Caracteristicile majore care le difereniaz de celelalte microorganisme:

Dimensiunea redus (20-300nm) Genomul posed un singur tip de acid nucleic, fie ARN,

fie ADN Sunt total dependente de celula vie, fie eucariot, fie procariot, pentru replicare i existen Nu posed ribozomi sau aparat propriu de sintez a proteinelor, mitocondrii sau surs proprie de energie Dei unele virusuri posed enzime proprii ca, de pild, ARN- sau ADN-polimeraza, ele nu pot amplifica i reproduce informaia n propriul genom, n absena celulei gazd

Structura
Structura de baz, obligatorie, a virionului o reprezint nucleocapsida Virusurile formate numai din nucleocapsid se numesc virusuri neanvelopate.
Virusurile care prezint pe lng nucleocapsid i un nveli extern lipoproteic derivat din sistemul membranar al celulei gazd (peplos sau anvelop), se numesc virusuri anvelopate.

Genomul viral
Este constituit dintr-un singur tip de acid nucleic fie ADN, fie ARN (niciodat ambii), care conine ntreaga informaie genetic necesar replicrii virusului i care reprezint suportul infeciozitii acestuia.
Molecula acidului nucleic poate fi simplu spiralat (ss) sau dublu spiralat (ds), liniar sau

circular, continu sau segmentat.

 Acidul nucleic al tuturor virusurilor ADN, cu excepia

parvovirusurilor, este ds (hepadnavirusurile au ADN parial ds cnd nu sunt n timpul replicrii). Acidul nucleic al tuturor virusurilor ARN, cu excepia reovirusurilor, este ss . n cazul virusurilor ARNss, genomul conine acid nucleic care poate fi: cu polaritate pozitiv (+), caz n care poate aciona direct ca ARNm (mesager) n interiorul celulei infectate, sau poate fi cu polaritate (-), caz n care trebuie transcris de o enzim asociat virusului, ARN-transcriptaza, ntr-un ARN cu polaritate (+) = imaginea n oglind.

Mrimea genomului viral se coreleaz cu mrimea capsidei sau anvelopei. virusurile mari au un genom de dimensiuni mari care conine cteva sute de gene i codific un numr relativ mare de proteine (poxvirusurile, herpesvirusurile, etc) virusurile mici au un genom de dimensiuni reduse care conine doar 3 sau 4 gene i codific un numr mic de proteine.

Capsida viral
Capsida viral este un nveli format din numeroase uniti proteice numite capsomere. proteine de dimensiuni mici care se autoasambleaz n structuri capsomerice mari iar in final se asambleaz sub forma capsidei virale. capsomerele individuale pot fi puse n eviden prin ME. Fiecare capsomer trebuie s posede o anumit structur chimic ce i permite s se asambleze cu capsomere asemntoare pentru a forma o structur complex cum este capsida.

Peplosul (anvelopa)

reprezint o membran cu structur similar membranei citoplasmatice a celulei gazd - conine lipide, proteine i lipoproteine. pe suprafaa ei - formaiuni specifice virale, codificate de virus:

1. spiculi (peplomere) de natur glicoproteic. Au funcia de adsorbie i penetrare n celula.

2. factori de fuziune. Se gasesc sub form inactiv (F0) iar sub aciunea proteazelor celulei gazd se scindeaz genernd forme active (F1, F2). Au funcia de iniiere a infeciei.
3. proteina M (matrix) cptuete faa intern a anvelopei. La unele virusuri, faciliteaz asamblarea, iar la altele, asigur meninerea formei.

Funciile nveliului sunt:

a) de ataare - asigur ataarea virusurilor anvelopate (nvelite) la celula gazd b) de protecie - Rolul protector al nveliului viral este anihilat de tratamentul cu solveni lipidici (eter, cloroform, sruri biliare), rezultnd inactivarea particulei virale. Pe baza acestui fenomen, virusurile sunt clasificate n: - eter-sensibile = virusurile nvelite - eter-rezistente = virusurile nenvelite

Replicarea (multiplicarea) viral

Virusurile prezint un nalt grad de parazitism intracelular i

sunt inerte metabolic pn cnd infecteaz o celul susceptibil. n celula gazd, virusurile se replic redirecionnd mecanismele biochimice ale celulei spre formarea de componente pentru noi particule virale.

