Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
1
U.M.F IAŞI
GENOTIP FENOTIP
MEDIU
STRUCTURA ADN
1. STRUCTURA PRIMARĂ ŞI
SECUNDARĂ A ADN
Grup fosfat
(ac.ortofosforic) Bază azotată:
Pur – A, G
Pentoză
Pir – T, C
D-2-dezoxiriboza
5
U.M.F IAŞI 1.1. Structura primară a ADN
8
U.M.F IAŞI 1.1. Structura primară a ADN
Informaţia genetică
9
U.M.F IAŞI
10
U.M.F IAŞI 1.2. Structura secundară a ADN
Legea
complementarităţii
bazelor explică
mecanismele prin care se
realizează funcţiile
genetice ale ADN:
• transcripţia,
• replicarea,
• repararea leziunilor,
• recombinarea
În condiţii experimentale
(tratare termică sau chimică)
→ ruperea (desfacerea)
legăturilor de hidrogen =
denaturare→ monocatene *.
13
U.M.F IAŞI
HM folosiţi în diagnostic şi
tratament:
B. STRUCTURA GENOMULUI
UMAN
15
U.M.F IAŞI
25.000 gene
16
U.M.F IAŞI
17
U.M.F IAŞI
2.1. Genomul nuclear
a) ADN GENIC (25%)
Gena = unitatea de
informaţie genetică →
codifică un produs
primar specific
(proteine sau ARN) 25.000 gene
Secvenţe netrasncrise
(necodante);
DUPLICAŢII
SEGMENTALE (5% GU) – Duplicaţie genică
blocuri (~10Kb) ce
flanchează genele (pe
acelaşi cromozom) ;
genă Deleţie genică
rol în sinapsa corectă a
omologilor in meioză * .
CO
Importanţă: inegal
fiind identice - pot genera HMSN = neuropatie ereditară motorie şi
erori de împerechere a senzorială
cromozomilor omologi → HLPP = neuropatie ereditară cu
CO inegal → mutaţii: predispoziţie la pareze presionale
duplicaţii /deleţii genice
→ BOLI GENOMICE 20
Charcot-Marie-Tooth
U.M.F IAŞI
3. GENOMUL MITOCONDRIAL
GENOMUL MITOCONDRIAL
Genomul mitocondrial al
zigotului provine, prin ovul,
exclusiv de la mamă.
ADNmt poate suferi mutaţii
germinale sau somatice
Mutaţiile germinale produc o
serie de boli degenerative în
SNC, SNP, muşchi, etc,
care se transmit maternal:
• de la mamă la toţi descendenţii;
• bărbaţii bolnavi nu transmit boala
24
U.M.F IAŞI
26
U.M.F IAŞI
APARATUL GENETIC:
structurile celulare care conţin ADN:
nucleul + mitocondriile
2. CROMATINA (v. LP )
2.1. EUCROMATINA ŞI
HETEROCROMATINA
•Exclusiv în nucleu!
• Două tipuri morfo-funcţionale Caracteristici EUCROMATINA HETEROCROMATINA
distincte: Condensare Fin dispersată Puternic condensată
(cromocentri)
- EUCROMATINA Colorare Slabă Intensă
HETEROCROMATINA:
29
U.M.F IAŞI
31
U.M.F IAŞI
CROMATINA X:
rezultă prin inactivarea unui cromozom X (la femeile XX) → va forma
(prin heterocromatinizare) corpusculul Barr
XN Xa
sănătoase?
33 anhidrotică
a = displazie ectodermală
U.M.F IAŞI
Sex genetic XX XY
(în stări intersex)
34
U.M.F IAŞI
CROMATINA SEXUALĂ
CROMATINA Y:
reprezintă heterocromatina de pe 2/3 distale braţ lung
cromozom Y
(colorată cu flurocromi – ex., quinacrină – şi vizibilă
la microscop UV ca un corpuscul fluorescent )
corpuscul F)
exclusiv la barbati
Nr. corpusculi F = nr. cromozomi Y
ex., bărbaţii XYY au 2 corpusculi F
35
U.M.F IAŞI
Analiza cromatinei la
microscopul electronic
evidenţiază un sistem
ierarhizat de
compactare a
moleculei de ADN →
fibre de cromatină,
de dimensiuni diferite,
alcătuite din ADN,
histone şi proteine
nehistonice.
