Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Introducere
Scurt istoric
Fiecare etap a dezvoltrii societii umane s-a caracterizat prin dezvoltarea cu
precdere a anumitor domenii caracteristice pentru etapele respective. n ceea ce
privete de exemplu pictura, sculptura, astronomia etc., umanitatea a aezat la loc de
cinste n primul rnd operele Evului mediu n timp ce apariia zorilor capitalismului, s
-a caracterizat prin dezvoltarea fr precedent a tehnologiilor.
nc pe la mijlocul secolului XVIII se tia c proteinele se pot scinda pn la
peptone nu numai n stomac, ci i n afara lui sub aciunea agentului (principiului
activ) din sucul gastric. O descoperire important n acest domeniu a fcut savantul
din Petersburg, K.C. Kirhhof n anul 1814. El a artat c extractul din mal (orez
ncolit) are proprietatea de a transforma amidonul n zahr (maltoz).
De aici, proprietatea de a transforma amidonul n zahr o au un numai boabele
ncolite de orez,dar i extractele lor, adic transformarea amidonului se poate
produce nu numai n interiorul celulei, dar i n afara ei (n vitro).
Substana extras din mal cu proprieti de zaharificare a amidonului a cptat
numele de amilaz. n mod analog a fost obinut extractul din drojdie, care la
temperatura de camer scindeaz rapid zahrul din sfecl n componentele sale
glucoza i fructoza. Astfel s-a artat c zaharoza poate fi hidrolizat nu numai n
celulele vii de drojdii, ci i n afara lor sub aciunea unei substane speciale, care se
extrage din drojdie i care poart numele de zaharaz , sau invertaz.
Prin analogie cu natura moart (n baza eliberrii rapide a oxigenului din apa
oxigenat H2O2 n prezena catalizatorului din platin spongioas ) s-a presupus i s-a
consolidat conceptul prezenei biocatalizatorilor n celulele vii ale omului, plantelor i
animalelor, care se mai numesc fermeni sau Enzime.
n vremurile noastre putem afirma fr a grei c secolul XX a fost secolul fizicii,
iar secolul XXI va aparine cu siguran dezvoltrii biotehnologiilor. Progresele
tehnologice moderne au permis extinderea i aprofundarea studiilor referitoare la
diveri constitueni celulari i subcelulari. Noile cuceriri ale biotehnologiei nu sunt
ns posibile fr aportul substanial al unor tiine de grani, n marea lor majoritate
tinere, cum ar fi biochimia, biofizica, biologia molecular, microbiologia
industrial i altele.
Biochimia este definit ca fiind tiina ce se ocup cu studiul structurii chimice a
organismelor vii, totalitatea reaciilor i transformrilor care au loc n celula vie,
reglarea acestora i interdependena permanent cu mediul nconjurtor.
Din punctul de vedere al obiectului de studiu distingem mai multe ramuri ale
biochimiei:
Biochimie microbian
Biochimie vegetal
Biochimie animal
3
n ultimul secol, n cadrul biochimiei animalelor, o amploare deosebit a fost
nregistrat de biochimia omului, n special biochimia medical sau clinic, dat fiind
importana practic imens a acesteia pentru pstrarea sntii omului.
n funcie de modul de abordare a problemelor studiate, se disting
dou ramuri principale ale biochimiei:
4
Celula procariot
Celula procariot
Celula eucariot
5
1. nveliul celulei
2. Membrana celular separ celula de mediul nconjurtor i intervine n
schimburile dintre celul i mediu;- este organizat pe modelul mozaicului fluid, fiind
alctuit din dou straturi fosfolipidice strbtute de proteine; - membrana este
permeabila i selectiv.
I. Peretele celular este specific celulei vegetale este structura nevie; la
ciuperci=fungi, este de natur chitinoas; la alge, muchi, ferigi, plante superioare -
este celulozic, fiind format din celuloz, hemiceluloz i substane pectice; se
formeaz cu participarea membranei celulare; lipsete la celula animal; are rol de
aprare, asigur schimbul de ap i substane dintre celul i mediul nconjurtor.
II . Citoplasma reprezint mediul n care se desfoar principalele procese
metabolice celulare.
Componente: citoplasma fundamentala= hialoplasma = nestructurat;
constituie mediul intern al celulei n care se desfoar principalele procese
metabolice celulare.
Prezint cureni citoplasmatici care pun n micare organitele componenta structurat
- reprezentat de organitele celulare:
Mitocondriile au rol n respiraia celular, la nivelul lor are loc oxidarea substanelor
organice, cu producerea de energie (se mai numescuzinele energetice ale celulei);
sunt autodivizibile = au material genetic propriu - ADN mitocondrial, care conine
informaia genetic pentru sinteza enzimelor respiratorii.
Alctuire: sunt formate din membran dubl: membrana extern este neteda,
membrana intern formeaz pliuri numite criste, la nivelul crora se gsesc enzimele
oxido-reducatoare; cavitate n care se gsete substana fundamental matricea
(matrix) ce conine ADN, ARN, enzime.
7
Introducere
Metabolism
ntre organismele vii i mediul nconjurtor exist un permanent schimb de
substane i energie astfel c organismele vii pot fi considerate din punct de vedere
temodinamic un sistem deschis.
Totalitatea acestor schimbri de substane i energie formeaz metabolismul. Dup
modul de desfurare el poate fi:
- general(bazal);
- intermediar.
Metabolismul general se refer la intrarea substanelor din mediul exterior i
evacuarea produselor rezultate, cu alte cuvinte, reprezint cheltuielile fixe de energie
necesare ntreinerii funciilor vitale (respiraia, circulaia, activitatea sistemului
nervos, excreia i secreia endocrin).
Metabolismul intermediar se refer la toate transformrile pe care le sufer
substanele n organism pn la evacuarea produselor rezultate n urma
transformrilor.
Metabolismul intermediar are dou laturi:
- anabolism ;
- catabolism.
Anabolismul const n sinteza compuilor macromoleculari din compui simpli
avnd loc aportul energiei.
Catabolismul const n degradarea compuilor macromoleculari cu formarea
compuilor simpli (ca monozaharide, glicerol, aminoacizi etc.) i este nsoit de
eliberare de energie. Ambele procese se desfoar simultan n organism astfel dac
ntr-un anumit loc se desfoar procese anabolice cu siguran n alt loc din
organism se desfoar procese catabolice.
Degradarea i sinteza diferitor substane presupune o succesiune de reacii, fiecare
reacie catalizat de anumit enzim ce reprezint calea metabolic.
Cile metabolice pot fi :
-liniare-ABCDEF;
-ramificate AB D
E
F
-ciclice-din AB i viceversa;
- ciclice interptrunse. A2 A A1
Dei cile metabolice conin unele reacii reversibile pe ansamblu acestea sunt
ireversibile deoarece:
-procesele anabolice i catabolice se desfoar n compartimente diferite(cele
anabolice n citoplasm), iar cele catabolice n mitocondrii.
Nu toate reaciile pot fi reversibile din punct de vedere termodinamic: procesele
catabolice i anabolice depind de factori diferii.
Procesele bioenergetice.
8
Organismele care i sintetizeaz compui organici din CO2, H2O i energie se
numesc organisme autotrofe. Din acestea fac parte algele verzi, bacteriile
nitrificatoare fixatoare de azot i ntr-o msur mai mic bacteriile ferogenoase,
sulfogenoase.
Organismele care folosesc energia chimic eliberat prin degradarea compuilor
organici gata sintetizai se numesc organisme heterotrofe. Acestea sunt dependente
de cele autotrofe. Dintre acestea fac parte organismele animalelor i omul, , bacteriile
de mucegai etc.
Chemiotrofe ca surs de E folosesc reaciile de oxido-reducere, i nu lumina solar
ca plantele.
Concomitent cu schimbul de substane are loc i schimbul de energie. Astfel,
reaciile care se desfoar cu eliberare de energie se numesc reacii exergenice, iar
cele care se desfoar cu absorbie de energie se numesc endergenice.
Energia eliberat prin procesele exergenice se nmagazineaz n nite legturi
speciale numite legturi macroerge i legturi fosfoesteri, fosfoamidice,
anhidridice. Compuii care conin legturi macroerge se numesc compui
macroergi. Dintre acetea locul principal revine ATP-ului (acidului
adenozintrifosfat). Energia eliberat n procesele ezergenice activeaz fosforul
anorganic fin compusul ionului acidului ortofosforic care se leag de ADP (acidul
adenozin difosforic) i se transform n ATP.
energie
ADP + H3PO4 ATP
n reaciile endergenice este necesar energia eliberat prin hidroliza ATP-ului
ATP energie
ADP + H3PO4
10
Toate aceste aspecte alctuesc tabloul general al metabolismului intermediar care
presupune att procese catabolice ct i procese anabolice.
Catabolismul i anabolismul se desfoar n trei etape:
Catabolismul.
Stadiul I const n degradarea compuilor macromoleculari (proteine, lipide, glucide)
n compui simpli aminoacizi, acizi grai , glicerol i monozaharide.
Stadiul II Const n transformarea biomoleculelor de baz ntr-o substan unic
numit Acetil CoA.
Stadiul III const n antrenarea Acetil CoA ntr-o succesiune de reacii care
alctuesc ciclul Krebs cu formarea a 4 perechi de H i 2 atomi de carbon sub
form de CO2.
Anabolismul
Stadiul I al anabolismului coincide cu stadiul II al catabolismului. n acest stadiu din
componena ciclului Krebs se formeaz Acetil CoA.
Stadiul II al anabolismului coincide cu stadiul II al catabolismului. n acest stadiu se
formeaz Acetil CoA biomolecule de baz.
Stadiul III al anabolismului coincide cu stadiul I al catabolismului. n acest stadiu
se sintetizeaz din biomolecule de baz macromolecule proprii organismului
dat(proteine, lipide, glucide).
11
hormonilor tiroidieni sunt numai n tiroid, enzimele implicate n biosinteza ureei se
gsesc numai n celulele hepatice.
Fiecare organ se caracterizeaz printr-un profil enzimatic reprezentat de enzimele
care acioneaz n diferitele compartimente din celul.
Membrana celular conine enzime implicate n transportul substanelor.
Mitocondriile prezint enzime ce catalizeaz procese generatoare de energie:
membranele extern i intern conin enzimele implicate n lanul respirator, sinteza
fosfolipidelor, elongarea i desaturarea acizilor grai, iar matricea mitocondrial
conine enzimele ciclului Krebs, enzimele implicate n decarboxilarea oxidativ a
cetoacizilor catabolismul acizilor grai, dezaminarea aminoacizilor, biosinteza ureei.
Nucleul conine enzimele implicate n metabolismul acizilor nucleici.
Ribozomii abunda n enzime implicate n diferitele faze ale biosintezei proteinelor.
Ribozomii liberi sintetizeaz proteinele celulare, iar cei fixai de reticulul
endoplasmatic, proteinele de export.
Citoplasma conine enzimele glicolitice, pentozofosfailor, enzimele din biosinteza
acizilor grai, a nucleotidelor etc.
Lizozomii abundeni n ficat, rinichi, globule albe conin hidrolaze:
enzime proteolitice, ribonucleaze, enzime care hidrolizeaz proteoglicanii,
sfingolipidele.
Complexul Golgi conine enzime implicate n exportarea proteinelor sintetizate n
reticulul endoplasmatic i maturarea glicoproteinelor si proteoglicanilor.
Unele enzime au localizare mixta, citoplasmatic i mitocondrial, cum sunt
transaminaz glutamic oxalilacetic, malat dehidrogenaza, izocitrat dehidrogenaza.
13
organice, existente aici, trebuie s-i corespund cel puin o enzim, care s participe
la sintez i/sau degradarea ei.
Or, Enzimele (din limba greac - zymosis - ferment) sunt proteine sau proteide fr
de care celule vii nu pot nfptui reacii complexe ntr-un timp scurt, la temperatura
mediului nconjurtor. Ele sunt substane care catalizeaz reaciile biochimice din
organism, avnd un rol esenial n biosinteza i degradarea substanelor din materia
vie, ntlnindu-se n toate organismele animale, vegetale i n microorganisme, mai
fiind denumite din aceast cauz biocatalizatori. Fr enzime , procesele biochimice
s-ar desfura cu viteze foarte mici.
1. Rolul enzimelor n cadrul organismelor poate fi generalizat:
a). Descompunerea moleculelor mari.
b). Accelereaz procesele metabolice.
c). Coordoneaz unele etape ale ciclului metabolic.
A) Caracteristicile enzimelor
Enzimele sunt proteine globulare putnd avea o structur:
a). unitar - enzime monocomponente, alctuite numai din aminoacizi: tripsin, ,
chimotripsin, pepsin, lipaz, ribonucleaz;
b). binar - enzime alctuite dintr-o parte proteic (apoenzima) i o grup neproteic,
definite de Euler astfel: Holoenzim= Apoenzim + Cofactor.
Studiul structurii enzimelor s-a realizat prin tehnici exacte: difracie de raze X,
dicroism circular, fluorescen, analize in UV i IR, RMN, spectrometrie Raman etc.
Apoenzim este de natur proteic care confer enzimei specifizarea de substrat.
Cofactor este de natur neproteic i care nu confer enzimei specificitatea de
reacii. Cofactorul poate fi reprezentat de :
-coenzime care sunt derivai de la vitamine cum ar fi NAD+;FAD+.
Ce prezint aceti cofactori (coenzime)?
R-s: Dintre toi cofactorii prezeni n organism, doi dintre ei mai cunocui purttori
de electroni sunt coenzimele NAD+ (nicotin-adenin dinucleotid) i FAD+ (flavin-
adenin-dinucleotidul). Restul de nucleotid din NAD + (sau FAD+) este forma
fosforilat a NAD+-lui, locul n care poate avea loc reducerea reversibil,
fenomen care const n transferul ionilor de hidrogen (NAD++H+NADH )
- grupe prostatice TPP, piridoxalfosfat, hemul;
- ionii metalici Na+, Cu2+, Zn2+, Fe2+, Fe3+, Co2+.
Enzime, biofermeni substane proteice specifice sintetizate n organismele vii,
care ndeplinesc rolul de catalizatori biologici n reaciile biochimice, asigurnd
reglarea proceselor metabolice. Se gsesc n toate celulele i lichidele organismului.
Dup structur enzimele se clasific n dou categorii: enzime exclusiv de
component de natur proteic i o component de natur neproteic numit
coenzim. Natur proteic format numai dintr-o holoproteid i enzime
hetroproteide formate dintr-o coenzim.
Enzimele se mpart n ase grupe mari: hidrolaze, transferaze, oxidoreductaze,
liaze, izomeraze i ligaze (sintetaze), fiecare avnd, la rndul ei, mai multe
subgrupe. Enzimele reacioneaz cu substratul (substana care va fi scindat) i
14
formeaz aa-numitul complex intermediar enzim-substrat (ES). Aceasta duce la
micorarea energiei de activare, nlesnind descompunerea substratului. Fermenii
sunt activi n concentraii extrem de mici (de ex., amilaza este activ n soluie de 1 :
1000.000, peroxidaza n soluie de 1 : 5000.000) i nu se consum n timpul
procesului de catalizare. Enzimele sunt proteine simple sau conjugate, ultimele avnd
dou componente: prima proteic, nedializabil, termolabil, numit apoenzim, i
cealalt micromolecular, dializabil i termostabil, numit coenzim (coferment
sau partea prostetic, cnd ea este strns legat de apoenzim). Cofermentul este
reprezentat prin enzim legat de metale (Si ++, Zn++, Mg++ etc.), nucleotide, vitamine
. a. Partea neproteic (cofactorul) determin sensul reaciei, activitatea catalitic
propriu-zis i mecanismul reaciei chimice. Apoenzima prin grupele sale chimice
speciale stabilete legtura enzimei cu substratul, adic determin caracterul specific
al reaciei. Activitatea catalitic nu este realizat de ntreaga molecul a enzimei, ci e
concentrat ntr-o poriune limitat, numit centru activ, afar de care n componena
enzimei mai ntr aa-numitul centru alosteric. Prin intermediul lui are loc reglarea
activitii enzimei. Unele enzime exist sub form inactiv (proenzim), activndu-se
n anumite condiii (de ex., pepsinogenul este activat n prezena acidului clorhidric).
Existena enzimei sub form de precursori inactivi reprezint un factor de protecie,
care previne, bunoar, autodigestia esuturilor, coagularea intravascular a sngelui
etc. Asupra activitii enzimelor acioneaz multe substane (iod, metale, hormoni,
metabolii etc.), printre care unele (numite activatori) le sporesc activitatea catalitic,
iar altele (numite inhibitori) o reduc. Inhibitorul formeaz cu enzima un complex
incapabil de activitate catalitic. n funcie de stabilitatea acestui complex exist
inhibiie ireversibil i inhibiie reversibil. Ultima poate fi concurent (izosteric)
sau neconcurent (alosteric). n cazul inhibiiei concurente inhibitorul are o structur
asemntoare cu substratul. Astfel ntre substrat i inhibitor are loc un fel de
concuren pentru centrul activ, care depinde de raportul dintre concentraiile lor.
Inhibiia concurent st la baza aciunii preparatelor sulfanilamidice de combatere a
unor microorganisme, pentru care acidul paraaminobenzoic (asemntor dup
structur cu unele sulfanilamide) constituie factorul de cretere al microorganismelor.
n urma substituiei concurente se obine un efect bacteriostatic (stagnarea creterii i
nmulirii bacteriilor). n cazul inhibiiei neconcurente inhibitorul (numit efector) nu
seamn dup structura sa cu substratul i, deci, nu se fixeaz n centrul activ
catalitic, ci n centrul alosteric. Ca efectori pot servi, de asemenea, unii metabolii,
unele nucleotide etc. Efectorul, fixndu-se n centrul alosteric, modific configuraia
enzimei, i, ca rezultat, centrul catalitic se deformeaz parial sau total, avnd ca
urmare pierderea sau reducerea activitii enzimei.
Ansamblul de reacii chimice care constituie metabolismul se desfoar ntr-o ordine
strict, la baza creia st procesul complex de reglare a activitii enzimelor.
Dereglarea proceselor enzimatice, aprute ca rezultat al mutaiilor, reprezint aa-
numitele enzimopatii, caracterizate prin sinteza enzimei defectuoase, adic inactiv
sau cu activitate catalitic parial redus. n cazul multor afeciuni activitatea
enzimelor se modific, de aceea determinarea activitii acestora n obiectele
biologice (ser, urin) are o aplicare larg n diagnosticarea hepatitei, pancreatitei,
bolilor cardiovasculare . a. n afar de aceasta astfel de preparate enzimatice, ca
15
pepsina, tripsina, fibrinolizina, hialuronidaza, trombina, lizozima . a., se
administreaz i pentru tratarea unor boli.
C) Nomenclatura.
Nomenclatura de lucru i cea sistematic.
Nomenclatura de lucru este aceea care se obine adugnd terminaia aza la numele
substratului asupra creia acioneaz enzima. Exemplu: maltaza are ca substrat
maltoza, ureaza are ca substrat ureea.
Nomenclatura sistematica include doua componente
1) Definete substratul sau cele doua substane asupra crora acioneaz enzima (la
reaciile bimoleculare);
2) Sufixul aza - indic natura procesului pe care-l determina enzima. Ex.:
glucoamilaza. 1,4 glucon - glucohidrolaza (asupra leg.1,4 din glucon i aciunea se
realizeaz hidrolitic cu eliminare de glucoza).
Cnd avem doi componeni: transaminaza = glutamat - piruvat aminotransferaza.
Clasificare
Dup locul unde acioneaz: endoenzime i exoenzime.
M = 13000 = 35000 - numr restrns
Dup organizarea structural - monomere - oligomere (majoritatea) (disociaz in
monomeri) M = 35000 sute de mii- izoenzime configuraie difetit, dar
catalizez.
aceleai reacii complexe enzimatice.
Sintetizate n celula legat una de alta i catalizeaz reaciile ntr-o anumit
succesiune.
(Modelul cheia i
lactul)
Organizarea centrului
activ la enzimele
alosterice.
17
Pentru E biocomponente centrul activ conine i cofactor (coferment).
n afar de aminoacizi care particip direct la reacia enzimatic, exist unii care au
rol indirect -->asigur flexibilitatea structurii teriare.
Exist aminoacizi care sunt considerai aminoacizi umplutur care variaz n
izoenzime sau n formele moleculare multiple.
Centrul activ este format din 2 regiuni :
prima regiune de recunoatere / legare cu a substratului; a 2-a regiune responsabil de
reacia enzimatica. Exemplu, acetilcolinesteraza are un centru activ format din 2
regiuni :
a) anionic care conine gruparea COO- a acidului aspartic, are rol de recunoaterea
regiunii pozitive din substrat;
b) esterazic care conine grupele -OH din serin i grupul imidazolic din restul de
histidin care au rol n scindarea substratului:
CH3-CO-O-CH2-CH2-N-(CH3)3 ----->CH3-COOH + CH2OH-CH2-N-(CH3)3
acetilcolina -HOH colina.
Centrul activ are n general este o structur complmentar cu structura substratului
18
Energia de activare
ntr-o reacie enzimatic cre terea vitezei de reacie se face prin scderea energiei de
activare fr a modifica starea termodinamic a sistemului.
O reacie de transformare a unui substrat n produi de reacie va avea loc numai
atunci cnd o anumit populaie din moleculele substratului vor avea suficienta
energie pentru a trece ntr-o stare activa (= cu cea de tranziie T ).
Cantitatea de energie necesar pentru a aduce toate moleculele dintr-un mol de
substrat la o temperatura dat n stare de tranziie T se nume te energie liber
de activare (kcal/mol).
n laborator energia cinetic necesar creterii numrul de ciocniri eficace pentru a
forma produi de reacie se realizeaz prin cretere temperaturii. Acest lucru nu este
posibil pentru organismele vii deoarece omul este fiin homeoterm, aceasta
imposibilitate este depit de prezena enzimei care are rolul de a scdea energia de
activare a reactanilor fr a modifica starea termodinamic a sistemului.
Eficienta catalizei enzimatice este asigurata prin mai multe mecanisme :
1) orientarea, apropierea substratului de centrul activ al E;
2) adaptarea indus a centrului activ la structura substartului;
3) cataliza general acid-baz;
4) cataliza covalent (enzima i o grupare funcional din centrul activ formeaz un
intermediar covalent)
Prin studiul cineticii enzimatice este explicat modul in care enzimele ac ioneaz,
permind determinarea vitezei maxime de reacie a unei enzime i a afinitaii sale
pentru substrat sau pentru unii efectori. Determinarea vitezei de reacie nu relev
stoechiometria reaciei sau mecanismul acesteia, deci este necesar o ecuaie care s
fac legtura ntre viteza iniial a reaciei (determinata experimental) i concentraia
reacantilor.
Dei cazul enzimelor monomerice cu un singur substrat este relativ rar, cinetica
clasica a enzimelor monomerice n faza staionar cu un singur substrat (prezentata
n continuare) este modul cel mai simplu de a trata i a inelege cinetica enzimatic.
Cele mai multe enzime au ns mai multe substaturi dnd natere la produi diferii
nerespectnd comportamentul clasic.
In reaciile cu un singur substrat, meninnd constanta concentraia enzimei,
creterea concentraiei de substrat determin mrirea vitezei de reacie pn cnd se
atinge o valoare maxim peste care orict ar crete concentraia substratului viteza
reaciei enzimatice rmne nemodificata. (La concentraii mici de substrat, viteza de
reacie este proporional cu concentraia substratului (reacii de ordin1). La
concentraii mari de substrat, viteza de reacie devine n dependent de concentra ia
substratului (reacii de ordin 0), enzima saturndu-se cu substrat.
Viteza unei reacii enzimatice este determinat de concentraia de substrat la acel
moment i de constantele Km i v max.
Enzimele pot cataliza numai reacii termodinamic posibile, adic numai acele reacii
chimice care au loc cu scderea entalpiei libere de reacie. Viteza reaciilor catalizate
de enzime reprezint cantitatea de substrat transformat (c) ntr-un anumit interval de
timp (dt). Valoarea vitezei reale de reacie este dat de relaia:
dc
Vr = dt
21
Cofactorul reprezint componenta neproteic termostabila, dializabil
(unele vitamine, nucleotide).
Cofactorul enzimatic, la randul su poate fi:
- un rest al unei substane organice numita grupare prostetic, inseparabil legat de
apoenzim;
- un rest al unei substane organice numit coenzim care poate trece de la o
apoenzim la alta, separndu-se uor de aceasta prin dializ si neparticipnd la
formarea centrului
Activ al enzimei respective;
- un rest al unei substae nespecifice numit activator sau cofactor anorganic care
determin transformarea unui zimogen, adic a unui compus inactiv din punct de
vedere enzimatic intr-o enzim activ.
Dintre enzimele a cror parte prostetic este hemul, este catalaza, care catalizeaz
descompunerea peroxidului de hidrogen in ap i oxigen.
Cofactorii au urmtoarele caracteristici: sunt indispensabili pentru manifestarea
activitii catalitice sau pentru potentarea ei; unii sunt uor disociabili de apoenzim,
alii nu; determin specificitatea de reacie, formeaz complexul enzima - cofactor.
Coenzimele sunt micromolecule organice care se ataeaz temporar la
apoenzim ( vitamine, hemulul, NTP, NDP).
La plante, enzimele proteolitice sunt rspndite att n organele vegetative (frunze,
tulpini, rdcini), ct i n seminele aflate n repaus sau n germinaie. n timpul
germinaiei, degradarea proteinelor de rezerv din endosperm sau cotiledoane are loc
cu o intensitate deosebit pentru a furniza aminoacizii necesari biosintezei proteinelor
specifice embrionului n dezvoltare. Degradarea proteinelor se realizeaz i n
procesul de imbtrnire a plantelor cnd sunt supuse hidrolizei proteinele organelor
vegetative. Produii rezultai migreaz spre organele reproductive unde procesul de
biosintez proteic este deosebit de intens.
Enzimele sunt deci substane active n cantiti foarte mici, nu modific echilibrul de reacie, ci
numai viteza acestora prin scderea energetice (activeaz sau labilizeaz moleculele care intra n
reacie).
n prezenta enzimelor nivelul energetic minimul este mult cobort, moleculele reacioneaz cu
viteze mari (n absena enzimelor nu ar reaciona).
22
Mecanismul prin care enzimele i exercit funcia lor catalitic include ansamblul urmtoarelor
procese moleculare principale:
- asocierea specifica a enzimei (E) cu
substratul (S) - complex intermediar ES
disociabil (Ajustarea indus);
n cazul catalizei enzimatice, ntre
enzim i substratul care se transform,
se formeaz un complex activat enzima-substrat, care apoi se transform cu vitez
mare n produii finali de reacie.
La formarea complexului activat enzima substrat, substratul se fixeaz pe regiuni
bine determinate de pe suprafaa enzimei, care poart numele de centri activi i
molecula substratului, exist complementariti conformaionale i chimice care
permit asamblarea lor.
Centrul activ al unei enzime este construit dintr-un numr redus de aminoacizi
situai n vecintate sau la distan.
n general, se admite ca pentru o reacie chimica obinuita, enzima particip cu doi
centri activi. Pentru enzimele cu structura binar unul dintre centrii activi este, n
general, situat n fragmentul protetic, iar al doilean fragmentul prostetic.
(Vezi modelul cheia i lactul)
Astfel, cataliza enzimatic are elemente comune cu cataliza omogen, deoarece
enzima este adeseori repartizat uniform n sistemul chimic al crui transformare o
asigur. Cataliza enzimatic are caracter i de cataliz eterogen, reacia biochimic
desfaurndu-se n regiuni bine determinate de pe suprafaa enzimei, situate la limita
de separare dintre sistemul reactant i macromolecula catalizatorului.
Un alt caracter tipic este marea eficien catalitic a enzimelor. O reacie decurge n
prezena enzimei de 108 pana la 1011 ori mai repede, dect n absenta ei. Numrul de
molecule de substrat transformate sub aciunea enzimei ntr-un minut (numr de
transfer, turnover) variaz ntre 1000 1000000.
Cataliza enzimatic are loc n condiii blnde. Reacii care necatalizate nu au loc
dect la temperaturi nalte, presiuni mari, valori extreme de pH, sub influena
enzimelor evolueaz cu mare vitez la temperaturi n jurul lui 37 0C i la presiune
atmosferic, la pH aproape neutru.
8.2.3. Influenta diferitor factori
A) Influenta pH-ului
Pentru enzimele din organismul uman, pH-ul optim de ac iune este pH-ul normal al
mediului n care ele si manifest aciunea catalitic.
Centrul activ al enzimelor conine grupe ionizabile, acide sau bazice, deci
modificarea pH-ului are ca efect modificarea gradului de disociere i, implicit,
modificarea vitezei de reacie.
pH-ul optim de aciune a unor enzime
Pentru enzimele din organismul uman pH-ul optim este intre 5-9, dar exist enzime ce
acioneaz i n afara acestui interval. De exemplu, pepsina acioneaza la pH 1,5-2,
fosfatazele alcaline la pH 9-10, iar fosfatazele acide la pH 4,5-5.
23
Fiecare enzima este caracterizat de un coeficient termic al reaciei, notat Q10, ce
reprezint creterea vitezei de reacie pentru o cretere cu 10 0 a temperaturii, n
condiiile meninerii constante a celorlali parametri. Pentru reaciile enzimatice Q10
este ntre 1 si 2, fiind mai mic dect pentru reaciile necatalizate, pentru care Q10
este intre 2 si 4. Aceasta relaie este valabil numai pan la temperatura optim,
pentru care viteza de reacie este maxim. Creterea temperaturii peste temperatura
optima determina scderea vitezei de reacie, datorit denaturrii pr ii proteice a
enzimei.
