Determinarea

hematocritului
Indicii eritrocitari

Hematocritul msoar raportul dintre volumul ocupat de eritrocite i

volumul sanguin total (volum eritrocitar procentual).
Determinarea sa poate face utilizand i instrumente electronice
automate unde valoarea sa este calculat din cea a volumului mediu
eritrocitar i din numrul de hematii sau tehnicile clasice ale macro
respectiv microhematocritului. n practic, pentru determinarea
hematocritului, se folosesc dou metode, macrometoda Wintrobe i
micrometoda Guest.

Principiu:
Sngele este fcut incoagulabil i centrifugat pentru a separa
eritrocitele de plasm i a evalua ct la sut reprezint masa eritrocitar
fa de volumul de snge integral.
Anticoagulantul folosit trebuie s fie izoton i uscat pentru a nu modifica
volumul plasmatic i cel eritrocitar iar tasarea optim a eritrocitelor se
obine printr-o centrifugare cu un anumit numr de turaii desfurat
ntr-un interval de timp standard.

Macrometoda Wintrobe
Macrometoda Wintrobe (macrohematocritul) are la baz o
centrifugare cu vitez mai redus, n tuburi cu diametrul de 3
mm.
Materiale necesare:
-materiale necesare recoltrii sngelui venos.
-snge venos recoltat pe anticoagulant ( Na 2EDTA, amestec
anticoagulant Wintrobe, heparin).
-tuburi de hematocrit Wintrobe din sticl groas, de 100 mm
lungime, cu diametrul de 2,5-3 mm, fund plat, prezentnd
diviiunini egale de la 0 la 100.
-centrifug.
-pipete Pasteur.

Tehnica de lucru:
Sngele venos recoltat pe anticoagulant este introdus
cu ajutorul unei pipete Pasteur n tubul Wintrobe, n
coloan continu, pn la nivelul diviziunii 100. Tubul este
apoi centrifugat timp de 30 de minute la 3000 de
turaii/minut. Dup centrifugare se observ dispunerea
coninutului tubului n trei straturi datorat diferenelor de
densitate: superior coloana de plasm de culoare galbencitrin (dansitatea plasmei= 1027 ), inferior coloana de
eritrocite de culoare roie (densitatea eritrocitelor= 1090),
iar la limita de separare dintre cele dou se formeaz un
strat subire, cenuiu-roietic format din leucocite i
trombocite care n mod normal nu depete 1% din total.

Rezultatul este dat de nlimea coloanei de

eritrocite care se exprim direct n procente dac
tubul de hematocrit prezint cele 100 de diviziuni
sau dac tubul nu este gradat se msoar
nlimea h a coloanei de eritrocite i nlimea H
a coloanei totale a sngelui care reprezint
100%.

Hematocritul venos (Htv) va fi dat de raportul h / H x100.

Valoarea obinut trebuie corectat n funcie de trei factori:
-factorul f1 care exprim cantitatea de plasm ce mai rmne
sechestrat printre hematii i dup centrifugare (3-8%); Corecia
plasmei interstiiale nu este necesar la determinrile de rutin
ntruct valorile normale, din diverse pri ale globului, au fost
stabilite fr aceast corecie.
-factorul f2 utilizat cnd un alt anticoagulant dect heparina a fost
folosit la recoltare, tipul de antioagulant, modificnd ntr-o
anumit msur presiunea osmotic i consecutiv volumul
eritrocitar;
-factorul f3 luat n calcul atunci cnd stratul format din leucocite i
trombocite reprezint mai mult de 1% din nlimea tubului. n
leucocitoze importante acest strat crete considerabil i trebuie
msurat pentru a aprecia corect att stratul eritrocitar ct i cel
plasmatic.

Hematocritul arterial i mai ales cel capilar au

valori mai sczute ( sngele complet oxigenat d un
hematocrit cu aproximativ 2% mai redus dect sngele
neoxigenat).

Atunci cnd se determin volumul sngelui total se

corecteaz
cifra
hematocritului
venos
msurat,
obinndu-se
valoarea
hematocritului
somatic,
hematocritul somatic = 0,91 x hematocrit venos msurat.

Micrometoda Guest
Micrometoda Guest ( microhematocritul) se bazeaz pe o
centrifugare cu vitez mai mare n tuburi capilare.

