Leucemii acute

 FROTIU DE SÂNGE PERIFERIC

 F R O T I U M Ă D U V Ă O S O A S Ă H E M ATO G E N Ă
 PLANUL DE INVESTIGAȚII
Leucemii acute-mecanisme
 Sunt blocate în stadiu
Celule de blaști
hematopoetice  Nu iși exercită funcțiile
își pierd
capacitatea de normale
diferențiere

 Celalalte celule ale

măduvei osoase
Celulele
hematopoetice
hematogene sunt
Sunt afecțiuni neoplazice se divid deprivate de nutrienți
datorate afectării celulei stem necontrolat  Apare pancitopenia
pluripotente hematopoetice și
celulelor parțial direcționate  Anemie
spre linia mieloidă și limfoidă  Trombocitopenie
 Leucopenie
Leucemii acute-mecanisme
Ficat

Splină

Timus
Celule blastice se acumulează în
maduva osoasă hematogenă
apoi trec în sânge, unde se pot
acumula la nivelul diverselor Noduli
organe (în special celulele
limfoblastice) limfatici
Leucemii acute-simptomatologie
Leucemii acute-planul de investigații

Examenul
Explorarea Studii de
frotiului de Reacții Studiul
morfologică a Imunofenitipare biologie
măduvă osoasă citochimice cariotipului
sângelui periferic moleculară
hematogenă
Leucemii acute-explorarea morfologică a
sângelui periferic
Seria leucocitară
• Forme leucemice, număr mare de leucocite, multe fiind leucemice
• Forme subleucemice, număr normal de leucocite, din care o parte sunt
leucemice
• Forme aleucemice, număr normal sau scăzut de leucocite, fără celule
leucemice

Seria eritrocitară
• Anemie severă, normocromă, normocitară
Seria trombocitară
• Poate fi normală la început, pe masură ce evolueză boala =>
trombocitopenie absolută

Blaști-celule imature/leucemice
-celule mari, de formă rotundă sau ovalară
-raport nucleu/citoplasmă în favoarea nucleului
-cromatină dispusă reticular
-nucleoli vizibili
-citoplasmă redusă cantitativ, dispusă perinuclear Hiatus leucemic=lipsa formelor de tranziție între
celulele tinere și elementele mature
Leucemii acute-explorarea frotiului de
măduvă osoasă hematogenă
Măduvă osoasă
hematogenă
Hipercelulară
Monomorfă
Blaști > 20%
principalul criteriu
de diagnostic
Celelalte serii
celulare sunt mult
reduse
Leucemii acute-reacții citochimice
Reacția mieloperoxidazelor
• +LAM ( intensitatea crește LAM13)

Reacția LAM LAL-B LAL-T

Reacția negru Sudan
Mieloperoxi + - -
• +LAM daze
• Rezultate paralele cu reacția mieloperoxidazelor
Negru + - -
Sudan B
Reacția esterazelor
• Specifică pentru monoblaști Esteraze M4, M5 - -
Periodic M6 + -
Reacția PAS acid-Schiff
• LAL1
• LAL2
Fosfataza - - +
• LAM6 acidă
Reacția fosfatazelor acide
• 80% din limfoblaștii leucemici (în special de tip T)
• Negativă în LAM
Leucemii acute mieloide -Clasificare
FAB
Citologic neidentificatibilă Mieloblastică fără diferențiere Mieloblastică cu diferențiere Promielocitară

M0 M1 M2 M3

Mielo-monocitară Monoblastică Eritroleucemia acută Megacarioblastică

M4 M5 M6 M7
Leucemii acute mieloide-Clasificarea
FAB
Leucemii acute limfoblastice-
Clasificarea FAB

LAL2-macrolimfoblastică, aspect
LAL1-microlimfoblastică-aspect
heterogen, cu limfoblaști de mărimi LAL3- cu celule Burkitt-like, aspect
monomorf cu limfoblaști mici (formă
diferite (formă frecventă la adulți, omogen al celulelor de talie mare
frecventă la copii)
prognostic prost)
Leucemii acute-imunofenotipare
Imunofenotiparea cu anticorpi monoclonali permite identificarea antigenelor specific fiecărui tip
de leucemie
Markeri specifici pentru celula stem

