Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Excitabilitate
Identitate
Transport ionic
membranar
Evoluie
Adaptabilitate
Acest suport este reprezentat, n general, de dinamica repartiiei ionilor la nivelul membranelor
celulare. La rdul ei, dinamica repartiiei ionilor rezult din interaciunea legilor termodinamicii,
masei, i cmpului electromagnetic cu sistemul de transport ionic membranar (STIM)Fig.2.9.
n ciuda caracterului relativ restrictiv att al legilor fizice, ct i al funciei STIM, repartiia
ionilor de o parte i de alta a membranei celulare - interfaa funcional dintre semnal i celula
excitabil - reprezint un sistem departe de echilibru. Ca urmare, excitabilitatea, la nivel celular, i,
mai ales, la nivel de sistem megacelular, cum este creierul uman, reprezint o dimensiune a crei
limite, sunt dificil de cuantificat. Cu toate acestea, cuantificarea limitelor/parametrilor excitabilitii
sistemului nervos i muscular este o necesitate fundamental att din perspectiv clinic ct i a
cunoaterii celui mai complex sistem de prelucrare i, posibil, de generare a informaiei.
Rspunsul oricrei structuri vii la aciunea unnui semnal este rezultatul interaciunii specifice
dintre semnal, ca suport al informaiei i o structur capabil s decodifice i s-i preia mesajul
informaional. Ca urmare a interaciunii, semnalul devine stimul iar structura ce preia informaia se
definete ca receptor, stabilindu-se, astefel, relaia de condiionare reciproc funcional ntre cele
dou sisteme.
1
SISTEM
RECEPTOR
STIMUL
CELUL
Deoarece este dificil de a stabili de la ce nivel de organizare a materiei aceste tipuri de interaciune pot fi cuantificate printr-un rspuns reproductibil, obiectivul acestui capitol este prezentarea mecanismelor moleculare ce stau la baza excitabilitii celulelor nervoase i musculare, precum i
extrapolarea lor, prin cuantificare/standardizare, n vederea utilizrii parametrilor rezultai n scop
diagnostic i/sau terapeutic. Prezentarea mecanismelor i parametrilor excitabilitii va fi n raport cu
relaia funcional ce se stabilete ntre elementele implicate n definirea excitabilitii (fig. 2.2).
RSPUNS
intracelular
extracelular
2. Excitarea de ctre un stimul chimic din mediul extern a receptorului specific (gust, olfactiv), sau
excitarea de ctre neuromediator a unei celule nervoase;
3. Excitarea prin mecanisme celulare intrinseci autoexcitare. Acest mecanism de excitare asigur
desfurarea unor funcii vitale (respiraia, activitatea cardiac .a) iar, n ultimul timp, sunt tot mai
multe argumente care susin implicarea lui n activitatea cortical.
Toate aceste mecanisme de excitare au un factor comun- potenialul de aciune n diferite
ipostaze care, fiind, relativ, uor cuantificabil/msurabil, reprezint, n general, principalul obiect de
lucru pentru neuroelectrofiziologia clinic. Astfel, tehnicile neuroelectrofiziologice fie, utilizeaz un
curent electric standardizat, n raport cu obiectivul urmrit, ca stimul pentru a msura, apoi rspunsul
electric al celulei/celulelor, din perspectiva mai multor parametri (de timp, amlitudine), fie, urmresc
generarea natural i conducerea potenialelor n sistemul nervos, sau, n fine, rspnsul efector
(contracia muscular). Principiul i metodologia principalelor tehnici de investigare medical vor fi
prezentate n capitolele acestei cri.
Pentru o bun utilizare a tehnicilor neuroelectrofiziologice i o interpretare ct mai just a
rezultatelor obinute vor fi prezentate, n continuare, mecanismele interaciunii dintre stimul i celul a
crei consecin este generarea potenialului de aciune. Capacitatea celulei de a rspunde la un stimul
specific depinde de polaritatea membranar din momentul aciunii. Pentru o bun nelegere a
fenomenului de polaritate membranar sunt necesare cteva precizri.
Termenul de polaritate electric membranar nu se refer la o diferen de repartiie a
numrului total de anioni sau cationi ntre compartimentul extra- i intracelular, deoarece numrul
total al sarcinilor anionice este considerat egal cu cel al sarcinilor cationice, att n fiecare din cele
dou sectoare, intra- i extracelular, ct i ntre ele (fig. 2.3).
Fig. 2.3. Repartiia ionilor n sectorul intra- i extracelular. Numrul sarcinilor cationice i
anionice este egal pentru fiecare compartiment i ntre cele dou compartimente. n apropierea
faei extracelulare sunt dispui cationi iar a celei intracelulare, anioni,
Polaritatea electric de repaus a membranei rezult, pe de o parte, din repartiia mai bogat a
sarcinilor pozitive n apropiere feei externe i a celor negative n apropierea feei citoplasmatice, iar,
3
pe de alt parte, din repartiia inegal, de o parte i de alta a membranei celulare, a fieccruia dintre
principalii ioni implicai n polaritatea membranei celulare (Na+ , K+ , Ca++, Cl-)
Dispunerea preponderent a cationilor i anionilor pe cele dou fee ale membranei celulare
reprezint doar o fraciune mic din cantitatea acestora i se datoreaz prezenei n concentraie mai
mare a unor molecule ncrcate negativ (aminoacizi, proteine) n sectorul intracelular, molecule ce nu
pot difuza prin membrana celular.
Repartiia inegal a principalelor tipuri de ioni de o parte i de alta a membranei celulare
-polaritatea membranar- reprezint condiia principal a excitabilitii celulare i este rezultatul
activitii componentelor STIM: canale, pompe i transportori.
deosebit de complex i are un impact deosebit innd seama de implicarea transportului ionic n
desfurarea diverselor funcii ale sistemului nervos i muscular. Pentru o clasificare a canalopatiilor
neurologice vezi Graves D.T.2005, iar pentru implicarea canalelor ionice n diferite forme ale
sindromului de epilepsie idiopatic vezi Mulley C.J. 2003.
Numrul tipurilor de canale ionice
cunoscute pn n prezent este peste 100, dar
innd seama de faptul c prima descriere a
structurii secundare a unei proteine ce
formeaz un canal a fost realizat relativ
recent, (Huang, 1982), este de ateptat o
cretere semnificativ a acestei valori.
Mecanismul de funcionare al acestui
sistem de transport reprezint unul din
criteriile de clasificare a canalelor ionice i va
fi prezentat pentru fiecare din tipurile mai bine
cunoscute, dar prezentarea ctorva principii Fig. 2.4 Fixarea micropipetei pe membrana celular cu
generale de funcionare, este util n vederea izolarea unui canal ionic controlat de acetilcolin, pentru
nregistrea curenilor prin metoda patch clamp. (Modificat
formrii unei imagini de ansamblu asupra dup Kandel.E. 2000
transportului ionic prin canalele membranare.
n celula nervoas i muscular canalele ionice permit un flux de cca. 100 000 000 ioni,
calculat pentru fiecare secund de excitare/canal. Aceast deplasare rapid a ionilor este pasiv numai
aparent pentru c, n realitate, ea este determinat de o for ce rezult din gradientul electrochimic,
pentru care s-a consumat energie n timpul ct celula era n stare de repaus.
Dac analizm i mai atent acest proces constatm c la meninerea concentraiei ionice a
lichidului interstiial dintr-o anumit zon particip toate celulele din zona respectiv iar probabilitatea
ca toate aceste celule s fie excitate simultan este foarte mic. Ca urmare, dei fiecare excitare celular
necesit un influx mare de ioni de sodiu i este condiionat de un eflux de K+ , iar capacitatea de
transport a pompelor Na+ K+, deci de restabilire a concentraiilor, raportat la unitatea de timp este
de aproximativ 1000 de ori mai redus dect cea a canalelor ionice, este puin probabil ca prin
excitarea repetat, fiziologic, a unei celule s se produc o scdere a concentraiei extracelulare a Na+
sau o scdere a concentraiei intracelulare a K+, pn la limita perturbrii excitabilitii.