Materiale necesare:
materiale necesare punciei venoase / capilare;
tuburi capilare din sticl, heparinizate;
anticoagulant ( heparin);
capsul de plastic;
baghete de sticl;
bec de gaz;
microcentrifug;
nomogram pentru citirea hematocritului.

Tehnic de lucru:
- se aplic o pictur de heparin (5000 de uniti) ntr-o capsul de plastic;
- capsula este meninut la termostat la 37 C n vederea uscrii heparinei;
- se adaug peste heparina uscat 5-6 picturi de snge capilar
omogenizndu-se cu bagheta de sticl;
- se ncarc tubul capilar pn la din nlimea sa, aeznd tubul n pictura
de snge din capsula de plastic, sngele urcand n tub prin capilaritate;
- captul opus celui prin care s-a fcut ncrcarea tubului se nchide prin
nclzire la flacra unui bec de gaz;
- se adapteaz tubul capilar la centrifug i se centrifugheaz timp de 2
minute la 24000 de turaii/ minut;
- dup centrifugare tubul capilar pentru hematocrit se suprapune unei
nomograme pe care se citete nlimea coloanei de hematii, exprimndu-se
valoarea hematocritului.
- n cazul microhematocritului cantitatea de plasm reinut printer hematii
dup centrifugare este cuprins ntre 1.5 i 3%. Microhematocritul sngelui
care conine eritrocite deformate ( siclemie, talasemie, sferocitoz ,
megalocitoz, anemie feripriv) este mai mare datorit reinerii crescute de
plasm printer eritrocitele cu plasticitate redus.

Aparatele electronice determin hematocritul prin nsumarea

volumelor eritrocitare individuale msurate direct. Ele necesit
calibrarea volumului eritrocitar mediu (VEM) i a numrului de
eritrocite pentru estimarea hematocritului.
Hematocritul este cea mai precis metod de evaluare a strii de
anemie sau poliglobulie, avnd cea mai mic eroare ( de 1,13% pentru
metodele manuale i sub 1% la metodele electronice).Valoarea sa
clinic este completat prin faptul c reprezint un parametru n
formulele de calcul al indicilor eritrocitari (VEM, CHEM) ca i prin
informaiile pe care le sugereaz aspectul plasmei (palid n anemii
feriprive, tulbure n hiperlipemie, icteric n anemii hemolitice sau n
alte ictere etc.) sau eventuala prezen a unui strat leuco-trombocitar
mai mare de 1% ce poate atrage atenia asupra unei leucemii.
Hematocritul indic doar volumul eritrocitar procentual, nu masa
total de eritrocite, de aceea pot exista situaii cu hematocrit sczut
fr scderea volumului eritrocitar total prin creterea volumului
plasmatic ( hemodiluie) sau hematocritul poate fi normal sau sczut
chiar dac s-a pierdut o cantitate mare de eritrocite ( oc
posthemoragic), datorit hemoconcentraiei.

Valorile normale ale hematocritului n funcie de

vrst:
Vrst

Hematocrit %

La natere

54 +/- 1

6 luni

35,5 +/- 5

1 an

35

4 ani

37

6 ani

37

10 ani

37,5

16 ani

39

Aduli B

45 +/- 7

Aduli F

42 +/- 5

Indicii eritrocitari
Evaluarea eritrocitelor din punct de vedere
al volumului i coninutului n hemoglobin se
realizeaz prin msurarea sau calcularea
urmtorilor parametrii: volum eritrocitar mediu
(VEM), hemoglobin eritrocitar medie (HEM),
concentraia
eritrocitar
medie
de
hemoglobin (CHEM), lrgimea distribuiei
eritrocitare (RDW).

