14.05.

2013

Biochimia sistemului hormonal

DEFINITIE - efectori biochimici endogeni, secretai n snge de celule specializate sau glande endocrine i transportai la organele efectoare int, unde i manifest aciunea specific. Sistemul hormonal este alctuit din: glande endocrine i celule secretorii; hormoni esuturile int; receptori hormonali. Glandele endocrine se caracterizeaz prin urmtoarele: o singur gland endocrin poate produce mai muli hormoni cu funcii diferite mai multe glande endocrine pot secreta acelai hormon unele au o funcie exclusiv endocrin, altele au i una neendocrin pot fi permanente sau temporare Celula int Bioritmuri hormonale

1. 2. 3. 4. 5. 6.

Clasificarea Caracteristici generale ale hormonilor Transportul Reglarea hormonala Receptori Mecanisme de actiune

14.05.2013

1. Clasificarea hormonilor
Criterii 1. Dup structur

Criterii

Tipuri de hormoni peptide sau proteine; steroidici; derivai din Tyr; derivai din AG polinesaturai Tipuri de hormoni endocrini; paracrini; autocrini

2. Dup locul de producere i

1. Dup structur aciune

3. Dup mecanismul de aciune 2. Dup locul de producere i aciune 4. Dup organul sau celula care l produce

peptide sau proteine; steroidici; derivai din Tyr;

cu receptori membranari; cu receptori intracelulari

3. Dup mecanismul de aciune 5. Dup solubilitate 4. Dup organul sau celula care l produce glande 5. Dup solubilitate 6. Dup aciunea asupra unor glande
6. Dup aciunea asupra unor

endocrini; paracrini; autocrini neurohormoni; glandulari; ai tractului gastrointestinal; renali hidrofili (peptide, proteine, catecolamine) cu receptori membranari; cu receptori intracelulari lipofili (steroidici, tiroidieni, calcitriol)
tropici (regleaz secreiaglandulari; altor hormoni) netropici gastrointestinal; renali neurohormoni; aii tractului

hidrofili (peptide, proteine, catecolamine) lipofili (steroidici, tiroidieni, calcitriol) tropici (regleaz secreia altor hormoni) i netropici

Clasificarea hormonilor n funcie de structur

atura hormonilor Reprezentani insulina, glucagon, parathormon, calcitonina, oxitocina, vasopresina, gonadotropine, corticotropina (ACTH), tireotropina (TSH), prolactina (PRL), factorii de cretere, somatotropina (STH), hormonii hipotalamici eliberatori (RH) i inhibitori (RIH), secretina, gastrina, colecistokinina, angiotensina; cortizol, corticosterona, aldosterona, estradiol, progesterona, testosterona, 1,25-dihidroxi-calciferoli; adrenalina, noradrenalina, tiroxina (T4), triiodtironina (T3).

Peptide/proteine/glicoproteine

Steroidici si derivai Derivai ai tirozinei/amine

Clasificarea hormonilor dup mecanismul de aciune

Tipul de hormon I. Hormoni cu R intracelulari Reprezentani Estrogeni, progestativi, androgeni, glucocorticoizi, mineralcorticoizi, calcitrioli, hormonii tiroidieni

II. Hormoni cu R intramembranari 1. cu cAMP ca mesager secund

cAMP: glucagon, catecolamine (-receptori), parathormon, calcitonina, vasopresina (V2 receptori), ACTH, FSH, LH, TSH, CRH (hormon eliberator al corticotropinei), gonadotropina corionic cAMP: catecolamine (2-receptori), angiotensina II, somatostatina, acetilcolina (M2receptori)

2. cu cGMP ca mesager secund

Factorul atrial natriuretic, rodopsina

3. cu mesager secund: DAG, IP3, Ca2+

Catecolamine (1-adrenergici), acetilcolina (R muscarinici), oxitocina, Gn-RH (H. eliberator al gonadotropinelor), colecistokinina, gastrina, vasopresina (V1 receptori)

4. Sistemul tirozin kinazic

Insulina, factorii de cretere, STH

14.05.2013

2. Caracteristici generale ale hormonilor

A. Hormonii steroidici sintetizai de corticosuprarenale, ovare, testicule i placent, din colesterol caracter hidrofob, circul n snge legai de proteine, strbat uor membranele celulare, receptorii intracelulari. Nu sunt depozitai n glanda endocrin productoare Catabolizarea are loc n dou etape: n prima etap - reacii de oxidare, reducere, ndeprtri de substitueni, cu participarea enzimelor microzomale. n etapa a doua - conjugarea derivailor hidroxilai cu UDPglucuronat sau PAPS si eliminarea pe cale renal, biliar sau intestinal. pot fi administrai pe cale oral.

