Sunteți pe pagina 1din 155

BIOCHIMIE MEDICAL

Suport curs pentru studenii Facultilor de Medicin i


Asisten Medical

CUPRINS

1. Proteine
2. Enzime
3. Vitamine
4. Energetica biochimic
5. Metabolismul glucidic
6. Metabolismul lipidic
7. Metabolismul proteic
8. Metabolismul nucleotidelor purinice si pirimidinice
9. Metabolismul cromoproteinelor
9.1. Biosinteza hemoglobinei
9.2. Degradarea hemoglobinei (bilirubinogenez
Abrevieri folosite n text

1. PROTEINE

Proteinele sunt componeni de baz ai celulei, reprezentnd aproximativ 50% din


greutatea ei uscat. Proteinele se gsesc n toate compartimentele celulare, fiind
substane fundamentale din toate punctele de vedere pentru structura i funcia celulei.
Prin hidroliza proteinelor se obin compui cu greutate moleculara mica, aminoacizi.
n organism proteinele ndeplinesc funcii multiple (plastic, energetic,
catalitic etc.) care le difereniaz de lipide sau glucide.
n alctuirea moleculelor proteice, aminoacizii se unesc prin legturi amidice
numite legturi peptidice, care se realizeaz prin eliminarea unei molecule de ap ntre
gruparea carboxil a unui aminoacid i gruparea amino a aminoacidului urmtor.

1.1.AMINOACIZII
Prin hidroliza proteinelor se formeaz 20 de -aminoacizi. Acetia sunt compui
cu greutate molecular mic care conin dou grupri funcionale, carboxil i amino,
legate de acelai atom de carbon ( C ).
Formula general a unui aminoacid este:
R

CH COOH
NH2

la care corespund toi aminoacizii cu excepia prolinei si hidroxiprolinei. Dup structura


radicalului R, aminoacizii se clasific n funcie de natura radicalului R:
Tabel 1 - Clasificarea -aminoacizilor din structura proteinelor
Formula structural
R CH COOH
Numele uzual
Numele tiinific
NH2

I. Radical alifatic (acizi monoaminomonocarboxilici)


H CH COOH

Glicina (Glicocol)
Gly (G)

Acid aminoacetic

NH2
CH3 CH COOH
NH2

Alanina
Ala (A)

Acid amino-propionic

Valina
Val (V)

Acid amino-izovalerianic

Leucina
Leu (L)

Acid -amino-izocaproic

Izoleucina
Ile (I)

Acid -amino--metilvalerianic

CH3 CH CH COOH
CH3 NH2

CH3 CH CH2 CH COOH


CH3

NH2

CH3 CH2 CH CH COOH


CH3 NH2

II. Radical cu grupare acida (acizi monoaminodicarboxilici)


Acid aspartic
Acid amino-succinic
HOOC CH2 CH COOH
Asp (D)
NH2

Asparagina
Asn (N)

-amida acidului
amino-succinic

H2N OC CH2 CH COOH


NH2

Acid glutamic
Glu (E)

Acid -amino-glutaric

Glutamina
Gln (Q)

-amida acidului
amino-glutaric

HOOC CH2 CH2 CH COOH


NH2

H2N OC CH2 CH2 CH COOH


NH2

III. Radical cu grupare bazica (acizi diaminomonocarboxilici)


Arginina
NH CH2 (CH2)2
Acid
-amino-Arg (R)
guanidino-n-valerianic
HN C

CH COOH
NH2

H2N

Lizina
Lys (L)

Acid ,-diaminocarpoic

H2N

Hidroxilizina
Hyl

Acid --diamino-hidroxi-n-carpoic

CH2

CH2

H2N

(CH2)3 CH COOH
NH2

CH

(CH2)2 CH COOH

OH

NH2

Histidina
Hys (H)

Acid -amino-imidazolil-propionic

CH2 CH COOH
HN

NH2

IV.Radical cu grupare hidroxil (Hidroxiaminoacid)


Serina
Acid -amino--hidroxiCH2 CH COOH
Ser (S)
propionic
OH

Treonina
Thr (T)

Acid -amino--hidroxin-butiric

CH3 CH CH COOH
OH NH2

V. Radical cu grupare tiolic (Tioaminoacizi)


Cisteina
Acid
-amino-Cys C
mercapto-propionic
Cistina

NH2

CH2 CH COOH
SH

Acid --ditio-(-aminopropionic)

NH2
CH2 CH COOH
NH2

S CH2 CH COOH
NH2

Metionina
Met (M)

Acid -amino--metiltio-n-butiric

CH2 CH2 CH COOH


S

NH2

CH3

VI. Radical aromatic (aminoacizi aromatici)


Histidina (grupa Acid
-amino-III)
clasificat
n
categoria
imidazolil propionic
amino-acizilor bazici (III)

Fenilalanina
Phe (F)

Acid -amino--fenilpropionic

CH2 CH COOH
NH2

Tirozina
Tyr (Y)

Acid -amino--(phidroxifenil) propionic

HO

CH2 CH COOH
NH2

Triptofan
Trp (W)

Acid -amino--(3)
indolil-propionic

CH2 CH COOH
NH2

VII. Iminoacizi
Prolina
Pro (P)

Acid
carboxilic

pirolidin-2N
H

COOH

HO

Hidroxiprolina
Hyp

N
H

Acid 4-hidroxi-pirolidin2-carboxilic

COOH

Dintre cei 20 de aminoacizi care intr n structura proteinelor animale opt


aminoacizi nu pot fi sintetizai n organism: provin din alimente aminoacizii eseniali:
Val, Phe, Leu, Ile, Thr, Trp, Met, Lys.
1.1.1. Proprieti fizice
a) Cu excepia glicinei, toi aminoacizii conin atomi de carbon asimetric,
motiv pentru care prezint activitate optic: la pH = 7 unii sunt dextrogiri (+), iar alii
sunt levogiri (-). Cu toate acestea ei aparin seriei L deoarece au configuraia
Lglicerinaldehidei.
CHO
HO C H
CH2 OH

L glicerinaldehida

COOH
H2N C H
R

L aminoacid

n organismele animalelor superioare apar i sunt metabolizai numai


L
aminoacizii, n timp ce D-aminoacizii se gsesc n peretele celular al unor
microorganisme sau n lanul polipeptidic din structura unor antibiotice (gramicidina,
actinomicina D).
Izomerii dextro i levo ai aminoacizilor formeaz perechi de enantiomeri care au
proprieti chimice asemntoare. Amestecul lor echimolecular se numete amestec
racemic i este lipsit de activitate optic. Sinteza enzimatic, fiind stereospecific,
conduce la unul sau cellalt enantiomer. Sinteza n laborator conduce la
amestecuri racemice de aminoacizi. Acest tip de amestec se poate obine numai
pe cale sintetic.

