Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
com/educatie/chimie/LUCRA
RE-DE-LICENTA-CHIMIE-SI-I37.php
LUCRARE DE LICENTA CHIMIE SI INGINERIE
CHIMICA - Acilarea selectiva a amestecului
racemic al etil 3-(furan-3-il)-3-hidroxi propanoat cu
Novozyme 435
UNIVERSITATEA BABES-BOLYAI
CLUJ-NAPOCA
LUCRARE DE LICENTA
Acilarea selectiva a amestecului racemic al
Novozyme 435
Partea I a
Formula structurala
Formula bruta: C9H10O4
Compozitia elementala:
Carbon: 12,01113/182,17907=59.337%
Hidrogen: 1,007914/182,17907=5,5325%
Oxigen: 15,99944/182,17907=35.129%
Copmusii organici care rotesc planul luminii polarizate in orice stare fizica (gazoasa,
lichida, solida sau in sloutie) si isi datoresc deci activitatea optica insasi structurii moleculare,
reprezinta substante optic active, care se pot prezenta sub forma mai multor izomeri optici.
Numai acele perechi de izomeri optici care rotesc planul luminii polarizate cu acelasi numar de
grade, unul spre dreapta si celalt spre stanga, sunt enantiomeri sau antipozi optici, si
prezentandu-se din punct de vedere structural (spatial) ca si obiectul si imaginea sa in oglinda.
Amestecul echimolecular al celor doi antipozi optici formeaza un racemic care nu roeste planul
luminii polarizate, deoarece rotatiile lor opuse se anuleaza reciproc. Prin anumite mijloace
racemicii pot fi scindati in antipozii optici respectivi.
Aparitia activitatii optice la substante organice este legata de anumite conditii structurale,
spatiale pe care trebuie sa le indeplineasca moleculele respective. Studiul substantelor optic
active a stabilit initial ca si conditie a aparitiei activitatii optice asimetria moleculei. Ulterior insa
a avut loc o importanta schimbare de conceptie (si de terminologie), legandu-se fenomenul de
activitate optica nu in mod obligatoriu cu notiunea de asimetrie, ci cu cea de chiralitate definita
ca proprietatea de neidentitate a unui obiect (structuri) cu imaginea sa de oglindire.
Metode uzuale de separare a enantiomerilor, ce sunt aplicate pentru a-i izola, sunt
scindarea, dedublarea sau rezolvarea.
Izolarea unui enantiomer dintr-un amestec racemic se poate realiza i pe cale biochimic a,
prina aciunea unor mucegaiuri, bacterii sau drojdii, care, crescute intr-un mediu de cultura
coninand in soluie un racemic, distruge prin metabolizare un singur enantiomer, celalalt
ramanand in soluie de unde se poate izola.
2.3 Biocataliza
Catalizatorii maresc viteza de reacie a unei reacii fara sa produca o schimbare in structura
lor. Dezvoltarea conceptului de cataliza in secolul XIX, a mers mana in mana cu descoperirea
catalizatorilor din surse biologice. Acestea au fost numite enzime, i mai tarziu s-a descoperit ca
erau de natura proteica.
Organismele vii conin un numar mare de enzime ce mediaza direct toate reaciile ce au loc
in organismul viu. Enzimele sunt catalizatori eficieni, adesea mult mai superiori catalizatorilor
convenionali, motiv pentru care sunt folosii din ce in ce mai mult in societatea de astazi de
inalta tehnologie, i au un rol important in expansiunea biotehnologica. Utilizarea lor a dat
natere la afaceri cu o diversitate mare de procese industriale, noi aplicaii ale enzimelor fiind
descoperite in mod constant. In natura enzimele pot fi gasite foarte rar in afara celulelor,
majoritatea exercitandu-i activitatea in interiorul celulei, in interiorul organismelor celulare.
Unele enzime ii pierd complet activitatea catalitica cand sunt separate din mediul lor ambiant,
astfel nu pot fi folosite in alt mediu, un exemplu ar fi proteinele membranare care sunt inactive in
absena componenilor membranelor.
