Biochimiea II dinamic (metabolismul)

Introducere
Scurt istoric
Fiecare etap a dezvoltrii societii umane s-a caracterizat prin dezvoltarea cu
precdere a anumitor domenii caracteristice pentru etapele respective. n ceea ce
privete de exemplu pictura, sculptura, astronomia etc., umanitatea a aezat la loc de
cinste n primul rnd operele Evului mediu n timp ce apariia zorilor capitalismului, s
-a caracterizat prin dezvoltarea fr precedent a tehnologiilor.
nc pe la mijlocul secolului XVIII se tia c proteinele se pot scinda pn la
peptone nu numai n stomac, ci i n afara lui sub aciunea agentului (principiului
activ) din sucul gastric. O descoperire important n acest domeniu a fcut savantul
din Petersburg, K.C. Kirhhof n anul 1814. El a artat c extractul din mal (orez
ncolit) are proprietatea de a transforma amidonul n zahr (maltoz).
De aici, proprietatea de a transforma amidonul n zahr o au un numai boabele
ncolite de orez,dar i extractele lor, adic transformarea amidonului se poate
produce nu numai n interiorul celulei, dar i n afara ei (n vitro).
Substana extras din mal cu proprieti de zaharificare a amidonului a cptat
numele de amilaz. n mod analog a fost obinut extractul din drojdie, care la
temperatura de camer scindeaz rapid zahrul din sfecl n componentele sale
glucoza i fructoza. Astfel s-a artat c zaharoza poate fi hidrolizat nu numai n
celulele vii de drojdii, ci i n afara lor sub aciunea unei substane speciale, care se
extrage din drojdie i care poart numele de zaharaz , sau invertaz.
Prin analogie cu natura moart (n baza eliberrii rapide a oxigenului din apa
oxigenat H2O2 n prezena catalizatorului din platin spongioas ) s-a presupus i s-a
consolidat conceptul prezenei biocatalizatorilor n celulele vii ale omului, plantelor i
animalelor, care se mai numesc fermeni sau Enzime.
n vremurile noastre putem afirma fr a grei c secolul XX a fost secolul fizicii,
iar secolul XXI va aparine cu siguran dezvoltrii biotehnologiilor. Progresele
tehnologice moderne au permis extinderea i aprofundarea studiilor referitoare la
diveri constitueni celulari i subcelulari. Noile cuceriri ale biotehnologiei nu sunt
ns posibile fr aportul substanial al unor tiine de grani, n marea lor majoritate
tinere, cum ar fi biochimia, biofizica, biologia molecular, microbiologia
industrial i altele.
Biochimia este definit ca fiind tiina ce se ocup cu studiul structurii chimice a
organismelor vii, totalitatea reaciilor i transformrilor care au loc n celula vie,
reglarea acestora i interdependena permanent cu mediul nconjurtor.
Din punctul de vedere al obiectului de studiu distingem mai multe ramuri ale
biochimiei:
Biochimie microbian
Biochimie vegetal
Biochimie animal

3
 n ultimul secol, n cadrul biochimiei animalelor, o amploare deosebit a fost
nregistrat de biochimia omului, n special biochimia medical sau clinic, dat fiind
importana practic imens a acesteia pentru pstrarea sntii omului.
n funcie de modul de abordare a problemelor studiate, se disting
dou ramuri principale ale biochimiei:

Biochimie structural (descriptiv) (I)

Biochimie dinamic (biochimia metabolismului) (II)
Din punct de vedere istoric, biochimia devine o tiin de sine stttoare n cea de a
doua jumtate a secolului al XIX-lea cnd ea s-a desprins din complexul tiinelor
chimice i biologice. Locul biochimiei ntre tiinele moderne poate fi considerat unul
central. Pe de o parte, dezvoltarea biochimiei nu ar fi fost posibil fr aportul unor
tiine clasice cum ar fi biologia, chimia, fizica, matematica etc. Pe de
alt parte, realizrile tiinifice ale biochimiei au contribuit i contribuie la
dezvoltarea altor tiine i domenii ale activitii umane, cum ar fi genetica, fiziologia,
medicina, biotehnologia(domeniu nou, deosebit de vast care poate s ofere soluii
avantajoase n rezolvarea multor probleme practice de interes major), industria
alimentar etc.
Reprezentarea general a disciplinei.
Biochimiea este o tiin cu o dezvoltare foarte rapid care n ultimele decenii a
permis aprofundarea cunotinelor noastre asupra intensitii proceselor vitale i a
influenat n mod esenial att gndirea ct i practica n domeniul producerii,
conservrii, ct i utilizrii alimentelor. Astzi avem posibilitatea de a ptrunde esena
proceselor dinamice de metabolism, am obinut informaii importante privind sinteza
i degradarea unor componente ale materiilor prime vegetale i animale, att n celul,
ct i n procesele biotehnologice de fabricare a alimentelor.
Biochimia II studiaz procesele de transformare a biomoleculelor, cile i
mecanismele de biosintez i descompunere, corelarea acestor procese continuii i
permanente de transformare care constituie substratul material al vieii i
caracterizarea dinamismului acestuia.

Celula- unitate structural i funcional a vieii

Structura, ultrastructura i rolul componentelor celulei procariote
Structur celulei eucariote:
- nveliul celulei: membran celular (model mozaic fluid);
- perete celular;
- citoplasm: fundamental; structurat - organite celulare: reticul endoplasmatic,
ribozomi, mitocondrii, aparat Golgi, lizozomi, centrozom, plastide, vacuole; nucleu -
membran nuclear, nucleoli, carioplasm-cromatin (acizii nucleici - tipuri i rol);
Celula
Celula este unitatea structural, funcional i genetic a organismelor vii, capabil de
autoconservare i de a-i duce viaa independent sau n complexe celulare
interdependente = esuturi.
Tipuri de celule :procariot, eucariot

4
Celula procariot

Celula procariot

este caracteristic: bacteriilor i algelor albastre verzi = cianobacterii; este alctuit

din: - perete celular rigid, necelulozic, care conine murein; membran celular;-
citoplasm - vscoas, fr cureni citoplasmatici; bogat n ribozomi cu rol n
sinteza proteinelor specifice; materialul genetic = nucleotid = nucleosid dispus
difuz, neindividualizat, reprezentat de o macromolecul de ADN, care formeaz un
cromozom circular.

Celula eucariot

Structura celulei vegetale Structura celulei animale

5
1. nveliul celulei
2. Membrana celular separ celula de mediul nconjurtor i intervine n
schimburile dintre celul i mediu;- este organizat pe modelul mozaicului fluid, fiind
alctuit din dou straturi fosfolipidice strbtute de proteine; - membrana este
permeabila i selectiv.
I. Peretele celular este specific celulei vegetale este structura nevie; la
ciuperci=fungi, este de natur chitinoas; la alge, muchi, ferigi, plante superioare -
este celulozic, fiind format din celuloz, hemiceluloz i substane pectice; se
formeaz cu participarea membranei celulare; lipsete la celula animal; are rol de
aprare, asigur schimbul de ap i substane dintre celul i mediul nconjurtor.
II . Citoplasma reprezint mediul n care se desfoar principalele procese
metabolice celulare.
Componente: citoplasma fundamentala= hialoplasma = nestructurat;
constituie mediul intern al celulei n care se desfoar principalele procese
metabolice celulare.
Prezint cureni citoplasmatici care pun n micare organitele componenta structurat
- reprezentat de organitele celulare:
Mitocondriile au rol n respiraia celular, la nivelul lor are loc oxidarea substanelor
organice, cu producerea de energie (se mai numescuzinele energetice ale celulei);
sunt autodivizibile = au material genetic propriu - ADN mitocondrial, care conine
informaia genetic pentru sinteza enzimelor respiratorii.
Alctuire: sunt formate din membran dubl: membrana extern este neteda,
membrana intern formeaz pliuri numite criste, la nivelul crora se gsesc enzimele
oxido-reducatoare; cavitate n care se gsete substana fundamental matricea
(matrix) ce conine ADN, ARN, enzime.

Reticulul endoplasmatic - RE - este o reea de tuburi i vezicule care formeaz un

sistem circulator intracitoplasmatic; are membran simpla;
poate fi neted sau rugos =granular (REG) (cnd are ataai ribozomi).
6
Ribozomii (granulele lui Palade) organite fr membran, sferice, de natur
ribonucleoproteica ce conin ARN=acid ribonucleic i proteine; se gsesc liberi n
citoplasma sau ataai RE, formnd REG; sunt sediul biosintezei proteinelor specifice.
Aparatul Golgi - este situat n apropierea nucleului i are funcii legate de procesele
de secreie celular, asamblare a produilor, de transport al secreiilor i n producerea
de membrane. Este mai dezvoltat n celulele secretoare; este alctuit din totalitatea
dictiozomilor= formaiuni discoidale cu membran simpl, aplatizate, suprapuse, de
la capetele crora se desprind permanent vezicule cu secreii.
Lizozomii - organite de form sferic sau ovoidal, cu membran simpla, ce conin
enzime hidrolitice cu rol n digestia intracelular (fagocitoz). Lizozomii sunt mai
numeroi n celulele secretoare i n leucocite.
Centrozomul = centrul celular este situat n apropierea nucleului; este prezent n
celulele animale i la protiste; este format din doi centrioli;d natere fusului de
diviziune.
Vacuolele - sunt vezicule delimitate de o membran simpl numit tonoplast;conin
suc vacuolar (ap, sruri, enzime, acizi organici); sunt temporare n celulele animale
i permanente n celulele vegetale.
Totalitatea lor formeaz vacuomul.
Plastidele specifice celulei vegetale; sunt autodivizibile (au material genetic propriu
- ADN plastidial); sunt: fotosintetizante: - cloroplaste-conin pigmeni verzi la
plantele verzi; rodoplaste - conin pigmeni roii la algele roii; feroplaste- conin
pigmeni bruni la algele brune; nefotosintetizante: cromoplaste conin pigmeni
roii-portocalii: fructe; leucoplaste - nu au pigmeni i depoziteaz diferite substane:
amiloplaste depoziteaz amidon - tuberculul de cartof; oleoplaste - depoziteaz
uleiuri - la floarea soarelui; proteoplaste depoziteaz proteine - n seminele
plantelor.
Cloroplastele conin pigmenii clorofilieni (verzi), ce absorb energia luminoas i o
convertesc n energie chimic, n timpul procesului de fotosintez.
Structural prezint: - membran dubl i cavitate; membrana prezint :-membrana
extern neted; -membrana intern - prezint prelungiri tilacoide, care ptrund n
cavitate i formeaz structuri discoidale aplatizate, dispuse n fiic ce alctuiesc
4grana. n gran sunt localizai pigmenii clorofilieni i aici se desfoar faza de
lumin a fotosintezei; cavitatea conine o substan fundamental = stroma. n strom
se gsesc: ADN, ARN, ribozomi, incluziuni lipidice, granule de amidon. Aici are loc
faza de ntuneric a fotosintezei.
Nucleul - este component celular fundamental, cu rol n coordonarea vieii celulei.
este alctuit din - membran dubl prevzut cu pori, prin care se desfoar
schimburile dintre nucleu i citoplasm; substan fundamental = carioplasma =
nucleoplasma, ce conine cariolimfa i cromatina; cromatina este constituit din ADN,
ARN i proteine i formeaz cromozomii, vizibili la microscop, n timpul diviziunii
celulare; n ADN este stocat informaia genetic. Aceasta poate fi transmis celulelor
rezultate prin diviziune sau poate fi utilizat n coordonarea activitii celulare, prin
tipurile de proteine (enzime) sintetizate intracelular; unul sau mai muli nucleoli - ce
conin ARN i au rol n biogeneza ribozomilor i n diviziunea celular.

7
 Introducere
Metabolism
ntre organismele vii i mediul nconjurtor exist un permanent schimb de
substane i energie astfel c organismele vii pot fi considerate din punct de vedere
temodinamic un sistem deschis.
Totalitatea acestor schimbri de substane i energie formeaz metabolismul. Dup
modul de desfurare el poate fi:
- general(bazal);
- intermediar.
Metabolismul general se refer la intrarea substanelor din mediul exterior i
evacuarea produselor rezultate, cu alte cuvinte, reprezint cheltuielile fixe de energie
necesare ntreinerii funciilor vitale (respiraia, circulaia, activitatea sistemului
nervos, excreia i secreia endocrin).
Metabolismul intermediar se refer la toate transformrile pe care le sufer
substanele n organism pn la evacuarea produselor rezultate n urma
transformrilor.
Metabolismul intermediar are dou laturi:
- anabolism ;
- catabolism.
Anabolismul const n sinteza compuilor macromoleculari din compui simpli
avnd loc aportul energiei.
Catabolismul const n degradarea compuilor macromoleculari cu formarea
compuilor simpli (ca monozaharide, glicerol, aminoacizi etc.) i este nsoit de
eliberare de energie. Ambele procese se desfoar simultan n organism astfel dac
ntr-un anumit loc se desfoar procese anabolice cu siguran n alt loc din
organism se desfoar procese catabolice.
Degradarea i sinteza diferitor substane presupune o succesiune de reacii, fiecare
reacie catalizat de anumit enzim ce reprezint calea metabolic.
Cile metabolice pot fi :
-liniare-ABCDEF;
-ramificate AB D
E
F

-ciclice-din AB i viceversa;
- ciclice interptrunse. A2 A A1
Dei cile metabolice conin unele reacii reversibile pe ansamblu acestea sunt
ireversibile deoarece:
-procesele anabolice i catabolice se desfoar n compartimente diferite(cele
anabolice n citoplasm), iar cele catabolice n mitocondrii.
Nu toate reaciile pot fi reversibile din punct de vedere termodinamic: procesele
catabolice i anabolice depind de factori diferii.

Procesele bioenergetice.
8
 Organismele care i sintetizeaz compui organici din CO2, H2O i energie se
numesc organisme autotrofe. Din acestea fac parte algele verzi, bacteriile
nitrificatoare fixatoare de azot i ntr-o msur mai mic bacteriile ferogenoase,
sulfogenoase.
Organismele care folosesc energia chimic eliberat prin degradarea compuilor
organici gata sintetizai se numesc organisme heterotrofe. Acestea sunt dependente
de cele autotrofe. Dintre acestea fac parte organismele animalelor i omul, , bacteriile
de mucegai etc.
Chemiotrofe ca surs de E folosesc reaciile de oxido-reducere, i nu lumina solar
ca plantele.
Concomitent cu schimbul de substane are loc i schimbul de energie. Astfel,
reaciile care se desfoar cu eliberare de energie se numesc reacii exergenice, iar
cele care se desfoar cu absorbie de energie se numesc endergenice.
Energia eliberat prin procesele exergenice se nmagazineaz n nite legturi
speciale numite legturi macroerge i legturi fosfoesteri, fosfoamidice,
anhidridice. Compuii care conin legturi macroerge se numesc compui
macroergi. Dintre acetea locul principal revine ATP-ului (acidului
adenozintrifosfat). Energia eliberat n procesele ezergenice activeaz fosforul
anorganic fin compusul ionului acidului ortofosforic care se leag de ADP (acidul
adenozin difosforic) i se transform n ATP.
energie

ADP + H3PO4 ATP
n reaciile endergenice este necesar energia eliberat prin hidroliza ATP-ului
ATP energie
ADP + H3PO4

Schimbul permanent de substane si energie dintre organism si mediu se

numete metabolism si constituie funcia fundamental a vietii; ncetarea
metabolismului determin moartea organismului. Or, Metabolismul este ansamblul
reaciilor biochimice care au loc in organism si sunt implicate in meninerea viei i
tuturor celulelor sale, schimbul permanent de materie si energie dintre organism si
mediu.
Metabolismul are dou procese: anabolism care reprezint
sinteza tuturor constituenilor celulari sau de rezerv ce are drept scop rennoirea
permanent a structurilor celulare uzate, sinteza unor substane active (enzime,
hormoni) i creterea si inmulirea celulelor.
Se face cu consum de energie. Catabolismul reprezint descompunerea moleculelor
pn la produi finali neutilizabili. Se face cu eliberare de energie care asigura
desfurarea proceselor fiziologice.
Organismul este un sistem deschis care face schimb de substan i energie cu
mediul extern. Acest schimb permanent se numete metabolism. Metabolismul
ncepe odat cu ingestia alimentelor i sfrete cu excreia produilor neutilizabili.
El se desfoar n trei etape: digestiv, celular i excretorie. Legtura dintre aceste
etape o asigur sngele i circulaia acestuia.
n etapa digestiv, sub aciunea unor fermeni specifici, are loc fragmentarea
hidrolitic a macromoleculelor organice din alimente i transformarea lor n molecule
9
simple, fr specificitate, absorbabile ( glucoz,acizi grai, glicerin, aminoacizi ).n
etapa celular, principiile alimentare sufer numeroase transformri.
Totalitatea transformrilor biochimice care au loc la nivel celular reprezint
metabolismul intermediar. Deci, metabolismul intermediar reprezint schimbul de
substane i energie dintre celul i mediul intern. Reaciile metabolice din celule sunt
de dou feluri: reacii anabolice, de sintez a unor constitueni celulari sau de
rezerv, i reacii catabolice, de scindare a substanelor pn la produi finali
neutilizabili (ap, dioxid de carbon,s ubstane azotate simple). Prin reacii anabolice
are loc rennoirea permanent a structurilor celulare uzate, sunt sintetizate o serie de
substane active ( enzime, hormoni ),este asigurat creterea i nmulirea celulelor,
precum i ncrcarea lor cu material nutritiv de rezerv. Reaciile catabolice
genereaz energie. Ele se desfoar n dou faze succesive. n prim faz are loc
metabolizarea incomplet, pe ci specifice,a substanelor nutritive, pn la stadiul de
acetil coenzim A i acid oxaloacetic, produi intermediari comuni glucidelor,
lipidelor i proteinelor. n aceast faz se elibereaz o cantitate redus de energie. n
faza a doua are loc metabolizarea complet a produilor intermediari. Aceast faz
este comun tuturor substanelor nutritive. Ea const n reacii de oxido-reducere prin
care se elibereaz peste 90% din energia chimic a moleculelor. O parte din aceste
reacii se desfoar ciclic, n cadrul ciclului citric sau ciclul lui Krebs, iar o alt parte
are loc la nivelul lanului sau catenei respiratorii celulare.
Metabolismul intermediar si energetic.

Metabolismul - este schimbul permanent de substane dintre organism i mediu.

Din punct de vedere didactic metabolismul prezint 2 componente:
- intermediar - care reprezint totalitatea transformrilor pe care le sufer alimentele
introduse in organism (glucide, proteine, apa, minerale).
- energetic - const n generarea i utilizarea energiei necesare, desfaurarii
activitii diferitelor organe i sisteme. Reaciile metabolice au loc n celule, unde
deosebim:
= reacii anabolice sau de sinteze care rennoiesc permanent structurile celulare sau
sintetizeaz substae active (enzime, hormoni) asigurnd creterea, inmulirea
celulelor. Aceste sunt reacii care necesit energie.
= reaciile catabolice care genereaz energie prin procesele de oxido-reducere, de
ardere a alimentelor in prezena oxigenului. Energia in organism se elibereaz treptat
n etape succesive, o parte se transforma in cldura, o alta se nmagazineaz sub
forma compuilor fosfat -macro-energetici de tip A.T.P.

Caracteristica metabolismuli intermediar

Obiectivele metabolismului intermediar sunt:
- de a prelua din mediul nconjurtor energie sub form de energie chimic din
componena hranei sau sub form de energie luminoas;
- utilizarea componenei hrnii pentru sinteza substanelor proprii;
- degradarea substanelor celulare cu eliberare de energie.

10
 Toate aceste aspecte alctuesc tabloul general al metabolismului intermediar care
presupune att procese catabolice ct i procese anabolice.
Catabolismul i anabolismul se desfoar n trei etape:
Catabolismul.
Stadiul I const n degradarea compuilor macromoleculari (proteine, lipide, glucide)
n compui simpli aminoacizi, acizi grai , glicerol i monozaharide.
Stadiul II Const n transformarea biomoleculelor de baz ntr-o substan unic
numit Acetil CoA.
Stadiul III const n antrenarea Acetil CoA ntr-o succesiune de reacii care
alctuesc ciclul Krebs cu formarea a 4 perechi de H i 2 atomi de carbon sub
form de CO2.
Anabolismul
Stadiul I al anabolismului coincide cu stadiul II al catabolismului. n acest stadiu din
componena ciclului Krebs se formeaz Acetil CoA.
Stadiul II al anabolismului coincide cu stadiul II al catabolismului. n acest stadiu se
formeaz Acetil CoA biomolecule de baz.
Stadiul III al anabolismului coincide cu stadiul I al catabolismului. n acest stadiu
se sintetizeaz din biomolecule de baz macromolecule proprii organismului
dat(proteine, lipide, glucide).

8.1 Modul I. Enzime

Tema 1. a) Consideraii generale ale enzimelor
Localizarea intracelulara a enzimelor

Enzimele (fermenii) sunt substane foarte complicate care se gsesc numai n

natura vie vegetala i animal avnd un rol important n desfacerea substanelor
alimentare brute (graimi, proteine, zaharuri) n substane mai simple pe care
organismul s le foloseasc mai rapid i mai uor pentru producerea de energie.
De asemenea, enzimele pot sintetiza substante complexe necesare vietii, din
substane mai simple.
Din arderea combustibilului alimentar n organism, rezult pe lng energie i o
serie de deeuri care nu mai pot fi utilizate de ctre organism sau care sunt toxice.
Enzimele descompun aceste deeuri pn la componentele simple din care au fost
sintetizate alimentele: ap, bioxid de carbon, azot, sulf, etc.
In celula, enzimele sunt localizate specific n anumite compartimente fie in organite
celulare, fie n citoplasm.
Separarea organitelor celulare prin ultracentrifugare urmat de identificarea specific
a enzimelor prin tehnici imunohistochimice a reprezentat modalitatea prin care s-a
stabilit exact localizarea intracelulara a enzimelor.
Unele procese au loc n toate tipurile de celule, enzimele respective fiind raspndite
ubicuitar(care este rspndit peste tot), cum ar fi de exemplu, enzimele implicate n
biosinteza proteinelor i acizilor nucleici, enzimele glicolitice.
Alte procese au loc numai n anumite celule, ca urmare numai acestea posed
echipamentele enzimatice specifice. De exemplu, enzimele implicate n sinteza

11
hormonilor tiroidieni sunt numai n tiroid, enzimele implicate n biosinteza ureei se
gsesc numai n celulele hepatice.
Fiecare organ se caracterizeaz printr-un profil enzimatic reprezentat de enzimele
care acioneaz n diferitele compartimente din celul.
Membrana celular conine enzime implicate n transportul substanelor.
Mitocondriile prezint enzime ce catalizeaz procese generatoare de energie:
membranele extern i intern conin enzimele implicate n lanul respirator, sinteza
fosfolipidelor, elongarea i desaturarea acizilor grai, iar matricea mitocondrial
conine enzimele ciclului Krebs, enzimele implicate n decarboxilarea oxidativ a
cetoacizilor catabolismul acizilor grai, dezaminarea aminoacizilor, biosinteza ureei.
Nucleul conine enzimele implicate n metabolismul acizilor nucleici.
Ribozomii abunda n enzime implicate n diferitele faze ale biosintezei proteinelor.
Ribozomii liberi sintetizeaz proteinele celulare, iar cei fixai de reticulul
endoplasmatic, proteinele de export.
Citoplasma conine enzimele glicolitice, pentozofosfailor, enzimele din biosinteza
acizilor grai, a nucleotidelor etc.
Lizozomii abundeni n ficat, rinichi, globule albe conin hidrolaze:
enzime proteolitice, ribonucleaze, enzime care hidrolizeaz proteoglicanii,
sfingolipidele.
Complexul Golgi conine enzime implicate n exportarea proteinelor sintetizate n
reticulul endoplasmatic i maturarea glicoproteinelor si proteoglicanilor.
Unele enzime au localizare mixta, citoplasmatic i mitocondrial, cum sunt
transaminaz glutamic oxalilacetic, malat dehidrogenaza, izocitrat dehidrogenaza.

Generalizri Consideraii generale ale enzimelor.

In organismele vii, mii de reacii chimice se desf oar foarte rapid n condiiile de
presiune i temperatur ale acestuia. Toate aceste transformri sunt mediate
de enzime (denumite iniial fermeni sau diastaze), proteine specializate s catalizeze
reaciile metabolice.
Substanele transformate n aceste reacii se caracterizeaz printr-o tendin a limitat
de reacie "n vitro" n aceleai condiii cu cele din organism.
De exemplu, oxidarea glucozei n celule se realizeaz rapid, glucoza fiind un compus
ce inmagazineaz o mare cantitate de energie prezentnd un anumit potenial
termodinamic, dei n laborator, n aceleai condiii ca cele din organism, aceasta
este stabil n prezena oxigenului.
Astfel de procese, favorabile termodinamic, pot decurge cu viteze crescute datorit
aciunii catalitice a enzimelor.
A) Caracteristicile enzimelor
Enzime
n organismele vii, mii de reacii chimice se desfoara foarte rapid n condiiile de
presiune i temperatura ale acestuia. Toate aceste transformri sunt mediate
de enzime (denumite iniial fermeni sau diastaze), proteine specializate s
catalizeze reaciile metabolice.
Substanele transformate n aceste reacii se caracterizeaz printr-o tendina limitata
de reacie "in vitro" in aceleai condiii cu cele din organism.
12
De exemplu, oxidarea glucozei n celule se realizeaz rapid, glucoza fiind un compus
ce nmagazineaz o mare cantitate de energie prezentnd un anumit potenial
termodinamic, dei n laborator, n aceleai condiii ca cele din organism, aceasta este
stabil n prezena oxigenului.
Astfel de procese, favorabile termodinamic, pot decurge cu viteze crescute datorit
aciunii catalitice a enzimelor.
Caracteristicile enzimelor
Enzimele pot fi definite biocatalizatori care prezint urmtoarele trsturi
caracteristice:
1. Enzimele au o putere catalitica enorma accelernd viteza reaciilor cu pn la
1016 fa de viteza reaciei necatalizate. Aceasta capacitate depete puterea oricrui
catalizator folosit in sinteza organica. Enzimele au aceasta imens putere catalitic n
soluii diluate, n condiii moderate de pH i temperatur.
Puterea catalitic poate fi definit ca raportul ntre viteza reaciei catalizate i viteza
reaciei necatalizate enzimatic.
2. Enzimele nu se consum i nu se transform n reaciile catalizate.
3. Enzimele se caracterizeaz printr-o mare specificitate. Orice enzim este foarte
selectiv att n ceea ce privete substana pe care o transform (substrat) ct i din
punctul de vedere al reaciei catalizate.
E (enzima) TransformareaS P (produi) se desfoar fr reacii
secundare,
astfel c rezult numai compuii dorii. Prin aceasta aciune enzimele se deosebesc de
catalizatorii din chimia organica, reaciile desfurate n absena enzimelor avnd
randamente mai sczute i fiind nsoite de reacii secundare.
4. Enzimele scad energia de activare a moleculelor de substrat pe care le transforma
accelernd astfel viteza reaciei biochimice.
5. Capacitate de reglare. Reglarea activitii enzimatice se realizeaz n moduri
diferite ce variaz de la controlul cantitii de enzima sintetizate de celula pn la
modularea activitii sale prin interaciuni reversibile cu activatori i inhibitori
metabolici. Activitatea variat a enzimelor poate fi pusa pe seama capacitii de
adaptare structural i funcional a proteinelor. Enzimele contribuie astfel la
coordonarea i reglarea proceselor metabolice.
7. Enzimele se gsesc n celule i acioneaz n cantitate foarte mic dar cu efect
semnificativ.
8. Enzimele pot cataliza reaciile n condiiile organismului, la temperatura de
aproximativ 37oC, n condiii de in general neutru i la presiune atmosferic.
Reaciile chimice ce au loc n organismele vii, n condiii de presiune i temperatur
relativ joase i pH bine definit nu se pot realiza, la vitezele apreciabile care le
caracterizeaz, dect admind intervenia unor catalizatori deosebit de eficieni.
Aceti catalizatori eficieni sunt produi chiar de organism, sunt de natur proteic i
poart numele de ENZIME (de la grecescul "en zime" = drojdie). Ele se pot defini,
deci, drept proteine cu aciune catalitic; aproape toate moleculele-enzim, cunoscute
pn acum, dintre care multe obinute sub form cristalin au structur proteic.
Numrul enzimelor este de ordinul miilor cci, n lumea vie, fiecrei molecule

13
organice, existente aici, trebuie s-i corespund cel puin o enzim, care s participe
la sintez i/sau degradarea ei.
Or, Enzimele (din limba greac - zymosis - ferment) sunt proteine sau proteide fr
de care celule vii nu pot nfptui reacii complexe ntr-un timp scurt, la temperatura
mediului nconjurtor. Ele sunt substane care catalizeaz reaciile biochimice din
organism, avnd un rol esenial n biosinteza i degradarea substanelor din materia
vie, ntlnindu-se n toate organismele animale, vegetale i n microorganisme, mai
fiind denumite din aceast cauz biocatalizatori. Fr enzime , procesele biochimice
s-ar desfura cu viteze foarte mici.
1. Rolul enzimelor n cadrul organismelor poate fi generalizat:
a). Descompunerea moleculelor mari.
b). Accelereaz procesele metabolice.
c). Coordoneaz unele etape ale ciclului metabolic.

A) Caracteristicile enzimelor
Enzimele sunt proteine globulare putnd avea o structur:
a). unitar - enzime monocomponente, alctuite numai din aminoacizi: tripsin, ,
chimotripsin, pepsin, lipaz, ribonucleaz;
b). binar - enzime alctuite dintr-o parte proteic (apoenzima) i o grup neproteic,
definite de Euler astfel: Holoenzim= Apoenzim + Cofactor.
Studiul structurii enzimelor s-a realizat prin tehnici exacte: difracie de raze X,
dicroism circular, fluorescen, analize in UV i IR, RMN, spectrometrie Raman etc.
Apoenzim este de natur proteic care confer enzimei specifizarea de substrat.
Cofactor este de natur neproteic i care nu confer enzimei specificitatea de
reacii. Cofactorul poate fi reprezentat de :
-coenzime care sunt derivai de la vitamine cum ar fi NAD+;FAD+.
Ce prezint aceti cofactori (coenzime)?
R-s: Dintre toi cofactorii prezeni n organism, doi dintre ei mai cunocui purttori
de electroni sunt coenzimele NAD+ (nicotin-adenin dinucleotid) i FAD+ (flavin-
adenin-dinucleotidul). Restul de nucleotid din NAD + (sau FAD+) este forma
fosforilat a NAD+-lui, locul n care poate avea loc reducerea reversibil,
fenomen care const n transferul ionilor de hidrogen (NAD++H+NADH )
- grupe prostatice TPP, piridoxalfosfat, hemul;
- ionii metalici Na+, Cu2+, Zn2+, Fe2+, Fe3+, Co2+.
Enzime, biofermeni substane proteice specifice sintetizate n organismele vii,
care ndeplinesc rolul de catalizatori biologici n reaciile biochimice, asigurnd
reglarea proceselor metabolice. Se gsesc n toate celulele i lichidele organismului.
Dup structur enzimele se clasific n dou categorii: enzime exclusiv de
component de natur proteic i o component de natur neproteic numit
coenzim. Natur proteic format numai dintr-o holoproteid i enzime
hetroproteide formate dintr-o coenzim.
Enzimele se mpart n ase grupe mari: hidrolaze, transferaze, oxidoreductaze,
liaze, izomeraze i ligaze (sintetaze), fiecare avnd, la rndul ei, mai multe
subgrupe. Enzimele reacioneaz cu substratul (substana care va fi scindat) i
14
formeaz aa-numitul complex intermediar enzim-substrat (ES). Aceasta duce la
micorarea energiei de activare, nlesnind descompunerea substratului. Fermenii
sunt activi n concentraii extrem de mici (de ex., amilaza este activ n soluie de 1 :
1000.000, peroxidaza n soluie de 1 : 5000.000) i nu se consum n timpul
procesului de catalizare. Enzimele sunt proteine simple sau conjugate, ultimele avnd
dou componente: prima proteic, nedializabil, termolabil, numit apoenzim, i
cealalt micromolecular, dializabil i termostabil, numit coenzim (coferment
sau partea prostetic, cnd ea este strns legat de apoenzim). Cofermentul este
reprezentat prin enzim legat de metale (Si ++, Zn++, Mg++ etc.), nucleotide, vitamine
. a. Partea neproteic (cofactorul) determin sensul reaciei, activitatea catalitic
propriu-zis i mecanismul reaciei chimice. Apoenzima prin grupele sale chimice
speciale stabilete legtura enzimei cu substratul, adic determin caracterul specific
al reaciei. Activitatea catalitic nu este realizat de ntreaga molecul a enzimei, ci e
concentrat ntr-o poriune limitat, numit centru activ, afar de care n componena
enzimei mai ntr aa-numitul centru alosteric. Prin intermediul lui are loc reglarea
activitii enzimei. Unele enzime exist sub form inactiv (proenzim), activndu-se
n anumite condiii (de ex., pepsinogenul este activat n prezena acidului clorhidric).
Existena enzimei sub form de precursori inactivi reprezint un factor de protecie,
care previne, bunoar, autodigestia esuturilor, coagularea intravascular a sngelui
etc. Asupra activitii enzimelor acioneaz multe substane (iod, metale, hormoni,
metabolii etc.), printre care unele (numite activatori) le sporesc activitatea catalitic,
iar altele (numite inhibitori) o reduc. Inhibitorul formeaz cu enzima un complex
incapabil de activitate catalitic. n funcie de stabilitatea acestui complex exist
inhibiie ireversibil i inhibiie reversibil. Ultima poate fi concurent (izosteric)
sau neconcurent (alosteric). n cazul inhibiiei concurente inhibitorul are o structur
asemntoare cu substratul. Astfel ntre substrat i inhibitor are loc un fel de
concuren pentru centrul activ, care depinde de raportul dintre concentraiile lor.
Inhibiia concurent st la baza aciunii preparatelor sulfanilamidice de combatere a
unor microorganisme, pentru care acidul paraaminobenzoic (asemntor dup
structur cu unele sulfanilamide) constituie factorul de cretere al microorganismelor.
n urma substituiei concurente se obine un efect bacteriostatic (stagnarea creterii i
nmulirii bacteriilor). n cazul inhibiiei neconcurente inhibitorul (numit efector) nu
seamn dup structura sa cu substratul i, deci, nu se fixeaz n centrul activ
catalitic, ci n centrul alosteric. Ca efectori pot servi, de asemenea, unii metabolii,
unele nucleotide etc. Efectorul, fixndu-se n centrul alosteric, modific configuraia
enzimei, i, ca rezultat, centrul catalitic se deformeaz parial sau total, avnd ca
urmare pierderea sau reducerea activitii enzimei.
Ansamblul de reacii chimice care constituie metabolismul se desfoar ntr-o ordine
strict, la baza creia st procesul complex de reglare a activitii enzimelor.
Dereglarea proceselor enzimatice, aprute ca rezultat al mutaiilor, reprezint aa-
numitele enzimopatii, caracterizate prin sinteza enzimei defectuoase, adic inactiv
sau cu activitate catalitic parial redus. n cazul multor afeciuni activitatea
enzimelor se modific, de aceea determinarea activitii acestora n obiectele
biologice (ser, urin) are o aplicare larg n diagnosticarea hepatitei, pancreatitei,
bolilor cardiovasculare . a. n afar de aceasta astfel de preparate enzimatice, ca
15
pepsina, tripsina, fibrinolizina, hialuronidaza, trombina, lizozima . a., se
administreaz i pentru tratarea unor boli.

