Cap I. VIRUSOLOGIE 1.

1 Noiuni generale de virusologie Virusologia se poate definii ca tiina care studiaz virusurile i infravirusurile: virusurile sunt ageni biotici plantele i animalele. Sunt considerate care infecteaz bacteriile, ca cele mai simple

microorganisme datorit structurii extrem de simple i dimensiunii extrem de mici, de ordinul milimicronilor. Regnul Vira prin reprezentanii si este o punte de legtur dintre materia organic nevie, prebiotic i cea vie, biotic. Caractere generale ale virusurilor: virusurile nu au structur celular. Unitatea morfo-funcional se numete virion , ce este un virus matur, complet din punct de vedere structural, capabil s realizeze ptrunderea ntr-o celul gazd. Virusurile se prezint ntotdeauna n dou stri alternative: una liber extracelular i se poate gsii n mediul ambiant sau n diferite umori ale altor organisme vii. n aceast form se comport ca particule inerte, lipsite de via, din punct de vedere biologic; a doua stare este cea intracelular, numit i virus vegetativ. Acesta se poate multiplica, devenind o particol biologic vie. Se poate considera c sistemul celul gazd virus reprezint sistemul biologic viu. Din punct de vedere morfologic, datorit dimensiunilor extrem de mici, virusurile trec prin porii filtrelor bacteriologice numindu-se particole filtrabile.Exist ns i virusuri att de mici nct pot traversa i porii unei membrane fine de colodiu i se numesc virusuri ultrafiltrabile; n structura virusurilor intr ntotdeauna un singur acid nucleic, fie ADN fie ARN;
1

 Din punct de vedere funcional virusurile nu posed echipament enzimatic propriu din care cauz sunt lipsite de metabolism.Ele nu-i pot sintetiza energia utilizabil i nici proprii constitueni; Virusurile nu au capacitate de cretere au un numr fix de molecule, deasemenea nu sunt capabile de multiplicare independent fr celula gazd. Activitatea biologic a virusurilor se exprim prin modul lor de multiplicare care se realizeaz numai ntr-o celul gazd i pe seama acesteia.Acest mod de nmulire se numete replicare. n prosesul de replicare virusul aduce numai informaia iar restul procesului l realizeaz celula gazd.Relaia dintre virus i celula gazd este o relaie de parazitism obligatoriu i absolut, n special la nivel genetic, modificnd informaia genetic a celulei, oblignd-o astfel s lucreze pentru virus. 1.2 Morfologia virusurilor Dimensiunile: Virusurile au dimensiuni cuprinse ntre 8-10 m ( cele mai mici) i 300-450 m (cele mai mari). Aceste dimensiuni se pt stabilii fie prin folosirea unei membrane filtrabile sau ultrafiltrabile fie prin imagini electronomicroscopice; Forma virusurilor: exist o mare variabilitate de form dar n general virusurile pot fi grupate n cinci forme principale: fibrilar ,filamentoas, sferoidal, spermatozoidal i de cartu; 1.3 Structura virusurilor n componena oricrui virus exist dou pri distincte i anume:
-

genomul viral reprezint partea central a unui virus i se aseamn cu nucleul unei celule;

capsida viral la exterior, care are aspectul unui nveli asemntor membranei celulare. mpreun cele dou componente formeaz un tot unitar numit nucleocapsid.

Genomul viral: este alctuit dintr-un singur tip de acid nucleic fie ADN, fie ARN. Cnd conine ADN poart denumirea de deoxiribovirusuri iar cnd conine ARN - ribovirusuri. Acidul nucleic din genom poate fi mono sau bicatenar n funcie de numrul lanurilor de nucleotide din care este constituit. Dimensiunile unui genom viral se msoar n kilobaze ce reprezint 1000 de nucleotide monocatenare sau perechi de nucleotide bicatenare. Din acest punct de vedere exist virusuri cu genom foarte mic (5 Kb) sau mare (16-20 Kb). Genomul mic prezint un mare avantaj pentru virusurile mici i anume scurtarea timpului de replicare evitnd totodat i transmiterea eronat a informaiei. Se evit astfel apariia de mutaii, spre deosebire de virusurile mari (ex. Virusul gripal) la care apar frecvent mutaii genetice. Forma genomului viral: este corelat cu tipul de virus. Apar astfel tipuri de genom liniar, circular sau genom divizat fie liniar fie circular( catenele apar ntrerupte, formate din mai multe fragmente). Funciile genomului viral: cea mai important funcie a genomului viral o reprezint nmagazinarea ntregii informaii genetice i induce astfel replicarea virsurilor. Acest lucru se poate realiza i n absena celorlali constitueni. Virusrile la care genomul viral este incomplet se numesc virusuri defective. Aceste virusuri nu sunt capabile de replicare dect n prezena altor virusuri care le ajut, numite din aceast cauz virusuri help. Capsida viral: este nveliul care acoper genomul viral (noiunea de capsid deriv din cuvntul grecesc Kapsa cutie). Din punct de vedere structural capsida viral este alctuit din uniti proteice numite
3

capsomere.La unele virusuri capsomerele sunt alctuite dintr-o singur protein i se numesc monomere, iar la altele din mai multe tipuri de proteine i se numesc oligomere (pentamere i hexamere). ntotdeauna pe un tip de virus numrul de capsomere este fix i grupate ordonat pe mai multe straturi care se repet deasemenea foarte ordonat, astfel c n final capsida are o anumit arhitectonic cu o simetrie spaial, care este un criteriu de recunoatere a virusurilor. Funciile capsidei virale: cea mai important funcie este aprarea genomului viral de aciunea unor enzime numite nucleaze care dac ajung n contact cu genomul viral l distrug. Deasemenea prin intermediul capsidei virale se realizeaz legarea i ptrunderea virusului n celula gazd. Pericapsida: Exist virusuri care pe lng cele dou componente, posed o a treia component numit pericapsid sau peplos (grecescul peplos manta). Aceasta este un nveli exterior capsidei i se formeaz din subsane chimice, constitueni ai celulei gazd, dup ce virionul s-a format prin replicare i nante ca acesta s prseasc celula gazd. Pericapsida este alctuit din dou straturi moleculare de lipide. La partea intern se afl i un strat proteic iar la exterior se gsesc nite proeminene de natur glico-proteic numite spiculi . Virusurile cu peplos au ntodeauna form sferic. Funciile pericapsidei: Rolul acesteia este att de aprare a nucleocapsidei ct i de ptrundere a virusului n interiorul celulei gazd. Virusurile ce au pericapsid se numesc virusuri acoperite spre deosebire de cele ce nu au pericapsid numite virusuri descoperite sau virusuri nude. 1.4 Replicarea virusurilor: Se realizeaz numai n interiorul celulei gazd pe care, virusul odat ptruns o oblig, prin informaia genetic ce i-o transmite s sintetizeze
4

acid nucleic viral respectiv proteine virale, n dauna sintezei proprii. Se poate afirma c virusurile sunt multiplicate de celula gazd. Replicarea virusurilor se desfoar n mai multe etape sau faze i anume: 1. Fixarea i adsorbia pe celula gazd: aceast etap este posibil deoarece la suprafaa membranei celulare exist n mod normal constitueni celulari denumii receptori de virus care din punct de vedere chimic au compatibilitate cu strucrurile chimice din capsida viral sau pericapsid. Desigur, nu orice tip de celul posed receptori pentru orice tip de virus, asfel c fixarea i adsorbia virusurilor pe celule nu este ntmpltoare i depinde de afinitatea dintre celul i virus, afinitate denumit tropism: n absena receptorilor specifici celula gazd este numit nepermisiv. Din punct de vedere a tropismului exist:
-

tropism de regn vegetal sau animal, existnd virusuri fitotrope , virusuri zootrope sau bacteriotrope (bacteriofagii). tropism de specie existnd virusuri ce paraziteaz o singur specie ( vir. Mozaicului tutunului, vir. Pestei porcine), sau cu tropism pentru mai multe specii (vir. Turbrii pentru toate mamiferele). tropism legat de celul exist virusuri care ptrund doar n celulele nervoase( neurotrope), altele ptrund n celulele epiteliale ( epiteliotrope), altele au tropism pentru celulele endoteliului alveolelor pulmonare (pneumotrope). Exist virusuri care pot ptrunde ntr-un numr mai mare de tipuri de celule(pantrope). Privit n dinamic aceast etap se realizeaz n dou faze: prima numit faza reversibil, se realizeaz datorit existenei unei atracii ionice dintre virus i celul a doua faz ireversibil, se realizeaz numai dac exist tropism ntre virus i celul

2.

Ptrunderea virusului n celul sau infectarea celulei cu virus. Aceast etap se poate realiza prin dou modaliti si anume: endocitoz - apare la virusurile nude iar mecanismul ptrunderii este asemntor procesului de fagocitoz. La nivelul membranei celulare se formeaz o invaginaie, nspre interiorul citoplasmei celulare, care include virusul ulterior membrana celulei se reface iar nveliul ce include virusul va fi lezat de enzimele citoplasmatice. Virusul poate s rmn n citoplasm sau poate s ptrund n nucleu. fuziune apare la virusurile acoperite i reprezint de fapt o ptrundere direct a virusului prin membrana celular, la locul de fixare. Spiculii existeni au rolul unor enzime, glicoproteaze, care vor liza membrana celular (rolul enzimatic al pericapsidei), formnd un canal prin care virusul trece n matricea citoplasmatic.

3. Decapsidarea sau faza de eclips . Dup ptrunderea n celul , ntr-un interval de cteva ore virusul i pierde structura morfologic, prin distrugerea capsomerelor sub aciunea proteazelor celulare i eliberarea acidului nucleic. Asfel genomul viral devine liber n celul numit i virus vegetativ. El nu este observabil fiind aparent disprut (fr identitate) de unde i denumirea de eclips. Unele virusuri pot rmne n aceast stare mascat un timp mai ndelungat, numii i provirui, pn la faza de multiplicare activ. n shimb la alii faza de eclips dureaz mai puin, 1-2 ore, dup care urmeaz multiplicarea. La unele virusuri genomul viral liber rmne n citoplasma celulei iar la altele el ptrunde n nucleu prin porii membranei nucleare. 4. Faza de multiplicare sau biosintez a componentelor virale. Acidul nucleic viral (ADN sau ARN) conine informaia genetic necesar replicrii lui i sintezei proteinelor virale. n general nmulirea virusurilor reunete trei aspecte comune tuturor virusurilor i anume: replicarea genomului i producerea de genomi progeni
6

transcripia sau copierea informaiei prin sinteza ARNm translocaia sau translaia , adic decodificarea mesajului la nivelul ribozomilor celulari

pentru sinteza proteinelor virale. Astfel celula gazd pune la dispoziia virusului pentru replicarea i sinteza proteinelor virale, materialul plastic i energetic necesar : aminoacizi, nucleotide, enzime, ARNt, ribozomi, iar virusul particip doar cu informaia genetic (cuprins n genomul viral ( ADN sau ARN) care indic ce trebuie realizat. Iniial are loc sinteza componentelor genomului viral. Este un proces complex i se bazeaz pe substituirea informaiei genetice a genomului celular cu cea a genomului viral i va obliga celula gazd s sintetizeze componente virale. Virusul prin mecanisme incomplet elucidate, scoate din funcie ADN-ul celular n momentul copierii informaiei de pe ADN pe ARNm. n celul apare un ARNm de tip nou, transcris de pe genomul viral. Exist diferene legate de acest proces de replicare a genomului viral n funcie de structura mono- sau bicatenar a acidului nucleic. 5. Asamblarea i maturarea virusului: Constituenii virali odat

