BIOCHIMIE METABOLIC

ef Lucrri Dr. Cristina Ctan

2015-2016
Referine
BIOCHIMIE METABOLIC

1. METABOLISM INTERMEDIAR
2. CATABOLISM SI ANABOLISM

3. METABOLISMUL ENERGETIC

4. METABOLISMUL GLUCIDIC

5. METABOLISMUL LIPIDIC

6. METABOLISMUL PROTEIC
 METABOLISM

DEFINIIE
Totalitatea transformrilor biochimice ale substanelor nutritive
(glucide, lipide i proteine)

METABOLISM INTERMEDIAR
CATABOLISM I ANABOLISM
REGENERAREA ATP N CONTRACIA MUSCULAR
ECHILIBRUL UNEI REACII REVERSIBILE
REACIA REVERSIBIL IMPLICAT N DOU CI
METABOLICE
Metabolism
La nivel celular reaciile enzimatice decurg sub
forma cilor metabolice multisecveniale (calea
glicolizei)

ntr-o cale metabolic, P unei reacii = S al reaciei

urmtoare; cile metabolice se intersecteaz reea

Metabolismul sau reeaua integrat a reaciilor

chimice = suma tuturor modificrilor chimice la
nivel celular
Metabolism
 Metabolismul intermediar

Un ansamblu de reacii
cuplate printr-un Acest fapt asigur o
intermediarcare este: mare flexibilitate
produsul de reacie al metabolismului,
unei reacii intermediarii putnd
substratul unei alte s fie utilizai i n alte
reacii ci metabolice
 Metabolismul intermediar

La intrarea n celul, glucoza este transformat n

glucozo- 6-fosfat (G-6-P) n cursul unei reacii catalizate de o enzim
 Metabolismul intermediar

n celule (ficat, muchi scheletic n repaus), G-6-P este transformat n

glicogen n urma unei serii de reacii de constituie
GLICOGENOGENEZA
 Metabolismul intermediar

n alte celule (ex. hematii), G-6-P este transformat n

dihidroxiacetonfosfat (DHAP)
pe parcursul unor reacii ce constituie prima parte a glicolizei.
 Metabolismul intermediar

n celule (ficat, esut adipos), G-6-P este transformat n

pentozo-fosfai= ciclul PENTOZOFOSFAT. Produii
rezultai in aceast cale metabolic sunt intermediari ai glicolizei
 Metabolismul intermediar

n majoritatea celulelor, DHAP poate fi transformat n

glicerol-fosfat (glicerol-P) n cursul unei reacii
 Metabolismul intermediar

Cea mai mare parte a DHAP se transform n piruvat pe parcursul

unei serii de reacii ce constituie a doua parte a glicolizei
 Metabolismul intermediar

n funcie de condiii,
piruvatul se transform n cursul unei reacii fie n

lactat (calea glicolizei anaerobe),

fie n acetil-CoA (calea glicolizei aerobe),

fie ntr-un aminoacid, alanina

 Metabolismul intermediar

ACID ACID
PIRUVIC LACTIC

Numeroasele reacii ale metabolismului intermediar asigur:

Flexibilitate metabolismului
Eliberarea gradual de energie, pe msura oxidrii moleculelor
 Metabolismul intermediar

Cile metabolice:
catabolice (de degradare)
anabolice (de sintez)

Cicluri de reacie = cile care regenereaz un

anumit compus chimic

Harta metabolic = reunete conexiunile dintre

diversele ci, permite vizualizarea metaboliilor
intermediari i a efectului blocrii uneia dintre ci
 Catabolismul- 3 stadii
Stadiul I
Hidroliza moleculelor complexe cu constituirea de
building blocks;
Proteine la aminoacizi
Polizaride la monozaharide
Triacilglicerolii la AG liberi si glicerol

Stadiul II
Conversia building blocks la acetil-CoA si molecule
simple
O parte din energie este captata ca ATP (mai putin decat
cea produsa in stadiul al 3-lea catabolic).

Stadiul III
Oxidarea acetil-CoA in ciclul acizilor tricarboxilici, TCA
O cantitate mare de ATP este produsa prin foforilare
oxidativa
 Catabolismul
Evolutia metabolismului de la atmosfera primitiva a Pamantului
(fermentatia) la atmosfera oxigenata ce favorizeaza
catabolismul aerobic rezultang mai multa energie.

Total- formarea CO2, HOH si ATP; organisme aerobe/ tesuturi

bogate in mitocondrii; catabolism aerobic-38 ATP

Partial- formarea piruvatului, lactatului, ureei; in anaerobioza

sau in tesuturile sarace in mitocondrii (muschii netezi)
produsii rezultati se numesc deseuri metabolice; catabolismul
anaerob al glucozei:2ATP (fermentatia lactica)
Catabolismul componentelor exogene difera de cel al
compusilor endogeni prin: secventa de reactii, enzime,
distributie intracelulara
ANABOLISMUL
 ANABOLISMUL

Reactii chimice de reducere

Necesita energie
(sunt endergonice)
Puterea reductiva este oferita
de electronii donorului NADPH

Reactiile anabolice au nevoie

de prezenta moleculelor mici
Aminoacizi proteine
Monozaharide polizaharide
Acizi grasi trigliceride
Catabolism versus Anabolism
Catabolism versus Anabolism
Catabolism versus Anabolism

