21.09.

2010

CLASIFICAREA SPIROCHETELOR

MICROBIOLOGIA I
DIAGNOSTICUL DE
LABORATOR AL
SPIROCHETOZELOR

Spirochetele bacterii helicoidale,

flexibile i mobile (fibrile interne),
rspndite n natur, comensale ale
mucoaselor umane.
Familii : Spirochaetaceae,
Leptospiraceae

MICROBIOLOGIA I DIAGNOSTICUL DE
LABORATOR AL SIFILISULUI
Familia Spirochaetaceae
Genul Treponema
Specii : - T.pallidum (patogen)
subspecii (variante):
T.pallidum pallidum (agentul sifilisului)
T.pallidum endemicum (agentul bejelului, sifilis
endemic nevenerian leziuni cutanate)
T.pallidum carateum (agentul pintei/carate,
nevenerian, America Central i de Sud)

T. pertenue (agentul pianului, maladie

cutanat, nevenerian, zone
tropicale i subtropicale)

CARACTERE MORFOLOGICE I
TINCTORIALE

Treponeme comensale:
Orale (T.denticola, T.orale, etc)
Genitale (T.phagedenis,
T.refringens, etc)

T.pallidum bacterie fin, helicoidal, cu 8-14 spire

regulate i capetele ascuite, mobil cu micri de
flexie, nurubare i translaie. Gram -.
Evidenierea :
- preparate native (microscopul cu fond negru,
contrast de faz)
- Nu se coloreaz dup Gram
- Romanovsky-Giemsa roz-pal
- Impregnare cu sruri de argint (filamente negrebrune pe fondul galben)
- Frotiuri Burri necolorate pe fondul negru

21.09.2010

CARACTERE DE CULTUR

STRUCTURA ANTIGENIC

Cultivarea T.pallidum in vitro

imposibil
Pasaje succesive n testicule de iepure
(tulpina Nichols de T.pallidum).
Suspensii de astfel de treponeme
supravieuiesc 72 ore n mediul MayerNelson (la 25 grade n anaerobioz).

Haptene lipidice (antigen cardiolipinic /

cardiolipin, Ag nespecific) fosfolipid prezent
la treponeme patogene i esuturi ale
mamiferelor (extras din cord bovin)
Antigen proteic, de grup, comun
treponemelor patogene i nepatogene
(obinut din tulpina Reiter a T. phagedenis)
Peptide i glicopeptide din membrana
extern, specifice T.pallidum (obinute din
tulpina Nichols a T.pallidum)

21.09.2010

FACTORI DE PATOGENITATE

Factori de adeziune
Factori de invazie (hialuronidaza)
Factori de sensibilizare
Endotoxina
Supresia rspunsului imun celular n
stadiile iniiale ale bolii

PATOGENEZA SIFILISULUI

1.
2.

3.

Sursa de infecie omul bolnav

Cile de transmitere:
Contact direct (sexual, srut)
Contact indirect (obiecte, instrumente
chirurgicale recent contaminate,
transfuzii de snge, etc.)
Transplacentar (vertical)

In 11 luni ale anuluiu 2009 au fost

nregistrate 2164 cazuri de sifilis, inclusiv
87 cazuri la copii, comparativ cu 2201
cazuri, inclusiv 89 cazuri la copii n anul
2008.
n 2 luni ale anului 2010 s-au nregistrat
394 cazuri de sifilis (2 luni 2009 400
cazuri) i 238 cazuri de gonoree acut i
cronic (2 luni 2009 300 cazuri), inclusiv
11 i respectiv 10 cazuri la copii pn la 17
ani.

