Mycobacterium

Minidefiniţie

• bacili acido-alcoolo-rezistenţi (baar)

• imobili
• necapsulaţi
• nesporulaţi
• uneori ramificaţi
• cultivă lent, foarte lent sau sunt necultivabili in vitro
• aerobi sau microaerofili
• degradează zaharurile oxidativ
• au o compoziţie particulară a peretelui celular
 Particularităţi

CONŢINUT MARE ÎN LIPIDE ŞI CERURI AL PERETELUI CELULAR

• acido-alcoolo-rezistenţa
• rezistenţa la tratamentul cu alcali
• rezistenţa relativă la antiseptice şi dezinfectante
• sensibilitate la o gamă restrânsă de AB şi chimioterapice
• supravieţuirea şi multiplicarea în fagolizosomi
–  bacterii facultativ i.cel.
–  infecţii latente
• caracter cronic şi granulomatos al infecţiilor
• coloraţia diferenţială Ziehl-
Neelsen
• baar fini, uneori ramificaţi, cu
aspect de litere unghiulare.
• culturi tulpinilor virulente ale
bacililor tuberculozei - dispoziţia în
corzi
 Caractere de cultivare

• medii complexe - mediul

Löwenstein-Jensen (LJ)
• mai repede în medii lichide decât
pe medii solide
• agar Middlebrook – colonii
minuscule
• 5-10% CO2
• creştere lentă (7-28Z) sau foarte
lentă (28-96Z)
• creştere rapidă (<7Z)
• Mycobacterium leprae nu cultivă
in vitro
 Identificare

• Identificare preliminară
– caractere microscopice
– caractere de cultivare
– producere de catalază

• Caractere biochimice - 3-21 de zile

• Analiza cromatografică – acizi graşi din peretele bacterian
• Sonde de acizi nucleici
• Reacţia de amplificare genică (PCR)
 Clasificare

• Micobacterii patogene agenţi etiologici ai tuberculozei şi leprei

Mycobacterium tuberculosis
Mycobacterium africanum
Mycobacterium bovis
Mycobacterium leprae
• Micobacterii atipice
- condiţionat patogene – complexul M.avium – M.avium
- M. intracelulare
- M. marimun
- M. kansasii
- saprofite – M. smegmatis, M.gastri, M.gordonae
 Mycobacterium tuberculosis (BK)

• Habitat
– om
– animale de agrement
• Caractere microscopice
– baar subţiri
– corzi flexuoase
• Caractere de cultivare
– pretenţioşi nutritiv
– creştere lentă (2-4 S)
• Rezistenţa la factorii de mediu
– relativ rezistenţi în mediul extern
– produse patologice uscate - un an la
întuneric
– lapte - 5 minute la 100oC
– fenolul 2% şi lizolul
– NaOH 4% - supravieţuiesc minim 15-30
minute
 Structura antigenică

• tuberculolipide
– acizi micolici, ceruri şi alcooli superiori
– fosfatidilcolina  Mf se metaplaziază în celule epitelioide
– acizi micolici  Mf se metaplaziază în celule gigante multinucleate
(celule Langhans)
– „cord-factor” cultivarea sub formă de corzi

• polizaharide – formare de Ac circulanţi

• tuberculoproteine
– sensibilizare de tip anafilactic
– răspuns imun predominant celular
 Factori de virulenţă

• bacterie facultativ intracelulară

• cord-factor
– inhibă migrarea polimorfonuclearelor
– induce formarea granulomului
– eliberat intracelular  lezarea mitocondriilor.

• sulfatidele
– inhibă formarea fagolizosomului (supravieţuirea i.cel. în macrofage)
 Patogenie

• poarta de intrare - 90% respiratorie (picături Flügge, nuclei de picături,

pulberi contaminate)

