Genul Pseudomonas

Specia Pseudomonas aeruginosa  bacilul piocianic

I. Diagnosticul bacteriologic
• consta in izolarea si identificarea germenilor potential patogeni din produsul pacientului
1. Recoltarea produselor patologice
- se folosesc materiale si instrumente sterile si tehnici de lucru aseptice
- se respecta normele generale si normele specifice de recoltare
- se aleg produsele recoltate in functie de localizarea infectiei
2. Transportul probelor la laborator
- se face rapid in maxim 1-2h sau se folosesc medii de transport
- se respecta conditiile de securitate microbiologica
- se asigura identitatea probei
3. Examenul macroscopic
- consta in examinarea cu ochiul liber a produsului recoltat
- sunt germeni piogeni (producatori de puroi) – puroiul poate prezenta miros aromatic de flori de tei si
pateaza pansamentele
4. Examen microscopic direct
- consta in examinarea unui frotiu colorat Gram din produsul patologic
- se pot observa caracterele morfo-tinctoriale:
• dimensiunea: lungime 2-3 µm, grosime 0.5-0.6 µm
• forma: bacili rotunjiti la capete
• mod de grupare: izolati de obicei
• capsula: nu prezinta
• spori: nu formeaza
• localizarea: extracelulara
• tinctorialitatea: Gram negativi
- frotiul are rol orientativ
5. Cultivarea in vitro
- sunt germeni nepretentiosi nutritiv, dezvoltandu-se cu usurinta pe medii uzuale
- in practica se folosesc:
• geloza-sange
• mediu selectivo-diferential pentru bacili Gram negativi (idem Enterobacteriaceae)
• mediu lichid – de ex.: apa peptonata (cu peptona)
- mediile se incubeaza la 37°C 24h in aerobioza (piocianicul este strict aerob)
- pe geloza-sange: formeaza colonii de talie medie/mare, de forme diferite (modalitati de crestere foarte
variate), cu reflex metalic, refringente, fluorescente, beta-hemolitice, pigmentate
- pe mediul selectivo-diferential: formeaza colonii lactoza negative, care sunt incolore si imprumuta
culoarea mediului; cultura are reflexe metalice si prezinta fluorescenta
- pe mediul lichid = apa peptonata: creste formand o pelicula la suprafata lichidului, care dupa 2-3 zile cade
la fundul tubului, se ramoleste, devine filanta si se pigmenteaza in culori de galben, verde, brun-roscat,
pana la negru
- pe toate mediile de cultura prezinta miros aromatic de flori de tei
6. Identificarea
- pentru stabilirea genului Pseudomonas se pot lua in considerare 5 criterii:
• cresterea specifica pe geloza-sange (si criteriu de identificare)
• colonii lactoza negative cu crestere specifica pe mediul selectivo-diferential
• pelicula in apa peptonata
• miros aromatic de tei
• reactia oxidazei pozitiva – se poate realiza prin mai multe variante tehnice utilizand reactiv Kovacs:
benzi impregnate cu reactiv, rondele impregnate cu reactiv sau reactiv pus cu o pipeta direct pe colonia de
pe mediul de cultura (reactia oxidazei mai este pozitiva si la genul Neisseria si la vibrionul holeric)
- pentru stabilirea speciei se utilizeaza:
• sisteme automate de bacteriologie sau galerii API pentru bacili Gram negativi non-fermentativi
(Pseudomonas degradeaza glucoza, dar oxidativ, nu fermentativ  nu se poate pune in evidenta acest
caracter pe mediul TSI  apare non-fermentativ pe el)
• teste biochimice manuale: sunt foarte importante, mai ales in cazul tulpinilor nepigmentogene, care
pot duce in eroare examinatorul  se utilizeaza aceleasi teste biochimice descrise la familia
Enterobacteriaceae
1 / LP 7  M
 * pe TSI: glucoza negativ, gaz negativ, H2S negativ, lactoza negativ
* pe MIU: mobil, indol negativ, uree negativ
* pe mediul Simmons: citrat pozitiv
7. Antibiograma
- este obligatorie, deoarece prezinta rezistenta naturala sau dobandita la diverse antibiotice
II. Diagnostic serologic
- consta in detectia anticorpilor in serul pacientului
- nu este cazul

Bacilul piocianic este un redutabil agent al infectiilor nosocomiale, deoarece:

- are nevoi nutritive minimale si un metabolism flexibil
- s-a adaptat la un spectru larg de gazde si este larg raspandit in natura
- are rezistenta naturala la multe antibiotice si poate dobandi relativ rapid, chiar in 3-5 zile de tratament,
rezistenta la altele

2 / LP 7  M