BIOCHIMIE

1
UNIVERSITATEA DE TIINE AGRONOMICE I MEDICIN
VETERINAR BUCURETI


Conf. univ. dr. RODICA ANA PUN












BIOCHIMIE












BUCURETI
2011
RODICA ANA PUN

2



























BIOCHIMIE

3

INTRODUCERE

Biochimia este o tiin tnr ce a aprut iniial ca o ramur special
a chimiei care studiaz materia vie. Organismele vegetale, animalele i
microorganismele, dei sunt alctuite din substane nevii ce se supun
legilor fizice i chimice, posed nsuiri deosebite de cele ale materiei
nevii. Caracteristica esenial care condiioneaz viaa este schimbul
permanent de substane i energie ntre fiinele vii i mediul nconjurtor.
Ansamblul proceselor biochimice i bioenergetice prin care se realizeaz
acest schimb se numete metabolism. O alt caracteristic a organismelor
vii este gradul ridicat de complexitate i organizare n comparaie cu
organizarea structurat mult mai redus a substanelor nevii. Cea mai
mic unitate structural-funcional a materiei vii ce are manifestri
metabolice este celula. Celula la rndul ei posed structuri interne
complicate alctuite din molecule complexe.
Aceste caracteristici extraordinare ale organismelor vii au cristalizat
obiectul biochimiei ca tiin de sine stttoare. Astfel biochimia devine
tiina ce studiaz structura i proprietile substanelor componente ale
organismelor vii precum i funciile i reaciile biochimice ale
biocomponentelor respective, adic metabolismul lor.
Natura organismului viu a condus la dezvoltarea specializat a
biochimiei: biochimia vegetal, care studiaz substanele componente i
metabolismul organismelor vegetale i biochimia animal, care studiaz
componentele i metabolismul organismelor animale.
Abordarea sistematic a studiului biochimiei se va face n dou pri:
- partea I-a biochimia structural care se ocup cu studiul structurii
i proprietilor substanelor constitutive ale organismelor vii.
- partea II-a metabolismul care se ocup cu studiul proceselor de
biosintez i biodegradare ale substanelor constitutive ale organismelor
vii n raport cu mediul nconjurtor.
Cunoaterea compoziiei chimice a organismelor vegetale i a
formrii i depozitrii lor n mediul n care plantele se dezvolt va permite
n viitor specialitilor s imagineze cum interacioneaz moleculele nevii
din alctuirea organismelor vii pentru a genera i perpetua viaa.
RODICA ANA PUN

4











Partea I


BIOCHIMIA
STRUCTURAL

BIOCHIMIE

5
Capitolul 1

COMPOZIIA CHIMIC GENERAL
A ORGANISMULUI VEGETAL

CUVINTE CHEIE:
- macroelemente
- microelemente
- biomolecule anorganice
- biomolecule organice

OBIECTIVE:
- prezentarea bioelementelor
- formarea biomoleculelor

Pentru nelegerea i cunoaterea transformrilor biochimice ce se
petrec n organismele vegetale este foarte important cunoaterea
compoziiei lor chimice. Compoziia chimic a plantelor este
rezultatul unor procese n care elementele minerale joac un rol
principal. Elementele chimice se combin n anumite proporii, prin
diferite tipuri de legturi chimice genernd biomolecule. Organismele
vegetale, de la cele inferioare la cele superioare, prezint o compoziie
chimic unitar att n ceea ce privete compoziia elementar ct i n
ceea ce privete compoziia molecular.


1.1. BIOELEMENTE

n general, n compoziia materialului vegetal, intr n mod curent sau
accidental aproximativ 60 de elemente chimice din cele 110 nscrise n
sistemul periodic al elementelor. Dintre acestea un numr de 27 de
elemente chimice particip n mod curent la alctuirea celulei vegetale,
ele fiind considerate elemente biogenetice sau eseniale.
Dup cantitatea n care se gsesc i dup rolul ce l au n celula
vegetal, elementele eseniale se clasific astfel:
macroelemente (reprezint 99% din totalul bioelementelor) sau
bioelemente plastice: C, H, O, N, P, S, Cl, Ca, Mg, Na, K.
RODICA ANA PUN

6
microelemente (reprezint 1% din totalul elementelor) sau
oligoelemente: Fe, Cu, Zn, Mn, Mo, Al, B, I
Dintre macroelemente C, H, O, N, P reprezint 95% din greutatea
materialului vegetal uscat, fiind considerate a fi de importan primordial
n formarea moleculelor compuilor caracteristici materiei vii.
Microelementele dei sunt prezente ntr-un procent foarte mic, ele
sunt indispensabile desfurrii proceselor biochimice. Ele au un rol
bioactiv, lipsa lor conducnd la dereglri ale reaciilor biochimice.

1.2. BIOMOLECULE

Bioelementele, n celula vegetal, nu se afl n stare liber, ele
genereaz biomolecule ce intr n alctuirea substanelor compuse
sintetizate de plante pentru asigurarea creterii, dezvoltrii i
autoreproducerii.
Compuii prezeni n materia vie se ntlnesc ntr-o varietate
extraordinar, dar principalele clase de bioelemente sunt comune tuturor
organismelor, ndeplinind funcii identice.
Biomoleculele, funcie de natura lor, de structura lor i de rolul
ndeplinit n organism, sunt de dou tipuri:
biomolecule anorganice: apa, srurile minerale.
biomolecule organice: glucide, lipide, protide, acizi nucleici, enzime,
vitamine i fitohormoni

REZUMAT

Compoziia chimic a plantelor este rezultatul unor procese n care
elementele minerale joac un rol principal. Elementele chimice ce
particip n mod curent la alctuirea celulei vegetale (elemente
biogenetice, eseniale) dup cantitatea i rolul ce l au n celula vegetal,
sunt macroelemente i microelemente. n celula vegetal bioelementele
nu se afl n stare liber, ele genernd biomolecule a cror natur poate
fi anorganic (apa, srurile minerale) i organic (glucide, lipide,
protide, acizi nucleici, enzime, vitamine, fitohormoni).

NTREBRI

1.1. Cte elemente biogenetice sunt?
BIOCHIMIE

7
1.2. Care este deosebirea dintre macroelemente i microelemente?
1.3. Care sunt biomoleculele anorganice?
1.4. Numii biomoleculele organice.

BIBLIOGRAFIE

1.1. Ledbetter, M.C., Porter, K.R., Introduction to the Fine Structure of
Plant Cells Springer - Verlag, New York, 1970.
1.2. Frieden, E. The Chemical Elements of Life Sci. Am. 227, pag. 52-64
(1972).
1.3. Palade G.E., The Organization of Living Matter, The Scientific
Endeavor, Rockefeller Institute, pag.179-203 (1964).

RODICA ANA PUN

8
Capitolul 2

APA


CUVINTE CHEIE:
- ap liber
- ap legat
- umiditate
- substan uscat

OBIECTIVE
- apa, componenta primordial a organismelor vii

Apa este o component primordial a organismelor vii. Viaa nu este
posibil fr prezena apei. Ea intr n constituia tuturor celulelor i
texturilor reprezentnd mediul n care se petrec toate procesele fizice i
biochimice.
Apa uureaz absorbia substanelor anorganice din sol, fiind un
factor de legtur ntre plant i mediul nconjurtor.
Apa asigur transportul unor substane din organismele vegetale;
transport seva brut de la rdcin la frunze i seva elaborat de la frunze
la organele de depozitare.
Toate aceste funcii sunt posibile datorit proprietilor fizico-chimice
caracteristice apei:
apa este o substan cu caracter polar, apa se comport ca un dipol, ca
un mic magnet; structura dipolar a moleculei de ap i confer o mare
capacitate de solubilizare i hidratare, fiind un foarte bun solvent
pentru toate tipurile de molecule
apa disociaz furniznd ioni de H
+
(respectiv H
3
O
+
) i OH
-
necesari
meninerii echilibrului acido-bazic, activitii enzimatice
apa are cldur specific (cldura necesar pentru a ridica temperatura
unui gram cu 1) mare datorit creia temperatura plantelor nu
nregistreaz variaii mari cnd temperatura mediului extern variaz
ntr-un timp scurt, avnd astfel un rol termoreglator.
Apa din organismele vegetale, n cantitatea cea mai mare, se prezint
n stare lichid. Ea se gsete n compartimentul extracelular i
BIOCHIMIE

9
intracelular al organelor i esuturilor vegetale sub form de ap liber i
ap legat. n spaiul extracelular se gsete cantitatea majoritar de ap
liber (apa higroscopic, apa vacuolic). esutul vegetal pierde apa liber
prin nclzire la 50-60C.
Apa legat este rspndit n toat structurile subcelulare. Ea apare ca
ap absorbit la suprafaa particulelor coloidale, ca ap de hidratare a
ionilor din soluia protoplasmei, ca ap de cristalizare la trecerea unor
substane din soluia apoas sub form de cristale (cristalohidrai).
Acest tip de ap, fiind integrat n constituia diferitelor structuri
chimice, nu poate fi eliminat dect prin nclzirea materialului vegetal la
105C.
Cantitatea total de ap (ap liber + ap legat) din 100 g material
vegetal proaspt reprezint umiditatea. Umiditatea se determin
gravimetric prin cntrirea materialului vegetal nainte i dup uscare la
105C i se raporteaz la 100 g de material vegetal.
Materialul vegetal rmas dup nclzirea la 105C este substana
uscat, ce reprezint toate substanele organice i cele anorganice (mai
puin apa ce a fost eliminat prin nclzire).
n aceste condiii suma procentului de substan uscat i al umiditii
va fi:
umiditatea% (u%) + substana uscat% (su%) = 100
Cantitatea de ap din organismele vegetale exprimat prin umiditate
variaz funcie de specie, de organ, de starea fiziologic, de vrst, de
regiunea geografic. esuturile tinere conin o cantitate mai mare de ap
dect cele btrne; esuturile fiziologic active rein o cantitate mai mare
de ap dect esuturile de susinere sau cele de protecie.
n aceste condiii umiditatea poate varia ntre 7% - 95% (ricin 6,46%,
cereale boabe 12-15%, fructe proaspete 79-90%, castravei 95%).
Cantitatea de substan uscat depinde i ea de natura i vrsta
plantei, de organele fiecrei plante. Substana uscat reprezint n medie
circa 10% n rdcini, 15-20% n frunze i 85-93% n semine din
materialul vegetal proaspt recoltat. Prezena substanelor anorganice din
materia uscat se poate pune n eviden prin incinerarea acesteia la o
temperatur de aproximativ 500C.
n aceste condiii substanele organice din materialul uscat ard i dau
natere la CO
2
, H
2
O, N
2
, iar substanele anorganice formeaz cenua
brut. Dac se face calcinarea la temperaturi mai nalte (450-500C),
cenua rezultat reprezint n general coninutul n sruri minerale din
RODICA ANA PUN

10
materialul vegetal analizat.

REZUMAT

Viaa nu este posibil fr prezena apei, fiind mediul n care se
petrec toate proceseele fizice i biochimice. Cantitatea total de ap (ap
liber; ap legat) din 100 g material vegetal proaspt reprezint
umiditatea. Materialul vegetal rmas dup nclzirea la 105C este
substana uscat. n aceste condiii suma procentului de substan uscat
i al umiditii va fi:
substan uscat (su%) + umiditatea % (u%) = 100

NTREBRI

Calculai urmtoarele:
a) umiditatea unei probe vegetale dac procentul de substan uscat
determinat este 42,6%.
b) Variaia procentului de substan uscat tiind din datele din
literatur c umiditatea variaz ntre 7% - 95%.

BIBLIOGRAFIE

2.1. Dick, D.A.T., Cell Water, Butterworth, Washington, D.C., 1966.
2.2. Galben T., Enache Aurelia, Curs de chimie i biochimie Lito
I.A.N.B., 1986.

BIOCHIMIE

11
Capitolul 3

SRURI MINERALE


CUVINTE CHEIE:
- cationi
- anioni
- cenu

OBIECTIVE
- srurile minerale sunt prezentate ca i componente alctuite din
macroelemente i microelemente implicate n procesele metabolice.
n cenua materialului vegetal s-au identificat aproximativ 60 de
elemente chimice. Aceste elemente se gsesc sub form de ioni, fie sub
form de sruri ale acizilor anorganici, sruri minerale. Cantitatea de
cenu d informaii asupra cantitii de sruri minerale din materialul
analizat.
Srurile minerale, funcie de solubilitatea lor, se gsesc disociate n
soluie sub form de ioni (cationi i anioni) sau nedisociate sub forma
unor structuri insolubile sau parial solubile.
Raportul dintre anioni i cationi n celule i n cenu rmne aproape
constant, meninndu-se astfel un echilibru dinamic, indiferent de condiiile
exterioare.
Cationii cei mai frecvent ntlnii n plante sunt: K
+
, Ca
2+
, Mg
2+
,
Mn
2+
, Ca
2+
, Na
+
, Al
3+
.
Anionii cei mai frecvent ntlnii n plante sunt: H
2
PO
4
-
, HPO
4
2
-
,
PO
4
3-
, NO
3
-
, HCO
3
-
, CO
3
2-
,
Cl
-
, SO
4
2-
, SiO
4
4-
.

Srurile cu macroelemente cum sunt clorurile, azotaii, carbonaii i
fosfaii de sodiu, potasiu, calciu i magneziu sunt implicate n procesele
osmozei intracelulare, n meninerea echilibrului hidric al organismului
vegetal i intr efectiv n unele structuri celulare i moleculare.
Srurile cu microelemente particip la formarea moleculelor unor
biocomponente organice numite enzime, imprimndu-le acestora rolul de
catalizatori ai reaciilor biochimice.
Dintre organele plantelor, frunzele au n general coninutul cel mai
ridicat de substane minerale (un procent de 20% cenu din materialul
RODICA ANA PUN

12
uscat). Coninutul substanelor minerale din frunze crete odat cu
mbtrnirea plantei. Seminele diferitelor plante au un coninut mai
sczut de substane minerale, cenua reprezentnd n medie 1% - 5% din
materialul uscat. Cel mai sczut coninut n substane minerale se
nregistreaz n prile lemnoase ale plantelor (0,2% - 1,2% cenu).

REZUMAT

Srurile minerale, funcie de solubilitatea lor, se gsesc disociate n
soluie sub form de ioni (cationi i anioni) sau nedisociate sub forma
unor structuri insolubile sau parial solubile. n cenua materialului
vegetal s-au identificat aproximativ 60 elemente chimice ce se gsesc sub
form de sruri minerale.

NTREBRI

3.1. Care sunt cationii cei mai frecvent ntlnii n plante?
3.2. Scriei formulele principalilor anioni ntlnii n plante i denumii-i.

BIBLIOGRAFIE

3.1. Neamu Gavril, Biochimie vegetal, Editura Ceres, 1981.
BIOCHIMIE

13
Capitolul 4

GLUCIDE


CUVINTE CHEIE:
- oze
- legtur glicozilic
- diglucide
- poliglucide

OBIECTIVE
- prezentarea glucidelor simple (oze) sub aspectul structurilor i al
proprietilor lor
- formarea oligoglucidelor
- descrierea unor poliglucide din regnul vegetal


Glucidele reprezint o clas de biocomponente rspndit n tot
regnul vegetal, ele formnd cea mai mare parte a substanei organice. n
organismele vegetale ele ndeplinesc un rol structural i un rol energetic.
Primul rol este dat de faptul c glucidele reprezint principalele substane
de susinere pentru plante precum i de faptul c ele duc la formarea altor
grupe de biocomponente. Faptul c glucidele reprezint combustibilul
necesar n oxidrile biologice, le confer rolul de furnizor de energie
necesar proceselor biochimice.
Glucidele sunt compui organici (formai din carbon, hidrogen i
oxigen) cu funciuni mixte i anume polihidroxialdehide,
polihidroxicetone. Majoritatea glucidelor corespund formulei brute
C
n
(H
2
O)
n
n care raportul dintre hidrogen i oxigen este ca cel din
formula apei, motiv pentru care iniial aceste substane au fost impropriu
numite hidrai de carbon. Nomenclatura actual este aceea de glucide
(de la grecescul glikis=dulce).
Clasificarea glucidelor se face avnd drept criterii comportarea la
reacia de hidroliz i structura lor (numrul atomilor de carbon din
molecul, tipul gruprii carbonilice, numrul de uniti structurale din
molecule).
RODICA ANA PUN

14
Prezentarea sistematic a clasificrii glucidelor este urmtoarea:



4.1. GLUCIDE SIMPLE OZE

Ozele sunt glucide simple deoarece ele sunt substane
monomoleculare ale cror molecule nu sunt scindate la reacia de
hidroliz. Ele nehidroliznd mai poart numele i de monoglucide.


4.1.1. Structura Ozelor

Molecula ozelor conine o grupare carbonilic i dou
sau mai multe grupri hidroxilice (-OH). n funcie de natura gruprii
carbonil, ozele pot fi hidroxialdehide- aldoze i hidroxicetone-cetoze.
Nomenclatura general a glucidelor simple se formeaz adugnd
sufixul oz la rdcina cuvintelor din limba greac di, tri, tetra, penta
etc. ce reprezint numrul atomilor de carbon din molecul.

Formulele aciclice i denumirile ozelor cele mai prezente n regnul
vegetal sunt urmtoarele:

BIOCHIMIE

15
a) TRIOZE

Aldehida gliceric Dihidroxiacetona
(aldotrioz) (cetotrioz)



b) TETROZE

Eritroza Eritruloza



c) PENTOZE

Riboz Deoxiriboz Ribuloza
RODICA ANA PUN

16
d) HEXOZE

Glucoz Fructoz


Manoz Galactoz

Dintre ozele prezentate pentozele i hexozele sunt cele mai
rspndite. Numrul mare de oze existente n materia vie este generat de
proprietatea ozelor de a forma mai multe tipuri de izomeri. Izomerii sunt
substane care au aceeai compoziie (acelai fel i acelai numr de
atomi), dar structur molecular diferit, ceea ce le imprim unele
proprieti fizice i chimice diferite. Observnd formulele aciclice de oze
prezentate, distingem urmtoarele tipuri de izomeri:
BIOCHIMIE

17
izomeri datorit gruprii carbonil (izomerie de compensaie
funcional) cum sunt aldozele i cetozele ce se deosebesc ntre ele doar
prin gruparea carbonil; astfel de izomeri sunt glucoza cu fructoza.
izomeri datorit poziiei gruprilor hidroxil secundare din catena
molecular (stereoizomeria), numrul acestor izomeri fiind cu att mai
mare cu ct numrul atomilor de carbon asimetrici din structura moleculei
este mai mare; numrul stereoizomerilor posibili este dat de formula Z=2
n
n care n este numrul atomilor de carbon asimetrici din molecul; astfel
pentozele pot avea 8 stereoizomeri iar hexozele 16. Dup poziia
hidroxilului de la C
n-1
rezult seriile sterice D (cnd e poziionat la
dreapta) i L (la stnga).
izomeri datorit activitii optice determinat de existena atomilor
de carbon asimetrici n molecul, izomeri ce se caracterizeaz prin faptul
c rotesc diferit (spre dreapta dextrogir sau spre stnga levogir) planul
luminii polarizate. Asemenea perechi de izomeri dextrogiri i levogiri se
numesc enantiomeri.

Ozele cu structur molecular aciclic sunt puin reprezentate n
natur. Ozele cu un numr de atomi de carbon mai mare de patru prezint
predominant forme structurale ciclice. Ciclizarea se produce prin procesul
de semiacetalizare, adic gruparea carbonilic formeaz cu una din
gruprile hidroxilice ale aceleiai molecule un semiacetal ciclic prin
reacie de adiie intramolecular. Apar astfel fie heterociclii formai din
4 atomi de carbon i unul de oxigen (ciclu furanozic) fie din 5 atomi de
carbon i unul de oxigen (ciclu piranozic). Prin semiacetalizare gruparea
carbonil este mascat, ea genernd o nou grupare hidroxil, numit hidroxil
semiacetalic, cu proprieti speciale fa de celelalte grupri hidroxilice.
n aceste condiii pentru redarea structurii spaiale a ozelor apar
formulele perspectivice. Se reprezint planul ciclurilor furanozice i
piranozice i substituenii care apar n stnga catenei carbonice se scriu
deasupra planului, iar cei ce apar n dreapta sub planul ciclului. Hidroxilul
semiacetilic se poate poziiona i el deasupra sau sub planul heterociclic.
Apar astfel izomerii datorai hidroxilului semiacetalic numii anomeri:
anomerul cnd hidroxilul semiacetalic este poziionat sub planul
heterociclic i anomerul cnd hidroxilul semiacetalic este poziionat
deasupra planului heterociclic.
Formulele ciclice perspectivice, marcnd hidroxilul semiacetalic,
posibile pentru glucoz i fructoz sunt urmtoarele:
RODICA ANA PUN

18

BIOCHIMIE

19
4.1.2. Proprietile ozelor

Proprietile fizice ale ozelor sunt:
stare de agregare solid, cristalin;
solubilitate n ap i insolvabilitate n solveni organici;
activitate optic a soluiilor de glucide (glucoza este dextrogir, iar
fructoza este levogir);
topirea i caramelizare la nclzire.
Proprietile chimice ale ozelor sunt determinate de structura lor
respectiv de gruprile funcionale din moleculele lor. Ozele vor prezenta
reacii chimice determinate de gruparea carbonil, de gruparea hidroxil
precum i datorit prezenei ambelor grupri funcionale n aceeai molecul.

a) Proprieti determinate de gruparea carbonil
Ozele, datorit prezenei n molecul a gruprii carbonil libere sau
mascate sub form de hidroxili semiacetalici manifest un caracter
reductor marcat, produii de oxidare fiind acizi, a cror natur depinde
de natura oxidantului i a mediului de reacie. Astfel:
oxidarea blnd se realizeaz cu oxidani slabi (oxidul de argint,
reactivul Fehling, apa de brom) la nivelul gruprii carbonilice care se
transform n grupare carboxilic rezultnd acizi aldonici;

glucoz acid gluconic
RODICA ANA PUN

20
oxidarea energic se realizeaz cu oxidani puternici (acidul azotic
concentrat) la nivelul gruprii carbonil i a gruprii hidroxil terminal
rezultnd acizii dicarboxilici, acizi zaharici;

glucoz acid glucozaharic

oxidarea parial se realizeaz prin protejarea gruprii carbonil (prin
blocarea ei prin condensare sau esterificare a hidroxilului semiacetalic)
i oxidarea gruprii hidroxilice primare, obinndu-se acizi
monocarboxilici numii acizi uronici.

glucoz acid glucuronic


b) Proprieti determinate de gruprile hidroxilice

Reaciile de esterificare sunt caracteristice gruprii funcionale
hidroxil. Toate gruprile hidroxilice ale ozei se pot esterifica cu acizi
organici i anorganici. n celula vie cel mai des ozele sunt esterificate cu
acid fosforic. Din punct de vedere biochimic esterii fosforici sunt foarte
importani, ei reprezentnd forma activat energetic n care ozele particip n
diferite procese metabolice. Foarte importani sunt urmtorii esteri fosforici:
BIOCHIMIE

21

Glucozo 1 fosfat
(Ester Cori)
Glucozo 6 fosfat
(Ester Robinson)
Fructozo 1,6 difosfat
(Ester Harden-Young)

Reaciile de esterificare se pot petrece la nivelul gruprii hidroxil
semiacetalic sau la nivelul gruprilor hidroxilice alcoolice. Hidroxilul
semiacetalic prezint o reactivitate mrit n comparaie cu celelalte
grupri hidroxil din molecule. Atunci cnd ele condenseaz cu alte
grupri hidroxilice se formeaz o legtur eteric ce poart numele de
legtur glicozidic, produii de reacie numindu-se glicozizi. Gruparea
hidroxil poate proveni dintr-un alcool, fenol sau poate fi chiar un hidroxil
alcoolic al altei molecule de oz, n acest caz prin legturi glicozidice,
ozele genereaz structurile moleculare ale oligo i poliglucidelor.


glucoz glucoz oligoglucid legtur glicozidic

4.2. OLIGOGLUCIDE

Oligoglucidele se formeaz prin condensarea a dou pn la opt
molecule de oz prin legturi glicozidice. Numrul moleculelor de oz ce
RODICA ANA PUN

22
se condenseaz fiind mic, denumirea lor deriv din grecescul oligos =
puin. n funcie de numrul moleculelor de oze ce particip la formarea
mole- culei de oligoglucid, ele sunt:
diglucide;
triglucide;
oligoglucide (pn la 8 molecule de oze).

Dintre acestea, diglucidele, sunt cele mai importante i mai rspndite
n regnul vegetal.