Un alt principiu de funcionare a canalelor ionice este capacitatea lor de a selecta, ntr-un grad
mai mare sau mai redus transportul ionic. Majoritatea canalelor permit trecerea unui singur element
ionic, dar exist i canale ionice permeabile pentru mai multe tipuri de ioni.
Primul sau cel mai general grad de selecie este cel n raport de tipul de sarcin, pozitiv sau
negativ. Astfel exist canale selective cationice, permisive pentru ionii din lichidul extracelular: Na+,
Ca2+ i Mg2+, dar cu o distribuie i funcie mai puin cunoscut. Toate canalele anionice sunt
permeabile la Cl-.
Dac mecanismul de selecie a cationilor i anionilor este relativ simplu fiind dependent de
sarcina electric a aminoacizilor din structura canalelor, mecanismul selectrii unui singur tip de ion
din categoria cationilor, este mai puin cunoscut. Unul din criteriile implicate n procesul de selectare
ionic este diametrul canalului i al ionului. Referitor la acest criteriu sunt necesare cteva precizri. n
primul rnd, diametrul ionilor aflai n lichidele organismului este mai mare dect cel al atomului fizic
deoarece moleculele de ap sunt atrase electrostatic de ctre cationi, prin intermediul atomului de
oxigen, i de ctre anioni prin intermediul hidrogenului, formnd un strat mai gros de molecule de ap,
5
pentru ionii cu diametrul mai mic. Astfel diametrul ionilor de sodiu poate deveni mai mare dect cel al
ionilor de potasiu. n al doilea rnd, conform rezultatelor cercetrilor realizate de ctre George
Eisenman i Bertil Hille, canalele ionice prezint o zon mai ngust ce acioneaz ca un filtru de
selectare a ionilor.
Procesul de selectare la acest nivel nu se face numai n funcie de diametrul iniial al ionilor
hidratai deoarece acetia pierd o parte din moleculele de ap datorit unor interaciuni chimice ce se
realizeaz ntre ei i aminoacizii din peretele canalului.
Pierderea moleculelor de ap este proporional cu interaciunea electrostatic dintre ioni i
aminoacizii din structura canalului. Dac aceast for electrostatic este mai mic dect cea dintre
ioni i moleculele de ap acetia nu vor putea strbate filtrul iar, dac este mai mare, legtura chimic
format va avea o durat mai mic de 1s. Dup acest timp de recunoatere ionul este eliberat,
putnd astfel, s-i recapteze moleculele de ap.
n general, sensul de deplasare a ionilor este unic, n acest caz, canalele comportndu-se ca un
rezistor n care fluxul de curent (ioni) variaz liniar cu gradientul electrochimic. Exist un numr mai
mic de tipuri de canale prin care fluxul nu variaz liniar cu fora gradientului electrochimic, comportndu-se ca un rectificator sau redresor. Aceste canale intervin n restabilirea potenialului de membran.
Dac deplasarea ionilor prin canalele membranare este, n primul rnd, asigurat de ctre fora
generat de gradientul electrochimic, deschiderea i nchiderea canalelor este un proces complex
controlat de mai muli factori.
Trecerea dintr-o stare n alta a canalelor se realizeaz prin modificri conformaionale ale
proteinelor ce le compun, induse de factorul de control al deschiderii sau nchiderii canalului respectiv.
Studii genice i electrofiziologice au stabilit c, n ciuda diversitii mari a tipurilor de canale, se
cunosc doar trei familii principale de gene ce controleaz sinteza proteinelor din structura lor, i, mai
mult toate canalele aparinnd unei familii genice au acelai mecanism funcional de control.
Una dintre aceste familii este rspunztoare de formarea canalelor ionice controlate de valoarea
potenialului electric al membranei neuronale. Acest tip de canale denumite canale controlate de voltaj
sau canale voltaj-dependente include pe cele selective pentru Ca2+, Na+, i K+.
Canalele ionice controlate de ctre transmitori sunt codificate de o alt familie de gene i
cuprind canalele ce prezint receptori pentru acetilcolin(Ach), acid -aminobutiric (GABA), glicin etc.
A treia familie de gene controleaz sinteza proteinelor ce formeaz canalele ionice din structura
sinapselor electrice.
n general, dup modul lor de funcionare canalele sunt de dou categorii principale:
canale fr poart (nongated ion channels) care sunt deschise permanent, deci permit
transportul ionic n funcie doar de gradientul electrochimic;
canale cu poart (gated ion channnels) a cror deschidere i nchidere este controlat prin mai
multe mecanisme.
Canalele ionice fr poart
Cunoscute i sub numele de canale de scurgere (din engl. leakage channels), permit deplasarea
pasiv a ionilor de K+, Na+ , Cl- i Ca2+ n timpul ct membrana plasmatic prezint potenial de repaus.
Identitatea canalelor de acest tip nu este pe deplin elucidat dar permeabilitatea lor este mult mai mic
n comparaie cu a celor controlate de voltaj sau de neurotransmitor. Dealtfel, ntre transportul ionic
prin aceste canale i cel realizat prin intermediul pompelor exist o interdependen al crui rezultat este
stabilirea unei stri de echilibru ntre cele dou sisteme de transport.
6
Canalele fr poart pentru sodiu permit influxul pasiv al acestui cation n timpul repausului
fiind n echilibru cu efluxul lui realizat de ctre pompa Na+ - K+ .
O importana deosebit au canalele fr poart, n special, cele de Na+ pentru celulele nervoase
ce prezint capacitatea de a genera spontan, poteniale de aciune,
Canalele fr poart pentru clor au o repartiie celular asemntoare celor pentru Na+ , dar rata
lor de transport este, probabil, mult mai mic datorit concentraiei mari a anionilor intracelulari.
Din cele prezentate, rezult c transportul ionic prin aceste canale ionice se realizeaz conform
gradientului electrochimic dar fr a se ajunge niciodat la egalizarea concentraiilor dintre cele dou
sectoare separate de membrana celular. Explicaia const n faptul c dei canalele fr poart nu
prezint un sistem propriu de control, fluxul ionic prin intermediul lor este modulat, pe de o parte, de
capacitatea mai mic de transport fa de canalele controlate iar, pe de alt parte, concentraia
intracelular mare a anionilor organici fixeaz electrostatic K+. n acest fel, n ciuda gradientului de
concentraie i a unui numr mare de canale fr poart, efluxul de K+, semnificativ din punct de
vedere cantitativ, nu poate avea loc dect n urma unui influx corespunztor de sarcini pozitive.
Aceast condiie se realizeaz n timpul depolarizrii, cnd, pentru majoritatea celulelor influxul de
sarcini pozitive este produs de Na+. Dar n aceste condiii efluxul de K+ va avea loc prin canalele
controlate, a cror rat de transport este mult mai mare dect a celor fr poart.
O alt funcie important a canalelor de acest tip, dar, n general, mai puin prezentat, este
meninerea homeostaziei presiunii osmotice i, implicit, a volumului i formei celulare. Aceast
funcie este ndeplinit prin faptul c pe lng permeabilitatea fa de ioni, canalele permit difuzia
moleculelor de ap.
Canale ionice cu poart
Dac potenialul de repaus este echilibrul dintre transportul prin intermediul canalelor fr
poart i a pompelor ionice, potenialul de aciune este rezultatul transportului ionic controlat prin
intermediul canalelor cu poart.
