G1/S constituie o rezerv de

supravieuire a celulei, care n condiii vitrege, sintetizeaz n
primul rnd proteine de ntreinere, iar sinteza proteinei U va fi
redus, nct dei celula nu se divide, ea rmne vie pentru
perioade lungi de timp, chiar i n condiii de inaniie sever. n
condiii n care celula este lipsit de aport nutritiv n alte perioade
ale ciclului celular, ea nu va supravieui. n acest mod, punctul de
restricie G1/S apare ca un punct de odihn sigur pentru
celulele care din cauza condiiilor de cretere sau interaciunilor
cu alte celule trebuie s i opreasc diviziunile. Celulele care se
afl oprite n aceast stare stabil se afl n faza G0 a ciclului
celular.

Un alt punct de restricie se afl la sfritul perioadei G2.

Inhibarea sintezei proteinelor n aceast faz mpiedic intrarea
celulei n diviziune. Se consider c la sfritul perioadei G2 este
activat o proteinkinaz solubil, care catalizeaz fosforilarea
proteinelor din membrana nuclear i a histonelor H1. Fosforilarea
proteinelor din membrana nuclear induce dezasamblarea
nveliului nuclear, iar fosforilarea histonelor H1 produce
condensarea cromozomilor, fenomen caracteristic diviziunii.

n raport cu modul n care parcurg ciclul celular, se disting trei categorii

de celule:

I - Celulele care i-au pierdut capacitatea de a se divide, dup

parturiie, fiind oprite n faza G1, ca de exemplu: neuronii, celulele
musculare.

II - Celulele care au o capacitate sczut de a se divide

(hepatocitele, unele celule endocrine), dar care n condiii speciale se pot
divide rapid. Astfel, hepatocitele se divid rapid dup hepatectomie,
refcnd celulele pierdute.

III - Celulele care se divid rapid, ca de exemplu celulele mduvei

osoase hematogene, din epiderm, din epiteliul mucoasei intestinale,
celulele liniei germinative spermatogene. Aceste celule se pot gsi n
esuturi n dou compartimente (grupe) celulare: a) un compartiment
proliferativ, ce cuprinde celulele care se divid rapid i b) un compartiment
neproliferativ, ce cuprind celule care nu se divid dect n anumite condiii.
Astfel, se petrec fenomenele n esuturile n care o parte din celulele
materne se pierd n mod fiziologic, ca de exemplu celulele din epiteliul
mucoasei intestinale, care se descuameaz dup 3-5 zile; hematiile care
se distrug dup 120 zile de via. Pierderile de celule mature sunt
compensate prin trecerea constant a unor celule de rezerv, numite i
celule surs, sau celule stem, aflate n faza G0, din compartimentul
neproliferator n compartimentul proliferator. Trecerea din faza G0 se face
sub aciunea unor stimuli specifici, reprezentai de substanele mitogene,
adic de cele ce induc mitoza, precum: eritropoietina, factorii de cretere
ai unor celule (ai nervilor, ai fibroblastelor), poliamina (exemplu
putrescina), hormoni (estrogeni). Pot aciona ns i factori tisulari, cum
sunt chalonele (peptide sau glicoproteine), care inhib diviziunile
celulare.

6.2. DIVIZIUNEA CELULAR

Diviziunea celular (divisio cellularis) este acea perioad a ciclului

celular n care se realizeaz distribuirea materialului genetic la cele dou
celule fiice. Exist dou modaliti de realizare a diviziunii celulare: a)
diviziunea direct (sau amitoza) i b) diviziunea indirect, care poate fi de
dou feluri: mitoz sau meioz.

6.2.1.Diviziunea direct

Diviziunea direct sau amitoza (amitosis) reprezint forma inferioar

de reproducere celular, caracteristic organismelor unicelulare. La
metazoare apare fie n procesele de regenerare, fie n condiii patologice n
unele procese tumorale. Se caracterizeaz prin lipsa aparatului mitotic, iar
materialul genetic este inegal distribuit, putndu-se produce erori n
distribuie. Cele mai frecvente modaliti de diviziune direct sunt:
nmugurirea, sciziparitatea, clivajul.(Fig.6.2.)

Fig.6.2. Diviziunea direct amitoza

6.2.2.Diviziunea indirect

Se caracterizeaz prin
procese mai complexe, ce
constau n modificri sincrone n
citoplasm (cytokinesis)
i nucleu (nucleokinesis), ce
realizeaz o distribuire egal a
materialului genetic la celulele
fiice.
Exist dou tipuri de
diviziune indirect: a) mitoza sau
diviziunea ecuaional, ntlnit
la celulele somatice i produce
celule diploide; b) meioza sau
diviziunea reducional, ntlnit
numai la celulele gametogene i
produc celule haploide.

6.2.2.1.Mitoza
Mitosa (mitosis) are o durat total de circa 60 minute la om

i se desfoar n patru faze: a) profaza (prophasis), mpreun

cu o faz intermediar - prometafaza (30 minute sau 50% din
durata total); b) metafaza (metaphsis) (8 minute sau 13,4%);
c) anafaza (anaphasis) (4 minute sau 6,6%); d) telofaza
(telophasis)(18 minute sau 30%).
Profaza
Se remarc printr-o serie de fenomene caracteristice, ce se
desfoar att n citoplasm, ct i n nucleu. (Fig.6.3.)

n citoplasm:
1) Devine vizibil cel de-al II-lea centru celular (centrozom),
dublarea centriolilor realizndu-se prin asamblarea unui centriol
nou (centriolum filiale), din depozitul de tubuline al citoplasmei.
Polimerizarea tubulinelor are loc ncepnd din faza S.
2) Separarea i ndeprtarea centriolilor centrosomului spre
polul celulei, ntre ei realizndu-se un fus de diviziune (fusus
mitoticus), format din filamente structurate pe seama
microtubulilor.

n nucleu: 1) dispare nucleolul; 2) se condenseaz cromatina

nuclear sub forma unui spirem (sau ghem) (glomus), iniial

compact (glomus compactum) i apoi lax (glomus dispersum)
din care se desprind cromozomii sub form de bastonae.
n nucleol - componenta amorf se desprinde i se amestec
cu sucul nuclear, iar restul structurii se ataeaz pe
fragmentele cromozomilor SAT.
n prometafaz: 1) dispare nucleolema (membrana nuclear)
prin aciunea proteinkinazei solubile (coninute n lizozomi) care
produce fosforilarea proteinelor din membran; 2) cromozomii
ncep s interacioneze cu fibrele fusului de diviziune. Ei
execut micri oscilatorii agitate, iar datorit contraciei
tubulinei, cromozomii se deplaseaz spre mijlocul fusului de
diviziune. Viteza lor de deplasare variaz de la un cromozom la
altul, ultimul ajungnd cromozomul X.
n metafaz:
1) Cromozomii sunt dispui la nivelul ecuatorului
fusului(equator fusi) de diviziune, cu axul lor lung perpendicular
pe axul fusului, realiznd o plac metafazic (lamina
equatorialis).
2) n placa metafazic, cromozomii se despic (cliveaz)

longitudinal, nct cele dou cromatide surori se despart. n

urma acestei clivri longitudinale se dubleaz numrul de

cromozomi (exemplu la taurine, din 60 rezult 120 cromozomi
monocromatidici), iar materialul genetic se distribuie n mod
egal la celulele fiice.
Fiecare din fibrele fusului de diviziune este alctuit dintr-un
mnunchi de circa 100 microtubuli i proteinele asociate lor. n
structura fusului de diviziune (fusus mirtoticus) se disting
dou categorii de fibre, n funcie de modul lor de ancorare la
capete: a) fibre polare (centrozom-centrozom) (microtubulus
continuus), cele mai numeroase, dispuse de la un pol la altul;
b) fibre cinetocorice (centrozom kenetocor) sau fibre de
jumtate de fus (microtubulus chromosomaticus), ancorate cu
un capt pe centrozom i cu cellalt pe cinetocorii
cromatidelor (cte doi pentru fiecare centromer al unui
cromozom). Fibrele cinetocorice sunt alctuite din
mnunchiuri de microtubuli ce radiaz n direcie opus de pe
cea cinetocori ai fiecrui cromozom. Ele servesc la aezarea
cromozomilor n placa metafazic, avnd capetele pozitive (+)
blocate n cinetocori, iar capetele negative (-) libere. (Fig.6.4.)

Fig.6.4. Schema fusului de diviziune

A-nceputul metafazei; B Sfritul metafazei
1-Centrozom;
2- Cromozom;
3- Fibr polar;
4- Fibr cinetocoric

Dac fusul este distrus nu se mai produce diviziunea celular, pe

acest fapt bazndu-se utilizarea unor medicamente citostatice (ca
vinblastina sau vincristina).
Anafaza
Se caracterizeaz prin deplasarea cromatidelor devenite cromozomii
fii spre cei doi poli ai celulei. Deplasarea spre polii celulei este rezultatul
a dou evenimente independente: a) micarea spre poli a fibrelor
cinetocorice prin depolimerizarea capetelor libere (negative) ale
microtubulilor i antrenarea cu ele a cromatidelor ataate; b) alungirea
prin polimerizare la captul pozitiv (+) a fibrelor polare, producndu-se
distanarea celor doi poli. Alunecarea fibrelor polare are la baz
sistemul motil microtubul-dinein.

Telofaza
ncepe n momentul n care cele dou grupe cromozomiale au ajuns

la cei doi poli celulari i fuzioneaz aparent formnd cte un spirem. n

jurul spiremului se reface nveliul nuclear prin defosforilarea
proteinelor laminare. Totodat se refac nucleolii, datorit aciunii
cromozomilor SAT, iar nucleul i recapt structura din interfaz,
cromatina lundu-i aspectul de reea i granule.
Clivarea citoplasmei la nivelul plcii ecuatoriale, n cursul
fenomenului denumit citodierez sau citokinez (cytokinesis), ncepe
prin apariia unui an pe suprafaa celulei (constrictio cytoplasmatica),
datorit activitii unui inel contractil, prezent sub plasmalem.
Inelul contractil (anulus equatorialis) este format dintr-un mnunchi
de filamente de actin, ce ncepe s fie asamblat nc de la nceputul
anafazei. Inelul i micoreaz diametrul prin depolimerizarea
filamentelor sale, necesitnd prezena ionilor de calciu.
Suprafaa total a celor dou celule fiice este mai mare dect a
celulei mam, fapt ce necesit o biogenez de plasmalem. Se
constat c biogeneza plasmalemei ncepe naintea diviziunii,
observndu-se prin microscopia de baleaj c pe msur ce celula trece
din faza G1 n faza S i apoi n faza G2, suprafaa ei devine din ce n ce
mai proas prezentnd microviloziti care reprezint rezerva de
membran necesar pentru nvelirea celulelor fiice, ce au foarte puini
microvili.
n urma mitozei, dintr-o celul mam rezult dou celule fiice avnd
aceeai cantitate de ADN i acelai numr de cromozomi ca i celula
mam. Gradul de asemnare al celulelor fiice cu celula mam permite
s se disting patru forme de mitoz: homotipic, heterotipic,
asimetric i de ntinerire.

n mitoza homotipic ( sau homoplastic ) celulele fiice sunt

asemntoare ntre ele i cu celula mam. Este ntlnit la celulele

nedifereniate (foarte tinere).
n mitoza heterotipic ( sau heteroplastic ), celulele fiice sunt
asemntoare ntre ele, dar sunt mai mature, mai difereniate dect
celula mam, fapt pentru care se mai numete i mitoz de
difereniere.
n mitoza asimetric ( homo-heteroplastic ), una din celulele fiice
seamn cu celula mam, iar cealalt este diferit.
n mitoza de ntinerire (sau de dedifereniere), celula mam d
natere la celule mai tinere (active), cu potenialiti biologice
caracteristice formelor tinere (active) ale celulei mam. Se ntlnete
la limfocit, care prin diviziune d natere la dou limfoblaste.
Factorii care determin mitozele sunt nc insuficient precizai.
Mitoza apare ca o faz obligatorie a ciclului celular ( n situaia n
care s-au depit punctele de restricie) i ca o consecin a dublrii
masei i componentelor celulei, fiind declanai de o serie de factori
ce pot fi ncadrai n trei grupe: a) factori generali, ca: temperatura,
lumina, hormonii (tiroidieni, hipofizari), vitamine; b) factori
intracelulari, ca: modificarea raportului nucleo-citoplasmatic i
nucleolo-nuclear (ca i cum volumul crescut al citoplasmei nu ar mai
putea fi controlat de nucleu, fcnd necesar diviziunea celulei); c)
factori intercelulari, precum raportul care trebuie s existe, n fiecare
esut, ntre celulele uzate i cele care se divid. Sunt cei mai
importani n cazul n care un grup de celule moare, se declaneaz
diviziunea unui alt grup de celule printr-un mecanism de retro
aciune (feed back), nct raportul ntre cele trei categorii de celule
s rmn aproximativ acelai.

6.2.2.2. Meioza
Meioza (meyosis s. cyclus meioticus) se caracterizeaz prin

faptul c reduce la jumtate numrul de cromozomi ( deci

materialul genetic), nct plecndu-se de la celule diploide, se
ajunge la celule haploide, care conin numai cte un cromozom
din fiecare pereche de omologi i numai un cromozom de sex.
Este prezent n procesul de maturare al gameilor. Permite ca,
prin procesul fecundrii, din dou celule haploide s rezulte o
celul diploid, din care se poate dezvolta n mod normal
ntregul organism (Fig.6.5).
Meioza este alctuit din dou diviziuni indirecte care se
succed fr ca ntre ele s se mai produc sinteza de ADN.
Prima diviziune se numete meioza I i este reducional, n
timp ce a doua diviziune se numete meioza II i este
nereducional, aprnd ca o mitoz homoplastic.
Meioza I apare mai complicat, cu o profaz specific n care
se petrec fenomene caracteristice. Poate dura zile, luni i ani de
zile (n funcie de specie), iar profaza este foarte lung, ocupnd
90% din aceast durat. Astfel, ovocitele primare rmn n
profaza I pn la pubertate, iar spermatogoniile intr n meioz
numai la pubertate.

Profaza I (prophasis I) cuprinde 5 faze (etape, stadii) succesive:

leptonema, zigonema, pachinema, diplonema i diachinezis.
1) n leptonem (leptonema), se produce condensarea
cromatinei, nct cromozomii devin vizibili cu aspect de filamente
lungi, cu diametrul neuniform. Ei se ataeaz cu ambele capete de
nveliul nuclear la nivelul unor structuri denumite plci de ataare .
Fiecare cromozom deci este duplicat i format din 2 cromatide
surori, intim ataate una de alta nct n lungul cromozomului se
formeaz o lam proteic, denumit ax. (Fig.6.6).

2) n zigonem (zygonema), caracteristic este fenomenul de

sinaps sau conjugarea (conjugatio) cromozomilor, care const

n faptul c, cromozomii omologi (chromosoma homologum)( din
aceeai pereche), unul din setul matern i altul din setul patern
se apropie i se alipesc, dar nu funzioneaz. Cromozomii
omologi sunt legai unul de altul printr-o reea proteic,
denumit complex sinaptolemal (complexus synaptonematicus),
ce se ntinde pe ntreaga lungime a cromozomilor, ancorndu-se
la cele dou capete de nveliul nuclear. Complexul sinaptolemal
realizeaz alinierea perfect a celor doi cromozomi, nct genele
alele s fie situate fa n fa. (Fig.6.7.)

Prin schimbul de fragmente ntre

cromozomi omologi se realizeaz un

schimb de gene, cu un rol extrem de
important n ereditate, nct gametul unui
individ va avea n final gene ce provin de
la cromozomul patern, ct i gene ce
provin de la cromozomul matern. n acest
fel, un cromozom bivalent, va cuprinde
tot patru cromatide, din care una este
patern pur, alta matern pur, iar cele
dou cromatide ntre care s-a efectuat
schimbul de material genetic sunt mixte.
Acest schimb de gene ntre

cromozomii omologi (chromosoma

homologicum), denumit i recombinare
genetic sau fenomen de crossing-over
este universal i are importan foarte
mare n transmiterea caracterelor
ereditare.

4) n diplonem (diplonema), cromozomii rezultai dup

crossing over (cromosoma meioticum) ncep s se

despart (s realizeze desinapsa ). Ei rmn, ns, legai
n punctele numite chiasme, n care s-a produs crossingoverul.
La ovocite, diplonema poate dura luni sau ani de zile,
deoarece cromozomii se decondenseaz i ncepe sinteza
de ARN.
5) n diachinesis (diakinesis), nceteaz sinteza ARN-ului,
cromozomii se condenseaz, se ngroa i se detaeaz
de nveliul nuclear. Fiecare cromozom bivalent conine
patru cromatide, din care cromatidele surori sunt unite la
nivelul centromerilor, iar cele nesurori, mixte, ntre care sa produs crossing-overul sunt unite la nivelul chiasmelor.
n concluzie, n profaza I au loc trei importante
fenomene caracteristice: 1) condensarea cromozomilor;
2) conjugarea sau sinapsa ( n zigonem ) i 3) schimbul
de gene ntre cromatidele nesurori (sau crossing-overul ).

n prometafaza I

( prometaphasis I ) se
produce dispariia nveliului
nuclear i formarea fusului
de diviziune.
n metafaza I ( metaphasis
I ) cromozomii se ataeaz
de fibrele fusului de
diviziune i formeaz placa
metafazic .
n anafaza I ( anaphasis I )
se produce deplasarea cte
unui cromozom ntreg
(bicromatidic,cu dou
cromatide) din fiecare
cromozom bivalent ctre un
pol al celulei, pe cnd
cellalt cromozom, tot
bicromatidic, se deplaseaz
spre polul opus. Diferena
esenial fa de anafaza
din mitoz const n faptul
c nu se despart i nu
migreaz separat
cromatidele fiecrui
cromozom, ele rmnnd
legate la nivelul
centromerului. (Fig.6.9)

Meioza II se realizeaz ca o mitoz obinuit, avnd cele patru

faze: profaza II cu prometafaza II (prometaphasis II), metafaza II
(metaphasis II), anafaza II (anaphasis), telofaza II (telophasis) . n
metafaza II se despart cromatidele fiecrui cromozom, dup care are loc
deplasarea lor spre polii celulei, n timpul anafazei II. (Fig.6.10)
n concluzie, n cursul diviziunii reducionale (a meiozei), celula se
divide de 2 ori, n timp ce cromozomii se divid (desprindu-i
cromatidele) numai o singur dat, n timpul metafazei II.

6.3.BAZELE MOLECULARE ALE REPRODUCERII CELULARE

Bazele moleculare ale reproducerii celulare se refer la trei

fenomene eseniale: 1) replicarea ADN; 2) transcrierea mesajului
genetic i 3) traducerea mesajului genetic n biosinteza
proteinelor.

6.3.1. Structura i replicarea ADN

Acidul deoxiribonucleic (ADN) constituie materialul genetic al

tuturor vieuitoarelor, care au n compoziia lor acest acid nucleic.

Replicarea (sau duplicarea sau autoreplicarea) ADN-ului

cromozomial i distribuirea lui n mod egal n celulele fiice formeaz baza
mecanismelor moleculare de transmitere a informaiei genetice.

Replicarea ADN este procesul molecular prin care se realizeaz o

copiere fidel a moleculelor de ADN (a secvenelor de nucleotide) n
timpul duplicrii cromozomilor. Dublarea cantitii de ADN are loc n
cursul biosintezei de ADN n faza S a ciclului celular, biosintez care se
numete replicare.

Structura ADN-ului
O
macromolecul, compus din dou
lanuri de nucleotide foarte lungi,
rsucite unul n jurul celuilalt ntr-o
structur dublu-elicoidal (numit
dublu-helix sau duplex de ADN).

Fiecare lan are: a) o parte

constant (ce poate fi asemnat
cu coloana vertebral) format din
dezoxiriboze, situate pe latura
extern i legate prin puni
diesterice i b) o parte variabil,
reprezentat de secvena bazelor.
Bazele sunt situate pe latura
intern (ntre lanuri) i sunt
reprezentate de dou baze purinice
(adenina A i guanina G) i
dou baze pirimidinice (timina T
i citozina C) (fig.6.11).

Fiecare lan este polarizat, deoarece la un capt prezint

hidroxilul 5 liber, iar la captul opus hidroxilul 3 liber. n mod

convenional se consider c secvena n lan este scris de la 5
spre 3, aa cum n proteine secvena este scris n direcia
amino-carboxil. Cele dou lanuri sunt antiparalele, avnd direcia
legturilor fosfo-diesterice opus, pe unul este de la 5 la 3, iar pe
lanul pereche de la 3 la 5.
Cele dou lanuri polinucleotidice sunt meninute mpreun prin
legturi de hidrogen ntre baze, existnd dou legturi ntre adenin
i timin i trei ntre guanin i citozin.
Aranjarea bazelor n perechi este specific, nct adenina este
legat, n pereche, ntotdeauna cu timina, iar guanina cu citozina.
Aceast specificitate este determinat de factori spaiali (sterici) i
de legturile de hidrogen. Astfel, diametrul constant al duplexului
de ADN (de 2 nm) face ca spaiul dintre cele dou lanuri s fie de
1,1 nm, att ct ocup o baz pirimidinic aranjat n pereche cu o
baz purinic. Dou baze purinice ar ocupa prea mult spaiu, iar
dou baze pirimidinice prea puin.

Pasul helixului este de 3,4 nm i reprezint intervalul la care se

repet structura helicoidal. Pe aceast distan se afl zece

nucleotide, deci 10 perechi de baze. Numrul de perechi de baze
dintr-o molecul de ADN variaz de la cteva mii pn la cteva
milioane ( de exemplu, la E. colli molecula de ADN cuprinde 3,4
milioane perechi de baze).
Pe un lan polinucleotidic, considerat izolat, secvena bazelor nu

este expus nici unei restricii; dar pe lanul pereche secvena va fi

strict determinat de specificitatea aranjrii bazelor n perechi,
nct lanurile sunt complementare. Astfel, un lan este
complementul celuilalt, la secvena GCTAG corespunznd pe lanul
opus secvena CGATC.
Complementaritatea lanurilor polinucleotidice a permis lui

WATSON i CRICK (1953), descoperitorii structurilor n dublu helix a

ADN-ului, s sugereze mecanismul replicrii i al transmiterii
informaiei genetice. Astfel fiecare lan acioneaz ca o matri
pentru formarea unui lan nou complementar cu el nsui. n acest
fel se poate replica ADN-ul (dubla cantitate de ADN), iar pentru c
molecula de ADN funcioneaz ca matri pentru propria sa
formare, procesul a fost denumit autoreplicare. (fig. 6.12).

n biologia molecular prin matri se nelege o macromolecul ce

prezint o suprafa de legare cu o anumit configuraie spaial. Pe

fiecare loc de matri se poate lega n mod specific un singur fel de
monomer, cel care are o configuraie complementar cu a matriei
(fig. 124).

Replicarea ADN-ului
Replicarea ADN-ului prezint urmtoarele caracteristici: 1) este

semiconservativ, nct n fiecare molecul de ADN nou format,

unul din lanuri provine din molecula mam (iniial); 2) ncepe
ntotdeauna n acelai punct numit origine, din care pleac pe
fiecare lan cte o furculi de replicare, ce reprezint locul n care se
produce simultan dezrsucirea ADN-ului parental i n care din dou
lanuri se formeaz patru lanuri polinucleotidice.

Replicarea ADN-ului ncepe odat cu dezrsucirea celor dou

lanuri polinucleotidice din dublul helix al ADN parental. Dezrsucirea
este favorizat de ruperea unuia din cele dou lanuri la nivelul
coloanei vertebrale de riboz-fosfat, la distan de circa 30 de
furculia de replicare, cu ajutorul unei enzime. n continuare
dezrsucirea este uurat de unele proteine specifice de
dezrsucire, care se leag una dup alta de ADN monocatenar,
mpiedicnd rsucirea lui. Concomitent cu dezrsucirea, pe fiecare
din cele dou lanuri polinucleotidice se sintetizeaz un lan nou (o
replic) cu secven complementar de nucleotide. Astfel pe fiecare
din lanurile parentale este sintetizat un ADN nou sub form de
fragmente mici (fragmente OKAZAKI) de circa 1000 nucleotide. n
procesul sintezei ADN ului intervin urmtoarele enzime:

1. ARN polimeraza, ce sintetizeaz cte un

fragment scurt de ARN (de circa 100 nucleotide)
pe fiecare din lanurile de ADN parental ce
servete ca matri. Rezult astfel un primer de
ARN, necesar pentru nceperea sintezei propriu
zise de ADN cu ajutorul polimerazelor.(Fig. 6.13)
2. ADN polimerazele (ADN polimeraza I, II i III
n ordinea descoperirii lor la E coli), catalizeaz
polimerizarea deoxiribonucleotidelor.
3. ADN ligaza, ce leag cte dou capete ale
unor fragmente de ADN ce fac parte dintr un
duplex, prin formarea unor legturi fosfodiesterice ntre cele dou capete (unul cu OH n
3, iar cellalt cu un fosfat la 5). Se nchid astfel
discontinuitile (sprturile) din ADN. Reacia
este endergonic, energia fiind donat de ctre
ATP.
4. ADN topoizomerazele ( I i II ) scindeaz
reversibil dublexul de ADN, permind astfel
rotaia i ndeprtarea tensiunii acumulate n
timpul dezrsucirii lanurilor polinucleotidice.