Diglucidele se clasific dup caracterul lor chimic n reductoare i
nereductoare.
a) Diglucidele reductoare au legtura glicozidic stabilit ntre
hidroxilul semiacetalic de la C-1 la aldoze sau C-2 la cetoze i hidroxilii
nesemiacetalici de la cealalt molecul de oz. Se stabilesc astfel legturi
monoglicozidice de tip sau funcie de anomerul respectiv. n
moleculele rezultate prin condensare exist un hidroxil semiacetalic liber
ce va determina proprieti reductoare ale diglucidului rezultat (reduc
oxidul de argint, reduc reactivul Fehling)
Maltoza este un diglucid reductor format din dou molecule de
-glucoz unite prin legtura 1-4 glicozidic. Izomaltoza se formeaz tot
din dou molecule de -glucoz dar unite prin legtur 1-6 glicozidic.


Prin hidroliza fiecreia din aceste dou molecule se vor obine cte
2 molecule de -glucoz (prin ruperea legturilor glicozidice). Aceast
hidroliz poate fi i enzimatic. Maltoza se gsete n seminele cerealelor
n curs de germinare, n orzul ncolit (se mai numete de aceea i zahr
de mal).
Celobioza este tot un diglucid reductor format prin condensarea a
dou molecule de -glucopiranoz prin legturi 1-4 glicozidice. Ea nu
BIOCHIMIE

23
se gsete liber n natur ci numai ca unitate structural constitutiv a
celulozei:


Prin hidroliz acid sau enzimatic molecula de celobioz genereaz
dou molecule de glucoz.
b) Diglucide nereductoare au legtura diglicozidic stabilit prin
eliminarea moleculelor de ap ntre hidroxilii semiacetalici ai ozelor
constituente. Nemaiavnd nici un hidroxil semiacetalic liber, ele nu vor
prezenta caracter reductor.
Zaharoza este un diglucid format prin condensarea unei molecule de
-glucoz cu o molecul de -fructoz prin legtura 1-2 , glicozidic.


Zaharoza
Zaharoza este cel mai rspndit glucid natural. Se gsete n trestia de
zahr (~ 20%) n sfecla de zahr (~ 12%), n fructe.
n mediu de acid clorhidric sau sub aciunea enzimei zaharaz,
zaharoza se descompune hidrolitic genernd un amestec echimolecular de
glucoz i fructoz (numit zahr invertit datorit activitii optice
modificate fa de soluia iniial de zaharoz).
RODICA ANA PUN

24

4.3. POLIGLUCIDE

Poliglucidele se formeaz prin condensarea unui numr foarte mare
de oze unite prin legturi glicozidice. Ele sunt deci substane
macromoleculare.
Poliglucidele au n viaa plantelor fie rolul de substane de rezerv
(amidonul) fie rolul de substane de meninere (celuloza).
n mediu acid sau sub aciunea unor enzime specifice are loc hidroliza
poliglucidelor producndu-se scindarea treptat a macromoleculei n
fragmente moleculare cu un numr din ce n ce mai mic de oze
condensate ca n final prin hidroliz total s fie generate molecule de oze
constituente. Principalele poliglucide din regnul vegetal sunt:
a) Amidonul este cel mai important poliglucid de rezerv din
organismele vegetale. Amidonul este un poliglucid format prin
policondensarea unui numr foarte mare (de ordinul miilor) a moleculelor
de glucopiranoz. n organele de rezerv amidonul se gsete sub form
de granule. Cercetrile experimentale au stabilit c granula de amidon
este format din dou componente: amiloz i amilopectina:
Amiloza este format prin legturi 1-4 glicozidice, avnd o
structur liniar. Gradul de policondensare al amilozei este de
200 1000 uniti. Unitatea structural repetitiv a amilozei este considerat
a fi maltoza.
Amilopectina este format prin legturi 1-4 glicozidice dar i prin
legturi 1-6 glicozidice, ceea ce i imprim o structur ramificat.
Amilopectina este componenta principal a granulei de amidon. Unitatea
structural repetitiv a amilopectinei sunt maltoza i izomaltoza.
Structura unui fragment din macromolecule de amidon se prezint
astfel:

BIOCHIMIE

25
Proprietile fizice i chimice ale amidonului sunt determinate de
structura lui molecular. Amidonul este solubil n ap cald, formnd
soluii coloidale.
Prin hidroliz acid sau enzimatic macromoleculele de amidon se
scindeaz n compui mai simpli numii dextrine. Masa lor molecular
este din ce n ce mai mic pe msur ce reacia de hidroliz are loc
obinndu-se ca produi finali maltoz i respectiv -glucoza. Dintre
principalele dextrine obinute n timp prin hidroliz sunt amilodextrinele,
eritrodextrinele, flavodextrinele i acrodextrinele.
Prin procesul de fotosintez plantele sintetizeaz amidonul n frunze
ca amidon primar. Dup hidroliza lui enzimatic la -glucoz este astfel
transportat n organele de rezerv ale plantei unde este resintetizat sub
form de amidon secundar. Astfel el se acumuleaz ca substan de
rezerv n diverse organe cum ar fi tuberculii de cartofi (~ 18%), n
endospermul seminelor de cereale (orez 75%, gru 64%, orz 54%).
n organismele vegetale amidonul este o substan de rezerv cu rol
energetic, deoarece prin degradarea (scindarea) macromoleculei lui se
elibereaz energia chimic a legturilor dintre unitile structurale,
energie ce este util plantei n diverse procese metabolice.
b) Celuloza este un poliglucid ce se gsete n toate organismele
vegetale, fiind specific regnului vegetal. Rolul acestui poliglucid este
preponderent plastic, el contribuind la formarea membranelor celulare i
ale esuturilor de susinere ale plantelor.
Celuloza este format prin policondensarea unui numr foarte mare
de molecule de glucopiranoz prin legturi 1-4 glicozidice. Unitatea
structural repetitiv este considerat a fi celobioza.
Structura unui fragment de celuloz se prezint astfel:


celobioz

Prin hidroliz enzimatic se scindeaz legturile glicozidice cu
eliberare de celobioz.
RODICA ANA PUN

26
Macromolecule de celuloz au aspect filiform, liniar datorit
legturilor -glicozidice care au un caracter mai rigid. Macromoleculele
de celuloz filiforme se asociaz ntre ele prin intermediul legturilor de
hidrogen formnd fibrile i fibre de celuloz. Fibrele de celuloz trec
unele peste altele n poziii diferite, dnd peretelui celulei o rezisten
mare, imprimnd rigiditate tulpinii, rdcinii. Lemnul precum i tulpinile
plantelor textile, trestia, sunt materiile prime pentru obinerea celulozei.
Celuloza i derivaii si (nitroceluloza, monoacetatul de celuloz) sunt
utilizate la obinerea materialelor textile, a hrtiei.

REZUMAT

Glucidele sunt compui organici (formai din carbon, hidrogen i
oxigen). Clasificarea glucidelor se face avnd drept criterii comportarea
la reacia de hidroliz i structura lor (deci, numrul de uniti
structurale din molecul, numrul atomilor de carbon din molecul, tipul
gruprii carbonilice). Ozele sunt glucide simple monomoleculare, cele
mai rspndite n regnul vegetal fiind pentozele (riboza, deoxiriboza) i
hexozele (glucoza, fructoza). Prin legturi glicozilice se formeaz
oligoglucide i poliglucide. Dintre oligoglucide, diglucidele sunt cele mai
importante i mai rspndite n plante (maltoza, celobioza, zaharoza).
Poliglucidele se formeaz prin condensarea unui numr foarte mare de
oze, fiind substane macromoleculare (amidon, celuloz). n organismele
vegetale glucidele ndeplinesc un rol structural i un rol energetic.

NTREBRI

4.1. Care este semnificaia termenului de aldoz i cetoz?
4.2. Scriei formula glucopiranozei.
4.3. Cum putei diferenia o soluie de maltoz de o soluie de zaharoz?
4.4. Care sunt produii hidrolizei acide sau enzimatice a amidonului?

BIBLIOGRAFIE

4.1. Davidson E.A., Carbohydrate Chemistry Holt, New-York, 1967.
4.2. Lehninher A.I., Biochimie, EdituraTehnic, 1987.
4.3. Neamu Gavril, Biochimie alimentar, Editura Ceres, 1997.
BIOCHIMIE

27
Capitolul 5

LIPIDE


CUVINTE CHEIE:
- acizi grai
- glicerol
- gliceride
- acid fosfatidic
- lecitine
- cefaline

OBIECTIVE
- prezentarea principalelor formule ale acizilor grai ce intr n
constituia lipidelor
- studiul alcoolilor ce intr n constituia lipidelor
- descrierea mai aprofundat a gliceridelor din punct de vedere al
structurilor i al proprietilor lor
- descrierea unor glicerofosfolipide

Lipidele sunt o clas de biocomponente organice a cror caracteristic
general este insolubilitatea n ap i solubilitatea n solveni nepolari
(eter, cloroform, benzen). Denumirea acestei clase (stabilit n 1967)
provine de la grecescul lipos = gras.
Pentru majoritatea organismelor vii lipidele ndeplinesc un rol
preponderent energetic, 1 g de lipide eliminnd prin oxidare 9,5 Kcal.
ntr-o msur mai mic lipidele ndeplinesc i un rol plastic intrnd n
constituia structurilor subcelulare.
n timp, s-au fcut diverse clasificri ale lipidelor dup diferite
criterii.
Dup A. Leninger clasificarea cea mai satisfctoare este cea care ia
drept criteriu structura catenei lor principalele, respectiv prezena acizilor
grai n molecul i deci capacitatea de saponificare prin hidroliz alcalin.
Prezentarea sistematic a clasificrii lipidelor este urmtoarea:
RODICA ANA PUN

28

Lipidele simple se afl n celule i esuturi n cantiti mai mici dect
lipidele complexe. n studiul lipidelor complexe trebuie nceput cu
descrierea structurii i proprietii acizilor grai, componentele specifice
acestei ntregi clase de lipide.

5.1. ACIZI GRAI

Acizii grai sunt acizi monocarboxilici, cu numr mare de atomi de
carbon n molecule. Catena carbonic are n majoritatea cazurilor un
numr par de atomi de carbon cuprins ntre 12 22 atomi de carbon.
Aceast caten hidrocarbonic poate fi liniar saturat sau nesaturat.
Acizii grai saturai cu peste 10 atomi de carbon n molecul sunt solizi.
Acizii grai saturai cel mai frecvent ntlnii n constituia lipidelor
vegetale sunt:
acidul lauric: H
3
C(CH
2
)
10
COOH
acidul miristic: H
3
C(CH
2
)
12
COOH
acidul palmitic: H
3
C(CH
2
)
14
COOH
acidul stearic: H
3
C(CH
2
)
16
COOH
acidul arahidic: H
3
C(CH
2
)
18
COOH

Acizii grai nesaturai pot avea una sau mai multe duble legturi; la
majoritatea lor una dintre dublele legturi se afl ntre atomii de carbon
9-10, celelalte fiind separate ntre ele printr-o grupare metilen.
Acizii grai nesaturai cel mai frecvent ntlnii n lipidele vegetale
sunt:
acidul oleic: H
3
C(CH
2
)
7
CH=CH(CH
2
)
7
COOH
acidul linoleic: H
3
C(CH
2
)
4
CH=CHCH
2
CH=CH(CH
2
)
7
COOH
acidul linolenic:
H
3
CCH
2
CH=CHCH
2
CH=CHCH
2
CH=CH(CH2)
7
COOH
BIOCHIMIE

29
acidul arahidonic:
H
3
C(CH
2
)
4
CH=CHCH
2
CH=CHCH
2
CH=CHCH
2
CH=CH(CH
2
)
3
COOH

Prezena dublelor legturi n molecul micoreaz punctele de
fierbere i de topire ale acizilor grai nesaturai. Ca urmare acidul oleic,
linoleic, linolenic, sunt lichizi, comparativ cu acidul stearic cu acelai
numr de atomi de carbon care este solid. Prezena dublelor legturi n
molecula acizilor grai determin reacii de adiie, de oxidare i de
autooxidare a dublelor legturi.
Prin adiia hidrogenului, catalitic, acizii grai nesaturai, lichizi, se
transform n acizi grai saturai solizi:
2H
H
3
C(CH
2
)
7
CH=CH(CH
2
)
7
COOH H
3
C(CH
2
)
16
COOH
Acid oleic Acid stearic

Aceast reacie este utilizat pentru transformarea grsimilor naturale
lichide n margarin.
Acizii grai cu mai multe duble legturi (dou i trei duble legturi)
au un rol metabolic important. Ei se numesc acizi grai eseniali i sunt
sintetizai numai de ctre plante, animalele neputnd s-i biosintetizeze.
Ei fiind indispensabili n alimentaia mamiferelor, mai sunt numii i
vitamine F, i sunt procurai de ctre acestea din lumea vegetal.
Proprietile lipidelor depind n mare parte de tipul, lungimea i
configuraia catenei hidrocarbonate, de numrul dublelor legturi din
molecula acizilor grai constitueni.
n afar de acizii grai i celelalte componente ale moleculelor
lipidelor complexe influeneaz tipul i proprietile lipidelor complexe.
Foarte multe dintre aceste lipide sunt esteri naturali ai acizilor grai, fiind
deci necesar cunoaterea i a componentei lor alcoolice.

5.2. ALCOOLI DIN CONSTITUIA LIPIDELOR

Alcoolii care intr n constituia lipidelor sunt n numr destul de mic.
Ei sunt monohidroxilici, polihidroxilici sau aminoalcooli. Alcoolii
monohidroxilici sunt reprezentai cel mai des de alcooli superiori.
Cei mai importani alcooli superiori sunt:
alcoolul stearilic H
3
C(CH
2
)
16
CH
2
OH
alcoolul cetilic H
3
C(CH
2
)
14
CH
2
OH
alcoolul cerilic H
3
C(CH
2
)
24
CH
2
OH
RODICA ANA PUN

30
Toi aceti alcooli de gsesc n ceruri.
Alcoolii polihidroxilici sunt reprezentai prin propantriol sau glicerol
cu formula:
CH
2
OH
|
CH OH
|
CH
2
OH

El formeaz prin esterificarea gliceride.

Aminoalcoolii care contribuie la formarea unor lipide complexe sunt:
Colamina HOCH
2
CH
2
NH
2

(se gsete n cefaline)
CH
3

Colina HOCH
2
CH
2
N
+


CH
3

(se gsete n lecitine) CH
3


Fitosfingozina
H
3
C(CH
2
)
13
CHCHCHCH
2
OH
| | |
OH OH NH
2


5.3. CERIDE

Ceridele sunt esteri naturali ai acizilor grai cu alcooli
monohidroxilici superiori. Cei mai frecveni acizi grai din ceride sunt
acidul palmitic i stearic, iar alcoolii cei mai frecveni sunt cetilic i
cerilic.
Reacia general de esterificare, n formarea unui cerid este:

Acid gras Alcool superior Cerid

Ceridele se gsesc n regnul vegetal sub form de cutin la suprafaa
fructelor, frunzelor fiind un strat protector mpotriva evaporrii apei, a
BIOCHIMIE

31
cldurii. Ceridele se gsesc n cantitate mai mare n plantele din zona
tropical dar i n fibrele de in i cnep, pe frunzele de varz, de tutun, de
trandafir.

5.4. GLICERIDE

Gliceridele sau acilglicerolii sunt esteri naturali ai acizilor grai cu
glicerolul.

5.4.1. Structura gliceridelor
Esterificarea gruprilor hidroxil ale glicerolului poate fi parial sau
total:

Din cauza posibilitilor multiple de combinare a diferiilor acizi grai
(cu radicali R
1
, R
2
, R
3
, diferii sau identici) numrul trigliceridelor
posibile este mare. Nomenclatura gliceridelor pleac de la denumirea
acizilor grai ce particip la reacia de esterificare.
RODICA ANA PUN

32
Exemplu:

CH
2
OCO(CH
2
)
14
CH
3

|
CHOCO(CH
2
)
16
CH
3

|
CH
2
OCO(CH
2
)
7
CH=CH(CH
2
)
7
CH
3

Palmito-stearo-olein

5.4.2. Proprietile gliceridelor

Proprietile fizice:
n structura trigliceridelor de natur vegetal predomin acizii grai
nesaturai, fapt care face ca aceste gliceride s fie lichide, uleiuri. n
regnul animal gliceridele sunt solide, numindu-se grsimi.
Din cauza heterogenitii acizilor grai gliceridele nu au puncte fixe de
topire ci un interval de temperatur de topire.
Gliceridele sunt solubile n solveni organici, solubilitatea lor scznd
odat cu creterea masei moleculare a acizilor grai.

Proprietile chimice
Gliceridele fiind din punct de vedere chimic esteri, vor prezenta unele
proprieti generale ale esterilor i unele specifice determinate de acizii
grai din compoziie.
a) Hidroliza gliceridelor poate fi acid, catalizat de ionii H
+
sau
enzimatic sub aciunea biocatalitic a lipazelor. Astfel trigliceridele se
transform n mod treptat n digliceride, monogliceride i n final n
glicerol i acizi grai.

CH
2
OCOR
1
CH
2
OH R
1
COOH
| |
CH OCOR
2
3H
2
O CHOH + R
2
COOH
| |
CH
2
OCOR
3
CH
2
OH R
3
COOH
triglicerid

b) Saponificarea gliceridelor este o reacie de hidroliz n mediu
alcalin care genereaz sruri ale acizilor grai numite spunuri.

BIOCHIMIE

33
CH
2
OCOR
1
CH
2
OH R
1
COOK
| |
CH OCOR
2
+ 3 KOH CHOH + R
2
COOK
| |
CH
2
OCOR
3
CH
2
OH R
3
COOK

triglicerid spunuri

Cantitatea n miligrame de KOH necesar pentru saponificarea unui
gram de glicerid se numete indice de saponificare. Valoarea acestui
indice permite caracterizarea chimic a gliceridelor.

c) Halogenarea gliceridelor este reacia de adiie a halogenilor, n
special a iodului molecular, la dublele legturi din catenele nesaturate ale
acizilor grai cu formarea unor derivai halogenai. Cantitatea n grame de
iod care se adiioneaz de ctre 100 grame de glicerol se numete indice de
iod. Valoarea acestui indice exprim gradul de nesaturare al unui glicerid.

d) Hidrogenarea gliceridelor este reacia de adiie a hidrogenului
molecular n prezen de catalizatori (Ni, Pt) la dublele legturi din
catenele acizilor grai nesaturai. Prin hidrogenare se formeaz gliceride
saturate cu acelai numr de atomi de carbon.


5.5. GLICEROFOSFOLIPIDE

Compusul de baz al acestei clase de lipide este esterul fosforic al
glicerolului:
CH
2
OH
|
CHOH OH
|
CH
2
O POH

O
RODICA ANA PUN

34
n fosfoglicerolipide, una dintre gruprile hidroxil primare ale
glicerolului este esterificat cu acid fosforic, celelalte dou grupri hidroxil
sunt esterificate cu acizi grai. Se obine astfel structura unui acid fosfatidic.

Acizii fosfatidici sunt cele mai simple glicerofosfolipide din regnul
vegetal. Ei au fost identificai n numeroase plante cum sunt: varza crea,
embrionii de gru, arborele de cauciuc. Prin esterificarea restului fosforic
cu un aminoalcool se formeaz funcie de natura aminoalcoolului alte
glicerofosfolipide. Astfel se formeaz:
a) lecitine prin esterificare cu colin

b) cefaline prin esterificare cu colamin


Lecitinele i cefalinele se gsesc att n regnul vegetal ct i n cel
animal. Lecitinele se gsesc mai cu seam n embrionii seminelor de
leguminoase i de cereale. Cefalinele s-au identificat n germenii de gru,
semine de floarea-soarelui, soia, in.
Glicerofosfolipidele sunt lipide de constituie intrnd n constituirea
peretelui celulei. Rolul lor principal este asigurarea permeabilitii
BIOCHIMIE

35
membranelor celulare, deci transportul diferitelor biomolecule n celule
vegetale.
n ncheierea studiului fcut n acest capitol lipidelor, trebuie
menionat faptul c ele sunt biomolecule ce reprezint o clas distinct,
dar uneori ele se asociaz prin legturi chimice slabe cu compui din alte
clase de biomolecule, formnd molecule hibride. Astfel prin asociere cu
glucide se formeaz glicolipidele prin asociere cu proteinele se formeaz
lipoproteinele, compui cu funcii biochimice distinctive fa de
componente.

REZUMAT

Lipidele sunt o clas de biocomponente organice a cror
caracteristic general este insolubilitatea n ap i solubilitatea n
solveni nepolari (eter, cloroform, benzen). Lipidele simple nu conin
acizi grai n molecul, sunt nesaponificabile. Lipidele complexe care se
caracterizeaz prin prezena n structura lor a acizilor grai sunt
saponificabile. Ele cuprind cerurile, gliceridele i glicerofosfolipidele.
Cele mai rspndite lipide sunt gliceridele, care sunt esteri naturali ai
glicerolului cu acizii grai. Lipidele au cteva funcii biologice
importante, servind drept componente structurale ale membranelor i
preponderent drept substane de depozitare a combustibilului metabolic
(preponderent rol energetic).

NTREBRI

5.1. Scriei ecuaia esterificrii complete a glicerolului cu acidul oleic;
denumii gliceridul format.
5.2. Numii produii obinui prin saponificarea palmito-stearo-oleinei.
5.3. Ce produi sunt obinui prin hidroliza complet a urmtorilor
compui: acid fosfatidic, lecitin, cefalin?

BIBLIOGRAFIE

5.1. Gurr, M.I. James, A.T., Lipid Biochemistry, An Introduction, Cornell
University Press, N.Y. 1971.
5.2. Mortimer Charles E., Chemistry, Wadsworth Publishing Company,
Bemont, SUA, 1983.
5.3. Leslie, Neal A., Chemistry and Biochemistry A Comprehensive
Introduc- tion, Mc Graw-Hill, SUA, 1971.
RODICA ANA PUN

36
Capitolul 6

PROTIDE



CUVINTE CHEIE:
- aminoacizi
- legtur peptidic
- peptide
- proteine
- cromoproteine

OBIECTIVE
- studiul aminoacizilor trecnd n revist clasificarea lor i
proprietile lor
- formarea peptidelor i proteinelor
- descrierea structurii proteinelor, a proprietilor lor fizico-chimice,
precum i al tipurilor de proteine
- determinarea practic a proteinei brute
- studiul principalelor clase de heteroproteide: metaloproteidele,
lipoproteidele, cromoproteidele i nucleoproteidele.

Protidele sunt cele mai importante componente structurale i
funcionale ale organismelor vii. Termenul de protide provine de la
cuvntul grecesc protos = primul, denumire care exprim importana
primordial, fundamental a acestei clase de biocomponente n lumea vie.
Protidele reprezint suportul material al vieii, necunoscndu-se fenomene
de via fr protide.
Protidele sunt biocomponente care au n organism un rol structural i
funcional. Protidele reprezint componenta principal a nucleelor
celulare, a protoplasmei, caracterizndu-se printr-o complexitate mare a
structurii moleculare ceea ce conduce la o specificitate de specie i esut.
Protidele ndeplinesc funciile vitale cele mai importante, viaa aprnd la
un anumit nivel de organizare a substanelor protidice, cnd apar
fenomenele de metabolism ce duc la cretere i autoregenerare.
n compoziia chimic a tuturor protidelor intr C, H, O i N, iar n unele
protide se gsesc n plus elemente ca S, Fe, Mg, Cu, Zn. Azotul este
BIOCHIMIE

37
elementul principal pentru protide, el gsindu-se ntr-un procent mediu de
16%.
Din punct de vedere chimic, protidele sunt substane organice care
prin hidroliz total pun n libertate -aminoacizi. Protidele sunt deci
substane macromoleculare a cror unitate structural sunt aminoacizii.
Avnd drept criteriu comportarea la reacia de hidroliz precum i
numrul, natura i structura produilor de hidroliz, protidele se clasific
astfel:


6.1. AMINOACIZI

Aminoacizii sunt substane organice cu funciuni mixte; ei conin n
molecula lor cel puin o grupare funcional amino (NH
2
) i o grupare
funcional carboxil (-COOH).
Formula general simplificat a unui aminoacid este:
RCHCOOH

NH
2

Radicalul (R) poate fi alifatic, aromatic, heterociclic, hidrocarbonat
sau s conin i alte grupri funcionale (OH, SH). n organismele vii
se gsesc -aminoacizi (gruparea funcional NH
2
i COOH sunt legate
la acelai atom de carbon) ntr-un numr frecvent cuprins ntre 20-25 de
aminoacizi.