Dup mecanismul de control al transportului ionic canalele cu poart pot fi:
1. canale voltaj-dependente - controlate de potenialul electric de membran;
2. canale controlate de ligani;
3. canale controlate de stimuli mecanici;
4. canale controlate de concentraia altui ion dect al celui care este transportat.
n general, un canal este controlat de un singur factor dar exist canale prin care transportul este
dependent de doi factori dintre care unul este principal; ex. canalele de K+ dependente de concentraia
Ca2+ i de potenialul de membran.
Dintre cele patru tipuri prezentate canalele voltaj dependente i canalele mediate de
transmitori sunt cele mai rspndite i studiate. ntre aceste dou tipuri de canale exist o
relaie de interdependen funcional, ordinea intrrii n activitate fiind diferit n funcie de
segmentul celular; n segmentul presinaptic activarea canalelor voltaj dependente determin
eliberarea sinaptic a neurotransmitorului care ajuns la segmentul postsinaptic induce prin
intermediul canalelor controlate chimic, modificri ale potenialului de membran care vor
activa canalele voltaj-dependente care, la rndul lor, vor produce fie un potenial postsinaptic
excitator (PPSE) fie un potenial postsinaptic inhibitor (PPSI).
1. Canalele voltaj dependente sunt canalele ionice a cror poart este controlat de
valoarea potenialului de membran i reprezint cel mai important tip de canale implicat n
generarea i transmiterea potenialului de aciune. Canalele din aceast categorie se deschid
7
atunci cnd potenialul de membran atinge valoarea proprie fiecrui tip de canal. Dup o
perioad scurt de timp, specific fiecrui tip de canal, n care rmne deschis permind
deplasarea ionilor, conform gradientului de concentraie, canalul se nchide. n aceast
categorie sunt descrise canale pentru Na+ , K+ , Ca2+ i Cl- .
Canalele de sodiu controlate de voltaj sunt formate dintr-un lan polipeptidic coninnd cca. 2000
de aminoacizi, organizat n 4 domenii identice, care, la rndul lor conin, fiecare, 6 segmente
transmembranare. Aceast structur reprezint subunitatea i este comun tuturor tipurilor de canale
de sodiu voltaj-dependente. Unul dintre segmente, din fiecare unitate, conine un numr mare de
resturi de aminoacizi de arginin i lizin cei mai electropozitivi aminoacizi i ndeplinete funcia
de senzor de voltaj.
Pe lng subunitatea canalele de sodiu voltaj-dependente mai conin nc una sau dou
subuniti , n funcie de specie i esut, anexate la subunitatea . Aceste subuniti controleaz
stabilitatea i sensibilitatea subunitii (C.Hammond. 2001).
Variaia potenialului de membran induce modificri de conformaie spaial a proteinelor din
senzor i poart determinnd deschiderea sau activarea a canalului.(Fig. 2.5).
Cercetarea mecanismului deschiderii i nchiderii canalelor voltaj dependente nceput cu o
jumtate de secol n urm de ctre Hodgkin i Huxley, continu s prezinte nc necunoscute. Din
cercetrile, realizate de ctre cei doi pioneri ai neuroelectrofiziologiei, rezult c transportul prin
canalele ionice voltaj-dependente implic modificri conformaionale reversibile a proteinelor din
structura lor, induse de variaia potenialului de membran. Dealtfel Hodgkin i Huxley au prevzut
sistemul de poart ca fiind o molecul cu sarcin electric pozitiv (gating charge) care, atunci cnd
Bistrat lipidic
_
__
TTX
LA
Poarta
SCTX
+ +
+
+ + + +
+ +
+
+ + + +
X
BT
Por
__
Extracelular
Senzor de voltaj
Fig. 2.5. Diagrama imaginar a unitilor funcionale ale unui canal i locurile de legare propuse pentru mai
multe toxine care afecteaza canalele de Na+. Receptori: TTX- tetrodotoxin i saxitonin; ScTx- toxina
scorpionic si anemonic; BTX, batrachotoxina, aconitina, veratridina si grayanotoxina; LA, loc de aciune
a anestezicelor locale; sarcinile electronegative de la captul extracelular al porului constituie filtru de
selectivitate al canalului ionic. ( modificat dup SIEGEL, G., J. et al.).
membrana este depolarizat s-ar putea deplasa realiznd deschiderea canalului. Conform ipotezei lor,
aceast deplasare ar trebui s fie nsoit de un curent de poart (gating current). Din motive tehnice
acest curent nu a putut fi msurat dect aproape trei decenii mai trziu de ctre Clay Armstrong care,
a sugerat un model de funcionare a canalelor voltaj-dependente conform cruia micarea ionilor prin
canal, care este blocat n timpul potenialului de repaus, apare cnd membrana celular este depolarizat pn la o valoare denumit potenial prag.
Odat atins valoarea potenialului prag, poarta se dechide i influxul de sodiu continu pn
cnd este activat componenta de inactivare a canalului, care va opri fluxul ionic.
Distribuia canalelor de Na+ voltaj-dependente a fost cercetat prin marcarea unor substane care
se leag specific de structura proteic a canalului. Deoarece substanele cu aceast proprietate, produc
blocarea canalelor ionice i, implicit pierderea funciei de excitabilitate, sunt denumite neurotoxine
(tetrodoxina (TTX), batrachotoxina).
Din studii electrofiziologice efectuate n paralel cu curba de legare a TTX rezult c viteza de
conducere a impulsului prin axoni crete proporional cu densitatea canalelor; axonii nemielinizai
prezint un numr relativ mic de canale din aceast categorie, densitatea fiind cuprins, n funcie de
celul, ntre 35 i 500 de canale/m2. n cazul densitii de 500 de canale/m2 suprafaa din membrana
celular ocupat de ctre acestea nu depete 1/10 din suprafaa total celular.
Variaia de potenial nregistrat prin patch-clamp n timpul influxului prin canalele de Na+
voltaj-dependente corespunde ratei de transport ionic calculat la o valoare mai mare de 107 ioni/sec.
Cunoaterea mecanismului de aciune a substanelor care interacioneaz cu canalele de Na+
voltaj-dependente este necesar pentru trecerea de la aspectele teoretice la utilizarea blocanilor
acestor canale n scop terapeutic. Blocarea canalelor de Na+ voltaj-dependente se poate realiza fie prin
blocarea componentei de activare fie prin ntrzierea sau blocarea componentei de inactivare.
Tetrodotoxina i Saxitoxina sunt molecule hidrosolubile i competiioneaz pentru acelai situs
extracelular producnd blocarea componentei de activare.
Sensibilitatea canalelor fa de TTX variaz n limite destul de mari; n timp ce majoritatea sunt
blocate la concentraii nanomolare, canalele din miocard i din muchiul scheletic denervat necesit
concentraii de ordinul micromolar. Veninul scorpionului nord-african ntrzie procesul de inactivare a
canalului crescnd astfel volumul i durata influxului ionic. Ca rezultat apar furnicturi, senzaie de
arsuri dureroase, aritmii cardiace i chiar paralizii excitatorii. Batrachotoxina i unele substane
neurotoxice, extrase din plante, cum sunt veratridina i aconitidina, fiind liposolubile se leag de un
situs intramembranar al structurii proteice ce constituie canalul. Efectul acestei categorii de
neurotoxice este ntrzierea procesului de inactivare.
Anestezicele locale, procaina i lidocaina fac parte din grupa blocanilor canalelor de Na+
voltaj-dependente i sunt folosite n practica medical pentru blocarea reversibil a conducerii
potenialului de aciune n fibrele nervoase senzitive i motorii.
Canalele de Ca2+ voltaj-dependente au fost descrise pentru prima dat de ctre Fatt, P. i
Ginsborg, B. L. n 1958, n fibra muscular de crab. Cercetri ulterioare, au demonstrat prezena
acestor canale n toate celulele excitabile (Hagiwara, 1983). Pentru multe tipuri de celule canalele de
Ca2+ reprezint principala component a generrii potenialului de aciune, cum este n cazul fibrei
musculare la organismele nevertebrate, a fibrei muchiului neted i a majoritii celulelor glandulare,
la vertebrate.
