Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Cultura
Cultura
- prezenta:
- crestere uniforma, cu inel aderent de pereti, la suprafata mediului (Escherichia coli),
- pelicula aderenta, uscata, la suprafata (bacilli aerobi sporulati/ Bacillus subtilis),
* miros:
- absent,
-prezent: aromat (Ps. aeruginosa), de indol (Enterobacteriaceae), de corn ars (anaerobi, Clostridium tetani),
fecaloid (E. coli)
* culoare:
- verde: pigment eliberat de Ps. aeruginosa,
- rosu: Serratia marcescens etc
c) Caractere culturale, biochimice si metabolice, pe medii de identificare:
1. Testul sensibilitatii la bacitracina:
- pe mediu geloza sange berbec se insamanteaza confluent o tulpina de streptococ beta hemolitic, se aplica
un comprimat de bacitracina 0,04 UI si se termostateaza 24 ore la 37 C,
- scopul este de a diferentia streptococii beta hemolitici de grup A (bac+, bacitracina - sensibili) de
streptococii de grup non- A (C, G, F, bac -, bacitracina- rezistenti),
Interpretare:
* Test (+): orice zona de inhibitie a cresterii in jurul discului de bacitracina (tulpina sensibila la bacitracina,
este inhibata cresterea ei, nu mai elibereaza hemolizine, hematiile raman integre in jurul discului, rezulta zona
circulara, rosie, in jurul comprimatului de bac),
* Test (-): tulpina de streptococ beta hemolitic este rezistenta la bacitracina, cultura creste pana in marginea
discului impregnat cu bacitracina, elaboreaza hemolizine, lizeaza hematiile din mediu, rezulta zona clara de
hemoliza beta in jurul comprimatului).
2. Testul sensibilitatii la optochin:
- diferentiaza Streptococcus pneumoniae (optochin sensibil) de streptococci viridans (rezistenti la optochin),
- pe o placa cu geloza sange se efectueaza sectoare din colonii izolate, cu aspect morfologic cultural sugestiv
pentru pneumococ, se aplica cate un disc impregnat cu optochin 5 g,
- incubare la 37C, 24 ore, in atmosfera imbogatita cu 5% CO2,
Interpretare:
* Test (+): sensibilitate la optochin: zona de inhibie a cresterii cu diametrul >= 14 mm, Streptococcus
pneumoniae,
* Test (-): rezistenta la optochin, fara zona de inhibitie a cresterii (streptococci viridans),
3. Aspectul cultural pe medii de identificare multitest:
* TSI (three sugar, iron):
- testeaza fermentarea glucozei (cu sau fara gaz), a lactozei, zaharozei, precum si producerea de hidrogen sulfurat,
- acest mediu agarizat, solidificat prin racire, in coloana si panta, contine glucoza, lactoza, zaharoza, o sursa de
sulf, indicator de pH si unul pentru H2S,
- panta este cea care diferentiaza fermentarea lactozei si zaharozei de fermentarea glucozei,
- mediul contine de 10 X mai putina glucoza decat lactoza si zaharoza, ca atare, si metabolitii acizi rezultati din
degradarea zaharurilor, vor fi cantitativ, corespunzatoare,
- in coloana, glucoza va fi degradata in absenta oxigenului, fermentativ, cu producere de cataboliti acizi, virare a
mediului spre pH acid (culoarea roz a mediului devine galbena),
3
- daca bacteria nu degradeaza glucoza, mediul din coloana ramane roz (bacterii glucozo- nefermentative/
Pseudomonas aeruginosa),
- la nivelul pantei, vor fi degradate oxidativ (in prezenta O2) lactoza si zaharoza,
- bacteriile lactozo (+), degradeaza lactoza cu producere de cataboliti acizi, scade pH- ul si are loc virarea de
culoare de la roz la galben (panta galbena, coloana galbena/ E. coli),
-bacteriile lactozo (-) nu degradeaza lactoza din mediu, panta ramane roz, nemodificata (coloana galbena, panta
roz/ Shigella dysenteriae),
- +/ - gaz,
- +/ - hidrogen sulfurat (coloana galbena, cu mai mult sau mai putin H2S/ Proteus, Salmonella etc).
* MIU (mobilitate, indol, uree):
- mediu utilizat pentru triajul bacteriilor din familia Enterobacteriaceae, in ceea ce privesc: producerea de ureaza,
indol si a mobilitatii,
- mediul contine: uree, peptone, triptofan, rosu fenol drept indicator de pH,
- este solidificat in coloana, ca geloza moale, care permite vizualizarea mobilitatii microorganismului insamantat,
prin opacizarea mediului ,
- hidroliza ureei (producerea de ureaza/ la Proteus, Providencia, Morganella) alcalinizeaza mediul (din roz,
culoarea vireaza in rosu portocaliu intens),
- producerea de indol este evidentiata prin inrosirea benzii impregnate cu reactiv Kovacs.
(indol+ la E. coli, Proteus vulgaris)
Citire, interpretare:
- opacifiere numai in lungul traiectului de insamantare: bacterie imobila,
- coloana de mediu opacifiata: bacterie mobile,
- coloana alcalinizata (rosie): ureaza pozitiva,
- culoarea coloanei nemodificata: ureaza negative,
- inel rosu limitat la suprafata mediului: alcalinizare nespecifica,
- hartia indicator rosie: indol pozitiv,
- hartia galbena, nemodificata: indol negativ.
Caracterul cultural (in special al coloniilor izolate, cu morfologie caracteristica pe medii corespunzatoare,
nutritive sau diferentiale) poate oferi elemente suficiente pentru un diagnostic prezumptiv, foarte important
pentru orientarea in instituirea tratamentului empiric.
In continuare, se face:
a) selectionarea coloniilor si repicarea lor in functie de:
- aspectul coloniei,
- natura prelevatului,
- diagnosticul clinic,
- rezultatul examenului bacterioscopic al produsului patologic,
b) identificarea speciei bacteriene (corelarea caracterelor morfologice, culturale, metabolice, antigenice si de
patogenitate).