Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
BIOTEHNOLOGII
INDUSTRIALE
ndrumtor:Dr.Ing.Alexandra Blaga
Student: Abramiuc Alexandru
Grupa:2405 (IB)
TEMA DE PROIECTARE:
Proiectarea unei instalatii industriale de ontinere a
Penicilinei G cu o productivitate de 26 T/AN.
CUPRINS
Cap.1 Memoriu tehnic
Cap.2 Tehnologii de fabricatie5
2.1 Domenii de utilizare si proprietatile produsului...9
2.1.1 Domenii de utilizare....9
2.1.2 Proprietati chimice,fizice si biologice....10
2.2 Variate tehnologice...13
2.3 Alegerea variantei optime....13
2.4 Descrierea procesului tehnologic adoptat. ....15
2.4.1 Elaborarea schemei tehnologice.........15
2.4.2 Materii prime intermediare si auxiliare....30
2.4.3 Mecanismul reactiilor biochimice......42
2.4.4 Cinetica reactiilor biochimice.46
2.4.5 Termodinamica reactiilor biochimice....54
2.4.6 Bilantul de materiale.......58
2.4.7 Consumuri specifice
Cap.3 Controlul fabricatiei.73
3.1 Controlul,reglarea si automatizarea proceselor tehnologice....73
3.2 Controlul de calitate.....79
3.2.1 Metode de analiza ale materiilor prime si intermediare.79
3.2.2 Metode de analiza ale produsului finit......90
Cap.4 Produse secundare,deseuri de fabricatie ,epurarea apelor
reziduale.91
Cap.5 Utilitati....92
Cap.6 Transport,ambalare,depozitare...93
Cap.7 Norme de prevenire a muncii si PSI....99
7.1. Norme de protec ia muncii................................................................99
7.2. Masuri P.S.I........................................................................................101
Bibliografie.........................................................................................................103
Naftazolina
Tiolazolinul
5. Antibiotice
cu
ac iune
mpotriva
protozoarelor
i
metazoarelor: antimalarice, antihelmintice
6. Antibiotice cu ac iune antitumoral.
Un alt criteriu de clasificare este mecanismul de ac iune mpotriva
infec iei:
1. Ac iune asura peretelui celular, cu efect bactericid, numai n
faza de multiplicare a bacteriilor: Penicilinele G i V,
Oxacilina, Ampicilina, Carbenicilina, Cefalosporinele
2. Ac iunea asupra membranei citoplasmatice, cu efect
bactericid: Polimixina B, Colistina, Amfotericina B
3. Ac iune de inhibare a sintezei proteinelor, la nivelul
ribozomilor, cu efect bactericid in faza de multiplicare i de
stagnare
a
bacteriilor:
Streptomicina,
Gentamicina,
Tobramicina,
Kanamicina,
Neomicina,
Tetraciclinele,
Cloramfenicol, Eritromicina, Lincomicin
4. Ac iune de inhibare a sintezei acizilor nucleici, cu efect
bacteriostatic i bactericid: Novobiocina, Rifampicina,
Griseofluvina, Acidul nalidixic
5. Ac iune competitiv prin substituire de metaboli i analogi.
Aici se incadreaz sulfamidele care nu sunt antibiotice, dar
posed efect bacteriostatic i bactericid.
n func ie de structura chimic antibioticele se grupeaz n:
1. Beta-lactamice: Peniciline, Cefalosporine
2. Aminoglicozidice: Streptomicina, Kanamicina, Gentamicina,
Amikacina
3. Polipeptide ciclice: Colistina, Polimixina
4. Tetraciclinele: Doxicilina
5. Macrolide: Eritrimicina
Dup spectrul antimicrobian exist:
1. Antibiotice cu spectru ngust de tip penicilinic
2. Antibiotice cu spectru ngust de tip streptomicinic:
aminoglicozide, polipeptide
3. Antibiotice cu spectru larg i foarte larg de ac iune:
Tetracicline, Cloramfenicol, cefalosporine din genera ia a II-a
i a III-a
4. Antibiotice de nlocuire, in cazul apari iei fenomenului de
rezisten : macrolidele, lincosamdele, rifampicina
5. Antibiotice de rezerv, toxice: Vancomicina
6. Antibiotice de excep ie: Fosfomicina
[2,33-34]
Penicilinele de biosintez fac parte din clasa antibioticelor lactamice, i sunt substan e chimice produse de diferite specii de
microorganisme
din
clasa
Penicillium notatum i Penicillium
crysogenum. Penicilinele con in n
structura lor un nucleu tiazolic,
condensat cu unul tetragonal,
diferind ntre ele prin natura
radicalului R.
Pentil
Metil
p-aminobenzil
p-hidroxibenzil
2-pentil
Benzil
Heptil
L-4-amino-4carboxi-butil
Alil-mercaptometil
Radicalul R
CH 3 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 CH 3 H 2 N-C 6 H 4 -CH 2 HO-C 6 H 4 -CH 2 CH 3 -CH=CH 2 -CH 2 -CH 2 C 6 H 5 -CH 2 CH 3 -(CH 2 -) 5 -CH 2 CH 3 -CH 2 -CH 2 -CH(NH 2 )
(COOH)CH 2 =CH-CH 2 -S-CH 2 -
Dihidropenicilina F
Metilpenicilina
Penicilina T
Penicilina X
Penicilina F
Penicilina G
Penicilina K
Penicilina M
Penicilina O
3-clor-2-buteniltiometil
CH 3 -CCl=CH-CH 2 -S-CH 2 -
Penicilina S
Fenoximetil
C 6 H 5 -O-CH 2 -
PenicilinaV
(2,35)
n secolul trecut, 1929, Alexander Fleming descoper penicilina G
i o introduce n tratament n 1941. Penicilina G este unul dintre cele
mai de pre antibiotice de biosintez, cu o puternic ac iune bactericid
i bacteriostatic. Ini ial, penicilina a fost produs de subculturile de
Penicillium notatum, ulterior, s-a descoperit c i Penicillium
crysogenum, citro-roseum, ribrum, i unele specii de Aspergillus secret
penicilin. Men inerea tulpinilor la un nivel inalt de productivitate s-a
realizat prin culturi succesive ale tulpinelor tinere, viguroase, i
utilizndu-se uscarea tulpinilor prin liofilizare. (3,46)
2.1 Domenii de utilizare i proprieta ile produsului
Dintre penicilinele de biosintez, n practica medical au fost
introduse penicilina G, sub form de sruri de porasiu, sodiu sau cu
amine.
2.1.1 Domenii de utilizare
Potrivit statisticilor, anual se produc cca. 26000 tone penicilina G la
nivel mondial. Domeniile de utilizare ale acesteia sunt urmatoarele:
- utilizare n terapeutic: 13%
- ob inerea de acid 6-aminopenicilanic: 65%
- ob inerea de acid 7-desoxicefalosoranic i al i intermediari:
20%
9
- alimenta ie: 2%
(2,30)
n cazul utilizrii terapeutice a penicilinei G, aceasta prezint o
toxicitate sczut, fiind activ impotriva agen ilot patogeni de tipul
bacililor gram pozitivi, a cocilor gram pozitiv i negativ, fiind
recomandat n angine streptococice, erizipel, scarlatin, pneumonie
streptococic, otite, sinuzite, antrax, difterie, sifilis, blenoragie.
Deasemenea este utilizat n profilaxia antitetanic i cea a infec iilor
prin mu cturi de animale. Nu este utilizat n cazul infec iilor cu
agen ilor patogeni secretori de penicilinaz (stafilococii de spital)
care sunt rezisten i la ac iunea antibioticului. (3,46)
Penicilina G se prezinta cu formula bruta: C16H18O4N2S, masa
moleculara M m =334 moli/g. In comert la noi in tara se gaseste sub
denumirile Penicilina G sodica si Penicilina G potasica produse
fabricate de S.C. Antibiotice S.A.
(2S,5R,6R)7-oxo-6-(2-
3,3-dimetill-
fenilacetamido)-4-thia-1-aza-biciclo[3.2.0]heptan-2-carboxilat
2.1.2 Propriet ile produsului
Propriet i fizice
Penicilina G se prezint sub forma unei substan e albe, cristaline,
solubile in ap i solven i organici, insolubil n eter, cloroform, uleiuri
grase, parafin. p.t.=80C Miros slab, caracteristic, gust amar.