C) Nomenclatura.
Nomenclatura de lucru i cea sistematic.
Nomenclatura de lucru este aceea care se obine adugnd terminaia aza la numele
substratului asupra creia acioneaz enzima. Exemplu: maltaza are ca substrat
maltoza, ureaza are ca substrat ureea.
Nomenclatura sistematica include doua componente
1) Definete substratul sau cele doua substane asupra crora acioneaz enzima (la
reaciile bimoleculare);
2) Sufixul aza - indic natura procesului pe care-l determina enzima. Ex.:
glucoamilaza. 1,4 glucon - glucohidrolaza (asupra leg.1,4 din glucon i aciunea se
realizeaz hidrolitic cu eliminare de glucoza).
Cnd avem doi componeni: transaminaza = glutamat - piruvat aminotransferaza.
Clasificare
Dup locul unde acioneaz: endoenzime i exoenzime.
M = 13000 = 35000 - numr restrns
Dup organizarea structural - monomere - oligomere (majoritatea) (disociaz in
monomeri) M = 35000 sute de mii- izoenzime configuraie difetit, dar
catalizez.
aceleai reacii complexe enzimatice.
Sintetizate n celula legat una de alta i catalizeaz reaciile ntr-o anumit
succesiune.

Nomenclatura enzimelor nu este dificil. Aceasta se bazeaz pe 2 factori:

- substratul asupra cruia acioneaz enzima.
- modul cum reacioneaz enzima cu substratul dat.
De exemplu: piruvat decarboxilaz enzim care ndeprteaz grupa carboxil de
la piruvat.

Proteinele joac mai multe roluri n

organism ca : enzime, enzime inhibatorii,
hormoni, rol protector (anticorpi),
regulatori osmotici,
conectori ai muchilor cu oasele.
Nici un alt polimer compus nu mai joaca attea
roluri n natur deoarece proteinele sunt foarte d
iverse n structur.
Doar 20 de aminoacizi sunt folosii pentru a Imagine de tip panglic a enzimei
construi structura primara,dar ei pot fi TIM (tiazo-fosfat-izomeraza) care
aranjai teoretic in 20 la puterea 19 secvene dif catalizeaz convulsia reversibil a e
izomerilor dihidroxiaceton-fosfat i
rite.
D gliceraldehida 3 fosfat
Enzimele sunt catalizatori biochimici propriu-
zii, aadar sunt compui care mresc viteza
16
reaciilor chimice ce se desfoar in sistemele biologice, fr s
se consume n cursul lor.
S-au efectuat lucrri numeroase de-a lungul anilor dovedindu-se prin acestea c
enzimologia constituie studiul bazelor moleculare ale vieii.
Enzimele sunt probabil mai importante dect orice alt element activ ca ajutor al
digestiei si sntii. Pan acum s-a artat c sute de enzime au un rol vital in
construirea sntii, datorit contribuiei lor la procesul de digestie. Studiile viitoare
probabil vor arta c enzimele au un rol mult mai important pentru sntate
dect se cunoate n prezent.
Nu putem trai mult fr enzime. De fapt, concepia n sine este dependent de aceste
elemente. Ele funcioneaz ca un catalizator care face ca celulele corpului s
funcioneze eficient. Din momentul naterii, enzimele fac viata posibil prin aciunile
lor, reparnd i construind corpul i celulele creierului. Aceti lucrtori acioneaz n
corp i n creier n cel mai fantastic i puternic mod. Ele lucreaz pentru o sntate
deplin. Enzimele reprezint nsi fora intangibila a vieii. Omul nu poate reui s
creeze enzime vii aa cum natura poate crea, dac ar fi putut, ar fi reuit s creeze
viata sau s readuc la via materia moart.
Exista miliarde de enzime n corpul nostru, i sunt sute de tipuri diferite de enzime
gsite n snge, care vor descompune 5 milioane de molecule de peroxid n ap i
oxigen n 60 secunde. Enzimele intestinale pot descompune moleculele de zahar i
grsimi care sunt de 1 milion de ori mai mari dect greutatea lor.

Centrul activ al enzimelor

Procesul enzimatic nu se desfoar oriunde n molecula enzimei, ci numai n
anumite zone care au o dispozitie spaial corespunzatoare, alctuite din 2-
4 aminoacizi. Aceste zone se numesc "centri activi" i reprezint aranjamentul
spaial adecvat "prinderii" substratului.
Legarea substratului la centrul activ al enzimei i imprima o stare de tensiune
molecular care faciliteaz reacia biochimic. n centrul activ se gsesc numai
anumii aminoacizi care prezinta grupe -OH, - SH, - COOH, -NH2, radical imidazol
(de exemplu, serina, histidina, acid aspartic, lizina).
n cazul enzimelor cu structur binar, n centrul activ se poate distinge un situs de
fixare care se combin cu substratul prin legturi labile (la formarea cruia particip
aminoacizi auxiliari) i un situs catalitic (format din aminoacizii colaboratori care
acioneaz asupra substratului), importan pentru aceast interac iune fiind prezena
cofactorilor. Aminoacizii care nu sunt implicai n reacia enzimatic sunt aminoacizi
necolaboratori. Functionalitatea centrului catalitic este consecina structurii spaiale a
proteinenzimei care prin dispoziia sa n spaiu aduce anumii aminoacizi distanai n
structura primar ntr-o pozitie optim pentru legarea substratului

(Modelul cheia i
lactul)
Organizarea centrului
activ la enzimele
alosterice.
17
Pentru E biocomponente centrul activ conine i cofactor (coferment).
n afar de aminoacizi care particip direct la reacia enzimatic, exist unii care au
rol indirect -->asigur flexibilitatea structurii teriare.
Exist aminoacizi care sunt considerai aminoacizi umplutur care variaz n
izoenzime sau n formele moleculare multiple.
Centrul activ este format din 2 regiuni :
prima regiune de recunoatere / legare cu a substratului; a 2-a regiune responsabil de
reacia enzimatica. Exemplu, acetilcolinesteraza are un centru activ format din 2
regiuni :
a) anionic care conine gruparea COO- a acidului aspartic, are rol de recunoaterea
regiunii pozitive din substrat;
b) esterazic care conine grupele -OH din serin i grupul imidazolic din restul de
histidin care au rol n scindarea substratului:
CH3-CO-O-CH2-CH2-N-(CH3)3 ----->CH3-COOH + CH2OH-CH2-N-(CH3)3
acetilcolina -HOH colina.
Centrul activ are n general este o structur complmentar cu structura substratului

Specificitatea enzimelor reprezinta :

1) capacitatea unei enzime de a cataliz, o anumit reacie enzimatic neputnd
aciona asupra substanelor cu structur asemntoare ca exemplu ureaza:
ureaza

H2N-CO-NH2 H 2O
2NH3+CO2

2) transformarea unui sau a mai multor substraturi cu structuri asemntoare n cadrul

reaciei respective, spre exemplu, amilazele pot ac iona att asupra amidonului ct i
asupra glicogenului .
3).Unele enzime sunt active pentru izomerii cis i pasive pentru izomerul trans al
aceleiai substrat.
Specificitatea poate fi de reacie: proprietatea unei enzime de a cataliza o singur
reacie termodinamic posibil cu excepie :
- enzimele proteolitice care n afar de legtur peptidic pot scinda legturi esterice
sau amidice i pot cataliza R de transesterificare ;
- enzimele piridoxal dependente catalizeaz R de transminare, de carboxilare,
izomerizare, alfa-beta eliminare;
- kinazele care catalizeaz transferul unui rest de fosfat de pe ATP pe anumite
substrate.
Specificitatea poate fi de substrat : absolut / relative / stereospecificitate optic sau
geometric.

18
 Energia de activare
ntr-o reacie enzimatic cre terea vitezei de reacie se face prin scderea energiei de
activare fr a modifica starea termodinamic a sistemului.
O reacie de transformare a unui substrat n produi de reacie va avea loc numai
atunci cnd o anumit populaie din moleculele substratului vor avea suficienta
energie pentru a trece ntr-o stare activa (= cu cea de tranziie T ).
Cantitatea de energie necesar pentru a aduce toate moleculele dintr-un mol de
substrat la o temperatura dat n stare de tranziie T se nume te energie liber
de activare (kcal/mol).
n laborator energia cinetic necesar creterii numrul de ciocniri eficace pentru a
forma produi de reacie se realizeaz prin cretere temperaturii. Acest lucru nu este
posibil pentru organismele vii deoarece omul este fiin homeoterm, aceasta
imposibilitate este depit de prezena enzimei care are rolul de a scdea energia de
activare a reactanilor fr a modifica starea termodinamic a sistemului.
Eficienta catalizei enzimatice este asigurata prin mai multe mecanisme :
1) orientarea, apropierea substratului de centrul activ al E;
2) adaptarea indus a centrului activ la structura substartului;
3) cataliza general acid-baz;
4) cataliza covalent (enzima i o grupare funcional din centrul activ formeaz un
intermediar covalent)

8-2. Tema II. Specificarea enzimelor

1. Generaliti
Enzimele sunt substane care catalizeaz reaciile biochimice din organism, au un rol
esenial n sinteza i degradarea substanelor din materia vie. Toate transformrile
biochimice au loc numai prin intermediul enzimelor de aceea se mai numesc i
biocatalizatori. Ele determin realizarea unor reacii chimice cu vitez mare, n
condiii compatibile cu viaa: dac ele n-ar exista reaciile chimice s-ar putea produce
numai la temperaturi i presiuni ridicate, condiii deosebite de alcalinitate i aciditate.
Enzimele au un rol fundamental n reglarea proceselor metabolice i pot aciona n
interiorul sau n exteriorul organismului.
Din punct de vedere chimic enzimele sunt substane proteice, cu rol funcional. Sunt
produse numai de organisme vii i acioneaz asupra unor substane care se numesc
substrat.
n celula se gsesc n nucleu, citoplasma, adsorbite la suprafaa diferitelor
componente celulare sau dizolvate n protoplasma sau n sucul celular.
Fiind substane proteice ii pierd proprietile catalitice n condiiile n care are loc
denaturarea proteinelor: temperatura ridicata, mediu acid, bazic, prezenta solvenilor
organici.
Enzimele se gsesc n organismele vegetale cu precdere n: semine n stare de
germinaie, plante, frunze, fructe. Concentraia lor este mai mare n organismele
tinere i puterea catalitic este mai mare.
Din punct de vedere fizic au proprietai asemanatoare proteinelor.
Paralela ntre catalizatori i enzime
a) Asemnri:
19
- in reacii reversibile asigura ajungerea foarte rapid la echilibru;
catalizeaz numai reacii termodinamic posibile (n sensul micorrii energiei
libere);
- nu modific echilibrul de reacii, ci numai viteza;
nu se consum n timpul reaciilor i nu se transform, de aceea o cantitate foarte
mic este suficienta pentru transformarea unor cantiti mari de substrat.
b) -Deosebiri:
- prezint specificitate de aciune care poate fi de reacii sau de substrat;
- asigur coordonarea, reglarea i controlul proceselor biochimice fiind modulatori ai
proceselor metabolice.
2. Structura i conformaia
Enzimele sunt macromolecule de natura proteic cu urmtoarele caracteristici:
a) au particulariti structurale specifice, adic existena unor situsuri (zone n care se
leag n mod specific substratul):
- situs catalitic;
- situs allosterice;
b) prezint configuraie spaial care asigur funcionarea ca enzim.
Substratul enzimelor reprezint un compus care se poate lega specific la o
enzim i asupra cruia enzima acioneaz transformndu-l in produs de reacie.
E +S[ES]E +P, unde E- enzima, S-substrat, P-produi de reacie
Substratul trebuie sa ndeplineasc urmtoarele condiii:
- sa satisfac necesitatea de specificitate a unei enzime;
- sa prezinte o dispunere spaial care sa-i permit accesul la enzim;
- sa prezinte o complementaritate structural i conformaional.
Situsul catalitic reprezint o zona specific i delimitat format dintr-un numr
mic de radicali de aminoacizi care includ grupri:
-OH, - NH2, - COOH, - SH.
Situsul catalitic ocup o zona restrns din suprafaa enzimei, de aceea
substratul este o molecul dimensionat pe msura situsului.
Situsul allosteric reprezint o zona a crei activitate se bazeaz pe existena unui
efector allosteric - activator sau inhibitor - care se leag la situsul allosteric i creaz
capacitatea de modulator al reaciilor biochimice.
Centrul catalitic este reprezentat de :
- situs la enzimele holoproteice;
- situs plus cofactor la cele heteroproteice.
Enzimele heteroproteice prezint doua pri componente active doar mpreuna:
- apoenzima i cofactorul.
Apoenzima este o componenta de natura proteica, termolabila i nedializabil, are n
structura sa situsul catalitic i pe cel allosteric; determina legarea substratului,
formeaz complexul enzim - substrat i enzima - cofactor, determin specificitatea
fa de substrat, manifest grade diferite de afinitate pentru cofactor.

8.2 Tema: Mecanismul catalizei enzimatice, cinetica reaciilor enzimatice,

influena diferitor factori asupra vitezei de reacie.
20
 8.2.1.Cinetica reaiilor enzimatice

Prin studiul cineticii enzimatice este explicat modul in care enzimele ac ioneaz,
permind determinarea vitezei maxime de reacie a unei enzime i a afinitaii sale
pentru substrat sau pentru unii efectori. Determinarea vitezei de reacie nu relev
stoechiometria reaciei sau mecanismul acesteia, deci este necesar o ecuaie care s
fac legtura ntre viteza iniial a reaciei (determinata experimental) i concentraia
reacantilor.
Dei cazul enzimelor monomerice cu un singur substrat este relativ rar, cinetica
clasica a enzimelor monomerice n faza staionar cu un singur substrat (prezentata
n continuare) este modul cel mai simplu de a trata i a inelege cinetica enzimatic.
Cele mai multe enzime au ns mai multe substaturi dnd natere la produi diferii
nerespectnd comportamentul clasic.
In reaciile cu un singur substrat, meninnd constanta concentraia enzimei,
creterea concentraiei de substrat determin mrirea vitezei de reacie pn cnd se
atinge o valoare maxim peste care orict ar crete concentraia substratului viteza
reaciei enzimatice rmne nemodificata. (La concentraii mici de substrat, viteza de
reacie este proporional cu concentraia substratului (reacii de ordin1). La
concentraii mari de substrat, viteza de reacie devine n dependent de concentra ia
substratului (reacii de ordin 0), enzima saturndu-se cu substrat.
Viteza unei reacii enzimatice este determinat de concentraia de substrat la acel
moment i de constantele Km i v max.

Enzimele pot cataliza numai reacii termodinamic posibile, adic numai acele reacii
chimice care au loc cu scderea entalpiei libere de reacie. Viteza reaciilor catalizate
de enzime reprezint cantitatea de substrat transformat (c) ntr-un anumit interval de
timp (dt). Valoarea vitezei reale de reacie este dat de relaia:
dc
Vr = dt

Mrimea vitezei de reacie reprezint de fapt activitatea enzimatic.

Viteza reaciilor enzimatice (activitatea enzimatic) depinde de o serie de factori:
concentraia enzimei, concentraia substratului, afinitatea enzim -substrat,
temperatur, pH, prezena inhibitorilor.
a) Influena concentraiei enzimei[E]
Viteza de reacie crete proporional pentru concentraii mici i rmne
constant pentru concentraii mari de enzim pus n contact cu aceiai cantitate de
substrat. Grafic aceast variaie este redat astfel:

21
 Cofactorul reprezint componenta neproteic termostabila, dializabil
(unele vitamine, nucleotide).
Cofactorul enzimatic, la randul su poate fi:
- un rest al unei substane organice numita grupare prostetic, inseparabil legat de
apoenzim;
- un rest al unei substane organice numit coenzim care poate trece de la o
apoenzim la alta, separndu-se uor de aceasta prin dializ si neparticipnd la
formarea centrului
Activ al enzimei respective;
- un rest al unei substae nespecifice numit activator sau cofactor anorganic care
determin transformarea unui zimogen, adic a unui compus inactiv din punct de
vedere enzimatic intr-o enzim activ.
Dintre enzimele a cror parte prostetic este hemul, este catalaza, care catalizeaz
descompunerea peroxidului de hidrogen in ap i oxigen.
Cofactorii au urmtoarele caracteristici: sunt indispensabili pentru manifestarea
activitii catalitice sau pentru potentarea ei; unii sunt uor disociabili de apoenzim,
alii nu; determin specificitatea de reacie, formeaz complexul enzima - cofactor.
Coenzimele sunt micromolecule organice care se ataeaz temporar la
apoenzim ( vitamine, hemulul, NTP, NDP).
La plante, enzimele proteolitice sunt rspndite att n organele vegetative (frunze,
tulpini, rdcini), ct i n seminele aflate n repaus sau n germinaie. n timpul
germinaiei, degradarea proteinelor de rezerv din endosperm sau cotiledoane are loc
cu o intensitate deosebit pentru a furniza aminoacizii necesari biosintezei proteinelor
specifice embrionului n dezvoltare. Degradarea proteinelor se realizeaz i n
procesul de imbtrnire a plantelor cnd sunt supuse hidrolizei proteinele organelor
vegetative. Produii rezultai migreaz spre organele reproductive unde procesul de
biosintez proteic este deosebit de intens.

8.2.2.Mecanisme de aciune a catalizei enzimatice

Enzimele sunt deci substane active n cantiti foarte mici, nu modific echilibrul de reacie, ci
numai viteza acestora prin scderea energetice (activeaz sau labilizeaz moleculele care intra n
reacie).
n prezenta enzimelor nivelul energetic minimul este mult cobort, moleculele reacioneaz cu
viteze mari (n absena enzimelor nu ar reaciona).
22
 Mecanismul prin care enzimele i exercit funcia lor catalitic include ansamblul urmtoarelor
procese moleculare principale:
- asocierea specifica a enzimei (E) cu
substratul (S) - complex intermediar ES
disociabil (Ajustarea indus);
n cazul catalizei enzimatice, ntre
enzim i substratul care se transform,
se formeaz un complex activat enzima-substrat, care apoi se transform cu vitez
mare n produii finali de reacie.
La formarea complexului activat enzima substrat, substratul se fixeaz pe regiuni
bine determinate de pe suprafaa enzimei, care poart numele de centri activi i
molecula substratului, exist complementariti conformaionale i chimice care
permit asamblarea lor.
Centrul activ al unei enzime este construit dintr-un numr redus de aminoacizi
situai n vecintate sau la distan.
n general, se admite ca pentru o reacie chimica obinuita, enzima particip cu doi
centri activi. Pentru enzimele cu structura binar unul dintre centrii activi este, n
general, situat n fragmentul protetic, iar al doilean fragmentul prostetic.
(Vezi modelul cheia i lactul)
Astfel, cataliza enzimatic are elemente comune cu cataliza omogen, deoarece
enzima este adeseori repartizat uniform n sistemul chimic al crui transformare o
asigur. Cataliza enzimatic are caracter i de cataliz eterogen, reacia biochimic
desfaurndu-se n regiuni bine determinate de pe suprafaa enzimei, situate la limita
de separare dintre sistemul reactant i macromolecula catalizatorului.
Un alt caracter tipic este marea eficien catalitic a enzimelor. O reacie decurge n
prezena enzimei de 108 pana la 1011 ori mai repede, dect n absenta ei. Numrul de
molecule de substrat transformate sub aciunea enzimei ntr-un minut (numr de
transfer, turnover) variaz ntre 1000 1000000.
Cataliza enzimatic are loc n condiii blnde. Reacii care necatalizate nu au loc
dect la temperaturi nalte, presiuni mari, valori extreme de pH, sub influena
enzimelor evolueaz cu mare vitez la temperaturi n jurul lui 37 0C i la presiune
atmosferic, la pH aproape neutru.
8.2.3. Influenta diferitor factori
A) Influenta pH-ului
Pentru enzimele din organismul uman, pH-ul optim de ac iune este pH-ul normal al
mediului n care ele si manifest aciunea catalitic.
Centrul activ al enzimelor conine grupe ionizabile, acide sau bazice, deci
modificarea pH-ului are ca efect modificarea gradului de disociere i, implicit,
modificarea vitezei de reacie.
pH-ul optim de aciune a unor enzime
Pentru enzimele din organismul uman pH-ul optim este intre 5-9, dar exist enzime ce
acioneaz i n afara acestui interval. De exemplu, pepsina acioneaza la pH 1,5-2,
fosfatazele alcaline la pH 9-10, iar fosfatazele acide la pH 4,5-5.

B) Influenta temperaturii asupra activitii enzimelor

23
 Fiecare enzima este caracterizat de un coeficient termic al reaciei, notat Q10, ce
reprezint creterea vitezei de reacie pentru o cretere cu 10 0 a temperaturii, n
condiiile meninerii constante a celorlali parametri. Pentru reaciile enzimatice Q10
este ntre 1 si 2, fiind mai mic dect pentru reaciile necatalizate, pentru care Q10
este intre 2 si 4. Aceasta relaie este valabil numai pan la temperatura optim,
pentru care viteza de reacie este maxim. Creterea temperaturii peste temperatura
optima determina scderea vitezei de reacie, datorit denaturrii pr ii proteice a
enzimei.
Temperatura optim pentru enzimele din organismul uman este 37-400C, la plante 50-
600C, iar pentru cele din microorganismele din apele termale este 80-1000C.
Determinarea activitii unei enzime trebuie s se fac la o temperatur ntre 25-370C.

8.3 Tema Influenta efectorilor enzimatici

Efectorii enzimatici sunt substane cu structuri chimice variate care aduse n mediul
de reacie pot influena activitatea enzimei care catalizeaz reacia.
Efectorii enzimatici pot fi activatori sau inhibitori.
Activatorii enzimatici. Sunt compui care stimuleaz activitatea enzimelor. Acetia
pot fi:
- activatori ai unor proenzime.
Forma inactiv a enzimei se numete proenzim sau zimogen, n care centrul activ al
enzimei este mascat. Prin eliminarea unei pri din molecul, centrul activ este
demascat, enzima devenind activ
Enzimele se caracterizeaz printr-o remarcabil specificitate n raport cu tipul de
reacie catalizat i cu natura substratului transformat. Sunt unele enzime(ureaza,
arginaza) care nu catalizeaz dect o singura reacie bine determinat.
Remarcabil este de asemenea multitudinea reaciilor catalizate de enzime. Astfel,
enzimele intervin n reacii dehidroliz, de polimerizare i policondensare, de
oxidoreducere, de transfer de grupri funcionale (formil, metil, amino, acil,
carboxil), de formare i scindare de legturi covalente, de reacii prin radicali liberi
etc.
Unele caracteristici ale enzimelor sunt imprimate de structura lor proteic. Astfel,
activitatea lor n cursul metabolismului intermediar este limitat n timp. Ele se
degradeaz relativ rapid sub influena altora. Activitatea, degradarea i biosinteza
enzimelor, sunt reglate de factori i mecanisme de control, de complexitate deosebit
i situate la nivele variate de organizare a sistemelor biologice.
8.3.1 Specificitatea de reacie
Enzimele catalizeaz un anumit tip de reacie, n funcie de modul de aciune asupra
substratului. Acest tip de specificitate st la baza clasificrii enzimelor i este datorat
cofactorului care guverneaz tipul de reacie n care se va angaja substratul. De
exemplu, un anumit -aminoacid poate fi substrat pentru mai multe enzime care au
cofactori diferii.

24
 Specificitatea absolut.
Enzimele din aceasta categorie acioneaz strict asupra unui anumit tip de substrat
nerecunoscnd nici o modificare a substratului respectiv. Ele nu sunt specifice pentru
o anumita legtura sau grupare din structura substratului i recunosc doar substratul
n totalitate.
Exemple:

Arginaza
acioneaz
numai asupra argininei:
Anhidraza carbonica catalizeaz sinteza acidului carbonic:

8.3.2. Cataliza prin ioni metalici

Multe enzime necesit prezena metalelor pentru a-si manifesta aciunea, fiind din
acest punct de vedere metaloenzime (conin ionii integrai n structuri intim legate de
enzim) sau enzime ce necesita metalele ca activatori ( metalul este legat de enzim
prin legturi mai slabe).
Interaciunile ionice dintre un metal legat la enzim i substrat pot ajuta la orientarea
substratului pentru reacie sau pentru a stabiliza starea de tranziie.
Metalele funcioneaz drept catalizatori electrofili sau ca i centri nucleofili la pH
neutru.
Alcool - dehidrogenaza este una dintre enzimele care folosesc acest mecanism, n care
un ion Zn2+ stabilizeaz sarcina negativa ce apare tranzitiv la molecula de
acetaldehida format n reacia de oxidare a alcoolului.
Enolaza este enzima ce catalizeaz reacia de transformare a acidului 2,3-
difosfogliceric n acid fosfoenolpiruvic n glicoliz, pentru care ionii de Mg 2+ sunt
implicai n interaciunea cu substratul (Fig.de mai jos).
In cazul acesteia, Lys 345 funcioneaz ca baza extrgnd H+, iar Glu 211 ca acid
cednd H+ grupei OH-. Prin interaciunea acidului 2,3-difosfogliceric cu Mg2+se
aciditeaz H+ de la C2 devenind mai reactiv.
25
 Manifestarea specif
icit ii enzimei n
raport cu un anumit
substrat sau grupe de substrat
crora le confer o anumit orientare spaial precis;
- activarea respectiv scderea energiei de activare a moleculelor de substrat
reactant (S+);
- procesul catalitic efectiv prin care substratul se transforma n produs (P).
E + S S + P +
sau E + S ..[ES] P1 + E P2
EP2 + S1 [EP2S1] P2S1 + E
S = donor
S1 = acceptor
Viteza reaciilor enzimatice influenate de: concentraia enzimei i substratului,
temperatura, valoarea pH-ului, prezenta electroliilor, ali factori.
Cunoaterea rolului acestor factori are importan pentru ca prin studiul lor pot fi
caracterizate enzimele i se poate interveni asupra activitii lor catalitice.
Factorii enzimatici.
8.3.3. Reglarea activitii enzimatice.
Caracteristicile componentei proteice
Apoenzima fiind protein are toate nivelurile structurale. Structura primar este
stabil, determinat de secven aminoacizilor din lan ul polipeptidic. Structura
secundar reprezinta procentul de configuraie spaiala -helix (n special) stabilizat
prin legturi de hidrogen. Structura teriar se refer la asamblarea formelor
elementare n spaiul tridimensional i plierea catenelor polipeptidice.
Majoritatea aminoacizilor polari se dispun la exteriorul moleculei, iar aminoacizii
nepolari la interior, formnd o zon hidrofob intern. Structura cuaternar apare la
majoritatea enzimelor care sunt alctuite din mai multe catene polipeptidice identice
(enzime homomultimerice) sau diferite (enzime heteromultimerice), asocierea
protomerilor facndu-se prin legturi de hidrogen, interaciuni electrostatice, forte
Van der Waals.
Ca orice protein, enzimele se pot denatura ca urmare a unor modificri la nivelul
structurilor secundare i teriare.
Componenta proteic a enzimelor se caracterizeaz prin urmtoarele:
- este nedializabil i termolabil;
- confer specificitatea de substrat pentru activitatea unei enzime;

26
 - conine situsul catalitic i pe cel la care se leag efectorii n cazul enzimelor
allosterice;
- determin legarea substratului la situsul catalitic i a efectorilor la alt situs.
Caracteristicile cofactorilor
Cofactorii sunt compui cu structura chimica variat deriva i de la vitamine sau ioni
metalici, legai mai labil de partea proteic (coenzime) sau fiind intim asociai cu
aceasta prin legturi covalente (grupe prostetice).
Tabel 4.1 Exemple de cofactori enzimatici
Ioni Enzima Coenzim Grupa Enzima
metal a transferat
ici
2+ +
Cu Citocrom NAD H+ Lactat
2+
Zn oxidaza FAD H+ dehidrogenaza
2+
Mg Alcool PALPO NH2 Succinat
2+
Mn dehidrogenaz Biotina CO2 dehidrogenaza
+
K a FH4 -CHO Aspartat
2+,
Fe Hexokinaza -CH3 aminotransferaz
3+
Fe Arginaza a
Piruvat PropionilCoA
kinaza carboxilaza
Catalaza Timidilat
Peroxidaza sintaza

Acetia se caracterizeaz prin urmtoarele:

-sunt termostabili;
-sunt dializabili;
-sunt indispensabili pentru desfurarea activitii enzimei;
-confer specificitatea de reacie pentru o enzim;
-intervin n reacie inducnd conformaia optim a enzimei, favoriznd aranjamentul
adecvat reaciei sau transfernd electroni sau grupe chimice.
Ansamblul de reacii chimice care constituie metabolismul se desfoar ntr-o
ordine strict, la baza creia st procesul complex de reglare a activitii enzimelor.

Sisteme multienzimatice
Exista ci metabolice n care toate enzimele ce catalizeaz reacii individuale sunt
asociate sub forma unor sisteme multienzimatice (enzime polifuncionale). Acestea
sunt sisteme proteice complexe capabile s foloseasc mai multe coenzime diferite.
Sunt fixate prin legturi slabe, n ordinea corespunztoare intrrii n aciune, pe o
protein central, ce poate fi chiar una dintre enzime.
Exemplul cel mai elocvent este reprezentat de complexele implicate n decarboxilarea
oxidativa a -cetoacizilor: piruvat dehidrogenaza, -cetoglutarat dehidrogenaza
formate dintr-un ansamblu proteic, patru coenzime (TPP, NAD +, acid lipoic,
coenzima A) , ionul
Mg2+, cu participarea final a NAD+. Un alt exemplu este acid gras sintaza care
intervine n biosinteza acizilor grai format din 7 enzime legate de o protein.
27
 Izoenzime
Sunt enzime care n plasm prezint dou sau mai multe forme moleculare. Aceste
variante sunt cunoscute ca i izoenzime i dei ele au structuri diferite au aceeai
funcie catalitic. Toate catalizeaz aceeai reacie, dar cu viteze diferite.
Catalizeaz aceeai reacie, dar au proprieti fizicochimice, cinetice, imunologice
diferite.
Pe baza acestor proprieti pot fi detectate i separate prin electroforez i
cromatografie.
Din punct de vedere structural, sunt oligomeri formai din subuniti identice sau
diferite.
Se cunosc izoenzime pentru oxidaze, dehidrogenaze, fosfataze, transaminaze.
Exemple:
a) Lactat dehidrogeneza (LDH) izoenzime (informatii generale)
LDH este o oxidoreductaza ce participa la glicoliza anaeroba, cataliznd reacia
reversibil de conversie a acidului lactic n acid piruvic. Este o enzim citoplasmatic
tetrameric, compus din subuniti H (Heart) i M (Muscle), larg distribuit n
organism, fiind ntlnit cu precadere n rinichi, miocard, musculatura scheletic,
creier, eritrocite, ficat i plmni.
LDH este un indicator nespecific de lezare tisular. Pentru a identifica sursa creterii
nivelului enzimatic sunt necesare izolarea i cuantificarea celor 5 fractiuni diferite ale
LDH-ului rezultate prin combinarea n diferite proporii a celor dou tipuri de
monomeri H si M: LDH-1 (H4), LDH-2 (H3M), LDH-3 (H2M2), LDH-4 (HM3) si
LDH-5 (M4).
b) Fosfataza alcalina-izoenzime (informatii generale)
Fosfataza alcalina (ALP) este o enzim ce face parte din clasa hidrolazelor
(ortofosfomonoesterfosfohidrolaza). Serul uman conine un amestec variabil de
izoenzime ale fosfatazei alcaline (ALP) provenite n principal din ficat, intestin,
rinichi i os, la care se adauga n timpul sarcinii o forma tranzitorie, forma
placentar. Anumite tumori maligne pot, de asemenea, produce o izoenzima ALP-7.
Fosfataza alcalina de origine osoasa ostaza este o glicoprotein tetramerica
care se gsete pe suprafaa osteoblastului i intervine n calcificarea matricei
osoase, fiind cunoscut ca un indicator sensibil i fidel al metabolismului osos. Are
un timp de injumatire lung. Un nivel ridicat al izoenzimei osoase este intlnit in
perioada de cretere osoas, n cursul procesului de vindecare a fracturilor, ct i n
afeciuni ale sistemului osos caracterizate prin hiperactivitate osteoblastic i
remodelare osoas cum ar fi boala Paget, rahitism, osteomalacie, acromegalie,
osteosarcom, sarcom Ewing, metastaze osoase (n special asociate cu carcinom
prostatic i mamar) 4;5;6.
c) Creatin- fosfokinaza(CK) este localizat cu preponderena n musculatura
scheletic, miocard.
S-au pus n eviden 3 izomeri:
1. CK/HM-de origine muscular i miocardic,
28
2.CK/BB gsit n esutul cerebral
3.CK/MB provenit din miocard.
Aceast enzim catalizeaz formarea ATP din creatinfosfat i ADP i se inactiveaz
foarte repede prin oxidarea gruprilor SH.