b) Aminoacizii sunt substane cristaline, solubile n ap, puin solubile n


solveni organici, cu puncte de topire de peste 200o C. n soluii apoase ei se gsesc sub
forma de ioni dipolari sau zwiterioni:
COO

+
H3N C H
R

Cnd un astfel de ion se dizolv n ap, el poate aciona fie ca un acid (donor de
protoni), fie ca o baz (acceptor de protoni):
Ca un acid: H3N+-CH(R)-COOH+ + H2N-CH(R)- COOCa o baza:
H3N+-CH(R)-COO- + H+
H3N+-CH(R)-COOH
Substanele care au astfel de proprieti se numesc amfotere sau amfolii.
Existenta ionului bipolar explic utilizarea soluiilor de aminoacizi drept soluii tampon.
Dac la soluia unui aminoacid se adaug un acid tare, protonii si vor fi neutralizai de
gruprile carboxil ale aminoacidului, iar dac se adaug o baza tare, gruprile hidroxil
vor fi neutralizate de gruprile NH3+, astfel nct pH-ul soluiei nu se modific.
c) Toi aminoacizii izolai din proteine absorb slab radiaiile din domeniul
ultraviolet (220 nm). Triptofanul, tirozina i fenilalanina, datorit nucleului aromatic,
dau absorbie specific la 280 nm, proprietate ce st la baza unei metode de dozare a
proteinelor.
1.1.2. Proprieti chimice
Proprietile chimice ale aminoacizilor sunt datorate att celor doua grupri
funcionale ct i prezenei radicalului R. Unele din aceste reacii se petrec i n
organism, altele sunt utilizate n studiul proteinelor (identificarea aminoacizilor din
hidrolizatele proteice, stabilirea secvenei de aminoacizi n proteine, identificarea
aminoacizilor specifici pentru funcia proteinelor, modificarea chimic a resturilor de
aminoacizi din moleculele proteice n vederea modificrii activitii lor biologice),
precum i pentru sinteza lanurilor polipeptidice n laborator.
1- Reacia cu acidul azotos, din care rezulta hidroxiacizi (reacie utilizat
pentru dozarea aminoacizilor prin metoda van Slyke).
R

CH COOH + HNO2

HCl

NH2

CH COOH + H2O + N2
OH

2- Reacia de alchilare atomii de H de la gruparea amino pot fi nlocuii cu


radicali alchil (de obicei metil), cu formare de betaine (compui n care atomul de azot
este cuaternar)
R CH
NH2

COOH + 3 CH3I

R CH COO
+N(CH )
3 3

Betaina glicocolului este un important donor de grupare metil n organism.

3- Reacia de acilare n prezenta acizilor carboxilici, a anhidridelor sau a


clorurilor acide gruparea amino poate fi acilat. De la glicocol, prin acilare la nivel
hepatic se obine acidul hipuric, compus ce reprezint forma de eliminare a acidului
benzoic din organism.
H2H-CH2-COOH + C6H5 CO~SCoA C6H5-CO-NH-CH2-COOH + CoA-SH
Acid hipuric
4- Reacia cu formaldehida gruparea amino poate reaciona reversibil cu
aldehidele, formnd compui denumii baze Schiff. Aceasta reacie s la baza metodei de
dozare a aminoacizilor prin metoda Srensen (formol titrarea). Bazele Schiff apar i n
organism sub forma de compui intermediari n unele procese (transaminare,
decarboxilare etc.).
R

CH
NH2

COOH + HCHO

CH

COOH + H2O

N CH2

5- Reacia cu ninhidrina ninhidrina este un agent oxidant care produce


decarboxilarea -aminoacizilor cu eliberare de CO2, NH3 i o aldehida cu un atom de C
mai puin. Ninhidrina redus reacioneaz cu amoniacul eliberat, formnd un complex
colorat n albastru, ce prezint absorbie specific la 570 nm; aceasta reacie st la baza
uneia din cele mai utilizate metode de dozare a aminoacizilor.
6- Reaciile specifice radicalului R sunt utilizate pentru identificarea calitativ a
aminoacizilor:
- reacia Sakaguchi specific pentru arginina care n prezena -naftolului d o
coloraie roie;
- reacia cu nitroprusiat specific cisteinei cu care d o coloraie roie;
- reacia Pauli (soluie alcalin de acid sulfanilic diazotat) reactivul d o
coloraie roie cu histidina i tirozina;
- reacia Ehrlich este specific pentru triptofan care d o coloraie albastr;
- reacia Folin Cioclteu (acid fosfomolibdowolframic) specific pentru
tirozina care d o culoare roie;
- reacia xantoproteic prin fierbere cu acid azotic concentrat, aminoacizii
ciclici dau o coloraie galben care trece n portocaliu la adugarea de baze.
1.2. PEPTIDE
Peptidele sunt compui rezultai din unirea a mai multor molecule de aminoacizi
prin legaturi peptidice (-HN-CO-) i pot fi obinute din proteine prin hidroliz parial
(chimic sau enzimatic).
n funcie de numrul de aminoacizi din molecul peptidele se mpart n:
- oligopeptide conin pn la 10 aminoacizi n molecul;
- polipeptide conin ntre 10 i 100 aminoacizi.
Polipeptidele care conin mai mult de 100 de resturi de aminoacizi n molecul
poart numele de proteine.

Nomenclatura peptidelor se face indicnd numele aminoacizilor n ordinea


n care se gsesc n molecul, ncepnd cu aminoacidul care conine gruparea aminoterminal liber. Denumirile aminoacizilor vor cpta terminaia il, cu excepia
ultimului care conine gruparea carboxil-terminal liber: de exemplu peptidul cu
secvena Ser-Gly-Tyr-Ala-Leu-Cys se va citi Seril-Glicil-Tirozil-Alanil-Leucil-Cistein.
Proprietile peptidelor
Peptidele, n special cele cu greutate moleculara mic, sunt solubile n ap,
insolubile n alcool absolut i au caracter amfoter ca i aminoacizii din care sunt
constituite.
Gruprile amino-terminale precum i gruprile R laterale dau aceleai reacii
caracteristice ca i cele din aminoacizii liberi. O reacie caracteristic este reacia
biuretului, care const n tratarea peptidelor i proteinelor cu soluii alcaline de Cu2+, cu
formarea unui complex colorat in violet; aceasta reacie este dat numai de compuii
care conin cel puin dou legturi peptidice n molecul.
Peptide biologice
1- Tripeptide. Glutationul (-glutamil-cisteinil-glicina) este prezent n toate
esuturile vii.
HOOC CH

CH2

CH2

NH2

CO

NH

CH CO
CH2

NH CH2 COOH

SH

Glutationul se gsete n organism n forma redus (GSH) i sub form oxidat


(GSSG). El ndeplinete un important rol fiziologic, fiind socotit un important sistem
oxidoreductor celular.
2 - Hormoni peptidici. Exist o serie de hormoni cu structur polipeptidic: unii
hormoni hipofizari, insulina, glucagonul, oxitocina, vasopresina i ACTH.
3 Peptide cu aciune antibacterian. Penicilinele, tirocidinele (A,B),
gramicidinele (A,B,C), bacitracinele i polimixinele au o structur polipeptidic.
Penicilinele sunt polipeptide atipice care conin acid 6-amino-penicilanic pe molecula
cruia sunt grefai diveri radicali. Cnd radicalul este C 6H5-CH2- compusul se numete
benzil-penicilina (penicilina G).
1.3. PROTEINE
Proteinele sunt biopolimeri macromoleculari care conin n molecul peste 100
de resturi de aminoacizi unii prin legturi peptidice. Numrul, natura i modul de
aranjare al aminoacizilor n molecul variaz de la o proteina la alta. Moleculele proteice
pot adopta diverse conformaii n spaiu, fiind descrise astfel mai multe niveluri de
organizare: primar, secundar, teriar i cuaternar.
1.3.1. Nivele de organizare structural
Structura primar
Structura primar reprezint numrul i ordinea aminoacizilor n molecul.

9
R1

(CO

CH
R

NH) n

;
+

H3N

CH

NH

R3

CH

CH

CH .............CH

R2

R4

COO

Structura secundar
Structura secundar reprezint cel de-al doilea nivel de organizare structural a
proteinelor, reprezentnd aranjarea spaial a moleculei proteice pe o singur\ ax\. Acest
lucru este posibil datorit legturilor de hidrogen formate ntre resturile carboxil i
amino aparinnd legturilor peptidice.
Cea mai mare contribuie la elucidarea structurii secundare a proteinelor au avut-o
lucrrile lui Pauling si Corey care au elaborat dou modele teoretice: modelul helicoidal
(spiralat) i modelul straturilor pliate, modele care explic destul de bine proprietile
fizico-chimice i biologice ale moleculelor proteice.
Structura sau modelul helicoidal rezult prin spiralarea catenei
polipeptidice n jurul unui cilindru imaginar.
n funcie de orientarea aminoacizilor, elicea poate fi de tip -dreapta, care are
sensul de rotaie al unui urub cu filetul spre dreapta i de tip -stnga cu sensul de
rotaie spre stnga. n ambele forme radicalii R ai aminoacizilor sunt proiectai spre
exteriorul elicei; n elicea dreapta radicalul R se afl n poziie trans fa de oxigen,
motiv pentru care aceasta forma este mai stabil.
Helixul de tip are forma unei scri n spiral. nalimea fiecrei trepte este de
1,5 , iar o spir conine 3,6 resturi de aminoacizi, ceea ce face ca distana dintre spire
s fie de 5,6 .

10

Aceast structur este meninut n spaiu datorit legturilor de hidrogen n care


sunt implicate toate legturile peptidice. Legturile de hidrogen sunt paralele cu axul
elicei i se realizeaz ntre gruparea carboxil a unui aminoacid i gruparea amino a celui
de-al patrulea aminoacid.
Prezena anumitor aminoacizi provoac ndoirea lanului polipeptidic. Din
aceast categorie fac parte prolina i hidroxiprolina (din cauza azotului iminic),
aminoacizi care conin grupri R ncrcate electric sau cu volum mare (arginina, acidul
glutamic, lizina, leucina, izoleucina).
Configuraia de tip -helix este ntlnit la multe proteine, dar nu nglobeaz
totalitatea lanului polipeptidic. Astfel, n molecula de paramiozina peste 90% din
aminoacizi sunt implicai n formarea -helixului, n timp ce n alte proteine spiralarea
nu depete 50%.
Structura sau modelul straturilor pliate se bazeaz pe formarea legaturilor

de hidrogen intercatenare i poate apare n doua variante: modelul paralel al straturilor


pliate (caracteristic -keratinei) i modelul antiparalel (ce poate fi ntlnit n cazul
fibroinei din mtase).

n modelul paralel (a) toate lanurile polipeptidice sunt aezate paralel, cu gruprile R
orientate n acelai sens, n timp ce n straturile antiparalele (b) catenele polipeptidice sunt
aezate fa n fa. Spre deosebire de -helix, n structura de tip , legturile de hidrogen sunt
aproape perpendiculare pe axa lanului polipeptidic.
Structura . Colagenul.
n afara celor dou modele caracteristice pentru structura secundar a proteinelor
descrise mai sus , mai exist o structur particular ntalnit n colagen, o proteina fibrilar,
insolubil i elastic prezent n esuturile animale (esut conjunctiv, tendoane, ligamente,
cartilagii, piele, oase etc.) i care reprezint aproximativ 25% din proteinele corpului.

11

Structura secundara a colagenului


este un triplu helix de dreapta format din trei
lanuri polipeptidice (fiecare fiind un helix de stnga) legate intre ele prin legaturi de
hidrogen.
Unitatea structural a colagenului este tropocolagenul care este format din trei lanuri:
dou lanuri 1 identice, iar al treilea, 2, fiind destul de asemntor cu celelalte dou.
Fiecare lan conine aproximativ 1000 de resturi de aminoacizi, dintre care 1/3 sunt resturi de
glicin; de asemenea exist un coninut ridicat de prolin, precum i o serie de aminoacizi
mai rari: hidroxiprolina i hidroxilizina.
Hidroxiprolina se formeaz dup ce lanul polipeptidic a fost sintetizat, prin aciunea
prolinhidroxilazei, enzim ce necesit O2, Fe2+, -cetoglutarat i acid ascorbic (vitamina C).
n scorbut, lipsa vitaminei C mpiedic hidroxilarea prolinei i colagenul sintetizat n aceste
condiii are o structura anormal, ceea ce duce la apariia leziunilor cutanate i la fragilitate
vascular.
ntre cele trei lanuri polipeptidice se stabilesc legturi de hidrogen ntre gruprile
>NH dintr-un lan i gruprile >C=O din alt lan i legturi van der Waals ntre resturile
nepolare ale aminoacizilor. Aceste legturi sunt orientate transversal fa de axa helixului.
Resturile de glicin ocup ntotdeauna al treilea loc n secvena aminoacizilor ncepnd din
poziia
13
a
lanului

polipeptidic.
Coninutul n iminoacid (prolina i hidroxiprolina) este important pentru
stabilirea termic a colagenului; colagenul animalelor cu snge cald, cel mai bogat
n prolin i hidroxiprolin, este i cel mai stabil termic.
Capetele lanurilor polipeptidice sunt nespiralate i datorit flexibilitii pot
forma legturi specifice ntlnite numai n aceste tipuri de proteine.
Ca i n cazul fibrinei, molecula de colagen este stabilizat prin legturi
ncruciate realizate intramolecular i intermolecular ntre resturile de lizin situate
n poriunile nespiralate ale moleculei de tropocolagen.
Numrul acestor legturi variaz cu funcia fiziologic i vrsta colagenului.
Astfel, colagenul din tendonul lui Achile, la obolanii maturi, are un numr foarte