Temperatura optim pentru enzimele din organismul uman este 37-400C, la plante 50-
600C, iar pentru cele din microorganismele din apele termale este 80-1000C.
Determinarea activitii unei enzime trebuie s se fac la o temperatur ntre 25-370C.
24
Specificitatea absolut.
Enzimele din aceasta categorie acioneaz strict asupra unui anumit tip de substrat
nerecunoscnd nici o modificare a substratului respectiv. Ele nu sunt specifice pentru
o anumita legtura sau grupare din structura substratului i recunosc doar substratul
n totalitate.
Exemple:
Arginaza
acioneaz
numai asupra argininei:
Anhidraza carbonica catalizeaz sinteza acidului carbonic:
Multe enzime necesit prezena metalelor pentru a-si manifesta aciunea, fiind din
acest punct de vedere metaloenzime (conin ionii integrai n structuri intim legate de
enzim) sau enzime ce necesita metalele ca activatori ( metalul este legat de enzim
prin legturi mai slabe).
Interaciunile ionice dintre un metal legat la enzim i substrat pot ajuta la orientarea
substratului pentru reacie sau pentru a stabiliza starea de tranziie.
Metalele funcioneaz drept catalizatori electrofili sau ca i centri nucleofili la pH
neutru.
Alcool - dehidrogenaza este una dintre enzimele care folosesc acest mecanism, n care
un ion Zn2+ stabilizeaz sarcina negativa ce apare tranzitiv la molecula de
acetaldehida format n reacia de oxidare a alcoolului.
Enolaza este enzima ce catalizeaz reacia de transformare a acidului 2,3-
difosfogliceric n acid fosfoenolpiruvic n glicoliz, pentru care ionii de Mg 2+ sunt
implicai n interaciunea cu substratul (Fig.de mai jos).
In cazul acesteia, Lys 345 funcioneaz ca baza extrgnd H+, iar Glu 211 ca acid
cednd H+ grupei OH-. Prin interaciunea acidului 2,3-difosfogliceric cu Mg2+se
aciditeaz H+ de la C2 devenind mai reactiv.
25
Manifestarea specif
icit ii enzimei n
raport cu un anumit
substrat sau grupe de substrat
crora le confer o anumit orientare spaial precis;
- activarea respectiv scderea energiei de activare a moleculelor de substrat
reactant (S+);
- procesul catalitic efectiv prin care substratul se transforma n produs (P).
E + S S + P +
sau E + S ..[ES] P1 + E P2
EP2 + S1 [EP2S1] P2S1 + E
S = donor
S1 = acceptor
Viteza reaciilor enzimatice influenate de: concentraia enzimei i substratului,
temperatura, valoarea pH-ului, prezenta electroliilor, ali factori.
Cunoaterea rolului acestor factori are importan pentru ca prin studiul lor pot fi
caracterizate enzimele i se poate interveni asupra activitii lor catalitice.
Factorii enzimatici.
8.3.3. Reglarea activitii enzimatice.
Caracteristicile componentei proteice
Apoenzima fiind protein are toate nivelurile structurale. Structura primar este
stabil, determinat de secven aminoacizilor din lan ul polipeptidic. Structura
secundar reprezinta procentul de configuraie spaiala -helix (n special) stabilizat
prin legturi de hidrogen. Structura teriar se refer la asamblarea formelor
elementare n spaiul tridimensional i plierea catenelor polipeptidice.
Majoritatea aminoacizilor polari se dispun la exteriorul moleculei, iar aminoacizii
nepolari la interior, formnd o zon hidrofob intern. Structura cuaternar apare la
majoritatea enzimelor care sunt alctuite din mai multe catene polipeptidice identice
(enzime homomultimerice) sau diferite (enzime heteromultimerice), asocierea
protomerilor facndu-se prin legturi de hidrogen, interaciuni electrostatice, forte
Van der Waals.
Ca orice protein, enzimele se pot denatura ca urmare a unor modificri la nivelul
structurilor secundare i teriare.
Componenta proteic a enzimelor se caracterizeaz prin urmtoarele:
- este nedializabil i termolabil;
- confer specificitatea de substrat pentru activitatea unei enzime;
26
- conine situsul catalitic i pe cel la care se leag efectorii n cazul enzimelor
allosterice;
- determin legarea substratului la situsul catalitic i a efectorilor la alt situs.
Caracteristicile cofactorilor
Cofactorii sunt compui cu structura chimica variat deriva i de la vitamine sau ioni
metalici, legai mai labil de partea proteic (coenzime) sau fiind intim asociai cu
aceasta prin legturi covalente (grupe prostetice).
Tabel 4.1 Exemple de cofactori enzimatici
Ioni Enzima Coenzim Grupa Enzima
metal a transferat
ici
2+ +
Cu Citocrom NAD H+ Lactat
2+
Zn oxidaza FAD H+ dehidrogenaza
2+
Mg Alcool PALPO NH2 Succinat
2+
Mn dehidrogenaz Biotina CO2 dehidrogenaza
+
K a FH4 -CHO Aspartat
2+,
Fe Hexokinaza -CH3 aminotransferaz
3+
Fe Arginaza a
Piruvat PropionilCoA
kinaza carboxilaza
Catalaza Timidilat
Peroxidaza sintaza
Sisteme multienzimatice
Exista ci metabolice n care toate enzimele ce catalizeaz reacii individuale sunt
asociate sub forma unor sisteme multienzimatice (enzime polifuncionale). Acestea
sunt sisteme proteice complexe capabile s foloseasc mai multe coenzime diferite.
Sunt fixate prin legturi slabe, n ordinea corespunztoare intrrii n aciune, pe o
protein central, ce poate fi chiar una dintre enzime.
Exemplul cel mai elocvent este reprezentat de complexele implicate n decarboxilarea
oxidativa a -cetoacizilor: piruvat dehidrogenaza, -cetoglutarat dehidrogenaza
formate dintr-un ansamblu proteic, patru coenzime (TPP, NAD +, acid lipoic,
coenzima A) , ionul
Mg2+, cu participarea final a NAD+. Un alt exemplu este acid gras sintaza care
intervine n biosinteza acizilor grai format din 7 enzime legate de o protein.
27
Izoenzime
Sunt enzime care n plasm prezint dou sau mai multe forme moleculare. Aceste
variante sunt cunoscute ca i izoenzime i dei ele au structuri diferite au aceeai
funcie catalitic. Toate catalizeaz aceeai reacie, dar cu viteze diferite.
Catalizeaz aceeai reacie, dar au proprieti fizicochimice, cinetice, imunologice
diferite.
Pe baza acestor proprieti pot fi detectate i separate prin electroforez i
cromatografie.
Din punct de vedere structural, sunt oligomeri formai din subuniti identice sau
diferite.
Se cunosc izoenzime pentru oxidaze, dehidrogenaze, fosfataze, transaminaze.
Exemple:
a) Lactat dehidrogeneza (LDH) izoenzime (informatii generale)
LDH este o oxidoreductaza ce participa la glicoliza anaeroba, cataliznd reacia
reversibil de conversie a acidului lactic n acid piruvic. Este o enzim citoplasmatic
tetrameric, compus din subuniti H (Heart) i M (Muscle), larg distribuit n
organism, fiind ntlnit cu precadere n rinichi, miocard, musculatura scheletic,
creier, eritrocite, ficat i plmni.
LDH este un indicator nespecific de lezare tisular. Pentru a identifica sursa creterii
nivelului enzimatic sunt necesare izolarea i cuantificarea celor 5 fractiuni diferite ale
LDH-ului rezultate prin combinarea n diferite proporii a celor dou tipuri de
monomeri H si M: LDH-1 (H4), LDH-2 (H3M), LDH-3 (H2M2), LDH-4 (HM3) si
LDH-5 (M4).
b) Fosfataza alcalina-izoenzime (informatii generale)
Fosfataza alcalina (ALP) este o enzim ce face parte din clasa hidrolazelor
(ortofosfomonoesterfosfohidrolaza). Serul uman conine un amestec variabil de
izoenzime ale fosfatazei alcaline (ALP) provenite n principal din ficat, intestin,
rinichi i os, la care se adauga n timpul sarcinii o forma tranzitorie, forma
placentar. Anumite tumori maligne pot, de asemenea, produce o izoenzima ALP-7.
Fosfataza alcalina de origine osoasa ostaza este o glicoprotein tetramerica
care se gsete pe suprafaa osteoblastului i intervine n calcificarea matricei
osoase, fiind cunoscut ca un indicator sensibil i fidel al metabolismului osos. Are
un timp de injumatire lung. Un nivel ridicat al izoenzimei osoase este intlnit in
perioada de cretere osoas, n cursul procesului de vindecare a fracturilor, ct i n
afeciuni ale sistemului osos caracterizate prin hiperactivitate osteoblastic i
remodelare osoas cum ar fi boala Paget, rahitism, osteomalacie, acromegalie,
osteosarcom, sarcom Ewing, metastaze osoase (n special asociate cu carcinom
prostatic i mamar) 4;5;6.
c) Creatin- fosfokinaza(CK) este localizat cu preponderena n musculatura
scheletic, miocard.
S-au pus n eviden 3 izomeri:
1. CK/HM-de origine muscular i miocardic,
28
2.CK/BB gsit n esutul cerebral
3.CK/MB provenit din miocard.
Aceast enzim catalizeaz formarea ATP din creatinfosfat i ADP i se inactiveaz
foarte repede prin oxidarea gruprilor SH.
29
1. Preparatele enzimatice microbiene
nsuirea anumitor mucegaiuri i bacterii de a produce n cursul dezvoltrii lor, ca de
altfel i cerealele care germineaz, enzime amilolitice este de mult timp cunoscut n
trile din Asia, n special Japonia i China. Astfel pentru prepararea buturii sake din
orez se foloseste un amestec de mucegaiuri productoare de enzime. Primul procedeu
de zaharificare a porumbului pentru obinerea bioetanolului, care s-a bazat pe
folosirea enzimelor microbiene, procedeul Amylo, a aprut la sfritul secolului trecut
n Frana,
servindu-se de o cultur pur din mucegai.
Triferment, drajeuri . Categoria: Medicamente
Compoziie Drajeuri coninnd tripsina 18 u.W., lipaza 6 u.W. i amilaza (putere
amilolitic) 6,5 g. Aciune terapeutica, preparat enzimatic digestiv, cuprinde fermeni
pancreatici, proteolitici, lipolitici i amilolitici.
Indicaii: pancreatit cronic, fibroza chistic pancreatic (la copii), dispepsii de
putrefacie i fermentaie, tulburri digestive prin exces alimentar la bolnavii cu
insuficien secretorie a pancreasului (profilactic i curativ), tulburri digestive n
cursul tratamentului cu sulfamide sau antibiotice cu spectru larg.
Drajeuri. Categoria: Medicamente
Compoziie. Pancreatin 100 mg .Papain 25 mg. Extract liofilizat de aloe vera 5 mg .
Aciune terapeutic. Preparat enzimatic digestiv rezultat prin asocierea enzimelor
pancreatice (amilaze, lipaze, proteaze) cu un extract obinut din fructele plantei
Carica papaya i un extract liofilizat de aloe vera. Aceasta asociere aduce n
organism un surplus de enzime sub forma de amestec: cele de origine animal
(enzime pancreatice) cu cele de origine vegetala (prezente n fructele de Carica
papaya), obinndu-se un sinergism de aciune la nivelul tractului digestiv. enzimele
digestive prezente n extractul Carica sunt papaina (cu aciune similar pepsinei,
denumit pepsin vegetal i care solubilizeaz proteinele), renina (ce descompune
proteinele din lapte) i o enzim similar peptidazelor (care stimuleaz declan area
digestiei). Extractul de Carica papaya prezinta i o usoara aciune antiulceroas. La
aceste enzime se asociaz extractul de Aloe vera care la
Fermeni pancreatici Categoria: Medicamente
Compoziie: Un drajeu conine pancreatina 275mg (echivalent cu o activitate
enzimatic minim per drajeu, de: 18 u.W activitate proteolitica, 6 u.W activitate
lipolitica si 6.5g activitate amilolitica) si excipieni: amidon de porumb, zahar,
gelatina, talc, acetoftalat de celuloza, polisorbat 80, polietilenglicol 400, carbonat de
calciu, colorant Subset Yellow (E 110), ceara galbena, ceara carnauba. Descrierea
produsului: fermeni pancreatici este un preparat enzimatic digestiv, cuprinde
fermeni pancreatici: proteolitici, lipolitici si amilolitici. Acest produs asigura
dizolvarea grsimilor, proteinelor si carbohidrailor, ajuta digestia si menine tractul
digestiv in stare optima. Indicaii: Este indicat ca tratament in: - pancreatita cronica; -
Fibroza chistica pancreatica (la copii); - Tulburrii digestive prin exces alimentar la
bolnavii cu insuficena secretorie a pancreasului (profilactic si curativ); - Dischinezie
biliar; - Colite i enterocolite.
Kreon 10 000, capsule Categoria: Medicamente
30
Compoziie Capsule a 150 mg pancreatina in minimicrosfere cu inveli enteric
(echivalent cu 10 000 uniti Ph. Eur. lipaza, 8 000 uniti Ph. Eur.amilaza, 600 uniti
Ph. Eur. proteaze totale); cutii cu 20, 50 capsule. Aciune terapeutic. Secre ia
enzimatic pancreatic absenta sau redusa (mai mica dect 10% din normal) necesit
tratament de substituie. enzimele pancreatice ingerate pe cale oral sunt necesare
pentru descompunerea nutrienilor n vederea digestiei. Lipaza descompune
graimile, amilaza descompune glucidele, iar proteaza determina descompunerea
proteinelor. Capsulele se dizolva n stomac n cateva minute i elibereaz sute de
minimicrosfere. Toate minimicrosferele au un inveli enteric, pentru a proteja
enzimele, n special lipaza, de la degradare i denaturare de ctre sucul gastric. Prin
aceasta form galenic se obine un amestec omogen cu chimul gastric. Dimensiunea
minimicrosferelor este important pentru asigurarea trecerii prin pilor n timpul
fazei
Oxireductaze (Dehidrogenaze)
Acea clasa de oxireductaze care catalizeaz reacia redox cu transfer de H2 adic au
nite coenzime care joac rolul de acceptori intermediari de H 2 ntre substrat i
produsul final.
Glicoliza este procesul biochimic enzimatic de degradare a glucozei, respectiv
procesul de oxidare intracelular a glucozei n scopul obinerii de energie sub form
de ATP necesar celulelor eucaritote vegetale i animale.
Se realizeaz pe 2 cai metabolice :
32
a) Anaerob are loc n citoplasm i se desfoar sub prezena O2 , dar fr
participarea lui i const n degradarea glucozei pn la acid lactic ca produs final
rezultnd o cantitate mic de energie sub form de ATP;
b) Glicoliza aeroba se realizeaz n condiiile participrii directe a O2 i const n
degradarea glucozei pn la produi finali CO2, H2O i o cantitate mare de energie
sub formade ATP.
Glicoliza anaeroba reprezint succesiunea de reacii enzimatice care se petrec n
condiiile aprovizionri insuficiente cu oxigen a esutului muscular .este un proces
rapid de generare a unei cantiti relativ mici de energie rezultnd totodat i
produi de metabolism ce pot fi utilizai n reaciile de biosinteza .
Oxireductazele catalizeaz reaciile biochimice de oxidoreducere. Oxidoreducerea
este un proces de transfer de electroni de la un donor la un acceptor cu trecere de la
forma redus la forma oxidat.
Atomii de hidrogen sunt donori de electroni n sistemele biochimice.
Oxidoreductazele sunt sisteme redox capabile de a se transfera reversibil din forma
redus n cea oxidat prin transfer de atomi de hidrogen sau de electroni.
Oxidoreductazele cu transport de hidrogen sunt numite i dehidrogenaze (aceste
enzime particip la dehidrogenarea substratului). Acestea sunt enzime ce au n
structur
coenzime. Catalizeaz procesele celulare de oxidoreducere, procese ce se desfoar
prin transport de hidrogen, electroni i oxigen de la un substrat donor la acceptor.
DH2 + A D + AH2
Dehidrogenaze-catalizeaz (de obicei reversibil) transferul de hidrogen de la un
substrat donor de hidrogen(notat DH2) la acceptorul de hidrogen(notat A)
DH2 + A D + AH2
Denumirea sistematic: donor de echivaleni reductori: acceptor eechivaleni
reductori oxidoreductaze.
Oxidaze sau oxigenaze = catalizeaz scoaterea hidrogenului de pe un substrat (DH2)
utiliznd oxigenul ca acceptor.
Produi de reacie: apa (H2O) sau peroxidul de hidrogen (H2O2).
DH2(Red) O2 DH2
O2
Oxidaze
(Oxigenaze)
Oxidaze
D(Ox) H 2O D
H2O2
33
A. Dioxigenaze ncorporeaz ambii atomi de oxigen n molecula substratului(notat
D):
B. Monooxigenaze sau hidroxilaze catalizeaz ncorporarea unui singur atom de
oxigen n molecula de substrat (notat, n acest caz, DH), iar cellalt este redus la ap:
unde DH substrat donor de hidrogen; AH2 cosubstrat donor de hidrogen; D-OH
este substrat hidroxilat.
34
c) Prima schem care se termin cu
Mecanismul redox este axat pe nucleul piridinic, motiv pentru care notnd cu -R
restul moleculei, procesul redox poate fi prezentat astfel:
8.5. Transferaze
Sunt enzime care catalizeaz reacii de transfer a unor grupri (resturi de molecule)
de pe un substrat pe altul, dup reacia general:
SA + S!BSB + S!A (sau cea de sub linie)
Dup natura chimic a radicalului sau a gruprii funcionale transferate distingem
urmtoarele subclase:
metiltransferaze (transfer radicalul metil CH3 -);
aciltransferaze (transferaze grupare acil R-CO-; acil coenzima A);
aminotransferaze (transfer gruparea funcional amino - NH2);
glicoziltransferaze (transfer gruprii glicozil);
fosforiltransferaze (transfer gruprii fosfat).
Coenzimele transferazelor sunt numeroase::piridoxal fosfatul, tiamin pirofosfatul,
coenzima A, acizii folici, coenzimele B12, biotina, S-adenozil metionina, nucleotid
polifosfai (ATP), formele active ale unor compui (UDP-glucoza, CDP-colina) etc.
Exemplu: EC 2.7.1.2 ATP: D-glucozo-6-fosfotransferaza (glucokinaza)
D-glucoza + ATP = D-glucozo-6-fosfat + ADP
n cazul transferazelor de grupe fosfat denumirea face obligatoriu referire la
acceptor.
2.7.1-alcool, 2.7.2.-carboxil, 2.7.3-grupa cu azot.
Pentru fosfotransferazele ce necesit ATP ca donor de grupe fosfat se mai
utilizeaza denumirea uzuala kinaza.
36
8.6. Hidrolaze
n biochimie, o hidrolaz este o enzim care catalizeaz hidroliza unei legturi chimice. De
exemplu, o enzim care catalizeaz urmtoarea reacie este o hidrolaz:
AB + H2O AOH + BH
Sunt enzime care catalizeaz ruperea legturilor moleculare ale unor substane cu ajutorul apei
(hidroliz). Dup natura legturii scindate distingem urmtoarele subclase:
esteraze (lipaze cnd hidrolizeaz lipide, ribonucleaze cnd hidrolizeaz fosfoesteri);
Esterazele sunt enzime care catalizeaz reacia reversibila de scindare a legturilor esterice cu
formarea acidului i alcoolului corespunzatori.
Aceste enzime au o specificitate mica n raport cu substratul i ca urmare microlizeaz cu viteze
comparabile un numar mare de esteri.
Exist mai multe tipuri de esteraze n funcie de natura chimic a acidului care particip la formarea
legturilor ester.
Carboxilesterazele enzimele care catalizeaz scindarea hidrolitic a esterilor carboxilici. Din
aceasta categorie fac parte:
Lipazele sau, conform denumirii sistematice, glicerol-ester-hidrolaze, care catalizeaz hidroliza
gliceridelor dup reacia:
diglicerida + acid gras triglicerida + H2O
Lipazele nu au o specificitate strict, dar viteza de aciune catalitic variaz cu originea diverselor
lipaze. Au o specificitate n funcie de lungimea catenei acizilor grai i posed o selectivitate n
funcie de configuraia subtratului. Posed, de asemenea, o specificitate stereochimic, unul din
izomerii optici ai aceluiai substrat putnd fi atacat cu o vitez mai mare dect cellalt.
Lipazele scindeaz toti cei trei acizi grai ai gli
Aciunea lipazelor are o mare importan pentru pstrarea alimentelor (finurilor, crupelor),
mai ales a celor ce conin cantiti mari de lipide. Prin aciunea acestor enzime, n timpul
depozitrii produselor alimentare, se produce o rapid descompunere a gliceridelor n acizi
grai i glicerol, ceea ce conduce la o cretere a aciditii produselor i la deprecierea lor
calitativ.
Fosfolipazele sunt esteraze care catalizeaz reacia de scindare hidrolitic a acizilor grai din
glicerofosfolipide (fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina).
Fosfolipidele sunt grsimile inteligente din creierul nostru. Ele sunt experte n izolare, ajutnd
la producerea unei substane numita mielina care formeaz o teac n jurul nervilor, asigurnd astfel
o propagare silentioas a semnalelor din creier.
Ele ajuta la furnizarea nutrimentelor care sunt implicate ntr-un proces cheie al organismului.
Ne mbunatesc dispoziia, mintea i performanele intelectuale, dar ne i protejeaz mpotriva
declinului memoriei.
Surse importante de fosfolipide sunt sardinele, ouale(cele de la ginile care au fost hrnite cu
semine de in sau concentrate din fin de pete), boabele de soia, arahidele i alte fructe
oleaginoase.
37
Amilaza seric face parte din categoria hidrolazelor, subgrup de enzime ce catalizeaz
degradarea hidrolitic a amidonului, glicogenului, poli- i oligozaharidelor.
Amilaza este o enzim de secreie exocrin care este prezent in ser sub dou forme principale:
izoenzima pancreatic (40% din amilaz seric total) i izoenzima salivar (60% din amilaza
seric totala). Enzima mai este prezent in cantiti mult mai mici n ficat, sucul duodenal,
intestinul subire, trompele uterine i muchii scheletici.
Fosfataza alcalin (ALP) este o enzim ce face parte din clasa hidrolazelor
(ortofosfomonoesterfosfohidrolaza). Serul uman conine un amestec variabil de izoenzime ale
fosfatazei alcaline (ALP) provenite n principal din ficat, intestin, rinichi i os, la care se adaug n
timpul sarcinii o forma tranzitorie, forma placentar. Substanele transformate n aceste reacii se
caracterizeaz printr-o tendin limitat de reacie "in vitro" n aceleai condiii cu cele din
organism.
De exemplu, oxidarea glucozei n celule se realizeaz rapid, glucoza fiind un compus ce
nmagazineaza o mare cantitate de energie prezentnd un anumit potenial termodinamic, dei n
laborator, n aceleai condiii ca cele din organism, aceasta este stabil n prezena oxigenului.
Astfel de procese, favorabile termodinamic, pot decurge cu viteze crescute datorit aciunii
catalitice a enzimelor.
Colinesterazele scindeaz hidrolitic esterii colinei, prezeni ndeosebi n esutul nervos, sinapse,
eritrocite. Astfel, aciunea acestor enzime se descompune : acetilcolina, mediatorul chimic care
faciliteaz transmiterea influxului nervos de la nervii motori la muchii striai.
Colinesteraza serica este o enzim care provine din ficat, pancreas, cord i creier (substana
alba), de unde este eliberat n snge.
Din punct de vedere clinic, colinesteraza este folosit n principal ca un indicator al unei
posibile intoxicaii cu insecticide. La persoanele care lucreaz cu insecticide ceridei, nsa nu
simultan, ci succesiv, fapt foarte important pentru procesul de absorbie a lipidelor.
Lipazele sunt enzime foarte rspndite n natur. n organismul animal se gsete
lipaza n sucul pancreatic, ficat, snge, limfa i n lapte. Plantele oleaginoase conin,
de asemenea, lipaze foarte active (n ricin, soia, floarea soarelui). O serie de
mucegaiuri i bacterii reprezint surse bogate n lipaze, fiind folosite pentru
biosinteza carboxilesterazelor i obinerea preparatelor enzimatice de acest tip.
Trebuie ns menionat c lipazele de diferite proveniene se deosebesc ntre ele sub
aspectul proprietilor i caracterului aciunii. ce conin fosfor scderea acestei enzime din
snge este att de puternic, nct poate pune viata n pericol.
glicozidaze (cnd scindeaz prin hidroliz legturi glicozidice);
peptidaze (cnd scindeaz prin hidroliz legturi peptidice).
8.7.Liaze
Sunt enzime care catalizeaz reacii de scindare a unor legturi chimice n absena apei sau procese
de oxido-reducere. Liazele pot determina ruperea urmtoarelor legturi:
legtura C C (cele mai importante sunt decarboxibazele, care catalizeaz eliminarea CO2 de pe
substrat);
legtura >C=O (cele mai importante sunt aldolazele care determin scindarea compuilor
carbonilici);
legtura C - N.
8.3.5. Izomeraze
Sunt enzime care catalizeaz izomerizarea diferitelor substraturi biologice. Ele pot contribui la
transformarea aldozelor n cetoze i invers,a formelor ceto-enolice etc.
8.3.6. Ligaze
38
Sunt enzime care catalizeaz reacii de sintez, formarea de noi legturi. Formarea noilor legturi
se face cu consum de energie, motiv pentru care reaciile catalizate de ligaze sunt cuplate cu
reaciile de scindare a unor compui macroergici (ATP). Aceste enzime pot cataliza:
formarea legturii C - C (carboxilazele prin cataliza reaciilor de introducere a unei molecule de
CO2 n molecula altor substane);
formarea legturii C - S (sunt enzime care sintetizeaz formarea acil-coenzimei A
plecnd de la acizii carboxilici prin mecanismul:
Caracteristicile cofactorilor
Cofactorii sunt compui cu structura chimica variat derivai de la vitamine sau ioni metalici,
legati mai labil de partea proteic (coenzime) sau fiind intim asociati cu aceasta prin legturi
covalente (grupe prostetice) (Tabel 4.1).
Acestia se caracterizeaza prin urmatoarele:
sunt termostabili;
sunt dializabili;
sunt indispensabili pentru desfurarea activitatii enzimei;
confera specificitatea de reacie pentru o enzim;
intervin n reacie inducnd conformaia optim a enzimei, favoriznd aranjamentul adecvat
reaciei sau transfernd electroni sau grupe chimice.
Sisteme multienzimatice
Exista ci metabolice n care toate enzimele ce catalizeaz reacii individuale sunt asociate sub
forma unor sisteme multienzimatice(enzime polifuncionale). Acestea sunt sisteme proteice
complexe capabile s foloseasc mai multe coenzime diferite. Sunt fixate prin legturi slabe, n
ordinea corespunztoare intrrii n aciune, pe o protein central, ce poate fi chiar una dintre
enzime.
Tabel 4.1 Exemple de cofactori enzimatici
Ioni Enzima Coenzima Grupa Enzima
metali transferata
ci
Cu2+ Citocrom NAD+ H+ Lactat
Zn2+ oxidaza FAD H+ dehidrogenaza
39
Mg2+ Alcool PALPO NH2 Succinat
Mn2+ dehidrogenaza Biotina CO2 dehidrogenaza
K+ Hexokinaza FH4 -CHO Aspartat
Fe2+, Arginaza -CH3 aminotransferaza
Fe3+ Piruvat kinaza PropionilCoA
Catalaza carboxilaza
Peroxidaza Timidilat sintaza
Exemplul cel mai elocvent este reprezentat de complexele implicate n decarboxilarea oxidativa a
-cetoacizilor: piruvat dehidrogenaza, -cetoglutarat dehidrogenaza formate dintr-unansamblu
proteic, patru coenzime (TPP, NAD+, acid lipoic, coenzima A) ,
ionul Mg2+, cu participarea final a NAD+. Un alt exemplu este acid gras sintaza care intervine n
biosinteza acizilor grai formata din 7 enzime legate de o protein.
uncionale specifice, ai atomilor sau ai electronilor.
Localizarea intracelulara a enzimelor
n celula, enzimele sunt localizate specific n anumite compartimente fie n organite celulare, fie
n citoplasm.
Separarea organitelor celulare prin ultracentrifugare urmat de identificarea specific a enzimelor
prin tehnici imunohistochimice a reprezentat modalitatea prin care s-a stabilit exact localizarea
intracelulara a enzimelor.
1. Unele procese au loc n toate tipurile de celule, enzimele respective fiind rspndite
ubicuitar(prezent pretutindeni), cum ar fi de exemplu, enzimele mplicate n biosinteza proteinelor
i acizilor nucleici, enzimele glicolitice.
2. Alte procese au loc numai n anumite celule, ca urmare numai acestea posed echipamentele
enzimatice specifice. De exemplu, enzimele implicate n sinteza hormonilor tiroidieni sunt numai
n tiroida, enzimele implicate n biosinteza ureei se gsesc numai n celulele hepatice.
3. Fiecare organ se caracterizeaz printr-un profil enzimatic reprezentat de enzimele care gsesc n
diferitele compartimente din celul.
Membrana celulara conine enzime implicate n transportul substanelor.