B. Hormonii peptidici / proteici secretai n afara celulei productoare, sintetizai ca preprohormoni sau prehormoni ex insulina prohormon conine mai muli hormoni, ex proopiomelanocortina depozitai n gland sub form de granule secretoare i sunt eliberai prin exocitoz; hidrofili, circul liberi n snge, receptori membranari (nu ptrund n celul) catabolizarea -proteoliz, n lizozomi. nu se administreaz pe cale oral

C. Hormonii derivai din tirozin - catecolamine (adrenalina, noradrenalina) i hormoni tiroidieni 1.

Catecolaminele
sintetizate n medulosuprarenale, caracter hidrofil, circul n snge libere sau slab legate de albumin, receptorilor membranari

2.

Hormonii tiroidieni
sunt puin solubili n ap transportai n snge legai de proteine transportoare receptorii lor au localizare intranuclear. depozitai extracelular n coloid sub form de tireoglobulin iodurat Se pot administra pe cale oral,

14.05.2013

3. TRANSPORT
hormonii peptidici i catecolaminele, hidrosolubili, circul liberi (excepie face somatomedina) hormonii steroidici, tiroidieni, calcitriolii, liposolubili, transportai de ctre proteine specifice - de obicei globuline (hormone-binding globulin, HBG) cu specificitate pentru un hormon sau grup de hormoni - Albumina - afinitate mic de legare dar, fiind n concentraie mare rezerv de legare a hormonilor excedentari.
globulina care leag corticosteroizi (corticosteroid binding globulin, CBG), globulina care leag hormoni sexuali (sex hormone binding globulin, SHBG) proteina care leag androgenii (androgen binding protein, ABP), globulina care leag hormonii tiroidieni (thyroxine binding globulin, TBG); prealbumina care leag tiroxina (thyroxine binding prealbumin, TBPA).

4.REGLAREA HORMONALA

I. Mecanismul feed-back
-/+ Hipotalamus RH c b -/+ Adenohipofiza Tropine + Glande endocrine Hormoni ( sau ) Organ efector efect fiziologic ( sau ) -/+ a Glande endocrine -/+

-/+ d

pozitiv sau negativ direct - secreia glandei endocrine este influenat de parametrul biologic pe care l controleaz indirect - prin intermediul hormonilor hipotalamici, care stimuleaz (RH) sau inhib (RIH) eliberarea de tropine hipofizare.

3 tipuri de sisteme feed-back: a) direct b) bucla lung - ntre secreia hormonilor glandulari i a celor hipofizari i hipotalamici; c) bucla scurt - ntre secreia hipofizei anterioare i cea a hormonilor hipotalamici; d) bucla ultrascurt - nivelul hormonului i poate regla propria producie.

14.05.2013

II. Reglarea la nivelul receptorilor

modificarea numrului de receptori, n funcie de concentraia hormonal astfel:

-creterea concentraiei hormonale determin descreterea numrului de receptori -reglare reductiv (down regulation) -poate fi considerat un feed-back negativ;

- scderea concentraiei de hormon din snge creterea numrului de receptori -reglare nalt sau ascendent (up regulation)
- mecanism de feed-back pozitiv.

5. RECEPTORII HORMONALI
Definitie - componente care se afl pe suprafaa sau n interiorul celulelor, capabile s recunoasc un hormon, s l fixeze i s iniieze evenimente, care s constituie rspunsul celular la mesajul extern. Localizarea receptorilor : - pentru hormonii hidrosolubili n membrana citoplasmatic; - pentru hormonii liposolubili (steroidici, tiroidieni, calcitrioli) intracelular. 1. Receptorii membranari Structur - proteine, oligomere sau multidomeniale, 2 regiuni active: una de fixare a hormonului; regiune care prelucreaz i transfer (transduce) semnalul extern unui mecanism efector intracelular rspuns biologic. Interaciunea HR se realizeaz prin fore necovalente, este reversibil, nalt, specificitate Legarea de receptor a altor compui (analogi ai hormonuluii) 2 cazuri: legarea s fie productiv, agonist (prezint activitate intrinsec); legarea s fie neproductiv, antagonist Intensitatea rspunsului celular depinde de: numrul de receptori i gradul de ocupare al acestora; existena unor receptori de rezerv

14.05.2013

Factorii care determin numrul de receptori/celul:

1.