8.3. Preparate enzimatice

Activitatea catalitic a enzimelor, extrem de important din punct de vedere
fiziologic, prezint i o deosebit importan practic. O serie de industrii care
prelucreaz materii prime de origine vegetal sau animal au de a face n procesele
lor tehnologice cu reacii catalizate de enzime care sunt proprii acestor materii prime
sau sunt elaborate de microorganismele ce se dezvolt n /pe ele. Reacii enzimatice
similare pot avea loc ns i cu enzime exogene sau cu
sisteme enzimatice extrase din diverse
surse bogate n enzime i introduse apoi n procesele tehnologice n scopul realizrii
unor transformri dorite. Aceste enzime sau sisteme enzimatice izolate din mediile n
care au fost elaborate se numesc preparate enzimatice.
Ele se caracterizeaz printr-o puritate mai mic sau mai mare n funcie de
cantitatea i
tipul compuilor, provenii din sursa enzimatic, ce le nsoesc.
Cu alte cuvinte, preparatele enzimatice pot fi mai mult sau mai puin pure
(purificate). n vederea obinerii preparatelor enzimatice trebuie ales un material
biologic bogat n
enzime cu o nalt activitate catalitic; materialul trebuie s fie ieftin, uor accesibil
i s se prelucreze uor.
Materiile prime folosite la obinerea preparatelor enzimatice pot fi de natur
vegetal, animal sau microbian. La plante concentraii mari de
enzime se ntlnesc n semine,
n boabele de cereale germinate i negerminate, n fructe, rdcini, sev, frunze. La
animale enzimele segsesc n toate celulele, ns concentraii mari de anumite
enzime se gsesc localizate n diferite organe ca: ficat, rinichi, inim, muchi.
Acestea au ns organe i esuturi specializate n producerea de enzime,aa cum sunt
glandele salivare, mucoasa stomacului, pancreasul, mucoasa intestinal. O surs
foarte important de enzime pentru obinerea preparatelor enzimatice o constituie
microorganismele: bacteriile, drojdiile i mucegaiurile. Acestea prezint avantajul c
se pot obine cu uurin n cantiti mari prin nmulirea n instalaii speciale pe
medii de cultur ieftine, de obicei subproduse ale industriei alimentare(tre de
gru,extract de porumb, melas, roturi de soia i de floarea soarelui, etc.).de
asemenea, ciclul de dezvoltare al microorganismelor este foarte scurt
n comparaiei cu ciclul de dezvoltare
al animalelor i plantelor, iar roducia lor de
enzime poate fi mult mrit prin selectarea
i utilizarea de tulpini i mutante nalt productive i prin utilizarea unor condiii
optime
de cultivare.

29
1. Preparatele enzimatice microbiene
nsuirea anumitor mucegaiuri i bacterii de a produce n cursul dezvoltrii lor, ca de
altfel i cerealele care germineaz, enzime amilolitice este de mult timp cunoscut n
trile din Asia, n special Japonia i China. Astfel pentru prepararea buturii sake din
orez se foloseste un amestec de mucegaiuri productoare de enzime. Primul procedeu
de zaharificare a porumbului pentru obinerea bioetanolului, care s-a bazat pe
folosirea enzimelor microbiene, procedeul Amylo, a aprut la sfritul secolului trecut
n Frana,
servindu-se de o cultur pur din mucegai.
Triferment, drajeuri . Categoria: Medicamente
Compoziie Drajeuri coninnd tripsina 18 u.W., lipaza 6 u.W. i amilaza (putere
amilolitic) 6,5 g. Aciune terapeutica, preparat enzimatic digestiv, cuprinde fermeni
pancreatici, proteolitici, lipolitici i amilolitici.
Indicaii: pancreatit cronic, fibroza chistic pancreatic (la copii), dispepsii de
putrefacie i fermentaie, tulburri digestive prin exces alimentar la bolnavii cu
insuficien secretorie a pancreasului (profilactic i curativ), tulburri digestive n
cursul tratamentului cu sulfamide sau antibiotice cu spectru larg.
Drajeuri. Categoria: Medicamente
Compoziie. Pancreatin 100 mg .Papain 25 mg. Extract liofilizat de aloe vera 5 mg .
Aciune terapeutic. Preparat enzimatic digestiv rezultat prin asocierea enzimelor
pancreatice (amilaze, lipaze, proteaze) cu un extract obinut din fructele plantei
Carica papaya i un extract liofilizat de aloe vera. Aceasta asociere aduce n
organism un surplus de enzime sub forma de amestec: cele de origine animal
(enzime pancreatice) cu cele de origine vegetala (prezente n fructele de Carica
papaya), obinndu-se un sinergism de aciune la nivelul tractului digestiv. enzimele
digestive prezente n extractul Carica sunt papaina (cu aciune similar pepsinei,
denumit pepsin vegetal i care solubilizeaz proteinele), renina (ce descompune
proteinele din lapte) i o enzim similar peptidazelor (care stimuleaz declan area
digestiei). Extractul de Carica papaya prezinta i o usoara aciune antiulceroas. La
aceste enzime se asociaz extractul de Aloe vera care la
Fermeni pancreatici Categoria: Medicamente
Compoziie: Un drajeu conine pancreatina 275mg (echivalent cu o activitate
enzimatic minim per drajeu, de: 18 u.W activitate proteolitica, 6 u.W activitate
lipolitica si 6.5g activitate amilolitica) si excipieni: amidon de porumb, zahar,
gelatina, talc, acetoftalat de celuloza, polisorbat 80, polietilenglicol 400, carbonat de
calciu, colorant Subset Yellow (E 110), ceara galbena, ceara carnauba. Descrierea
produsului: fermeni pancreatici este un preparat enzimatic digestiv, cuprinde
fermeni pancreatici: proteolitici, lipolitici si amilolitici. Acest produs asigura
dizolvarea grsimilor, proteinelor si carbohidrailor, ajuta digestia si menine tractul
digestiv in stare optima. Indicaii: Este indicat ca tratament in: - pancreatita cronica; -
Fibroza chistica pancreatica (la copii); - Tulburrii digestive prin exces alimentar la
bolnavii cu insuficena secretorie a pancreasului (profilactic si curativ); - Dischinezie
biliar; - Colite i enterocolite.
Kreon 10 000, capsule Categoria: Medicamente

30
Compoziie Capsule a 150 mg pancreatina in minimicrosfere cu inveli enteric
(echivalent cu 10 000 uniti Ph. Eur. lipaza, 8 000 uniti Ph. Eur.amilaza, 600 uniti
Ph. Eur. proteaze totale); cutii cu 20, 50 capsule. Aciune terapeutic. Secre ia
enzimatic pancreatic absenta sau redusa (mai mica dect 10% din normal) necesit
tratament de substituie. enzimele pancreatice ingerate pe cale oral sunt necesare
pentru descompunerea nutrienilor n vederea digestiei. Lipaza descompune
graimile, amilaza descompune glucidele, iar proteaza determina descompunerea
proteinelor. Capsulele se dizolva n stomac n cateva minute i elibereaz sute de
minimicrosfere. Toate minimicrosferele au un inveli enteric, pentru a proteja
enzimele, n special lipaza, de la degradare i denaturare de ctre sucul gastric. Prin
aceasta form galenic se obine un amestec omogen cu chimul gastric. Dimensiunea
minimicrosferelor este important pentru asigurarea trecerii prin pilor n timpul
fazei

8.4. Tema. Nomenclatura i clasificarea enzimelor

Descrierea principalelor clase de enzime.
Odat cu creterea numrului de enzime descoperite i studiate sub aspectele
structurii lor chimice i mecanismului reaciei catalizate, a aprut necesitatea unei
clasificri tiinifice a acestora. Astzi este valabil clasificarea propus n 1964 de
ctre Comisia de Enzimologie a Uniunii Internaionale de Biochimie care are la baz
tipul i mecanismul reaciei catalizate.
Enzimele sunt biocatalizatori care exercit o aciune specific n soluii diluate.
Enzimele acioneaz selectiv, nu provoac reacii imposibile (nespecifice) ei, mresc
viteza reaciilor chimice, acionnd pe diferite sectoare ale macromoleculelor,
vremelnic se combin cu ele, dup care revin n compoziia iniial.
La rndul lor enzimele din fiecare clas se mpart n subclase i subsubclase, n
funcie de mecanismul de reacie, natura cofactorului, tipul de legtur chimic din
substrat asupra creia acioneaz etc. n cadrul fiecrei sub subclase, enzimele sunt
aranjate ntr-o anumit ordine, n special cronologic.
Conform acestei clasificri, fiecare enzim este caracterizat nu numai de o denumire,
ci i de un cod specific format din patru cifre: prima cifr reprezint clasa, a doua
subclasa, a treia cifr arat sub subclasa, iar ultima cifr a codului indic numrul de
ordine din sub subclasa respectiv. Acest cod este precedat de prescurtarea E.C.
(Enzyme Commission).
De exemplu, denumirea corect i complet a catalazei este H2O2:
H2O2 oxidoreductaza, iar cea a enzimei cu denumirea trivial dihidroorotaza este L-
5,6-dihidroorotat-amidohidrolaza.
Conform acestui criteriu, enzimele cunoscute pn n prezent se clasific n ase
clase principale, enzimele cuprinse ntr-o clas cataliznd acelai tip de reacie, adic
dup reacia pe care o catalizeaz.
Enzimele sunt biocatalizatori adic o clasa special de molecule proteice dotat cu
activitate catalitic.
-Caracteristici- -sunt cei mai eficieni catalizatori cunoscui deoarece acioneaz la
concentraii foarte mici ,desfurnd o activitate intens.-nu se consum i nu se
31
transform n timpul reaciilor biochimice pe care le catalizeaz.-mic oreaz
energia de activare a moleculelor asupra crora acioneaz-nu modific starea
final de echilibru a reaciilor pe care le catalizeaz ,ci mresc numai viteza cu care
se realizeaz acest echilibru .
- enzimele au specificitate de substrat, dar i specificitate de reacie.
- unele enzime au proprieti.reglatoare, adic deci de iniierea, desfurarea sau
stoparea unei anumite reacii.
Structura i conformaia enzimelor
Deoarece enzimele sunt molecule de natur proteica, ele vor fi alctuite dintr-un
numr foarte mare de aminoacizi care vor fi dispui ntr-o configuraie spaial de
tip. genetic, configuraie.care va fi specific pentru activitatea catalitic a enzimei.
Fiind proteic va avea toate proprietile .fizico-chimice ale proteinelor. Unele
enzime sunt monocomponente fiind alctuite din macromolecula proteica.
Majoritatea enzimelor sunt ns biocomponente.
Apoenzima-este molecula proteica a enzimei termo-labil, nedializabil, dotat cu
activitate catalitic determin specificitatea de substrat n reacia pe care o
catalizeaz.
Cofactorul-molecule de natur neproteica, cu structur chimic diferit,
indispensabile manifestrii activitii catalitice a unei enzime.

8.4. Clasificarea enzilemlor. Descrierea principalelor clase de enzime

Dup natura reaciilor pe care le catalizeaz enzimele au fost clasificate in 6 mari

clase enzimatice:
1)Oxireductaze catalizeaz reaciile care decurg cu transfer de hidrogen, electroni
sau oxigen.
2)Hidrolaze - catalizeaz reaciile de liz a moleculelor de substrat sub aciunea apei
3)Transferaze catalizeaz transferul unor grupri specifice de un substrat donor la
un substrat accptor.
4)Izomeraze- catalizeaz reaciile de rearanjare intramolecular a atomilor sau
gruprilor funcionale din molecula substratului.
5)Liazelecatalizeaz scindarea legturilor chimice fr aportul apei.
6)Ligazele catalizeaz reaciile de formare a unor noi legturi chimice cu consum
de ATP .

Oxireductaze (Dehidrogenaze)
Acea clasa de oxireductaze care catalizeaz reacia redox cu transfer de H2 adic au
nite coenzime care joac rolul de acceptori intermediari de H 2 ntre substrat i
produsul final.
Glicoliza este procesul biochimic enzimatic de degradare a glucozei, respectiv
procesul de oxidare intracelular a glucozei n scopul obinerii de energie sub form
de ATP necesar celulelor eucaritote vegetale i animale.
Se realizeaz pe 2 cai metabolice :

32
a) Anaerob are loc n citoplasm i se desfoar sub prezena O2 , dar fr
participarea lui i const n degradarea glucozei pn la acid lactic ca produs final
rezultnd o cantitate mic de energie sub form de ATP;
b) Glicoliza aeroba se realizeaz n condiiile participrii directe a O2 i const n
degradarea glucozei pn la produi finali CO2, H2O i o cantitate mare de energie
sub formade ATP.
Glicoliza anaeroba reprezint succesiunea de reacii enzimatice care se petrec n
condiiile aprovizionri insuficiente cu oxigen a esutului muscular .este un proces
rapid de generare a unei cantiti relativ mici de energie rezultnd totodat i
produi de metabolism ce pot fi utilizai n reaciile de biosinteza .
Oxireductazele catalizeaz reaciile biochimice de oxidoreducere. Oxidoreducerea
este un proces de transfer de electroni de la un donor la un acceptor cu trecere de la
forma redus la forma oxidat.
Atomii de hidrogen sunt donori de electroni n sistemele biochimice.
Oxidoreductazele sunt sisteme redox capabile de a se transfera reversibil din forma
redus n cea oxidat prin transfer de atomi de hidrogen sau de electroni.
Oxidoreductazele cu transport de hidrogen sunt numite i dehidrogenaze (aceste
enzime particip la dehidrogenarea substratului). Acestea sunt enzime ce au n
structur
coenzime. Catalizeaz procesele celulare de oxidoreducere, procese ce se desfoar
prin transport de hidrogen, electroni i oxigen de la un substrat donor la acceptor.
DH2 + A D + AH2
Dehidrogenaze-catalizeaz (de obicei reversibil) transferul de hidrogen de la un
substrat donor de hidrogen(notat DH2) la acceptorul de hidrogen(notat A)
DH2 + A D + AH2
Denumirea sistematic: donor de echivaleni reductori: acceptor eechivaleni
reductori oxidoreductaze.
Oxidaze sau oxigenaze = catalizeaz scoaterea hidrogenului de pe un substrat (DH2)
utiliznd oxigenul ca acceptor.
Produi de reacie: apa (H2O) sau peroxidul de hidrogen (H2O2).

DH2(Red) O2 DH2
O2

Oxidaze

(Oxigenaze)
Oxidaze
D(Ox) H 2O D
H2O2

Oxigenazele - dou grupe:

33
 A. Dioxigenaze ncorporeaz ambii atomi de oxigen n molecula substratului(notat
D):
B. Monooxigenaze sau hidroxilaze catalizeaz ncorporarea unui singur atom de
oxigen n molecula de substrat (notat, n acest caz, DH), iar cellalt este redus la ap:
unde DH substrat donor de hidrogen; AH2 cosubstrat donor de hidrogen; D-OH
este substrat hidroxilat.

Transportori de hidrogen coenzime nicotinice(coenzime piridinice)

Coenzime nicotinice (coenzime piridinice).

Coenzime transportoare de hidrogen
Structur chimic:cele dou forme biologic active ale amidei nicotinice (vitamina
B3):
Nicotinamid adenindinucleotid-NAD+(n forma oxidat)
Nicotinamid adenin-dinucleotid fosfat-NADP+(forma oxidat)
Coenzimele dehidrogenazelor sunt :
a)Nicotinamid-adenin-dinucleotid prescurtat NAD+.
b) Este o enzim cu structur dinucleotidic:

34
c) Prima schem care se termin cu

Mecanismul redox este axat pe nucleul piridinic, motiv pentru care notnd cu -R
restul moleculei, procesul redox poate fi prezentat astfel:

Sistemul redox poate fi prezentat astfel(vezi schema de mai sus):

c) Flavin -adenin -dinucleotid, prescurtat FAD

. Schematic structura chimic pentru FAD (marcnd structura flavinic i notnd cu
R restul nucleului dinucleotidului) este forma oxidat
Forma redus - cea de jos.
Oxidoreductazele cu transfer de electroni sunt enzime cu grupare prostetic hemic
(structur profirinic cu ioni centrali de Fe2+ sau Fe3+). Din aceast clas fac parte
citrocomii. Toi citrocomii sunt sisteme redox cu transfer de electroni care
funcioneaz
35
 pe baza mecanismului reversibil.
Se cunosc mai muli citocromi, n funcie de potenialul redox la care acioneaz,
astfel: citocromul a, citocromul b, citocromul c. Marea parte a citocromilor
acioneaz n lanul respirator i n procesul de fosforilare.
Lactat dehidrogeneza (LDH)
LDH este o oxidoreductaz ce particip la glicoliza anaerob, cataliznd reaca
reversibil de conversie a acidului lactic n acid piruvic. Este o enzim citoplasmatic
tetrameric, compus din subuniti H (Heart) i M (Muscle), larg distribuit in
organism, fiind ntlnit cu precdere n rinichi, miocard, musculatura scheletici,
creier, eritrocite, ficat i plmni.
LDH este un indicator nespecific de lezare tisular, are 5 fraciuni diferite ale LDH-
ului rezultate prin combinarea n diferite proporii a celor dou tipuri de monomeri.

8.5. Transferaze
Sunt enzime care catalizeaz reacii de transfer a unor grupri (resturi de molecule)
de pe un substrat pe altul, dup reacia general:
SA + S!BSB + S!A (sau cea de sub linie)
Dup natura chimic a radicalului sau a gruprii funcionale transferate distingem
urmtoarele subclase:
metiltransferaze (transfer radicalul metil CH3 -);
aciltransferaze (transferaze grupare acil R-CO-; acil coenzima A);
aminotransferaze (transfer gruparea funcional amino - NH2);
glicoziltransferaze (transfer gruprii glicozil);
fosforiltransferaze (transfer gruprii fosfat).
Coenzimele transferazelor sunt numeroase::piridoxal fosfatul, tiamin pirofosfatul,
coenzima A, acizii folici, coenzimele B12, biotina, S-adenozil metionina, nucleotid
polifosfai (ATP), formele active ale unor compui (UDP-glucoza, CDP-colina) etc.
Exemplu: EC 2.7.1.2 ATP: D-glucozo-6-fosfotransferaza (glucokinaza)
D-glucoza + ATP = D-glucozo-6-fosfat + ADP
n cazul transferazelor de grupe fosfat denumirea face obligatoriu referire la
acceptor.
2.7.1-alcool, 2.7.2.-carboxil, 2.7.3-grupa cu azot.
Pentru fosfotransferazele ce necesit ATP ca donor de grupe fosfat se mai
utilizeaza denumirea uzuala kinaza.

36
 8.6. Hidrolaze
n biochimie, o hidrolaz este o enzim care catalizeaz hidroliza unei legturi chimice. De
exemplu, o enzim care catalizeaz urmtoarea reacie este o hidrolaz:
AB + H2O AOH + BH
Sunt enzime care catalizeaz ruperea legturilor moleculare ale unor substane cu ajutorul apei
(hidroliz). Dup natura legturii scindate distingem urmtoarele subclase:
esteraze (lipaze cnd hidrolizeaz lipide, ribonucleaze cnd hidrolizeaz fosfoesteri);
Esterazele sunt enzime care catalizeaz reacia reversibila de scindare a legturilor esterice cu
formarea acidului i alcoolului corespunzatori.
Aceste enzime au o specificitate mica n raport cu substratul i ca urmare microlizeaz cu viteze
comparabile un numar mare de esteri.
Exist mai multe tipuri de esteraze n funcie de natura chimic a acidului care particip la formarea
legturilor ester.
Carboxilesterazele enzimele care catalizeaz scindarea hidrolitic a esterilor carboxilici. Din
aceasta categorie fac parte:
Lipazele sau, conform denumirii sistematice, glicerol-ester-hidrolaze, care catalizeaz hidroliza
gliceridelor dup reacia:
diglicerida + acid gras triglicerida + H2O
Lipazele nu au o specificitate strict, dar viteza de aciune catalitic variaz cu originea diverselor
lipaze. Au o specificitate n funcie de lungimea catenei acizilor grai i posed o selectivitate n
funcie de configuraia subtratului. Posed, de asemenea, o specificitate stereochimic, unul din
izomerii optici ai aceluiai substrat putnd fi atacat cu o vitez mai mare dect cellalt.
Lipazele scindeaz toti cei trei acizi grai ai gli
Aciunea lipazelor are o mare importan pentru pstrarea alimentelor (finurilor, crupelor),
mai ales a celor ce conin cantiti mari de lipide. Prin aciunea acestor enzime, n timpul
depozitrii produselor alimentare, se produce o rapid descompunere a gliceridelor n acizi
grai i glicerol, ceea ce conduce la o cretere a aciditii produselor i la deprecierea lor
calitativ.
Fosfolipazele sunt esteraze care catalizeaz reacia de scindare hidrolitic a acizilor grai din
glicerofosfolipide (fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina).
Fosfolipidele sunt grsimile inteligente din creierul nostru. Ele sunt experte n izolare, ajutnd
la producerea unei substane numita mielina care formeaz o teac n jurul nervilor, asigurnd astfel
o propagare silentioas a semnalelor din creier.
Ele ajuta la furnizarea nutrimentelor care sunt implicate ntr-un proces cheie al organismului.
Ne mbunatesc dispoziia, mintea i performanele intelectuale, dar ne i protejeaz mpotriva
declinului memoriei.
Surse importante de fosfolipide sunt sardinele, ouale(cele de la ginile care au fost hrnite cu
semine de in sau concentrate din fin de pete), boabele de soia, arahidele i alte fructe
oleaginoase.
37
 Amilaza seric face parte din categoria hidrolazelor, subgrup de enzime ce catalizeaz
degradarea hidrolitic a amidonului, glicogenului, poli- i oligozaharidelor.
Amilaza este o enzim de secreie exocrin care este prezent in ser sub dou forme principale:
izoenzima pancreatic (40% din amilaz seric total) i izoenzima salivar (60% din amilaza
seric totala). Enzima mai este prezent in cantiti mult mai mici n ficat, sucul duodenal,
intestinul subire, trompele uterine i muchii scheletici.
Fosfataza alcalin (ALP) este o enzim ce face parte din clasa hidrolazelor
(ortofosfomonoesterfosfohidrolaza). Serul uman conine un amestec variabil de izoenzime ale
fosfatazei alcaline (ALP) provenite n principal din ficat, intestin, rinichi i os, la care se adaug n
timpul sarcinii o forma tranzitorie, forma placentar. Substanele transformate n aceste reacii se
caracterizeaz printr-o tendin limitat de reacie "in vitro" n aceleai condiii cu cele din
organism.
De exemplu, oxidarea glucozei n celule se realizeaz rapid, glucoza fiind un compus ce
nmagazineaza o mare cantitate de energie prezentnd un anumit potenial termodinamic, dei n
laborator, n aceleai condiii ca cele din organism, aceasta este stabil n prezena oxigenului.
Astfel de procese, favorabile termodinamic, pot decurge cu viteze crescute datorit aciunii
catalitice a enzimelor.
Colinesterazele scindeaz hidrolitic esterii colinei, prezeni ndeosebi n esutul nervos, sinapse,
eritrocite. Astfel, aciunea acestor enzime se descompune : acetilcolina, mediatorul chimic care
faciliteaz transmiterea influxului nervos de la nervii motori la muchii striai.
Colinesteraza serica este o enzim care provine din ficat, pancreas, cord i creier (substana
alba), de unde este eliberat n snge.
Din punct de vedere clinic, colinesteraza este folosit n principal ca un indicator al unei
posibile intoxicaii cu insecticide. La persoanele care lucreaz cu insecticide ceridei, nsa nu
simultan, ci succesiv, fapt foarte important pentru procesul de absorbie a lipidelor.
Lipazele sunt enzime foarte rspndite n natur. n organismul animal se gsete
lipaza n sucul pancreatic, ficat, snge, limfa i n lapte. Plantele oleaginoase conin,
de asemenea, lipaze foarte active (n ricin, soia, floarea soarelui). O serie de
mucegaiuri i bacterii reprezint surse bogate n lipaze, fiind folosite pentru
biosinteza carboxilesterazelor i obinerea preparatelor enzimatice de acest tip.
Trebuie ns menionat c lipazele de diferite proveniene se deosebesc ntre ele sub
aspectul proprietilor i caracterului aciunii. ce conin fosfor scderea acestei enzime din
snge este att de puternic, nct poate pune viata n pericol.
glicozidaze (cnd scindeaz prin hidroliz legturi glicozidice);
peptidaze (cnd scindeaz prin hidroliz legturi peptidice).
8.7.Liaze
Sunt enzime care catalizeaz reacii de scindare a unor legturi chimice n absena apei sau procese
de oxido-reducere. Liazele pot determina ruperea urmtoarelor legturi:
legtura C C (cele mai importante sunt decarboxibazele, care catalizeaz eliminarea CO2 de pe
substrat);
legtura >C=O (cele mai importante sunt aldolazele care determin scindarea compuilor
carbonilici);
legtura C - N.
8.3.5. Izomeraze

Sunt enzime care catalizeaz izomerizarea diferitelor substraturi biologice. Ele pot contribui la
transformarea aldozelor n cetoze i invers,a formelor ceto-enolice etc.

8.3.6. Ligaze

38
Sunt enzime care catalizeaz reacii de sintez, formarea de noi legturi. Formarea noilor legturi
se face cu consum de energie, motiv pentru care reaciile catalizate de ligaze sunt cuplate cu
reaciile de scindare a unor compui macroergici (ATP). Aceste enzime pot cataliza:
formarea legturii C - C (carboxilazele prin cataliza reaciilor de introducere a unei molecule de
CO2 n molecula altor substane);
formarea legturii C - S (sunt enzime care sintetizeaz formarea acil-coenzimei A
plecnd de la acizii carboxilici prin mecanismul:

Numele acestei enzime: Acetil - CoA sintetaz.

Studiul enzimelor - enzimologia s-a dezvoltat foarte mult n ultimele decenii, numrul enzimelor
cunoscute depind 2000 fa de 10 - 15enzime n 1920. n organism alturi de enzimele bine
individualizate i localizate se gsesc sisteme enzimatice sau complexe multienzimatice care
catalizeaz reacii succesive sau cuplate.
n organismele vegetale exist i substane, care sunt factori coenzimatici (ndeplinesc rolul de
coenzime) sau sunt activatori enzimatici, cum sunt vitaminele.
Rezumat
Enzimele sunt proteine specializate n cataliza reaciilor biologice. Unele enzime sunt proteine
simple, altele sunt conjugate coninnd ca grupri prostetice ioni metalici, coenzime sau ambele. n
reaciile catalizate de enzime creterea concentraiei de substrat produce creterea vitezei de reacie
pn la un punct dup care viteza de reacie devine independent de concentraia substratului
Enzimele se clasific n funcie de reacia pe care o catalizeaz in: oxidoreductaze,
transferaze,hidrolaze, liaze, izomeraze i ligaze.
Coenzimele i gruprile prostetice servesc ca purttori intermediari ai gruprilor f

Caracteristicile cofactorilor
Cofactorii sunt compui cu structura chimica variat derivai de la vitamine sau ioni metalici,
legati mai labil de partea proteic (coenzime) sau fiind intim asociati cu aceasta prin legturi
covalente (grupe prostetice) (Tabel 4.1).
Acestia se caracterizeaza prin urmatoarele:
sunt termostabili;
sunt dializabili;
sunt indispensabili pentru desfurarea activitatii enzimei;
confera specificitatea de reacie pentru o enzim;
intervin n reacie inducnd conformaia optim a enzimei, favoriznd aranjamentul adecvat
reaciei sau transfernd electroni sau grupe chimice.
Sisteme multienzimatice
Exista ci metabolice n care toate enzimele ce catalizeaz reacii individuale sunt asociate sub
forma unor sisteme multienzimatice(enzime polifuncionale). Acestea sunt sisteme proteice
complexe capabile s foloseasc mai multe coenzime diferite. Sunt fixate prin legturi slabe, n
ordinea corespunztoare intrrii n aciune, pe o protein central, ce poate fi chiar una dintre
enzime.
Tabel 4.1 Exemple de cofactori enzimatici
Ioni Enzima Coenzima Grupa Enzima
metali transferata
ci
Cu2+ Citocrom NAD+ H+ Lactat
Zn2+ oxidaza FAD H+ dehidrogenaza
39
 Mg2+ Alcool PALPO NH2 Succinat
Mn2+ dehidrogenaza Biotina CO2 dehidrogenaza
K+ Hexokinaza FH4 -CHO Aspartat
Fe2+, Arginaza -CH3 aminotransferaza
Fe3+ Piruvat kinaza PropionilCoA
Catalaza carboxilaza
Peroxidaza Timidilat sintaza
Exemplul cel mai elocvent este reprezentat de complexele implicate n decarboxilarea oxidativa a
-cetoacizilor: piruvat dehidrogenaza, -cetoglutarat dehidrogenaza formate dintr-unansamblu
proteic, patru coenzime (TPP, NAD+, acid lipoic, coenzima A) ,
ionul Mg2+, cu participarea final a NAD+. Un alt exemplu este acid gras sintaza care intervine n
biosinteza acizilor grai formata din 7 enzime legate de o protein.
uncionale specifice, ai atomilor sau ai electronilor.
Localizarea intracelulara a enzimelor
n celula, enzimele sunt localizate specific n anumite compartimente fie n organite celulare, fie
n citoplasm.
Separarea organitelor celulare prin ultracentrifugare urmat de identificarea specific a enzimelor
prin tehnici imunohistochimice a reprezentat modalitatea prin care s-a stabilit exact localizarea
intracelulara a enzimelor.
1. Unele procese au loc n toate tipurile de celule, enzimele respective fiind rspndite
ubicuitar(prezent pretutindeni), cum ar fi de exemplu, enzimele mplicate n biosinteza proteinelor
i acizilor nucleici, enzimele glicolitice.
2. Alte procese au loc numai n anumite celule, ca urmare numai acestea posed echipamentele
enzimatice specifice. De exemplu, enzimele implicate n sinteza hormonilor tiroidieni sunt numai
n tiroida, enzimele implicate n biosinteza ureei se gsesc numai n celulele hepatice.
3. Fiecare organ se caracterizeaz printr-un profil enzimatic reprezentat de enzimele care gsesc n
diferitele compartimente din celul.
Membrana celulara conine enzime implicate n transportul substanelor.
Mitocondriile prezint enzime ce catalizeaz procese generatoare de energie: membranele extern
i intern conin enzimele implicate n lanul respirator, sinteza
fosfolipidelor, elongarea i desaturarea acizilor grai, iar matricea mitocondrial conine
enzimele ciclului Krebs, enzimele implicate n decarboxilarea oxidativ a cetoacizilor
catabolismul acizilor grai, dezaminarea aminoacizilor, biosinteza ureei.
Nucleul conine enzimele implicate n metabolismul acizilor nucleici.
Ribozomii abund n enzime implicate n diferitele faze ale biosintezei proteinelor. Ribozomii
liberi sintetizeaz proteinele celulare, iar cei fixai de reticulul endoplasmatic, proteinele de export.
Citoplasma conine enzimele glicolitice, cii pentozofosfailor, enzimele din biosinteza acizilor
grai, a nucleotidelor etc.
Lizozomii abundeni n ficat, rinichi, globule albe contin hidrolaze:
enzime proteolitice, ribonucleaze, enzime care hidrolizeaza proteoglicanii,
sfingolipidele.
Complexul Golgi conine enzime implicate n exportarea proteinelor sintetizate n reticulul
endoplasmatic i maturarea glicoproteinelor i proteoglicanilor.
Unele enzime au localizare mixt, citoplasmatica i mitocondrial, cum sunt transaminaza glutamic
oxalilacetica, malat dehidrogenaza, izocitrat dehidrogenaza.
Centrul activ al enzimelor
Procesul enzimatic nu se desfoar oriunde n molecula enzimei, ci numai n anumite zone care au
o dispoziie spaial corespunztoare, alctuite din 2-4 aminoacizi. Aceste zone se numesc "centri
activi" i reprezint aranjamentul spaial adecvat "prinderii" a substratului.
Legarea substratului la centrul activ al enzimei i imprim o stare de tensiune molecular care
faciliteaz reacia biochimic. n centrul activ se gsesc numai anumiti aminoacizi care prezint
grupe -OH, - SH, - COOH, -NH2, radical imidazol (de exemplu, serina, histidina, acid aspartic,
lisina).
40
n cazul enzimelor cu structur binar, n centrul activ se poate distinge un situs de fixare care se
combin cu substratul prin legturi labile (la formarea caruia particip
aminoacizi auxiliari) i un situs catalitic (format din aminoacizii colaboratori care acioneaz
asupra substratului), important pentru aceast interaciune fiind prezena cofactorilor. Aminoacizii
care nu sunt implicai in reacia enzimatica suntaminoacizi necolaboratori. Functionalitatea
centrului catalitic este consecin/a structurii spatiale a proteinenzimei care prin dispoziia sa n
spatiu aduce anumii aminoacizi distantai n structura primar ntr-o poziie optim pentru legarea
substratului (Fig.4.1)
Fig. 4.1.