Mitocondriile prezint enzime ce catalizeaz procese generatoare de energie: membranele extern
i intern conin enzimele implicate n lanul respirator, sinteza
fosfolipidelor, elongarea i desaturarea acizilor grai, iar matricea mitocondrial conine
enzimele ciclului Krebs, enzimele implicate n decarboxilarea oxidativ a cetoacizilor
catabolismul acizilor grai, dezaminarea aminoacizilor, biosinteza ureei.
Nucleul conine enzimele implicate n metabolismul acizilor nucleici.
Ribozomii abund n enzime implicate n diferitele faze ale biosintezei proteinelor. Ribozomii
liberi sintetizeaz proteinele celulare, iar cei fixai de reticulul endoplasmatic, proteinele de export.
Citoplasma conine enzimele glicolitice, cii pentozofosfailor, enzimele din biosinteza acizilor
grai, a nucleotidelor etc.
Lizozomii abundeni n ficat, rinichi, globule albe contin hidrolaze:
enzime proteolitice, ribonucleaze, enzime care hidrolizeaza proteoglicanii,
sfingolipidele.
Complexul Golgi conine enzime implicate n exportarea proteinelor sintetizate n reticulul
endoplasmatic i maturarea glicoproteinelor i proteoglicanilor.
Unele enzime au localizare mixt, citoplasmatica i mitocondrial, cum sunt transaminaza glutamic
oxalilacetica, malat dehidrogenaza, izocitrat dehidrogenaza.
Centrul activ al enzimelor
Procesul enzimatic nu se desfoar oriunde n molecula enzimei, ci numai n anumite zone care au
o dispoziie spaial corespunztoare, alctuite din 2-4 aminoacizi. Aceste zone se numesc "centri
activi" i reprezint aranjamentul spaial adecvat "prinderii" a substratului.
Legarea substratului la centrul activ al enzimei i imprim o stare de tensiune molecular care
faciliteaz reacia biochimic. n centrul activ se gsesc numai anumiti aminoacizi care prezint
grupe -OH, - SH, - COOH, -NH2, radical imidazol (de exemplu, serina, histidina, acid aspartic,
lisina).
40
n cazul enzimelor cu structur binar, n centrul activ se poate distinge un situs de fixare care se
combin cu substratul prin legturi labile (la formarea caruia particip
aminoacizi auxiliari) i un situs catalitic (format din aminoacizii colaboratori care acioneaz
asupra substratului), important pentru aceast interaciune fiind prezena cofactorilor. Aminoacizii
care nu sunt implicai in reacia enzimatica suntaminoacizi necolaboratori. Functionalitatea
centrului catalitic este consecin/a structurii spatiale a proteinenzimei care prin dispoziia sa n
spatiu aduce anumii aminoacizi distantai n structura primar ntr-o poziie optim pentru legarea
substratului (Fig.4.1)
Fig. 4.1.
41
3. Enzimele se caracterizeaz printr-o mare specificitate. Orice enzim este foarte selectiv att n
ceea ce privete substana pe care o transform (substrat) ct i din punctul de vedere al reaciei
catalizate.
E (enzima) Transformarea SP (produsi) se desfoara fr reactii secundare, astfel
c rezult numai compuii dorii.
Prin aceast aciune enzimele se deosebesc de catalizatorii din chimia organica, reaciile
desfurate n absena enzimelor avnd randamente mai scazute i fiind insoite de reactii
secundare.
4. Enzimele scad energia de activare a moleculelor de substrat pe care le transform accelernd
astfel viteza reaciei biochimice.
5. Capacitate de reglare. Reglarea activitii enzimatice se realizeaz n moduri diferite ce variaz
de la controlul cantitii de enzim sintetizate de celul pn la modularea activitii sale prin
interaciuni reversibile cu activatori i inhibitori metabolici. Activitatea variat a enzimelor poate fi
pus pe seama capacitii de adaptare structural i funcional a proteinelor. Enzimele contribuie
astfel la coordonarea i reglarea proceselor metabolice.
7. Enzimele se gsesc n celule i acioneaz n cantitate foarte mic, dar cu efect semnificativ.
8. Enzimele pot cataliza reaciile n condiiile organismului, la temperatura de aproximativ 37oC, n
condiii de n general neutru i la presiune atmosferic.
ntrebri:
8.1. Care este diferena dintre o recie catalizat de un catalizator chimic i una catalizat de o
enzim?
8.2. Ce este situsul activ al unei enzime?
8.3.Explicai de ce reaciile enzimatice necesit o temperatur optim i un pH optim?
8.4. Care este semnificaia termenului de coenzim?
8.5. Care atom n NAD+ i NADP+ este responsabil de sarcina pozitiv?
8.6.Caracteristica fiecrei grupe de enzime.
8.7. Rolul biologic al enzimelor.
8.8. Exemple la fiecare grup de enzime
Capitolul 9 Hormoni
9. 2. Clasificarea hormonilor
Clasificarea hormonilor se face n funcie de raza de aciune, solubilitate, structura chimica, locul
de sinteza i in funcie de interdependina sistemului endocrin cu cel nervos
Hormoni endocrini
Hormonii endocrini respect definiia clasic fiind sintetizai i secretai de celule specializate
urmnd s ajung la celula inta prin intermediul sistemului circulator legai de proteine
transportoare n cazul hormonilor hidrofobi sau liberi n snge n cazul hormnilor hidrofili.
Clasificare hormonilor in funcie de solubilitate. In funcie de solubilitate hormonii se pot clasifica
n hormonii hidrosolubili (hidrfili) i hormoni liposolubili (hibrofobi). Hormonii
liposolubilinecesit proteine transportoare pentru a fi vehiculai prin snge pn la nivelul celulei
int, de asemenea aceti hormoni prezint capacitatea de a traversa bistratul lipidic al membranei
celulare, ptrunznd n interiorul celulei unde se afl receptori specifici fie n citoplasma, fie legai
de cromatin la nivelul nucleului. Hormonii hidrosolubili circul liberi prin sistemul circulator nsa
nu pot traversa membrana celulara. Receptori pentru acest tip de hormoni se afla ncorporai n
membrana celulara, determinnd producia de mesageri secunzi la nivelul spaiului citoplasmatic
hormonul, fiind considerat mesager primar.
Hormonii hidrosolubili sunt:
-hormonii peptidici;
-hormonii proteici.
Hormonii derivai din aminoacizi
Hormoni liposolubili
Hormonii steroizi
Hormonii tiroidieni
Clasificarea hormonilor dup structura chimic.
Hormoni derivati din aminoacizi
Hormonul Aminoacid precursor Loc de sinteza
Dopamina Tyrozina Hipotalamus, medulosuprarenala
Adrenalina Tirozina medulosuprarenala
Noradrenalina Tirozina medulosuprarenala, nervi periferici
Hormoni polipeptidici, proteici si glicoproteici
Numr de resturi
Hormon Loc de sinteza
aminoacidice
Oxitocina 9 Neurohipofiza
Celule A
Glucagonul 29
()pancreatice
44
Celulele B
Insulina 51
()pancreatice
Hormonii steroizi sunt hormoni ce au ca precursor comun colesterolul
1. Estradiol 2. Estrona testosteron 3. Cortisol 4. Aldosteron
45
Glanda hipofiza este denumita si "glanda sef" datorit rolului important pe care l au unii din
hormonii secretai de ea n controlul secreiei celorlalte glande ca i a legturii directe pe care o are
cu centrul de control al sistemului nervos - hipotalamusul (prin sistemul sanguin port hipotalamo -
hipofozar). Hipofiza este situata intr-o depresiune a osului sfenoid (os component al craniului)
numita a turceasca si este alctuit din 3 pri : o parte anterioar care secret ase hormoni
peptidici (hormonul de cretere - STH cu rol important n dezvoltarea oaselor i a cartilagiilor,
patru hormoni cu rol n controlul activitii glandelor suprarenale - ACTH, tiroida - TRH, ovare i
esticule - FSH i LH i prolactina cu rol n dezvoltarea snilor i lactaie), o parte intermediara
care secreta hormonul melanostimulant (melatonina este un pigment aflat n celulele pielii i care
determin aspectul bronzat al acesteia) si o parte posterioara care este responsabila de eliberarea in
circulaie a hormonilor : vasopresina sau hormonul diuretic deoarece are rol in absorbia apei de la
nivelul rinichilor, absenta lui duce apariia diabetului insipid, boala in care pacientul are o urina
foarte diluata si in cantitate mare si oxitocina - hormon care stimuleaz celulele musculare ale
uterului gravid i contribuie la expulzia ftului i care de asemenea determin prin aciunile lui i
ejecia laptelui.
Hipotalamusul, componenta a sistemului nervos central este considerat si glanda endocrina
deoarece secreta hormoni care asigura controlul nervos al hormonilor secretai de hipofiza si
implicit si al celor al altor glande endocrine.
Tiroid, glanda situata in regiunea gatului intre trahee si laringe produce si secreta trei hormoni
tiroxina (T4) si triiodotironina (T3) importani pentru creterea i dezvoltarea normal i
armonioas a organismului, cu efecte pe metabolismul glucidelor, proteinelor i lipidelor cu
producere de energie, calcitonina fiind cel de-al teilea hormon tiroidian, rolul principal fiind
prevenirea creterilor de calciu seric peste limita normal.
Paratiroidele in numr de patru, situate la polii lobilor tiroidieni secreta parathormonul - hormonul
metabolismului fosfo-calcic (rol in dezvoltarea osului, dar mai ales in contracia tuturor muchilor -
extirparea paratiroidelor este incompatibila cu supravieuirea).
Glandele suprarenale, aflate la polul superior al rinichilor produc i elibereaz n circulaia
sanguin numiii hormoni mineralocorticoizi - aldosteronul care retine sodiul in organism,
glucocorticoizi - cortizolul, important pentru metabolizarea glucidelor, proteinelor si grsimilor, n
cretere i dezvoltare, n aprarea mpotriva infeciilor, mici cantiti de hormoni sexuali androgeni.
Pancreasul endocrin are rol in reglarea valorilor glucozei sanguine prin hormonii si insulina
(anomaliile in secreie sau in rspunsul celulelor int la aciunile ei duc la diabet zaharat) i
glucagonul.
Testiculele secreta hormoni androgeni - testosteronul care determina dezvoltarea i meninerea
caracterelor secundare masculine (pilozitate, aspect fizic, voce etc.), promoveaz creterea,
particip la formarea spermei, determin caracterul agresiv i creterea libidoului.
Ovarele produc hormoni steroizi importani n dezvoltarea caracterelor sexuale secundare
feminine, in dezvoltarea si meninerea funciei reproductive a femeii, estrogenii care acioneaz pe
musculatura uterina, cresc libidoul, scad nivelul colesterolului ceea ce duce la protecie mpotriva
ateromatozei vasculare i progesteronei cu rol n dezvoltarea esutului mamar, a modificrilor
endometrului n timpul ciclului menstrual.
Epifiza secret melatonina important n mecanismul somn - veghe.
Dup cum se poate observa subiectul este exterm de vast, dereglarile chiar minime ale oricreia
dintre aceste glande influentnd intregul organism datorit numeroaselor interrelaii existente astfel
nct duc la o simptomatologie extrem de divers. Un diagnostic cert n cazul unei eventuale
afeciuni endocrine se poate face numai prin colaborarea medic de familie - medic endocrinolog.
Hormoni suprarenalieni
Epinefrina (adrenalina) Hormonul epinefrina, cunoscut si sub numele de adrenalina, este un fluid
eliberat de glanda suprarenala. Acesta joaca un rol important n ncercarea organismului de a
reaciona n situaii de urgen. Adrenalina gsesc ca un neurotransmitor. Un neurotransmitor
transfera si reglementeaz semnale ntre neuroni i alte celule ale corpului. Rspunsul fight-or-
flight" al corpului este iniiat de secreia de epinefrin. Sistemul nervos simpatic, o subdiviziune a
sistemului nervos autonom, este responsabil pentru generarea rspunsului.
46
Epinefrina este secretata sau declanat n anumite situaii, mai ales n stare de excitare sau stres.
Excitarea ce duce la secreia de adrenalina poate fi att de natur pozitiv ct i negativ. Anumii
factori externi, cum ar fi poluarea sonor sau luminile sxtralucitoare pot ridica, de asemenea,
nivelul de adrenalina din organism.
Efectele secreiei de adrenalin
Multe aciuni au loc dup ce adrenalina este eliberata n organism. Furnizarea de oxigen i glucoz
n muchi i creier ncepe s creasc. Exist o cretere n ce privete riscul producerii unui accident
vascular cerebral i creste ritmul cardiac. Volumul unui accident vascular cerebral se refera la
volumul sau cantitatea de snge pompat de ctre un ventricul n cadrul unei bti de inim. Secreia
de epinefrin conduce spre dilatarea pupilelor i constricia arteriolelor prezente n piele. Creterea
nivelului de zahar n snge este alt consecin a secreiei de adrenalina. Aceasta suprim, de
asemenea, funcionarea sistemului imunitar. Procesul de funcionare al sistemului digestiv ia si
acesta o pauz.
Noradrenalina sau norepinefrina, un hormon similar cu epinefrina este de asemenea eliberat atunci
cnd crete nivelul de stres. Principala diferena ntre epinefrin i norepinefrin este ca epinefrina
este responsabil pentru controlul tuturor esuturilor corpului n timp ce norepinefrina deine
controlul acelor pri ale creierului care sunt responsabile pentru relaia corp-minte i aciunile de
rspuns. Valorile crescute ale norepinefrinei sunt asociate cu anxietate, stres, tensiune arterial
crescut i hiperactivitate. Nivelurile sczute ale noradrenalinei pot cauza un nivel sczut de
energie, lipsa de concentrare i motivaiei. Att epinefrina ct i norepinefrina ajut la reglarea
ateniei, concentrrii mentale, excitrii i cognitiei.
47
Asocierea acestor dou pri constituie un proces unitar al metabolismului substanelor. n
consecin, metabolismul substanelor este unitatea proceselor contrare de alimentaie i eliminare,
absorbie i degradare, sintez i descompunere etc., adic unitatea proceselor de
asimilaie i dezasimilaie. Catabolismul reprezint, n primul rnd, descompunerea enzimatic a
macromoleculelor
hranei (proteine, lipide, glucide) care se desfoar cu precdere, pe seama reaciilor de hidroliz i
oxidare. Pe parcursul catabolismului se formeaz mai multe molecule mici (acid lactic, acid acetic,
CO2, NH3 etc.) ceea ce determin o eliminare de energie liber care se
nmagazineaz sub forma legturilor macroergice din ATP.
Anabolismul reprezint sinteza enzimatic a moleculelor relativ mari i a complexelor
supramoleculare din precursori simpli (sinteza polizaharidelor din monozaharide etc.), ceea ce
necesit un aport de energie furnizat de ATP. Catabolismul i anabolismul decurg simultan n celule
i sunt strns legate ntre ele; de exemplu, n descompunerea glucozei, prima reacie o reprezint
sinteza unui compus mai complex glucozo-6-fosfatul.Exist o mare varietate de cii anabolice i
catabolice: cile liniare, cele mai simple, unde produsul fiecrei reacii catalizate de o enzim este
substrat pentru urmtoarea; cile ciclice, care presupun cuplarea compusului A cu M, substana
rezultat fiind transformat pe parcursul mai multor etape n aa fel nct A este degradat la X, iar M
se regenereaz i poate s reacioneze cu o nou molecul de A; ci ciclice care se ntreptrund prin
intermediul unui compus; ci cu una sau mai multe bifurcaii . Caracteristic pentru procesele
catabolice ale glucidelor, lipidelor i proteinelor este
faptul c ele converg spre o cale final comun.
Cile anabolice prezint, dimpotriv, numeroase ramificri, ceea ce permite formarea dintr-un
numr mic de compui iniiali a unui numr foarte mare de compui celulari. Aceste caracteristici
ale catabolismului i anabolismului reflect un principiu fundamental al organizrii materiei vii,
respectiv o economie maxim a compuilor i reaciilor.
Determinnd natura chimic a substanelor care se elimin din organism sub form de produse
finale (uree, CO2, ap etc.) se caut s se afle cile, precum i transformrile chimice ale
substanelor iniiale, n urma crora rezult aceste produse finale.
Pentru studiul metabolismului este necesar de a cunoate nu numai produsele iniiale i finale,dar
i produsele i n t e r m e d i a r e ale transformrilor, precum i participarea anumitor organe la
realizarea acestor procese. Ca exemplu, urina conine totdeauna uree, care prezint unul din
produsele finale ale schimbului de aminoacizi, este important de a preciza n urma cror reacii,
cu participarea cror enzime, n ce consecutivitate, azotul din aminoacizi se transform n uree i ce
organe joac n acest proces rolul decisiv.
b) Principiile bioenergeticii.
48
autotrofe intr i bacteriile nitrificatoare fixatoare de azot i alte microorganisme de mai mic
importan: bacterii feruginoase, sulfuroase etc.Celelalte organisme, i n primul rnd animalele,
care necesit compui organicigata sintetizai se numesc heterotrofe.
Acelai caracter l au i majoritatea microorganismelor (bacterii,drojdii, mucegaiuri). n aceste
organisme, energiaptrunde, n special, sub forma energiei legturilor chimice ale compuilor
organici. Formarea substanelor proprii heterotrofelor decurge pe calea chimosintezei, adic a
sintezei pentru care energia se procur pe seama energiei compuilor chimici,care, de regul, sunt de
natur organic, n procesul descompunerii crora se i elibereaz energia necesar sintezei. Fiecare
compus organic care intr n constituia materiei vii posed un anumit potenial energetic total (H),
care grupeaz energia de legtur a atomilor (energia electronic), precum i energiile de vibraie,
de rotaie, de translaie. Biochimia se intereseaz mai puin de energia intern a unei molecule, dar
mai mult de variaia de energie n cursul unei reacii sau unui proces metabolic.Ca urmare, din
energia total, numai o parte (G) este disponibil i poate fi utilizat
pentru a efectua un travaliu. Aceast energie se numete energie liber.
Modificarea energiei libere a sistemului (G) la trecerea sa dintr-o stare n alta reprezint criteriul
de apreciere a transformrii chimice n conformitatea cu legile termodinamicii. Relaia dintre aceste
mrimi se poate prezenta astfel: H =G + TS unde: T este temperatura absolut; S variaia
entropiei sistemului;
H variaia entalpiei sistemului care corespunde variaiei energiei totale msurabil experimental
pe cale calorimetric, sub forma cldurii degajate sau absorbite.
Termenul TS exprim variaia energiei legate a sistemului, adic a acelei pri din energia total
care nu poate fi transformat ntr-o form oarecare de travaliu util(mecanic, chimic, electric, etc.), ci
rmne numai sub form de cldur i se disipeaz. Din relaia de mai sus, variaia energiei libere
este:G =H - TS
Cnd variaia energiei libere are loc n condiii standard (temperatura 25C, presiunea 1 atm,
concentraia 1 M i pH=7,0) se folosete termenul dG, iar energia liber pentru un compus dat se
noteaz Gs. Pentru un proces chimic: G=RT ln K n care R este constanta gazelor (8,31 J/mol),
iar K-constanta de reacie .Relaia dintre entropie (S) i energia liber arat sensul desfurrii unei
reacii. Pentru reaciile spontaneS>0 i G<0, pentru cele de echilibru (procesul numai are loc),
G=0 iS=0, iar pentru cele care nu se petrec spontan i este necesar energia din afara sistemului
pentru a le induce, S<0 iG>0. Toate reaciile n care crete entropia (S) i scade energia liber
(G) se petrec exergonic, adic sistemul cedeaz energie. Cu ct S are o valoare mai mare, cu att
gradul de ireversibilitate al reaciei respective este mai mare. Reaciile n care S scade i G crete
vor fi endergonice i vor necesita energie din afara sistemului pentru a se produce. Acest tip de
procese nu sunt posibile din punct de vedere termodinamic dac ele nu sunt legate de un sistem
exergonic n care entropia corespunztoare (S) crete att nct s compenseze micorarea ei n
sistemul endergonic. Energia liber i potenialul chimic apar n acest fel ca o msur a afinitii
chimice i ca indicatori ai sensului de desfurare a reaciilor biochimice. Sistemul care nu
se gsete n echilibru sufer modificri spontane numai dac prin aceasta energia liber se
micoreaz (ia natere o energie liber negativ). La echilibru nu au loc nici un fel de modificri
spontane ale energiei libere, iar scoaterea sistemului din echilibru necesit o energie suplimentar.
Principalii purttori de energie liber n compuii organici sunt legturile chimice dintre atomi. De
aceea, la formarea legturilor chimice ntr-o molecul, nivelul energiei libere a compusului se
modific. n general, nivelul energetic al unei legturi chimice care se formeaz sau se rupe ntr-o
molecul ce se transform se evalueaz prin modificarea nivelului energiei libere, care este egal cu
aproximativ 3 kcal/mol (12,5kj/mol). Un asemenea nivel al energiei libere se constat la
modificrile majoritii legturilor compuilor organici. Sunt i cazuri, ns, n care la formarea sau
ruperea unor legturi, nivelul energiei libere din molecula unor tipuri de compui organici poate
ajunge la 6 kcal/mol i chiar mai mult. O modificare sensibil a energiei libere standard (G) de
hidroliz se ntlnete, de exemplu, la unii compui fosforilai:
Compuii ale cror molecule conin legturi ce dau prin hidroliz o cantitate important din energia
liber se numesc compui macroergici , iar legturile la a cror transformare au loc puternice
modificri ale balanei energetice a substanei se numesc legturi macroergice.
Legturile macroergice sunt n primul rnd legturile esterice (printre care i tiosterice),
fosfoamidice i anhidridice. Ca urmare, aproape toi compuii cu legturi macroergice conin atomi
de fosfor i sulf, dup locul crora n molecul sunt localizate i legturile macroergice.
Energia care ia natere la ruperea legturilor macroergice este absorbit de sinteza unor compui
organici cu un nivel al energiei libere mult mai nalt dect cel iniial. n acelai timp,
rezervele de compui macroergici din organism sunt mereu completate pe seama energiei acumulate
i care se elibereaz prin scderea nivelului energetic al substanelor ce se descompun. n felul
acesta, compuii macroergici ndeplinesc funcia i de donori i de
acceptori de energie n metabolismul substanelor. Poziia central ntre compuii macroergici o
ocup ATP.
Capacitatea ATP de a stoca i ceda energie, adic de a forma sistemul ATP-ADP, ocupnd o poziie
intermediar pe scara termodinamic a compuilor fosforilai, determin funciaacestui sistem de
intermediar, transportor al gruprilor fosfat bogate n energie de la compuii fosforilai cu coninut
nalt de energie, situai pe scara termodinamicmai sus de ATP, la compui mai puin bogai n
energie, care, acceptnd fosfatul,se activeaz. n felul acesta, ATP are un rol esenial n
procesele bioenergetice. ATP intervine i n metabolismul unor compui macroergici. Sinteza n
organism a multor altor asemenea substane decurge prin intermediul ATP. Un rol important n acest
metabolism l are i formarea altor nucleozidtrifosfai (5'-guanozintrifosfat, 5'-uridintrifosfat, 5'-
citidintrifosfat) care pot, ca i ATP, s serveasc ca surse deenergie n procesele de biosintez.Ca
urmare, metabolismul substanelor i energiei reprezint un proces
unitar,continuu, n care modificarea unei substane este nsoit ntotdeauna de o eliberare sau
absorbie de energie i n care se elibereaz sau se absoarbe aceeai cantitate de energie
care asigur descompunerea sau sinteza legturilor chimice, adic n fond modificarea acelei
substane. Trebuie avut n vedere c energia liber care se produce prin descompunerea compuilor
macroergici i pe seama creia se poate efectua un anumit travaliu se folosete nu numai pentru
sinteza chimic. Ea poate servi n organism pentru formarea cldurii, acumularea de electricitate,
efectuarea unor activiti mecaniceetc. n aceste cazuri energia chimic se transform, prin
participarea obligatorie a compuilor macroergici (n special a ATP), n cldur, electricitate,
energie mecanic etc.
Interaciunea descris poate fi
redat ,de asemenea, sub form de
inel energetic sau Sisteme de
activitate energetic
50
Caracteristica metabolismului intermediar
Funciile specifice ale metabolismului intermediar constau n:
- absorbia din mediul exterior a energiei, care ptrunde sau sub forma energiei chimice a
compuilor organici din hran (la heterotrofe), sau sub form de energie solar (la autotrofe);
- sinteza biomoleculelor necesare pentru ndeplinirea diferitelor funcii specifice ale celulei;
- descompunerea biomoleculelor celulare pentru formarea energiei necesare diferitor
funcii specifice ale celulei.
Metabolismul intermediar cuprinde sute de reacii enzimatice diferite, deoareceproduii unei reacii
enzimatice servesc ca substrat al altei reacii, care reprezint urmtoarea etap a
metabolismului. Existena unei asemenea succesiuni este legat de faptul c, n reaciile
enzimatice are loc o rupere a unor grupri funcionale de la un substrat i transferul lor la
moleculele acceptorului are la rndul su devin substrat pentru urmtoarea reacie.
n calitate de grupri funcionale, n majoritatea reaciilor metabolismului intermediar, iau parte
gruprile amino, acetil, fosfat, formil, carboxil sau chiar atomi de hidrogen. n felul acesta, reaciile
enzimatice care decurg n celul reprezint un proces n mai multe trepte, unitar, precis organizat n
spaiu i timp. Succesiunea acestui proces metabolic este uimitor de identic la toate formele de via,
ndeosebi npartea central a cilor metabolice. n catabolismul compuilor macromoleculari se
disting trei stadii principale.
n primul stadiu proteinele, acizii nucleici, lipidele, glucidele se descompun prin hidroliz n pri
componente, cu mas molecular relativ mic, care servesc fie caelemente de construcie pentru
sinteza biomoleculelor celulare, fie ca substrat energetic : proteinele - n aminoacizi, acizii nucleici
n nucleotide; lipidele n acizi grai, glicerin i ali componeni, polizaharidele n
monozaharide.
Aceste transformri au loc, ndeosebi, n tractul gastrointestinal al animalelor, dar se pot produce i
intracelular. n al doilea stadiu catabolic, produii care se formeaz n primul stadiu, pe calea
oxidrii anaerobe, se transform n molecule mai simple, al cror numr nu este mare. Astfel, acizii
grai, glicerina, monozaharidele se descompun pn la acetil-CoA, iar aminoacizii - pn la acetil-
CoA i acid -cetoglutaric, acid succinic, acid fumaric i acid oxalacetic. Produii care se formeaz
n stadiul II, trec n stadiul III, care pentru toi este comun i n care ei se oxideaz aerob pn la
dioxid de carbon i ap. Acest, al III-lea stadiu comun constituie aa numitul ciclul acidului citric
sau ciclul acizilor tricarboxilici, cuplat cu lanul transportorilor de electroni sau prescurtat
lanul respirator (catena de respiraie).
Procesul de anabolism, care are loc n celule simultan cu catabolismul, include de
asemenea, trei stadii. Substanele iniiale pentru procesele de sintez suntfurnizate de stadiul III al c
atabolismului. n felul acesta, ciclul acidului citric reprezint, n acelai timp, al treilea stadiu al
catabolismului i primul, stadiu iniial,al anabolismului. Acest ciclu furnizeaz -cetoacizii pentru
sinteza proteinelor,acetil-
CoA i CO2pentru sinteza acizilor grai i
glucidelor.
n stadiul II al anabolismului din aceste
substane iniiale se formeaz aminoacizi,
monozaharide,acizi grai i alte elemente de
construcie, din care n stadiul III al
anabolismului se sintetizeaz proteine, lipide,
glucide etc.
Cuvinte cheie:
- organisme aerobe, organisme anaerobe, ciclul Krebs, lanul respirator, acetil-coenzima A (CH3-
CO-SCOA)
Obiective:
- trasarea proceselor biochimice din ciclul Krebs
- descrierea mecanismului de degradare n lanul respirator
11.1. Caracteristica general a oxidrii biologice
Prin oxidare celular (respiraie celular) are loc degradarea structurilor diferitelor biocomponente
cu eliberarea energiei chimice din legturile structurale (energia eliberat este stocat n compusul
macroergic ATP). Prin oxidare celular organismele autotrofe i procur energia
necesar proceselor
de biosintez atunci cnd nu este lumin i fotosinteza nu poate avea loc.
Pentru organismele heterotrofe oxidarea celular este singura cale de obinere a energiei necesare
pentru sinteza biocomponentelor specifice; prin procesele de degradare a substanelor de rezerv
(glucide, lipide) luate din hran se elibereaz energie chimic cu care se formeaz ATP.
Degradarea biocomponentelor se produce de fapt prin reacii de oxidoreducere, moleculele
organice fiind oxidate i transformate n structuri mai simple, coenzimele trecnd n form redus.
Degradarea biocomponentelor poate avea loc n condiii aerobe sau n condiii anaerobe.
n cazul organismelor aerobioxidarea biomoleculelor organice se face pn la CO2 i ap
n prezena oxigenului molecular , avnd loc transferul atomilor de hidrogen i a electronilor de pe
coenzimele reduse rezultate pn la oxigenul molecular cu formarea moleculelor de ap.
n cazul organismelor anaerobe atomii de hidrogen respectiv electronii sunt trecui pe o
structur acceptor, degradrile avnd loc n absena oxigenului, deci degradarea nemaifiind
avansat pn la CO2 i H2O (oxidare total). Acesta este motivul pentru care cantitatea de
energie eliberat n degradrile anaerobe este mult mai mic dect cea obinut prin
degradarea aerob (respiraie). Prin prezentarea principalelor etape ale oxidrii aerobe se
obine tabloul
complet al oxidrii celulare.