Mecanismul molecular al biosintezei (replicrii) de

ADN cuprinde urmtoarele etape: 1) desprinderea

(desperecherea) lanurilor de ADN din molecula
parental; 2) sintetizarea, pe fiecare lan, prin
aciunea ARN polimerazei, a cte unui primer de ARN;
3) sintetizarea, n continuarea primerului, a lanurilor
de ADN complementare matriei, cu ajutorul ADN
polimerazei; 4) fragmentele OKAZAKI - se formeaz n
direcia 5 - 3 pe ambele lanuri; 5) excizia
fragmentului de ARN sub aciunea ARN polimerazei I
nct pe msur ce se ndeprteaz cte un
ribonucleotid, se adaug imediat dezoxiribonucleotidul
corespunztor; 6) legarea fragmentelor de ADN nou
formate prin aciunea ADN ligazei.

6.3.1.1. Particularitile replicrii la eucariote

Diferenele care exist ntre replicarea de la procariote i

cea de la eucariote se datoresc complexitii organizrii
cromatinei la eucariote, unde ADN ul este complexat cu histone
n nucleozomi, care se succed la intervale de circa 200 perechi
baze n lungul ADN, nct fragmentele de ADN nou formate
(OKAZAKI) sunt mai mici ca la procariote avnd 100-200
nucleotide, iar primerul de ARN numai 10-20 nucleotide.

Viteza replicrii la eucariote este de 10 ori mai mic dect

la procariote (de exemplu se replic 50 nucleotide pe secund
fa de 500 la procariote). Astfel pentru ntreaga replicare a unui
cromozom uman, o singur furculi de replicare ar avea nevoie
de 800 de ore, depind de circa 10 ori perioada S a ciclului
celular.

Pentru a se putea ncadra n faza S, replicarea ncepe pe fiecare

cromozom n mai multe puncte de origine (circa 100 pentru fiecare

cromozom uman). Pentru fiecare punct de origine apar dou furculie de
replicare, ce se deplaseaz pe direcii opuse n lungul cromozomului
genernd nite structuri denumite bule de replicare (fig. 6.14).

Originile furculielor de replicare apar n grupe (de 20-80) situate

toate ntr o anumit zon. Fiecare grup se numete unitate de replicare
(sau replicon). Repliconii se activeaz treptat n faza S a ciclului, zonele de
heterocromatin fiind ultimele activate. Furculiele de replicare se
deplaseaz cu aceeai vitez n tot cursul fazei S. Cnd ajung s se
ntlneasc pe tot cromozomul, replicarea se termin, iar cei doi
cromozomi se despart.

Replicarea ADN ului se produce paralel cu sinteza de histone, care

are loc numai n faza S a ciclului celular. Odat sintetizate i asamblate n
nucleozomi, histonele nu mai prsesc ADN ul de care s au legat nct
miezurile nucleozomilor vechi trec numai pe unul din duplexuri, n timp ce
pe cellalt duplex de ADN se leag numai de miezurile nucleozomilor noi
sintetizai.

Implicaiile i aplicaiile medicale ale replicrii ADN ului constau n:

a) apariia mutaiilor; b) sinteza reparatoare a ADN-lui i c) inhibarea
sintezei de ADN.

Apariia mutaiilor este rezultatul unor greeli care apar n procesul

de replicare a ADN ului. Un anumit nivel de apariie a mutaiilor (de obicei
sczut) a fost necesar i util n evoluia speciilor, dar atunci cnd depesc
acest nivel fac imposibil supravieuirea celulei, majoritatea mutaiilor fiind
duntoare. Din aceast cauz celulele au numeroase sisteme enzimatice
de reparare a erorilor care pot apare n ADN spontan sau induse de ageni
mutageni (fizici sau chimici). Mecanismele reparatorii sunt eficace, nct o
mutaie spontan apare la un milion de replicri ale genelor.

Pot s apar mutaii punctiforme (prin nlocuirea unui singur nucleotid) sau

mutaii mari complexe, ca: deleii (lipsa unor secvene din ADN), inserii
(secvene n plus de nucleotide). Frecvena mutaiilor poate crete foarte mult n
urma aciunii unor substane, denumite mutagene, precum: a) unele substane
chimice (ce modific direct bazele din ADN), agenii alchilani (care fixeaz
radicalii metil, etil etc.) actiflavinele, cofeina; b) radiaiile ultraviolete; c)
radiaiile ionizante (ce produc ruperea unuia sau a ambelor lanuri de ADN,
pierderi de baze, modificri ale bazelor).

Unii din aceti ageni pot fi folosii n terapia cancerului, ntruct

celulele maligne sunt mai sensibile la aciunea lor (ca de exemplu, unii ageni
alchilani, radiaiile ionizante).

Sinteza reparatorie a ADN-lui se produce ntr o anumit perioad de

timp, nct exist posibilitatea (n cazul celulelor care prolifereaz foarte rapid)
ca s nceap un nou ciclu de replicare nainte ca reparaia s fie complet. n
acest fel, celulele care prolifereaz foarte rapid sunt foarte sensibile la radiaii,
fapt ce permite folosirea radiaiilor ionizante n tratamentul cancerelor.

Inhibarea sintezei de ADN este produs de o serie de substane chimice,

care pot fi folosite n practica medical curent - ca substane antimicrobiene,
antivirale i antitumorale (citostatice). Astfel: acidul nalidixic, un antibiotic,
inhib biosinteza ADN ului; acidul fosfonoacetic, un agent antiviral, inhib
selectiv ADN polimerazele virale i din celula gazd. Unele substane
antitumorale (arabinozilcitozina, arabinoziladenina) inhib sinteza de ADN, iar
altele (neocarcinostatina - o protein format din 109 aminoacizi) produc rupturi
n molecula de ADN.

6.3.2.Transcrierea mesajului genetic

n exprimarea informaiei genetice (a mesajului genetic) exist

dou etape: 1) transcrierea (copierea) informaiei din ADN n ARN i 2)
traducerea informaiei coninut n ARN n sinteza de proteine. Sub form
prescurtat transmiterea informaiei genetice este cuprins n dogma
central a biologiei moleculare care se exprim n formula:
autoreplicare ADN

Astfel, genele din ADN determin sinteza de proteine de ctre

celul, dar nu ADN ul este matricea pe care se sintetizeaz proteinele, ci
moleculele de ARN (Fig. 6.15).

Moleculele de ARN care poart informaia genetic necesar

pentru biosinteza proteinelor se numesc ARN mesager (ARN m).

ARN-ul mesager

Conceptul de ARN mesager (ARN m) a fost introdus n

biologia molecular n 1961 de ctre JACOB i MONOD care au
presupus existena unui ARN care este sintetizat i degradat
foarte rapid, ce servete ca mesager al genei (aflat n nucleu),
transfernd informaia de la nucleu la sediul sintezei proteinelor
(ribozomi) - aflai n citoplasm.

ARN mesager este o molecul sintetizat pe matria de

ADN, avnd o secven a bazelor complementar ADN matri.
Pentru fiecare gen se sintetizeaz cte o molecul de ARN m,
care va servi la rndul ei ca matri pentru sinteza proteinei
codificat de gena respectiv.

n celul, pe lng ARN-ul mesager, mai exist nc dou

categorii de ARN, implicate direct n biosinteza proteinelor: ARN-l de
transfer i ARN-ul ribozomal.
ARN-ul de transfer (ARNt) transport aminoacizii activai la
ribozomi, unde se realizeaz formarea legturilor polipeptidice n
secvena dictat de matria de ARNm.
ARN-ul ribozomal (ARNr) intr n componena ribozomilor, fr
a i se cunoate precis rolul lui n biosinteza proteinelor.

6.3.3.1. Mecanismul molecular al biosintezei de ARN

ARN ul este o macromolecul lung format din ribonucleotide
legate prin legturi 3-5 fosfodiesterice. Numrul de nucleotide variaz
ntre 75 (n ARNt) i cteva mii (n ARNm).
Toate tipurile de ARN sunt biosintetizate printr un mecanism
molecular asemntor, sinteza de ARN pe matri de ADN fiind
catalizat de enzima denumit ARN polimeraz ADN dependent
(transcriptaz).
Pentru realizarea sintezei de ARN sunt necesare urmtoarele
elemente: 1) matria de ADN dublu helicoidal; 2) precursori activai, ca
ribonucleozid trifosfai (ATP, GTP, UTP, CTP); 3) ioni de magneziu sau
alte metale bivalente. Sinteza de ARN se aseamn cu sinteza de ADN
prin: a) direcia de sintez (de la 5 la 3, care este antiparalel lanului
de ADN); b) mecanismul de alungire, care produce eliberarea de acid

Diferenele ntre biosinteza de ARN i biosinteza de ADN

constau n: 1) conservarea integral a matriei de ADN n procesul de
sintez de ARN (n timp ce n sinteza de ADN matria este
semiconservat); 2) ARN polimeraza nu necesit un primer; 3) ARN
polimeraza nu desfoar activitate nucleazic.
La eucariote, exist mai multe ARN polimeraze, nct cele din
clasa A produc ARNr, cele din clasa B produc ARNm, iar cele din clasa C
produc ARNt.
n timpul procesului de transcriere se parcurg mai multe etape
dup cum urmeaz:
1) Legarea ARN polimerazei de matria de ADN n regiunile
promotoare care sunt recunoscute n mod specific, producndu se
dezrsuciri locale ale helixului.
2) Iniierea formrii lanului de ARN prin formarea primei
legturi diesterice la nivelul regiunii dezrsucite.
3) Alungirea lanului de ARN se face n direcia de la 3 la 5 a
matriei de ADN, n timp ce lanul de ARN crete n direcia 5 la 3.
Matria de ADN transcris i reia conformaia dublu helicoidal, n timp
ce poriunea urmtoare se dezrsucete.
4) terminarea lanului de ARN are loc n momentul n care pe
matria de ADN se recunosc unele puncte de terminare, cu ajutorul unei
proteine specifice.
5) maturarea sau prelucrarea are loc numai dup desprinderea
de pe matri de ADN i este suferit numai de unele molecule de ARN.

La eucariote, trecerea ARNm din nucleu n citoplasm se

face prin porii nucleari sub forma unor precursori ribozomali.
S-a demonstrat c, pentru fiecare gen (care are dou
lanuri ADN), numai unul din cele dou lanuri de ADN este
copiat, nct o gen codific o singur protein.
Aplicaiile medicale legate de transcrierea mesajului
genetic constau n folosirea unor inhibitori i a transcrierii n
combaterea unor infecii microbiene sau virale. Astfel,
rifampicina (extras din Streptomyces) i rifampicina (un derivat
semisintetic) inhib n mod specific iniierea sintezei de ARNm.
Actinomicina D inhib n mod specific transcrierea fr a inhiba
replicarea ADN sau biosinteza proteinelor.
6.3.3.Traducerea mesajului genetic n biosinteza
proteinelor
n conformitate cu dogma central a biologiei
moleculare, informaia genetic stocat sub forma secvenei de
baze n ADN este transcris (copiat) n secvena de baze din
ARNm i apoi este tradus (concretizat) n secvena
( dispunerea ) aminoacizilor din proteine.
ntruct n acizii nucleici exist numai patru baze azotate

Codul genetic prezint urmtoarele caracteristici:

a) este degenerat, deoarece legarea unui aminoacid
(specificarea lui) ntr o protein este determinat de mai muli
codoni;
b) prezint 3 codoni nonsens, care nu specific (leag)
nici un acid, ci determin terminarea lanului polipeptidic;
c) este universal, fiind acelai n toate celulele de la
bacterii pn la om.
Sinteza unei molecule de protein, prin asamblarea
aminoacizilor, se face la nivelul ribozomilor, unde se citete
informaia genetic de pe ARNm, participnd i o serie de
proteine solubile, precum i aminoacizi activai legai de ARNt
ce prezint: 1) un loc de punct de legare a aminoacidului i 2)
un loc de recunoatere a matriei de ARNm, reprezentat de o
secven de 3 baze, denumit anticodon.
Anticodonul de pe ARNt recunoate secvena
complementar de 3 baze din codonul de pe ARNm permind
legarea specific a aminoacidului de matri. Pentru un
aminoacid (din cei 20 existeni n proteine) pot exista mai multe
molecule diferite de ARNt, legat de faptul c mai muli codoni

Moleculele de ARNt prezint: a)

patru regiuni cu baze
complementare dispuse n dublu
helix, denumite tulpini (tulpina
acceptor, tulpina D, tulpina T i
tulpina anticodon) i b) 4 regiuni
fr baze complementare
denumite bucle (o bucl
anticodon, o bucl D, o bucl T i o
bucl variabil).(Fig. 6.16)
Datorit apariiei structurii
de dublu helix la nivelul tulpinilor,
molecula de ARNt are o dispunere
spaial n forma literei L, cu
dou brae: a) un bra lung ce
cuprinde tulpinile T i acceptor.
Regiunile dublu helicoidale sunt
perpendiculare una pe alta i
conin fiecare cte 10 perechi de
baze, ce corespund la o tur de
dublu helix. Formarea regiunilor de
dublu helix asigur moleculei o
mare stabilitate, iar buclele ce
proemin pot interaciona specific

Legarea aminoacidului de ARNt este

catalizat de o enzim, denumit
aminoacil ARN sintetaz existnd cte o
enzim specific pentru fiecare din cei
20 aminoacizi, care poate lega
aminoacidul de ARNt diferii.
Aminoacidul ARNt sintetaza
catalizeaz dou reacii succesive:
1) activeaz aminoacidul legndu-l de
AMP, formnd un compus intermediar,
denumit aminoaciladenilat
(aminoacil~AMP), care rmne legat de
enzim pn ntlnete o molecul de
ARNt specific pentru aminoacidul
respectiv;
AA + ATP = AA ~ AMP + ADP
2) transfer aminoacidul pe ARNt
formnd complexul ARNt ncrcat
( aminoacil ARNt ). Energia legturii
macroergice din complexul aminoacil
ARNt poate fi utilizat ulterior n
ribozomi pentru formarea legturii

Molecula de ARNt prezint la toate vieuitoarele o structur

asemntoare, perfect adaptat funciei sale, fiind o molecul
universal ca i codul genetic.
Acidul ribonucleic ribozomal (ARNr) este reprezentat de mai
multe specii cu constante de sedimentare diferite. ARNr este sintetizat
n nucleu i intr n constituia celor dou subuniti ribozomale: a)
subunitatea mic (40 S) i b) subunitatea mare (60 S), care se
angreneaz, n citoplasm, cu subunitatea mic, realiznd ribozomul.

6.3.3.1.Mecanismul
molecular al biosintezei
proteinelor

Formarea legturilor
peptidice ntre aminoacizii
care compun proteina are
loc n ribozom, sinteza
lanului polipeptidic avnd
loc n direcia aminocarboxil.
Ribozomul devine funcional
numai atunci cnd are loc

Mecanismul sintezei de proteine, mai bine studiat la E.coli,

este acelai n toate celulele i cuprinde trei faze: 1) faza de
iniiere, 2) faza de elongare i 3) faza de terminare (la fel ca
i la sinteza de ADN i de ARN).
Faza de iniiere ncepe odat cu formarea compusului formil
metionil ARNt prin legarea metioninei de un ARNt specific
i prin blocarea gruprii amino prin formilare. n continuare
se formeaz Complexul de iniiere 30 S la care particip
formil metionil ARNt, subunitatea mic 30 S, ARNm i
unele proteine solubile din citosol, denumite factori de
iniiere (IF1, IF2, IF3), precum i GTP. Subunitatea mic (30
S) se leag de ARNm pe un loc specific situat la circa 10
nucleotide de la captul 5 al ARNm (factorul IF3
intervenind n aceast legare).

Biosinteza proteinelor la
procariote

De complexul 30 S se leag apoi subunitatea mare (50 S) a ribozomului,

folosind pentru legare energia rezultat din hidroliza GTP ului. S a format astfel,
complexul de iniiere (70 S), n care pe ribozom exist dou locuri de legare: a)
un loc P (de la peptidil) care este ocupat de formil metionil ARNt i b) un loc A
(de la aminoacid) neocupat n complexul de iniiere.
Faza de elongare se realizeaz n trei timpi (subfaze): a) inseria unui
aminoacid; b) formarea legturii peptidice i c) translocarea.
Inseria const n legarea pe locul A din ribozom a unui aminoacidARNt, ce corespunde codonului din ARNm, aflat n dreptul locului A. Codonul
din ARNm este recunoscut de anticodonul ce transport aminoacidul cerut
(specificat) de cele trei nucleotide ale codonului (din ARNm). Pentru inserie
sunt necesare: o molecul de GTP i o protein din citosol numit primul factor
al elongrii. n urma inseriei a rezultat un complex n care pe locul P se afl
formilmetionil-ARNt-ul, iar pe locul A se afl un aminoacil-ARNt.
Formarea legturii peptidice se produce cu ajutorul unei enzime
denumit peptidil transferaz, existent n subunitatea 50 S a ribozomului, prin
transferul formilmetioninei (de pe locul P) pe gruparea amino din animoacilARNt (aflat pe locul A). n urma formrii legturii peptidice pe locul P rmne
un ARNt descrcat, n timp ce pe locul A se gsete un dipeptidil ARNt.

Translocarea cuprinde trei fenomene: a) ARNt descrcat

prsete locul P; b) dipeptidil-ARNt se mut (transloc) de pe locul A
pe locul P i c) ARNm se deplaseaz cu trei nucleotide spre captul 3.
Datorit acestui fapt, codonul urmtor de pe ARNm este pregtit pentru
a fi citit de ctre anticodonul unui nou aminoacid-ARNt corespunztor.
Translocarea necesit hidroliza celei de-a treia molecule de GTP
i intervenia celui de al treilea factor al elongrii, denumit translocaz.
Odat ncheiat translocarea, ciclul elongrii se poate repeta,
fiindc locul A a devenit vacant, iar n dreptul su se afl un alt codon,
care poate fi recunoscut de aminoacidul ce prezint anticodonul
complementar. n acest fel un alt aminoacid este legat n locul
polipeptidic (P), iar mesajul genetic nscris n ARNm este citit de
ctre anticodonii de pe ARNt i tradus n formarea unei legturi
peptidice ntre aminoacizi n conformitate cu secvena dictat
(specificat) de codoni.
Faza de terminare a sintezei lanului polipeptidic se declaneaz
n momentul cnd la sfritul fazei de elongare, n dreptul locului A din
ribozom ajunge unul dintre cei trei codoni nonsens (UAA, UGA i UAG);
n citoplasma celulelor normale nu se gsesc molecule de ARN cu
anticodoni camplementari acestor codoni. Dar aceti codoni nonsens
sunt recunoscui de o protein, denumit factor de eliberare (existnd
doi factori de eliberare RF1 i RF2). Factorii de eliberare se leag de
locul A i determin hidroliza legturii dintre polipeptid i ARNt de pe
locul P, elibernd lanul polipeptidic terminat care prsete ribozomul.

Compoziia lanului polipeptidic sintetizat de un ribozom este

determinat n mod exclusiv de ARNm i nu de felul ribozomului. n acest
mod, aceiai ribozomi pot sintetiza lanuri polipeptidice diferite n
funcie de matria de ARNm pe care sunt legai.
6.3.3.2.Particulariti ale biosintezei
proteinelor la eucariote
La eucariote, sinteza proteinelor are
loc n ribozomii 80 S din citosol, iar
iniierea sintezei lanului polipeptidic
se face prin metionil-ARNt care nu
este formilat ca la bacterii. Factorii de
iniiere sunt mai numeroi i mai
compleci la eucariote, ei controlnd
viteza sintezei proteinelor.
Viteza cu care se sintetizeaz
proteinele este foarte mare, att
datorit elongrii foarte rapide, ct i
datorit faptului c o molecul~a de
ARNm este tradus simultan de mai
muli ribozomi. Grupul de ribozomi
legat de o molecul de ARNm se
numete poliribozom sau polizom.
ntr-un polizom ribozomii sunt dispui
la distane de circa 100 nucleotide

n lanul polipeptidic, aminoacizii sunt legai n mod strict n ordinea

(secvena) codificat de gen, nct codul genetic (limbajul bazelor
nucleotidice din ADN i ARNm) este tradus n ordonarea (aezarea)
aminoacizilor din molecula de protein.
Numrul de lanuri polipeptidice care pot fi sintetizate pe o
molecul de ARNm este diferit la procariote, de eucariote. Astfel, la
eucariote pe fiecare molecul de ARNm se sintetizeaz un singur lan
polipeptidic, n timp ce la procariote o molecul de ARNm sintetizeaz
mai multe lanuri polipeptidice. Poriunea din ARNm care codific un
lan polipeptidic se numete cistron i ncepe cu un codon de iniiere
(unde se leag ribozomii) i se termin cu un codon nonsens.
La eucariote ARNm este ntotdeauna monocistronic, pe cnd la
bacterii este de obicei policistronic.
Prin adugarea sau prin delecia (nlturarea) unei baze din
ARNm apar mutaii, deoarece din acel punct de vedere citirea codonilor
este greit, defazat fa de mesajul original, rezultnd alte cuvinte.
La eucariote unele gene apar discontinui. Pn n prezent gena
este definit ca o regiune a cromozomului (ca un fragment de ADN)
care este copiat (transcris) ntr-o molecul de ARNm, iar aceasta este
tradus ntr-un lan polipeptidic. La eucariote secvenele de ADN
(denumite exoni) care codific aminoacizii sunt separate prin segmente
de ADN (denumite introni) care nu codific. Din moleculele de ARNm
precursor (ce apare prin transcrierea genei) sunt ndeprtate poriunile
ce corespund intronilor, fragmentele rmase fiind legate cap la cap

i la eucariote exist posibilitatea ca unele secvene de ADN s

produc cel puin dou molecule diferite de ARNm, datorit unor
variaii n fenomenul de ndire. De asemenea, nu toate genele
codific proteine.
Influenarea biosintezei proteinelor cu ajutorul unor antibiotice
sau prin aciunea unor toxine st la baza unor aplicaii sau implicaii
medicale.
Aplicaii medicale
n practica medical sunt folosite antibiotice care inhib
biosinteza proteinelor, acionnd pe subunitatea mic sau mare i pe
ribozomi de tipuri diferite (70 S sau 80 S). Streptomicina i
tetraciclinele acioneaz pe subunitatea 30 S, producnd citirea greit
a ARNm (streptomicina) sau blocnd legarea aminoacil ARNt pe locul A
din ribozomi (tetraciclinele).
Cloramfenicolul i ciclohexinida acioneaz pe subunitatea

Puromicina acioneaz pe ambele tipuri de ribozomi producnd terminarea prematur a

sintezei lanului polipeptidic.
Unele toxine microbiene inhib biosinteza proteinelor la eucariote. Astfel,
toxina difteric produs de Corynebacterium dyphteriae, blocheaz faza de elongare la
eucariote, inactivnd translocaza
7.DIFERENIEREA I EVOLUIA CELULELOR
Diferenierea celular este procesul biologic, n care, pornindu-se de la o
singur celul, se constituie tipuri celulare stabile, deosebite morfofuncional ntre ele.
Diferenierea este un proces esenial, de el depinznd nsi apariia i existena
organismelor individuale. Prin difereniere se realizeaz: 1) reproducerea, n urma creia
se formeaz noi indivizi ntr o specie; 2) creterea i dezvoltarea organismelor; 3)
regenerarea celulelor sau a esuturilor lezate sau uzate; 4) evoluia speciilor i adaptarea
organismelor la mediu.
Diferenierea celular are caracter universal n lumea vie, fiind prezent la
toate speciile de plante sau animale. Nefiind limitat n timp, diferenierea celular se
desfoar pe tot parcursul vieii individului, din momentul concepiei i pn n
momentul morii organismului. Intensitatea i amploarea diferenierii sunt variabile n
timpul diverselor perioade ale vieii organismului, nregistrnd o intensitate maxim n
embriogenez. La mamifere, diferenierea celular are un caracter ireversibil, nct nici
o celul difereniat nu i mai poate redobndi caracterele embrionare.

7.1.Mecanismele diferenierii celulare

La mamifere, diferenierea celular debuteaz n momentul
fecundrii, cnd se formeaz zigotul. Att zigotul, ct i celulele
rezultate din primele diviziuni se pot diferenia n oricare din tipurile
celulare funcionale ale adultului. Aceste celule care au potenial
maxim de difereniere sunt denumite celule totipotente sau
pluripotente i se caracterizeaz din punct de vedere genetic c au
toate genele active (derepresate) nct accept orice mesaj genetic,
putnd urma orice traseu evolutiv. Ele se pot integra n oricare din
regiunile unui embrion avansat, la care soarta celulelor este definitiv,
genernd structuri specializate n funcie de indicaia primit de la
regiunea suport

O serie de factori extracelulari denumii factori determinani,

oblig fiecare celul pluripotent s aleag un anumit traseu
evolutiv, transformndu se n celule determinate ( direcionate ).
Determinarea reduce progresiv numrul de tipuri celulare
specializate care pot lua natere din celule embrionare. Astfel, celulele
pluripotente pot genera prin difereniere toate tipurile de celule
adulte, dar mai trziu, odat cu apari,tia celor trei foie embrionare,
din fiecare foi rezult un numr limitat de celule, ca de exemplu:
celule nervoase din ectoderm; celule conjunctive, musculare din
mezoderm etc.
Dei cantitativ i calitativ genotipul celulelor pluripotente i
determinate este identic, determinarea i diferenierea celular
represeaz (inactiveaz) un numr variabil de gene, mereu altele n
funcie de tipul de celule specializate. Cu ct vrsta embrionului este
mai avansat, numrul genelor represate este mai mare, iar starea de
celul determinat este ireversibil la mamifere.
Factorii care impun alegerea unui anumit parcurs i deci
diferenierea spre un anumit tip de celul specializat se
numesc inductori. Inductorii acioneaz asupra unor celule int,
iar aciunea lor este posibil numai dac celulele int devin permisive,
n urma primirii unor mesaje sau influene directoare.