Volumul eritrocitar mediu

Volumul eritrocitar mediu (VEM) este msurat direct n analizoarele
automate dar poate fi i calculat atunci cnd se cunosc valorile hematocritului i
cele ale numrului de hemati,i utiliznd formula:
VEM = Hct (%) x 10 / Nr. Er. ( x 106/l)
- Rezultatul se exprim n micrometri cubi sau n femtolitri (fl).
- Valorile normale sunt cuprinse la adult ntre 80-100 fl fiind ceva mai mari la
nou nscui i la vrstnici i ceva mai mici la copiii pn la 18 ani (vezi tab nr. ).
- Valori normale ale VEM caracterizeaz normocitele, valori mai mici dect
normalul, microcitele iar valori mai mari, macrocitele
- VEM este un indice util n clasificarea anemiilor.
- VEM normal asociat cu RDW < 15 caracterizeaz o anemie normocitar;
- VEM sczut cu RDW > 15 indic anemia microcitar iar
- VEM crescut arat o anemie macrocitar.
- Prezena unei duble populaii eritrocitare n proba analizat poate determina n
cazul msurtorilor automate un VEM normal dar prezena RDW >15 i
examinarea la microscop a frotiului de snge corecteaz interpretarea.

VEM fals crescut este determinat de reticulocitoza

marcat (>50%), leucocitoz marcat (>500000/l),
hiperglicemie (>600 mg/dl), prezena de aglutinine la rece ,
intoxicaia cu metanol.
VEM fals sczut este determinat prin hemoliz n vitro,
prezena de eritrocite fragmentate sau exces de EDTA.
Valoare sa depinde de osmolaritatea plasmatic i
numrul diviziunilor eritrocitare.

n cazul analizoarelor automate devine important

stabilirea pragului inferior respectiv superior al msurtirilor
pentru c fixarea prea sus a acestora va duce la
nemsurarea eritrocitelor mai mici respectiv la msurarea i
a leucocitelor, ceea ce determin un rezultat eronat.

Hemoglobina eritrocitar
medie
Hemoglobina eritrocitar medie (HEM) msoar coninutul
mediu de hemoglobin pe eritrocit. Valoarea sa este calculat automat
de analizoatoarele de hematologie sau manual cnd se cunosc valorile
concentraiei hemoglobinei i ale numrului de hematii conform
formulei:
HEM = Hb (g/dl) x 10 / Nr. Er. ( x 106/l)
Rezultatul se exprim n picograme (pg = 10 -12 g).
Valorile normale la adult sunt cuprinse ntre 26-34 pg i se exprim
ca normocromie, n timp ce valori sub normal caracterizeaz
hipocromia. Hipercromia apare din cauza volumului eritrocitar crescut
ca n anemia megaloblastic. Dei HEM depinde att de mrimea
eritrocitului ct i de coninutul su n hemoglobin practic valorile
acestui indice se coreleaz cu cele ale VEM.

Concentraia eritrocitar medie

de hemoglobin
Concentraia eritrocitar medie de hemoglobin (CHEM)
msoar concentraia medie de hemoglobin dintr-un volum dat de
eritrocite. Poate fi calculat de analizorul automat sau manual dup
formula:
CHEM = Hb (g/dl) x 100/ Hct (%)
CHEM se exprim n g/dl.
Valorile normale la adult sunt cuprinse ntre 32-36 g/dl.
CHEM sczut caracterizeaz anemiile hipocrome.
Creterea CHEM peste 36 g/dl nu este posibil deoarece ncrcarea
cu hemoglobin a eritrocitelor normale este maxim. Dar n sferocitoza
ereditar CHEM poate s ating valoarea de 37-39 g/dl. O cantitate
mare de Hb n eritrocit poate s apar numai prin creterea volumului
su ceea ce va influena valoarea hematocritului.

Lrgimea distribuiei
eritrocitare
Lrgimea distribuiei eritrocitare (RDW) este indicele
eritrocitar care cuantific heterogenitatea volumului celular
(gradul de anizocitoz)
RDW este calculat de analizorul automat:
RDW (CV%) = Deviaia standard a mrimii eritrocitelor x
100 / VEM.
Valorile de referina sunt: 11,6-14,8 coeficient de variaie a
volumului eritrocitar. RDW este util n diferenierea betatalasemiei minore necomplicate, n care VEM este sczut iar
RDW normal, de anemia feripriv n care VEM este sczut iar
RDW crescut, RDW fiind un semn precoce al deficitului de fier.
Indicele permite deasemenea diferenierea ntre anemia din
bolile cronice (VEM normal/sczut, RDW normal) i anemia
feripriv incipient (VEM normal/sczut, RDW crescut).