Astfel ntr-o prim etap glucidele, acizii
grai (obinui din hidroliza enzimatic a
lipidelor), aminoacizii(obinui din hidroliza
enzimatic a protidelor) sunt degradai prin
ci specifice pn la
acetil-coenzima A (CH3 CO~SCoA).
n continuare acetil-coenzima A este
degradat enzimatic printr-o secven de
53
reacii n ciclul Krebs (ciclul acizilor tricarboxilici) cu formarea de CO 2 i coenzime reduse
(NADH+H+ i FADH2).
n ultima etap coenzimele reduse intr n lanul respirator unde n prezena oxigenului molecular
atomii de H din coenzimele reduse genereaz ap, cu eliberare de energie ce se stocheaz n
ATP. Se vor descrie n acest capitol etapele de degradare ale acetil-coenzimei A (comune pentru
glucide, lipide i protide) urmnd ca procesele specifice de degradare ale fiecrei clase
de biocomponente pn la acetil-coenzima A s fie prezentate n capitole ce
abordeaz metabolismul biocomponentelor respective.
Palade a fost pentru biologia celular ceea ce Einstein a fost pentru fizic, a afirmat Gnter
Blobel, laureat al Premiului Nobel
Se povestete c, odat, ziaritii l-au ntrebat pe sir Hans Krebs: V-a surprins acordarea Premiului
Nobel?. Rspunsul a venit prompt: Nu, deloc, pentru c i profesorul meu a primit aceeai
distincie!.
Premiul Nobel
Hans Krebs a stabilit principalele etape ale acestui proces ciclic, proces ce s-a numit ulterior ciclul
Krebs. Acest ciclu mai poart i numele de ciclul acizilor tricarboxilici deoarece apar acizi
tricarboxilici precum i ciclul acidului citric dup substana implica n aceste transformri.
Ciclul lui Krebs reprezint unul din procesele biochimice fundamentale ale tuturor organismelor
vegetale i animale. El este reprezentat de o succesiune de reacii de oxidoreducere, de
decarboxilare, de fosforilare, de hidratare, reacii catalizate de enzime specifice, localizate n
mitocondrii.
Mitocondriile sunt organite n form de tij, care pot fi
considerate generatoarele de energie a celulei, de conversie
de oxigen i substane nutritive n adenozin trifosfat ( ATP ).
ATP este energie "moneda" chimic a celulei care
alimenteaz activitile metabolice celulelor. Acest proces
este numit respiraie aerob i este motivul pentru
animalele ce respir oxigen. Fr mitocondriile (singular,
mitocondrie), animalele superioare, probabil nu ar exista,
deoarece celulele lor ar putea numai pentru obinerea de
energie din respiraie anaerob (n absena oxigenului), un
proces mult mai puin eficient dect respiraia aerob. De
fapt, mitocondriile permite celulei pentru a produce de 15 ori mai mult dect ar putea ATP altfel, i
animale complexe, ca i oamenii, au nevoie de cantiti mari de energie, n scopul de a supravieui.
Degradrile oxidative din ciclul Krebs degaj o cantitate mare de energie.
Ciclul Krebs este deci ansamblul de reacii biochimice de degradarea acetil-
coenzimei A cu formare de ATP (energie), CO2 , coenzime reduse
(NADH+H + , FADH2 ).
54
Ciclul Krebs (fiind calea comun de degradarea glucidelor, lipidelor i protidelor precum i
generatorul unor precursori n sinteza altor biocomponente) reprezint o plac turnant a
metabolismului.
Secvenele importante din procesul ciclului Krebs sunt urmtoarele:
iniierea ciclului de ctre acidul oxalil-acetic;
condensarea enzimatic a moleculei de acetil-coenzim A cu acidul oxalil-acetic cu formarea
acidului citric;
transformarea acidului citric prin decarboxilri succesive (degajare de CO2) i prin formare de
NADH+H+ n succinil coenzim A;
transformarea succinul-
coenzimei A printr-un ir de reacii
n acid oxalilacetic cu dezvoltarea
de energie (ATP respectiv GDP)
i NADH+H+ i FADH2,
nchizndu-se
astfel ciclul.
Schematic acest proces se
prezint n fig. 11.1.
Lanul respirator este alctuit dintr-o suit de reacii biochimice al cror rezultat este
formarea apei n organism din oxigenul molecular i atomii de hidrogen din coenzimele
reduse provenite din ciclul Krebs.Aceste reacii biochimice sunt reacii enzimatice de oxido-
reducere n care au loc att transferul succesiv al atomilor de hidrogen ct i al electronilor
respectivi pe oxigenul molecular.
Necesitatea acestor reacii succesive deriv, din motive termodinamice.
n transportul i activarea hidrogenului un rol important l au dehidrogenazele NAD +, NADP+, ce
trec atomii de hidrogen pe o flavoprotein cu o coenzim FAD. Electronii sunt transportai printr-o
succesiune de reacii de ctre transportatorii de electroni la oxigenul atomic cu formarea ionului
O2-.
55
De obicei transportul electronilor se face de ctre citocromi de la o component la alta prin
scderea potenialului standard de oxido-reducere. Eliberarea de energie (formarea de ATP) are loc
la trecerea atomilor de hidrogen de pe NADH+H+ pe FAD i la transferul electronilor de pe
citocomul b pe citocomul c i apoi de pe citocomul a pe citocomul a3.
Formarea de ATP (fosforilarea) este n acest caz cuplat cu oxidarea(transferul electronilor),
motiv pentru care acest proces se numete fosforilare oxidativ.
Pentru ca hidrogenul i oxigenul s reacioneze mpreun trebuie s fie activai. Activarea acestor
elemente se face fie prin nclzire, fie cu ajutorul biocatalizatorilor.
n lipsa enzimelor, hidrogenul i oxigenul nu se combin la temperatura existent n plante
sau animale. Pentru ca aceste dou elemente s fie activate prin ridicarea temperaturii, ele trebuie
nclzite la aproape 2000C, ceea ce nu se poate realiza n organism; asemenea temperatur
distruge celulele i esuturile i, deci, ar determina moartea plantelor. Hidrogenul i oxigenul sunt
activai n plante prin intermediul biocatalizatorilor. Activarea se face cu ajutorul unor sisteme
enzimatice i const n esen n transformarea atomului de oxigen n ion negativ (O 2-) i a
atomului de hidrogen n ion pozitiv (H+). La unirea acestor ioni cu formarea molecului de ap, se
degaj aceast mare cantitate de energie.
Schematic, procesele din lanul respirator pot fi prezentate astfel:
Lanul respirator
56
Oxidarea celular
Energia care se degaj n cadrul degradrii prin oxidare celular provine din energia acumulat n
substane, n procesul de sintez (n spe fotosintez). Din energia eliberat numai 40-50% este
utilizat n alte procese de biosintez. Restul energiei este captat sau transformat n alte forme de
energie.
Rezumat:
Prin oxidare celular are loc degradarea structurilor diferitelor biocomponente cu eliberarea
energiei chimice din legturile structurale(cu formarea ATP). Degradarea biocomponentelor se
produce de fapt prin reacii de oxidoreducere, moleculele organice fiind oxidate i transferate n
structuri mai
simple. Degradarea poate avea loc n condiii aerobe sau anaerobe.
n cazul organismelor aerobe, oxidarea biomoleculelor organic se face pn la CO2 i ap
(H2O) n prezena oxigenului molecular (atmosferic); n cazul organismelor
anaerobe, atomii de hidrogen, respectiv, electronii sunt trecui pe o structur acceptor n absena
oxigenului.
Prin prezentarea principalelor etape ale oxidrii aerobe se obine tabloul complet al oxidrii
celulare.
Astfel ntr-o prim etap glucidele, acizii grai, aminoacizii sunt degradai prin ci specifice pn la
acetil-coenzima A. n continuare, acetil-coenzima A este degradat enzimatic printr-o
secven de reacii ale ciclului Krebs cu formare de CO2 , coenzime reduse i energie.
n ultima etap coenzimele reduse intr n lanul respirator unde n prezena oxigenului
molecular, atomii de hidrogen din coenzimele reduse formeaz ap.
ntrebri:
11.1. n ce unitate a celulei are loc ciclul Krebs i este localizat sistemul transportor de electroni?
11.2. De ce este considerat ciclul Krebs o plac turnant a metabolismului?
11.3. Care sunt produii de degradare ai acetil-coenzimeiA n ciclul Krebs?
11.4. Care este importana biologic a fosforilarii oxidative n lanul respirator?
58
Tema 12.1 .Anabolismul glucidelor (fotosinteza i formarea diverselor glucide
n organisml animal)
Fotosinteza ( stgr. - lumina, - conectare) - un proces biochimic pentru
producerea de compui organici din materie anorganic, n celulele care
conin clorofil sau bacterioclorofila, cu participarea de lumin.
Acesta este unul dintre cele mai importante schimbri biochimice pe Pmnt .
Acest proces menine un nivel ridicat de oxigen n atmosfer i contribuie la creterea
cantitii de carbon organic n piscina carbon prin creterea masei de materie organic n
detrimentul materie anorganic.
Fotosinteza este procesul prin care se sintetizeaz subsante organice (glucide, lipide,
proteine), pornind de la ap i sruri minerale, folosind ca surs de energie, energia
luminoas i ca surs de C folosete CO2 atmosferic.
- are loc n structuri specializate numite cloroplaste, unde se gsesc pigmenii clorofilieni
clorofilele a i b. Ambele clorofile absorb energia luminoas, dar numai clorofila o poate converti
n energie chimic.
Formul molecular
Clorofila b Clorofila c1 Clorofila c2 Clorofila d
Clorofila a
C55H72O5N4 C55H70O6N4 C35H30O5N4 C35H28O5N4 C54H70O6N4
Mg Mg Mg Mg Mg
Fazele fotosintezei:
1. Faza de lumin are loc n membrana tilacoidelor (grana);
- folosete, ca surs de energie, energia luminoas - absorbit de
pigmenii clorofilieni;
- const ntr-un proces de fotoliz a apei:
2H2O 2H2 +O2 , prin care:
- se elibereaz H2 necesar n faza de ntuneric;
- se elibereaz energie nglobat n ATP (adenozintrifosfat);
59
- se elibereaz oxigenul necesar respiraiei.
2. Faza de ntuneric :
- are loc n stroma cloroplastelor;
- const n sinteza substanelor organice (glucide, lipide, proteine);
- folosete ca surs de carbon CO2 atmosferic;
- folosete, ca surs de energie, energia chimic nglobat n ATP.
Importana fotosintezei:
- conversia energiei luminoase n energie chimic;
- sinteza de substane organice;
- eliberarea oxigenului necesar respiraiei;
- purificarea atmosferei prin absorbia CO2.
Apa n fotosintez
Fr ap viaa plantelor, ca de altfel a tuturor vieuitoarelor de
pe Terra, este imposibil. Dup cum se tie, globul pmntesc este aprovizionat cu ap n mod
foarte diferit. Cele mai puine precipitaii, inegal distribuite n cursul anului, cad n deerturi.
Deerturile se gsesc aproape n toate coninentele, ocupnd suprafee mai mari sau mai mici,
populate cu o flor i o faun specific. Toate procesele metabolice depind de cantitatea de ap
din esuturi. Un deficit de ap n esuturile asimilatoare influeneaz direct procesul
fotosintezei att n faza de lumin, ct i n faza de ntuneric, provocnd inhibarea acestuia.
Deoarece principalul rezultat al pierderilor turgescenei l constituie nchiderea stomatelor,
schimbul de gaze care are loc n fotosintez, respiraie i fotorespiraie, este mult ngreunat.
Totui, i ali factori nonstomatici intervin n reducerea fotosintezei sub influena deficitului i
stresului de ap.
60
Fotosinteza este procesul de fixare a dioxidului de carbon din atmosfer de ctre
plantele verzi (cu clorofil), n prezena radiaiilor solare, cu eliminare de oxigen i formare
de compui organici (glucide, lipide,proteine) foarte variai.
Dei apa particip n fotosintez, ca i dioxidul de carbon, ea nu constituie, nici chiar cnd este n
cantiti reduse, un factor limitant pentru toate speciile.
Intensitatea fotosintezei se exprim cantitativ prin volumul de gaz degajat pe unitate de timp.
Reacii fotochimice
Este numita faza Robin Hill i const dintr-un lan de transformari fotofizice i reacii
fotochimice desfurate n granele cloroplastelor, caracterizate prin urmatoarele procese de
prima importana : captarea CO2 n cloroplastele celulelor asimilatoare, stimularea clorofilei
pentru fixarea energiei luminoase, fosforilarea ADP n ATP, fotoliza apei cu fixarea H+ n
NADP redus i eliminarea O2 . Toate aceste procese necesit n mod obligatoriu, prezena
luminii i sunt grupate n trei etape distincte :
- ptrunderea CO2 n cloroplaste ,
- absorbia energiei luminoase i transformarea ei n energie chimica .
n stadiul dependent de lumin (reacia
la
lumin), clorofila absoarbe energia lumino
as, care stimuleaz unii electroni din
moleculele de pigment, transferndu-i pe
straturi cu niveluri mai ridicate de energie.
Acetia prsesc clorofila i trec printr-o
serie de molecule, formnd NADPH (o
enzim) i molecule ATP care stocheaz energia. Oxigenul rezultat n urma reaciilor chimice este
eliberat n atmosfer prin porii frunzelor.
Pentru formarea glucidelor proprii, respectiv glicogenul sau glucoza din snge, animalele
utilizeaz substane organice elaborate n prealabil de plantele verzi sub form de hran.
Forma de rezerv a glucidelor n organismul animalelor o constituie glicogenul.
Sediul de formare a glicogenului este ficatul.
Pentru biosinteza glicogenului n ficat este necesar formarea prealabil a glucozo-1-fosfat.
Formarea glucozo-1-fosfat n organismele animale are loc din glucoza provenit pe mai multe ci.
Glicogenul este o poliglucid cu structur ramificat care se gsete n ficat i n cantiti mai
mici n esutul muscular. Ea constituie rezerva de glucide a organismului animal.
Metabolismul glicogenului cuprinde dou laturi:
biosinteza glicogenului sau glicogenogeneza;
degradarea glicogenului sau glicogenoliza.
Glicogenogeneza i glicogenoneogeneza
62
organismele animale pot sintetiza n esutul hepatic rezerva de glucide sub form de glicogen, fie
pornind direct de la glucoz sau de la alt glucid(ggg), fie pornind de la componente neeglucidice
((gng).
- Ficatul este singurul organ care, chiar i n cazul unui aport insuficient de glucide, poate pune la
dispoziia organismului necesarul de componeni glucidici.
Metaboliii comuni rezultai din catabolismul glicidic, protidic i lipidic, constituie n ficat aa-
numitul fond metabolic, care poate servii la sinteza glucozei, respectiv a glicogenului.
Glicogenul hepatic reprezint depozitul central de glucide a organismului din care, dup
necesiti, sunt repartizate diverse cantiti i altor organe sau esuturi, care conin i ele, dar n
cantitate mic glicogen sub form de glicogen muscular, celular.
Deoarece glucidele nu pot circula n organism dect sub form de monoglucide, transportul loor are
loc conform schemei:
Glicogen muscular
Glicogen hepatic
Glucoz (snge) Glicogen celular
Numai esutul hepatic poate resintetiza, n exces fa de propriile nevoi lui, glicogen din acid lactic.
realizeaz pe de o parte, sinteza glucidelor din lipide sau protide, atunci cnd alimentai cu
glucide este deficitar, iar pe de alt parte, economie de glucide(utilizate n procesele energetice),
prin resintetizarea glicogenului din acidul lactic format n muchii din degradarea anaerob a
glucidelor.
Acidul lactic format n muchi prin degradarea anaerob a glucidelor este transportat de curentul
sangvin la ficat, unde 1/5-1/6 din cantitatea de acid lactic este oxidat cu formare de CO 2 i H2O,
restul transformndu-se n glicogen.
Cnd necesitile de glucoz n muchi sunt stringente, glucoza adus de snge la muchi nu se mai
transform n glicogen muscular, ci este ooxidat la acid lactic, n vederea furnizrii energiei
necesare
contraciei musculare.
Protidele pot fi i ele transformate de ctre esutul hepatic n glucide, respectiv n glicogen,
datorat prezenei n compoziia protidelor a aa-numiilor aminoacizi glucoformatori: glicocol,
alanin, acid aspartic, acid glutamic, ornitin, etc.
Acetia pot fi transformai n cetoacizi care fac parte din cilul de degradare oxiidativ a glucidelor
din care, prin inversarea reciiilor, se poate obine glucoza, respectiv glicogenul.
Ex.: a-alanina se poate transforma n acid piruvic, acidul aspartic -n acid oxalilacetic i acidul
glutamic n acid -ceto-glutaric.
Pe aceeast cale se pot furniza rezerve glucidice organismelor animale i n cazul unei alimentaii
unilaterale cu protide.
Experimentele efectuate pe cini hrnii exclusiv cu proteine, confirm transformarea proteinelor n
glucoz i glicogen.
Valoarea glicogenetic a proteinelor este de 58 g glucoz/100 g protein
64
12.2.2. Metabolismul glucozei
Metabolismul glucozei poate avea loc aerob sau anaerob, n funcie de condiiile care exist ntr-o
celul. Catabolismul anaerob al glucozei se numete glicoliz.
Catabolismul aerob al glucozei poate s se desfoare pe 3 ci distincte.
Acestea sunt:
calea acizilor tricarboxilici;
calea pentozofosfailor;
calea acizilor uronici.
Acidul lactic format n muchi nu se elimin, ci poate participa n ficat la un proces de resintez de
glucide. Energia rezultat n glicoliz este depozitat n muchi, ntr-un compus numit fosfagen din
care este utilizat n timpul efortului muscular.
12.2.B. Catabolismul aerob al glucozei
Principalele ci de catabolizare aerob a glucozei sunt urmtoarele:
calea acizilor tricarboxilici (ATC);
calea pentozofosfailor;
calea acizilor uronici.
66
A) modul de utilizare a NADH + H + - n degradarea aerob nu mai este folosit pentru reduceri, ci ca
generator de energie (prin combinarea hidrogenului su cu O2);
- modul de transformare a acidului piruvic nu mai este redus la acid lactic, ci sufer decarboxilare
oxidativ i carboxilare.
- Decarboxilarea oxidativ are loc n prezena HS-CoA i se formeaz acid acetic activat (acetil-
CoA).
- Carboxilarea are drept rezultat formarea acidului oxalil-acetic.
- Cele 2 substane formate prin transformarea acidului piruvic
(CH3-CO~SCoA i HOOC-CH2-CO-COOH), reprezint componentele de la care are loc, n
continuare, degradaea oxidativ a glucidelor sub forma unui proces ciclic numit ciclul acizilor
tricarboxilci sau ciclul Krebs.
67
CH3COOH + 2 H2O 2 CO2 + 8H
- CO2 astfel format este cel care apare n procesul respiraei, fiind eliminat prin expiraie cu
ajutorul hemoglobinei, care-l transport de la esuturi la plmni.
- Cei 8 H sunt preluai de acceptori ((NAD+ i FAD)) i prin intermediul citocromilor catenei de
oxidare celular numit i caten de respiraie, localizat n mitocondrii, sunt activai sub form de
H+ care poate forma H2O cu oxigenul activat ca O2-.
- Rezultatul procesului de degradare oxidativ este oxidarea biologic, produii finali ai acestui
proces fiind CO2 i H2O:
C6H12O6 + 6 O2 6 CO2 + 6 H2O
- Energia ce apare n urma acestei oxidri se datoreaz reaciei exergonice de oxidare a H cu O2 adus
prin respiraie de ctre hemoglobin:
H2 + O2 H2O - 5522 kkcal
Dac se realizeaz un bilan energetic al glicolizei (I) i unul al degradrii aerobe (II), prin
comparaie
rezult c degradarea aerob furnizeaz de cca. 19 ori mai mull energie dect cea anaerob.
(I) C6H12O6 2 CH3-CH(OH)-COOH + 2 ATP
(II) C6H12O6 6 CO2 + 6 H2O + 38 ATP
Calea princiipal economic de degradare a glucidelor este reprezentat deci, de calea
metabolizrii de-a lunngul ciclului Krebs, combustibil necesar (atomi de H) oxidrii finale.
Cu toate acestea, n condiie n care aportul de O2 prin respiraie este insuficient, organismul este
obligat s fac apel i la degradarea anaerob, neavantajoas d.p.d.v. energetic.
NAD+ NAD+H+
UDP-glucuronatul poate elibera acidul glucuronic i UDP prin hidroliz sau poate intra direct n
reacii de glucurono-conjugare.
Ciclul acidului glucuronic
. Acidul glucuronic format, neangajat n reacii de biosintez, se poate transforma fie n pentoze,
stabilind astfel legtura cu ciclul pentozofosfat i conducnd n final la formarea de glucoz, fie n
acid ascorbic.Reaciile chimice care au loc n cadrul ciclului acidului glucuronic sunt prezentate n
figura 12.7.
12.2.3.A Gluconeogeneza
Gluconeogeneza reprezint procesul de formare
a glucozei n organismul animal din componente
neglucidice. Componentele neglucidice pot fi: diferii
aminoacizi provenii din proteinele din hran, glicerolul
care rezult din lipide i care se transform n triozofosfat pentru a putea participa la
gluconeogenez sau diferite molecule rezultate din catabolismul aerob sau anaerob al glucozei.
Astfel, n condiiile n care organismului nu i se asigur cantitatea necesar de glucide, acesta are
posibilitatea de-a transforma alte biomolecule n glucide, care sunt transportate apoi spre esuturile
care au absolut nevoie de acestea, esuturile glucodependente: esutul nervos, muscular sau
eritrocitele.
69
Procesul de gluconeogenez are loc intens la bovine n perioada de gestaie i lactaie, cnd
organismul consum cantiti mari de glucide.
Gluconeogeneza poate fi considerat o inversare a glicolizei, pentru c dac se pornete de la acidul
lactic (obinut prin glicoliz) rezult glucoz.
Schematic, gluconeogeneza poate fi redat astfel:
Glicemia
Concentraia normal n glucoz a sngelui se numete glicemie. n organismul animal glicemia
se menine la valori relativ constante, datorit echilibrului care exist ntre procesele metabolice
care consum glucoz i cele care o produc. Acest echilibru este controlat de sistemele de reglare
ale metabolismului glucidic.
Glucoza sanguin provine din urmtoarele surse:
1. glucide alimentare;
2. glucoza rezultat prin glicogenoliz hepatic;
3. gluconeogenez.
Procesele metabolice care consum glucoz i care duc la scderea glicemiei sunt:
a) degradarea oxidativ a glucozei n celule,
b) depozitarea glucozei sub form de glicogen prin procesul de glicogenogenez,
c) transformarea glucozei n lipide i alte substane,
d) glucozurie (eliminarea glucozei prin urin) n cazuri patologice.
Hormonii care intervin n reglarea glicemiei sunt:
insulina, care are aciune hipoglicemiant, prin intensificarea consumului de glucide din celul i
prin favorizarea glicogenogenezei hepatice,
glucagonul, ACTH-ul, STH-ul, adrenalina i hormonii glucocorticosteroizi care mresc
glicemia prin stimularea transformrii glicogenului n glucoz (glicogenoliza) i a
gluconeogenezei.
12.9. ntrebri
1. Cum se formeaz glicogenul n organismul animal?
2. Ce fel de biomoleculele se formeaz n urma catabolizrii glicogenului?
3. Care sunt enzimele ce intervin in metabolismul glicogenului?
4. Definii glicoliza.
5. Care sunt principalele etape ale glicolizei?
6. Care sunt cile de catabolizare aerob ale glucozei i care sunt compuii chimici ce
rezult din aceasta?
7. Cum se formeaz apa n organismul animal?
70
8. Ce se nelege prin fosforilarea oxidativ?
9. Care este principala cale de formare a glucozei n organimul animal?
Lipidele sunt substane eterogene din punct de vedere chimic de aceea metabolismul se studiaza
pentru fiecare grupa n parte. Cercetarea proceselor metabolice s-a efectuat cu deuteriu, tritiu , azot
marcat, 13C, l4C.
1.a Biointeza glicerolului
Gliceridele sunt esteri ai glicerolului cu acizii grai, sunt cele mai rspndite lipide, gindu-se
att n regnul animal cit i n cel vegetal.
Glicerolul este componentul alcoolic att al glicerolipidelor imple ct i al celor complexe. Se
formeaz din aldehida- 3- fosfogliceric sau din fosfodihidroxiacetona, dou importante trioze cu
rol metabolic care se obin n cursul degradrii anaerobe a glucidelor. Acestea, prin reducere i
defosforilare dau glicerol i ATP.
O
CH CH2 OH CH2 - OH
NADH + H+ glicerofosfataza
CH OH CH OH CH - OH + ATP
CH2 OH CH2 O P CH2 - OH
Aldehida fosfoglicerica glicerol
Etapa I Acetil CoA, sub influena acetil CoA carboxilazei, care are drept coenzim biotina,
reactioneaz cu CO2 activat i formeaz malonil CoA. CO2 rezult din decarboxilarea acidului
piruvic.
Reacia este endergonic.
Acetil CoA se formeaz n mitocondrii dar membrana lor este impermeabil pentru acetil CoA de
aceea aceasta se combin cu acidul oxalil acetic i formeaz acidul citric care traverseaz
membrana mitocondriala apoi se reface acetil CoA n acidul oxalil acetic. Acidul
citric este transportator de acetil CoA. Malonil CoA se poate obine din acidul malonic.
Etapa a-II-a Se formeaz un compus intermediar acetil malonil CoA sub aciunea unei
enzime din sistemul acid gras sintetaza.
Etapa a-III-a Se formeaz acetoacetil CoA sub aciunea malonil decarboxilazei . Aceasta are 2
atomi de carbon n plus fa de acetil CoA de la care s-a pornit biointeza. Aceste transformri sunt
exergonice.
Etapa a-IV-a Acetoacetil CoA se reduce sub aciunea NADPH + H+ i se formeaz
hidroxibutiril CoA (NADPH+H+ rezult n procesul de fotofosforilare, ciclul Krebs, ciclul
pentazofosfatilor).
Etapa a-V-a Hidroxibutiril CoA se deshidrateaz sub actiunea erotonazei rezultnd erotonil
CoA.
Etapa a-VI-a prin reducere cu NADPH+H+, sub aciunea unei ACP reductaze, rezult butiril
CoA, compus cu 4 atomi de carbon.
Spira s-a nchis i s-a format un acid gras cu doi atomi de carbon mai mult decat acetil CoA.
Biointeza acizilor grai este un proces spiralic, spiralele se repet de jumtate minus 1 din
numarul atomilor de carbon : de exemplu, pentru acidul palmitic sunt necesare 7
spire adic( 16 :2)-1 spire.
Scadere coninutului de acizi grai din ciclul Krebs conduce la scderea biosintezei lor.
72
Prin acest proces se formeaz acizi grai cu catena carbonica lung( C18-C30) din acizi grai cu
catena mai scurt( C12- C10), sub aciunea enzimelor.
Substana activ care se cupleaz cu acizii grai cu catena scurt este acetil CoA.
Formarea acidului stearic din acidul palmitic :
cetotiolaza
CH3-(CH2)14-CO SCoA + CH3-CO SCoA Palmitil CoA acetil CoA ATP, HSCoA
OH NADH+H+
CH3-(CH2)14-CO-CH2-CO SCoA CH3-(CH2)14-CH-CO SCoA
Cetostearil CoA - NAD+ hidroxibutiril CoA
NADH+H+
Enoilhidraza
CH3-(CH2)14-CH=CH-CO ScoA CH3-(CH2)16-CO SCoA - H2O - NAD+
oleilCoA stearilCoA
Acidul stearic se mai poate obine i prin intermediul malonil CoA:
-CO2
palmitil CoA + malonil CoA cetostearil S-ACP -HSCoA
NADH+H+HSCoAstearil-ACP stearilCoA + HSACP -H2O
Biointeza acizilor grai cu catena ramificat sau numar par de atomi de carbon are loc prin
malonil CoA i un acceptor impar , radical acil coenzima. ( valerianil, propionil, izocapril,
izovalerianil).
Biointeza acizilor grai nesaturati mono i polietenici se presupune c are loc din acizi grai
saturai , n prezena oxigenului , oxigenazei, dehidrogenazei, NADPH+H+, ferodoxina i
citocrom b5.
Bilan energetic pentru acidul palmitic:
7ATP/ciclu 7x7 = 49ATP + 1= 50 ATP
c) Biosinteza trigliceridelor
Trigliceridele sau triacilglicerolii sunt lipidele cele mai abundente din natur. Sunt componentele
principale ale grsimilor de rezerv din esuturi i ale grsimilor din lapte. Acilglicerolii sunt esteri
ai glicerolului cu acizi grai, i pot fi mono, di- sau tri-acilgliceroli.
1 Trigliceridele constituie o surs major de energie pentru organism .
2.Triacilglicerolii (trigliceridele) sunt compui hidrofobi, nepolari. Nefiind implicai n procese
osmotice, pot fi depozitai n cantiti foarte mari n celule. Trigliceridele din esutul adipos uman
cuprind urmtorii acizi grai: acid oleic, acid palmitic, acid linoleic, acid palmitoleic, acid stearic.
Acizii grai sunt transformai n triacilgliceroli pentru a fi transportai ntre esuturi i pentru a fi
depozitai ca surs de energie metabolic. O mare proporie din trigliceride sunt depozitate n
esutului adipos .