formai se vor asambla ntr-un tot unitar formnd noi particule virale (virionii). n jurul moleculelor de acid nucleic de dispun capsomerele ntro ordine i simetrie foarte precis. Asamblarea poate avea loc n citoplasm (la majoritatea virusurilor ce conin ARN) sau n nucleul celulei 6. Eliberarea virionilor din celul este diferit n funcie de virus astfel:
-

prin liza celulei distrugerea acesteia se elibereaz ntregul material viral( la virusurile foarte mici, nude) numite i virusuri agresive prin nmugurire la virusurile mari, nvelite . La nivelul membranei celulare, se formeaz muguri (excrescene) din care virusul
7

mprumut material pentru formarea pericapsidei, dup care inclui n aceste excrescene se desprind de celul.Celula gazd nu este distrus n totalitate astfel c membrana se poate reface. Celula elibereaz virioni treptat, continuu, nu toi deodat (virusuri atenuate). Durata ciclului de multiplicare este diferit.. La virusurile cu ARN aceasta este mai mic, deoarece ARN-ul viral are i monocatenar.Durata cea mai rol de ARNm i cel mai adesea este mare este la virusurile mari, cu ADN

bicatenar ce necesit mai mult timp pentru sintez. Dup dinamica mecanismului de multiplicare, caracteristic de fapt fiecrei specii virale i capacitii patogene a acesteia, avem: virusuri virulente, virusuri atenuate i virusuri temperate. 1.5 Relaii virus celul gazd: exist trei tipuri de relaii: La virusurile virulente avem relaii de antagonism ,cu efecte distructive asupra celulei gazd : efect citolitic sau citocid, care prin multiplicare exagerat duc la distrugerea complet a celulei gazd i eliberarea virionilor. Acetia atac alte celule, cele iniial infectate nu mai produc virus. Timpul necesar replicrii de noi elemente virale (din momentul adsorbiei pn la eliberare) poate fii ntre 3 ore pn la 15-20 ore. Din aceast grup fac parte virusurile descoperite, monocatenare, ADN sau ARN i produc boli grave, cu evoluie acut. Ele polueaz puternic mediul exterior, eliminnd cantiti mari de virus prin secreii i excreii deci cu o mare putere de difuzibilitate (transmitere pe orizontal : animal bolnav la animal sntos). Exemple de astfel de virusuri agresive: din familia Parvoviride avem virusul gastroenteritei infecioase care afecteaz tineretul canin ( virus cu ADN monocatenar), sau din familia Picornaviride: virusul febrei aftoase la biongulate boal viral extrem de contagioas.

La virusurile atenuate virusul are o rat mai redus de multiplicare, deci este mai puin mai virulent. Dei apar modificri morfologice n celula gazd ea supravieuiete timp ndelungat i produce virioni complei cu intermiten ( infecii producive), sau produce numai unele componente virale fr a se forma virioni complei (infecii abortive). n aceast grup intr virusurile bicatenare, acoperite sau nu. Transmiterea infeciilor virale cu virusuri atenuate se realizeaz tot pe linie orizontal. n cazul virusurilor atenuate, relaia celul-virus este persistent n timp, este cronic, astfel c infeciilew virale sunt lente cu evoluie progresiv i modificri degenerative la nivelul celulelor gazd. Exemple de virusuri atenuate : din familia Herpesviridae avem virusul care produce boala lui Aujescky (pseudoturbarea) sau virusul care produce la psri boala lui Marek. n cazul infeciilor abortive virusurile incomplete pot fi maturate prin supsainfecii cu alte virusuri, ce au rol de help-virus. La virusurile temperate - acidul nucleic viral ptrunde n nucleul celulei gazd i se integreaz n genomul acesteia, adic n ADN-ul nuclear. Rmne n stare de laten sub form de provirus i coexist cu funciile normale ale celulei i nu o perturb. n urma multiplicrii celulare fiecare celul nou va primii i genomul viral : deci discutm deci de o transmitere vertical. Exemple de virusuri temperate: din familia Retroviride amintim virusurile care produc leucemiile la om iar la animale leucozele, apoi virusul anemiei infecioase a cabalinelor i virusul HIV ce produce SIDA la om. Virusurile latente pot rmne n stare mascat fr a se multiplica, timp ndelungat iar cnd intervine un factor declanator al multiplicrii virale se poate ajunge la infecii virale grave cu liza celulei gazd. De asemenea virusurile latente pot determina transformri ale celulei gazd
9

sub raport morfofuncional uneori genetic i lipsa de control n creterea i multiplicarea celular, deci rol moncogen determinnd proliferri necontrolate i se integreaz n genomul celeular transmindu-se la toate celulele rezultate prin diviziune. Celula iniial creia I s-a indus eronat informaia genetic, se numete cap de clon. Pe lng modificrile produse asupra celulelor gazd, o alt consecin a prezenei virusului n celul este apariia incluziilor virale, vizibile i la microscopul optic. Aceste incluzii reprezint locul unde se sintetizeaz componentele virale sau locul unde se asembleaz virionii astfel c ele apar fie intracitoplasmatic fie intranuclear. Pentru unele virusuri aspectul incluziilor este caracteristic(chiar patocnomonic adic stric specifc ) i au denumiri caracteristice pentru fiecare virus, de obicei dup numele celui care le-a descoperit (ex: incluzii Babe-Negri cu localizare intracitoplasmatic ,in turbare,cu localizare in celulele nervoase; incluzii Bollinger intracitoplasmatice n variola aviar cu localizare n epiteliile de acoperire; incluzii Rubarth intranucleare n hepatita Rubarth localizate n celulele hepatice . Interferena viral: Infectarea aceleiai celule gazd cu dou virusuri diferite, fie nrudite genotipic sau tulpini cu genotipuri diferite, poate fi urmat de: multiplicarea ambelor virusuri (unul n citoplasm iar cellalt n nucleu); cooperare - sub form de complementare prin intensificarea maturrii unuia cu ajutorul virusurilor ajuttoare (help); interferen prin care virusul de suprainfecie este mpiedicat s ptrund sau s se nmuleasc ntr-o celul deja infectat cu un virus. Primul care declaneaz interferena se numete virus inductor sau interferent, iar al doi-lea virus interferat sau exclus. Virusul
10

inductor acioneaz conform dreptului primului ocupant prin : blocarea receptorilor de membran, blocarea replicrii virusului sau prin stimularea celulei gazd de a produce substane care s protejeze celulele pentru ptrunderea altor virusuri (interferon). Interferonul, descoperit n 1957 reprezint o clas de proteine sintetizat de celulele animalelor vertebrate infectate cu virus i care se transfer altor celule mediind un mecanism de aprare fa de agresiunea viral. Interferonul este eliberat din celul i difuzeaz n spaiile extracelulare. Aciunea protectoare a interferonului se exercit i asupra altor tipuri de celule, de la alte specii dect a celei productoare i fr o selectivitate viral. Se tie c toate tipurile de celule pot produce interferon, ns unele produc cantiti mai mari ca de exemplu: celule SRE, limfocite, celule splenice, hepatice i pulmonare,deasemenea cele din timus i ganglioni. Mecanismul de aciune a interferonului nu este direct ci prin intermediul unei proteine denumit protein inhibitoare a translaiei. Prin aceast protein celula este capabil s fac distincie ntre ARNm viral i cel propriu blocnd replicarea virusului. Celula infectat produce interferon care difuznd naintea virusului la alte celule le protejeaz. Interferonul acioneaz i asupra virusurilor oncogene latente mpiedicnd i inhibnd creterea tumoral. Deasemenea interferonul transmite la celulele vecine rezistena antiviral localiznd infecia. Astfel interferonul este utilizat n tratamentul unor boli virale precum i n unele boli canceroase. 1.7 Bacteriofagii sau virusuri mnctoare de bacterii: sunt virusuri rspndite n toate mediile de via: ap, sol, aer, acolo unde gsesc microorganisme receptive. Bacteriofagii au form spermatozoidal fiind prevzui cu un cap n care se afl genomul viral
11

de tip ADN i capsida i o coad care conine proteine virale contractile precum i o enzim numit murolizina. Ataarea bacteriofagului de celul se face prin coad care lizeaz peretele celulei bacteriene cu ajutorul murolizinei, apoi se contract i mpinge genomul n celul iar capsida rmne afar (fagi fantom). Exist dou grupe de bacteriofagi:
-

viruleni care dup replicare i n timpul eliberrii din celul produc liza celulelor parazitate un ciclu litic de distrugere a bacteriei temperai care nu produc liza celulei ci se integreaz n genomul celulei gazd sub form de profag. Profagii se replic sincron cu genomul celulei iar celulele fice vor conine i ele n genom profagul respectiv. Dup mai multe generaii profagul se despride de genomul bacterian i devine fag liber prin liza celulei lizogenic. bacteriene ciclu

Importana bacteriofagilor: Fiind foarte rspndii n natur au rol important n ecologia i evoluia bacteriilor. Asrfel ei contribuie la reducerea numeric a unor populaii de bacterii - reglaj numeric. Specificitatea relaiei fag-bacterie a dus la elaborarea unui procedeu de clasificare a bacteriilor n funcie de sensibilitatea lor fa de un fag sau de un anumit grup de fagi, numit lizotipie sau tipizare prin fag. Aceast particularitate este utilizat n epidemiologie pentru a stabilii originea i rspndirea unei infecii ntr-o colectivitate uman, ca indicator sanitar, de exemplu a gradului de poluare a apelor. n acest sens periodic se preleveaz probe de ap i se caut fagii ce paraziteaz pe anumite bacterii. Prezena fagului antitific evideniaz poluarea sursei de ap cu specia Salmonella typhi. n industria fermentativ se acord o atenie sporit detectrii fagilor viruleni care pot liza microorganismele utilizate n biotehnologiile

12

fermentative sau n procese de biosintez.