Substan higroscopic. (1,86)
Propriet i chimice .
Penicilinene sunt instabile n prezen a acizilor, alcalilor,
oxidan ilor, alcoolilor, metalelor grele i la temperaturi ridicate.
Penicilina i i pierde propriet ile in solu ii cu pH acid mai mic de 5 sau
bazic mai mare de 8. (4,3) In solu ii apoase prezint pH= 5,5-7,5.
Prezint trei atomi de carbon asimetrici (C 3 , C 5 ,C 7 ), fiind optic
activ cu D 2 0 +241
Produsul ini ial rezultat prin hidroliza nucleofil (prezen a lactamazelor, a penicilinazelor sau a ionilor metalici) a penicilinei este
acidul peniciloic, biologic inactiv, acesta prin acidulare pierde o
molecul de CO 2 trecnd n acid peniloic.
ac. peniciloic
ac. peniloic
10
11
Proprietai biologice
Penicilina G se prezint sub form de sruri de sodiu sau potasiu fiind activ
bacteriostatic i bactericid fa de bacili i coci grampozitivi. (1,86)
n studiul aciunii biologice a antibioticelor se urmrete stabilirea relaiei
dintre structura chimic a medicamentului i aciunea sa farmacologic pe de o parte,
12
randament ridicat
13
Hidrati de carbon
Extract de porumb
Saruri nutritive
Aer nesteril
Pregatire mediu de
cultura
Abur, 5 a.t.a.
Penicillium crysogenum
Sterilizare m.c.
Sterilizare aer
Condens
Ag. antispumant
Acid fenilacetic
Fermentatie
Filtrare
Masa celulara
Acetat de butil
Sol. dil. H 2 SO 4
Extractie
Faza apoasa
Reextractie
Sol.NaCO 3
Butanol
`CH 3 Cl 3
butanol
Distilare
azeotropa
Solventi reziduali
Filtrare, spalare
pe
Uscare
Pe
ni
c
G ilina
14
1.Pregatirea mediilor
Mediul de cultura reprezinta substratul nutritiv care contine
complexul de substante
folosite pentru cresterea si multiplicarea
microorganismelor in conditii artificiale.
Pregatirea mediului consta in dizolvarea in apa a componentilor
acestuia conform retetei pentru fiecare faza a procesului de fermentatie.
Mediul de cultura trebuie sa contina hidrati de carbon:, saruri minerale,
surse de azot oragnic si anorganic, precursori si apa. Deoarece
sterilizarea mediului de cultura de face cu abur direct, cantitatea de apa
ce se adauga la prepararea mediului de cultura este mai mica cu o
cantitate egala cu cea a aburului care condenseaza in timpul sterilizarii.
Pregatirea mediilor de cultura se face in aparate destinate acestui
scop, prevazute cu agitatoare, conducte pentru abur, serpentine de
incalzire respectiv racire. In aceste aparate se introduce apa, se
incalzeste la 50-60C, apoi se adauga extractul de porumb principala
sursa de aminoacizi- si se fierbe timp de 30-60 minute.Dupa aceasta,
solutia se raceste la 50-60C si se adauga restul componentilor mediului
in urmatoarea ordine: CaCO 3 , NH 4 NO 3 , NaSO 4 , MnSO 4 , KH 2 PO 4 , ZnSO 4 ,
lactoza, glucoza.
15
Intermediar
Regim
2-3
3-3,5
1,2
0,7
0,2-0,3
0,12
0,06
0,2
0,016
2,5-2,8
6-7
2-3
0,3
1,2-1,3
0,5-0,6
0,3
0,06
0,002
0,002
0,4
0,8
16
Precursori
Precursorii sunt compui organici sau anoganici, care atunci cnd sunt adugai
n mediul de cultur intervin ca molecule intermediare n biosintez sau dirijeaz
biosinteza ctre o anumit direcie.
Acidul fenilacetic dirijeaz procesul de biosintez ctre obinerea de penicilin
G, folosind ca microorganism productor Penicillium Chrysogenum. Astfel se
favorizeaz atingerea unor randamente ridicate de biosintez.
Prin activitatea lor, extrem de eficient, n procesele de biosintez, precursorii
sunt considerai componente ce nu lipsesc din mediile de cultur, iar pentru a evita
efectele inhibitorii acetia se vor aduga treptat, meninndu-se o concentraie
constant. [5.68]
Reglatori ai proceselor de biosintez
n biosinteza antibiotecelor se pot folosi unele molecule organice sau
anorganice, ce acioneaz ca inductor, activatori sau represani.
Un exemplu tipic este ionul fosfat (PO43-), prezent prin KH2 PO4, care dup o
anumit concentraie devine un inhibitor pentru acumularea produselor utile. ). [5.69]
17
2.Sterilizarea este procesul prin care are loc distrugerea sau indepartarea
microorganismelor patogene sau apatogene din substante, preparate,
spatii inchise, obiecte etc.
Metodele diferite de sterilizare se pot clasifica dupa urmatoarele
criterii:
a. metode termice:
- sterilizare cu aer cald la 140-200C
- sterilizare cu vapori de apa sub presiune la 120-140C
- sterilizare prin incalziri repetate la 70-100C
b. metode fizice:
- filtrare prin umpluturi fibroase
- filtare prin materiale poroase
- filtrare prin membrane
- utilizarea radiatiilor UV, IR, raze X, etc.
c. metode chimice:
- utilizarea agentilor chimici : oxid de etilena,
formaldehida, fenol, ozon, etc. [7,80]
Sterilizarea mediilor de cultura se poate realize prin metode
mecanice(filtrare, centrifugare, flotatie, electrostatic), pe cale termica,
cu agenti chimici sau cu unde electromagnetice. S-a ales ca posibilitate
de sterilizare a mediului de cultura din industria de biosinteza,
sterilizarea cu abur.
Procedeul de sterilizare cu abur este foarte simplu si permite
obtinerea unui grad inalt de sterilitate. Acest procedeu prezinta totusi o
serie de dezavantaje date de reactiile secundare pe care le sufera
principalele componente ale mediului in timpul procesului:
- denaturarea proteinelor si inactivarea enzimelor
- degradarea artiala a vitaminelor si a anumitor factori de
crestere
- supraincalziri ce pot initia reactii chimice.
Aceste dezavantaje sunt diminuate prin alegerea judicioasa a procesului,
care este totusi cel mai sigur. Procedeul de sterilizare termica a mediului
de cultura poate fi realizat prin procedeu continuu sau discontinuu,
utilizand drept sursa de incalzire aburul sau energia electrica. Deoarece
sterilizarea directa in fermentator prin proedeu discontinua la 120C
necesita un timp mare si degradarea mediului este mai avansata, se alege
procedeul de sterilizare mediului de cultura in instalatia continua. [6,
27]
18
35-40C
Sterilizarea aerului.
Procesele industriale de fermentatie sunt aproape in totalitate
procese aerobe si in marea lor majoritate aseptice. Necesarul orar de aer
steril variaza intre 60-120 m 3 aer/m 3 mediu de cultura. In sterilizarea
acestor debite mari de aer apar dificultati generate, pe de o parte de
varietatea microoganismelor prezente si de rezistenta lor la temperaturi
uscate si pe de alta de limitele largi ale dimensiunilor acestora. [5,110]
Pentru sterilizarea aerului au fost propuse urmatoarele metode:
- sterilizare termica
- sterilizare cu raze ionizante sau untra-violete
- sterilizarea cu agenti chimici
- sterilizarea prin filtrare
Pentru sterilizarea prin filtrare se pot folosi urmatoarele materiale
filtrante:
- fibre de sticla cu diametru intre 5 si 18
- nitrat de celuloza pentru filtru cu membrana
- teflon cu o rezistenta termica mare(300C) si caracter
hidrofob
- poliamida
In sterilizarea prin filtrare
aplicabilitate practica:
- filtrul cu fribra de sticla
- filtre disc cu membrana
- filtre-lumanare
exista
trei
tipuri
de
filtre
cu
21
3.Fermentatia.
Este faza fundamentala a procesului de biosinteza si se realizeaza in trei
etape:
- inoculator
- intermediar
- regim
Aceste
etape
corespund
unor
faze
de
dezvoltare
a
microorganismelor. Astfel, in inoculator se petrece procesul de
aclimatizare a Penicillium crysogenum la noile conditii de dezvoltare, in
intermediar
incepe
cresterea
exonentiala
a
numarului
de
microorganisme, iar in regim se termina procesul de crestere a
microorganismelor si de formare a penicilinei.