1 Lipoliza presupune hidroliza trigliceridelor la glicerol i acizi grai, care trec n snge. Acizii
grai sunt utilizai de toate esuturile, cu excepia creierului, pentru producerea de energie sau ca
surs de atomi de carbon pentru biosinteza lipidelor. Glicerolul este utilizat de ficat ca surs pentru
sinteza de glucoz. Hidroliza trigliceridelor se face de ctre trei tipuri de enzime, i anume:
lipaza pancreatic (digestiv), lipoprotein lipaza (din snge) i lipaza hormonsensibil (din
esutul adipos).
1 Angajarea lipidelor n direcia sintezei sau degradrii trigliceridelor depinde de energia
metabolic necesar a organismului. n organismul uman exist dou ci pentru sinteza
trigliceridelor care difer prin natura precursorului n structura cruia intr glicerolul: calea
monoacilglicerolului i calea glicerol-3-fosfatului.
- Calea monoacilglicerolului funcioneaz n enterocite, i reprezint calea rapid i economic de
resintez a trigliceridelor din produii de digestie, absorbii din intestin. Triacilglicerolii sintetizai
sunt nglobai n chilomicroni, care prin sistemul limfatic trec n snge.
- Calea de esterificare a glicerol-3-fosfatului este calea de sintez a trigliceridelor n aproape toate
celelalte esuturi al organismului.
73
- Sinteza triacilglicerolilor n ficat i n esutul adipos joac un rol important n economia energetic
a organismului.
-Capacitatea ficatului de a sintetiza triacilgliceroli este mare. Acizii grai ncorporai n
triacilglicerolii din ficat provin din sinteza de novo din glucoz (ficatul fiind principalul organ de
conversie al glucidelor n acizi grai) sau din plasm prin captare din fraciunea de acizi grai liberi.
- n ficat, dup sintez, trigliceridele sunt ncorporate mpreun cu alte lipide i proteine n VLDL i
apoi secretate n plasm, fiind surs de acizi grai pentru esuturile extrahepatice.
Sinteza triacilglicerolilor n esutul adipos reprezint modalitatea de stocare a excesului caloric,
lipidic, sau glucidic al organismului. n condiiile unui exces caloric, att sub form de lipide ct i
de glucide este favorizat sinteza trigliceridelor i depozitarea acestora n esutul adipos.
- Grsimile sunt utilizate ca materiale energetice de ctre majoritatea esuturilor. Acizii grai sunt
ari preferenial de miocard, muchi scheletici, rinichi. Acizii grai depozitai ca triacilgliceroli
reprezint 90% din greutatea triacilglicerolilor. Trigliceridele depozitate n esutul adipos sufer
continuu procesele de lipoliz i reesterificare. Rezultatul acestor dou procese, care implic
substraturi i enzime diferite, determin cantitatea de acizi grai liberi din esutul
adipos i n final, nivelul acizilor grai liberi, circulani, din plasm.
- Trigliceridele constituie o surs major de energie pentru organism. Nivelul seric al
trigliceridelor este evaluat ca parte a profilului lipidic. Acest panel include
colesterolul total, trigliceridele i lipoproteinele HDL i LDL.3
Se produce n general ncepnd de la fosfoglicerol sau mono i di gliceride i din
acizi activai sub form de tioesteri.( acil Co A). Procesul este endergonic i are loc
n prezena lipazelor i a cofactorilor: ATP, Mn2+, Mg2+, O2.
CH2OH CH2 - O - CO -R
lipaza
CHOH + R-Co SCoA CH - O - CO - R1
CH2O-P CH2 - O - P
Fosfoglicerol Acid fosfatidic
CH2 - O - CO - R CH2 - O - CO -
R
fosfataza CH - O - CO - R1 R2 - Co SCo A CH - O - CO -
RI
CH2 - OH -HSCoA CH2 - O - CO -
R2
Diglicerida Triglicerida
Lipidele din plante provin in cea mai mare parte din glucide. n cursul dezvoltrii
plantei, n timp ce scade coninutul de glucide ,creste cel de lipide.
ATP, Mg2+, Mn2+
5C6H12O6 + O2------------------>C18H36O2 + 12CO2 + 2H2O - 946 Kcal
Energia necesara provine din degradarea glucidelor. Glucidele furnizeaz aldehida 3
fosfoglicerica, dihidroxiacetona i energie; sursa principala este reprezentata de
glucoz i fructoz.
Glucidele se pot forma n cantiti mici i din proteide, respectiv aminoacizi
74
Trigliceridele/graimile propriu-zise sunt principalele componente din raia
alimentar. La acestea se adauga colesterolul. Vitaminele liposolubile sunt dizolvate
n graimi, iar prezena grsimilor este indispensabil n dieta(dispersare,
solubilizare, hidroloza grsimilor).
Lipaza lingual secretat de glandele Ebner situate pe faa dorsal a limbii fr
importan la om i lipaza gastric foarte important la om iniiaz
digestia lipidelor.
Aceste enzime hidrolizeaz cataliza trigliceridelor ce conin resturi de acizi grai
saturai cu o caten scurt i acizi grai nesaturai a acizi grai liberi i 1,2-diacil
glicerol.
Substratul ideal pare a fi constituit din lapte ce conine resturi de acizi grai cu
catena scurt i medie, legturi n poziia 3 a glicerolului. Enzimele sunt inactivate la
PH-ul mic. Dup mese sunt activate i datorit aciunii tampon a proteinelor
alimentar, datorit timplui de reacie 2-4 ore, 30% din trigliceride sunt digerate.
Acizii grai cu caten scurt i medie in urma hidrolizei sunt abosrbii din
peretele stomacal i trec i vena port, iar restul trec n intestin:(lipidele alimentare,
vin n contact cu bila care conine cantiti mari de sruri biliare i lecitine, ce
disperseaz graimea sub form unei solutii coloidale asupra careia acioneaz
hidrolazele pancreatice:
1) lipaza: specific pentru legturi de tip ester 1-3 a trigliceridelor, i din hidroliz
2 acizi grai liberi i un monoacid glicerat de tipul 2-monoacilglicerol;
2) fosfolipaze(A2) are specificate carboxiesterazica i acioneaz asupra lecitinelor
cu obinere de izolecitine i un acid gras liber.
Fosfolipaza A2 necesit cationi de Ca. Este activat de colipaza(proteina prezent n
secreia pancreatic). Ambele sunt secretate ca precursori. Izolecitinele au
proprietatea tensioactive puternice i contribuie la solubilizarea proteinelor n
intestin.
Sub influena srurilor biliare, alturi de grsimile emulsionate, apar i acizi grai
saponificai. Acizii grai i glicerina, trec, liberi sau reesterificai, prin pereii
intestinului subire, n limf i n snge, n urma procesului de absorbie.
78
- oxidaza -CO2 H2O + NAD+
acid gras hidroxiacid aldehida
O2 -H2
acid gras cu un atom de carbon mai puin.
NAD+, ATP
Sau cetoacid acid gras cu un atom + CO2
acid ascorbic de carbon mai puin.
Tema 13.4. Catabolismul gliceridelor (oxidarea glicerolului, a acizilor grai saturai, cu numr
par i impar de atomi de carbon i acizilor grai nesaturai)
Importana biologic a lipidelor const n faptul c ele servesc ca substane energetice de rezerv
ale organismului. Substanele nutritive consumate (glucide, protide) se transform n mare parte n
lipide i sunt depozitate n esuturile corespunztoare.
Catabolismul gliceridelor
Acest proces ncepe prin degradarea hidrolitic la acizi grai i glicerol sub aciunea
lipazelor. Activitatea lipazelor se intensific n perioadele de germinaie a seminelor, tuberculilor,
bulbilor.
Glicerolul i acizii grai se degradeaz n continuare , transformndu-se n CO2 i H2O.
Procesul este exergonic degajnd 9 Kcal/ mol.
Catabolismul se poate realiza treptat, rezultnd produse intermediare, se produce nu numai n
organele de depozit, ci i n frunze. Hidroliza grsimilor se intensific i n perioadele de
mbatranire sau vtamare a esuturilor vegetale.
2. a) Catabolismul glicerolului
79
Are loc prin activarea glicerolului sub form de fosfoglicerol, sub aciunea fosfokinazei
i ATP. Sub aciunea fosfoglicerol aldehid dehidrogenazei din citoplasma, ce conine NAD+,
acesta trece n aldehida 3 fosfogliceric care se poate degrada:
- prin ciclul lui Krebs la CO2 i H2O;
-Fosfodihidroxi-ester fructozo1, 6 difosforic
- Dehidrogenarea fosfoglicerolului se poate rerealiza prin aciunea NAD+ sau FAD.
-Glicerolul rezultat din hidroliza gliceridelor poate intra n ciclul lui Krebs sau poate intra n ciclul
de biosintez a glucidelor n funcie de sistemul enzimatic.
80
- Lipidele emulsificate n prealibil de ctre sruiile biliare sunt hidrolizate de ctre lipaz la acizi
grai liberi i monogliceride.
-Dei nu conin enzime (cu excepia fosfatazei alcaine), bila scindeaz molecule lipidelor, datorit
srurilor biliare.
- Bila realizeaz emulsionarea grsimilor (fracionarea lor n picturi foarte fine), favoriznd n
acelai timp, activitatea lipazelor intestinale, precum i absorbia acizilor grai.
-Dup emulsionare, grsimile sunt mult mai uor de hidrolizat de ctre lipaze.
-Lipaza pancreatic, activat de ctre srurile biliare, Ca2+ i aminoacizi, realizeaz desfacerea
lipidelor n acizi grai i glicerol (glicerin).
n urma hidrolize se formeaz miceli minuscule, sub forma unor picturi extrem de fine, mult mai
mic dect cel rezulta e din emulsionarea biliar.
- Sub influena srurilor biliare, alturi de grsim ile mulsionate, apar i acizi grai saponificai.
- Acizii grai, glicerina, trec, liberi sau reesterificai, prin pereii intestinului subire, n limf i n
snge, n urma procesului de absorbie.
- Colesterolul alimentar este n cea mai mare parte esterificat i este hidrolizat de sterol-ester
hidrolaza pancreatic la colesterol liber.
- Fosfolipidele alimentare sunt digerate de fosfolipaz A2 pancreatic, la acizi grai lizo-fosfolipide.
- n lumenul intestinal, produii de digestie ai lipidelor formeaz mpreun cu sruiile bili are
miceli, agregate cilindrice cu un coninut lipidic diferit: n zona central hidrofib conin n general
acizi grai,monogliceride i colesterol. n zona periferic conin srurile biliare.
Catabolismul gliceridelor (oxidarea glicerolului, a acizilor grai saturai, cu numr par i
impar de atomi de carbon i acizilor grai nesaturai)
-Prima etap n degradarea grsimilor este cea hidrolitic (cu formare de acizi grai i glicerol) i
are loc n citoplasm.
- Glicerolul (format n cantiti mici din grsimi) este metabolizat n continuare prin reaciile
finale ale glicolizei, urmat de ciclul Krebs.
Etapa final de catabolizare a acizilor grai cu caten lung (-oxidarea sau etapa de ardere celular,
cu formare de CO2 ,H2O i generare de energie sub forma de ATP), are loc numai n mitocondrii
(uzinele energetice ale celulei).
81
- Acizii grai cu caten lung au o capacitate limitat de a traversa sistemul de endomembrane i
de a ajunge din citoplasm (unde se formeaz) n mitocondriom (unde se metabolizeaz).
- Pentru o metabolizare total a grsimilor este necesar parcurgerea celor 2 etape, cea iniial, de
hidroliz citoplasmatic, i cea final, de oxidare mitocondrial.
- Pentru a se cupla cel 2 etape cat bolice ste necesar un purttor (o molecula caru, un mijloc de
transport molecular) care s preia iciz grai din citoplasm i s-i duc n interio ul
mitocondriomului.
- Molecula purttor este L-carnitea care preia gruparea cil (rest de acid gras) de pe acil- enzima A
(forma activ a cidului, sub care apare n citoplasm), formnd acil-carnitea.
- Acil- carnitea trece prin membranele mitocondriei, cu ajutorul unui sistem de transport specific al
unei enzime numite translocaz.
- n ultima etap a procesului de intrare n mitocondrion, gruparea cil este transferat de la carnit
la coenzima A mitocondrial, reformndu-se acil- oenzima A.
- Carnitea eliberat se ntoarce n citoplasm, fiind disponibil pentru transferul altor resturi de acid
gras.
- Carnitea are deci o aciune de biocatalizator, la sfritul ciclului de reacii metabolice
regsindu-se neschimbat.
- Arderea grsimilor se declaneaz n celule numai atunci cnd nu este disponibil glucoza la
nivel tisular.
Metabolismul
triacilglicerolilor(TG)
Hidroliza TG
Trigliceridele
reprezinta forma de
depozitare a excesului
caloric din organism.
Trigliceridele se gsesc
n cantiti apreciabile n
esutul adipos.
Degradarea tisular a
trigliceridelor are loc
prin hidroliza treptat,
conducnd n
final acizi grai liberi
i glicerol.
Fiecare etap este
catalizat de carte o enzim specific din grup.
Prima etapa care este catalizat de triacilglicerol-lipaza este etapa cea mai lent i este
determinant de viteza de reacie. Triacilglicerol-lipaza este cea mai importanta enzima din
esutul adipos i este responsabil de mobilizarea rezervelor lipidice din organism prin lipoliz.
Energia este controlat hormonal(lipaza hormon sensibil). Acest enzim este activat prin
fosforilarea proceselor ce are loc prin AMP ciclic. Activarea acestei enzime crete sub aciunea
catecolaminelor i glucogonului: hormonii lipolitici.
Insulina si prostaglandinele au efect inhibitor.
Glicerolulhidroliza triacilglicerolilor difuzeaz n plasm fapt ce duce la imposibilitatea utilizrii
lui de ctre esutul adipos care nu dispune de glicerolkinaz pentru fosforilare. Glicerolul este
captat de ficat, unde va servi ca substrat pentru gluconeogeneza(biosinteza de glucoz)
Acizii grai prin hidroliza trigliceridelor sunt utilizai n urma cii metabolice la:
1) ardere cu eliberare de ATP necesar funciei adipocitare;
82
2) sinteza de triacilglicerol prin activarea lui la acil-CoA, proces care este dependent de
glicemie i insulinemie;
3) eliberarea lor n plasm, unde funcioneaz, ca substane energogenice pentru muchii
scheletici, miocard, rinichi.
Valoarea acizilor grai n plasm crete n diabet, stres, datorit intensificrii lipolizei. Ficatul
epureaz plasma de acizi grai , si prin transferul lor n corpii cetonici (TAG)
Pentru o metabolizare total a grsimilor este necesar parcurgerea celor 2 etape, cea iniial, de
hidroliz citoplasmatic, i cea final, de oxidare mitocondrial.
Pentru a se cupla cele 2 etape catabolice este necesar un purttor (o molecula cru, un mijloc de
transport molecular care s preia acizii grai din citoplasm s-i duc n interiorul mitocondrionului.
Molecula purttor este L-carnitina care preia gruparea acil (rest de acid gras) de pe acil- coenzima
A (forma coenzima A (forma activ a acidului, sub care apare n citoplasm) formnd acil-
carnitina.
Acil-carnitina trece prin membranele mitocondriei, cu ajutorul unui sistem de transport specific i al
unei enzime numite translocaz.
n ultima etap a procesului de intrare n mitocondrion, gruparea acil este transferat de la carnitin
la coenzima A mitocondrial, reformndu-se acil-coenzima A.
Efectul energetic este foarte ridicat comparativ cu glucoz
DG=-347 Kcal/ 100 gr glucoz
DG=-914 Kcal/ 100 gr acid palmitic.
Se ia ca exemplu acidul palmitic deoarece este cel mai abundent acid gras din organism.
Sinteza lipidelor se face de la acetil Co.A n prezenta ATP-ului, care reprezint legtura esenial
ntre metabolismul lipidelor i glucidelor. Lipogeneza este condiionat de aportul glucidic. ntr-un
regim alimentar hiperglucidic, esutul adipos este bine reprezentat de acizii grai formai i se unesc
cu glicerolul rezultnd grsimile neutre care n esutul adipos au rol de termoreglare.
Glicerolul este un complex al acil i fosfoacil glicerolului.,
-Se formeaz prin hidroliza tisular a triglicerolilor i intra n fluxul metabolic sub forma
fosforilat .
Reacia de fosforilare are loc sub aciune glicerolkinazei(activa in ficat). Este prezent i n alte
tesuturi, dar lipsete n adipocit i n muchi. Reacia de fosforilare este dependet de ATP.
- Alta sursa de glicerol-3-P este de la dehidroxiaceton-P care provine de la glicoliz glucozei.
n esutul adipos, singura surs de glicerol-3-P necesar lipogenezei este glucoz, fapt ce
demonstreaz dependea metabolismului lipidic de glucoz i de reglarea insulinic. Glicerol-3-P
poate evolua pe mai multe cai metabolice :
-Sinteza de tri/fosfogliceride;
-gluconeogeneza;
-scop energeric prin transformarea sa n CO2, apa , i energie
Catabolismul lipidic se face prin beta-oxidare din care rezult o mare cantitate de energie
148mol ATP. Oxidarea n continuare n calea ciclului Krebs nu este folosit pentru sinteza
glicogenului.
Biosinteza glicerolului se realizeaz n cantitate mare din aldehida 3-fosfogliceric i din fosfo-
dihidroxi-aceton, care se formeaz n procesul de glicoliz (prin scindarea froctozo-1,6-
difosfatului). n biosinteza gliceridelor punctul de plecare este - fosfoglicerolul, carete mult mai
activ dect - fosfoglicerolul.
Biosinteza acizilor grai se realizeaz pe 2 ci diferite: o cale evideeniat la nivel
mitocondrial; alta, localizat n citoplasma celular, calea de importan major.
Trstura esenial a sistemuluii citoplasmatic al biosintezei acizilor grai este dependena lui
total de CO2 sau de HCO3-, de ATP, Mg+2 sau Mn+2, de NADPH + H+ i de biotin.
83
Punctul de plecare n sinteza acizilor grai la nivel citoplasmatic este acetil-CoA (acetatul
activat), compus care rezult:
- n procesul de degradare oxidativ a acizilor grai;
- din acidul pruvic rezultat n metabolismul glucidelor;
- din aminoacizii glucoformatori.
Biosinteza trigliceridelor i digliceridelor are loc n limitele reduse la nivelul celulelor din mucoasa
peretelui intestinal, de unde trrec ulterior n limf.
Procesul necesit prezena ATP i HS-CoA. Pentru biosinteza trigliceridelor este absolut necesar ca
glicerolul, rezultat n urma absorbiei intestinale, s fie fosforilat sub fform de-glicerofosfat.
Formarea glicerofosfatului este condiionat la nivelul esuturilor i celulelor n prezena unei
enzime, glicerokinaz, care a fost identificat n ficat, inim i este absent n esutul adipos i
mucoasa intestinal.
Biosinteza acizilor grai pe cale mitocondriala
Acesta cale consta n ataarea la o caten preexistent de acid gras a unor resturi acetil,
realizndu-se o lungire de 2 atomi de C a acidului preexistent.
Procedeul urmeaza calea invers a oxidrii:
Capitolul 14.
84
- Altele, inclusiv mamiferele i n special omul, pot sintetiza numai o parte din ei, care au fost
numii aminoacizi neeseniali.
-Cei ce nu pot fi sintetizai i care trebuie suplimentai prin diet sunt numii aminoacizi eseniali.
85
14.2. Cile generale de degradare a aminoacizilor
Spre deosebire de glucide sau lipide, n organism nu exista rezervoare de proteine. Aminoacizii n
exces, care nu sunt ncorporai n proteine sunt metabolizai sau inglobai n masa metabolic.
Conversia aminonitrogenului/NH3 n uree se face cu o vitez apreciabil prin parcurgerea
etapelor: dezaminarea oxidativ, trans-dezaminarea, transportul NH3 i ciclul ureogenetic.
14.2.1. Dezaminarea oxidativa a -aminoacizilor
Aceast transformare catalizat de glutamat dehidrogenaz (GDH) prezent n mitocondrii este
singura care determin dezaminarea rapid a unui aminoacid, a Glu. Ea are doua etape. Prima este
o reacie de dehidrogenare catalizat de GDH, NAD(P)+-dependent, din care rezulta iminoacidul
glutamic:
GDH este inhibat de GTP i activat de ADP n vitro ceea ce sugereaz aciunea acestor
nucleotide n vivo unde enzima funcioneaz aproape de echilibru .A doua reacie este hidroliza -
iminoacidului rezultnd acidul -cetoglutaric (-CG):
HOOC-CH2-CH2-CH(COOH)=NH + H2O HOOC-CH2-CH2-CH(COOH)=O + NH3
Modularea activitii GDH de ADP si GTP se face n funcie de necesiti. Dac un hepatocit
necesit intensificarea ciclului citric, dezaminarea oxidativa este intensificat rezultand -CG care
este un intermediar al ciclului. Prin urmare, dezaminarea oxidativa Glu este o reacie
86
anaplerotic. Pe de alta parte, dac, datorit activitii prea intense a ciclului citric, se acumuleaza
GTP, dezaminarea oxidativa a Glu este inhibat. GG
Datorita etapei 2 secvena celor doua reacii are un bilan energetic defavorabil (GG 30 kJ.mol-1)
ceea ce d.p.d.v. fiziologic este important. Se menine astfel concentraia NH3 rezultat, substana
toxic pentru sistemul nervos central (SNC), la o concentraie mic.
n afara de GDH exist n ficat i rinichi dou enzime nespecifice, L-aminoacid oxidaza i D-
aminoacid oxidaza, cu activitate mic. Reaciile enzimatice catalizate de aceste doua enzime
decurg n dou etape:
-Aminoacid + FAD + H2O -Cetoacid + NH3 + FADH2
FADH2 + O2 FAD + H2O2
Apa oxigenata este rapid degradat de catalaz. Existena D-aminoacid oxidazei este intructva
enigmatic, deoarece D-aminoacizii apar doar n peretele celulelor bacteriene.
Dezaminarea neoxidativa are ca substraturi puini aminoacizi (Ser si His). Reaciile implicate vor
fi tratate mai jos.
Azotul gruprilor -NH2(aminonitrogenul) din structura aminoacizilor se elimina cel mai adesea
sub form de amoniac, n cursul degradrii acestora. Formarea i conversia amo-niacului n
structuri netoxice constituie metabolismul acestui compus.
Ambele reactii sunt catalizate de glutamil sintetaza. Sarcina net a Glu este -1 la pH-ul fizio-logic,
ceea ce impiedic difuzia acestuia prin membrane. n schimb glutamina, a crei sarcin net este
nul, strbate usor membranele difuznd in sange. Ea este o important forma de transport a
aminonitrogenului (fig. 1). Eficiena ridicat se datoreaz i coninutului ridicat n azot al
glutaminei. Ea depaete de cateva ori concentraia plasmatic a celorlali aminoacizi liberi.
Glutamina ajunge pe cale sanguin la ficat unde sub aciunea glutaminazei elibereaza NH3,
conform reaciei:
Decarboxilarea aminoacizilor
In general decarboxilarea unui aminoacid proteinogen sau neproteinogen monocarboxilic produce
o amin biogen(ptomain) care are importante proprieti biologice. Cateva exemple puse intr-o
reprezentare schematic apar n figura 6.
88
14.2.4.1. Catabolismul aminoacizilor cu catena ramificata.
Valina i Izoleucina, aminoacizi cu catena ramificat, produc succinil-CoA (fig. 18). Producand
doar succinil-CoA valina este un aminoacid glucoplastic. Izoleucina este un aminoacid mixt
deoarece, ea produce atat succinil-CoA ct i CH3COSCoA din care se sintetizeaz corpi cetonici.
Leucina este aminoacid cetoplastic, deoarece prin catabolizare ea produce numai acetoacetat, corp
cetonic.
90
Figura 19. Caile de degradare ale aminoacizilor cu catena ramificat: izoleucina (A), valina (B) si
leucina (C).
Primele 3 reacii ale fiecarei ci utilizeaz enzimele comune: aminoacid cu catena ramificat
aminotransferaza (PLP-dependenta)(1), -cetoacid dehidrogenaza (2) si acil-CoA dehidrogenaza
(3). Degradarea Ile continucu implicarea enzimelor: enoil-CoA hidrataza (4), -hidroxiacil-CoA
dehidrogenaza (5) i acetil-CoA acetil transferaza (6). Degradarea Val implica: enoil-CoA hidrataza
(7), -hidroxiizobutiril-CoA hidrolaza (8), -hidroxiizobutirat dehidrogenaza (9) i metilmalonat
semialdehida dehidrogenaza (10). Degradarea Leu implica: -metilcrotonil-CoA carboxilaza
(biotindependenta) (11),-metilglutaconil-CoA hidrataza(12) i -HMG-CoA-liaza(13).
Metabolism proteine
Proteinele alimentare sunt scindate hidrolitic pana la aminoacizi, sub actiunea enzimelor
proteolitice din sucurile digestive. Aminoacizii rezultati sunt absorbiti din intestin si, pe cale
portala, ajung la ficat, unde sunt metabolizati in proportii variabile (20-80%); restul strabat ficatul
si ajung in circulatia sistemica, de unde sunt extrasi si utilizati in tesuturi.
Ficatul detine rolul principal in metabolismul aminoacizilor de provenienta alimentara si al celor de
origine tisulara (endogena), care impreuna constituie un fond metabolic comun. Parte din
aminoacizi sunt utilizati de ficat pentru sinteza si remanierea proteinelor proprii structurale, parte
pentru sinteza unor proteine functionale necesare intregului organism (albumine plasmatice, factori
ai coagularii, anticorpi, enzime, etc.) si o anumita cota de aminoacizi este descarcata in circulatia
sistemica, mentinand concentratia plasmatica totala a aminoacizilor la valori cuprinse intre 35 si 65
mg/100ml.
Catabolismul aminoacizilor, in urma caruia rezulta un cetoacid si amoniac, consta in special in
dezaminare, proces care se poate realiza pe mai multe cai, cea mai important fiind dezaminarea
oxidativa, care are loc in ficat.
Cetoacidul care rezulta poate urma mai multe cai metabolice:
sinteza de noi aminoacizi prin procesul de transaminare, adica de transfer a gruparii aminice
desprinsa de pe un aminoacid pe un alt cetoacid, proces catalizat de transaminaze. In organism pe
aceasta cale se pot sintetiza toti aminoacizii pentru care exista cetoacizi corespunzatori, dar nu si
aminoacizii pentru care nu exista asemenea cetoacizi si care trebuie deci sa fie adusi in organism
prin alimentatie (aminoacizi esentiali);
intrarea in ciclul Krebs si oxidarea completa pana la dioxid de carbon si apa cu eliminarea
concomitenta de energie;
intrarea in ciclul Krebs, dupa transformarea intr-unul din constituentii acestuia si parcurgerea
retrograda a reactiilor acestui ciclu, ajungandu-se la sinteza de glucoza (gluconeogeneza procesul
cu o eficienta redusa are loc in ficat). Aceasta reprezinta calea de legatura dintre metabolismul
protidic si cel glucidic si este accesibila aminoacizilor denumiti glucoformatori;
sinteza corpilor cetonici este calea metabolica a cetoacizilor (aminoacizi cetogeni). Sintetizati in
ficat, corpii cetonici sunt descarcati in circulatie, de unde sunt extrasi de celule, fiind utilizati ca
material energetic sau pentru sinteze de acizi grasi.
Amoniacul, rezultat al dezaminarii tisulare si hepatice a aminoacizilor, precum si cel care rezulta
din catabolismul intestinal al aminoacizilor sub actiunea enzimelor bacteriene, fiind o substanta
toxica, este rapid neutralizat, in special de catre ficat. Cea mai mare parte a amoniacului este
92
combinata cu dioxidul de carbon la nivelul ficatului, rezultand uree (ureogeneza), produs terminal
al catabolismului proteic, care este eliminat prin urina.
In anumite tesuturi (sistem nervos, ficat) amoniacul este combinat cu acidul glutamic, rezultand
glutamina compus netoxic, care se desface usor, eliberand amoniacul necesar diferitelor reactii
metabolice. De asemenea, parte din amoniac este utilizata pentru reaminarea cetoacizilor si sinteza
de noi aminoacizi.
Aminoacizii sunt catabolizati i prin decarboxilare, sub actiunea unor enzime specifice ale florei
intestinale. Procesul, care are amploare in special cand ajung in colon cantitati crescute de proteine
nedigerate, genereaza amine, unele de importanta biologica deosebita.
Creatina si creatinina sunt, de asemenea, produsi ai metabolismului protidic - creatina este
sintetizata in ficat si depusa in cea mai mare parte in musculatura si in mai mica masura in tesutul
nervos iar creatinina este produsul final de catabolism al creatinei. In muschiul scheletic, creatina
se afla combinata cu acidul fosforic sub forma de fosfocreatina, datorita energiei furnizate de ATP,
iar in timpul contractiei musculare desfacerea legaturii fosfat-macroergice a fosfocreatinei
furnizeaza energia necesara refacerii ATP.
Reglarea metabolismului protidic este realizata, in primul rand, de corelatiile dintre anumiti factori
intracelulari, asupra carora actioneaza diferiti hormoni, dintre care unii stimuleaza sinteza de
proteine din aminoacizi (hormonii anabolizanti - somatotropul, insulina, hormonii sexuali) si altii
intensifica degradarea proteinelor in aminoacizi (hormoni catabolizanti - corticotropina hipofizara,
glucocorticoizii suprarenali, care actioneaza stimuland degradarea aminoacizilor si
gluconeogeneza, si hormonii tiroidieni, cand sunt secretati in cantitati crescute).
