11/06/08

Contiina
de sine

?
Neurotiine

Raionament
Motivare

Instinct
Reflex
Tactism
Timp geologic

Vertebrate
Nevertebrate

11/06/08

Biologia molecular a
excitabilitii

Excitabilitate
Excitabilitate - capacitatea
p
(condiia
condiia)) unui sistem viu de a capta
semnale specifice,
specifice, ca form de
actualizare a informaiei,
informaiei, necesare
organizrii lui ntru adaptabilitate i
continuitate

11/06/08

Relaia semnal - stimul

semnal receptor
stimul
?
Interaciunea stimul - receptor

fizic
stimul

chimic

Receptor

Interaciunea stimul - receptor

rspuns

11/06/08

De la transport ionic
membranar la comportament

11/06/08

Monostrat fosfolipidic
lipide

Bistrat lipidic
p

Apa

11/06/08

molecul
lipidic

molecul proteic

11/06/08

11/06/08

Sistemul de transport ionic

membranar (STIM)
- Canale
C
l ionice
i i
- Pompe ionice
- Transportori ionici

Canale ionice
Canale ionice controlate (gated)

- controlate (gated) de voltaj

- controlate (gated) de mediator
- controlate (gated) mecanic
Canale ionice fr poart
necontrolate (nongated)

11/06/08

Canale ionice fr poart

necontrolate (nongated)
Semnificatie fiziologica

11/06/08

Canale ionice cu poart

controlate (gated)
Voltaj dependente

10

11/06/08

Canale ionice cu poart

controlate (gated)
Controlate chimic

Canale ionice Ach

11

11/06/08

Schema generala a receptorului de NMDA

Kainat
K

20
00 nM, CA3

Bicuculin
B

20 M, CA3
2

NMDA N-metil-D-aspartat; PCP- fenciclidina; MK-801 - dizocilpina

CONTROL

CRI
CRIZ
Z EVOCAT

CRIZ SPONTAN

Bicuculina

12

11/06/08

Canale ionice cu poart

controlate (gated)
Controlate mecanic

STIM

situs de
ancorare
intracelular
membran celular

protein
fibrilar
extrcelular
membran
celular
intracelular

13

11/06/08

STIM
situs de
ancorare

extrcelular

membran
celular

intracelular
protein
fibrilar

Canale de potasiu

Canale de calciu

poart

Canale de sodiu

4-amino-piridin

Nifedipin

Omegaconotoxin

Dizociplin

Tetraetilamoniu

Nimodipin

Bepridil

Feniciclidin

Glibenclamid

Verapamil

Efonidipin

Fenciclidin

Nicardipin

Analogi de
tedisamil

Cadmiu, lantan

Difgenilamin 2
carboxilat

Analogi de tedisamil Fenciclidin

Dopamina
Alfa-dendrotoxin
Charybdotoxin

Mibefradil

Englitazon
g

Nichel, cesiu

Azimilida

Nitrendipin

Dimetilsulfoxid

Clordiazepoxid

Dizocilpin

Penfluridol

Ceriu
Zonisamid

Blocani de
canale ionice

Flunorizin

14

11/06/08

POMPE IONICE
particulariti funcionale
- transport
t
t activ-ioni,
ti i i mol.
l organice
i
- implic reacii enzimatice
- rat mic de transport

POMPE IONICE
clasificare
- tip
ti P
- tip F
- tip V
- tip ABC

15

11/06/08

Molecule mici

Na+, K+, H+, Ca++

citosol

Pompe tip P

Pompe tip
P
ti F ii
tipV

Pompe tip
P
ti ABC
(transporteri)

POMPE IONICE
tip P
- Pompa
P
N
Na-K
K
- Schatzmann 1953 glicozide cardiace
- Skou, 1957 ATP-aza activata de Na i K
1977, PN