ATP, NAD, FAD

 Catabolism versus Anabolism

Caile anabolice si catabolice sunt simultane si in interrelatie

Gluconeogeneza din piruvat - 11 reactii:
4 reactii ireversibile catalizate de enzime reglatorii specifice
7 reactii sunt catalizate de aceleasi enzime implicate in
glicoliza
Glicoliza la piruvat - 10 reactii:
3 reactii ireversibile catalizate de enzime reglatorii specifice
7 reactii sunt catalizate de aceleasi enzime implicate in
gluconeogeneza
Enzimele reglatorii asigura ireversibilitatea celor doua cai,
stabilind care dintre cele doua cai este predominanta intr-un
anumit tesut la un moment dat (in functie de semnalul endocrin)
 Catabolism versus Anabolism

Gluconeogeneza =sinteza glucozei din

alte surse decat CH: piruvat si lactat
(60%); aminoacizi (20%), glicerol (20 %).
Reversibilitatea metabolica versus
ireversibilitatea chimica
Reglarea metabolismului

Caile metabolice sunt

coordonate in functie de
necesitatiloe celulare

Semnalele reglatorii
include:
Hormoni
Neurotransmitatori
Disponibilitatea
nutrientilor
 Factori ce regleaza metabolismul

Semnale intracelulare
Rata caii metabolice este influentata de
Disponibilitatea substratelor
Inhibitia produsului (feedback process)
Modificarile de concentratie ale activatorilor/ inhibitorilor

Comunicarea intercelulara
Surface-to surface contact, formarea de gap junctions
neurotransmitatori
Sistemul mesagerilor secunzi
Hormonii sunt primii messengeri
Mesagerii secundari = molecule care cresc/temporizeaza cascada de
reactii ca raspuns la primul mesager:
Sistemul calciu/ phosphatidil inozitol
Sistemul adenil ciclazei
METABOLISMUL ENERGETIC
 Sinteza ATP

1. S-P + ADP ATP;

ATP este produs prin fosforilarea ADP de la

substratul fosforilat (S-P). Are loc in citoplasma

sau in mitocondrie.
2. fosforilarea oxidativa la nivelul citocromilor;
Are loc in mitocondrie (lant respirator
mitocondrial)
In acest proces NADH si FADH2 sunt oxidate,
energia eliberata fiind utilizata in sinteza ATP (3
molecule din NADH si 2 molecule din FADH2).
Metabolism
 Metabolismul central versus metabolism
particular

Exista cai metabolice care se

desfasoara in toate celulele
(animale and vegetale), dar cu
viteze diferite metabolism
central.
Ex: Glycoliza este prezenta in
aproape toate celulele, in
citozol, unde Glu este degradata
pana lal piruvat.
In anaerobioza piruvatul
este degradat la acid lactic

In aerobioza acidul piruvic

este degradat in mitocondrii
pana la CO2, H20 si 38 ATP.
 Functiile specifice ale glicolizei
in diferite tesuturi

Eritrocitele, sarace in mitochondrii glicoliza anaeroba lactat este o sursa de energie

(ATP).
Muschii scheletici, bogati in mitochondrii glicoliza aeroba este o sursa de energie during
in timpul exercitiului fizic
Tesutul adipos glicerol fosfatul pentru sinteza trigliceridelor, folosind acetil-CoA pentru
sinteza AG
Ficat sursa de acetil-CoA pentru sinteza AG si a glicerol fosfatului necesare sintezei de
TAG
Creier consuma 120 g/ zi (=60% din Glu in repaus); Glu este unicul substrat metabolic
(combustibil energetic), iar prin glicoliza aeroba, Glu este degradata la acetil-CoA, CO2,
H2O and ATP.
 Surse de ATP muscular

ATP este principala sursa de energie

care asigura contractia musculara. 1 2 3

Totusi, o fibra musculara contine

prea putin ATP pentru mentinerea
unei contractii timp indelungat.
Exista trei surse de refacere a ATP-
ului muscular in fibrele bogate in
mitocondrii:

Creatin fosfatul, CONTRACTIA

glicogenul MUSCULARA
respiratia celulara
 METABOLISMUL ENERGETIC

Muchiul n repaus conine o rezerv de energie

i sub form de creatin fosfat.
Graie creatin kinazei,
ATP-ul este regenerat printr-un transfer al
grupului fosfat de la creatin fosfat la ADP.
 3.1. REGENERAREA ATP IN CONTRACIA
MUSCULAR

Cnd muchiul este activat i se contract se epuizeaz rapid

rezerva de creatin fosfat,
iar contracia muscular ar trebui s nceteze.
 REGENERAREA ATP IN CONTRACIA MUSCULAR

Din fericire, ATP se regenereaz continuu datorit fosforilrii oxidative,

un proces extrem de important care necesit O2.
Cnd muchiul nu se mai contract, fosforilarea oxidativ
i consumul de O2 (respiraia celular) nceteaz.
 Sistemul fosfagen permite cresterea nivelului
de ATP muscular

Nivelul de creatin
fosfat este de 10 ori mai
mare decat ATP

Creatin P este mai

bogat in energie decat
ATP, iar fosforilarea
ADP are loc in
prezenta creatin
kinazei.
 REGENERAREA ATP IN CONTRACIA
MUSCULAR

SURSE DE ENERGIE PENTRU CONTRACTIA MUSCULARA

 ECHILIBRUL UNEI REACII REVERSIBILE

O reacie reversibil este n echilibru

cnd viteza de reacie ntr-un sens este egal
cu viteza de reacie n sens invers. Concentraiile participanilor
la reacie la echilibru sunt diferite,
dar raportul dintre concentraii (G-6-P/F-6-P) rmne constant.
 ECHILIBRUL UNEI REACII REVERSIBILE