Utilizarea enzimelor in scopuri sintetice are i unele dezavantaje care nu pot fi ignorate.
Costul mare al izolarii i purificarii enzimelor descurajaza inca folosirea lor mai ales in
domeniile in care exista o procedura bine stabilita. Acest dezavantaj poate fi evitat utilizand
extracte crude, sau chiar celule intacte, avand grija ca procesul sa nu fie contaminat cu al i
produi. In general, datorita originii naturale, unele enzime devin inactive cand sunt extrase din
mediul lor natural. Datorita originii lor naturale, enzimele de obicei lucreaza in mediu apos.
Acest lucru poate cauza dificultai cand substratul sau produsul sunt insolubile sau sensibile la
apa. Exista totui unele tehnici care catiga teren: folosirea solvenilor organici, a fluidelor
supercritice, sisteme micelare sau emulsii bazate pe cristale lichide. In obinerea compuilor
optic activi, enzimele contaminate pot cataliza aceeai transformare, dar cu diferite viteze i
stereoselectivitate diferita. Astfel este important sa determini gradul de puritate al enzimei pentru
garantarea puritaii produsului.
Lipazele necesita activare, iar cele mai multe tipuri de activare sunt cunoscute ca facand
substratul mult mai disponibil pentru emulsificare utilizand ca ageni activi detergen ii. Alt
activator binecunoscut sunt ionii de calciu i ei activeaza prin formarea cu acizii gra i liberi a
unor saruri insolubile de calciu sau sapunuri.
Cele mai multe lipaze au un pH alcalin cuprins intre 8 i 9. Exista cateva lipaze microbiene
care prefera mai muli ioni de hidrogen, avand pH optim de 5-6. Temperatura optima este de 30-
40C, dar exista i lipaze care ii inceteaza activitatea catalitica la -10 C deoarece substraturile
lichide devin solide la aceasta temperatura. Lipazele sunt serin hidrolaze, ele prezinta o activitate
enzimatica slaba in mediu apos coninand substrat dizolvat. In eucariote lipazele sunt implicate
in diferitele etape ale metabolismului lipidic, inclusiv digestia, absorbia grasimilor i
metabolismul lipoproteinelor. In plante, lipazele se gasesc in esuturile depozitare de energie.
Structura lipazei Candida Antartica a fost studiata prin difracie de raze X. Au fost izolate
i caracterizate doua lipaze CaLA i CaLB. Cele doua lipaze au fost clonate i secven iate fiind
obinute cristalele pentru caracterizare structurala. Intre cele doua enzime nu s-a gasit nici o
secvena omoloaga. Lipaza B s-a dovetit extrem de utila in sinteza organica prin paleta larga a
transformarilor stereospecifice i selective pe care le poate cataliza in medii organice. CaLB are
317 aminoacizi, conine doua foi , 9 catene , 17 zone helicoidale i 3 puni disulfurice.
Studiile chimice care demonstreaza natura situsurilor active ale enzimelor adesea se
bazeaza pe reactivii de afinitate-blocare, substane ale caror structura este asemanatoare cu cea a
substraturilor naturale dar, reacioneaza ireversibil cu enzima.
Reacia are loc in doua etape principale. In prima etapa se realizeaza o legatura covalenta
intre atomul de carbon C1 al legaturii peptidice ce urmeaza a fi hidrolizata si serina din situsul
catalitic. Formarea intermediarului acilenzima are loc printr-o stare de tranziie incarcata negativ
la atomul de oxigen ataat la C1. Formarea acestei stari de tranziie este facilitata de rolul de baza
generala a histidinei. Acest rol este potenat de restul de acid aspartic care stabilizeaza sarcina
pariala pozitiva care apare la nucelul imidazolic al histidinei. Oxigenul Ser devine puternic
nucelofil astfel incat poate genea o stare de tranziie tetraedrica la C1. Aceasta stare de tranzi ie
este stabilizata prin legaturi de hidrogen care fixeaza oxianionul de la C1. Aceste legaturi de
hidrogen sunt realizate in buzunarul oxoanionic. Ruperea legaturii poate duce la formarea acil-
enzimei. In cea de a doua etapa, sub influena aceleiai baze generale, dar in prezena
metanolului va avea loc un atac nucleofil la acelai C1. i in cea de a doua stare de tranziie ionul
oxianionic este stabilizat prin existena unor legaturi de hidrogen in buzunarul oxianionic. Prin
ruperea legaturii esterice dintre serina i fragmentul peptidic N-terminal enzima se regenereaza.