In organismul adultului normal exista un echilibru dinamic intre procesele de anabolism si
catabolism protidic. In schimb, in perioada de crestere predomina procesele anabolice, ceea ce are
ca rezultat acumularea de proteine, iar in perioada de batranete predomina procesele de catabolism
protidic, avand ca urmare scaderea stocului de proteine.
14.3.1.
Biosinteza proteinelor
93
Proteinele sunt substane organice macromoleculare formate din lanuri simple sau complexe
de aminoacizi; ele sunt prezente n celulele tuturor organismelor vii n proporie de peste 50% din
greutatea uscat. Toate proteinele sunt polimeri ai aminoacizilor, n care secvena acestora este
codificat de ctre o gen. Fiecare protein are secvena ei unic de aminoacizi, determinat de
secvena nucleotidic a genei.
Biosinteza proteinelor
94
guanosin grefat printr-o legtur de tip 5'- 5' de molecula de ARN prin intermediul unei legturi
trifosfat.
. Are loc adiia unei grupri 5', grupare dinucleotidic care are rolul de a asigura stabilitatea ARN i
de a-l transforma n ARN matur. O secven de aminoacizi este grefat n poziia 3' terminal
pentru protecie, dar i pentru a sluji drept ablon pentru procesele urmtoare.Mai departe are loc
formarea ARN, care este apoi utilizat n ribozomi pentru sinteza proteinelor. La procariote legarea
ARN de ribosomi are loc dup ce acesta este ndeprtat de nucleoid; n contrast la procariote acest
proces are loc chiar n membrana nuclear i apoi translocat n citoplasm. Rata sintezei proteic
poate ajunge la circa 20 aminoacizi la procariote, mult mai puin la eucariote.
Translaia
n timpul translaiei ARNm transcris din ADN este decodat de ribozomi pentru sinteza proteinelor.
Acest proces este divizat n 3 etape:
1. Iniierea. 2. Elongarea. 3. Faza terminal.
Ribozomul are situsuri de legare care permit altei molecule de ARNt (ARN de transfer), s se lege
de o molecul de ARN m, proces nsoit de prezena unui anticodon. Pe msur ce ribozomul
migreaz de-a lungul moleculei de ARNm (un codon o dat) o alt molecul de ARNt este
ataat ARNm. Are loc eliberarea ARNt primar, iar aminoacidul care este ataat de acesta este
legat de ARNt secundar, care l leag de o alt molecul de aminoacid. Translaia continu pe
msur ce lanul de aminoacid este format. La un moment dat apare un codon de stop, o
secven format din 3 nucleotide (UAG, UAA), care semnaleaz sfritul lanului proteic.
Chiar dup termminarea translaiei lanurile proteice pot suferi modificri post-translaionale
i plierea lanului proteic, responsabil de structura secundar i cea teriar. Modificrile post-
translaionale se refer la posibilitatea formrii de legturi disulfidice, sau de ataarea la scheletul
proteic a diferite grupri ca rol biochimic: acetat, fosfat etc.
Sinteza chimic.
Procesul de sintez chimic poate avea loc n laborator, dar pentru lanuri mici de proteine. O serie
de reacii chimice cunoscute sub denumirea de sinteza peptidelor, permit producerea de cantiti
mari de proteine. Prin sinteza chimic se permite introducerea n lanul proteic a aminoacizilor ne-
naturali, ataarea de exemplu a unor grupri fluorescente. Metodele sunt utilizate n biochimie i n
biologia celulei. Sinteza are la baz cuplarea gruprii carboxil -COOH (carbon terminus) cu
gruparea -amino -NH2 (segmentul N terminus).
Se cunosc 2 metode de sintez pe cale chimic:
- Sinteza n faz lichid, metoda clasic, care a fost nlocuit cu sinteza n faz solid.
- Sinteza n faz solid a crei baz a fost pus de Robert Bruce Merrifield. Prin aceat metod, se
pot sintetiza proteine D, cu aminoacizi D. n prima
faz Merrifield a folosit metoda tBoc (ter-butil-
oxi-carbonil). Pentru nlturarea acestuia din lanul
peptidic se folosete acidul fluorhidric (HF), care
este foarte nociv, periculos, iar din acest motiv,
metoda nu se mai utilizeaz. Atunci cnd este vorba
de sinteza analogilor peptidici non-naturali de tip
baz (depsi-peptidele) este necesar.
O alt metod este cea introdus de R.C. Sheppard
n anul 1971, i are la baz folosirea Fmoc
(fluorenil metoxi carbonil), iar pentru neprtarea
acesteia se folosete de obicei mediu bazic asigurat
de o soluie 20% piperidin/DMF (dimetil
formamid). ndeprtarea gruprii din lanul proteic
se face prin incubare n acid trifluoracetic (TFA).
98
99
100
Tema: Metabolismul apei
- Dup O2 apa reprezinta a doua substanta indispensabila meninerii vietii. Necesarul de ap - 2,5l/zi
depinznd de temperatur i efortul depus putand ajunge la 4litri in 24ore.
- apa extracelular (plasma, lichidul interstitiar);
- apa intracelular.
Cele 2 medii sunt separata de membrana celular. Originea apei este exogen(adus prin
alimentatii), endogen(rezulta din reaciile de oxidare). La realizarea homeostazei apa detine o mare
pondere, ea fiind ntr-un echilibru permanent prin micarea apei, formarea apei n organism,
eliminarea prin rinichi i plmni.
Echilibrul hidric se realizeaz prin ingerarea a 1500 ml apa, 100ml cu alimente, 300ml apa prin
arderea H din substaele organice. Se elimina 1500ml prin urina, 600 - 800ml prin tegument, 400 pe
cale respiratorie, 100ml prin fecale. Echilibrul hidric este dependent de concentratia ionilor de Na+
si Cl-. Cand presiunea osmatica a sngelui creste, apa este reinuta n organism i eliminata. Cand
osmopolaritatea scade, modificarea presiunii osmatice a sngelui determin apariia senzatiei de
sete i, deci, ingerare de ap. Efortul fizic tinde s tulbure permanent echilibrul hidric i n special
prin transpiraie cnd se pierd cantiti importante de sruri minerale, dar se elimin i o serie de
produi toxici formai n timpul efortului fizic. Cu pierderea apei scade greutatea corporal n
funcie de intensitatea efortului i temperaturii.
I Metabolismul mineral - nevoia de substane minerale este n medie de 25gr din care sarea
reprezint 10gr. Na.- se gasete n cantitatea cea mai mare n sange, n lichid interstiiar, iar restul de
5 - 10% n celule i 25% n os. Importan/a Na+ n corp rezid realizarea presiunii osmatice a
sngelui n procesele de excitabilitate celular, n conductibilitatea nervoas, n permeabilitatea
membranei, n realizarea sistemului tampon cu rol n meninerea pH mediului intern. Potasiu - se
101
afla n cantitate mare in interiorul celulei iar Na in spatiul intercelular si contribuie la men inerea
potentialului de repaos celular, deci a excitabilitii neuro-musculare. Ca2+. - produs n oase, se afl
n muschi, snge - este adus cu alimentele, iar absorbia lui intestinal se face n prezena vitaminei
D. Fosforul - predomina in compozitia chimica a oaselor, se absoarbe din alimente. Are rol in
formarea scheletului, n structura membranelor, in A.D.P. i O.P cu rol puternic energetic.
Reglarea metabolismului mineral se realizeaz pe cale nervoas prin centrii hipotalamici,
tiroidieni, suprarenali i para-tiroidieni.
-II- Metabolismul energetic - reprezint totalitatea schimburilor energetice dintre materia vie i
mediul extern. El are la baza transformri enzimatice, chimice, ale alimenta iei din cadrul
metabolismului intermediar, glucidic, protidic, lipidic n care se elibereaz treptat energie cuprinse
n principiile alimentare. Energia este stocat n molecula de A.T.P. n proporie de 45% i 55% se
transform n cldura.
Cheltuielile energetice ale organismului
- fixe - care reprezint metabolismul bazal (M.B.)
- variabile - care depind de o serie de factori.
Metabolismul bazal (fixe)- este consumul energetic minim necesar intreinerii funciilor vitale. n
repaos consumul energetic al organismului este mai mic i este rezultatul reaciilor chimice care au
loc n organism. Vitale - inima, rinichi etc. determinarea metabolismului se face printr-o metoda
indirect a schimburilor gazoase folosind aparate cu circuit nchis n care se inspir i expira.
Aparatul are un clopot de sticla care conine O2 i pe masur ce subiectul inspir nivelul O 2 este
inregistrat grafi sub forma unei curbe a carei inalime exprimat n mm. corespunztori cu
cantitatea de calorii consumat de organism. Valoarea obinuta se raporteaza la suprafaa corporal
sau se inmulete cu 24ore. Valorile medii ale metabolismului bazal sunt legate de varst, sex,
greutate, inalime, efort, clim, somn, febr etc.
Variabile - depind de o serie de factori. Cele mai mari cresteri ale consumului de O 2 se produc in
eforturile intense cand energia calorica degajata poate depai pentru scurt timp de 30 - 50ori valorile
bazale ale cheltuielilor energetice.
Cheltuielile energiei variabile - depind de:
activitatea muscular- muschii reprezint 30% din greutatea corporala i sunt mari consumatori de
energie att n repaos ct si n efort.
Cheltuielile energetice variaz proportional cu activitatea muscular depus. Astfel este de 2000 -
3000Kcal pentru muncitorii din uzin, dar cel mai mare consum energetic l au sportivii n
antrenament ntre 5000 i 6000 Kcal. Consumul energetic ncepe nc nainte de ncepere efortului
i n continuare proportional cu efortul depus. Oricat s-ar mari ventilatia pulmonar nu se poate
asigura o absorbtie de O2 mai mare de 6 - 7l/min. Dac efortul este att de mare ncat organismul
necesita 30 - 40l/min. nu se poate asigura aceasta valoare i organismul este nevoit s lucreze n
datorie de O2 se achita n perioada de restabilire a organismului dup efort.
102
Temperatura mediului nconjurator - cnd temperatura scade pierderile de caldura cresc, dar intervin
mecanismele reflexe prin vaso-constricie, deci scade depozitul de caldur, iar instalarea frisonului
intensifica arderile celulare cu 50%. Expunerea la cald intensifica circulatia respiratorie, secretia
sudorala si termoliza. Intre cele 2 extreme de temperatura exist o valoare a temperaturii mediului
ambiant de circa 21grade pentru omul mbracat i 28 grade pentru cel dezbracat.
Temperatura de confort termic.
Aciunea alimentelor - ingerarea de alimente activeaza schimburile energetice cu 10 15% fat de
metabolismul bazal. Acest efect a fost denumit aciunea dinamica specific (A.D.S.). A.D.S. este
mai mare de +30% fat de glucide care au +6% iar lipidele +4%.
Alti factori - care cresc metabolismul cu 3 - 4% - emotiile, pot produce prin suprasolicitare
modificri cronice ale metabolismului prin afectarea S.N.C. i endocrin. Pentru ca emoiile cresc
secreia de adrenalina care are un efect stimulator energetic. n funcie de cheltuielile energetice
pe ramura de sport se calculeaz necesarul caloric zilnic. Exista tabele care contin tipul de efort cu
valorile medii ale ratiei alimentare. Cunoscand costul energetic al activitatii efectuate avem
posibilitatea planificrii repaosului n asa fel ncat s se obin un echilibru energetic adecvat i s
se menin greutatea corporal constant.
103
corpul unde se afla apa.In corpul omenesc fiecare gram de apa evaporate de pe suprafata pielii
(transpiratie) la temperatura camerei inlesneste pierderea a 580 de calorii mici.
Introducerea si eliminarea apei din organism
Apa este introdusa in organism sub forma de bauturi impreuna cu alte alimente.Intr-adevar, in
afara de apa pe care o bem, o cantitate de apa se formeaza in organism prin oxidarea diferitelor
alimente.
Multa lume considera ca daca mananca o paine, o friptura, o prajitura sau o legume nu itroduc in
organism nici o picatura de apa.Acest lucru este gresit.S-a constatat ca prin completa oxidare a 100
grame de grasime se formeaza 107 grame de apa, din 100 gramede amidon se formeaza 55 de
grame de apa, din 100grame de albumila se formeaza 41 de grame de apa.Dintr-un alt punct de
vedere alimentele contin o insemnata cantitate de apa impreuna cu alte substante hranitoare.De
regula fructele si vegetalele contin peste 90 apa, iar alimentele pe care le numim uscate (painea,
carnea) contin intre 60 si 85% apa.Orice aliment pe care l-am considera contine o cantitate
apreciabila de apa, in afara cantitatii de apa care se formeaza prin oxidarea alimentului respectiv.
Apa luata din stomac si din intestine este transportata de sange in tot organismul si este retinuta de
tesuturi.Rezerva de apa aorganismului o constituie in special muschii si pielea, datorita volumului
lor.Pe langa acestea si celelalte organe si parti ale corpului omenesc au in compozitia lor o cantitate
insemnata de apa (ficatul, creierul, plasma sanguina, celulele, plamanii).
n mod normal organismul uman are nevoie zilnic de 2 litri si jumatate de apa, dar uneori aceasta
nevoie poate sa se ridice pana la zeci de litri de apa.Intrebarea este de ce e nevoie sa schimbam
apa ?Este limpede ca daca eliminam apa trebuie sa o si punem inapoi.Dar de ce sa o eliminam ?.
Apa se elimina din organism in primul rand prin rinichi (1 litru si jumatate pe zi).De fapt pierderea
aceasta variaza intre 0,6 si 2 litri pe zi.In unele cazuri se pot atinge valori foarte mari.Astfel, in boli
cum ar fi diabetul pot fi eliminate cantitati uriase de urina(8-10litri pe zi).
Rinichii au un rol foarte important ; ei extrag din sange toate substantele nefolositoare sau
daunatoare organismului, pe care acesta le-a adunat din tesuturi si organe.Pentru a arunca afara
aceste substante este neaparat nevoie de apa, in care aceste substante sunt dizolvate.Restul apei se
elimina prin plamani, sub forma de vapori(~400cm2), prin intestine (100-200cm2) si prin piele
(500cm2).
O mare parte din apa se pierde prin plamani.La caini, care sunt lipsiti de glande sudoripare,
evaporarea apei se produce prin gura, prin plamani si prin caile respiratorii.Aceasta pierdere a apei
este marita prin gafaire.In acest fel cainele reuseste sa faca fata vara la marea cantitate de caldura.
In respiratia accelerata la om, in timpul muncii sau a altor eforturi fizice, cantitatea de apa care se
elimina prin plamani creste.Oamenii care muncesc in conditii de temperatura ridicata pot pierde
pana la 6-10 litri de apa.
Starea si reglarea metabolismului apei
Multi oameni si-au pus intrebarea de ce le este sete ?Setea este semnalul lipsei de apa in
organism.Celulele din diferite tesuturi ajung la un moment dat sa nu mai aiba destula apa.Acest
lucru de intampla mai ales vara.Celelale anunta creierul despre lipsa apei.La nivelul cerebral
informatia este prelucrata si se formeaza senzatia de sete, care ne obliga sa bem apa.
Cat timp poate sa traiasca o vietuitoare fara apa ?Aceasta variaza mult de la o specie la alta.Unele
specii, cum sunt molii sau serpii au o rezistenta foarte mare la lipsa apei.La fel si camilele au o
rezistenta buna la dezhidratare.Insa majoritatea animalelor nu po suferi lipsa indelungata a
apei.Oamenii pirduti in desert fara apa, supravietuiesc cel mult 3 zile.
Metebolismul apei este influentat de multe glande cu secretie interna (tiroida, glandele
suprarenale, glandele genitael, pancreasul, ficatul), dar organul cel mai important care regleaza
metabolismul apei este hipofiza (o glanda ce se situeaza sub creier).Hormonul lobului posterior al
hipofizei pituitrita-provoaca o diuree puternica (cresterea cantitatii de urina).
Scoarta creierului are un rol foarte important in reglarea introducerii, folosirii si eliminarii apei
din organism.Ca organ coordonator scoarta creierului intervine in toate aceste procese.
Astfel viata devine indisolubil legata de apa
Cantitatea de apa din componentele lichide ale corpului omenesc :
Plasma sanguina 3litri
104
Lichid interstitial 14litri
Apa din celule 29litri
Procente de apa in corpul omenesc :
Creier.75%
Plamani.80%
Inima.79%
Splina75%
Rinichi82%
Sange83%
Muschi.. 75%
Oase..22%
Anexe
2. Fotosinteza - sintetizarea substanelor organice complexe din substane minerale cu ajutorul
luminii
Sinteza porfirinelor
- Capitolul 11
Oxidarea biologic
105
Procese generale n catabolism
Procese de oxidoreducere n organismele vii
Calea de baz pentru valorificarea glucidelor, lipidelor, proteinelor este oxidarea biologic numit
i respiraia sau proces catabolic prin care moleculele substanelor nutritive sunt degradate treptat
sub aciunea oxigenului atmosferic cu formare de CO2 i eliberare de energie.
n urma procesului de oxidare biologic, toate cele trei clase principale de substane nutritive
(G,L,P) sunt transformate`ntr-un intermediar comun i anume acetilcoenzima A sau acetatul
activ; acesta se catabolizeaz n mitocondrii pn la CO2 i H2O n prezena O2
n cadrul a dou procese: Ciclul Krebs sau ciclul acizilor tricarboxilici, n care acetatul activ, prin
intermediul unor acizi tricarboxilici este transformat n CO2 i atomi de hidrogen activai sub
forma redus a coenzimelor unor dehidrogenaze; Lanul transportorilor de hidrogen i electroni
numit i lanul respirator sau catena de respiraie n care hidrogenul fixat pe dehidrogenaze este
activat n continuare pn la starea de proton, prin preluarea electronilor i transportul acestora la
oxigen, pe care-l activeaz sub formde anion, fiind astfel posibi formarea apei: 2H++ O2-= H2O
n anumite etape ale acestei activri `n care se elibereaz energie, se formeaz i ATP din ADP i
Pa, proces numit i fosforilare oxidativ.Oxidarea biologic are loc n mitocondriile tuturor
celulelor animale aerobe sub aciunea sistemelor multienzimatice care de la acest nivel catalizeaz
transformrile biochimice respective, rolul acesteia fiind n primul rnd cel energetic.
Ciclul Krebs
Procesul biochimic prin care acetatul activat (CH3CO SCoA) provenit prin metabolizarea G,L,P,
este catabolizat n scop energetic printr-o succesiune de reacii iniiat de condensarea sa cu acidul
oxalil acetic, se reia ciclic odat cu regenerarea oxalil-acetatului.
Catena de respiraie i fosforilarea oxidativ
Formarea apei din hidrogenul reultat prin dehidrogenarea substratelor ioxigenul preluat din aer
este procesul metabolic hotrtor n producerea de energie i are loc n mitocondriile fiind
continuare a ciclului Krebs. Energia reaciei de formare a apei se elibereaz trptat prin parcurgerea
unei catene de sisteme redox alctuit din transportori i e-: NADH++ H+, FAD,coenzima Q,
citocromii b, c1,c, a i a3
. Coenzimele care particip la procesele redox pot fi n stare redus sau oxidat unele pot prelua
hidrogenul de la substrat reducndu-se, altele preiau numai electronii. Succesiunea lor n catena de
respiraie depinde de valoarea potenialului redox a substratelor.
Oxidarea fosforilant
este procesul prin care energia eliberat odat cu transportul hidrogenului este utilizat pentru
fosforilarea ADP la ATP. Legtura macroergic se poate forma numai n unele etape ale lanului de
oxidare i anume n acele etape n care energia eliberat este mai mare dect energia de formare a
legturii macroergice. n schema lanului respirator se formeaz 3 moli de ATP n etapele:
NADH2 /FAD; CoQH2/cit c1Fe3+i cit a 3Fe2+/oxigen.
Ca o regul general, la toate lanurile de oxidare, cnd ncep cu coenzimele NAD+sau NADP
se vor forma 3 legturi macroergice, iar cele care ncep cu FAD vor forma dou legturi
macroergice.
Energetica metabolismului
n cadrul proceselor metabolice transformrile substanelor sunt nsoite de schimbul i
transformarea energiei; toate reaciile biochimice sunt nsoite de consum sau eliberare de
energie. Astfel, reaciile de descompunere a substanelor complexe n substane mai simple sunt
nsoite de obicei de o scdere a energiei libere a substanelor care se transform, n schimb
sintezele biochimice au loc cu consum de energie. Un efect energetic deosebit de important l au
reaciile de oxidoreducere, care reprezint principala surs de energie `n organismul animal.
Reaciile de degradare furnizeaz energia necesar reaciilor de biosintez;orice intensificare a
proceselor de biosintez n organismele vii, pentru care este necesar energia liber, trebuie s fie
106
nsoit de o intensificare a proceselor de degradare a substanelor care furnizeaz energia necesar
realizrii acestor biosinteze. O mic parte din energia catabolic este transformat n cldur.
Echilibrul chimic care exist ntre diferite procese biochimice se realizeaz cu ajutorul anumitor
sisteme de reglare, prin mecanisme specifice sau nespecifice. Reaciile biochimice pot fi controlate
enzimatic i hormonal prin mecanisme interdependente cu ajutorul efectorilor enzimatici.
METABOLISMUL
11.1. Generaliti
11.2. Oxidarea biologic
11.3. Catena de respiraie i fosforilarea oxidativ
11.4. Metabolismul glicogenului
11.4.1. Biosinteza glicogenului - glicogenogeneza
11.4.2. Degradarea glicogenului - glicogenoliza
12.2. Metabolismul glucozei
11.2.A. Catabolismul anaerob al glucozei (Glicoliza)
11.2.B Catabolismul aerob al glucozei
12.3. Gluconeogeneza
12.4. Biosinteza lactozei
12.5. Glicemia
12.6. ntrebri
11.1. Generaliti
Metabolismul este o nsuire comun tuturor vieuitoarelor i nu poate avea loc n afara materiei
vii.Totalitatea transformrilor chimice i energetice, ce au loc n organism
mpreun cu schimbul de substane cu mediul nconjurtor, constituie
metabolismul general.
Biochimia studiaz mecanismele chimice, care au loc la nivelul esuturilor i celulelor, ceea ce
constituie metabolismul intermediar.
El are dou laturi principale:
anabolismul - procesul de construcie (sintez) a substanelor proprii organismului (necesit
energie)
catabolismul - procesul de degradare a substanelor din organism, care duc n majoritatea
cazurilor la bioxid de carbon (CO2), ap (H2O) i energie chimic ncorporat n legturile
macroergice ale ATP.
Procesele anabolice i catabolice constau dintr-o succesiune de reacii chimice catalizate de enzime
specifice.
n coordonarea i reglarea proceselor (biologice) metabolice un rol deosebit revine hormonilor i
sistemelor neurohormonale.
107
2. Fragmentele coninnd 2 C sunt apoi desfcute prin reacii n care se elibereaz treptat CO2 i
2H;
3. CO2 rezult prin decarboxilarea acizilor organici ntr-un proces ciclic, numit ciclul ATC
(ciclul acizilor tricarboxilici) sau ciclul lui Krebs, fr schimbarea esenial de energie;
4. H2O se formeaz prin oxidarea hidrogenului desprins din diferitele biomolecule (glucide,
lipide, protide) i preluat de ctre codehidrogenaze.
Oxidarea biologic poate fi prezentat n mod simplu, astfel:
2H2 2 H+ reacie de
oxidare
O2 + 2 O2- reacie de
reducere
Cele dou elemente activate se vor combina i vor forma apa:
2 H+ + O2- H2O
Electronii cedai de hidrogen nu ajung direct la oxigenul respirat, ci prin intermediul unor enzime
din clasa oxidoreductazelor numite citocromi. Acestea sunt de mai multe feluri: cit a, cit b, cit c
i conin fier n molecul. Participarea citocromilor la transportul electronilor este posibil datorit
existenei Fe2+ i Fe3+ n moleculele lor:
-
Cit (Fe2+) cit (Fe3+)
Hidrogenul provenit din diferiii compui organici (diferitele substrate) este preluat de enzimele
din clasa oxidoreductazelor, care au ca i cofactori NAD, FAD sau coenzima Q. Preluarea
hidrogenului va transforma aceste enzime n formele lor reduse NADH2, FADH2 i QH2.
Formarea apei este nsoit de o mare degajare de energie care se elibereaz treptat i este
ncorporat sub form de energie chimic n legturile macroergice ale ATP. ATP se formeaz din
ADP i fosfat anorganic:
108
ADP + ATP
Pa
Formarea ATP se numete fosforilare oxidativ.
Catena de respiraie i fosforilarea oxidativ sunt dou procese care au loc simultan, de aceea se
folosete termenul de cuplarea catenei de respiraie cu fosforilarea oxidativ.
Cele dou procese pot decurge i separat, adic catena de respiraie este decuplat de fosforilarea
oxidativ, dar atunci energia rezultat la formarea apei se pierde sub form de energie
termic, ceea ce nu este avantajos pentru celul. Decuplarea catenei de respiraie de fosforilarea
oxidativ explic supravieuirea animalelor care hiberneaz pe timp de iarn.
Catena de respiraie i cuplarea ei cu fosforilarea oxidativ poate fi redat schematic astfel:
Ciclul Krebs sau ciclul acizilor tricarboxilici, n care acetatul activ, prin intermediul unor acizi
tricarboxilici este transformat n CO2 i atomi de hidrogen activai sub forma redus
a coenzimelor unor dehidrogenaze. Lanul transportorilor de hidrogen i electroni numit i
lanul respirator sau catena de respiraie n care hidrogenul fixat pe dehidrogenaze este activat n
continuare pn la starea de proton, prin preluarea electronilor i transportul acestora la oxigen, pe
care-l activeaz sub form de anion, fiind astfel posibil formarea apei: 2 H++ O2-= H2O
n anumite etape ale acestei activri n care se elibereaz energie, se formeaz i ATP din ADP i
Pa, proces numit i fosforilare oxidativ.Oxidarea biologic are loc n mitocondriile tuturor
celulelor animale aerobe sub aciunea sistemelor multienzimatice care de la acest nivel catalizeaz
transformrile biochimice respective, rolul acesteia fiind n primul rnd cel energetic.
Ciclul Krebs
Procesul biochimic prin care acetatul activat (CH3CO SCoA) provenit prin metabolizarea G,L,P,
este catabolizat n scop energetic printr-o succesiune de reacii iniiat de condensarea sa cu acidul
oxalilacetic, se reia ciclic odat cu regenerarea oxalil-acetatului.
111
Ciclul acidului citric - cunoscut i sub numele de ciclul acizilor tricarboxilici(ciclul TCA), ciclul
Krebs, sau ciclul Szent-Gyrgyi-Krebs - este un ciclu de reacii chimice, care este folosit de ctre
toate aerobe pentru a genera energie prin oxidarea acetatului provenit din carbohidrai, grsimi i
proteine n dioxid de carbon i ap.
n plus, ciclul furnizeaz precursori pentru biosintez, incluznd aici anumii aminoacizi, precum
i agentul de reducereNADH, care este implica n numeroase reacii biochimice. Importana
acestuia din urm, pentru mai multe ci metabolice, sugereaz c a fost unul dintre cele mai
timpurii componente ale metabolismului celular i poate avea origine abiogenic.
Numele acestei ci metabolice este derivat de la acidul citric (un acid tricarboxilic) care este mai
nti consumat i apoi regenerat prin aceast secven de reacii pentru a complete ciclul. n plus,
n ciclu se consum acetat (sub form de acetil-CoA) i ap, se reduce NAD+ la NADH, i se
produce dioxid de carbon. NADH-ul generat prin ciclul acizilor tricarboxilici este utilizat ulterior n
procesele de fosforilare oxidativ. Rezultatul net al acestor dou ci strns legate este oxidarea de
substane nutritive pentru a produce energie sub form de ATP.
n celulele eucariote, ciclul acidului citric are loc n matricea mitocondriei. Bacteriile utilizeaz, de
asemenea, ciclul TCA de generare a energiei dar, n lipsa mitocondriilor, secvena de reacie se
efectueaz n citosol.
Componentele i reaciile ciclului acidului citric au fost stabilite n 1930 de ctre laureaii
Premiului Nobel Albert Szent-Gyrgyi i Hans Adolf Krebs.
Componenii ciclului TCA deriv de la bacterii anaerob i se presupune c nsi aceast cale
metabolic ar fi putut evolua n mai multe rnduri. Teoretic exist mai multe alternative ale ciclului
TCA, dar acesta pare a fi cel mai eficient. Dac multiplele alternative ar fi evoluat n mod
independent, el ar fi convers fr ndoial la ciclul acidului citric.
Descrierea ciclului
Ciclul acidului citric este un component cheie al metabolismului, prin care toate organismele
aerobe produc energie. Prin catabolismul zaharurilor, a grsimilor i a proteinelor se produce acetat
sub form de acetil-CoA. Acetil-CoA mpreun cu doi echivaleni de ap (H2O) sunt consumai n
ciclul acidului carboxylic cu producerea a doi echivaleni de dioxid de carbon (CO2) i a unui
echivalent de HS-CoA. Pe lng acetia, un ciclu complet reduce trei echivaleni de NAD+ la
NADH, un echivalent de ubichinon (Q) la (QH2), i convertete un echivalent
de GDP i fosfat anorganic (Pi) n GTP. NADH i QH2 obinui n ciclul acidului citric este
utilizat ulterior n procesele de fosforilare oxidativ pentru a produce ATP.
