Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
NH
NH2 NH2
C C
N N NH
C C
HN O N OH
5’
Riboza Dezoxiriboza
5’
HO CH2 OH HO CH2 OH
O O
4’ 1’
3’ 2’
OH OH OH lipseşte
2’-OH
NUCLEOZIDUL SE LEAGA PRIN C5 AL DEZOXIRIBOZEI DE
ACIDUL FOSFORIC
Legătură
β-N-glicozidică
În stare liberă se
găsesc şi formele di- şi
trifosfat ale acestor
nucleotide: ADP –
adenozin-difosfat,
GDP, CDP, UDP, ATP,
GTP, CTP, UTP,
respectiv dADP, dGDP,
dCDP, dTDP, dATP,
dGTP, dCTP, dTTP.
Baza Nucleozidul Nucleotid
Dezoxiadenozin monofosfat
(dAMP) sau dezoxiadenilat
Dezoxiadenozin difosfat
(dADP)
Dezoxiadenozin trifosfat
(dATP)
Terminologie Dezoxiribo-nucleozide/nucleotide
(cînd pentoza = dezoxiriboză)
Baza Nucleozidul Nucleotidul
Adenina (A) Dezoxiadenozina (A) Dezoxiadenozin monofosfat
(dAMP)
Dezoxiadenozin difosfat (dADP)
Dezoxiadenozin trifosfat (dATP)
Guanina (G) Dezoxiguanozina (G) Dezoxiguanozin monofosfat
(dGMP)
Dezoxiguanozin difosfat (dGDP)
Dezoxiguanozin trifosfat (dGTP)
Citozina (C) Dezoxicitidina (C) Dezoxicitidin monofosfat (dCMP)
Dezoxicitidin difosfat (dCDP)
Dezoxicitidin trifosfat (dCTP)
Timina (T) Dezoxitimidina (T) Dezoxitimidin monofosfat (dTMP)
Dezoxitimidin difosfat (dTDP)
Dezoxitimidin trifosfat (dTTP)
Reprezentarea simplificată a catenei de ADN
O
G u a n in e Prin convenţie o catenă de ADN se
HN N
scrie în direcţia
H2N N N
5’- 3’.
5' end HO CH2
O NH2
ex. GCT înseamnă 5’GCT 3’
C y to s in e
N
O
N O
O P O CH2
O
O
O P O
O
O
T h y m in e
H3C
NH
NH O
O P O CH2
O
O
OH
3' end
Structura primara ADN
Lantul unei catene de ADN este format prin insiruirea celor 4 tipuri de
nucleotide care se unesc intre ele cu ajutorul acidului fosforic.
U.M.F IAŞI
STRUCTURA PRIMARĂ
• ADN este un macro-polimer de
dezoxiribonucleotide;
[P – 5dR - N]n
Grup fosfat
(ac.ortofosforic) Bază azotată:
Pur – A, G
Pentoză Pir – T, C
D-2-dezoxiriboza
U.M.F IAŞI
• Polimerizarea
nucleotidelor: legături
covalente (puternice)
fosfodiesterice
• Se formează o catenă
(lanţ):
- continuă,
- lineară
(neramificată!)
• o parte
"constantă"
(ax) → fosfo-
glucidică şi
• o parte
“variabilă” →
bazele azotate
• Periodiocitate celor 4 nucleotide, adica o ordonare regulata:
A-T-G-C-A-T-G-C-A-T-G-C-A.
• Chargaff a demonstra prin metode fizico-chimice ordinea
aperiodica a nucleotidelor din monocatena de AND :
.. A-T-T-A-G-C-G-A-T-C-C-A-C-A-T….
Informaţia genetică codificată = secvenţa (ordinea)
nucleotidelor → determină ordinea aminoacizilor în proteine.
5'- ATGCCTAGATCA - 3'
aa1- aa2-aa3- aa4
AND de tip B
A 11 + 34,7 2,56 23
B 10 + 34,0 3,38 20
Z 12 - 30,0 5,71 18
- transcris in prezenta ARN polimerazei sub forma de ARN m precursor care prin
maturare trece in ARNm matur.
ARNm aduce la nivelul ribozomilor mesajul genetic copiat din ADN, mesaj care va fi
folosit la sinteza unei proteine specifice.
ARN RIBOZOMAL-ARNr
• 80-85% din ARN celular
• are zone monocatenare alternand cu
zone dublu catenare
• este constituentul major al subunităţilor
ribozomale, în care are rol atât
structural, cât şi funcţional catalitic
(catalizează reacţii din procesul de
sinteză a proteinelor care se realizează
la nivelul ribozomului)
• masa moleculara mare: 106 - 104 daltoni,
ARNt de transfer
- 8-10% din totalul ARN, este scurt: 70 - 90
nucleotide
- are 2 situsuri :
1. o extremitate se termina cu secventa
CCA- unde se va fixa aminoacidul specific;
2. a doua polaritate este bucla centrala cu o
secventa de 3 nucleotide (ANTICODON),
complementara codonului de pe ARNm .