n sol i ap fagii lizeaz

numeroase bacterii patogene contribuind la o sterilizare a mediului. 1.8 Viroizii: cunoscui sub denumirea de infravirusuri, sunt ageni infecioi cu o structur foarte simpl tip monocatenar. n cmpul 2,5-5m. Viroizii au fost idetificai doar la plante i pn la ora actual nu este cunoscut modul lor de replicare. Exist ns o teorie acceptat i anume c viroizii s-ar comporta n interiorul celulelor gazd ca un ARN de transport ce induce sinteza unor proteine anormale n celula gazd formate acesteia. 1.9 Prionii : denumirea vine de la cuvintele poteinaceous nucleic. Dimensiunile prionilor sunt de 100-100.000 mai mici dect virusurile i s-a constatat c au capacitatea de replicare i agresiune asupra celulelor S.N.C. Cercetrile minuioase efectuate n ultimul timp arat c n neuronii n care s-au depistat aceste particole proteice infecioase , citoplasma lor apare cu numeroase guri dobndind un aspect spongios (vacuolar) . De la acest aspect s-a dat denumirea bolilor produse de prioni i anume: la oaie - encefalit spongioas (scapia), la bovine - encefalopatia spongiform (boala vaci nebune ). La microscopul electronic prioni apar ca mici granule sau agregate proteice alctuite dintr-o nlnuire de 250 aminoacizi.
13

reprezentat de un singur acid

nucleic, ntodeauna ARN. Viroizii sunt lipsii de capsid, ARN-ul este de microscopic, vzute la microscopul electonic, apar ca bastonae uor ncubate,de dimensiuni cuprinse ntre

din

70-80 aminoacizi

rezultnd

astfel

o nbolnvire a englezeti

infectios particle - particole

proteice infecioase, prin

urmare ei sunt reprezntai de molecule de protein lipsite de acid

Prionii nu induc producii de interferon ceea ce i deosebete de virusuri. O alt carateristic este perioda de laten mare care poate fi cuprins ntre 2-20 ani. Legat de rezistena lor fa de ageni fizici i chimici ( radiaii , temperatur, diverse substane chimice ) care acioneaz distructiv asupra acizilor nucleici , s-a constatat c radiaiile ionizante care sunt foarte nocive pentru acizii nucleici sunt inofensve pentru prioni rezistnd la 20 milioane rad.(virusurile rezist la 300.000 rad, iar omul la 6000 rad. ). De asemenea prioni rezist la temperatur extrem de ridicat chiar la incinerare (ardere); de asemenea rezist la temperaturi sczute (-700 ) iar n sol rezist pn la 3 ani. Legat de replicarea acestora pn la ora actual nu este cunoscut mecanismul de nmulire al acestora. Totui unii cercettori afirm c aceste particole infecioase ar induce n celul sinteza unui acid nucleic responsabil de sinteza prionilor. n schimb ali cercettori afirm c n organism exist o gen care poart mesajul codificat pentru sinteza proteinei prionice i c sub aciunea unor factori nc neelucidai gena respectiv ar putea fi activat pentru producerea de particole prionice nerecunoscute de sistemul imunitar al organismului superior Un grup restrns de cercettori afirm c particola prionic folosete acidul nucleic din celula gazd pentru replicare. 1.10 Sistematica virusurilor n clasificarea virusurilor se ine cont de : 1. tipul de acid nucleic : - ADN- Dezoxiribovirusuri - ARN -Ribovirusuri 2. prezena sau absena pericapsidei : -virusuri nude - fr pericapsid

14

-virusuri acoperite - cu pericapsid 3. dup dimensiuni , form, tropism. Clasificarea virusurilor se face dup familie i gen. Astfel pentru familie denumirea se d cu sufixul viridae iar pentru gen cu sufixul virus. Exemple : fam. Herpes viridae , genul Herpes virus. Legat de specie denumirea vine de virusul turbri etc. Cele mai importante virusuri aparin grupei de virusuri zootrope (la om i animale) la boala pe care o produc : exemplu , turbarea -

1.10.1 Grupa virusurilor cu ADN nude (descoperite ) Familia Parvoviridae Denumirea vine de la cuvntul latinesc parvus = mic . Aceast familie cuprinde virusuri mici (18-26 m) , de form sferic cu genom ADN monocatenar. Au tropsim pentu epiteliul tubului digestiv (mucoasa gastric i intestinal) dar i pentru organele hematopoietice (mduva osoas). La tineretul carnivor (cel, pisoi,etc.) produce o boal extrem de grav, denumit gastroenterita infecioas. La om exist parvovirus care afecteaz mduva osoas n special cea cu rol hematogen, distugnd globulele roii prvocnd astfel o grav anemie . 1.10.2 Grupa virusurilor ADN acoperite Familia Poxviridae Cuprinde virusuri ovale, cu dimensiuni mari 250-300 m, cu ADN bicaternar. La animale produc boli cunoscute sub denumirea de variole (la mamifere i psri). Sunt virusuri epiteliotrope.
15

1.10.3 Grupa virusurilor ARN nude Familia Picornaviride Denumirea vine de la cuvntul grecesc picos mic. Cuprinde virusuri cu dimensiuni de 25-30 m, sferice cu genom ARN-monocatenar. La om exist virusul poliomielitei (meningoencefalit). La animale virusul febrei aftoase care afecteaz biongulatele dar i omul. 1.10.4.Grupa virusurilor ARN-acoperite Familia Retroviridae cuprinde virusuri sferice, cu dimensiuni medii 8 -10 m, cu genom ARN monocatenar, unele fiind oncogene. La om produc leucemiile iar la animale leucozele - boli cu evoluie cronic deoarece virusurile fac parte din categoria virusurilor temperate. Din aceeai familie face parte virusul care produce anemia infecioas la cabaline i deasemenea virusul HIV care produce SIDA la om. Familia Rabdoviridae cuprinde virusuri alungite asemntoare unui cartu, avnd dimensiuni de 100 -150 m i genom ARN monocatenar. Din aceast familie face parte virusul turbrii, care se transmite prin muctura sau zgrietura unui animal infectat. Cu ct muctura este mai aproape de cap cu att pericolul este mai mare iar perioada de incubaie mai mare. Familia Ortomoxoviridae cuprinde virusuri sferice de 90-100 m cu genom ARN monocatenar, virusuri ce produc gripele la om iar la animale influena.

16

Cap II. PROCARYOTOLOGIE

Regnul Procaryota, cuprinde microorganisme unicelulare

caracterizate prin lipsa membranei nucleare, nucleul fiind liber n citoplasm, de aspectul unui nucleu difuz. Denumirea vine de la protos primul i carios - nucleu (greac). Procariotele sunt microorganismele cele mai rspndite n natur. O parte dintre ele Photoprocaryota. Photoprocaryotele cuprind lumea plantelor fotosintetizatoare fiind dependente de energia luminoas. Scotoprocaryotele cuprind 3 clase : Mollicutes, Rickettsia , Bacteria triesc i se dezvolt la nivelul altor organisme vii. Regnul se mparte n dou subregnuri i anume : Scotoprocaryota i

2.1 Clasa Bacteria

2.1.1 au Caractere generale organizare celular , unitatea morfofuncional fiind celula

bacterian sau protoplastul ce este lipsit de reticul endoplasmatic i mitocondrii iar nucleul conine un singur filament de ADN ce este i singurul cromozom al bacteriilor. Din punct de vedere genetic sunt haploide. Bacteriile apar ca celule active sau vegetative ns la unele specii exist alternan ntre forma vegetativ i o form latent sau inactiv numit spor bacterian.

Bacteriile au o structur chimic complex i conin ambii acizi nucleici: ADN n genom i ARN n citoplasm. De asemenea n compoziia chimic mai intr proteine, glucide, lipide, sruri minerale.

17

 Bacteriile conin un bogat echipament enzimatic, au componentele propii, capacitate de cretere i

metabolism capacitate

propiu adic au capacitatea de a-i produce energie,de a-i sintetiza independent de nmulire, Bacteriile pot fi distruse de bacterofagi , prezint sensibilitate fa de antibiotice, au o specificitate ridicat din punct de vedere al stucturii chimice i al manifestrilor patologice. Fixarea bacteriofagilor este mijlocit i condiionat de existena receptorilor de membran. Se nmulesc prin diviziune direct ,deci o nmulire asexuat cu o rat mai mare de multiplicare. Unele speciii se pot nmuli i printr-o form primitiv de nmulire sexuat ( prin conjugare). Dup modul de nutriie, majoritatea bacteriilor sunt heterotrofe ( folosesc ca surs de carbon diferite substane organice). Un numr restns de bacterii sunt autotrofe chimiosintetizante, utiliznd ca unic surs, carbonul din mediu. Bacteriile sunt rspndite peste tot ,att n medii inerte (ap, sol, aer ) fiind numite bacterii saprofite ct i n organisme fiind numite bacterii parazite. 2.1.2 Morfologia bacteriilor Dimensiunile se msoar n microni i n general bacteriile msoar 0,3-15 diametrul longitudinal i 0,1-1,5 diametrul transversal. Aceste dimensiuni le fac observabile cu microscopul optic. Forma bacteriilor poate fi ncadrat n 4 tipuri fundamentale : - grupa cocilor - cele rotunde - grupa bacililor -cele alungite ,sub form de bastonae - grupa vibrionilor - cele sub form de virgul sau forma literei S
18

- grupa spirochetelor cele spiralate ,filamentoase n funcie de modul de grupare a celulelor bacteriene n procesul de diviziune , apar anumite gruprii, ca de exemplu: gruparea diplo cte dou bacterii: diplococi ,diplobacili; gruparea strepto bacterii aezate n lan: streptococi , streptobacili; gruparea stafilo bacterii aezate n ciorchine: stafilococi; gruparea palisad specific bacililoraezai paralel asemntor degetelor de la mn Vibrioni i spirochetele nu se grupeaz, ele rmn celule solitare, izolate. 2.1.3 Structura Din punct de vedere structural avem stuctur celular. La unele specii pariental (membrana celular) i coninutul

exist i structur extrapariental, considerate particulariti. Structura pariental sau membrana celular , d forma celulei i confer acesteia rezistena necesar la aciunea factorilor externi. Este o structur rigid nedeformabil Stratul bazal, identic i reprezint 30% din greutatea format dintr-un n asigurarea celulei . Acest perete celular prezint 2 straturi: chimic la toate bacteriile, fiind polimer denumit peptidoglicon sau murein implicat rezistenei mecanice a peretelui celular; Stratul superficial,alctuit din proteine, glucide, lipide, diferite cantitativ n funcie de grupa de bacterii. Structura acestui strat confer celulei bacteriene diferite proprieti , cea mai important fiind cea legat de afinitile tinctoriale adic posibilitatea de colorare a acestora cu diferii colorani. Astfel bacteriile care se coloreaz prin coloraia Gram se impart n dou grupe distinctive i anume: Gram pozitive i Gram negative. La bacteriile Gram pozitive in structura stratului superficial predomin polizaharidele, celelalte componente (lipide i proteine )
19

fiind n cantiti reduse astfel c stratul bazal este mai gros dect stratul superficial. n schimb, la cele Gram negative se constat c stratul superficial este mai bogat n lipoproteine, n dauna stratului glucidic, astfel c la aceste bacterii stratul bazal este mai subire comparativ cu cel superficial. Exist un grup de bacterii, denumite acido-aloolo-rezistente la care n stratul superficial predomin componenta lipidic, astfel c acest grup de bacterii nu pot fi colorate prin metoda Gram fiind necesar o coloraie special (Ziehl Neelson). De remarcat faptul c sub aciunea unor factori externi, peretele celular al bacteriilor poate fi lizat parial sau total cnd se numesc sferoplati sau protoplati. Sferoplatii pierd numai o parte din peretele celular (i pstreaz fraciunea lipidic), astfel c atunci cnd factorul declanator dispare, peretele celular se reface. Ei sunt caracteristici pentru bacteriile Gram negative i acido-alcoolo-rezistente. n schimb protoplatii i pierd n totalitate peretele celular, astfel c sunt lipsii de afiniti tinctoriale, n schimb i pstreaz metabolismul celular iar diviziunea este foarte lent. Ei sunt specifici Gram pozitivilor care dealtfel sunt foarte sensibile la antibiotice (penicilina). Conintul celular Sub peretele celular se afl membrana citoplasmatic ce delimiteaz citoplasma. Are numeroase invaginaii, numite mezozomi, locul n care se concentreaz enzimele cu rol n respiraie i n metabolismul energetic. Coninutul celular este alctuit din citoplas i materia nuclear. Citoplasma este un sistem coloidal complex format din proteine, glucide, lipide, sruri minerale i ap. Conine numeroase organite citoplasmatice, dintre care mai importante sunt ribozomii. Acetia conin ARN 65% iar restul substane proteice. Ribozomii reprezint sediul sintezei proteinelor celulare. De asemenea conine Mg, care
20

este legat de acidul nucleic formnd ribonucleatul de Mg, cu rol n afinitile tinctoriale. Materia nuclear reprezint de fapt nucleul care la bacterii nu este delimitat de membran nuclear. Are aspect granular sau filamentos i este alctuit reprezint din ADN dublu catenar,ce este ncolcit. Acesta singurul cromozom al bacteriilor i include ntreaga

informaie genetic. Materia nuclear are rol de a controla toate procesele vitale ,inclusiv sinteza componentelor proteice cu rol de enzime. La unele bacterii exist i ADN extra cromozomial sau ADN citoplasmatic numite plasmide. Structuri capsula i cilii. Capsula este un nveli celular cu rol n aprare i din punct de vedere chimic conine polizaharide conferiindu-i astfel un aspect mucos, gelatinos. La bacteriile parazite capsula se formeaz dup ce acestea au ptruns n organism i au rolul de a apra bacteriile de aciunea anticorpilor i fagocitelor. Cilii sunt organite de micare i apar la bacteriile mobile (vibrionii i spirochetele). Apar ca formaiuni filamentoase, fiind dispui la surafaa membranei celulare.Dup numrul i poziia lor exist: -bacterii monotriche ( un singur cil ) -bacterii amfitriche (2 cili dispui la poli ) -bacterii lofotriche ( mai muli cili grupai la un pol ) -bacterii membranei celulare) Originea lor este n citoplasm n aa numitul bleferoplast. peritriche (cili dispui pe toat suprafaa extraparientale Sunt prezente doar la unele bacterii ,dintre care amintim