12

mare de astfel de legturi, n timp ce n colagenul din coad care este flexibil,
numrul legturilor este mai mic.
O caracteristic interesant a structurii colagenului este faptul c ntre
capetele moleculelor de colagen se gsesc spaii libere care joac un rol nsemnat n
formarea osului, ntruct n aceste spaii se fixeaz calciu, sub form de
hidroxiapatit (fosfat bazic de calciu).
Elastina, constituentul major al pereilor vaselor sanguine i al ligamentelor,
are un coninut ridicat de glicin, prolin i acizi aminai cu grupri nepolare
(alanin, valin, leucin i izoleucin), dar conine foarte puin hidroxiprolin i
acizi aminai polari i nu conine deloc hidroxilizin. Elastina matur con ine multe
legturi ncruciate ce o face aproape insolubil i din acest motiv, foarte greu de
analizat.
Structura teriar reprezint interaciunea spaial ntre segmente care
nu sunt vecine n lanul polipeptidic, avnd ca rezultat o structur tridimens ional,
globular. Ea este caracteristic n special proteinelor globulare, a cror catene
macromoleculare sunt strnse sub forma unor cilindri elipsoidali cu o lungime care
nu depete de 2-6 ori diametrul lor. Este rezultatul interaciunii dintre radicalii R
ai resturilor de aminoacid din lanul polipeptidic. Forele de atracie implicate n
formarea structurii teriare sunt datorate urmtoarelor tipuri de legturi:
a) Legturi de hidrogen care pot fi stabilite ntre gruparea fenolic a tirozinei
i o grupare carboxil de la acidul glutamic sau acidul aspartic, sau ntre radicalul
imidazolic al histidinei i gruparea hidroxilic a serinei.
b) Legturi ionice ntre grupele carboxil ale acizilor dicarboxilici i grupele
amino ale acizilor diaminai. Realizarea acestor legturi este posibil atunci cnd
distanele dintre atomi sunt cuprinse ntre 2 i 3,1 . Studii de difracie a razelor X
au evideniat c n realitate se formeaz un numr mai mic de legturi ionice,
datorit faptului c majoritatea gruprilor care ar putea realiza aceste legturi intr
n interaciune cu solventul. ntr-adevr, n soluie, gruprile polare ale proteinelor
sunt orientate spre exteriorul moleculei, ceea ce face ca proteinele s fie solubile i
s se comporte ca electroliii.
c) Legturi nepolare prin fore van der Waals care se stabilesc ntre radicalii
hidrocarbonai al alaninei, fenilalaninei, leucinei etc. Distanele dintre atomii care
particip la astfel de legturi sunt cuprinse ntre 3,1 i 4,1 . Aceste legturi sunt
cele mai importante pentru meninerea proteinei n structura teriar. Resturile
nepolare, hidrofobe se gsesc n interiorul ghemului rezultat prin ncolcirea
lanului polipeptidic avnd ca efect stabilizarea din punct de vedere termodinamic a
moleculei, mai mult dect n cazul n care aceste resturi ar fi orientate spre mediul
exterior. Din acest motiv lanurile peptidice introduse n soluie apoas se
ncoltcesc spontan aa fel nct resturile nepolare se situeaz n interiorul
ghemului, iar gruprile polare rmn pe suprafaa moleculei.
d) Legturi disulfidice S-S-, covalente, pot contribuie la meninerea
structurii teriare a proteinelor globulare limitnd tendina de depliere a moleculei,
ns contribuia lor este mic, deoarece sunt puine.

13

Structura primar a unei proteine determin aranjarea moleculei proteice n


configuraii -helix sau -foi pliate, n funcie de interaciunile radicalilor R.
Prima protein a crei structur teriar a fost elucidat este mioglobina
(Kendrew i colab. 1957), o protein globular, prezent n cantiti mari n muchi,
avnd rolul de a depozita oxigenul la nivel tisular. 75% din lanul polipeptidic (153
aminoacizi) din mioglobin cuprinde opt segmente elicoidale (notate A...........H),
coninnd ntre 7 (segmentul D) i 24 de resturi de aminoacizi (segmentul H).
Zonele elicoidale sunt ntrerupte de segmente nespiralate, la nivelul crora lanul
polipeptidic i schimb direcia. n patru dintre aceste puncte se afl prolina, n
celelalte plierea fiind determinat de ali factori. n acest fel, molecula se aranjeaz
ntr-o form compact cu dimensiunile 45 x 35 x 25 . n interiorul moleculei se
gsesc aminoacizi nepolari cu excepia a dou resturi polare de histidin care
particip la legarea hemului, iar n exterior sunt plasate gruprile polare i cele cu
ncrcare electric.

14

n general, proteinele intracelulare, solubile, au form sferic sau elipsoidal n


funcie de raportul dintre aminoacizii cu radical R polar i aminoacizii cu radical R
nepolar. Cnd raportul are valori cuprinse ntre 0,9-1,4, proteina opteaz pentru form
alungit, iar cnd raportul este mic (0,3-0,6) proteina adopt forma sferic.
n cazul proteinelor membranare, nglobate n dublul strat lipidic, resturile de
aminoacizi sunt repartizate invers, radicalii hidrofobi se gsesc pe partea exterioar care
vine n contact cu moleculele lipidice membranare, iar resturile polare i ncrcate
electric, n interior, cptuind canalele ionice ce strbat membranele.
Structura cuaternar
Un numr mare de proteine sunt constituite din mai multe lanuri polipeptidice,
formnd oligomeri. Lanurile individuale se numesc protomeri sau subuniti, fiecare
avnd structur primar, secundar i teriar proprie. Subunitile se asambleaz n
structura cuaternar prin fore asemntoare celor din structura teriar, cu deosebirea, c
n acest caz, legturile se stabilesc ntre subuniti.
n general, proteinele cu greutate molecular mai mare de 50.000 sunt formate
din mai multe subuniti polipeptidice i sunt active sub form de oligomeri, protomerii
fiind inactivi. n multe proteine subunitile sunt identice: chimotripsina, fosfataza
alcalin (dou subuniti), aldolaza (trei subuniti), glutamat dehidrogenaza (patru
subuniti), catalaza (optsprezece subuniti), iar n altele, subunitile sunt diferite:
hemoglobina (dou lanuri i dou ), lactat dehidrogenaza tetramer format din dou
tipuri de subuniti notate H (heart) i M (muscle).

