RECEPTORI CELULARI

Comunicare intercelular
intercelular

Tipuri de semnalizare

- Local
Local

- La distan
distan

Tipuri de molecule semnal

- Substane gazoase
- Substane hidrofobe
- Substane hidrofile
Hormoni:: caracteristici
Hormoni

Receptori

Caracterizare
Clasificare
Intracelulari (citoplasmatici & nucleari
nucleari):
): caracteristici
caracteristici,, mecanism de transducie
Membranari
cu canal pentru ioni:

- Ex. receptorul nicotinic al Ach

cuplai cu proteine G de tipul

- Gs: ex. receptorul -adrenergic

- Gi: ex. receptorul 2-adrenergic
- Gq: ex. receptorul 1-adrenergic
cuplai cu enzime sau cu activitate enzimatic intrinsec
- Ex. receptorul insulinei

Comunicarea inter
intercelular
celular
2,5 Miliarde ani de evoluie
Apariia organismelor multicelulare
Dezvoltarea mijloacelor
mijloacelor complexe de comunicare celular
Apariia molecule
oleculelor
lor semnal i a receptori
receptorilor
lor

Comunicare intercelular
intercelular

Direct
Direct

- prin jonciunea celulelor adiacente

- prin interaciunea proteinelor de suprafa

Indirect
Indirect

- prin semnale intercelulare

Tipuri de semnalizare intercelular

intercelular

Local
Local

- contact
contact--dependent
dependent

- paracrin
paracrin

- autocrin
autocrin

- sinaptic
sinaptic

La distan
distan

- exocrin
exocrin

Tipuri de semnalizare intercelular

intercelular
(1)
Local
Local

celula semnalizatoare expune molecule

semnal pe suprafaa membranei
membranei,, care vor
interaciona cu receptori de pe celula int
int
,
cu care vine n contact direct

celula semnalizatoare secret

secret
molecule
semnal (ex. interferon) n spaiul extracelular
extracelular,,
care vor interaciona cu receptori de pe
celulele int
int
din vecin
vecin
tate

Tipuri de semnalizare intercelulara (2)

Local
Local

Moleculele semnal secretate de celula

semnalizatoare acioneaz
acioneaz
pe receptori
situai pe celule semnalizatoare de acelasi
tip, din vecin
vecin
tate

ntre 2 neuroni
neuroni,, prin
intermediul neuromediatorilor

Tipuri de semnalizare intercelulara (3)

La distan
distan

Celula semnalizatoare (endocrin

endocrin
) secret
secret molecule semnal (ex. hormoni
hormoni))
care sunt transportai la distan
distan
(de c
ctre sistemul circulator) pentru a
ajunge la celulele int
int
;

Semnalizarea exocrin
exocrin
i sinaptic
sinaptic
- Comparaie

Relativ lent
lent

Rapid
Rapid

H transportat de fluxul sanguin i apoi prin difuzie

Funcioneaz
Funcioneaz
la [H]<

10-8

=> Afinitate mare a R pentru H

Viteza impulsului electric 100m/sec;

Neuromediatorul difuzeaz
difuzeaz
<100nm n <milisec
milisec))

Funcioneaz
Funcioneaz
la [L]=10-3-10-4 M
=> Afinitate mic a R pentru L

= > Semnalizarea sinaptic

sinaptic
este mai rapid
rapid
dar cere o concentraie mai mare a
ligandului!!
ligandului

Diferite celule pot r

rspunde n mod diferit la
acelai tip de molecul
molecul
semnal
Ex. efectele leg
leg
rii acetilcolinei pe diferii receptori

Tipuri de molecule semnal (extracelulare)

Substane gazoase
CO (monoxidul de carbon)
NO (monoxidul de azot)
H2S (hidrogenul sulfurat)

Substane hidrofobe
Hormoni steroizi
Hormoni tiroidieni
Acidul retinoic,
Colecalciferol (Vitamina D3)

Substane hidrofile
Hormoni peptidici
peptidici,, aminoacizi
aminoacizi,, derivati ai aminoacizilor

(GABA, serotonina
serotonina,, catecolamine etc)

Rolul NO n relaxarea muchiului neted din

pereii vaselor de snge

Caracteristici ale hormonilor (H)

LIPOFILI
Cu transportor plasmatic
Durata de via
(t1/2 plasmatic)
Localizarea receptorului (R)