Virusurile mari au, de obicei, acid nucleic cu greutate

molecular crescut i care are capacitatea de a codifica un numr mare de proteine.

Virusurile mici au un acid nucleic cu greutate molecular

sczut i un potenial de codificare limitat, de accea codific doar unele din proteinele lor structurale i utilizeaz cel puin cteva enzime ale celulei gazd, pentru propria replicare.

Replicarea virusurilor parcurge urmtoarele etape: 1. recunoaterea celulei gazd 2. adsorbia (ataarea ) virusului de celula gazd 3. penetrarea (ptrunderea) virusului n celula gazd 4. decapsidarea virusului 5. sinteza macromolecular a) biosinteza ARNm precoce i a proteinelor precoce = proteine-enzime b) replicarea genomului viral c) biosinteza ARNm tardiv i a proteinelor tardive = proteine structurale 6. eliberarea virionilor progeni din celula gazd

1.Recunoaterea celulei gazd

Pentru a infecta o celul, virusul trebuie, s

recunoasc celula care i permite replicarea.

Acest proces este realizat datorit existenei unor

situsuri receptor-specifice (de natur proteic) situate pe suprafaa extern a particulei virale. reacioneaz specific cu receptori corespunztori (de natur glicoproteic sau glicolipidic) de pe suprafaa celulelor "int". broasc" se explic faptul c anumite virusuri prezint tropism pentru anumite gazde i pentru anumite esuturi ale gazdei respective.

Acestea

Prin aceast interaciune precis de tip "cheie-

2.Ataarea virusului de celula gazd

Ataarea virusurilor este specific i implic legarea

situsurilor receptor-specifice de receptorii specifici aflai pe membrana citoplasmatic a celulei gazd. a) Structurile de ataare ale virusului pot fi: - capsomerele capsidei, prezente la virusurile neanvelopate - glicoproteinele, ce reprezint proiecii ale nveliului viral, la virusurile anvelopate. b) Receptorii specifici de pe membrana citoplasmatic a celulei gazd sunt constitueni normali ai acesteia. Multiplele interaciuni dintre proteinele virale de ataare i receptorii celulei gazd, ataeaz ferm virusul de celula gazd. Aceste interaciuni pot reprezenta mecanismul trigger (declanator) n urma cruia este eliberat nucleocapsida n celula gazd.

3. Penetrarea sau ptrunderea virusului n celula gazd (internalizarea)

Dup ataarea la celula gazd, virusul trebuie s penetreze

membrana celular extern i s elibereze genomul viral n mediul intracelular, pentru replicare. Penetrarea se poate realiza prin 3 mecanisme, n funcie de structura virusului: fuziunea nveliului viral la membrana celular extern, cu eliberarea ulterioar a acidului nucleic viral, viropexia (pinocitoza) - internalizarea ntregului virion i fuziunea ulterioar cu o membran intern vacuolar, pentru eliberarea acidului nucleic viral penetrarea direct - virusurile lipsite de membran lipidic par s treac direct prin membrana citoplasmatic extern.

4. Decapsidarea i migrarea acidului nucleic la locul replicrii

Decapsidarea const n ndeprtarea sau distrugerea

capsidei virale astfel nct genomul viral s devin accesibil mecanismelor de transcripie i translaie. n multe cazuri, penetrarea i decapsidarea se produc sub forma unui proces unic. Astfel, n cursul traversrii membranei citoplasmatice, unele virusuri sufer alterri la nivelul structurii capsidei, aceste alterri facilitnd intrarea acidului nucleic n citoplasm. n cazul virusurilor lipsite de anvelop, se poate produce fuziunea cu lizozomi, astfel nct decapsidarea se realizeaz prin enzimele lizozomale.