Cnd o reacie produce

G-6-P concentraia sa crete

Cnd echilibrul reaciei reversibile

se restabilete (consum de G-6-P),
raportul dintre concentraiile de
G-6-P/F-6-P redevine constant.
ECHILIBRUL UNEI REACII REVERSIBILE

Cnd n reacia urmtoare

se utilizeaz Fr-6-P,
concentraia sa diminu

Echilibrul reaciei reversibile

se restabilete prin
producia crescut de Fr-6-P
ECHILIBRUL UNEI REACII REVERSIBILE

Dac o reacie produce Fr-6-P

atunci concentraia sa crete

Reacia reversibil are loc

n sensul producerii de
G-6-P,
[G-6-P]/[F-6-P]
redevine constant,
meninndu-se echilibrul
REACIA REVERSIBIL IMPLICAT N
DOU CI METABOLICE

O reacie reversibil
poate participa la dou
ci metabolice inverse

De exemplu, n ficat,
G-6-P- izomeraza
particip la glicoliz
si la
gluconeogenez
 REACIA REVERSIBIL IMPLICAT N
DOU CI METABOLICE

O reacie reversibil este cuplat cu alte reacii ireversibile,

specifice unei ci metabolice
Aceste reacii ireversibile determin sensul reaciei reversibile

Dac sunt activate HEXOKINAZA i

FOSFOFRUCTOKINAZA reacia catalizat de G-6-P
izomeraza se va desfura n sensul GLICOLIZEI

Dac sunt activate Fr-1,6-BISFOSFATAZA i G-6-

FOSFATAZA reacia catalizat de G-6-P izomeraza se va
desfura n sensul GLUCONEOGENEZEI
 METABOLISMUL GLUCIDIC

Glucide: roluri, clasificare, structur, izomerie

Glicoliza
Etapele si reglarea glicolizei
Soarta piruvatului
Ciclul acidului lactic (ciclul Cori)
Gluconeogeneza
Calea pentozo-fosfat
Calea acidului glucuronic
 METABOLISMUL GLUCIDIC

Metabolismul glicogenului
Glicogenoliza
Glicogenogeneza
Reglarea metabolismului glicogenului
Glicogenoze
Metabolismul fructozei
Metabolismul galactozei
Glicozaminoglicanii. Proteoglicanii. Glicoproteinele
 Carbohidratii: rol, clasificare, structura

CH- cele mai abundente

molecule organice din natura.

Roluri:
energetic: 1g furnizeaza 4
kcal; CH = 65-75% din
necesarul caloric zilnic.
CH: sursa de pentoze pt
sinteza ADN/ ARN, sinteza
ATP
Sinteza vitaminei B2 si B12
CH: componente ale MC
(structural)
CH: celuloza care creste
masa MF cu stimularea
peristaltismului intestinal
 Glucide: roluri, clasificare, structur, izomerie

Carbohidraii: (CH2O)n

surs energetic
form de stocare a surplusului energetic
comunicarea intercelular
rol structural: peretele bacterian
CLASIFICAREA CARBOHIDRAILOR
 CLASIFICAREA CARBOHIDRAILOR

Monozaharidele pot fi clasificate astfel:

ALDOZE CETOZE

Aldoze (-oza): exc. gliceraldehida

Cetoze (-uloza): exc. dihidroxiacetona, fructoza, xiluloza
Dizaharidele: 2 uniti monozaharidice
Oligozaharidele: 3- 10 uniti monozaharidice
Polizaharidele: > 10 uniti monozaharidice (sute)
CLASIFICAREA CARBOHIDRAILOR
 IZOMERI I EPIMERI

Izomeri: compui cu formule chimice identice, dar cu structuri

chimice diferite
Ex. C6H12O6: fructoza, glucoza, galactoza i manoza
Epimeri: izomeri carbohidrai care difer prin configuraia unui
singur atom de C (exc. C din gruparea carbonil- anomeri); G i Gal:
epimeri la C4

C1 C4
DIZAHARID LACTOZA

Galactoz legtur Glucoz

glicozidic
 IZOMERI I EPIMERI

G i Man: epimeri la C2

C2

Glucoz Manoz

Gal i Man nu sunt epimeri (structuri diferite la C 2 i C4);

Gal i Man sunt izomeri
 ENANTIOMERI

Glucidele din organism sunt D- glucide: gruparea -OH legat la C

asimetric situat cel mai departe de C carbonilic este poziionat
dextrogir

ENANTIO-
MERI

D- GLUCOZA L- GLUCOZA

Racemazele asigur interconversia izomerilor D i L

 CICLIZAREA MONOZAHARIDELOR

Sub 1% din monozaharidele cu > 5 C au form aciclic; majoritatea

au configuraie inelar prin interaciunea dintre gruparea aldehidic
(cetozic) cu un radical alcoolic al aceluiai glucid

PIRANOZA:
FURANOZA:
compus inelar
compus inelar
hexa-atomic
penta-atomic
 ATOMUL DE CARBON ANOMERIC

Ciclizarea : un C anomeric (fostul C carbonilic) i configuraiile

i ale glucidului

Gruparea OH
DIASTEREO-
a C anomeric de
IZOMERI
aceeai parte cu
inelul
 ATOMUL DE CARBON ANOMERIC