Organizarea centrului activ

De exemplu, pentru aciunea chimotripsinei, enzima care hidrolizeaz legturile peptidice, este
eseniala legare a substratului la Ser195care constituie cu Asp102 i His57 centrul activ al enzimei,
interaciunea acestora fiind posibil datorit modificrii conformatiei spatiale a proteinei n timpul
reaciei enzimatice.
Enzimele allosterice prezint dou
situsuri: situsul catalitic la care se leag
substratul i situsul allosteric la care se leagp
efectorul allosteric, activator sau inhibitor .
(Fig.4.2).

Fig. 4.2 Organizarea centrului activ la enzimele alosterice

Caracteristicile enzimelor
Enzimele pot fi definite biocatalizatori care prezinta urmatoarele trasaturi caracteristice:
1. Enzimele au o putere catalitica enorma accelerand viteza reaciilor cu pana la 1016 fa de viteza
reaciei necatalizate. Aceasta capacitate depete puterea oricrui catalizator folosit n sinteza
organica. Enzimele au aceast imens putere catalitic n soluii diluate, n condiii moderate de pH
i temperatur.
Puterea catalitic poate fi definit ca raportul ntre viteza reaciei catalizate i viteza reaciei
necatalizate enzimatic.
2. Enzimele nu se consuma i nu se transform n reaciile catalizate.

41
3. Enzimele se caracterizeaz printr-o mare specificitate. Orice enzim este foarte selectiv att n
ceea ce privete substana pe care o transform (substrat) ct i din punctul de vedere al reaciei
catalizate.
E (enzima) Transformarea SP (produsi) se desfoara fr reactii secundare, astfel
c rezult numai compuii dorii.
Prin aceast aciune enzimele se deosebesc de catalizatorii din chimia organica, reaciile
desfurate n absena enzimelor avnd randamente mai scazute i fiind insoite de reactii
secundare.
4. Enzimele scad energia de activare a moleculelor de substrat pe care le transform accelernd
astfel viteza reaciei biochimice.
5. Capacitate de reglare. Reglarea activitii enzimatice se realizeaz n moduri diferite ce variaz
de la controlul cantitii de enzim sintetizate de celul pn la modularea activitii sale prin
interaciuni reversibile cu activatori i inhibitori metabolici. Activitatea variat a enzimelor poate fi
pus pe seama capacitii de adaptare structural i funcional a proteinelor. Enzimele contribuie
astfel la coordonarea i reglarea proceselor metabolice.
7. Enzimele se gsesc n celule i acioneaz n cantitate foarte mic, dar cu efect semnificativ.
8. Enzimele pot cataliza reaciile n condiiile organismului, la temperatura de aproximativ 37oC, n
condiii de n general neutru i la presiune atmosferic.

ntrebri:
8.1. Care este diferena dintre o recie catalizat de un catalizator chimic i una catalizat de o
enzim?
8.2. Ce este situsul activ al unei enzime?
8.3.Explicai de ce reaciile enzimatice necesit o temperatur optim i un pH optim?
8.4. Care este semnificaia termenului de coenzim?
8.5. Care atom n NAD+ i NADP+ este responsabil de sarcina pozitiv?
8.6.Caracteristica fiecrei grupe de enzime.
8.7. Rolul biologic al enzimelor.
8.8. Exemple la fiecare grup de enzime

Capitolul 9 Hormoni

9. 1.Aspecte generale. Cele mai importante glande endocrine

Hormonii se pot defini ca substane organice de natur endogen, secretate n cantiti extrem
de mici de glande endocrine sau de alte esuturi specializate, care ptrund prin circuitul
sanguin n tot organismul i au proprietatea de a stimula i coordona functionarea unor
organe sau esuturi-inta, procese metabolice sau activitatea ntregului organism.
Deci hormonii i manifest aciunea asupra unor organe i esuturi mai ndeprtate de locul
secreiei, fr a exclude posibilitatea lor de a aciona i asupra unor celule i esuturi foarte
apropiate de locul de secreie(cazul testosteronului). Aciunea nalt specializat a hormonilor
nu este recepionat dect de formaiuni celulare caracteristice i capabile de a intercepta aciunea
unui hormon, care are o anumita structur chimic.
Glandele sunt organe existente n corpul uman i animal unde au rol de a elabora i
secreta anumite substane, unele biologic-active. Dup mediul n care i expulzeaz secreia,
glandele se clasifica n glande exocrine sau cu secreia extern i glande endocrine sau cu
secreia intern.
Din prima categorie fac parte glandele salivare, stomacale, intestinale, mamare, sudoripare
si altele. Din cea de a doua categorie fac parte alte glande care sunt lipsite de o conduct de
eliminare, produsele lor de secreie ptrunznd direct n snge, deci ntr-un mediu din
interiorul organismului(endo-nuntru i crincin-a elimina).
Unele glande au caracter mixt, de exemplu pancreasul, ovarele.
Clasificarea hormonilor din punct de vedre al glandei:
hormoni tiroidieni
42
hormoni suprarenali
hormoni epifizari
hormoni sexuali
hormoni ai glandei timus
Hormonii gsesc n cantii foarte mici.
Secreia hormonilor este sub controlul i influenta sistemului nervos central.Concentratia
hormonilor n snge este reglat printr-un mecanism feedback negativ: reducerea concentraiei unui
hormon stimuleaz secreia lui, iar o cretere a concentraiei inhib secreia. Inima secret un
hormon ce acioneaz asupra rinichilor, facilitnd eliminarea Na+ prin urina. Intestinul subire
secret colecistochinina i secretina cu rol n digestia intestinal.

Structura unor hormoni steroizi

Cele mai importante glande

endocrine (sexul
masculin stnga, sexul
feminin dreapta.) 1. Epifiz 2. Hipofiz 3.Tiroid 4. Timus 5. Supra
renale 6. Pancreas
7. Ovar 8. Testicul
Hormonul (grec. , - horman, hormanus - a pune n micare, a
trezi) este o substan biochimic care transmite informaii de la un
organ sau esut la altul, fiind secretat de glandele endocrine sau de
alte esuturi, care stimuleaz i coordoneaz activitatea
anumitor organe sau a ntregului organism.
Spre deosebire de sistemul nervos unde informaiile de la centru
(creier sau mduva spinrii) impulsurile nervoase se propag prin
prelungirile axonice sau dentritice cu o vitez mare ce dureaz
fraciuni de secund, informaiunile transmise pe cale hormonal sunt mai lente, unele ca, de
exemplu, n cazul adrenalinei care dureaz secunde, pe cnd n cazul celorlali hormoni dureaz
zile, pn ce informaiile ajung la organul sau esutul int.
De la aceast regul fac o excepie hormonii tisulari (produi de esuturi), hormoni ca: histamina,
serotonina, sau prostaglandinele, care sunt produi direct de parenchimul organului int.
Hormonii au fost descoperii pe la nceputul secolului XX, termenul de hormon a fost pentru
prima oar folosit n anul1905 de psihologul englez Ernest Starling (1866 - 1927).
Hormonii fiind substane care acioneaz pe anumite organe int, ce au receptori speciali n
membrana celular care leag moleculele hormonului respectiv, unde hormonii declaneaz o serie
de reacii biochmice, ptrunznd prin membrana celular ajungnd n citoplasm, respectiv nucleul
celulei.
Hormonii din organismul animal sunt produi i de glandele endocrine: hipofiz, epifiz,
tiroid, paratiroid, pancreas, glandele suprarenale cu corticosuprarenala i
insulele angerhans, gonadele sau glandele genitale.
Denumirea de glande endocrine sau glande cu secreie intern se datoreaz faptului c hormonii
produi de glandele respective se vars direct n snge fiind transportai pe calea sanguin la
organul int.
Tiroida - La baza gatului, ea secreta triiodotironina si tiroxina, indispensabile dezvoltrii oaselor
i creierului la copil i activatoare ale reaciilor chimice ale organismului.
Hormonii produi de plante se numesc fitohormoni (au de exemplu un nucleu format din o
grupare fenolic i steroid) i asemntor hormonilor produi de organismul animal, acioneaz
la distan fiind suficient o cantitate foarte mic de ordinul nanogramelor.
43
tiina care se ocup cu studiul glandelor endocrine i hormonilor se numete endocrinologie, iar
medicul care lucreaz n aceast ramur endocrinolog.
1 Exemple de reglri pe cale hormonal

9. 2. Clasificarea hormonilor

2.1 Clasificare hormonilor in funcie de raza de aciune

2.2 Clasificare hormonilor in funcie de solubilitate
2.3 Clasificarea hormonilor dup structura chimica
2.3.1 Hormoni derivai din aminoacizi
2.3.2 Hormoni polipeptidici, proteici si glicoproteici
2.3.3 Hormoni steroizi
3.1 Fitohormoni (hormoni produi de plante)

Clasificarea hormonilor se face n funcie de raza de aciune, solubilitate, structura chimica, locul
de sinteza i in funcie de interdependina sistemului endocrin cu cel nervos
Hormoni endocrini
Hormonii endocrini respect definiia clasic fiind sintetizai i secretai de celule specializate
urmnd s ajung la celula inta prin intermediul sistemului circulator legai de proteine
transportoare n cazul hormonilor hidrofobi sau liberi n snge n cazul hormnilor hidrofili.
Clasificare hormonilor in funcie de solubilitate. In funcie de solubilitate hormonii se pot clasifica
n hormonii hidrosolubili (hidrfili) i hormoni liposolubili (hibrofobi). Hormonii
liposolubilinecesit proteine transportoare pentru a fi vehiculai prin snge pn la nivelul celulei
int, de asemenea aceti hormoni prezint capacitatea de a traversa bistratul lipidic al membranei
celulare, ptrunznd n interiorul celulei unde se afl receptori specifici fie n citoplasma, fie legai
de cromatin la nivelul nucleului. Hormonii hidrosolubili circul liberi prin sistemul circulator nsa
nu pot traversa membrana celulara. Receptori pentru acest tip de hormoni se afla ncorporai n
membrana celulara, determinnd producia de mesageri secunzi la nivelul spaiului citoplasmatic
hormonul, fiind considerat mesager primar.
Hormonii hidrosolubili sunt:
-hormonii peptidici;
-hormonii proteici.
Hormonii derivai din aminoacizi
Hormoni liposolubili
Hormonii steroizi
Hormonii tiroidieni
Clasificarea hormonilor dup structura chimic.
Hormoni derivati din aminoacizi
Hormonul Aminoacid precursor Loc de sinteza
Dopamina Tyrozina Hipotalamus, medulosuprarenala
Adrenalina Tirozina medulosuprarenala
Noradrenalina Tirozina medulosuprarenala, nervi periferici
Hormoni polipeptidici, proteici si glicoproteici

Numr de resturi
Hormon Loc de sinteza
aminoacidice
Oxitocina 9 Neurohipofiza
Celule A
Glucagonul 29
()pancreatice

44
 Celulele B
Insulina 51
()pancreatice
Hormonii steroizi sunt hormoni ce au ca precursor comun colesterolul
1. Estradiol 2. Estrona testosteron 3. Cortisol 4. Aldosteron

Hormoni de natur proteic cu secvene specifice de aminoacizi:

Hormoni pancreatici
Insulina. Insulina este un hormon, secretat de insulele lui
Langerhans, ce particip la metabolismul glucidelor.
Insulina este cel mai important hormon n metabolismul
glucidelor. Insulina contribuie n primul rnd la micorarea
concentraiei glucozei n snge. Aceasta mrete
permeabilitatea membranei celulare pentru glucoz.
Insulina are o aciunea antagonist glucagonului.
Strustura. Insulina este un hormon, ce este compus din
2 lanuri peptidice, formate din 20 - 30 aminoacizi, unite
ntre ele prin 2 legturi bisulfidice. Moleculele de insulin
sunt asemntoare la mamifere, astfel nct muli bolnavi
de diabet sunt tratai cu insulin extras de la porci. Aceste
molecule tind s formeze dimeri n soluie.
Insulina este o protein mic cu masa de 5734 daltoni i cuprinde 51 resturi aminioacidice. Este
alctuit din dou lanuri, un lan A (cu 21 resturi aminoacidice) i unul B (cu 30 resturi
aminoacidice) legate prin dou puni
disulfurice (A7-B7 i A20-B19); o a treia legtur disulfuric leag restul Cys-A6 cu Cys-A11.
160.
Glucagonul Glucagonul este cel de-al doilea hormon pancreatic implica n reglarea echilibrului
glicemic, alturi de insulin. Glucagonul prezint efect hiperglicemiant. Acesta este secretat de
celulele alfa ale insulelor Langerhans. Pancreasul secret glucagon atunci cnd nivelul glicemiei
scade prea mult. Glucagonul stimuleaz ficatul s transforme rezervele sale de glicogen n glucoz,
care este imediat eliberat n snge (glicogenoliza). Glucagonul i insulina fac parte dintr-un sistem
feedback ce menine glicemia la un nivel acceptabil.
Glucagonul este un polipeptid (non-steroid), alctuit din 29 de resturi de aminoacizi.

Hormoni, glandele endocrine- informaii generale. Dr. Mihaele Moise

Activitatea armonioasa a tuturor parilor organismului i a relailor sale cu mediul inconjurtor
este asigurat de sistemul nervos. Sistemul de comunicare de tip hormonal imbuntete
activitatea de comunicare de tip nervos n interiorul organismului, sistemul endocrin fiind un
elegant mecanism de "verificri i balane" care acioneaz prin anse de feed-back ce faciliteaz
funcionarea normal a organismului.
Hormonii sunt substae chimice (peptide, proteine, steroizi) produse i secretate de celule
specializate ce acioneaz pe diferitele celule "inta" aflate local sau la distan. Specificitatea
aciunii hormonale este determinata de prezenta receptorilor specifici de pe celulele "inta" iar
rspunsul celular este determinat de programarea genetica particular a celulei respective astfel
nct acelai hormon are aciuni diferite pe esuturi diferite.
Glandele endocrine sunt uniti funcionale formate din mai multe celule care pot secreta
hormoni, localizate in diferite regiuni ale corpului alcatuind sistemul endocrin. Fiecare glanda are
o funcie specifica care contribuie la meninerea echilibrului mediului intern si a supravieuirii
organismului uman.
Dei exist i esut endocrin difuz (ex. : epiteliul gastrointestinal) sunt cteva glande endocrine
majore sau centri de control ai sistemului endocrin : hipofiza, hipotalamusul, suprarenalele, tiroida,
paratiroidele, pancreasul endocrin, testiculele, ovarele si epifiza.

45
Glanda hipofiza este denumita si "glanda sef" datorit rolului important pe care l au unii din
hormonii secretai de ea n controlul secreiei celorlalte glande ca i a legturii directe pe care o are
cu centrul de control al sistemului nervos - hipotalamusul (prin sistemul sanguin port hipotalamo -
hipofozar). Hipofiza este situata intr-o depresiune a osului sfenoid (os component al craniului)
numita a turceasca si este alctuit din 3 pri : o parte anterioar care secret ase hormoni
peptidici (hormonul de cretere - STH cu rol important n dezvoltarea oaselor i a cartilagiilor,
patru hormoni cu rol n controlul activitii glandelor suprarenale - ACTH, tiroida - TRH, ovare i
esticule - FSH i LH i prolactina cu rol n dezvoltarea snilor i lactaie), o parte intermediara
care secreta hormonul melanostimulant (melatonina este un pigment aflat n celulele pielii i care
determin aspectul bronzat al acesteia) si o parte posterioara care este responsabila de eliberarea in
circulaie a hormonilor : vasopresina sau hormonul diuretic deoarece are rol in absorbia apei de la
nivelul rinichilor, absenta lui duce apariia diabetului insipid, boala in care pacientul are o urina
foarte diluata si in cantitate mare si oxitocina - hormon care stimuleaz celulele musculare ale
uterului gravid i contribuie la expulzia ftului i care de asemenea determin prin aciunile lui i
ejecia laptelui.
Hipotalamusul, componenta a sistemului nervos central este considerat si glanda endocrina
deoarece secreta hormoni care asigura controlul nervos al hormonilor secretai de hipofiza si
implicit si al celor al altor glande endocrine.
Tiroid, glanda situata in regiunea gatului intre trahee si laringe produce si secreta trei hormoni
tiroxina (T4) si triiodotironina (T3) importani pentru creterea i dezvoltarea normal i
armonioas a organismului, cu efecte pe metabolismul glucidelor, proteinelor i lipidelor cu
producere de energie, calcitonina fiind cel de-al teilea hormon tiroidian, rolul principal fiind
prevenirea creterilor de calciu seric peste limita normal.
Paratiroidele in numr de patru, situate la polii lobilor tiroidieni secreta parathormonul - hormonul
metabolismului fosfo-calcic (rol in dezvoltarea osului, dar mai ales in contracia tuturor muchilor -
extirparea paratiroidelor este incompatibila cu supravieuirea).
Glandele suprarenale, aflate la polul superior al rinichilor produc i elibereaz n circulaia
sanguin numiii hormoni mineralocorticoizi - aldosteronul care retine sodiul in organism,
glucocorticoizi - cortizolul, important pentru metabolizarea glucidelor, proteinelor si grsimilor, n
cretere i dezvoltare, n aprarea mpotriva infeciilor, mici cantiti de hormoni sexuali androgeni.
Pancreasul endocrin are rol in reglarea valorilor glucozei sanguine prin hormonii si insulina
(anomaliile in secreie sau in rspunsul celulelor int la aciunile ei duc la diabet zaharat) i
glucagonul.
Testiculele secreta hormoni androgeni - testosteronul care determina dezvoltarea i meninerea
caracterelor secundare masculine (pilozitate, aspect fizic, voce etc.), promoveaz creterea,
particip la formarea spermei, determin caracterul agresiv i creterea libidoului.
Ovarele produc hormoni steroizi importani n dezvoltarea caracterelor sexuale secundare
feminine, in dezvoltarea si meninerea funciei reproductive a femeii, estrogenii care acioneaz pe
musculatura uterina, cresc libidoul, scad nivelul colesterolului ceea ce duce la protecie mpotriva
ateromatozei vasculare i progesteronei cu rol n dezvoltarea esutului mamar, a modificrilor
endometrului n timpul ciclului menstrual.
Epifiza secret melatonina important n mecanismul somn - veghe.
Dup cum se poate observa subiectul este exterm de vast, dereglarile chiar minime ale oricreia
dintre aceste glande influentnd intregul organism datorit numeroaselor interrelaii existente astfel
nct duc la o simptomatologie extrem de divers. Un diagnostic cert n cazul unei eventuale
afeciuni endocrine se poate face numai prin colaborarea medic de familie - medic endocrinolog.
Hormoni suprarenalieni
Epinefrina (adrenalina) Hormonul epinefrina, cunoscut si sub numele de adrenalina, este un fluid
eliberat de glanda suprarenala. Acesta joaca un rol important n ncercarea organismului de a
reaciona n situaii de urgen. Adrenalina gsesc ca un neurotransmitor. Un neurotransmitor
transfera si reglementeaz semnale ntre neuroni i alte celule ale corpului. Rspunsul fight-or-
flight" al corpului este iniiat de secreia de epinefrin. Sistemul nervos simpatic, o subdiviziune a
sistemului nervos autonom, este responsabil pentru generarea rspunsului.
46
Epinefrina este secretata sau declanat n anumite situaii, mai ales n stare de excitare sau stres.
Excitarea ce duce la secreia de adrenalina poate fi att de natur pozitiv ct i negativ. Anumii
factori externi, cum ar fi poluarea sonor sau luminile sxtralucitoare pot ridica, de asemenea,
nivelul de adrenalina din organism.
Efectele secreiei de adrenalin
Multe aciuni au loc dup ce adrenalina este eliberata n organism. Furnizarea de oxigen i glucoz
n muchi i creier ncepe s creasc. Exist o cretere n ce privete riscul producerii unui accident
vascular cerebral i creste ritmul cardiac. Volumul unui accident vascular cerebral se refera la
volumul sau cantitatea de snge pompat de ctre un ventricul n cadrul unei bti de inim. Secreia
de epinefrin conduce spre dilatarea pupilelor i constricia arteriolelor prezente n piele. Creterea
nivelului de zahar n snge este alt consecin a secreiei de adrenalina. Aceasta suprim, de
asemenea, funcionarea sistemului imunitar. Procesul de funcionare al sistemului digestiv ia si
acesta o pauz.
Noradrenalina sau norepinefrina, un hormon similar cu epinefrina este de asemenea eliberat atunci
cnd crete nivelul de stres. Principala diferena ntre epinefrin i norepinefrin este ca epinefrina
este responsabil pentru controlul tuturor esuturilor corpului n timp ce norepinefrina deine
controlul acelor pri ale creierului care sunt responsabile pentru relaia corp-minte i aciunile de
rspuns. Valorile crescute ale norepinefrinei sunt asociate cu anxietate, stres, tensiune arterial
crescut i hiperactivitate. Nivelurile sczute ale noradrenalinei pot cauza un nivel sczut de
energie, lipsa de concentrare i motivaiei. Att epinefrina ct i norepinefrina ajut la reglarea
ateniei, concentrrii mentale, excitrii i cognitiei.

Capitolul 10 (completat) . Metabolisme intermediare

Tema 10.1. Introducere n metabolismul substanelor i energiei:
Aspecte generale.

Prin metabolism se nelege totalitatea transformrilor biochimice i energetice care au loc

n esuturile organismului viu. Metabolismul este un proces complex, ce implic schimburi de
materii i energii, i care include dou procese (simultane) opuse:
catabolism / dezasimilaie - totalitatea proceselor chimice de degradare a substanelor din
organism; se produce n special ruperea legturilor dintre atomii de carbon, din moleculele
diferitelor substane; acest tip de reacii este nsoit de eliberare de energie (reacie exergonice).
anabolism / asimilaie - procesele chimice de biosintez a substanelor ce intr n alctuirea
materiei vii. Reaciile anabolice se caracterizeaz prin consum de energie i se numesc reacii
endergonice (reacii endergonice).
Dup rolul jucat n biologia organismelor, metabolismul este clasificat n:
Metabolism primar sau fundamental, care este implica direct, esenial n meninerea vieii
organismelor i plantelor.
Metabolism secundar sau lturalnic, care este implica n producerea de substane "neeseniale"
vieii (de ex., pigmeni, alcaloizi, antibiotici ageni etc.).
Energia necesar proceselor de biosintez provine n cea mai mare parte din desfacerea legturilor
macroergice ale diferiilor compui. n funcie de capacitatea de producere a energiei, organismele
se mpart n :
autotrofe (greac autos=nsui; trophe=hran) - organisme care i sintetizeaz substanele
organice necesare din substane anorganice, prin procesul de fotosintez i chemosintez.
heterotrofe (greac heteros=diferit; trophe=hran) - organisme care i asigur hrana folosind
substane sintetizate de alte organisme (acestea pot fi microfage, fitofage sau zoofage).
Catabolismul i anabolismul se desfoar printr-o succesiune a numeroase reacii
chimice: hidroliz, hidrogenare, deshidratare, decarboxilare, dezaminare, transaminare,
esterificare, condensare, polimerizare.

47
 Asocierea acestor dou pri constituie un proces unitar al metabolismului substanelor. n
consecin, metabolismul substanelor este unitatea proceselor contrare de alimentaie i eliminare,
absorbie i degradare, sintez i descompunere etc., adic unitatea proceselor de
asimilaie i dezasimilaie. Catabolismul reprezint, n primul rnd, descompunerea enzimatic a
macromoleculelor
hranei (proteine, lipide, glucide) care se desfoar cu precdere, pe seama reaciilor de hidroliz i
oxidare. Pe parcursul catabolismului se formeaz mai multe molecule mici (acid lactic, acid acetic,
CO2, NH3 etc.) ceea ce determin o eliminare de energie liber care se
nmagazineaz sub forma legturilor macroergice din ATP.
Anabolismul reprezint sinteza enzimatic a moleculelor relativ mari i a complexelor
supramoleculare din precursori simpli (sinteza polizaharidelor din monozaharide etc.), ceea ce
necesit un aport de energie furnizat de ATP. Catabolismul i anabolismul decurg simultan n celule
i sunt strns legate ntre ele; de exemplu, n descompunerea glucozei, prima reacie o reprezint
sinteza unui compus mai complex glucozo-6-fosfatul.Exist o mare varietate de cii anabolice i
catabolice: cile liniare, cele mai simple, unde produsul fiecrei reacii catalizate de o enzim este
substrat pentru urmtoarea; cile ciclice, care presupun cuplarea compusului A cu M, substana
rezultat fiind transformat pe parcursul mai multor etape n aa fel nct A este degradat la X, iar M
se regenereaz i poate s reacioneze cu o nou molecul de A; ci ciclice care se ntreptrund prin
intermediul unui compus; ci cu una sau mai multe bifurcaii . Caracteristic pentru procesele
catabolice ale glucidelor, lipidelor i proteinelor este
faptul c ele converg spre o cale final comun.
Cile anabolice prezint, dimpotriv, numeroase ramificri, ceea ce permite formarea dintr-un
numr mic de compui iniiali a unui numr foarte mare de compui celulari. Aceste caracteristici
ale catabolismului i anabolismului reflect un principiu fundamental al organizrii materiei vii,
respectiv o economie maxim a compuilor i reaciilor.
Determinnd natura chimic a substanelor care se elimin din organism sub form de produse
finale (uree, CO2, ap etc.) se caut s se afle cile, precum i transformrile chimice ale
substanelor iniiale, n urma crora rezult aceste produse finale.
Pentru studiul metabolismului este necesar de a cunoate nu numai produsele iniiale i finale,dar
i produsele i n t e r m e d i a r e ale transformrilor, precum i participarea anumitor organe la
realizarea acestor procese. Ca exemplu, urina conine totdeauna uree, care prezint unul din
produsele finale ale schimbului de aminoacizi, este important de a preciza n urma cror reacii,
cu participarea cror enzime, n ce consecutivitate, azotul din aminoacizi se transform n uree i ce
organe joac n acest proces rolul decisiv.

b) Principiile bioenergeticii.

Fiecare reacie enzimatic de transformare a unei substane ntr-un proces

metabolic este nsoit de o transformare de energie.
n unele etape ale catabolismului energia chimic este depozitat (de regul sub form de ATP),
iar n anumite etape ale anabolismului, ea este consumat. Relaiile energetice sunt strns
condiionate de interaciunea proceselor anabolice i catabolice: de fiecare dat cnd are loc sinteza
unor substane mai complexe care necesit consum de energie, concomitent cu aceasta trebuie s
aib loc procese care furnizeaz energie procese de descompunere sau oxidare. Procesele care
decurg cu eliberarea de energie se numesc
exergonice, iar procesele care decurg cu consum de energie, endergonice.
La plantele verzi energia ptrunde n organism sub form de cuante de lumin.
Organismele care sunt capabile s-i sintetizeze compuii organici proprii organismului lor din
compui anorganici, se numesc organisme autotrofe.
Pe cea mai nalt treapt de autotrofism se gsesc plantele i algele verzi al
cror metabolism este bazat pe fotosinteza clorofilian. n categoria organismelor

48
autotrofe intr i bacteriile nitrificatoare fixatoare de azot i alte microorganisme de mai mic
importan: bacterii feruginoase, sulfuroase etc.Celelalte organisme, i n primul rnd animalele,
care necesit compui organicigata sintetizai se numesc heterotrofe.
Acelai caracter l au i majoritatea microorganismelor (bacterii,drojdii, mucegaiuri). n aceste
organisme, energiaptrunde, n special, sub forma energiei legturilor chimice ale compuilor
organici. Formarea substanelor proprii heterotrofelor decurge pe calea chimosintezei, adic a
sintezei pentru care energia se procur pe seama energiei compuilor chimici,care, de regul, sunt de
natur organic, n procesul descompunerii crora se i elibereaz energia necesar sintezei. Fiecare
compus organic care intr n constituia materiei vii posed un anumit potenial energetic total (H),
care grupeaz energia de legtur a atomilor (energia electronic), precum i energiile de vibraie,
de rotaie, de translaie. Biochimia se intereseaz mai puin de energia intern a unei molecule, dar
mai mult de variaia de energie n cursul unei reacii sau unui proces metabolic.Ca urmare, din
energia total, numai o parte (G) este disponibil i poate fi utilizat
pentru a efectua un travaliu. Aceast energie se numete energie liber.
Modificarea energiei libere a sistemului (G) la trecerea sa dintr-o stare n alta reprezint criteriul
de apreciere a transformrii chimice n conformitatea cu legile termodinamicii. Relaia dintre aceste
mrimi se poate prezenta astfel: H =G + TS unde: T este temperatura absolut; S variaia
entropiei sistemului;
H variaia entalpiei sistemului care corespunde variaiei energiei totale msurabil experimental
pe cale calorimetric, sub forma cldurii degajate sau absorbite.
Termenul TS exprim variaia energiei legate a sistemului, adic a acelei pri din energia total
care nu poate fi transformat ntr-o form oarecare de travaliu util(mecanic, chimic, electric, etc.), ci
rmne numai sub form de cldur i se disipeaz. Din relaia de mai sus, variaia energiei libere
este:G =H - TS
Cnd variaia energiei libere are loc n condiii standard (temperatura 25C, presiunea 1 atm,
concentraia 1 M i pH=7,0) se folosete termenul dG, iar energia liber pentru un compus dat se
noteaz Gs. Pentru un proces chimic: G=RT ln K n care R este constanta gazelor (8,31 J/mol),
iar K-constanta de reacie .Relaia dintre entropie (S) i energia liber arat sensul desfurrii unei
reacii. Pentru reaciile spontaneS>0 i G<0, pentru cele de echilibru (procesul numai are loc),
G=0 iS=0, iar pentru cele care nu se petrec spontan i este necesar energia din afara sistemului
pentru a le induce, S<0 iG>0. Toate reaciile n care crete entropia (S) i scade energia liber
(G) se petrec exergonic, adic sistemul cedeaz energie. Cu ct S are o valoare mai mare, cu att
gradul de ireversibilitate al reaciei respective este mai mare. Reaciile n care S scade i G crete
vor fi endergonice i vor necesita energie din afara sistemului pentru a se produce. Acest tip de
procese nu sunt posibile din punct de vedere termodinamic dac ele nu sunt legate de un sistem
exergonic n care entropia corespunztoare (S) crete att nct s compenseze micorarea ei n
sistemul endergonic. Energia liber i potenialul chimic apar n acest fel ca o msur a afinitii
chimice i ca indicatori ai sensului de desfurare a reaciilor biochimice. Sistemul care nu
se gsete n echilibru sufer modificri spontane numai dac prin aceasta energia liber se
micoreaz (ia natere o energie liber negativ). La echilibru nu au loc nici un fel de modificri
spontane ale energiei libere, iar scoaterea sistemului din echilibru necesit o energie suplimentar.
Principalii purttori de energie liber n compuii organici sunt legturile chimice dintre atomi. De
aceea, la formarea legturilor chimice ntr-o molecul, nivelul energiei libere a compusului se
modific. n general, nivelul energetic al unei legturi chimice care se formeaz sau se rupe ntr-o
molecul ce se transform se evalueaz prin modificarea nivelului energiei libere, care este egal cu
aproximativ 3 kcal/mol (12,5kj/mol). Un asemenea nivel al energiei libere se constat la
modificrile majoritii legturilor compuilor organici. Sunt i cazuri, ns, n care la formarea sau
ruperea unor legturi, nivelul energiei libere din molecula unor tipuri de compui organici poate
ajunge la 6 kcal/mol i chiar mai mult. O modificare sensibil a energiei libere standard (G) de
hidroliz se ntlnete, de exemplu, la unii compui fosforilai:

compui KJ / mo Kcal / mol

l
49
 Fosfoenol piruvat - 61,9 - 14,8
1,3 difosfoglicerat - 49,4 - 11, 8
Creatinfosfat - 43,1 -10, 3
Acetilfosfat - 42,0 - 10,1
ATP - 30,4 - 7, 3
Glucozo-1-fosfat - 21,0 - 5,0

Compuii ale cror molecule conin legturi ce dau prin hidroliz o cantitate important din energia
liber se numesc compui macroergici , iar legturile la a cror transformare au loc puternice
modificri ale balanei energetice a substanei se numesc legturi macroergice.
Legturile macroergice sunt n primul rnd legturile esterice (printre care i tiosterice),
fosfoamidice i anhidridice. Ca urmare, aproape toi compuii cu legturi macroergice conin atomi
de fosfor i sulf, dup locul crora n molecul sunt localizate i legturile macroergice.
Energia care ia natere la ruperea legturilor macroergice este absorbit de sinteza unor compui
organici cu un nivel al energiei libere mult mai nalt dect cel iniial. n acelai timp,
rezervele de compui macroergici din organism sunt mereu completate pe seama energiei acumulate
i care se elibereaz prin scderea nivelului energetic al substanelor ce se descompun. n felul
acesta, compuii macroergici ndeplinesc funcia i de donori i de
acceptori de energie n metabolismul substanelor. Poziia central ntre compuii macroergici o
ocup ATP.
Capacitatea ATP de a stoca i ceda energie, adic de a forma sistemul ATP-ADP, ocupnd o poziie
intermediar pe scara termodinamic a compuilor fosforilai, determin funciaacestui sistem de
intermediar, transportor al gruprilor fosfat bogate n energie de la compuii fosforilai cu coninut
nalt de energie, situai pe scara termodinamicmai sus de ATP, la compui mai puin bogai n
energie, care, acceptnd fosfatul,se activeaz. n felul acesta, ATP are un rol esenial n
procesele bioenergetice. ATP intervine i n metabolismul unor compui macroergici. Sinteza n
organism a multor altor asemenea substane decurge prin intermediul ATP. Un rol important n acest
metabolism l are i formarea altor nucleozidtrifosfai (5'-guanozintrifosfat, 5'-uridintrifosfat, 5'-
citidintrifosfat) care pot, ca i ATP, s serveasc ca surse deenergie n procesele de biosintez.Ca
urmare, metabolismul substanelor i energiei reprezint un proces
unitar,continuu, n care modificarea unei substane este nsoit ntotdeauna de o eliberare sau
absorbie de energie i n care se elibereaz sau se absoarbe aceeai cantitate de energie
care asigur descompunerea sau sinteza legturilor chimice, adic n fond modificarea acelei
substane. Trebuie avut n vedere c energia liber care se produce prin descompunerea compuilor
macroergici i pe seama creia se poate efectua un anumit travaliu se folosete nu numai pentru
sinteza chimic. Ea poate servi n organism pentru formarea cldurii, acumularea de electricitate,
efectuarea unor activiti mecaniceetc. n aceste cazuri energia chimic se transform, prin
participarea obligatorie a compuilor macroergici (n special a ATP), n cldur, electricitate,
energie mecanic etc.
Interaciunea descris poate fi
redat ,de asemenea, sub form de
inel energetic sau Sisteme de
activitate energetic

Fig.1. Schema interaciunii dintre

proceseleexergonice i endergonice
care au loc cu participarea ATP.