5. Sinteza macromolecular. Biosinteza componenilor virali

Convenional, se consider c ARNm (specia de

ARN care funcional se fixeaz pe ribozomi pentru a i se traduce mesajul genetic) are o polaritate pozitiva "+". Transcripia cu formarea ARNm pentru sinteza proteinelor precoce difer n funcie de acidul nucleic viral.
Acizii nucleici

negativ (-), deci polaritatea va fi notata (). Pentru formarea de ARNm (+), genomul acestor virusuri, ADN sau ARN, este transcris asimetric, adic va fi transcris o singura caten, cea cu polaritate (+). Acizii nucleici mc au catena fie cu polaritate (+), identic cu cea a ARNm, fie cu polaritate (-), complementar cu cea a ARNm.

dc au dou catene : una pozitiv (+) i una

5.1. Transcripia genomului viral n ARN mesager (ARNm) i replicarea genomului viral
A. Virusuri ARN

Virusurile ARN pot urma 3 tipuri de transcripie, n funcie de sensul mesajului nscris n genomul lor:

 In cazul virusurilor ARN cu polaritate pozitiv,

ARN-ul viral este ARNm i poate fi translat n proteine virale.

ARN-ul viral "parental", cu polaritate pozitiv, este

folosit direct ca ARNm viral, din care vor fi translate direct proteinele virale precoce i tardive.
Replicarea genomului parental se produce prin

sinteza unei forme intermediare dublu catenare din care, sub aciunea ARN-polimerazei (protein viral precoce), sunt sintetizate multe copii ale genomului parental.

 n cazul virusurilor ARN cu polaritate negativ, iniial sunt produse copii cu polaritate pozitiv ale

genomului parental (sub aciunea ARNpolimerazei virale). Aceste copii constituie ARNm i ele sunt apoi translate n proteine virale. ARN polimerazele virale transcriu ARN-ul parental, cu polaritate negativ, ntr-o copie complet sub forma unui intermediar dublu catenar. Din acesta se vor sintetiza noi molecule de ARN cu polaritate negativ care vor fi ncorporate n noii virioni.

 Cea

de-a treia modalitate de transcripie este caracteristic retrovirusurilor. ARN-ul viral parental este transcris sub aciunea unei revers-transcriptaze virale (ADN polimeraz-ARN dependent) ntr-un ADN monocatenar care formeaz un hibrid ADN-ARN. Lanul ARN al acestui hibrid este distrus i este nlocuit de o copie ADN, rezultnd astfel o molecul de ADN dc. Acest ADNdc (numit ADN proviral) este integrat n ADN-ul celulei gazd. Din ADN-ul proviral sunt transcrise moleculele de ARNm care sunt apoi translate n proteine virale. Din ADN-ul proviral sunt transcrise i copii complete de ARN viral care vor fi ncorporate n noii virioni.

B. Virusuri ADN

Virusurile ADN trebuie, de asemenea, s produc un transcript ARNm. Acest proces este, de obicei, realizat sub aciunea unei enzime a celulei gazd (ARN-polimeraza ADN-dependent). Moleculele de ARNm viral sunt translate n proteine precoce i tardive. ADN-ul parental dc este de obicei replicat de o ADN-polimeraz ADN-dependent codificat de virus.

5.2. Sinteza proteinelor virale.

Biosinteza proteinelor nestructurale precoce precede

replicarea acidului nucleic viral. Acestea inhib sinteza proteinelor celulei gazd i sunt implicate n replicarea acidului nucleic viral. Biosinteza proteinelor structurale tardive ncepe imediat dup replicarea genomului viral. Biosinteza se realizeaza prin translaia ARNm format n etapa anterioar, n proteine specifice particulei virale (proteine capsidale, peplomere). Speciile de ARNm care servesc drept matri pentru proteinele tardive sunt diferite de cele care servesc ca matri pentru proteinele precoce

 Moleculele de ARNm viral sunt translate pe poliribozomii

celulei gazd pentru sinteza proteinelor virale structurale i nestructurale. Enzime ale celulei gazd sunt responsabile de citirea mesajului genetic al virusului. Proteinele structurale sunt proteine constitutive ale particulei virale, n timp ce proteinele nestructurale sunt componente cu funcii importante (de obicei, enzimatice), dar care nu fac parte din virion. Dup ce au fost sintetizate, proteinele virale structurale migreaz la nivelul membranei citoplasmatice se acumuleaz n citoplasma sau n nucleul celulei gazd. n toate cele 3 situaii, ele sufer transformri biochimice sub aciunea enzimelor celulei gazd.