Poarta de intrare tegumentul lezat,

mucoasa genital, bucal, anal
Perioada de incubaie 2-6 sptmni (3)
Evoluia sifilisului
Sifilisul primar (4-6 sptmni)
la poarta de intrare apare ancrul sifilitic:
ulceraie cu baza indurat, nedureros, bogat
n treponeme (99% localizare genital i
anal, 1% - bucal).
- Adenopatie satelit
- Vindecare spontan a ancrului (imunitatea
local)

21.09.2010

Sifilisul secundar (urmare a diseminrii

sangvine) dup 6-8 spt. de evoluie
- Manifestri cutanate (rozeole, sifilide
erozive,etc)
- Manifestri mucoase (plci mucoase)
- Poliadenopatie
- Leziuni ale organelor interne (hepatite,
nefrite, periostite, meningite, etc)
- Rspunsul imun poate duce la
dispariia leziunilor n 1-3 luni

Sifilisul latent (treponemele persist n

ganglioni limfatici i splin)
Lipsa semnelor clinice
Necontagios
Posibile recidive
Sifilisul teriar (dup 4-30 ani de la
contaminare)
Afeciuni cardio-vasculare (aortite,
anevrisme)
Afeciuni neurologice (tabes, paralizie
general)
Afeciuni osoase i cutanate (gome)
Deces posibil

21.09.2010

Sifilisul congenital
n timpul graviditii moartea
ftului prin afeciuni poliviscerale
La finele graviditii sau la natere
leziuni tardive (dentare, osoase,
oculare)
Imunitatea (nesteril)
Umoral
Celular (protectoare, deprimat n
sifilisul primar i secundar)

21.09.2010

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR

1.
-

Prelevate: serozitatea din leziunile

primare sau secundare, puncii din
ganglioni limfatici, serul sangvin, LCR
Metode de diagnostic
Examenul microscopic
Microscopia pe fond negru, contrast
faz
RIF
Impregnare argentic, coloraia Giemsa

Examenul serologic (sifilis secundar,

teriar)
I Reacii nespecifice (cu Ag cardiolipinice)
- Reacia VDRL (Veneral Disease Research
Laboratory) - reacie de precipitare
Ieftin, facil, specificitate redus
Reacii fals pozitive: viroze, colagenoze,
paludism, ciroze, reumatism, graviditate,
etc.
- RFC (Wassermann)

Reacii specifice (cu Ag treponemice)

RFC Wassermann sau Kolmer
RHAI (Ag lizat din tulpina Nichols fixat pe
hematii)
RIFI (Ag suspensie de T.pallidum fixat pe
lam)
RIT (testul Nelson) (Ag tulpina Nichols a
T.pallidum)
RIE (ELISA)
PCR (detectarea ADN) n LCR, lichidul
amniotic, esut

EVOLUIA TITRURILOR DE AC

RIFI se pozitiveaz la apariia ancrului

(o lun dup infectare)
VDRL dup 6 sptmni
RHAI
RIT n stadiul secundar, 2 luni dup
infectare

Dup tratamentul sifilisului:

VDRL se negativeaz prima
Alte reacii rmn pozitive

21.09.2010

TERAPIA I PROFILAXIA SIFILISULUI

ANTIBIOTERAPIA beta-lactamine,
tetracicline, macrolide (rezisten la
aminoside)
Reacia Herxheimer este posibil
(efectul endotoxinei)
PROFILAXIA depistarea sistematic
activ i tratarea bolnavilor

MICROBIOLOGIA I DIAGNOSTICUL DE
LABORATOR AL LEPTOSPIROZELOR
Leptospirele sunt bacterii care pot infecta
numeroase specii de animale (n special vertebrate)
i accidental omul.
Clasificare
Familia Leptospiraceae
Genul Leptospira
Spp. L.interrogans (patogen pentru om i animale)
L.biflexa (saprofit, ape de suprafa)
L.parva (saprofit, apa de conduct)

CARACTERE MORFOBIOLOGICE
Caractere morfologice bacterii
fine i spiralate, cu 10-30 spire
strnse i regulate, cu capetele
ndoite n crlig (aspect de S, C, ?).
Realizeaz micri de nurubare,
flexie i translaie.
Pot fi examinate la microscopul cu
fond negru sau cu contrast de faz.
Coloraia Giemsa roz-pal