• baar  Mf alveolare neactivate  X în fagosomi

• fagocite infectate distruse  fagocitoză de către Mf, X, liză celulară

• metaplazierea Mf în celule Langhans, celule epitelioide

• Mf infectate  ggl. limfatici regionali, sânge, ţesuturi

• răspunsul imun al gazdei la infecţie

 Patogenie
• Infecţia primară
– inflamaţie nespecifică (exsudat fibrinos, PMN, baar)  răspuns imun celular 
inflamaţie specifică, granulomatoasă
– primoinfecţia tuberculoasă inaparentă - cicatrizarea leziunilor, infecţie latentă
– tuberculoza primară subclinică – necroza de cazeificare  tuberculom 
calcificare  evoluţie latentă
– primoinfecţia manifestă necomplicată
• gazde cu reactivitate deficitară
• simptome clinice, semne radiologice
• diseminare hematogenă
• evoluţie funcţie de reactivitatea gazdei
– primoinfecţia complicată
• propagare limfatică retrogradă spre pleură
• diseminare în plămâni, sistemic  tuberculoza miliară sau granulia tuberculoasă
– consecinţe
• sensibilizare de tip întârziat la tuberculină
• imunitate relativă antituberculoasă
• Infecţia tuberculoasă latentă – bacili dormanzi
• Tuberculoza secundară
– reinfecţii masive
– reactivarea unor focare latente (“reinfecţie endogenă”)
Tuberculosis begins when droplet nuclei reach the alveoli.
When a person inhales air that contains droplets most of the
larger droplets become lodged in the upper respiratory tract
(the nose and throat), where infection is unlikely to develop.
However, the smaller droplet nuclei may reach the small air
sacs of the lung (the alveoli), where infection begins.
 Imunitate şi sensibilizare

• imunitate de infecţie, mediată celular

• eficienţă dependentă de capacităţile funcţionale ale macrofagelor
• imunitate relativă
– întârzie multiplicarea bacililor
– reduce diseminarea limfatică
– creşte capacitatea organismului de a delimita leziunile
– insuficientă pentru vindecarea leziunilor în TB secundară

• sensibilizarea tuberculinică este un corolar al imunităţii

• cele două fenomene pot fi disociate
 Diagnostic de laborator

• sugerat de semnele radiografice

• spută, spălătură bronşică, exsudat pleural, articular, lichid cefalo-rahidian
(LCR), urină, probe biopsice, puroi ş.a.
• 3 produse patologice, în 3 zile consecutive, dimineaţa
• concentrare prin centrifugare (urină, LCR ş.a.)
• Baciloscopia
– depistează baar fără indicaţii referitoare la specie
– rapid (1-2 ore)
– rezultat pozitiv - valoare diagnostică în cazul prelevatelor necontaminate sau
sputei
– baciloscopia negativă nu exclude diagnosticul de tuberculoză
• Izolarea
– indispensabilă diagnosticului de certitudine al tuberculozei
– decontaminare chimică (NaOH 4%) a prelevatelor contaminate
– mediul Lowenstein-Jensen - urmărire săptămânală 2-3L
– cultura negativă nu exclude diagnosticul de tuberculoză (leziuni închise sau
care elimină intermitent cantităţi mici de bacili)  examene repetate
• Identificarea
– caractere de cultură, microscopice şi biochimice
X-ray showing a moderately advanced case of
X-ray showing a far advanced case of
pulmonary TB. The patient had just begun
pulmonary TB. Infection is widespread
producing sputum, as there is evidence of a cavity
throughout both sides of the lung, seen as fuzzy
on the upper-left side
white abnormalities in this x-ray
Mycobacterium tuberculosis stained with
auramine fluorescence stain. Only the "Acid-Fast Bacillus" smear, positive for presence of
bacteria are illuminated while other Mycobacterium tuberculosis. Note the small, purple,
materials are blacked out rod-shaped bacilli
 Intradermoreacţia (i.d.r.) la tuberculină
• se bazează pe imunitatea mediată celular dezvoltată împotriva M.
tuberculosis
• PPD (Purified Protein Derivative): 2 UT/0,1 ml şi 10UT/0,1 ml

• rezultate citite la 48-72 ore de la injectare

– + zonă eritematoasă indurată  10 mm
– -  retestare cu 10 UT în < 15 zile

• Interpretare
– + = primoinfecţie tuberculoasă (vaccinare)
– tuberculoza/ evoluţia virtual nefavorabilă a primoinfecţiei:
• reacţie pozitivă foarte intensă la 2 UT (flictenă, necroză);
• virajul reacţiei de la negativ la pozitiv la copii nevaccinaţi BCG;
• saltul tuberculinic (creşterea diametrului reacţiei cu peste 8 mm între 2 testări, la
intervale de 6 luni)

• Reacţii fals-pozitive - reacţie încrucişată cu alte micobacterii

• Reacţii fals-negative - anergie (e.g., infecţie cu M. tuberculosis
generalizată, imunosupresie)
 The large blister-effect of a positive
reaction to the tuberculin skin test
(SK TB Control Guide).
The wheal is measured 48 hours after injection.
A positive reaction is much larger and means
the patient has contacted the TB bacteria, but
does not mean the patient has TB
 Tratament

• testarea sensibilităţii izolatelor la antituberculoase

• antituberculoasele de primă linie: izoniazida (HIN), rifampicina,

etambutol, pirazinamida, streptomicina
• antituberculoase de a doua linie: cicloserina, etionamida, fluorochinolone,
capreomicina, kanamicina, acidul para-aminosalicilic (PAS), rifabutin,
viomicina.