Enzimele deosebesc cele dou structuri i

Glicogenul: sintetizat din - D-glucopiranoz

celuloza: sintetizat din - D-glucopiranoz

n soluie, anomerii i sunt n echilibru i pot fi

interschimbai spontan prin mutarotaie
 GLUCIDELE REDUCTOARE

Statusul atomului de oxigen legat de atomul anomeric

dicteaz caracterul reductor sau nereductor al unui
glucid, restul gruprilor OH nefiind implicate

testele colorimetrice ce utilizeaz reactivi cromogeni

detecteaz prezena glucidelor n urin
Identificarea exact a glucidului necesit teste adiionale
specifice
 Cuplarea monozaharidelor

Monozaharidele se pot uni pt a forma:

Dizaharide:
lactoza Gal + G
sucroza G + Fr
maltoza G + G
Polizaharide: homo- si heteropolizaharide
glicogen ramificat (orig. animal)
Polimeri
de amidon (orig. vegetal)
glucoz celuloza neramificat (orig. animal)
 LEGTURILE GLICOZIDICE

Legturile dintre glucide- puni glicozidice n prezena

glicoziltransferazelor (S = glucide nucleotidice de tipul UDP-G)

Hidroliza unei legturi glicozidice: glicozidaze

Se denumesc n funcie de:

nr. atomilor de C conectai
poziia gruprii OH anomerice:
OH n configuraie - legtur glicozidic
Ex. lactoza
 LEGTURILE GLICOZIDICE

Legtur
galactozil- (1->4 )-
glucoz

Lactoza are caracter reductor (captul anomeric al G nefiind implicat n

formarea legturii glicozidice)
 CARBOHIDRAI COMPLECI

Carbohidraii se pot ataa prin legturi glicozidice unor

structuri neglucidice:
baze purinice i pirimidinice ( acizi nucleici)
nuclee aromatice (steroizi, bilirubin)
proteinele (glicoproteine, glicozaminoglicani)
lipidele (glicolipide)

Legtur N- glicozidic: glucid ataat la -NH2

Legtur O- glicozidic: glucid ataat la -OH
Legturile dintre glucide sunt O-glicozidice
 DIGESTIA CARBOHIDRAILOR

Digestia carbohidrailor alimentari se desfoar n:

cavitatea oral
intestin
Procesul are loc rapid i se ncheie cnd chimul gastric ajunge
la jonciunea duodeno-jejunal
Enzime:
Endoglicozidazele: hidroliza oligo- i polizaharidelor
Dizaharidazele: hidroliza dizaharidelor
Glicozidazele specifice: hidroliza legturilor glicozidice
 DIGESTIA CARBOHIDRAILOR LA NIVELUL
CAVITII ORALE

- amilaza salivar hidrolizeaz legturile (14) din

amidon si glicogen

GLICOGEN

14 16
Celuloza nu poate fi digerat- legturi (14)
- amilaza salivar este inactivat de aciditatea gastric
local
 DIGESTIA CARBOHIDRAILOR LA NIVELUL
CAVITII ORALE

Rezult oligozaharide
cu legturi (16) sau
dextrine scurte,
maltotrioze, dizaharide
rezistente la actiunea -
amilazei
 DIGESTIA CARBOHIDRAILOR N INTESTIN

Coninutul gastric acid ajunge n lumenul intestinului subire este

neutralizat de bicarbonatul secretat de pancreas, iar - amilaza
pancreatic reia procesul de degradare a amidonului

Etapele finale ale digestiei au loc n jejunul superior

Enzime sintetizate la nivelul feei luminale a marginii n perie a
celulelor mucoasei intestinale
Ex. Dizaharidaze i oligozaharidaze: izomaltaza, maltaza, lactaza
DIGESTIA CARBOHIDRAILOR N INTESTIN
 ABSORIA MONOZAHARIDELOR

Absoria glucidelor alimentare: n duoden i jejun superior;

insulina nu este necesar

Mecanisme diferite de absorie:

active 1.co-transportorul SGLT-1pt G i Gal; 2. GLUT-5 pt Fr
G, Gal i Fr sunt transportate din celulele mucoasei
intestinale n circulaia portal cu GLUT-2
 DEGRADAREA ANORMAL A DIZAHARIDELOR

n mod normal, procesul global de digestie i absorie este

eficient

Disfuncia dizaharidazelor specifice determin ptrunderea

CH n lumenul intestinului gros cu producerea diareei
osmotice

Fermentaia bacterian a CH cu 2 sau 3 atomi de C genereaz

CO2 i H2 activi cu apariia crampelor abdominale, diareei,
flatulenei
 DEFICIENELE ENZIMELOR DIGESTIVE-CAUZE

Deficienele congenitale ale dizaharidazelor: la sugari i copii

cu intoleran dizaharidic

Malnutriie, medicamente ce lezeaz mucoasa intestinal

Deficien enzimatic temporar n diaree sever; nu se

consum lactate
 DEFICIENELE ENZIMELOR DIGESTIVE
CAUZE

Intolerana la lactoz
> 3/4 din aduli, 90% dintre adulii africani i asiatici au deficit de
lactaz
reducere cantitativ a activitii enzimatice
Tratament:
reducerea consumului de lapte integral;
se prefer iaurt, branzeturi, broccoli pt Ca;
tablete cu lactaz nainte de mas
 DEFICIENELE ENZIMELOR DIGESTIVE