Permisivitatea apare ca urmare a unor modificri genetice i

structurale ce au loc la nivelul membranei celulare, modificri
determinate de aciunea unui alt inductor anterior. Se remarc faptul
c permisivitatea pentru un anumit inductor este limitat n timp.
Diferenierea celular se realizeaz prin intervenia unui grup
heterogen de factori inductori, care iniial acioneaz asupra unei
populaii de celule pluripotente, iar mai apoi, asupra unor celule
determinate (direcionate). Astfel, n ontogenez numrul
determinrilor succesive coincide cu numrul inductorilor.
n urma aciunii inductorilor i determinrii rezult celulele
STEM, celule de origine, din care vor lua natere anumite tipuri de
celule specializate. Astfel, celulele stem din mduva osoas
hematogen sunt capt de serie pentru hematii, leucocite i
trombocite, iar celulele nedifereniarte din epiteliu sunt capt de serie
pentru diverse tipuri de epitelii.
n organismul adult nu mai exist celule pluripotente, dar
fiecare esut i fiecare organ mai are nc rezerve de celule stem
incomplet difereniate (excepie fcnd esutul nervos i muscular
cardiac). Aceste celule stem i pot continua programul de difereniere,
putnd reface celulele specializate adulte, lezate sau uzate.
La mamifere, celula difereniat i pstreaz aceeai cantitate
de ADN ca i celula pluripotent, iar caracterele generale ale celulelor
difereniate sunt expresia fenotipic a numrului de gene nerepresate

Diferenierea celular se realizeaz n dou etape: a) o etap a

diferenierii intracelular i b) o etap a diferenierii intercelular.
n etapa diferenierii intracelulare, n interiorul celulei se produc
modificri structurale succesive care determin apariia formei i
structurilor specifice celulei difereniate, ca de exemplu modificarea
formei spermatogoniei i apariia flagelului.
n etapa diferenierii intercelulare, modificrile structurale suferite
de un grup restrns de celule dintr o populaie mai mare determin
apariia unor diferene ntre caracterele celulelor iniiale i caracterele
celulelor provenite din celulele iniiale.
Sub raport biochimic, diferenierea s-a realizat n momentul
n care n celul s-a acumulat o substan specific, de regul o
protein cu funcie enzimatic, ca de exemplu hemoglobina n hematii,
actina i miozina n celulele musculare.
Ca rezultat al diferenierii celulare apar funcii specifice fiecrui tip
celular constituit, precum contractilitatea celulelor musculare, mobilitatea
spermatozoidului, transportul de oxigen i bioxid de carbon. Caracterele
celulelor difereniate sunt reprezentate de:
1) Specializarea funcional, care reprezint principalul
obiectiv al diferenierii celulare, fr a se contrapune cooperrii cu alte
tipuri celulare.
2) Morfologia (forma i structura) celulelor difereniate este
specific n sensul dezvoltrii mai accentuate a organitelor celulare
necesare ndeplinirii funciilor specifice. Astfel, reticulul endoplasmic
rugos i complexul Golgi sunt foarte dezvoltate n celulele implicate n

3) Compoziia chimic apare specific, datorit acumulrii unor proteine

specifice sau datorit desfurrii unor activiti enzimatice specifice.
4) Adezivitatea pe substrat, care permite formarea esuturilor i organelor.
5) Interrelaia cu alte celule sau jonciunea, prin care se realizeaz solidarizarea
ntre ele n cadrul unui esut. Prin jonciunile permeabile, de tip gap pot trece anumite
molecule cu rol n reglarea funcional, permind funcionarea sincron a celulelor din
esuturi.
6) Inhibiia capacitii de diviziune. Celulele difereniate sunt greu divizibile
sau indivizibile (ca neuronul, hematia, celula muscular cardiac etc). Celulele difereniate
divizibile i pot regla ritmul de diviziune n funcie de necesiti (ca n cazul hepatocitelor).
Capacitatea de diviziune este mai ntrziat sau inhibat n cazul celulelor cu grad de
specializare avansat. De asemenea, n cazul unor esuturi n care celulele specializate au o
durat de via foarte scurt, ca urmare a solicitrilor func,tionale intense (exemplu n
epiteliu interstiial) se ntlnesc celule tinere, incomplet difereniate, capabile s se divid
pentru refacerea
populaiei de celule
adulte specializate,
epuizate

Celule specializate

7) Inhibiia de contact, care apare atunci cnd densitatea celulelor

atinge un anumit grad ntr un esut (ca, de exemplu n regenerarea
epiteliilor dup lezionare) sau n culturile de celule. Prin aceast
proprietate celulele sunt oprite din migrare i proliferare.
7.3. Caracteristicele celulelor nedifereniate:
1) Nu au funcii specifice, celulele nedifereniate pot
ndeplini un singur rol, acela de a genera diverse tipuri de celule
specializate n urma determinrilor succesive.
2) Nu au structuri specifice, toate celulele nedifereniate sau
parial difereniate sunt asemntoare prezentnd: nucleul mare,
eucromatic, citoplasma redus cantitativ, slab bazofil datorit
numrului sczut de ribozomi. 3) Nu au compoziii chimice specifice.
4) Prezint adezivitate pe substrat, nct atunci cnd vin n
contact se recunosc, ader i formeaz esuturi sau organe.
5) Joncionarea cu alte celule se poate realiza prin jonciuni
de tip gap, cu un diametrul mai mic dect n cazul celulelor
difereniate. Aceste jonciuni prezint un mare dinamism desfcndu se
i refcndu se cu rapiditate.
6) Prezint o mare capacitate de diviziune, ceea ce permite
unui numr redus de molecule inductoare care acioneaz iniial asupra
unui numr foarte mic de celule s genereze un numr mare de celule.

7) Prezint inhibiie de contact, ca i n cazul celulelor difereniate. n

momentul n care iau contact cu alte tipuri de celule, celulele
nedifereniate se opresc din migrare, putnd s realizeze esuturi i
organe.
Celulele mature pot suferi fenomenul de modulaie i de metaplazie.
Modulaia este fenomenul prin care n celulele mature, n anumite
condiii fiziologice sau patologice, pot s apar modificri structurale
i funcionale, minore i pasagere, reversibile, care le fac s
semene cu celula tnr din care au provenit. Astfel, fibrocitele se pot
transforma n fibroblaste n culturile de celule, datorit condiiilor de
mediu.
Metaplazia este fenomenul de transformare a unei celule
difereniat ntr o celul difereniat de alt tip. Metaplazia apare
exclusiv la esutul epitelial i conjunctiv.
7.4.MBTRNIREA I MOARTEA CELULELOR
n viaa sa, celula parcurge urmtoarele stadii (sau faze): 1) un
stadiu de funcionare normal; 2) mbtrnirea (sau senescena);
3) agonia; 4) moartea celular.
Celule mbtrnite sufer o serie de modificri morfologice
precum: a) scderea volumului celular; b) scderea ritmului mitotic i
creterea procentului de celule moarte, ntr o populaie de celule; c)
modificri ale nuceului i d) modificri ale citoplasmei.

Modificrile nucleului sunt reprezentate de: 1) picnoza

nuclear, care const n retractarea i condensarea nucleilor, colorare
intens (hipercromie) i dispariia detaliilor de structur; 2) cariorexis
sau fragmentarea nucleului; 3) carioliza sau dispariia (dizolvarea)
nucleului.
Modificrile citoplasmei constau n: scderea bazofiliei,
vacuolizarea citoplasmei, acumularea de pigmeni de uzur i lipide ca
urmare a scindrii moleculelor lipoproteice. (Fig.7.1)
n celulele n agonie se observ: a) modificri nucleare
asemntoare celor ntlnite n celulele mbtrnite; b) modificri ale
organitelor citoplasmatice, cu eliberare de fosfolipide i formarea de
figuri mielinice; c) modificarea strii coloidale a citoplasmei (fluidificare
sau gelificare) i modificri ale curenilor citoplasmatici.
Ipotezele i teoriile privind mbtrnirea i moartea celulelor
se pot grupa n dou categorii: a) o teorie a erorilor i b) o teorie a
morii programate a celulelor.

Teoria erorilor consider c senescena celular

(mbtrnirea) este o consecin a acumulrii defectelor genetice n
urma aciunii radiaiilor, agenilor mutageni sau radicallor liberi din
mediu asupra ADN-ului sau asupra diferitelor etape din transcrierea i
traducerea informaiei genetice. Rezultatul acestei aciuni este
producerea unor erori n sinteza unor proteine i n funcionalitatea
lor. O variant a teoriei erorilor o reprezint teoria invaziei virale care
consider senescena celular ca fiiind o consecin a ncorporrii ADNului viral n genomul celulei. Prin teoria erorilor nu se poate explica ns
variabilitatea
via a diferitelor
tipuri
de celule.
Teoriaduratei
moriide
programate
susine
c fiecare
tip de celul are
nscris n programul genetic o anumit durat de via, dup care
celula moare. Aceast teorie este sprijinit de rezultatele
experimentale obinute de HAYFLICK (1986), care, n culturi de celule, a
observat c fibroblastele provenite din esutul embrionar se divid de 50
de ori, n timp ce la fibroblastele provenite de la persoane de diferite
vrste, numrul diviziunilor scade treptat cu vrsta. Dac culturile de
celule sunt ngheate mai muli ani, la dezgheare, culturile se divid
exact de attea ori, ca i celulele de aceeai generaie nengheate.
Descifrarea mecanismului programrii morii n celulele normale poate
oferi cheia vindecrii cancerului i prelungirea vieii.
mbtrnirea celular apare ca un proces cu semnificaii
structurale i funcionale variate pentru diferitele tipuri de celule
existente n organism. Astfel, celulele cu ritm rapid de diviziune au
un proces de mbtrnire cu un mecanism de producere diferit fa de

programate genetic, nct mbtrnirea poate s se traduc prin

scderea ritmului sau chiar oprirea complet a procesului de diviziune.
n cazul celulelor nedivizibile n cursul vieii organismului (neuronul,
celulele musculare) mbtrnirea se traduce prin acumularea de
macromolecule cu proprieti diferite de cele iniiale sau prin
acumularea de substane nedegradabile (ca lipofuscin etc.).
ntre senescena celular i mbtrnirea organismului ntreg
este o mare diferen, organismul animal fiind format din mai multe
sisteme. Astfel mbtrnirea organismului este rezultatul
mbtrnirii fiecrui sistem n parte i mai ales rezultatul
mbtrnirii moleculelor, celulelor, esuturilor i organelor, fiecare
Moartea celulei
dintre acestea mbtrnind ntr-un mod specific, diferit.
Studierea mecanismelor i a cauzelor care produc moartea
celulei constiuie obiectul de studiu al tanatologiei celulare.
Moartea celulei se produce instantaneu, nct post mortem se poate
observa: a) retractarea pseudopodelor i adoptarea unei forme
sferice; b) o colorare difuz a nucleului i citoplasmei cu colorani
vitali; c) balonarea i dispariia mitocondrilor; d) picnoz,
cariorexis i carioliz nuclear. Aceste modificri sunt rezultatul
eliberrii enzimelor din lizozomii alterai, ca urmare a ncetrii
circulaiei sanguine i constituie un semn cert al morii organismului
animal.
Sunt descrise trei tipuri de moarte a celulelor: moartea celular
programat, apoptoza i necroza.
Moartea celular programat sau oncoza const n

cursul dezvoltrii ontogenetice embrio-foetale, pe parcursul dezvoltrii

sau funcionrii unor organe (de exemplu: involuia glandei mamare, la
ncheierea unui ciclu de lactaie sau involuia uerului la ncetarea strii
de gestaie
Apoptoza este o moarte celular lent, care intervine dup
primirea unor semnale intrinseci i se realizeaz prin mecanisme
proprii. Prin acest tip de moarte celular, organismul se elibereaz de
anumite celule care nu-i mai sunt utile (celule lezate, celule n exces,
celule cu ADN-ul modificat i nereparat, etc)
n producerea apoptozei se pot distinge patru stadii
evolutive : un stadiu molecular, un stadiu de contractare, un stadiu
de clivaj i un stadiu de fagocitoz.
n stadiul molecular sau de preangajare apar modificri ale
membranei i citoplasmei care i permit celulei s recepioneze
semnale (de obicei chimice: AMP-c, inozitol trifosfatul, ioni de calciu,
etc), ce produc modificarea permeabilitii membranelor celulare,
dispariia microvililor , dispariia jonciunilor i pierderea contactului cu
celulele adiacente. Ca o consecin a acestor fenomene se produce
activarea unor gene de liz sau gene letale (protooncogene cfos, c-myc, antioncogena P 53). Aceste gene induc sinteza de
macromolecule efectoare sau activatoare ale apoptozei (proteina de
stress hsp 70, catepsina D etc.) Celulele prsesc angrenajul tisular,
citosolul se condenseaz, plasmalema prezint invaginaii adnci, iar n
nucleu apare o hipercromatoz marginal, datorit dispunerii periferice
a eucromatinei nucleare. n acest stadiu ribozomii i mitocondriile nu

n stadiul urmtor, de clivaj n corpi apoptotici, cisternele reticulului

endoplasmic i unii saci golgieni se vacuolizeaz, iar fibra de cromatin
este fragmentat, sub aciunea unor endonucleaze, dependente de
calciu i sensibile la zinc. Apar corpii apototici cu aspectul
fragmente celulare delimitate de plamalem i coninnd citosol,
organite i oligonucleozomi.
Stadiul de fagocitoz i de eliminare a corpilor apoptotici
este de scurt durat, deoarece corpii apoptotici sunt recunoscui
imediat de lectine i receptorii macrofagelor i eliminai prin fagocitoz.
Citonecroza sau necroza sau necrobioza este o moarte
celular violent. Se produce sub o aciune patogen intens ce
depsete posibitile de adaptare ale celulei i cuprinde un numr mai
mare de celule. ntr-o prim faz celula se tumefiaz, apoi lizozomii
elibereaz hidrolazele acide, nct celulele se lizeaz n
totalitate,genernd o reacie inflamatorie n teritorillie nvecinate.
Nucleul trece prin modificri profunde (picnoz, carirexis i
7.5. Recunoaterea celular
carioliz).Celulele necrozate i mresc volumul, contrar fa de ceea ce
se ntmpl n apoptoz.
Celula posed capacitatea de a se recunoate unele pe altele n
mod specific. Astfel, dac un embrion de gin este disociat n celule
independente, prin tratament cu tripsin, dup cteva ore celulele
aflate n suspensie se agreg (se grupeaz) din nou. Dac se amestec
celule ectodermice i mezodermice, iniial se formeaz un conglomerat
sferic, dar dup 1-2 zile, celulele se separ dup tip, cele mezodermice
dispunndu-se la interior, iar cele ectodermice la exterior

. Fenomenul se datoreaz glicoproteinelor prezente n membrana

citoplasmatic, care formeaz molecule specifice, capabile s transmit
informaia genetic. n cultur fenomenul recunoaterii celulare se
manifest n cazul celulelor normale prin inhibiia de contact nct
contactul cu peretele lateral al vasului i cu celulele vecine ofer celulei
informaia
pentru
oprirea
Inhibiia denecesar
contact este
absent
n diviziunii.
cazul celulelor maligne i a unor
celule transformate, care apar spontan n culturile de celule normale.
Pierderea inhibiiei de contact nu este ns un criteriu suficient
pentru a defini o celul malign sau o celul transformat. Astfel n
1960, AUB a descoperit c celulele maligne i transformate au un plus
nc o proprietate care le deosebete de celulele normale, ele fiind
aglutinate de lectine (sau fit - hemaglutinine) care sunt proteine
vegetale ce se leag de glicolipidele i glicoproteinele din membranele
7.6.ONCOGENELE
celulelor transformate i tumorale.
Sunt gene, care pot s determine transformarea unei celule normale
ntr-o celul canceroas. Sunt considerate o form mutant a unei
gene normale (proto-oncogen) implicat n creterea i diviziunea
celulelor.
Modificrile de membran ale celulelor maligne se datoresc
modificrilor intervenite n exprimarea unor gene, care determin
compoziia i proprietile membranei celulare periferice, ceeace face
ca celulele maligne s aib o capacitate de cretere autonom, ele
reproducndu-se i prolifernd independent de mecanismele normale

Un model al genezei cancerelor (cancerogenezei) propus de

HUEBNER i TODARO (1969) susine c n toate celulele normale exist un
virus integrat n cromozomi (un provirus). La un moment dat se produce
activarea uneia din genele virale (denumit oncogen) care codific
proteine capabile s transforme o celul normal ntr-o celul malign.
S-a constatat c, n cromozomii umani, exist gene care au
secvene foarte asemntoare cu oncogenele virusurilor cu ARN (denumite v
oncogene). Astzi se tie c nu oncogenele celulare provin din cele virale
(deci nu sunt virusuri integrate), ci dimpotriv virusurile au preluat din
celulele normale aceste gene.
Oncogenele celulare au fost denumite i proto-oncogene i se pare
c s-au conservat, n evoluie, un timp foarte ndelungat, ndeplinind funcii
foarte importante. Pn n prezent nu se cunoate ce rol au n celula normal
i nici ce este modificat, atunci cnd se produce cancerul, determinnd
perturbri n exprimarea oncogenelor. n cancer s-au descris modificri ale
cromozomilor ca ruperi de cromozomi i transferuri ale fragmentelor
pe ali cromozomi, oncogenele fiind localizate tocmai n locul n care se rup
cromozomii sau n fragmentele translocate.
Sunt cunoscute 18 proto-oncogene, care se pot clasifica n dou
clase: myc i ras.
Oncogenele myc intervin n codificarea proteinelor nucleare,
regleaz transcrierea i induc transcrierea unor gene eseniale, critice
pentru proliferarea celular.
Oncogenele ras codific o serie de proteine ce se localizeaz n

nsi creterea celulei care l-a produs.

Date recente par a indica c o singur oncogen nu poate
produce cancer, fiind necesar colaborarea mai multor oncogene care
intr n activitate n fiecare din etapele carcicogenezei. Cunoscndu-se
mecanismele moleculare ale malignizrii se pot identifica punctele
unde aceasta va putea fi ntrerupt nct se sper c biologia
molecular va contribui la adoptarea unei adevrate terapii a
cancerelor.

8. MATRICEA
EXTRACELULAR
Matricea extracelular sau intercelular
este mediul n care triesc i i
desfoar activitatea diferitele tipuri de
celule ale organismelor pluricelulare. n
acest mod, celulele se afl n contact cu
o reea de macromolecule, denumit
matricea extracelular, care ocup
spaiul intercelular continundu-se cu
glicocalixul.

Matricea extracelular este compus dintr-o mare diversitate de

molecule de proteine i de poliglucide,care sunt asamblate ntr-o reea,
ce menine strnse raporturi cu suprafaa celulelor, care le sintetizeaz.Este
bogat n polimeri fibrilari, n special de colagen, care rezist mai mult
dect celulele la diferite solicitri mecanice.
Exist mari diferene n cantitatea, tipul de molecule i
modul de organizare a matricei extracelulare, fiecare form de
organizare fiind adaptat la solicitrile funcionale ale
esutului.Astfel,matricea extracelular se calcific n esutul osos i n
dini, este transparent n cornee.n esutul conjunctiv, matricea este mai
abundent dect n alte tipuri de esuturi, nct celulele apar relativ mai
rare.
Matricea extracelular particip la realizarea unor structuri specializate
precum: membranele bazale, cartilagiile i tendoanele. iar mpreun cu
depunerea cristalelor de fosfat de calciu particip la formarea oaselor i
dinilor.
Funciile matricei extracelulare sunt multiple: a) stabilizeaz
structura fizic a esuturilor; b) lubrefiaz, amortizeaz ocurile
mecanice i asigur elasticitatea esuturilor i organelor; c) asigur i
controleaz adezivitatea celular, acionnd ca un clei intercelular
universal; d) influeneaz i controleaz creterea, diferenierea,
proliferarea i migrarea celulelor; e) ndeplinete un rol metabolic
activ.

8.1.Membrana bazal
Membrana bazal sau lamina bazal este o structur special
situat sub celulele epiteliale (pe care le separ de esutul conjunctiv
subiacent) sau n jurul unor celule individuale (musculare, adipoase, celula
Schwann).
n histologia clasic, termenul de membran bazal a fost atribuit
structurilor alctuite dintr-o lam fin polizaharidic, ce ndeplinea rolul de a
cimenta baza epiteliilor i care se asociaz cu o tram reticular fin, n
contact cu esutul conjunctiv.
Lama poliglucidic a fost evideniat selectiv prin impregnri cu
sruri de argint sau prin reacia PAS cnd se coloreaz n rou purpuriu.
Epiteliile n marea lor majoritate, prezint membrane bazale de
form lamelar, cu o grosime de ordinul zecilor de nanometri (40-120, n
epiderm, epiteliul cilor respiratorii, glandele exocrine). Membrane bazale
mai groase (de civa micrometri) sunt prezente la nivelul epiteliilor
corneei (anterior i posterior), cristalinului. n alte cazuri, ca n epiteliul
vezicii urinare, existena membranei bazale a fost pus la ndoial n
histologia clasic, grosimea ei fiind sub puterea de rezoluie a microscopului
optic. n glomerulul renal (n foia visceral a capsulei Browmann) sau n
epiteliul alveolar, membrana bazal este singura care se interpune ntre
epiteliul respectiv i endoteliul capilarelor sanguine, acionnd ca un filtru

La microscopul electronic, membrana bazal se prezint ca o

structur matriceal fin care se interpune ntre esuturile epiteliale i
esutul conjunctiv subiacent. Membrana bazal prezint n alctuirea sa
trei structuri lamelare suprapuse:
1)lamina lucid cu grosime de 10 nm, adiacent plasmalemei bazale a
celulelor epiteliale, omogen i traversat de rare filamente fine;
2) o lamin dens (lamina densa s.basalis), cu grosime de 20-30 nm
format din filamente fine, abundente, cuprinse ntr-o matrice amorf,
dens i
3) o lamin reticulat (lamina fibroreticularis), care face trecerea la
matricea esutului consjunctiv.
Membrana bazal este produs, prin secreie, de ctre celulele
estului conjunctiv. Celulele epiteliale se leag prin dispozitive joncionale
speciale de adezivitate, denumite hemidesmozomi. n epiteliul stratificat
pavimentos cornificat al epidermului, lamina basalis este ancorat de
esutul conjunctiv subiacent prin fibrile de ancorare (anchoring fibrils),
formate colagen VII.
Compoziia chimic a membranelor bazale variaz de la un esut la
Laminina este una din primele proteine ale matricei extracelulare,
altul, de la o regiune la alta a aceleiai lamine i cuprinde: colagen (de tipul
sintetizat de celulele embrionare. n stadiile timpuriii ale structurrii,
IV ), proteoglicani (precum un mare heparan sulfat, denumit perlecan),
lamina bazal este format dintr-o reea de laminin, colagenul IV lipsind
fibronectin, entactina i laminina.
sau fiind redus cantitativ.

Fig.8.2. Componentele membranei bazale

Particip la regenerarea esuturilor lezionate (epitelii, muchi,

nervi), funcionnd ca un suport pentru deplasarea celulelor n cursul
regenerrii esuturilor epiteliale, a jonciunilor neuromusculare.
n cazul jonciunii neuromusculare, membrana bazal care
nconjoar celula muscular prezint o poriune joncional care se
interpune ntre terminaiile neuronului motor i plasmalema celulei
musculare. Aceast poriune joncional joac un rol central n refacerea
sinapsei dup lezarea nervului sau a muchiului.Astfel, membrana bazal
joncional ghideaz terminaiile nervoase motorii i controleaz localizarea
receptorilor pentru acetilcolin n plasmalem celulei musculare.
n extractele obinute din membrana bazal joncional s-a
identificat o nou protein matriceal, denumit agrin, care adaugat la
culturile de celule musculare, iniaz apariia de structuri sinaptice n
plasmalem. Agrina este produs nu numai de neuronii motori i pare a
avea rolul n configurarea ansamblului de receptori i de alte
Particip la recunoaterea intercelular i la ghidarea celulelor, n
macromolecule postsinaptice.
timpul dezvoltarii embrionului. Astfel, s-a observat c mutaia unei gene
care codific o protein asemntoare lamininei perturb cile pe care
unele celule mezodermice i axoni nervoi se deplaseaz pe memebrana
bazal ce susine epidermul.
Membranele bazale sunt capabile s: induc diferenierea celular,
s determine polaritatea celular, s influeneze metabolismul celular, s
organizeze proteinele din membrana plasmatic adiacent i s constituie o
cale specific pentru migrarea celulelor.