De o importan deosebit pentru reglarea contractibilitii fibrei miocardice sunt canalele de
2+
Ca de la nivelul sarcolemei i a reticulului sarcoplasmic din aceste celule.
Distribuia canalelor de Ca2+ voltaj-dependente la nivelul celulelor nervoase este mult mai
redus, n comparaie cu canale de Na+; n medie, densitatea canalelor de calciu nu depete valoarea
de 100/m2, fiind de aproape cinci ori mai mic dect cea a canalelor de sodiu. n aceiai termeni de
comparaie, o deosebire i mai mare este ntre fluxul ionic per canal 180000 de ioni de Ca2+/ sec.
dei gradientul lui de concentraie este cu trei ordine de mrime mai mare dect al sodiului. Din
parametrii prezentai se poate deduce c variaia curenilor generai de influxul de Ca2+ este mai lent
dect n cazul influxului de Na+. Dealtfel, canalele de Ca2+ voltaj-dependente sunt mai puin implicate
n transmiterea axonic, la distane mari, a potenialului de aciune. Funcia lor este mai important n
lent. Durata celor dou procese variaz de la o celul la alta att de semnificativ nct nu se poate
exclude posibilitatea existenei mai multor tipuri structurale incluse n aceast categorie.
Rolul cel mai important al acestor canale este limitarea duratei desfurrii potenialelor de
aciune. Majoritatea axonilor prezint numai acest tip de canale de K+ voltaj-dependente, dei unele
zone sunt srace sau lipsite de aceste canale, cum este axolema nodurilor Ranvier.
Canalele de potasiu Ca-dependente sunt activate n prezena creterii concentraiei
citoplasmatice a calciului ionic. La o concentraie a Ca2+ normal, de repaus, canalele de K+ rmn
nchise. Dac valoarea concentraiei citosolice crete la 10M, ca urmare a influxului de Ca2+ prin
canalele voltaj- dependente, canalele de potasiu dependente de calciu, se activeaz funcionnd
asemntor celor de rectificare ntrziat. Ca urmare ionii de potasiu prsesc celula determinnd o
hiperpolarizare lent. Acest balans ionic are ca rezultat pstrarea n limite normale a excitabilitii
celulare, opunndu-se depolarizrii precoce care ar urma unui influx de Ca2+. Unele celule pot
prezenta mai multe tipuri de canale de K+ dependente de Ca2+ deosebindu-se ntre ele prin conductana
determinat prin tehnica de patch clamp i prin sensibilitatea fa de diferite substane blocante.
Fig. 2.6 Structura transmembranar a canalelor ionice Kv - canale de K+ voltajdependente; Kir - canale de K+ de rectificare Kca - canale de K+ activate de Ca 2+.
Curentul de posthiperpolarizare, produs de activarea acestui tip de canale prin depolarizare, este
lent, i crete n timpul descrcrilor repetitive de poteniale, reflectnd sensibilitatea lui fa de
creterea concentraiei de Ca2+. Funcia acestui curent este de a determina ncetinirea treptat a
descrcrilor de poteniale ceea ce permite neuronului s ntrerup descrcarea de impulsuri declanate
de ctre un stimul, pentru a putea rspunde la altul.
Canalele de potasiu de tip M sunt activate prin depolarizare, dar spre deosebire de alte canale
ionice acestea nu prezint un mecanism propriu, specializat de inactivare. Aceste canale sunt cuplate
cu receptori din membrana celular. Dintre receptorii implicai n acest proces, un receptor colinergic,
muscarinic (ce confer denumirea M tipului de canale) i un receptor pentru peptidul asemntor
gonadoliberinei (GnRH-like peptide), sunt mai bine cunoscui ca modulatori ai neuronilor coninnd
canale de K+ de tip M.
11
Un aspect funcional interesant al acestor canale este dependena de timp. Mai mult, s-a constat
c activitatea unor canale din acest tip este stimulat de ctre substanele adrenergice prin intermediul
-receptorilor i de ctre somatostatin, avnd ca mesager secund AMPc.
Deoarece aproape n fiecare an este descris cte un canal, cteva tipuri de canale permeabile
pentru acest cation i a cror identitate structural i funcional nu este nc suficient stabilit, sunt
incluse de ctre Steve Watson i Debbie Girdlestone n categoria alte canale. Din aceast categorie
fac parte canale dependente doar parial de valoarea potenialului de membran.
Canalele de K+ dependente de ATP sunt controlate de raportul ATP/ADP intracelular. Unele
din canalele din acest tip sunt dependente i de valoarea pH -lui extracelular. Dintre blocanii i
inhibitorii canalelor din acest tip fac parte tolbutamidul, fentolamina lidocaina, tetraetilamoniu (TEA),
4-aminopiridin (4 AP), .a.
Canalele de K+ dependente de Na+ sunt deschise cnd concentraia intracelular a sodiului
depete valoarea de 20 mM. Conductana acestor canale este mult mai mare (~ 220pS), comparativ
cu celelalte canale permeabile pentru K+; 1 siemen (S) =1/ohm. Canalele din acest tip sunt blocate de
ctre TEA i 4 AP.
Canalele de K+ senzitive la creterea de volum a celulei se deschid atunci cnd volumul celulei
crete peste valoarea normal. Activarea acestor canale este produs, n general, cnd creterea
volumului celular este rezultatul unui dezechilibru osmotic ntre compartimentul intra- i extracelular,
urmat de ptrunderea osmotic intracelular a apei. Mecanismul de activare al acestui tip de canale
poate fi interpretat ca o reflectare a relaiei dintre concentraia mediului n care se afl celula i
excitabilitatea ei. Lidocaina i qinidina sunt blocante ale canalelor de K+ dependente volumul celular.
Canalele de clor voltaj-dependente sunt mai puin cunoscute i, probabil, mai puin rspndite la
nivelul celulelor nervoase. Funcia lor este atestat pentru celule miocardice, fibrele musculare striate
i pentru o varietate mare de celule epiteliale.
Dup descrierea principalelor canale ionice voltaj-dependente, se poate constata, cu uurin, c
n ciuda diversitii lor mari i a variaiilor relativ restrnse a valorii potenialului de membran, procesele de activare i inactivare a canalelor se realizeaz cu o mare precizie integrat la nivel celular i
supracelular, dificil de imaginat, i, mai ales, de descris, n dinamica desfurrii lor.
Participarea celor dou categorii principale de canale ionice - fr poart i controlate de voltaj la meninerea potenialului de repaus, respectiv, la generarea potenialului de aciune necesit
intervenia celei de a treia categorii de canale ionice, a cror funcie este controlat de
neurotransmitor sau neuromediator n vederea transmiterii semnalului de la o celul la alta.
Potenialul de aciune, odat generat ntr-un segment al celulei nervoase, este transmis prin
fibrele nervose pn la captul lor terminal unde, n urma unor procese declanate prin intermediul
canalelor ionice voltaj-dependente, determin eliberarea transmitorului n spaiul sau fanta sinaptic.
12
Fig. 2.7. Schema general a receptorului - canal mediat de Ach. 1,2,3- poziiile
aminoacizilor din structura filtrului de selecie. Poarta reprezint zona cea mai ngust a
porului. n partea extracelular a moleculei proteice reprezentnd receptorul-canal se
afl locul de legare a transmitorului. (modificat dup Zigmond M.I. et al. 1999).
Canalele din aceast categorie, localizate n segmentul postsinaptic al sinapselor cu transmitere rapid,
excitatorie sau inhibitorie, sunt adesea descrii ca receptorii ionotropici.Din aceast categorie fac
parte, n general, receptorii pentru neurotransmitorii nonpeptidergici, precum acetilcolin, glutamat,
glicin, ac. -aminobutiric, .a.