16

11/06/08

situs
oubaina

gradient
electrochimic

gradient
electrochimic
citosol

extracelular

citosol

ROL

17

11/06/08

POMPE IONICE
tip P

Pompa Ca

Pompa de Ca
Extracel

Intracel.
N

Situs de legare a Ca2+

Calmodulin

Situsul ATP-azei

Situsul de legare a ATP

18

11/06/08

POMPE IONICE
- tip F- sintetizeaz ATP pe
baza gradientului de H

- tip V intoduc H in lisosomi si

vezicule sinaptice

19

11/06/08

POMPE IONICE
tip ABC

Transportori ionici
- Na/Ca
- Na/H
- Na/HCO3
- Na/ aa, Na/G
- Cl/HCO3 - Na/K/2Cl
- K/Cl

20

11/06/08

H+
H+

K+

3Na+

Ca2+

POMPE

TRANSPORTORI

K+
Cl-

CANALE

K+

Cl-

Ca2+

AA
Na+

Componentele sistemului
de transport ionic membranar.
Cl-

Distribuia sarcinilor electrice

21

11/06/08

Valorile concentraiilor ionice i a

potenialului Nernst n celula nervoas

Ion Concentraie Concentraie

extracelular intracelular
(mM)
(mM)
+
K
5
14 0
C l1 10
10
+
Na
1 45
10

Potenial Nernst
(mV)
8 9 .0 0 0 2 1 8 9 3
6 4 .0 4 5 6 5 0 1 4
7 1 .4 2 4 1 3 2 1 4

Ec. Goldman

Ec. Nerst

22

11/06/08

Potenial de aciune

0 mV

PA
Na+

50

K+

+20

Pm (mV)

depolarizare

repolarizare

depolarizare

- 60
hiperpolarizare

repolarizare

timp (ms)
Variaia potenialului de membran n raport cu activitatea
celulei nervoase

23

11/06/08

Transmiterea i procesarea
semnalului n sistemul nervos

I. Date generale
SNC - 1011 neuroni;

- 1000 sinapse/neuron
- alte mecanisme de comunicare
- neuron=microprocesor ?

24

11/06/08

Transmiterea i procesarea
semnalului n sistemul nervos
Repere istorice
L Galvani 1791L.Galvani
1791 97-electricitatea
97 electricitatea
animal
A.Volta-bateria electric
J.Bernstein- potential bioelectric
Ch Sherrington
Ch.
Sh i t
18971897 Sinapsa
Si
Cole i Curtis -1939, Hodkin&Katz
Hodkin & Katz- 1949- PA / Na
Otto Loewi-1920- Ach

25

11/06/08

Componenta trigger
trigger si de conducere

Transmiterea sinaptic electric

model tridimensional
al sinapsei electrice:
A. Seciune prin
sinaps Fiecare
sinaps.
din cele dou
membrane
conine cte
o jumtate din
canalul sinaptic.
B Conformaia
B.Conformaia
conexonului
variaz cu starea
nchis/deschis.
C. Semnificaie
funcional ?