Mediatorul semnalului

HIDROFILI

da

nu

ore-zile

minute

intracelulara

membranar

complexul R-H

cAMP, cGMP,
Ca2+, IP3,
cascad de kinaze

Receptori
Caracterizare

Proteine cu cel putin 2 domenii pentru

fixarea hormonului
transducerea
transducerea semnalului extern unui sistem efector intracelular
intracelular,, responsabil
de producerea raspunsului biologic;
Cele 2 domenii comunic
comunic
prin tranziii conformaionale iniiate de
fixarea ligandului
Formarea complexului ligand
ligand--receptor
se bazeaz
bazeaz
pe complementaritatea steric
steric
a partenerilor
se realizeaz
realizeaz
prin interaciuni necovalente
necovalente,,
este reversibil
reversibil
(ca i interaciunea enzim
enzim
-substrat
substrat))
Afinitatea receptorului pentru ligand
este dat
dat
de constanta de disociere (Kd) a complexului L-R,
are aceai semnificaie cu KM,
are valoarea 10-10-10-6, n acord cu concentraiile mici ale liganzilor
liganzilor..
Numarul receptorilor este reglabil
concentratia mare a ligandului
ligandului,, timp ndelungat => sc
sc
derea nr. R = down
down
regulation (ca urmare a reducerii sintezei lor i
i//sau a ndep
ndep
rt
rt
rii celor
existeni prin endocitoz
endocitoz
).
uneori
uneori,, la o expunere prelungit
prelungit
=> creterea nr. R (up
(up regulation).
regulation).
Specificitatea R pentru ligandul specific este foarte mare
dar este posibil
posibil
i legarea altor compui cu structur
structur
asem
asem
ntoare (analogi
analogi).
).
Dac
Dac

legarea analogului iniiaz

iniiaz
un r
rspuns celular similar el este denumit agonist,
legarea analogului este neproductiv
neproductiv
este denumit antagonist.

Receptori
Clasificare
Localizare
Intracelular

Tipuri

Liganzi specifici

Citoplasmatici
Nucleari

Hormoni tiroidieni
Hormoni steroizi

Receptori cu canal pentru ioni

Acetilcolina
GABA
Adrenalina

Serotonina
Membranar Receptori cuplai cu proteina G Glucagon

Receptori cuplai cu enzime

sau cu activitate enzimatic
intrinsec

Insulina
Factori de cretere

Receptori intracelulari
Citoplasmatici sau nucleari
Liganzi hidrofobi:
hidrofobi:

hormoni steroi
teroizzi
hormoni tiroidieni
acid retinoi
retinoicc
colecalciferol (Vit
Vit.. D3)
prostaglandine

Complexul receptorreceptor-ligand
se leag de ADN (la nivelul nivelul hormone response element HRE
HRE))
regleaz transcrierea
transcrierea unor gene

Structur
Structur-- cel puin 3 domenii care leag
leag
:
ligandul specific
ADN (HRE)
inhibitor
inhibitorii

Rezultat
Rezultat::
rspuns primar la 30 minute
minute
rspuns secundar dup
dup
ore zile

Activarea receptorilor nucleari

Mecanismul prin care legarea ligandului la R nuclear

sau citoplasmatic determin
determin
un r
rspuns biologic

Mecanismul prin care legarea hormonului estrogen

la R citoplasmatic determina un raspuns biologic

Receptori membranari
Tipuri
Receptori cu canal pentru ioni

Receptori cuplai cu proteina G

Liganzi specifici
Acetilcolina
GABA
Gly
Adrenalina
Serotonina
Glucagon

Receptori cuplai cu enzime sau Insulina

cu activitate enzimatic
Factori de cretere
intrinsec

Tipuri de
receptori
membranari

10

Modalit
Modalit
i de desensibilizare
desensibilizare a receptorilor

Receptori cu canale ionice (ionotropici)

Receptorul de tip nicotinic al acetil colinei (nAChR
nAChR))
Nicotina i muscarina = agonisti ai acetil colinei

D.p.d.v
D.p.d.v.. structural sunt proteine formate din mai multe subunit
subunit
i diferite
care traverseaz
traverseaz
membrana i formeaz
formeaz
un canal selectiv pentru ioni
ioni,,
a c
crui conductivitate este controlat
controlat
de c
ctre ligand prin legarea de centri
specifici situai n domeniul extracelular al receptorului

Activai foarte rapid de liganzi (milisecunde

milisecunde))
=>fluxul
=>
fluxul unor ioni i depolarizarea sau hiperpolarizarea membranelor
neuronilor postsinaptici sau ai celulelor musculare
musculare..