Concentraia plasmatic a hormonului nivel ridicat i prelungit al hormonului scderea numrului de receptori (down regulation) o Scderea numrului de receptori membranari are loc prin endocitoza complexelor HR unde pot fi degradate. concentraie sczut a hormonului, creterea numrului de receptori, (up regulation)

. 2. Fosforilarea receptorilor a)

protein-kinaze specifice

Receptorul -adrenergic fosforilat la nivelul resturilor de Ser a complexului HR sub aciunea unor kinaze cAMP-dependente. complexul HR fosforilat este internalizat prin endocitoza. in veziculele endocitate receptorul este defosforilat. dac concentraia hormonului circulant scade, receptorii pot fi redistribuii n membrana celular.

b) Receptorii insulinei i ai factorilor de cretere receptori cu activitate intrinsec de protein-kinaze; formarea complexului HR determin autofosforilarea receptorului, cu modificarea funciei sale.

Familii de receptori
I. Familia receptorilor cu 7 segmente transmembranare (nrudii cu receptorul -adrenergic) cuprinde: receptorul pentru catecolamine -adrenergic; receptorul pentru acetilcolin de tip muscarinic; receptorii pentru serotonin (cu excepia subtipului 5-HT3); proteine fotoreceptoare din retin (de tipul rodopsinei); receptorul glucagonului, al STH-RH, oxitocinei, vasopresinei, angiotensinei, calcitoninei, dopaminei, melanocortinei, corticotropinei, etc. acioneaz prin intermediul proteinelor G.

Receptorul -adrenergic lanul polipeptidic strbate de 7 ori membrana celular 3 bucle extracelulare i 3 intracelulare; fosforilat de o kinaz specific, la nivelul resturilor de Ser. situsul de legare al hormonului este format dintr-un buzunar. transducerea semnalului extern proteinelor G domeniul transmembranar 6 stimularea adenilat ciclazei.

14.05.2013

II. Familia receptorilor cu activitate enzimatic protein-kinazic tirozin-specific receptorii insulinei i ai factorilor de cretere. Receptorul insulinei un tetramer 22 Lanurile sunt n totalitate extracelulare, lanturile au segmentele N-terminale extracelulare, cte un segment transmembranar, iar capetele C-terminale se afl n citoplasm. Lanurile i sunt legate prin 2 puni disulfurice. domeniu de legare al insulinei, segmentele N-terminale ale lanurilor . Dup legarea insulinei la receptor, are loc o autofosforilare (2 resturi de Tyr din fiecare lan ).
Domeniu bogat n cistein Domeniu de tip imunoglobulinic ss ss ss Domeniu kinazic Receptor EGF Receptor insulinic Receptor IGF-1 Receptor Receptor NGF FGF Receptor Receptor VEGF PDGF Receptor M-CSF CITOSOL M embran plasmatic

III. Receptorii care regleaz canalele ionice. Hormonii care deschid canale ionice. receptorii nicotinici ai acetilcolinei, receptorii pentru glutamat i GABA, receptorii pentru glicin din SNC, receptorii 5-HT3 pentru serotonin.

2. Receptorii intracelulari hormonilor steroidici (estrogeni, progestativi, androgeni, corticosuprarenali), calcitriolilor, ai hormonilor tiroidieni i acidului retinoic; hormoni lipofili, strbat uor membranele celulare.

Caracteristici: - localizai n citoplasm si n nucleu pentru glucocorticoizi, aldosteron, hormonii tiroidieni, estrogeni, progesteron, androgeni, calcitrioli, acid retinoic; - sunt proteine cu cteva sute de aminoacizi, care posed 3 domenii distincte: a) domeniul N-terminal - rol reglator; b) domeniul de legare al hormonului n regiunea C-terminal; c) domeniu prin care se leag la cromatin, influennd transcrierea.
Receptorii se gsesc n form inactiv legai de un complex proteic inhibitor, care conine proteina ocului termic (Hsp 90) n form dimeric. situsul de legare la HRE din ADN este blocat. HR determin modificri conformaionale care, elibereaz situsul de legare la ADN.

14.05.2013

6. Mecanisme de aciune ale hormonilor

pentru hormonii lipofili, care au receptori intracelulari; pentru hormonii hidrofili, care acioneaz prin receptorii membranari.

Mecanismul de aciune al hormonilor steroidici

Hormonii tiroidieni

Retinoizii
Acidul all trans retinoic 9-cis-retinoic

14.05.2013

Mecanisme de aciune ale hormonilor cu receptori membranari

hormonul este primul mesager; receptorii sunt localizai n membrana celular intervine un sistem de cuplare reprezentat de proteinele G; sistemul efector genereaz n celul, mesagerul secund,

mesageri secunzi: cAMP, cGMP, DAG, IP3, Ca2+, sisteme efectoare: adenilat ciclaza (ATP pirofosfat liaz), guanilat ciclaza (GTP pirofosfat liaz), fosfolipaza C (fosfatidil inozitidaza).