21

Sporul bacterian

apare

ca o particularitate bacterian apare

la unele

bacterii i

reprezint o trecere a bacteriei de la starea vegetativ ntr-o stare latent de anabioz. Sporul peretele celular astfel numai la bacili i n c se special la cei de dimensiuni mari i Gram pozitivi. Aceste bacterii n au fraciunea lipidic foarte redus astfel deshidrateaz foarte uor n condiii de uscciune , fiindu-le periclitate existent. Acest proces de transformare se numete sporogenez i se desfoar treptat. Morfologic , sporul devine oval sau rotund , dimensiunile sunt mult mai mici (1-2 microni ). Se produce o deshidratare i o concentrare a structurilor bacteriei ( citoplasma prezint numeroase granulaii, membrana citoplasmatic este groas ,dens i lipsit de pori ). Membrana celular i pstreaz stratul bazal format din glican ns stratul superficial se densific i i pierde permeabilitatea , sporul fiind astfel izolat de mediu . Din punct de vedere funcional , se constat o lips a activitii metabolice , de asemenea lipsa multiplicrii. Crete rezistena la aciunea diferiilor factori de mediu : variaii de temperatur Exist , uscciune , substane chimice , etc, astfel sporul n celula bacterian reprezint o form de conservare a speciei n timp. mai multe tipuri de spori : liberi i integrai vegetativ, existnd spori care nu deformeaz celula (sporii genului Bacillus ) i spori care deformeaz celula bacterian (sporii genului Clostridium ). Unii pot fi situai central (sporii de B.anthracis) iar alii terminal (sporii de Clostridium tetani).

22

2.1.4 Fiziologia multiplicarea.

bacteriilor

cuprinde

metabolismul

bacterian i unui

Metabolismul bacterian echipament activitate . enzimatic foarte

este posibil datorit complex

existenei

care controleaz ntreaga

2.1.4.1 Enzimele bacteriene sunt reprezentate de proteine funcionale i au att un rol plastic ct i energetic, asigurnd 3 procese eseniale . -scindarea macromoleculelor n molecule mai mici care pot trece prin porii peretelui celular (nutrieni bacterieni) -asigurarea substratului metabolice . -sinteza componentelor celulare din substane simple . Clasificarea enzimelor se face n funcie de raportul acestora cu celula bacterian, de viteza lor de aciune i de procesele biochimice pe care le intemediaz . 1.Dup raportul cu celula bacterian exist 2 tipuri de enzime : exoenzime i endoenzime . Exoenzimele dei sintetizate n interiorul celulei , acioneaz n afara acesteia scindnd macromoleculele din mediu n substane simple accesibile bacteriei . Se mai numesc i hidrolaze . Endoenzimele sintetizate tot n interiorul celulei nu difuzeaz niciodat n mediul nconjurtor. 2.Dup viteza de aciune , enzimele se mpart n: Constitutive,fiind prezente constant n celule , avnd o vitez rapid de aciune unde dealtfel i acioneaz ,asigur att anabolismul ct i catabolismul bacterian i energetic necesar ntregii activiti

23

Adaptative, sintetizate de celule doar cnd acestea vin n contact cu un anumit substrat , asigurnd astfel o adaptare a bacteriilor la diferite substraturi. Viteza lor de aciune este mult mai lent . 3. Dup procesele chimice pe care le intermediaz avem : Hidrolaze: care asigur o desfacere a compuilor chimici compleci n substane simple cu fixarea unei molecule de ap . Ele sunt exoenzime iar n funcie de substratul pe care l hidrolizeaz avem proteaze ,glucidaze , esteraze, glucoproteinaze, etc. Desmolaze: sunt endoenzime catabolice de desfacere a unor legturi chimice ,de obicei ntre doi atomi de carbon , cu eliberare de energie. Din aceast cauz se mai numesc i enzime respiratorii . Hidrogenaze: sunt endoenzime care activeaz hidrogenul molecular de la un donator i l transport la un acceptor. Oxidaze: sunt principalii acceptori de oxigen i apar la unele bacterii. 2.1.4.2 Nutriia la bacterii Fiecare tip de bacterii trebuie s-i identifice desfurri sursa de carbon proprii a metabolismului i azot pentru energetic a-i necesar de sintetiza bunei substanele macrostructurile i suportul

propriu. n funcie

nutritive folosite bacteriile se grupeaz n 4 grupe i anume : -bacterii autotrofe -bacterii heterotrofe -bacterii mixotrofe -bacterii auxotrofe Bacteriile autotrofe Folosesc ca surs utilizeaz ca substane nutritive substanele minerale sau organice asemnndu-se cu plantele. de carbon dioxidul de carbon iar ca surs de azot compui minerali ai acestuia (amoniac, nitrii, nitrai). Astfel aceste bacterii pot sintetiza substane organice producnd biomas i sunt extrem de rspndite n natur (ap, sol ) fiind nepatogene.
24

Au un rol

important n

circuitul materiei

n natur. Energia prin oxidrile

necesar proceselor de sintez sulfotrofe , ferotrofe .

este procurat

compuilor minerali ai N, Fe, S, etc. existnd astfel bacterii nitrotrofe , Bacteriile heterotrofe folosesc ca surs nutritiv i energetic compuii organici pe care i gsesc n mediul de via. Aceste substane organice sunt descompuse prin hidroliz de unde rezult

molecule simple , mici ce pot fi absorbite prin membrana celular. Aceste bacterii se gsesc pretutindeni unde exist suport organic ,numite din aceast cauz bacterii saprofite. Ele au un rol important n natur, deoarece descompun materia organic moart i repun n circuitul natural substane minerale . O parte din bacteriile heterotrofe triesc n diferite organisme ,fiind bacterii parazite i produc nbolnviri ,fiind deci patogene . Bacteriile mixotrofe folosesc ca surs nutritiv i energetic att substane organice ct i substane anorganice. Din aceast categorie fac parte bacteriile fixatoare de azot care utilizeaz ca surs de azot, azotul anorganic, iar ca surs de carbon substane organice hidrocarbonate . Bacteriile auxotrofe sunt acele bacterii care pentru dezvoltare i nmulire cretere. 2.1.4.3 Respiraia la bacterii este reprezentat de orice tip de reacie biochimic eliberatoare de energie. Acest proces de respiraie const ntr-un ir de reacii de oxido-reducere din cantitate nsemnat de energie. Esena procesului de respiraie la bacterii const n preluarea H2 obinut din reacii catabolice a unor substraturi cu ajutorul
25

au nevoie

de substane

speciale

denumite factori de

care rezult o

hidrogenazelor i cedarea lui unui acceptor de hidrogen care poate fi oxigenul sau alte substane chimice. n funcie de acceptorul de hidrogen exist dou tipuri de respiraie: aerob i anaerob. Respiraia aerob: apare la majoritatea bacteriilor care folosesc oxigenul molecular ca acceptor de hidrogen care poate fi oxigenul atmosferic sau oxigenul obinut din catabolismul diferitelor substraturi. Referitor la mecanismul producerii respiraiei aeroben hidrogenul obinut prin dehidrogenarea unor substraturi este preluat iniial de enzimele respiratorii denumite citocromi i cedat oxigenului acceptor care este activat de oxidaze. Din aceast combinaie rezult peroxidul de hidrogen care n foarte scurt timp este descompus de peroxidaze n ap i oxigen cu eliberarea unei mari cantiti de energie. n funcie de cantitatea de oxigen pe care o necesit, bacteriile aerobe se mpart n : Bacterii strict aerobe care necesit o mare concentraie de oxigen n mediu aproximativ egal cu cea din aer (21%); Bacterii aerobe care necesit concentraii mai mici de oxigen putnd trii i n medii cu o concentraie de peste 1% oxigen Bacterii facultativ anaerobe care se pot adapta i trii i n mediul n care cantitatea de oxigen scade foarte mult putnd lipsii chiar. Respiraia anaerob: apare la un numr restrns de bacterii iar respiraia se desfoar n absena oxigenului. Procesul respirator const n acceptarea hidrogenului obinut de ctre alte substane fie anorganice ( nitrii, nitrai, sulfai) fie organice ( acidul ascorbic, aminoacizi). Aceste bacterii nu pot folosii oxigenul deoarece sunt lipsite de enzime respiratorii (citocromi, oxidaze i peroxidaze) astfel c pentru aceste bacterii oxigenul atmosferic este duntor.