Rol
Rol:: propagarea rapid
rapid
a impulsurilor electrice i transferul informaiei
informaiei dedea lungul sinapselor

11

Receptorul nicotinic al ACh

Localizare
Localizare:: jonciun
jonciunea
ea neuromuscular
neuromuscular

Dpdv structural

glicoprotein (GM=
(GM=275
275 kDa)
kDa)
5 subuniti 2 cu o dispozitie circulara (canal);
fiecare subunitate are 4 domenii transmembranare (M1
M1--M4);
domeniul M2 al fiec
fiec
rei subunit
subunit
i formeaz
formeaz
peretele canalului

Legarea a 2 molecule de ACh de cele 2 subunit

subunit
i

=> modificarea conformaional

conformaional
i deschide
deschiderea
rea a canalul
canalului
ui
=> influxul
influxul ionilor de Na+ i efluxul ionilor de K+
=> depolarizarea local
local
a sarcolemei
=> activarea unui canal de Na+ voltaj
voltaj--dependent (din vecin
vecin
tate
tate))
=> potenarea depolariz
depolariz
rii i deschiderea unui canal de Ca2+ voltaj
voltaj--dependent
din reticulul sarcoplasmic adiacent

=> cuplarea excitaiei cu contracia muscular

muscular

Hidroliza acetilcolinei (catalizat

catalizat
de acetil
acetil--colinesteraz
colinesteraz
) => sc
scderea
concenratia Ach din spaiul sinaptic => nchiderea canalului ionic

Receptor
eceptorul
ul nicotinic al
al ACh

Depolarizarea local
local
a sarcolemei
activarea unui canal de Na+ voltaj
voltaj--dependent (din vecin
vecin
tate
tate)) care va potena depolarizarea
=> deschiderea unui canal de Ca2+ voltaj
voltaj--dependent din reticulul sarcoplasmic adiacent
=> cuplarea excitaiei cu contracia muscular
muscular

12

Ali liganzi ai receptorilor ACh

Atropina = antagonist receptor muscarinic al Ach (cuplat cu proteina Gi) => tahicardie
Cobratoxina,, Bungarotoxina = antagonisti receptor nicotinic al Ach (canal de ioni
Cobratoxina
ioni)) => paralizie

Patologie asociat
asociat

receptorilor
receptori
lor cu canale ionice

Miastenia gravis
Intoxicaia
cu gaze
gaze de lupt (DIPFP)
venin de arpe

DIPFP = d
diizo
zop
propil fluor fosfat = inhibitor ireversibil al colinesterazei!

13

Patogeneza miasteniei gravis

gravis
Formarea de autoanticorpi anti
receptori ai ACh
de la nivelul jonciunii
neuromusculare
Legarea anticorpilor la receptori,
i internalizarea
lor prin endocitoz

Reducerea marcat a
numrului receptorilor pentru
Ach
Semne clinice
n special slbiciune muscular
episodic

Miastenia gravis ocular

ocular
- Simptome

Sl
Sl
biciunea & Cderea pleoapelor (ptoz
ptoz
palpebral
palpebral
)
Sl
Sl
biciunea musculaturii globului ocular =>vedere
=>vedere dubl
dubl
(diplopie
diplopie))

Oboseal
Oboseal
muscular
muscular
excesiv
excesiv
dup
dup
activit
activit
ii fizice
Sl
Sl
biciunea musculaturii faciale
Tulbur
Tulbur
ri ale capacit
capacit
iiii de articulare a cuvintelor (dizartrie
dizartrie))
Tulburri ale capacitii de mestecare i nghi
nghiire (disfagie
disfagie))
Afectare a musculaturii respiratorii (criz
criz
miastenic
miastenic
)

14

Clasificarea receptorilor
Localizare
Intracelularar

Tipuri

Liganzi
specifici

Citoplasmatici

Hormoni tiroidieni

Nucleari

Hormoni steroizi

Receptori cu canal pentru ioni

Acetilcolina
GABA

Receptori cuplai cu proteina G

Membranar
Receptori cuplai cu enzime sau
cu activitate enzimatic
intrinsec

Adrenalina
Serotonina
Glucagon
Insulina
Factori de
cretere

Receptori cuplai cu proteina G = metabotropici

(GPCR G protein coupled receptors)
receptors)
Reprezint
Reprezint
cea mai mare familie de receptori