8.2. Fibrele intercelulare

Fibrele intercelulare sunt reprezentate de: a) fibrele de colagen; b)
fibrele elastice cu varianta lor fibrele oxitalanice i c) fibrele de reticulin.
8.2.1. Fibrele de colagen
Fibrele de colagen sunt alctuite din proteine fibroase (sau
scleroproteine), constituite din molecule de colagen, care reprezint
aproximativ 25-30% din totalul proteinelor din organism.
Molecula de colagen are o lungime de 300 nm i un diametru
de 1,5 nm, fiind format din trei lanuri polipeptidice numite lanuri
alfa, rsucite n triplu helix. Configuraia de triplu helix a moleculei de
colagen este stabilizat prin puni de hidrogen i legturi bisulfidice,
realizate ntre cele trei lanuri, din care dou lanuri alfa 1 (1) sunt
asemntoare ntre ele prin frecvena aminoacizilor, dar difer de cel de
al treilea lan, denumit lan alfa 2 (2 ).
Lanurile alfa pot fi de 25 tipuri diferite, fiecare fiind codificat de
cte o gen proprie. Un lan conine 1000 radicali de aminoacizi, este
rsucit n helix spre dreapta, pe fiecare tur existnd o triplet de
aminoaci ( glicin -prolin -hidroxiprolin). Prolina are o form sferic,
stabilizeaz conformaia helicoidal n fiecare lan .Glicina, cel mai mic
aminoacid din lan (avnd numai un atom de hidrogen n lan) permite
mpacetarea strns a celor trei lanuri pentru a forma n final triplu
helixul de colagen. Genele care codific lanurile sunt foarte mari,
ajungnd la o lungime de 44 Kilobaze i conin n jur de 50 exoni.

.
Multi exoni au o lungime de 54 (sau un multiplu de 54) de
nucleotide, ceea ce sugereaz c colagenii iau natere prin multiple
duplicaii ale unei gene primordiale ce conine 54 nucleotide i codific
tripleta Gly-X-Y (glicin-prolin-hidroxiprolin).

Exist 25 lanuri care pot fi asamblate n mai mult de 10.000 tipuri de

molecule de colagen, dintre care numai 15 sunt mai bine cunoscute.
Principalele tipuri de colagen din esutul conjuctiv sunt colagenul de tip I,
II, III,IV, V i XI (Fig.8.3).
Colagenul de tip I, fibrilar, este cel mai comun,fiind principalul
colagen din piele, tendoane, oase i capsule. Prezint o structur
molecular tipic, n triplu helix (Fig.8.4).
Colagenii de tip IV i VII formeaz reele.Moleculele de colagen IV
formeaz o estur care ocup o parte important din membrana
bazal. Moleculele de colgen de tip VII formeaz dimeri, care ntr n
structura fibrilelor de ancorare , mai abundente n piele i care ajut la

. Colagenii de tip IX i XII, denumii colageni asociai fibrilelor acoper

suprafaa acestora i particip la legarea fibrilelor att ntre ele, ct i de
ali componeni ai matricei extracelulare

Colagenul de tip I, II i III polimerizeaz sub form de fibrile de colagen

i organizeaz colagenul fibrilar care intr n alctuirea fibrelor de
colagen i reticulin.
Colagenul de tip IV i V nu formeaz fibrile, fiind colagen afibrilar i
intrnd n structura membranelor bazale i nvelitorilor fetale.
n mediul extracelular, moleculele de colagen polimerizeaz,
formnd microfibrile de colagen, cu diametrul de 10-300 nm, lungi de
mai multe sute de microni, observabile n electronomicrografii. Fiecare
microfibril de colagen prezint o alternan regulat de benzi clare i
ntunecate, ce se succed cu o periodicitate de 67 nm, datorit
dispunerii ordonate a moleculelor. n microfibrile, moleculele de colagen
(sau tropocolagen) sunt dispuse paralel ntre ele i n scar, aprnd

Microfibrilele de colagen se leag , prin interaciuni covalente transversale, ce se

stabilesc ntre radicalii de lizin din moleculele constituiente, formnd fibrilele de colagen
(fibrilla colagenosa), groase de 0,2 - 0,5 m. Dac legturile transversale sunt inhibate,
rezistena la ntindere este foarte redus, iar formaiunile colagenoase din piele,tendoane i vase
devin fragile, rupndu-se. n unele structuri (tendonul Ahile), legturile transversale sunt foarte
dese, asigurnd o foarte mare rezisten la intindere.
Fibrilele au diametre variate i se organizeaz diferit. n pielea mamiferelor se
dispun n reele pentru a rezista la traciuni pe mai multe direcii.n tendoane, se dispun n
benzi parale, orientate n axul major al tensiunii. n osul matur i n cornee, se dispun n
lamele,iar fibrlele dintr-o lamel sunt paralele ntre ele, dar perpendiculare pe cele din lamela
nvecinat.
Celulele conjunctive regla mrimea i dispunerea fibrilelor de colagen, prin ghidarea
dispunerii moleculelor de colagen dup secreie n strns asociere cu plasmalema. n plus,
organizarea spaial a fibrilelor de colagen este influenat i de interaciunile cu alte molecule
din matricea extracelular. Astfel, molecule de colagen de tip IX i XII sunt produse de nsui
celule conjunctive locale i devin colageni asociai fibrilelor.
Colagenii asociai fibrilelor difer de colagenii fibrilari prin: - au structura triplu
helicoidal ntrerupt de unul sau dou domenii nonhelicoidale, ceea ce le confer mai mult
flexibilitate; - rein propeptidele dup secreie; - nu se grupeaz pentru a forma fibrile;- se leag
periodic de suprafaa fibrilelor din colagenii fibrilar. Astfel, colagenul de tip IX se leag de
colagenul II, coninut n cartilagii, cornee i corpul vitros.Clagenul de tip XII se leag de
colagenul I din tendoane i din alte esuturi. Colagenii asociai fibrilelor au rolul s medieze
att interaciunile fibrelor ntre ele, ct i cu alte molecule din matrice, jucnd un rol deosebit
n dispunere fibrilelor.

Colagenii asociai fibrilelor au rolul s medieze att interaciunile fibrelor

ntre ele, ct i cu alte molecule din matrice, jucnd un rol deosebit n dispunere
fibrilelor.
Un numr variabil de fibrile de colagen se asociaz i formeaz fibre de
colagen, cu grosimi ntre 1 i 20 m. La rndul lor, fibrele sunt unite ntre ele prin ca
hexoze, care confer o reacie PAS pozitiv fibrelor de colagen.
Fibrele de colagen sunt cilindrice lungi i sinuoase cu capete care se pierd n
matricea extracelular. Sunt denumite i fibre albe i nu se anastomozeaz ntre ele,
dar se pot grupa n benzi, n unele esuturi conjunctive. Sunt foarte rezistente i apar
birefringente la microscopul de polarizare. Fiind acidofile se coloreaz n roz cu
eozina, n albastru prin coloraia tricromic Mallory i n verde cu coloraia tricromic
Masson. Pot fi degradate sub aciunea colagenazei, care elibereaz molecula de
tropocolagen la un anumit nivel i mparte triplul helix n dou fragmente inegale,
unul reprezentnd 75% din molecul, iar cellalt 25%. Numai n cazuri rare se
reueste s separe unul de altul cele trei lanuri ale moleculei de colagen.

Formarea (geneza) fibrelor de

colagen
Colagenul este produs
(sintetizat i secretat) de ctre
fibroblaste (n esuturile conjunctive),
condroblaste (n cartilaj), osteoblaste
(n esuturile osos). Producerea
colagenului are loc n dou etape: o
etap
intracelular
i alta
n etapa
intracelular
are loc:extracelular.(Fig.8.6)
copierea genelor (transcripia) care
codific sinteza moleculelor de
colagen; - traducerea mesajului
genetic n sinteza lanurilor pro ; hidroxilarea radicalilor de prolin i
lizin, precum i glicozilarea
radicalilor de hidroxilizin; elaborarea lanurilor polipeptidice,
formarea legturilor bisulfidice i
asamblarea lanurilor polipeptidice cu
formarea de triplu helix; mpachetarea procolagenului n
complexul Golgi i eliberarea
acestuia n mediul extracelular.

Lanturile polipeptidice de colagen sintetizate de ribozomii ataati

membranele reticulului endoplasmic sunt injectate n lumenul acestuia ca
precursori, denumii lanuri pro-. Aceti precursori prezint la ambele
capete ( amino- i carboxil-) aminoacizi adiionali, denumii propeptide.
Propeptidele ghideaz formarea intracelular a moleculeor de procolagen
triplu rsucite, prevenind, totodat, apariia intracelular a unor fibrile
mari,care ar putea fi nocive pentru celule. n lumenul RE, radicalii de
prolin i lizin sunt hidroxilai, formnd hidroxiproline i hidroxilizine, iar
unele hidroxilizine sunt glicozilate. Fiecare lan pro- se leag de alte
dou lanuri prin puni de hidrogen, rezultnd o molecul triplu rsucit
helicoidal, denumit procolagen.
n etapa extracelular, procolagenul este transformat n
molecule de colagen ( tropocolagen ) prin nlturarea enzimatic a
propeptidelor (numai n cazul formelor de colagen fibrilar), dup care are
loc polimerizarea moleculelor i formarea fibrilelor de colagen.
n moleculele de colagen, gupurile hidroxil din hidroxiprolin i
hidroxilizin au rolul s formeze legturi de hidrogen ntre lanuri, care
stabilizeaz conformaia spaial de triplu helix i previn hidroxilarea
prolinei, cum se ntmpl n deficiena de acid ascorbic (scorbut).
nlocuirea (turnoverul) moleculelor de colagen are loc dup o perioad
destul de lung, ce ajunge n os pn la 10 ani.
Fibrilele de colagen se depun pe suprafaa celulei care le-a
produs, ocupnd cu predilecie nfundrile plasmalemei, formate prin
fuziunea veziculelor secretorii cu suprafaa celulei. Citoscheletul din

8.2.2.Fibrele elastice
Fibrele elastice sau fibrele galbene sunt mai subiri dect cele
de colagen avnd diametrul de numai 1 nm. Ele sunt monofibrilare, se
ramific i se anastomozeaz formnd reele neregulate. Sunt de cel
puin cinci ori mai extensibile dect o fibr de cauciuc de aceeai
seciune transversal. Se pot colora electiv cu orcein ( n rou brun
ntunecat ), cu rezorcin fuxin WEIGERT (n rou aprins), cu
aldehidfuxin GMRI (n negru) i cu hematoxilin-eozin (cnd se
coloreaz slab i inconstant). Sunt rezistente i extensibile (cu 100200%), revenind la lungimea iniial, dup ce traciunea asupra lor a
ncetat. Se gsesc n pereii vaselor sanguine, n pulmon, n piele i
n esutul conjunctiv lax. Odat cu naintarea n vrst se rresc
provocnd disfuncia organelor respective. Au o compoziie n amino-acizi
asemntoare cu a fibrelor de colagen.

Fibrele elastice sunt de trei feluri:

- oxitalanice,
- de elaunin
- elastice propiu-zise.(Fig.8.7)
Componentul principal al fibelor
elastice este elastina, o protein
foarte hidrofil cu o lungime de circa
750 resturi (radicali) de amino acizi.
Asemntor colagenului este bogat
n prolin i glicin, dar spre
deosebire de acesta nu este
glicozilat i conine puin
hidroxiprolin i hidroxilizin.
La microscopul electronic, fibrele elastice prezint n centru o mas
amorf, astructurat, ce conine elastina, nconjurat de o teac
de microtubuli, orientat n axul longitudinal al fibrei i dispui n
benzi. Microtubulii sunt formai din glicoproteine, apar primii n
cursul elaborrii fibrei de ctre fibroblast i au rolul de a orienta
depunerea elastinei n regiunea amorf central.

Formarea (geneza) fibrelor elastice.

Elastina este sintetizat ca precursor (proelastina) de ctre
fibroblastele din piele i tendoane sau de ctre celulele musculare
netede din pereii vaselor mari. Proelastina, o molecul globular cu
masa de 70 kDa este eliminat n matricea extracelular, unde pe
suprafaa membranei plasmatice (n nfundturile acesteia) are loc
polimerizarea n fibre elastice. Sub form nefibrilar, elastina este
prezent n lamele elastice din pereii unor vase sanguine.
Elastina conine doi amino acizi, desmosina i isodesmozina, fiind
compus din dou tipuri de segmente scurte, care alterneaz dealungul
lanurilor polipeptidice:- segmente hidrofobe, care i confer proprieti
elasticitate i semente helicoidale,bogate n alanin i lizin, care
formeaz legturi transversale ntre moleculele adiacente. Fiecare
segment este codificat de un exon separat.
Elastina este rezistent la fierbere, la extracia cu acizi i baze diluate
i la aciunea tripsinei. n schimb, este hidrolizat de o enzim, elastaza,
secretat de pancreas.

Moleculele de elastin, sinuoase i polimorfe, sunt legate ntre ele

prin puni necovalente slabe, ca i prin puni covalente distanate, care
permit reelei s fie elastic. n organism, elastina poate servi ca matrice
pentru calcifiere, explicndu-se astfel formarea plcilor ateromatoase i
calcifierea unor esuturi.
Miezul de elastin este acoperit de o teac de microfibrile, care au un
diametru de 10 nm. Microfibrilele sunt compuse dintr-un numr de
glicoproteine, dintre care fibrilina pare a fi esenial pentru integritatea lor.
Microfibrilele joac un rol important n asmblarea fibrelo elastice. Ele apar
naintea elastinei n timpul dezvoltrii fibrelor elastice i formeaz o
schel pe care se depun moleculele de elastin.
Fibrele oxitalanice sunt o varietate de fibre elastice, foarte
rezistente la acizi. Sunt mai groase i mai rigide dect fibrele elastice. Ele
se pot colora cu coloranii fibrelor elastice (orceina, fucsina) numai dup o
prealabil tratare cu acid peracetic, acid permanganic sau acid performic.
Rezist la digestia cu elastaz, dar sunt degradate imediat prin tratare cu
acid peracetic. Se gsesc n numr mare n ligamentele alveolo-dentare,
dispersate printre fibrele de colagen i reticulin. Numrul lor crete n
bolile paradoniului sau n chisturile radiculare dentare.
O form aparte de fibre elasice sunt fibrele de elaunin, care se

8.2.3.Fibrele de reticulin
Fibrele de reticulin se caracterizeaz printr-un diametru mai redus (ntre
0,5 i 2 m), aprnd foarte subiri. Nu sunt grupate n fascicule, dar sunt
ramificate i formeaz reele, n mod frecvent. Pot fi observate n contrast
de faz i n microscopul de polarizaie, dup colorare cu rou Sirius. Pe
preparatele fixate, se coloreaz ca i cele de colagen (cu albastru de
anilin). Fiind fibre argirofile, se pot evidenia n condiii bune cu sruri de
argint. Datorit coninutului mai mare n glicoproteine, fibrele de reticulin
sunt PAS-pozitive. Astfel, hexozele sunt n procent de 6-12% n fibrele de
reticulin, fa de 1% n fibrele de colagen.
Fibrele de reticulin conin, n principal, molecule de colagen de tip
III, asociat cu glicoproteine, proteoglicani i alte tipuri de colagen. La
microscopul electronic apar formate din fibrile groase de 35 nm, strns
mpachetate i legate ntre ele prin puni de proteoglicani i glicoproteine.
Fibrele de reticulin iau natere, ca i celelalte dou tipuri de fibre
conjunctive, n fibroblaste, unde are loc sinteza de molecule de colagen tip
III, ce vor fi exocitate i polimerizate extracelular.
Sunt rspndite n: muchii netezei, n esuturile hematopoetice i
limfopoetice (mduva osoas, splin i organele limfoide), n jurul
capilarelor, n membranele bazale, n glandele endocrine, n ficat, n rinichi,
iar,n condiii patologice, apar n esuturi dup lezionri.Diametru redus i
dispunerea n reea lax i flexibil a fibrelor reticulare permite modificri
de form i volum a unor organe,precum splina, ficatul, arteerele,

8.3Substana fundamental a matricei extracelulare.

Substana fundamental, interfibrilar sau intercelular, apare
amorf, incolor, transparent, omogen i vscoas. Din punct de vedere
chimic, conine diferite molecule de glicozaminoglicani, de obicei legai
covalent de o protein, formnd proteoglicani i proteine fibroase, care
sunt de dou feluri: structurale (colagen, elastin) i glicoproteine
structurale adezive (fibronectina i laminina).
8.3.1.Glicozaminoglicanii
Denumii, n trecut, mucopoliglucide sau mucopolizaharide,
glicozaminoglicanii (GAG) sunt complexe poliglucidice neramificate,
compuse din uniti repetitive de diglucide, n care unul din cele dou
resturi de glucid care se repet este un aminoglucid ( N acetil glucozamina
sau N-acetil-galactozamina ).Cel de al doilea glucid este, de obicei un acid
uronic (glucoronic sau iduronic).

Glicozaminoglicanii sunt intens ncrcai negativ, din cauza

gruprilor (terminaiilor) sulfat sau carboxil existente pe resturile de
glucide. Dup radicalii de glucide, tipul de legturi ntre acestea, numrul i
dispunerea gruprilor sulfat se disting mai multe tipuri principale de
glicozaminoglicani:-acidul hialuronic sau hialuranul;- condroitin
sulfatul i dermatan sulfatul;- heparan sulfatul i heparina; -keratan
sulfatul (Fig. 8.8).
Lanurile de poliglucide sunt intens hidrofile i inflexibile, nct
nu se pot plia n structuri globulare. De aceia, glicozaminoglicanii au o
conformaie foarte extins, ocupnd un volum imens fa de masa lor,
formnd geluri i la concentraii foarte mici.
Sarcinile negative, foarte numeroase, atrag o mulime de cationi
(Na+), sunt osmotic active i rein o mare cantitate de ap n matricea
extracelular, fcnd-o turgescent, capabil s reziste la compresiuni, n
contradicie cu fibrele de colagen care rezist la traciuni. Prin acest
mecanism, matricea cartilajului articular poate rezista la presiuni de sute de
atmosfere.

n esutul conjunctiv,
glicozaminoglicanii ocup mai puin
de 10% din cantitatea de proteine
fibroase. Dar, pentru c ei formeaz
geluri hidratate "poroase",
glicozaminoglicanii ocup mult din
spaiul extracelular, oferind suport
mecanic pentru esuturi i permind
o rapid difuziune a moleculelor
solubile n ap (nutrieni, metabolii,
hormoni) sau deplasarea celulelor.
n fibrele de colagen i
elastice i sunt reprezentati de:
acidul hialuronic (singurul
nesulfatat), condroitin-sulfaii,
heparan-sulfaii, keratan-sulfaii i
heparina. Excepie fcnd acidul
hialuronic, toi ceilali
glicozaminoglicani se leag covalent
de o protein formnd molecule de
proteoglicani (PG), n care
glicozaminoglicanii ocup 95%, iar
proteinele 5%. n esutul conjunctiv,
glicozaminoglicanii i proteoglicanii

Acidul hialuronic ( sau hialuronanul sau hialuronatul ) este format

dintr-o repetare secvenial a peste 25.000 de uniti diglucidice
nesulfatate. Se gsete n cantiti variabile n toate esuturile, fiind mai
abundent la embrionii timpurii. Este cea mai simpl form de
glicozaminoglicani.
Producerea acidului hialuronic se realizeaz direct pe suprafaa celulei,
cu ajutorul unui complex de enzime, cuprinse n membrana plasmatic,
nefiind nevoie de exocitoz.
Fa de ceilali glicozaminoglicani, acidul hialuronic nu conine
dizaharide sulfatate, secvenele sunt mai simple,iar lanurile mai scurte
(mai puin de 300 resturi glucidice).
Acidul hialuronic ndeplinete multiple roluri: - asigur rezistena
mecanic n esuturi i articulaii; - ocup spaiile libere n timpul
dezvoltrii embrionare, permind modificarea formelor i structurilor ;
- fiind produs de zona bazal a epiteliilor, sevete la crearea unui spaiu
liber, n care celulele vor migra , ca n cazul formrii cordului, corneei etc.
Cnd migrarea celulelor s-a ncheiat, excesul de hialuronan este degradat
de hialuronidaz. Hialuronanul este produs n cantiti mari n timpul
cicatrizrii leziunilor i constituie un lubrefiant al lichidului
articular.ndeplinirea acestor roluri este condiionat de legarea
hialuronanului de proteinele sau proteoglicanii din matricea extracelular
sau de pe suprafaa celulelor. Unele din aceste molecule, denumite
hialaderine prezint domenii omoloage pentru legare de acidul hialuronic,
coninnd grupe de radicali aminoacizi, ncrcate pozitiv.

8.3.2.Proteoglicanii
Proteoglicanii (PG) sunt compui din lanuri de glicozaminoglicani
legate covalent de un miez proteic. Ca i n cazul altor glicoproteine,
lanul de polipeptide sau miezul proteic este sintetizat n reticulul
endoplasmic rugos, iar lanurile de polizaharide sunt asamblate pe
acesta n complexul Golgi.
Proteoglicanii se deosebesc de celelalte glicoproteine prin
felul, cantitatea i aranjamentul lanurilor de glucide. Apar foarte
heterogeni, n ceea ce privete coninutul proteic, mrimea moleculei
i numr, dar prezint o repetare a diglucidelor similare.
Miezul proteic al unui proteoglican este de obicei o glicoprotein. n
el, carbohidraii pot ocupa mai mult de 95% din greutatea sa, cel
mai adesea avnd forma de lanuri lungi neramificate, cu 80 radicali
de glucide.
De obicei, proteoglicanii sunt mult mai mari dect glicoproteinele.
Astfel, agrecanul care este o component major a cartilajului are o
mas de 3 x 106 daltoni, peste 100 lanuri de GAG, cte unul la
fiecare 20 resturi de aminoacizi. Exist, ns i proteoglicani mici, cu
1-10 lanuri de GAG, ca de exemplu decorinul, care este secretat de
fiboblaste i are numai un lan de GAG.

n principiu, proteoglicanii au o heterogenitate fr limit. Greutatea

molecular a miezului proteic variaz de la 10.000 la 600.000 daltoni, de el
putndu-se ataa un mare numr i tipuri diferite de GAG. n plus, modelul
de repetare a diglucidelor n fiecare GAG poate varia n funcie de gruprile
SH, nct se obine o heterogenitate enorm, ce face dificil identificarea i
clasificarea proteoglicanilor n funcie de glucidele lor. Secvena
proteinelor din miezul proteic, determinat prin tehnici de ADN recombinat
apare, de asemenea extrem de divers. Dei au fost identificate cteva
familii mici, nu exist un aspect structural comun care s disting clar
proteinele din miezul proteic de alte proteine, iar muli PG au unul sau mai
multe domenii care sunt omoloage cu domeniile existente n alte proteine
din matricea extracelular i din membran. Se consider (Hardungham,
Fosang 1992) c proteoglicanii sunt un grup aparte de glicoproteine
glicosilate, a cror funcii sunt mediate att de miezul proteic, ct i de
lanurile de GAG.
Funciile proteoglicanilor.
Rolul PG nu poate fi limitat la meninerea hidratrii spaiului intercelular.
Lanurile de GAG formeaz geluri cu pori de mrimi variate,nct servesc
ca site selective ce regleaz traficul de molecule n funcie de mrime i
ncrctura electric. Astfel, perlecanul, un PG heparan sulfat, joac acest
rol n membrana bazal a glomerulului renal.
PG intervin n comunicarea chimic dintre celule. Ei leag diferite molecule
semnal produse de celule, ca de exemplu unii factori de cretere,

Astfel, factorul de cretere a fibroblastelor (FGF) se leag de lanurile de

heparan sulfat ale PG, att n esuturi, ct i in vitro. Pentru unele celule
aceast legare reprezint un pas necesar pentru activarea receptorilor
de suprafa.
n majoritatea cazurilor, moleculele semnal se leag de lanurile de GAG
ale PG, existnd diferene ntre molecule: - factorul de transformare a
creterii
( transforming growth factor =TGF- ) se leag de miezul proteic al mai
multor PG din matrice ( de decorin) ncetndu-i activitatea. PG se leag
i regleaz activitatea proteazelor i a inhibitorilor de protease.
Legarea de un PG controlez activitatea unei proteine prin urmtoarele
mecanisme:- i limiteaz sfera de aciune, imobiliznd proteina la locul
de producere; - i blocheaz activitatea; - creaz un rezervor de proteine,
n vederea unei eliberri ulterioare; - protezeaz o protein fa de o
degradare proteolitic;- modific sau concentrez proteina pentru o mai
eficient prezentare la receptorii de suprafa.
Glicozaminoglicanii i proteoglicanii se asociaz pentru a forma
complexe polimerice imense n matricea extracelular, Astfel, molecula
de aggrecan ( un PG important din esutul cartilaginos) formeaz
mpreun cu acidul hialuronic un complex mai mare dect o bacterie.
Totodat GAG i PG se asociaz cu proteinele fibroase din matrice (cu
colagenul),rezultnd structuri extrem de complexe. Dispunerea spaial
a moleculelor de PG este intens determinat n esuturile vii.