26

11/06/08

Neurotransmitori cu molecul mic i enzimele lor de

biosintez
Transmitor
Transmi
tor

Enzime

Activitate

Acetil colin

Colin acetiltransferaz

Specific

D
Dopamin
i

Tirozin
Ti
i hid
hidroxilaz
il

Specific
S
ifi

Epinefrin

Tirozin hidroxilaz i
dopamin b hidroxilaz

Norepinefrin

Tirozin hidroxilaz i
dopamin b hidroxilaz

Specific

Serotonin

Triptofan hidroxilaz

Specific

Histamin

Histidin decarboxilaz

Specificitate incert

Amine biogene

Aminoacizi
GABA

Glutamat decarboxilaz Specificitate probabil

Glutamat

Enzime din
metabolismul general

Cale specific
nedeterminat

Glicin

Enzime din
metabolismul general

Cale specific
nedeterminat

Peptide cerebrale neuroactive

clasificate dup localizarea tisular
Categoria

Peptide

Hormoni eliberatori hipotalamici TRH, GnRH, Somatostatin, CRH, GHGH-RH

Hormoni neurohipofizari

Vasopresin, Oxitocin

Peptide hipofizare

ACTH, BB-endorfin, A
A--MSH, Prolactin,
LH, GH, TSH

Peptide gastrointestinale

VIP, CCK, Gastrin, Neurotensin, MetMetEnkefalin, LeuLeu-Enkefalin, SP,

Insulin, Glucagon, Bombezin,
Secretin, SST, TRH, Motilin

Peptide cardiace

ANF

Altele

Angiotensina II, Bradikinin,

Calcitonin, CGRP, NPYY, Galanin,
Substana K (Neurokinina A), Peptide
de somn

27

11/06/08

Sinapsa chimic
Segment
presinaptic

AGONITI

ANTAGONITI
Sinaps excitatorie
Sinaps inhibitorie

Segment
postsinaptic

sinapsa colinergic

28

11/06/08

Receptori colinergici
Nicotinici
Ag.nicotina
Atg. d-tubocurarina

Muscarinici
Ag.muscarina, pilocarpina
Atg. atropina

Nicotinici musculari
Nicotinici neuronali
Ag.oxotremorina
Ag.feniltrimetilamoniu Ag.dimetilfenilpiperazina
Atg. propilbenzilcolina
Atg. d-tubocurarina
citisina
Atg. trimetafan, bungarotoxin
embrionar
(1)2
jonctional
(1)2

nicotinici
neuronalili
2-5

nicotinici
neuronali
2-10

muscarinici
M1-5
15

R. MUSCARINICI

Muscarinici M1
pirenzepin
Muscarinici M2
metoctramin
Muscarinici M3
hexahidrosiladifenidol
Muscarinici M4
himbacin
Muscarinici M5
?

29

11/06/08

Distribuia receptorilor colinergici

I. Distribuia periferic
- m.scheletic (N)
- s n v (N+M)
II. Distribuia central SNC (N+M)
III. Alte roluri
orgs. unicelulare dezvoltare
orgs. pluricelulare difereniere

I.Distribuia receptorilor colinergici

Receptorii nicotinici musculari embrionari
- pe toat
t t suprfaa
f fib
fibreii musculare
l
neinervat sau denervat
- au o rat mare a turnoverlui
Receptorii nicotinici musculari joncionali
- la nivelul jonciunii neuromusculare
- au o rat mic a turnoverlui

30

11/06/08

I.Distribuia receptorilor colinergici

Receptorii nicotinici neuronali
- sp.i psp.din creasta neural,
au proprieti
i ti id
identice
ti
- gg. postsinp. sp.,psp. i MS.
Receptorii muscarinici neuronali
postgg psp - m.n.visceral,
m n visceral miocard
- postgg.psp.
glande secretorii
- postgg.sp.- piloerecie, sudoraie

II.Distribuia receptorilor colinergici

-interneuronilor-corpul striat- controlul
motor extrapiramidal i memorie
-neuronilor de proiecie:
din nc.bazali,conectati cu hipocampusul
bulbul olfactiv i cortex.(Meynert- b. Alz.
-din tr.cerebral, conectati cu talamusul,
nc. interpeduncular,coliculii. sup
- cel. Renshaw

31

11/06/08

Sinapsa Colinergica
Transportor
de colina (ChT)
Transportor
vezicular ACh ((VAchT))
ACh

ACh

vesamicol
ChAT
Colina

ACh
AcCoA

AChE

ACh

fisostigmina

hemicolinium
Colina + Ac-

Trasportor de colina (ChT)

- 13 segmente transmembranare
- grad
d mare de
d conservare
filogenetic
- in alte esuturi, (Km=10-100 mol/L)
- in neuron
neuron, Na dependent
dependent, situsuri
de fosforilare, (Km= 1-5 mol/L)
- co-localizat n membr. vezicular
cu VAchT i n membrana sinaptic

32

11/06/08

Trasportor de colina (ChT)

- blocarea endocitozei colinei ?
- nr. i activitii ChT din
membrana sinaptic
- stimularea sintezei i elib. ACh ?
- nr. i activitii ChT din
membrana sinaptic
- captarea Ch = factor de control
al biosintezei i eliberrii ACh
- tratamentul cu hemicolin
?