6.1.1. Clasificarea aminoacizilor

Clasificarea aminoacizilor se poate opera dup mai multe
caracteristici ale lor:
a) Dup numrul gruprilor funcionale amino i carboxil din
molecul pot fi:

RODICA ANA PUN

38
Acizi monoaminomonocarboxilici (au caracter neutru)





Acizi monoaminodicarboxilici (caracter acid)


BIOCHIMIE

39
Acizi diaminomonocarboxilici (au caracter bazic)
NH

CH
2
NH
2


CH
2


CH
2


CH
2


H
2
NCH

COOH
Lizina

CH
2
NHCNH
2


CH
2


CH
2


H
2
NCH

COOH


Arginina

b) Dup structura molecular aminoacizii pot fi: aciclici i ciclici.
Toate structurile prezentate mai sus sunt aciclice.
Aminoacizii ciclici pot fi:
tioaminoacizi (cu sulf n molecul)
CH
2
SH

H
2
NCH

COOH


Cisteina
CH
2
SSCH
2


H
2
NCH H
2
NCH

COOH COOH


Cistina
CH
2
SCH
3


CH
2


H
2
NCH

COOH
Metionina
hidroxiaminoacizi (cu gruparea funcional OH)
CH
2
OH

H
2
NCH

COOH


Serina
CH
3


HCOH

H
2
NCH

COOH
Treonina
RODICA ANA PUN

40
d) Dup importana biochimic aminoacizii pot fi: eseniali i
neeseniali. Aminoacizii eseniali sunt indispensabili pentru creterea i
dezvoltarea organismelor vii, lipsa lor indicnd perturbri de metabolism.
Aminoacizii eseniali sunt sintetizai numai de ctre plante, animalele
procurndu-i din hrana vegetal. Aminoacizii eseniali sunt: valina,
leucina, treonina, lizina, metionina, triptofanul, fenilalanina.
Sintetiznd cele prezentate, clasificarea schematic a aminoacizilor este:


6.1.2.Proprietile aminoacizilor

Proprieti fizice
Aminoacizii sunt substane n general solubile n ap (cu excepia
treoninei, cisteinei i lizinei) i puin solubile n solveni organici, funcie
de particularitile structurale (hidrofilie sau hidrofobie) ale radicalului
din structura lor. Aminoacizii prezint activitate optic, cu excepia
glicocolului care nu are atom de carbon asimetric n molecul.
Aminoacizii sunt substane care disociaz n soluie apoas sub form
de amfioni (sau ioni dipolari) fapt ce le confer un caracter amfoter. Ei
pot reaciona att cu acizii ct i cu bazele conform schemei:

BIOCHIMIE

41
Valoarea pH-ului la care soluia unui aminoacid conine acelai
numr de anioni i cationi (deci toate moleculele se afl sub form de
amfioni) este pH izoelectric (sau punct izoionic). pH-ul izoelectric are
valori caracteristice pentru fiecare aminoacid. n acest punct nu are loc
deplasarea particulelor ntr-un cmp electric exterior.

Proprieti chimice
Structura molecular este cea care determin proprietile chimice ale
unei substane n consecin aminoacizii vor prezenta proprieti chimice
determinate de gruparea carboxil, de gruparea amino i de prezena
ambelor grupri funcionale n molecul.

a) Proprieti datorit gruprii carboxil
Formarea de sruri cu bazele


Decarboxilarea sub aciunea unor enzime specifice. Prin pierderea
CO2 aminoacizii se transform n amine.


b) Proprieti datorit gruprii amino
Formarea de baze Schiff prin condensarea cu aldehidele:

Dezaminarea aminoacizilor sub aciunea unor enzime specifice.
Prin eliberarea unei molecule de amoniac, aminoacidul se transform fie
ntr-un -cetoacid (dac dezaminarea este oxidativ) fie ntr-un
RODICA ANA PUN

42
hidroxiacid (dac dezaminarea este hidrolitic) fie ntr-un acid carboxilic
(dac dezaminarea este reductiv).

c) Proprieti datorit prezenei concomitente a gruprilor
funcionale amino i carboxil
Formarea legturilor peptidice prin eliminarea unei molecule de ap
dintre gruparea carboxilic a unui aminoacid i gruparea amino a altui
aminoacid. Prin aceast condensare se formeaz o legtur ntre cei doi
aminoacizi ce se numete legtur peptidic. Noua molecul rezultat
poart numele de peptid.

Secvena (CONH) este o legtur amidic i se numete legtur
peptidic.
n reacia de mai sus participnd doi aminoacizi, produsul de reacie
este un dipeptid; acesta cu o alt molecul de aminoacid condenseaz
genernd un tripeptid i aa mai departe. Legturile peptidice sunt deci
cele care unesc aminoacizii n macromolecule polipeptidice i proteice.


6.2. PEPTIDE

Peptidele sunt substane formate dintr-un numr relativ mic de
aminoacizi unii prin legturi peptidice. n funcie de numrul de
aminoacizi ce se condenseaz peptidele sunt:
oligopeptide (cu 2-10 aminoacizi condensai);
polipeptide (cu 10-100 aminoacizi condensai).
Peptidele pot forma izomeri n funcie de natura, numrul i
succesiunea aminoacizilor din lanul polipeptidic.
Dintre peptidele care se gsesc n general n regnul vegetal,
glutationul, este dintre cele mai importante. Glutationul este un tripeptid
format prin condensarea glicocolului cu cisteina i acidul glutamic.
BIOCHIMIE

43

Glutation

Remarcm gruparea SH a cisteinei, astfel nct vom putea reda
molecula glutationului sub forma GlSH. n celule, glutationul se poate gsi
sub form redus GlSH sau sub form oxidat, ca disulfur (diglutation).
Trecerea reversibil a glutationului din forma redus n forma oxidat
constituie un important sistem de oxidoreducere, glutationul fiind un
transportator de hidrogen neenzimatic.


Glutationul se gsete n cantitate mai mare n seminele n stare de
germinaie.

6.3. PROTEINE (HOLOPROTEIDE)

Proteinele reprezint componentele fundamentale ale materiei vii. Ele
sunt substane macromoleculare formate prin policondensarea prin
legturi peptidice a unui numr foarte mare de molecule de aminoacizi.
Tipul, numrul i succesiunea aminoacizilor (secvenialitatea
aminoacizilor) din lanul polipeptidic este codificat genetic.
Masa molecular a macromoleculelor proteice astfel formate este de
ordinul 10
3
10
6
UMA. Ele se gsesc n toate organismele vegetale
participnd la constituia formaiunilor subcelulare, precum i a esuturilor
organismelor vii.
Proteinele au un rol hotrtor nu numai n constituirea structurii
celulelor i esuturilor ci i n funcionarea acestora. Structura moleculelor
proteice i relaia cu funcia lor biologic constituie preocupri actuale ale
biochimiei.
RODICA ANA PUN

44
6.3.1. Structura proteinelor
Determinarea structurii substanelor proteice este deosebit de
complex. Multitudinea cercetrilor ntreprinse n acest domeniu au
schiat un model structural al macromoleculelor proteice alctuit din patru
nivele de organizare:
a) Structura primar este dat de natura, numrul i succesiunea
aminoacizilor n lanul polipeptidic care se realizeaz prin legturi
peptidice.

b) Structura secundar este dat de forma lanurilor polipeptice. Ea
se realizez prin rsucirea sau plierea lanului polipeptidic, determinate de
instalarea unor legturi de hidrogen intercatenare ntre gruprile >C=O i
>NH din diverse secvene ale catenei. Aceast atracie determin fie
spiralarea lanului polipeptidic (cu un pas de 5,4 ) sub form de helix,
fie o pliere.

Pe lungimea ntregului lan polipeptidic alterneaz zonele spiralate cu
zone nespiralate.
BIOCHIMIE

45
c) Structura teriar se realizeaz prin legturi intercelulare dintre
lanurile polipeptidice. Ia natere astfel o conformaie spaial,
tridimensional. n funcie de rolul biologic pe care l ndeplinesc n
organismele vii, apare o structur teriar caracteristic ducnd la urmtoarele
tipuri de proteine:
proteinele globulare n care lanul polipeptidic sufer o nfurare,
determinat i meninut prin legturi disulfitice, legturi de hidrogen,
fore Van der Waals. Rolul de substane bioactive este ndeplinit de
proteine prin acest nivel de organizare structural.
proteine fibroase n care lanurile polipeptidice sub form de helix
se asociaz sub forma unei elice cu pasul mai mare, rezultnd fibre.
Asocierea lanurilor polipeptidice se realizeaz prin fore slabe
intermoleculare.
d) Structura cuaternar se refer la modul n care se unesc
subunitile proteice pentru formarea unor conglomerate. Acest tip de
structur este caracteristic proteinelor globulare. Pentru asocierea mai
multor protomeri (lanuri polipeptidice cu structur teriar globular) iau
natere formaiunile proteice oligomere. Acest nivel de structur confer
proteinelor oligomere roluri biochimice speciale.

6.3.2. Proprietile fizico-chimice ale proteinelor

solubilitatea proteinelor depinde de legturile care se stabilesc ntre
gruprile libere de la suprafaa macromoleculelor i moleculele
solventului. Astfel dac gruprile libere sunt hidrofile (COOH, NH
2
,
SH, OH) atunci proteinele vor fi solubile n ap. Dac gruprile libere
sunt hidrofobe (radicali alchilici) atunci proteinele sunt insolubile n ap
i solubile n solveni organici/alcooli). Proteinele globulare genereaz
prin solubilizare n ap soluii coloidale, ale cror particule dispersate sunt
chiar macromoleculele proteice.
caracterul amfoter i pH-ul izoelectric sunt determinate de
capacitatea proteinelor ca i a aminoacizilor de a forma amfioni.

Cation
RODICA ANA PUN

46
Caracterul amfoter al substanelor proteice este determinat n
principal de gruprile carboxilice i aminice libere, care nu formeaz
legturi peptidice. n mediu acid proteinele se comport ca baze slabe
genernd un cation iar n mediu bazic proteinele se comport ca acizi
slabi genernd un anion. Datorit caracterului amfoter proteinele pot
neutraliza cantiti mici de acizi i baze, funcionnd n organismele vii ca
sisteme tampon.
migrarea cationilor i anionilor proteici spre electrozi, n cmp electric,
la un pH diferit de pH-ul izoelectric. Electroforeza este un procedeu ce
folosete mobilitatea diferit a fraciunilor proteice n cmp electric pentru a
analiza i separa proteinele. Prin electroforez cationii proteici se deplaseaz
spre catod (cataforez) iar anionii proteici se deplaseaz spre anod (anaforez).
precipitarea proteinelor din soluiile lor are loc sub aciunea unor
factori fizici (cldur, ultrasunete, radiaii ionizante) sau chimici (sruri,
acizi, solveni organici). Precipitarea proteinelor este un proces fizico-
chimic care se produce din cauza deranjrii structurii lor sub aciunea
factorilor amintii. Atunci cnd se produce o micorare a stabilitii
particulelor coloidale n mediul de dispersie, fr a fi afectat structura
tridimensional precipitarea este reversibil. Astfel de ageni de
precipitare care distrug stratul protector de molecule de ap, producnd
sedimentarea particulelor coloidale sunt soluiile concentrate ale srurilor
alcaline (Na
+
, K
+
, Mg
2+
) i de amoniu (NH
4
+
) i solveni organici (alcool,
aceton) solubili cu ap n orice proporie. Prin ndeprtarea agenilor de
precipitare (adugarea de ap) proteinele revin la forma i la proprietile
iniiale. Atunci cnd sub aciunea agenilor exteriori are loc o distrugere a
structurii tridimensionale, prin ruperea legturilor chimice ce duc la
formarea structurii teriare, precipitarea este ireversibil, se produce
denaturarea proteinei. Prin denaturare proteinele i pierd activitatea lor
biologic. Sub aciunea cldurii majoritatea proteinelor precipit
ireversibil. Agenii chimici de precipitare ireversibil sunt: srurile
metalelor grele (Pb, Hg, Cu), acizii minerali (H
2
SO
4
, HNO
3
, HCl), unele
substane organice (acidul picric, acidul tricloracetic). Prin ndeprtarea
agenilor de precipitare, proteinele nu mai revin n acest caz la
proprietile iniiale.
hidroliza proteinelor se produce cu apa n mediu acid sau alcalin i
sub aciunea enzimelor specifice (proteaze) avnd drept rezultat ruperea
legturilor peptidice. Prin hidroliz total se obin aminoacizi ce au intrat
n alctuirea lanului polipeptidic.
BIOCHIMIE

47
reaciile de culoare ale proteinelor au loc datorit fie legturii
peptidice, fie datorit unor anumii aminoacizi din structur. Astfel
reacia biuretului (formarea unei culori albastru-violet la tratarea
extractului cu sulfat de cupru n mediu alcalin) se datoreaz existenei a
cel puin dou legturi peptidice n molecula proteic, reacia
xantoproteic (formarea unei culori galbene la tratarea cu HNO
3

concentrat) se datoreaz existenei n structura proteinei a aminoacizilor
aromatici, reacia sulfurii de plumb (formarea la fierbere a unui precipitat
negru n prezena sulfurii de plumb) se datoreaz existena aminoacizilor
cu sulf.

6.3.3. Tipuri de proteine vegetale

Din studiul structurii proteinelor se evideniaz funcie de structura
tridi- mensional dou feluri de macromolecule: globulare i fibrilare.
Acestea, funcie de masa lor molecular, de natura solventului n care se
dizolv se clasific n urmtoarele tipuri:
a) Albuminele sunt proteine cu mas molecular mic, solubile n ap
i electrolii diluai cu formarea de soluii coloidale, care precipit
reversibil i sub aciunea cldurii ireversibil. n albumine predomin
aminoacizii monoaminomonocarboxilici i ceea ce este foarte important
conin toi aminoacizii eseniali. Albuminele se gsesc n cantiti mai
mari n seine. Astfel n mazre i soia se gsete legumelina, n seminele
de cereale leucozina. Albuminele se gsesc n plante n stare liber sau
prin asociere cu alte biocomponente (cu poliglucidele).
b) Globulinele sunt proteine cu mas molecular mare, avnd
structur globular, solubile n ap i n electrolii diluai (mai puin dect
albuminele). Au un caracter acid mai pronunat dect albuminele datorit
aminoacizilor dicarboxilici coninui n molecul. n plante globulinele se
gsesc depozitate n semine (fasolina din fasole, glicin n soia). Exist
mai multe fracii de globuline separabile electrolitic: , etc.
c) Gliadinele (prolamine) sunt proteine solubile n ap, puin solubile
n soluii diluate de electrolii. Au un caracter acid mai pronunat datorit
unui coninut mai ridicat de prolin, acid glutamic i acid aspartic. Sunt
proteine specifice plantelor, ele gsindu-se n boabele de gru (gliadina),
n boabele de orz (hordeina), n boabele de porumb (zeina).
d) Glutelinele sunt proteine insolubile n ap i n electrolii. Au un
caracter acid pronunat, un coninut mai mare de aminoacizi eseniali
RODICA ANA PUN

48
dect gliadinele. Sunt i ele proteine specifice plantelor, gsindu-se n
boabele de gru (glutelina) i boabele de orez (orizenina).
Glutelinele i protaminele sunt componentele principale ale
glutenului. Glutenul este un amestec preponderent de gluteline (25-40%)
i gliadine (40-50%) care n prezena apei formeaz o mas elastic.
Glutenul imprim finilor de cereale nsuiri de panificaie. Prin tratarea
finii cu ap se obine un aluat elastic care poate s creasc. Cerealele
care nu conin raportul apropiat de gluteline i gliadine de mai sus nu au
fin panificabil. Grul, secara i orzul sunt panificabile, fina de
porumb i cea de orez nu sunt panificabile.
e) Protaminele i histonele sunt proteine solubile n ap, cu caracter
bazic, cu structuri moleculare mai simple. Sunt proteine specifice regnului
animal. n plante nu s-au identificat proteinele acestea tipice ci unele
nrudite ce intr n constituia nucleoproteidelor.

6.3.4. Dozarea proteinei brute

Elementul principal i caracteristic pentru proteine este azotul; n
100g de protein gsindu-se n medie 16 g de azot total. Prin dozarea
azotului total (N%), se determin indirect cantitatea de protein brut din
materialul vegetal. Formula de calcul este:
100
Protein brut % = N%
*
= N%
*
6,25
16
Coninutul n protein brut al principalelor boabe de cereale variaz
ntre 10-15% la gru, 10-16% la orz, 8-10% la orez, 7-13% la porumb.
Boabele de soia au un coninut ridicat de protein brut, (40%) fiind
valoroase din punct de vedere nutritiv.

6.4. HETEROPROTEIDE
Heteroproteidele sunt proteide ale cror molecule sunt formate dintr-o
component proteic (albumin, globulin etc.) i dintr-o component
neproteic numit grupare prostetic. Legtura dintre cele dou
componente, funcie de gruprile funcionale libere din protein i funcie
de structura componentei prostetice, se face prin legturi covalente sau
coordinative.
Dup natura gruprii prostetice se disting urmtoarele clase de
heteroproteide:
BIOCHIMIE

49
metaloproteide (au ca grupare prostetic metale);
glicoproteide (au ca grupare prostetic glucide);
lipoproteide (au ca grupare prostetic lipide);
cromoproteide (au ca grupare prostetic un pigment colorat);
nucleoproteide (au ca grupare prostetic un nucleotid).

6.4.1. Metaloproteide

Metalele (Fe, Cu, Mg, Co, Zn) prin legturi preponderent
coordinative formeaz cu proteinele, chelai genernd moleculele de
metaloproteide. Aceast clas de biocomponente va prezenta proprietile
generale ale proteinelor prin componenta proteic), dar i proprieti
speciale conferite de prezena metalului n molecul. Ele au astfel un rol
metabolic nsemnat ca transportori i depozitari ai diferitelor metale, sunt
implicate n fotosintez, respiraie. Foarte multe enzime conin n
structura lor un metal, ele datorndu-i activitatea catalitic acestei
structuri.
Feritina este un exemplu de metaloproteid ce se gsete n
cloroplaste, ce are rolul de a depozita fierul n organism.

6.4.2. Lipoprotidele

Lipoprotidele conin ca grupare prostetic molecule de lipide.
Legarea lipidelor, de obicei fosfoglicerolipide, la componenta proteic se
face prin legturi slabe (fore Van der Waals). Funcie de proporia
componentei lipidice, lipoproteidele vor fi liposolubile sau eventual
hidrosolubile. Acest tip de heteroproteide se gsesc n cantitate mare n
nucleu, mitocondrii, cloroplaste, n membranele celulare. Astfel ele
influeneaz permeabilitatea membranelor biologice, ajut la transportul
lipidelor n organismul viu.

6.4.3. Cromoproteidele

Cromoproteidele sunt acele heteroproteide ce conin drept grupare
prostetic un pigment, ceea ce face ca aceste substane s fie distinct colo-
rate. n gruparea prostetic n marea majoritate a cazurilor exist i atomi
metalici legai coordinativ de aceast structur. Structura gruprii prostetice
determin clasificarea cromoproteidelor n cromoproteide porfirinice i
RODICA ANA PUN

50
cromoproteide neporfirinice. Cele mai rspndite cromoproteide sunt cele cu
structur porfirinic. Acestea conin n gruparea prosteic un inel porfirinic,
format din patru nuclee pirolice legate ntre ele prin grupri metinice.
Cel mai important cromoproteid din regnul vegetal este cloroglobina
(cloroplastina).
Cloroglobina are drept grupare prostetic pigmentul verde: clorofila.
Clorofila are o structur porfirinic, cu un atom de magneziu legat de
heterociclurile pirolice. Funcie de unii substitueni, se disting clorofila a
i clorofila b.
Structura molecular a clorofilei este:



Cloroglobina se gsete n toate celulele i esuturile verzi, fiind
localizat n cloroplastele plantelor superioare. Clorofila a reprezint
pigmentul principal avnd un rol esenial n fotosintez prin capacitatea ei
de a converti energia luminoas n energie chimic. Clorofila b are un rol
secundar n fotosintez.
O alt cromoproteid porfirinic prezent n plante n cantiti mai
mici este leghemoglobina. n acest caz pigmentul ce coordoneaz
comonenta proteic este hemul (pigmentul rou), care are un atom central
de fier i structur porfirinic. Leghemoglobina se afl n nodozitile
plantelor leguminoase.
Citocromii sunt ali reprezentani ai cromoprotidelor porfirinice. i n
acest caz gruparea prostetic este hemul, diferite tipuri de citocromi difer
ntre ele prin natura proteinei specifice. n organism ei ndeplinesc o
aciune catalitic funcionnd ca enzime de oxido-reducere, bazat pe
BIOCHIMIE

51
sistemul redox format din ionii Fe
2+
i Fe
3+
; sunt implicai astfel n
transportul de electroni n lanul respirator i n procesul de fotosintez.

6.4.4. Nucleoproteide

Nucleoproteidele sunt formate dintr-o component proteic (de obicei
cu caracter bazic) i din acizi nucleici drept grupare prostetic.
Nucleoproteidele sunt cele mai complexe proteide. Ele se gsesc n toate
celulele vegetale.
Clasificarea nucleoproteidelor se face dup natura acizilor nucleici n
ribonucleotide (care conin ARN) i deoxiribonucleotide (conin ADN).
Ribonucleotidele se gsesc n cantitate mare n ribozomi, n citoplasm i
mai puin n nucleul celular. Deoxiribonucleotidele se gsesc n cantitate
mare n nucleul celular i n cromozomi. Funciile lor sunt determinante
pentru existena i perpetuarea materiei vii. De altfel toat clasa protidelor
contribuie n mod hotrtor n structura i funcionarea celulelor, aflndu-
se ntr-o strns interdependen cu acizii nucleici. Relaia proteide-acizi
nucleici este considerat de tiina modern axa central a ntregii biologii.

REZUMAT

Protidele sunt cele mai importante componente structurale i
funcionale ale organismelor vii. Ele reprezint suportul material al vieii
necunoscndu-se forme de via fr protide. Din punct de vedere chimic
protidele sunt substane organice care prin hidroliz total pun n
libertate aminoacizi. Protidele sunt substane macromoleculare ce au
deci, drept uniti structurale aminoacizii. Aminoacizii sunt substane
organice cu funciuni mixte, ei coninnd n molecul cel puin o grupare
funcional amino (-NH
2
) i una carboxil (-COOH). Datorit prezenei
concomitente a celor dou grupri funcionale prin eliberarea unei
molecule de ap ntre dou sau mai multe molecule de aminoacid se
formeaz legturi peptidice generndu-se moleculele de peptide,
polipeptide i proteine.
Proteinele sunt substane macromoleculare formate prin
policondensarea unui numr foarte mare de aminoacizi. Tipul, numrul i
succesiunea aminoacizilor (secvenialitatea aminoacizilor) din lan
polipeptidic este codificat genetic. Proteinele reprezint componente
fundamentale ale materiei vii. Structura lor este deosebit de complex
RODICA ANA PUN

52
avnd patru nivele de organizare: structura primar, secundar, teriar,
cuaternar. Proteinele ndeplinesc diverse funcii ca elemente structurale,
catalizatori, transportori ai unor substane. Funcie de structura
tridimensional, principalele tipuri de proteine vegetale sunt albuminele,
globulinele, gliadinele, glutelinele, protaminele. Heteroproteidele sunt
proteide ale cror molecule sunt formate dintr-o component proteic
(albumin, globulin) i dintr-o component neproteic. Clasificarea lor
se face dup natura gruprii neproteice n: metaloproteide,
cromoproteide etc. Protidele sunt biocomponente care au un rol n
organism, un rol structural i funcional primordial, nsi viaa fiind
condiionat de existena lor.


NTREBRI

6.1. Scriei formulele unor aminoacizi ce fac parte din urmtoarele
clase:
a) monoaminomonocarboxilici;
b) monoaminodicarboxilici;
c) diaminomonocarboxilici.
6.2. Explicai de ce proteinele au puncte izoelectrice.
6.3. Care sunt produii hidrolizei totale (la nivelul legturii peptidice) a
glutationului?
6.4. Ce tip de legturi determin strcutura secundar a proteinelor?
6.5. Care este denumirea i structura pigmentului ce intr n structura
cloroglobinei?