Exist i PG intracelulari. Astfel, serglycina este un constituient al veziculelor

secretorii intracelulare, unde ajut la mpachetarea i stocarea moleculelor
secretate.
Ali PG sunt componenete integrate n membranele plasmatice, avnd
miezul proteic inserat transversal n bistratul lipidic sau ataat la bistrat prin
glicosil-fosfatidil-inozitol (GPI). Asfel, syndecanii au un miez proteic ce
traverseaz membrana. De domeniul lor extracelular se leag un numr
variabil de lanuri GAG (condroitin sulfat i heparan sulfat), n timp ce
domeniul lor intracelular interacioneaz cu actina citoscheletului din
cortexul celular.
Sindecanii se gsesc pe suprafaa mai multor tipuri de celule (fibroblaste,
celule epiteliale), unde ndeplinesc, alturi de integrine, rolul de receptori
pentru colagen, fibronectin i alte proteine matriceale , de care ei se
leag.Sindecanii se mai leag factorul de cretere a fibroblastelor (FGF),
fiind prezeni n receptorii pentru FGF. Betaglicanul se leag de TGF-
(factorul de transformare a creterii), fiind prezent n receptorii pentru TGF. n acest mod, proteoglicanii din membranele plasmatice acioneaz ca i
coreceptori care colaboreaz cu receptorii convenionali ai suprafeei
celulare, att n legarea celulelor de matricea extracelular, ct i n iniierea
rspunsului celular la factorii de cretere.
Sindecanii sunt organizai n gel hidratat, nct lanul de GAG difuzeaz
repede ntre celule, facilitnd migrarea celulelor i formarea prelungirilor
celulare.

Mai multe subuniti se leag necovalent pe un lung filament de acid

hialuronic (AH) prin intermediul unor mici linkeri proteici, ajungnd
la o mas de 105 Kdal i o lungime de ordinul micrometrilor. n
majoritatea proteoglicanilor, miezul proteic este asociat cu dermatansulfatul, condritin-sulfatul sau heparan-sulfatul. n unele cazuri
proteoglicanii se pot lega unii de alii sau de alte macromolecule
locale cum ar fi colagenul, elastina i fibronectina.
La microscopul electronic, proteoglicanii pot fi evideniai cu
ajutorul roului de ruteniu, care se leag selectiv la polimerii acizi i
devin electronodeni dup combinarea lor cu oxidul de osmiu (OsO4).
Astfel proteoglicanii au fost identificai n glicocalix (sub form de
filamente subiri de 3-5 nm), n matricea extracelular (sub form de
granule mari de 20-50 nm) i n membranele bazale (sub form de
granule mici de 10-20 nm).
n concluzie, proteoglicanii ndeplinesc multiple roluri, dintre
care subliniem : 1) particip la realizarea adezivitii celulare fa de
matrice; 2) confer vsco-elasticitate i rezisten la presiune
populaiilor celulare; 3) regleaz deplasarea moleculelor (mari i mici)
prin spaiul interstiial; 4) modeleaz homeostazia tisular; 5)
interacioneaz cu lipoproteinele sanguine.
Sinteza glicozaminoglicanilor i proteoglicanilor se realizeaz
n fibroblaste printr-un mecanism de sintez comun glicoproteinelor.
Astfel componenta proteic se sintetizeaz la nivelul ribozomilor
reticulului endoplasmic rugos (RER), unde ncepe i glicolizarea, care

8.3.3.Glicoproteinele structurale
Sunt formate dintr-un miez proteic la care se ataeaz glucide cu
structur ramificat. n contrast cu PG, n glicoproteinele structurale (GS)
predomin miezul proteic, iar glicoproteinele structurale nu conin
poliglucide lineare formate din diglucide repetitive ce au glucozamine. Ele
joac un rol important n funcionalitatea matricei extracelulare, cum ar fi
relaiile intercelulare, adezivitatea celulelor.
Sunt reprezentate de fibronectine (prezente n matricea tuturor
tipurilor de esuturi conjunctive) i n cele mai multe membrane bazale,
condronectine (prezente n matricea cartilaginoas) i laminine (prezente n
membranele bazale).
Fibronectina este o glicoprotein, cu o greutate medie de 222-240 kDa,
compus din dou subuniti legate prin puni bisulfidice, n apropierea
terminaiei carboxil. Fiecare subunitate prezint o serie de domenii
funcionale distincte, desprite prin domenii polipetidice flexibile. (Fig.8.10)

Fig.8.10. Adezivitatea celulelor la colagenul

intercelular cu ajutorul fibronectinei i
proteoglicanilor

Domeniile sunt constituite din mici module repetabile, codificate de

codoni separai deoarece gena fibronectinei prezint multiple
duplicaii ale exonilor, asemnndu-se cu genele colagenului. Un
domeniu leag colagenul, altul heparina, iar altul se leag de diveri
receptori specifici de pe suprafaa unor variate tipuri de celule.ndat
ce un domeniu cu activitate de legare a fost identificat de receptori,
secvena sa de aminoacizi determin sinteza unor peptide care i
corespund. Aceste peptide sunt folosite pentru gsirea regiunii
principale pentru legarea celulei, fiind identificat o secve specific
de tripeptide (Arg-Gly-Asp sau RDG). Fiecare peptid foarte scurt
conine secvena RDG i concur cu fibronectina pe situsul de legare al
celulei, putnd s inhibe ataarea celulelor la fibronectin. Dac
aceste peptide sunt prezente pe o suprafa solid, ele determin
aderena celulelor la aceasta.
Tipul principal de modul, numit repetiia fibronectinei de tip III (type III
fibronectin repeat) are o lungime de circa 90 radicali de aminoacizi i
se gsete de cel puin 15 ori n fiecare subunitate. Acest modul mai
este ntlnit i n alte proteine matriceale, n unele proteine ale
membranei plasmatice i citoplasmei.
Exist mai multe forme ( izoforme ) de fibronectin:fibronectina plasmatic, solubil,prezent n snge i alte lichide din
corp, intervine n coagularea sngelui , n vindecarea rnilor i n

Toate formele de fibronectin sunt codificate de o singur gen mare, lung

de 50 kilobase i format din circa 50 exoni cu mrimi similare. Transcrierea
AND-ului produce o singur molecul mare deARN, care pote fi sudat
alternativ n trei regiuni n funcie de tipul de celul i de stadiu de
dezvoltare. La om se produc 20 tipuri de ARN mesageri, fiecare fiind
capabil s codifice cel puin o subunitate diferit de fibronectin. Sudarea
alternativ permite celulei s produc tipul de fibronectin cel mai potrivit
cu necesitile esutului.
Astfel, formele de fibronectin produse n timpul dezvoltrii embrionare
difer de cele ntlnite n fazele trzii. Dar dac cutisul adult este lezat se
revine la fibrovectina embrionar. n vindecarea rnilor, fibronectina
permite migrarea celulelor i proliferrile cerute de dezvoltare sau
repararea esuturilor. Prin experiene de inginerie genetic,efectuate pe
oareci, s-au inactivat genele fibronectinei, fapt ce a generat o serie de
defecte morfologice ce au produs anomalii n dezvoltarea notocordului,
somitelor, cordului, vaselor sanguine, tubului neural i anexelor
extraembrionare.
Fibronectina este produs de fibroblaste, de celulele endoteliale i n
cantitate mai mic i de unele celule epiteliale i mediaz aderarea
celulelor la colagen sau la alte componente ale matricei extracelulare,
aciune la care pot contribui i alte molecule locale ca laminina,
condronectina etc.
Alte roluri ale fibronectinelor constau n: a) organizarea spaial a
citoscheletului; b) intervenia lor n migrarea celulelor n cursul diferenierii

Mai exist i alte tipuri de molecule adezive din matrice, care joac un rol n
ghidarea celulelor n cursul deplasrilor morfogenetice. Astfel,este tenascina
un complex glicoproteic cu ase lanuri polipeptidice, care se desprind dintrun centru.
Fiecare din lanuri este pliat i compus din diferite secvene scurte de
aminoacizi, care se repet de mai multe ori. Pe fiecare lan se gsesc un
numr de domenii funcionale distincte, din care unul se leag de suprafaa
celulei prin syndecan ( un proteoglican transmemebranar), iar altul de
fibronectin. Tenascina este mai abundent n matricea a esuturilor
embrionare. Ea poate s favorizeze, sau s inhibe adeziunea celular, n
funcie de tipul de celul i de medierea unor domenii proteice, jucnd un rol
n ghidarea deplasrilor celulare.
Laminina este o glicoprotein a membranelor bazale, fiind localizat
n lamina rara, n imediata apropiere a celulelor epiteliale cu membrana
bazal, mediind ataarea acestora de colagenul de tip IV al membranelor
bazale. Nu prezint o specificitate absolut nct poate facilita i ataarea
fibroblastelor la un substrat de sticl. Este compus din trei lanuri alfa (sau
A) i un lan
beta (sau B) ce formeaz o molecul foarte
mare cu o greutate de 1 milion daltoni,
ce posed locuri specifice
de legare. (Fig.8.11)

Condronectina este o glicoprotein seric ce mediaz specific ataarea

condrocitelor de colagenul de tip II din cartilaj. Este sintetizat de
condrocite.
n matricea extracelular din aproape toate esuturile conjunctive
s-a identificat glicoproteina 115 (necolagen), cu o greutate molecular de
aproape 115.000, care este prezent n cantitate mai mare n vasele
sanguine, n fibrele musculare netede, i n unele membrane bazale,
avnd o funcie asemntoare fibronectinei i lamininei.
La embrion, n faza de morul, se ntlnete o glicoprotein
denumit uvomorulina implicat n adezivitatea celulelor embrionare. Ea a
putut fi identificat i la adult n spaiul intercelular al epiteliului intestinal,
n jurul domeniului laterobazal al celulelor. Uvomorulina este distribuit
uniform la suprafaa celulelor maligne n carcinomul nedifereniat. Tot n
matricea extracelular a unui tip de carcinom a fost izolat epinectina, o
protein cu greutatea molecular de 70.000 daltoni.
n serul sanguin, n afar de condronectin i fibronectin se mai
ntlnesc i alte glicoproteine cu importan major n adezivitatea
celulelor de colagen i n etalarea celulelor n vitro, ca de exemplu: factorul
de etalare a fibroblatilor i a celulelor epiteliale, epibolina (ce favorizeaz
etalarea celulelor epiteliale).
Tot n matricea extracelular a esuturilor conjunctive este prezent
i lichidul tisular care are o compoziie asemntoare plasmei sanguine,
coninnd ap, molecule mici (inclusiv proteine) i diferii ioni (n special

Unele moleculele din matricea extracelular pot s regleze cantitatea altor

molecule extracelulare. Astfel, fibronectina stimuleaz sinteza colagenului
de ctre hepatocite n urma efectelor pe care fibronectina le are asupra
fosforilrii proteinelor. La fel factorul de cretere epidermic, AMP-ul ciclic,
vitamina A stimuleaz acumularea fibronectinei n diferite linii celulare.
Refacerea (turnoverul) moleculelor matricei extracelulare este
continu i prezint o mare importa pentru multe procese biologice. Se
realizeaz un echilibru ntre degradare i resintez.
Astfel, o degradare rapid se produce n timpul involuiei uterine post
partum. Degradri localizate sunt necesare atunci cnd unele celule
( leucocitele) trec prin memebrana bazal n esuturi, iar celulele
canceroase migreaz la distan, dnd metastaze. Componentele matricei
sunt degradate prin enzime proteolitice care sunt produse i eliberate local
de celule, precum:- unele metaloproteaze, ce depind de ionii de Ca2+ i
de Zn2+, iar altele sunt proteaze serice. Ele coopereaz pentru a degrada
proteinele matriceale (colagenul, laminina, fibronectina). Colagenaza (o
proteaz seric) ore o specificitate restrns, modificnd integritatea
matricei pe zone limitate i facilitnd migrarea celulelor. O important
proteaz seric este un activator de tip plasminogen al urokinazei
(urokinase-type plasminogen activator) (U-PA). Ea transform
plasminogenul ntr-o proteaz activ plasmina, care degradeaz fibrina,
fibronjectina i laminina.
Degradarea componentelor matriceale este controlat strns prin mai
multe mecanisme ca: - secreia unor proteaze ca precursori inactivi;activitatea proteazelor este limitat la anumite arii de inhibitori specifici;

. Ei protejeaz de asemenea i proteinele de pe suprafaa celulelor, care

sunt necesare pentru adeziune i migrare. Multe celulele au receptori de
memebran care leag U-PA, limitnd aciunea acesteia la zonele unde este
necesar. Astfel, un receptor pentru U-PA a fost detectat pe conul de
cretere al neuronului, la marginea de naintare a leucocitelor i la unele
tipuri de celule canceroase, care metastazeaz.
8.4. Integrinele sau receptorii celulari pentru
matricea extracelular
Integrinele sunt o familie de proteine transmembranare care leag
colagenul, fibronectina i laminina.
Spre deosebire de ali receptori de membran, integrinele prezint o
constant de afinitate relativ joas (Ka =106 109 litri/ mol), permind
celulelor s exploreze ambiana fr s se ataeze de matrice. Interginele
sunt heterodimeri, compusi din dou subuniti ( i ) necovalente
asociate cu glicoproteine transmembranare.
Integrinele ndeplinesc un rol crucial pentru adeziunea i cooperarea
celulelor cu matricea extracelular. n timp ce unele integrine leag numai
o macromolecul din matrice (fibronectina sau laminina), altele pot lega
mai multe. Astfel, o integrin prezent pe suprafaa fibroblastelor leag
colagenul, fibronectina i laminina. Mai mult aceiai molecul de integrin,
n diferite tipuri de celule, poate lega diferite molecule. O subfamilie de
integrine recunoate i leag secvena de aminoacizi arginin-glicin-

Datorit prezenei a 3 sau 4 domenii de legare existente pe partea

extracelular a catenei , legarea integrinelor depinde de unii cationi
extracelulari bivaleni(Ca2+, Mg2+).
La vertebrate, unele proteine matriceale pot fi recunoscute i ataate de
mai multe integrine. Astfel, fibronectina este legat de 8 integrine, iar
laminina de 5 fibronectine.Integrinele sunt foarte diverse, deoarece cei 20
heterodimeri pot forma 9 tipuri de subuniti i 14 tipuri de subuniti .
Catenele 1 care formeaz dimeri cu cel puin 9 catene exist la aproape
toate celuele de la vertebrate. Astfel, 5 1 este receptor pentru
fibronectin, iar 6 1 leag laminina. Lanurile 2 care formeaz dimeri cu
3 tipuri de lanuri se gsesec pe suprafaa leucocitelor i joac un rol
esenial n activarea lor. Astfel, integrina 12 este un factor asociat
limfocitelor (LAF-1), iar integrina M2 este
asociat macrofagelor (Mac-1). Integrinele 2 mediaz n principal
interaciunile dintre celule i mai puin pe cele dintre celul i matrice. Ele
premit leucocitelor s se ataeze de endoteliul vascular i s-l traverseze.
Integrinele funcioneaz ca linkeri transmembranari (sau
integratori) care mediaz interaciunea dintre citoschelet i matricea
extracelularCele mai multe intergine se leag de filamentele de actin,
excepie fcnd integrina 64, existent n hemidesmozomi, care se leag
de filamentele intermediare. n timpul atarii integrinei de un ligand
extracelular, captul intracelular al catenei se leag la filamentele de
actin din citoschelet. Ataarea transmembranar la citoschelet este o
cerin important att pentru adeziunea celelelor la matrice, ct i pentru

Integrinele mediaz, interaciuni transmembranare, ntre

citoschelet i matricea extracelular jucnd un rol important n orientarea
celulelor i matricei n esuturi.
La rndul su, matricea extracelular poate influena organizarea
citoscheletului, determinnd n fibroblastele transformate (cancer like) din
culturi apariia intracelular a fibrelor de stres, prin organizarea filamentelor
de actin i producerea unei cantiti mai reduse de fibronectin.
Citoscheletul exercit fore care orienteaz moleculele matricei pe care
celulele o produc, iar acestea influeneaz organizarea citoscheletului.
Celulele reglez activitatea integrinelor pe care le produc. Astfel,
integrinele celulelor sanguine trebuie s fie activate pentru a media
adeziunea celular. Acest fapt permite celulelor sanguine s circule
nestnjenite pn cnd sunt activate rapid de un stimul specific, deoarece
integrinele lor nu trebuie sintetizate, ele existnd deja sub form inactiv.
Trombocitele sunt activate de contactul cu peretele lezat al vasului sanguin
sau de unele molecule semnal solubile. Acestea determin activarea
integrinei 3 din membrana trombocitelor, nct aceasta recepioneaz i
leag proteinele coagulrii, determinnd agregarea trombocitelor i
formarea coagulilor.
n mod asemntor, legarea de limfocitul T a unui antigen de suprafa
specific blochez calea de semnalizare intracelular, ceea ce duce la o
activare rapid, dar trectoare a integrinei (LFA -1). Integrina activat
permite limfocitului T s adere puternic i pentru un timp suficient de lung
la celula int, pn de vine stimulat. Dup aceia integrina revine la starea

i alte evenimente intracelulare pot determina activarea integrinelor.

Astfel, fosforilarea serinei de pe captul citoplasmatic a integrinei 1 , n
timpul mitozei celulelor din culturi diminueaz capacitatea integrinei de
a lega fibronectina, nct celulele i modific forma i se detaeaz de
substrat.
Moleculele matricei extracelulare influeneaz puternic comportaea
celulelor n culturi, modificndu-le forma, micarea, metabolisnmul,
dezvoltarea i diferite funcii. Integrinele mediaz multe din aceste
evenimente. Asfel , integrinele de locul de contact cu matricea sau cu
alt celul pot activa mai multe ci de semnalizare intracelular. ( pe cea
a fosfolipid inozitolului, a tirozin kinazei,etc). Se produce,astfel un semnal
complex pe faa intern a membranei, care determin intrarea in
activitate a unor receptori intracelulari . n urma acestor evenimente,
numai celulele ataate prin integrine la moleculele matricei extracelulare
reacioneaz, decland o cascad de semnale care se traduc prin
mnodificri n comportamentul celulelor i prin proliferri celulare.

9.EMBRIOLOGIA
GENERAL
Embriologia este disciplina biologic care se ocup cu studiul

dezvoltrii ontogenetice a organismelor, din momentul producerii

gameilori si pn n momentul parturitiei sau ecloziunii.

Ontogeneza (ontogenesis) parcurge mai multe etape sau

faze:
1)gametogeneza;
2) fecundaia;
3)segmentarea;
4) gastrularea;
5) histogeneza;
6) organogeneza si
7)

creterea i dezvoltarea postnatal sau post eclozional .

Etapele ontogenezei

n cazul mamiferelor, unele din aceste faze sunt parcurse n organismul

matern, alctuind dezvoltarea intrauterin, ce cuprinde: fecundaia,
segmentarea, gastrularea, histogeneza i organogeneza.
Dezvoltarea intrauterin (genesis praenatalis) se continu dupa
actul parturiiei (parturitio), n afara organismului matern cu o perioada
denumita extrauterin sau postnatal.
n cazul psrilor, perioada dezvoltrii n organismul matern este
nlocuit, aproape n totalitatea sa (exceptnd fecundatia) de perioada
dezvoltrii n ou, iar dup ecloziune se continua cu o perioada
posteclozionala.

Dezvoltarea intrauterin sau preeclozional se

desfasoar n trei etape:
1) o perioada embrionar sau embriogeneza
(embryogenesis), care ine pn la apariia celor trei
foie embrionare i a anexelor embrionare;
2) o perioada de histogenez (histogenesis) i
organogenez (organogenesis);
3) o perioada fetal (fetogenesis) - n care se
continu dezvoltarea organelor pna la fatare
(parturiio) sau ecloziune.

Embriogeneza constituie obiectul de studiu al embriologiei generale, iar

histogeneza, organogeneza i perioada fetal sunt studiate de
embriologia special (ce va fi prezentat odat cu histologia esuturilor i
organelor).
9.1. Gametogeneza
Gametogeneza (gametogenesis) cuprinde ansamblul de
transformari prin care trec celulele
germinale primordiale
(cellulae germinales
promordial)sau
gonocitele primordiale
pna la stadiul de celula
sexuala matura. (Fig.9.1)
Procesul de
gametogeneza parcurge
trei perioade, asemanatoare
la ambele sexe:
1)perioada germinativa
(de multiplicare sau de nmultire);
1)perioada de crestere;
2)perioada de maturare.

9.1.1. Spermatogeneza
Spermatogeneza (spermatogenesis) cuprinde totalitatea
proceselor pe care le parcurg spermatogoniile (gonocite primordiale
mascule) pn devin celule sexuale mature (spermatozoizi), apte pentru
fecundaie. Se desfasoar la nivelul epiteliului seminal din tubii seminiferi
ai testiculului. (Fig.9.2)
1) Perioada germinativ (de multiplicare sau de nmultire) este
parcursa n timpul prepubertatii, cnd gonocitele primordiale se divid
mitotic, genernd doua categorii de spermatogonii: a) unele mici, identice
cu gonocitele primordiale; b) altele mai mari, spermatogoniile prafoase
(de tip A) (spermatogonium A), care se vor divide mitotic, n mod repetat,
trecnd spritr-un stadiu intermediar (spermatogonium intermedium) i
genernd spermatogoniile crustoase (de tip B) (spermatogonium B), care
vor continua linia seminala.

2) Perioada de cretere se
declanseaz odat cu pubertatea i
const n creterea (dublarea n
volum) a spermatogoniilor,
transformndu-se n spermatocite de
ordinul I (spermatocytus primarius).
3) Perioada de maturare se remarc
prin faptul ca spermatocitul de
ordinul I se divide reducional
(meiotic) genernd doua spermatide
de ordinul II (spermatocytus
secundarius) (cu set haploid de
cromozomi), care se divid imediat (n
mod mitotic), rezultnd n final 4
spermatide dintr-un spermatocit de
ordinul I sau dou spermatide dintr-un
spermatocit de ordinul II. (Fig.9. 3)

Spermatidele (spermatidium,a) parcurg o metamorfoz celular,

denumit spermiogeneza (spermiogenesis) , fiecare spermatid devenind
un spermatozoid (spermatozoon s. spermium).
Spermiogeneza are loc n cile genitale intratesticulare.
Spermatida apare ca o celula poliedric, n citoplasma careia se
gsete un nucleol situat central. Complexul Golgi i mitocondriile sunt
dezvoltate, iar centrul celular este reprezentat de doi centrioli. Elementele
reticulului endoplasmic neted sunt numeroase i asociate cu lipide.
Enzimele hidrolitice sunt active.
Transformarea spermatidei n spermatozoid, spermiogeneza, se
realizeaz n patru perioade succesive: a) perioada Golgi; b) perioada cap;
c) perioada acrozom; d) perioada de maturare. (Fig.9.4)

a) n perioada Golgi: 1. - nucleul spermatidei se deplaseaz n sens axial,

ctre un pol al celulei, se alungete i se aplatizeaz uor; 2. - complexul
Golgi, cuprinznd n interiorul sau granule proacrozomice (granulum
proacrosomaticum) i vezicule proacrozomiale (vezicula proacrosomatica),
se deplaseaza, n cadrul citoplasmei, ctre polul anterior al nucleului; 3. centriolii se despart, dispunndu-se unul lng polul caudal al nucleului
(centriolul proximal), iar cellalt la o distan de 1-2 m (centriolul distal),
de nucleu - de la el desprinzndu-se filamentul axial al viitoarei cozi.
b) n perioada cap: 1. proacrozomul (proacrosoma) sau vezicula
crozomal se detaeaz de complexul Golgi, se aplatizeaz i ia forma
unui capion ce mbrac jumatatea anterioar a nucleului; 2. - complexul
Golgi migreaz spre periferia citoplasmei; 3. - microtubulii din citoplasm
se grupeaz ntre cei doi centrioli i structureaz filamentul axial, din care
se va constitui viitoarea axonem a spermatozoidului.
c) n perioada acrozomic: 1. - nucleul spermatidei se alungete, devenind
ovoidal; 2. vezicula acrozomal se transform n acrozom i acoper
jumtatea anterioar a nucleului; 3. nucleul devine compact, pierde o
parte din ap, iar cromatina se condenseaz; 4. - citoplasma se
deplaseaz spre polul posterior al nucleului; 5.-axonema crete n
lungime, structurnd piesa de conjugare i piesa intermediar; 6.centriolul distal se desparte ntr-o jumtate proximal, cu aspect discoidal,
situat ntre piesa de conjugare i piesa intermediar, si o jumtate
distal, cu aspect inelar, ce nconjoar axonema cozii, fiind situat ntre
piesa intermediar i piesa principal.

d) n perioada de maturare a spermiogenezei: 1. - jumtatea inelar a

centriolului distal (denumit si inelul Jensen) se ndeprteaz, delimitnd
lungimea piesei intermediare; 2. - citoplasma spermatidei se reduce; 3.
mitocondriile, n numr de 15-25, se dispun n helix (cu 14 ture), n jurul
filamentului axial al cozii; 4. - se contureaz aspectul morfologic al
spermatozoizilor maturi, care au capul nfundat n faldurile membranei
apicale a celulelor de susinere (Sertoli); 5. - pe msur ce se realizeaz
maturarea, spermatozoizii ncep s secrete hialuronidaza i se desprind de
celulele de sustinere, devenind liberi.
Nucleul spermatidei sufer o serie de modificri, precum:
condensarea cromatinei, formnd n stadiile iniiale fibre paralele cu axul
lung al nucleului, fibre care mai trziu se grupeaz n lamele;
membrana nuclear si mrete suprafaa, formnd falduri care sunt mai
numeroase spre polul posterior (caudal) al nucleului, unde i porii
membranei sunt mai numeroi;
la polul anterior, cromatina nuclear ader la membrana nucleului, iar la
polul posterior se dispune sub aspectul unui material filamentos ntre cutele
membranei.
Citoplasma spermatidei este mai hialin i conine ribozomi, lipide,
glicogen i puine mitocondrii. Se realizeaz un trazit intens ntre nucleu i
citoplasm.Odat cu maturarea complet se acumuleaz spre polul
posterior al nucleului, sub forma unei picturi, denumit relicvat
citoplasmatic (sau corp rezidual), ce va fi fagocitat de celule Sertoli. n

9.1.1.1.Morfologia
spermatozoidului
Evideniat n 1667 la om, de
Ham din Leyda i n 1679, la animale,
de van Leeuwenhoek, spermatozoidul
(spermatozoon s. spermium) este
format din: cap i flagel (coad).