Aceasta etapizare reprezinta o imagine generala si putin idealizata
a procesului de biosinteza, deoarece chiar in intermediar incepe procesul
de elaborare a penicilinelor ca rezultat al distributiei varstelor
microorganismului. Acumularea unor cantitati mari de masa moleculara
face ca volumele fermentatoarelor, in care are loc procesul, sa creasca in
raport zecimal.
Eficacitatea procesului de biosinteza este determinata de
conformatia genetica a tulpinei. Tulpina utilizata este P. Crysogenum
Q176 a carei potenta a fost ridicata foarte mult prin procese de mutatie.
O tulpina buna se caracterizeaza prin capacitatea mare de inmultire,
utilizare rapida a azotului si a precursorului, lipsa pigmentilor in
biomasa si miceliu fibros.
Procesul de fermentatie cuprinde trei faze distincte:
- faza de crestere
- faza de producere
- faza autolitica
Faza de crestere se caracterizeaza prin acumularea de masa
miceliana si utilizarea intensiva a componentelor mediului de cultura.
Glucoza este asimilata foarte rapid atat pentru formarea masei celulare,
cat si pentru formarea energiei necesare. Cerintele de oxigen sunt
maxime in aceasta perioada, iar activitatea respiratorie, volumul de CO 2
degajat este mare.
Faza de producere a penicilinelor se caracterizeaza prin
incetinirea cresterii miceliului fie datorita epuizarii constituentilor usor
asimilabili, fie altor conditii existente cum ar fi scaderea consumului de
oxigen, mentinerea pH-ului la 6.8-7.5 si acumularea de penicilina. In
aceasta faza lactoza este folosita lent de catre miceliu si furnizeaza
energia necesara proceselor de biosinteza sau pentru formarea
constituentilor celulari.
Faza autolitica corespunde stadiului in care microoganismele se
epuizeaza ca urmare a activitatii metabolice prelungite, iar sursele de
carbon din mediu sunt consumate. Continutul de azot al miceliului
descreste considerabil si incepe procesul de autoliza al acestuia cu
elibereare de amoniac si cresterea pH-ului peste 8. Producerea
22
23
Durata
[h]
30-40
20-40
90-120
25
27
3.
4.
1.
2.
3.
4.
5.
Distilarea azeotrop
n prezent pentru separarea srurilor penicilinei G din soluia apoas rezultat
de la reextracia n carbon de Na(K), se folosete procedeul antrenrii azeotrope a apei
cu butanol, la vid, astfel ncat, odat cu ndeprtarea apei are loc cristalizarea srii
respective, apoi, acesta se filtreaz si se spal cu butanol i cloroform. Utilizarea
butanolului, dei prezint avantajul unui timp relativ scurt al fazei de cristalizare si al
unei solubilitai relativ bune a impuritatilor are o serie de inconveniente cum ar fi:
- conduce la pierderi mari de butanol, datorita solubilitatii ridicate a acestuia
in apa(7,45%), precum si datorita solubilitatii mari a apei in butanol
(20,5%); acest aspect determina si cheltuilei sporite cu recuperarea
solventului.
- posibilitatea degradarii termice a penicilinei, datorita temperaturii
necesare evaporarii amestecului butanol-apa
- posibilitatea degradarii chimice a penicilinei in butanol.[8,85]
Uscarea
Uscarea este o operatie prin care se indeparteaza umiditatea dintrun material cu ajutorul energiei termice.Termenul de uscare se mai
utilizeaza si in cazul indepartatii unui component in stare lichida sau de
vapori dintr-un gaz sau dintr-un amestec lichid.
Uscatoarele se pot clasifica in functie de mai multe criterii:
1) dupa regimul de fuctionare pot fi:
- continue
- discontinue
2) dupa presiunea de lucru pot fuctiona:
- la presiune atmosferica
29
- la vid
3) dupa procedeul de uscare pot fi:
- cu agent termic gazos
- cu incalzirea materialului
4) dupa sensul de circulatie a solidului si a gazului pot fi in :
- echicurent,
- contracurent,
- curent mixt
- curent incrucisat
5) din punct de vedere constructive sunt:
-uscatoare cu strat fix,
-cu strat mobil,
-cu strat fluidizat,
-cu pulverizare,
-de contact
Penicilina G precipitata se filtreaza pe filtrul Nuce si se usuca in
uscator dulap la 35-45C sub vid de 100-225 mmHg, timp de 16-20 ore.
Condiii de admisibilitate
Tipul
Lactoz rafinat
Lactoz telenic
Calitatea I
Calitatea a II-a
30
Aspect
Culoare
Gust i miros
Aspectul soluiei apoase
Puterea rotaiei specifice
[]2020
Pierderi prin uscare:
-la 130C, %, max.
-la 100C, %, max.
Aciditatea exprimat a
acidului lactic, %, max.
Cloruri, %, max.
Sulfai (SO4), %, max.
Calciu
Metale grele (Pb)
Arsen, %, max.
Fier
pulbere cristalin
alb
alb - galben
galben
slab dulceag, fr miros strin
incolor, limpede
galben deschis,
Galben
slab tulbure
+52 +53
+51 +52
+47 +51
5.5
0.05
0.4
0.07
2
1
0.004
0.002
lips n condiiile
determinrii
lips n condiiile
determinrii
0.01
lips n condiiile
determinrii
2. Extractul de porumb
Conditii tehnice de calitate
Constituienti g/100g extract de porumb
Substanta uscata
Cenusa
N total
Zahar total (exprimat ca glucoza)
Acid lactic
Aciditate(ml sol NaOH 0,1N/100g) extract de porumb
Fe
P
Ca
Zn
K
SO2
Sedimente solide
%
46-49,6
8,04-10,73
3,33-3,67
4,00-4,70
0,74-4,39
11,6-19,3
0,009-0,02
1,5-1,9
0,02-0,7
0,05-0,012
2,0-2,5
0,02
38,4-52,9
31
- pH= 3.5-4
- Continutul in acid lactic: minim 20g la 100g substanta uscata
- Zahar total: maxim 2.5%
3. Faina de soia
Generalitati:
Faina de soia este o sursa de azot naturala, bogata in proteine, aminoacizi
continand si acizi nucleici, vitamine, oligoelemente, lipide, zaharuri, compusi cu sulf si
fosfor dupa cum urmeaz:
4. Glucoza
Generaliti:
Proteine
42 %
Materii grase
3.5 %
Metionina
0.54 %
Cisteina
1.1 %
Lizina
2.4 %
Calciu
0.2 %
Sodiu
0.287 %
Potasiu
1.7 %
Magneziu
0.21 %
Sulf
Fosfor
0.32 %
0.6 %
SR 13359-7
32
Aspect
Culoare
Gust
Corpuri
strine
Metod
de
verificare
SR 13359-1
Miros
Condiii de admisibilitate
Tip de glucoz
Lichid
Solid
Aromatizat
Nearomatizat
Lichid vscos
Mas solid,
Mas solid
sub form de
tablete
Incolor pn
Crem pn la
Crem pn la
la galben
galben sau
galben
specific
colorantului
adugat
Lips
Caracteristic
Lips
aromei adugate
Dulce
Dulceag, uor amrui
specific
Lips
Umiditate, % max.
RBU, max.
Culoare
ml iod
soluie
0.1 n/100 ml,
max
Densitate 20/20C, g/ml, min
Indice de refracie la 20C
Aciditate, grade, max.
Acizi minerali liberi, %
pH, la o soluie 20 g/100 ml
Condiii de admisibilitate
Tip de glucoz
Lichid
Solid
Aromatizat Nearomatizat
20
21
200
1.5
-
1.42
1.49
2.5
2.8
Lips
4.5...5.5
Metod de
verificare
SR 13359-2
SR 13359-3
SR 13359-4
SR 13359-5
SR 13359-6
SR 13359-7
SR 110-12
33
Coninut de
-n
produs
SO2 ml/100 g nealbit
max.
-n produs albit
Coninut
de
cenu
conductometric, raportat la
s.u., %, max.