• TdT, HLA-DR, CD-34

Markeri specifici pentru limfocitul B

• CD10, CD19, CD20, CD22

Markeri specifici pentru limfocitul T

• CD2, CD3, CD5, CD7

Markeri specifici granulo-monocitari

• CD11, CD13, CD14, CD33

Markeri specifici megacarioblastici

• CD41, CD42, CD62

Leucemii acute-studiul cariotipului
Permite evidențierea unor anomalii structurale sau numerice
În LAM se întâlnesc frecvent:
 t(8;21) în LAM2;
 t(15;17) în LAM3,
 t(9;11) în LAM5

În LAL anomaliile numerice sunt mai frecvente: hiperploidie

(>47 de cromozomi), mai rar hipoploidie (<46 de cromozomi),
dar apar frecvent și anomaliile calitative (translocații, deleții,
inserții)
Există și un procent mare de cazuri de leucemii acute cu
cariotip normal
Leucemii acute-modificări bioumorale
Hiperuricemie
Hiper/hipocalcemie
Hiperfosfatemie
Creșterea VSH-ului
Creșterea lizozimului în proliferări monocitare
Creșterea LDH-ului
Hipocolesterolemie
Hipoalbuminemie
Creșterea metabolismului bazal
Studiul hemostazei
Studiul funcției renale
Întrebari
1. Care este urmarea faptului că
celulele blastice în leucemiile acute
iși pierd capacitatea de maturare?

2. Care este urmarea faptului că

celulele blastice in leucemiile acute
se divid necontrolat?

3. Planul de investigatii in leucemii

acute?

4. Ce reprezintă hiatusul leucemic?

5. Ce procent minim de blaști este

diagnostic în leucemiile acute la
nivelul măduvei osoase
hematogene?
Întrebari
6. Reacția mieloperoxidazelor și
reactia negru Sudan este pozitivă
în LAL?

7. Ce reacție este specifică pentru

monoblaști?

8. Ce reprezintă imunofenotiparea?

9. Ce modificări pot să apară la

studiul cariotipului în leucemii?

10. Există situații in care stiudiul

cariotipului este normal in
leucemiile acute?
 Răspunsuri
1. Celulele hematopoetice sunt blocate în stadiu de blaști, ne mai putând sa devină celule mature acestea nu
pot să își exercite funcțiile normale.
2. Celule leucemice se divid necontrolat și astfel consumă nutrienții destinați celorlalte linii celulare =>
pancitopenie (anemie, trombocitopenie, leucopenie).
3. Frotiu de sânge periferic, reacții citochimice, imunofenotipare, stiudiul cariotipului, studii de biologie
moleculară
4. Lipsa formelor de tranziție între celulele blastice și elementele mature.
5. 20%
6. Nu, în LAM
7. Reacția esterazelor
8. Imunofenotiparea permite identificarea antigenelor specific fiecărui tip de leucemie
9. Modificări numerice (hipo/hiperploidie), modificări calitative (deleții, inserții, translocații)
10. Da
Caz clinic nr 1
Pacient în vârstă de 25 de ani se prezintă
pentru:
• Infecții respiratorii superioare recurente
• Greață
• Marirea în volum a regiunii
submandibulare
Simptomatologie debutată de căteva luni

La examenul obiectiv:
• Adenopatie submandibulară
• Fără alte organomegalii palpabile
Caz clinic nr 1-hemoleucogramă; frotiu
de sânge periferic
Eritrocite 2,7 mil/mm3
Hb 9,9 g/dl
Ht 28%
VEM 106 fl
HEM 36,9 PG
CHEM 34,8 g/dl
Leucocite 7.900/mm3
◦ Neutrofile 4%
◦ Limfocite 16%
◦ Monocite 1%
◦ Eozinofile 0%
◦ Bazofile 0%
◦ Celule blastice 79%