Transportor vezicular de
acetilcolina (VAChT)
- 12 segmente transmembranare
- gena localizat pe Cr.X in
apropierea genei de sinteza a ChAT
- este un antiporter H+ / ACh, ATP
depentent
- este inhibat selectiv de vesamicol

33

11/06/08

Acetilcolinesteraza (AChE)
-Este un important factor de control
al transmiterii sinaptice
- animale knock out prezinta un
tremor continuu, dezvoltare
deficitar, disfuncii neurologice
-Inhibitori
Inhibitori AChE: sarinul,
sarinul compui
organofosforici induc fibrilaii
musculare, blocarea activitii
musculare

Acetilcolinesteraza (AChE)
-succinilcolina blocant muscular
competitiv - miorelaxant
- anticolinesteraze
ti li
t
- tratament
t t
t pentru
t
miastenia gravis, B.Alzhaimer
-inhibitori reversibili: edrofonium,
galamina

34

11/06/08

Rspunsuri biochimice mediate prin receptorii colinergici muscarinici

ACh
NE

A
-AdrR

M2/M4
mAChR

AC

ATP

cAMP

GTP

GTP

Stimularea fosfolipazei C fosfoinozitid-specifica

M(1,3,5)
mAChR
PI-PLC
Protein
kinazaC

q/11

PIP2PIPPI

Ca2+
GTP
Diacilglicerol
g
IP3

35

11/06/08

ACh

M2/M4
mAChR

GTP

K+

Basic Neurochemistry G. Siegel, Elsevier, 2006

sinapsa adrenergic

36

11/06/08

Subtipuri de receptori 1-adrenergici

1A
Aminoacizi
430-476
Cromosom
8
Cale efectoare Ca2+, PKC
Distributie

inim,
inim ficat,
ficat
cerebellum,
cortex cerebral,
vase sanguine

1B
515
5
Ca2+, PKC

1D
560
20
Ca2+, PKC

splin rinichi,
splin,
rinichi aorta,
aorta
creier fetal
cortex cerebral
vase sang

Subtipuri de receptori 2-adrenergici

2A

2B

Aminoacizi
450
450
Cromosom
10
2
Cale efectoare cAMP
cAMP
Distribution
pancreas,
ficat,
intestin subire, talamus
locus ceruleus
hipocampus

2C
461
4
cAMP
inim,plmn
aorta, hipocampus
bulb olfactiv,

37

11/06/08

Subtipuri de receptori -adrenergici

1

Aminoacizi

477

413

Cromosom

10

Cale efectoare

cAMP

cAMP

Distributie

3
402/408
8
cAMP

inim, rinichi, plmn,ficat

creier,
cortex cerebral,
cerebral cerebel,
cerebel
esut adipos
hipotalamus
hipocampus,
cortex cerebral,
muschi neted,
bulb olfactiv

Caracteristici ale oarecilor knockout

pentru receptori catecolaminergici
Knockout

Fenotip

Receptor adrenergic 1A

Scderea presiunii arteriale

Receptor adrenergic 1B

Scderea presiunii arteriale i a rspunsului la

stimulenii SNC

Receptor adrenergic 1D

Scderea presiunii arteriale

Receptor adrenergic 2A

Creterea activitii simpatice, tahicardie

Receptor adrenergic 2B

Scderea rspunsului vasoconstrictor la

agonitii 2

R
Receptor
t adrenergic
d
i 2C

F un fenotip
Fr
f
ti evident
id t

Receptor adrenergic 1

Majoritatea mor prenatal

Receptor adrenergic 2

Modificri de tonus vascular i de metabolism

energetic n stres

Receptor adrenergic 3

Modificarea concentraiilor de leptin i insulin

dup tratamentul cu agoniti

38

11/06/08

Sinapsa noradrenergica

Sinapsa glutamatergica

39

11/06/08

Transportori sinaptici

40