Eficiena aciunii catalitice depinde de stabilizarea delor dou a stari de tranziie prin
legaturile de hidrogen care fixeaza oxianionul de la C1.
R = Substrat
3.2.Modelarea procesului
3.2.1 Modele de bilan de masa
Unde:
Masa moleculara
Compus Formula moleculara
[g/mol]
Diclormetan 85 CH2Cl2
Acetona 58 C3H6O
Lipaza -
REACIA DE ACILARE:
INTRARE IEIRE
Cantitate Cantitate Ca
Compus Compus
[Kg] [kmoli] [
Lipaza 2 - Lipaza
Acetat de n-butil
56
exces
Acetat de n-butil 576.278 4.96
Acetaldehida 6
Pierderi 2
Bilanul termic al unei instalaii chimice are ca scop: urm arirea fluxurilor termice, a
consumurilor de caldura, determinarea randamentelot termice i dimensionarea aparatelor.
Caldura acumulata in reactor = Caldura intrata in reactor - Caldura ieita din reactor +
Efectul termic al procesului - Caldura cedata in exterior.
Hf = -94,38C-34,1H-0(Br+Cl+N+O)-41,1F-69,3S-Hc
unde:
Estimarea caldurilor de combustie ale compuilor organici, in stare solida se poate realiza
prin doua metode:
1.Metoda Karash
1.Metoda Karash:
Caldurile de combustie ale compuilor organici in stare lichida se pot determina cu formula
lui Karash. Ideea de baza a acestui calcul este aceea ca legaturile dintre atomi se formeaza
intotdeauna pe seama a 2 electroni, care devin comuni celor 2 atomi. La arderea unei
hidrocarburi are loc deplasearea electronilor atomilor de carbon i hidrogen catre atomul de
oxigen. Cantitatea de caldura degajata prin deplasearea unui electron de la atomul de carbon sau
hidrogen catre atomul de oxigen este de 26,05 Kcal( regula lui Karash).
Pentru hidrocarburile simple se poate calcula cu relaia:
Hc = -26,05n
Caldurile de combustie ale compuilor mai complicai, cu legaturi duble sau triple sau
ale celor polisubstituii, nu se pot calcula cu aceasta relaie simpla, care trebuie completata cu
corecii termice caracteristice diferitelor tipuri de legaturi i substituen i ai atomilor de carbon.
Aceasta relaie este:
HC = -26,05n + [Kcal/mol]
- corecia termica.
Deoarece relaia lui Karash se poate aplica doar pentru substane lichide, pentru substan e
solide se vaintroduce corecia urmatoare:
qvap = (240 * ) / M
Hc = ai + x bi
Orice grup funcional din compusul organic se poate considera c a provine de la o parafina
saturata in care s-au operat anumite modificari structurale. De aceea, la calcularea caldurii de
combustie, primii coeficieni (ai i bi) care se iau in discuie sunt acei ai parafinei normale pentru
care valorile tabelate sunt: ai = +5,7 i bi = +52,08.
Daca apar mai multe grupari de acelai fel, ai se multiplica cu numarul grupelor
funcionale identice, dar biramane neschimbat. Valorile coeficienilor ai , bi se citesc din tabel in
funcie de starea de agregare.
Caldura de combustie este parametrul utilizat in calculul termodinamic din doua motive:
1. Caldura de combustie care poate fi masurata direct, fiind accesibila verificarii experimentale;
2. Caldurile de formare au valori numerice mai mici, astfel, erorile care apar in calculul lor sunt
mai mari.
Hf = -94.38C-34.19H-0(Br+Cl+I+N+O)-41.4F-69.3S-Hc
Relaia se aplica in cazurile in care produsele de ardere ale substituiei sunt CO 2, Cl2, N2,
SO2 in stare gazoasa, H2O i Br2 in stare lichida si HF in soluie apoasa.