Trombocite 50.000/mm3
Caz clinic nr 1-hemoleucogramă; frotiu
de sânge periferic
Anemie megaloblastică
Anemie ușoară
Număr de leucocite normal
Celule blastice 79% (nu ar fi trebuit să apară
pe hemoleucogramă în mod normal)
Este prezent hiatus leucemic – celule mature și
celule blastice, fără celule intremediare
(promielocite, mielocite samd)
Trombocitopenie
Macrocitoză, anizocitoză, policromazie
Celule blastice:
◦ Sunt de dimensiuni medii (diametru dublu față
de diamentrul hematiilor)
◦ Nucleul are formă neregulată, invaginații
prezente, cromatină fin dispusă, 1-2 nucleoli
◦ Citoplasmă bazofilă, corpi Auor prezenți
Trombocitele aspect normal
Caz clinic nr 1
Care sunt investigațiile indicate în continuare?
Caz clinic nr 1
1. Puncție medulară
2. Reacții citochimice
3. Imunofenotipare
4. Studiul cariotipului
5. Studii de biologie moleculară
Caz clinic nr 1-LAM
Puncție medulară
◦ Hipercelulară
◦ 94% blaști aceiași morfologie precum cei din frotiul de sânge

Reacții citochimice
◦ Reacția mieloperoxidazelor +
◦ Reacția negru Sudan +
◦ Reacția esterazelor –

Imunofenotiparea și studiile genetice nu au fost efectuate

Caz clinic nr 2
Pacient în varstă de 6 ani se prezintă pentru
infecții respiratorii superioare, cefalee
persistentă, dureri osoase și hematoame la
traumatisme ușoare, simptomatologie
debutată în urmă cu 3 săptămâni

La examenul obiectiv:
Adenopatii: submaxilare, axilare și cervicale
Hepatomegalie
Splenomegalie
Peteșii și hematoame la nivelul trunchiului și
membrelor
Caz clinic nr 2-hemoleucogramă; frotiu
de sânge periferic
Eritrocite 3,34 mil/mm3
Hb 9,0 g/dl
Ht 27%
VEM 82 fl
HEM 27,2 PG
CHEM 33,4g/dl
Leucocite 92.400/mm3
◦ Neutrofile 4%
◦ Limfocite 8%
◦ Monocite 1%
◦ Eozinofile 0%
◦ Bazofile 1%
◦ Celule blastice 86%

Trombocite 18.000/mm3
Caz clinic nr 2-hemoleucogramă; frotiu
de sânge periferic
Anemie normocromă, normocitară Eritrocitele
◦ Normocrome, normocitare
Anemie ușoară
Celule blastice
Leucocitoză severă (fenomene de leocostază0
◦ Sunt de dimensiuni medii (diametru dublu față
crește vâscozitatea sângelui)
de diamentrul hematiilor)
Celule blastice 86% (nu ar fi trebuit să apară ◦ Nucleul de dimensiuni mare, invaginații
pe hemoleucogramă in mod normal) prezente, cromatină fin dispusă, 1-2 nucleoli
◦ Citoplasmă bazofilă
Este prezent hiatus leucemic – celule mature și
celule blastice, fără celule intremediare Trombocitele
(promielocite, mielocite samd) ◦ aspect normal
Trombocitopenie severă
Caz clinic nr 2
Care sunt investigațiile indicate în continuare?
Caz clinic nr 2
1. Puncție medulară
2. Reacții citochimice
3. Imunofenotipare
4. Studiul cariotipului
5. Studii de biologie moleculară
Caz clinic nr 2
Puncție medulară
◦ Hipercelulară
◦ 90% blaști, aceiași morfologie precum cei din frotiul de sânge
Reacții citochimice
◦ Reacția mieloperoxidazelor -
◦ Reacția negru Sudan -
◦ Reacția PAS +
Imunofenotiparea
◦ TdT +
◦ Markeri specifici pentru limfocitul B +
◦ Markeri specifici pentru limfocitul T -
◦ Markeri specifici granulo-monocitari -
Studiul cariotipului
◦ 46, XY fără anomalii structurale și numerice
Caz clinic nr 2-diagnostic
Leucemie acută limfoblastică-B
FAB L1