Deoarece receptorii din aceast categorie sunt canale ionice ce conin n structura lor unul sau
mai multe locusuri de legare a neurotransmitorului, n prezent este mai frecvent folosit termenul de
receptor canal.
Din varietatea mare de receptori de aceast categorie, mai bine cunoscut este receptorul-canal
colinergic nicotinic (Fig. 2.7.). Acesta este format din cinci subuniti: dou , i cte una , i .
Fiecare subunitate este compus din patru domenii transmembranare. Unul din domeniul fiecrei
uniti conine aminoacizii ncrcai negativ orientai spre interiorul canalului i dispui in trei inele n
jurul canalului porului. Aceste inele constituie filtrul de selecie a cationilor.
Receptorul-canal pentru glutamat are o structur mai complex i particip la transportul de
Ca2+ n celula nervoas..
Deoarece Ca2+ pe lng rolurile multiple pe care le ndeplinete, poate deveni neurotoxic la
concentraii intracelulare crescute, controlul acestui canal este dependent de mai multe substane (Fig. 2.8).
Canalele controlate de ligani sintetizai de celula din care fac parte pot fi:
- canale controlate de proteine G sau de mesageri secunzi (Ca2+, IP3 etc.), descrise i ca receptori
metabotropici, i care particip la transmiterea sinaptic lent sau la modularea transmiterii sinaptice;
- canale controlate de neurotransmitor dar localizate pe segmentul presinaptic, avnd rolul de
a controla eliberarea i concentraia acestuia n spaiul sinaptic (autoreceptori)
De menionat c de multe ori acelai neurotransmitor poate aciona pe ambele tipuri de
receptori determinnd rspuns rapid sau mai lent.
Cuplarea neurotransmitorului cu canalul ionic poate avea dou efecte:
a. Influxul de Na+ n segmentul postsinaptic, urmat de depolarizare i generarea potenialului
postsinaptic excitator (PPSE) care se va propaga n celul.
b. Efluxul de K+ sau influxul de Cl- n segmentul postsinaptic, urmat de hiperpolarizare i
generarea potenialului postsinaptic inhibitor (PPSI) care se va inhiba celula, n sensul, de a
diminua excitabilitatea celulei, fcnd-o mult mai greu depolarizabil.
ntre cele dou tipuri de sinapse exist un echilibru ce confer starea de funcionalitate a creierului.
3. Canalele ionice controlate de stimuli mecanici denumite canale mecanosenzitive au o
rspndire larg n organism att n teritoriul somatic ct i n cel vegetativ. Poarta canalelor de acest
tip este ancorat prin intermediul unor proteine fibrilare de un situs de ancorare plasat la o distan
corespunztoare dimensiunilor celulare, n membrana plasmatic a aceleai celule sau a celulei
invecinate (Fig. 2.9.). Modificarea distanei dintre poart i situs-ul de ancorare ca urmare a
modificrii dimensiunilor celulei, respectiv, a distanei dintre cele dou celule, determin deschiderea
canalelor i un transport ionic corespunztor, care induce diferite procese n funcie de tipul de celul.
A
extrcelular
situs de
ancorare
situs de
ancorare
intracelular
membran
celular
membran
celular
protein
fibrilar
intracelular
protein
fibrilar
poart
extrcelular
14
membran
celular
intracelular
comparabil cu cea a pompei. Ca2+, n exces, legndu-se de calmodulin, i blocheaz efectul inhibitor
asupra activitii pompei iar rezultatul acestei interaciuni este creterea activitii pompei de a scoate
Ca2+ din celul.
Pompa de calciu din peretele reticulului endoplasmatic, mai bine studiat n celula miocardic,
ndeplinete funcia de a transporta acest cation de la concentraia mic din citosol nspre concentraia
mai mare din lumenul reticulului endoplasmatic.
Mecanismul de transport al acestei pompe este controlat tot de o molecul proteic cunoscut
sub numele de fosfolamban a crei funcie const n reglarea activitii pompei de calciu din reticulul
sarcoplasmic; cnd nu este fosforilat are efect inhibitor, iar n starea fosforilat, acest efect este blocat.
Fosforilarea este dependent de AMPc i de o proteinkinaz activat de Ca2+.
Importana acestui sistem de reglare a concentraiei citosolice de calciu reiese i din faptul c
fosfolambanul este identificat n celula miocardic, fibra muscular neted i muchiul striat lent,
lipsind din cel rapid i din celula nervoas (Katz, 1992).
Pompa de clor. Dei concentraia i distribuia ionilor de clor i sodiu sunt apropiate,
mecanismul i sistemul de transport activ transmembranar pentru Cl- sunt mult mai puin cunoscute.
Participarea ionilor de clor la activitatea neuronal este foarte important mai ales la nivelul sinapselor
inhibitorii din SNC. Prezena canalelor de Cl- dintre care, probabil, majoritatea nu sunt prevzute cu
sistem propriu de control (non-gated channels), impune cel puin urmtoarea ntrebare: dac
concentraia extracelular a Cl- este de cel puin zece ori mai mare dect concentraia intracelular, iar
majoritatea canalelor membranare pentru Cl- nu sunt controlate nici de neurotransmitor nici de
gradientul electric membranar, de ce nu se realizeaz influxul pasiv de Cl- prin difuzie?
Rspunsul ar putea consta din faptul c n interiorul celulei se afl numeroase sruri ale acizilor
glutamic, aspartic i fosforic precum i o cantitate de proteine mult mai mare dect extracelular.
Datorit valorii pH-lui intracelular toate aceste substane se manifest ca purttoare de sarcini
negative. Spre deosebire de majoritatea celorlalte substane purttoare de sarcini electrice, deci
implicate n generarea gradientului electric transmembranar, anionii intracelulari avnd molecula mai
mare nu pot strbate membrana plasmatic. Ca urmare, ionii de clor, dei prezint un gradient de
concentraie favorabil influxului, nu ptrund n celul datorit excesului de sarcini negative greu
mobilizabile din celul. Dealtfel aceste sarcini negative intracelulare se opun i efluxului de K+,
contracarnd fora ce rezult din gradientul lui de concentraie. Aceste dou aspecte determinate de
mobilitatea mult mai redus a anionilor intracelulari prin membrana plasmatic datorit moleculei lor
mai mari, pe de o parte i lipsei unui sistem de transport corespunztor, pe de alt parte, contribuie
ntr-un mod substanial la meninerea i dinamica potenialului electric de membran.
n ciuda implicrii Cl- n transmiterea sinaptic GABA-ergic, pn n prezent nu au fost aduse
dovezi clare despre existena unei ATP-aze care s transporte activ Cl- din celul. Probabil cel mai
important sistem de transport al Cl- din celula nervoas este simporterul K, Cl.
2.1.1.3.Transportori ionici
Transportorii ionici sunt molecule proteice transmembranare care leag ionul sau alte particule
dintr-o parte a membranei, le transport prin membran i le elibereaz de partea opus a membranei
celulare (Somjen G. 2004). Acest sistem de transport este repartizat n toate celulele i ndeplinete o
mare diversitate de funcii, n raport cu tipul i activitatea celular, dobndind, astfel statutul de
element celular funcional indispensabil (Fig.2.10). Din perspectiva excitabilitii celulare, sistemul de
17
Cl-
3Na+
2K+
H+
K+
Na+
ATP
ClHCO3-
ADP+Pi
Cl
3Na+
ATP
Ca2+
Glcz, AA,
Na+
H+
K+
ADP+Pi
TRANSPORTORI
ATP
POMPE
H+
Na+2Cl
K+
ADP+Pi
ATP
+
K
Cl-
CANALE
ADP+Pi
K+
Ca
2+
Cl-
Ca2+
AA
Na
Cl
transportori membranari poate fi prezentat ca un sistem care integreaz excitabilitatea fiecrei celule n
n raport cu statusul metabolic propriu i al organismului. Aceast integrare se realizeaz prin funcia
transportorilor membranari de conectare a transportului ionic cu metabolismul celular, echilibrul
osmotic i, mai ales, cu echilibrul acido-bazic al celulei i al mediului extracelular.