BIBLIOGRAFIE

6.1. Lehninger A.I., Biochimie, Ed. Tehnic, 1987.
6.2. Neamu Gavril, Biochimie alimentar, Ed. Ceres, 1997.
6.3. Neurat H., The Proteins, vol. I-IV, Academic Press, New York,
1966.
6.4. Maister A., Biochemistry of the Aminoacids, Academic Press, New
York, 1965.
BIOCHIMIE

53
Capitolul 7

ACIZI NUCLEICI


CUVINTE CHEIE:
- baze azotate
- riboza
- deoxiribiz
- nucleozid
- nucleotid
- ADN
- ARN

OBIECTIVE:
- studiul nucleozidelor i nucleotidelor
- schiarea structurilor acizilor nucleici: acidul ribonucleic i acidul
deoxiribonucleic

Acizii nucleici au fost descoperii de F. Miescher (1869) n nucleii
leucocitelor, ulterior ei au fost identificai i n plante.
Acizii nucleici sunt biocomponente care au un rol fundamental n
stocarea, conservarea i transmiterea informaiei genetice de la o
generaie la alta, fiind astfel mpreun cu proteinele substanele care
asigur organizarea i funcionarea materiei vii. Pe lng rolul
informaional, acizii nucleici au un rol esenial n sinteza proteinelor, a
enzimelor.
Acizii nucleici sunt substane macromoleculare polinucleotidice,
unitatea lor structural fiind nucleotidele.
Structura lor macromolecular este alctuit n mod ierarhizat,
componentele identificate prin hidroliz acid fiind organizate astfel:
prin condensarea unei pentoze cu o baz azotat se formeaz
printr-o legtur glicozidic un nucleozid;
prin condensarea unui nucleozid cu o molecul de acid fosforic se
formeaz un nucleotid;
prin condensarea unui numr mare de nucleotide rezult acizii
nucleici.
RODICA ANA PUN

54
Acizii nucleici sunt deci biocomponente macromoleculare
polinucleotidice. Pentru a schia structura acizilor nucleici trebuie parcurs
studiul componentelor de mai sus.

7.1. NUCLEOZIDE

Nucleozidele sunt substane formate dintr-o pentoz i o baz azotat
unite prin legtura N-glicozidic.
Pentozele participante sunt -riboza i -deoxiriboza.
Bazele azotate participante sunt compui heterociclici cu azot,
derivate de la purin i pirimidin.
a) Bazele azotate purinice


Adenina Guanina

b) Baze azotate pirimidinice

Uracil Timin Citozin
(metiluracil)

Adenina s-a gsit n stare liber n numeroase plante (frunze de ceai,
sfecla de zahr, drojdie, tre de orez, frunze de secar). Guanina s-a
extras pentru prima dat din guano (ngrmnt format din excrementele
BIOCHIMIE

55
psrilor). S-a identificat ulterior n numeroase plante. Adenina i guanina
intr n constituia tuturor acizilor nucleici. Prin oxidarea acestor purine se
obine acid uric. Legtura glicozidic se stabilete ntre atomul de azot din
bazele azotate (accentuat n structurile de mai sus) i hidroxilul
semiacetalic al ribozei sau deoxiribozei. Rezult structuri de tipul:

Adeninribonucleozid Adenindeoxiribonucleozid
(Adenozina) (Deoxiadenozina)


7.2. NUCLEOTIDE

Nucleotidele conin n molecul o pentoz, o baz azotat i acid
fosforic. Acidul fosforic se leag de nucleozide (pentoz+baz azotat)
prin legturi esterice la nivelul gruprilor hidroxilice libere ale pentozei.
Nucleotidele sunt deci esteri fosforici ai nucleozidelor. Rezult structuri de
tipul:

Adenozin monofosfat
(AMP)
RODICA ANA PUN

56
Exist posibilitatea legrii n continuare de molecule de acid fosforic
de restul fosforic existent ntr-un nucleozid monofosfat. Rezult astfel
nucleozide di i trifosforilate. Energia legturilor dintre resturile de acid
fosforic este foarte mare (7-12 Kcal/mol de fosfat), fapt care confer
acestor substane rolul de compui macroergici. Structurile lor sunt:

Legturile macroergice sunt reprezentate prin semnul ~. Prin ruperea
legturilor macroergice ale acestor compui pe de o parte se elibereaz
energia chimic necesar altor procese metabolice i pe de alt parte se
genereaz grupri fosfat necesare activrii unor molecule care astfel
particip la reaciile biochimice. Ruperea legturilor se produce prin
hidroliz sub aciunea catalitic a unor enzime specifice.

Hidroliz enzimatic
ATP ADP + H
3
PO
4
+ E

n acelai timp, pot ndeplini nu numai rolul de acumulare a energiei,
ci i rolul de acceptori de radicali fosfat, n aceste condiii captnd i
stocnd energie.
BIOCHIMIE

57
Energie
ADP + H
3
PO
4
ATP

Mononucleotidele se unesc ntre ele prin intermediul acidului fosforic
formnd lanuri lungi de polinucleotide, macromoleculele de acizi nucleici.


7.3. STRUCTURA ACIZILOR NUCLEICI

Se cunosc dou tipuri de acizi nucleici funcie de natura pentozei din
structura nucleotidelor constituente:
acizii ribonucleici care coni riboz (ARN);
acizii deoxiribonucleici care conin deoxiriboz (ADN).

7.3.1. Acizii ribonucleici

Acizii ribonucleici rezult prin policondensarea ribonucleotidelor.
Conin n molecul adenin i guanin (baza purinic) i dintre bazele
pirimidinice citozina i uracilul (baza pirimidinic) alturi de riboz i acid
fosforic.
Acizii ribonucleici prezint o structur ierarhizat: primar, secundar.
Structura primar este dat de un singur lan polinucleotidic (sunt
monocatenari). Lanul polinucleotidic se formeaz prin legtur
fosfodiesteric ntre atomul C-3 al unei ribonucleotide i C-5 al altei
ribonucleotide.
Schema structurii primare a ARN este:


RODICA ANA PUN

58
Structura primar a ARN este:

Structura secundar a ARN este dat de stabilirea unei legturi de
hidrogen ntre bazele azotate, adenin-uracil i guanin-citozin, legturi
intracatenare ce conduc la o configuraie spaial pseudoelicoidal (spiral
neregulat).
Sub aspect structural i funcional se cunosc trei tipuri de acizi nucleici:
ARN ribozonal (ARNr);
BIOCHIMIE

59
ARN mesager (ARNm);
ARN de transfer (ARNt).
ARN-ribozomal se gsete n ribozomii din citoplasm. Ribozomii
sunt formai din acizi nucleici (65%) i proteine (35%) fiind sediul de
biosintez al proteinelor. Mesajul genetic adus de ARNm aici se refer la
succesiunea aminoacizilor n lanul polinucleotidic.

Masa molecular a macromoleculelor ARN este cuprins ntre
600.000 1.200.000 (coninnd 100 3000 de nucleotide).
ARN mesager se formeaz n nucleu pe un segment bine determinat
de ADN ce i servete drept matri. El transmite informaia genetic
nscris n ADN i o duce la ribozomii din citoplasm la locul de
biosintez a proteinelor. Se pare c ARNm se menine n celul numai n
timpul sintezelor proteice.
Masa molecular a macromoleculelor ARNm este mare, de ordinul
10
6
-10
9
UMA.

ARN-transfer se gsete n lichidul citoplasmatic. Acest tip de ARN, aa
cum arat i denumirea lui, transport aminoacizii n ribozomi pentru sinteza
proteinelor. Structura primar a ARNt se prezint sub orma unui lan
polinucleotidic ce are la captul C-3 terminal ntotdeauna aceleai 3 nu-
cleotide. Cea mai probabil configuraie a ARNt este sub form de frunz de
trifoi. Dup Hollez (1965) aceast configuraie poate fi schiat astfel:

ARN de transfer

Masa molecular a ARNt este mic (23.000-28.000) coninnd 75-90
nucleotide n lanul polinucleotidic.
RODICA ANA PUN

60
7.3.2. Acizii deoxiribonucleici
Acizii deoxiribonucleici rezult prin policondensarea
deoxiribonucleozidelor, gsindu-se n cantitate mare n nucleul celulelor (n
cromozomi).
Conin n molecul adenin (A), guanin (G) ca baze purinice i
dintre bazele pirimidinice citozina (C) i timina (T). Acizii
deoxiribonucleici prezint o structur ierarhizat: primar, secundar.
Structura primar se refer la modul de formare a lanului
polinucleotidic prin legturi fosfodiesterice (ntre C-3 a unei
mononucleotide i gruparea hidroxilic din C-5 al altei mononucleotide).
Un fragment polinucleotidic de ADN se prezint astfel.

BIOCHIMIE

61
. . . . .
Structura secundar a acizilor deoxiribonucleici a fost propus de
Watson i Crick (Premiul Nobel n 1962). Ei au demonstrat c
macromolecula de ADN este bicatenar fiind format din dou lanuri
polinucleotidice lungi, rsucite n spiral (dublu helix). Bazele azotate din
cele dou lanuri polinucleotidice se leag ntre ele prin legturi de
hidrogen. Perechile de baze complementare sunt:
adenina i timina unite prin 2 legturi de hidrogen
guanina i citozina unite prin 3 legturi de hidrogen
Datorit stabilirii legturilor de hidrogen, A::::T i G:::::C, cele dou
lanuri polinucleotidice sunt complementare, n dreptul adeninei dintr-un
lan gsindu-se timina din cellalt .a.m.d. (perechile de baze de mai sus
se numesc baze complementare).
Lanurile polinucleotidice ale spiralei sunt orientate antiparalel nct
n faa captului C-5 dintr-un lan se afl C-3 din cellalt lan.

Masa molecular a acizilor deoxirobonucleici este mare, de ordinul
10
4
-10
12
UMA, la formarea macromoleculei participnd un numr foarte
mare de nucleotide.
Macromolecula de ADN reprezint substratul chimic al ereditii. n
molecula de ADN este nscris programul genetic al fiecrui organism.
ADN are un rol esenial n biosinteza proteinelor i n apariia mutaiilor
genetice, n procesul de cretere, dezvoltare i difereniere al celulelor.
RODICA ANA PUN

62
REZUMAT:

Acizii nucleici conin monomere repetabile numite nucleotide.
Unitile monomere ale acidului ribonucleic, ribonucleotidele sunt
compuse dintr-o molecul de baz purinic sau pirimidinic, una de
riboz i una de acid fosforic. Unitile monomerice ale acidului
deoxiribonucleic conin n loc de riboz, deoxiriboz.
Ribonucleotidele conin ca baze pirimidinice citozina i uracil, iar ca
baze purinice adenina i guanina. Deoxiribonucleotidele conin ca baze
pirimidinice citozina i timina, iar ca baze purinice adenina i guanina.
Nucleotidele sunt elementele constitutive ale acizilor nucleici, dar mai au
i funcii de transportori de grupri fosfat (ATP). Acizii deoxiribonucleici
nmagazineaz i transmit informaia genetic. Acizii ribonucleici au
rolul de a exprima informaia genetic a ADN-ului. Acizii ribonucleici
exist n trei tipuri majore: ARN- ribozomal, ARN-mesager, ARN de
transfer. Acizii nucleici sunt biocomponente care au un rol fundamental
n stocarea, conservarea i transmiterea informaiei genetice de la o
generaie la alta.


INTREBRI:

7.1. Care sunt cele dou clase de baze azotate din strcutura acizilor
nucleici?
7.2. Ce produi se obin n urma hidrolizei complete a adenozinei i a
deoxiadenozinei?
7.3. Explicai de ce un compus ca adenozintrifosfatul (ATP) este ma-
croergic.
7.4. Care este diferena intre structur ARN i ADN?

BIBLIOGRAFIE

7.1. Brown, T.H., Le May, Burstein H., Chemistry the Central Science,
New Gersey, 1967
7.2. Davidson, Y.N., The Biochemistry of Nucleic Acid, Academic
Press, New York, 1972
7.3. Michelson A.M., The Chemistry of Nucleosides and Nucleotides,
Academic Press, New York, 1963
7.4. Neamu Gavril, Biochimia alimentar, Ed. Ceres, 1997
BIOCHIMIE

63
Capitolul 8

ENZIME



CUVINTE CHEIE:
- biocatalizatori
- cofactori
- substrat
- coenzime


OBIECTIVE:
- descrierea structurii i a modului de aciune al enzimelor
- studiul cineticii reaciilor enzimatice
- clasificarea i nomenclatura enzimelor

Enzimele sunt substanele care catalizeaz reaciile chimice ce au loc
n organismele vii. Toate transformrile biochimice n toate formele de
manifestare ale materiei vii sunt posibile numai prin aciunea enzimelor,
ele fiind deci biocatalizatori.
n prezena enzimelor, reaciile biochimice se desfoar optim la
temperatura de 30-40C i n mediu apos, la o valoare pH de aproximativ
7.
n lipsa enzimelor, majoritatea reaciilor chimice din organism nu ar
avea loc, neexistnd procese metabolice, nu exist nici via. Enzimele
sunt biocomponente care au un rol fundamental att n desfurarea
reaciilor biochimice ct i n reglarea proceselor metabolice din
organismele vegetale.
Enzimele sunt biocomponente de natur proteic specializate n
cataliza reaciilor biochimice.

8.1. STRUCTURA I MODUL DE ACIUNE AL ENZIMELOR

Din punct de vedere chimic unele dintre enzime sunt proteine
(constituite numai din aminoacizi condensai) iar altele conin i
RODICA ANA PUN

64
componente neproteice, componente numite cofactori. Cofactorii pot fi
ioni metalici (n metaloenzime) sau molecule organice numite coenzime.
Dac din molecula enzimei este ndeprtat cofactorul, proteina rmas
este catalitic inactiv numindu-se apoenzim; activitatea catalitic a
enzimelor este deci dat a complexul protein (apoenzim) + cofactor.
Pentru a explica proprietile catalitice ale enzimelor i mecanismul
de aciune catalitic, s-a introdus noiunea de situs activ al enzimelor
(situs catalitic). Acesta este o zon special situat n poriunea hidrofob
a componentei proteice, care prin structura sa special este capabil de
activitate catalitic. Substana asupra creia acioneaz enzimele prezint
numele de substrat, iar substanele obinute n urma reaciei biochimice,
produi de reacie.
Activitatea catalitic a enzimelor const de fapt n creterea vitezei
reaciei pe care o catalizeaz. Acest proces are loc datorit faptului c
enzimele determin scderea energiei de activare a moleculelor
substratului, fcnd mai repede posibil atingerea energiei necesare
producerii reaciei respective, deci apariia produilor de reacie. Acest
lucru este posibil datorit formrii unui complex activat ES* a crei
energie de activare este mai mic dect a unui complex activat S* singur.
Formarea complexului activat are loc atunci cnd structura situsului
activ al enzimei are o secven corespondent potrivit n structura
substratului. Mecanismul de coresponden este de tipul broasc -
cheie. n prezena unui substrat, situsul activ al enzimei manifest o
flexibilitate i o capacitate de adaptare la structura complementar a
substratului. Mecanismul acesta poate fi redat sintetic astfel:

n care:
E - enzim
S - substrat
ES* - complex activat
P - produi de reacie

De remarcat faptul c la sfritul reaciei enzima se regsete
nemodificat chimic (ca orice catalizator obinuit) i c procesele fiind
reversibile se mrete att viteza reaciei directe ct i a celei inverse,
grbind instalarea echilibrului chimic. O alt proprietate general
catalizatorilor este aceea c o cantitate mic de enzim poate determina
transformarea unor cantiti mari de reactani (substrat).
BIOCHIMIE

65
Biocatalizatorii - enzimele - prezint spre deosebire de catalizatorii
chimici o specificitate deosebit. Aceast specificitate poate fi:
a) specificitate de aciune (de reacie) n sensul c o enzim
catalizeaz numai o anumit reacie sau un grup de reacii de acelai tip;
b) specificitate de substrat, n sensul c o enzim catalizeaz n cadrul
unui anumit tip de reacie numai un anumit substrat, i anume acela pentru
care are mecanismul broasc - cheie potrivit (ca legturi chimice, ca
specificitate steric).

8.2. CINETICA REACIILOR ENZIMATICE

Enzimele pot cataliza numai reacii termodinamic posibile, adic numai
acele reacii chimice care au loc cu scderea entalpiei libere de reacie.
Viteza reaciilor catalizate de enzime reprezint cantitatea de substrat
transformat (c) ntr-un anumit interval de timp (dt). Valoarea vitezei reale
de reacie este dat de relaia:

Mrimea vitezei de reacie reprezint de fapt activitatea enzimatic.
Viteza reaciilor enzimatice (activitatea enzimatic) depinde de o serie de
factori: concentraia enzimei, concentraia substratului, afinitatea enzim -
substrat, temperatur, pH, prezena inhibitorilor.

a) Influena concentraiei enzimei [E]
Viteza de reacie crete proporional pentru concentraii mici i
rmne constant pentru concentraii mari de enzim pus n contact cu
aceiai cantitate de substrat. Grafic aceast variaie este redat astfel:


RODICA ANA PUN

66
b) Influena concentraiei substratului [S]
Dac se menin constante concentraia enzimei i crete concentraia
substratului pus n contact cu enzima, viteza de reacie crete pn se
atinge o valoare maxim constant dup care nu mai depinde de creterea
concentraiei substratului. Creterea vitezei de reacie nu mai este posibil
deoarece are loc saturarea enzimei prin ocuparea tuturor situsurilor active
cu molecule de substrat. Cu ct afinitatea dintre enzim i substrat este
mai mare cu att ocuparea situsurilor este mai rapid i deci viteza de
reacie este mai mare, deoarece concentraia complexului activat ES* este
i ea mai mare.
Michaelis a artat c funcie de afinitatea enzim substrat, valoarea
vitezei reaciilor enzimatice la un anumit moment este dat de ecuaia
Michaelis - Menten:

n care:
Vr - viteza de reacie
Vm - viteza maxim
[S] - concentraia substratului
KM - constanta Michaelis

n cazul n care viteza de reacie este jumtate din viteza maxim de
reacie Vr = Vm/2, rezult prin substituie n ecuaia de mai sus valoarea
lui KM dat de egalitatea KM = [S]. Deci constanta lui Michaelis este
egal cu concentraia de substrat ce corespunde unei viteze de reacie
egal cu jumtate din viteza maxim de reacie (Vm/2).
Grafic aceast variaie este redat astfel:

BIOCHIMIE

67
c) Influena temperaturii
n cinetica reaciilor chimice, temperatura este un factor de cretere
proporional a vitezei de reacie.
n cazul reaciilor enzimatice trebuie remarcat c exist un interval de
temperatur n care enzima este stabil. n acest interval de temperatur
viteza reaciilor enzimatice crete odat cu creterea temperaturii.
Majoritatea enzimelor au o temperatur sau un interval de temperatur
optim.
Prin depirea acestui interval (peste 55 - 60
o
C) activitatea
enzimatic scade deoarece prin denaturarea termic se distrug
proprietile de biocatalizatori ale enzimelor.

d) Influena pH - ului
Enzimele fiind substane de natur proteic ele i pierd aciunea
catalitic sub aciunea acizilor i bazelor tari. Pentru fiecare enzim exist
un pH optim la care activitatea enzimatic este maxim. La valori mai
mari sau mai mici dect pH optim activitatea enzimatic scade. La
majoritatea enzimelor pH-ul optim este cuprins ntre 6 i 8, deci n jurul
valorii neutre; pH-ul optim variaz n funcie de natura enzimei.

e) Prezena inhibitorilor
Inhibatorii enzimatici sunt substane care influeneaz negativ
activitatea enzimatic, micornd viteza reaciilor biochimice.
Inhibitorii pot aciona asupra enzimelor n mod competitiv sau
necompetitiv.
Inhibatorii competitivi, fiind substane care prezint analogie
structural cu substratul, tind s ocupe situsul activ al enzimei formnd un
complex activat EI*. Dac energia de activare a complexului EI* este mai
mic dect cea a complexului activat ES* atunci, situsul catalitic al
enzimei va fi ocupat de inhibitor, n defavoarea substratului, micornd
deci viteza de reacie. Pesticidele i bazeaz aciunea de combatere
acionnd ca inhibitori competitivi specifici ai unei reacii enzimatice
vitale a plantelor (erbicidele), a insectelor (insecticidele) etc.
Inhibatorii necompetitivi, sunt substane care micoreaz efectiv
activitatea enzimatic fie legndu-se n enzima liber fie cu complexul
activat ES*. n acest caz inhibitorii prin legturile ce le stabilesc deranjeaz
structura tridimensional a proteinei din constituia enzimelor, diminund
proprietile catalitice.
RODICA ANA PUN

68
Inhibitorii necompetitivi sunt ionii unor metale grele Pb
2
+
, Hg
2
+
etc.
n acest caz inhibarea depinde de afinitatea enzimei pentru inhibitor i de
concentraia n inhibitor.

8.3. NOMENCLATURA ENZIMELOR I CLASIFICAREA LOR

Conform nomenclaturii propuse n anul 1961 de ctre Uniunea
Internaional de Biochimie, s-a stabilit c numele individual al fiecrei
enzime s se formeze att dup natura substratului ct i dup felul
reaciei pe care o catalizeaz mpreun cu sufixul -az. De exemplu,
enzima care produce decarboxilarea acidului piruvic se numete piruvat
decarboxilaz. Cu aceeai ocazie s-a stabilit i sistemul de clasificare al
enzimelor bazat pe tipurile de reacii catalizate. Sistemul cuprinde 6 clase
mari de enzime, fiecare dintre ele avnd subclase (s-a adoptat i un sistem
zecimal conform cruia fiecare enzim are un cod din patru cifre ce o
poziioneaz n clase, subclase .a.m.d.).
Cele ase clase principale de enzime sunt urmtoarele:
1. OXIDOREDUCTAZE
2. TRANSFERAZE
3. HIDROLAZE
4. LIAZE
5. IZOMERAZE
6. LIGAZE
Cunoaterea structurii, a mecanismului de aciune a rolului biochimic
al enzimelor cuprinse n cele 6 clase permite abordarea studiului
metabolismului celular.

8.3.1. OXIREDUCTAZE

Enzimele din aceast clas catalizeaz reaciile biochimice de
oxidoreducere. Oxidoreducerea este un proces de transfer de electroni de
la un donor la un acceptor cu trecere de la forma redus la forma oxidat.
Atomii de hidrogen sunt donori de electroni n sistemele biochimice.
Oxidoreductazele sunt sisteme redox capabile de a se transfera reversibil
din forma redus n cea oxidat prin transfer de atomi de hidrogen sau de
electroni.
Oxidoreductazele cu transport de hidrogen sunt numite i
dehidrogenaze (aceste enzime particip la dehidrogenarea substratului).
Acestea sunt enzime ce au n structur coenzime. Coenzimele
BIOCHIMIE

69
dehidrogenazelor sunt:
a) Nicotinamid - adenin - dimecleotid prescurtat NAD
+
. Este o enzim
cu structur dinucleotidic:

riboz riboz
Dinucleoid
Mecanismul redox este axat pe nucleul piridinic, motiv pentru care
notnd cu -R restul moleculei, procesul redox poate fi prezentat astfel astfel:

b) Nicotinamid - adenin - dinucleotid - fosfat, prescurtat NADP
+
;
schematic structura chimic pentru NADP
+
poate fi prezentat:

RODICA ANA PUN

70
Sistemul redox poate fi prezentat astfel:

c) Flavin - adenin - dinucleotid, prescurtat FAD. Schematic structura
chimic pentru FAD (marcnd structura flavinic i notnd cu R restul
nucleului dinucleotidului) este:

Forma oxidat Forma redus
Oxidoreductazele cu transfer de electroni sunt enzime cu grupare
prostetic hemic (structur profirinic cu ioni centrali de Fe
2+
sau Fe
3+
)
Din aceast clas fac parte citrocomii. Toi citrocomii sunt sisteme
redox cu transfer de electroni care funcioneaz pe baza mecanismului
reversibil:

Se cunosc mai muli citocromi, n funcie de potenialul redox la care
acioneaz, astfel: citocromul a, citocromul b, citocromul c. Marea parte a
citocromilor acioneaz n lanul respirator i n procesul de fosforilare.

8.3.2. TRANSFERAZE

Sunt enzime care catalizeaz reacii de transfer a unor grupri (resturi
de molecule) de pe un substrat pe altul, dup reacia general:

Dup natura chimic a radicalului sau a gruprii funcionale
transferate distingem urmtoarele subclase:
metiltransferaze (transfer radicalul metil);
aciltransferaze (transferaze grupare acil R-CO-; acil coenzima A);
aminotransferaze (transfer gruparea funcional amino - NH
2
);
glicoziltransferaze (transfer gruprii glicozil);
fosforiltransferaze (transfer gruprii fosfat).
BIOCHIMIE

71
8.3.3. HIDROLAZE

Sunt enzime care catalizeaz ruperea legturilor moleculare ale unor
substane cu ajutorul apei (hidroliz). Dup natura legturii scindate
distingem urmtoarele subclase:
esteraze (lipaze cnd hidrolizeaz lipide, ribonucleaze cnd
hidrolizeaz fosfoesteri);
glicozidaze (cnd scindeaz prin hidroliz legturi glicozidice);
peptidaze (cnd scindeaz prin hidroliz legturi peptidice).

8.3.4. LIAZE

Sunt enzime care catalizeaz reacii de scindare a unor legturi
chimice n absena apei sau procese de oxido-reducere. Liazele pot
determina ruperea urmtoarelor legturi:
legtura C C (cele mai importante sunt decarboxibazele, care
catalizeaz eliminarea CO
2
de pe substrat);
legtura >C=O (cele mai importante sunt aldolazele care
determin scindarea compuilor carbonilici);
legtura C - N.

8.3.5. IZOMERAZE

Sunt enzime care catalizeaz izomerizarea diferitelor substraturi
biologice. Ele pot contribui la transformarea aldozelor n cetoze i invers,
a formelor ceto-enolice etc.

8.3.6. LIGAZE

Sunt enzime care catalizeaz reacii de sintez, formarea de noi
legturi. Formarea noilor legturi se face cu consum de energie, motiv
pentru care reaciile catalizate de ligaze sunt cuplate cu reaciile de
scindare a unor compui macroergici (ATP).
Aceste enzime pot cataliza:
formarea legturii C - C (carboxilazele prin cataliza reaciilor de
introdu-cere a unei molecule de CO
2
n molecula altor substane);
formarea legturii C - S (sunt enzime care sintetizeaz
formarea acil-coenzimei A plecnd de la acizii carboxilici prin
mecanismul:
RODICA ANA PUN

72

Numele acestei enzime: Acetil - CoA sintetaz.
Studiul enzimelor - enzimologia s-a dezvoltat foarte mult n ultimele
decenii, numrul enzimelor cunoscute depind 2000 fa de 10 - 15
enzime n 1920.
n organism alturi de enzimele bine individualizate i localizate se
gsesc sisteme enzimatice sau complexe multienzimatice care catalizeaz
reacii succesive sau cuplate.
n organismele vegetale exist i substane, care sunt factori
coenzimatici (ndeplinesc rolul de coenzime) sau sunt activatori
enzimatici, cum sunt vitaminele.

REZUMAT:

Enzimele sunt proteine specializate in cataliza reaciilor biologice.
Unele enzime sunt proteine simple, altele sunt conjugate coninnd ca
grupri prostetice ioni metalici, coenzime sau ambele. n reaciile cata-
lizate de enzime creterea concentraiei de substrat produce creterea
vitezei de reacie pn la un punct dup care viteza de reacie devine
independent de concentraia substratului. Relaia cantitativ ce red
acest lucru este dat de ecuaia Michaelis - Menten. Enzimele se clasific
n funcie de reacia pe care o catalizeaz in: oxidoreductaze, transferaze,
hidrolaze, liaze, izomeraze i ligaze. Coenzimele i gruptile prostetice
servesc ca purttori intermediari ai gruprilor funcionale specifice, ai
atomilor sau ai electronilor.

NTREBRI:
8.1. Care este diferena dintre o recie catalizat de un catalizator
chimic i una catalizat de o enzim?
8.2. Ce este situsul activ al unei enzime?
8.3. Explicai de ce reaciile enzimatice necesit o temperatur
optim i un pH optim?
8.4. Care este semnificaia termenului de coenzim?
8.5. Care atom n NAD
+
i NADP
+
este responsabil de sarcina
pozitiv?
BIOCHIMIE

73
BIBLIOGRAFIE

8.1. Galben T., Enache Aurelia, Curs de chimie i biochimie
vegetal, Lito, I.A.N.B., 1986.
8.2. Lehninger A.I., Biochimie, Ed. Tehnic, 1987.
8.3. Leslie, Neal A., Chemistry and Biochemistry a Comprehensive
Introduction, Mc Graw-Hill, SUA, 1971.
8.4. Meister A., Advances in Enzymology, Academic Press, New York,
1973.
8.5. Plowman K., Enzyme Kinetics, Mc Graw-Hill, New York, 1972.

RODICA ANA PUN

74
Capitolul 9

VITAMINE


CUVINTE CHEIE:
- vitamine
- avitaminoz
- acid ascorbic
- tiamin
- riboflavin
- piridoxalfosfat

OBIECTIVE:
- descrierea unor vitamine hidrosolubile i liposolubile

Vitaminele sunt substane organice cu rol funcional n concentraii
foarte mici, fiind indispensabile pentru creterea i dezvoltarea
organismelor. Lipsa vitaminelor din alimentaie provoac tulburri grave
ale funcionrii organismului cunoscute sub numele de boli de caren.
Lipsa total a unei vitamine din organism se numete avitaminoz i poate
provoca chiar moartea.

Vitaminele sunt sintetizate de organismele vegetale, animalele
procurndu-i aceste biocomponente indispensabile din hrana vegetal.
Vitaminele intrnd n constituia multor enzime, sunt substane
bioactive contribuind la reglarea funciilor celulare, fiind componente
eseniale pentru desfurarea metabolismului.
Denumirea de vitamine (amine vitale) dat de ctre Funk acestei clase
de biocomponente i menine n prezent valabilitatea, chiar dac nu toate
vitaminele cunoscute conin azot n molecul, privind importana lor vital.
Nomenclatura vitaminelor se face dup trei criterii:
dup nomenclatura iniial - se denumesc cu ajutorul literelor
mici din alfabetul latin: vitamina A, vitamina C etc;
dup rolul fiziologic pe care l au n organism: vitamina
antixeroftalmic (vit. A), antiscorbutic (vit. C);

BIOCHIMIE

75
dup structura chimic: tiamina (vitamina B
1
), acidul ascorbic
(vitamina C).
Sub aspect chimic vitaminele sunt o clas de substane foarte
heterogene. Clasificarea vitaminelor s-a fcut dup solubilitatea lor n ap
i solveni organici n:
vitamine hidrosolubile;
vitamine liposolubile.


9.1. VITAMINE HIDROSOLUBILE

Din aceast clas fac parte complexul de vitamine B, vitamina C,
vitamina PP, acidul pantotemic, biotina etc. Cu excepia vitaminei C,
majoritatea vitaminelor hidrosolubile intr n structura unor coenzime.
Vitamina C a fost numit i antiscorbutic, lipsa acestei vitamine n
alimentaia omului producnd o dereglare metabolic ce duce la boala
denumit scorbut. Din punct de vedere chimic este gamalactona unui acid
hexoic. Se numete i acid ascorbic dei are gruparea carboxil blocat de
legtura lactonic. Are n structur o secven enoldiolic care prin
tendina marcat de a trece n gruparea dicetonic, i imprim proprieti
reductoare pronunate.
Caracterul acid al vitaminei este determinat de legtura enoldiolic i
de atomii de hidrogen de la gruprile enolice, care se disociaz cu
uurin i pot fi nlocuii cu metale dnd natere la sruri. Vitamina C are
o structur furanozic ce i imprim o mai mare reactivitate. Mecanismul
aciunii reductoare este:

RODICA ANA PUN

76

Reacia fiind reversibil, acidul ascorbic i acidul dehidroascorbic
funcioneaz ca un sistem redox, avnd un rol esenial n reglarea
potenialului de oxido-reducere din celule.
Vitamina C este cea mai rspndit vitamin din natur.
Se gsete n aproape toate plantele. n cantiti mari se afl n nuci
verzi (pn la 900 mg acid ascorbic/100g), n ardei verzi (pn la 200 mg/
100g), ptrunjel (150mg/100g), fructe citrice (40mg/100 g), coacze negre
(300 mg/100g). Pentru omul adult doza zilnic este de 35-70 mg, fructele
i legumele proaspete fiind considerate sursele principale de vitamina C
pentru alimentaie.
Vitamina B
1
se mai numete tiamin. Sub form de tiaminpirofosfat
(TPP) face parte ca i coenzim din structura carboxilazei. Vitamina B
1

este un factor nutritiv foarte important, carena n aceast vitamin ducnd
la tulburri ale sistemului nervos, la boala beri - beri. Este o vitamin larg
rspndit n plante.
n cantitate mare se afl n seminele cerealelor (0,2 - 0,4 mg/100g) i
leguminoase (0,2 - 0,4 mg/100g), n flori, n polen, n drojdia de bere
(5 - 25mg/100 g).
Pentru adult necesarul de vitamina B
1
este de 0,3 - 5 mg/zi.
Vitamina B
2
se mai numete riboflavin. Sub form de FAD face
parte ca i coenzim din structura oxidoreductozei (dehidrogenazei),
contribuind la reaciile de oxido-reducere. Stimuleaz creterea
organismelor tinere, participnd la procesele de fotosintez, la degradarea
oxidativ a unor biocomponente. n cazuri de avitaminizare organismele
au o slab rezisten la infecii, se produce cderea prului. Coninutul B
2

se gsete n semine germinate, n esuturile verzi ale plantelor.
Vitamina B
6
are drept form activ piridoxalfosfatul care ndeplinete
rolul de coenzim al transaminazelor i decarboxilazelor. La om strile de
avitaminoz se manifest prin inflamaii ale epidermei, tulburri cardiace
i de cretere i nevroz.
Cantitatea de vitamina B
6
din plantele ierboase variaz ntre 8 - 19 g/g.


9.2. VITAMINE LIPOSOLUBILE

Vitaminele liposolubile sunt biocomponente solubile n grsimi, n
solveni organici i insolubile n ap. Din aceast grup fac parte:
BIOCHIMIE

77
vitamina A, vitamina D, vitamina E, vitamina K i vitamina F.
Vitamina A se mai numete retinol sau vitamin antixeroftalmic. Ea
se afl sub form de provitamin (carotenoide) n legume i fructe (n
special n morcov, spanac). Vitaminele A au un rol important activator n
creterea organismelor tinere i la om n procesul vederii. Avitaminoza A
poate duce la tulburri oculare i chiar la pierderea vederii.
Vitaminele D sunt substane care deriv de la steroli; dup natura
sterolilor se cunosc mai multe vitamine notate D
2
, D
3
... D
7
. Vitamina D
2

se obine prin iradierea prin ultraviolete a ergosterolului.
Vitaminele D au un rol fiziologic important: ele favorizeaz absorbia
calciului (Ca
2+
) i fosforului (PO
4
3-
) ajutnd la formarea sistemului osos.
n avitaminoza D apare rahitismul la copii i osteoporoza la aduli (din
acest motiv ele se mai numesc i vitamine antirahitice). Produsele vege-
tale sunt srace n vitamina D, cu excepia unor ciuperci i a boabelor de
cacao.
Vitaminele F se mai numesc i vitamine antidermatitice (avitaminoza
determin dereglri metabolice la nivelul pielii). Vitaminele F sunt
formate dintr-un amestec de acizi grai eseniali (acizi grai cu dou i
mai multe duble legturi sintetizai numai de plante). Rolul lor n
organismul uman este acela de a fi antioxidani, protejnd enzimele, alte
vitamine de ageni oxidani.
Acizii grai eseniali stimuleaz nmulirea celulelor, intervin n
metabolismul colesterolului putnd preveni astfel arteroscleroza. n
situaii de avitaminoz apar dereglri n funcionarea pielii.
Acizii grai eseniali se gsesc n cantitate mai mare n seminele
oleaginoase.


REZUMAT:

Vitaminele sunt substane organice care n cantiti foarte mici sunt
eseniale pentru via dar care nu pot fi sintetizate de unele organisme i
trebuie obinute din surse exogene. Vitaminele se clasific n
hidrosolubile i liposolubile. Cele mai multe vitamine hidrosolubile sunt
componente necesare ale unor coenzime importante pentru cile
metabolice centrale. Vitaminele liposolubile par s nu aib rol de
coenzime, ci indeplinesc alte funcii importante.

RODICA ANA PUN

78

NTREBRI:

9.1. Care sunt vitaminele liposolubile?
9.2. Explicai proprietile reductoare ale vitaminei C.
9.3. Care sunt denumirile, dup rolul fiziologic pe care l au, al unor
vitamine liposolubile?

BIBLIOGRAFIE:

9.1. Dyke, S.F., The Chemistry of the Vitamins, Interscience, New York,
1965.
9.2. Neamu Gavril, Biochimie alimentar, Ed. Ceres, 1997.

BIOCHIMIE

79

PARTEA A IIA


METABOLISMUL
VEGETAL


Metabolismul este caracteristica fundamental i exclusiv a
organismelor vii. Numai organismele vii, ca sisteme termodinamice
deschise, au capacitatea de a se hrni cu substane din mediul
nconjurtor, de a se dezvolta i reproduce eliminnd o serie de produi n
mediul nconjurtor. Totalitatea transformrilor biochimice i energetice
ce au loc n organismele vii poart numele de metabolism. Metabolismul
se caracterizeaz deci printr-un schimb nentrerupt de materie, energie i
informaie ntre materia vie i mediul ambiant.
Dup modul de nutriie organismele vii se clasific n organisme
autotrofe i organisme heterotrofe. Organismele autotrofe i sintetizeaz
ele nsi substanele organice necesare vieii din compui anorganici
(CO
2
, H
2
O), folosind ca surs de energie pentru formarea noilor structuri
(legturi) chimice fie energia luminoas, fie cea chimic. Organismele
heterotrofe nu pot utiliza compuii anorganici (n spe CO
2
ca surs de
carbon) pentru a-i sintetiza substanele organice vitale. Ele i formeaz
substanele organice proprii numai din compui organici. Energia
eliberat prin reacii de oxido-reducere ale substanelor organice
(procurate din hran), este utilizat de organismele heterotrofe n sinteza
ulterioar a biomoleculelor specifice.
Plantele verzi superioare i inferioare, bacteriile fotosintetizante i
unele microorganisme sunt autotrofe.
Ciupercile, drojdiile, bacteriile nefotosintetizante, plantele parazite i
saprofite, animalele sunt heterotrofe.
Metabolismul este un proces complex format din dou ansamble de
procese opuse: anabolism i catabolism.
Procesele chimice de biosintez a substanelor din organismelor vii
reprezint anabolismul; procesele biochimice de degradare a
substanelor din organismelor vii reprezint catabolismul. Anabolismul i
catabolismul sunt ntr-o strns dependen i unitate.
RODICA ANA PUN

80
Reaciile anabolice se realizeaz cu consum de energie pentru
formarea noilor legturi chimice, fiind deci endergonice. Energia este
furnizat de compusul macroergic ATP. Reaciile anabolice sunt n
general procese de reducere, ceea ce nseamn implicarea coenzimelor n
form redus NADH
2
, NADPH
2
i FADH
2
.
Procesele de biosintez se realizeaz n natur n cea mai mare parte
prin fotosintez i n mic msur prin chemosintez.
Reaciile catabolice, avnd loc prin scindarea (degradarea) unor
legturi chimice, elibereaz energia (procese exergonice). Energia
realizat este stocat sub form de ATP. Reaciile catabolice sunt n
general proese de oxidare, ceea ce nseamn implicarea coenzimelor n
form oxidat NAD+, NADP+, FAD.
Oxidarea celular (respiraia celular) este procesul prin care prin
degradarea substanelor organice se procur energie (pentru organismele
heterotrofe este singura modalitate de procurare a energiei necesare
sintezei biocomponentelor organice, iar pentru cele autotrofe cnd nu este
lumin i fotosinteza nu poate avea loc).
Procesele catabolice opt fi aerobe (oxigenul reprezint acceptorul fial
de electroni n reaciile de oxido-reducere) i anaerobe (acceptorul final
de electroni este reprezentat de diverse molecule organice).
Pentru a uura nelegerea metabolismului vegetal se prezint aceste
dou principale i fundamentale ansamble de procese: fotosinteza i
oxidaia celular i apoi se studiaz separat i sintetic anabolismul i
catabolismul diferitelor biocomponente.
BIOCHIMIE

81
Capitolul 10

FOTOSINTEZA



CUVINTE CHEIE:
- clorofil
- fotofosforilare
- fotoliza apei
- ribulozo5-fosfat
- ciclul Calvin

OBIECTIVE:
- analiza fazei luminoase a fotosintezei
- prezentarea reaciilor din faza obscur a fotosintezei




Fotosinteza este procesul de formare a substanelor organice din
substane anorganice n organismele autotrofe clorofiliene (plante verzi)
cu ajutorul energiei luminoase. Fotosinteza este un proces anabolic
fundamental n natur prin care energia solar este convertit n energie
chimic prin sinteza unor cantiti mari de substane organice, punnd n
libertate oxigen. Aceasta face ca rolul plantelor verzi s fie esenial n
meninerea vieii pe Pmnt.
Fotosinteza are loc n cloroplaste i n zona citoplasmei
nconjurtoare, ele fiind uniti fotosintetizante complete. n cloroplaste se
gsesc pigmenii i sistemele enzimatice care particip direct la
fotosintez. Pigmentul principal este clorofila a, care este singurul
pigment capabil s transforme energia luminoas n energie chimic.
Pigmenii secundari (clorofila b, c i d, flavonoide, carotenoide) cedeaz
energia absorbit de ei clorofilei a. Toate clorofilele absorb fotoni din
spectrul vizibil al luminii datorit structurii lor, respectiv datorit
existenei dublelor legturi conjugate din molecula lor.

RODICA ANA PUN

82
Relaia care exprim n mod global i simplificat faptul c din CO
2
i
H
2
O n prezena clorofilei cu ajutorul energiei solare se produc glucide
(molecule organice) i oxigen este urmtoarea:
energie luminoas
h
6CO
2
+ 6H
2
O C
6
H
12
O
6
+ 6O
2

clorofil

Desfurarea procesului de fotosintez se face n dou faze:
faza luminoas (are loc n prezena luminii)
faza obscur (are loc n absena luminii)

10.1. FAZA LUMINOAS A FOTOSINTEZEI

Dup datele actuale n faza luminoas a fotosintezei au loc
urmtoarele procese:
fotofosforilarea ciclic
fotoliza apei i fotofosforilarea aciclic.

Fotofosforilarea ciclic
Prin fotofosforilare sau fosforilare fotosintetic se nelege formarea
ATP-ului din ADP i fosfat anorganic n cloroplaste cu consum de
energie luminoas n prezena unor cofactori (feredoxin, chinone,
citocromi).
Lumina absorbit de clorofil determin eliminarea unor electroni cu
potenial mare de energie. Electronii emii de clorofila excitat sunt
captai de diferite substane (feredoxin, plastochinon) de unde prin
intermediul citocromilor b6 i f se rentorc la clorofil cu un potenial
energetic mai mic.
Energia electronilor excitai expulzai de clorofil este utilizat la
fosforilarea ADP cu H
3
PO
4
pentru formarea ATP. Deoarece dup sinteza
ATP electronii se rentorc pe clorofil procesul este ciclic numindu-se
fotofosforilare (formarea de ATP cu ajutorul luminii) ciclic.
Clorofila ndeplinete n aceast reacie un rol catalitic fotochimic
deoarece clorofila oxidat prin pierderea electronilor va reveni la forma
iniial prin rentoarcerea electronilor.


BIOCHIMIE

83
Schematic mecanismul fotofosforilrii ciclice este urmtorul:



Sintetic fotofosforilarea ciclic nseamn:

h
nADP + nH
3
PO
4
nATP
cloroplaste

Fotoliza apei i fotofosforilarea aciclic
Fotoliza este procesul de descompunere a apei n hidrogen i oxigen
cu ajutorul luminii i al clorofilei. Reacia de fotoliz a fost descoperit de
R.Hill n anul 1937 i demonstrat n 1942 de ctre Ruben. Aceast
reacie se petrece astfel:
clorofila activat (sub aciunea luminii) contribuie la ionizarea apei
n ioni de H
+
i OH
-
ionul de hidrogen este redus prin captarea
unui electron emis de clorofila excitat, hidrogenul atomic format
prin reducere prin intermediul feredoxinei este cedat NADP
+
-ului
cu formarea NADPH+H
+
.
ionul OH
-
este oxidat transformndu-se n ap i oxigen molecular.
Astfel fotosinteza este singurul proces natural ce genereaz oxigen
molecular, vital pentru biosfer.
clorofila oxidat (n urma expulzrii electronilor ce n final au dus
la formarea de NADPH+H
+
) va primi electronii preferenial de la
ionii de OH
-
care iau natere prin ionizarea apei. n aceast secven
are loc i fosforilarea ADP cu formarea de ATP. Deoarece apa este
furnizoarea electronilor care permit revenirea clorofilei oxidate n
*
RODICA ANA PUN

84
forma fundamental, fotofosforilarea este neciclic fiind un proces
prin care energia luminoas este utilizat nu numai la formarea
ATP (ca n fotofosforilarea ciclic) ci i la fotoliza apei cu
formarea de NADPH+H
+
.
Schematic mecanismul fotolizei apei i a fotofosforilrii ciclice este:

Sintetic reacia de fotoliz a apei cuplat cu formarea NADPH
+
H
+
i
a ATP-ului (prin fotofosforilarea neciclic) este:

lumin
H
2
O + NADP
+
+ ADP + H
3
PO
4
O
2
+ NADPH+H
+
+ ATP
clorofil
n ultimile 2-3 decenii s-au adus dovezi c aparatul clorofilian este
compartimentat pe fotosisteme (PS) cu funcii distincte i activitate
succesiv, legate ntre ele prin lanuri de transportori de . Fotosistemul I
(PS I) este format din clorofila a care are maximul de absorbie n jur de
700 nm (notat P700) iar n fotosistemul II (PS II) o clorofil a care are
maximul de absorbie la 680 nm, clorofila b i pigmenii accesorii.
Clorofila b i pigmenii accesorii funcioneaz exclusiv ca i colectori de
energie pe care apoi o transfer clorofilei a, aceasta (P700 i P680) fiind
singurul pigment capabil s converteasc energia luminoas n energie
chimic.
Principiul fundamental al activitii celor dou fotosisteme const n
declanarea unui flux de electroni de pe moleculele unor donori (H
2
O) pe
acceptorii finali (ADP i NADP
+
). Transformrile biochimice din cadrul
PS I duc la fotofosforilarea ciclic i a sintezei NADPH+H
+
.
Transformrile biochimice care au loc n PS II duc la realizarea fotolizei
apei i a fotofosforilrii aciclice (sinteza concomitent de ATP i
NADPH+H
+
). Transportatorii de electroni sunt localizai n membrana
tilacoizilor, deci i etapa luminoas a fotosintezei are loc n tilacoizi.
BIOCHIMIE

85
Produii NADPH+H
+
i ATP formai n faza luminoas a fotosintezei
vor fi utilizai ulterior n faza obscur la biosinteza moleculelor organice.

10.2. FAZA OBSCUR A FOTOSINTEZEI

Clasificarea mecanismului prin care se face n aceast faz fixarea i
transformarea dioxidului de carbon n molecule organice (glucide) a fost
fcut n perioada 1946-1956 de ctre Calvin. S-a constatat c n aceast
faz a fotosintezei pentru parcurgerea reaciilor succesive nu este necesar
participarea luminii (respectiv a clorofilei) ci numai a produilor etapei
luminoase. Conform mecanismului sugerat de Calvin, la plantele din
regiunile temperate (C3), fixarea dioxidului de carbon se face pe esterul
fosforic al ribulozei (ribulozo 5-fosfat) obinndu-se acidul 3 fosfo-gliceric
care este primul compus organic stabil al fotosintezei. Acesta este redus la
aldehida 3-fosfogliceric, o trioz, care apoi printr-un ir de reacii
genereaz prima hexoz sintetizat n fotosintez: fructozo-6 fosfatul i
reface iniiatorul mecanismului ribulozo-5-fosfatul.
Fructozo-6-fosfatul, prima hexoz sintetizat n fotosintez pe de alt
parte se condenseaz parial cu aldehida 3 fosfogliceric genernd printr-o
succesiune de reacii n final ribulozo5fosfatul (iniiatorul fixrii CO
2
)
care face ca acest proces s fie deci ciclic.
Pentru formarea unei molecule excedentare de fructozo-6-fosfat care s
prseasc ciclul trebuie s se fixeze 6 molecule de CO
2
ceea ce nseamn
6 molecule de ribulozo-5-fosfat deci o parcurgere de 6 ori a ciclului.
Ecuaia global a reaciilor ce au loc n faza obscur poate fi redactat
astfel:


Toate echipamentele enzimatice necesare reaciilor din aceast faz a
fotosintezei se gsesc n strom.
Trebuie subliniat faptul c acidul 3-fosfogliceric reprezint substana
de baz din care se formeaz glucidele, lipidele, protidele prin procesul de
fotosintez.
Procesul de formare a glucidelor este deci ciclic, pentru care mai este
denumit i ciclul lui Calvin.


RODICA ANA PUN

86

















Glucidele se formeaz din aldehida-3-fosfogliceric care prin reaciile
de mai sus conduce la fructozo 1,6 difosfat care apoi formeaz alte oze
din unirea crora ulterior se pot forma oligoglucidele i poliglucidele.
Acidul-3-fosfogliceric, prin decarboxilare se transform n acid acetic
care sub form activ va servi la sinteza acizilor grai. Aldehida 3
6
6
6 12
BIOCHIMIE

87
fosfogliceric prin reducere formeaz glicerolul. Astfel din glicerol i
acizi grai se formeaz gliceride (lipide).
Din cetoacizii ce apar n procesul de fotosintez se pot genera prin
aminare reductiv aminoacizi, din care ulterior se vor forma proteinele.
Acest fundamental proces anabolic din plante, fotosinteza, se poate
reda schematic astfel:






REZUMAT:

Fotosinteza este procesul de formare a substanelor organice din
substanele anorganice n organismele autotrofe clorofiliene (plante verzi)
cu ajutorul energiei luminoase. Relaia care exprim n mod global i
simplificat faptul c din CO
2
i H
2
O n prezena clorofilei cu ajutorul
energiei solare se produc glucidele i oxigen este urmtoarea:

energie luminoas
6CO
2
+ 6H
2
O C
6
H
12
O
6
+ 6O
2

clorofil

Desfurarea procesului de fotosintez se face n dou faze: faza
luminoas i faza obscur. n faza luminoas are loc fotofosforilarea
ciclic, fotoliza apei I fotofosforilarea aciclic.
n faza obscur prin ciclul Calvin are loc fixarea CO
2
pe ribulozo-5-
fosfat cu formarea fructozo-6-fosfatului.



RODICA ANA PUN

88
NTREBRI:

10.1. Ce compui din plantele verzi recepioneaz lumina, trecnd n
form excitat?
10.2. Ce se nelege prin termenul de fotofosforilare?
10.3. Ce cale metabolic furnizeaz ribozo-5-fosfatul n fotosintez?
10.4. Care este primul produs stabil al fixrii fotosintetice a CO
2
?
10.5. ATP i NADPH + H
+
sunt produi ai fotofosforilrii. n ce reacii
sunt aceti doi produi utilizai n fotosintez?

BIBLIOGRAFIE:

10.1. Brown, T.H., Le May, H. Burstein, Chemistry the Central
Science, Prentice Hall, New Jersey, 1997.
10.2. Leslie, Neal A., Chemistry and Biochemistry, a comprehensive
introduction, Mc. Graw-Hill, S.U.A., 1971.
10.3. Neamu Gavril, Biochimie vegetal, Editura Ceres 1981.

BIOCHIMIE

89
Capitolul 11

OXIDAREA CELULAR


CUVINTE CHEIE:
- organisme aerobe
- organisme anaerobe
- ciclul Krebs
- lanul respirator
- acetil-coenzima A (CH3-CO-SCOA)

OBIECTIVE:
- trasarea proceselor biochimice din ciclul Krebs
- descrierea mecanismului de degradare n lanul respirator

Prin oxidare celular (respiraie celular) are loc degradarea structurilor
diferitelor biocomponente cu eliberarea energiei chimice din legturile
structurale (energia eliberat este stocat n compusul macroergic ATP). Prin
oxidare celular organismele autotrofe i procur energia necesar
proceselor de biosintez atunci cnd nu este lumin i fotosinteza nu poate
avea loc. Pentru organismele heterotrofe oxidarea celular este singura cale
de obinere a energiei necesare pentru sinteza biocomponentelor specifice;
prin procesele de degradarea substanelor de rezerv (glucide, lipide) luate
din hran se elibereaz energie chimic cu care se formeaz ATP.
Degradarea biocomponentelor se produce de fapt prin reacii de
oxidoreducere, moleculele organice fiind oxidate i transformate n
structuri mai simple, coenzimele trecnd n form redus.
Degradarea biocomponentelor poate avea loc n condiii aerobe sau n
condiii anaerobe. n cazul organismelor aerobe oxidarea biomoleculelor
organice se face pn la CO
2
i ap n prezena oxigenului molecular, avnd
loc transferul atomilor de hidrogen i a electronilor de pe coenzimele reduse
rezultate pn la oxigenul molecular cu formarea moleculelor de ap.
n cazul organismelor anaerobe atomii de hidrogen respectiv
electronii sunt trecui pe o structur acceptor, degradrile avnd loc n
absena oxigenului, deci degradarea nemaifiind avansat pn la CO
2
i
H
2
O (oxidare total). Acesta este motivul pentru care cantitatea de energie
RODICA ANA PUN

90
eliberat n degradrile anaerobe este mult mai mic dect cea obinut
prin degradarea aerob (respiraie).
Prin prezentarea principalelor etape ale oxidrii aerobe se obine
tabloul complet al oxidrii celulare. Astfel ntr-o prim etap glucidele,
acizii grai (obinui din hidroliza enzimatic a lipidelor), aminoacizii
(obinui din hidroliza enzimatic a protidelor) sunt degradai prin ci
specifice pn la acetil-coenzima A (CH
3
CO~SCoA). n continuare
acetil-coenzima A este degradat enzimatic printr-o secven de reacii n
ciclul Krebs (ciclul acizilor tricarboxilici) cu formarea de CO
2
i
coenzime reduse (NADH
+
H
+
i FADH
2
). n ultima etap coenzimele
reduse intr n lanul respirator unde n prezena oxigenului molecular
atomii de H din coenzimele reduse genereaz ap, cu eliberare de energie
ce se stocheaz n ATP. Se vor descrie n acest capitol etapele de
degradare ale acetil-coenzimei A (comune pentru glucide, lipide i
protide) urmnd ca procesele specifice de degradare ale fiecrei clase de
biocomponente pn la acetil-coenzima A s fie prezentate n capitole ce
abordeaz metabolismul biocomponentelor respective.

11.1. CICLUL KREBS

Hans Krebs a stabilit principalele etape ale acestui proces ciclic,
proces ce s-a numit ulterior ciclul Krebs. Acest ciclu mai poart i numele
de ciclul acizilor tricarboxilici deoarece apar acizi tricarboxilici precum
i ciclul acidului citric dup substana implicat n aceste transformri.
Ciclul lui Krebs reprezint unul din procesele biochimice fundamentale
ale tuturor organismelor vegetale i animale. El este reprezentat de o
succesiune de reacii de oxidoreducere, de decarboxilare, de fosforilare,
de hidratare, reacii catalizate de enzime specifice, localizate n
mitocondrii. Degradrile oxidative din ciclul Krebs degaj o cantitate
mare de energie.
Ciclul Krebs este deci ansamblul de reacii biochimice de degradare
a acetil-coenzimei A cu formare de ATP (energie), CO
2
, coenzimereduse
(NADH+H
+
, FADH
2
). Ciclul Krebs (fiind calea comun de degradare a
glucidelor, lipidelor i protidelor precum i generatorul unor precursori n
sinteza altor biocomponente) reprezint o plac turnant a metabolismului.
Secvenele importante din procesul ciclului Krebs sunt urmtoarele:
iniierea ciclului de ctre acidul oxalil-acetic;
condensarea enzimatic a moleculei de acetil-coenzim A cu acidul
BIOCHIMIE

91
oxalil-acetic cu formarea acidului citric;
transformarea acidului citric prin decarboxilri succesive (degajare
de CO
2
) i prin formare de NADH
+
H
+
n succinil coenzim A;
transformarea succenil-coenzimei A printr-un ir de reacii n acid
oxalilacetic cu dezvoltarea de energie (ATP respectiv GDP) i
NADH+H
+
i FADH
2
, nchizndu-se astfel ciclul.
Schematic acest proces se prezint n fig. 11.1.


Ciclul Krebs
RODICA ANA PUN

92
Prin degradarea unei molecule de acetil-coenzima A prin ciclul Krebs
rezult produii ncadrai n schema de mai sus: coenzime reduse
(3 NADH+H
+
i 1 FADH
2
), 2 molecule de CO
2
, i 1 ATP (de fapt GTP
direct din reacie).
tiind c: 1 FADH
2
este echivalent cu 2 ATP.
1 NADH+H
+
este echivalent cu 3 ATP rezult c bilanul energetic al
ciclului Krebs este de 12 ATP. Prin transformrile substanelor din cadrul
ciclului Krebs se elibereaz deci, n mod treptat o cantitate mare de
energie care este necesar permanent proceselor fitologice i biochimice
din organism.
Coenzimele reduse (NADH+H
+
i FADH
2
) trec n ultima etap a
degradrii aerobe, n lanul respirator.


11.2. LANUL RESPIRATOR

Lanul respirator este alctuit dintr-o suit de reacii biochimice al
cror rezultat este formarea apei n organism din oxigenul molecular i
atomii de hidrogen din coenzimele reduse provenite din ciclul Krebs.
Aceste reacii biochimice sunt reacii enzimatice de oxido-reducere n care
au loc att transferul succesiv al atomilor de hidrogen ct i al electronilor
respectivi pe oxigenul molecular. Necesitatea acestor reacii succesive
deriv, din motive termodinamice. n transportul i activarea hidrogenului
un rol important l au dehidrogenazele NAD
+
, NADP
+
, ce trec atomii de
hidrogen pe o flavoprotein cu o coenzim FAD. Electronii sunt
transportai printr-o succesiune de reacii de ctre transportatorii de
electroni la oxigenul atomic cu formarea ionului O
2
-
. De obicei
transportul eletronilor se face de ctre citocromi de la o component la
alta prin scderea potenialului standard de oxido-reducere.
Eliberarea de energie (formarea de ATP) are loc la trecerea atomilor
de hidrogen de pe NADH
+
H
+
pe FAD i la transferul electronilor de pe
citocomul b pe citocomul c i apoi de pe citocomul a pe citocomul a3.
Formarea de ATP (fosforilarea) este n acest caz cuplat cu oxidarea
(transferul electronilor), motiv pentru care acest proces se numete
fosforilare oxidativ.
Pentru ca hidrogenul i oxigenul s reacioneze mpreun trebuie s
fie activai. Activarea acestor elemente se face fie prin nclzire, fie cu
ajutorul biocatalizatorilor. n lipsa enzimelor, hidrogenul i oxigenul nu se
BIOCHIMIE

93
combin la temperatura existent n plante sau animale. Pentru ca aceste
dou elemente s fie activate prin ridicarea temperaturii, ele trebuie
nclzite la aproape 2000C, ceea ce nu se poate realiza n organism;
asemenea temperatur distruge celulele i esuturile i deci ar determina
moartea plantelor. Hidrogenul i oxigenul sunt activai n plante prin
intermediul biocatalizatorilor. Activarea se face cu ajutorul unor sisteme
enzimatice i const n esen n transformarea atomului de oxigen n ion
negativ (O
2
-
) i a atomului de hidrogen n ion pozitiv (H
+
). La unirea
acestor ioni cu formarea molecului de ap, se degaj aceast mare
cantitate de energie.
Schematic, procesele din lanul respirator pot fi prezentate astfel:


Lanul respirator

Importana biologic a fosforilrii oxidative const n aceea c
energia eliberat n procesul de oxidare al hidrogenului se nmagazineaz
n legturile macroergice ale ATP-ului. Hidrogenul de pe substratul
respirator (glucide, lipide, protide) este luat de diferite enzime, este
activat i mpreun cu oxigenul atmosferic, care de asemenea este activat,
RODICA ANA PUN

94
formeaz apa i se degaj o mare cantitate de energie. Acest proces al
respiraiei celulare este localizat n mitocondrii, unde ptrunde oxigenul
molecular.
Schematic, ntregul proces al degradrii aerobe prin oxidare celular
poate fi reprezentat astfel:


Oxidarea celular

Energia care se degaj n cadrul degradrii prin oxidare celular
provine din energia acumulat n substane, n procesul de sintez (n
spe fotosintez). Din energia eliberat numai 40-50% este utilizat n
alte procese de biosintez. Restul energiei este captat sau transformat n
alte forme de energie.


REZUMAT:

Prin oxidare celular are loc degradarea structurilor diferitelor
biocomponente cu eliberarea energiei chimice din legturile structurale
(cu formarea ATP). Degradarea biocomponentelor se produce de fapt
prin reacii de oxidoreducere, moleculele organice fiind oxidate i
transferate n structuri mai simple. Degradarea poate avea loc n condiii
aerobe sau anaerobe. n cazul organismelor aerobe, oxidarea
biomoleculelor organice se face pn la CO
2
i ap n prezena
oxigenului molecular (atmosferic); n cazul organismelor anaerobe
atomii de hidrogen, respectiv electronii sunt trecui pe o structur
acceptor n absena oxigenului. Prin prezentarea principalelor etape ale
BIOCHIMIE

95
oxidrii aerobe se obine tabloul complet al oxidrii celulare. Astfel
ntr-o prim etap glucidele, acizii grai, aminoacizii sunt degradai prin
ci specifice pn la acetil-coenzima A. n continuare, acetil-coenzima A
este degradat enzimatic printr-o secven de reacii ale ciclului Krebs cu
formare de CO
2
, coenzime reduse i energie. n ultima etap coenzimele
reduse intr n lanul respirator unde n prezena oxigenului molecular,
atomii de hidrogen din coenzimele reduse formeaz ap.


NTREBRI:

11.1. n ce unitate a celulei are loc ciclul Krebs i este localizat sistemul
transportor de electroni?
11.2. De ce este considerat ciclul Krebs o plac turnant a
metabolismului?
11.3. Care sunt produii de degradare ai acetil-coenzimeiA n ciclul Krebs?
11.4. Care este importana biologic a foforilarii oxidative n lanul
respirator?

BIBLIOGRAFIE:

11.1. Galben T., Enache Aurelia, Curs de Chimie i Biochimie, Partea II-a,
Biochimie Vegetal, Lito IANB, 1986.
11.2. Lehninger A.I., Biochimie, Editura Tehnic, 1987.
11.3. Wood, W.B., Wilson J.H., Biochemistry A Problem Approch,
Benjamin, California, 1974.

RODICA ANA PUN

96
Capitolul 12

METABOLISMUL GLUCIDELOR




CUVINTE CHEIE:
- biosinteza ozelor
- biosinteza oligoglucidelor
- biosinteza poliglucidelor
- glicoliza
- decarboxilarea acidului piruvic
- fermentaii


OBIECTIVE:
- descrierea principalelor ci de biosintez a glucidelor
- studiul proceselor ce alctuiesc catabolismul glucidelor: glicoliza,
decarboxilarea acidului piruvic, degradrile fermentative ale glucidelor.
Metabolismul este un proces complex format din dou laturi opuse:
anabolismul i catabolismul. Metabolismul ca unitate a dou laturi opuse
ce realizeaz permanent schimbul de substane i energie cu mediul
nconjurtor reprezint sursa micrii biologice, a vieii.



12.1. ANABOLISMUL GLUCIDELOR

Dup cum s-a artat n capitolul 4 din punct de vedere structural
glucidele sunt simple (oze) i complexe (oligoglucide i poliglucide).
Biosinteza acestor biocomponente se va realiza n etape, de la structurile
simple la structurile complexe, n urmtoarea succesiune:
biosinteza ozelor;
biosinteza oligoglucidelor;
biosinteza poliglucidelor.

BIOCHIMIE

97
Biosinteza ozelor
Principala cale de biosintez a ozelor este fotosinteza. La ncheierea
ciclului Calvin se sintetizeaz prima hexoz sub form de fructozo-6-fosfat.
n procesul de fotosintez se sintetizeaz n diverse momente i trioze
(aldehida 3 fosfogliceric), tetroze i pentoze.
O alt cale de biosintez a ozelor ce nu se formeaz direct n procesul
de fotosintez este interconversia. Prin acest proces, care de fapt este un
ansamblu de reacii biochimice, ozele formate n fotosintez se transform
n alte oze. O astfel de interconversie poate fi de tipul izomeriei aldoz-
cetoz, ca de exemplu:

Ozele sintetizate n locul de producere al fotosintezei n cloroplaste
pot fi transportate n alte celule ale plantei lipsite de clorofil unde pot fi
utilizate la alte procese de biosintez ale oligoglucidelor i poliglucidelor.

Biosinteza oligoglucidelor
Oligoglucidele se formeaz n plante din derivai ai ozelor, prin
reacii biochimice care nu necesit lumin. Transformarea ozelor n
oligoglucide se face prin reacii biochimice n prezena unor enzime
specifice. Pentru ca ozele s reacioneze ntre ele, pentru a genera prin
condensare oligoglucide, ele trebuie s fie activate. Activarea se face prin
fosforilare cu formare de esteri fosforici cu ajutorul ATP (acid
adenozintrifosforic) cu formare de derivai nucleotidici cu ajutorul UTP
(acid uridin trifosforic). Derivaii nucleotidici ai ozelor sunt mult mai
reactivi dect esterii fosforici ai ozelor, deoarece au o energie de legtur
mai mare.
Mecanismul de formare al oligoglucidelor este urmtorul: ntr-o
prim faz ozele se fosforileaz iar n etapa a doua esterul format
reacioneaz cu UTP i formeaz UDP-derivat care mpreun cu un nou
ester glucidic formeaz un diglucid.
Zaharoza, cel mai rspndit diglucid, se poate sintetiza chiar n
cloroplaste legat de procesul de fotosintez, fiind astfel primul diglucid
care se formeaz, ct i n esuturile nefotosintetice.
Zaharoza se formeaz din UDP-glucoz i ester fructozo-6-fosforic
sub aciunea uridiltransferazei.

RODICA ANA PUN

98
n plantele superioare zaharoza poate fi format i din UDP-glucoz
i fructoz sub aciunea zaharosintetazei.

Zaharoza prin reacii de transglicozilare (trecerea restului glicozil de pe o
molecul pe alta) i izomerizare poate trece repede n amidon, formnd
amidonul de sintez care se acumuleaz n frunze n timpul fotosintezei.

Biosinteza poliglucidelor
Principalul poliglucid de rezerv al plantelor verzi este amidonul.
Amidonul se formeaz din -glucoz. Biosinteza amidonului din hexoze
se realizeaz prin reacii de fosforilare, izomerizare i transglicozilare.
Acest proces are loc n dou etape: n prima etap se formeaz esterul
glucozo-1-fosforic din glucoz i din celelalte hexoze, iar n etapa a doua
se produce transferul acestui ester la o alt molecul de glucoz, maltoz
sau pe un fragment poliglucidic formndu-se n cele din urm amiloza
(prin legtura 1,4 glicozidic) i amilopectina (prin legturi
1,6-glicozidice) principalele componente ale macromoleculei de amidon.
Enzima care determin formarea legturilor 1,4 glicozidice este o
fosforilaz iar cea care determin formarea legturilor 1,6 glicozidice este
enzima Q.


n plastide biosinteza amidonului se face din UDP-glucoz sub ac-
iunea amidon-sintetazei prin tranglicozilare folosindu-se ca acceptor mal-
toza (sau un triglucid, tetraglucid) realizndu-se astfel creterea progre-
siv a lanului de amiloz.

n mod analog biosintezei amidonului se formeaz prin tranglicozilare
i celelalte poliglucide din plante. Celuloza, principalul poliglucid din
alctuirea esuturilor de rezisten ale plantei se formeaz n reticulul
endoplasmatic neted prin tranglicozilare a UDP-glucoz pe un acceptor
care poate fi de exemplu celobioza.
BIOCHIMIE

99
12.2. CATABOLISMUL GLUCIDELOR

Degradarea glucidelor n organismele vegetale este un proces puternic
exergonic, reprezentnd principala sursa de energie pentru plante.
Componenta de plecare pentru degradarea glucidelor este esterul
glucozo-6-fosfat. El reprezint forma metabolic activ a glucozei.
Acesta este motivul pentru care ntr-o prim etap toate glucidele sunt
transformate prin diverse reacii n glucozo-6-fosfat. Astfel dac are loc
degradarea unor hexoze, acestea prin diferite reacii de izomerizare duc la
formarea glucozo-6-fosfatului.
Dac are loc degradarea oligo i poliglucidelor acestea prin reacii de
hidroliz enzimatic i izomerizri genereaz glucozo-6-fosfatul.
De exemplu amidonul, principalul poliglucid de rezerv, se scindeaz
n final n molecule de glucoz prin hidroliz (sub aciunea enzimelor
numite amilaze).
Glucoza n prezena fosforilazei i a acidului fosforic trece n
glucozo-1-fosfat care sub aciunea fosfoglucomutazei trece n glucozo-6-
fosfat.
Esterul glucozo-6-fosforic se poate degrada n continuare prin mai
multe ci din care cea mai important este degradarea total pn la CO
2

i H
2
O. Oxidarea total a glucidelor poate avea loc n organism n etape
succesive, una anaerob, alta aerob.
Aceste etape sunt:
glicoliza ce transform glucozo 6 fosfatul n acid piruvic
decarboxilarea acidului piruvic cu formare de acetilcoenzima
A (CH
3
COSCoA)
ciclul Krebs
lanul respirator

12.2.1. Glicoliza

Glicoliza este procesul de transformare anaerob a glucozei n acid
piruvic sub aciunea enzimelor.
Transformrile care au loc n procesul de glicoliz au fost studiate de
Embden, Maierhof i Parnas, motiv pentru care glicoliza se mai numete
i calea EMP. Prin glicoliz se realizeaz degradarea oxidativ a glucozei
fr participarea oxigenului.

RODICA ANA PUN

100
Schematic, reaciile enzimatice ale glicolizei sunt urmtoarele:


BIOCHIMIE

101
Dup cum se observ prin marcare n acest proces se formeaz ATP,
care poate fi utilizat direct de ctre celul.
n condiii de anaerobioz, acidul piruvic este redus la acid lactic:
OH

CH3CHCOOH
n condiii de aerobioz are loc degradarea acidului piruvic prin
decarboxilare.


12.2.2. Decarboxilarea acidului piruvic

Aceast reacie are loc sub aciunea unui sistem multienzimatic numit
piruvat decarboxilaz.
Deoarece la reacie particip i coenzima oxidat NAD
+
,
decarboxilarea este oxidativ.
Produsul acestui proces este acetilcoenzima A.

Schematic acest proces se prezint astfel:



Acetilcoenzima A format este degradat n continuare prin ciclul
Krebs, cu formare de CO
2
, NADH+H
+
, FADH
2
i ATP, iar coenzimele
reduse formate att la decarboxilarea oxidativ a acidului piruvic ct i
cele formate n ciclul Krebs intr n lanul respirator fiind oxidate de
oxigenul molecular cu formare de ap i ATP. Aceste procese au fost
descrise la capitolul OXIDAREA CELULAR (Cap. 11).
Dac se nsumeaz ATP-ul format dintr-un mol de glucoz prin
degradare aerob prin procesele descrise mai sus se obine un bilan
energetic de 38 moli ATP/1 mol glucoz.


RODICA ANA PUN

102
Schema general de degradare aerob a glucidelor este:


Degradarea aerob a glucidelor


BIOCHIMIE

103
12.2.3. Degradri fermentative ale glucidelor

Totalitatea proceselor de descompunere a glucidelor de ctre
microorganisme poart numele de fermentaii. Sub aciunea
microorganismelor heterotrofe glucidele se transform n compui cu
molecule mai mici, eliberndu-se energia de legtur. Degradrile
fermentative pot fi de dou feluri:
anaerobe, anoxidative avnd loc fr participarea oxigenului;
aerobe, oxidative avnd loc cu participarea oxigenului.
Dup natura principalelor substane finale care se formeaz se pot
deosebi ca fermentaii anaerobe fermentaiile alcoolic, lactic, butiric i
ca fermentaii aerobe fermentaia acetic i citric.
Indiferent de tipul de fermentaie ntr-o prim etap are loc
degradarea glucozei prin glicoliz pn la acid piruvic. Acesta este
transformat n diveri produi funcie de natura microorganismului
implicat n proces.

Fermentaii anaerobe
a) Fermentaia alcoolic
Prin fermentaia alcoolic se formeaz alcoolul etilic i CO
2
, din
glucide sub aciunea drojdiilor din genul Sacharomyces. Capacitatea
fermentativ a diferitelor organisme care determin fermentaiile depinde
de sistemele enzimatice pe care acestea le elaboreaz. Mecanismul
fermentaiei alcoolice este identic cu cel al glicolizei pn la etapa
formrii acidului piruvic. Acidul piruvic se decarboxileaz enzimatic
trecnd n aldehid acetic care este redus sub aciunea NADH+H
+
la
alcool etilic. Schematic procesul este urmtorul:






n cazul fermentaiei mustului de struguri mai apar ca produse
secundare i alcooli superiori (ex: alcool izobutilic) i unele substane care
determin aroma specific buturilor alcoolice. Fermentaia alcoolic are
numeroase aplicaii practice la fabricarea spirtului din cereale, din cartofi,
la fabricarea berii, a vinului, n prepararea pinii.
decarboxilaz
RODICA ANA PUN

104
b) Fermentaia lactic
Prin acest proces glucidele se transform sub aciunea
microorganismelor n acid lactic. Fermentaia lactic este provocat de
activitatea enzimatic a bacteriilor de tipul Lactobacilus bulgaricus,
Streptococus lactis.
n acest caz acidul piruvic format n glicoliz este redus sub aciunea
NADH
+
H
+
la acid lactic.



n unele plante acidul piruvic poate fi transformat n acid lactic cu
ajutorul glutationului redus.
Fermentaia lactic are aplicaii n industria laptelui, a brnzeturilor.
Acidul lactic format n acest tip de fermentaie inhib dezvoltarea bac-
teriilor de putrefacie motiv pentru care fermentaia lactic este folosit la
prepararea murturilor, la nsilozarea furajelor.