• ARN t : - bucla 1 prezinta o secventa specifica cu rol de situs pt fixarea
temporara a ARNt la ribozom in timpul sintezei proteice
- bucla 4 (bucla dihidrouracilului)
- bucla 3 ( bucla anticodonului) prezinta o tripleta de nucleotide (3-5)
care recunoaste codonul din ARNm (5-3) cu care formeaza leg de H in timpul
fixarii ARNt pe complexul ARNm-ribozom.
FUNCTIILE ACIZILOR NUCLEICI
• ADN
o autocatalitica (autoreplicare)-conserva informatia genetica;
o heterocatalitica-datorita structurii primare aperiodice transcrie
informatia genetica in ARN- proteine-caracter.
o variabilitate- asigura posibilitatea de recombinare sau de
mutatie a ADN
• ARN
ARNm-in transcriptie
ARNr-cupleaza ribozomii in procesul de translatie.
ARNt-transporta aminoacizii la locul sintezei proteice.
Funcţia heterocatalitică a ADN
Informaţia genetică
Proteine
Funcţia autocatalitică a ADN
• autoreplicare semiconservativa
||| ||| ||| ||| ||| ||| ||| ||| || || || || || || || || || || || || || || || || || ||| ||| ||| ||| ||| ||| ||| |||
C C G C G G C G TTATAATTATAAATATT G G C C G C G G
Replicarea ADN la
eucariote debuteză în mai
multe puncte de origine,
ce corespund unor mici
unităţi de replicare numite
repliconi.
• Replicarea progresează
bidirecţional pentru fiecare
replicon şi, după ce se
termină, repliconii
fuzionează treptat până ce
întreagul AND este duplicat.
REPLISOM :
• HELICAZE
• GIRAZE (topoizomeraze)
• Proteinele de replicare A
(RPA) numite şi proteine
SSB (de la single-strand
binding proteins)
• PRIMAZE
• POLIMERAZE
• LIGAZE
La nivelul originii replicării se ataşează o
enzimă şi desface dublul helix separând
cele două monocatene . Această enzimă
este helicaza.
Topoizomerazele relaxează dublul helix permiţând helicazei să avanseze. Topoizomeraza taie una dintre
catene unul dintre capete se răsuceşte de câteva ori în jurul catenei, tensiunea acumulată în dublul helix
ADN ca urmare a avansării helicazei este anulată; ulterior, topoizomeraza reuneşte covalent cele două
capete libere, refăcând continuitatea catenei. În absenţa topoizomerazei, la un moment dat, prin intervenţia
helicazei, dublul helix ar deveni supratensionat, iar helicaza nu ar mai putea să avanseze.
• Proteine SSB (de la
single-strand binding
proteins) împiedică
reîmperecherea
bazelor.
• Sub acţiunea
primazei se
sintetizează
amorse scurte =
primeri..
ADN polimerazele prezinta două caracteristici
generale:
• toate ADN polimerazele sintetizează ADN
numai în direcţia 5’→3
• “nu ştiu” să înceapă sinteza unei catene ci
numai să o alungească, adăugând un
nucleotid la extremitatea 3’OH
Sinteza nu poate fi sincrona pe
ambele catene deoarece acestea
sunt antiparalele, iar ADN
polimeraza III lucreaza numai in
directia 5’ -3’
Sinteza ADN se face diferit pe cele 2
catene :
• pe catena CONDUCATOARE se
face direct, in sensul de actiune a
ADN polimerazei-5’-3’
• pe catena DECALATA se face pe
segmente scurte – fragmente
OKAZAKI in prezenta primerului.
3’ Primerul primului 5’
Primerul celui de-al
fragment Okazaki doilea fragment
3’ Primul fragment Al doilea Okazaki Al treilea Fragment
5’ 3’ 5’ 3’ 5’
Okazaki fragment fragment deoxiribonucleotidic sintetizat
Okazaki Okazaki de ADN-polimeraza I în locul
primerului excizat
3’ 5’
5’ 3’ 5’ 3’
ADN-ligaza – realizează
legătura covalentă între capătul
3’-OH al fragmentului de ADN
sintetizat de polimeraza I şi
capătul 5’-fosfat al fragmentului
Okazaki precedent, stabilind
astfel continuitatea covalentă a
catenei replică.
Replicarea se încheie prin fuzionarea tuturor ochiurilor de replicare şi prin
desprinderea enzimelor de pe moleculele-fiice de ADN rezultate.
ETAPELE REPLICARII ADN
• În condiţii experimentale
(tratare termică sau chimică)
→ ruperea (desfacerea)
legăturilor de hidrogen =
denaturare→ monocatene *.
• HM folosiţi în diagnostic şi
tratament: