UMF Carol Davila

Facultatea de Medicina Generala

Catedra de Genetica

Asist. Univ. Dr. Florina Raicu

MUTATIILE SI
PROCESUL
REPARATOR AL
ADN

Copyright © Florina Raicu 2009

 Mutatii. Generalitati.
MUTATII PATOLOGICE
o mutatii aparute la nivelul ADN nuclear

o Genomice: altereaza numarul de cromozomi

din celula (anuploidii, poliploidii)
o Cromozomale: altereaza structura
individuala a cromozomilor
o Genice: altereaza structura genelor
VARIANTE
o mutatii aparute la nivelul ADN mitocondrial
ALE
SECVENTEI
ADN POLIMORFISME ADN Diabet tip I
Repetitii in tandem
o SNPs
Hemofilia A o VNTR: microsateliti (STR) si minisateliti
Repetitii inalt repetitive dispersate
o Repetitii SINE si LINE
o Elemente genetice mobile -retrotranspozoni
 MUTATIILE
Definitie:
Mutatia reprezinta o alterare sau modificare aparuta la nivelul materialului genetic.

Mutatia apare in:

• celulele liniei germinale - se poate transmite ereditar
• celulele somatice - nu transmite ereditar.

Mutatiile apar in:

• regiuni codificatoare ale genelor
• regiuni necodificatoare: regiuni reglatorii si situsuri de splicing conservate

Efectele mutatiilor asupra Efecte ale mutatiilor la nivel

structurii ADN : proteic:

o Substitutii • tranzitii o Sinonime (silentioase / neutre):

• transversii nu produc alterari

o Deletii o Non-sinonime:
• missense
• non-sense
• expansiuni de
• frameshift
o Insertii triplete
• duplicatii
 TIPURI DE MUTATII

Substitutii:
• tranzitii
• transversii
 Missense
Mutatia missense

ADN original codifica pentru o secventa de aminoacizi

Baze
azotate

Amino acid Inlocuirea unei singure

nucleotide

Secventa de aminoacizi incorecta care poate produce o

proteina nefunctionala
 Nonsens
Mutatia nonsense

ADN original codifica pentru o secventa de aminoacizi

Baze
azotate

Amino acid
Inlocuirea unei singure
nucleotide

Codonul STOP care poate produce o proteina

truncata
 Frameshift
Mutatia frameshift

ADN original codifica pentru o secventa de aminoacizi

Baze
azotate

Amino acid

Modificarea cadrului de citire cu o singura baza azotata poate

produce o secventa anormala de aminoacizi
 Deletii
Mutatia cauzata de o deletie

ADN original codifica pentru o secventa de aminoacizi

Baze
azotate

Amino acid
Deletia unei singure nucleotide

Secventa de aminoacizi incorecta care poate produce o

proteina nefunctionala
 Insertii
Mutatia cauzata de insertie

ADN original codifica pentru o secventa de aminoacizi

Baze
azotate

Insertia unei singure

Amino acid
nucleotide

Secventa de aminoacizi incorecta care poate produce o

proteina nefunctionala
 Mutatia dinamica
Mutatia cauzata de expansiunea de triplete MUTATIA DINAMICA

ADN original codifica pentru o secventa de aminoacizi

Baze
azotate

Amino acid Trinucleotide repetate

(CAG)

Secventa de aminoacizi incorect extinsa

introduce in proteina glutamina
 Slippage ADN polimeraza
Replicare normala

Alunecare spre inapoi

cauzeaza insertie

Alunecare spre inainte

cauzeaza deletie
 Duplicatia
Boala Charcot
Marie Tooth

Cromozom

Un fragment
din ADN este
duplicat
 CAUZELE MUTATIILOR. FACTORI CU EFECT
MUTAGEN
FACTORI EXOGENI

•Radiatii ionizante
•Raze UV
•Agenti chimici
•Agenti alkilanti
•Agenti intercalanti