Deficiena de izomaltaz- sucraz determin intolerana la

sucroz

Tratament:
restricia alimentelor cu zahr
substituia enzimatic
Diagnostic: teste de toleran oral la fiecare dizaharid
msurarea H2 respirator
 METABOLISM- NOIUNI INTRODUCTIVE

Cile metabolice:
catabolice (de degradare)
anabolice (de sintez)

Cicluri de reacie = cile care regenereaz un anumit compus

chimic

Harta metabolic = reunete conexiunile dintre diversele ci,

permite vizualizarea metaboliilor intermediari i a efectului blocrii
uneia dintre ci
Glicoliza- cale metabolic
GLICOLIZA
 GLICOLIZA
Definiie. Degradarea glucozei cu producere de ATP ( 2 molecule
ATP/ 1mol Glucoz ) i metabolii intermediari ce pot fi utilizai n
alte ci metabolice. Are loc n citosol. n centrul metabolismului CH

n aerobioz (reoxidarea NADH este indispensabil):

10 REACII

Piruvatul este convertit la acetil- CoA,prin oxidarea la nivelul

ciclului citric i a lanului respirator mitocondrial rezultnd 36-38
moli ATP/mol G
 GLICOLIZA

Alternativ, Py este redus la lactat (NADH este oxidat la NAD +.

Glicoliza anaerob permite sinteza de ATP n esuturile n care

aportul de oxigen este insuficient: hematii ce nu conin mitocondrii,
leucocite, cornee, cristalin, celule n hipoxie-muchi scheletic n
contracie rapid
 TRANSPORTUL GLUCOZEI N CELULE
Glucoza nu poate ptrunde n celule prin difuziune simpl
2 mecanisme: transport facilitat i cotransport

Difuziunea facilitat (Na +- independent) realizat cu 14 proteine

transportoare membranare (izoforme ale aceluiai transportor):
GLUT 1-14 ce prezint secvene comune i specifice membranei
rezidente

G extracelular se leag la
transportor care sufer o modificare
conformaional ce permite
transportul G prin MC

GLUT- Glucose Transporter

 TRANSPORTUL GLUCOZEI N CELULE

Specificitatea tisular a expresiei genei GLUT:

GLUT-3 principalul transportor la nivel neuronal

GLUT-1 n eritrocite i esutul cerebral
GLUT-4 n adipocite i celulele musculare striate, nr i activitatea lor
fiind crescute de insulin

Funciile specializate ale izoformelor GLUT:

n difuziunea facilitat G este transportat din mediul cu [G] mai
mare spre cel cu [G] mai mic
GLUT-1, GLUT-3 i GLUT-4 implicate n preluarea G din circulaie
 TRANSPORTUL GLUCOZEI N CELULE
Funciile specializate ale izoformelor

GLUT-2 este localizat n ficat i rinichi i transport G n interiorul

hepatocitelor i al celulelor renale cnd glicemia este crescut sau
invers (din aceste celule n snge) la glicemie mic ( jeun); este
prezent i n pancreas

GLUT-5: n trasnportul primar al Fr (intestin subire, testicule)

GLUT-7: n ficat i alte esuturi gluconeogenetice mediaz fluxul G
prin membrana RE
 TRANSPORTUL GLUCOZEI N CELULE

Sistemul de co-transport Na + - glucoz necesit consum de energie i

asigur transportul G mpotriva gradientului de concentraie
(extracelular [G] este < dect intracelular).

La nivelul transportorului sunt ataai G i Na + . Ionii de sodiu sunt

transportai n celul simultan cu G, proces favorizat de energia
coninut n gradientul de Na. Transportorul este sodiu-dependent sau
SGLT
n celulele epiteliului intestinal, tubilor renali i ale plexului coroid
 REACIILE GLICOLIZEI

Conversia G la Py decurge n 2 etape si are loc in citoplasma celulara :

Prima, consumatoare de 2ATP/mol de G, hexozele fosforilate fiind

transformate ntr-un produs comun: gliceraldehid-3-fosfat (GAP)

A II-a, de oxidare a GAP, generatoare de 4 ATP/mol de glucoz, 2Py i 2

NADH, H+, ca urmare a oxidrii GAP

Cele dou molecule de NADH sunt oxidate la NAD+ pe msur ce Py este

redus la lactat (glicoliz anaerob)
 REACIILE GLICOLIZEI

Toi intermediarii glicolizei (de la G la Py) sunt fosforilai

Gruparea fosfat a intermediarilor glicolizei are 3 roluri principale:

1. de a-i menine n celul (cu un grup polar negativ sunt incapabili s

traverseze membrana celular la pH=7, prin simpla difuziune)
2. pstrarea moleculelor energetice n celul (compui hidrofili)
3. interaciunea enzim-substrat mai bun
 REACIILE GLICOLIZEI

Primele 5 reacii:

A. Fosforilarea glucozei
B. Izomerizarea G-6-P la Fr-6-P (fructozo-6-fosfat)
C. Fosforilarea Fr-6-P la Fr-1,6- bisfosfat
D. Scindarea Fr-1,6- difosfatului
E. Izomerizarea dihidroxiaceton-fosfatului (Interconversiunea trioz-
fosfailor)
 REACIILE GLICOLIZEI

A. Fosforilarea glucozei este catalizat de izoenzimele hexokinazei ( una

dintre cele 3 enzime reglatoare ale glicolizei alturi de fosfofructokinaz
i piruvat-kinaz)