50
 Caracteristica metabolismului intermediar
Funciile specifice ale metabolismului intermediar constau n:
- absorbia din mediul exterior a energiei, care ptrunde sau sub forma energiei chimice a
compuilor organici din hran (la heterotrofe), sau sub form de energie solar (la autotrofe);
- sinteza biomoleculelor necesare pentru ndeplinirea diferitelor funcii specifice ale celulei;
- descompunerea biomoleculelor celulare pentru formarea energiei necesare diferitor
funcii specifice ale celulei.
Metabolismul intermediar cuprinde sute de reacii enzimatice diferite, deoareceproduii unei reacii
enzimatice servesc ca substrat al altei reacii, care reprezint urmtoarea etap a
metabolismului. Existena unei asemenea succesiuni este legat de faptul c, n reaciile
enzimatice are loc o rupere a unor grupri funcionale de la un substrat i transferul lor la
moleculele acceptorului are la rndul su devin substrat pentru urmtoarea reacie.
n calitate de grupri funcionale, n majoritatea reaciilor metabolismului intermediar, iau parte
gruprile amino, acetil, fosfat, formil, carboxil sau chiar atomi de hidrogen. n felul acesta, reaciile
enzimatice care decurg n celul reprezint un proces n mai multe trepte, unitar, precis organizat n
spaiu i timp. Succesiunea acestui proces metabolic este uimitor de identic la toate formele de via,
ndeosebi npartea central a cilor metabolice. n catabolismul compuilor macromoleculari se
disting trei stadii principale.
n primul stadiu proteinele, acizii nucleici, lipidele, glucidele se descompun prin hidroliz n pri
componente, cu mas molecular relativ mic, care servesc fie caelemente de construcie pentru
sinteza biomoleculelor celulare, fie ca substrat energetic : proteinele - n aminoacizi, acizii nucleici
n nucleotide; lipidele n acizi grai, glicerin i ali componeni, polizaharidele n
monozaharide.
Aceste transformri au loc, ndeosebi, n tractul gastrointestinal al animalelor, dar se pot produce i
intracelular. n al doilea stadiu catabolic, produii care se formeaz n primul stadiu, pe calea
oxidrii anaerobe, se transform n molecule mai simple, al cror numr nu este mare. Astfel, acizii
grai, glicerina, monozaharidele se descompun pn la acetil-CoA, iar aminoacizii - pn la acetil-
CoA i acid -cetoglutaric, acid succinic, acid fumaric i acid oxalacetic. Produii care se formeaz
n stadiul II, trec n stadiul III, care pentru toi este comun i n care ei se oxideaz aerob pn la
dioxid de carbon i ap. Acest, al III-lea stadiu comun constituie aa numitul ciclul acidului citric
sau ciclul acizilor tricarboxilici, cuplat cu lanul transportorilor de electroni sau prescurtat
lanul respirator (catena de respiraie).
Procesul de anabolism, care are loc n celule simultan cu catabolismul, include de
asemenea, trei stadii. Substanele iniiale pentru procesele de sintez suntfurnizate de stadiul III al c
atabolismului. n felul acesta, ciclul acidului citric reprezint, n acelai timp, al treilea stadiu al
catabolismului i primul, stadiu iniial,al anabolismului. Acest ciclu furnizeaz -cetoacizii pentru
sinteza proteinelor,acetil-
CoA i CO2pentru sinteza acizilor grai i
glucidelor.
n stadiul II al anabolismului din aceste
substane iniiale se formeaz aminoacizi,
monozaharide,acizi grai i alte elemente de
construcie, din care n stadiul III al
anabolismului se sintetizeaz proteine, lipide,
glucide etc.

Fig..2. Schema stadiilor catabolismului i

anabolismului(liniile continui cile
catabolice; liniile punctate cile anabolice.
.Dei anabolismul i catabolismul au loc n
celule n mod simultan i exist o
51
 reversibilitate natural a reaciilor catalizate de enzie, nu exist o deplin coinciden ntre cile
catabolice i anabolice ale unui anumit precursor i produsul su corespunztor datorit
unei deosebiri eseniale ntre etapele enzimatice ale
acestor ci, diferenei de localizare intracelular a
sistemelor enzimatice ale Schema stadiilor catabolismului i anabolismului(liniile continui cile catabolice;
liniile punctate cile anabolice)catabolismului i anabolismului i, n sfrit, deosebirii ntre
mecanismele dereglare a lor.
Cile catabolice i anabolice ale metabolismului sunt legate de un stadiu comun,reprezentat
de ciclul acidului citric, nsoit de catena de respiraie, care este definit ca fiind calea central
sau calea amfibolica metabolismului.
Calea amfibolic, pe de o parte este utilizat pentru finalizarea degradrii moleculelor care se
formeaz n stadiul II al catabolismului i, n acelai timp, aceast cale furnizeaz moleculele ce
reprezint precursorii pentru stadiul II al anabolismului.
Concomitent cu transformarea substanelor n reaciile enzimatice ale metabolismului intermediar,
se produce eliberarea i utilizarea energiei, adic are loc metabolismul energetic. Eliberarea energiei
chimice prin catabolism decurge cu grade diferite n cele trei etape ale sale.
Prin descompunerea hidrolitic a compuilor macromoleculari se elibereaz o cantitate foarte
mic de energie (mai puin de 1% din energia de oxidare a acestor compui). O cantitate apreciabil
de energie se elibereaz n reaciile de glicoliz,de oxidare a acidului lactic, a glicerinei, acizilor
grai, aminoacizilor etc., adic n stadiul de descompunere a elementelor de construcie a
proteinelor, acizilor nucleici, polizaharidelor, lipidelor. n finalul acestor reacii se formeaz trei
produi de baz care au importan deosebit sub aspect energetic:
acetil-CoA, acidul -cetoglutaric i acidul oxalacetic.
. Aceste substane sunt supuse oxidrii ulterioare n ciclul acidului citric care funcioneaz
nsoit de catena de respiraie. Ca rezultat al acestei etape se elibereaz 2/3 din ntreaga energie de
descompunere a substanelor. Energia eliberat este parial transformat n cldur, iar aproximativ
40% din ea se acumuleaz pe calea sintezei compuilor macroergici- n special sub form de energie
a legturilor fosfat din ATP, precum i din GTP, UTP, CTP.ATP se sintetizeaz pe cale enzimatic, in
prezena kinazei, din ADP i fosfor anorganic:ADP + Pi
ATP(conservarea i stocarea energiei). Reaciile enzimatice n care are loc transferul gruprilor
fosfat cu formarea ATP sunt nsoite n anumite etape de eliberarea energiei n reaciile de oxidare
ale procesului de catabolism. Moleculele de ATP pot fi transferate n acele componente celulare care
necesit energie. Altfel vorbind, n sistemele vii, energia eliberat intr-un anumit punct,poate fi
cedat sub forma compuilor macroergici n alt punct, unde ea este utilizat direct pentru
desfurarea unei reacii chimice. La transferul gruprii fosfat terminale de la ATP la un anumit
acceptor se produce eliberarea energiei chimice a ATP, prin care ATP se transform n ADP,
iar acceptorul, primind energie, are posibilitatea de a efectua un anumit lucru.
ATP ADP + P(generare de energie)
Conversia ATP la ADP este un proces exergonic n care se elibereaz o mare cantitate de energie
chimic util (7,3 Kcal/mol) (fig.9.4).
ns, ATP utilizat n reaciile de biosintez poate ceda nu numai gruparea ortofosfat, ci i gruparea
pirofosfat, formndu-
se AMP i eliberndu-
se o cantitatei mai
mare de energie:
ATP AMP + PPi

Fig. 3. Conversia ATP

la ADP Pirofosfatul
rezultat este hidrolizat
rapid sub aciunea
pirofosfatazei:
52
PPi + H2O 2 Pi
reacie n care se elibereaz aproximativ aceeai cantitate de energie ca la hidroliza ATP. Aceast
energie suplimenteaz energia eliberat prin scindarea ATP n AMP i PPi.
n felul acesta energia care se elibereaz n procesul de catabolism prin reaciile de oxidare i care
se acumuleaz n legturi macroergice, poate fi folosit n diferite reacii de sintez n procesele
metabolice.
Asemntor transferului energiei sub forma energiei legturilor fosfailor exist un transfer al
energiei sub forma transferului de electroni. Electronii scoi n catabolism prin reaciile de oxidare,
sunt cedai gruprilor reduse n reaciile metabolice cu ajutorul coenzimelor care ndeplinesc rol de
transportori de electroni. Cel mai important transportor al electronilor bogai n energie n aceste
reacii este NADP, care ia parte, de exemplu, la transferul energiei ce se elibereaz prin oxidarea
glucidelor pentru reacia de sintez a acizilor grai.
Capitolul 11
Oxidarea celular (biologic)

Cuvinte cheie:
- organisme aerobe, organisme anaerobe, ciclul Krebs, lanul respirator, acetil-coenzima A (CH3-
CO-SCOA)
Obiective:
- trasarea proceselor biochimice din ciclul Krebs
- descrierea mecanismului de degradare n lanul respirator
11.1. Caracteristica general a oxidrii biologice
Prin oxidare celular (respiraie celular) are loc degradarea structurilor diferitelor biocomponente
cu eliberarea energiei chimice din legturile structurale (energia eliberat este stocat n compusul
macroergic ATP). Prin oxidare celular organismele autotrofe i procur energia
necesar proceselor
de biosintez atunci cnd nu este lumin i fotosinteza nu poate avea loc.
Pentru organismele heterotrofe oxidarea celular este singura cale de obinere a energiei necesare
pentru sinteza biocomponentelor specifice; prin procesele de degradare a substanelor de rezerv
(glucide, lipide) luate din hran se elibereaz energie chimic cu care se formeaz ATP.
Degradarea biocomponentelor se produce de fapt prin reacii de oxidoreducere, moleculele
organice fiind oxidate i transformate n structuri mai simple, coenzimele trecnd n form redus.
Degradarea biocomponentelor poate avea loc n condiii aerobe sau n condiii anaerobe.
n cazul organismelor aerobioxidarea biomoleculelor organice se face pn la CO2 i ap
n prezena oxigenului molecular , avnd loc transferul atomilor de hidrogen i a electronilor de pe
coenzimele reduse rezultate pn la oxigenul molecular cu formarea moleculelor de ap.
n cazul organismelor anaerobe atomii de hidrogen respectiv electronii sunt trecui pe o
structur acceptor, degradrile avnd loc n absena oxigenului, deci degradarea nemaifiind
avansat pn la CO2 i H2O (oxidare total). Acesta este motivul pentru care cantitatea de
energie eliberat n degradrile anaerobe este mult mai mic dect cea obinut prin
degradarea aerob (respiraie). Prin prezentarea principalelor etape ale oxidrii aerobe se
obine tabloul
complet al oxidrii celulare.
Astfel ntr-o prim etap glucidele, acizii
grai (obinui din hidroliza enzimatic a
lipidelor), aminoacizii(obinui din hidroliza
enzimatic a protidelor) sunt degradai prin
ci specifice pn la
acetil-coenzima A (CH3 CO~SCoA).
n continuare acetil-coenzima A este
degradat enzimatic printr-o secven de

53
reacii n ciclul Krebs (ciclul acizilor tricarboxilici) cu formarea de CO 2 i coenzime reduse
(NADH+H+ i FADH2).
n ultima etap coenzimele reduse intr n lanul respirator unde n prezena oxigenului molecular
atomii de H din coenzimele reduse genereaz ap, cu eliberare de energie ce se stocheaz n
ATP. Se vor descrie n acest capitol etapele de degradare ale acetil-coenzimei A (comune pentru
glucide, lipide i protide) urmnd ca procesele specifice de degradare ale fiecrei clase
de biocomponente pn la acetil-coenzima A s fie prezentate n capitole ce
abordeaz metabolismul biocomponentelor respective.
Palade a fost pentru biologia celular ceea ce Einstein a fost pentru fizic, a afirmat Gnter
Blobel, laureat al Premiului Nobel
Se povestete c, odat, ziaritii l-au ntrebat pe sir Hans Krebs: V-a surprins acordarea Premiului
Nobel?. Rspunsul a venit prompt: Nu, deloc, pentru c i profesorul meu a primit aceeai
distincie!.

11.2. Ciclul Krebs

Hans Adolf Krebs

N\scut: 25 August 1900, Hildesheim, Germany

Decedat: 22 November 1981, Oxford, United Kingdom

Profesor la:Universitatea Sheffield, Sheffield, United Kingdom

Specialist ]n: biochemist, fiziolgie, metabolism

Premiul Nobel

Hans Krebs a stabilit principalele etape ale acestui proces ciclic, proces ce s-a numit ulterior ciclul
Krebs. Acest ciclu mai poart i numele de ciclul acizilor tricarboxilici deoarece apar acizi
tricarboxilici precum i ciclul acidului citric dup substana implica n aceste transformri.
Ciclul lui Krebs reprezint unul din procesele biochimice fundamentale ale tuturor organismelor
vegetale i animale. El este reprezentat de o succesiune de reacii de oxidoreducere, de
decarboxilare, de fosforilare, de hidratare, reacii catalizate de enzime specifice, localizate n
mitocondrii.
Mitocondriile sunt organite n form de tij, care pot fi
considerate generatoarele de energie a celulei, de conversie
de oxigen i substane nutritive n adenozin trifosfat ( ATP ).
ATP este energie "moneda" chimic a celulei care
alimenteaz activitile metabolice celulelor. Acest proces
este numit respiraie aerob i este motivul pentru
animalele ce respir oxigen. Fr mitocondriile (singular,
mitocondrie), animalele superioare, probabil nu ar exista,
deoarece celulele lor ar putea numai pentru obinerea de
energie din respiraie anaerob (n absena oxigenului), un
proces mult mai puin eficient dect respiraia aerob. De
fapt, mitocondriile permite celulei pentru a produce de 15 ori mai mult dect ar putea ATP altfel, i
animale complexe, ca i oamenii, au nevoie de cantiti mari de energie, n scopul de a supravieui.
Degradrile oxidative din ciclul Krebs degaj o cantitate mare de energie.
Ciclul Krebs este deci ansamblul de reacii biochimice de degradarea acetil-
coenzimei A cu formare de ATP (energie), CO2 , coenzime reduse
(NADH+H + , FADH2 ).

54
Ciclul Krebs (fiind calea comun de degradarea glucidelor, lipidelor i protidelor precum i
generatorul unor precursori n sinteza altor biocomponente) reprezint o plac turnant a
metabolismului.
Secvenele importante din procesul ciclului Krebs sunt urmtoarele:
iniierea ciclului de ctre acidul oxalil-acetic;
condensarea enzimatic a moleculei de acetil-coenzim A cu acidul oxalil-acetic cu formarea
acidului citric;
transformarea acidului citric prin decarboxilri succesive (degajare de CO2) i prin formare de
NADH+H+ n succinil coenzim A;

transformarea succinul-
coenzimei A printr-un ir de reacii
n acid oxalilacetic cu dezvoltarea
de energie (ATP respectiv GDP)
i NADH+H+ i FADH2,
nchizndu-se
astfel ciclul.
Schematic acest proces se
prezint n fig. 11.1.

Prin degradarea unei molecule de

acetil-coenzima A prin ciclul Krebs
rezult produii ncadrai n schema
de mai sus: coenzime reduse(3
NADH+H+i 1 FADH2), 2 molecule
de CO2, i 1 ATP (de fapt GTP direct
din reacie).
tiind c: 1 FADH2 este echivalent
cu 2 ATP.1 NADH+H+ este
echivalent cu 3 ATP rezult
c bilanul energetic al ciclului
Krebs este de 12 ATP. Prin
transformrile substanelor din
cadrul ciclului Krebs se elibereaz deci, n mod treptat o cantitate mare de energie care este
necesar permanent proceselor fitologice i biochimice din organism. Coenzimele reduse
(NADH+H+ i FADH2) trec n ultima etap a degradrii aerobe, n lanul respirator.

Tema 11.2. Lanul transformrilor de hidrogen i electroni (catena de

respiraie). Fosforilarea oxidativ.

Lanul respirator este alctuit dintr-o suit de reacii biochimice al cror rezultat este
formarea apei n organism din oxigenul molecular i atomii de hidrogen din coenzimele
reduse provenite din ciclul Krebs.Aceste reacii biochimice sunt reacii enzimatice de oxido-
reducere n care au loc att transferul succesiv al atomilor de hidrogen ct i al electronilor
respectivi pe oxigenul molecular.
Necesitatea acestor reacii succesive deriv, din motive termodinamice.
n transportul i activarea hidrogenului un rol important l au dehidrogenazele NAD +, NADP+, ce
trec atomii de hidrogen pe o flavoprotein cu o coenzim FAD. Electronii sunt transportai printr-o
succesiune de reacii de ctre transportatorii de electroni la oxigenul atomic cu formarea ionului
O2-.

55
 De obicei transportul electronilor se face de ctre citocromi de la o component la alta prin
scderea potenialului standard de oxido-reducere. Eliberarea de energie (formarea de ATP) are loc
la trecerea atomilor de hidrogen de pe NADH+H+ pe FAD i la transferul electronilor de pe
citocomul b pe citocomul c i apoi de pe citocomul a pe citocomul a3.
Formarea de ATP (fosforilarea) este n acest caz cuplat cu oxidarea(transferul electronilor),
motiv pentru care acest proces se numete fosforilare oxidativ.
Pentru ca hidrogenul i oxigenul s reacioneze mpreun trebuie s fie activai. Activarea acestor
elemente se face fie prin nclzire, fie cu ajutorul biocatalizatorilor.
n lipsa enzimelor, hidrogenul i oxigenul nu se combin la temperatura existent n plante
sau animale. Pentru ca aceste dou elemente s fie activate prin ridicarea temperaturii, ele trebuie
nclzite la aproape 2000C, ceea ce nu se poate realiza n organism; asemenea temperatur
distruge celulele i esuturile i, deci, ar determina moartea plantelor. Hidrogenul i oxigenul sunt
activai n plante prin intermediul biocatalizatorilor. Activarea se face cu ajutorul unor sisteme
enzimatice i const n esen n transformarea atomului de oxigen n ion negativ (O 2-) i a
atomului de hidrogen n ion pozitiv (H+). La unirea acestor ioni cu formarea molecului de ap, se
degaj aceast mare cantitate de energie.
Schematic, procesele din lanul respirator pot fi prezentate astfel:

Lanul respirator

Importana biologic a fosforilrii oxidative const n aceea c energia eliberat n procesul de

oxidare al hidrogenului se nmagazineaz n legturile macroergice ale ATP-ului. Hidrogenul de
pe substratul respirator (glucide, lipide, protide) este luat de diferite enzime, este activat i
mpreun cu oxigenul atmosferic, care de asemenea este activat, formeaz apa i se degaj o mare
cantitate de energie. Acest proces al respiraiei celulare este localizat n mitocondrii,
unde ptrunde oxigenul molecular.
Schematic, ntregul proces al degradrii aerobe prin oxidare celular poate fi reprezentat astfel:

56
 Oxidarea celular
Energia care se degaj n cadrul degradrii prin oxidare celular provine din energia acumulat n
substane, n procesul de sintez (n spe fotosintez). Din energia eliberat numai 40-50% este
utilizat n alte procese de biosintez. Restul energiei este captat sau transformat n alte forme de
energie.
Rezumat:
Prin oxidare celular are loc degradarea structurilor diferitelor biocomponente cu eliberarea
energiei chimice din legturile structurale(cu formarea ATP). Degradarea biocomponentelor se
produce de fapt prin reacii de oxidoreducere, moleculele organice fiind oxidate i transferate n
structuri mai
simple. Degradarea poate avea loc n condiii aerobe sau anaerobe.
n cazul organismelor aerobe, oxidarea biomoleculelor organic se face pn la CO2 i ap
(H2O) n prezena oxigenului molecular (atmosferic); n cazul organismelor
anaerobe, atomii de hidrogen, respectiv, electronii sunt trecui pe o structur acceptor n absena
oxigenului.
Prin prezentarea principalelor etape ale oxidrii aerobe se obine tabloul complet al oxidrii
celulare.
Astfel ntr-o prim etap glucidele, acizii grai, aminoacizii sunt degradai prin ci specifice pn la
acetil-coenzima A. n continuare, acetil-coenzima A este degradat enzimatic printr-o
secven de reacii ale ciclului Krebs cu formare de CO2 , coenzime reduse i energie.
n ultima etap coenzimele reduse intr n lanul respirator unde n prezena oxigenului
molecular, atomii de hidrogen din coenzimele reduse formeaz ap.

1. Lanul respirator este transportor de protoni, genernd la nivelul membranei mitocondriale

interne un gradient electrochimic;
2. ATP sintaza produce ATP prin disiparea gradientului protonic;( disiparea A-i pierde sau a face
s-i piard energia . 2.Dex pag. 586).
3. Membrana mitocondrial intern conine transportorii ce asigur traficul metaboliilor ;
4. Pe ci nespecifice membrana mitocondrial intern este practic impermeabil la protoni i, n
general, la ioni.
Din cele prezentrate mai sus, ct i din cele ce stipuleaz cele patru postulate ale teoriei
chemiosmotice, rezult c buna cooperare dintre aciunea lanului respirator cu activitatea ATP
sintazei (cooperare numit cuplare chemiosmotic) este esenial pentru o eficient producere de
ATP, adic pentru metabolismul energetic mitocondrial. Orice disipare nespecific a gradientului
protonic prin membrana mitocondrial intern afecteaz randamentul producerii de ATP. Orice
agent decuplant afecteaz funcionarea mitocondriilor.
Exist totui o situaie fiziologic n care se folosete decuplarea parial la nivelul fosforilrii
oxidative. Acest lucru se ntmpl n mitocondriile celulelor adipoase brune. Membrana
57
mitocondrial intern, n aceste celule, conine un decuplant fiziologic numit termogenin.
Termogenina este o protein transmembranar care structureaz un canal protonic. Ea
transform energia acumulat de aciunea lanului respirator n gradientul protonic, n
energie termic. Prezena termogeninei la nivelul mitocondriilor din adipocitele brune explic de
ce organismele tinere, n care esutul adipos brun este bine reprezentat, sunt mai rezistente la frig
dect organismele mature.

Putem sintetiza cele prezentate mai sus despre mitocondrie prin:

- mitocondria este un organit cu o arhitectur deosebit, structurat pe baza unui sistem de dou
membrane;
- cele patru elemente structurale ale mitocondriei coopereaz pentru asigurarea funciei de baz a
organitului: producerea de ATP;
- funcionarea mitocondriei este sintetizat prin postulatele teoriei chemiosmotice;
- funcia respiratorie este asigurat de complexele enzimatice ale lanului transportor de electroni;
- alimentarea cu electroni a lanului respirator o face ciclul Krebs prin NADH i FADH2;
- disiparea gradientului protonic, format de lanul transportor de electroni, reprezint fora motrice
pentru producerea de ATP la nivelul ATP sintazei;
- cuplarea/decuplarea lanului respirator cu/de fosforilarea ADP reprezint mecanismul celular de
comutare: ATP/cldur;
- dei mitocondria are propriul su bagaj genetic, cea mai mare parte a proteinelor necesare
funcionrii organitului este codificat de ADN-ul nuclear; ele sunt sintetizate pe poliribosomi liberi
n citosol i importate prin mecanisme de translocare posttraducere;
- mitocondria joac un rol important n controlul proceselor apoptotice;
- biogeneza mitocondrial nu presupune producerea de novo a organitului.

Fosforilarea oxidativ.reprezint punctul culminant al metabolismului generator de energie.

Toate cile de degradare oxidativ a glucidelor, lipidelor i aminoacizilor converg spre aceast etap
final, n care energia eliberat n procesele de oxidare este utilizat pentru sinteza ATP.
Fosforilarea oxidativ este o cale metabolic ce utilizeaz oxidarea nutrienilor pentru
sinteza ATP (adenozintrifosfatului). Are loc n mitocondriile celulelor organismelor. Este un
proces exergonic ce implic lanuri transportoare de electroni. Procesul se ncadreaz n
domeniul de studiu al bioelectrochimiei.
Funcia esenial a mitocondriei const n sinteza ATP folosind energia rezultat din oxidarea
NADH i FADH2 provenii din ciclul citric i din oxidarea acizilor grai.
Diferena de potenial (E0) n cazul oxidrii NADH de ctre O2 este de 1,14 V. n cazul oxidrii
NADH energia liber este de 52,6 kcal/mol, deci reacia este una exergonic, energia degajat
avnd valoarea de cca. 53 kcal/mol NADH oxidat. n cazul oxidrii FADH2 calculele analoage dau
valoarea de cca. 37 kcal/mol. Energia rezultat prin oxidrile NADH i FADH 2 este n proporie de
cca. 50 kcal/mol folosit pentru sinteza de ATP, care se produce simultan cu scurgerea elecronilor
prin lanul respirator. Restul energiei provenite din oxidri, nenmagazinat n ATP, este disipat
sub form de energie. Acest proces joac un rol esenial n meninerea temperaturii corpului la
animale cu snge cald.

ntrebri:
11.1. n ce unitate a celulei are loc ciclul Krebs i este localizat sistemul transportor de electroni?
11.2. De ce este considerat ciclul Krebs o plac turnant a metabolismului?
11.3. Care sunt produii de degradare ai acetil-coenzimeiA n ciclul Krebs?
11.4. Care este importana biologic a fosforilarii oxidative n lanul respirator?

Capitolul 12. Metabolismul glucidelor.

58
Tema 12.1 .Anabolismul glucidelor (fotosinteza i formarea diverselor glucide
n organisml animal)
Fotosinteza ( stgr. - lumina, - conectare) - un proces biochimic pentru
producerea de compui organici din materie anorganic, n celulele care
conin clorofil sau bacterioclorofila, cu participarea de lumin.
Acesta este unul dintre cele mai importante schimbri biochimice pe Pmnt .
Acest proces menine un nivel ridicat de oxigen n atmosfer i contribuie la creterea
cantitii de carbon organic n piscina carbon prin creterea masei de materie organic n
detrimentul materie anorganic.
Fotosinteza este procesul prin care se sintetizeaz subsante organice (glucide, lipide,
proteine), pornind de la ap i sruri minerale, folosind ca surs de energie, energia
luminoas i ca surs de C folosete CO2 atmosferic.
- are loc n structuri specializate numite cloroplaste, unde se gsesc pigmenii clorofilieni
clorofilele a i b. Ambele clorofile absorb energia luminoas, dar numai clorofila o poate converti
n energie chimic.
Formul molecular
Clorofila b Clorofila c1 Clorofila c2 Clorofila d
Clorofila a
C55H72O5N4 C55H70O6N4 C35H30O5N4 C35H28O5N4 C54H70O6N4
Mg Mg Mg Mg Mg

Ecuaia chimic a fotosintezei:

6CO2 + 6H2O C6H12O6 (glucoz) + 6O2

Dioxid de carbon + Ap + Energie luminoas Glucoz + Oxigen

Fotosinteza are loc n cloroplaste i n zona citoplasmei care le nconjoar. La nivelul
cloroplastelor alturi de clorofila a, pigment activ n reaciile fotochimice, se mai gsesc i ali
pigmeni, cu rol de pigmeni accesori:
Clorofil b, clorofil c
Carotenoizi
Flavonoide
Pigmeni ficobilinici = ficobiliproteine
Mecanismul clorofilei se pare c include 3 procese principale:
1. Fotofosforilarea
2. Fotoliza apei
3. Fixarea i transformarea CO2 n glucide.
- Fotosinteza se desfoar n toate organele verzi ale plantei, dar predominant la nivelul frunzei,
care are o structur adaptat funciei:
- suprafaa mare de contact, epiderma cu stomate, esut asimilator - bogat n cloroplaste, vase
conductoare;
- fotosinteza are loc n structuri specializate numite cloroplaste, unde se gsesc
pigmenii clorofilieni clorofilele a si b.

Fazele fotosintezei:
1. Faza de lumin are loc n membrana tilacoidelor (grana);
- folosete, ca surs de energie, energia luminoas - absorbit de
pigmenii clorofilieni;
- const ntr-un proces de fotoliz a apei:
2H2O 2H2 +O2 , prin care:
- se elibereaz H2 necesar n faza de ntuneric;
- se elibereaz energie nglobat n ATP (adenozintrifosfat);

59
- se elibereaz oxigenul necesar respiraiei.

2. Faza de ntuneric :
- are loc n stroma cloroplastelor;
- const n sinteza substanelor organice (glucide, lipide, proteine);
- folosete ca surs de carbon CO2 atmosferic;
- folosete, ca surs de energie, energia chimic nglobat n ATP.

Importana fotosintezei:
- conversia energiei luminoase n energie chimic;
- sinteza de substane organice;
- eliberarea oxigenului necesar respiraiei;
- purificarea atmosferei prin absorbia CO2.

Hydra verde ( Hydra viridis ) - un animal care folosesc fotosinteza,

prin simbioza cu zoochlorellami.
Avnd n vedere existena unor legturi strnse efecte fotosintetice
simbiotice aproape imediat, se poate utiliza licheni , precum si a
organismelor heterotrofe, avnd n esen zoochlorelle,
zooxanthellae i cyjanelle .

Apa n fotosintez
Fr ap viaa plantelor, ca de altfel a tuturor vieuitoarelor de
pe Terra, este imposibil. Dup cum se tie, globul pmntesc este aprovizionat cu ap n mod
foarte diferit. Cele mai puine precipitaii, inegal distribuite n cursul anului, cad n deerturi.
Deerturile se gsesc aproape n toate coninentele, ocupnd suprafee mai mari sau mai mici,
populate cu o flor i o faun specific. Toate procesele metabolice depind de cantitatea de ap
din esuturi. Un deficit de ap n esuturile asimilatoare influeneaz direct procesul
fotosintezei att n faza de lumin, ct i n faza de ntuneric, provocnd inhibarea acestuia.
Deoarece principalul rezultat al pierderilor turgescenei l constituie nchiderea stomatelor,
schimbul de gaze care are loc n fotosintez, respiraie i fotorespiraie, este mult ngreunat.
Totui, i ali factori nonstomatici intervin n reducerea fotosintezei sub influena deficitului i
stresului de ap.

60
Fotosinteza este procesul de fixare a dioxidului de carbon din atmosfer de ctre
plantele verzi (cu clorofil), n prezena radiaiilor solare, cu eliminare de oxigen i formare
de compui organici (glucide, lipide,proteine) foarte variai.
Dei apa particip n fotosintez, ca i dioxidul de carbon, ea nu constituie, nici chiar cnd este n
cantiti reduse, un factor limitant pentru toate speciile.
Intensitatea fotosintezei se exprim cantitativ prin volumul de gaz degajat pe unitate de timp.
Reacii fotochimice
Este numita faza Robin Hill i const dintr-un lan de transformari fotofizice i reacii
fotochimice desfurate n granele cloroplastelor, caracterizate prin urmatoarele procese de
prima importana : captarea CO2 n cloroplastele celulelor asimilatoare, stimularea clorofilei
pentru fixarea energiei luminoase, fosforilarea ADP n ATP, fotoliza apei cu fixarea H+ n
NADP redus i eliminarea O2 . Toate aceste procese necesit n mod obligatoriu, prezena
luminii i sunt grupate n trei etape distincte :
- ptrunderea CO2 n cloroplaste ,
- absorbia energiei luminoase i transformarea ei n energie chimica .
n stadiul dependent de lumin (reacia
la
lumin), clorofila absoarbe energia lumino
as, care stimuleaz unii electroni din
moleculele de pigment, transferndu-i pe
straturi cu niveluri mai ridicate de energie.
Acetia prsesc clorofila i trec printr-o
serie de molecule, formnd NADPH (o
enzim) i molecule ATP care stocheaz energia. Oxigenul rezultat n urma reaciilor chimice este
eliberat n atmosfer prin porii frunzelor.

Reacii nefotochimice ( de ntuneric )

Ciclul Calvin (descoperit de Melvin Calvin) reprezint o serie de reacii biochimice, care au loc n
stroma organismelor fotosintetice, n timpul fazei de ntuneric. n cadrul acestui proces, energia
cinetic a fotonilor este transformat n energie chimic de legatur. NADPH i ATP sunt
compuii care conduc la cel de al doilea stadiu al fotosintezei, (sau ciclul Calvin).n acest
stadiu, glucoza este produs folosindu-se dioxid de carbon din atmosfer.