6. Eliberarea virusului din celula gazd

Aceast

etap se poate realiza prin dou mecanisme: eliberarea prin nmugurire i eliberarea prin liz celular. In cazul virusurilor eliberate prin nmugurire, o parte din proteinele virale sunt transportate la nivelul membranei celulare externe a celulei gazd, iar alte proteine structurale virale se cantoneaz la nivelul membranei celulare interne. Proteinele i acidul nucleic se asambleaz i proemin prin membrana celular. Aceast proeminen ("mugure") este apoi desprins i virionul este eliberat. Adesea, n cazul virusurilor eliberate prin nmugurire, procesul descris mai sus se repet succesiv, astfel nct o celul gazd elibereaz valuri succesive de noi particule virale. Eliberarea prin liz celular presupune asamblarea complet a virionului n citoplasma celulei gazd i eliberarea sa prin liz i moartea celulei respective.

Familia Poxviridae
4 genuri cu semnificaie n patologia uman:

genul Orthopoxvirus genul Parapoxvirus genul Yatapoxvirus genul Molluscipoxvirus

Virusul variolic

Morfologie
cele mai voluminoase virusuri
virusul variolic msoar aproximativ 300/170 nm virionii sunt de form paralelipipedic sau ovoidal

Virusul variolic - ME

Structur
Virionii sunt compui dintr-o anvelop i un nucleoid central.
Anvelopa are o structur complex : un strat dublu lipoproteic
un complex de structuri tubulare

Nucleoidul central conine acidul nucleic viral (ADN) ce este nconjurat de o membran dubl lipoproteic. ADN-ul viral este bicatenar, circular, covalent nchis i este flancat de doi corpi laterali care dau aspectul de "halter".
genomul viral codific un numr mare de proteine

structurale (peste 100) i transcriptaza-ADN-dependent, ADN-dependent)

enzime (ADN ARN-polimeraza-

Replicare
poxvirusurile se replic doar n citoplasma celular,

cu formarea de corpi de incluziune

decapsidarea

se realizeaz cu participarea enzimelor celulei gazd i a enzimelor virale ADN-dependent mediaz transcripia ARNm, parcurgndu-se n continuare etapele replicative ale virusurilor cu genom ADN

ARN-polimeraza

Epidemiologie
actualmente, variola este considerat drept boal

infecioas eradicat prin vaccinare global confirmat de OMS n 1980)

(eradicare

infecia variolic a fost prima boal n care s-a

aplicat profilaxia specific

eradicarea variolei a fost posibil deoarece :

- omul era singurul rezervor cunoscut de virus variolic

- nu exist purttori asimptomatici ai virusului

- virusul variolei nu determin infecie latent sau persistent

Patogenez
modelul

patogenic-cel generalizate

al

unei

infecii

acute

calea de ptrundere a virusului n organism

respiratorie
multiplicare activ local i la nivelul ganglionilor

regionali

perioada de incubaie era de 10-12 zile

debutul - acut, febril

erupie cutanat iniial macular, cu evoluie

ulterioar spre papule - vezicule - pustule cruste

la pacienii care supravieuiau, se constatau cicatrici tegumentare persistente

Variol - erupie

Variol - erupie

Variol - cruste

Variol

Se deosebeau 2 forme clinice de variol, cauzate de dou tipuri virale cu diferene minime ntre ele:
variola major - cu mortalitate de peste 30%
variola

minor (alastrim) (mortalitate sub 1%)

form

atenuat

Virusul vaccinal
folosit pentru prepararea vaccinului antivariolic, datorit

cross-reactivitii antigenice existente ntre cele dou virusuri

Virusul variolei maimuelor

infecteaz primatele n zonele ecuatoriale
infecia omului este rar i se manifest prin

erupie cutanat generalizat

letalitatea este de aproximativ 15%

Virusul variolei bovine

infecia la om se produce prin contactul cu vaci infectate
leziunile eruptive localizate pe ugerul vacilor infectate constituie sursa de infecie pentru om (mulgtori) care dezvolt leziuni similare pe mini i brae (fr tendin de generalizare)

Leziuni eruptive localizate pe mn v.variolei bovine

Diagnostic de laborator
Inoculare n ou embrionate - pe membrana corio-alantoidian : - Evidenierea incluziilor caracteristice n epiteliul cornean (cornee de iepure) : virusul variolei determin apariia corpusculilor Guarnieri (incluzii eozinofile, nconjurate de un halou clar) - mici (1-2) incluziile sunt mai mari (3-7) i mai numeroase n cazul virusului vaccinal

Familia Orthomyxoviridae

Clasificare
Familia include 4 genuri:
Genul Influenzavirus A include virusul gripal tip A Genul Influenzavirus B include virusul gripal tip B Genul Influenzavirus C include virusul gripal C Genul Thogotovirus include virusurile Thogoto,

Dhori i Batken.