Coninut de dextroz raportat la
s.u., (DE), %
4
40
0.6
32...49
SR EN 1185
15
-
SR 110-2
SR 13359-8
sau
SR 13359-9
sau
SR ISO 5377
min. 75
B
92
C
-
1,0
0,5
0,45
1
0,47
90
0,6
0,2
90
0,6
0,2
0,5
0,5
98,5
0,10
-
97
0,15
-
34
Cupru(Cu), %max
Mangan(Mn), %max
Arsen
0,001
0,003
-
0,001
0,003
-
0,001
0,003
-
6. Fosfat monopotasic
S.T.A.S 10497-76
Generalitati:
Prezentul standard se refera la fosfatul monopotasic tehnic utilizat, n principal,
in mediu de cultura la fabricarea antibioticelor.
Formula chimica: KH2PO4
Masa moleculara: 136,09 g/mol
Condiii tehnice de calitate
Aspect i culoare
Cristale albe
Umiditate , %, max.
0.3
Fosfat monopotasic (KH2PO4), %, min.
96
Cloruri (Cl), %, max.
0.25
Fier (Fe), %, max.
0.003
Metale grele (Pb), %, max.
0.01
Substane insolubile n ap, %, max.
0.5
Observaii:
- Caracteristicile din tabel, cu exceptia umiditatii, se refera la fosfatul monopotasic
uscat la 105 2C
- Cu acordul beneficiarilor produsul se poate livra si cu max. 0.05 % fier.
7. Sulfat de sodiu
S.T.A.S 2126-84
General
itai
Prezentul standard se refera la sulfatul de sodiu, anhidru, tehnic, intrebuintat in
industria de medicamente.
Formula chimic: Na2SO4
Masa moleculara relativ: 142.044 g/mol
Caliti
Sulfatul de sodiu, anhidru, tehnic se livreaz n trei calitai:
calitatea I produs secundar la bile de filare, de la obinerea fibrelor artificiale;
calitatea II obinut prin tratarea fosfogipsului rezidual cu sod calcinat
(Na2CO3), urmat prin uscarea produsului prin atomizare.
- calitatea III produs secundar din fabricaia acidului formic din formiat de sodiu
i acid sulfuric.
Condiii tehnice de calitate
Calitatea
I
II
Aspect
praf neaglomerabil praf neaglomerabil
Culoare
Alb
alb
Sulfat de sodiu
99
97.5
III
praf aglomerabil
Alb cenuiu
97
35
(Na2SO4), %,
max.
Umiditate, %,
max.
Substane
insolubile n ap,
%, max.
Acid sulfuric
liber(H2SO4)
Clorur de sodiu
(NaCl), %, max.
Fier (Fe), %, max.
Acizi organici
(HCOONa)
Densitate n stare
netasat kg/dm3
0.3
0.1
0.5
0.3
0.3
0.5
Lips
lips
%, max. 1.0
0.1
1.2
1.2
0.001
0.001
0.03
%, max. 1.5
lips
0.7...1.55
0.4...0.7
1.26...1.30
Observaie:
- toate valorile din tabel, exceptnd umiditatea si densitatea n stare netasat, sunt
raportate la produsul uscat la 105 2C.
8. Sulfat de zinc
S.T.A.S. 2367-80
Generalitati :
Prezentul standard se refera la sufatul de zinc tehnic cristalizat, granulat si lichid.
Sulfatul de zinc tehnic cristalizat si granulat se livreaza in 3 calitati:
- calitatea I
- calitatea II
- calitatea III
Sulfatul de zinc tehnic lichid se livreaza in 2 calitati:
- calitatea I
- calitatea II
Formula chimica: ZnSO4
Masa moleculara: 161 g/mol
La data aprobarii standardului, sulfatul de zinc tehnic granulat si lichid se importa.
Conditii tehinice de calitate a sulfatului de zinc tehnic cristalizat, calitatea I:
Calitatea
II
Aspect
III
cristale mici
Culoare
Alba
alb-galbuie-cenusie
Zinc(Zn) %min.
22,5
22,1
21,6
Substante insolubile
in apa, %max.
0,05
0,1
0,5
Fier(Fe), %max
0,035
0,5
1,0
Cupru(Cu), %max
0,005
36
Acid sulfuric
liber(H2SO4), %max
0,1
0,5
Arsen
Lipsa
Cloruri, %max
0,2
Observatii:
- pentru industria chimico-farmaceutica se va folosi sulfat de zinc tehnic
cristalin, calitatea I.
9. Azotat de amoniu
S.T.A.S. 450-30
Generalitai
Standardul cu nr. 450-30 se refera la azotatul de amoniu tehnic, granulat obinut
prin neutralizarea acidului azotic cu amoniac utilizat la fabricarea explozivilor i n
alte scopuri industriale.
Formula chimica: NH4NO3
Masa molecular relativ: 80.04 g/mol
-
I
Granule neaglomerabile
alb
II
granule neaglomerabile
alb-roz
95
95
5
0.2
5
0.3
0.02
0.02
98.8
99.4
0.2
34.6
34.8
0.2
Observaie:
- coninutul de azotat de amoniu, azotat de magneziu, azot total i aciditatea
liber sunt raportate la produsul uscat.
37
Agent antispumant:
Ulei de floarea soarelui tehnic
STAS 2710-70
Generaliti:
Standardul cu numarul 2710-70 se refer la uleiul tehnic obinut din seminele de
floarea soarelui.
Uleiul tehnic de floarea soarelui se livreaz n dou caliti:
-calitatea I, obinut prin presare sau extracie cu solveni i prelucrare ulterioar;
-calitatea II, obinut prin presare sau extracie cu solveni.
Proprieti fizice i chimice:
Calitatea
Aspect, la 60C
I
Limpede
fr
impuriti
II
-
Metode de analiz
STAS 145/1-67
38
mecanice
0.914...0.927
1.4710...1.4760
20
0.1
1
0.2
1
2
12
1.2
1.2
119...135
0.05
186...198
lips
165
135
STAS 145/3-67
STAS 145/4-67
STAS 145/2-67
STAS 145/11-67
STAS 145/10-67 cap 1
STAS 145/16-67 cap 1
STAS 145/15-67
STAS 145/19-67 cap 1
STAS 145/13-67
STAS 145/17-67
STAS 18-70
STAS 145/6-67 cap 1
Observatii:
- la uleiul rafinat de floarea soarelui tip A, imbuteliat pe linii fara uscare, se
admite un continut de apa si substante volatile de max 0.15%
- indicele de peroxid pentru uleiul destinat pastrarii indelungate se stabileste prin
intelegere intre parti
Acetat de N-butil
S.T.A.S 904-89
Generalitati:
Standardul cu numarul 904-89 se refera la acetatul de n butil tehnic obtinut prin
esterificarea acidului acetic cu alcool n butilic sau prin transesterificarea acetatului de
metil.
Formula chimica: CH3CO2(CH2)3CH3
Masa moleculara relativa: 116.16 g/mol
Acetatul de n butil tehnic este un produs inflamabil, avand punctul de inflamabilitate
de cca. 28C.
Acetatul de nbutil tehnic se livreaz n trei tipuri, funcie de continutul de ester si
anume:
- tipul 98
-
tipul 92
tipul 88
Condiii de admisibilitate
Tipul
92
88
39
Aspect
Culoare , mg K2Cr2O7/ l, max.
Miros
Densitate relativa, d2020
Distilare (la presiunea de 1013,2 mbar)*:
- interval de distilare, C...
- n intervalul de distilare distila, % vol.,
min...
Acetat de nbutil, %, min.
Aciditate (acid acetic), %, max.
Reziduu la evaporare, %, max.
Ap , %, max.