Cuprinde

receptorii - si - adrenergici,

receptorii muscarinici ai ACh,

unii receptori ai Glu i ai serotoninei,

receptorii pentru miros

fotoreceptorii

Dpdv structural sunt formai dintr

dintr--un singur lan
lan polipeptidic care prezint
prezint
7 fragmente
transmembranare
transmembr
anare helicoidale (serpentine), unite prin bucle extra
extra-- i intracelulare

Dpdv al rolului biologic regleaz activitatea unei enzime sau canal pentru ioni prin
intermediul unei proteine trimerice
trimerice,, cu activitate GTPGTP-azic, numit proteina G

Legarea ligandului la receptor are ca efect modificarea

concentraiei intracelulare a unui mediator de ordinul II, sau

concentra

modificarea permeabilit
permeabilit
ii
ii membranei celulare pentru anumi
anumii ioni

50% din medicamente acioneaz la nivelul acestora

15

Receptori cuplai cu proteine

proteine G
Structura receptorului
Poziia receptorului, a proteinei G i
a adenilat ciclazei la nivelul
membranei

Receptori cuplai cu proteina G

(metabotropici
metabotropici))

Funcii biologice mediate de

receptorii cuplai cu proteine G
Miros
Vz
Transmisie sinaptic
Secreie hormoni
Chemotaxie
Exocitoza
Embriogeneza
Control tensiune arterial
Cretere i difereniere celular
Infecie viral
Carcinogenez

16

Proteine G - Clase & Funcii

Clas
Clas
& Tip

Gs

Gi

Gq

Ligand

Sistem efector primar

Glucagon, -Adrenergice

Adenilat ciclaza

olf

Odoranti

Adenilat ciclaza

11

Acetilcolina

Adenilat ciclaza

12

2-Adrenergice, M2-Colinergice

Adenilat ciclaza

Opioide
Endorfine

Lumina

M1-Colinergice, 1-Adrenergice

Fosfolipaza C

11

1-Adrenergice

Fosfolipaza C

Canale de K
Canale de Ca
cGMP Fosfodiesteraza

Activarea & Inactivarea proteinei G

Forma intermediar
intermediar

Forma inactiva

Forma activa

17

Receptor cuplat cu proteina Gs

Ex. receptorul -adrenergic

Spatiul extracelular
Adenilat
ciclaza

R
+

GDP

GT P

P r oteina
Gs

GDP
GTP

Membrana celulara

ATP
AMPc
+

Protein kinaza
inactiva

Protein kinaza
activa

HO Enzima

Enzima O P

activa

(inactiva)

inactiva

ATP

(activa)
ADP

Receptor cuplat cu proteina Gi

Ex. receptorul 1-adrenergic

interactioneaza cu proteina Gi =>

=>inhibiia
inhibiia adenilat ciclazei !

Aplicaii Efectele unor toxine i medicamente

Toxina holer
holeric (Vibrio choleris)
Holera
Toxina pertusic
pertusic
(Bordetell
Bordetella
a pertussis
pertussis))
Tusea convulsiv
Metilxantinele (cafeina, teofilina)
Relaxarea musculaturii netede (efect bronhodilatator
bronhodilatator),
),
stimularea sistemului nervos central

Beta
Beta--blocante (propranolol, metoprolol)
Reducerea tensiunii
tensiunii,, tulbur
tulbur
rilor de ritm cardiac, a anxiet
anxiet
ii i
panicii

18

Toxina holerica ADP

ADP--ribozileaz
ribozileaz
subunitatea a proteinei Gs => [AMPc
[AMPc]]
Toxina pertusica ADP
ADP--ribozileaz
ribozileaz
subunitatea a proteinei Gi => [AMPc
AMPc]]
Cafeina si teofilina inhib
inhib
fosfodiesteraza => [AMPc
[AMPc]]

ADP--ribozilarea Gs
ADP

19

Receptor cuplat cu proteina Gq

(1-adrenergic)
H

Spatiul extracelular

PLC
+

q
GDP
P r oteina
Gs

q +

GTP

PIP2

PK-C

P
P

Membrana
celulara

DAG

ATP

GDP
GTP

Enzima O

ADP

P
P

Ca+2

T oxine

Pi

inactiva

(activa)