Aspectul energetic al fotosintezei

Au trebuit s treac nc 44 ani pentru ca aspectul energetic al fotosintezei s fie cunoscut. Meritul
revine medicului i fizicianului german Robert Mayer, care a aplicat legea conservrii energiei la
vieuitoare. Astfel, n 1845 el a publicat lucrarea "Micarea organic n relaie cu metabolismul",
n care a explicat clar transformarea energiei n procesul fotosintezei. n timpul efecturii
fotosintezei, plantele nmagazineaz energia luminii solare sub form de energie chimic specific
ei din natur. Plantele nu creeaz energie, ci numai o transform pe cea primit de la soare. n plus,
Mayer afirm c viaa animalelor este dependent de aceast proprietate unic a plantelor verzi.
Astfel energia consumat de animale n timpul vieii provine din radiaiile solare. Acest fapt
stabilete ferm procesul de fotosintez ca fiind unul dintre fenomenele cele mai importante din
lumea vieuitoarelor.
Fosforilarea reprezint formarea ATP-ului (din ADP i fosfat anorganic- P1) i a NADP +H+
i H rezultat din fotoliza apei.
2H2O + 2NADP+ + 2P1 + () 2NADPH + 2H+ + 2AP + O2
Fixarea i transformarea CO2 n glucide pornete de la esterul ribulozo1,5-difosforic. Procesul de
formare a glucidelor este un proces ciclic esterul regenerndu-se prin ciclul Calvin-Benson.
Se observ c triozele servesc att la sintez ct i la refacerea esterului ribulozo 1,5-difosforic.
Primul produs organic al fotosintezei este acidul 3-fosfogliceric din care se formeaz ulterior:
- aldehid 3-fosfogliceric ester fructozo-1,6-difosforic glucide;
61
 prin decarboxilare i defosforilare CH3COOH acizi grai lipide;
- aldehida 3-fosfogliceric care prin reducere formeaz glicerol;
- aminoacizi i ulterior protide, din cetoacizii ce apar n metabolismul glucidic prin aminare
reductiv sau transaminare.
Biosinteza amidonului
Amidonul se formeaz n plante n urma unui proces secundar al fotosintezei, prin condensarea
moleculelor de glucoz.
Sinteza poate avea loc fr participarea energiei luminoase (expimentai.: scufundnd pedunculul
unei frunze tiate, la ntuneric, n soluie de glucoz sau ali produi de natur glucidic, n frunze
se acumuleaz amidon).
n plante exist enzime capabile de a forma:
- legturii 1,4-glicozidice ce dau natere lanului liniar al amilozei,
- legturi 1,6-glicozidiice, ducnd la ramificarea moleculei, adic la formarea amilopectinei.

Tema 12.1. A. Metabolismul glicogenului (Anabolismul)

Pentru formarea glucidelor proprii, respectiv glicogenul sau glucoza din snge, animalele
utilizeaz substane organice elaborate n prealabil de plantele verzi sub form de hran.
Forma de rezerv a glucidelor n organismul animalelor o constituie glicogenul.
Sediul de formare a glicogenului este ficatul.
Pentru biosinteza glicogenului n ficat este necesar formarea prealabil a glucozo-1-fosfat.
Formarea glucozo-1-fosfat n organismele animale are loc din glucoza provenit pe mai multe ci.
Glicogenul este o poliglucid cu structur ramificat care se gsete n ficat i n cantiti mai
mici n esutul muscular. Ea constituie rezerva de glucide a organismului animal.
Metabolismul glicogenului cuprinde dou laturi:
biosinteza glicogenului sau glicogenogeneza;
degradarea glicogenului sau glicogenoliza.

Biosinteza glicogenului glicogenogeneza

Glicogenul se sintetizeaz n ficat din glucoza adus pe cale sanguin n prezena unei enzime:
glicogen sintetaza. Glucoza particip la biosintez sub form activat de UDP-glucoz.
Pentru biosinteza glicogenului, n ficat trebuie s existe fragmente de glicogeni cu molecule mai
mici dect ale acestuia i cu structur ramificat, aa numitul poliozid primar. Acesta s-a format
din glicogen prin hidroliz, sub aciunea unor amilaze speciale.
Prin stabilirea legturilor glicozidice ntre poliozidul primar i molecula de glucoz transportat
de UDP, acesta va crete, formndu-se n final glicogenul.
Formarea glicogenului este stimulat de hormonul hipoglicemic, deci de insulin.
Structura puternic ramificat a glicogenului este asigurat de prezena unei enzime, numit enzim
de ramificaie. Pornind de la un poliozid coninnd patru resturi de glucoz, prin reacia acestuia cu
o molecul de glucoz va rezulta un poliozid coninnd (n+1) rest de glucoz :
Poliozid + G Poliozid + (n+1)
Poliozid (n+1) +G Poliozid (n+2) etc.
Glicogenul format se stocheaz n ficat, unde va constitui rezerva de glucoz a organismului.

Glicogenogeneza i glicogenoneogeneza

- Glicogenogeneza (g) i glicogenoneogeneza (gng) hepatic reprezint procesele cu ajutorul

crora

62
 organismele animale pot sintetiza n esutul hepatic rezerva de glucide sub form de glicogen, fie
pornind direct de la glucoz sau de la alt glucid(ggg), fie pornind de la componente neeglucidice
((gng).
- Ficatul este singurul organ care, chiar i n cazul unui aport insuficient de glucide, poate pune la
dispoziia organismului necesarul de componeni glucidici.
Metaboliii comuni rezultai din catabolismul glicidic, protidic i lipidic, constituie n ficat aa-
numitul fond metabolic, care poate servii la sinteza glucozei, respectiv a glicogenului.
Glicogenul hepatic reprezint depozitul central de glucide a organismului din care, dup
necesiti, sunt repartizate diverse cantiti i altor organe sau esuturi, care conin i ele, dar n
cantitate mic glicogen sub form de glicogen muscular, celular.
Deoarece glucidele nu pot circula n organism dect sub form de monoglucide, transportul loor are
loc conform schemei:

Glicogen muscular

Glicogen hepatic
Glucoz (snge) Glicogen celular

Numai esutul hepatic poate resintetiza, n exces fa de propriile nevoi lui, glicogen din acid lactic.

A). Glicogenogeneza hepatic.

Sinteza glicogenului reprezint un proces endergonic, n care energia necesar condensrii
moleculelor de glucoz rezult prin degradarea oxidativ total la CO 2 i H2O (proces exergonic) a
cca. 10% din cantitatea de glucoz disponibil.
n biogeneza glicogenului substana de plecare este glucozo-1- fosfatul, etapele procesului fiind:
- formarea glucozo-1-fosfatului se poate realiza fiie din glucoz cnd se obine intermediar
glucozo-6-fosfatul care sub aciunea fosfoglucomutazeii se transform n glucozo-1-foosfat fie din
alte hexoze ((fructoz, manoz, galactoz), fie din pentoze priintr-un prooces nuumit calea
pentozo-fosfat ct i prin transglucozilarea.

B). Glicogenoneogeneza hepatic

realizeaz pe de o parte, sinteza glucidelor din lipide sau protide, atunci cnd alimentai cu
glucide este deficitar, iar pe de alt parte, economie de glucide(utilizate n procesele energetice),
prin resintetizarea glicogenului din acidul lactic format n muchii din degradarea anaerob a
glucidelor.
Acidul lactic format n muchi prin degradarea anaerob a glucidelor este transportat de curentul
sangvin la ficat, unde 1/5-1/6 din cantitatea de acid lactic este oxidat cu formare de CO 2 i H2O,
restul transformndu-se n glicogen.
Cnd necesitile de glucoz n muchi sunt stringente, glucoza adus de snge la muchi nu se mai
transform n glicogen muscular, ci este ooxidat la acid lactic, n vederea furnizrii energiei
necesare
contraciei musculare.

Glucogenez Formarea glucozei. Galactoz + ATP Formarea glucozei.

n organismele animale glucoza are mai multe proveniene:

a) din alimente ca atare sau sub forma unor derivai care n urma unor procese de digestie
i absorbie
intestinal elibereaz glucoza;
b) din procesul de glucogenez ce const n biosinteza glucozei din alte monozaharide (care la
rndul
63
 lor provin din hran);
d) din procesul de gluconeogenez ce const n biosinteza glucozei din alte substane dect glucide
(lipide, proteine, dar mai ales din aminoacizi glucoformatori i din acid lactic).
Mecanismul transformrii acidului lactic n glicogen reprezint n mare parte, inversarea
reaciilor degradrii anaerobe a glucidelor.
- Biosinteza glicogenului din lipide se bazeaz pe posibilitatea oxidrii glicerinei rezultat din
hidroliza lipidelor) la aldehida fosfogliceric compus care se numr printre metabolii
metabolismului glucidic, din care se poate sintetiza cu uurin glucoza pe calea inversrii
glicolizei.

Protidele pot fi i ele transformate de ctre esutul hepatic n glucide, respectiv n glicogen,
datorat prezenei n compoziia protidelor a aa-numiilor aminoacizi glucoformatori: glicocol,
alanin, acid aspartic, acid glutamic, ornitin, etc.
Acetia pot fi transformai n cetoacizi care fac parte din cilul de degradare oxiidativ a glucidelor
din care, prin inversarea reciiilor, se poate obine glucoza, respectiv glicogenul.
Ex.: a-alanina se poate transforma n acid piruvic, acidul aspartic -n acid oxalilacetic i acidul
glutamic n acid -ceto-glutaric.
Pe aceeast cale se pot furniza rezerve glucidice organismelor animale i n cazul unei alimentaii
unilaterale cu protide.
Experimentele efectuate pe cini hrnii exclusiv cu proteine, confirm transformarea proteinelor n
glucoz i glicogen.
Valoarea glicogenetic a proteinelor este de 58 g glucoz/100 g protein

Tema 12.2. Catabolismul (degradarea) glicogenului glicogenoliza

12.2.1. Catabolismul glucidelor.

-La organismele autotrofe are loc doar degradarea glucidelor proprii pentru asigurarea energiei
necesare proceselor fiziologice.
- La organismele heterotrofe are loc degradarea glucidelor alimentare n vederea folosirii lor pentru
sinteza glucidelor proprii sau pentru asigurarea necesitilor energetice imediate.
- Degradarea hidrolitic a glucidelor alimentare de ctre organismele animale pn la faza de
monoglucide, n vederea sintetizrii de glicogen, se realizeaz n procesul de digestie i absorbie a
glucidelor alimentare.
- Digestia ncepe nc din cavitatea bucal sub influena amilazei salivare, ns datorit timpului de
contact redus al alimentelor cu aceast enzim, aciunea ei este superficial.
- Degradarea esenial a glucidelor alimentare are loc n duoden i intestin sub influena sucului
pancreatic i intestinal ce conin amilaza pancreatic i respectiv maltaza.
Sub aciunea celor 2 enzime, amiidonul este transformat n glucoz, trecnd prin faze
intermediare de dextrine i maltoz.
Glicogenoliza este procesul catabolic de transformare a glicogenului n glucoz, prin care se
asigur nivelul glucozei din snge (glicemia). Glicogenoliza este controlat de hormonul
hiperglicemiant (glucagonul i adrenalina). Din punct de vedere chimic, glicogenoliza este o
fosforoliz, deci pentru desfacerea legturilor glicozidice dintre resturile de glucoz care alctuiesc
molecula de glicogen, este necesar prezena H3PO4. Aceasta reacie este catalizat de enzime,
numite fosforilaze.
Pentru deramificarea molecule de glicogen intervin enzime de deramificare, a cror aciune
necesit prezena apei, deci reacia chimic care are loc n prezena acestora este o reacie de
hidroliz.
Schematic, glicogenoliza poate fi prezentat astfel:

64
 12.2.2. Metabolismul glucozei
Metabolismul glucozei poate avea loc aerob sau anaerob, n funcie de condiiile care exist ntr-o
celul. Catabolismul anaerob al glucozei se numete glicoliz.
Catabolismul aerob al glucozei poate s se desfoare pe 3 ci distincte.
Acestea sunt:
calea acizilor tricarboxilici;
calea pentozofosfailor;
calea acizilor uronici.

12.2.A. Catabolismul anaerob al glucozei (Glicoliza)

Transformarea anaerob a glucozei n organismul animal se numete
glicoliz. Prin glicoliz, glucoza se transform n acid lactic:
Glucoza2 CH3CH(OH)-COOH + Q=36Kcal
Glicoliza are loc n muchi. Procesul este nsoit de o degajare moderat
de energie.
Glicoliza cuprinde patru etape. Acestea sunt:
transformarea glucozei n triozofosfat;
transformarea triozofosfatului n acid fosfogliceric;
transformarea acidului fosfogliceric n acid piruvic;
transformarea acidului piruvic n acid lactic.
n timpul glicolizei se formeaz o serie de esteri fosforici ai glucozei i
fructozei: G-1P, F-6P, F-1,6 diP ( glucoza-1-fosfat, fructoza-6-fosfat,
fructoza-1,6-difosfat).
Schematic glicoliza poate fi prezentat astfel:

Acidul lactic format n muchi nu se elimin, ci poate participa n ficat la un proces de resintez de
glucide. Energia rezultat n glicoliz este depozitat n muchi, ntr-un compus numit fosfagen din
care este utilizat n timpul efortului muscular.
12.2.B. Catabolismul aerob al glucozei
Principalele ci de catabolizare aerob a glucozei sunt urmtoarele:
calea acizilor tricarboxilici (ATC);
calea pentozofosfailor;
calea acizilor uronici.

12.2.C.. Catabolismul glucozei pe calea ATC

Catabolizarea aerob a glucozei pe calea ATC necesit degradarea ei la acid piruvic. Acesta
se formeaz printr-un mecanism comun cu a glicogenului, dar care are loc n condiii aerobe.
65
Acidul piruvic format n etapa a III-a a glicolizei se decarboxideaz oxidativ i va forma
acetil-CoA. Acest compus intr apoi ntr-un proces ciclic, numit ciclul ATC sau ciclul lui Krebs,
n care se va forma bioxidul de carbon i hidrogen, care va fi oxidat i va forma apa ntr-un proces
numit catena de respiraie. Procesul are loc n mitocondrii. Cantitatea de energie rezultat este mult
mai mare dect cea rezultat la glicoliz.
Detalii ale mecanismului.
Degradarea anaerob a glucidelor reprezint un proces oxidativ care se petrece n organismele viii,
fr participatre O2.
Procesul prezint 2 aspecte:
a) glicoliza, care se petrece n organismele animale;
b). fermentaia anaerob, care este specific organismelor, dar poate avea loc uneori i la plantele
superioare.
Glicoliza reprezint procesul de degradare anaerob a glucozei sau glicogenului, care are ca
rezultat formarea acidului lactic.
- Fermentaia parcurge toate fazele glicolizei cu excepia ultimei.
- Diferena dintre cele dou tipuri de degradare const n produsul ultimei etape:
I.- acidul lactic, n cazul glicoliei, CH3-CO-COOH CH3-CH(OH)-COOH
Re ducere

acidul piruvic acidul lactic

Acidul piruvic este un acid carboxilic cu formula CH3-CO-COOH. Este cel mai simplu cetoacid.
Baza conjugat lui este ionul piruvat. Este important n metabolismul energetic. Rezult n celule
din glucoz prin glicoliz;

II.- alcoolul etilic, n cazul fermentaiei.

CH3-CO-COOH CH3-CHO CH3-CH2-OH
Decarboxilare reducere

acidul piruvic aldehida acetic alcool etilic

Formarea acidului piruvic n procesul degradrii anaerobe a glucidelor are semnificaie

deosebit deoarece:
reprezint substane de pornire n degradarea aerob a glucidelor (prin carboxilare i
decarboxilare) realizeaz una dintre cele mai importante puni de legtur cu metabolismul
protidic (prin aminare reductiv formnd alanina).
Transformarea global care are loc n degradarea anaerob a glucidelor este:
glucoz+2 NAD +2 ADP +2Pi 2 acid piruvic +2 NADH +2H+ +2ATP + 2H2O
Degradarea aerob a glucidelor este etapa ce urmeaz degradrii anaerobe, care pornete de
la acidul piruvic (produsul degradrii anaerobe) i are loc cu participarea O2
- Diferenele ntre degradarea aerob i anaerob a glicidelor sunt:

66
A) modul de utilizare a NADH + H + - n degradarea aerob nu mai este folosit pentru reduceri, ci ca
generator de energie (prin combinarea hidrogenului su cu O2);
- modul de transformare a acidului piruvic nu mai este redus la acid lactic, ci sufer decarboxilare
oxidativ i carboxilare.
- Decarboxilarea oxidativ are loc n prezena HS-CoA i se formeaz acid acetic activat (acetil-
CoA).
- Carboxilarea are drept rezultat formarea acidului oxalil-acetic.
- Cele 2 substane formate prin transformarea acidului piruvic
(CH3-CO~SCoA i HOOC-CH2-CO-COOH), reprezint componentele de la care are loc, n
continuare, degradaea oxidativ a glucidelor sub forma unui proces ciclic numit ciclul acizilor
tricarboxilci sau ciclul Krebs.

Analiznd ansamblul reaciilor rezult c se consum 1molecul de CH 3COOH i se formeaz

2 molecule de CO2 i 8 atomi de H:

67
CH3COOH + 2 H2O 2 CO2 + 8H
- CO2 astfel format este cel care apare n procesul respiraei, fiind eliminat prin expiraie cu
ajutorul hemoglobinei, care-l transport de la esuturi la plmni.
- Cei 8 H sunt preluai de acceptori ((NAD+ i FAD)) i prin intermediul citocromilor catenei de
oxidare celular numit i caten de respiraie, localizat n mitocondrii, sunt activai sub form de
H+ care poate forma H2O cu oxigenul activat ca O2-.
- Rezultatul procesului de degradare oxidativ este oxidarea biologic, produii finali ai acestui
proces fiind CO2 i H2O:
C6H12O6 + 6 O2 6 CO2 + 6 H2O
- Energia ce apare n urma acestei oxidri se datoreaz reaciei exergonice de oxidare a H cu O2 adus
prin respiraie de ctre hemoglobin:
H2 + O2 H2O - 5522 kkcal
Dac se realizeaz un bilan energetic al glicolizei (I) i unul al degradrii aerobe (II), prin
comparaie
rezult c degradarea aerob furnizeaz de cca. 19 ori mai mull energie dect cea anaerob.
(I) C6H12O6 2 CH3-CH(OH)-COOH + 2 ATP
(II) C6H12O6 6 CO2 + 6 H2O + 38 ATP
Calea princiipal economic de degradare a glucidelor este reprezentat deci, de calea
metabolizrii de-a lunngul ciclului Krebs, combustibil necesar (atomi de H) oxidrii finale.
Cu toate acestea, n condiie n care aportul de O2 prin respiraie este insuficient, organismul este
obligat s fac apel i la degradarea anaerob, neavantajoas d.p.d.v. energetic.

Reacia global a catabolismului glucozei pe aceast cale este urmtoarea:

12.2.3. Catabolismul glucozei pe calea pentozofosfailor

Este o cale secundar de catabolizare a glucozei comparativ cu calea ATC. Doar 8-30 % din
totalul glucozei din organismul animal se degradeaz pe aceast cale. Este ns foarte important,
pentru c asigur pentozele necesare biosintezei acizilor nucleici i a unor enzime. Sediul
procesului este ficatul, glanda mamar, rinichiul. Din proces rezult o cantitate de energie
asemntoare celei rezultate prin ciclul ATC.
Reacia global este urmtoare:
G + Pentoze + CO2 +energie
68
 Pentozele rezultate se pot transforma prin procese numite de transaldolizare i transcetolizare n
alte oze: trioze, tetroze, 6-oze, 7-oze.

12.2.4. Degradarea glucidelor pe calea acidului glucuronic

Pe lng cele trei ci majore de degradare a glucozei (anaerob, aerob, pentozfosfat) n
organismele animale i la plante exist i o alt cale care implicoxidarea glucozei n acid
glucuronic.Calea acidului glucuronic este important deoarece prin aceast cale din glucide se
formeaz acid glucuronic element constitutiv al mucopolizaharidelor, iar n plante i n
organismele, cu excepia omului, primatelor i a cobaiului, se formeazacid ascorbic.
Formarea acidului glucuronic parcurge urmtoarele etape: Glucozo-1-fosfatul, rezultat din
glicogen, amidon prin fosforoliz sau din izomerizarea glucozo-6-fosfatului, se activeaz prin
cuplarea sa cu UTP(uridin difosfo-glucoza).
Glucozo-1-fosfat + UTP UDP-glucoz + PPi
n etapa urmtoare, are loc oxidarea UDP-glucozei la UDP-glucuronat n prezenaUDP-
glucozo-dehidrogenazei .dehidrogenaza

NAD+ NAD+H+

UDP- glucoz UDP-

glucuronat
UDP-gluco-
dehidrogenaza

UDP-glucuronatul poate elibera acidul glucuronic i UDP prin hidroliz sau poate intra direct n
reacii de glucurono-conjugare.
Ciclul acidului glucuronic
. Acidul glucuronic format, neangajat n reacii de biosintez, se poate transforma fie n pentoze,
stabilind astfel legtura cu ciclul pentozofosfat i conducnd n final la formarea de glucoz, fie n
acid ascorbic.Reaciile chimice care au loc n cadrul ciclului acidului glucuronic sunt prezentate n
figura 12.7.

Biosinteza acidului ascorbic se produce n celul la nive

lul membranei mitocondriale, iar formarea
pentozelor, n lichidul celular. Pe calea acidului
glucuronic se degradeaz o cantitate mic de glucide.

12.2.3.A Gluconeogeneza
Gluconeogeneza reprezint procesul de formare
a glucozei n organismul animal din componente
neglucidice. Componentele neglucidice pot fi: diferii
aminoacizi provenii din proteinele din hran, glicerolul
care rezult din lipide i care se transform n triozofosfat pentru a putea participa la
gluconeogenez sau diferite molecule rezultate din catabolismul aerob sau anaerob al glucozei.
Astfel, n condiiile n care organismului nu i se asigur cantitatea necesar de glucide, acesta are
posibilitatea de-a transforma alte biomolecule n glucide, care sunt transportate apoi spre esuturile
care au absolut nevoie de acestea, esuturile glucodependente: esutul nervos, muscular sau
eritrocitele.

69
Procesul de gluconeogenez are loc intens la bovine n perioada de gestaie i lactaie, cnd
organismul consum cantiti mari de glucide.
Gluconeogeneza poate fi considerat o inversare a glicolizei, pentru c dac se pornete de la acidul
lactic (obinut prin glicoliz) rezult glucoz.
Schematic, gluconeogeneza poate fi redat astfel:

Glicemia
Concentraia normal n glucoz a sngelui se numete glicemie. n organismul animal glicemia
se menine la valori relativ constante, datorit echilibrului care exist ntre procesele metabolice
care consum glucoz i cele care o produc. Acest echilibru este controlat de sistemele de reglare
ale metabolismului glucidic.
Glucoza sanguin provine din urmtoarele surse:
1. glucide alimentare;
2. glucoza rezultat prin glicogenoliz hepatic;
3. gluconeogenez.

Procesele metabolice care consum glucoz i care duc la scderea glicemiei sunt:
a) degradarea oxidativ a glucozei n celule,
b) depozitarea glucozei sub form de glicogen prin procesul de glicogenogenez,
c) transformarea glucozei n lipide i alte substane,
d) glucozurie (eliminarea glucozei prin urin) n cazuri patologice.
Hormonii care intervin n reglarea glicemiei sunt:
insulina, care are aciune hipoglicemiant, prin intensificarea consumului de glucide din celul i
prin favorizarea glicogenogenezei hepatice,
glucagonul, ACTH-ul, STH-ul, adrenalina i hormonii glucocorticosteroizi care mresc
glicemia prin stimularea transformrii glicogenului n glucoz (glicogenoliza) i a
gluconeogenezei.
12.9. ntrebri
1. Cum se formeaz glicogenul n organismul animal?
2. Ce fel de biomoleculele se formeaz n urma catabolizrii glicogenului?
3. Care sunt enzimele ce intervin in metabolismul glicogenului?
4. Definii glicoliza.
5. Care sunt principalele etape ale glicolizei?
6. Care sunt cile de catabolizare aerob ale glucozei i care sunt compuii chimici ce
rezult din aceasta?
7. Cum se formeaz apa n organismul animal?
70
8. Ce se nelege prin fosforilarea oxidativ?
9. Care este principala cale de formare a glucozei n organimul animal?

Capitolul 13. Metabolismul lipidelor

13.1. Anabolismul gliceridelor (oxidarea glicerolului, acizilor grai i a gliceridelor)

Lipidele sunt substane eterogene din punct de vedere chimic de aceea metabolismul se studiaza
pentru fiecare grupa n parte. Cercetarea proceselor metabolice s-a efectuat cu deuteriu, tritiu , azot
marcat, 13C, l4C.
1.a Biointeza glicerolului
Gliceridele sunt esteri ai glicerolului cu acizii grai, sunt cele mai rspndite lipide, gindu-se
att n regnul animal cit i n cel vegetal.
Glicerolul este componentul alcoolic att al glicerolipidelor imple ct i al celor complexe. Se
formeaz din aldehida- 3- fosfogliceric sau din fosfodihidroxiacetona, dou importante trioze cu
rol metabolic care se obin n cursul degradrii anaerobe a glucidelor. Acestea, prin reducere i
defosforilare dau glicerol i ATP.
O
CH CH2 OH CH2 - OH
NADH + H+ glicerofosfataza
CH OH CH OH CH - OH + ATP
CH2 OH CH2 O P CH2 - OH
Aldehida fosfoglicerica glicerol

CH2 OH CH2 OH CH2 - OH

NADH + H+ glicerofosfokinaza
C=O CH OH CH OH + ATP
ADP
CH2 O P CH2 O P CH2 - OH
fosfodihidroxiacetona glicerol
Fosfodihidroxiacetona i aldehida -3-fosfoglicerica sunt n echilibru i particip la numeroase
procese de intez. n biosinteza gliceridelor actioneaz fosfoglicerolul care este mult mai activ
dect glicerolul.
b. Biointeza acizilor grai
Este un proces consumator de energie care conduce la obinerea de acizi grai din acetil coenzima
A (acid acetic activat) i malonil - coenzima A care se formeaz din glucide i din acizi grai prin
oxidarea acestora.
n cantitate mica acetil coenzima A se formeaz din aminoacizi, aldehida acetic, steroli, terpene,
vitaminele E i K.
Acizii grai formai n acest fel contribuie la biosinteza gliceridelor care se depun in semine,
fructe; unii contribuie la formarea lipidelor complexe care sunt constituieni ai membranelor
celulare i ai esuturilor cu activitate fiziologic intens.
Biosinteza acizilor grai are loc pe 2 ci:
a) Calea malonil CoA calea citoplasmatic.
b) Calea elongatiei sau calea mitocondriala.
a) Reprezint principala cale de biosinteza a acizilor grai ; la plante are loc n cloroplaste, n unele
sisteme nemitocondriale din citoplasm i n lichidul citoplasmatic.
Schema procesului este urmtoarea :
COOH
CH3 CO- SCoA
71
acetil CoA CH3 CO CH CO SCoA
CO2 ATP acetil malonil CoA
HOOCCH2CO SCoA
Malonil CoA HSCoA CO2
CH3 CO SCoA CH3 COCH2 CO SCoA
NADPH+H+
NADP+
OH
CH3CH2CH2CO SCoA CH3CHCH2CO SCoA
Butiril CoA Hidroxibutiril CoA
NADP+
NADPH+H+
CH3-CH=CH-CO SCoA H2O
Crotonil CoA
Substanele de baza sunt acetil coenzima A i malonil coenzima A alturi de care sunt necesare
CO2, HCO3- , ATP, NADPH + H+, ioni Mg 2+, Mn 2+ , oxigen, biotina, acid citric i un complex
enzimatic format din acid gras sintetaza, acetil CoA carboxilaza, biotincarboxilaza, dehidrogenaze,
transacilaze, oxigenaze etc.
Acid gras sintetaza din spanac, avocado, arahide, drojdii reprezint un sistem multienzimatic
format din 6-7 enzime care sunt grupate pe o proteina solubila - proteina purttoare de acil (ACP).
Aceasta este format din gruparea proteic i o grupare prostetic , 4 fosfopanteteina care se leag
esteric de un rest de fosfoserin.

Etapa I Acetil CoA, sub influena acetil CoA carboxilazei, care are drept coenzim biotina,
reactioneaz cu CO2 activat i formeaz malonil CoA. CO2 rezult din decarboxilarea acidului
piruvic.
Reacia este endergonic.
Acetil CoA se formeaz n mitocondrii dar membrana lor este impermeabil pentru acetil CoA de
aceea aceasta se combin cu acidul oxalil acetic i formeaz acidul citric care traverseaz
membrana mitocondriala apoi se reface acetil CoA n acidul oxalil acetic. Acidul
citric este transportator de acetil CoA. Malonil CoA se poate obine din acidul malonic.
Etapa a-II-a Se formeaz un compus intermediar acetil malonil CoA sub aciunea unei
enzime din sistemul acid gras sintetaza.
Etapa a-III-a Se formeaz acetoacetil CoA sub aciunea malonil decarboxilazei . Aceasta are 2
atomi de carbon n plus fa de acetil CoA de la care s-a pornit biointeza. Aceste transformri sunt
exergonice.
Etapa a-IV-a Acetoacetil CoA se reduce sub aciunea NADPH + H+ i se formeaz
hidroxibutiril CoA (NADPH+H+ rezult n procesul de fotofosforilare, ciclul Krebs, ciclul
pentazofosfatilor).
Etapa a-V-a Hidroxibutiril CoA se deshidrateaz sub actiunea erotonazei rezultnd erotonil
CoA.
Etapa a-VI-a prin reducere cu NADPH+H+, sub aciunea unei ACP reductaze, rezult butiril
CoA, compus cu 4 atomi de carbon.
Spira s-a nchis i s-a format un acid gras cu doi atomi de carbon mai mult decat acetil CoA.
Biointeza acizilor grai este un proces spiralic, spiralele se repet de jumtate minus 1 din
numarul atomilor de carbon : de exemplu, pentru acidul palmitic sunt necesare 7
spire adic( 16 :2)-1 spire.
Scadere coninutului de acizi grai din ciclul Krebs conduce la scderea biosintezei lor.

b) Calea elongatiei (calea mitocondrial)

Are loc la nivelul mitocondriilor i se mai numeste calea mitocondrial.