15

Asamblarea
subunitilor
n structura cuaternar este posibil datorit
existenei unor zone complementare spaial si electric pe suprafeele subunitilor.
Interaciunile dintre subuniti prin suprafeele complementare sunt caracterizate
prin fenomenul de cooperare, adic primele contacte odat realizate, favorizeaz
formarea celorlalte.
Modificarea unui dintre protomeri (combinarea cu un compus oarecare) se
resimte la nivelul ntregii molecule oligomere, fiind deranjat structura cuaternar i
deci, funcia biologic a proteinei. Acest fenomen st la baza mecanismului de reglare
alosteric a activitii enzimelor.
Formarea proteinelor complexe confer proteinelor proprieti noi, fiecare
subunitate catalizeaz o etap dintr-o cale metabolic. Eficiena crete mult deoarece
intermediarii nu sunt pierdui n reacii colaterale, procesul desfurndu-se n flux
continuu. De exemplu, piruvat dehidrogenaza este format din patru subuniti: trei
subuniti catalitice (trei enzime distincte) i a patra este subunitate reglatoare.
O protein oligomer important este hemoglobina, responsabil de transportul
oxigenului la vertebrate. Structura hemoglobinei a fost elucidat de Perutz prin difracia
razelor X i spectre ORD (dispersia rotaiei optice).
Dou lanuri polipeptidice din hemoglobin sunt foarte asemntoare cu cel al
mioglobinei att n privina structurii primare ct i teriare. Lanul din hemoglobin
conine 141 resturi de aminoacizi, iar lanul conine 146 resturi de aminoacizi.
ntre lanurile identice se realizeaz legturi polare ntre gruprile terminale
+
NH3 i COO , iar ntre lanurile diferite, legturi de hidrogen i Van der Waals pe
poriuni mai mari.

16

1.3.2. Proprietile proteinelor


Proteinele izolate din diverse surse sunt n general substane solide, amorfe, care
prin purificare avansat pot fi obinute n stare cristalizat.
Solubilitatea proteinelor depinde de forma moleculei, natura solventului,
structura chimic, temperatur, pH. Ea se datoreaz prezenei pe suprafaa moleculei a
gruprilor polare, hidrofile (-COOH, -NH2, -OH) ce se orienteaz spre ap cu care
interacioneaz electrostatic. n acest mod, molecula proteic se izoleaz de celelalte
molecule i se dizolv. Proteinele globulare, avnd molecule ovoidale, se asociaz greu
i de aceea sunt solubile.
Proteinele fibrilare au o suprafa mic de contact cu solventul i ca atare sunt
puin solubile sau chiar insolubile n ap.
Modificarea pH-ului mediului influeneaz solubilitatea proteinelor prin
modificare ncrcrii electrice. La pHi (pH izoelecteric), solubilitatea proteinelor este
minim deoarece numrul sarcinilor pozitive fiind egal cu numrul sarcinilor negative,
moleculele proteice nu mai interacioneaz cu moleculele polare ale apei.
Soluiile diluate de electrolii (sruri ale metalelor uoare, NaCl, MgCl2, Na2SO4,
(NH4)2SO4) mresc solubilitatea proteinelor n timp ce soluiile concentrate scad
solubilitatea, pn la precipitare. Astfel, globulinele sunt greu solubile n ap pur, uor
solubile n soluii saline diluate i insolubile n soluii saline de concentraie mare.
Aceast comportare st la baza uneia dintre cele mai simple i rspndite metode de
separare a proteinelor plasmatice. Cel mai adesea se folosesc soluii de sulfat de amoniu
cu grad de saturare diferit: globulinele precipit cu soluii semisaturate de (NH4)2SO4, iar
albuminele, la concentraii mai mari de 75% saturaie.
Solvenii organici (eter, aceton, alcool), adugai la o soluie de protein,
mpiedic interaciunea moleculelor proteice cu moleculele apei i n consecin,
proteina va precipita.
Caracterul amfoter al proteinelor este dat de gruprile carboxil i amino
care nu sunt angajate n formarea legturilor peptidice. Ele vor imprima proteinei
caracter acid (cationi) sau bazic (anioni) n funcie de numrul gruprilor COOH i
NH2 libere provenite de la acid glutamic, acid aspartic, lizin, arginin i nucleului
imidazolic din histidin. Grupele carboxil i amino terminale au o contribuie mai redus
n determinarea caracterului amfoter cu ct lanul polipeptidic este mai lung.
La pH fiziologic toate gruprile acide sau bazice sunt complet ionizate. Fiecare
protein este caracterizat prin pH-ul izoelectric (pHi), care reprezint valoare pH-ului la
care ncrcarea electric a proteinei este nul, numrul gruprilor ncrcate pozitiv fiind
egal cu numrul gruprilor ncrcate negativ.
La pHi solubilitatea i mobilitatea n cmp electric a proteinei este minim. La
valori de pH mult diferite de pHi proteina va fi ncrcat (+) sau (-) i va migra n cmp
electric, proprietate ce st la baza metodelor electroforetice de separare a proteinelor din
amestecuri.

17

Proprieti optice proteinele ca i aminoacizii, prezint activitate optic


determinat de prezena atomilor de carbon asimetrici. La asimetria moleculei prin
carbon asimetric se adaug i asimetria creat de -helix. Puterea rotatorie a proteinelor
este o msur a strii de integritate sau degradare a moleculei.
Denaturarea proteinelor Conformaiile native ale proteinelor globulare
realizate prin interaciunile specifice dintre lanurile polipeptidice sunt fragile, fiind uor
deranjate de aciunea aa numiilor ageni denaturani. Aceti ageni acioneaz prin
ruperea legturilor necovalente din structurile secundar, teriar i cuaternar, dar nu
afecteaz legturile covalente, legturile peptidice rmn intacte (nu se elibereaz
aminoacizi).
Agenii denaturani sunt foarte diferii: temperatur ntre 50-60oC; valori extreme
de pH; ureea i guanidina n concentraii mari; ageni tensioactivi; solveni organici.
Deranjarea structurii teriare a moleculelor proteice duce la modificarea
proprietilor biologice a acestora. Forma moleculei proteice este determinat att de
structura primar, ct i de factorii de mediu. ntr-adevr, aa cum arat White i
Anfinsen, tratarea ribonucleazei cu uree 8M n prezena unui agent reductor, mercaptoetanolul, cauzeaz deplierea complet a moleculei prin ruperea celor patru
legturi disulfidice dintre resturile de cistein i n consecin pierderea activitii acestei
enzime. ndeprtarea prin dializ a agenilor denaturani duce la refacerea activitii
enzimei, ceea ce indic revenirea proteinei la structura teriar iniial.