Hormon=Prim mesager H Membrana celular Sistem efector Adenilat ciclaza Fosfolipaza C

Semnal intern (mesager secund)

cAMP DAG, IP3 Ca2+

EFECT BIOLOGIC

Proteinele G proteine membranare, cupleaz complexele HR cu sistemele generatoare de mesageri intracelulari (secunzi). activate de GTP sunt formate din 3 subuniti , i : subunitile reprezint componenta care leag GDP i GTP, au activitate GTP-azic, sunt de mai multe tipuri (41-45 kD ) i confer individualitate proteinelor G; subunitile (35-36 kD) i (7-10 kD) sunt asemntoare n structura proteinelor G.

Forma inactiva trimerica -GDP Forma activa -GTP

Tipuri de proteine G
proteinele Gs conin subunitatea s (stimulatoare) asigur cuplarea complexului HR cu adenilat ciclaza creia i stimuleaz activitatea, ceea ce are ca urmare creterea concentraiei de cAMP n celul; proteinele Gi conin subunitatea i (inhibitoare) asigur cuplarea negativ a complexului HR cu adenilat ciclaza, are loc scderea activitii enzimatice i, n consecin reducerea concentraiei celulare de cAMP; proteinele Gp care conin subunitatea p sunt proteine care cupleaz complexul HR cu sistemul efector al fosfolipazei C. Acesta hidrolizeaz fosfatidilinozitol-4,5-difosfatul (PIP2) n diacilglicerol (DAG) i inozitol 1,4,5-trifosfat (IP3), mesageri secunzi care determin creterea concentraiei celulare de Ca2+ i activarea unor kinaze; proteinele Gt (transducina) este proteina specializat n fototransducie, intervenind n mecanismul vederii. Receptorul pentru vederea crepuscular este reprezentat de rodopsin din celulele bastona ale retinei care conine 11-cis retinalul, ca grupare prostetic; proteinele Go (de la other) sunt rspndite n SNC, activarea proteinei Go prin cuplarea cu complexul HR prin subunitatea o, conduce la nchiderea canalelor de Ca2+ voltaj dependente i / sau deschiderea canalelor de K+.

Tip de protein Gs (stimulatoare) Gi (inhibitoare) Gp Gt (transducina)

Sistemul efector adenilat ciclaza adenilat ciclaza fosfolipaza C cGMP fosfodiesteraz

Mesager secund cAMP cAMP DAG, IP3 cGMP

14.05.2013

Sisteme de transducie ale semnalelor hormonale

a) Sistemul adenilat ciclaz: proteinele Gs i Gi i dou tipuri de receptori pt hormoni care stimuleaz sau inhib adenilat ciclaza.

Hormon

Receptor

Protein G Adenilat ciclaza Membrana celular

GDP AC

GDP

AC

GTP GDP

GDP

AC GTP AC

Pi

AC GTP-

ATP

cAMP mesager secund

NH2 N N N N O O 1 O O CH2 O P O P O P O O ATP O O Adenilat ciclaza PPi N

NH2 N N N O O cAMP CH2 O

NH2 2 cAMP fosfodiesteraza H2O

P O O

N N

N N O

O CH2 O P O O

5'AMP

Mecanismul de aciune al cAMP

Hormon Receptor Spatiu , extracelular AC

Membrana celular

Gs Citosol ATP Subunitate catalitic C C R R reglatoare cAMP 2 C cAMP cAMP R R Protein ATP ADP P-Protein

Protein kinaza A (inactiv)

Procesul de fosforilare poate avea diferite efecte: a) mresc sau micoreaz activitatea unor enzime P enzime active: fosforilaza, lipaza tisular, fosforilazokinaza; P-enzime inactive sunt: glicogen sintetaza, Pir-DH, AcCoAcarboxilaza, HMG-CoA-reductaza, etc.; b) modific sensibilitatea unor enzime fa de efectori; c) dac proteina fosforilat este o kinaza, are loc o amplificare, n cascad, a semnalului iniial (ex: fosforilazo-b-kinaza); d) prin fosforilare se modific concentraia unor metabolii reglatori (ex: F-2,6-P2 reglator al glicolizei i GNG); e) unele P-proteine sunt implicate n diviziunea celular, transcrierea genelor i translaia lor, permeabilitatea membranar

Protein kinaza A (activ)