CARACTERE MORFOBIOLOGICE
Caractere de cultur
Medii lichide cu sruri
anorganice tamponate cu fosfai i
mbogite cu ser de iepure (mediile
Korthof, Stuart), medii semisintetice
- Aerobioz
- 28-30 grade C
Leptospirele se multiplic n 3-10 zile
(pn la o lun) fr a tulbura
mediul

21.09.2010

CARACTERE MORFOBIOLOGICE
Structura antigenic a L.interrogans
1. Antigene cu specificitate de gen,
LPZ
2. Antigene majore de grup (peste
20 serogrupuri)
Ex.: L.icterohaemorrhagia,
grippotyphosa, hebdomadis,
canicola, pomona, autumnalis, etc.
3. Antigene minore de tip (peste 200
serotipuri/variante) - proteice

PATOGENEZA LEPTOSPIROZELOR

Sursa de infecie: roztoarele slbatice,

accidental-roztoarele peridomestice sau
animalele domestice (porci, cini, cai,
bovine) tubii contori proximali renali
Poarta de intrare: tegument i mucoase
Cile de transmitere:
Alimentar (alimente i apa contaminat)
Contact direct cu animalele infectate
Contact indirect (cu apa contaminat)

Leptospirele sunt antrenate n circulaia

sangvin fr leziuni la poarta de intrare

Incubaia 1-2 sptmni (10 zile)

Evoluia leptospirozelor:
1. Faza septicemic (generalizat) 7 zile
- febr, frison, sindrom meningeal
2. Faza afebril (1-3 zile)
3. Faza organic (febr, sindrom meningeal,
sindrom hepato-renal, sindrom cardiovascular-hemoragic, icter)
Imunitatea: umoral, specific de tip,
durabil

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR
Prelevate: snge, LCR (prima
sptmn), urin (din sptmna
II de boal), probe necroptice
(seciuni histologice renale,
hepatice)
Metode de diagnostic
- Examenul microscopic (fond negru,
contrast de faz, coloraia Giemsa
sau impregnaia argentic a
seciunilor histologice), RIF

21.09.2010

Examenul bacteriologic
Probele sunt nsmnate n cte 3-5
tuburi cu mediu de cultur,
incubate n aerobioz la 28 grade
pn la 1-3 luni.
Identificarea n baza caracterelor:
- Microscopice
- De cultur
- De patogenitate
- Serologice (RFC, RAL)
-

TRATAMENT I PROFILAXIE

Tratament: penicilin, tetraciclin,

gama-globulina antileptospiroas
Profilaxie: deratizarea, igiena i
protecia muncii, supravegherea
bazinelor de ap, vaccinarea
selectiv (vaccin inactivat, durata
imunitii-1 an)

Examenul biologic (inocularea

intraperitoneal la cobai). Peste 1-3 zile
leptospirele pot fi depistate n exsudatul
din cavitatea abdominal.
Tehnici PCR (detectarea ADN)
Diagnocticul serologic (din spt. II)
1.
Reacii cu specificitate de gen (RFC, RHAI,
RIFI, ELISA)
2.
Reacii cu specificitate de tip (de
referin)-RAL (Reacia de aglutinare-liz)
Titrul diagnostic - 1/400 sau cretrea n
dinamic de 4 ori
-

MICROBIOLOGIA I DIAGNOCTICUL DE
LABORATOR AL BORRELIOZELOR

CLASIFICARE:
Familia Spirochaetaceae
Genul Borrelia
Specii:
- B.recurrentis (transmis prin
pduchi)
- B.duttoni, B.hispanica, B.persica,
B.burgdorferi, etc (transmise prin
cpue)

21.09.2010

CARACTERE MORFOBIOLOGICE
Morfologia: filamente spiralate cu
5-8 spire neregulate, flexibile i
mobile, cu micri de flexie i
nurubare. Gram-, colorate n
albastru-violet dup Giemsa.
Caractere de cultur: bacterii
anaerobe, cultiv in vitro pe medii
complexe i in vivo (ou embrionat,
artropode, animale de laborator)