Prin denaturare, proteinele i pierd proprietile chimice i fiziologice (hormonii


devin inactivi, anticorpii pierd capacitatea de a precipita antigenii etc.); n aceast stare,
proteinele sunt mai uor atacate de enzime dect n stare nativ.
Hidroliza proteinelor. Sub aciunea acizilor sau bazelor la cald i a enzimelor
proteolitice, proteinele sunt hidrolizate prin ruperea legturilor peptidice pn la stadiul de
aminoacizi.
Reacii de culoare. Proteinele dau aceleai reacii de culoare ca i aminoacizii
din care sunt constituite i pot fi identificate printr-una din acestea.
Reacia xantoproteic. Prin tratarea unei soluii de protein cu acid azotic, la
rece sau la cald, apare o coloraie galben datorit formrii unor nitroderivai;
Reacia biuretului. Tratarea unei soluii de protein cu reactiv biuret (o soluie
alcalin de sulfat de cupru) se formeaz un complex de culoare violet caracteristic.
Reacia este utilizat n practic pentru dozarea proteinelor din snge.

18

Proprietile
biochimice
i imunologice. Proteinele ndeplinesc n
organism diferite roluri cum ar fi, rol catalitic, de rezerv, transportor, protector, structural
etc.
1.3.3. Clasificarea proteinelor
Proteinele se clasific n general dup forma moleculelor i dup compoziia lor
chimic.
n clasificarea proteinelor dup forma molecular deosebim:
proteine globulare (sferoproteine) care au form aproape sferic (ovoidal) i
sunt, n general, solubile n ap, n soluii diluate de acizi, baze i sruri. Din aceast clas
fac parte albuminele, globulinele, histonele, protaminele i prolaminele;
proteine fibrilare (scleroproteine), caracterizate prin structur fibroas, de
forma unui elipsoid ntins cu raportul dintre axe de cel puin 1 : 100, sunt foarte greu
solubile n ap, au vscozitate mare i putere de difuzie mic. Aceste proprieti explic
prezena lor n esuturile de susinere. Din aceast clas fac parte colagenul, elastina,
fibrinogenul, miozina, actina, keratina etc.
Dup compoziia chimic, proteinele se pot clasifica n:
proteine simple (holoproteine), constituite din aminoacizi;
proteine conjugate (heteroproteine), conin pe lng aminoacizi i o grupare
prostetic. n funcie de natura acestei grupri, heteroproteinele se mpart n fosfoproteine,
glicoproteine, lipoproteine, metaloproteine, nucleoproteine i cromoproteine.
1.3.3.1. Holoproteine
Albuminele (serumalbumina, lactalbumina, ovalbumina etc.) sunt solubile n
ap, coaguleaz la nclzire, au pHi mai mare dect 7 i pot fi precipitate cu o soluie
saturat de sulfat de amoniu. Greutatea molecular a albuminelor este cuprins ntre 35.000
i 75.000. Albuminele intr n constituia proteinelor plasmatice (55%), participnd la
transportul glucidelor, lipidelor, hormonilor, srurilor biliare, medicamentelor i ionilor
(HCO3-, NO3-, citrat, Ca2+, Mg2+, Zn2+ etc.). Datorit masei moleculare mici i concentraiei
mari, albuminele serice asigur 80% din presiunea coloidosmotic a plasmei.
Globulinele sunt proteine globulare insolubile n ap, solubile n soluii de NaCl
5%. Prin nclzire coaguleaz. Sunt rspndite att n regnul vegetal ct i animal. Dintre
globulinele de origine animal amintim globulinele din snge cu greutate molecular de
aproximativ 500.000. Din totalul proteinelor plasmatice, 35-45% sunt globuline. Prin
electroforez au fost separate trei fraciuni (, i ), iar prin imunoelectroforez au fost
puse n eviden peste 30 fraciuni proteice. Fiecare fraciune ndeplinete un rol bine
definit; toate particip la transportul glucidelor, -, -globulinelelor, la transportul
lipidelor, iar -globulinele au rol n imunitate, motiv pentru care se numesc i
imunoglobuline. Imunoglobulinele sau anticorpii apar n serul sanguin sau n alte celule ca
rspuns la ptrunderea n organism a unei proteine sau a unei macromolecule provenit de
la alt specie, compus care poart numele de antigen.
Structura de baz a anticorpilor a fost elucidat de Porter n 1960. Anticorpii sunt
formai din dou lanuri polipeptidice grele (H), cu greutate molecular 53.000-75.000 i

19

dou lanuri uoare (L), cu greutate molecular 23.000, unite prin legturi
disulfidice. Lanurile grele au o regiune flexibil care permite rotirea capetelor aminoterminale cu un unghi variabil, ceea ce permite legarea antigenului.
Prin digestia cu papain molecula de imunoglobulin (IgG) poate fi divizat n trei
fragmente active cu greutate molecular 50.000. Papaina cliveaz lanurile H n partea
constant (C). Dou dintre fragmentele obinute pot lega anticorpul i din acest motiv au fost
notate Fab (F de la fragment i ab de la antigen binding), iar al treilea fragment, care leag
complementul, Fc.
IgG (150.000)

Papaina

2 Fab (50.000) + Fc (50.000)

Fragmentul Fab este format dintr-un lan L i o poriune a captului N-terminal al


lanului H. Fragmentul Fc este format din cele dou capete C-terminale ale lanurilor H
(Poriunea lanului H incorporat n Fab este notat Fd).