Conectarea funcional dintre STIM i principalii parametri ai homeostazei celulare se
rsfrnge i asupra relaiei dintre acetia i excitabilitate. Aceast relaie se manifest n cazul
modificrilor de excitabilitate induse de perturbrile metabolice i ale echilibrului acido-bazic din
diverse stri patologice. La rndul ei, creterea excitabilitii peste limita normal, urmat de o
activitate nervoas i, mai ales, muscular corespunztoare, poate determina modificri ale echilibrului
acido-bazic.
La sfritul acestui capitol se pot desprinde cteva concluzii:
9 sistemul de transport ionic membranar (STIM), n repaus, controleaz distribuia ionilor de o
parte i alta a membranei celulare, meninnd starea departe de echilibru, iar, sub aciunea
unui stimul specific, permite apropierea de echilibru a sistemului;
9 dac n repaus, starea departe de echilibru a distribuiei ionilor se menine prin consum de
energie i acumularea energiei poteniale a sistemului, apropierea de echilibru se realizeaz
printr-un flux ionic incomparabil mai mare, consumndu-se doar energia potenial.
18
19
2.2.1.Potenialul de repaus
Repartiia inegal de o parte i de alta a membranei celulare a principalilor ioni este rezultatul
activitii sistemului de transport ionic membranar (STIM) i reprezint o condiie obligatorie pentru
meninerea excitabilitii celulare. Transportul ionic la nivel celular este un proces continuu indiferent
de starea de activitate a celulei, dar valoarea parametrilor de transport variaz n funcie de activitatea celulei.
Din aceast perspectiv se poate descrie transportul ionic i valoarea potenialului de
membran a celulei excitabile n condiii de repaus i de activare sau excitare.
Starea de repaus a unei celule excitabile se caracterizeaz prin stabilirea unui echilibru
dinamic ntre fluxul ionic prin mecanisme pasive i active pentru fiecare dintre ionii principali
participani la realizarea potenialului de membran. Realizarea acestui echilibru este susinut de
meninerea concentraiei ionice i a potenialului de membran la valori aproape constante. n aceast
stare diferena de concentraie de o parte i de alta a membranei celulare pentru fiecare ion este
maxim i corespunde valorii maxime a gradientului de concentraie.
Potenialul de repaus, definete diferena de potenial transmembranar ce permite celulei
excitabile s rspund aciunii unui stimul, prin modificarea rapid a repartiiei ionice i, implicit, a
valorii potenialului de membran genernd potenialul de aciune. n repaus, distribuia ionilor de o
parte i de alta a membranei plasmatice este rezultatul interrelaiei dintre permeabilitatea selectiv a
membranei i cuplarea transportului ionic cu procesele metabolice energogenetice.
Permeabilitatea membranei celulare fa de o anumit substan se definete prin proprietatea
membranei respective de a permite transportul pasiv, conform legilor fizice. Suportul permeabilitii
selective a membranei fa de transportul ionic este reprezentat de canalele ionice din structura ei i
asigur potenialul de membran i particip la homeostazia hidroelectrolitic celular.
Din punct de vedere funcional sunt descrise canale ionice cu poart i canale ionice fr
poart pentru principalii ioni implicai n meninerea potenialului de membran: K+, Na+ , Ca2+ i Clcare permit trasportul selectiv, controlat diferit n funcie de tipul de canal.
Pentru ambele tipuri de canale, cu sau fr poart, n general, fora motrice principal care
determin transportul ionic este gradientul electrochimic. Transportul prin canalele fr poart este,
practic, continuu i n echilibru cu transportul activ prin pompele ionice i prin transportori. Fluxul
ionic prin aceste dou sisteme antagonice de transport este mult mai redus comparativ cu fluxul prin
canalele cu poart i deine funcia principal n meninerea potenialului de repaus.
Un aspect funcional important ce caracterizeaz permeabilitatea membranar selectiv este
dependena de factorul temporal. Conform acestui parametru se poate afirma c membrana celulelor
excitabile este permeabil la toi ionii anorganici din lichidul intra- i extracelular. Dar aceast
permeabilitate nu este continu pentru toi ionii i pentru toate tipurile de canale ci se manifest
alternativ, n funcie de starea funcional a celulei. Mai mult, activarea i inactivarea canalelor cu
poart este dependent de factorul temporal n sensul c fiecare tip de canal prezint o perioad proprie
de laten i o durat a strii deschis. Astfel, pe lng diversitatea canalelor rezultnd din existena
mecanismelor de activare, diversitatea canalelor este amplificat prin implicarea factorului temporal.
Valoarea poteialului de repaus (50 i 80 mV) pentru majoritatea neuronilor este stabilit
prin msurarea diferenei de potenial cu ajutorul a doi microelectrozi dintre care unul este plasat
intracelular iar cellalt, extracelular. Cei doi electrozi sunt conectai la un amplificator de voltaj, care
la rndul lui este cuplat cu un osciloscop ce permite cuantificarea amplitudinii potenialului
transmembranar (Vm).
Vm = Vin Vext.
20
unde Vin este potenialul intracelular iar Vext., cel extracelular. Deoarece, conform conveniei,
electrodul extracelular este zero, potenialul membranar de repaus (VR) este egal cu potenialul
intracelular (Vin).
Potenialul de repaus poate fi calculat n funcie de valoarea concentariei intra- extracelulare a
ionilor care particip la determinarea potenialului de membran. innd seama de faptul c pentru
toate celulele excitabile canalele de K+ fr poart au rspndirea i ponderea cea mai important n
meninerea potenialului de repaus se poate afirma c potenialul de repaus reprezint potenialul de
echilibru al potasiului.
Valoarea potenialului de echilibru al potasiului se poate calcula conform ecuaiei lui Nerst:
[K+]ext
RT
EK =
ln
zF
[K+]int
unde EK este valoarea potenialului de echilibru al potasiului, cnd concentraiile lui, intra- i extracelular sunt n echilibru; R constanta gazelor; T temperatura, n grade Kelvin; z valena potasiului;
F constanta Faraday; [K+ ]ext i [K+]int concentraia extra- i intracelular a K+. nlocuind n formula
de mai sus valorile z = 1, RT/ZF la 25oC = 26 mV i constanta de transformare a logaritmului natural
n logaritm n baza 10, care este 2,3 se obine valoarea potenialului de echilibru al potasiului care
variaz n funcie de concentraia acestuia n raport cu diferite celule. n tabelul 2.1 se poate urmri
valoarea de potenialului de echilibru a ionilor principali corespunztoare concentraiilor dintr-un
neuron cerebral de la obolan i din axonul gigant.
Tabel 2.1.Valoarea potenialului de echilibru n raport cu concentraia principalilor ioni
Axon
gigant
Neuron
cerebral
Ion
K+
concentraie
intracelular (mM)
140
concentraie
extracelular (mM)
3
potenial de
echilibru (mV)
-97
Na+
140
+75
Cl-
140
-75
K+
400
20
-75
Na+
50
440
+55
Cl-
52
560
-60
21
Neuronii centrali avnd mai multe canale ionice fr poart pentru Na i Cl, comparativ cu
celula glial, potenialul lor de repaus este cel mai departe de potenialul de echilibru al potasiului.
Sarcolema celulei musculare scheletice conine, comparabil cu alte celule excitabile, un numr
mai mare de canale fr poart pentru clor, conferindu-i astfel o participare aproape egal cu potasiul
la meninerea potenialului de repaus.