Hexokinaza:
Sp larg pt S fosforilnd mai multe hexoze nafara G
inhibat de produsul final de reacie G-6-fosfatul care se acumuleaz n
organism cnd rata de metabolizare scade
Km sczut pt G
Vmax redus pt G ( nu poate reine hexozele fosforilate n interiorul
celulei i nici nu poate fosforila o cantitate de glucide mai mare dect
necesarul
 REACIILE GLICOLIZEI

Reacia de fosforilare este ireversibil i necesit 1mol ATP

Mg este indispensabil n toate fosforilrile

Glucokinaza sau hexokinaza D sau tipul IV

principala enzim care asigur fosforilarea G
n celulele pancreatice, detector de G, determin nd pragul secreiei de
insulin
la nivel hepatic faciliteaz fosforilarea G n episoadele hiperglicemice
Sp de S similar izoenzimelor hexokinazei
 REACIILE GLICOLIZEI

Km pt glucokinaz >>> Km pt hexokinaza

Glucokinaza funcioneaz la [G] hepatocitare (postprandial)

Vmax pt glucokinaza >>>

permite Fi s elimine eficient fluxul masiv de G adus prin sngele portal
previne suprancrcarea cu G a circulaiei sistemice
reduce Hglicemia din per. de absorie (GLUT-2)
 REACIILE GLICOLIZEI

Activitatea glucokinazei:

nu este inhibat alosteric de G-6-P (ca pt alte hexokinaze);

este inhibat indirect de Fr-6-fosfat (n echilibru cu G-6-P)

stimulat indirect de G printr-un mecanism

specific
 REACIILE GLICOLIZEI

Nucleul hepatocitelor conine o protein reglatoare a glucokinazei

n prezena Fr-6-P, GK este translocat n nucleu i se leag strns de
proteina reglatoare (GRP), inactivnd enzima
cnd glicemia este crescut (GLUT-2 contribuie la creterea [G] hepatocitare,
G determin separarea GK de GRP cu ptrunderea enzimei n citosol, avnd
loc fosforilarea G la G-6-P

Cnd [G] libere scade, Fr-6-P determin translocarea GK napoi n nucleul

hepatocitar i legarea acesteia la GRP cu inhibarea activitii enzimatice;
GK=senzor de G; crete secreia de insulin metabolizarea G
 REACIILE GLICOLIZEI

B. Izomerizarea G-6-P la Fr-6-P (fructozo-6-fosfat)

Reacia este complet reversibil

Nu constituie o etap limitant de vitez
Are loc n prezena fosfoglucoizomerazei
 REACIILE GLICOLIZEI

C. Fosforilarea Fr-6-P la Fr-1,6- bisfosfat are loc n prezena

Fosfofructokinazei I (PFK-1) sau a fructozo-6- fosfat kinazei

Cea mai important etap limitant de vitez a glicolizei

PFK-1 este o enzim alosteric, cheie, inhibat de prezena unor
cantiti mari de ATP (semnal energogen) i de Fr-6-P
modularea activitii PFK-1 de alte substane reglatoare
 REACIILE GLICOLIZEI

Reglarea realizat de rezervele energetice icel.

PFK-1 este inhibat de:
[ATP] crescut
[citrat] crescut

PFK-1 este inhibat de [AMP] crescut, indicnd epuizarea rezervelor

energetice celulare

Reglarea exercitat de [Fr-2,6-difosfat]

Fr-2,6-difosfat= cel mai puternic activator al PFK-1 activnd-o i n

prezena unor cantiti crescute de ATP
 REACIILE GLICOLIZEI

Reglarea exercitat de [Fr-2,6-difosfat]

Fr-2,6-difosfat se formeaz sub aciunea PFK-2, diferit de PFK-1

cu dubl activitate: kinazic i fosfatazic ce asigur retroconversia
Fr-2,6-difosfat la Fr-6-P
n ficat, domeniul kinazic este activ cnd este defosforilat
Fr-2,6-difosfat inhib Fr-1,6-disfosfataza, enzima GNG
 REACIILE GLICOLIZEI

Aciunea reciproc a Fr-2,6-bisfosfat de activare a glicolizei i de

inhibare a GNG (nefiind simultane cele dou ci): este mpiedicat
crearea unui ciclu inutil prin care G ar fi transformat n Py n paralel
cu resinteza G din Py

postprandial, [Glucagon] i [insulin] stimuleaz activitatea Fr-2,6-

bisfosfat, cu activarea glicolizei
Fr-2,6-bisfosfat = semnal icel ce indic prezena unei [G]

jeun, [Glucagon] i [insulin] reduce [Fr-2,6-bisfosfat]

intrahepatocitar cu scderea ratei globale a glicolizei
 REACIILE GLICOLIZEI
D. Scindarea Fr-1,6- difosfatului n prezena aldolazei (Fr-1,6-
bisfosfat-aldolaza)
reacie reversibil i necontrolat

n urma clivrii
Fr-1,6- bisfosfat-ului
se obine DHAP
(dihidroxiacetonfosfat)
i GAP
(gliceraldehid-3-fosfat)

n ficat i rinichi, aldolaza B cliveaz Fr-1,6- difosfatul, intervenind

n metabolizarea Fr alimentare
 REACIILE GLICOLIZEI

E. Izomerizarea dihidroxiaceton-fosfatului (Interconversiunea trioz-

fosfailor)