Fermentaii aerobe
a) Fermentaia acetic
n acest caz glucidele, respectiv alcoolul etilic sunt transformate n
acid acetic sub aciunea bacteriilor din genul Acetobacter. Oxidarea trep-
tat a alcoolului etilic la aldehid acetic i apoi la acid acetic se face cu
participarea coenzimelor oxidate NAD
+
care trec n forma redus ce n
prezena O
2
molecular n lanul respirator sunt transformate n ap i
ATP. Schematic acest proces este:



Acest tip de fermentaie este aplicat n procesul de fabricaie a oe-
tului de vin.
BIOCHIMIE

105
Degradrile fermentative se caracterizeaz prin unitate n ceea ce
privete principalele transformri biochimice pn la formarea acidului
piruvic i prin diversitate n ceea ce privete produsele finale obinute.
Sub aspect energetic degradrile fermentative se caracterizeaz prin faptul
c energia acumulat n glucide nu se elibereaz odat, ci treptat pe
parcursul reaciilor intermediare.

REZUMAT:

Principala cale de biosintez a ozelor (anabolismul glucidelor) este
fotosinteza. Ozele sintetizate n locul de producere al fotosintezei n
cloroplaste pot fi transportate n alte celule ale plantei lipsite de clorofil
unde pot fi utilizate la alte procese de biosintez ale oligoglucidelor i
poliglucidelor.
Degradarea glucidelor (catabolismul glucidelor) n organismele
vegetale este un proces puternic exergonic, reprezentnd principala
surs de energie pentru plante. Componenta de plecare pentru
degradarea glucidelor este glucoza-6-fosfatul (forma activ a glucozei).
Oxidarea total a glucidelor poate avea loc n etape succesive, una
anaerob, alta aerob. Acestea sunt: glicoliza, decarboxilarea acidului
piruvic cu formarea acetilcoenzimei A, ciclul Krebs i lanul respirator.
Glicoliza este procesul de transformare anaerob a glucozei n acidul
piruvic, cu formare de ATP, care poate fi utilizat direct de ctre celul. n
condiii de aerobioz acidul piruvic se decarboxileaz sub aciunea
enzimei piruvat decarboxilaz cu formare de acetilcoenzima A, care la
rndul ei intr n degradare n ciclul Krebs i apoi lanul respirator.
Descompunerea glucidelor poate avea loc i sub aciunea
microorganismelor, proces ce poart numele de fermentaie. Degradrile
fermentative pot fi aerobe (fermentaia acetic) i anaerobe (fermentaia
alcoolic, lactic).

NTREBRI:

12.1. Definii noiunile anabolism i catabolism.
12.2. Ce semnific termenul anaerob i aerob?
12.3. Ce coenzime sunt reduse n procesul glicolizei?
12.4. Ce microorganisme determin fermentaia alcoolic? Dar pe cea
lactic?
RODICA ANA PUN

106

BIBLIOGRAFIE

12.1. Dickens F., Randle P.J., Whealan W.J., Carbohydrate Metabolism
and its Disorders, Academic Press, New York 1968
12.2. Lehninger A.I., Biochimie, Editura Tehnic, 1987
12.3. Leslie, Neal A., Chemistry and Biochemistry, a comprehensive
introduction, Mc. Graw-Hill, S.U.A., 1971






BIOCHIMIE

107
Capitolul 13

METABOLISMUL LIPIDELOR




CUVINTE CHEIE:
- gliceride
- malonilcoenzima A
- aldehida 3 fosfogliceric
- lipaze
- Ciclul Lynen


OBIECTIVE:
- descrierea principalelor ci de biosintez a gliceridelor: biosinteza
acizilor grai, biosinteza glicerolului, biosinteza gliceridelor.
- studiul proceselor ce alctuiesc catabolismul gliceridelor:
catabolismul acizilor grai, catabolismul glicerolului.
Lipidele reprezint o clas de substane heterogene, avnd fiecare ci
de metabolizare specific. Totui, acizii grai reprezint un element
structural comun pentru diversele tipuri de lipide, motiv pentru care
descrierea cilor de biosintez i biodegradare ale acestora va acoperi un
segment important din studiul metabolismului lipidelor.
ntruct i n cadrul Biochimiei structurale, din aceast clas au fost
studiate gliceridele, cu larg prezen n organismele vegetale, se vor
prezenta cile de biosintez i biodegradare ale gliceridelor.


13.1. ANABOLISMUL GLICERIDELOR

Gliceridele sunt, din punct de vedere chimic, esteri ai acizilor grai cu
glicerolul. n cadrul anabolismului gliceridelor se vor prezenta deci cile
de formare ale componentelor (acizilor grai i glicerolului) i apoi ale
trigliceridelor.

RODICA ANA PUN

108
13.1.1. Biosinteza acizilor grai
Precursorul n aceste fenomene de biosintez este acetilcoenzima A
care se formeaz n plante n cantitate mare din glucide. Aceasta poate
urma pentru biosinteza acizilor grai dou ci principale:
Calea malonil-coenzimei A, care are loc n sistemele
nemitocondriale din citoplasm motiv pentru care se mai numete
i calea citoplasmatic.
Calea acetil-coenzimei A, care are loc la nivelul mitocondriilor
motiv pentru care se mai numete i calea mitocondrial.
Calea malonil-coenzimei A este specific regnului vegetal, cea a
acetilcoenzimei A regnului animal, motiv pentru care este descris n
continuare calea malonil-coenzimei A. Principalele etape sunt
urmtoarele:
Malonil-coenzima A se formeaz din acetil-coenzima A printr-o
reacie de carboxilare n prezena unui complex enzimatic (cu un
situs enzimatic cu ioni de Mg
2+
i Mn
2+
) i folosind energia
furnizat de ATP

Malonil-coenzima A se condenseaz cu acetil-coenzima A n
prezena unei enzime condensatoare cu formarea unui compus
intermediar instabil, acetil- malonil-COA.

Acetil-malonil-CoA se decarboxileaz sub aciunea malonil
decarboxilazei cu formare de acetoacetil-CoA.

Acetoacetil-coenzima A se reduce sub aciunea NADPH+H
+
cu
formare de hidroxibutiril-coenzima A:

BIOCHIMIE

109
Hidroxibutiril-coenzima A se deshidrateaz sub aciunea
crotonazei cu formarea crotonil-CoA

Crotonil-coenzima A se reduce n prezena NADPH+H
+

transformndu-se n butiril-coenzima A, ceea ce nseamn un
compus cu patru atomi de carbon n molecul.

ButirilCoA reia mpreun cu o molecul de malonil coenzima
A acest ciclu de reacii, la captul lor formndu-se un compus
cu 6 atomi de carbon n molecul.
Biosinteza acizilor grai se produce printr-un proces spiralic, spira
repetndu-se de jumtate minus unu din numrul atomilor de carbon ai
acidului gras sintetizat. Astfel, pentru formarea acidului stearic, acid gras cu
18 atomi de carbon n molecul, succesiune reaciilor n spiral se repet de 8
ori.
Sintetic procesul de biosintez este dat de schema urmtoare:
Schema biosintezei acizilor grai pe calea malonil-CoA
RODICA ANA PUN

110
n plantele superioare, dintre acizii naturali n cantitate mai mare este
sintetizat acidul palmitic. Reacia general, prin parcurgerea a 7 spirale
este urmtoarea:



n plante alturi de acizii grai saturai se gsesc i acizii grai nesaturai
(n plantele oleaginoase), cu una, dou sau mai multe duble legturi n
molecul. Introducerea unei duble legturi n catena saturat a acizilor
grai are loc printr-un proces de dehidrogenare a acidului gras cu
participarea O
2
i NADPH+H
+
.



Mecanismul biosintezei acizilor grai cu mai multe duble legturi
(polienici) este mai puin cunoscut. Biosinteza acestora are loc numai n
organismele vegetale fiind se pare dependent de fotosintez.

13.1.2. Biosinteza glicerolului

n plante glicerolul se formeaz n cantitate mare din aldehida-3-
fosfogliceric prin reducerea cu NADPH+H
+



n sinteza gliceridelor nu se folosete glicerolul n stare liber ci
forma activat, glicerol 3 fosfat.
BIOCHIMIE

111
13.1.3. Biosinteza gliceridelor

Biosinteza trigliceridelor n plante se realizeaz din glicerol-3-fosfat
i acizi grai activai sub form de acid-gras-coenzima A (tioesteri).
Biosinteza gliceridelor se produce n prezena enzimelor i a unor
cofactori Mn
2+
, Mg
2+
, cu consum mare de ATP.




Prin hidroliza acidului fosfatidic se eliberez H
3
PO
4
cu formarea unui
diglicerid. Acesta prin condensare cu o nou molecul de acid-
grascoenzim formeaz trigliceridele, iar prin condensare cu amino-
alcooli (colin, colamin) genereaz glicerofosfolipide (lecitina, cefaline).




Energia necesar biosintezei gliceridelor provine n cea mai mare
parte din degradarea glucidelor.

RODICA ANA PUN

112
13.2. CATABOLISMUL GLICERIDELOR

Prima etap n degradarea gliceridelor este hidroliza acestora sub
aciunea enzimelor numite lipaze, cu formare de acizi grai i glicerol.
Acizii grai i glicerolul rezultai se degradeaz n continuare prin ci
specifice genernd n final CO
2
i H
2
O.

13.2.1. Catabolismul acizilor grai

Catabolismul acizilor grai este un proces exergonic care se
realizeaz att n mitocondrii ct i la nivelul glioxizomilor, a reticulului
endoplasmatic. Prin degradarea oxidativ a acizilor grai, organismele
vegetale i procur energie necesar diverselor procese fiziologice i
biochimice. Degradarea acizilor grai se face prin oxidare; mecanismul
degradrii (ca i al biosintezei) a fost stabilit de ctre F. Lynen (1952).
Conform teoriei -oxidrii, catena liniar a acidului gras este
degradat treptat, prin ruperea succesiv a unui fragment format din 2
atomi de carbon, de fapt acetil-CoA. Procesul oxidativ are loc la nivelul
carbonului fa de gruparea carboxilic, de unde i denumirea dat
acestui tip de degradare.
Procesul de -oxidare se realizeaz printr-o succesiune de reacii de
dehidrogenare, formarea unui hidroxiacid, a unui cetoacid i n final
ruperea unei molecule de acetilcoenzima A cu formarea unui nou acid
gras (activat sub form de acil coenzim A) cu doi atomi de carbon mai
puin dect acidul gras iniial. Acest acid gras (cu Cn-2) intr ntr-o nou
-oxidare, genernd n final o molecul a acetilcoenzimei A i un acid
gras cu 4 atomi de carbon mai puin (dect iniialul cu Cn) i aa mai
departe. Repetarea n spiral a acestui proces se face pn la degradarea
complet a acizilor grai n acetil-coenzima A.
-oxidarea este un proces spiralic care poate fi considerat inversul
procesului spiralic de biosintez a acizilor grai. Acest ciclu de reacii se
numete i spirala acizilor grai sau Ciclul lui Lynen. Degradarea
acizilor grai ncepe printr-un proces de activare al acestora, deoarece
acizii grai saturai sunt din punct de vedere chimic destul de ineri.
Activarea acizilor grai se realizeaz prin combinarea lor cu CoASH, prin
transformarea acidului gras din stare liber n acil-CoA, care este un ester
ce conine o legtur macroergic.
Schematic degradarea acizilor grai poate fi redat astfel:
BIOCHIMIE

113

Ciclul Lynen

Degradarea acizilor grai prin -oxidare este un proces puternic
exergonic. Pentru desprinderea unei molecule gram de acetil-CoA dintr-
un mol de acid gras se formeaz 1 mol FADH2 i un mol de NADH+H+.
Aceste enzime prin oxidare la nivelul mitocondriilor elibereaz o cantitate
de energie echivalent cu 5 moli de ATP. n cazul acidului palmitic de
exemplu care are nevoie de 7 spire de - oxidare se vor forma 35 moli de
ATP. Bilanul energetic va rezulta prin scderea unui mol de ATP utilizat
la activarea acidului gras, el fiind 34 moli ATP. Considernd c acetil-
coenzima A format se degradeaz total prin Ciclul Krebs i lanul
respirator, dintr-o molecul gram de acetil-CoA rezult 12 moli ATP. Din
acidul palmitic formndu-se n final 8 moli de acetilcoenzima A
(8x12=96 ATP), rezult n final degajarea unei energii prin degradarea
total echivalent cu 130 moli ATP (34+96). tiind c energia unei
legturi macroergice din ATP este de 7Kcal, rezult c la degradarea unui
mol de acid palmitic se elibereaz 910 kcal/mol.
Lipidele au deci proprietatea de a depozita energia chimic, fiind
considerate rezerve concentrate de energie ale organismelor vii.
RODICA ANA PUN

114
13.2.2 Catabolismul glicerolului

Forma activ prin care glicerolul format prin hidroliz intr n
degradare este glicerol-3-fosfatul (care se formeaz sub aciunea
fosfokinazei cu ATP). Acesta sub aciunea unei enzime ce conine NAD
+

trece n aldehid-3- fosfogliceric, care prin calea glicolizei genereaz
acid piruvic, care prin ciclul Krebs i lanul respirator se degradeaz cu
formarea de CO
2
i H
2
O.




REZUMAT:

Din clasa lipidelor au fost studiate gliceridele, ele avnd o larg
prezen n organismele vegetale.
Pentru biosinteza gliceridelor trebuie obinute componentele lor:
acizii grai i glicerolul. Biosinteza acizilor grai are drept precursor
acetilcoenzima A. Aceasta urmnd calea malonilcoenzimei A sau a
acetilcoenzimei A printr-un proces spiralic conduce la sinteza moleculei
de acid gras, spira repetndu-se de jumtate minus unu din jumtatea
numrului atomilor de carbon ai acidului gras.
BIOCHIMIE

115
Glicerolul se formeaz din aldehida 3 fosfogliceric prin reducere cu
NADPH+H
+
. Biosinteza trigliceridelor n plante se realizeaz din
glicerol-3-fosfat i acizi grai activai sub form de acid gras-coenzima
A, n prezena unor enzime i a unor cofactori Mn
2+
, Mg
2+
, cu consum
mare de ATP.
Degradarea gliceridelor are ca prim etap hidroliza enzimatic a
lor cu formare de acizi grai i glicerol. n continuare acizii grai i
glicerolul rezultai se degradeaz pe ci specifice genernd n final CO
2

i H
2
O. Degradarea acizilor grai prin -oxidare este un proces puternic
exergonic.
Lipidele au deci proprietatea de a depozita energia chimic, fiind
considerate rezerve concentrate de energie ale organismelor vii.

NTREBRI:

13.1. Scriei ecuaia hidrolizei unui triglicerid.
13.2. Pentru sinteza acidului palmitic de cte ori trebuie s se repete suc-
cesiunea reaciilor n spiral?
13.3. Ce energie se degaj la degradarea unui mol de acid stearic?

BIBLIOGRAFIE:

13.1. Gurr M.I., James A.T., Lipid Biochemistry. An Introduction,
Cornell University Press, N.Y, 1971
13.2. Howyhorne J.N., Ansell G.B., Form and Function of Phospholipids,
ediia a-2-a Elsenier, Londra, 1973
13.3. Leslie, Neal A., Chemistry and Biochemistry, a comprehensive
introduction, Mc. Graw-Hill, S.U.A., 1971
13.4. Neamu Gavril, Biochimie alimentar, Editura Ceres 1997
RODICA ANA PUN

116
Capitolul 14

METABOLISMUL PROTIDIC



CUVINTE CHEIE:
- amoniac
- cetoacizi
- aminare reductiv
- transaminare
- dezaminarea aminoacizilor
- uree
- replicare
- citron
- ribozomi

OBIECTIVE:
- studiul metabolismului aminoacizilor i al amoniacului: biosinteza
aminoacizilor, biodegradarea aminoacizilor, metabolismul amoniacului
- schiarea metabolismului acizilor nucleici: biosinteza AND,
biosinteza ARN
- descrierea biosintezei proteinelor

n organismele vii proteidele reprezint compuii cei mai importani
care funcie de structura lor molecular ndeplinesc un rol multiplu i
complex. Proteinele din organismele vii se rennoiesc permanent avnd o
mare specificitate de specie, organ, esut. Aceasta face ca metabolismul
protidic s fie o sum foarte dinamic de procese anabolice i catabolice.
ntruct structurile protidice sunt ierarhizate de la simplu (aminoacizi,
uniti structurale) la complex (proteine i heteroproteine), studiul
metabolismului lor este structurat astfel:
metabolismul aminoacizilor i amoniacului;
metabolismul acizilor nucleici;
metabolismul proteinelor;


BIOCHIMIE

117
14.1. METABOLISMUL AMINOACIZILOR I AMONIACULUI

Aminoacizii, la fel ca i celelalte substane protidice se sintetizeaz i
se degradeaz n organismele vii n mod continuu.

14.1.1. Biosinteza aminoacizilor

Pentru biosinteza aminoacizilor organismele au nevoie de azot sub
form de amoniac.
Plantele, spre deosebire de animale, pot utiliza azotul anorganic
pentru biosinteza aminoacizilor. Plantele verzi sunt autotrofe att pentru
carbon ct i pentru azot. Biosinteza substanelor proteice din substane
anorganice este o trstur caracteristic plantelor.
Sursele de azot prin care plantele i procur amoniacul sunt sub
diferite forme. Astfel azotul amoniacal (NH
4
+
) este asimilat de plante prin
rdcini din sol, putnd fi utilizat n mod direct, ca generator de NH
3
, la
biosinteza aminoacizilor. Azotul nitric (NO
3
1-
) prezent sub form de
azotai n sol, este una dintre cele mai bine utilizate surse de azot de ctre
plante. Plantele nu pot utiliza azotul nitric sau nitros (NO
2
-
) n mod direct
n biosinteza aminoacizilor. Azotaii i azotiii sunt redui n etape
succesive sub aciunea unui sistem enzimatic specific pn la NH
3
.
Hidrogenul necesar reducerii nitrailor i nitriilor la amoniac este furnizat
de degradarea aerob a glucidelor (sub form de NADH+H
+
i FADH
2
).



Azotaii pot fi luai din soluia solului de ctre plante n cantiti
nerestrictive, putndu-se acumula n esuturi, deoarece spre deosebire de
NH
3
nu este toxic pentru plante.
Azotul molecular (azotul atmosferic) este utilizat numai de ctre anu-
mite specii de bacterii. Procesul de reducere al N
2
la amoniac necesitnd
un consum energetic mare, plantele nu pot utiliza aceast form de azot
dect atunci cnd sunt n simbioz cu bacteriile care pot realiza reducerea
N
2
la NH
3
. Astfel bacteriile simbiotice fixatoare de azot din genul
RODICA ANA PUN

118
Rhizobium pot furniza leguminoaselor pe ale cror rdcini se fixeaz,
amoniac. Mecanismul transformrii azotului molecular n amoniac se face
sub aciunea unui complex enzimatic format dintr-o reductaz i o
nitrogenaz.
Odat furnizat amoniacul, pentru a se sintetiza aminoacizii, este
necesar fixarea lui pe molecule organice pe cetoacizi. Aceti compui
provin n cea mai mare parte din degradarea glucidelor n ciclul Krebs
(acidul piruvic, acidul oxalil acetic, acidul glutaric).
Cile generale de biosintez ale aminoacizilor sunt: aminarea
reductiv a cetoacizilor i transaminarea. Aminarea reductiv a
cetoacizi este calea prin care se formeaz n organism majoritatea
aminoacizilor. Principalii cetoacizi ce contribuie la biosinteza
aminoacizilor sunt acidul piruvic, acidul oxalilacetic i acidul glutaric.
Aminarea reductiv a acestor cetoacizi a fost pus n eviden la animale,
n coleoptilele de gru, porumb, mazre, dovleac, n numeroase
microorganisme. Enzimele care catalizeaz aceste reacii au fost de
asemenea puse n eviden n numeroase bacterii, plante superioare.
n procesul aminrii reductive directe apare ca substan intermediar
un iminoacid instabil. Mecanismul simplificat al acestui proces este
urmtorul:





n mod particular se vor forma:

BIOCHIMIE

119


Acidul aspartic i acidul glutamic formai prin aminare reductiv direct,
au un rol esenial n formarea celorlali aminoacizi prin transaminare.
Transaminarea, a doua cale principal de biosintez a aminoacizilor,
este o reacie catalizat de enzime specifice (transaminaze) prin care
gruparea amino (-NH
2
) de pe un aminoacid este transferat pe un
-cetoacid cu formarea unui nou aminoacid i a altui cetoacid.
Transaminazele sunt localizate att n mitocondrii ct i n sucul
citoplasmatic, reaciile de transaminare fiind reversibile.
Mecanismul acestui proces este urmtorul:

Ca donatori principali de grupri aminice sunt acidul glutamic i
acidul aspartic (i amidele lor) iar ca acceptori sunt acizii -cetoglutaric,
oxalil acetic i piruvic. Astfel prin transaminare acidul piruvic genereaz
alanina, acidul oxalil acetic genereaz acidul aspartic.
Aminoacizii se pot forma n organism att prin ci generale, comune
majoritii aminoacizilor, ct i prin reacii specifice, caracteristice numai
anumitor aminoacizi.
Plantele pot sintetiza toi aminoacizii. Aminoacizii eseniali sunt
sintetizai numai de ctre plante, animalele neputndu-i sintetiza i-i
procur din hrana vegetal.
RODICA ANA PUN

120
14.1.2. Biodegradarea aminoacizilor

Aminoacizii liberi din organismele vegetale provin fie din procesele
de biosintez (acetia sunt n cantitate mic deoarece preponderent
aminoacizii sintetizai sunt utilizai la sinteza proteinelor i a altor
compui cu azot), fie prin hidroliza proteinelor. Aminoacizii se pot
degrada parial sau total. Prin degradarea parial se obin unele substane
cu un rol important n organism, iar prin degradarea total a aminoacizilor
se obin CO
2
, H
2
O, NH
3.
Procesele de degradare ale aminoacizilor sunt
mai intense n perioadele cu metabolism alert (ex. n timpul germinaiei).
Cile de degradare ale aminoacizilor pot fi generale (valabile pentru
toi aminoacizii) sau specifice (valabile numai pentru anumii amioacizi).
Cile generale de degradare ale aminoacizilor sunt: dezaminarea,
decarboxilarea i transaminarea.
Dezaminarea aminoacizilor este procesul de nlturare a gruprii
aminice din molecula aminoacizilor cu formare de amoniac i substane
organice. Amoniacul format este blocat sub form de amide, iar
substanele organice formate vor fi utilizate fie n diverse alte biosinteze
fie vor fi degradate prin ci specifice claselor din care fac parte.

Dezaminarea aminoacizilor poate fi:
dezaminarea oxidativ cu formarea de NH
3
i un cetoacid:

dezaminarea reductiv cu formarea de NH
3
i a unui acid carboxilic
saturat:

dezaminare hidrolitic cu formarea de NH
3
i a unui hidroxiacid:

BIOCHIMIE

121
dezaminarea intramolecular sau desaturant cu formarea NH
3
i a
unui acid nesaturat:

n plantele superioare predomin dezaminarea oxidativ, iar la
ciuperci i unele bacterii cea hidrolitic i reductiv.
Decarboxilarea aminoacizilor este procesul prin care prin eliberarea
CO
2
iau natere amine. Aceste amine au un rol biologic important, ele
numindu-se amine biogene sau proteinogene.
Sub aciunea enzimelor aminoaciddecarboxilaze are loc urmtoarea
reacie, prezentat simplificat i general:

Aminele biogene care se formeaz n organism prin decarboxilarea
aminoacizilor, fie vor fi utilizate la biosinteza altor aminoacizi i compui
azotai, fie se vor oxida genernd n special aldehide i acizi.
Aminele nebiogene care se formeaz n cantitate mare n natur prin
putrezirea substanelor proteice sub aciunea microorganismelor,
determin mirosul substanelor proteice care putrezesc.
Transaminarea aminoacizilor a fost prezentat ca o cale de biosintez
a aminoacizilor. Ea poate fi i o cale de degradare a aminoacizilor fiind un
mecanism important n interrelaiile dintre aminoacizi i glucide.