72
 Prin acest proces se formeaz acizi grai cu catena carbonica lung( C18-C30) din acizi grai cu
catena mai scurt( C12- C10), sub aciunea enzimelor.
Substana activ care se cupleaz cu acizii grai cu catena scurt este acetil CoA.
Formarea acidului stearic din acidul palmitic :

cetotiolaza
CH3-(CH2)14-CO SCoA + CH3-CO SCoA Palmitil CoA acetil CoA ATP, HSCoA
OH NADH+H+
CH3-(CH2)14-CO-CH2-CO SCoA CH3-(CH2)14-CH-CO SCoA
Cetostearil CoA - NAD+ hidroxibutiril CoA
NADH+H+
Enoilhidraza
CH3-(CH2)14-CH=CH-CO ScoA CH3-(CH2)16-CO SCoA - H2O - NAD+
oleilCoA stearilCoA
Acidul stearic se mai poate obine i prin intermediul malonil CoA:
-CO2
palmitil CoA + malonil CoA cetostearil S-ACP -HSCoA
NADH+H+HSCoAstearil-ACP stearilCoA + HSACP -H2O
Biointeza acizilor grai cu catena ramificat sau numar par de atomi de carbon are loc prin
malonil CoA i un acceptor impar , radical acil coenzima. ( valerianil, propionil, izocapril,
izovalerianil).
Biointeza acizilor grai nesaturati mono i polietenici se presupune c are loc din acizi grai
saturai , n prezena oxigenului , oxigenazei, dehidrogenazei, NADPH+H+, ferodoxina i
citocrom b5.
Bilan energetic pentru acidul palmitic:
7ATP/ciclu 7x7 = 49ATP + 1= 50 ATP

c) Biosinteza trigliceridelor
Trigliceridele sau triacilglicerolii sunt lipidele cele mai abundente din natur. Sunt componentele
principale ale grsimilor de rezerv din esuturi i ale grsimilor din lapte. Acilglicerolii sunt esteri
ai glicerolului cu acizi grai, i pot fi mono, di- sau tri-acilgliceroli.
1 Trigliceridele constituie o surs major de energie pentru organism .
2.Triacilglicerolii (trigliceridele) sunt compui hidrofobi, nepolari. Nefiind implicai n procese
osmotice, pot fi depozitai n cantiti foarte mari n celule. Trigliceridele din esutul adipos uman
cuprind urmtorii acizi grai: acid oleic, acid palmitic, acid linoleic, acid palmitoleic, acid stearic.
Acizii grai sunt transformai n triacilgliceroli pentru a fi transportai ntre esuturi i pentru a fi
depozitai ca surs de energie metabolic. O mare proporie din trigliceride sunt depozitate n
esutului adipos .
1 Lipoliza presupune hidroliza trigliceridelor la glicerol i acizi grai, care trec n snge. Acizii
grai sunt utilizai de toate esuturile, cu excepia creierului, pentru producerea de energie sau ca
surs de atomi de carbon pentru biosinteza lipidelor. Glicerolul este utilizat de ficat ca surs pentru
sinteza de glucoz. Hidroliza trigliceridelor se face de ctre trei tipuri de enzime, i anume:
lipaza pancreatic (digestiv), lipoprotein lipaza (din snge) i lipaza hormonsensibil (din
esutul adipos).
1 Angajarea lipidelor n direcia sintezei sau degradrii trigliceridelor depinde de energia
metabolic necesar a organismului. n organismul uman exist dou ci pentru sinteza
trigliceridelor care difer prin natura precursorului n structura cruia intr glicerolul: calea
monoacilglicerolului i calea glicerol-3-fosfatului.
- Calea monoacilglicerolului funcioneaz n enterocite, i reprezint calea rapid i economic de
resintez a trigliceridelor din produii de digestie, absorbii din intestin. Triacilglicerolii sintetizai
sunt nglobai n chilomicroni, care prin sistemul limfatic trec n snge.
- Calea de esterificare a glicerol-3-fosfatului este calea de sintez a trigliceridelor n aproape toate
celelalte esuturi al organismului.
73
- Sinteza triacilglicerolilor n ficat i n esutul adipos joac un rol important n economia energetic
a organismului.
-Capacitatea ficatului de a sintetiza triacilgliceroli este mare. Acizii grai ncorporai n
triacilglicerolii din ficat provin din sinteza de novo din glucoz (ficatul fiind principalul organ de
conversie al glucidelor n acizi grai) sau din plasm prin captare din fraciunea de acizi grai liberi.
- n ficat, dup sintez, trigliceridele sunt ncorporate mpreun cu alte lipide i proteine n VLDL i
apoi secretate n plasm, fiind surs de acizi grai pentru esuturile extrahepatice.
Sinteza triacilglicerolilor n esutul adipos reprezint modalitatea de stocare a excesului caloric,
lipidic, sau glucidic al organismului. n condiiile unui exces caloric, att sub form de lipide ct i
de glucide este favorizat sinteza trigliceridelor i depozitarea acestora n esutul adipos.
- Grsimile sunt utilizate ca materiale energetice de ctre majoritatea esuturilor. Acizii grai sunt
ari preferenial de miocard, muchi scheletici, rinichi. Acizii grai depozitai ca triacilgliceroli
reprezint 90% din greutatea triacilglicerolilor. Trigliceridele depozitate n esutul adipos sufer
continuu procesele de lipoliz i reesterificare. Rezultatul acestor dou procese, care implic
substraturi i enzime diferite, determin cantitatea de acizi grai liberi din esutul
adipos i n final, nivelul acizilor grai liberi, circulani, din plasm.
- Trigliceridele constituie o surs major de energie pentru organism. Nivelul seric al
trigliceridelor este evaluat ca parte a profilului lipidic. Acest panel include
colesterolul total, trigliceridele i lipoproteinele HDL i LDL.3
Se produce n general ncepnd de la fosfoglicerol sau mono i di gliceride i din
acizi activai sub form de tioesteri.( acil Co A). Procesul este endergonic i are loc
n prezena lipazelor i a cofactorilor: ATP, Mn2+, Mg2+, O2.
CH2OH CH2 - O - CO -R
lipaza
CHOH + R-Co SCoA CH - O - CO - R1
CH2O-P CH2 - O - P
Fosfoglicerol Acid fosfatidic

CH2 - O - CO - R CH2 - O - CO -
R

fosfataza CH - O - CO - R1 R2 - Co SCo A CH - O - CO -
RI
CH2 - OH -HSCoA CH2 - O - CO -
R2
Diglicerida Triglicerida
Lipidele din plante provin in cea mai mare parte din glucide. n cursul dezvoltrii
plantei, n timp ce scade coninutul de glucide ,creste cel de lipide.
ATP, Mg2+, Mn2+
5C6H12O6 + O2------------------>C18H36O2 + 12CO2 + 2H2O - 946 Kcal
Energia necesara provine din degradarea glucidelor. Glucidele furnizeaz aldehida 3
fosfoglicerica, dihidroxiacetona i energie; sursa principala este reprezentata de
glucoz i fructoz.
Glucidele se pot forma n cantiti mici i din proteide, respectiv aminoacizi

Digestia absorbia i transportul lipidelor

74
 Trigliceridele/graimile propriu-zise sunt principalele componente din raia
alimentar. La acestea se adauga colesterolul. Vitaminele liposolubile sunt dizolvate
n graimi, iar prezena grsimilor este indispensabil n dieta(dispersare,
solubilizare, hidroloza grsimilor).
Lipaza lingual secretat de glandele Ebner situate pe faa dorsal a limbii fr
importan la om i lipaza gastric foarte important la om iniiaz
digestia lipidelor.
Aceste enzime hidrolizeaz cataliza trigliceridelor ce conin resturi de acizi grai
saturai cu o caten scurt i acizi grai nesaturai a acizi grai liberi i 1,2-diacil
glicerol.
Substratul ideal pare a fi constituit din lapte ce conine resturi de acizi grai cu
catena scurt i medie, legturi n poziia 3 a glicerolului. Enzimele sunt inactivate la
PH-ul mic. Dup mese sunt activate i datorit aciunii tampon a proteinelor
alimentar, datorit timplui de reacie 2-4 ore, 30% din trigliceride sunt digerate.
Acizii grai cu caten scurt i medie in urma hidrolizei sunt abosrbii din
peretele stomacal i trec i vena port, iar restul trec n intestin:(lipidele alimentare,
vin n contact cu bila care conine cantiti mari de sruri biliare i lecitine, ce
disperseaz graimea sub form unei solutii coloidale asupra careia acioneaz
hidrolazele pancreatice:
1) lipaza: specific pentru legturi de tip ester 1-3 a trigliceridelor, i din hidroliz
2 acizi grai liberi i un monoacid glicerat de tipul 2-monoacilglicerol;
2) fosfolipaze(A2) are specificate carboxiesterazica i acioneaz asupra lecitinelor
cu obinere de izolecitine i un acid gras liber.
Fosfolipaza A2 necesit cationi de Ca. Este activat de colipaza(proteina prezent n
secreia pancreatic). Ambele sunt secretate ca precursori. Izolecitinele au
proprietatea tensioactive puternice i contribuie la solubilizarea proteinelor n
intestin.
Sub influena srurilor biliare, alturi de grsimile emulsionate, apar i acizi grai
saponificai. Acizii grai i glicerina, trec, liberi sau reesterificai, prin pereii
intestinului subire, n limf i n snge, n urma procesului de absorbie.

Soarta lipidelor n organismul omului

La nivelul organismului uman, lipidele joac rol energetic, funcional
i de constituie.
Dup absorbie, lipidele urmeaz mai multe ci, care se pot intersecta:
- se depoziteaz n esutul adipos, ca substane de rezerv, sub form
de trigliceride;
- se stocheaz temporar n ficat;
- n urma unor reacii, intr n structura unor substane complexe
(lipoproteine), unele dintre ele rmnnd n circulaia sanguin;
- se oxideaz n esuturi, pn la dioxid de carbon i ap, cu eliberare
de energie (1 g de lipide poate elibera 9,3 kcal);
Grsimile din organism, se afl sub form de: trigliceride,
fosfolipide, colesterol i acizi grai liberi.
75
 Metabolismul lipidelor este sub control endocrin, desfurndu-se
cu participarea hormonilor anterohipofizari, tiroidieni, pancreatici,
suprarenali. Totodat, n procesul metabolic al grsimilor, intervine
activ i leptina, hormon specific esutului adipos. Pe lng sistemul
endocrin, n reglarea metabolismului lipidelor, mai particip i sistemul
nervos.
Procesul de desfacere a fraciunilor lipidelor, poart denumirea
de lipoliz. Lipoliza se desfoar, dup cum am artat mai sus, la
nivelul tubului digestiv, dar continu i la nivelul esuturilor,
realizndu-se sub cataliza enzimelor numite lipaze. Insulina intervine
n mod indirect n metabolismul lipidelor, n special prin efectul
inhibant exercitat asupra lipazelor, frnnd astfel lipoliza i oxidarea
lipidelor.
Prin activitatea insulinei, dup o mas bogat n glucide, va fi
favorizat arderea glucozei, n timp ce arderea lipidelor va fi inhibat.
Alcoolul, alturi de carbohidrai, inhib de asemenea oxidarea
lipidelor. n sens contrar, o mas bogat n grsimi, va avea o aciune
inhibant asupra insulinei, fr ns ca metabolismul lipidic s se
intensifice, deoarece lipidele n exces, frneaz activitatea tiroidei.
Hidroliza enzimatic a lipidelor ncepe prin desprirea gliceridelor n
componentele sale (acizi grai i glicerin). Glicerina se fosforileaz,
trecnd n aldehid fosfogliceric, respectiv fosfohidroxiaceton, dup
care poate intra n ciclul lui Krebs pentru a se oxida cu degajarea de
energie sau poate s serveasc ca baz pentru sinteza de glucide.
n ceea ce privete catabolizarea (dezasimilaia) acizilor grai,
procesul presupune scurtarea lanului carbonic, cu cte 2 atomi de
carbon (betaoxidare), pn n stadiul de acid acetil acetic. Acidul
acetil acetic poate intra n ciclul lui Krebs, oxidndu-se pn la bioxid
de carbon i ap, cu eliberare de energie, sau poate servi la sinteza de
noi acizi grai, care se depun, cel mai mult, n esutul adipos.
Metabolismul lipidelor degaj mult energie (9,3 kcal/g).
n catabolizarea defectuoas a acizilor grai se acumuleaz peste
limitele normale; corpi cetonici i colesterol.
Este important s se neleag c n dezasimilaia energetic, prioritatea
metabolic este acordat glucidelor, care se oxideaz n totalitate pe
parcursul a 24 de ore, deoarece capacitatea de stocare a glicogenului
este limitat. n aceste condiii, lipidele, dac nu exist nevoi energetice
imediate, se vor depozita n esutul adipos. Aceasta nsemn c pn nu
se ard toate glucidele, lipidele nu vor fi utilizate, ci vor fi bgate n
depozitele adipoase.
Singurele substane care ngra n mod direct sunt lipidele exogene,
toi ceilali compui cunoscui ca aductori de kilograme n plus,
acionnd pe cale indirect. S-a demonstrat n vivo c neogeneza
lipidelor (formarea grsimilor din ali compui) n organismul omului,
este cu mult mai mic dect se credea pn nu demult. Dr. Emil
76
 Rdulescu arat c n cazul unei diete bogate n carbohidrai, lipogeneza
hepatic de acizi grai, nu depete 5-10 g pe zi. n ceea ce
privete protidele, formarea grsimilor pe baza lor este neglijabil. Deci,
este fals s se cread c glucidele, care ptrund n organism, se
transform n grsimi, dar este adevrat faptul c, sub influena
carbohidrailor, lipidele din hran se ncorporeaz cu mare uurin,
uneori n totalitate, n esuturile adipoase. Mai mult, din metabolismul
glucidelor, rezult substana numit glicerofosfat. Glicerofosfatul
esterific acizi grai liberi din snge, depunndu-i sub form de
trigliceride n esuturile adipoase. Totui, o anumit cantitate de glucoz,
substan oxidant metabolic, este necesar pentru a iniia arderea corect
a grsimilor (beta-oxidare), n alte condiii, formndu-se corpii cetonici. Dar trebuie,
n ceea ce privete glucoza, atunci cnd se urmrete scderea n greutate, s se
ndeplineasc 3 condiii:

- s provin din categoria glucidelor cu absorbie mai lent,

- s nu ajung n organism n cantitate prea mare,
- s nu se administreze mpreun cu lipidele.

13.2. Catabolismul trigliceridelor

Prima etap n degradarea grsimilor este cea hidrolitic (cu formare de acizi grai i glicerol) i
are loc n citoplasm. Glicerolul (format n cantiti mici din grsimi) este metabolizat n continuare
prin reaciile finale ale glicolizei, , urmat de ciclul Krebs.
Etapa final de catabolizare a acizilor grai cu caten lung (oxidarea sau etapa de ardere celular
cu formare de CO2, H2O i generare de energie sub forma de ATP), are loc numai n mitocondrii
(uzinele energetice ale celulei). Acizii grai cu caten lung au o capacitate limit de a traversa
sistemul de endomembrane i de a ajunge din citoplasm (unde se formeaz) n mitocondriom unde
se metabolizeaz).
Pentru o metabolizare total a grsimilor este necesar parcurgerea celor 2 etape, cea iniial, de
hidroliz citoplasmatic, i cea final, de oxidare mitocondrial.
Pentru a se cupla cele 2 etape catabolice este necesar un purttor (o molecula cru, un mijloc de
transport molecular care s preia acizii grai din citoplasm s-i duc n interiorul mitocondrionului.
Molecula purttor este L-carnitina care preia gruparea acil (rest de acid gras) de pe acil- coenzima
A (forma coenzima A (forma activ a acidului, sub care apare n citoplasm) formnd acil-
carnitina.
Acil-carnitina trece prin membranele mitocondriei, cu ajutorul unui sistem de transport specific i al
unei enzime numite translocaz.
n ultima etap a procesului de intrare n mitocondrion, gruparea acil este transferat de la carnitin
la coenzima A mitocondrial, reformndu-se acil-coenzima A.
Carnitina eliberat se ntoarce n citoplasm, fiind disponibil pentru transferul altor resturi de acid
gras. Carnitina are deci o aciune de biocatalizator, la sfritul ciclului de reacii metabolice
regsindu-se neschimbat.
Arderea grsimilor se declaneaz n celule numai atunci cnd nu este disponibil glucoza la
nivel tisular.
Colesterolul alimentar este n cea mai mare parte eterificat i este hidrolizat de sterol-ester
hidrolaza pancreatic la colesterol liber.
Fosfolipidele alimentare sunt digerate de fosfolipaza A 2 pancreatic, la acizi grai i lizo-
fosfolipide. n lumenul intestinal produii de digestie ai lipidelor formeaz mpreun cu srurile
biliare micele, agregate cilindrice cu un coninut lipidic diferit:
- n zona central hidrofob conin n general acizi grai, monogliceride i colesterol;
- n zona periferic conin srurile biliare.
77
Rolul miceliilor este de a solubiliza lipidele i de a asigura transportul lor n enterocite.

13.3 Catabolismul gliceridelor

a. Catabolismul glicerolului
b. Catabolismul acizilor grai
1. Catabolismul gliceridelor
Acest proces incepe prin degradarea hidrolitic la acizi grai i glicerol sub aciunea
lipazelor. Activitatea lipazelor se intensifica n perioadele de germinaie a semintelor, tuberculilor,
bulbilor.
Glicerolul i acizii grai se degradeaza n continuare , transformndu-se in CO2 i H2O.
Procesul este exergonic degajnd 9 Kcal/ mol.
Catabolismul se poate realiza treptat, rezultand produse intermediare, se produce nu numai n
organele de depozit ci i n frunze. Hidroliza graimilor se intenific i n perioadele de imbrnire
sau vtmare a esuturilor vegetale.
2. a) Catabolismul glicerolului
Are loc prin activarea glicerolului sub form de fosfoglicerol, sub actiunea fosfokinazei
i ATP. Sub aciunea fosfoglicerol aldehid dehidrogenazei din citoplasm, ce conine NAD+, acesta
trece n aldehida 3-fosfogliceric care se poate degrada:
- prin ciclul lui Krebs la CO2 i H2O;
- cu triozoizomeraza pn la ester 1,6-fructozo difosforic apoi la glucoz.
- Dehidrogenarea fosfoglicerolului se poate rerealiza prin actiunea NAD+ sau FAD.
Glicerolul rezultat din hidroliza gliceridelor poate intra n ciclul lui Krebs sau poate intra n ciclul
de biointez a glucidelor n funcie de sistemul enzimatic.
2. b) Catabolismul acizilor grai
Acizii grai reprezinta cea mai activa form metabolic a lipidelor. Catabolismul lor este un
proces exergonic care se realizeaz la nivelul mitocondriilor dar i extramitocondrial. Degradarea
are loc pn la CO2 , H2O i energie, lipidele fiind considerate cea mai concentrat form de
rezerv a energiei.
Catabolismul acizilor grai se realizeaza pe doua cai:
a) oxidarea acizilor grai;
b) oxidarea acizilor grai.
a) oxidarea acizilor grai;
Conform teoriei oxidarii catena liniara a acidului gras este degradat treptat , prin ruperea
succesiv a unui fragment format din doi atomi de carbon ( acetil coenzima A).
Scindarea este oxidativ i se petrece la atomul faa de gruparea COOH. Procesul are loc n
prezena de enzime: HSCoA, ATP, NAD+, NADP+,
Mn2+, Mg2+. Rolul HSCoA n metabolismul acizilor grai este imilar cu al acidului fosforic n
metabolismul glucidelor.
Etapa I - dehidrogenarea acil CoA la poziia i i rezulta acid gras nesaturat, n prezena de
FAD.
Etapa aIIa adiia apei la enoil CoA i rezult hidroxiacil CoA;
Etapa a IIIa - prin dehidrogenare rezult cetoacil CoA;
Etapa a IV a - se rupe un fragment de doi atomi de carbon i rezulta acetil CoA i un nou acid gras
activat cu doi atomi de carbon mai putin.
Procesul este spiralic ca i la biointeza.
b) oxidarea acizilor grai
Se produce la acizii grai saturati cu catena mare sau la unii acizi cu catena ramificat. Exist
dou mecanisme de actiune:
- n semine n stare germinat:
peroxidaza
acid gras + H2O2 aldehida + CO2 + H2O
- in frunze:

78
- oxidaza -CO2 H2O + NAD+
acid gras hidroxiacid aldehida
O2 -H2
acid gras cu un atom de carbon mai puin.
NAD+, ATP
Sau cetoacid acid gras cu un atom + CO2
acid ascorbic de carbon mai puin.

Tema 13.4. Catabolismul gliceridelor (oxidarea glicerolului, a acizilor grai saturai, cu numr
par i impar de atomi de carbon i acizilor grai nesaturai)

Importana biologic a lipidelor const n faptul c ele servesc ca substane energetice de rezerv
ale organismului. Substanele nutritive consumate (glucide, protide) se transform n mare parte n
lipide i sunt depozitate n esuturile corespunztoare.
Catabolismul gliceridelor
Acest proces ncepe prin degradarea hidrolitic la acizi grai i glicerol sub aciunea
lipazelor. Activitatea lipazelor se intensific n perioadele de germinaie a seminelor, tuberculilor,
bulbilor.
Glicerolul i acizii grai se degradeaz n continuare , transformndu-se n CO2 i H2O.
Procesul este exergonic degajnd 9 Kcal/ mol.
Catabolismul se poate realiza treptat, rezultnd produse intermediare, se produce nu numai n
organele de depozit, ci i n frunze. Hidroliza grsimilor se intensific i n perioadele de
mbatranire sau vtamare a esuturilor vegetale.
2. a) Catabolismul glicerolului

79
 Are loc prin activarea glicerolului sub form de fosfoglicerol, sub aciunea fosfokinazei
i ATP. Sub aciunea fosfoglicerol aldehid dehidrogenazei din citoplasma, ce conine NAD+,
acesta trece n aldehida 3 fosfogliceric care se poate degrada:
- prin ciclul lui Krebs la CO2 i H2O;
-Fosfodihidroxi-ester fructozo1, 6 difosforic
- Dehidrogenarea fosfoglicerolului se poate rerealiza prin aciunea NAD+ sau FAD.
-Glicerolul rezultat din hidroliza gliceridelor poate intra n ciclul lui Krebs sau poate intra n ciclul
de biosintez a glucidelor n funcie de sistemul enzimatic.

2. b) Catabolismul acizilor grai

- Acizii grai reprezint cea mai activ form metabolica a lipidelor. Catabolismul lor este un
proces exergonic care se realizeaz la nivelul mitocondriilor, dar i extramitocondrial. Degradarea
are loc pan la CO2 , H2O i energie, lipidele fiind considerate cea mai concentrat form de
rezerv a energiei.
Catabolismul acizilor grai se realizeaza pe doua cai:
a) oxidarea acizilor grai;
b) oxidarea acizilor grai.

a) oxidarea acizilor grai;

Conform teoriei oxidrii catena liniar a acidului gras este degradat treptat , prin ruperea
succesiv a unui fragment format din doi atomi de carbon ( acetil coenzima A).
Scindarea este oxidativ i se petrece la atomul fa de gruparea COOH. Procesul are loc n
prezen de enzime: HSCoA, ATP, NAD+, NADP+, Mn2+, Mg2+. Rolul HSCoA n metabolismul
acizilor grai este similar cu al acidului fosforic n metabolismul glucidelor.
Etapa I - dehidrogenarea acil CoA la pozitia i i rezult acid gras nesaturat, n prezenta de
FAD.
Etapa a IIa adiia apei la enoil CoA i rezult hidroxiacil CoA;
Etapa a IIIa - prin dehidrogenare rezult cetoacil CoA;
Etapa a IV a - se rupe un fragment de doi atomi de carbon i rezult acetil CoA i un nou acid gras
activat cu doi atomi de carbon mai puin.
Procesul este spiralic ca i la biosinteza.

b) oxidarea acizilor grai

Se produce la acizii grai saturai cu catena mare sau la unii acizi cu catena ramificat.
Exista doua mecanisme de aciune:
- n semine n stare germinat:peroxidaza H2O2 + acid gras aldehid + CO2 + H2O
n frunze: oxidaza-CO2 + H2O + acid gras hidroxiacid aldehid O2 -H2 acid gras cu
un atom de carbon mai puin. NAD+, ATP
Sau cetoacid acid gras + CO2 acid ascorbic cu un atom de carbon mai puin.

Varianta a II-a a Temei 13 . Metabolismul lipidelor

13 .1 Catabolismul lipidelor
Importana biologic a lipidelor const n faptul c ele servesc ca substane energetice de rezev
ale organismuli.
Substanel nutritive consumate (glucide, protide) se transform n mare parte n lipide i sunt
depozitate n esuturile corespunztoare.
Digestia lipidelor
- Digestia trigliceridelor este realizat de lipaze.
- Cea mai mare parte a digestiei trigliceridelor are loc n duoden, sub aciunea lipazei pancreatice,
dar i n intestin, sub aciunea lipazei intestinale.
- Activitatea lipazei pancreatice se desfoar la un pH-ului alcain.

80
- Lipidele emulsificate n prealibil de ctre sruiile biliare sunt hidrolizate de ctre lipaz la acizi
grai liberi i monogliceride.
-Dei nu conin enzime (cu excepia fosfatazei alcaine), bila scindeaz molecule lipidelor, datorit
srurilor biliare.
- Bila realizeaz emulsionarea grsimilor (fracionarea lor n picturi foarte fine), favoriznd n
acelai timp, activitatea lipazelor intestinale, precum i absorbia acizilor grai.
-Dup emulsionare, grsimile sunt mult mai uor de hidrolizat de ctre lipaze.
-Lipaza pancreatic, activat de ctre srurile biliare, Ca2+ i aminoacizi, realizeaz desfacerea
lipidelor n acizi grai i glicerol (glicerin).
n urma hidrolize se formeaz miceli minuscule, sub forma unor picturi extrem de fine, mult mai
mic dect cel rezulta e din emulsionarea biliar.
- Sub influena srurilor biliare, alturi de grsim ile mulsionate, apar i acizi grai saponificai.
- Acizii grai, glicerina, trec, liberi sau reesterificai, prin pereii intestinului subire, n limf i n
snge, n urma procesului de absorbie.

- Colesterolul alimentar este n cea mai mare parte esterificat i este hidrolizat de sterol-ester
hidrolaza pancreatic la colesterol liber.
- Fosfolipidele alimentare sunt digerate de fosfolipaz A2 pancreatic, la acizi grai lizo-fosfolipide.
- n lumenul intestinal, produii de digestie ai lipidelor formeaz mpreun cu sruiile bili are
miceli, agregate cilindrice cu un coninut lipidic diferit: n zona central hidrofib conin n general
acizi grai,monogliceride i colesterol. n zona periferic conin srurile biliare.
Catabolismul gliceridelor (oxidarea glicerolului, a acizilor grai saturai, cu numr par i
impar de atomi de carbon i acizilor grai nesaturai)
-Prima etap n degradarea grsimilor este cea hidrolitic (cu formare de acizi grai i glicerol) i
are loc n citoplasm.
- Glicerolul (format n cantiti mici din grsimi) este metabolizat n continuare prin reaciile
finale ale glicolizei, urmat de ciclul Krebs.
Etapa final de catabolizare a acizilor grai cu caten lung (-oxidarea sau etapa de ardere celular,
cu formare de CO2 ,H2O i generare de energie sub forma de ATP), are loc numai n mitocondrii
(uzinele energetice ale celulei).

81
- Acizii grai cu caten lung au o capacitate limitat de a traversa sistemul de endomembrane i
de a ajunge din citoplasm (unde se formeaz) n mitocondriom (unde se metabolizeaz).
- Pentru o metabolizare total a grsimilor este necesar parcurgerea celor 2 etape, cea iniial, de
hidroliz citoplasmatic, i cea final, de oxidare mitocondrial.
- Pentru a se cupla cel 2 etape cat bolice ste necesar un purttor (o molecula caru, un mijloc de
transport molecular) care s preia iciz grai din citoplasm i s-i duc n interio ul
mitocondriomului.
- Molecula purttor este L-carnitea care preia gruparea cil (rest de acid gras) de pe acil- enzima A
(forma activ a cidului, sub care apare n citoplasm), formnd acil-carnitea.
- Acil- carnitea trece prin membranele mitocondriei, cu ajutorul unui sistem de transport specific al
unei enzime numite translocaz.
- n ultima etap a procesului de intrare n mitocondrion, gruparea cil este transferat de la carnit
la coenzima A mitocondrial, reformndu-se acil- oenzima A.
- Carnitea eliberat se ntoarce n citoplasm, fiind disponibil pentru transferul altor resturi de acid
gras.
- Carnitea are deci o aciune de biocatalizator, la sfritul ciclului de reacii metabolice
regsindu-se neschimbat.
- Arderea grsimilor se declaneaz n celule numai atunci cnd nu este disponibil glucoza la
nivel tisular.

- Rolul micelilor este de a solubiliza lipidele i de a sigura transportul lor n enterocite.

Metabolismul
triacilglicerolilor(TG)
Hidroliza TG
Trigliceridele
reprezinta forma de
depozitare a excesului
caloric din organism.
Trigliceridele se gsesc
n cantiti apreciabile n
esutul adipos.
Degradarea tisular a
trigliceridelor are loc
prin hidroliza treptat,
conducnd n
final acizi grai liberi
i glicerol.
Fiecare etap este
catalizat de carte o enzim specific din grup.
Prima etapa care este catalizat de triacilglicerol-lipaza este etapa cea mai lent i este
determinant de viteza de reacie. Triacilglicerol-lipaza este cea mai importanta enzima din
esutul adipos i este responsabil de mobilizarea rezervelor lipidice din organism prin lipoliz.
Energia este controlat hormonal(lipaza hormon sensibil). Acest enzim este activat prin
fosforilarea proceselor ce are loc prin AMP ciclic. Activarea acestei enzime crete sub aciunea
catecolaminelor i glucogonului: hormonii lipolitici.
Insulina si prostaglandinele au efect inhibitor.
Glicerolulhidroliza triacilglicerolilor difuzeaz n plasm fapt ce duce la imposibilitatea utilizrii
lui de ctre esutul adipos care nu dispune de glicerolkinaz pentru fosforilare. Glicerolul este
captat de ficat, unde va servi ca substrat pentru gluconeogeneza(biosinteza de glucoz)
Acizii grai prin hidroliza trigliceridelor sunt utilizai n urma cii metabolice la:
1) ardere cu eliberare de ATP necesar funciei adipocitare;
82
2) sinteza de triacilglicerol prin activarea lui la acil-CoA, proces care este dependent de
glicemie i insulinemie;
3) eliberarea lor n plasm, unde funcioneaz, ca substane energogenice pentru muchii
scheletici, miocard, rinichi.
Valoarea acizilor grai n plasm crete n diabet, stres, datorit intensificrii lipolizei. Ficatul
epureaz plasma de acizi grai , si prin transferul lor n corpii cetonici (TAG)

Pentru o metabolizare total a grsimilor este necesar parcurgerea celor 2 etape, cea iniial, de
hidroliz citoplasmatic, i cea final, de oxidare mitocondrial.

Pentru a se cupla cele 2 etape catabolice este necesar un purttor (o molecula cru, un mijloc de
transport molecular care s preia acizii grai din citoplasm s-i duc n interiorul mitocondrionului.
Molecula purttor este L-carnitina care preia gruparea acil (rest de acid gras) de pe acil- coenzima
A (forma coenzima A (forma activ a acidului, sub care apare n citoplasm) formnd acil-
carnitina.
Acil-carnitina trece prin membranele mitocondriei, cu ajutorul unui sistem de transport specific i al
unei enzime numite translocaz.
n ultima etap a procesului de intrare n mitocondrion, gruparea acil este transferat de la carnitin
la coenzima A mitocondrial, reformndu-se acil-coenzima A.
Efectul energetic este foarte ridicat comparativ cu glucoz
DG=-347 Kcal/ 100 gr glucoz
DG=-914 Kcal/ 100 gr acid palmitic.
Se ia ca exemplu acidul palmitic deoarece este cel mai abundent acid gras din organism.

Tema 13.2. Anabolismul gliceridelor (biosinteza glicerolului, a acizilor grai i a gliceridelor).

Sinteza lipidelor se face de la acetil Co.A n prezenta ATP-ului, care reprezint legtura esenial
ntre metabolismul lipidelor i glucidelor. Lipogeneza este condiionat de aportul glucidic. ntr-un
regim alimentar hiperglucidic, esutul adipos este bine reprezentat de acizii grai formai i se unesc
cu glicerolul rezultnd grsimile neutre care n esutul adipos au rol de termoreglare.
Glicerolul este un complex al acil i fosfoacil glicerolului.,
-Se formeaz prin hidroliza tisular a triglicerolilor i intra n fluxul metabolic sub forma
fosforilat .
Reacia de fosforilare are loc sub aciune glicerolkinazei(activa in ficat). Este prezent i n alte
tesuturi, dar lipsete n adipocit i n muchi. Reacia de fosforilare este dependet de ATP.
- Alta sursa de glicerol-3-P este de la dehidroxiaceton-P care provine de la glicoliz glucozei.
n esutul adipos, singura surs de glicerol-3-P necesar lipogenezei este glucoz, fapt ce
demonstreaz dependea metabolismului lipidic de glucoz i de reglarea insulinic. Glicerol-3-P
poate evolua pe mai multe cai metabolice :
-Sinteza de tri/fosfogliceride;
-gluconeogeneza;
-scop energeric prin transformarea sa n CO2, apa , i energie
Catabolismul lipidic se face prin beta-oxidare din care rezult o mare cantitate de energie
148mol ATP. Oxidarea n continuare n calea ciclului Krebs nu este folosit pentru sinteza
glicogenului.
Biosinteza glicerolului se realizeaz n cantitate mare din aldehida 3-fosfogliceric i din fosfo-
dihidroxi-aceton, care se formeaz n procesul de glicoliz (prin scindarea froctozo-1,6-
difosfatului). n biosinteza gliceridelor punctul de plecare este - fosfoglicerolul, carete mult mai
activ dect - fosfoglicerolul.
Biosinteza acizilor grai se realizeaz pe 2 ci diferite: o cale evideeniat la nivel
mitocondrial; alta, localizat n citoplasma celular, calea de importan major.
Trstura esenial a sistemuluii citoplasmatic al biosintezei acizilor grai este dependena lui
total de CO2 sau de HCO3-, de ATP, Mg+2 sau Mn+2, de NADPH + H+ i de biotin.
83
 Punctul de plecare n sinteza acizilor grai la nivel citoplasmatic este acetil-CoA (acetatul
activat), compus care rezult:
- n procesul de degradare oxidativ a acizilor grai;
- din acidul pruvic rezultat n metabolismul glucidelor;
- din aminoacizii glucoformatori.

Tema 13.3. Biosinteza trigliceridelor i digliceridelor

Biosinteza trigliceridelor i digliceridelor are loc n limitele reduse la nivelul celulelor din mucoasa
peretelui intestinal, de unde trrec ulterior n limf.
Procesul necesit prezena ATP i HS-CoA. Pentru biosinteza trigliceridelor este absolut necesar ca
glicerolul, rezultat n urma absorbiei intestinale, s fie fosforilat sub fform de-glicerofosfat.
Formarea glicerofosfatului este condiionat la nivelul esuturilor i celulelor n prezena unei
enzime, glicerokinaz, care a fost identificat n ficat, inim i este absent n esutul adipos i
mucoasa intestinal.
Biosinteza acizilor grai pe cale mitocondriala
Acesta cale consta n ataarea la o caten preexistent de acid gras a unor resturi acetil,
realizndu-se o lungire de 2 atomi de C a acidului preexistent.
Procedeul urmeaza calea invers a oxidrii:

Capitolul 14.

Tema 14. Metabolismul protidelor

Biosinteza aminoacizilor prin diferite ci: aminare reductiv, transaminare, etc.

Tema 14.1. Metabolismul intermediar al proteinelor

- Proteinele se transforma in aminoacizi, se absorb la nivel digestiv si ajung prin vena porta la ficat
apoi n circulaia sistemic de unde sunt extrai i folosi de toate esuturile n scop plastic. n ficat
i alte esuturi, aminoacizii pot urma 2 cai metabolice:
- sinteze de proteine,
- degradarea catabolic.
Aceste 2 procese au loc permanent, iar viteza de rennoire a atacului proteic circulant la adult
necesit 2 sptmni.
1. Procesul de sinteza - const n formarea aminoacizilor. O parte din aminoacizi pot fi sintetizai
n organism. Acestia sunt aminoacizi neesentiali.
Aminoacizii eseniali nu pot fi sintetizati, singura sursa fiind cea alimentar.
acetia sunt: Triptofanul, Histidina, Treonina, Lizina, Metionina, Arginina, Valina,
Fenilanina, Leucina, Izolencina.
Formarea aminoacizilor n viitoarele proteine este prescris sub forma codului genetic de ctre
moleculele A.R.N. sediul sintezei fiind in reticulul citoplasmatic i in ribozomi.

2. Degradarea proteinelor - se realizeaz intr-o prim faz prin hidroliz cu formarea de

aminoacizi ce urmeaz ci diferite de decarboxilare sau transaminare, procese n care se formeaz
aminoacizi, care fiind toxic este transformat de ficat n uree. Etapa final de degradare a
aminoacizilor este tot CO2, H2O i energie i se face n ciclul Krebs.
-Dintre aminoacizii cunoscui numai un numr de 20 prezint importan pentru biosinteza
proteinelor.
-Unele forme de viat (plante, bacterii) sunt capabile
s sintetizeze toi cei 20 de aminoacizi din
intermediari amfibolici.

84
 - Altele, inclusiv mamiferele i n special omul, pot sintetiza numai o parte din ei, care au fost
numii aminoacizi neeseniali.
-Cei ce nu pot fi sintetizai i care trebuie suplimentai prin diet sunt numii aminoacizi eseniali.