26

2.1.4.4 nmulirea la bacterii: avnd n vedere metabolismul intens i procesul de nmulire este rapid. Dup modul de multiplicare bacteriile au o nmulire asexuat i foarte rar apare nmulirea sexuat numit conjugare. nmulirea sexuat se realizeaz prin diviziune direct i nmugurire. Diviziunea direct numit i sciziparitate sau bipartiie apare la majoritatea bacteriilor. Acest proces const n formarea din celula mam a dou celule fice identice. Exist dou modaliti: prin trangulare la mijlocul celulei se produce o invaginaie a peratelui celular urmat de desprinderea celulelor fice prin sept transversal format la mijlocul celulei Fiecare celul nou format conine cantiti egale de constitueni celulari. ntotdeauna, iniial are loc replicarea ADN-ului adic o dublare a cantitii de ADN i separarea n cele dou mase nucleare. Diviziunea prin nmugurire - apare la unele bacterii (Actinomycetes) i const n formarea unui mugur pe celula mam, mugur n care migreaz constituenii celulari, acesta crete, dimensiune se desprinde. Viteza de multiplicare este determinat genetic i depinde de specia bacterian. n medie viteza de multiplicare este de 20-30 minute cu limite minime de 9 minute i maxime de 3-4 ore. Viteza de multiplicare este dependent de anumii factori de mediu cum ar fii: temperatura, umiditatea , pH-ul, poluarea mediului cu alte microorganisme,etc. Din aceast cauz studierea ritmului de multiplicare i dinamica multiplicrii se efectueaz pe medii de cultur artificiale rezultnd culturi pure. ntr-un astfel de mediu artificial procesul de multiplicare trece prin patru faze diferite ntre ele i anume:
27

iar cnd ajunge la o anumit

I.Faza de adaptare dureaz din momentul nsmnrii mediului pn n momentul multiplicrii. ncepe n aceast faz o dezvoltare, o cretere a celulelor bacteriene. Exist numai celule tinere, foarte sensibile la condiiile de mediu, deaceea trebuie s se asigure condiii de dezvoltare optime. Durata acestei faze este variabil n funcie de specie, de la cteva zile ( genul Mycobacterium) la cteva ore (2-3 ore). n aceast faz numrul celulelor bacteriene corespunde cu numrul celulelor nsmnate. II.Faza de multiplicare activ- ncepe din momentul cnd celulele devin mature, capabile de diviziune, iar succesiunea generaiilor este foarte rapid. Aceast faz dureaz, ntre 6 24 ore iar numrul de celule bacteriene atinge o valoare maxim, caracteristic fiecrei specii i se numete concentraie maxim. Caracterele culturale ale unei specii bacteriene, se verific n aceast faz. III.Faza staionar- cupride intervalul de timp n care n cultur se menine un numr constant de celule bacteriene. Ritmul de multiplicare este mai lent, doar de nlocuire a celulelor moarte, iar durata acestei faze este echivalent cu cantitatea de substrat nutritiv existent ntr-un mediu (1-2 sptmni). IV.Faza de declin este rezultatul epuizrii substratului nutritiv din mediu i intoxicrii acestuia cu produi de dezasimilaie, iar numrul de celule bacteriene scade sub concentraia maxim. Multiplicarea se reduce, nu se mai asigur nlocuirea celulelor bacteriene moarte, astfel c avem o dominan a celulelor moarte. Excepie fac speciile de bacterii capabile de sporulare care n condiii nefavorabile de mediu vor sporula, iar rensmnate n medii proaspte se vor reface. Durata acestei faze este extrem de variabil de la 2-3 sptmni, la ani de zile la speciile sporulate.

28

2.1.5 Influena factorilor de mediu asupra bacteriilor. Temperatura: variaiile de temperatur influeneaz bacteriile. Fiecare specie bacterian are o anumit toleran termic cumprins ntre dou valori: temperatur minim letal i temperatur maxim letal, iar ntre aceste dou praguri de toleran exist valori termice care permit multiplicarea bacteriilor numite temperaturi de dezvoltare. n funcie de valoarea acestor temperaturi de dezvoltare, de multiplicare bacterian ,avem: 1. Bacterii criofile care se pot multiplica ntre 100C i 300C iar optimul termic este ntre 15-200C. Sunt bacteriile saprofite cu habitat n sol, ap i uneori ajung pe elemente de origne vegetal sau animal ce sunt conservate prin frig. 2. Bacterii mezofile cu limite de dezvoltare ntre 10-400C optimul termic de dezvoltare fiind ntre 25-370C. unele bacterii din acest grup sunt saprofite iar altele sunt parazite pentru animalele homeoterme. 3. Bacterii termofile se dezvolt ntre 40-600C cu un optim termic de multiplicare 50-550C. Bacteriile din acest grup sunt dotate cu ns i n unele alimente (lapte, enzime termostabile i triesc n sol, ape termale, ap de canal, platforme de gunoi, n silozuri, produse lactate, conserve, etc.). Unele bacterii termofile sunt utile omului fiind folosite n industria laptelui. 4. Bacteriile termorezistente se dezvolt la temperaturi de peste 650C i se ntlnesc n unele izvoare termale. 2.1.6 Sistematica bacteriilor: Exist numeroase ncercri de clasificare teoretic n taxoni superiori genului (familie, ordin) dar fr aplicativitate practic, asfel c dpdv practic toate bacteriile sunt clasificate n genuri i specii, existnd i
29

taxoni inferiori i anume subspecia sau tipul care ine seama de un singur caracter comun. Gruparea bacteriilor se face dup form i coloraie COCI,GRAM POZITIVI 1. Genul Staphylococcus grupate n ciorchine, cu dimensiuni de 1, imobili, necapsulai i nesporulai, aerobi. Se dezvolt uor pe medii uzuale dar pentru diferenierea lor de alte bacterii se cultiv pe medii hiperclorurate (bacterii halofile). Ca specii mai importante amintim: S.saprophiticus larg rspndit n natur, nepatogen S. aureus specie patogen ce produce infecii purulente (abcese, flegmoane) 2.Genul Streptococcus cu prinde bacterii de form rotund sau oval, cu dimensiuni de 1-2 , grupai n lanuri. Sunt nesporulai, neciliai, unele specii sunt capsulate. Se cultiv pe medii cu ser sau snge cnd produc hemoliz (steptococi hemolitici patogeni pentru oameni i animale). Sunt i streptococi nepatogeni, nehemolitici, sau streptococi saprofii, numii i streptococi lactici, sau exist streptococi comensali care n anumite condiii pot devenii patogeni provocnd amigdalite, faringite. n tubul digestiv , mai ales n intestin se gsesc streptococi denumii fecali, doarece se elimin prin fecale, care dac ajung pe alimente le pot contamina. Ca specii mai importante amintim: Str. zooepidermicus produce infecii purulente locale (faringite, amigdalite) Str.equi produce gurma mnzului Str.pyogenes produce la om infecii purulente iar toxina ei este responsabil de producerea scarlatinei Cuprinde bacterii de form rotund

30

COCI GRAM NEGATIVI Aceast grup de bacterii cuprinde un numr redus de specii, unele fiind patogene pt. om i amintim : Genul Nisseria cu dou specii: N. gonoreea cu localizare la nivelul mucoasei organelor genitale producnd o boal veneric numit gonoreea sau blenoragia N. meningitides localizat la nivelul mucoasei bucale, dar care prin nmulire excesiv ajunge la sistemul nervos central i produce meningit. BACILI GRAM POZITIVI, SPORULAI, AEROBI Genul Bacillus-cuprinde peste 50 specii de bacterii de form alungit, sporulai, aerobi, unele specii fiind capsulate i mobile. Specii mai importante: B. anthracis ce produce la om i animale antraxul. Este un bacil mare 4-6 , grupat strepto, este capsulat, sporulat i neciliat. n mediu extern se gsete sub form de spori, iar n organism n form vegetativ. Se nmulete extrem de rapid fiind cea mai virulent bacterie producnd septicemie. Sporii sunt ovali situai central n celul cu diametrul egal cu diametrul celulei. Rezist n mediu, mai ales n sol zeci de ani. Exist i specii saprofite, utile omului cum ar fii : B.brevis utilizat n producerea de antibiotice (polimixina). Alte specii sunt utilizate pe scar industrial n producerea unor enzime ( amilaze, proteaze), folosite n industria uoar. Totui exist specii saprofite de Bacillus care dac ajung n contact cu unele produse alimentare le altereaz (B.macerans)

31

BACILI GRAM POZITIVI SPORULAI ANAEROBI Genul Clostridium - ce sunt adaptai la condiii de anaerobioz. Au spori de dimensiuni mai mari care deformeaz celula i sunt localizai subterminal sau terminal. Patogenitatea celor mai multe specii din acest gen se datoreaz toxinelor eliminate, fiind considerate specii toxigene. Cele mai importante specii: Clostridium botulinum: bacil mare de aproximativ 2-10 , necapsulat, ciliat i sporulat. Este o bacterie saprofit n sol unde se gsete sub form de spori iar dac ajunge pe furaj sau alimente, n condiii de anaerobioz (silozuri, conserve), devine form vegetativ, se nmulete rapid i secret o toxin extrem de puternic ce produce n urma consumului o boal mortal: botulismul. Clostridium tetani bacil lung 2-5 , necapsulat, ciliat i sporulat, cu spori mari aezai terminal (aspect de picot). n sol se gsete sub form de spori ce rezist zeci de ani. Ajungnd ntr-un organism animal la nivelul unor plgii (rni adnci), sporii ntlnind condiii de anaerobioz se transform n forme vegetative,cu o multiplicare rapid i elimin o toxin foarte puternic care se propag pe cale nervoas producnd nepatogene, saprofite tetanosul. Exist i specii de Clostidium care dac ajung pe alimente de origine

animal (n special carne) le altereaz. Din aceast cauz controlul bacteriologic al alimentelor v-a cuprinde i depistarea germenilor din genul Clostridium ca indicator igenico- sanitar al alimentelor. BACILI GRAM POZITIV NESPORULAI Marea majoritate sunt speci nepatogene saprofite. Genul Lactobacillus cu specii ce se difereniaz ntre ele prin valoarea temperaturii de dezvoltare (mezofile, termofile) i prin spectrul enzimatic fa de glucide i polialcoli. Cele mai importante sunt speciile care
32

fermenteaz lactoza din lapte fiind utilizate n industria laptelui: L. lactis, L. acidophilus, L bulgaricus, etc. Exist un numr restrns de specii de lactobacili saprofii care triesc n intestinul animalelor (inclusiv la om) unde alturi de alte bacterii formeaz microbiocenoza intestinal, foarte important i indispensabil n finalizarea proceselor de digestie. BACILI GRAM NEGATIVI Genul Escherichia cu specia E.coli sau colibacilul care are ca habitat principal intestinul gros la mamifere i psri, unde se comport ca o bacterie comensal. Se elimin n mediu odat cu fecalele i poate ajunge n organism odat cu apa sau hrana. Este o bacterie condiionat patogen putnd produce tulburri grave digestive (colibaciloze) mai ales la tineretul debil. E.coli msoar 2-5 este nesporulat, necapsulat dar ciliat. Se dezvolt cu uurin pe medii uzuale, are o puternic activitate fermentativ, produce indol dar nu produce H2S Genul Salmonella cuprinde un numr mare de specii, toate fiind patogene pentru mamifere i psri. Morfologic i cultural se aseamn cu E.coli, diferenierea const n aceea c nu fermenteaz lactoza, nu produce indol, dar produce H2S. Produc boli grave numite salmoneloze i toxiinfeci alimentare. Genul Proteus cuprinde bacterii foarte rspndite cu habitat intestinal, ns cu o mare rezisten n mediu extern. Acet gen cuprinde specii condiionat patogene. Rolul lor n natur este deosebit deoarece intervin n procesele de putrefacie a materiei organice (puternic activitate proteolitic). Dpdv morfologic au aspect polimorf, cocibacilar sau filamentos, sunt nesporulai, necapsulai i ciliai fiind cea mai mobil bacterie cu dispunere peritrich a cililor. Pe medii de cultur produc o adevrat invazie sub aspectul unor valuri caracteristice ( fenomenul de