116...128
113...130
95
98.0
0.01
0.01
0.2
95
92.0
0.03
0.02
0.35
95
88.0
0.03
0.02
0.5
S.T.A.S 97-80
Generalitati:
Formula chimica:H2SO4
Masa moleculara: 98,08 g/mol
Dupa contiuntul de acid sulfuric monohidrat, acidul sulfuric fehnic se livreaza in 4
tipuri:
-tipul 98
-tipul 96
-tipul 92
-tipul 73
Conditiile tehnice de calitate a acidului sulfuric
Tipul
98
96
92
73
Aspect
lichid nicios, limpede sau opalescent
Culoare
Conform STAS 9482-74
Densitate g/cm3, min
1,836
1,835
1,821
1,634
Acid sulfuric monohridat(H2SO4),
98
96
92
73
% max
Dioxid de sulf(SO2), % max
0,1
0,1
0,1
Fier(Fe), % max
0,02
0,02
0,02
Reziduu la calcinare, % max
0,1
0,15
0,15
Arsen(As), % max
0,001
0,001
0,001
Cloroform
S.T.A.S. 3306-82
Generalitati:
Formula chimica:HCCl3
Masa moleculara: 119,38 g/mol
Cloroformul se livreaza in urmatoarele tipuri si calitati:
-tipul A, stabilizat cu 0,61% alcool etilic absolute, utilizat in
industria de medicamente:
40
-calitatea I
-calitatea II
- tipul B, nestabilizat tehnic utilizat ca solvent
Tipul
A (stabilizat)
B(nestabilizat)
calitate I
calitatea II
lichid limpede, incolor, volatil
Caracteristic
dulceag, arzator
1,473-1,480
1,473-1,490
98,0
97,0
-
Aspect
Miros
Gust
Densitatea relativa
Cloroform, %min
Distilare:
-punct initial de fierbere, 0C, min
59
57
57
-punct final de fierbere, 0C, max
62
63
63
-intre punctual initial si final de
fierbere distilata, %vol, min
97
96
94
Reziduu la evaporare, % max
0,002
0,002
0,015
Clor liber
Cloruri(Cl), % max
0,0008
0,0008
Aciditate
Substante organice straine
15mg l/100cm3
Substante volatile straine
Apa
Observatii: Cloroformul este greu solubil in apa, miscobil in orice proportie cu alcoolul
etilic absolute, eterul etilic, benzina si majoritatea uleiurilor,Este neinflamabil.
[9]
41
42
43
Dupa aceasta schema sinteza nucleului de baza al penicilinei, acidul 6aminopenicilanic ar rezulta din acidul -amino-adipic, l-cisteina si l-valina trecand prin
faza tripeptidei. In ultima etapa se formeaza enicilina G sau acid 6-aminopenicilanic
prin pierderea grupei acil.
44
45
E S
E S*
k2
P E
constata de viteza a reactiei de formare a substratului si a enzimei din complexul enzima substrat
constanta de viteaza a reactiei de formare a produsului din complexul enzima substrat
K 2 = kB T
h
unde CE-S* concentratia complexului enzima substrat in stare activata
constanta de echilibru
kC*
constanta Boltzman
kB
h
constanta Planck
vp =
kB T
h
CE-S*
Reformulnd se obtine:
vp =
kB T
h
K C* C E C S
Cc =
1*
Cc k2*Cc= 0
C E * Cs
k
k2
Cs
48
Unde avem:
V= k2*CE : viteza maxima de formare a produsului ce corespunde
stadiului n care ntreaga cantitate de enzima formeaza complexul enzima
substratul;
Ks =
k2
: constanta de echilibru la disocierea complexului enzima substrat
k 1
KM = K s
k2
k
49
dCp
V*Cs
=
KM Cs
d
.
1
K
M
* Cs
Vp
V
V
Prin reprezentarea grafica a ultimei relatii n coordonate 1/Vp i 1/Cs conduce la
obtinerea diagramei LineweaverBurk, ce permite determinarea constantelor V i KM n
functie de variatia concentratiei substratului i de valorile experimentale ale vitezei de
formare a produsului.
50
CD
E
51
Ks
E S
E S
KI
E I
E I S
E S
k2
KS'
K'I
I
E S I
E S I
nu este limitat
52
Substratul limitativ poate fi sursa de carbon si energie (glucoza, alcool, nparafine), un aminoacid esential (triptofan, arginina), oxigenul, fosforul sau azotul
anorganic.
ecuatia de cretere a masei celulare n functie de concentratia
substratului limitativ, Cs:
Cs
dCx
= max *
* Cx Ecuatia lui Monod
d
Ks Cs
Trebuie remarcat faptul ca ecuatia Monod este valabila numai n cazul n care
creterea este limitata de un singur substrat, ceea ce n conditiile industriale se ntmpla
foarte rar. De obicei, n aceste procese intervine i un al doilea substrat, care, de cele
mai multe ori, este chiar oxigenul. n aceste conditii, vitezele specifice de cretere a
masei celulare sunt descrise prin ecuatia lui Monod modificata sau prin ecuatia Monod Cantois :
CL
Cs
= max *
*
KL CL
Ks Cs
= max *
CL
KL CL
Cs
B* Cx Cs
n care:
CL, CS- concentratiile substraturilor limitative;
KL, KS constantele de saturatie corespunzatoare substraturilor
limitative;
B constanta Cantois;
Pentru culturi industriale discontinue, Monod a introdus o constanta
caracteristica Y, denumita constanta de exploatare sau de cretere:
53
dCs
dCx
=Y*
d
d
n functie de valorile constantelor cinetice KS, max, Y stabilite de Monod, se pot
caracteriza cantitativ culturile microbiene discontinue.
54
CO2
H2
ATP
Energie rezultat
O2 la oxidareaP
sursa moleculei
combustibile
de energie
O2\
Biosintez
(lucru
chimic)
Contrac ie
muscular
(lucru
mecanic)
Transport
activ
(lucru
osmotic)
P
ADP
Surse de
energie
Fig. Ciclul ATP-ADP i modalitatile de utilizare a energiei eliberate de ATP
55
56
Productia in
sarje (Ps)
fermentator
g randament global
57
filtrare : 80%
extractie : 94%
- filtrare + spalare : 95 %
reextractie 90%
- uscare : 98%
g = 0,59229 %
Productivitatea microorganismului
Productivitatea microorganismului pentru penicilina este de 80000 ui/ml,
iar activitatea standard este de 1670 ui/ml
1 mg................................1670 ui/ml
kg/m3
x mg..............................80000 ui/ml
P = productivitatea microorganismului ; P = x
P = 47,9041 kg/m3
Vu = volumul util
58
Extract de porumb
Lactoza
Glucoza
Faina de soia
CaCO3
KH2PO4
NH4NO3
Na2SO4
ZnSO4
Acid fenilacetic
Tiosulfat de sodiu
MnSO4
Apa
2,6
6,5
2,5
0,3
1,25
0,55
0,3
0,06
0,002
0,4
0,8
0,002
84,736
Apa = 100 - xi
100 kg M.d.c. ..................................2,6 kg extract de porumb
17914,581 kg M.d.c.........................x1 kg extract de porumb
x1 = 465,779 kg extract de porumb/sarja
100 kg M.d.c.......................................6,5 kg lactoza
17914,581 kg M.d.c............................x2 kg lactoza
x2 = 1164,448 kg lactoza/sarja
100 kg M.d.c...........................2,5 kg glucoza
59
60
Materiale intrate
Extract de porumb
Lactoza
Glucoza
Faina de soia
CaCO3
KH2PO4
NH4NO3
Na2SO4
ZnSO4
Acid fenilacetic
Tiosulfat de sodiu
MnSO4
Apa
TOTAL
%
2,6
6,5
2,5
0,3
1,25
0,55
0,3
0,06
0,002
0,4
0,8
0,002
84,736
100
kg/sarja
465,779
1164,448
447,865
53,744
223,932
98,53
53,744
10,748
0,358
71,658
143,316
0,358
15180,099
17914,575
Materiale iesite
Extract de porumb
Lactoza
Glucoza
Faina de soia
CaCO3
KH2PO4
NH4NO3
Na2SO4
ZnSO4
Acid fenilacetic
Tiosulfat de sodiu
MnSO4
Apa
TOTAL
%
2,6
6,5
2,5
0,3
1,25
0,55
0,3
0,06
0,002
0,4
0,8
0,002
84,736
100
kg/sarja
465,779
1164,448
447,865
53,744
223,932
98,53
53,744
10,748
0,358
71,658
143,316
0,358
15180,099
17914,575
Componentii in exces:
-
kg/sarja
-
kg/sarja
1
2
3
4
5
Materiale intrate
Extract de porumb
Lactoza
Glucoza
Faina de soia
CaCO3
%
2,86
7,15
2,75
0,33
1,25
kg/sarja
512,357
1280,891
492,65
59,118
223,932
Materiale iesite
Extract de porumb
Lactoza
Glucoza
Faina de soia
CaCO3
%
2,86
7,15
2,75
0,33
1,25
kg/sarja
512,357
1280,891
492,65
59,118
223,932
61
6
7
8
9
10
11
12
13
KH2PO4
NH4NO3
Na2SO4
ZnSO4
Acid fenilacetic
Tiosulfat de sodiu
MnSO4
Apa
TOTAL
0,55
0,3
0,06
0,002
0,4
0,8
0,002
83,546
100
98,53
53,744
10,748
0,358
71,658
143,316
0,358
14966,915
17914,575
KH2PO4
NH4NO3
Na2SO4
ZnSO4
Acid fenilacetic
Tiosulfat de sodiu
MnSO4
Apa
TOTAL
0,55
0,3
0,06
0,002
0,4
0,8
0,002
83,546
100
98,53
53,744
10,748
0,358
71,658
143,316
0,358
14966,915
17914,575
2. Sterilizarea
In aceasta etapa se degradeaza compusii care la etapa precedenta au primit un excedent
de 10%.