Pentru calcularea potenialului de repaus n funcie de concentraia mai multor ioni se poate
utiliza ecuaia Goldman-Hodkin-Katz:
EM= ln
Din cele prezentate reiese c valoarea potenialului de repaus este rezultatul participrii tuturor
sistemelor membranare de transport dintre care, ponderea cea mai mare, o dein canalele de K+ fr
poart. Importana acestor canale rezult din cercetrile efectuate pe celulele gliale a cror membran
plasmatic prezint canale fr poart, permeabile aproape n exclusivitate pentru K+ . innd seama
c gradientul de concentraie transmembranar al acestui cation are, aproximativ, aceeai valoare ca i
la nivelul celorlalte celule excitabile, este nevoie s analizm mecanismul lui de meninere, n ciuda
numeroaselor canale deschise permanent fa de K+. Factorul principal care se opune efluxului de K+
este fora electrostatic datorat concentraiei mari a anionilor organici intracelulari pentru care
membrana celular nu este permeabil (Fig. 2.11). Pe de alt parte, concentraia mare a ionilor de Na+
din mediul extracelular, se opune efluxului de K+ , care ar rezulta din gradientul lui de concentraie. Ca
urmare a aciunii celor dou fore electrostatice ce se opun efluxului ionilor de K+ , se menine valoarea
mare a gradientului de concentraie al acestui cation n celule excitabile, n repaus.
Ecuaia factorilor ce asigur echilibrul de meninere a potenialului de membran cuprinde, pe
lng forele gradientului electrochimic, i activitatea de transport activ a pompelor ionice, n special a
pompelor de Na-K i Ca. Activitatea acestora depinde de cel puin doi factori principali. Metabolismul
energetic al celulei asigur funcionarea continu a acestora iar concentraia ionic modeleaz rata lor
de transport.
Un aspect deosebit al potenialului de repaus este relaia dintre acesta i generarea
potenialului de aciune din celule cu activitate electric spontan, rspunztoare de desfurarea unor
funcii vitale precum activitatea neuronilor din centrii respiratori, pace-maker-ul cardiac etc. Din
perspectiva potenialului de repaus, n general, aceste celule apar ca lipsite de capacitatea de a
menine potenialul de repaus, permind o depolarizare fr stimuli din exteriorul celulei.
n final, despre potenialul de repaus, se pot desprinde cteva concluzii:
9 potenialul de repaus este o msur a repartiiei ionice de o parte i de alta a
membranei celulare;
9 repartiia ionic este un parametru integrativ al structurii i funciei sistemului de
transport ionic membranar (STIM) corelat cu activitatea metabolic a celulei;
9 potenialul de repaus este o premis/condiie a excitabilitii celulare, n sensul c n
funcie de valoarea potenialului de repaus n momentul cnd intervine stimulul se va
genera rspunsul celulei prin modificarea potenialului de membran ce constituie
potenialul de aciune.
22
2.2.2.Potenialul electrotonic
Modificrile de potenial electric membranar, de amplitudine inferioar celei generatoare de
potenial de aciune i care se produc ntr-o anumit zon a celulei nervoase ca urmare a aciunii unor
stimuli, neuromediatorilor, neuromodulatorilor sau a altor substane care interacioneaz cu transportul
ionic transmembranar, constituie potenialul electrotonic. Pentru o mai bun nelegere a acestei
noiuni s urmrim modificrile de potenial de membran induse de transmiterea sinaptic
axodendritic i de aciunea unui stimul mecanic asupra receptorilor de ntindere din fusul
neuromuscular.
Transmiterea potenialului de aciune de la un neuron la altul se face, n general, prin multiple
sinapse (n medie 1000) ntre terminaiile axonice i dendritice ale celor doi neuroni. Localizarea
sinapselor n compartimentul dendritic este destul de neomogen, distana de la fiecare sinaps pn la
segmentul iniial al axonului, locul unde se genereaz potenialul de aciune, fiind foarte variabil.
Eliberarea neurotransmitorului va induce la nivelul fiecrei sinapse, prin cuplarea cu canalele
receptor, potenialul postsinaptic excitator care se va transmite ca o variaie de potenial de membran
spre corpul celular i spre vrful dendritei. Aceast variaie de potenial ce pleac de la fiecare sinaps
constituie potenialul electrotonic.
n cazul alungirii brute a fibrelor musculare intrafuzale (ex. lovirea tendonului sau
modificarea brusc a poziiei corpului sau al unui segment urmare aciunii unei fore exterioare
organismului-ineria) se vor produce i modificri de tensiune a terminaiilor nervoase senziteive cu
care fibrele musculare sunt n contact. Modificrile de tensiune vor induce deschiderea canalelor
ionice din mecanoreceptorii terminaiilor nervoase, urmat de modificri ale potenialului de
membran care se vor deplasa sub form de potenial electrotonic pna la primul nod Ranvier al
axonului senzitiv unde va genera potenialul de receptor, transmis, apoi la mduva spinrii.
n ambele exemple potenialul electrotonic va genera sau nu, n funcie procesului de sumaie,
un potenial ce se va deplasa, neschimbat, pe distane mai mari, ca potenial de aciune, respectiv
potenial de receptor.
Potenialul electrotonic i procesul de sumaie spaiotemporal sunt elementele eseniale ale
funciei de procesare i integrare a semnalului la nivelul fiecrei celule i, implicit, la nivelul
sistemului nervos.
2.2.3.Potenialul de aciune
Sistemul nervos este cel mai complex i performant sistem biologic de captare, procesare,
stocare a semnalului ca suport al informaiei i, probabil, de generare a informaiei. Dac, pn n
prezent, capacitatea creierului de a genera informaie a rmas doar la nivelul unor tentative discrete
filosofice sau artistice, funciile de captare, procesare i stocare a informaiei au beneficiat de un
interes mai mare din partea cercetrii tiinifice. Prin aceste procese sistemul nervos ndeplinete
funcia fundamental de integrare, pe de o parte, a funciilor componentelor organismului n vederea
funcionrii lui ca sistem, iar, pe de alt parte, de integrare a acestuia n mediu de via.
Printre cele mai vechi referine scrise care fac legtura ntre lezarea creierului i simptomele
induse, sunt cele consemnate ntr-un papirus egiptean din sec. XVII .c. i care cuprinde transcrierea
unor documente scrise cu cca. cinci milenii n urm. Papirusul a fost descoperit la Teba, n 1862, de
Edwin Smith (Voiculescu Vlad, Mircea Steriade. 1963) i descifrat de ctre James Breasted n anul
1930, (Kandel, 2003)
23
24
deplasa spre captul distal al axonului, unde va determina eliberarea neurotransmitorului n sinapsele
derivate din axonul respectiv.
Dac n urma integrrii variaiilor de potenial reprezentnd potenialele de receptor sau
potenialele sinaptice rezult, la nivelul zonei de declanare, o variaie de potenial echivalent valorii
prag a neuronului respectiv, se deschid canalele ionice voltaj dependente care vor declana potenialul
de aciune.
ntr-o prima faz se deschid canalele voltaj dependente care vor permite un influx rapid de
cationi care va determina scderea diferenei de potenial faza de depolarizare urmat de
deschiderea canalelor de potasiu voltaj dependente prin care efluxul ionic va readuce potenialul de
membran la valoarea potenialului de repaus faza de repolarizare. Pentru majoritatea celulelor
efluxul de potasiu continu dup revenirea potenialului la valorea potenialului de repaus, rezultnd,
astfel, o posthiperpolarizare denumit i hiperpolarizare postpotenial ( Fig.2.12 ).