Estimarea caldurilor de combustie ale compuior organici pe baza bilanului de oxigen caldura
de combustie a unei substane organice este funcie liniara de numarul de atomi de oxigen
implicai in combustia completa a unui mol din compusul respectiv.
Se vor calcula caldurile de combustie prin metoda bilanului de oxigen utilizand formula
lui Roth:
Hc = -52.5 x
unde: x numarul de atomi de oxigen necesari combustiei complete a unui mol de substana.
x = 23 moli de oxigen
x = 23moli de oxigen
Hf = -94.38*7-34.19*10-(-1207.5) = -16.18kcal/mol
x= 8 moli de oxigen
Hf298 =(-1316.26-2271.28)+1316.26+556.56=917.8kcal/mol
Pentru determinarea entropiei substanelor organice este necesara estimarea capacitaii calorice a
acestora.
Capacitaile calorice ale lichidelor i solidelor pot fi determinate din caldurile atomice utilizand
relaia lui Kopp:
Caldura
Unitate de masura C H O
atomica
Pentru substane
Cal/atomg*K 01.03.10 2.3 4.0
Solide
CP=7*1.8+10*2.3+4*1.6=43cal/mol*K
S0298=1.1*43=47.3 cal/mol*K
CP=7*1.8+10*2.3+4*1.6=43cal/mol*K
S0298=1.1*43=47.3 cal/mol*K
CP=11*1.8+16*2.3+5*1.6=50.8cal/mol*K
S0298=1.1*50.8=55.88cal/mol*K
CP=6*1.8+12*2.3+2*1.6=41.6cal/mol*K
S0298=1.1*41.6=98.12 cal/mol*K
Entropia reaciei de alchilare:
S0298 = (43+50.8)-43-41.6=9.2cal/mol*K=9.2*10-3Kcal/mol*K
G0=H0-TS0
G0=315.8-298*(43*10-3)=314.51kcal/mol*K
Principiul saturarii enzimei cu substratul este general valabil in cazul cineticii enzimatice.
Cinetica enzimatica poate fi folosita ca si cinetica clasica, in elucidarea unor mecanisme de
reactie, in calculul timpului de reactie, al conversiilor, al conditiilor economice optime, cand se
urmareste productia industriala in bioreactor.
V=kc
unde: k-constanta
c-concentratia
-la concentratii scazute ale substratului, viteza de reactie este proportionala cu concentratia
substratului (reactie de ordinul intai);
-la concentratii ridicate ale substratului viteza de reactie este independenta de concentratia
substratului, Cs ( reactie de ordinul zero);
-exista o plaja a concentratiei de enzima la care viteza maxima depinde liniar de concentratia
enzimei, Ce.
Henry in 1902, pe baza acestor constatari propune un model empiric pentru dependenta
vitezei reactiei enimatice de concentratia de substrat:
V=VmaxCs/(Km+Cs)
Brown propune tot in 1902 un mecanism general potrivit caruia initial se formeaza intr-o
reactie reversibila, un complex enzima-substrat ES, care se transforma ireversibil in produsul de
reactie cu regenerarea enzimei:
E+S ESE + P
- concentratia totala de enzima ramane constanta in timpul reactiei enzimatice, adica enzima
initiala se va regasi atat sub forma de complex enzima-substrat, cat si ca enzima libera;
- concentratia de enzima este mult mai mica decat cea de substrat, prin urmare formarea
complexului nu va modifica semnificativ concentratia substratului;
Constanta KM este egala cu constanta de echilibru KS numai atunci cand k2<<k+1.Cu cat
valoarea lui KM este mai mica, cu atat este mai mare afinitatea enzimei pentru substrat.
Ataata in Anexe
3.4. Schema fluxului tehnologic
Ataata in Anexe
- evitarea unor productii de serie sau unitati specializate in fabricarea utilajelor respective;
Automatizarea bioreactorului:
Reglarea debitului pompelor se poate face prin strangularea directa a conductei de refulare.