14.1.3. Metabolismul amoniacului

Amoniacul poate proveni n organism fie din sursele prezentate la
biosinteza aminoacizilor (din NH
4
+
, din NO
3
-
i NO
2
-
, din N
2
) fie prin
dezaminarea aminoacizilor i a altor substane ce conin azot (amine,
amide, baze azotate). Amoniacul este o substan toxic pentru
organismele vii. Acesta este motivul pentru care, dac nu este folosit n
procesele de biosintez, trebuie captat i pstrat n organism sub form de
substane netoxice pentru plante (sruri de amoniu, glutamin,
asparagin).
RODICA ANA PUN

122
n organismele care au un coninut ridicat de acizi organici (acid
oxalic, acid citric, acid malic) amoniacul va forma prin reacia de
neutralizare srurile de amoniu respective.
n majoritatea organismelor detoxifierea celulelor i a esuturilor de
amoniac se face cu ajutorul acidului glutamic i aspartic, cu formarea
amidelor respective glutamina i asparagina. Formarea acestor amide se
realizeaz cu consum mare de energie, sub aciunea enzimelor specifice.
Simplificat procesul de blocare a amoniacului sub form de amide este:


Asparagina i glutamina se gsesc n toate organismele vegetale.
Cnd organismele au nevoie de amoniac se produc intens reaciile de
hidroliz ale asparaginei i glutaminei.
La unele plante superioare i n special la ciuperci ca i la animale
amoniacul este captat sub form de uree:

Ureea constituie i ea (mai ales atunci cnd plantele conin cantiti
mari de glucide) o surs de azot n biosinteza aminoacizilor, elibernd
prin hidroliza enzimatic NH
3
necesar.
BIOCHIMIE

123
14.2. METABOLISMUL ACIZILOR NUCLEICI

Acizii nucleici sunt substane polinucleotidice, coninnd n molecula
lor baze azotate (pirimidinice i purinice), pentoze (riboz sau
deoxiriboz) i acizi fosforici. Acizii nucleici iau parte n organism la
biosinteza proteinelor, transmiterea caracterelor ereditare, apariia
variaiilor. Studiul metabolismului acizilor nucleici este foarte complex,
fiind necesar studiul metabolismului fiecrei componente structurale.
Metabolismul bazelor azotate cuprinde totalitatea reaciilor de
biosintez i biodegradare a bazelor pirimidinice i purinice. Astfel,
bazele pirimidinice se sintetizeaz n organism din amoniac, CO
2
i acid
aspartic printr-o succesiune de reacii catalizate de enzime specifice.
Sinteza de nucleotide se face prin combi- narea bazelor pirimidinice libere
(provenite i din catabolism) cu fosforiboza cu formarea n prima etap a
unui nucleozid care apoi prin fosforilare (sub aciunea kinazelor)
genereaz un nucleotid.
Degradarea bazelor pirimidinice se face i ea printr-o succesiune de
reacii cu formarea de substane cu structuri mai simple. Produii finali de
degradare ai bazelor pirimidinice sunt CO
2
, NH
3
, alanina, ureea.
Biosinteza bazelor purinice se face din componente simple ca CO
2
, NH
3
,
glicerol. Bazele purinice pot suferi n organism reacii de interconversiune
reciproc (adenina se transform n guanin i invers). Biodegradarea bazelor
purinice se face prin reacii de dezaminare i oxidare n substane mai simple
ce sunt ntrebuinate ulterior n diverse secvene anabolice.
n biosinteza acizilor nucleici bazele purinice i pirimidinice se comport
diferit. Bazele purinice se ncorporeaz libere n molecula acizilor nucleici i
nu sub form de nucleozide sau nucleotide ca bazele pirimidinice.
Ribonucleotidele i respectiv ribonucleozidele cu baze azotate
purinice, sub influena unui sistem enzimatic ce cuprinde NADH+H
+
i o
reductaz specific, i pot transforma riboza n deoxiriboz, formndu-se
deoxiderivai.

14.2.1. Biosinteza ADN

Formarea lanului polinucleotidic de ADN are loc sub aciunea
enzimei ADN-polimeraz, din toate cele patru mononucleotide
(deoxiadenozin trifosfat, deoxiguanozin trifosfat, deoxitimidin trifosfat,
deoxicitidin fosfat) i dintr-un lan polinucleotidic de ADN, numit model
RODICA ANA PUN

124
sau starter n prezena ionilor Mg
2+
. Energia necesar reaciei este dat
de ruperea legturilor macroergice din deoxinucleotid trifosfat. Sub
aciunea enzimelor specifice deoxiribonucleotidele trifosforilate se leag
ntre ele rezultnd lanul polinucleotidic.
tiind c structura ADN este dublu helicoidal, rezult c ADN-ul
iniial este desfcut n lanuri separate i la acestea se fixeaz bazele
corespunztoare din mediul de reacie, pe baza principiului
complementaritii. Biosinteza ADN are deci loc prin replicare sau
duplicare, fiind deci un proces de biosintez conservativ. Cele dou
catene polinucleotidice separate devin fiecare matrie pentru biosinteza
unor catene noi, dictnd ordinea n care se succed deoxiribonucleotidele
n catenele noi formate. Dintr-o molecul ADN model se formeaz dou
noi molecule de ADN, dup mecanismul din figura urmtoare:

Replicarea semiconservativ a ADN-ului

S-a constatat c desprinderea se produce treptat, pe poriuni limitate.
Sinteza lanurilor replic decurge concomitent i n aceeai direcie.
Din punct de vedere chimic formarea noului lan polinucleotidic se
realizeaz prin formarea de legturi fosfodiesterice. Gruparea OH de la
atomul de carbon 3 al deoxiribozei se continu cu acidul fosforic de la C5 al
deoxiribozei altui mononucleotid liber, mrindu-se astfel treptat lanul
BIOCHIMIE

125
polinucleotidic. La ncheierea biosintezei se produce spiralarea n jurul
axei a fiecrui lan nou de ADN, obinndu-se structura bicatenar.

14.2.2. Biosinteza ARN

Biosinteza celor trei tipuri de ARN (ARN mesager, ARN ribozomal
i ARN de transfer) are loc prin replicarea unor secvene de ADN, pe baza
mecanismului bazelor complementare i a unor enzime specifice (ARN-
polimeraz). Mecanismul prin care ADN-ul dirijeaz biosinteza ARN-ului
nu este deplin cunoscut. ADN-ul care joac rol de matri n sinteza
ARN-ului, ADN-ul activ, este cel care realizeaz transferul informaiei
genetice la molecula nou de ARN, dictnd secvena nucleotidelor.
Biosinteza ARNm ncepe prin recunoaterea de ctre ARN-polimeraz pe
una din catenele ADN activ a punctului de iniiere. Are loc desprinderea
ADN i desfacerea celor dou catene.
n acest moment, enzima realizeaz noul lan poliribonucleotidic cu
ribonucleotidele din nucleu. Cnd ARN-polimeraz a atins zona de
terminare a lanului de transcriere, lanul de ARNm se desprinde de
catena matri de ADN, trecnd n citoplasm.

Biosinteza ARN pe matria ADN
RODICA ANA PUN

126
Mecanismul prin care AND-ul dirijeaz biosinteza nc nu este
cunoscut. Se pare c histonele i proteinele cu caracter acid legate
puternic de molecula de ADN (proteine reziduale) s aib un rol nsemnat
n biosinteza ARN. Declanarea i ncetarea biosintezei ARN-ului s-ar
datora unei secvene specifice nucleotidelor, recunoscut de
ARN-polimeraz, fie datorit unei conformaii structurale a moleculei de
ADN.
n ARN-ul rezultat prin mecanismul de mai sus, raportul A+U/G+U
este egal cu raportul A+T/G+C din poriunea de ADN replicat.
Celelalte tipuri de ARN au loc dup acelai mecanism, diferind numai
poriunile din catenele de ADN unde are loc codificarea.

14.3. BIOSINTEZA PROTEINELOR

Biosinteza proteinelor se face printr-un mecanism complex, rolul
principal revenindu-le acizilor nucleici. Proteinele nu pot lua natere din
aminoacizi liberi prin inversarea reaciei de proteoliz.
ADN-ul este cel care determin specificitatea proceselor de sintez ale
proteinelor n celul, precum i particularitile de cretere, difereniere i
morfogenez. Biosinteza fiecrei proteine depinde de un anumit segment din
molecula de ADN care poart numele de gen. Teoria aceasta a fost
completat, actualmente folosindu-se noiunea de cistron, ca o subunitate a
genei. O gen este reprezentat de un lan cistronic. Totalitatea posibilitilor
de biosintez a proteinelor pe care la are o celul se numete genotipul acelei
celule. Caracteristicile unei proteine (funcionale i structurale) sunt deter-
minate de secvena aminoacizilor si. Poziia unui aminoacid n lanul poli-
nucleotidic al proteinei este determinat de o anumit succesiune a trei
nucleotide din molecula ADN-ului, ce poart numele de codon.
O secven de aminoacizi este deci determinat de ordinea codonilor
din ADN. Modificarea codonilor din ADN poart numele de mutaie i ea
va determina schimbarea secvenei de aminoacizi din lanul polipeptidic,
formndu-se astfel o protein mutant. n prezent se cunoate codonul
tuturor celor 20 de aminoacizi prezeni n mod curent n proteine.
Deoaece n molecula acizilor nucleici intr patru tipuri de nucleotide, din
care numai trei determin poziia unui aminoacid, rezult c exist 4
3
=64
de posibiliti de localizare a celor 20 de aminoacizi. Existnd mai muli
codoni dect numrul aminoacizilor, rezult c mai muli codoni pot
determina poziia unui aminoacid.
BIOCHIMIE

127
Exemplu:
Alaninei i corespund codonii: GCU, GCC, GCA, GCG.
Fenilalaninei i corespund codonii: UUC, UUC.
Lizinei i corespund codonii: AAA, AAG.
Metioninei i corespund codonii: AUG.
Exist, de asemenea, unele triplete ce nu corespund nici unui
aminoacid, numite codon nonsens. Acetia se pare c ntrerup sinteza
lanului polipeptidic. Totalitatea codonilor din molecula de ADN
formeaz codul genetic.
n procesul de biosintez al moleculelor proteice se disting dou
aspecte importante:
transcrierea mesajului genetic de la ADN la ARN
m
traducerea
(translaia) mesajului genetic din ARN
m
n secvena aminoacizilor
din lanul peptidic.
Biosinteza proteinelor se produce n ribozomii activi, adic n
ribozomii care conin pe lng ARN
r
i ARN
m
. Fiecare ribozom activ
sintetizeaz o protein specific, fiecrei gene corespunzndu-i n celul
ribozomul su. Transcrierea mesajului genetic are loc n nucleu, respectiv
n mitocondrii i cloroplaste.
Procesul de biosintez al proteinelor cuprinde urmtoarele etape:
activarea aminoacizilor sub aciunea ATP-ului i a unor enzime
specifice (n numr de 20) prin formarea unui complex aminoacil-
enzim, cu participarea ARN
t
ce conine o secven numit anticodon
cu care este recunoscut de enzim;
transportul aminoacizilor activai de ctre ARN
t
pn la polizomi i
ribozomi unde va avea loc efectiv sinteza proteinelor. S-a determinat
experimental faptul c fiecrui aminoacid care intr n structura
proteinelor i corespunde n citoplasm un ARN
t
specific;
stabilirea secvenialitii aminoacizilor i formarea lanului polipeptidic.
Acum se realizeaz traducerea mesajului genetic (ordinea
aminoacizilor), determinat de ARN
m
prin codonii si (adic secvena
nucleotidelor din ARN
m
determinat de fragmentul de ADN pe care s-a
format).
desprinderea proteinei formate, molecula proteic consolidndu-i
structura secundar, teriar, quaternar;
formarea proteidelor prin ataarea gruprilor prostetice respective
la moleculele proteice sintetizate.

RODICA ANA PUN

128
Schematic sinteza proteinelor se prezint astfel:

Schema biosintezei proteinelor

Biosinteza proteinelor este un proces puternic endergonic. Reglarea
biosintezei substanelor proteice se realizeaz la nivelul formrii ARNm
i n ribozomi.

REZUMAT:

Structurile protidice sunt ierarhizate de la simplu (aminoacizi, uniti
structurale) la complex (proteine i heteroproteine). Pentru aceasta studiul
metabolismului lor este structurat astfel: metabolismul aminoacizilor i
amoniacului, metabolismul acizilor nucleici i metabolismul proteinelor.
Pentru biosinteza aminoacizilor organismele au nevoie de azot sub
form de amoniac. Plantele spre deosebire de animale pot utiliza azotul
anorganic pentru biosinteza aminoacizilor. Sursele de azot prin care
plantele i procur amoniacul sunt: azotul amoniacal (NH
4
+
), azotul
nitric (NO
3
-
), azotul molecular (N
2
, azotul atmosferic). n continuare cile
generale de biosintez ale aminoacizilor sunt: aminarea reactiv a
cetoacizilor i transaminarea. Plantele pot sintetiza toi aminoacizii.
Degradarea aminoacizilor poate fi parial sau total. Prin
degradare parial se obin unele substane cu un rol important n
organism, iar prin degradarea total a aminoacizilor se obin CO
2
, H
2
O,
BIOCHIMIE

129
NH
3
. Cile generale de degradare ale aminoacizilor sunt: dezaminarea,
decarboxilarea, transaminarea. Prin dezaminarea aminoacizilor i a
altor substane ce conin azot se genereaz amoniac. Amoniacul este o
substan toxic pentru organismele vii. Excesul de amoniac care nu este
folosit n procesul de biosintez este captat i pstrat n organism sub
form de substane netoxice pentru plante: sruri de amoniu ale acizilor
organici, amide ale acizilor glutamici (glutamin), aspartic (asparagin)
i uree.
Biosinteza proteinelor se face printr-un mecanism complicat, rolul
principal revenindu-le acizilor nucleici. Formarea lanului
polinucleotidic de ADN se face sub aciunea enzimei ADN-polimeraz
prin replicare (biosintez conservativ). Biosinteza celor trei tipuri de
ARN are loc prin replicarea unor secvene de ADN, pe baza
mecanismului bazelor complementare i a unor enzime specifice.
Biosinteza fiecrei proteine depinde de un anumit segment din
molecula de ADN care poart numele de gen (cistron o subunitate a
genei). Caracteristicile unei proteine sunt determinate de secvena
aminoacizilor si. Poziia unui aminoacid n lanul polipeptidic este
determinat de o succesiune a trei nucleotide din molecula ADN-ului, ce
poart numele de codon. Biosinteza proteinelor se produce n ribozomii
activi, fiind un proces endergonic.

NTREBRI:

14.1. Asupra crui substrat acioneaz urmtoarele enzime?
a) nitratreductaz
b) nitritreductaz
14.2. Ce aminoacid se formeaz prin transferul gruprii amino
(transaminare) din acidul glutamic pe acidul piruvic?
14.3. Care sunt produii reaciei de dezaminare oxidativ a acidului
aspartic?
14.4. Scriei formula asparaginei i a glutaminei.
14.5. Explicai pe scurt urmtoarele noiuni:
a) replicarea semiconservativ
b) baze complementare
c) cistron
d) codon
e) mutaie.
RODICA ANA PUN

130
BIBLIOGRAFIE:

14.1. Karlson P., Introduction to Modern Biochemistry, Academic Press,
New York 1965
14.2. Lehninger A.I., Biochimie, Editura Tehnic, 1987
14.3. Neamu Gavril, Biochimie alimentar, Editura Ceres 1997
14.4. White A.P., Handler, F.Smith, Principles of Biochemistry, Mc Graw
Hill, New York, 1968
14.5. Yanosky, Charles, Gene structure and Protein Structure, 1967, p 80.

BIOCHIMIE

131
Capitolul 15

INTERRELAII METABOLICE


CUVINTE CHEIE:
acid 3-fosfogliceric, acid piruvic, acetilcoenzima A, ciclul Krebs

OBIECTIVE:
- prezentarea schematic a interrelaiilor metabolice


Metabolizarea biocomponentelor are loc n mod concomitent. ntre
diversele procese metabolice exist relaii strnse att n ceea ce privete
anabolismul substanelor ct i catabolismul lor. n catabolism se pleac
de la substane macromoleculare complexe ajungndu-se la substane
simple. Dei se pleac de la substane foarte diferite n ceea ce privete
structura, compoziia i masa molecular prin degradare se ajunge n
etapa final la compui foarte simpli ca H
2
O, CO
2
, NH
3
. n anabolism
procesul este invers. Cu toate acestea cile catabolice i anabolice pentru
un anumit produs nu sunt ci identice inversate ale proceselor
intermediare ce duc la formarea produsului respectiv. De exemplu
biosinteza proteinelor din aminoacizi nu se face prin ci inverse
degradrii proteinelor n aminoacizi. Cile anabolice i cele catabolice ale
unui produs sunt coordonate de sisteme enzimatice diferite.
Interrelaiile metabolice se stabilesc prin intermediul unor compui
comuni care rezult prin metabolizarea diverselor biocomponente. Aceti
produi comuni duc la intersecia unor ci metabolice. Cteva exemple
sunt ilustrate n acest sens. Acidul 3-fosfogliceric face legtura dintre
biosinteza i degradarea glucidelor. Similar, aldehida gliceric se poate
degrada prin glicoliz i ciclul respirator n CO
2
i H
2
O sau se poate
izomeriza n dihidroxiaceton participnd la sinteza amidonului,
celulozei.
Acidul piruvic este un compus important deoarece are un rol principal
n stabilirea interrelaiilor metabolice ntre glucide i protide, formndu-se
prin degradarea glucidelor ct i din unii aminoacizi. Din glucide prin
degradare anaerob se formeaz acid piruvic, din care prin fermentaii sub
RODICA ANA PUN

132
aciunea microorganismelor se pot obine alcool etilic, acid lactic,
aldehid gliceric etc. Prin degradarea aerob a acidului piruvic prin
ciclul Krebs, se obine acetilcoenzima A, acizii citric, gluteric, succinic
etc.
Acetilcoenzima A are un rol cheie n stabilirea unor interrelaii
metabolice ntre glucide, acizi grai deoarece poate aprea ca produs
intermediar n degra- darea glucidelor, acizilor grai i sub aciunea altor
sisteme enzimatice contribuie la biosinteza unor alte noi molecule de
substane din care s-a format.
Ciclul Krebs reprezint o cale comun de metabolizare a unor produi
provenii din degradarea diverselor biocomponente.
n prezent, interrelaiile metabolice au fost studiate cu ajutorul
izotopilor radioactivi. Prin aceast metod se pun n mediul de cultur
glucide, lipide sau protide marcate cu izotopi radioactivi i se analizeaz
radiometric compuii ce provin din alte categorii de substane ce au fost
nemarcate n experiment. De exemplu, dac n mediul de cultur glucidele
au fost marcate cu izotopul radioactiv al carbonului 14C i apoi se
regsete izotopul 14C n structura unor aminoacizi, se demonstreaz c
ntre aceste clase de substane s-a stabilit o interrelaie metabolic.
Aceast interrelaie trebuie neleas n sensul c glucidul a fost degradat
n substane simple ce au participat apoi la sinteza aminoacizilor.
Utilizarea glucozei marcate n diverse cercetri a dus la obinerea de acizi
grai marcai, glicerol marcat, aminoacizi marcai. Atunci cnd au fost
administrai unor organisme vii aminoacizi marcai cu izotopul 14C, acest
izotop a fost gsit n glucoz, acizi grai, amine.
Substanele comune care unesc metabolismul diferiilor compui sunt
im- portante deoarece dau organismului posibilitatea s treac de la o
categorie la alta de substane n funcie de necesitile celulelor, mai ales
cnd n celule nu se gsesc toate substanele de care plantele au nevoie.
Schema interrelaiilor metabolice (dup G. Neamu, 1997) este
prezentat n figura urmtoare.
BIOCHIMIE

133


Schema interrelaiilor metabolice

Tabloul interconexiunilor metabolice trebuie completat i cu
interrelaiile energetice metabolice. Energia eliberat n procesele
catabolice (procese exergonice) este folosit n cea mai mare parte n
procesele anabolice (procese endergonice). Energia inclus n substane
RODICA ANA PUN

134
(sub form de energie de legtur) n timpul biosintezei este eliberat prin
biodegradare i stocat sub form de legturi macroergice (n special ATP
care este astfel combustibilul specific organismelor vii).
Reaciile biochimice care au loc n plante n procesele de asimilare i
dezasimilare sunt legate ntre ele asigurnd rennoirea i autoconservarea
organismelor. Interrelaiile metabolice sunt indispensabile pentru
creterea i dezvoltarea plantelor, genernd substane indispensabile
pentru sinteza diferitelor biocomponente.
Interrelaiile metabolice (i sub aspect energetic) dau posibilitatea
plantelor de a se adapta la condiiile de mediu, la strile de stres prin
utilizarea foarte eficient a substanelor nutritive.

REZUMAT:

Interrelaiile metabolice se stabilesc prin intermediul unor compuI
comuni care rezult prin metabolizarea diverselor biocomponente. Aceti
produi comuni (esterul glucozo-6-fosforic, acidul 3-fosfogliceric, acidul
piruvuc, acetilcoenzima a) duc la intersecia unor ci metabolice.


NTREBRI:

15.1. Care este calea comun de metabolizare a glucidelor, lipidelor,
protidelor?

BIBLIOGRAFIE

15.1. ROWN, T.H.; Le May; H. Burstein; Chemistry the Central Science
Prentice Hall, New Jersey, 1997.
15.2. GALBEN T.; Enache Aurelia; Curs de Chimie i Biochimie, Partea
II-a Biochimie Vegetal, Lito IANB, 1986.
15.3. Lehninger A.I.; Biochimie, Editura Tehnic, 1987.
15.4. Leslie, Neal A.; Chemistry and Biochemistry, a comprehensive
introduction, Mc. Graw-Hill, S.U.A., 1971.
15.5. Mortimer Charles E.; Chemistry, Wadsworth Publishing company,
Bemont, S.U.A., 1983.
15.6. Neamu Gavril; Biochimie alimentar; Editura Ceres 1997.
15.7. Neamu Gavril; Biochimie vegetal; Editura Ceres 1981.
BIOCHIMIE

135
CUPRINS


INTRODUCERE ............................................................................................... 3

Partea I-a. Biochimia structural
Capitolul 1. Compoziia chimic general a organismului vegetal ..................... 5
1.1. Bioelemente ............................................................................................... 5
1.2. Biomolecule ............................................................................................... 6

Capitolul 2. Apa ................................................................................................ 8
Capitolul 3. Sruri minerale .............................................................................. 11
Capitolul 4. Glucide ......................................................................................... 13
4.1. Glucide simple oze ................................................................................ 14
4.2. Oligoglucide............................................................................................. 21
4.3. Poliglucide ............................................................................................... 24

Capitolul 5. Lipide............................................................................................ 27
5.1. Acizi grai ................................................................................................ 28
5.2. Alcooli din constituia lipidelor ............................................................... 29
5.3. Ceride ....................................................................................................... 30
5.4. Gliceride................................................................................................... 31
5.5. Glicerofosfolipide .................................................................................... 33

Capitolul 6. Protide.......................................................................................... 36
6.1. Aminoacizi ............................................................................................... 37
6.2. Peptide...................................................................................................... 42
6.3. Proteine (holoproteide) ............................................................................ 43
6.4. Heteroproteide.......................................................................................... 48

Capitolul 7. Acizi nucleici .............................................................................. 53
7.1. Nucleozide ............................................................................................... 54
7.2. Nucleotide ................................................................................................ 55
7.3. Structura acizilor nucleici ........................................................................ 57

Capitolul 8. Enzime ........................................................................................ 63
8.1. Structura i modul de aciune al enzimelor .............................................. 63
8.2. Cinetica reaciilor enzimatice................................................................... 65
RODICA ANA PUN

136
8.3. Nomenclatura enzimelor i clasificarea lor ................................................ 68

Capitolul 9. Vitamine ...................................................................................... 74
9.1. Vitamine hidrosolubile............................................................................. 75
9.2. Vitamine liposolubile ............................................................................... 76


Partea a IIa. Metabolismul vegetal
Capitolul 10. Fotosinteza................................................................................. 81
10.1. Faza luminoas a fotosintezei ................................................................ 82
10.2. Faza obscur a fotosintezei .................................................................... 85

Capitolul 11. Oxidarea celular ....................................................................... 89
11.1. Ciclul Krebs ........................................................................................... 90
11.2. Lanul respirator ..................................................................................... 92

Capitolul 12. Metabolismul glucidelor ........................................................... 96
12.1. Anabolismul glucidelor .......................................................................... 96
12.2. Catabolismul glucidelor ......................................................................... 99

Capitolul 13. Metabolismul lipidelor .............................................................. 107
13.1. Anabolismul gliceridelor......................................................................... 107
13.2. Catabolismul gliceridelor ..................................................................... 112

Capitolul 14. Metabolismul protidic................................................................ 116
14.1. Metabolismul aminoacizilor i amoniacului ........................................... 117
14.2. Metabolismul acizilor nucleici ............................................................. 123
14.3. Biosinteza proteinelor ............................................................................. 126

Capitolul 15. Interrelaii metabolice ................................................................ 131