Numai GAP este degradat n faza a II-a a glicolizei

DHAP este utilizat dup conversia la GAP
Reacia este reversibil i catalizat de triozo-fosfat-izomeraza avd
ca rezultat net producerea a 2 molecule de gliceraldehid-3-fosfat din
produii de clivare ai Fr-1,6-difosfatului

Se ncheie prima etap a glicolizei

 REACIILE GLICOLIZEI

Etapa productoare de energie- 5 etape:

F. Oxidarea gliceraldehid-3-fosfat (GAP) la 1,3 bisfosfoglicerat

G. Sinteza 3-fosfoglicerat (Transferul gruprii fosfat pe ADP) cu
sinteza de ATP
H. Translocarea fosfatului de pe C 3 pe C 2 (Izomerizarea 3-
fosfoglicerat la 2- fosfoglicerat)
I. Deshidratarea 2- fosfoglicerat cu formarea fosfoenolpiruvat (PEP)
J. Sinteza Py (Transferul fosfatului de pe PEP pe ADP)
 REACIILE GLICOLIZEI

F. Oxidarea gliceraldehid-3-fosfat (GAP) la 1,3 bisfosfoglicerat n prezena

gliceraldehid-3-fosfat-dehidrogenaza (GAPDH), este prima reacie de
oxidoreducere a glicolizei ce va conduce la formarea de NADH, H+:

Gruparea carboxil rezultat din oxidarea funciei aldehidice este legat

printr-o legtur macroergic de fosfat, rezultnd un ester carboxilfosfat
 REACIILE GLICOLIZEI

F. Oxidarea gliceraldehid-3-fosfat (GAP) la 1,3 bisfosfoglicerat

Cele 2 molecule de GAP obinute n prima faz vor fi metabolizate la

Py, secvena enzimatic fiind descris pornind de la o molecul GAP

Enzima care catalizeaz reacia este gliceraldehid-3-fosfat

dehidrogenaza, GAPDH, n prezena fosfatului anorganic.

Produsul obinut este 1,3-bisfosfoglicerat. Electronii eliberai sunt

preluai de NAD+. Reacia este reversibil
 REACIILE GLICOLIZEI

Pt ca glicoliza s poat continua, NADH rezultat trebuie reoxidat la

NAD + prin 2 mecanisme:

conversia Py la Lactat (reacie anaerob)

oxidarea NADH n lanul respirator mitocondrial

Energia fosfatului macroergic faciliteaz sinteza ATP-ului n

urmtoarea reacie a glicolizei
 REACIILE GLICOLIZEI

G. Sinteza 3-fosfoglicerat (Transferul gruprii fosfat pe ADP) cu sinteza de

ATP:

1molecul G genereaz
2 molecule 1,3BPG
reacia nlocuiete cele
2 molecule de ATP consumate

Reacia este reversibil n condiii fiziologice, obinndu-se 3- fosfoglicerat

i ATP= fosforilare la nivel de substrat (energia necesar formrii unui
compus macroergic provine din clivajul unui S, nu din lanul transportor de
electroni)
 REACIILE GLICOLIZEI

Sinteza 2,3-bifosfogliceratului n eritocite

Fosfoglicerat-
kinaza
1,3 BPG 3-Fosfoglicerat
Mutaza
Fosfataza

2,3 DPG

2,3 DPG prezent n celule n cantiti infime, n eritrocite exist n

concentraii crescute, glicoliza fiind modificat prin aceste reacii de
untare
 REACIILE GLICOLIZEI

Mecanismul intoxicaiei cu arsenic

Toxicitatea arsenicului inhib:
piruvat- dehidrogenaza (cofactor- acidul lipoic)

Arsenicul pentavalent mpiedic formarea de ATP si NADH n calea glicolizei,

fr a inhiba direct aceast cale:
Arsenicul intr n competiie direct cu fosfatul anorganic ca substrat al
GAPDH (gliceraldehid-3-fosfat-dehidrogenazei), formnd un complex care
hidrolizeaz spontan cu formare de 3-fosfoglicerat

Prin scurtcircuitarea sintezei i a defosforilrii moleculei de 1,3- DPG, celula

este privat de energia produs n cursul glicolizei
 REACIILE GLICOLIZEI

H. Translocarea fosfatului de pe C 3 pe C 2 (Izomerizarea 3-

fosfoglicerat la 2- fosfoglicerat) este catalizat de fosfoglicerat-
mutaz, fiind o reacie reversibil spontan

I
 REACIILE GLICOLIZEI

I. Deshidratarea 2- fosfoglicerat cu formarea fosfoenolpiruvat (PEP)

are loc sub aciunea enolazei

inducnd redistribuirea energiei n cadrul moleculei cu formarea

fosfoenolpiruvatului (PEP) ce conine o grupare enol-fosfat
macroergic.