Strangularea nu se va face niciodata pe conducta de aspiraie deoarece prin vidul relativ creat se
produce un fenomen de cavitaie, care distuge rotorul pompei.
4.Proiectarea tehnologica:
4.1. Alegerea si descrirea echipamentelor si utilajelor necesare in proces
Aceste utilaje de tip recipient cu pereti subtiri care servesc depozitarii temporare a
substantelor solide, lichide sau gazoase , care constitue materii prime, produsi intermediari sau
finali intr-o instalatie chimica.
Ele fac parte din cea mai importanta parte componenta a instalatiilor industriale de sinteza fina,
instalatia de distilare si reflux. Partea principala a instalatiei este aparatul de reactie sau reactorul.
El este compus din vasul cu manta, capac cu gura de vizitare, agitator. Pe capacul reactorului
sunt fixate mai multe racorduri (stuturi) la traseele de vapori, reflux, incarcari cu materii lichide.
4.1.3. Condensatoarele
Utilajele pentru transfer termic asigura trecerea caldurii de la o substanta la alta substanta
prin intermediul unui perete despartitor. Solutiile constructive pentru aceste utilaje sunt de o
mare diversitate. In acest caz, transmiterea caldurii este insotita de schimbarea starii de agregare.
Cele mai utilizate, in prezent sunt schimbatoarele de caldura de suprafata tubulare cu manta, din
cadrul carora se aleg doua schimbatoare cu fascicul tubular rigid si o trecere, in care circulatia
agentilor termici este in contracurent .
Aceste aparate sunt construite in principiu dintr-un fascicol de tevi, montate in doua placi
tubulare si inchise intr-o manta prevazuta cu capace. In general tevile sunt laminate si destinate
special constructiei schimbatoarelor de caldura. Exista o mare varietate de diametre cat mai mici,
care asigura un transfer de termic mai intens si constructii mai compacte, dar se vor avea in
vedere si aspectele legate de pierderile de presiune si de colmatare.
Este format dintr-un cilindric, cu capac , prevazut la o oarecare distanta de fund cu o tabla
gaurita (sau fund poros), care sustine mediul de filtrare (panza) si sa permita trecerea filtratului.
Dupa intinderea panzei pe placa gaurita (poroasa) se trimite suspensia pe la partea superioara si
cea inferioara a stratului filtrant, creata prin presiunea hidrostatica a suspensiei si pentru
producerea vidului sub placa poroasa.
4.1.5. Pompele
Pompele utilizate pentru manipularea lichidelor din proces sunt pompe centrifuge.
Reactorul are forma cilindrica cu fund si capac elipsoidal, cu manta de incalzire-racire (cu
abur respectiv apa), cu agitator cu elice actionat de un motor electric. Capacul este demontabil,
asamblat prin flanse prinse cu suruburi, iar fundul este montat de corpul cilindric prin
intermediul unui cordon de sudura.
Din procesul tehnologic rezulta ca trebuie impuse anumite conditii de lucru, si anume:
temperatura de lucru de 25 0C;
presiunea de lucru, presiunea atmosferica, P=1,013 MPa;
densitatea masei de reactie =1238.33 kg/m3;
Vu=24+0.016+0.0002
Vu =24.016 m3
V - volumul reactorului , m3
Astfel:
V = 31.5 m3
Raportul dintre inaltimea si diametrul bioreactorului variaza intre 1-3 ( H/D coeficient de
zveltete)
D diametrul reactorului.
Vt=
D = = 2790 mm;
H = 4200 mm
Hreactor = H + 2 Hfund [ mm ]
Hfund=
Hfund = m
Hreactor =4.2+1.4
Acestea din urma sunt supuse unor recuperari pentru a putea fi purificate si recirculate in
sistem, abia apoi sunt deversate in reteaua de canalizare.
Dintre materiile prime utilizate enzima i alcoolul racemic nu sunt periculoase. Cei care
ridica probleme sunt: acetatul de n-butil, acetona, diclormetanul.