Capul spermatozoidului
Capul (caput) prezint forme i dimensiuni
diferite, n funcie de specie, aprnd ovalar
(la hominide, armsar, taur, berbec, ap, vier)
sau cu form de: par (la iepure i cine),
secer (la coco i obolan), cu lungimi medii
ntre 5 m (la bbat) i 9 m (la berbec),
grosimile medii atingnd ntre 2-5 m.

Nucleul spermatozoidului este nconjurat de un strat subire de

citoplasm i de o plasmalem periferic foarte delicat.
n componena capului intr: nucleul, acrozomul, capionul cefalic,
perforatorul, protuberanele bazale i membrana periferic.
Nucleul (nucleus) conine cromatina deshidratat i condensat, n care
ADN-ul (43%) este strns combinat cu protamine bazice (57%). Ocup cea
mai mare parte din capul spermatozoidului. Cromatina apare mai
condensat la baza nucleului, granular n partea apexial i cu aspect
clar, n regiunea ecuatorial. Cantitatea de cromatin reprezint o
caracteristic de specie. Din cromatin se formeaz cromozomii autosomi i
un heterozom. Deoarece spermatozoizii sunt celule haploide conin numai
jumtate din numrul de cromozomi al unei specii ( n cromozomi ). Se
accept c, aproximativ, jumtate din numrul total de spermatozoizi dintrun testicul conin cromozomul sexual X, iar cealalt jumtate cromozomul
Y.(Fig.9.5)
Acrozomul este situat supranuclear, interpus ntre membran i
nucleu, pe care l acoper pn n zona inelului ecuatorial. Se formez din
complexul Golgi n timpul spermiogenezei. Cuprinde n structura sa: o
membrana acrozomic intern (membrana acrosomatica interna),o
membran acrozomic extern ( membrana acrosomatica externa) i o
substana acrozomic (substantia crosomatica), n care se disting granulele
acrozomice (granulum acrosomale). Este considerat un lizozom specializat
ce conine multe enzime hidrolitice (ex: fosfataza acid, hialuronidaza) si o
protein nrudit cu tripsina. Aceste enzime depolimerizeaz acidul

Perforatorul
este situat ntre
acrozom i
membrana
nuclerar, avnd
rolul s perforeze
plamalema
ovocitului. Formez
un canal n
citoplasm, prin care
se transfer
coninutul nucleului
spermatozoidului.
Protuberanele
bazale apar ca dou
formaiuni osmiofile
semicirculare,
formate din
citoplasm
condensat, dispuse
la polul caudal
(bazal) al capului.

. Fosa de implantare (fosulla articularis) apare ca o escavaie redus ce

servete pentru inseria extremitii proximale a filamentului axial al
cozii spermatozoidului.
Membrana periferic, trilaminat, foarte delicat i
transparent, acoper capionul cefalic i acrozomul, delimitnd capul
spermatozoidului. Prezint receptori specifici.
Coada spermatozoidului sau flagelul
Flagelul (flagellum) cuprinde (dupa Nomina Histologica
1994) urmtoarele parti: gtul, piesa intermediar, piesa principal i
piesa terminal.
a) Gtul spermatozoidului (pars conjungens) apare foarte scurt,
circa 0,4 m, fiind delimitat ntre nucleu i jumtatea proximal a
centriolului distal.
Conine placa bazal, capitelul, coloanele segmentate,
centriolul proximal, mitocondriile i dispozitivul fibrilar, fiind delimitat la
periferie de o membran fin de natura lipoproteic. Este foarte fragil,
rupndu-se deseori.
Placa bazal (patella basalis) este o lam fix de citoplasm
osmiofil, dispus n fosa de implantare. Delimiteaz capul
spermatozoidului de gt, interpunndu-se ntre membrana nuclear i
capitel.
Capitelul (capitulum) este segmentul proximal al complexului
centriolar i reprezint zona de unire a bazelor coloanelor segmentate
(basis columnaris), care vine n contact cu faa distal a plcii bazale.

Dupa constituirea coloanelor segmentate, centriolul proximal devine

centriol cinetic al cozii spermatozoidului.
Centriolul proximal (centriolum proximale), situat sub capitel,
prezint o forma de cilindru (cu o lungime de 500nm i un diametru de
250nm) i o nclinaie de 70, n raport cu axa lung a cozii. Are peretele
format din 9 triplete (A,B,C) de microtubuli.
Mitocondriile sunt alungite i dispuse n partea distal a gtului,
nconjurnd dispozitivul fibrilar.
Dispozitivul fibrilar este compus din 9 fibrile dense (aflate n
continuarea coloanelor segmentare), care nconjoar un complex filamentos
axial (axonema), alctuit din 10 perechi de microtubuli, din care o pereche
este central, iar celelalte 9 perechi sunt dispuse periferic. (Fig. 9.6)

Spermatozoizii imaturi prezint la limita dintre piesa de comjugare i piesa

inmtermediar o pictur citoplasmatic, care va fi fagocitat de celulele
Sertoli pn la maturarea complet.
b) Piesa intermediara (pars intermedia), cu lungimi variabile (5 10
m), este delimitat ntre cele dou jumati (proximal i distal) ale
centriolului distal. Cuprinde n structura sa: 1. o membrana plasmatic
periferic, ce prezint o margine inelar (annulus) - la limita cu piesa
principal; 2. o pelicula de citoplasm, n care se gsesc particule mici ce
formeaz rezerva de glicogen a spermatozoidului; 3. mitocondriile - dispuse
helicoidal ntr-un filament dublu spiral (cu circa 25 de ture a 3-4 mitocondrii
fiecare), ce formeaz o teac mitocondrial (vagina mitochondrialis); 4.
fibre externe dense (fibra densa), groase si masive, n numar de nou, inegal
dezvoltate i n contact cu fibrele satelite axolemei, plasate central; 5.
filamentul axial (filamentum axiale s. axonema), compus din 9 dublete
periferice (diplomicrotubulus periphericus) si o pereche de filamente centrale
(microtubulus centralis).
Piesa intermediar joac rolul de central energetic a
spermatozoidului.
c) Piesa principal apare de aproximativ 9 ori mai lung dect piesa
intermediar. Cuprinde: 1. - filamentul axial (axonema), format din cele 10
perechi (9+1) de microtubuli ; 2. nou fibre dense (fibra densa) externe,
groase; 3. - teaca fibroas (vagina fibrosa) format din fibre circumfereniale
(costa fibrosa), care se prind prin capetele lor n dou coloane longitudinale
(columna longitudinalis) ce reprezint ngrori ale tecii, diametral opuse; 4. -

Ciclul spermatogenetic (spermatogenesis) are o durat variabil la

diverse specii (13,5 zile la taur, 10,4 la berbec, 8 zile la vier), iar dintr-o
spermatogonie rezult un numar variabil de spermatide (112 la oarece, 96
la hamster i 64 la taur i berbec).
Desfurarea spermatogenezei este influenat de numeroi factori
fizici, fiziologici, farmacologici, umorali. Astfel, temperatura ridicat,
aplicat local sau n condiii generale produce oligospermie, iar razele X i
gama atac spermatogoniile si cromozomii spermatidelor. Alimentaia
deficitar n proteine sau vitamine (A, E), unii hormoni (FSH, LH) i sistemul
nervos pot interveni, modificnd funcia spermatogenetic.
Pentru a-si ndeplini functia de reproducere, spermatozoizii trebuie
s prezinte: mobilitate, putere fecundant i vitalitate.
Mobilitatea se datoreaz prezenei tubulilor n organizarea flagelului
(cozii) spermatozoidului. Suprimarea mobilitaii mpiedic, n mod ireversibil
fecundaia. Viteza de deplasare difer n funcie de specie, atingnd: 6-7
mm/minut la taur; 5-10 mm/minut la berbec; 4-6 mm/minut la armasar; 3-6
mm/minut la vier.
Puterea fecundanta sau capacitatea vital (capacitaia) este o
nsuire pe care spermatozoizii o dobndesc cnd ajung n cile genitale
femele, dup o perioad de aclimatizare. Aceast nsuire se dobndete
prin pierderea unei caliti antagoniste (decapacitaia) pe care
spermatozoizii o folosesc ca protecie n drumul lor prin cile genitale
mascule. Ea permite spermatozoidului s ptrund n ovul sau n mucoasa
uterin.

9.1.2. Ovogeneza
Ovogeneza (ovogenesis) cuprinde complexul de transformri prin
care trece ovogonia (celula germinativ iniial) pn devine ovul (ovocit)
apt de fecundare.
Se petrece n zona cortical a ovarului, n interiorul unor formaiuni
histologice complexe, denumite foliculi ovarieni.
n ovogenez sunt parcurse trei perioade: germinativ, de cretere
i de maturare.
1. Perioada germinativ (de nmulire) se desfoar n timpul vieii
embrionare, avnd ca punct de plecare ovogoniile din ovarul embrionar. n
perioada embrio-fetal, n ovar se formeaz ntreaga rezerv de celule
sexuale femele, pentru toat viaa (ce cuprinde circa 60.000 - 100.000
ovocite de ordinul I). Ovocitele de ordinul I (ovocytus primarius) rmn n
stare de laten biologic (status quiescent) pn la pubertate, fiind blocate
n profaza diviziunii meiotice (reducionale).
2. Perioada de cretere variaz foarte mult ca durat, ncepnd
imediat dupa natere i ajungnd s se ntind pe ani de zile (exemplu: la
hominide pn la 20-30 de ani). n cursul acestei perioade se produce i se
acumuleaz vitelus.
La psri, perioada de vitelogeneza cuprinde dou intervale: a) unul
lung de circa 180 de zile, la gin, n care se realizeaz 5-10% din rezerv
de vitelus i b) altul mai scurt, de circa 5 -12 zile, n care se sintetizeaz 90-

Vitelogeneza const n formarea de plcue de vitelus n citoplasma

ovociilor primari. Vitelusul este format din substane nutritive (glicogen,
lipide, fosfolipide) care sunt produse n ficat (vitelus exogen) apoi sunt
vehiculate de snge i pinocitate n ovocite prin microvilozitile care apar
la suprafaa membranei acestor celule.
3. Perioada de maturare a ovocitelor ncepe la pubertatea
animalului. Cuprinde cele dou diviziuni de maturare: a) prima diviziune,
care este meiotic (reducionala), din ovocitul de ordinul I rezultnd dou
celule inegale: una de talie mare (haploid) - ovocitul de ordinul II (ovocytus
secundarius) i alta de talie mic - primul globul (polocytus primarius), ce
se poate divide; b) a doua diviziune de maturare este mitotic, din ovocitul
secundar (ovocit de ordinul II) rezultnd ovulul (ovocitul) matur i al doilea
globul polar
(polocytus secundarius).
n acest fel, la sfritul perioadei
de maturare, dintr-un ovocit primar,
rezult un ovocit cu set haploid de
cromozomi i trei globuli polari. (Fig. 9.7)

Dehiscena (ruperea) folicular i eliberarea ovocitelor are loc n

momentul n care ovocitul primar (ovocitul de ordinul I) si formeaz fusul
de diviziune, intrnd n prima diviziune de maturare (meiotica), nct
pavilionul oviductului capteaz deja ovocitul secundar (ovocitul de ordinul
II). Posibilitile de supravieuire ale ovocitului secundar (ovocitul de ordinul
II) sunt de 24-48 de ore, iar a dou diviziune de maturare se finalizeaz
numai dac a avut loc penetraia zonei pelucide de ctre spermatozoizi. n
caz contrar, ovocitul secundar (de ordinul II) rmne blocat n metafaza
celei de-a doua diviziuni de maturare.
n momentul dehiscenei, ovocitul secundar (ovocitul de ordinul II)
este nconjurat de ovolem, zona pelucida i coroana radiata.
Ovolema (ovolema sau membrana vitelin) este o membrana
citoplasmatic cu numeroi microvili.
Zona pelucid (zona pellucida) este o zon mucopoliglucidic,
traversat de microvili lungi ai celulelor foliculare, ce ajung la microvilii
ovolemei.
Coroana radiata (corona radiata) este format din 1-2 rnduri de
celule foliculare.

9.1.2.1. Morfologia ovulei

Ovula sau ovocitul matur (ovum) reprezint celula sexual femel
matur, haploid, cu o form sferic i cu un diametru de pn la 200 m.
Conine, pe lng materialul genetic inclus n cromozomi i material nutritiv
necesar pentru perioada iniial de dezvoltare a embrionului.
a) Nucleul celulei apare sferic, veziculos, nucleolat, cu cromatina fin
granular, situat central sau excentric i delimitat de o membran dubl cu
pori, n al cror lumen este prezent un material electronodens, ce intervine
selectiv n reglarea tranzitului nucleo-citoplasmatic. Prin porii membranei
nucleare trec n citoplasm granule electronodense de 350.(Fig.9. 8)

b) Citoplasma ovulei (ovoplasma) este acidofil i fin granular. Conine, pe

lng organitele comune, aglomerate n zona perinuclear, mult ARN liber
i nucleul vitelin (Balbiani) (deuteroplasma s. vitellus), o formaiune
ovoid format din mitocondrii, dictiozomi i lamele inelare. Mitocondriile
alctuiesc o coroan perinuclear incomplet. La bovidee, mitocondriile au
o prelungire n forma de glug, ce cuprinde n concavitatea ei o picatur
lipidic. Cristele mitocondriale lipsesc n prelungire dar se menin n restul
mitocondriei. (Fig.8.9)

c) Complexul Golgi se extinde i n zona cortical a citoplasmei,

unde este constituit din granule corticale, nconjurate de endomembrane.
Granulele corticale particip la formarea lichidului perivitelin, ndeplinind un
rol important n fecundaie. Complexul Golgi particip activ la concentrarea
vitelusului i la sinteza lipidelor, procese n care sunt implicate i
mitocondriile.
Reticulul endoplasmic este de tip neted, cu elemente dispuse lax.
Ribozomii sunt liberi sau ataai reticulului endoplasmic. De asemenea, sunt
prezeni n citoplasm: lizozomi primari, corpi multiveziculari (ca urmare a
pinocitozei intense) i numeroase granule (plcue de vitelus).
d) Membrana vitelina a ovocitului ( ovolemma s.plamalemma) este
de natura lipoproteic trilaminat i prezint numeroase prelungiri - sub
forma de microviloziti fine, care se angreneaz cu prelungirile rare i
groase ale celulelor foliculare. Se pare c formaiunile microviloase nu sunt
permanente, apariia lor fiind legat de stadiul funcional al celulei. La
nivelul membranei
viteline se observ numeroase vezicule
pinocitice, ceea ce demonstreaz schimbul
intens de substane ce se efectueaz ntre
celulele foliculare ale coroanei radiata i
ovul. (Fig.9.10)

Zona pelucida (zona pellucida) prezint un aspect striat, datorat

microvilozitilor membranei viteline i ale celulelor foliculare, n care se
realizeaz jonciuni celulare de tipul zonulei adherens.
Capacitatea vital a gametului femel difer, n raport cu specia i se
menine: 10 ore la iap, 20 ore la vac, 5 ore la oaie, 12 ore la scroaf i 6
ore la iepuroaic.
Clasificarea ovocitelor se face n funcie de cantitatea de vitelus pe
care o conin, existnd urmtoarele tipuri: oligolecite, lecite, telolecite i
centrolecite.
Ovulele oligolecite conin vitelus n cantitate mic, iar segmentaia lor este
total i inegal. Sunt prezente la cefalocordate (la amfioxus)si la mamifere.
(Fig.9.11)

Ovulele lecite sau mezolecite se ntlnesc la batracieni i cuprind

mai mult vitelus dect cele oligolecite. Vitelusul se aglomereaz la polul
vitelin sau vegetativ al celulei, n timp ce polul vitelin al celulei este srac n
vitelus i conine nucleul. Segmentaia este total, rezultnd blastomere
inegale.
Ovulele telolecite sunt caracteristice petilor, reptilelor i psrilor.
Vitelusul, n cantitate mare, ocup aproape ntreaga mas a ovulei, n timp
ce nucleul (sau vezicula germinativ) mpreun cu o cantitate redus de
citoplasm formeaza discul germinativ. Segmentaia este parial i
discoidal interesnd numai
Ovulele centrolecite sunt caracteristice artropodelor. Vitelusul
nutritiv ocupa centrul ovulei, n timp ce vitelusul formativ (hialoplasma)
formeaz un strat periferic subire. Segmentaia intereseaz numai vitelusul
formativ, aprnd de tip superficial.
9.2.FECUNDAIA
Fecundatia este un proces biologic complex, format dintr-o
succesiune de fenomene interdependente prin care, cei doi gamei de sex
opus (spermatozoidul i ovula) se contopesc i se asimileaz reciproc,
rezultnd zigotul (sau oul), prima celula a unui viitor organism.

Fazele fecundaiei

Fecundaia se realizeaz n trei faze succesive: de apropiere, de

penetraie i de amfimixie.
a) Faza de apropiere are loc datorit atraciei reciproce dintre cei doi
gamei ntruct membrana pelucida a ovocitului conine o glicoprotein
denumit fertilizin sau ginogamon, care reacioneaz cu o protein acid
de pe suprafaa spermatozoizilor, denumit antifertilizin sau androgamon.
n felul acesta se produce o reacie similar reaciei dintre antigen i
anticorp.
S-a demonstrat ca anticorpii IgG pot impiedica ataarea
spermatozoizilor i penetrarea zonei pelucide (denumit i membran
pelucida). Pot aprea autoanticorpi pentru zona pellucida care s genereze
infecunditate.
Spermatozoizii care au capacitate fecundant (capacitatio) produc
disocierea celulelor foliculare din coroana radiata cu ajutorul
hialuronidazei, deschiznd drumul spre membrana (zona) pelucida. La vac,
oaie, capr disocierea are loc imediat dup ovulaie. Disocierea celulelor
foliculare nu este specific, realizndu-se i sub aciunea enzimelor eliberate
de spermatozoizii altor specii.
Apropierea celor doi gameti are loc n treimea superioara
oviductului. Ataarea spermatozoidului de zona pelulucida are loc n urma
formrii unor legturi ntre o glicoprotein din membrana plamatic a
spermatozoidului (o galactosyltransferaz) i receptorii pentru aceasta din

b) Faza de penetraie (penetratio spermii) const n ptrunderea ctorva

spermatozoizi, numai din aceeai specie sau din specii foarte apropiate, ca
de exemplu: cal-mgar. Spermatozoizii trec prin zona (membrana)
pelucida i ajung n spaiul perivitelin (spatium perivitellinum), plin cu
lichid perivitelin (liquor perivitellinus).
n urma contactului dintre acrozom i membrana (zona) pelucida,
se rupe membrana acrozomului (reactio acxrosomalis), eliberndu-se
acrozina (sau hialuronidaza), ce produce o hidroliz localizat, realiznd un
canal (via spermatica) tangenial la ovolem. Micrile spermatozoizilor
(motus spermii) de traversare a zonei pelucide dureaz circa 5 minute.
Ovocita reacioneaz la ptrunderea unui numr redus de
spermatozoizi n zona pelucida, prin realizarea celei de-a doua diviziuni de
maturare, rezultnd al doilea globul polar (polocitul secundar), celul care
va fi eliminat i ovula, apt pentru fecundare. Dupa ce primii
spermatozoizi au ptruns n zona pelucid se produce reacia zonei
pelucide, adic: granulele corticale din ovocit i vars coninutul n spatiul
perivitelin, ceea ce face ca din acest moment zona pelucida s devin
impermeabil i rezistent fa de acrozina altor spermatozoizi.
Impermeabilizarea se poate realiza lent, in circa 60 secunde (la vac, iap,
oaie, scroaf, cea, hamster), sau rapid n1-2 secunde (la iepuroaic). n
felul acesta se asigura fecundaia monospermic (monospermia) i se
evit polispermia (polyspermia).

Spermatozoizii cei mai viguroi se orienteaz spre orificiul membranei

viteline prin care a fost expulzat cel de-al doilea globul polar. Numai un
singur spermatozoid, denumit spermatozoid privilegiat ptrunde n ovul.
La taurine, ovine, canide i leporide, n ovul ptrunde numai capul
spermatozoidului, gtul i coada rmnnd n zona pelucida. La hominide i
la unele roztoare ( oarece, cobai) penetraia este total.
La mamifere, producerea contactului dintre cei doi gamei i
realizarea fecundaiei depinde de supravieuirea spermatozoizilor, depui n
cile genitale femele. Supravietuirea variaz n funcie de specie, fiind de:
44 ore la armsar, 25-30 ore la taur, 30-35 ore la berbec, 8 -12 ore la iepure.
c) Faza de amfimixie sau concepie (conceptio) are loc dup
ptrunderea spermatozoidului n ovul. n aceast faz se produc
urmtoarele fenomene:
1. capul spermatozoidului migreaz spre centrul ovulului, unde se afla
nucleul, suferind o rotaie de 180, nct acrozomul se orienteaz spre
membrana vitelin, iar gtul spermatozoidului se orienteaz spre nucleul
ovulului;
2. centriolul proximal se detaeaz de baza capului, formnd spermocentrul,
iar citoplasma ovulei se condenseaz n jurul spermocentrului sub form de
raze citoplasmatice, dnd natere la asterul spermatic (aster
spermaticus);
3. capul spermatozoidului, respectiv nucleul, ncepe sa asimileze foarte
repede citoplasma ovulei, crete n volum i devine pronucleu mascul
(pronucleus masculinus); 4. nucleul ovulei sufer modificri infrastructurale

componentele infrastructurale i biochimice ale celor doi pronuclei,

obinndu-se astfel o celula nou, zigotul (zygota s. conceptus) sau oul
fertilizat (ovum fertilizatum s.spermovium).
n timpul amfimixiei se reface setul diploid al zigotului, realiznduse setul de cromozomi caracteristic speciei i stabilindu-se bazele
ereditii ale noului organism. Se determin sexul i se declaneaz
segmentaia.
Durata total a fecundaiei variaz n funcie de specie, fiind n
medie de 12-16 ore, la animalele domestice. Cel mai mare numr de ore
(10-12 ore) este ocupat de fenomenele care au loc la nivelul pronucleilor.
Exist unle specii de animale nevertebrate (albine,furnici, purici de
plante) sau vertebrate (o specie de oprl, Lacerta saxatilis), la care
dezvoltarea ovulei se poate produce fr a fi avut loc fecundaia, prin
fenomenul de partenogenez. De asemenea, la unele specii de peti (la
caras - Carassius auratus gibelio), a fost observat fenomenul de
pseudogamie sau ginogenez , o form de fecundaie incomplet, cnd nu
se produce amfimixia, dei spermatozoidul ptrunde n ovul. Puii rezultai
au motenit i unele caractere de la tai, ceea ce demonstrez influena
substanelor din spermatozoizi asupra metabolismului i dezvoltrii
oului,chiar i n cazul, n care nu s-a produs amfimixia.
n patologia fecundaiei se ntlnesc aspecte precum: a)
himerismul - cnd are loc o fecundaie dispermic: un spermatozoid face
amfimixie cu nucleul ovulei, iar cellalt spermatozoid face amfimixie cu
nucleul globulului polar, antrenndu-se ntr-o dezvoltare anarhic; b)

9.3. SEGMENTATIA
Prin segmentaie se nelege ansamblul diviziunilor pe care le
urmeaz zigotul i n urma crora se realizeaz edificii pluricelulare. Se
declaneaz la un interval variabil de timp dup fecundare (la circa 30 de
ore la hominide).La sfritul ei embrionul este schiat, fiind constituit din
primele dou foie embrionare. Se desfaoar n timp ce zigotul coboar
prin oviduct n uter i cuprinde urmtoarele stadii embrionare: morula,
blastula, gastrula i neurula.
Ca model didactic pentru explicarea segmentaiei, se prezint
segmentaia la amfioxus (de la grecescul amphi = dublu; oxys = ascuit),
Branchiostoma lanceolatum, un cefalocordat. Este cea mai simpl
segmentaie i prezint asemnri cu cea de la pasre i mamifere
9.3.1.Segmentaia la amfioxus
Amfioxus are ovul de tip oligolecit, care va
realiza o segmentaie total holoblastic
(fissio holoblastica s. fissio totalis) i inegal
( fissio inequalis) , parcurgnd fazele de:
morul, blastul, gastrul i neurul.
(Fig. 9.13)

9.3.1.1.. Faza de morula

Faza de morul (morulatio) ncepe la cteva ore dup fecundare,
cnd zigotul (zygota s. conceptus) sau celula ou intr n diviziune. Prima
diviziune se realizeaz dup un plan vertical, meridional (planul fissionis
meridionalis), rezultnd dou blastomere (blastomerus) egale, al cror
volum total nu depsete volumul zigotului (a celulei ou). A doua diviziune
este tot meridional (vertical), ns perpendicular pe planul primei
diviziuni, rezultnd patru blastomere. A treia diviziune este transversal,
planul de diviziune fiind paralel cu ecuatorul, dar situat supraecuatorial
(planum fissionis tangentiale). Rezult opt blastomere inegale: patru
blastomere mici, micromere (micromerus), n emisfera polului animal i
patru blastomere mai mari, macromere (macromerus), situate n emisfera
polului vegetativ. Prin diviziunile ulterioare, numrul blastomerelor crete n
proporie geometric (16, 32, 64, 128) att n cazul micromerelor ct i n al
macromerelor. Celulele rezultate n urma acestor diviziuni vor genera o
formaiune sferoidal (spheroideum s. sphaeroideum), plin de celule cu
aspect muriform, denumit morula (morula).
Morula este mai mare, ca volum, dect celula ou din care s-a
format. n cadrul ei, micromerele se dispun spre polul animal, iar
macromerele spre polul vegetal al morulei.