33

crare sau roire). Ca specii amintim P.vulgaris ce poate produce la om i animale toxiinfecii alimentare. BACILII ACIDO-ALCOLO-REZISTENI Genul Mycobacterium bacterii ce prezint n structura peretelui celular o dominan a componentei lipidice (60%), fapt ce nu permite colorarea lor prin metoda gram fiind necesare metode speciale de colorare. Morfologic sunt bacili de 1-4 , neciliai, nesporulai i necapsulai. Se dezvolt doar pe medii speciale de cultur n care se introduc factori de cretere. M.tuberculosis sau bacilul Koch responsabill de producerea tuberculozei la om i animale. Exist trei tipuri: uman, bovin i aviar. Omul se contamineaz att cu tipul uman, ct i cu tipul bovin. Bovinele doar cu tipul bovin, la fel psrile doar cu tipul aviar, iar cinele cu tipul bovin i uman. M.paratuberculosis este patogen doar pentru taurine, localizat la nivelul mucoasei Intestinale, induce o boal grav paratuberculoza. M. leprae este patogen doar la om i produce lepra. Exist un grup aparte de bacili ncadrai n grupa actinomicetelor, care din punct de vedere morfo-funcional fac trecerea de la bacterii spre ciuperci. Asemnarea cu bacteriile const n faptul c au organizarea de tip procariot, iar cu ciupercile se aseamn prin dispunerea radial, cap la cap a celulelor, cu multe ramnificaii ca un miceliu. Deasemenea nmulirea se realizeaz prin nmugurire sau fragmentare celular n pri egale care apoi se desprind genernd celulele noi. Aceste fragmente se numesc artrospori. Sunt germeni nesporulai, necapsulai i neciliai. Se

34

coloreaz Gram pozitiv. Cele mai importante specii sunt acelea care produc antibiotice. Genul Streptomices cu speci ca S. griseus care produce streptomicina, S. aurefaciens care produce aureomicina. Genul Actinomyces - cu specii patogene pentru om i animale, A. bovis care produce actinomicoza manifestat prin procese tumorale maxilarului la bovine. ale

Cap III. MICOLOGIE

Din ncrengtura Mycetes, fac parte ciupercile ce aparin regnului vegetal fiind eucariote, deci au nucleu cu membran nuclear. 3.1 Caractere generale: Dei ciupercile sunt nc ncadrate n regnul vegetal, avnd o organizare celular de tip eucariot se deosebesc de plante prin lipsa clorofilei. Unitatea morfofuncional se numete tal ce poate fi uni sau pluricelular. Talul reprezint partea vegetativ i asigur nutriia, creterea i dezvoltarea. Pe lng partea vegetativ exist i aparat de reproducere denumit aparat sporifer. Celulele care asigur nmulirea se numesc spori i pot fi asexuai sau sexuai. Nutriia, este de tip heterotrof, existnd un bogat echipament enzimatic. Marea majoritate sunt specii saprofite contribuind la circuitul materiei n natur, alturi de bacterii. Au o bogat capacitate enzimatic, fermentativ, producnd n special fermentaia alcoolic. Exist un numr restrns de specii saprofite, productoare de antibiotice (genul Penicillium). Deasemenea exist i specii parazite, cu parazitism obligatoriu, producnd boli grave denumite micoze
35

localizate fie pe piele (dermatomicoze), fie n organele interne ( micoze viscerale). Exist dou mari grupe de ciuperci: Archimicetes sau ciuperci primitive, parazite doar la plante i Eumicetes ce cuprinde ciupercile evoluate. 3.2 Morfologia la Eumicetes Eumicetele se clasific n dou grupe distincte: Ciuperci unicelulare, denumite levuri sau drojdii Ciuperci pluricelulare , deumite ciuperci filamentoase sau mucegaiuri

3.2.1 Ciupercile unicelulare sunt ciuperci holocarpice (nu au aparat reproductor distinct). Unitatea morfofuncional o reprezint talul unicelular, de aspect rotund, oval sau piriform, cu dimensiuni variabile de la 2 - 50 , iar membrana celular este groas nedeformabil, bogat n chitin (un polizaharid complex). Sub membrana celular se gsete membrana citoplasmatic ce reprezint sediul unui bogat echipament enzimatic. Citoplasma este vacuolar i conine numeroase organite celulare: mitocondrii, ribozomi, reticul endoplasmatic, aparat Golgi. Nucleul este de tip eucariot, compact i nvelit de membrana nuclear. Celulele triesc n mod normal izolat, dar n anumite situaii n procesul de nmulire, celulele fice se pot aeza cap la cap, formnd un pseudomiceliu. n condiii nefavorabile de mediu, levurile pot trece la un mod de via latent, asemntor procesului de sporulare de la bacterii, i se denumesc clamidospori. 3.2.2 Ciuperciple pluricelulare sau eucarpice (au aparat reproductor separat de tal). Talul este alctuit din filamente lungi, ramnificate i mpletite ntre ele, denumite hife, iar totalitatea acestora formeaz miceliu. Hifele pot fi de dou feluri:

36

hife neseptate, de aspectul unor celule cu mai muli nuclei (ntre celulele ce alctuiesc hifele nu exist membrane despritoare) hife septate, fiecare celul are un singur nucleu, ntre ele celulele fiind desprite de septuri transversale ce prezint pori de comunicare pentru citoplasm. Membrana celular n ambele cazuri este rigid i nedeformabil,

conine chitin i substane pectice. Membrana citoplasmatic este subire i neted, iar ntre peretele celular i ea se afl un spaiu plin cu un lichid numit micolimf, cu rol n rezistena peretelui celular. Nutriia este de tip heterotrof, ciupercile fiind dotate cu un bogat echipament enzimatic, cu activitate hidrolitic descompunnd substane organice din mediul de via, n substane simple care apoi vor fi asimilate de celul pentru sinteza componentelor proprii. Principala activitate enzimatic a ciupercilor este fermentarea glucidelor, utilizat de altfel de om n diferite procese biotehnologice industriale cum ar fi fermentaia alcoolic, acetic, citric sau n scopul obinerii unor enzime pe scar industrial (amilaza, polimeraza, proteaza) folosite ulterior n industria textil, alimentar, farmaceutic, etc. 3.3 Respiraia la ciuperci poate fi de tip aerob sau anaerob, mecanismul fiind asemntor cu cel al bacteriilor. 3.4 nmulirea este diversificat i complex, existnd att o form de nmulire asexuat, ct i sexuat. Dup modul de nmulire, ciupercile se clasific n 4 clase: Phycomycetes Ascomycetes Bazidiomycetes Deuteromycetes Primele trei clase cuprind ciuperci care au o nmulire att asexuat, ct i sexuat i sunt considerate ciuperci perfecte iar ultima
37

clas cuprinde ciuperci cu nmulire doar asexuat fiind considerate ciuperci imperfecte. n general nmulirea asexuat este predominant la ciuperci, dar poate aprea i o nmulire sexuat atunci cnd condiiile de mediu sunt nefavorabile sau atunci cnd este necesar revigorarea genetic. Excepie fac ciupercile din clasa evoluate ciuperci. Ciupercile exist ca Bazidiomycetes la care organisme haploide (n domin forma de nmulire sexuat i sunt considerate ca cele mai cromozomi) dar n faza de nmulire sexuat, pentru un scurt timp exist i o faz diploid (2n cromozomi). Celulele care asigur nmulirea la ciuperci se numesc spori i pot fi asexuai rezultai dintr-o diviziune direct sau indirect, sau pot fi sexuai cnd rezult din procesul de fecundaie. 3.4.1 nmulirea asexuat nmulirea vegetativ: echivalent cu butirea la plante, apare doar la ciupercile filamentoase (mucegaiuri) i const ntr-o fragmentare a hifelor ce se desprind i dac ajung n condiii optime de via formeaz un nou miceliu, printr-o nmulire succesiv a celulelor terminale. nmulirea prin nmugurire: se realizeaz prin diviziune direct i const n apariia la suprafaa celulei mam a unor muguri (celule fice ) care cresc i se maturizeaz dup care se desprind de celulele mam, devenind independente. Acest mod de nmulire apare cu precdere la levuri iar celulele fice se numesc blastospori. Uneori acest tip de nmulire poate aprea i la mucegaiuri ns mugurii se formeaz fie n vrful hifelor, fie lateral, sunt fici i nu se desprind de celula mam dect prin ruperea hifelor nmugurite. Mugurii n acest caz se numesc aleuspori.

38

nmulirea prin fragmentarea hifelor: se realizeaz printr-o segmentare egal i fiecare segment se ncojoar de perete celular, devenind celule independente denumite artrospori i apar numai la mucegaiuri. Aceste forme de nmulire asexuat apar la ciupercile imperfecte iar sporii se formeaz direct pe tal. nmulirea prin intermediul unui aparat sporifer Acest aparat reproductor se numete aparat sporifer sau corp de fructificaie, i apare ca o prelungire a hifei iar celulele terminale prin diviziuni succesive formeaz spori asexuai, care n funcie de aezarea pe corpul de fructificaie pot fi endo sau exospori. Endosporii se formeaz pe corp de fructificaie numit sporangiofor ce prezint n vrf o formaiune sferic denumit sporangie ce cuprinde numeroi spori. Cnd sporii sunt maturi, peretele sporangiei se rupe iar sporii sunt mprtiai. Exosporii numii i conidii se formeaz pe corp de fructificaie denumit conidiofor, iar aezarea conidiilor pe conidiofor este diferit n funcie de specie. Conidiile pot fi mici i se numesc microconidii, sau mari cnd se numesc macroconidii. Acest mod de nmulire apare la ciupercile filamentoase din primele trei clase. Endo i exosporii sunt celule haploide (n cromozomi), ce dau natere la un miceliu tot haploid.

3.4.2 nmulirea sexuat n momentul cnd se iniiaz, unii spori asexuai sau unele celule terminale ale unor hife se difereniaz n gamei sau celule sexuale mascule i femele, capabile de fecundaie. Acest proces de fecundaie presupune mai nti unirea citoplasmei celor dou celule, proces denumit plasmogamie, urmat de unirea nucleilor, proces denumit cariogamie.
39

Rezult un zigot care preia zestrea ereditar a celor dou celule sexuale, iar prin acest amestec se revigoreaz miceliul nou format. n funcie de clas, exist mai mute tipuri de nmulire sexuat. Astfel la clasa Phycomycetes exist dou tipuri: izogamia care reprezint unirea a doi gamei identici dpdv genetic, care provin din corpi de fructificaie de pe aceeai hif iar zigotul format se numete zigospor. anizogamia care reprezint unirea a doi gamei diferii dpdv morfologic i provin din hife diferite iar zigotul format se numete oospor Ascomycetes i Bazidiomycetes forma de nmulire sexuat este mai complex deoarece n procesul de nmulire apare o structur nou denumit miceliu secundar dicariot avnd celule binucleate ( cu 2 nuclei). Aceste celule apar n urma plasmogamiei cu pstrarea celor doi nuclei ai celor 2 gamei participani. Aceste celule binucleate vor da natere la numeroase prelungiri cu formarea de noi hife, iar n celulele terminale din aceste hife are loc cariogamia cu formarea zigotului. La clasa Ascomycetes zigotul se numete asc iar n interiorul ei se formeaz spori de tip endospori numii i ascospori iar la clasa Bazidiomycetes zigotul se numete bazidie iar la nivelul ei se formeaz bazidiosporii n nite invaginaii. 2.5 Clasificarea miceilor n clasificarea lor se ine seama de tipul de nmulire, existnd n fiecare clas att ciuperci unicelulare ct i ciuperci pluricelulare. Ciuperci unicelulare: Genul Saccharomyces face parte din clasa Ascomycetes. Au aspect rotund sau oval i se nmulesc att asexuar prin blastospori ct i sexuat prin ascospori. Cuprinde specii care intervin n procesele de