Virusurile gripale A, B i C

Clasificarea virusurilor gripale n tipuri i subtipuri.

Specificitate Antigen Caracteristici

De gen

NP (nucleopreoteina)
M (matrix)

-3 genuri : A, B, C
-3 genuri: A, B, C -14 tipuri HA (n patologia uman doar : HA1, HA2, HA3) -9 tipuri N (n patologia uman doar : N1 i N2)

De tip

HA (hemaglutinina)

N (neuraminidaza)

Morfologie i structur
Virionii sunt de form sferic sau alungit, cu diametrul de 100-200 nm, prevzui cu anvelop. Sunt caracterizai prin pleiomorfism, astfel nct uneori se pot observa virioni cu form filamentoas i cu lungimi pn la 1000 nm.

Structura virusului gripal

Structura virionului:
Anvelopa - strat dublu lipoproteic ce deriv din

membrana celulei infectate. Stratul extern este prevzut cu spiculi care conin hemaglutinin (HA) i neuraminidaz (N). Stratul intern conine proteina M (matrix) cu rol n meninerea formei virionului.

Hemaglutinina se gsete sub forma inactiv care

este activat prin scindare sub aciunea proteazelor celulei gazd. n urma scindrii rezult dou tipuri de segmente : H1 i H2. Rolul HA - ataarea virionului la celul - eliberarea intracitoplasmatic a ARN viral.
Neuraminidaza (prezent doar la virusurile gripale A

i B) mediaz ptrunderea virionului n stratul de mucus al cilor respiratorii.

Capsida - simetrie helicoidal

Genomul - ARN monocatenar cu polaritate negativ.

Componente suplimentare asociate genomului

nucleoproteina (NP) - protein intern asociat ARN,

cu rol n protejarea acestuia. polimeraze : PB1, PB2, PA. proteine nestructurale NS1, NS2 i BM2 .

Patogenez
Infecia

este transmis pe cale respiratorie, interesnd, de obicei, tractul respirator superior. Virusul se replic la nivelul epiteliului respirator, determinnd distrugerea cililor. Infecia viral a tractului respirator inferior (pneumonia gripal) se manifest cu semne majore de toxemie i cu letalitate ridicat. Mai frecvent, pneumonia este rezultatul suprainfeciei bacteriene secundare (S. aureus, H. influenzae, streptococi hemolitici).

Manifestri clinice Gripa

Boala la om se manifest, dup o incubaie de 2-5

zile, prin febr nalt (39-40C), cefalee, mialgii, artralgii, astenie marcat, simptome respiratorii (tuse uscat, rinoree).

Dup o perioad de stare de aproximativ o

sptmn, febra scade, tusea devine productiv, iar evoluia este autolimitant cu vindecare lent (1-2 sptmni).
mici, btrnii, persoanele cu afeciuni cronice debilitante, imunosupresaii.

Grupele de risc pentru infecia gripal sunt copiii

Diagnostic de laborator
Examen direct Microscopia electronic Imunofluorescena - detectarea antigenelor virale Cultivare Se realizeaz pe culturi celulare primare de rinichi de

maimu. Efectul citopatic nu este caracteristic, dar identificarea se poate realiza prin hemaglutinare direct. i n cazul inoculrii oulor embrionate, diagnosticul se pune tot pe baza proprietilor hemaglutinante ale v. gripal. Inocularea la animale de experien produce fie infecia experimental, fie, doar creterea titrului de anticorpi specifici.

Serologia
Decelarea anticorpilor specifici de tip (anti-NP) i de

subtip (anti-HA) prin : - hemaglutinoinhibare - seroneutralizare - fixarea complementului - ELISA

Profilaxie
Msuri generale
Pe plan european i mondial exist programe de

supraveghere i control menite s previn i s limiteze extinderea epidemiilor de grip. Chimioprofilaxia Preparatele antivirale (Amantadina, Rimantadina) sunt eficiente doar pentru virusul gripal A i administrarea lor este grevat de efecte secundare relativ severe mai ales la copii.