• asocierea a 4 medicamente în iniţierea terapiei antituberculoase:

HIN+RIF+PYZ+ETM
• 6-12 luni, funcţie de gravitatea bolii
• complianţa pacientului este esenţială pentru a minimaliza emergenţa
tulpinilor rezistente
Empty circles represent tubercle
bacilli susceptible to all anti-
tuberculosis drugs. A circle with a
letter in it represents a tubercle
bacillus with resistance to the drug
indicated by the letter: I = isoniazid
resistance; R = rifampin resistance; P
= pyrazinamide resistance
Epidemiologie
• Rezervor de infecţie - bolnavi cu leziuni deschise
• Transmiterea - aerogenă, contact direct cu leziuni deschise.
• Receptivitatea - generală, influenţată de vârstă şi factorii de mediu
• Incidenţă > 130%ooo (RO); mortalitate 11%ooo

Profilaxie
• Măsuri nespecifice
– depistarea activă şi precoce a surselor de infecţie
– izolarea, tratarea şi educaţia sanitară a pacienţilor
– dezinfecţia în focarul de tuberculoză
• Măsuri specifice
– Vaccinarea antituberculoasă
• vaccin atenuat BCG, i.dermic n.n. (Z4)
• revaccinări - i.d.r. la tuberculină negativă (selectiv)
• reduce cu 80% frecvenţa globală a tuberculozei
– Chimioprofilaxia
• HIN, timp de un an
– n.n. din mame tuberculoase
– contacţilor tuberculino-negativi din focare de tuberculoză
– copiilor la care s-a surprins virajul tuberculinic neexplicat prin vaccinare BCG
• previne primoinfecţia tuberculoasă cu tulpini virulente
 Complexul Mycobacterium bovis

• M. bovis, M. africanum, BCG

• Mycobacterium bovis
– TB bovină
– consum lapte vacă crud (mamită TB), inhalare aerosoli (vite TB
pulmonară)  TB om
– LJ – creştere săracă, lentă, colonii S, nepigmentate, f. mici
• Mycobacterium africanum
– Africa de Vest şi centrală
– LJ – creştere săracă, lentă, colonii plate, R
• BCG
– tulpină M. bovis cu virulenţă atenuată
– LJ – creştere abundentă, colonii R
– avirulent pentru persoane normoreactive; infecţii postvaccinale
manifeste la copii cu imunodeficienţă celulară
• sensibilitate la chimioterapice ~ M. tuberculosis; M. bovis R la PYZ
• profilaxie – pasteurizarea laptelui; sacrificarea vitelor reactive la
tuberculină
 Micobacterii atipice
• specii cu caractere de cultivare, habitat, patogenitate şi sensibilitate la AB diferite de
ale bacililor tuberculozei
• caractere de cultivare
– grup I fotocromogen
– grup II scotocromogen
– grup III noncromogen
– grup IV creştere rapidă (<7Z)
• patogene pentru animale, condiţionat patogene pentru om/ saprofite ale ambientului
• persoane imunoreactive – infecţii localizate, infecţii latente; persoane
imunocompromise (SIDA) – infecţii generalizate grave

M. kansasii Infecţii pulmonare RIF+ETM+HIN

M. avium-intracellulare Pacienţi cu SIDA: infecţii CLR/AZT+ETM+RIF+CFZ
sistemice
M. fortuitum-chelonae Abcese s.c. AK+CFX+PRB 2-6S,
SXT/DO 2-6L

• semnificaţie clinică - în lipsa bacililor tuberculozei, izolarea repetată coincide cu

evoluţia bolii
 Mycobacterium leprae

• Caractere microscopice
– baar drept sau uşor încurbat,
dispus izolat, în mici grămezi sau,
caracteristic, în “globi”, cel mai
frecvent i.cel. în Mf