Acetatul de n-butil
Acetona
Foarte inflamabila, formeaza amestecuri explozive cu aerul; daunatoare prin ingerare, inhalare si
absorbie prin piele; poate provoca ameeli, iritanta in contactul cu pielea;
Diclormetanul
Inflamabil, formeaza amestecuri explozive cu aerul la 100C; iritant al ochilor, posibil cancergen.
Partea a II a
1.Generalitai:
In secolul 21 avem nevoie de subtane enantiomeric pure pentru a le folosi in industria
farmaceutica. Importana obinerii acestori compui a primit o noua dimensiune, in anul 1992,
cand Administraia Alimentelor i Medicamentelor din SUA (F.D.A.), a impus producatorilor de
medicamente sa sintetizeze, caracterizeze i sa testeze ambii enantiomeri ai oricarei substane.
Biocataliza este este ramura importanta a biotehnologiei in care se utilizeaza enzime sau
preparate enzimatice, respectiv celule producatoare ale acestor enzime ca atare.
2.Materiale i metode
Spectrele 1H- si 13C-RMN au fost inregistrate la un spectrometru Brucker ce opereaza la
frecvente de 300 MHz respectiv 75 MHz, la 25 C. Probele chimice sunt exprimate in ppm fac_
de valoarea TMS luat_ ca standard intern.
HPLC a fost achiziionat de la firma Agilent, seria 1200, cu pomp a cuaternara, detector Uv-Vis,
cu injecie manuala. Coloanele chirale folosite pentru separarea enantiomerilor sunt Chiralpak
IA i Chiralcel OJ-H, legate in serie, folosind ca eluent hexan:izopropanol 90:10 v/v.
Reactanti si solventi
Reactantii si solventii folositi sunt produsi ai companiilor Aldrich or Fluka. Toti solventii au fost
purificati si uscati prin metode standard.
Biocatalizatori
Lipozyme immob.M, lipozyme TL IM, CalB imobilizata in piatra ponce, si lipaza Ak au fost
obinute de la fima Novozyme din Danemarca.
3.Partea experimentala:
S-a realizat obinerea unui a unui -hidroxi ester optic activ, folosind rezoluia cinetica.
Pentru aceasta s-a realizat urmatoarele etape:
Reactia Reformatsky:
+ HBr
Mod de lucru:
lipaza
= 2-3%
Astfel, pentru a optimiza aceasta metoda s-au modificat cateva dintre variabile ale reaciei, care
sunt in cazul nostru:
a). Timpul
b). Solventul
c). Reactantul
d). Enzima
Mod de lucru:
a. Timpul:
Timpul optim pentru realizarea reaciei este de 65 de ore, randamentul fiind de 49,99%.
b. Solventul:
Astfel pentru un compus racemic valoarea ee-ului este zero, iar pentru un compus
enantiomeric pur valoarea de:
E = raport enantiomeric = ;
Am incercat urmatorii reactani de acilare (tabelul 2), cu enzima CalB, timpul de reacie
fiind de 65 de ore.
d. Enzime:
S-a incercat i alte enzime (tabelul 3), folosind timpul de reacie 65 de ore, acetat de
vinil, octan pur.
Mod de lucru:
a. Timpul:
Timpul optim pentru realizarea reaciei este de 65 de ore, randamentul fiind de 49,99%.
b. Solventul:
Puritatea enantiomerica a unui compus este exprimat in termenul lui de exces enantiomeric(ee),
definit ca:
Astfel pentru un compus racemic valoarea ee-ului este zero, iar pentru un compus enantiomeric
pur valoarea de:
E = raport enantiomeric = ;
c = conversia = eeS/ eeS+eeP;
c. Reactani de acilare:
Am incercat urmatorii reactani de acilare (tabelul 2), cu enzima CalB, timpul de reacie fiind de
65 de ore.
d. Enzime:
S-a incercat i alte enzime (tabelul 3), folosind timpul de reacie 65 de ore, acetat de
vinil, octan pur.
4. Rezultate si discutii
Analizele HPLC efectuate au aratat o conversie de 2-3%; din acest motiv s-a recurs la un
studiu de optimizare bazat pe modificarea parametrilor reactiei pentru a gasi conditiile cele mai
propice. Au fost variati urmatorii parametri: timp de reactie, solvent, reactiv de acilare, enzima.