Au fost descrise mai multe tipuri de lanuri L i H. La om au fost evideniate numai


dou tipuri majore la lan L, notate K i , difereniabile serologic sau prin analiza secvenei
aminoacizilor. La om aproximativ 70% din lanurile L din Ig sunt de tip K i numai 30% de
tip . O imunoglobulin conine fie dou lanuri uoare K, fie dou , dar niciodat unul K i
unul . Lanul H este unic pentru o clas de Ig, dar au fost identificate cinci tipuri notate: , ,
, , . Fiecare tip de lan H se poate asocia cu lanuri L de tip K sau genernd cele cinci
clase de imunoglobuline: IgG (), IgA (), IgM (), IgD () i IgE (). Pe lanurile

20

polipeptidice ale Ig sunt ataate resturi glucidice (IgG conine dou resturi
monozaharidice i IgM trei resturi).
Scleroproteinele sunt proteine fibrilare, de consisten solid, ntlnite numai n
regnul animal, avnd rol de susinere i protecie, au un coninut mai sczut de azot fa de
alte proteine, dar au un coninut crescut de sulf. Scleroproteinele sunt total insolubile n ap,
n soluii acide i bazice i sunt stabile fa de aciunea enzimelor proteolitice.
Dup rolul pe care l ndeplinesc i dup esutul n care au fost identificate
scleroproteinele se mpart n:
Keratine se gsesc n epiderm, pr, unghii, pene, coarne etc. i au rol de
protecie. Au un coninut mare de sulf (2-5,7%) datorit proporiei mari de cistein. Graie
prezenei legturii disulfidice keratinele au o rezisten mecanic mare, elasticitate i
rezisten la aciunea enzimelor proteolitice i sunt insolubile.
Colagenele au coninut mare de glicocol, prolin, hidroxiprolin i hidroxilizin,
avnd o structur cu totul caracteristic, adaptat funciei esuturilor din care fac parte:
tendoane, ligamente, oase, cartilagii, piele. Ele reprezint 25% din proteinele corpului
omenesc.
Colagenele sunt insolubile n ap, dar prin fierbere ndelungat se transform n
gelatin solubil, n care o parte din legturile peptidice au fost hidrolizate. Colagenele sunt
rezistente la aciunea enzimelor proteolitice (cu excepia colagenazei), n timp de gelatina
poate fi hidrolizat cu pepsin i tripsin.
Elastinele se aseamn cu colagenul, ntlnindu-se alturi de acestea n esutul
conjunctiv, dar ele nu pot fi gelificate. Coninutul ridicat de glicocol, alanin i valin
imprim acestei proteine o elasticitate comparabil cu a cauciucului. Elastinele sunt
hidrolizate specific de elastaza pancreatic.
Fibrinogenul este o protein fibrilar format din ase lanuri polipeptidice unite
prin puni disulfidice. Din cauza dimensiunilor mari ale moleculei, n condiii fiziologice,
fibrinogenul trece n cantiti foarte mici prin peretele capilarelor n lichidul interstiial. n
inflamaii, din cauza alterrii permeabilitii capilarelor, trecere fibrinogenului este mult
facilitat.
Fibrinogenul este sintetizat n ficat i este degradat n macrofage i are timpul de
njumtire de 3-5 zile. Sub aciunea enzimatic a trombinei i a ionilor de calciu,
fibrinogenul se transform ntr-o protein fibrilar insolubil, denumit fibrin. Fibrina
formeaz o reea spaial n care sunt nglobate elementele figurate ale sngelui, formnd
cheagul sanguin.
Miozina se gsete n cantitate de 40-60% n miofibrele esutului muscular.
Miozina este insolubil n ap, dar solubil n soluii alcaline diluate. n structura miozinei
intr aminoacizi diaminici i dicarboxilici ceea ce explic prezena a numeroase grupri
polare ce i confer capacitatea de a fixa ioni metalici.
Prin combinare cu actina n proporie de 3/1, formeaz actomiozina.
Actina reprezint 15% din proteinele musculare. Att miozina ct i actina au
activitate ATP-azic i joac rol esenial n contracia muscular.
Tropomiozina reprezint 2,5% din totalul proteinelor musculare, avnd rol n
contracia muscular.

21

1.3.3.2. Heteroproteine
Fosfoproteinele sunt proteine conjugate care au drept grupare prostetic acidul
fosforic legat prin legtur esteric de gruparea hidroxil a unui rest de serin din molecula
proteic. Acidul fosforic se gsete sub forma srii sale de Ca sau K.
NH CO CH NH CO
_
CH2
O
O P O Ca2+
_
O

NH CO CH NH CO
_
CH2 O K+
O P O
_
O K+

Dintre fosfoproteine fac parte:


caseina , principala protein din lapte (80%).
ovovitelina prezent n glbenuul de ou alturi de lecitine. Ea furnizeaz
embrionului aminoacizii i fosforul necesar dezvoltrii.
Glicoproteinele formeaz o categorie de heteroproteine care au drept grupare
prostetic o component glucidic; partea proteic imprim caracterul ei chimic ntregii
molecule, ceea ce le deosebete de mucopolizaharide unde componenta glucidic predomin
i imprim moleculei caracter glucidic.
Lipoproteinele sunt complexe ale proteinelor cu lipidele. Dup rolul pe care l
ndeplinesc, lipoproteinele se mpart n dou categorii: lipoproteine de transport i sistemele
de membran.
Plasma uman conine patru clase principale de particule lipoproteice care difer ntre
ele prin densitate, constant de sedimentare i mrimea particulelor, prin tipurile de proteine
i proporia de lipide coninute. Sunt particule sferice de mrimi diferite, formate dintr-un
miez nepolar (trigliceride i esteri de colesterol) nvelit cu un strat de 2 nm constituit din
colesterol liber, fosfolipide i apoproteine. Aceste particule sunt solubile n plasm i servesc
la transportul lipidelor ntre diverse esuturi.
Metaloproteinele sunt combinaii complexe ale proteinelor cu ionii metalici: Fe,
Cu, Zn, Mg, Mn etc. i particip n organism fie n transportul acestor metale, fie n cataliza
enzimatic.
Feritina conine 20-25% fier trivalent (aproape cte un atom de Fe pentru fiecare
legtur peptidic) legat de o protein numit apoferitina. Feritina constituie rezerva de fier
pentru sinteza hemoglobinei i citocromilor. Se gsete n special n ficat i splin.
Siderofilina (transferina) este un transportor al Fe pentru sinteza hemoproteinelor
(fixeaz doi atomi de Fe/molecul). Ea este sczut n anemia feripriv;
Ceruloplasmina conine aproximativ 0,34% Cu (opt atomi/molecul). Este o
glicoprotein care migreaz cu fraciunea 2-globulinic, are o greutate molecular de
150.000. Ceruloplasmina nu transport ionii de cupru, dar are rol n absorbia Fe, putnd
oxida fierul bivalent la fier trivalent i funcioneaz ca o polifenoloxidaz. Concentraia
plasmatic de ceruloplasmin crete n inflamaii.