40

fermentaie, n special cea alcoolic, transformnd zaharurile n alcool etilic i dioxid de carbon. Ca specii mai importante amintim: S.cerevisiae numit i drojdia de bere, utilizat n industria spirtului, a berii, dar i n panificaie pentru dospirea aluatului. S. elipsoideus drojdia de vin utilizat n fermentarea mustului de struguri. Genul Zigosaccharomyces cuprinde aa numitele drojdii de nectar deoarece se dezvolt pe medii foarte bogate n zaharuri (zaharofile). Produc o fermentaie alcoolic de intensitate redus din care cauz produc alterartea unor produse bogate n zaharuri (siropuri, dulceuri, gemuri). Genul Micoderma cuprinde aa numitele drojdii de floare, dezvoltnduse la suprafaa unor lichide alcoolice formnd membrane de suprafa. Aceste specii produc oxidarea alcoolululi etilic n dioxid de carbon i ap astfel c butura i pierde din trie i se altereaz. Exist un grup de levuri condiionat patogene, cele mai importante fcnd parte din genul Candida. Ele printr-o nmulire excesiv devin patogene producnd boli cunoscute sub denumirea de candidoze, ce apar att pe piele ct i pe mucoase . Ciuperci pluricelulare: Genul Aspergillus. Ciupercile din acest gen ascospori. Ca specii mai importante amintim: A.niger de culoare neagr, este o specie bogat n enzime fiind utilizat pe scar industril n producerea amilazei. Deasemenea conine cantiti mari de ergosterol fiind folosit n obinerea vitaminei D. Pe substraturi bogate n zaharuri produce fermentaia citric rezultnd acidul citric ( sarea de lmie). fac parte din clasa Ascomycetes. Asexuat se nmulesc prin conidii iar sexuat prin

41

A. flavus i A. oryzae, de culoare glbuie, se dezvolt pe medii bogate n amidon producnd o uoar fermentaie alcolic ( A. oryzae se utilizeaz pentru a produce sake-ul). Exist specii de mucegaiuri din genul Aspergillus, care dac ajung

ntr-un organism animal produc mbolnviri grave, numite aspergiloze, cu localizare frecvent respiratorie la puii de gin, viei, purcei , animale inute pe aternuturi mucegite. Specia A. flavus dac ajunge pe alimente sau furaje produce o toxin puternic denumit aflatoxina care consumat de om sau animale d intoxicaii grave. Genul Penicillium face parte din clasa Ascomycetes. Morfologic ciupercile din acest gen au un miceliu septat, sporii sunt mici (3-4 ) i colorai n verde sau brun. Asexuat se nmulesc prin conidii iar sexuat prin ascospori. Ca specii mai importante amintim: P.notatum folosit n obinera penicilinei P.album utilizat n industria alimentar la obinerea unor brnzeturi aparte (Camembert, Rochefort). P. glaucum sau mucegaiul comun care se dezvolt pe produse alimentare producnd alterarea acestora (n special untul). Grupa dermatomiceilor Cuprind ciuperci strict patogene care se dezvolt pe piele, uneori pe fanere ( pr, unghii, pene) datorit prezenei unui bagaj enzimatic cheratolitic. Dermatomiceii genurile mai importante sunt: Genul Tricophyton apare sub forma unui miceliu fin, subire i fragil. Asexuat se nmulete prin nmugurire ( mugurii formai se numesc aleurospori). Att hifele ct i sporii se pot dispune n jurul firului de pr (de tip exotrix), fie n interior (endotrix), fie ambele situaii. Boala produs se numete tricofiie i este o antropozoonoz. fac parte din clasa Deuteromycetes iar

42

Genul Microsporium cuprinde specii ce de dezvolt pe pielea din regiunea capului cu predilecie pe obraji i periocular producnd o boal grav numit microsporoza.

Cap IV PROTOZOOLOGIE
ncrengtura Protozoa cuprinde microorganisme ce aparin regnului animal. Denumirea vine de la cuvintele greceti protos- primul i zoon- animal. 4.1 Caractere generale: Protozoarele au organizare unicelular de tip eucariot. Corpul este alctuit dintr-o singur celul care asigur toate funciile vitale. Sunt rspndite n toate mediile de via: sol , ap dar i n alte organisme vii, cu care pot avea relaii de simbioz, comensalism sau parazitism. n ciclul lor biologic protozoarele pot prezenta dou stri diferite: starea vegetativ sau starea de via activ, numite trofozoii i starea nchistat sau de via latent numite i chiti. Pentru
43

protozoarele cu via liber nchistarea este o modalitate de conservare, de supravieuire a speciei n condiii ambientale nefavorabile. n schimb pentru speciile parazite formele nchistate au i rol de rspndire a speciei la alte gazde ( rol de transmisibilitate). Nutriia este de tip heterotrof excepie fcnd protozoarele din genul Euglenoides ce au i nutriie autotrof. nmulirea este predominant asexuat ns exist i specii la care ciclul biologic se deruleaz i prin faze sexuate de nmulire. La unele specii ns nmulirea sexuat apare numai pentru revigorarea speciei dup mai multe serii de nmulire asexuat. n clasificarea protozoarelor se ine seama de prezena sau absena organitelor de micare , existnd protozoare mobile ( Cl. Rizopoda, Cl Flagelata, Cl Ciliata) i protozoare imobile (Cl . Sporozoa) 4.2 Morfologia protozoarelor Forma : la Rizopode celula are forme neregulat deoarece celula nu prezint perete rigid. La celelalte 3 clase forma celular este fix deoarece peretele celular este rigid, nedeformabil fiind sferice rotunde, piriforme, cilindrice, etc. Dimensiunile: se ncadreaz n limite extrem de largi: 0,5 - 800

4.3 Structura: sunt formate din membran, citoplasm, nucleu i organite celulare. Totui exist i unele particulariti de structur i anume:

44

la ciliate, n celul, exist 2 nuclei , diferii dpdv morfologic i funcional fiind astfel dicariote i heterocariote. Un nucleu este mai mare numit macronucleu, cu funcie vegetativ, iar cellalt mai mic numit micronucleu, cu rol n nmulirea sexuat.

la toate protozoarele se gsesc n citoplasm vacuole digestive i vacuole contractile sau pulsatile cu rol n excreie. Protozoarele au tipuri diferite de organite de micare, existnd patru

tipuri: preudopode, cili, flageli, membran ondulant. Pseudopodele apar la rizopode i sunt prelungiri temporare i intermitente ale citoplasmei. Ele se formeaz n direcia de micare. n aceste prelungiri ptrund cureni de citoplasm, asigurnd astfel micarea. Flagelii sunt organite de micare ce apar la flagelate i sunt prelungiri permanente de aspect filamentos. Flagelii i au originea n blefaroplati sau corpusculi bazali iar numrul lor este diferit n funcie de specie. Membrana ondulant apare tot la flagelate cnd alturi de flageli contribuie la micare. Ea apare ca o prelungire fin, transparent a ectoplasmei, delimiteaz celula i se termin liber la polul opus. Clilii apar la ciliate i au originea n blefaroplati i sunt prelungiri permanente ale citoplasmei, sunt subiri i scuri i pot fi dispui pe toat suprafaa membranei sau numai n unele poriuni. 4.4 Nutriia la protozoare este de tip heterotrof , excepie fcnd genul Euglenoides din clasa Flagelata care are o nutriie mixt auto i heterotrof n funcie de condiiile de mediu, nutriia autotrof este posibil datorit prezenei clorofilei. n nutriia de tip heterotrof, marea majoritate a protozoarelor utilizeaz ca nutrieni substane organice moarte pe care le iau din mediul de via i se numesc protozoare saprofage. Un grup de protozoare dup felul nutriiei sunt prdtoare, se hrnesc cu alte
45

vieuitoare (bacterii, alge, protozoare mai mici). Alte protozoare au via strict parazitar i folosesc ca nutrieni substane organice existente n esuturile parazitate. n general la protozoare difer mult modalitatea de nutriie, existnd: Nutriia prin osmoz care apare la majoritatea protozoarelor parazite (clasa Flagelata i Sporozoa) i const n preluarea nutrienilor existeni n mediul de via, prin difuziune la nivelul membranei celulare, dotat cu o permeabilitate selectiv. Aceti nutrieni trebuie s fie ns molecule mici dizolvate n soluie asigurnd astfel trecerea prin porii membranei celulare. Osmoza este cea mai simpl i economic modalitate de nutriie. Nutriia prin nglobarea particolelor de hran, solide sau lichide, cu ajutorul pseudopodelor i formarea n citoplasm a vacuolelor digestive n care se vars enzime hidrolitice. Acest tip de digestie intracelular reprezint cel mai simplu proces de digestie din lumea animalelor. O parte din produsele de digestie obinute sunt utilizate pentru producerea de energie, altele intr n compoziia citoplasmei iar o mic parte sunt nmagazinate ca rezerve. La ciliate nutriia se realizeaz printr-un orificiu situat la un pol al celulei pe unde ptrund particolele nutritive (peristom sau citostom). Acest orificiu ptrunde n citoplasm iar la baza lui se vor forma vacuole digestive rezultnd digestia intracelular. La unele protozoare parazite exist i o digestie extracelular cnd enzimele hidrolitice din celul sunt eliminate n exterior. Aceste enzime produc digestia diferitelor esuturi ale organismului gazd, astfel c particolele nutritive rezultate sunt absorbite de protozoare.

46

4.5 Excreia Substanele rezultate din procesul de digestie, care nu au fost utilizate sau sunt chiar nocive pentru celul sunt eliminate fie prin difuziune prin membrana celular, fie prin preluarea acestor substane de vacuole contractile care se alipesc de membrana celular iar coninutul lor este eliminat printr-un por al membranei celulare. La protozoarele ciliate exist un orificiu special pentru excreie numit citoproct. Vacuolele contractile aflate intracitoplasmatic la protozoare au i un important rol n meninerea presiunii osmotice n interiorul citoplasmei prin reglarea coninutului de ap a citoplasmei. La protozoarele de ap dulce, datorit concentraiei mai mari de sruri minerale a citoplasmei fa de apa dulce exist tendina de ptrundere a apei n celul, astfel c tot excesul de ap este eliminat prin vacuolele contractile. 4.6 Respiraia Marea majoritate a protozoarelor sunt aerobe, utiliznd oxigenul din aer i elimin prin difuzie dioxid de carbon. n schimb, protozoaele parazite sunt facultativ aerobe. 4.7 nmulirea la protozoare n momentul n care celula ajunge la maturitate cu o anumit dimensiune, ea este capabil de nmulire fie asexuat fie sexuat. 4.7.1 nmulirea asexuat se poate realiza: Diviziune direct: sau sciziparitate care este modalitatea obinuitt de nmulire la rizopode, flagelate i ciliate, indiferent de modul de via al acestora. Diviziunea direct la aceste protozoare se poate desfura fie n plan transversal, fie n plan longitudinal. n procesul de diviziune direct, iniial se produce o alungire a nucleului urmat de o gtuire central a acestuia pn se rupe n dou pri egale, fiecare constituind un viitor nucleu. n paralel acelai proces l sufer i protoplasma care
47