37
U.M.F IAŞI
39
3)
U.M.FFibra
IAŞI pliată în bucle laterale (300
nm)
FC (30 nm) se pliază în
bucle laterale ataşate la
un “schelet” de proteine
nonhistoince → FPBL =
300nm
O buclă (domeniu crs) –
de ~75Kb – câteva gene =
unitate funcţională (de
transcripţie şi replicare).
Rată de "compactare" este
de circa 10:1
40
U.M.F IAŞI
41
U.M.F IAŞI
INTERFAZA DIVIZIUNE
42
U.M.F IAŞI
Sinteză
44
U.M.F IAŞI
3. CROMOZOMII UMANI
CROMOZOMI = organite
nucleare care fixează
intens coloranţi bazici
(“chroma” + “soma”)
Funcţii:
Transportă + distribuie
materialul genetic în cursul
diviziunii → stabilitatea
proceselor ereditare.
Asigură recombinarea
genetică în meioză
45
U.M.F IAŞI
46
U.M.F IAŞI
(2) CENTROMERUL
(2) CENTROMERUL
La ADN cen se
fixează proteine
CENP = kinetocorii
→ locul de fixare a
filamentelor fus de
diviziune → ce vor
tracta cromatidele la
poli (în anafază)
M A T
48
U.M.F IAŞI
a). Elemente comune tuturor
cromozomilor
Funcţii:
menţinerea integrităţii structurale;
asigurarea replicării complete;
poziţionare cromozomilor omologi în
nucleu
49
U.M.F IAŞI
b). Elemente caracteristice unor cromozomi
51
U.M.F IAŞI
52
U.M.F IAŞI
Benzile reflectă
structura
internă,
heterogenă, a
cromozomilor.
Fiecare
cromozom – are
un model
caracteristic de
benzi →
identificarea sa
precisă.
53
U.M.F IAŞI
55
U.M.F IAŞI
EVOLUŢIA
TEHNICILOR DE ANALIZĂ
CROMOZOMIALĂ
(v LP)
(1) TEHNICI DE
GENERAŢIA I (1956)
- cromozomi uniform
coloraţi;
- identificare
imprecisă*
(2) TEHNICI DE
GENERAŢIA II
(1970)
- marcaj în benzi G
sau R cromozomi
metafazici
(400 benzi);
- identificare precisă 56
GI
G II
Identificarea
precisă a
57 cromozomilor
U.M.F IAŞI
(3) TEHNICI DE
GENERAŢIA III
(1977)
- Înaltă rezoluţie: M PM P
cromozomi
pro-metafazici
(550 benzi)
sau
profazici
(850 benzi)
- o bandă = 3-5
Mb
58
U.M.F IAŞI
TEHNICI DE ANALIZĂ CROMOZOMIALĂ
(v LP)
F fluorescence
I in Hibridare fluorescentă
S situ in situ
H hybridization
61
a. Proba şi ADN ţintă
b. Marcarea probei –
indirectă (stg.) şi directă
(dr.)
c. Denaturarea probei şi a
ADN-ului ţintă
e. Fixarea fluoroforului la
haptenă (marcaj indirect)
63
Exemple de sonde
Sondă centromerică
(celulă interfazică) 64
Exemple de sonde
Sonde telomerice
(celulă metafazică)
65
Exemple de sonde
68
Sindromul Velo-cardio-facial
Cromosom 22 anormal
Cromosom 22
normal
69
20/02/2022 71
20/02/2022 72
MLPA
20/02/2022 73