Profilaxia specific activ se realizeaz prin

administrarea de vaccinuri.
Vaccinurile inactivate se prepar din tulpini virale

selectate anual.
Se asigur anual vaccinuri care s conin cu

maxim probabilitate tulpinile circulante n sezonul respectiv sau variante strns nrudite.

 Vaccinurile vii atenuate se afl nc n faza de

studiu.
Vaccinurile recombinante se studiaz elaborarea

de vaccinuri pe baz de sisteme recombinante de clone de ADNc al ARN gripal cu obinerea de vaccinuri cu antigene virale purificate sau peptide nalt imunogene.

Familia Rhabdoviridae

Clasificare
Familia Rhabdoviridae include dou genuri cu

importan pentru patologia uman :

Genul Lyssavirus

- virusul rabic
Genul Vesiculovirus

- virusul stomatitei veziculare

Genul Lyssavirus virusul rabic

Este agentul etiologic al rabiei (turbrii). Boala

se transmite prin muctura animalelor infectate.

Sursa de virus este reprezentat att de animale

slbatice (lupi, vulpi, lilieci, obolani, etc) ct i de animale domestice (cini, pisici).

Morfologie i structur
Virionul are o form alungit, caracteristic de "glon"

sau "obuz", cu diametrul de 70-80 nm i lungimea de 120-240 nm. El se compune din anvelop, capsid i genom. - Anvelopa este alctuit dintr-un strat dublu lipidic. La suprafaa stratului proemin formaiuni glicoproteice - spiculi (glicoproteina G), iar n interior se gsete proteina M- proteina structural major Glicoproteina G este implicat n ataarea virionului la celula int, avnd i activitate hemaglutinant. - Capsida are simetrie helicoidal. - Genomul este ARN monocatenar cu polaritate negativ.

Replicare
Ptrunderea virionului n celul este mediat de

reacia ntre proteina G i receptorii specifici celulari i se realizeaz prin endocitoz. Virusul prezint tropism neuronal. Replicarea are loc n citoplasm. La acest nivel se acumuleaz nucleocapside virale sub form de incluziuni intracitoplasmatice (corpusculii BabeNegri - aspect patognomonic). Eliberarea virionilor se realizeaz prin nmugurire.

Patogenez
Virusul se transmite prin muctura animalelor

infectate (excreie salivar intens de virus). Se multiplic la nivelul porii de intrare (n muchi i esutul conjunctiv). Incubaia este variabil (ntre 10 zile i 1 an ) n funcie de localizarea i gravitatea plgii mucate infectante. Genomul viral trece n axoplasma nervilor periferici din vecintatea porii de intrare,unde se multiplic.

Infecia disemineaz centripet (spre sistemul nervos central), pe traiectul nervilor periferici, invadnd creierul (encefalita rabic). Dup replicarea la acest nivel, virusul disemineaz centrifug, de-a lungul nervilor periferici, ajungnd s invadeze alte esuturi, inclusiv glandele salivare. Datorit leziunilor nervoase centrale i periferice se produc simptome specifice : hiperexcitabilitate, anxietate, spasm faringian, convulsii, paralizii. Evoluia este ntotdeauna letal.

Cultivare Se realizeaz n culturi celulare primare (rinichi de hamster) sau n linii celulare de

neuroblastom. Identificarea se face prin imunofluorescen cu anticorpi monoclonali sau pe baza efectului citopatogen (incluziunile patognomonice). Inocularea intracerebral la oareci produce paralizii spastice .

Examen direct: ELISA cu varianta rapid

RREID (Rapid Rabies Enzyme ImmunoDiagnosis) deceleaz Ag rabice n esutul cerebral. Serologia decelarea de Ac rabici specifici n ser i n lichidul cefalo-rahidian prin: teste de seroneutralizare (deceleaz Ac anti-glicoproteina G) ELISA

Profilaxie
Imunizarea se realizeaz cu vaccin viral inactivat.
n urma mucturii potenial infectante, profilaxia

rabiei se realizeaz cu imunoglobulin uman specific.