Una dintre sursele primare de acetil-CoA sunt carbohidraii, care sunt degradai n procesul de
glicoliz pentru a produce piruvat. Acesta este decarboxilat cu ajutoru enzimei piruvat
dehidrogenaza i genereaz acetil-CoA dup urmtoarea schem de reacie:
CH3C(=O)C(=O)O (piruvat) + HSCoA + [[NAD+]] CH3C(=O)SCoA (acetil-CoA) + NADH +
H++ CO2
Produsul de reacie, acetil-CoA, este punctul de plecare n ciclul acidului citric.
Ciclul acidului citric ncepe cu transferul gruprii acetil de la acetil-CoA la compusul acceptor cu
patru atomi de carbon (oxaloacetat) cu formarea compusului cu ase atomi de carbon (citrat).
Citratul sufer ulterior o serie de transformri chimice, pierznd dou grupri carboxil sub form de
CO2. Acest CO2 este originar din oxaloacetat, i nu din acetil-CoA. Atomii de carbon din acetil-
CoA devin parte a scheletului de oxaloacetat dup primul ciclu complet. Pierderea atomilor de
carbon donai de acetil-CoA necesit mai multe cicluri complete. Cu toate acestea, datorit rolului
ciclului TCA n anabolism, aceti atomi de carbon pot s nu fie pierdui sub form de CO2,
deoarece muli dintre intermediarii ciclului TCA sunt precursori pentru biosinteza altor molecule.
Majoritatea energiei eliberat n etapele oxidative ale ciclului este tranferat sub forma compusului
redus NADH. Pentru fiecare grupare acetil care intr n ciclu se produc trei molecule de NADH.
Electronii sunt de asemenea transferai i la ubichinona Q, genernd forma redus QH2.
La sfritul ciclului este generat oxaloacetatul i ciclul continu.
112
Doi atomi de carbon sunt oxidai la CO2, energia acestei reacii fiind transferat altor procese
metabolice prin intermediul GTP (sau ATP), i sub form de electroni n NADH i [[QH2]].
NADH generat n ciclul TCA poate ulterior dona electronii n procesele de fosforilare oxidativ
pentru a sintetiza ATP; FADH2 se ataeaz covalent la succinat dehidrogenaz, o enzim care
funcioneaz att n ciclul TCA ct i n lanul transportor de electroni din mitocondrie n
fosforilarea oxidativ. De aceea, FADH2 faciliteaz transferul de electroni la coenzima Q, care este
acceptorul final al reaciei catalizate de complexul succinat:ubichinona oxidoreductaza, acionnd
ca intermediar n lanul transportor de electroni.
Ciclul acidului citric acid este aprovizionat continuu cu carbon sub form de acetil-CoA, care intr
n etapa 1.
Doi atomi de carbon sunt oxidai la dioxid de carbon, energia oxidrii este cuplat cu sinteza GTP
sau ATP, a cror disociere va transfera ulterior energie altor procese metabolice care o necesit.
Substra
Produi Enzima Tip reacie Comentariu
te
stadiu limitant de
Oxalilc
vitez
etat +
Citrat + Citrat Condensare (ireversibil),
1 Acetil
CoA-SH sintaza aldolic extinde
CoA +
oxalilacetat 4C la
H2O
o molecul 6C
cis-
Aconitat
2 Citrat Deshidratare
+
H2O Aconita isomerizare
cis- za reversibil
Aconita
3 Isocitrat Hidratare
t+
H2O
Oxalilsu
Isocitra genereaz NADH
ccinat+
4 t+ Oxidare (echivalent a 2.5
NAD + Isocitra
NAD+ ATP)
H+ t
- dehidro
genaza stadiu ireversibil,
Oxalils cetoglut Decarboxil
5 genereaz o
uccinat arat+ are
molecul 5C
CO2
- stadiu reversibil,
Cetoglu Succinil - genereaz NADH
tarat+ -CoA+ cetoglu (echivalent a 2.5
decarboxilar
6 NAD+ NADH tarat ATP),
eoidativ
+ + H+ + dehidro regenereaz
CoA- CO2 genaza lanul 4C (CoA
SH exclus)
Succinat sau ADPATP i
Succini Succini
+ fosforilare n loc de
l-CoA+ l-CoA
7 CoA-SH la nivel GDPGTP,
GDP + sintetaz
+ substrat genereaz 1 ATP
Pi a
GTP sau echivalent
8 Succina Fumarat Succina Oxidare folosete FAD ca
113
grupare
prostetic (FAD
FADH2 in
t+ + t prima etap a
ubichin ubichino dehidro reaciei) in
on(Q) l (QH2) genaza enzim,
genereaz
echivalentul a 1.5
ATP
Fumara
Fumara H2O adiie
9 t + L-Malat
za (hidratare)
H2O
Oxalilac
L- Malat genereaz NADH
1 etat +
Malat + dehidro Oxidare (echivalent a 2.5
0 NADH
NAD+ genaza ATP)
+ H+
Prin desprinderea treptat a glucozei prin lanul poliglucidic, n final acesta se transform, n
totalitate, n glucozo-1-fosfat.
Fosforilaza determin desfacerea legturilor 14 -glicozidice, legturile 16--glicozidice din
molecula poliglucidului (amilopectina sau glicogen) sunt scindate pe cale hidrolitic i nu
fosforolitic (sub aciunea amino 1-6-glucuzidaz).
n continuare esterul glucozo1-fosfat sub aciunea fosfoglucomutazei este transformat n glucozo
1- fosfat
Glucozo- Glucozo-6-fosfat
1-fosfat
fosfoglicomutaza
114
Amidon Glicogen Pi
Pi
Glucozo-1-fosfat fosfoglucomutaza
-ATP
ADP
Glucoza Glucozo-6-fosfat Calea pentozo-fosfat
Glicoliza are loc n muchi. Procesul este nsoit de o degajare moderat de energie.
Glicoliza cuprinde patru etape. Acestea sunt:
transformarea glucozei n triozofosfat;
transformarea triozofosfatului n acid fosfogliceric;
transformarea acidului fosfogliceric n acid piruvic;
transformarea acidului piruvic n acid lactic.
n timpul glicolizei se formeaz o serie de esteri fosforici ai glucozei i fructozei: G-1P, F-6P, F-1,6
diP ( glucoza-1-fosfat, fructoza-6-fosfat, fructoza-1,6-difosfat).
Schematic glicoliza poate fi prezentat astfel:
115
Acidul lactic format n muchi nu se elimin, ci poate participa n ficat la un proces de resintez de
glucide. Energia rezultat n glicoliz este depozitat n muchi, ntr-un compus numit fosfagen din
care este utilizat n timpul efortului muscular.
12.2.B. Catabolismul aerob al glucozei
Principalele ci de catabolizare aerob a glucozei sunt urmtoarele:
calea acizilor tricarboxilici (ATC);
calea pentozofosfailor;
calea acizilor uronici.
12.2.C. Catabolismul glucozei pe calea ATC
Catabolizarea aerob a glucozei pe calea ATC necesit degradarea ei la acid piruvic. Acesta se
formeaz printr-un mecanism comun cu a glicogenului, dar care are loc n condiii aerobe. Acidul
piruvic format n etapa a III-a a glicolizei se decarboxideaz oxidativ i va forma acetil-CoA. Acest
compus intr apoi ntr-un proces ciclic, numit ciclul ATC sau ciclul lui Krebs, n care se va forma
bioxidul de carbon i hidrogen, care va fi oxidat i va forma apa ntr-un proces numit catena de
respiraie. Procesul are loc n mitocondrii. Cantitatea de energie rezultat este mult mai mare
dect cea rezultat la glicoliz.
Reacia global a catabolismului glucozei pe aceast cale este urmtoarea:
116
12.2.D. Catabolismul glucozei pe calea pentozofosfailor
Este o cale secundar de catabolizare a glucozei comparativ cu calea ATC. Doar 8-30 % din totalul
glucozei din organismul animal se degradeaz pe aceast cale. Este ns foarte important, pentru c
asigur pentozele necesare biosintezei acizilor nucleici i a unor enzime. Sediul procesului este
ficatul, glanda mamar, rinichiul. Din proces rezult o cantitate de energie asemntoare celei
rezultate prin ciclul ATC.
Reacia global este urmtoare:
117
Astfel, acidul lactic, aminoacidul sau glicerolul se poate transforma n glucid. Aceasta va fi
preluat de circuitul sanguin, unde asigur glicemia sau se poate stoca n ficat sau sub form de
glicogen.
12.4. Biosinteza lactozei
Lactoza, principala glucid din lapte, se poate sintetiza din glucoza adus pe cale sanguin n
glanda mamar. O vac care produce 20 L lapte/zi sintetizeaz pn la 1 kg lactoz.
Lactoza este o diglucid format din o molecul de glucoz i una de galactoz, care confer
laptelui gustul dulce, plcut. Coninutul de lactoz din lapte depinde de specie, la vac acesta fiind
de 4-5 g / 100ml.
Schematic, reacia de biosintez a lactozei poate fi redat astfel:
Dintre cele dou molecule de glucoz utilizate la obinerea lactozei, una se va transforma n
galactoz prin izomerizare, iar galactoza format i glucoza vor forma astfel lactoza.
Pentru a putea fi valorificat lactoza, n intestinul subire se scindeaz hidrolitic n componentele
ei: glucoz i galactoz. Reacia are loc sub aciunea lactazei. Galactoza rezultat poate fi
izomerizat la glucoz sau poate participa la diferite biosinteze de glicoproteide sau glicolipide.
12.5. Glicemia
Concentraia normal n glucoz a sngelui se numete glicemie. n organismul animal glicemia
se menine la valori relativ constante, datorit echilibrului care exist ntre procesele metabolice
care consum glucoz i cele care o produc. Acest echilibru este controlat de sistemele de reglare
ale metabolismului glucidic. Valorile normale ale glicemiei la diferite specii este artat n tabelul
urmtor:
Glicemia (mg/100
Specia
ml)
Bovine 40-75
Capr 45-75
Oaie 50-80
Rumegtoare
66
mici
118
Porc 80-150
Iepure 60-130
Cine 70-110
Cal 106
Gin 153-250
Colesterolul este o substanta gras produs de ficat, substan responsabil n formarea membranei
celulelor i anumitor hormoni.
Atunci cnd mncm mai multe grasimi animale face ficatul s produc mai mult colesterol mult
mai mult decat este nevoie . Acest exces de colesterol se depune pe artere dnd natere la placi care
vor incetini circulatia sangelui aternnd terenul propice la viitorul infart sau comoie cerebral .
Daca i se va spune vreodata c nivelul colesterolului tau este mare va trebui s te gandeti la
snatatea ta .... ceva se poate intampla n orce moment.
Colesterolul este cunoscut sub dou forme LDL (colesterolul rau) i HDL (colesterolul bun ).
Aceste lipoproteine sunt un amestec de grsimi i proteine produse ale corpului nostru , care sunt
responsabile n a transporta alte grsimi care nu sunt dizolvate n sange n celulele tale . Fiecare din
cele dou lipoproteine acioneaz diferit i influeneaz snatatea noastra LDL reprezint cea mai
mare parte a colesterolului din snge . n momentul cnd nivelul LDL este prea mare , aceasta
mpreun cu alte substante se depune pe artere formnd plci care micoreaz diametrul acestora ,
micornd astfel trecerea sngelui sau chiar blocand-o , iar n ultima instana duce la un posibil atac
de cord sau comoie cerebrala . Cercetatorii spun ca reducand nivelul LDL putem preantampina
infartul si comotia cerebrala , HDL reprezint aproape un sfert din colesterolul din sange ,
transportat de la diferite organe ctre ficat de unde v-a fi trimis ctre corp. HDL deasemeni poate
aduna colesterolul depus pe artere eliminndu-1 prentmpinnd astfel formarea de plci
.Specialitii spun c mentinerea nivelului HDL fiind considerat un adevrat curator de artere, este
tot att de important ca i scaderea LDL .
Glosar
Catabolism/Dezasimilaie
Glicogenoliz - transformarea glicogenului n glucoz
Glicoliz - transformarea glucozei n piruvat i ATP
Fosforilarea oxidativ
Degradarea glucidelor prin ciclul pentozofosfailor (numit i untul hexozomonofosfatului)
Proteic - hidroliza proteinelor n aminoacizi
Degradri fermentative:
Fermentaia anaeroba:
Fermentaia alcoolic
Fermentaia lactic
Fermentaia propionic
Fermentaia butiric
Fermentaia celulozei
Fermentaia aerob:
Fermentaia acetic
Fermentaia citric, succinic i malic
Fermentaia oxalic
Calea acidului mevalonic
Anabolism/Asimilaie
Glicogeneza - formarea glicogenului n glucoz prin procesul de hidroliz
Gliconeogeneza - formarea glucozei din proteine i grsimi
120
Subiectele evalurii finale
Biochimie II
Subiectele pentru evaluarea final
122
123
Cuprins
N d/o Denumirea temei pag.
capitol
Introducere Scurt istoric. 2
Celula- unitate structural i funcional a vieii 6
Structura, ultrastructura i rolul componentelor celulei procariote.
Structur celulei eucariote 7-10
Metabolism. Metabolismul intermediar si energetic. 10
Caracteristica metabolismuli intermediar 11
8.1 Modul I. Enzime.
Tema I. Consideraii generale ale enzimelor. Biogeneza i
rspndirea enzimelor.
Nomenclatura. Structura enzimelor (centrul activ, organizarea
structural a enzimelor).
a) Consideraii generale ale enzimelor
Localizarea intracelulara a enzimelor 12
Caracteristicile enzimelor
A). Caracteristicile enzimelor 14
B). Nomenclatura.Nomenclatura de lucru i cea sistematic 15
Clasificare 16
8-2. Centrul activ al enzimelor. Specificitatea enzimelor. 18
Energia de activare 18
Tema II. Mecanismul catalizei enzimatice, cinetica reaciilor 19
enzimatice, influena diferitor factori asupra vitezei de reacie.
8.2.1.Cinetica reaiilor enzimatice. Cofactorul enzimatic 20
Specificarea enzimelor. Generaliti.
Paralela ntre catalizatori i enzime
8.3. 8.2.2.Mecanisme de aciune a catalizei enzimatice 21
8.2.3. Influenta diferitor factori 22
8.3. Influenta efectorilor enzimatici 23
8.3.1 Specificitatea de reacie. Specificitatea absolut. 24
8.4. 8.3.2. Cataliza prin ioni metalici 24
8.3.3. Reglarea activitii enzimatice.Caracteristicile componentei 25
proteice. Sisteme multienzimatice. Izoenzime. Preparate
enzimatice.
Tema III. Nomenclatura i clasificarea enzimelor 30
Descrierea principalelor clase de enzime. Structura
i conformaia enzimelor.
8.4.. Clasificarea enzilemlor. Descrierea principalelor clase de 31
enzime. Oxireductaze (Dehidrogenaze)
Transportori de hidrogen coenzime nicotinice(coenzime 32
piridinice)
8.5. Transferaze. 8.6. Hidrolaze. 8.7.Liaze 34-37
Rezumat. Caracteristicile cofactorilor. Localizarea intracelulara a 38
enzimelor. Centrul activ al enzimelor. Organizarea centrului activ.
Caracteristicile enzimelor
Tema Hormoni
41
124
9. 9. 1.Aspecte generale. Cele mai importante glande endocrine 43
9. 2. Clasificarea hormonilor. Hormoni de natur proteic 44
cusecvene specifice de aminoacizi:Hormoni pancreatici
(Insulina,Glucagonul) 45
Glandele endocrine (hipofiza, Hipotalamusul, Tiroid
Paratiroidele Pancreasul endocrin Testiculele
Ovarele Suprarenale, )
10. Metabolisme intermediare 46
Tema 10.1. Introducere n metabolismul substanelor i
10. energiei. Aspecte generale.
Metabolism primar sau fundamental. 47
Metabolism secundar sau lturalnic
Principiile bioenergeticii 48
Caracteristica metabolismului intermediar 50
Capitolul 11. Oxidarea celular (biologic) 53
Tema 11.1. Caracteristica general a oxidrii biologice
11. 11.2. Ciclul Krebs 54
56
Tema 11.2. Lanul transformrilor de hidrogen i electroni
(catena de respiraie). Fosforilarea oxidativ. 57
Lanul respirator. Oxidarea celular. Rezumat.
126
Universitatea de Stat ,,B.P. Hasdeudin Cahul
Facultatea de Economie, Informatic i Matematic
Catedra Inginerie i tiine Aplicate
Vasile Curjos
127
Note de curs
Disciplina Biochimie II
Cu drept de manuscris
Cahul 2015
128
Disciplina Biochimia II. Program analitic
8. Enzime
8.1. Consideraii generale ale enzimelor. Biogeneza i rspndirea enzimelor.
Nomenclatura. Structura enzimelor (centrul activ, organizarea structural a enzimelor).
8.2. Specificitatea enzimelor. Mecanismul catalizei enzimatice, cinetica reaciilor
enzimatice i influena diferiilor factori. Efectori enzimatici. Reglarea activitii enzimatice
8.3. Preparate enzimatice.
8.4. Clasificarea enzimelor. Descrierea principalelor clase de enzime. Oxidoreductazele
NAD+ i FAD dependente, citocromii, oxidazele i ali transportori de electroni)
8.5. Transferazele (amino-, fosfo-, metil-, acil- i glicoziltransferazele)
8.6. Hidrolaze (esteraze, glicozidaze, proteaze, amilaze, polifosfataze)
8.7. Liazele (C-C liaze, C-O liaze, C-N liaze i C-S liaze)
8.8. Izomeraze i ligaze
9. Hormoni
9.1. Aspecte generale. Hormoni derivai de la aminoacizi. Hormoni de natur polipeptidic i
proteic.
9.2. Hormoni steroizi. Alte tipuri de hormoni. Fitohormoni.
10. Metabolisme intermediare
10.1. Introducere n metabolismul substanelor i energiei: aspecte generale, principiile
bioenergericii, caracteristica metabolismului intermediar.
11. Oxidarea biologic
11.1. Caracteristica general a oxidrii biologice . Ciclul acizilor tricarboxilici
11.2. Lanul transportorilor de hidrogen i electroni (catena de respiraie). Fosforilarea oxidativ.
12 Metabolismul glucidelor - 6 ore
12.1. Anabolismul glucidelor (fotosinteza i formarea diverselor glucide n organismul animal)
129
12.2. Catabolismul glucidelor: transformarea poliglucidelor n monoglucide , glicoliza,
transformarea anaerob i aerob a acidului piruvic, alte ci de degradare a glucidelor (pentofosfat,
calea acidului glucuronic etc.)
13. Metabolismul lipidelor
13.1. Anabolismul gliceridelor (biosinteza glicerolului, a acizilor grai i a gliceridelor)
13.2. Catabolismul gliceridelor (oxidarea glicerolului, acizilor grai saturai cu numr
par i impar de atomi de carbon i a acizilor grai nesaturai)
14. Metabolismul protidelor
14.1. Biosinteza aminoacizilor prin diferite ci: aminare reductiv, transaminare, etc
14.2. Catabolismul aminoacizilor: dezaminare, decarboxilare i alte ci. Destinaia componentei
ternare a amoniacului.
14.3. Metabolismul proteinelor: biosinteza i catabolismul
14.4. Metabolismul apei i mineral
PROGRAMA ANALITIC
Disciplina: Biochimie II
Specialitatea ,,Inginerie i Management n Industria Alimentar
Anul II, Sem. I
I. Intruducere
1. Prezentarea general a disciplinei (locul i locul disciplinei)
Biochimia este o tiin cu o dezvoltare extrem de rapid care n ultimile decenii a permis
aprofundarea cunotinelor noastre asupra intensitilor proceselor vitale i a influenei n mod
exenial ct i practica n domeniul producerii,conservrii ct i utilizrii alimentelor. Astzi avem
posibilitatea de a ptrunde esena proceselolr de metabolism, am obinut informaii importante
privind sinteza i degradarea unor componente ale materiei prime vegetale i animale a tt n celule
ct i n procesele biotehnologice de fabricare a alimentelor.
Biochimia II studiaz procesele de transformare a proceselor biomoleculelor, cile i mecanismele
de biosintez i descompunere, corelarea acestor procese continue i permanente de transformare
care constituie substratul material i caracterizarea dinamismului acetuia.
2. Cunotine/cerine minime necesare pentru studierea cursului
Cunotine teoretice i practice dobndite n disciplinele:
Chimie organic;
Chimia produselor alimentare;
Biochimie II.
I. IAdministrarea disciplinei
B. Obiectivele disciplinei:
Disciplina isi propune urmtoarele obiective:
Cunoaterea elementelor necesare identificrii i caracterizrii componentelor biochimice
ale organismelor vii, ale materiilor prime utilizate n industria alimentar i ale
produselor finite;
Cunoaterea ansamblului de transformri metabolice care au loc n organismele vii, n corelaie cu
mecanismele biochimice ale proceselor tehnologice n industria alimentar.
131
C. Metode de predare nvare: prelegerea, conversaia euristic, explicaia, dezbaterea,
problematizarea, simularea de situaii, metode de lucru n grup i individual, studiul documentelor
curriculare i al bibliografiei.
D. Forme i metode de evaluare:
- evaluare continu (pondere 50%) prin metode orale, probe scrise, practice i teme de cercetare
(semestrul II participarea la cercuri tiinifice);
- evaluare sumativ (pondere 50%) prin probe scrise.
Biochimie II
Subiectele pentru evaluarea final
1. Explicai procesul de reducere a acidului piruvic pn la acid lactic
2. Explicai biosinteza gliceridelor
3. Descriei procesul de glicoliz
4. Descriei biosinteza acizilor grai
5. Dscriei procesul de oxidare biologic
6. Explicai biosinteza gliceridelor
7. Descriei clasificarea enzimelor
8. Descriei activitatea oxireductazelor. Dai exemple
9. Definii i descriei activitatea transferazelor. Dai exemple
10. Definii i descriei activitatea reductazelor. Dai exemple
11. Ce sunt izomerazele. Dai exemple
12. Descriei modul de aciune a amilazalor
13. Ce tii despre centrul de aciune a enzimelor?
14. Dai exemple de liaze i precizai unde intervin acestea n metabolism
15. Descriei etapele ciclului Krebs i precizai importana acestuia
16. Precizai importana peroxidazei. Dai exemple
17. Ce nelegei prin glicogenogenaz?
18. Ce nelegei prin glicogenoneogenaz?
19. Descriei mecanismul de aciune a enzimelor
136
20. Descriei procesul de glicoliz
21. Explicai biosinteza glucidelor n organismele vegetale
22. Ce nelegei prin specificarea enyimelor?
23. Descriei catena de respiraie
24. Ce prezint hidrolazele?
25. Caracteristica general a oxidrii biologice
26. Descriei procesul de fosforilare oxidative
27. Explicai faza de lumin a procesului de fotozintez
28. Dai exemple de sintetaze, rolul lor n formare de noi substane
29. Explicai faza de ntuneric a procesului de fotozintez
30. Care este soarta lipidelor n organism?
31. Cum se produce adsorbia glucidelor n organism?
32. Biosinteza glicogenului n organismul omului?
33. Ce prezint dezaminarea oxidativ. Exemple
34. Digestia glucidelor. Factorii ce favorizeaz procesul
35. Digestia lipidelor. Actorii ce favorizeaz procesul
36. Ce tii digestia proteinelor?. Actorii ce favorizeaz procesul
37. Definiia metabolismului ca noiune i necesitatea de a-l cnoate.
38. Cum nelegei degradarea anaerob a glucidelor?
39. Ce nelegei prin glicoliz?
40. Descriei care este rolul proteinelor n alimentaie
41. Funciile biologice ale proteinelor?
42. Funciile biologice ale glucidelor
43. Funciile biologice ale trigliceridelor
44. Cum nelegei metadolismul energetic?
45. Cum se formeaz glicogenul n organismul animal?
46. Ce fel de biomoleculele se formeaz n urma catabolizrii glicogenului?
47. Care sunt enzimele ce intervin in metabolismul glicogenului?
48. Definii glicoliza.
49. Care sunt principalele etape ale glicolizei?
50. Care sunt cile de catabolizare aerob ale glucozei i care sunt compuii chimici ce rezult din
aceasta?
51. Cum se formeaz apa n organismul animal?
52. Ce se nelege prin fosforilarea oxidativ?
53. Care este principala cale de formare a glucozei n organimul animal?
137
pH de aproximativ7.n lipsa enzimelor, majoritatea reaciilor chimice din organism nu aravea loc,
neexistnd procese metabolice, nu exist nici via.
Enzimele sunt biocomponente care au un rol fundamental att n desf urareareaciilor biochimice
cti n reglarea proceselor metabolice dinorganismele vegetale.
Enzimele sunt biocomponente de natur proteic specializate n cataliza reaciilor biochimice.
n care:E enzim, S substrat; ES* - complex activat; P - produi de reacie De remarcat faptul
c la sfritul reaciei enzima se regsete nemodificat chimic (ca orice catalizator obinuit)
i c procesele fiind reversibile se mrete att viteza reaciei directe ct i a celei inverse,
grbind instalarea echilibrului chimic.
O alt proprietate general catalizatorilor este aceea c o cantitate mic de enzim poate
determina transformarea unor cantiti mari de reactani (substrat).
Biocatalizatorii - enzimele - prezint spre deosebire de catalizatorii chimici o specificitate
deosebit. Aceast specificitate poate fi:
a) specificitate de ac iune (de reacie)n sensul c o enzim catalizeaz numai
o anumit reacie sau un grup de reacii de acelai tip;
b) specificitate de substrat , n sensul c o enzim catalizeaz n cadrul unui anumit tip de reacie
numai un anumit substrat,i anume acela pentru care are mecanismul broasc - cheie potrivit (ca
legturi chimice, ca specificitate steric).
Anex la tema
8.3. NOMENCLATURA ENZIMELOR I CLASIFICAREA LOR
Conform nomenclaturii propuse n anul 1961 de ctre Uniunea Internaional de Biochimie, s-a
stabilit c numele individual al fiecrei enzime s se formeze att dup natura substratului ct i
dup felul reaciei pe care o catalizeaz mpreun cu sufixul-az. De exemplu,enzima care produce
decarboxilarea acidului piruvic se numete piruvatdecarboxilaz. Cu aceeai ocazie s-a stabiliti
138
sistemul de clasificare al enzimelor bazat pe tipurile de reacii catalizate. Sistemul cuprinde 6 clase
mari de enzime, fiecare dintre ele avnd subclase (s-a adoptat i un sistem zecimal conform cruia
fiecare enzim are un cod din patru cifre ce o poziioneaz n clase, subclase .a.m.d.).
Cele ase clase principale de enzime sunt urmtoarele:
1. Oxidoreductaze
2. Transferaze
3. Hidrolaze
4. Liaze
5. Izomeraze
6. Ligaze
Cunoaterea structurii, a mecanismului de aciune a rolului biochimic al enzimelor cuprinse n cele
6 clase permite abordarea studiuluimetabolismului celular.
8.4 A) Oxidazele
DH2 + TD + TH2 unde DH2 este donatorde protoni de H2, T- transportator, A-acceptor
TH2 + A T + AH2
DH2 + T + A D + T + AH2
Mecanismul de aciune al acestor enzime se explic prin nucleul piridinic al coenzimelor acestor
enzime NAD+ i NADP+
DH2 D + 2H+ + 2
139
Clasificarea i denumirea enzimelor
Denumirea enzimelor.
Se pot utiliza dou modaliti:
- adugarea sufixului az la numele substratului
(zaharaz, ureaz, glucozidaz)-denumire dup aciunea specific a enzimei(guanilat ciclaz, lactat
dehidrogenaz, glutationreductaz).
- denumiri particulare fr legtur cu reacia catalizat: pepsin, chimotripsin, tripsin.
Numele enzimei cuprinde:
- denumirea substratului - tipul reaciei catalizate coenzima.
In timp ce acest lucru este adevrat pentru multe categorii de produse, industria de panificaie are o
lunga istorie de studiere si utilizare a enzimelor. Intr-adevr, exista referine despre utilizarea
enzimelor in produsele de panificaie vechi de peste 100 de ani.
Chiar si fr acest record de utilizare, enzimele sunt considerate ingrediente funcionale din mai
multe motive.
De exemplu, enzimele sunt componente naturale ale multor ingrediente folosite in panificaie.
Utilizarea enzimelor: inele n panificaie, altele pentru distrugerea deeurilor periculoase, sau ca
indicatori de poluare a solului
Aceti lucrtori acioneaz in corp si in creier in cel mai fantastic si puternic mod. Ele lucreaz
pentru o sntate deplina. Enzimele reprezint nsi fora intangibila a vieii. Omul nu poate reui
sa creeze enzime vii aa cum natura poate crea. Daca ar fi putut, ar fi reuit sa creeze viata sau s
readuc la viata materia moarta.
Tema 4. B) Transferazele
Transaminazele catalizeaz reacia reversibil,
de transfer a unei grupari amino de la un
aminoacid la un cetoacid.
Transferazele - enzime ce catalizeaz reacii de transfer ale unor grupe de atomi ce pot fi i grupe
funcionale de la un substrat la altul, fr ca aceste grupri s existe libere n timpul procesului,
catalizeaz reacii de transfer a unei grupri de la un donor ctre un acceptor.
Subclase:
Aminotransferaze (transaminaze) catalizeaz transferul unei grupri amino ntre un amino i un
cetoacid, conducnd la formarea unui aminoacid diferit i unui cetoacid diferit.Coenzima
participant este piridoxal fosfatul.