se alungete n acelai plan cu nucleul, urmat de gtuirea i ruperea n dou pri egale. n urma acestui proces rezult dou celule tinere, egale ntre ele ns mai mici dect celula mam. Devin independente, se hrnesc, cresc i la un moment dat se nmulesc. Diviziunea multipl numit i schizogonie este specific protozoarelor din clasa Sporozoa, care cuprinde numai specii parazite, cu un parazitism strict intracelular. ntrotdeauna n acelai ciclu bilogic, nmulirea prin schizogonie este urmat de o faz de nmulire sexuat. Schizogonia const n fragmentarea nucleului celulei mam n n pri (attea pri cte pot pstra informaia genetic). n aceast faz rezult o celul multinucleat.Procesul de fragmentare a nucleului se numete cariotomie. Urmeaz fragmentarea protoplasmei, numit plasmotomie i dispunerea unui fragment de protoplasm n jurul fiecrui fragment nuclear rezultnd n celule fice numite merozoizi. Acestea sunt nglobate ntr-o formaiune numit schizont. Membrana schizontului se distruge, deasmenea i membrana celulei gazd iar merozoizii liberi atac alte celule gazd, relund de mai multe ori schizogonia. n momentul n care condiiile de mediu oferite de organismul gazd nu mai sunt prielnice schizogoniei, aceasta se oprete i ncepe faza de nmulire sexuat. 4.7.2 nmulirea sexuat Se mai numete i gametogonie i const n diferenierea formelor vegetative asexuate ( merozoizi de ultim generaie) n celule sexuale: unele cu ncrctur sexual mascul iar altele femel. Gameii femeli (macrogameii) sunt celule mari ncrcate cu substane nutritive. Gameii masculini (microgameii) sunt celule mici i n numr mare rezultnd din diviziuni multiple, sunt mobili fiind dotai cu un flagel. n urma procesului de fecundaie rezult zigotul sau celula ou care se
48

nconjoar de 2 membrane protectoare iar masa germinativ se condenseaz rezultnd oochistul ( element de laten i de rezisten a parazitului). La unele specii de protozoare din clasa ciliata exist un tip de nmulire sexuat denumit conjugare. Acest proces de nmulire apare dup mai multe cicluri directe de nmulire, n momentul cnd, generaiile obinute pierd din potenialul genetic de nmulire. Deci, conjugarea reprezint modalitatea de revigorare, de regenerare a populaiei. Conjugarea are loc intre doi indivizi nedifereniai sexual, care se alipesc unul de altul, n aa fel nct se suprapun peristomele, rezultnd o punte de legatur ntre cei doi indivizi, prin care se realizeaz un schimb de material nuclear, un important rol in conjugare revenind micronucleului. 4.8. nchistarea protozoarelor reprezint procesul de trecere de la viaa vegetativ, activ, la viaa latent i reprezint un proces de aprare la condiiile nefavorabile de mediu (modificri de temperatur, de umiditate, lipsa oxigenului, a nutrienilor ). nchistarea apare att la protozoarele cu via liber ct i la cele parazite, la care procesul de nchistare apare mai ales atunci cnd prin intermediul unor secreii i excreii, formele vegetative sunt eliminate din organismul gazd i ajung n mediul nconjurtor. Procesul de nchistare cuprinde urmtoarele modificri: deshidratarea protoplasmei prin activitatea susinut a vacuolelor contractile , cnd celula i modific att volumul ct i forma ( vulumul se reduce la jumtate iar forma este sferic) organitele de micare se resorb, dispar orificiile la ciliate, porii membranei celulare se nchid, aceasta devenind impermeabil. Chistul astfel obinut, reprezint protoplasma condensat, de aspect granular iar ectoplasma se transform ntr-o membran care

49

captuete membrana celular, conferind astfel chistului o rezisten mai mare la condiiile de mediu neprielnice. Aceast celul nchistat este izolat de mediul nconjurtor, este inactiv metabolic, imobil, dar are structurile foarte bine conservate. Rezistena chistului este diferit n funcie de specie, ns este mai mare n condiii de uscciune i temperaturi sczute. Deasemenea, chisturile pot fi vehiculate prin cureni de aer, ap, sau vectori animai, fiind rspndite n mediu. Dac formele chistice ajung n condiii favorabile, se produce o dechistare i transformarea lor n celule vegetative active. Procesul de germinare ncepe prin rehidratarea celulelor, permeabilizarea membranelor, refacerea organitelor de micare i a tuturor structurilor existente n laten. Exist i specii ce nu sunt adaptate acestui mod de aprare, ele vor fi vulnerabile la modificrile factorilor de mediu, avnd rezisten sczut. Un aspect particular al nchistrii apare la clasa Sporozoa, cnd oochisturile ajunse n mediul exterior, n condiii favorabile de mediu (temperatura, umiditate , aeraie), evolueaza printr-un proces de diviziune, rezultnd forme vegetative, care rmn protejate de membrana oochistului, formnd astfel oochistul infectant, formele vegetative din interior numindu-se sporozoizi. Aceast etap de transformare a oochistului se numete sporogonie. La unele specii de sporozoare, fazele de nmulire asexuat i sexuat se deruleaz n acelai individ gazd i avem ciclu biologic monoxen. La alte specii ns, intervin dou gazde diferite i anume: ntr-o gazd are loc nmulirea asexuat (gazd intermediar) iar n alt gazd are loc nmulirea sexuat (gazd definitiv), avnd un ciclu biologic dixen. 4.9 Clasificarea protozoarelor

50

Sistematizarea protozoarelor pe clase, ordine , familii, genuri i specii, s-a realizat n funcie de caracterele morfo-funcionale. Astfel, exist patru clase, din care trei sunt clasificate dup felul organitelor locomotorii: clasa Rhizopoda, clasa Flagelata i clasa Ciliata. A patra clasa reunete protozoare clasificate dup modul de nmulire i avem clasa Sporozoa. 4.9.1 Clasa Rhizopoda Grupeaz protozoare lipsite de membran rigid, ectoplasma innd locul membranei citoplasmatice. Rizopodele emit prelungiri protoplasmatice, numite pseudopode, cu rol n deplasare dar i n hrnire. Din aceast clas, importan deosebit prezint familia Amoebidae, cu genul Entamoeba , cu specia E. histolitica, localizat la nivelul mucoasei intestinale, fiind histiotrof i hematofag. Paraziteaz la mamifere i om, producnd grave tulburri digestive (dizenterie, slbire exagerat si mortalitate). Exist i specii localizate la nivelul mucoasei gingivale, n ficat, creier, plmn. Contaminarea se realizeaz prin ingerarea de chiti de pe minile murdare, ap i furaje infectate. 4.9.2 Clasa Flagellata Cuprinde protozoare cu perete rigid, nedeformabil. n citoplasm prezint 1-2 nuclei, unu sau mai muli flageli, cu rol n deplasare. Flagelii i au originea n blefaroplati, organite localizate intracitoplasmatic. Unele flagelate au o membran ondulant, cu rol important n micare, iar altele dispun de o formaiune intracitoplasmatic rigid, ca un microschelet, denumit axostil. O parte din flagelate formeaz chiti. nmulirea se realizeaza prin diviziune direct. Familia Trypanosomidae cuprinde genul Trypanosoma, ce reunete flagelate cu corpul alungit, fusiform i extremitile uor rsucite, prevzute cu un singur flagel, iar unele specii i cu membran ondulant. Se nmulesc prin diviziune direct i se hrnesc prin endosmoz. Din
51

genul Trypanosoma fac parte specii cu localizare in sngele unor mamifere vertebrate ce sunt gazde definitive i n tubul digestiv al unor arthropode hematofage ce sunt gazde intermediare, avnd deci, un ciclu biologic dixen. Ca specii mai importante amintim: Thripanosoma gambiense i Thripanosoma rhodesiense, ce produc boala somnului la om, rumegtoare, porci, girafe, zebre, care sunt gazde definitive ,iar gazdele intermediare sunt unele muscidae din genul Glossina, numite si musca Tze-tze. Thripanosoma equiperdum, ce produce sifilisul cailor, o boal genital grav, specific solipedelor, localizat cu predilecie la nivelul organelor genitale, dar se poate dezvolta i n snge sau n edemele cutanate. Familia Trichomonadidae cuprinde flagelate de aspect piriform sau oval, prevzute cu trei cinci flageli, dintre care, unul delimiteaz o membran ondulant. Prezint o structur citoplasmatic numit axostil, se inmulesc prin diviziune direct, se hrnesc prin endosmoz. Important este genul Trichomonas cu speciile T. vaginalis, la om, care produce tricomonoza genital; T. foetus, la taurine, care produce tricomonoza genital, tradus printr-o inflamaie a mucoasei utero-vaginale, numeroase avorturi n primele luni de gestaie, iar la tauri are o evoluie asimptomatic, el fiind purttorul i transmitorul bolii. T. galinae i T. gallinarum, produc tricomonoza tineretului aviar ( pui de gain, porumbel, curc), caracterizat prin inflamaii de tip pseudomembranos ale diferitelor segmente digestive. Familia Octomitidae Cuprinde genul Giardia, ce cuprinde flagelate cu simetrie bilateral, avnd doi nuclei i patru perechi de flageli. Important este specia G. intestinalis ( G. lamblia), la om, care produce n special la copii
52

tulburri digestive, urticarie, slbire. La animale avem giardioze produse de G. canis, G. bovis, G. cuniculi. 4.9.3 Clasa Sporozoa Reunete protozoare parazite, lipsite de organite de micare, iar nmulirea se realizeaz n dou faze: schizogonic i gametogonic, pe aceli individ (ciclu monoxen), sau pe indivizi diferii (ciclu dixen). Ordinul Haemosporidia Cuprinde dou familii mai importante: Familia Plasmodidae, cu genul Plasmodium i numeroase specii, care paraziteaz globulele roii la om i animale n rile tropicale, producnd malaria sau palidismul (frigurile de balt), boala se transmite prin narul anofel. Familia Babesiidae, cu genul Babesia, care cuprinde specii localizate tot n eritrocite, la numeroase specii de animale domestice i slbatice, producnd bnoli grave (babesioze) traduse prin anemie, icter, febr i hemoglobinurie. Ciclul biologic este dixen, boala se transmite prin cpue, care sunt gazde definitive, mamiferele fiind gazde intermediare. Cteva specii : B. major, B. bigemina, B. caballi.

Ordinul Coccidia Cuprinde numeroase familii, mai important fiind : Familia Eimeridae, cu genul Eimeria, care cuprinde numeroase specii, care afecteaz n special tineretul mamifer i aviar, cu localizare predilect la nivelul mucoasei intestinale, dar exist i excepii cu localizri renale sau hepatice.Amintim cteva specii: E.tenella, E. stidae, E. truncata.

53

Ciclul biologic este monoxen, bolile produse se numesc eimerioze i evolueaz prin tulburri digestive, slbire, tulburri hepatice i locomotorii. 4.9.4 Clasa Ciliata Cuprinde protozoare cu corpul acoperit in totalitate sau parial cu cili, cu rol n micare i prehensiunea hranei. Au citostomi i citoproct, iar intracitoplasmatic doi nuclei; macro i micronucleul. Se inmulesc prin diviziune direct, uneori prin conjugare, iar m,odul de nutriie este heterotrof. Unele specii de protozoare ciliate au o mare importan deoarece sunt localizate in diferite compartimente ale tubului digestiv ( rumen, intestin gros ), iar prin enzimele pe care le secret, contribuie la fermentarea i digestia hranei. Substanele rezultate sunt absorbite de intestinul gazdei. Aceste protozoare alctuiesc populaii foarte numeroase, constituind aa numiii simbioni ruminali sau intestinali, ce altuiesc o comunitate secific, numit microbiocenoz. Exist specii de protozoare ciliate, condiionat patogene sau oportuniste, cum este genul Balantidium, cu o patogenitate ridicat pentru om i suine. Balantidium coli, este localizat n intestinul gros i produce mbolnviri traduse prin tulburri digestive, diaree, uneori cu snge, dureri abdominale, slbire.

54

55