Ministerul Educaţiei Naţionale şi Cercetării Ştiinţifice

ROMÂNIA
FACULTATEA DE FARMACIE
Departamentul de Ştiinţe Farmaceutice Fundamentale
Chimie Analitică şi Analiza Medicamentului

CHIMIE ANALITICĂ ŞI ANALIZĂ INSTRUMENTALĂ

LABORATOR 8 2 . 2

SPECTROMETRIA UV-VIS
Determinarea cantitativă prin spectrometrie UV-VIS a două substanţe aflate în amestec

SCOPUL LUCRĂRII

Determinarea cantitativă a unor substanţe în amestec bazată pe aditivitatea absorbanţelor.

Substanţe studiate: sulfatiazol şi sulfacetamida (sulfamide cu acţiune bacteriostatică
utilizate ca agenţi antiinfecţioşi).

Sulfatiazol Sulfacetamida

CONSIDERAŢII TEORETICE
Se poate rezolva determinarea spectrofotometrică a unor amestecuri ce conţin două
componente chiar dacă spectrele lor se suprapun parţial, prin măsurarea absorbanţei probei la
două lungimi de undă corespunzătoare maximelor de absorbţie ale celor două componente.
Această determinare se poate realiza datorită faptului că absorbanţele sunt aditive.
S-a constatat că spectrul de absorbţie a unui amestec de doi componenţi (x şi y) este echivalent cu
rezultatul însumării spectrelor caracteristice celor 2 componenţi x şi y (Figura 1).

Figura 1. Spectrul de absorbţie a doi compuşi x şi y (separat) şi în amestec.

Prin urmare, dacă se determină absorbanţa probelor la lungimile de undă 1
, 2
caracteristice componenţilor x şi y (este vorba de max) se pot scrie următoarele ecuaţii:

1
 Ministerul Educaţiei Naţionale şi Cercetării Ştiinţifice
ROMÂNIA
FACULTATEA DE FARMACIE
Departamentul de Ştiinţe Farmaceutice Fundamentale
Chimie Analitică şi Analiza Medicamentului

Aλ1 = AXλ1 + AYλ1 = (A1%1cm) Xλ1l CX + (A1%1cm)Yλ1l CY pentru 1

Aλ2 = AXλ2 + AYλ2 = (A1%1cm) Xλ2l CX + (A1%1cm)Yλ2l CY pentru 2

În cazul unui amestec format din componente diferite care nu interacţionează între ele,
absorbanţa totală la o lungime de undă dată este suma absorbanţelor fiecărei componente la acea
lungime de undă. Dacă sulfacetamida (SAM) şi sulfatiazolul (STZ) sunt componentele amestecului,
absorbanţa totală A a amestecului la o anumită lungime de undă se scrie
A ASAM ASTZ

Deoarece fiecare componentă se supune legii Beer – Lambert (A = A1%1cm c l)

A (A1%1cm)SAM cSAM l (A1%1cm)STZ cSTZ l

unde (A1%1cm)SAM, (A1%1cm)STZ sunt absorbanţele specifice ale celor două substanţe la lungimea de
undă de lucru, cSAM, cSTZ sunt concentraţiile %(m/V) ale componentelor în amestec, iar l este
dimensiunea cuvei în care se măsoară probele (de regulă, l = 1 cm).
Pentru sistemul binar considerat determinările se vor face la două lungimi de undă 1 şi 2
pentru care se vor putea scrie relaţiile

A1 (A1%1cm)1SAM cSAM l (A1%1cm)1STZ cSTZ l pentru 1

A2 (A1%1cm)2SAM cSAM l (A1%1cm)2STZ cSTZ l pentru 2

unde A1 şi A2 sunt absorbanţele amestecului probă la lungimile de undă considerate.

Lungimile de undă de lucru se aleg aşa încât fiecare substanţă să aibă la cel puţin una
dintre lungimile de undă absorbanţă semnificativă (lungimile de undă de lucru se aleg, de regulă,
la max corespunzătoare celor două substanţe).
În practică se măsoară absorbanţa amestecului probă la cele două lungimi de undă şi
cunoscând absorbanţele specifice ale substanţelor la lungimile de undă de lucru, se înlocuiesc în
sistemul de ecuaţii anterior şi, prin rezolvarea acestuia, se află cSAM şi cSTZ. Observaţie: dacă
absorbanţa uneia dintre substanţele studiate la una dintre lungimile de undă de lucru este
nesemnificativă, se consideră absorbanţa specifică la acea lungime de undă practic 0.

MOD DE LUCRU
Alegerea lungimilor de undă de lucru şi determinarea absorbanţelor specifice

1) Pornind de la soluţii stoc de SAM 0,005%(m/V) şi STZ 0,005 %(m/V) în apă se obţin câte o
soluţie standard din fiecare substanţă STDSAM şi, respectiv, STDSTZ. Diluţia se face astfel încât
absorbanţele la maximele observate să fie minimum 0,2 şi să nu depăşească valoarea 1 (nu se iau
în considerare maximele situate sub 220 nm). Din spectrele substanţelor obţinute se aleg două
lungimi de undă de lucru aşa încât fiecare substanţă să aibă la cel puţin una dintre lungimile de
undă alese absorbanţă semnificativă.
2) Se măsoară absorbanţele soluţiilor standard STDSAM şi STDSTZ la cele două lungimi de
undă de lucru şi, ţinând cont de legea Lambert-Beer A = A1%1cm c l, se calculează A1%1cm la fiecare
lungime de undă de lucru atât pentru SAM, cât şi pentru STZ:
2
 Ministerul Educaţiei Naţionale şi Cercetării Ştiinţifice
ROMÂNIA
FACULTATEA DE FARMACIE
Departamentul de Ştiinţe Farmaceutice Fundamentale
Chimie Analitică şi Analiza Medicamentului

(A1%1cm)1SAM la 1 (A1%1cm)2SAM la 2
(A1%1cm)1STZ la 1 (A1%1cm)2STZ la 2
Atenţie: concentraţia se exprimă %(m/V).

Dozarea SAM şi STZ în soluţia probă

Se măsoară absorbanţa amestecului probă P la cele două lungimi de undă alese şi,
cunoscând (A1%1cm)1SAM, (A1%1cm)2SAM, (A1%1cm)1STZ, (A1%1cm)2STZ, se rezolvă sistemul de ecuaţii următor
pentru a afla cSAM şi cSTZ:
A1 (A1%1cm)1SAM cSAM l (A1%1cm)1STZ cSTZ l pentru 1
2 1% 2 1% 2
A (A 1cm) SAM cSAM l (A 1cm) STZ cSTZ l pentru 2

SAM STZ Amestec SAM:STZ

1% 1%
Lungime Absorbanţa A 1cm Lungime Absorbanţa A 1cm Lungime Absorbanţa A1%
de undă de undă de undă 1cm
1 1 1
2 2 2