1
2
3
4
5
6
Marimi intrate
Extract de porumb
Lactoza
Glucoza
Faina de soia
CaCO3
KH2PO4
%
2,86
7,15
2,75
0,33
1,25
0,55
kg/sarja
512,357
1280,891
492,65
59,118
223,932
98,53
Marimi iesite
Extract de porumb
Lactoza
Glucoza
Faina de soia
CaCO3
KH2PO4
%
2,6
6,5
2,5
0,3
1,25
0,55
kg/sarja
465,779
1164,448
447,865
53,744
223,932
98,53
62
7
8
9
10
11
12
13
NH4NO3
Na2SO4
ZnSO4
Acid fenilacetic
Tiosulfat de sodiu
MnSO4
Apa
TOTAL
0,3
0,06
0,002
0,4
0,8
0,002
83,546
100
53,744
10,748
0,358
71,658
143,316
0,358
14966,915
17914,575
NH4NO3
Na2SO4
ZnSO4
Acid fenilacetic
Tiosulfat de sodiu
MnSO4
Apa
TOTAL
0,3
0,06
0,002
0,4
0,8
0,002
84,736
100
3. Fermentatia
In etapa de fermentatie este necesar calculul a 3 cantitati : necesarul de aer,
cantitatea de biomasa si cantitatea de apa evaporata.
Aer.
Necesarul de aer pentru etapa de fermentatie se considera a fi
1 Laer / 1 Lm.d.c *
min
1L = 10-3m3 M.d.c................................1L = 10-3m3 aer
Vu = 17,9676 m3 M.d.c.........................x m3 aer
x=17,9676 m3 aer/min
1 min.........................................17,9676 m3 aer
tf = 140 * 60 = 8400 min..........y
y = 150927,84 m3 aer/sarja
Maer = Vaer * aer
0 = 1,293 kg/m3
T0 = 273 K
T = 298 K
P = 1 atm
P0 = 1,1 atm
63
53,744
10,748
0,358
71,658
143,316
0,358
15180,099
17914,575
Biomasa.
cx = 20 g s.u./l M.d.c
Celulele vii contin 20% substanta uscata si 80% apa.
1L = 10-3 m3 M.d.c.......................................100 g celule
17,9676 m3 .................................................cx g celule
cx = 1796,76 kg biomasa/sarja
Apa evaporata.
1
2
3
4
Marimi intrate
Mediu de cultura
Inocul
Aer
TOTAL
kg/sarja
16123,122
Marimi iesite
Lichid de fermentatie
(Penicilina G)
1791,458
Biomasa
196508,047 Apa evaporata
Aer
214422,627 TOTAL
kg/sarja
14152,740
(860,722)
1796,76
1965.080
196508,047
214422,627
4.Filtrarea
= 80%
- precipitatul retine 20% din lichidul de fermentatie
Mpp - masa precipitatului
Mpp = Mbiomasa + 0.2 * Mpp = Mbiomasa / 0,8
Mpp = 2245,95 kg/sarja
Mfiltrat = Ldf 0,2 * Mpp
Mfiltrat = 14152,140 0,2 * 2245,950 = 13703,55 kg/sarja
Marimi intrate
Lichid de fermentatie
kg/sarja
14152,740
Marimi iesite
Precipitat
kg/sarja
2245,95
(Penicilina G)
Biomasa
(860,722)
1796,76
Filtrat
13703,55
65
TOTAL
15949,5
(Penicilina G)
TOTAL
(688,577)
15949,5
5. Extractia
= 94%
- extractia se realizeaza utilizand acetat de butil in raport de 1:3 fata de filtrat
Madb = Mfiltrat / 3
Madb = 4567,85 kg/sarja
- reactia chimica dupa care are loc extractia este urmatoarea:
2PCOOK + H2SO4 2PCOOK + K2SO4
2 * 372
98
2 * 334
174
688,577
x = 90,699 kg H2SO4/sarja
y = 618,238 kg PCOOH/sarja
z = 161,038 kg K2SO4/sarja
Fermentatia are loc la un pH 6,7. Extractia are loc la pH 2. In acest scop se adauga acid
sulfuric.
pH=6,7
pH=2
pH=4,7
66
1
2
3
Marimi intrate
Filtrat
kg/sarja
13703,55
Marimi iesite
Extract
(Penicilina G)
Acetat de butil
H2SO4 4%
TOTAL
(688,577) (Penicilina G)
4567,85
Rafinat
2267,818
20539,218 TOTAL
kg/sarja
5057,6361
(b=581,310)
15481,5602
20539,1962
6. Reextractia
= 90%
- reextractia se realizeaza cu solutie de K2CO3 10% in exces de 10%
- are loc dupa urmatoarea reactie:
2PCOOH + K2CO3 2PCOOK + CO2 + H2O
67
2*334
138
2*372
581,310
y`
44
18
z`
t`
y` *0,9 = y
t` * 0,9 = t
z` * 0,9 = z
x = 120,091 kg K2CO3/sarja
y`= 647,44 * 0,9 = 582,7023 kg PCOOK/sarja
z`= 38,289 * 0,9 = 34,460 kg CO2/sarja
t`= 14,664 * 0,9 = 14,097 kg H2O/sarja
Marimi intrate
Extract
kg/sarja
5057,636
Marimi iesite
Solvent
(Penicilina G)
K2CO3 10%
(581,310)
321,001
Solutie carbonat
TOTAL
6378,637
(Penicilina G)
TOTAL
kg/sarja
4444,9341
1933,8712
(c=582,7023)
6378,805
68
Marimi intrate
Solutie carbonat
kg/sarja
1933,8712
(Pen. G)
BuOH
(582,7023) Precipitat
3445,4807 Azeotrop
BuOHI
5379,351
TOTAL
TOTAL
Marimi iesite
Penicilina G
kg/sarja
547,7401
4222,4082
609,2088
5379,3517
8. Filtrare
= 0,95
- cristalele se spala pe filtru cu BuOH si CHCl3 in raport de 1:5 fata de masa
pecipitatului
MBuOH = MCHCl3 = Mpp/5 = 109,5482 kg/sarja
69
1
2
3
4
Marimi intrate
Penicilina G pp
kg/sarja
547,7401
Marimi iesite
Precipitat
BuOH
CHCl3
BuOHI
TOTAL
109,5482
109,5482
609,2088
1376,0453
BuOH
CHCl3
BuOHI`
TOTAL
kg/sarja
578,1701
(e=520,353)
109,5482
109,5482
578,7788
1376,0349
9. Uscare
= 0,98
- umiditatea retinuta este de 10%
MCHCl3 = 0,1 * Mpp + Mpp pierdut = 68,224 kg/sarja
Mpp pierdut = e * 0,02 = 10,407 kg/sarja
Penicilina G = e *0,98 = 520,353 * 0,98 = 509,9459 kg/sarja
Marimi intrate
kg/sarja
Marimi iesite
1 Precipitat
578,1701
Penicilina G
2
CHCl3
TOTAL
578,1701
TOTAL
kg/sarja
509,9459
68,224
578,1699
70
men inerea condi iilor favorabile pentru via ai producerea microorganismelor. Acest
fapt se face prin reglarea automata a unor parametrii tehnologici specifici proceselor de
biosinteza.
temperatura
presiunea
pH-ul
concentraia reactanilor
debit
nivelul lichidului
nivelul spumei
nivelul Oxigenului
71
transversal
suprapresiune
presiunea
mare
depind
si
cu
considerabil
hidrostatic,variaii
ale
ale
nivelului
dar
modificari
72
73
74
75
Aceste
sisteme
sunt
neizolate
ale
firelor
metalice, se realizeaz practic un contact electric cu apariia unui semnal analitic, care
dup o prealabil amplificare poate declana un sistem de avertizare opticsau acustic,
sau ambele. Simultan, semnalul dat poate aciona spargatorul mecanic de spum, sau
dupa un anumit interval de timp sistemul de adugare a agentului de antispumare.