(Substratul)
Randament = 76%;
Analiza RMN
a). timp
b).solvent
c).reactant
d).enzima
Ca sa putem monitoriza mersul reaciei avem nevoie de o metoda chirala. Aceasta metoda
este HPLC:
Fig 4. Cromatograma HPLC (Coloana chirala Chiralpak IA Chiralcel OJ-H) racemat furan-
3-hidroxi-propionatul de etil
Fig 5. Cromatograma HPLC (Coloana chirala Chiralpak IA Chiralcel OJ-H) a butanoat i etil-3-
(furan-3-il)-3-hidroxipropanoat
Fig 6. Cromatograma HPLC (Coloana chirala Chiralpak IA Chiralcel OJ-H) a propionat i etil-3-
(furan-3-il)-3-hidroxipropanoat
Fig.7 Cromatograma HPLC (Coloana chirala Chiralpak IA Chiralcel OJ-H) a acetat i etil-3-
(furan-3-il)-3-hidroxipropanoat
Cromatograma dupa 30 h
Fig.8 Cromatograma HPLC dupa 30h (Coloana chirala Chiralpak IA Chiralcel OJ-H) etil 3-
(furan-3-il)-3-hidroxi propanoat
Cromatograma dupa 65 h
Fig.9 Cromatograma HPLC dupa 65h (Coloana chirala Chiralpak IA Chiralcel OJ-H) etil 3-
(furan-3-il)-3-hidroxi propanoat
4.3.2. Solventul
Nr.
Solvent Ees Eep c E
Crt
Acetatul de
2 0.550595 0.083525 0.131718 3.74409
vinil:IL 3:1
Tabelul1.Solventi utilizati
S-a pastrat timpul de reactie 65 h, reactantul de acilare butanoatul de vinil, enzima CaL- B.
4.3.3. Reactanti de acilare
4.3.4. Enzime
Nr.
Denumire enzima Ees Eep c E
Crt.
Lipozyme immob. M.
1 0.759625 0.139508 0.155158 8.3888
michei
Analiza HPLC:
Analiza RMN
5.Concluzii
S-a incercat rezolvarea racemicului prin metoda acilari selective in vederea obtinerii
hidroxi esterului optic activ corespondent substratului folosit dar s-a obtinut un randament foarte
scazut;
Pentru optimizarea metodei (obtinerea unui randament mai ridicat) s-a recurs la un studiu
de optimizare bazat pe modificarea a 4 factori determinanti pentru reactie;
Dupa rezultatele obtinute in urma optimizarii, s-a concluzionat ca enzima: lipaza CaLB,
solventul: n-octanul, timpul: 65 h , reactiv de acilare: butanoat de vinil sunt variabilele optime
pentru substratul discutat.
Prin metoda prezentata in lucrarea de faa s-a obinut enantiomeriul optic activ etil 3-
(furan-3-il)-3-hidroxipropanoat, prin acilare enzimatica cu CaL-B.
Partea a III-a
1. Concluzii generale
Prin prezenta lucrare s-a efectuat:
Studiul eficacitaii unei metode noi de separare a racematului prin intermediul folosirii
HPLC-ului, pe coloane chirale legate in serie IA i OJ-H;
Proiectarea unei instalaii la scara industriala de obinere a etil 3-(furan-3-il)-3-
hidroxipropanoat;
Prin metoda rezoluiei cinetice s-a obinut etil 3-(furan-3-il)-3-hidroxipropanoat optic
activ
Analiza spectrala a confirmat structura compuilor organici sintetizai;
4. Anexe
A.1.Schema de operatii
4.Anexe
2 pompa centrifuga pentru butanoatul de vinil; 16, 19 pompe centrifuge pentru fraciile
4 bioreactor pentru reacia de acilare; 17, 18, 20 vase de stocaj fracii rezultate
5 filtru Nutsche de vid; de la coloana cromatografica;
11 evaporator;
14 coloana cromatografica;