Se consider c, pn n stadiul de cteva (8-10) blastomere, toate

celelele sunt omnipotente (cellula omnipotens) sau pluripotente (cellula
pluripotents), avnd aceeai valoare n difereniere. n acest stadiu celulele
sunt nedeterminate (cellula indetermniata) i indiferent de poziia lor, dac
sunt detaate i puse n condiii propice, evolueaz pn la sfritul
dezvoltrii embrionare, putnd genernd un organism ntreg.
9.3.1.2. Faza de blastula (blastulatio)
Blastomerele din interiorul morulei ncep s produc un lichid
blastocelic ce le mpinge la periferie, unde se dispun sub forma unui singur
strat de celule, ce delimiteaz cavitatea blastocelic (cavum blastocystis).
Rezult, astfel, stadiul monoblastic (blastocystis unilaminaris) sau blastula
(blastula) s.blastocystis).
Blastula sau blastocistul (blastocystis) cuprinde circa 128
blastomere, Este sferoidal i nu depsete, la amfiox, volumul iniial al
zigotului. n cazul acestei formaiuni, micromerele au mai puin vitelus i
formeaz peretele emisferei animale, iar macromerele sunt mai bogate n
vitelus, alctuind peretele emisferei vegetale.
n aceasta faz se produce determinarea (determinatio) prin poziie,
blastomerele ocupnd prin diviziuni repetate, anumite poziii. Blastomerele
vor evolua diferit,n funcie de factorii de mediu ambiant i n raport cu
interrelatiile intercelulare. Aceasta faz este denumita i preludiul
diferenierii, pentru ca, dup intrarea celulelor n faza de determinare,
conform poziiilor i relaiilor intercelulare noi, n fiecare celul sau ntr-un

9.3.1.3. Faza de gastrul (gastrulatio)

Faza de gastrul (gastrulatio) se caracterizeaz printr-o
proliferare intens, o cretere volumetric i prin deplasri
morfogenetice (motus morphogenetici) ample de celule sau grupuri de
celule, n urma crora rezult foiele embrionare (strata germinalia).
Micromerele se divid mai rapid i alunec (immigratio) la
suprafaa blastulei prin epibolie (epibolia), realiznd foia celular
extern (epiblastus) sau ectoblastul (ectoblastus). Macromerele care
conin vitelusul se divid mai puin intens i se invagineaz (invaginatio),
prin embolie, realiznd foia intern (endoderma) sau endoblastul
(endoblastus). Embolia const ntr-o invaginanare n cavitatea
blastocelic a macromerelor. Cavitatea format n urma invaginrii se
numete arhenteron i comunic cu exteriorul prin blastopor, care
marcheaz extremitatea caudal a corpului viitorului animal, fiind
delimitat de dou buze, una superioar, alta inferioar. Spre sfritul
fazei are loc o alungire (elongatio) a gastrulei, n sensul axului anteroposterior.
Factorii ce intervin n diferenierea i dezvoltarea embrionului.
n evenimentele complexe ale diferenierii i dezvoltrii
embrionare, un rol important, n afara controlului genetic permanent, l
au influenele din mediul extracelular, interaciunea celulelor nvecinate,
micarile celulare morfogenetice i adezivitatea celular.

Astfel, accesibilitatea diferit la factorii din mediul extracelular,

determin potenialiti evolutive diferite. Acioneaz un gradient de
mediu, care se refer la faptul c lichidul extracelular este mai bogat n
substane nutritive la periferia masei de celule, n timp ce n centrul
masei de celule este mai srac n substante nutritive i mai bogat n
produi de excreie ai celulelor.
Interaciunile celulare cu rol inductiv apar foarte de timpuriu n
embriogenez, nc din faza de 8 blastomere. n etapa de morul,
celulele sunt cuplate electric, membranele celulare avnd o foarte mare
permeabilitate ionic. Curentul electric realizeaz un cuplaj, chiar n
absena jonciunilor specializate. ntr-o faz mai avansat,
permeabilitatea pentru ioni scade foarte mult, rmnnd nealterate la
nivelul jonciunilor de tip gap, care apar imediat dupa primele
determinri.
Micrile celulare (motus morphogenetici) sunt foarte intense n
embriogenez, fiind determinate de factori greu de definit, asemntori,
ca efect, cu factorii chimio-tactici pentru leucocite. Micrile celulare
ncep n faza de gastrul i permit celulelor s ajung n contact cu un
alt tip de celule cu care pot stabili interaciuni cu rol inductiv.
Adezivitatea celular joac un rol deosebit n evenimentele
complexe ale diferenierii i dezvoltrii embrionare, fiind mediat de
molecule de proteine, denumite molecule de adezivitate (n limba
engleza: cell adhesion molecules, prescurtat: CAM). Acestea aparin

Moleculele adezivitii celulare activeaz selectiv n cursul

desfurrii proceselor dinamice care au loc, modificnd
comportamentul celulelor angajate n micari morfogenetice. Ele au
fost identificate sau izolate prin metode ale imunologiei i au fost
definite dup celulele pe care au fost depistate, astfel, existnd:
molecule de adezivitate interneuronale ( N-CAM ), molecule ale
adezivitatii celulelor hepatice ( L-CAM ) i molecule ale adezivitatii
dintre neuron i nevroglie ( NG-CAM ). Ele sunt glicoproteine, iar N-CAM
conin cantitti foarte mari de acid sialic. N-CAM, L-CAM si NG-CAM nu
au specificitate ncruciat, deoarece nu se leag ntre ele pentru a

n funcie de repartiia moleculelor adezivitii celulare (CAM),

embriologii au conceput hrti ce indic esuturile i structurile care se
vor forma din fiecare regiune. Astfel, regiunile blastocistului care
exprim N-CAM vor da natere plcii neurale, notocordului i somitelor,
iar cele care exprim L-CAM vor genera ectodermul non-neural i
endodermul. Cu ajutorul metodelor de imunofluorescen s-a observat
c 2/3 din suprafaa blastomerului este pozitiv pentru cele dou tipuri
de molecule ale adezivitii.
9.3.1.4. Faza de neurul
Faza de neurul (neurulatio) sau perioada iniial a anului
neural (periodus sulci neuralis initialis) se caracterizeaz prin formarea
din ectoblast, n mod succesiv a plcii neurale (lamina neuralis), a
canalului i a tubului neural . Astfel, faza neurulrii marcheaz
constituirea tubului nervos, dar, totodat i nceputul histogenezei,
precum i a diferenierii primordiilor de organe. n aceast faz se
petrec dou evenimente morfogenetice majore:
a) formarea tubului neural
b) cordomezoblastului.

a) Formarea tubului neural

Micromerele ectoblastice din zona dorso-central a embrionului
devin mai nalte dect ectoblastul, se ngroa, formndu-se placa sau
lama neural (neuroectoblastul) orientat n axul longitudinal al
embrionului.

Celulele plcii neurale se divid n continuare cu mare

intensitate, nct placa neural se ndoaie i se invagineaz puin,
formnd jgheabul (sulcus neuralis) i canalul neural (canalis neuralis)
cu forma literei U sau V (pe seciune transversal) delimitat de
crestele neurale (crista neuralis). Ulterior, jgheabul neural se nchide
prin apropierea i sudarea marginilor sale superioare, realizndu-se

b) Formarea cordomezoblastului
Se desfoar concomitent cu formarea tubului neural i const
n formarea coardei dorsale i a mezoblastului primar.
Coarda dorsal sau notocordul (notochorda) se formeaz n
axul sagital dorsal al endoblastului prin diviziuni rapide i proliferri
puternice, dup care se detaeaz de endoblast i se dispune ventral
de tubul neural.
Concomitent, paramedian se produce o ngroare a celor dou
margini laterale ale jumtii dorsale a endoblastului, realizndu-se
dou creste paramediane cu aspect triunghiular, care se vor detaa de
endoblast i vor forma, pe ambele laturi, mezoblastul primar.
Mezoblastul primar sau mesodermul paraaxial (mesoderma
paraaxiale) se dezvolt, ptrunznd, pe fiecare parte, printre ectoblast
i endoblast, constituind cea de-a treia foi embrionar, ce marcheaz
apariia stadiului triblastic (tridermic), care ncheie embriogeneza,
marcnd trecerea spre histogenez i organogenez.(fig.9.16)

Prin dezvoltarea mezoblastului, vor rezulta trei formaiuni

(somitele, nefrotomul i hipoblastul) dispuse dorso-ventral i iniial
legate ntre ele. Tot din mezoblast deriv i mezenchimul.
Somitele(somiti) apar ca dou mase celulare, triunghiulare pe
seciune transversal ce flancheaz lateral tubul neural i coarda
dorsal. Ele se vor segmenta transversal, printr-un proces denumit
metamerizare. Din somite se vor diferenia: a) miotoamele
(myotomi),din partea dorso-lateral a somitelor, formate din mioblati,
care se vor transforma n fibre musculare; b) sclerotoamele
(sclerotomi),din partea medial a somitelor, din care se vor dezvolta
oasele.
Nefrotomul (nephfrotomi) se segmenteaz transversal (se
metamerizeaz) genernd primordiile (primordia) sau mugurii
embrionari ai aparatului urinar.
Hipoblastul nu se metamerizeaz, ci se delamineaz
(delaminatio) (despic) longitudinal, genernd splanchnopleura i
somatopleura, ce vor delimita cavitatea celomic primar (celoma s.
coeloma) i vor da natere membranelor seroase ale cavitilor (pleura,
peritoneul, pericardul). (Fig.9.16)
Splanchnopleura (splanchnopleura) sau foia visceral va
acoperi intestinul primitiv i toate organele ce se vor forma din el.
Somatopleura (somatopleura) sau foia parietal va cptui ectoblastul
care delimiteaz embrionul.
Mezenchimul (mesenchyma) este un derivat mezoblastic ce se

Din ectoderm (ectoderma) se formeaz: epiderma, epiteliul

mucoasei bucale i anale, sistemul nervos, hipofiza, epifiza,
medulosuprarenala, epiteliul cornean i cristalinian, epiteliul senzorial
auditiv, retina i epiteliul olfactiv. Se remarc apariia unor ngrori
ectoblastice denumite placode: placoda olfactiv, placoda cristalinian
i placoda auditiv.
Placoda olfactiv (placoda olfactoria) difereniaz, prin
evoluie, neuronii olfactivi i celulele de susinere din mucoasa
olfactiv. Placoda cristalinului (placoda lentis) va genera cristalinul, iar
din placoda auditiv (placoda otica)se va diferenia vezicula auditiv
din care se va dezvolta labirintul membranos.
Din mezoderm (mesoderma) se difereniaz: epiteliile rinichilor
i gonadelor, mezoteliile cavitilor pleurale, pericardiace i
peritoneale; endoteliile vaselor sanguine i limfatice; celulele
corticosuprarenalei; celulele Leydig din testicul, celulele luteale ale
ovarului; esuturile conjunctive, sistemul macrofagic monocitar;
scheletul osos; sngele, muchii; vasele; aparatul urinar; unele poriuni
ale aparatelor genitale.
Din endoderm (endoderma) se difereniaz: epiteliile
aparatului respirator (cu excepia mucoasei nazale); epiteliul tubului
digestiv (exceptnd epiteliile cavitii bucale i canalului anal); ficatul,
pancreasul i vezica biliar; glandele tiroid i paratiroid; epiteliul
cavitii timpanice i ale tubei auditive; timusul.

9.3.2.SEGMENTAIA LA PSRI
Datorit oului, care este de tip telolecit, segmentaia este
meroblastic sau parial, iar dup aspectul su este polar sau
discoidal.
La psri, celula sexual femel matur (sau ovulul) este
reprezentat numai de glbenu. Nucleul ovulei este situat la polul
animal al glbenuului, fiind nconjurat de o cantitate redus de
citoplasm activ (sau vitelus formativ) mpreun cu care alctuiete o
formaiune discoidal, denumit discgerminativ (cicatricula) sau pat
germinativ (nucleul Pander). Numai discul germinativ va intra n
segmentaie.
Restul ovoplasmei este format din vitelus alb formativ (ce conine
granule mici, cu compoziie predominant proteic 43%) i din vitelus
galben nutritiv, ce cuprinde granule mari, formate n principal din
lipide i proteine, n cantitate mai redus (28%).

Depunerea vitelusului ncepe de sub discul germinativ, cu un

strat de vitelus alb care se prelungete spre centrul oului cu o
formaiune cu aspect de limb de clopot, denumit latebra Purkinje. n
afara acestui vitelus alb se se dispune un strat de vitelus galben, iar n
continuare are loc o dispunere a celor dou tipuri de vitelus n straturi
concentrice alternative. La periferie, oul este nvelit de o membran
vitelin (de ovolem). (Fig.9.17)

Fecundarea oulor are loc n poriunea iniial a oviductului sau

pe suprafaa ovarului, nainte de a fi acoperit cu albu, membrane
cochiliere i cochilie. Dup fecundare ovula (oul nefecundat) devine ou
fecundat (ovum fertilisatum s. sperovium) sau zigot (zygota s.
conceptus).
nceputul segmentaiei este marcat de apariia unui an linear
ce marcheaz planul de separare dintre cele dou celule fiice, plan ce
cade perpendicular pe suprafaa discului germinativ, fr s-i ating
marginile. Celulele rezultate sunt identice i de talie egal (diviziune
homoplastic). A doua mitoz are anul i planul de separare dispuse
perpendicular pe primul an. n cea de-a treia mitoz apar dou
anuri verticale, ambele perpendiculare pe primul an. Este urmat
de alte diviziuni verticale, rezultnd un singur strat de celule
prismatice, reprezentnd ectoblastul. Formarea primelor dou
blastomere are loc dup 30 de minute de la singamie, iar dup patru
ore embrionul are 8 blastomere, ajungnd la 152 blastomere dup 7
ore.
Segmentarea este sincron, deoarece toate diviziunile celulare
se desfoar simultan. Intercineza este scurt, fr sintez de acizi
nucleici, acetia existnd deja. n plus, vitelusul formativ este bogat n
aminoacizi, enzime, glucide i lipide, asigurnd necesarul proceselor de
multiplicare.

Ectoblastul este desprit de vitelus printr-o cavitate plin de

lichid, denumit cavitatea subgerminal sau de segmentare. Acest
aspect (ectoblastul i cavitatea subgerminal) reprezint stadiul
embrionar monoblastic (comparabil cu blastula de la amfiox), avnd la
psri forma de disc, de unde i denumirea de discoblastul (sau de
disc embrionar sau bnu). (Fig.9. 18)

Privit de sus, discul embrionar apare ca o suprafa relativ

circular care prezint: 1) o zon mai transparent aria pelucid
(area pellucida), situat uor excentric
2) o zon mai ntunecat aria opac (area opaca), ce nconjoar aria
pelucid.
n stadiul diblastic se formeaz endoblastul.
Unele dintre celulele ectoblastice iau form cubic i migreaz la limita
dintre ectoblast i cavitatea subgerminal

n continuare, aceste celule se multiplic i formeaz un strat

continuu subectoblast, denumit hipoblast (hypoblastus), mprind
cavitatea de segmentare n dou spaii, o cavitate blastocelic i o
cavitate subgerminal propiuzis, delimitat ntre vitelus i
hipoblast,umplut cu lichid blastocelic i particule de vitelus. Procesul
de de separare a celulelor ce formeaz hipoblastul se numete
delaminare (delaminatio), iar ectoblastul devine epiblast (epiblastus).
Hipoblastul are un rol temporar, fiind nlocuit de endoblast
(endoblastus). Celulele endoblastice imping celulele hipoblastice in aria
extraembrionar, unde particip la formare peretelui vezicii ombilicale.
Stratul diblastic se realizeaz n intervalul de 24-48 de ore, ct
(Fig.9.19)
dureaz parcurgerea oviductului, pn n momentul eliminarii oului din
corpul psrii (pontei). Evoluia embrionului se oprete prin meninerea
acestuia la 5 7C i continu prin incubaie la 38-39C, n condiii de
umiditate, aerare i ntoarcere periodic.

Procesele de multiplicare celular se reiau dup ase ore de la

nceperea incubaiei,cnd ncepe perioada de gastrulare. Celulele
epiblastice i cele ale hipoblastului realizeaz: micri de convergen
(pentru a forma linia primitiv i nodulul caudal),migrri n profunzime
(n cavitatea blastocelic i n aria extraembrionar), micri de
deplasare lateral (pentru a forma mezoblastul).
Gastrularea la psri cuprinde: formarea nodulului posterior,
formarea liniei primitive cu nodulul anterior, formarea mezodermului,
formarea notocordului i regresia liniei primitive.
Dup 24 de ore de incubaie, discul embrionar (discus embryonicus) i
modific forma, devenind oval (din rotund), apoi cu aspect piriform (cu
lungimea de 3,5-5 mm), prezentnd o extremitate cefalic i o
extremitate caudal, cu o proliferare ectoblastic, de form
triunghiular, cu aspect ntunecat, denumit nodul caudal sau posterior.
Aceast proliferare ectoblastic se prelungete pe linia median, n sens
cranial, formnd linia primitiv (linea primitiva), care este parcurs n
sens longitudinal de o depresiune ngust, denumit anul liniei
primitive (sulcus primitivus). (Fig.9. 20)
Extremitatea cefalic a liniei primitive se termin printr-o
formaiune nodular denumit nodul cranial sau anterior (Hensen)
(nodus primitivus), aprut datorit proliferrilor mai intense. n centrul
nodulului anterior se observ o depresiune denumit foset primitiv

De la nodulul anterior, prin proliferri celulare, ia natere o

formaiune prelungirea cefalic (processus cephalicus s.processus
notochordalis) dirijat cranial, care va ptrunde sub forma unui deget
de mnu ntre ectoblast i endoblast, fr a se atinge limita discului
(plica limtans areae et sulcus limitans disci embryonici). Aceast
prelungire va genera cordomezoblastul, respectiv coarda dorsal
(notochorda) i mezoblastul (mesoderma embryonicum) anterior.
(Fig.20)

Spre deosebire de Amfioxus, unde mezoblastul are origine

endodermic, la psri, mezoblastul se formeaz din ectoblast. (Fig.9.
21, 9.22 )

Exist la psri dou focare de mezoblastogenez:

a)la nivelul liniei primitive, unde are loc o proliferare celular care se
ndreapt spre laturile discului embrionar (mesoderma paraaxiale) i,
ptrunznd ntre ectoblast i endoblast, genereaz o parte a
mezoblastului embrionar (mesoderma embryonicum ) i mezoblastul
extraembrionar (mesoderma extraembryonicum);
b)la nivelul prelungirii cefalice, de unde ia natere, aproape n totalitate
mezoblastul ce invadeaz discul embrionar, genernd coarda
dorsal i mezoblastul anterior (mesoderma capitis).

Mezoblastul anterior, situat pe prile laterale ale coardei

dorsale formeaz lamele mezodermale (mesoderma laterale) care vor
evolua n somite, nefrotoame i lame laterale. Printr-un proces de clivaj,
din lamele laterale apare cavitatea celomic (cavum celomicum)
delimitat de: a) somatopleur, format din elementele celulare
mezoblastice aflate n contact cu ectoblastul i de b) splanchnopleur,
aflat n contact cu endoblastul. (Fig.9.23)
Neurulaia se desfoar n mod asemntor cu cea de la
amfiox. Ectoblastul situat la nivelul prelungirii cefalice (median i oral
de nodul anterior), va genera prin ngrori proliferative, placa neural,
anul neural, canalul (tubul) neural i crestele neurale.
n partea anterioar a extremitii cefalice a discului embrionar, n aria
extraembrionar vascular apare o formaiune cu aspect semilunar
semiluna gonocitar sau conul germinativ, ce constituie locul de
difereniere a celulelor gonocitare la psri.

La incheierea stadiului de neurul, embrionul capt forma

literei C i se delimiteaz de sacul vitelin, de care va rmne ataat
prin canalul vitelin. Formarea corpului embrionului se realizeaz n dou
etape: n prima etap, tubul neural crete mai intens dect ectodermul
i endodermul,aparnd un buzunar subencefalic i un proces cranial; n
etapa a doua, capul i corpul embrionului se delimiteaz de zona
extraembrionar, n ziua a IIIa de incubaie.

9.3.3.SEGMENTAIA LA MAMIFERE
Prezint particulariti generate de faptul c la mamifere oul
este oligolecit. Segmentaia este total (ntreaga mas a oului intr n
diviziune), subegal (rezultnd blastomere aproape egale ca mrime) i
de tip asincron (mitozele se succed fr o anumit ordine n timp).
Prezint trei perioade:
1) o perioad iniial, asemntoare cu segmentaia de la amfioxus;
2) o perioad specific mamiferelor
3) o perioad asemntoare cu segmentaia la psri.
Prima diviziune a oului duce la formarea unei celule voluminoase
macromera (macromerus), cu aspect clar i a unei celule mici,
micromera (micromerus), ntunecat, ambele ocupnd spaiul delimitat
de zona pelucid. (Fig.9.24)

Macromera se divide naintea micromerei, rezultnd stadiul cu

3 blastomere (foarte scurt ca existen), pentru ca, imediat, unul din
blastomerele clare (macromere) se divide, rezultnd stadiul de 4
blastomere, dintre care 3 sunt clare (macromere) i una este ntunecat
(micromer). n continuare, ritmul de diviziune al blastomerelor devine
cu totul neregulat, iar planurile de segmentaie nu sunt ordonate
spaial, nct dispar i diferenele volumetrice ntre blastomerele clare
i cele ntunecate.
n final se edific morula (morula), alctuit dintr-un bloc
compact de celulentunecate, cu contururi poligonale.
Diferena fa de ceea ce se ntmpl la amfiox, const n
aceea c micromerele i macromerele nu se polarizeaz la antipozi, nici
n morul, nici n blastul. Astfel, micromerele se dispun periferic
nvelind macromerele i genernd trofoblastul (trophoblastus), ce va
servi la hrnirea embrionului pn la formarea placentei. Macromerele
se dispun central, alctuind embrioblastul embrionar (embryoblastus
s.massa cellularis interna) sau butonul embrionar.
Toate transformrile desfurate pn n acest moment se
petrec n spaiul delimitat de membrana pelucid, care se va subia
treptat i va dispare definitiv. Prin dispariia membranei pelucide,
trofoblastul ia contact intim cu membrana uterin, intervenind ulterior
n nutriia embrionului.

Celulele embrioblastului secret un lichid albuminos, care se

acumuleaz ntr-o cavitate, denumit lecitocel, ce mpinge
macromerele spre polul superior (animal). La acest pol, macromerele
vor forma un mugure embrionar (nodus embryonicus s. massa
embryonica), suspendat parc de trofoblast, asemntor unei picturi
de ap condensat pe tavan.
Aceast formaiune ce cuprinde trofoblastul (format din
micromere dispuse periferic), lecitocelul i mugurele embrionar poart
denumirea de blastocist (blastocystis s. blastula) i este analog
blastulei de la amfiox, aprnd dup aproximativ 7 zile de la
fecundaie. (Fig.9.25)

Blastocistul ajunge n cavitatea uterin i se fixeaz de mucoasa

uterin prin procesul de nidaie (la om i la roztoare) sau implantaie
(la restul animalelor).
Concomitent cu nceputul nidaiei sau implantaiei ncep procesele de
difereniere n butonul embrionar i n trofoblast.
Din trofoblast se vor diferenia 2 straturi: a) un strat extern,
sinciiotrofoblastul (sycytiotrophoblastus), alctuit din celule cu limite
celulare slabe i cu o citoplasm mai ntunecat; i b) un strat intern,
citotrofoblastul (cytotrophoblastus), format din celule cu limite distincte.
Ca rezultat al diferenierilor ulterioare, din trofoblast se va forma
componenta fetal a placentei, iar din butonul embrionar se vor
diferenia cele trei foie embrionare: ectoblastul, endoblastul i
mezoblastul.
Gastrulaia

La mamiferele placentare, gastrulaia se desfoar n dou

etape: n prima etap se formeaz ectoblastul i endoblastul, iar n a
doua mezoblastul. (Fig.9.26)

Formarea ectoblastului i endoblastului.