76
biochimice
industriale,
influennd
mod
decisiv
numeroase
77
In prezena ninhidrinei,
78
Aparatura
Polarograf si accesorii.
Reactivi
acid azotic d = 1,40 diluat 1+1
amoniac, sol d = 0,91
gelatina, sol 1% preparata la 60C - proaspat preparata.
soluie de baza - intr-un balon cotat de 1000 ml se introduc 20g clorura de
amoniu si 80 ml amoniac sol. d = 0,91, se aduce la semn cu apa.
soluie etalon de zinc - intr-un pahar Berzelius de 150 ml se dizolva 0,4g zinc
metalic intr-un amestec format din 10ml acid sulfuric d = 1,84 diluat 1+1 si 1 ml
acid azotic d = 1,40 diluat 1+1. Se fierbe pentru completa dizolvare si eliminare
a vaporilor nitrosi. Soluia se trece intr-un balon cotat de 1000 ml. Se adauga 25
ml soluie d = 0,91, 100 ml soluie de baza si 20 ml soluie 1% de gelatin. Se
aduce la semn cu apa. 1 ml soluie etalon conine 0,0004 g zinc.
sulfit de sodiu.
Modul de lucru
Intr-un pahar Berzelius de 250 ml se introduce 1 g proba de analizat si se
dizolva in 30 ml apa 5 ml acid azotic. Se fierbe pentru oxidarea fierului si eliminarea
vaporilor nitrosi.
Dupa racire, soluia se trece intr-un balon cotat de 500 ml si se adauga:
25 ml soluie de amoniac
50 ml soluie de baza
10 ml soluie de gelatina
Se aduce la semn cu apa. Se lasa sa se depuna hidroxidul de fier. Soluia se
introduce in vasul pentru polarografiere. Se adauga circa 1 g sulfit de sodium, se agita si
se lasa 5 minute in repaus.
Se polarografiaza faa de electrodul saturat de calomel intre 1 V si 1.5 V.
79
Modul de lucru
Din proba se introduc 25 ml intr-un pahar Berzelius si se adauga 250 ml apa.
Soluia se aciduleaza cu 5 ml acid clorhidric, se incalzeste la fierbere, apoi se adauga
80
unde:
m1 masaprecipitatului de sulfat de bariu calcinat, in grame
m masa probei de sulfat de sodiu luata, in grame
U umiditatea, in procente
A coninutul de acid sulfuric liber, in procente.
vasului timp de 3 minute. Se adauga 2 picaturi solutie felolftaleina, apoi, acid clorhidric
picatura cu picatura, sub agitara, pana la virarea culorii indicatorului.
Se adauga 40 ml acid clorhidric, exact masurati, se fierbe timp de 10 minute si
se raceste. Se adauga 2 picaturi solutie metiloranj si se titreaza excesul de acid
clorhidric cu solutie de hidroxid de sodiu.
Titrarea este considerata terminata atunci cand, prin adaugarea unei picaturi de
solutie de hidroxid de sodiu, indicatorul vireaza de la portocaliu la galben.
Aceasta picatura se scade din volumul de solutie de hidroxid de sodiu consumat
pentru titrare.
Intre doua determinari paralele se admite o diferenta de maxim 0.5% in valoare
absoluta.
Calcul
%carbonat de calciu (CaCO3)
Modul de lucru
Din proba de azotat de amoniu se iau 5g si se introduc intr-un balon cotat de
100 ml si se completeaza cu apa pana la semn.
Din aceasta soluie, se iau cu o pipeta cate 25 ml si se introduc in doua vase
Erlenmayer de 200 ml. In primul vas, se adauga una sau doua picaturi de soluie de
rosu de metil si daca este cazul se neutralizeaza cu soluie de hidroxid de sodiu. In al
doilea vas, se adauga volumul de soluie de hidroxid de sodiu adaugat in primul vas
pentru neutralizarea soluiei - fara soluia de rosu de metil, 10 ml soluie de aldehida
formica masurai cu cilindrul gradat si 5...7 picaturi de fenolftaleina. Se agita si se lasa
sa stea 5 minute, pentru terminarea reaciei de formare a hexametilentetraminei si
eliberarea acidului azotic.
Se titreaza cu soluie de hidroxid de sodiu pana la coloraia slab roz,
persistenta.
Calcul
%azotat de amoniu
unde:
V volumul soluiei 0,1 n de hodroxid de sodiu folosit la titrarea probei, dupa
adaugarea aldehidei formice, in ml
m masa probei luata pentru determinare, in g
U coninutul de umiditate, in procente.
83
Tiosulfar de sodiu
Reactivi
iod, sol. 0,1 n;
amidon, sol. 0,5 % Preparare: se dizolva prin agitare continua 0,5g amidon in 10
ml acid salicilic soluie 0,1 %. Se adauga 3040 ml apa clocotita si se fierbe
pana la dizolvarea amidonului. Dupa racire se completeaza cu apa pana la 100
ml.
Mod de lucru
10 ml proba tiosulfat de sodiu in apa si se trece cantitativ intr-un balon cotat de
100 ml, se aduce la semn cu apa si se omogenizeaza. Se iau cu pipeta 10 ml proba, se
introduc intr-un vas Erlenmeyer de 300 ml si se adauga circa 40 ml apa. Se titreaza cu
soluie de iod in prezena de amidon, pana cand apare o coloraie albastra care se
menine timp de un minut.
Calcul
%tiosulfat de sodium
unde
V- volumul soluiei de iod 0,1 n utilizat la titrare, in ml
m - masa probei, in g.
84
Principiul metodei:
Precipitarea ionului sulfat cu clorura de bariu si dozarea gravimetrica a acestuia
ca sulfat de bariu.
Reactivi:
acid azotic d = 1,4
acid clorhidric d = 1,19
azotat de argint, sol. ,5%
acid sulfuric d = 1,84
clorura de bariu, sol. 10%
metiloraj sol. 0,1%
Mod de lucru
Din soluia pregatita se iau 50 ml si se introduc intr-un pahar de laborator de
200 ml. Se adauga 2-3 picaturi de soluie de metiloranj, se neutralizeaza cu acid
clorhidric pana la virarea indicatorului, apoi se dauga 1 ml acid clorhidric in exces.
Se fierbe soliia cateva minute, apoi in soluia calda se adauga in fir subire, 25
ml soluie de clorura de bariu. Se fierbe inca 2 - 3 min. Se lasa sa se depuna pana a
doua zi.
Se filtreaza apoi prin hartie de filtru cu porozitate mica si se spala precipitatul
cu apa calda pana cand filtratul nu mai da reacia ionului clor(verificarea cu soluie de
azotat de argint, in prezena de acid azotic).
Filtrul cu precipitat se introduce intr-un creuzet de platina sau de porelan, adus in
prealabil la masa constanta prin calcinare in cuptor electric, la cca. 800C.
85
86
Mod de lucru
Intr-un vas conic de 250 ml cu gatul slefuit se introduc 50 ml sol hidroxid de
potasiu si se cantareste la balanta analitica. Se introduc apoi 5 ml proba si se cantareste
din nou, determinandu-se prin diferenta cantitatea de proba.
Vasul se racordeaza la un refrigerent cu reflux, racit cu apa si se incalzeste la
fierbere timp de o ora, pe baie de apa. Apoi se raceste vasul si se spala interiorul
refrigerentului si sliful de doua ori cu care 20 ml apa, care se prinde in vasul cu proba.
Se adauga 0.5 ml sol fenolftaleina si se titraza excesul de hidroxid de potasiu cu acid
clorhidric pana la disparitia culoarei roz.
In paralel, in mod identic dar fara proba de analizar, se executa o proba de
control al reactivilor.