AX + BY AY + BX
R1 CH(NH2)-COOH + R2-(C=O)-COOH R1-(C=O)-COOH + R2 (C=O)-CH
(NH2) COOH
Amidotransferazele ( amidoferazele) catalizeaz transferul unei grupe amidiceR -C(NH2) =NH):
R-C(NH2)=NH + R1-CH(COOH)-NH2R-H + R1-CH(COOH)-NH- C(NH2)=NH
Aciltransferazele catalizeaz transferul restului acilde pe compui cu potenial chimic ridicat
(R-CO~SCoA), pe acceptori potrivii cu formare de esteri, amide, anhidride:
R-CO~S-CoA + R1-OH R-CO-OR1+ CoA - SH
Fosforil transferazele (kinaze) catalizeaz transferul
resturilor fosforil de pe ATP pe substraturi:
Glucoza + ATPGlucozo-6-P +ADP
Metiltransferazele catalizeaz transferulgruprilor metil (-
CH3 :
R-CH3 + R1-H R-H-R1-CH3
Histamina N-metiltransferaza ( CE 2.1.1.8 , histamina 1-
metiltransferaza ,histamina metiltransferaza , enzima
140
Histamin- metiltransferaza
histamina-metilare , imidazolmetiltransferaza, S-adenozilmetionin-histamina N-metiltransferaza )
este o enzim cu denumirea sistematic a S-adenozil-L-metionin: histamina N- Tele-
metiltransferaza . Aceast enzim catalizeaz urmtoarea reacie chimic:
S-adenoszl-L-metionin + histamin S-adenoszl-L-homocistein + N tau metilhistamin
Glucotransferazele-care transport grupele de glucoz (glicozilul de la o substan la alta):
Tema 5. C) Hidrolazele
Hidrolazele enzime ce catalizeaz scindarea diferitelor legturi covalente din molecula substratului
cu adiionarea moleculelor de ap.
Subclase:
Esterazele care pot fi:
carboxilesteraze (cu substrat R-COOR) tiolesteraze (cu
substrat R-CO -SR) ;
Glicozidaze
Glicozida este o substan de natur organic format prin condensarea a 2 componente: una de tip
glucidic (mono -, dizaharidic de regula glucoz sau oligozaharide ce au la baz glucoza) i alta de tip
non-glucidic denumit aglicon.
Glicozidarea Fischer
Are la baz reacia dintre o cetoz sau aldoz cu un alcool n mediu puternic acid de
regul clorotrimetilsilanul (TMS-Cl)
Iniial zaharidul este neprotejat n mediul alcoolic.Are loc un proces de echilibru n urma cruia
rezult un amestec de izomeri ciclici, anomeri i n procent mai mic forme aciclice
Reacia KoenigsKnorr
Reacia are loc ntre un derivat halogenat al unei oze cu un alcool n prezena carbonatului de argint
Koenigs.gif Carbonatul de argint poate fi nlocuit cu alte sruri ale unor metale grele: cianura de
mercur,oxidul de mercur, bromura de mercur
Enzimele care sunt secretate n stomac se numesc enzime gastrice. Stomacul joac un rol important
n digestie, att ntr-un sens mecanic prin amestecarea i zdrobirea alimente, i, de asemenea, ntr-un
sens enzimatic, prin digestia aceasta.
Urmtoarele sunt enzimele produse de stomacul i funcia lor respective:
pepsinogenul este enzima principal gastric. Acesta este produs de celulele gastrice numite "celule
de seam" n forma sa pepsinogen inactiv, care este un zimogen. Pepsinogenul este apoi activat de
acidul din stomac in forma sa activa, pepsina.
Pepsin descompune proteinele din alimente n particule mai mici, cum ar fi peptide fragmente
i aminoacizi . Digestia proteinelor, prin urmare, mai nti ncepe n stomac, spre deosebire de
carbohidrai i lipide, care ncepe digestia lor n gur.
Acid clorhidric (HCl): Aceasta este, n esen, incarcate pozitiv atomi de hidrogen (H), sau n
perioada de ouat-termeni acidul din stomac , i este produs de celulele din stomac numite celule
parietale . HCl funcioneaz n principal de a denatura proteinele ingerate, pentru a distruge orice
bacterie sau virus care rmne n alimente, i, de asemenea, pentru a activa pepsinogen in pepsina.
Tema 6 C) Izomeraze,
catalizeaz toate tipurile de transformri n cadrul unei i aceleai molecul
Timidin kinaz ( CE 2.7.1.21 , timidilic kinazei (fosforilare) , 2'-dezoksitimidinska
kinazei , dezoksitimidinska kinaza (fosforilarea) ) este o enzim cu denumirea sistematic ATP:
timidin 5'-fosfotransferaza . Aceast enzim catalizeaz urmtoarea reacie chimic
ATP + timidin ADP + dTMP
Dezoksiuridin poate aciona, de asemenea, ca acceptor. dGTP poate aciona ca un donator.
D) Liazele
Liaze,catalizeaz ruperea legturilor C-C, C-S C-N; fr adiionarea apei, adiia la legturi duble i
reaciile inverse
a) Liazele - enzime ce catalizeaz reacii de adiie a unor grupe de atomi la molecula substratului
sau clivarea acestor grupri cu rearanjarea ulterioar a valenelor.
Aceste enzime scindeaz de la substrat o grup sau alta , f r h i d r o l i z . Aparin acestei
grupe, ca exemplu, pituvatdecarboxilaza- care rupe legturile C-C din acidul piruvic, elibernd gazul
CO2:
CH3-CO-CO-OH CO2 + CH3 - CO=H(aldehid);
catalizeaz reacii de adiie reversibile, la legturi multiple.
Anhidraza carbonic catalizeaz
hidratarea dioxidului de carbon:CO2+ H2O H2CO3
Fumaraza catalizeaz hidratarea acidului fumaric la acid malic:
HOOCC=C-COOH +H2O HOOC- CH(OH)-CH2-COOH
Fumaaya
Ligazele sau sintetazele - enzime ce catalizeaz formarea unor noi legturi chimice carbon carbon
sau carbon heteroatom, n majoritatea cazurilor utilizndu-se energia stocat n legturile
macroergice ale moleculelor de ATP:
catalizeaz reacii de condensare cuplate cu scindare de
ATP i a n a l o g i l o r l u i..
A- H + B - O H A B
ATP A D P + P
Sinteza glutaminei catalizat deglutaminsintetaz:
A c i d g l u t a m i c + NH3 G l u t a m i n
Complicatele procese chimice ce au loc in metabolismul celular nu se pot
produce in afara celulei, in vitro la presiunea, temperatura si pH-ul caracteristice mediului celular.
In celulele vii, reaciile chimice ale metabolismului pot avea loc in condiiile fizico-chimice
compatibile cu viaa protoplasmei datorita aciunii catalizatorilor biologici, numii enzime sau
fermeni.
Structura si proprietile enzimelor in general si ale -amilazei in special.
Sub denumirea de enzima se nelege o proteina cu proprieti catalitice care are in structura sa asa-
numitul centru activ si in unele cazuri o grupare prostetic; efectul catalitic este condiionat de
capacitatea proteinei de a activa specific alte substane.
Aceasta definiie se bazat pe faptul ca toate enzimele separate pana in prezent sau cunoscute si
neseparate nc in stare pura, cristalizata, poseda proprietile caracteristice proteinelor:
accelereaz att reacia direct ct i indirect;
sunt termostabile;
direcia procesului la temperatura dat se determin de concentraia produselor finale ale reaciei.
Dac, de exemplu, se introduce e s t e r a z a (enzim ce catalizeaz hidroliza i sinteza esterilor) n
sistemul ester + ap, se descompune esterul i se formeaz o anumit cantitate de acid i alcool.
Dac esteraza ce introduce ntr-un amestec echimolecular de acid i alcool, se formeaz un ester, a
crui concentraie va crete pn ce se egaleaz viteza reaciei directe cu a vitezei indirecte, adic
pn la momentul stabilirii echilibrului chimic.
n tubul digestiv substanele alimentare se scindeaz sub aciunea enzimelor pn la capt datorit
faptului c concentraia produselor de hidroliz a alimentelor n intestin, n urma absorbiei lor
permanente de vilozitile intestinelor, este mic.
Pepsina (E.C. - 3.4.4.1.) este rspndita in sucul gastric al tuturor vertebratelor. Pepsinele izolate din
diferite surse se deosebesc intre ele prin unele proprieti cum ar fi stabilitatea, structura primara,
specificitatea de substrat etc. Dat fiind faptul ca in condiii fiziologic normale pH-ul sucului gastric
se situeaz in zona puternic acida (1,0 - 2,0), pepsina poseda o stabilitatea foarte mare in mediu
puternic acid. Ea este activa in intervalul de pH 1,0 - 4,0 cu un pH optim de aciune de 1,8, iar la pH
= 5,0 se denatureaz.
144
Aplicaii practice ale enzimelor
A. Principiile enzimologiei sunt aplicate in laborator la masurarea activitatii enzimatice in scop
diagnostic si a concentratiei de substrat.
Enzimele plasmatice sunt: enzime plasmatice functionale, active asupra unor substraturi plasmatice
(de exemplu, lipoprotein lipaza) si enzime plasmatice nefunctionale ce ajung in plasma in cantitate
foarte mica in conditii normale, activitatea lor crescand in cazul unor afectiuni ale organelor ce le
contin. Dintre acestea cele mai importante sunt enzimele celulare. Modificarea permeabilitatii
membranelor sau distrugerea celulelor sunt insotite de eliminarea enzimelor in spatiul extracelular.
Enzimele citoplasmatice apar inaintea enzimelor mitocondriale. De exemplu, transaminazele, LDH,
CK, aldolaza.
Pentru diagnosticarea unor afectiuni specifice unui anumit organ este ideala cunoasterea unor enzime
specifice organului respectiv, numite enzime marker. Gasirea unor markeri exclusivi este extrem de
dificila totusi se poate considera ca unele dintre enzimele a caror activitate se determina in laborator
au aceasta calitate.
De exemplu, amilaza este marker pentru pancreas, fosfataza
acida pentru prostata, OCT pentru ficat, izoenzimele LDH1 si CK-MB sunt markeri inafectiunile
miocardului, izoenzimele LDH4 si LDH5 sunt markeri pentru ficat si muschi.
In laborator, enzimele se folosesc si ca "reactivi" pentru dozarea unor componente plasmatice prin
metode enzimatice, cum ar fi glucoza, colesterolul, ureea, creatinina, etc.
B. Enzimele imobilizate sunt enzimele legate chimic de un suport diferit ca structura: gel de silice,
alumina, carbune activ, rasini schimbatoare de ioni, polizaharide modificate (DEAE -sephadex,
carboximetil celuloza). Suportul trebuie sa indeplineasca anumite caracteristici: sa permita atacul
enzimei fara pierdere de activitate enzimatica, nu trebuie sa fie inactivat de sange, nu trebuie sa
provoace hemoliza sau sa reactioneze cu plachetele sanguine, nu trebuie sa prezinte toxicitate sau sa
genereze raspuns imun, sa elibereze produsi toxici (in cazul in care enzimele imobilizate pe acesta
vin in contact cu organismul uman).
1. Tehnicile moderne de imunologie (EIA, ELISA) folosesc enzimele ca indicatori. Anticorpii
specifici pentru un antigen sunt cuplati cu enzime indicatoare (peroxidaza din hrean, fosfataza
alcalina). Acestea, dupa transformarea unui substrat specific, genereaza produsi colorati a caror
concentratie este proportionala cu cea de antigen.
2. Enzimele imobilizate se folosesc ca reactivi in analizoarele de chimie uscata. Ele sunt imobilizate
intr-un suport de dimensiuni reduse cu tamponul adecvat, cofactorii, cosubstratul si indicatorul de
culoare. Plasma furnizeaza substratul si apa necesara activarii sistemului. Enzimele sunt stabile prin
legarea de o matrice si pastrarea intr-un loc uscat.
3. Enzimele imobilizate pe o matrice insolubila se folosesc si in reactoarele chimice din industria
farmaceutica, ca reactivi specifici
145
Enzimele in medicatia vasculara. Streptokinaza, amestec enzimatic obtinut din streptococ, are
aciune fibrinolitica (trombolitica), fiind utila pentru activarea hidrolizei trombilor formati in conditii
patologice, de exemplu in infarct miocardic.
Urokinaza obtinuta din urina are acelasi rol.
Diferitele produse farmaceutice ce reprezinta activatorul tisular al plasminogenului (tPA) sunt
folosite pentru dizolvarea cheagului de fibrina. Heparinazamicrobiana imobilizata poate fi folosita
pentru indepartarea heparinei folosite in tratament ca anticoagulant.
Hemocoagulaza (reptilaza) activeaza transformarea fibrinogenului in fibrina si este folosita pentru
tratarea hemoragiilor nedeterminate de deficitul unor factori ai coagularii.
Enzimele in terapia antitumorala. Ex. asparaginaza este folosita de pacientii cu leucemie deoarece
celulele tumorale au afinitate mare pentru asparagina si scazand nivelul acesteia nu mai este posibila
dezvoltarea lor. Fenilalanin amonioliaza este o alta enzima ce se poate utiliza imobilizata pentru a
reduce cantitatea de fenilalanina la pacientii cu cancer sau fenilcetonurie.
Enzimele folosite in tulburarile digestive. Enzimele digestive se folosesc ca terapie de substitutie
pentru a realiza digestia proteinelor (pepsina, chimotripsina, tripsina,
carboxipeptidaza), glucidelor (amilaza) si lipidelor (lipaza). Se utilizeaza asocieri de mai multe
enzime, dar si cu substae utile digestiei (bila, hemicelulaze). Exista si preparate ce contin enzime
proteolitice de natura vegetala (ficina, bromelina, papaina).
Enzimele folosite ca antiinflamatoare si cicatrizante. Sunt diferite endopeptidaze si enzime ce
acioneaz asupra proteoglicanilor care degradeaza tesuturile alterate de la suprafata unor leziuni
facilitand penetrarea medicamentelor, vindecarea ranilor, reducerea edemelor (se asociaza in
medicatia dermatologica, ORL, oftalmica): hialuronidaza, tripsina, chimotripsina, papaina, lizozims
147
Proteazele digestive
Sub aciunea catalitic a proteazelor, are loc scindarea moleculelor proteinelor.
nc din stomac au loc prefaceri ale proteinelor din hran, prin activitatea acidului
clorhidric, dar i a unor enzime, ca:
- renina ("desface" cazeina din lapte i derivate, elibernd totodat i
substaneleminerale "prinse" n structura sa),
- pepsina (descompune albuminele i globulinele n substane cu structur mai
simpl).
n duoden, prin secreia pancreasului exocrin, se excret enzime care particip la
scindarea proteinelor, pn n stadiul de aminoacizi. Dintre fermenii proteolitici din
sucul pancreatic, cei mai importani sunt:
- tripsina,
- chimotripsina,
- carboxipeptidaza.
i intestinul subire secret proteze, care desvresc digestia proteinelor.
Principalul ferment proteolitic secretat de mucoasa intestinal, este aminopeptidaza,
substan care catalizeaz descompunerea oligopetidelor, cu eliberare de aminoacizi.
Activitatea de degradare enzimatic a proteinelor se desfoar i la nivelul
intestinului gros, ns nu sub influena fermenilor secretai de mucoase, ci prin
aciunea sistemelor enzimatice ale bacteriilor proteolitice, microorganisme
aparintoare microflorei colonului. Aceste bacterii, reuesc s descompun
substanele aminate pn la amoniac.
n lipsa sau insuficiena enzimelor proteolitice, organismul se resimte, instalndu-se
disfuncii, ca: alergia alimentar, carena proteic i chiar malnutriia.
Proteazele sanguine
n snge se afl o seria de proteaze, cu rol important n coagulare (trombina,
convertina, trombplastina, etc.), n anticoagulare (antitrombina III) sau n
metabolism.
n cadrul hemostazei, pe parcursul procesului de fibrinoliz, intervine o enzim
proteolitic foarte important, numit plasmin. Plasmina este o enzim care se
formeaz dintr-o proenzim numit plasminogen, atunci cnd este iniiat fibrinoliza.
Sub aciunea biocatalitic a plasminei, are loc degradarea fibrinei fibrinogenului,
precum i al altor proteine plasmatice.
Asupra fibrinolizei, n sensul accelerrii acesteia, acioneaz i anumite enzime de
origine bacterian prezente n snge, aa cum sunt streptokinazele i stafilokinazele.
Transaminazele
Transaminazele sunt enzime care catalizeaz reaciile de transaminare. Aceti
fermeni cuprind n structura lor, drept coenzim, vitamina B6, substan de care este
dependent activitatea enzimatic desfurat. Transaminazele se concentreaz n
interiorul celulelor.
Alanin-aminotransferaza
Alanin-aminotransferaza, enzim cunoscut sub denumirea de ALT (primele dou
litere provin de la simbolul aminoacidului alanin, iar ultima de la tipul enzimei,
dup aciunea biochimic; transferaz) are o localizare n interiorul celulelor
148
rinichilor i ficatului.
Nivelul ALT crete n cazul distrugerii celulelor ficatului (hepatit, cancer, ciroz).
Aspartat-aminotransferaza
Aspartat-aminotransferaza este un ferment cu simbolul AST, localizarea sa fiind la
nivelul ficatului, a muchilor scheletici i la nivelul eritrocitelor.
Nivelul AST crete n bolile hepatice, ns nu att de mult ca ALT.
149
degradare a lor. Economisirea de metabolii i de energie reprezint condiii de desfurare a
proceselor biochimice componente ale metabolismului intermediar.
Unele ci anabolice i catabolice cuprind etape comune formate din reacii r eversibile
Care sunt catabolizate de enzime comune i la care particip metabolii comuni aa cumeste cazul
gluconeogenezei i glicolizei din metabolismul glucidic.Aceste ci cuprind ietape distincte formate
din reacii ireversibile i care sunt catalizate de enzime reglatoare.
Echipamentul enzimatic care catalizeaz o anumit cale metabolic anabolic sau catabolic are o
localizare intracelular distinct. Astfel, citosolul conine enzime specifice urmtoarelor seturi de
reacii: glicoliza, calea pentozofosfailor, biosinteza acizilor grai. Echipamentul enzimatic care
catalizeaz setul de reacii din ciclul acizilor tricarboxilici ( ATC), fosforilarea oxidativ, oxidarea
-acizilor grai ,formarea corpilor cetonici este localizat n matricea mitocondrial.
Metabolismul se clasific n funcie de natura biomoleculei sau compusului metabolizat:
a) Metabolismul glucidic.
b).Metabolismul lipidelor.
c).Metabolismul proteinelor (incluznd aici i metabolismul nucleotidelor i acizilor Nucleici).
d).metabolismul hidromineral.
Reglarea metabolismului se realizeaz la mai multe nivele i cuprinde anumite sisteme de
reglare ,unele prin mecanisme specifice, iar altele prin mecanisme nespecifice.n molecula enzimei
care controleaz o anumit reacie biochimic exist nafara centrului activ al moleculei i centri
alosterici unde se pot lega specii molecularecare nu prezint analogie structural cu substratul
( numii efectori alosterici). Legarea acestor efectori determin modificri conformaionale n
macromolecula de enzim carese transmit la distan , la centrul activ al enzimei i acioneaz n
sensul activrii sau inhibrii formrii complexului enzim-substrat. Aceti efectori alosterici joac
un rol important n reglarea i controlul proceselor biochimice.
Astfel ntr-un proces biochimic care decurge n mai multe etape (proces multi-secvenial) , unul
dintre produii finali poate aciona ca inhibitor alosteric pentru una dintre enzime ( n schema de
mai jos: S= substrat, P=produs de reacie, E=enzima ):
S E1 P1 E 2 P2 E 3 P3 ... En Pn
(-)
Reglarea proceselor metabolice se poate face i prin controlul genetic al vitezei de biosintez al
enzimei care catalizeaz o reacie biochimic sau prin controlulvitezelor de intrare a biomoleculelor
n celul datorit permeabilitii selective a m embranelor celulare pentru acetia.
Procesele metabolice n organismele animale sunt reglate prin intermediul Hormonilor. Astfel,
hormonii hipotalamici pot stimula sau inhiba secreia tropinelor Hipofizare.
Eliberarea hormonilor hipotalamici i a tropinelor hipofizare este reglat prin mecanism feed back
de ctre concentraia plasmatic a hormonilor periferici Activitatea unor glande endocrine cum este
paratiroida sau pancreasul endocrin este reglat de parametrul biologic pe care-L controleaz.
Astfel, eliberarea de insulin cu aciune hipoglicemiant este declanat de creterea
glicemiei. Hormonii sunt activatori ai biosintezei la nivel celular, ndeplinind funcia de efectori ai
biosintezei enzimelor.
n metabolismul lipidic , unii hormoni cum ar fi catecolaminele stimuleaz lipoliza (mesagerul
secundar este n acest caz AMP ciclic) n timp ce alii (cum ar fi insulina) stimuleaz lipogeneza.
n metabolismul glucidic
Hormonii glucocorticosterozi faciliteaz conversia aminoacizilor n glucoz, iar insulina induce
conversia glucozei n glicogen.
150
Biomoleculele cu structur complex de natur exogen cum ar fi poliglucidele, proteinele sau
lipidele nu pot fi utilizate de ctre organism dect dup o prealabil conversie a lor n aparatul
digestiv.Scindarea hidrolitic a acestor biomolecule este realizat cu ajutorul echipamentului
enzimatic prezent n sucul gastric, sucul duodenal,intestinul subire i flora bacterian. n urma
acestor transformri metabolice se obin unitile componente ale acestor biomolecule
complexe:monoglucide, glicerol,acizigrai, aminoacizi. Aceste uniti componente sunt catabolizate
la nivel celular prin desfacerea treptat a legturilor C-C din fiecare compus cu formarea n final a
unui metabolit comun, acetilcoenzima A, care reprezint punctul de legtur catabolic i
anabolic din organism.
Pornind de la acetilcoenzima A se pot sintetiza mai multe clase de biomolecule. Degradarea
aminoacizilor presupune obligatoriu i o etap de ndeprtare a gruprii amino realizat prin
transaminare sau deaminare oxidativ.Catabolizarea unitilor structurale ( monoglucide,
aminoacizi etc.) rezultate prin hidroliz se face pe cale oxidativ , cu consum de oxigen, iar acest
proces este denumit impropriu oxidare biologic.Din oxidarea acizilor grai rezult cele mai
importante cantiti de energie, dar oxidarea glucidelor decurge mai rapid, fiind utilizat deseori de
ctre organismul animal pentru nevoile imediate de energie. DioixIdul de carbon i apa reprezint
produii finali ai oxidrii acetilcoenzimei A n ciclul ATC cuplat cu catena de respiraie i
fosforilare oxidativ. Dioxidul de carbon rezult prin decarboxilarea unor acizi ( de exemplu acidul
151
Proteine Poliglucide
Lipide
Aminoacizi Glucoza
Acizi grai
Piruvat
Acetil-
CoA
Ciclul ATC
CO2
NADH+H+
NAD+
O2
H2O
ADP+Pi
ATP
152
Fosforilarea la nivelul substratului i fosforilarea oxidativ reprezint cele mai importante ci de
sintez a ATP-ului.
Fosforilarea la nivelul substratului implic utilizarea imediat n scopul sintezei de ATP a energiei
eliberate n cursul unei reacii exergonice care face parte dintr o secven catabolic. Fosforilarea
la nivelul substratului implic preluarea de Pi i asigur 10-12% din
necesarul de ATP al organismului animal.
Se cunosc trei reacii de fosforilare la nivelul substratului care opereaz n organismul animal i
anume:
A). n glicoliz, aldehida 3-Fosfogliceric este convertit la acid 1,3-difosfogliceric
Sub aciunea gliceraldehid-fosfat-dehidrogenazei (cu preluare de Pi). ntr-o etap ulterioar, acidul
1,3-difosfogliceric este transformat sub aciunea fosfogliceratkinazei n acid
3-fosfogliceric cu sinteza concomitent de ATP:
M E T A B O L I S M.
CONSIDERATII GENERALE
Organismele vii se caracterizeaz prin schimburi permanente cu mediul nconjurtor, precum i
printr-o autorennoire continu a componentelor chimice care le alctuiesc, proprieti cunoscute sub
numele de metabolism. Inexistent la materia nevie, metabolismul reprezint esena vieii, ntruct din
el deriv toate funciile de baz ale materiei vii: creterea, nutri]ia, respiraia, reproducerea,
ereditatea, variabilitatea.
Fa de mediul nconjurtor, organismele vii se comport ca sisteme deschise care vor avea cu
mediul nconjurtor att schimburi de energie, care se realizeaz prin metabolism. Se poate afirma
deci c metabolismul reprezint totalitatea transformrilor fizice i chimice, de energie i informaie
care au loc ntr-un organism viu.
Metabolismul este un proces unitar alctuit din dou procese: catabolismul i anabolismul, care se
gsesc ntotdeauna n echilibru. Prin procesul de degradare sau catabolism substanele organice
(glucide,lipide, proteine) provenite din mediul nconjurtor se degradeaz n compui mai simpli i
energie, care se depoziteaz sau se elimin. Prin procesul de biosintez sau anabolism, organismele
vii i sintetizeaz din substanele luate din mediul nconjurtor compuii structurali [i funcionali
necesari. Un echilibru adecvat ntre catabolism i anabolism este obligatoriu pentru buna funcionare
a organismului animal. Metabolismul se refer nu numai la schimburile de substan ci i la
schimburile de energie. Astfel, n cadrul anabolismului, transformrile chimice care au loc decurg cu
consum de energie (reacii endoergice), pe cnd n cadrul catabolismului se produc reacii chimice cu
eliberare de energie (exergonice).
153
Metabolismul furnizeaz energia necesar meninerii vieii organismului, energia degajat fiind
condiia de baz pentru meninerea structurii labile a protoplasmei vii. Reducerea aportului de
energie, adic ncetarea metabolismului, duce la modificri distructibile i ireversibile n structura
materie vii.
Metabolismul cuprinde totalitatea transformrilor complexe fizice i chimice pe care substanele
alimentare le sufer n organism, adic digestia,absorbia, transportul, metabolismul intermediar
i excreia.
Digestia reprezint totalitatea transformrilor mecanice (masticarea), fizice (dizolvarea,
emulsionarea, mbibarea ) i chimice (hidroliza, esterificarea, sinteza) pe care alimentele le sufer
sub aciunea enzimelor din aparatul digestiv pn ce ajung la forma fizic i chimic cea mai simpl
n care pot ptrunde n organism i pot fi asimilate de acesta. Prin absorbie, substanele nutritive din
hran transformate n componente cu molecule mici, ptrund n mediul intern al organismului.
Circulaia sngelui asigur transportul oxigenului i a substanelor nutritive spre toate celulele
organismului, precum i eliminarea prin organele excretoare a compuilor corespunztori.
Metabolismul intermediar
cuprinde totalitatea reaciilor biofizice i biochimice care au loc la nivel de celul, procese care
intervin n schimburile dintre protoplasm i substanele aduse din exterior. Metabolismul are loc
prin secvene de reacii catalizate de enzime cu formarea unui numr de produi intermediari.
Substanele care apar n procesele metabolice se numesc metabolii.
n cadrul metabolismului intermediar se disting dou grupe mari de transformri: reacii
de degradare (catabolice); reacii de biosintez (anabolice).
n cadrul reaciilor de degradare substanele complexe sunt scindate n substane simple. n aceste
transformri energia eliberat este nmagzionat n legturile macroergice din ATP. Caracteristic
pentru procesele catabolice este faptul c ele converg spre o cale final comun de degradare pn la
CO2 i H2O a glucidelor, lipidelor i protidelor. n urma transformrilor metabolice ale glucidelor,
lipidelor i protidelor rezult acid acetic activat, care constituie punctul de legtur anabolic i
catabolic din organism. Din acid acetic activat se formeaz mai multe clase de compui organici.
Reaciile de biosintez au loc n sens invers i anume, din substane cu structur mai simpl se
sintetizeaz enzimatic componenii moleculari ai celulei (glucide, lipide, proteine, acizi nucleici).
Aceste reacii au loc cu consum de energie.
Procesele catabolice i anabolice au loc concomitent n celul i sunt nsoite de schimburi
de energie; desfurarea acestor procese are loc n compartimente celulare distincte cu mecanisme de
reglare diferite, ceea ce face ca ele s fie ireversibile. n procesele metabolice organismul aplic cu
strictee principiul economiei maxime a compuilor i reaciilor, adic pornim de la un numr mic de
compui iniiali s se obin un numr foarte mare de compui intermediari i finali.
Energetica metabolismului
n cadrul proceselor metabolice transformrile substanelor sunt nsoite de schimbul i
transformarea energiei; toate reaciile biochimice sunt nsoite de consum sau eliberare de energie.
Astfel, reaciile de descompunere a substanelor complexe n substane mai simple sunt nsoite de
obicei de o scdere a energiei libere a substanelor care se transform, n schimb sintezele
biochimice au loc cu consum de energie. Un efect energetic deosebit de important l au reaciile de
oxidoreducere, care reprezint principala surs de energie n organismul animal.
Reaciile de degradare furnizeaz energia necesar reaciilor de biosintez; orice intensificare a
proceselor de biosintez n organismele vii, pentru care este necesar energia liber, trebuie s fie
nsoit de o intensificare a proceselor de degradare a substanelor care furnizeaz energia necesar
realizrii acestor biosinteze. O mic parte din energia catabolic este transformat n cldur.
Echilibrul chimic care exist ntre diferite procese biochimice se realizeaz cu ajutorul anumitor
sisteme de reglare, prin mecanisme specifice sau nespecifice. Reaciile biochimice pot fi controlate
enzimatic i hormonal prin mecanisme interdependente cu ajutorul efectorilor enzimatici.
154
155
156