Din stratul unic de macromere prismatice care reprezint
ectoblastul se difereniaz pe faa sa profund cteva celule mai
intunecate. Acestea se vor nmuli i vor genera, similar cu ceea ce se
ntmpl la psri, un al doilea strat, format din celule turtite, denumit
endoblast. Apare, n acest fel, stadiul diblastic, care datorit aspectului
su se mai numete i gastrodisc, sau pat embrionar. Odat ce
endoblastul s-a format complet i cptuete ntreaga cavitate a a
lecitocelului, n blocul de celule care formeaz buttonul embrionar se
produce o clivare (delaminatio), aprnd un spaiu nou, cavitatea
amniotic (cavum amnii).

La suine,ovine, cervide i leporide, ectoblastul se formeaz din

podeaua cavitii amniotice,disprd tavanul acesteia mpreun cu
trofoblastul adiacent.Tavanul cavitii amniotice rmne intact la cobai,
oarece, obolan, veveri, arici i liliac, unde formeaz ectoblastul, ce
este acoperit n totalitate de trofoblast. La ecvine, taurine i carnivore,
nu apare cavitate amniotic primar, iar ectoblastul se formeaz din
celulele superficiale ale butonului embrionar.(Fig.9. 27)
n stadiul incipient al gastrulaiei, cnd ectoblastul i
endoblastul sunt complet formate, aria embrionar ( cmp embrionar
sau zon embriogen ) are un aspect piriform, cu extremitatea caudal
mai ascuit i cu cea cranial mai rotunjit. La extremitatea caudal,
se realizeaz prin proliferare, o formaiune mai opac, denumit nodul
posterior, ce se continu n sens cranial cu linia primitiv. La mijlocul
ariei embrionare, linia primitiv prezint o dilataie, nodulul anterior
(Hensen), dup care se continu spre extremitatea cefalic cu
prelungirea cefalic. (Fig.9.28)
De pe prile laterale ale liniei primitive, se desprind
numeroase celule cu contur neregulat (stelat), ce vor forma
mezoblastul (mesoblastus), ntre ectoblast i endoblast.

Mezoblastul embrionar prezint trei poriuni distincte: a) o

poriune cefalic, nesegmentat; b) o poriune mijlocie, sau
mezoblastul trunchiului; c) o poriune caudal, nesegmentat.
Mezoblastul trunchiului cuprinde trei zone (regiuni) distincte:
1) o zon dorsal;
2) o zon intermediar;
3) o zon lateral. (Fig.9.29)
1) Zona dorsal se va fragmenta transversal, genernd
somitele (somiti). Fiecare somit prezint, la rndul ei, trei poriuni:
a) miotomul (myotomus), poriunea medio-dorsal din care vor
lua natere mioblatii i ulterior muchii;
b) sclerotomul (sclerotomus), poriunea medio-ventral, din care
se
desprind celulele mezenchimale,
care migreaz n jurul tubului neural, structurnd mezenchimul
(mesenchyma);
c) dermatomul (dermatomus), poriunea lateral a somitei care
va
genera dermul (dermis) i hipodermul.
2) Zona intermediar (zona nefrogen) (mesoderma
intermedium) se segmenteaz transversal n veziculele nefrogene ale
pronefrosului, ale mezonefrosului i ale metanefrosului.

3) Zona lateral a mezoblastului (mesoderma laterale) se

cliveaz, dnd splanchnopleura i somatopleura, ntre care se
delimiteaz celomul primitiv embrionar (cavum coelomicum) .
Concomitent acestor transformri, embrionul ia aspect
tubular i apoi sufer o ncurbare, sub forma literei C, ale crei
capete se apropie i nchid o parte din cavitatea blastocelic ce va
deveni cavitate toraco-abdominal, iar ceea ce rmne din
cavitatea blastocelic va forma extraembrionar, vezicula vitelin
(ombilical) a embrionului.
Odat realizate fenomenele de proliferare i difereniere, n
dezvoltarea embrionului ncepe o nou etap, denumit histogenez
i organogenez, iar embrionul i continu dezvoltarea devenind
fetus (foetus). Cele trei foie embrionare i schimb denumirea n
ectoderm, endoderm i mezoderm.

9.4.Anexele embrionare i fetale

Sunt formaiuni morfologice cu rol n protecia, nutriia i epuraia
embrionului i fetusului. Ele sunt o continuare n exteriorul embrionului
a componentelor embrionare (ectoderm, endoderm i mezoderm),
alctuind, n totalitatea lor, aria extraembrionar.
Anexele embrionare i fetale (membranae fetales) sunt
reprezentate de: a) vezicula vitelin (sau ombilical);
b) alantoid;
c) amnios;
d) corion.
9.4.1. Vezicula vitelin (ombilical)
Vezicula vitelin sau sacul vitelin (saccus vitellinus) este anex
embrionar care deriv din endoderm, dup ce acesta nlocuiete
hipoblastul. Este desprit de trofoblast prin lecitocel sau blastocel.
Ocup o parte din spaiul cavitatii lecitocelice care, odat cu
ncurbarea embrionului (sau a ariei embrionare) se mparte n dou
compartimente: - un compartiment cuprins n corpul embrionului,
reprezentnd intestinul primitiv (enteron primitivum) cptuit de
endoderm; i - un compartiment mai spaios, situat extraembrionar,
care va forma vezicula ombilical, cptuit de endodermul
extraembrionar, ce delimiteaz cavitatea vitelin (cavum vitellinum).

Peretele vezicii viteline este format din dou straturi: unul

intern, format de celulelele endodermale ( care au nlocuit hipoblastul)
i altul extern format din splanchnopleur (din mezoderm
extraembrionar). Aici celulele mezenchimale se se grupeaz i
formeaz insule sanguine (hemato- i vasculo-formatoare).
n etapa timpurie a embriogenezei ndeplinete rolul de organ
vasculo i hematoformator, precum i de rezervor de substane
nutritive, regresnd ulterior
9.4.2. Amniosul
Amniosul (amnion) se
formeaz (amniogenesis) din
ndoiturile ectodermului i ale
somatopleurei care l cptuete,
cute ce apar n urma coborrii
embrionului n cavitatea lecitocelic
n acest mod se formeaz patru
cute (plica limitans): anterioar,
posterioar i dou laterale, care
se vor suda n planul median,
delimitnd o cavitate amniotic (cavum amnii) ntre ectodermul
embrionar i foia amniotic realizat. n lichidul amniotic (liquor

Alantoida rmne legat de locul de origine printr-un pedicul ,

strbtut de canalul urac (urachus),denumit i canal alantoidian
(ductus allantoicus). n splanchnopleura, ce acoper endodermul se
dezvolt o bogat reea vascular ce se va conecta la vasele viteline pe
care le nlocuiete treptat, alctuind cea de-a doua circulaie fetal
(circulaia alantoidian) ce cuprinde dou artere i dou vene
alantoidiene.
Cavitatea (vezicula) alantoidian (cavum allantoicum), plin cu
lichid, este delimitat de dou foie: una intern, n contact cu amniosul
(allantoamnion) i alta extern, n contact cu corionul (allantochorion).
9.4.5.Corionul
Cea mai extern anex (nvelitoare) din aria extraembrionar,
corionul, provine din micromerele morulei. Dup dispariia membranei
pelucide, acestea vor forma corionul primar (chorion primarium) sau
procorionul sau trofoblastul. Pe suprafaa sa extern prezint viloziti
(villi chorii primarii) ce sunt repartizate n diferite moduri, n funcie de
specie.
O vilozitate corial este constituit din: axul conjunctiv de
esut lax i din trofoblastul care acoper axul conjunctiv. Trofoblastul
este format din dou rnduri de celule, morfologic distincte:
citotrofoblastul i sinciiotrofoblastul.
Sinciiotrofoblastul (syncytiotrophoblastus), stratul extern, are o

Are aspectul unui epiteliu cubic simplu, cu margine n perie.

Examinat la microscopul electronic, marginea n perie prezint
microviloziti dispuse la intervale de 8-20 nm. Microvilozitile nu sunt
structuri rigide, prezentnd lungimi ce variaz ntre 1-2 m i un
diametru de 150-250 nm.
Nucleii sinciiotrofoblastului apar deseori grupai, polimorfi,
prezentnd un nucleol excentric, cu citoplasma clar i cromatina
granular, rspndit neuniform.
Citotrofoblastul (cytotrophoblastus) (stratul intern sau stratul
celular Langhans) cuprinde celule mari cu limite celulare distincte, cu
nuclei veziculoi, cu nucleoli evideni, cu citoplasm clar, cu
numeroase mitocondrii, reticul endoplasmic rugos, complex Golgi
perinuclear, numeroase microvezicule i granule cu fier. La limita cu
sinciiotrofoblastul prezint numeroi desmozomi.
Membrana bazal a trofoblastului are un aspect neregulat,
discontinuu i o grosime de 150 nm. Este desprit de polul bazal al
celulelor citotrofoblastice printr-un spaiu de 25 nm, plin de o mas
amorf cu o densitate electronic sczut.
Axul conjunctiv al vilozitii coriale este format din esut
conjunctiv embrionar, cu celule mezenchimatoase stelate. Cuprinde o
arteriol care se capilarizeaz sub membrana bazal a epiteliului
vilozitii. Din estura de capilare se desprinde o venul care va fi
colectat de venele membranei coriale. Endoteliul acestora, extrem de
fin, este nconjurat de fibre delicate, ce aparin esutului conjunctiv

9.4.5.Particulariti ale anexelor embrionare i fetale la

mamifere
Vezicula vitelin are o dezvoltare redus, rolul su nutritiv
limitndu-se la fazele timpurii ale embriogenezei, datorit faptului c
ovulele mamiferelor sunt oligolecite. Dup atrofia veziculei viteline, se
menine o formaiune vestigial, denumit diverticulul Meckel.
Prezint o funcie vasculoformatoare i hematoformatoare
timpurie. Astfel, celulele mezoblastice din peretele veziculei viteline vor
forma insule vasculo i hemato-formatoare (insulele Wolff i Pander)
(insulae sanguineae). Aici apar primele elemente figurate sanguine i
reeaua extraembrinar de capilare, care se va conecta la circulaia
sanguin intraembrionar. Circulaia vitelin a embrionilor, denumit i
omfalomezenteric, va fi nlocuit treptat cu circulaia placentar, iar
hematopoeza este preluat de ficat.

La mamiferele cu schizamnios (primate, cobai, arici, liliac)

vezicula ombilical este mai redus dect la mamiferele cu
plectamnios (rumegtoare, carnivore, roztoare).
Amniosul se formeaz foarte timpuriu. Modul de formare a
amniosului difer n funcie de modul de implantare (nidaie).
Formarea poate avea loc n dou moduri: prin plicaturare
(plectamnios) i prin clivaie (schizamnios). Prin plicaturarea
ectodermului se formeaz amniosul la leporide, carnivore, suine i
rumegtoare, unde nidaia este de tip central. La hominide i la alte
specii de mamifere (cobai, arici,liliac,tatu),unde nidaia este de tip
interstiial, formarea amniosului are loc n faza de embrion diblastic
(gastrodisc) printr-un proces de clivaj orizontal al celulelor
ectoblastului. Rndul superior va forma amniosul, iar spaiul dintre
cele dou straturi de celule ectoblastice va genera cavitatea
amniotic, n care se va acumula lichid amniotic. La mamiferele cu
nidaie de tip excentric, ntr-o prim faz apare un scizamnios,care va
fi nlocuit de un plectamnios.
Lichidul amniotic, nghiit de fetus, este resorbit n intestin,
ajunge n circulaia fetal alantoidian i, prin traversul placentei, n
circulaia matern, dar nu ptrunde n cile respiratorii. Este
mucilaginos, limpede i sporete cantitativ n prima parte a gestaiei.
Acumularea de lichid amniotic este mai lent n a doua parte a
gestaiei, cnd lichidul devine tulbure i conine pr, celule
descuamate etc. n apropierea parturiiei este galben datorit

Amniosul mamiferelor se dezvolt foarte mult, revenindu-i mai

multe roluri: - de protecie a embrionului mpotriva ocurilor mecanice;
- de lubrefiere a cilor de expulzare a fetusului i dec urirea a
acestora de bacterii i micei; -rol trofic, fiind bogat n ap, sruri
minerale, proteine;-rol metabolic ntervenind n glicogenez (la
rumegtoare) i n lipogenez; -rol de depozit pentru produide
dezasimilaie (acid uric,uree). Gradul de dezvoltare al amniosului,
respectiv suprafaa i volumul de lichid amniotic (raportat la talia
speciei) crete progresiv la marsupiale, la carnivore, la rumegtoare i
la primate.
La iap, amniosul ncepe s se formeze la 21 de zile, iar
cantitatea de lichid ajunge la 3-7 litri, formnd a doua pung a
apelor. La rumegtoare, la nivelul amniosului se descriu formaiuni, cu
form neregulat, denumite plaje amnitotice cu rol neelucidat,
(probabil
glicogenogenetic).Plajele amniotice
lipsesc la scroaf i cea, iar la iap i
oaie sunt rar nrtlnite.
La scroaf, lichidul amniotic,
ajunge la 40-300ml, dar scade dup
sptmna a 12-a de gestaie, iar la
carnivore (cea i pisic) la parturiie
rmn numai cteva picturi (8-30 ml).
(Fig.9.31)

Alantoida prezint un grad de dezvoltare ce difer foarte mult

n raport cu specia. Astfel, exist specii cu: a) alantoida redus la un
diverticul n deget de mnu (la primate); b) alantocorion, n care
alantoida apare ca o pung aplatizat, a crei fa intern acoper
aproape n totalitate amniosul ( la mamiferele aplacentare); c)
amniocorionul, la care alantoida acoper numai parial amniosul,
aceasta venind n contact cu corionul. Foia extern a alantoidei va
cptui corionul pe o suprafa mai mare sau mai mic.
La mamifere, alantoida prezint trei zone:
1)zona intraembrionar, din care se va forma vezica urinar;
2)zona mijlocie, din care va rezulta canalul urac, zona este cuprins n
cordonul ombilical;
3)zona extraembrionar sau sacul alantoidian propriu-zis, interpus ntre
amnios i corion.
Lichidul alantoidian apare nainte ca rinichii fetali s devin
funcionali. Este limpede, apos, brun glbui. Conine albumin, fructoz
i uree, deoarece filtratul renal fetal ajunge n sacul alantoidian prin
canalul urac. La vac, iap, oaie,capr i scroaf, se ntlnesc calculi
alantoidieni (formai din detritusuri celulare, fosfat de calciu i
mucoproteine)ceplutesc n lichidul alantoidian.
La mamifere, reeaua vascular alantoidian (a doua circulaie
embrionar) este mai dezvoltat dect la psri i particip la
realizarea circulaiei placentare. La vrsta de 2 luni (la ecvine, taurine),
circulaia vitelin este complet atrofiat i nlocuit de circulaia

Alantoida ndeplinete la mamifere mai multe roluri: -de

rezervor de substane toxice i deeuri metabolice; - organizator al
reelei vasculare embrio-fetale ce nlocuiete reeaua vascular
vitelin; -furnizeaz mezenchim pentru axul vilozitilor coriale;pregtete i lubrefiaz tractusul genital pentru parturiie; - particip la
formarea cordonului ombilical.
Cordonul ombilical face legtura dinte placent i fetus. La
structurarea lui particip: vezica vitelin cu canalul ombilical, alantoida
cu canalul alantoidian, peretele sacului amniotic adiacent zonei
ombilicale, mezodermul extraembrionar (celule mezenchimale,
substan fundamental mucoid-gelatin Wharton), arterele i venele
ombilicale. Lungimea cordonului ombilical este, n medie de 50-60 cm
la iap, 30-40 cm la bovine, 25 cm la scroaf, 8-12 cm la cea i
pisic. La rumegtoare i cabaline n cordonul ombilical sunt prezente
i fibre musculare netede, care produc vasoconstricie n momentul
parturiiei.
La iap, mugurele alantoidian apare la 21 de zile i ajunge n
contact cu corionul la 55-60 de zile, cnd are reeaua vascular
dezvoltat i nlocuiete circulaia vitelin (omfalo-mezenteric) pn la
70-80 de zile. Cantitatea de lichid alantoidian ajunge la 8-18 litri, fiind
clar i constituit iniial din transsudat sanguin. n apropierea parturiiei,
din cauza urinii fetale devine glbui murdar.
La scroaf, alantoida lipsete n mare parte la nivelul zonei
centrale, unde amniosul, venind n contact cu corionul, realizeaz un

La rumegtoare, alantocorionul se gsete pe cea mai mare

parte a suprafeei, exceptnd zona central, unde predomin
amniocorionul (ca la scroaf).
La cea i pisic, alantoida separ complet amniosul de corion
(alantocorion). Cantitatea de lichid alantoidian ajunge la 40-110 mililitri
(la cea),iar la pisic este ntre 5-15 ml.
Corionul la mamifere prezint viloziti coriale primare, cu
aspect de formaiuni filiforme sau digitiforme orientate spre exterior.
Concomitent cu vascularizarea i dezvoltarea alantoidei, vilozitile
coriale primare se repartizeaz diferit, n raport cu specia, se
vascularizeaz i ptrund n criptele mucoasei, devenind viloziti
coriale secundare i participnd la constituirea placentei. Astfel, o
vilozitate corial secundar este o prelungire a corionului ( trofoblast cu
mezoderm extraembrionar) n care au ptruns vasele alantoidiene (n
cazul alantocorionului) sau vasele viteline (n cazul omfalocorionului).
Vilozitile coriale secundare pot fi rspndite: a) difuz, cu
rspndire uniform complet (pe toat suprafaa), la iap sau
incomplet (lipsind la capetele corionului), la scroaf; b) zonal, sub
forma unui bru circular median, la carnivore; c) grupate n formaiuni
denumite cotiledoane, la rumegtoare; d) discoidal, sub forma unei
zone circulare la roztoare i primate.
Vilozitile coriale lipsesc la marsupiale, care au un corion
avilos i sunt denumite mamifere aplacentare.

La iap, corionul este cptuit n ntregime de alantoid, dup

55 60 de zile, cnd apare i circulaia placentar. Complexul corio
alantoidian prezint cute care se pot desprinde, cad n lichidul
alantoidian i constituie hipomamele. Corionul are un aspect catifelat,
datorit vilozitilor fine (microcotiledoane), dispuse uniform pe toat
suprafaa sa. La nivelul contactului corio-alantoidian pot apare
depuneri de fosfat de calciu, denumite plci opace.
La scroaf, sacul corial este iniial alungit-fusiform, (msurnd
15 mm la 17 zile) dup care se scurteaz (prin necroza extremitilor)
i se dilat dup 20 de zile. Vilozitile lipsesc la capetele sacilor
corionici.
La vac, sacul corial fusiform ajunge la 50-60 cm lungime.
Vilozitile coriale se grupeaz n cotiledoane, dispuse pe 4 rnduri,
fiind n numr de 80-120, n dreptul fiecrui corn uterin. n zona
central a sacului, corionul nu este cptuit de alantoid, stabilindu-se
un raport amnio-corial. n restul suprafeei uterine a corionului, raportul
este alanto-corial. La extremitile sale, corionul este necrotic, ca i la
scroaf. La oaie i capr, angrenarea vilozitilor coriale n criptele
uterine are loc n a 44-a zi de gestaie.
La cea i pisic, iniial corionul este acoperit n totalitate cu
viloziti coriale primitive, dintre care se dezvolt numai cele cin zona
circular central (reprezentnd 1/3 din suprafaa corionului). n
totalitatea sa, corionul este cptuit de alantoid (alantocorion).

9.4.6.Particularitile anexelor embrionare la psri

La psri, sacul vitelin (vezicula vitelin) are o importan mult
mai mare dect la mamifere, deoarece ovula este de tip telolecit. Este
prima anex embrionar care se organizeaz ( din ziua a treia de
incubaie). n ziua a 5-a de incubaie, vitelusul coninut n vezicula
ombilical este acoperit n ntregime de endodermul i mezodermul
extraembrionar, nct peretele sacului vitelin este structurat din
endoderm, membrana vitelin i mezoderm.
n mezodermul sacului vitelin se formeaz insulele sanguino- i
vasculo-formatoare (Wolff i Pander), din care iau natere celulele
sanguine i vasele primei circulaii embrionare (circulaia
omfalomezenteric). Aceast reea vascular transport substanele
absorbite de ctre endodermul vitelin, care prezint viloziti.
Rezorbia vitelusului continu i n primele zile dup ecloziune. Tot prin
reeaua vascular se realizeaz transferul pasiv al anticorpilor
maternali existeni n vitelus, precum i al unor proteine virale sau
virusuri. Acest fapt permite transmiterea pe vertical (transembrionar)
a unor infecii i vaccinarea in ovo , aplicat pentru imunoprofilaxia
unor boli ( Boala Marek, bursita infecioas aviar).
Sacul vitelin este complet dezvoltat dup 5-6 zile de incubaie i
comunic cu intestinul embrionului prin canalul vitelin (ductus
vitellinus), fr ca vitelusul s treac prin acest canal n intestin.
Vestigiile canalului vitelin persist sub forma diverticulului vitelin

Sacul vitelin ndeplinete mai multe roluri, precum:-absorbia

din vitelus a substanelor nutritive i plastice, necesare dezvoltarii
embrionului pn la ecloziune; - organizeaz reeaua de capilare
omfalomezenterice; - produce primele celule sanguine; - are funcie de
aprare imun local i general.
Amniosul se formeaz de timpuriu (din a doua zi de
incubaie),prin plicaturare, fiind complet nchis n ziua a treia (la gin)
sau a patra (la curc i la gsc) de incubaie. Peretele amniosului este
format din dou straturi:- un strat intern, orientat ctre embrion,
reprezentat de ectodermul extraembrionar i altul extern, reprezentat
de mezodermul extraembrionar (respectiv de somatopleur), n care
vor apare vase de snge i fibre musculare. Fibrele musculare
genereaz contracii ritmice.Amniosul este desprit de corion printr
un spaiu denumit cavitate celomic extraembrionar (celoma
extraembryonicum).
Ectodermul amniosului secret lichidul amniotic (liquor
amnioticus) care umple cavitate amniotic (cavum amnii). n acest
lichid se acumuleaz urai, produi de rinichiul embrionar, fulgi i
secreii ale glandelor din cavitatea bucal i tractusul respirator. Din
ziua a 5-a de incubaie, lichidul amniotic este nghiit de pui.
Amniosul i lichidul amniotic asigur: -protecia mecanic;
libertate de micare pentru embrion; -nutriia embrionului cu albu,
care este transferat din sacul cu albu (albumen) delimitat de corion
ntr un canal sero amniotic i nghiit de embrion;-asigur necesarul

. Dup 11 zile de incubaie, amniosul ncepe s regreseze, se atrofiaz

i dispare.

Fig.9.32. Schema unei seciuni prin

oul de gin, la nceputul incubaiei
1-Camera cu aer;
2- Amnios;
3- Alantoid;
4- Sacul vitelin;
5- Coaja calcaroas;
6- Membrana cochilier;
7- Albu;
8- Corion

Alantoida se formeaz ncepnd cu a 46 ore de incubaie,

cnd mugurele endodermic alantoidian, detaat din zona caudoventral a intestinului prsete aria embrionar, devenind o
vezicul (dup 72 ore de incubaie) plin cu lichid, ce comunic cu
intestinul primitiv printr-un pedicul strbtut de canalul urac. Pe
msur ce se dezvolt, vezicula alantoidian se insinueaz ntre
sacul vitelin, amnios i corion, antrennd splanchnopleura i ocupnd
ntreg celomul extraembrionar. nconjoar albuul pe care l cuprinde
ntr-un sac. Din corion se formeaz un diverticul tubular care trece
printre alantoid i sacul vitelin,devenind canal seroamniotic, prin
care albuul este transferat n amnios i nghiit de pui.
Mezodermul splanchnic al foiei externe, se sudeaz cu
somatopleura corionului, realiznd membrana corioalantoidian , n
care se dezvolt o reea vascular (dup 5-6 zile de incubaie), care
se va lega de reeaua vitelin pe care o va nlocui treptat, realiznd
circulaia alantoidian care se va racorda la circulaia embrionar
Rolul alantoidei este foarte important n a doua jumtate a incubaiei
cnd asigur: protecia embrionului prin lichidul alantoidian;
consumarea albuului (rol nutritiv); excreia metaboliilor (prin
canalul urac); respiraia (prin intermediul circulaiei alantocoriale,
ncepnd cu ziua a 6-a).

Corionul este anexa cea mai puin important la psri. Se

formeaz de timpuriu, o dat cu amniosul, din partea extern a cutelor
amniotice. Are origine ectodermic i parial mezodermic (din
somatopleur). Este mpins de alantoid i ajunge n contact (dup 7-8
zile de incubaie) cu membranele cochiliere i cu alantoida, cnd
somatopleura corionului se sudeaz cu splanchnopleura alantoidei,
realiznd membrana corioalantoidian (alantocorionul). Membrana
corioalantoidian asigur, ncepnd cu zillele 9-10 de incubaie,
respiraia embrionului prin circulaia alantocorial i schimburile de ap
ntre embrion i mediul exterior.
n timpul incubaiei: - nutriia se face pe seama vitelusului
coninut n vezicula ombilical i prin intermediul alantoidei (din sacul
de albu); -respiraia se face prin intermediul vascularizaiei alantoidine
direct din camera de aer; - excreia se face prin alantoid. Pe msur
ce rezerva de vitelus este consumat, sacul vitelin se retracteaz i
dispare, nchizndu-se ombilicul. n momentul ecloziunii puiul sparge cu
ciocul resturile de alantoid, corionul, membranele cochiliere i coaja
calcaroas.