Calcul
Acetat de n-butil
Microseringa de 5l
Reactivi
- amestec etanol care contine toti componentii existenti in proba de analizat si in
concentratii apropiate de ale probei de analizat
-
Tricrezil fosfat
88
unde:
c - concentratia in bezilpenicilina potasica a probei de analizat (%)
Ap264, Ap280 - absorbantele solutiei cu proba la 264 nm si la 280 nm
Aen264,Aen280 - absorbantele solutiei etalon la 264 nm si la 280 nm
mp - masa probei luata in lucru, in g
men - masa etalonului national luata in lucru, in g
Up - pierderea prin uscare a probei, %
Uen - pierderea prin uscare a etalonului national, %
Cen - concentratia in benzilpenicilina potasica a etalonului national, %
89
Cap.4
PRODUSE
SECUNDARE,
DESEURI
FABRICATIE, EPURAREA APELOR REZIDUALE
DE
90
Apele uzate industriale sunt admise n reeaua de canalizare a oraului numai dac
ndeplinesc anumite condiii. Este interzis evacuarea n reelele de canalizare
oreneti a apelor reziduale industriale care conin:
-suspensii sau alte materiale care se pot depune
-corpuri solide, solide plutitoare sau antrenate care nu trec prin grtarul cu spaiul
liber de 20 mm ntre bare
-corpuri solide antrenate, dure care pot genera zone de corodare a colectoarelor
-pcur, uleiuri, grsimi care pot genera aderen pe pereii colectorului
-substane care provoac fenomene de coagulare
-substane cu agresivitate chimic asupra materialului de construcie a colectorului
i staiei de epurare
-substane ca: benzin, benzen, eter, cloroform, acetilen, hidrocarburi clorurate,
etc., care prin evaporare pot provoca amestecuri detonante
-substane nocive care pot pune n pericol personalul de deservire a staiilor de
epurare
-substane inhibitoare ale procesului de epurare care ar putea prejudicia
funcionarea instalaiilor de epurare biologic sau a celor de fermentare a
namolului
-ape calde cu temperaturi de peste 50C.
O alt surs de poluare este reprezentat de eliminarea de gaze, CO2 i aer-de
cele mai multe ori amestecat cu particule lichide sau solide. Prin interaciunea chimic
a acestor substane cu diferite forme fizice ale apei pot rezulta uneori substane
chimice foarte toxice.
Cap.5 UTILITATI
Utilitatile folosite in procesul de productie al penicilinei G sunt:
-energia electrica
-aburul
-apa
-aerul comprimat
Toate utilitile sunt considerate ca fcnd parte din sfera produselor energetice ale
unei ntreprinderi.
Energia electric
Aceasta reprezint una din formele de energie cele mai folosite n industria chimic
datorit uurinei de transport la distane mari cu care poate fi transformat n energie
mecanic, termic sau luminoas.
Energia electric transformat n energie mecanic este utilizat la acionarea
electromotoarelor cu care sunt dotate: pompele i reactorul cu agitare mecanic. Se
utilizeaz energie electric pentru iluminat-monofazat i pentru motoare-trifazat.
Aburul
91
Vapori de ap sunt cei mai utilizai ageni termici pentru nclzire. Realizarea unor
temperaturi peste 200C necesit presiuni mai mari de 35 atmosfere, ceea ce conduce la
cresterea cheltuielilor de investiie.
Funcie de presiunea pe care o are la ieirea din generator aburul poate fi: abur
umed, abur saturat, abur supranclzit.
Aburul umed conine picturi de ap i rezult de la turbinele cu contra presiune sau
din operaiile de evaporare, ca produs secundar. Este cunoscut sub denumirea de abur
mort.
Aburul saturat este frecvent folosit ca agent de nclzire, avnd cldur latent de
condensare mare i coeficienii individuali de tranfer de cldur mari. Temperatura
aburului saturat poate fi reglat uor prin modificarea presiunii. nclzirea cu abur se
poate realiza direct, prin barbotare, sau indirect, prin intermediul unei suprafee ce
separ cele dou fluide.
Aburul supranclzit cedeaz, n prima faz cldura sensibil de rcire, pn la
atingerea temperaturii de saturaie, cand coeficientul individual de transfer de cldur
este mic i apoi cldura latent prin condensare.
Apa
Se utilizeaz apa pentru rcirea masei de reacie n timpul fermentaiei. Apa de
rcire poate proveni din fntni de adncime, temperatura ei se menine ntre 10 - 15C
tot anul, sau apa de la turnurile de rcire, cnd se recircul avnd temperatura n timpul
verii 25 - 30C.
Pentru rcirea coninutului de suspensii se realizeaz coagularea, decantarea sau
filtrarea apei nainte de a fi utilizat n instalaii.
Pentru evitarea formrii crustei, temperatura apei la ieire din aparate nu trebuie s
depeasc 50C.
Rcirile cu ap industrial se pot realiza pn la 35-40C. Apa este un agent termic
cu capacitate caloric mare, uor de procurat. Se utilizeaz i: apa de incendiu, apa
potabil, apa tehnologic.
Aerul comprimat
Aerul comprimat se utilizeaz n urmtoarele scopuri:
materie prim tehnologic;
amestecare pneumatic;
uscare;
diferite scopuri: curirea utilajelor;
purttor de energie (pentru acionarea aparatelor de msur i de reglare, n
atelierul mecanic etc.)
92
93
94
95
Tiosulfat de sodiu
Tiosulfatul de sodiu cristalizat, tehnic, se ambaleaz n butoaie din hrtie nfurat
STAS 5537-65, sau n butoaie din fag STAS 1648-71. Se admite folosirea i a altor
ambalaje numai dac ele se ncadreaz n prescripiile respective prevzute de legislatia
n vigoare.
Ambalajele se eticheteaz n mod vizibil i durabil cu urmtoarele specificaii:
-marca de fabric
-denumirea produsului, calitatea i STAS 1817/2-75
-numrul lotului i data fabricaiei
-masa brut i tara
-semnul organului de control tehnic al calitii (CTC)
-termenul de garanie.
Tiosulfatul de sodiu cristalizat, tehnic se depoziteaz n ncperi uscate, n care
temperatura nu depete 30C.
Transportul produsului se face numai cu mijloace de transport acoperite.
La documentele de transport se va anexa un certificat de calitate ntocmit conform
reglementrilor legale n vigoare.
Cloroform
Cloroformul se ambaleaz astfel:
Tipul A in damigene de sticl, de culoare nchis sau vopsite n negru, nchise cu dopuri
de plut nvelite n foi de staniol sau n celofan i apoi parafinate. Damigenele de
sticl se introduc n couri de nuiele i se protejeaz cu un strat de paie sau tala. Sau
cisterne de oel.
Tipul B in cisterne de oel sau bidoane de polietilen.
Ambalajele trebuie s fie curate, uscate i nchise etan.
Ambalajele vor fi marcate cu urmtoarele specificaii:
-marca de fabric a ntreprinderii productoare
-denumirea produsului, tipul, calitatea, STAS 330-82
-masa net
-numarul lotului
-data fabricaiei
-termenul de garanie
-viza organului de control tehnic al calitii (CTC).
-semnele avertizoare pentru produse toxice, produse care trebuie ferite de umezeal
i produse care trebuie pstrate la rece, conform STAS 5055-66.
Manipularea, depozitarea i transportul cloroformului se fac cu respectarea normelor de
tehnic a securitii muncii referitoare la produsele toxice.
Cloroformul se depoziteaz n ncperi, ferit de lumin, de umiditate i de cldur,
pentru a evita descompunerea produsului cu formare de fosgen (foarte toxic).
Transportul se face cu mijloace de transport acoperite.
Fiecare lot de livrare va fi nsoit de documentul de certificare a calitii, ntocmit
conform dispoziiilor legale n vigoare.
Acid sulfuric tehnic
96
97
99
100
101
Bibiografie:
1. C. Onisiu Chimia i tehnilogia medicamentelor Editura Tehnica, Bucureti,
1988
2. Anca Irina Galaction, Dan Cascaval Metaboliti secundari si bioreactoare
Editura Bit, Iasi, 2004
3. Dan Cascaval Inginerie biochimica si biotehnologie vol. 3
4. prospect penicilina G. www.antibiotice.ro
5. Dan Cascaval Inginerie biochimica si biotehnologie vol 1.
6. C. Onisiu Tehnologia poceselor de biosinteza
7. Dan Cascaval Inginerie biochimica si biotehnologie vol 2.
8. Anca Irina Galaction, Dan Cascaval Metaboliti secundari cu aplicatii
farmaceutice, cosmetice si alimentare
9. STAS-uri si standarde conform Consiliului national pentru stiinta si tehnologie,
Institutul roman de standardizare.
10. Indrumar FDT
102
103