• Caractere de cultură
– nu poate fi cultivat pe medii de
cultură acelulare
– cultură de celule cultivare foarte
lentă, la 30oC
– tatuul cu nouă brâie
 Patogenie
• lepra (boala Hansen)
• incubaţie de 2-4 ani
• evoluţie foarte lentă, cronică
• două forme majore de lepră
1. Lepra tuberculoidă
 macule sau plăci extinse pe trunchi, faţă şi membre
 leziuni granulomatoase cu o margine eritematoasă elevată şi un centru
uscat, care poate fi hipopigmentat, fără fire de păr
 leziuni paucibacilare
 M. leprae invadează nervii senzitivi  anestezie regională
 reacţie de hipersensibilizare întârziată la lepromin
2. Lepra lepromatoasă
 evoluează bacteriemic
 leziuni mari, difuze, granulomatoase şi multibacilare
 nervi senzitivi implicaţi difuz  anestezia regională
 leziuni cu precădere în regiunile corpului cu temperatură relativ scăzută,
e.g., tegumentul feţei şi extremităţilor ş.a.
 facies caracteristic, leonin
 anergici la lepromin
The face of a patient with active, neglected The face of a Peruvian man with active
nodulous lepromatous leprosy. With lepromatous leprosy
treatment, all nodules could be reversed
The foot of a woman that has been grossly Deformity due to nerve damage with its
disfigured through leprosy infection consequent ulcers and resorption of bone.
Such deformities can be worsened by
careless use of the hands
• Diagnostic de laborator
– depistarea microscopică în exsudatul nasal (forma
lepromatoasă) sau în biopsii din leziuni cutanate (forma
tuberculoidă) a baar necultivabili
• Tratament
– dapsonă + clofazimină + RIF (2-4 ani)
• Epidemiologie
– sursa de infecţie – bolnavii (lepră lepromatoasă > lepră
tuberculoidă)
– transmitere
• contact direct cu leziuni tegumentare
• inhalare de pulberi contaminate
• Profilaxia
– depistare, izolare şi tratament antilepros
– vaccinare BCG
– educaţia sanitară
Nocardia
 Nocardia

• N. asteroides, N. brasiliensis, N. farcinica

• Habitat
– distribuţie cosmopolită în soluri bogate în materie organică
• Caractere microscopice
– bacili filamentoşi gram-pozitivi, parţial acido-alcoolo-rezistenţi
– peretele celular conţine acizi micolici
• Caractere de cultivare
– strict aerob
– creşte pe majoritate mediilor neselective
– incubare prelungită (7Z) pentru majoritatea tulpinilor
• Factori de virulenţă
– insuficient cunoscuţi
– bacterie condiţionat patogenă
 Nocardia

• N. asteroides
– pacienţi imunocompetenţi cu boli pulmonare cronice (bronşită, emfizem,
bronşiectazie)
– pacienţi imunocompromişi cu deficienţe ale celulelor T (pacienţi
transplantaţi, cu tumori, HIV+, sub terapie cu corticosteroizi)
– infecţii bronhopulmonare (pneumonie cu cavitaţie)  diseminare SNC,
ţesut s.c.
– inhalare  colonizare orofaringe  aspirarea secreţiilor orale în TRI
• N. brasiliensis
– pacienţi cu leziuni cutanate prin care microorganismele pot fi introduse
în ţesutul s.c.
– localizare secundară după diseminare din infecţie pulmonară primară
– necroză, formare de abces
– infecţii cronice cu formare de fistulă
– micetoame, infecţii limfocutanate, celulită, abcese s.c.
 Nocardia

• probe de spută multiple

• anunţă laboratorul despre
suspiciunea de nocardioză
• microscopie
– bacterii ramificate, parţial acido-
rezistente
– sensibilă, relativ specifică
• cultivare
– lentă (incubare 1S)
– medii selective (agar BCYE) –
produse patologice contaminate
 Nocardia

• Tratament
– SXT, sulfamide (doză mare),  6S
– tratament chirurgical al plăgii
– N. farcinica cea mai rezistentă la AB

• Epidemiologie
– infecţii exogene
– transmitere – inhalare (pulmonară), introducere traumatică (cutanată)
– pacienţi cu risc – HIV+, transplantaţi

• Profilaxie
– imposibil de evitat expunerea la Nocardia
– îngrijire adecvată a plăgilor