Efect biologic

10

14.05.2013

b) Sistemul guanilat ciclaz

O HN H2N N N NO 1 Guanilat ciclaza H N CH2 O P O P O P O 2 O O O PPi O O O HN

O
N N NO CH2 O P O O cGMP

2 HN cGMP fosfodisteraza H N N 2
H2O

N O N O CH2 O P O O 5'GMP

GTP

Sinteza cGMP i hidroliza la 5'GMP Guanilat ciclaza are 2 forme izoenzimatice: una cu localizare membranar, iar alta citoplasmatic. Guanilat ciclaza membranar prezint domeniul extracelular cu rol de receptor al semnalului extern, iar domeniul intracelular joac rol de efector care genereaz mediatorul intracelular. n condiii normale enzima exist ntr-o stare de fosforilare puternic. Dup legarea hormonului, domeniul intracelular al guanilat ciclazei se activeaz, ceea ce determin transformarea GTP n cGMP, urmeaz o defosforilare rapid a guanilat ciclazei i o revenire a activitii la starea de baz n ciuda prezenei continue a hormonului.
Domeniu extracelular Guanilat ciclaza Hormon Hormon

P P Domeniu P P intracelular P P

P P P GTP

P P Guanilat ciclaza defosforilat

P cGMP+PP i

Model de aciune al guanilat ciclazei membranare

c) Sistemul fosfatidilinozitolic.
H Membran celular R
Gp

PI

AP

I
+

GTP

p
GTP

PLC IP 4
K

PIP 2

DAG
+

PKC
IP 3

GDP

P-Proteine (Ser, Thr)

receptor

Ca 2+ RE

CM
+ + +

Efecte biologice
MLCK

CaCM

fosforilazokinaza diferite proteinkinaze

Sistemul fosfatidilinozitolic R - receptor; H - hormon; PLC - Fosfolipaza C; PKC Protein-kinaza C; DAG - diacilglicerol; PIP2 - Fosfatidilinozitol 4,5 difosfat; MLCK - kinaza care fosforileaz lanul uor al miozinei; CM - calmodulina; RE - reticul endoplasmatic; I Inozitol; AP - Acid fosfatidic; PI - Fosfatidilinozitol; K - Kinaz; IP3 - Inozitol-1,4,5-trifosfat; IP4 - Inozitol 1,3,4,5tetrafosfat.
CH2 O CO R1 CH O CO R 2 OH OH O CH2 O P O OOP O P OH CH 2 O CO R 1 Fosfolipaza C H 2O CH2 OH DAG CH O CO R2 + P O OP O P OH Inozitoltrifosfat (IP3) OH OH

Fosfatidilinozitol difosfat (PIP2)

11

14.05.2013

TSH Receptor (glicoprotein) Receptor (gangliozid) TSH

AC PIP2 PLC Gp Gs PIP2 PLC IP3 + DAG Gp Gs

AC

ATP

cAMP

Model de aciune a TSH-ului

PIP2-Fosfatidilinozitol-4,5 difosfat; PLC = Fosfolipaza C; AC = adenilat ciclaz.

Mecanismul de actiune al TSH poate activa att sistemul adenilat ciclaz, ct i cel fosfatidilinozitolic. Receptorul TSH-ului este compus din dou subunti: o glicoprotein i un gangliozid. adenilat ciclaza este activat prin intervenia componentei gangliozidice a receptorului, iar componenta glicoproteic se pare a fi legat de sistemul fosfatidilinozitolic.

d) Calciul ca mesager secund Ca2+ funcioneaz ca mesager secund mpreun cu cAMP, cGMP, DAG IP3 sau independent de acetia. Creterea [Ca2+] intracelular poate avea loc: rapid, din spaiul extracelular, prin canale voltaj sensibile; lent, dar cu efect mai lung, din RE prin canale controlate de IP3. 2+ Ca se leaga de calmodulin, modificare conformaional a calmodulinei, modific activitatea unor enzime. Complexul Ca2+-calmodulin intervine n mecanismul contraciei musculaturii netede

IP3

RE
+

Ca2+

Ca2+ CM
+

Ca2+ CM MLCK
ATP ADP

(Ca2+ATP

Protein kinaza CM-dependent)

ADP

Miozina

Miozin-P
H2O

Actin-caldesmon

CM=calmodulina; MLCK=kinaza lanului uor al miozinei; RE=reticul endoplasmatic.

Reprezentarea schematic a mecanismului contraciei musculaturii netede, declanat de eliberarea Ca2+ din RE sub aciunea IP3

Pi

Miozin fosfataz Actina Actomiozin Caldesmon-P

Contractie , muscular

12