SPECTRUL RADIATIILOR ELECTROMAGNETICE

Creste lungimea de unda Scade lungimea de unda
neionizanta ionizanta
lungimea de unda

Radio infrarosu ultraviolet Raze gamma

Frecventa
TIPUL DE
extrem de
RADIATIE microunde
scazuta Raze X

Surse
CAUZELE MUTATIILOR. FACTORI CU EFECT
MUTAGEN

FACTORI ENDOGENI

•Depurinarea
•Deaminarea
•Erori in replicarea ADN
•Erori in recombinarea ADN
•Esecul procesului reparator
Raspunsul celulelor la alterarea
ADN

1. Repararea ADN ƒ Repararea erorilor de imperechere

(Mismatch)
ƒ Repararea directa
ƒ Repararea prin excizia bazelor azotate
(BER)
ƒ Repararea prin excizia nucleotidelor
(NER)
ƒ Repararea post replicatorie (prin
recombinare)
2. Controlul ciclului celular
3. Apoptoza
4. Tolerarea leziunilor
Ataxia telangiectazia
Anemia Fanconi
 PROCES REPARATOR ADN
Inainte Dupa

Foton UV
 I. SISTEMUL DE REPARARE AL ERORILOR DE IMPERECHERE
(Mismatch Repair System)
Sistemul de la
organismul model Cancer de colon
Escherichia coli Mutatii in genele omoloage
MSH si MLH
 II. REPARARE DIRECTA

• Fotoreactivarea – ADN fotoliaza

• Indepartarea gruparilor metil din G - enzima MTMG

DIMERUL DE TIMINA

Radiatie UV

Inel ciclobutanic
 III. REPARARE PRIN
EXCIZIA BAZELOR (BER)

Sunt excizate
bazele modificate
chimic
 IV. REPARARE PRIN . . . .Exista si
EXCIZIA NUCLEOTIDELOR Reparare cuplata cu
transcriptia

Xeroderma
pigmentosum

La om exista 25 de proteine din

care 7 -
XPA, XPB, XPC…XPG -
responsabile de Xeroderma
pigmentosum

Sistemul de la organismul model

Escherichia coli
implica doar 4 proteine
 V. REPARAREA
RUPTURILOR
BICATENARE –
Double strand break
(DSB)

‰ Repararea prin
recombinare
omoloaga – se
bazeaza pe
informatia aflata pe
cromozomul omolog

‰ Repararea prin
rupere realipire
(Non-homologous End
Joining)

‰ Sinteza
transleziunilor
 Patologie moleculara - mecanisme
Avem o alela mutanta si o alela normala:
de ce se manifesta/ de ce nu se manifesta alela
mutanta?

Cel mai important aspect al mutatiilor este legat de efectul lor asupra
organismului :

• LOSS – OF – FUNCTION – produsul genic prezinta

o functie redusa sau absenta

• GAIN – OF – FUNCTION – produsul are un efect pozitiv anormal

LOSS – OF – FUNCTION (LOF)
Caracterizeaza fenotipul recesiv

Haploinsuficienta
Mutatia reduce la jumatate cantitatea de produs normal al copiei
de alele iar acesta cantitate nu este suficienta pentru
functionalitatea normala

Efect dominant negativ

Alela mutata produce o proteina ce interfera cu actiunea celei
normale

Boala Hungtington
GAIN – OF – FUNCTION (GOF)
Caracterizeaza fenotipul dominant
Mutatia prin castig de functie conduce la formarea unei noi proteine cu
functie patologica
 NOMENCLATURA UTILIZATA IN DESCRIEREA EFECTULUI UNEI
GENE:

• alela nula / amorfa - alela mutanta nu produce niciun produs;

• hipomorfa – alela produce o cantitate redusa din produsul genic sau

are o activitate redusa;

• hipermorfa - alela produce o cantitate crescuta din produsul genic

sau are o activitate crescuta;

• neomorfa - alela are o noua activitate;

• antimorfa - alela a carei activitate antagonizeaza cu produsul

normal al alelei normale;