Structura antigenic: variabilitate

pronunat
Habitat
- Omul bolnav n snge i esuturi
infectate
- Roztoare
- Vectori (pduchi, cpue) n lichidul
celomic

FEBRA RECURENT
Febra recurent epidemic
Agentul cauzal - B.recurrentis
Sursa de infecie omul bolnav
Vector - Pediculus humanus
Contaminare prin lichidul celomic
eliberat la zdrobirea pduchilor
Poarta de intrare tegumentul lezat,
conjunctiva

Febra recurent endemic

Agenii cauzali - B.hispanica,
B.persica, B.duttoni, etc
Sursa de infecie roztoarele
slbatice sau peridomestice
Vectori cpue din genul
Ornithodoros
Contaminare prin neptur, prin intermediul
lichidului coxal, prin
dejecii anale

10

21.09.2010

PATOGENEZA FEBREI RECURENTE

Perioada de incubaie 3-14 zile (borreliile

se multiplic n viscere ficat, splin,
creier, etc.)
Perioada febril debut brutal, cu febr 4041 grade i frison (endotoxina eliberat n
snge la distrugerea borreliilor). Algii
difuze, stare de tifos, semne meningeale,
hepato-splenomegalie, icter. Criza febril
dureaz 7 zile.
Urmeaz o perioad afebril de o
sptmn, succedat de alt criz termic
cu durat mai scurt
Accesele se repet (2-4-10 recurene)

Sub aciunea anticorpilor bactericizi

formai la sfritul acceselor febrile
se selecteaz varianta antigenic
responsabil de urmtorul acces.
Febra recurent endemic are o
evoluie mai benign

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR
AL FEBREI RECURENTE
Prelevate: snge, LCR
Metode de diagnostic:
1. Examenul microscopic (n perioada febril):
- preparate native (fond negru, contrast de
faz)
- Frotiuri colorate Giemsa
- RIF
2. Examenul biologic (infectarea cobailor,
obolanilor)

TRATAMENTUL I PROFILAXIA
FEBREI RECURENTE

Tratament: peniciline, tetracicline,

cloramfenicol
Profilaxie: lupta contra vectorilor i
protecia individual

11

21.09.2010

BOALA LYME

Agentul cauzal Borrelia burgdorferi

(B.burgdorferi sensu stricto,
B.afzelii, B.garinii)
Caractere morfoculturale bacterie
helicoidal, mobil prin micri de
flexie i rotaie. Nu se coloreaz prin
metoda Gram.
Se cultiv lent (cteva sptmni)
numai pe medii speciale

HABITAT I CONTAMINARE
Rezervor de infecie: roztoare,
animale domestice (cini, cai, etc),
psri.
Vectori: cpue din genurile Ixodes
i Amblyomma, nari, tuni
Contaminare: prin neptura vectorului infectat

EVOLUIA BOLII LYME

Incubaie 2-4 sptmni
I Faza primar (leziune cutanat
eritemul cronic migrator). Durata
3-4 sptmni

Faza secundar durata 2-6

sptmni manifestri neurologice,
cardiace, cutanate, artralgii
Faza teriar dureaz luni, ani
afeciuni cronice cutanate
(acrodermatit cronic atrofiant),
articulare (artrite cronice),
neurologice (encefalomielite)

12

21.09.2010

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL
BOLII LYME

1.

2.
3.
4.

Prelevate: biopsii cutanate, snge, LCR,

lichid sinovial
Metode de diagnostic:
Examenul microscopic (preparate native,
coloraia special a biopsiilor, impregnare
argentic)
Examenul bacteriologic
Diagnosticul serologic (RIFI, ELISA,
Western-blot)
PCR

Tratament peniciline, tetracicline

Profilaxie informarea populaiei,
extragerea cpuelor

13