Enzima OH
activa

(inactiva)
P
P

Reticul

endoplasmic

Lumen
Ca+2

Clasificarea receptorilor
Localizare
Intracelular

Tipuri
Citoplasmatici

Hormoni tiroidieni

Nucleari

Hormoni steroizi

Receptori cu canal pentru ioni

Acetilcolina
GABA

Receptori cuplai cu proteina G

Membranar

Liganzi specifici

Adrenalina
Serotonina
Glucagon

Receptori cuplai cu enzime sau

Insulina
cu activitate enzimatic
Factori de cretere
intrinsec

20

Receptori cu activitate enzimatic sau

cuplai cu enzime

Pot avea activitate

activitate::
Tyr
Tyr--kinazic sau sunt cuplai cu TyrTyr-kinaz
kinaze
e,

Ser/Thr kinazic
Guanilil ciclazic

Liganzi
Liganzi:: insulina
insulina,, IGFIGF-1, factori de cretere
cretere,, etc.
Cuplarea ligandului
ligandului cu receptor
receptorul
ul specific
modificri conformaionale
stimularea activitii enzimatice

Tipuri de receptori cu activitate enzimatic

EGF = Epidermal Growth Factor

21

Mecanism general de transducie a semnalului

Receptor cu activitate Tyr-kinazic activat
(prin autofosforilare)

Proteina adaptor face legtura dintre receptor activat i

Ras GEF (rol n schimbarea GDP cu GTP pentru Ras)

Ras-GDP (inactiv) trece n Ras-GTP (activ)

Activarea cascadei de MAP-kinaze

Efecte finale:
modificarea activitii unor proteine
modificarea expresiei genice

Receptorul insulinei
Caracterizare structural
Este format din

2 lanuri extracelulare de tip unite printrprintr-o legtur

S-S; fiecare lan
lan conin
conine
e un domeniu de legare a
insulinei
2 lan
lanuri transmembranare de tip
regiunea citoplasmatic a subunitilor
subunitilor conine
domeniile cu activitate TyrTyr-kinazic

Fiecare lan este legat de un lan

lan printr
printr-o legtur S-S

22

Receptorul insulinei
insulinei-- Mecanismul transductiei

Legarea insulinei de centrul specific format de subunitatile => Autofosforilarea subunitatilor

Legarea & fosforilarea proteinei IRS
IRS--1 => Legarea fosfatidil
fosfatidil--3-kinazei (PI(PI-3-kinaza)
Fosforilarea fosfatidil inozitolului membranar => fosfatidil inozitol trifosfat PIP3 (sfarsitul
(sfarsitul etapei 1)
Atasarea de PIP3 si activarea prin fosforilare a protein kinazei B (etapa
(etapa 2)

PKB activa va fosfori

fosforila
la alte kinaze (ex. glicogen sintetaz kinaza GSK3) (etapa
(etapa 3)
Efecte finale:

Activarea cilor consumatoare de glucoz

glucoz
(glicogenosintez
glicogenosinteza
a, glicoliz
glicoliza)
a)
Iniierea sintez
sintezei
ei unor proteine
Expunerea transportorilor glucozei de tip GLUT4 pe membrana adipocitelor

Mecanismul diabetului zaharat insulino independent

Modificri ale receptorilor pentru insulin
Modificri ale cii intracelulare de transducie a semnalului
(ex. mutaia proteinelor IRS)
Muta
Mutaii
ii ale enzime
enzimelor
lor implicate n metabolismul glucozei (HK, GS)
Obezitatea
(AG exces acilacil-CoA, ceramide, DAG activarea PKC Ser/Thr
Ser/Thr--fosforilare
anormal a IRS

REZISTENA LA INSULIN
Hiperinsulinism

Insuficien pancreatic
(prin consumarea celulelor beta)

Diabet zaharat

23

Implicatii clinice - Diabetul zaharat tip II

Modificri ale receptorilor pentru insulin
Modificri ale cii intracelulare de transducie a semnalului

(ex. mutaia proteinelor IRS)

Muta
Mutaii
ii ale enzime
enzimelor
lor implicate n metabolismul glucozei (HK, GS)
Obezitatea (AG exces
exces acil
acil--CoA, ceramide, DAG activarea PKC
serin, treonintreonin-fosforilare anormal a IRS
REZISTENA LA INSULIN
Hiperinsulinism
Insuficien pancreatic
(prin consumarea celulelor beta)

Diabet zaharat insulino independent

24