Reacia este reversibil n pofida caracterului macroergic al

produsului
 REACIILE GLICOLIZEI

J. Sinteza Py (Transferul fosfatului de pe PEP pe ADP)

Transferul fosfatului de pe PEP pe ADP este catalizat de piruvat-kinaz

(fosfotransferaza)= a II-a fosforilare de substrat ;a 3-a reacie ireversibil a
glicolizei
 REACIILE GLICOLIZEI

1. Reglarea prin conexiune direct (feed- forward) a piruvat-kinazei:

La nivel hepatic, piruvat-kinaza este activat de Fr-1,6-difosfat,
produsul reaciei catalizate de fosfofructokinaz

Reglarea feed- forward este diferit de mecanismul feedback,

determinnd cuplarea celor dou kinaze:

creterea activitii FFrK conduce la creterea [Fr-1,6- difosfat],

care activeaz piruvat-kinaza
 REACIILE GLICOLIZEI

2. Modularea covalent a piruvat-kinazei:

Fosforilarea unei protein-kinaze AMPc- dependente determin

inactivarea piruvat-kinazei hepatice, mecanism declanat la glicemie
sczut (glucagonul stimuleaz creterea [cAMP])

PEP nu mai particip la reciile glicolizei i ptrunde n circuitul

GNG; glucagonul inhib glicoliza hepatic i stimuleaz GNG

Defosforilarea piruvat kinazei sub aciunea unei fosfoprotein-

fosfataze determin reactivarea enzimei
 REACIILE GLICOLIZEI

2. Modularea covalent a piruvat-kinazei:

REGLAREA GLICOLIZEI
 REACIILE GLICOLIZEI

3. Deficitul de piruvat-kinaz ca frecven, reprezint a doua cauz

de anemie hemolitic prin deficit enzimatic (dup deficitul de
glucozo-6-fosfat dehidrogenaza)

Eritrocitul matur, normal, nu dispune de mitocondrii, pt producerea

de ATP fiind complet dependent de glicoliz

ATP: necesiti metabolice eritrocitare; combustibil biologic al

pompelor ionice ce asigur meninerea formei biconcave flexibile a
hematiei
 REACIILE GLICOLIZEI

Anemia hemolitic din deficitul de piruvat-kinaz:

consecin a modificrii membranei eritrocitare cu

alterarea formei hematiei
fagocitarea hematiilor de ctre SRE (macrofagele splenice)
95% dintre defectele genetice ale enzimelor glicolitice
4% deficit de fosfogluco- izomeraz
form cronic de gravitate medie sau sever (transfuzii repetate)
 REACIILE GLICOLIZEI
Reducerea Py la lactat are loc la nivelul structurilor slab
vascularizate/ lipsite de mitocondrii

Sinteza muscular de lactat este favorizat de creterea raportului

NADH/ NAD + cnd sinteza NADH n prezena GAPDH i a celor 3
dehidrogenaze NAD + - dependente din ciclul citric depete
capacitatea oxidativ a lanului respirator
 REACIILE GLICOLIZEI

Sinteza muscular de lactat

n efort fizic intens, lactatul se

acumuleaz n muchi i
determin scderea pH celular,
crampe musculare

Cea mai mare parte difuzeaz

n sngele circulant fiind
utilizat la nivel hepatic pt
sinteza glucozei

Ciclul lui Cori

 REACIILE GLICOLIZEI

Utilizarea lactatului
Sensul reaciei catalizate de LDH depinde de :
[lactat], [piruvat] icel.
NADH/ NAD +
La nivel hepatic i cardiac, NADH/ NAD + este < fa de muchiul n
efort, lactatul fiind oxidat la Py
n ficat, Py este convertit n G prin GNG sau oxidat n ciclul citric

Muchiul cardiac este singurul capabil s oxideze lactatul n CO 2 i

ap pe calea ciclului citric
Ciclul Cori sau cooperarea metabolic
muchi striat-ficat
 REACIILE GLICOLIZEI

Acidoza lactic = creterea [lactat] ce nsoete colapsul circ. din

infarctul miocardic
embolia pulmonar
hemoragiile necontrolate
oc

Excesul de oxigen necesar recuperrii dup o perioad de n care aportul

de oxigen a fost inadecvat = "datorie de oxigen"

Lactacidemia permite depistarea rapid a datoriei de oxigen, permite

monitorizarea recuperrii pacientului cu oc
 APORTUL ENERGETIC AL GLICOLIZEI

Glicoliza anaerob
2 molecule ATP/ molecul de G fr consum/sintez NADH

Glicoliza aerob
2 molecule ATP/ molecul de G; 1 molecul NADH n l. resp.
mitoc.= 3 ATP; pt a ajunge n MMI se folosesc navete
 REGLAREA HORMONAL A GLICOLIZEI
Reglarea alosteric a glicolizei sau prin fosforilarea/ defosforilarea E
limitante de viteza este de scurt durat

Reglarea hormonal determin creterea de 10-20 ori a activitii

enzimatice (ore, zile)

Mesele bogate n CH sau insulina activeaz transcripia genic

precum i creterea [glucokinaz], [FFrK] i [piruvat-kinaza] la nivel
hepatic cu activarea glicolizei

Transcripia genic i sinteza celor 3 E sunt reduse jeun, n DZ,

glucagon plasmatic i insulina
 GLICOLIZA

Cile de transformare a piruvatului

A. Decarboxilarea oxidativ a Py
este important n esuturile cu capacitate
oxidativ crescut (miocard)

Complexul piruvat- dehidrogenazei

asigur conversia ireversibil a Py n acetil-
CoA, principalul combustibil al ciclului citric i
elementul esenial al sintezei AG

inhib PDH
 GLICOLIZA
B. Carboxilarea Py la OAA sub aciunea piruvat-carboxilazei biotin-
dependent
surs de intermediari ai ciclului citric, substrat al GNG

Piruvat-carboxilaza este activat de acetil- CoA i catalizeaz o

reacie ireversibil
 GLICOLIZA
C. Reducerea Py la etanol sau fermentaia alcoolic (metabolismul
microorganismelor)