+30
0
repolarizare
Vm (mV)
depolarizare
- 55
- 70
potenial prag
depolarizare
potenial
de repaus
hiperpolarizare
repolarizare
timp (ms)
Fig. 2.12. Variaia potenialului de membran (Vm) n raport cu activitatea celulei nervoase
Faza de depolarizare, pentru majoritatea celulelor excitabile din organismul uman, este
determinat de deschiderea canalelor de Na voltaj dependente. La valoarea prag al potenialului de
membran se deschid un numr limitat de canale care vor induce, apoi, activarea n cascad, prin
mecanism de feed-back pozitiv, a canalelor, nsoit de o cretere corespunztoare a conductanei i o
variaie de potenial de cca.100 mV.(Fig.2.13). Durata fazei de depolarizare este mai mic de 1ms
rezultnd din timpul n care un canal rmne n starea deschis- cca. 0,43 ms pentru neuronii cerebrali i
0,7 ms pentru fibra muscular scheletic (Hammond C. 2001). Deoarece canalele de Na voltaj
dependente dintr-o celul nu se deschid simultan, durata depolarizrii depete puin durata ct un
canal rmne deschis.
Faza de repolarizare a potenialului de aciune este determinat de deschiderea canalelor voltaj
dependente pentru potasiu. Pe baza proprietilor fiziologice se descriu dou categorii de canale de K
controlate de potenialul de membran: 1) canale de rectificare ntrziat care se activeaz i se
deschid dup o perioad de cca. 4 ms dup depolarizare i se inactiveaz mult mai lent dect canalele
25
de sodiu; 2) canale de tip A care activeaz i se inactiveaz rapid. Parametrii de funcionare a canalelor
din prima categorie prezint o mare variabilitate din perspectiva timpului i asigur repolarizarea
membranei(Fig.2.13).
mV
20
PA
0
-10
-30
gNa
-50
gK
-70
0,5
1,5
2,5
3 ms
Fig. 2.13. Variaia conductanei pentru Na (gNa) i K (gK) n timpul potenialului de aciune (PA)
Pentru un numr mult mai redus de tipuri de celule excitabile potenialul de aciune nu este
dependent numai de canale voltaj dependente pentru sodiu ci i de ali cationi. Astfel, potenialele de
aciune din celulele Purkinje din cerebel, din terminaiile axonice din neurohipofiz i din celulele
(fibrele) Purkinje din miocard, sunt dependente, ntr-o msur mai mare sau mai mic, de calciu.
Dup ce un canal a fost deschis urmeaz starea de inactivare n care fluxul ionic este oprit dar
canalul nu poate fi activat dect dup nchiderea porii i revenirea potenialului de membran la
valoarea de repaus. Aceast secven a strilor funcionale ale canalelor ionice determin i
controleaz perioada refractar i, implicit, asigur deplasarea unidirecional a potenialului de
aciune, n condiii fiziologice.
Perioada refractar reprezint timpul de la debutul unui potenial de aciune pn la momentul
recuperrii posibilitii generrii unui nou potenial. n aceast perioad aplicarea unui stimul,
indiferent de intensitate, nu poate induce modificri ale potenialului de membran deoarece canalele
voltaj dependente pentru Na sunt sau deschise sau n starea de inactivare.innd seama c deschiderea
canalelor nu se face simultan iar perioada n care sunt deschise i cea de inactivare sunt constante
rezult c primele canale care se deschid vor fi primele care vor deveni disponibile pentru un nou
stimul. Astfel, in periaoda refractar absolut nici un canal nu poate fi activat de un nou stimul iar n
perioada refractar relativ se poate obine un rspuns, mai ales la un stimul supraliminar, prin
implicarea unui numr mai mic de canale ionice.
Potenialul de aciune, odat declanat se transmite diferit prin axonii mielinizai i
nemielinizai (vezi cap. 3)
26
BIBLIOGRAFIE
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
Alberts, B., Bray, D., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K., Watson, J. D. (1994). Molecular Biology of The Cell.
New York
Anatoli N. Lopatin, Colin G. Nichols (2001) Ion Channel Localiyation Methods and Protocols, Humana
Press
Catterall, W. A. (1988). Structure and function of voltage-sensitive ion channels. Science. 242: 50-61.
Chiesi, M., Voherr, T., Schwaller, R., Carafoli, E. (1990). Cardiac phospholamban is related to the
inhibitory domain of the plasma membrane Ca-pump. Circulation. 82 (Supll. III) : III-349.
Dubois Reymond Prcis dlectromyographie, (1959), Maloine (Lbr.) S.A., Paris Citat in ref. 170.
Eccles, J. C., Eccles, R. M., Lundberg, A. (1958). The action potentials of alpha motoneurones suplying fast
and slow muscles. J. Physiol. (Lond.) 142:257.
Fatt, P., Ginsborg, B. L. (1958). The ionic requirements for production of action potentials in crustacean
muscle fibres. J.Physiol.(Lond.), 142:516-543.
Graves D.T., Hanna G.M.(2005). Neurological channelopathies. Postgrad. Med. J. 81:20-32
Gupta S.K, (2001) Pharmacology and Therapeutics in the New Milenium, Narosa Publishing House
Hagiwara, S. (1983). Membrane Potential-Dependent Ion Channels in Cell Membrane: Phylogenetic and
Developmental Approaches. New York: Raven Press.
Hammond C. (2001).Cellular and Molecular Neurobiology. Academic Press
Hill, R. R., Robins, N. (1991). Plasticity of presynaptic and postsynaptic elements of neuromuscular
junction repeatedly observed in living adult mice. J. Neurocytol. 20:165.
Hille, B. (1989). Voltage gated channels and electrical excitability, In Textbook of Physiology. (Patton, H.
D. Ed.), Vol. I.
Hodgkin, A. L., Huxley, A. F. (1952). A quantitative description of membrane current and its application to
conduction and excitation in nerve. J. Physiol. (Lond.), 117: 500-544.
Kandel, E. R., Schwartz, J. H. Jessell, T. M. Eds. Principles of Neural Science. (2000), Fourth edition, Mc
Graw-Hill.
Katz, A. M. (1992). Physiology of the heart. Raven Press, New-York.
Mulley C. J., Scheffer E. I., Petrou S., Berkovic F. S. (2003). Channelopathies as a genetic cause of
epilepsy. Curr. Opin. Neuro.16:171-176
Nowycky, M. C., Fox, A. P. and Tsien, R. W. (1985). Three types of neuronal calcium channel with different
calcium agonist sensitivity. Nature., 310: 440-443.
Payne, J. A., Stevenson, T. J., and Donaldson, L. F. Molecular characterization of a putative K-Cl
cotransporter in rat brain. A neuronal-specific isoform. (1996)J. Biol. Chem. 271:16245-16252,.
Shepherd, G. M. (1994). Neurobiology. Oxford University Press.
Siegel G. J., Agranoff R. W. , Albers R. W. Fisher S. K(1998) Basic Neurochemistry Molecular, Cellular
and Medical Aspects, Sixth Edition, Lippincott+Raven Publishers
Smith, K. J., Blakemore, W. F., Murray, J. A., Patterson, R. C. (1982). Internodal myelin volume and axon
surface area. A relationship determinig myelin thickness. J. Neurol. Sci., 55:231.
Stamatoiu, I., Agian, B., Vasilescu, C. (1981). Electromiografie Clinic. (Ed. Medical). Bucureti.
Sqiure L., Bloom F., McConnell S. K., Roberts J., Spitzer N.C., Zigmond M. J. (2003) Fundamental of
Neuroscience , Academic Pres.
Voiculescu V., Steriade M. din Istoria Cunoaterii Creierului(1963) Editura Stiinific.Bucureti
Zgrean Leon (1996) Elemente de Neurobiologie, edit. Univ. Carol Davila. Bucureti
Zgrean Leon (2002) Neurotiine-principii fundamentale, edit. Univ. Carol Davila. Bucureti
27