Acizii nucleici

1
 Acizii nucleici
 ADN:
 molecule bicatenare;
 deţine informaţia genetică codificată
 despre....

 ARN – molecule monocatenare:

 ARNm – copia IG, matriţa pentru sinteza proteinelor
 ARNt – transportă aminoacizi, translatori ai codului genetic
 ARNr – component al ribozomilor, controlul translaţiei
 microARN – reglarea expresiei IG

2
 ADN
acid dezoxiribonucleic

 Monomeri
 Structura
 Primară
ADN

 Secundară

 Terţiară

 Localizare
 Proprietăţi
 Funcţii
 Sinteză
 Particularităţile ADN uman
 Metode de studiu

3
 Momomerul ADN

N – baza azotată
O - Pu – Adenina
γ β α N
5’ Guanina
C
P P P C1’ - Py – Timina
C Citozina
ADN

4’
C3’ C2’

nucleozid

dNTP – nucleotid – nucleozid trifosfat

5
 dNMP = monomeri ADN
ADN
 Monomer – nucleotidele (dNMP)
Structura primară:
catena polinucleotidică

Structura secundară:
bicatenară
ADN
 Structura ADN
ADN

I II III
• catena polinucleotidică • dublul helix = două • DNP =
catene spiralizate unite dezoxiribonucleoprotei
prin legături de d
hidrogen

8
 Structura primară a ADN
ADN

5' GCGT ... 3‘ 9

10
 Rosalind Franklin Maurice Wilkins
ADN

James Watson şi Francis Crick

alături de modelul structurii
secundare a ADN.

11
 Complementaritatea ADN asigură:

mecanismul
ADN

stabilitatea mecanismul
mecanismul mecanismul reparării
moleculei recombinări
replicării transcripţiei leziunilor
ADN i
ADN

12
 Conformaţia spaţială a moleculelor de ADN liniar
Tip Lungimea spirei Baze/tur Înclinarea faţă
de ax
A 24,6 Å ~11 +19°
B 33,2 Å ~10 -1,2°
Z 45,6 Å ~ 12 -9°
ADN

13
 Structura terţiară
 ADN + proteine = DNP
 ADN + proteine situs-specifice= complex funcţional

 ADN nuclear + proteine histone = cromatina ↔ cromozomii

ADN

14
 Proprietăţile ADN
Replicare • dublarea IG

Reparaţie • Identificarea, înlăturarea greşelilor

Denaturare • ruperea legăturilor de H

Renaturare • refacerea dublului helix

ADN

Heterogenitate • varietatea secv. nucleotidice

Flexibilitate • A↔B↔Z

Fragilitate • sensibilitate la factori mutageni

Migrare în câmpul • ADN are “—”

electric

Hibridizare • molecule de diferită origine formează noi molecule

 Replicarea

= dublarea ADN
= dublarea IG
ADN

= transmiterea IG

16
 Funcţiile ADN
• succesiunea b.a. în ADN
Deţine IG determină succesiunea
codificată: aminoacizilor în proteină

• de acţiunea nucleazelor
Păstrează IG: • de citirea neautorizată
• de mutaţii
ADN

Transmite IG prin • 1ADN — replicare 

dublare=replicare: 2ADN

• ADN — transcripţie 
Realizează IG ARN — translaţie 
proteină

17
 Exemple
 globina
Hb

 globina

Reglează nivelul
Insulina glucozei
ADN

actina Asigură
contracţiile
musculare
miozina

Apărare imună
Imunoglobulina
 Concluzii:

 ADN are secvenţe codante = gene:

 Gene p/u proteine  ARNm ~ 30 000
 Gene preARNr ~ 250
 Gene ARNr 5S ~ 2000
 Gene ARNt ~ 1300
ADN

 Gene p/u microARN

 ADN are secvenţe necodante
 Secv. reglatoare
 Secv. spaţiatori
 Secv. satelit (cen, t)
 Secv. minisatelit (markeri crs)
 Secv. microsatelit (markeri individuali)
 Localizarea ADN

 În nucleu 95 - 98%
 molecule mari liniare de ADN
 asociate cu proteine histone
ADN

 sub formă de cromatină ↔ cromozomi

 În mitocondrii 2-5%
 molecule mici inelare

20
 Particularităţile ADN uman
ADN nuclear (nucleul celulei somatice, diploid)
 cu o lungime de ~ 6,4x109p.n.; 7 picograme
 fragmentat în 46 de molecule;
 asociat cu proteine histone;
 extrem de eterogen:
 secvenţe codificatoare şi necodificatoare;
ADN

 secvenţe repetitive şi unice;

 secvenţe active transcripţional şi inactive;
 secvenţe stabile şi instabile mutaţional;
 conţine ~ 30000 perechi de gene;
 se replică numai în perioada S a ciclului celular;
 50% este de origine maternă şi 50% de origine
paternă.

21
 ADN

22
 Anemia cu hematii falciforme

A→T 17
ADN

23
 Indivizii homozigoţi
recesivi

Hemoglobină anomală

Hematii falciforme (în formă de seceră)

Distrugerea rapidă a Lipirea celulelor şi Acumularea celulelor

celulelor falciforme blocarea circulaţiei falciforme în splină
sanguine
Anemie
Dereglări locale în alimentare sanguină

Supraactivitatea Defecte Defecte în Defecte în

măduvei osoase cardiace activitatea tractul
musculară gastrointestinal
Dilatarea
Creşterea cantităţii Defecte
cordului Afectarea Dereglări
măduvei osoase renale
plămânilor cerebrale

Diminuarea
activităţii Pneumonie Paralizie Dereglări
mintale renale

Deformări Dereglări Dureri Fibroza

24
scheletice cardiace nespecifice splinei
 Particularităţile ADN uman
ADN mitocondrial
 Are o lungime de 16,6 kb
 Este inelar
 Numărul moleculelor este variabil (2-10)
ADN

 Conţine 37 de gene
 Genele sunt dispuse compact
 Se replică în dependenţă de metabolismul
celular
 Este de origine maternă

25
 Particularităţile genomului uman

Genomul nuclear Genomul mitocondrial

n=3,2 Gb / 2n=6,4 Gb 16,6 kb
(~ 30000 gene/perechi) 37 de gene

ADN genic ADN extragenic

25% 75%

ADN ADN Secvenţe unice Secvenţe

codant necodant sau în număr moderat sau
10% 90% mic de copii înalt repetitive
60% 40%

26
 Genomul nuclear

SECVENŢE SECVENŢE
OBLIGATORII FACULTATIVE
• Gene structurale • Elemente mobile
(codificatoare de
ADN

• Pseudogene
proteine) • ADN viral
• Gene pentru
ARNt, ARNr;
• Palindromi;
• ADN satelit
(c,t…)
27
 Secvenţele necodificatoare ale genomului uman

SINEs • transpozoni; situsuri de iniţiere a replicării

LINEs • retrotranspozoni; situsuri de împerechere corectă a

crs în timpul meiozei I
ADN

ADN satelit • rol structural, formează regiunile de

heterocromatină constitutivă (c, t, h, s)

ADN • markeri genetici ai crs

minisatelit
ADN • markeri genetici individuali
• SINEs (Short interspersed elements) – 11%
microsatelit • LINEs (Long interspersed elements) – 16%
28
 Studiul ADN pentru:

Stabilirea structurii genelor normale şi mutante

Depistarea mutaţiilor
ADN

Diagnosticul bolilor genice

Analiza polimorfismului individual

29