Metabolizarea i sinteza aminoacizilor pe nelesul tuturor

Metabolizarea aminoacizilor este un proces complex, care implic un numr mare de metabolii,
care se gsesc n proteine dietetice, vitamine, suplimente nutritive i suplimente de sntate. Prin
procesul de metabolizare a aminoacizilor, alimentele bogate n proteine sunt folosite de organism
pentru a face proteine pentru esuturi, iar proteinele esutului sunt defalcate pentru a produce
energie. Aminoacizii sunt cunoscui pentru faptul c ofer combustibilul necesar pentru creterea i
funcionarea sntoas a esuturilor i organelor corpului.
Procesul de metabolizare a aminoacizilor
Metabolizarea aminoacizilor se desfoar n mai multe etape. n primul rnd, proteinele alimentare
sunt defalcate n aminoacizi. (Moleculele de proteine sunt constituite din lanturi lungi de aminoacizi
legai unul de altul prin legturi peptidice (amidice.
Alimentele bogate in proteine sunt digerate i transformate n aminoacizi n tractul gastro-
intestinal, ncepnd din stomac i terminnd n duodenul intestinului subire. Aminoacizii sunt apoi
absorbii, iar aminoacizii absorbii sunt transportai n sngele aflt n circulaie la ficat, de unde
sunt distribuii n diferite esuturi.
Aminoacizii care sunt n plus fa de nevoile organismului sunt convertii de ctre enzimele
hepatice n acizi cetonici i uree. Acizii cetonici pot fi utilizai ca surse de energie, transformai
n glucoz, sau stocai sub form de grsime. Ureea este eliminat din organism prin sudoare i
urin.

Aminoacizi din proteine

Ingestia de proteine trebuie s furnizeze aminoacizi pentru formarea proteinelor din organism.
Aminoacizii din proteine pot fi mprii n dou categorii: nutrienti eseniali i neeseniali. Toti cei
20 de aminoacizi sunt necesari pentru corpurile noastre.
Aminoacizi eseniali sunt:
1. Arginina 2.Histidina 3.Izoleucin 4. Leucing 5. Lizin 6. Metionin 7. Fenilalanin
8.Treonin 9. Triptofan 10 Valin.
Aminoacizi neeseniali sunt:
1.Alanin 2. Aspartat Asparagina 4.Cisteina 5.Glutamatul 6.Glutamina 7. Glicin
8.Prolina 9.Serina 10.Tirozin
Alimente proteice i aminoacizi
Alimentele proteice conin tipuri diferite de aminoacizi. Alimentele proteice care conin toi
aminoacizii esentiali sunt proteine complete. Alimentele proteice care nu conin toi aminoacizii
esentiali sunt incomplete. Atunci cnd dou sau mai multe proteine incomplete sunt combinate, ele
pot forma o protein complet.
Organism are nevoie de aminoacizi Valoarea crora depinde de nivelul de activitate i de greutatea
corporala. Pentru majoritatea oamenilor, consumul a 1 1,5 grame de proteine pe kilogram de
greutate corporal este o cantitate bun. Sportivii necesit mai multe proteine, precum i
carbohidrai i grsimi, deoarece acetia ard mai mult energie nainte, n timpul i dup
antrenamente.
n schema de mai jos este artat pocesul de aminare a aminoacizilor

85
 14.2. Cile generale de degradare a aminoacizilor
Spre deosebire de glucide sau lipide, n organism nu exista rezervoare de proteine. Aminoacizii n
exces, care nu sunt ncorporai n proteine sunt metabolizai sau inglobai n masa metabolic.
Conversia aminonitrogenului/NH3 n uree se face cu o vitez apreciabil prin parcurgerea
etapelor: dezaminarea oxidativ, trans-dezaminarea, transportul NH3 i ciclul ureogenetic.
14.2.1. Dezaminarea oxidativa a -aminoacizilor
Aceast transformare catalizat de glutamat dehidrogenaz (GDH) prezent n mitocondrii este
singura care determin dezaminarea rapid a unui aminoacid, a Glu. Ea are doua etape. Prima este
o reacie de dehidrogenare catalizat de GDH, NAD(P)+-dependent, din care rezulta iminoacidul
glutamic:

HOOC-CH2-CH2-CH(COOH)-NH2 + NAD(P)+-HOOC-CH2-CH2-CH(COOH)=NH + NAD(P)H+

+H+

Figura 2. Trans-dezaminarea, cale de eliminare a aminonitrogenului sub forma de amoniac care

este convertit in uree in ciclul ureogenetic.

GDH este inhibat de GTP i activat de ADP n vitro ceea ce sugereaz aciunea acestor
nucleotide n vivo unde enzima funcioneaz aproape de echilibru .A doua reacie este hidroliza -
iminoacidului rezultnd acidul -cetoglutaric (-CG):
HOOC-CH2-CH2-CH(COOH)=NH + H2O HOOC-CH2-CH2-CH(COOH)=O + NH3
Modularea activitii GDH de ADP si GTP se face n funcie de necesiti. Dac un hepatocit
necesit intensificarea ciclului citric, dezaminarea oxidativa este intensificat rezultand -CG care
este un intermediar al ciclului. Prin urmare, dezaminarea oxidativa Glu este o reacie

86
anaplerotic. Pe de alta parte, dac, datorit activitii prea intense a ciclului citric, se acumuleaza
GTP, dezaminarea oxidativa a Glu este inhibat. GG
Datorita etapei 2 secvena celor doua reacii are un bilan energetic defavorabil (GG 30 kJ.mol-1)
ceea ce d.p.d.v. fiziologic este important. Se menine astfel concentraia NH3 rezultat, substana
toxic pentru sistemul nervos central (SNC), la o concentraie mic.
n afara de GDH exist n ficat i rinichi dou enzime nespecifice, L-aminoacid oxidaza i D-
aminoacid oxidaza, cu activitate mic. Reaciile enzimatice catalizate de aceste doua enzime
decurg n dou etape:
-Aminoacid + FAD + H2O -Cetoacid + NH3 + FADH2
FADH2 + O2 FAD + H2O2
Apa oxigenata este rapid degradat de catalaz. Existena D-aminoacid oxidazei este intructva
enigmatic, deoarece D-aminoacizii apar doar n peretele celulelor bacteriene.
Dezaminarea neoxidativa are ca substraturi puini aminoacizi (Ser si His). Reaciile implicate vor
fi tratate mai jos.

14.2.2. Trans-dezaminarea -aminoacizilor

Cuplarea transaminarii catalizat de transaminaze, enzime active n ficat, cord, muschi, cu
dezaminarea oxidativ prin intermediul GDH, asigur dezaminarea rapid a oricrui aminoacid cu
excepia Lys, Thr si Pro (fig. 2).
Cum am aratat in volumul I, transami-nazele transfera gruparea -NH2 de la -amino-acid la -
cetoacid rezultand altaminoacid si alt cetoacid. Multe transaminaze au -cetogluta-
ratul (CG) drept substrat acceptor de grupare amino. Acesta se transforma n Glu. Cele mai
importante transaminaze din aceasta categorie sunt GOT (glutamic-oxalacetic-transaminaza) i
GPT (glutamic-piruvic-transaminaza). Aceste enzime se mai numesc AST (aspartat amino-
transferaza) respectiv ALT (alanin aminotrans-feraza). Energia libera standard de
reacie, G' 0, ceea ce arat c transaminrile sunt reversibile. Mai sunt i alte transaminaze ale
caror substraturi acceptoare de grupare -NH2 sunt OA sau Pyr. Aminoacizii rezultai sunt Asp
respectiv Ala. Prin transaminare se sintetizeaz in organism aminoacizi neesentiali pe seama
aminoacizilor esentiali.
In concluzie, privind figura 2 putem spune c dac aminoacizii captai din alimente nu sunt
utilizai pentru sintez de noi aminoacizi, proteine sau alti compui azotati, Glu este
"canalul" prin care gruparea amino este adus ntr-o stare excretabil, prin dezaminare
oxidativ i apoi ureogenez.

Azotul gruprilor -NH2(aminonitrogenul) din structura aminoacizilor se elimina cel mai adesea
sub form de amoniac, n cursul degradrii acestora. Formarea i conversia amo-niacului n
structuri netoxice constituie metabolismul acestui compus.

Detoxifierea extrahepatic i transportul NH3

NH3 este un toxic puternic, n special pentru SNC. La pH = 7,4 circa 99% din moleculele de
NH3 sunt sub forma de ioni NH4+. Acest ion nu poate strbate membrana mitocondrial datorit
sarcinii electrice care creeaz asa-zisele "forte imagine" care se opun traversrii membranei. Totusi,
cei 1% de NH3 penetreaz cu usurin membrana, iar n mitocondrie transform CG in Glu,
conform reaciei:
CG + NH3 + NAD(P)H + H+ Glu + H2O + NAD(P)+
Reacia este catalizat tot de enzima GDH. Scderea concentraiei CG micsoreaz viteza ciclului
acidului citric (CK) si deci a oxidrii glucozei, sursa unic de energie a neuronilor. Rezultatul
acestei 'descrcri' a CK este spolierea energetic a neuronilor cu consecine neurologice nefaste,
ceea ce explic toxicitatea NH3 la acest nivel. Dac n celulele
creierului sau ale altor tesuturi extrahepatice apare NH3 n cantiti mari el este incorporat rapid n
Glu prin aminarea CG i apoi este incorporat n Glu-NH2 prin reaciile: glutamil fosfat.

1. HOOC-CH2-CH2-CH(COOH)-NH2 + ATP H2O3POCO-CH2-CH2-CH(COOH)-NH2 + H2O

87
2.H2O3POCO-CH2-CH2-CH(COOH)-NH2 + NH3 H2N- CO-CH2-CH2-CH(COOH)-NH2 +H3PO4

Ambele reactii sunt catalizate de glutamil sintetaza. Sarcina net a Glu este -1 la pH-ul fizio-logic,
ceea ce impiedic difuzia acestuia prin membrane. n schimb glutamina, a crei sarcin net este
nul, strbate usor membranele difuznd in sange. Ea este o important forma de transport a
aminonitrogenului (fig. 1). Eficiena ridicat se datoreaz i coninutului ridicat n azot al
glutaminei. Ea depaete de cateva ori concentraia plasmatic a celorlali aminoacizi liberi.
Glutamina ajunge pe cale sanguin la ficat unde sub aciunea glutaminazei elibereaza NH3,
conform reaciei:

H2N- CO-CH2-CH2-CH(COOH)-NH2 + H2O HOOC-CH2-CH2-CH(COOH)-NH2 + NH3

Enzima este prezent in mitocondriile hepatice. Amoniacul va lua calea ciclului ureogenetic alturi
de el fiind detoxifiat i NH3 rezultat prin dezaminarea Glu.
n musculatura scheletic, n condiii de efort intens, exist o mare productie de NH3 din
aminoacizi i de piruvat rezultat din glicoliz. Fiecare din aceti produi trebuie s ajung la ficat,
acest tranzit fiind rezolvat la mamifere printr-un singur ciclu: ciclul glucoza-alanin (Felig-
Malette). n muschi NH3 este detoxifiat prin transformare n Glu care prin transaminare cu Pyr
formeaz Ala. Aceasta este molecula care transporta azotul la ficat unde transaminarea n sens
invers reface Pyr i Glu.
Am vazut c formele de detoxifiere extrahepatic si de transport a NH3 pan la ficat sunt
aminoacizii Glu, Glu-NH2 i Ala. n ficatul animalelor ureotelice este sintetizat forma final de
detoxifiere a NH3 , forma de excretabil care este ureea.

Tema 14.2.4.Catabolizarea catenelor de carbon ale aminoacizilor

Degradarea catenei de carbon a amino-acizilor poate fi abordat cu pierderea

atomului de carbon -carboxilic printr-o reacie de decarboxilare.

Decarboxilarea aminoacizilor
In general decarboxilarea unui aminoacid proteinogen sau neproteinogen monocarboxilic produce
o amin biogen(ptomain) care are importante proprieti biologice. Cateva exemple puse intr-o
reprezentare schematic apar n figura 6.

Figura 6. Decarboxilarea Glu si His.

88
 14.2.4.1. Catabolismul aminoacizilor cu catena ramificata.

Valina i Izoleucina, aminoacizi cu catena ramificat, produc succinil-CoA (fig. 18). Producand
doar succinil-CoA valina este un aminoacid glucoplastic. Izoleucina este un aminoacid mixt
deoarece, ea produce atat succinil-CoA ct i CH3COSCoA din care se sintetizeaz corpi cetonici.
Leucina este aminoacid cetoplastic, deoarece prin catabolizare ea produce numai acetoacetat, corp
cetonic.

Figura 18. Degradarea aminoacizilor cu catena ramificata (schema).

In figura 19 apar detaliat cile de degradare a aminoacizilor cu catena ramificat.

Primele 3 reactii, transaminarea (1), decarboxilarea oxidativa a -cetoacizilor rezultai (2) i
dehidrogenarea FAD-dependent (3) sunt de acelai tip. Mai mult, exist o singura enzim pentru
transaminarea tuturor celor 3 aminoacizi. In ce priveste etapa decarboxilarii oxidative, complexele
enzimatice au structuri similare cu ale complexului Pyr DH folosind TPP, acidul lipoic i FAD
89
drept coenzime ale enzimelor -cetoacid DH, transacilaze i dihidrolipoil DH corespunzatoare. In
plus aceste complexe sunt inactivate, ca i in cazul Pyr DH, prin fosforilare cu ATP de ctre o
protein kinaza. O fosfoprotein fosfataz defosforileaza aceste complexe enzimatice i, prin
concurena celor doua procese (fosforilare-defosforilare), este reglat catabolismul aminoacizilor cu
caten ramificat. Inhibitorii protein kinazei sunt ADP, -cetoacizii produsi, agenti hipolipidemici
(clofibrat, dicloroacetat). Clofibratul este unul din primele medicamente antihipercolesterolemice.
Cel mai puternic inhibitor dintre -cetoacizi este -cetoizocaproatul. In ce priveste dehidrogenarea
FAD-dependent a celor 3 aminoacizi, exist 2 enzime care catalizeaz aceast reacie, ntre care
izovaleril-CoA DH, printr-un mecanism similar dehidrogenrii FAD-dependente a acizilor grai
activai cu coenzima A, n cadrul -oxidarii. In continuare caile de catabolizare ale Ile, Val i Leu
se despart. nainte de a trece la prezentarea cailor de metabolizare a fiecarui aminoacid, este de
mentionat similitudinea unor etape ale acestora.

90
Figura 19. Caile de degradare ale aminoacizilor cu catena ramificat: izoleucina (A), valina (B) si
leucina (C).
Primele 3 reacii ale fiecarei ci utilizeaz enzimele comune: aminoacid cu catena ramificat
aminotransferaza (PLP-dependenta)(1), -cetoacid dehidrogenaza (2) si acil-CoA dehidrogenaza
(3). Degradarea Ile continucu implicarea enzimelor: enoil-CoA hidrataza (4), -hidroxiacil-CoA
dehidrogenaza (5) i acetil-CoA acetil transferaza (6). Degradarea Val implica: enoil-CoA hidrataza
(7), -hidroxiizobutiril-CoA hidrolaza (8), -hidroxiizobutirat dehidrogenaza (9) i metilmalonat
semialdehida dehidrogenaza (10). Degradarea Leu implica: -metilcrotonil-CoA carboxilaza
(biotindependenta) (11),-metilglutaconil-CoA hidrataza(12) i -HMG-CoA-liaza(13).

14.3. Catabolismul proteinelor

Metabolismul proteinelor ocupa un loc central n multitudinea proceselor metabolice caracteristice

lumii vii deoarece nsusi fenomenul vietii este caracterizat prin modul de organizare a substantelor
proteice i rennoirea continu a acestora din substantele chimice existente n mediul nconjurator.
Din aceasta caracteristic principal a viului rezid i importana capital a metabolismului
proteinelor n microorganisme, plante si animale.
Dat fiind faptul c enzimele reprezint o clas special de proteine funcionale, al cror
metabolism este identic cu cel al proteinelor structurale, rezult ca biosinteza proteinelor n celula
vie constituie fundamentul ntregului metabolism al substantelor caracteristic pentru fiecare specie
de microorganisme, plante si animale.
Spre deosebire de microorganisme i plante, organismele animale (inclusiv omul) sunt dependente
de un aport permanent de proteine exogene. Utilizarea acestora debuteaz prin degradarea lor
hidrolitic sub aciunea unor enzime specifice numite proteinaze. Acest proces se desfoara de
asemenea i n organismele vegetale i microorganisme unde asigur realizarea procesului complex
de rennoire continu a proteinelor aa cum se ntmpl cu toate celelalte componente structurale
ale lumii vii.
Toate proteinele din organismele vii se rennoiesc prin biosintez din precursorii corespunztori.
Fiecare molecula proteic "triete" un interval de timp bine determinat care oscileaz ntre limite
extrem de largi - de la cteva zile la civa ani. Din acest punct de vedere, proteinele pot fi mpartite
n doua categorii:
a) proteine ce se sintetizeaz pentru a asigura formarea i rennoirea celulelor i esuturilor (acest
proces este mai bine studiat n cazul proteinelor eritrocitare);
b) proteine ce se sintetizeaz independent de diviziunea celular, fenomen ce asigur circuitul
molecular al proteinelor.
nc din 1868 a aparut ideea c acest circuit este legat de labilitatea moleculelor proteice i c
acestea pot fi clasificate n proteine inerte din punct de vedere metabolic (care nu se rennoiesc) i
proteine circulante. Studii mai aprofundate l-au determinat pe Danilewski s considere c de fapt
nu exist proteine inerte. Toate proteinele din organismele vii sunt mai mult sau mai putin labile i
se afl ntr-o permanent schimbare, fiind clasificate de catre Folin n proteine exogene i
proteine endogene.
Dupa introducerea metodei izotopilor radioactivi s-au facut numeroase determinri ale vitezei de
rennoire a proteinelor. Aceasta difer foarte mult de la un organ la altul , ordinea descresctoare
fiind: piele muschi creier eritrocite. Mai mult de att, n unul i acelai organ, diferite
proteine se sintetizeaz cu viteze diferite. n tesutul muscular de exemplu, proteinele contractile se
rennoiesc cu o viteza mai mic n comparaie cu enzimele musculare.
S-a demonstrat experimental ca exista proteine care se rennoiesc foarte rar. De exemplu, durata
de "via" a colagenului este de aproximativ 300 de zile. Dac luam n considerare viteza de
rennoire a colagenului la sobolan a crui durata medie de viat este de aproximativ doi ani, rezult
c acest proces se realizeaz n organismul sobolanului doar o singura data n via.
n privina mecanismelor celulare ale rennoirii proteinelor, au fost formulate de-a lungul timpului
mai multe teorii. Primele ipoteze au aparinut lui Spigelman, L. care, la nceputul secolului XX
91
considera c n organismele vii are loc un proces continuu de degradare a proteinelor, dar nu exist
un proces de resintez din precursori endogeni. La vremea respectiv autorul a legat acest fenomen
de procesul de mbatrnire a organismului.
Actualmente, se consider c degradarea i resinteza proteinelor este un proces complex care se
realizeaz continuu, att prin utilizarea precursorilor endogeni, ct i a celor exogeni. Cele dou
resurse se utilizeaz cu viteze inegale, n funcie de condiiile de mediu, particularitile
fiziopatologice etc.
Cele doua compartimente ale metabolismului proteic - anabolismul si catabolismul - sunt contrare
i se realizeaza pe cai complet diferite. Cu toate acestea exist o serie de puncte comune ale cilor
de degradare i biosinteza a proteinelor. n primul rnd, o serie de produi de degradare parial
reprezint precursorii cilor de biosinteza. Aceste doua componente ale metabolismului mai sunt
interdependente si la nivel energetic, n sensul c energia din moleculele de ATP formate n urma
degradarii aminoacizilor se utilizeaz n procesele biosintetice. n fine, un alt punct comun l
constituie capacitatea oxido-reducatoare. Procesele de degradare sunt nsoite de reducerea NAD+,
NADP+, FAD i uneori FMN, iar regenerarea formelor oxidate ale acestor cofactori are lor n
paralel cu procesele biosintetice care utilizeaza NADH, NADPH, FADH2 si respectiv FMNH2.

Metabolism proteine
Proteinele alimentare sunt scindate hidrolitic pana la aminoacizi, sub actiunea enzimelor
proteolitice din sucurile digestive. Aminoacizii rezultati sunt absorbiti din intestin si, pe cale
portala, ajung la ficat, unde sunt metabolizati in proportii variabile (20-80%); restul strabat ficatul
si ajung in circulatia sistemica, de unde sunt extrasi si utilizati in tesuturi.
Ficatul detine rolul principal in metabolismul aminoacizilor de provenienta alimentara si al celor de
origine tisulara (endogena), care impreuna constituie un fond metabolic comun. Parte din
aminoacizi sunt utilizati de ficat pentru sinteza si remanierea proteinelor proprii structurale, parte
pentru sinteza unor proteine functionale necesare intregului organism (albumine plasmatice, factori
ai coagularii, anticorpi, enzime, etc.) si o anumita cota de aminoacizi este descarcata in circulatia
sistemica, mentinand concentratia plasmatica totala a aminoacizilor la valori cuprinse intre 35 si 65
mg/100ml.
Catabolismul aminoacizilor, in urma caruia rezulta un cetoacid si amoniac, consta in special in
dezaminare, proces care se poate realiza pe mai multe cai, cea mai important fiind dezaminarea
oxidativa, care are loc in ficat.
Cetoacidul care rezulta poate urma mai multe cai metabolice:
sinteza de noi aminoacizi prin procesul de transaminare, adica de transfer a gruparii aminice
desprinsa de pe un aminoacid pe un alt cetoacid, proces catalizat de transaminaze. In organism pe
aceasta cale se pot sintetiza toti aminoacizii pentru care exista cetoacizi corespunzatori, dar nu si
aminoacizii pentru care nu exista asemenea cetoacizi si care trebuie deci sa fie adusi in organism
prin alimentatie (aminoacizi esentiali);
intrarea in ciclul Krebs si oxidarea completa pana la dioxid de carbon si apa cu eliminarea
concomitenta de energie;
intrarea in ciclul Krebs, dupa transformarea intr-unul din constituentii acestuia si parcurgerea
retrograda a reactiilor acestui ciclu, ajungandu-se la sinteza de glucoza (gluconeogeneza procesul
cu o eficienta redusa are loc in ficat). Aceasta reprezinta calea de legatura dintre metabolismul
protidic si cel glucidic si este accesibila aminoacizilor denumiti glucoformatori;
sinteza corpilor cetonici este calea metabolica a cetoacizilor (aminoacizi cetogeni). Sintetizati in
ficat, corpii cetonici sunt descarcati in circulatie, de unde sunt extrasi de celule, fiind utilizati ca
material energetic sau pentru sinteze de acizi grasi.
Amoniacul, rezultat al dezaminarii tisulare si hepatice a aminoacizilor, precum si cel care rezulta
din catabolismul intestinal al aminoacizilor sub actiunea enzimelor bacteriene, fiind o substanta
toxica, este rapid neutralizat, in special de catre ficat. Cea mai mare parte a amoniacului este
92
combinata cu dioxidul de carbon la nivelul ficatului, rezultand uree (ureogeneza), produs terminal
al catabolismului proteic, care este eliminat prin urina.
In anumite tesuturi (sistem nervos, ficat) amoniacul este combinat cu acidul glutamic, rezultand
glutamina compus netoxic, care se desface usor, eliberand amoniacul necesar diferitelor reactii
metabolice. De asemenea, parte din amoniac este utilizata pentru reaminarea cetoacizilor si sinteza
de noi aminoacizi.
Aminoacizii sunt catabolizati i prin decarboxilare, sub actiunea unor enzime specifice ale florei
intestinale. Procesul, care are amploare in special cand ajung in colon cantitati crescute de proteine
nedigerate, genereaza amine, unele de importanta biologica deosebita.
Creatina si creatinina sunt, de asemenea, produsi ai metabolismului protidic - creatina este
sintetizata in ficat si depusa in cea mai mare parte in musculatura si in mai mica masura in tesutul
nervos iar creatinina este produsul final de catabolism al creatinei. In muschiul scheletic, creatina
se afla combinata cu acidul fosforic sub forma de fosfocreatina, datorita energiei furnizate de ATP,
iar in timpul contractiei musculare desfacerea legaturii fosfat-macroergice a fosfocreatinei
furnizeaza energia necesara refacerii ATP.
Reglarea metabolismului protidic este realizata, in primul rand, de corelatiile dintre anumiti factori
intracelulari, asupra carora actioneaza diferiti hormoni, dintre care unii stimuleaza sinteza de
proteine din aminoacizi (hormonii anabolizanti - somatotropul, insulina, hormonii sexuali) si altii
intensifica degradarea proteinelor in aminoacizi (hormoni catabolizanti - corticotropina hipofizara,
glucocorticoizii suprarenali, care actioneaza stimuland degradarea aminoacizilor si
gluconeogeneza, si hormonii tiroidieni, cand sunt secretati in cantitati crescute).
In organismul adultului normal exista un echilibru dinamic intre procesele de anabolism si
catabolism protidic. In schimb, in perioada de crestere predomina procesele anabolice, ceea ce are
ca rezultat acumularea de proteine, iar in perioada de batranete predomina procesele de catabolism
protidic, avand ca urmare scaderea stocului de proteine.

14.3.1.

Biosinteza proteinelor

93
 Proteinele sunt substane organice macromoleculare formate din lanuri simple sau complexe
de aminoacizi; ele sunt prezente n celulele tuturor organismelor vii n proporie de peste 50% din
greutatea uscat. Toate proteinele sunt polimeri ai aminoacizilor, n care secvena acestora este
codificat de ctre o gen. Fiecare protein are secvena ei unic de aminoacizi, determinat de
secvena nucleotidic a genei.

Biosinteza proteinelor

La nivelul ribozomilor se realizeaz translaia informaiei

genetice de la ARNm n lanul polipeptidic. n nucleu ARN
m copiaz informaia genetic de la ADN nuclear iar apoi
migreaz n citoplasm. Fiecare molecul de ARNt posed la
mijlocul lanului su un anticodon a cror 3 baze consecutive
se pot asocia prin legturi de hidrogen cu 3 baze
complementare de un codon ARNm. Pe baza acestui anticodon
aminoacizii vor fi poziionai conform mesajului genetic din
ARNm. Aceast poziionare a aminoacil-ARNt se realizeaz la
suprafaa ribozomului la nivelul a 2 situsuri stereospecifice:
situl "P" (peptidil) i situl "A" (aminoacil), situate la suprafaa
subunitilor. Biosinteza proteinelor este un proces prin
care fiecare celul i sintetizeaz proteinele proprii, prin
intermediul unui proces care include multe etape, sinteza
ncepnd cu procesul de transcripie i terminnd cu
procesul de translaie. Procesul dei similar, este diferit n
funcie de celul:eucariot sau procariot.
Transcripia
Procesul de transcripie necesit prezena unei singure
molecule de ADN dublu catenar, numit ADN ablon, molecul care intr n procesul de
iniiere. Aici acioneaz enzima ARN polimeraza, enzim care se leag de o anumit regiune din
molecula de ADN, regiune (denumit promoter), de unde va ncepe transcripia. Pe msur ce ARN
polimeraza se leag de promoter, lanurile de ADN vor ncepe sa se desfac. Urmtorul proces n
care intr ADN este procesul de elongaie (alungire a catenei). Pe msur ce ARN polimeraza se
mic de-a lungul
catenei de ADN, are loc
sinteza ribonucleotidelor
complementare (ARNm
- ARN mesager). Acest
ARN, dup cum i arat
i numele, se poate
deplasa i n alte pri ale
celulei cum ar fi reticulul
endoplasmatic sau
citoplasma.

Gruparea 5' se gsete n

captul 5' final al
moleculei de ARNm, i
este format din

94
guanosin grefat printr-o legtur de tip 5'- 5' de molecula de ARN prin intermediul unei legturi
trifosfat.
. Are loc adiia unei grupri 5', grupare dinucleotidic care are rolul de a asigura stabilitatea ARN i
de a-l transforma n ARN matur. O secven de aminoacizi este grefat n poziia 3' terminal
pentru protecie, dar i pentru a sluji drept ablon pentru procesele urmtoare.Mai departe are loc
formarea ARN, care este apoi utilizat n ribozomi pentru sinteza proteinelor. La procariote legarea
ARN de ribosomi are loc dup ce acesta este ndeprtat de nucleoid; n contrast la procariote acest
proces are loc chiar n membrana nuclear i apoi translocat n citoplasm. Rata sintezei proteic
poate ajunge la circa 20 aminoacizi la procariote, mult mai puin la eucariote.
Translaia
n timpul translaiei ARNm transcris din ADN este decodat de ribozomi pentru sinteza proteinelor.
Acest proces este divizat n 3 etape:
1. Iniierea. 2. Elongarea. 3. Faza terminal.
Ribozomul are situsuri de legare care permit altei molecule de ARNt (ARN de transfer), s se lege
de o molecul de ARN m, proces nsoit de prezena unui anticodon. Pe msur ce ribozomul
migreaz de-a lungul moleculei de ARNm (un codon o dat) o alt molecul de ARNt este
ataat ARNm. Are loc eliberarea ARNt primar, iar aminoacidul care este ataat de acesta este
legat de ARNt secundar, care l leag de o alt molecul de aminoacid. Translaia continu pe
msur ce lanul de aminoacid este format. La un moment dat apare un codon de stop, o
secven format din 3 nucleotide (UAG, UAA), care semnaleaz sfritul lanului proteic.
Chiar dup termminarea translaiei lanurile proteice pot suferi modificri post-translaionale
i plierea lanului proteic, responsabil de structura secundar i cea teriar. Modificrile post-
translaionale se refer la posibilitatea formrii de legturi disulfidice, sau de ataarea la scheletul
proteic a diferite grupri ca rol biochimic: acetat, fosfat etc.
Sinteza chimic.
Procesul de sintez chimic poate avea loc n laborator, dar pentru lanuri mici de proteine. O serie
de reacii chimice cunoscute sub denumirea de sinteza peptidelor, permit producerea de cantiti
mari de proteine. Prin sinteza chimic se permite introducerea n lanul proteic a aminoacizilor ne-
naturali, ataarea de exemplu a unor grupri fluorescente. Metodele sunt utilizate n biochimie i n
biologia celulei. Sinteza are la baz cuplarea gruprii carboxil -COOH (carbon terminus) cu
gruparea -amino -NH2 (segmentul N terminus).
Se cunosc 2 metode de sintez pe cale chimic:
- Sinteza n faz lichid, metoda clasic, care a fost nlocuit cu sinteza n faz solid.
- Sinteza n faz solid a crei baz a fost pus de Robert Bruce Merrifield. Prin aceat metod, se
pot sintetiza proteine D, cu aminoacizi D. n prima
faz Merrifield a folosit metoda tBoc (ter-butil-
oxi-carbonil). Pentru nlturarea acestuia din lanul
peptidic se folosete acidul fluorhidric (HF), care
este foarte nociv, periculos, iar din acest motiv,
metoda nu se mai utilizeaz. Atunci cnd este vorba
de sinteza analogilor peptidici non-naturali de tip
baz (depsi-peptidele) este necesar.
O alt metod este cea introdus de R.C. Sheppard
n anul 1971, i are la baz folosirea Fmoc
(fluorenil metoxi carbonil), iar pentru neprtarea
acesteia se folosete de obicei mediu bazic asigurat
de o soluie 20% piperidin/DMF (dimetil
formamid). ndeprtarea gruprii din lanul proteic
se face prin incubare n acid trifluoracetic (TFA).

Aceast grup de protejare cu simetrie ortogonal

se folosete n multe sinteze chimice.
95
Protejarea gruprii prin intermediul Fmoc este de obicei lent, deoarece anionul nitro produs la
sfritul reaciei nu este un produs favorabil desfurrii reaciei.
Rol
Datorit compoziiei, fiind formate exclusiv din aminoacizi se ntlnesc alturi de ali compui
importani de tipul polizaharidelor, lipidelor i acizilor nucleici ncepnd cu structura virusurilor, a
organismelor procariote, eucariote i terminnd cu omul. Practic nu se concepe via fr proteine.
Proteinele pot fi enzime care catalizeaz diferite reacii biochimice n organism, altele pot juca un
rol important n meninerea integritii celulare (proteinele din peretele celular), n rspunsul imun
i autoimun al organismului.
Nutriia
Majoritatea microorganismelor i plantelor pot sintetiza toi cei 20 aminoacizi standard, n
timp ce organismele animale obin anumii aminoacizi din diet (aminoacizii eseniali). Enzime
cheie, cum ar fi de exemplu aspartat kinaza, enzim care catalizeaz prima etap n sinteza
aminoacizilor lizin, metionin i treonin din acidul aspartic, nu sunt prezente n organismele de
tip animal. La aceste organisme aminoacizii se obin prin consumul hranei coninnd proteine.
Proteinele ingerate sunt supuse aciunii acidului clorhidric din stomac i aciunii enzimelor
numite proteaze, proces n urma cruia lanurile proteice sunt scindate (denaturate).
Ingestia aminoacizilor eseniali este foarte important pentru sntatea organismului, deoarece fr
aceti aminoacizi nu se poate desfura sinteza proteinelor necesare organismului. De asemenea,
aminoacizii sunt o surs important de azot; unii aminoacizi nu sunt utilizai direct n sinteza
proteic, ci sunt introdui n procesul de gluconeogenez, proces prin care organismul asigur
necesarul de glucoz n perioadele de nfometare (mai ales proteienele aflate n muchi).s

Tema: Structura chimica a ADN i ARN Rolul lor n sinteza proteinelor

Introducere
a) Genetica moleculara, cea mai tnara si cea mai moderna ramura a geneticii este unul dintre cele
mai dinamice domenii ale cercetarii stiintifice. Gregor Mendel, fondatorul geneticii, descopera
factorii ereditari care