22

sunt pigmeni respiratori din sngele molutelor. Ele conin


Cu i au greutate molecular de aproape 10 milioane.
Metaloproteinele cu Zn sunt n general enzime: alcool-dehidrogenaza, carbonicanhidraza, uricaza etc.
Cromoproteine
Cromoproteinele sunt proteine conjugate care au drept grupare prostetic, o grupare
cromofor. Dup natura acestei grupri, se disting dou mari clase de cromoproteine:
porfirinice care conin un nucleu tetrapirolic i neporfirinice, conin drept grupare prostetic
derivai de izoaloxazin sau carotene (vezi vit. B2 i A).
Dintre cromoproteinele neporfirinice deosebit de importante sunt flavoproteinele care
au drept grupare prostetic o flavin (derivat de izoaloxazin) i care ndeplinesc n organism
rol catalitic, precum i carotenoproteinele, a cror grupare prostetic este un derivat terpenic
(carotenii). Acestea din urm, sunt importante n procesul vederii.
Hemocianinele

Cromoproteinele porfirinice conin n molecul un nucleu substituit de porfirin.

Ele ndeplinesc diverse funcii biologice, cum ar fi: transportul de oxigen, transportul de
electroni, cataliza enzimatic.
Specificitatea de funcie a acestor proteine se datoreaz apoproteinei legate de nucleul
porfirinic. Sunt reprezentate de mioglobin, hemoglobin, citocromi, hemenzime.
Porfirinele sunt derivai de porfirin, un compus ciclic format din patru nuclee
pirolice unite prin grupri metinice (-CH=).

Prin substituirea atomilor de hidrogen din poziiile 1-8 cu diferii radicali se obin
porfirinele, care se denumesc i se clasific n funcie de aceti substitueni n: etioporfirine,
mezoporfirine, protoporfirine i coproporfirine. Dintre acestea cel mai des ntlnite sunt
protoporfirinele care conin patru grupri metilice, dou grupri vinil i dou resturi de acid
propionic. Datorit celor trei tipuri de substitueni din molecul, pot exista 15 forme izomere
de protoporfirine. Cea mai nsemnat dintre ele este protoporfirina IX (1,3,5,8-tetrametil-2,4divinil-6,7-dipropionil-porfirina).
Porfirinele posed un sistem de duble legturi conjugate ce confer acestor compui
stabilitate, culoare roie-violet, absorbia caracteristic i fluorescen. Reducerea gruprilor
metinice duce la formarea de compui necolorai, numii porfirinogeni. Prin intermediul
azotului pirolic, porfirinele pot fixa ioni metalici cum sunt: Fe, Mg, Zn, Cd, Co, Cu, Mn, V
sub form de compleci chelatici. Un astfel de complex al protoporfirinei IX cu Fe2+ se

23

numete protohem sau hem, un complex similar cu Fe3+ poart numele de hemin sau
hematin.

Protoporfirina IX

Hem

Fierul are ase poziii de coordinare care sunt ndreptate spre vrfurile unui
octoedru regulat. n hem, atomul de Fe se leag de inelele II i IV prin legturi
ionice, realizate prin ndeprtarea celor doi atomi de H de la azot sub form de H +
i de dou legturi coordinative cu atomii de azot din ciclurile I i III. Celelalte
dou poziii, 5 i 6, sunt perpendiculare pe planul determinat de cele patru legturi
ale fierului cu nucleele pirolice i sunt libere. Dac aceste poziii sunt ocupate,
compusul rezultat se numete hemocrom sau hemocromogen.
Hemul este situat ntr-o cavitate a moleculei proteice. Cele dou resturi
propionat, ionizate la pH fiziologic, sunt orientate spre suprafa, iar restul
hemului n interiorul cavitii, nconjurat de aminoacizi nepolari, cu excepia a
dou resturi de histidin prin care se face legtura cu partea proteic. Un rest de
histidin situat n segmentul F (HisF 8) numit histidin proximal se fixeaz pe
poziia 5 de coordinare a Fe 2+ . Cellalt rest HisE 7, numit histidin distal se leag
de hem prin intermediul unei molecule de ap (formele neoxigenate de mioglobin
i hemoglobin). Legtura este labil i se desface uor n procesul de fixare a
oxigenului, acesta nlocuind molecule de ap (formele oxigenate ale mioglobinei i
hemoglobinei).

24

Mioglobina este pigmentul rou din muchi, similar hemoglobinei ca

structur i rol; diferena dintre ele const n structura globinei. Globina


mioglobinei este alctuit dintr-un singur lan polipeptidic, format din 150
aminoacizi, cu o greutate molecular de aproximativ 17.200, pliat sub forma unui
ghem cu dimensiunile 45/35/25 . Mioglobina are o afinitate fa de oxigen de
aproximativ 6 ori mai mare dect hemoglobina. Cantiti mari de mioglobin se
gsesc n muchiul inimii i muchii pectorali ai psrilor care efectueaz micri
ritmice
de
lung
durat.
Hemoglobinele reprezint pigmentul rou al sngelui. Ele au aceeai

grupare prostetic (hemul), dar difer n privina prii proteice, globina. Globina
imprim specificitatea diferit a hemoglobinelor.
Structura hemoglobinei a fost elucidat de Perutz prin difracia razelor X i
spectre ORD (dispersia rotaiei optice). Lanurile i au o structur
asemntoare, aproximativ 70% din molecul formnd poriuni de -helix
ntrerupte de poriuni ndoite ca n molecula de mioglobin. Conformaia
tridimensional a lanurilor este asigurat prin legturi van der Waals ce se
stabilesc ntre resturile nepolare ale aminoacizilor. Legturile polare sunt orientate
spre mediul apos ceea ce explic solubilitatea hemoglobinei. Catenele
polipeptidice sunt orientate aa fel, nct, formeaz ntre ele o cavitate n care este
inclus molecula de hem. Legarea hemului de globin se face prin intermediul a
dou resturi de histidin.
Cele patru lanuri din Hb sunt asamblate ntr-un tetramer compact
(structur cuaternar), rezultnd o molecul cu dimensiunile 64/55/52 . ntre
lanurile identice se realizeaz legturi polare stabilite ntre grupele terminale
NH3 + i COO- , iar ntre lanurile diferite ( i ) se stabilesc legturi de hidrogen
i Van der Waals pe poriuni mari ale acestor lanuri.
Citocromii sunt pigmeni respiratori care au drept grupare prostetic tot
hemul, dar poziiile 5 i 6 de coordinare ale Fe sunt ocupate de resturi de
aminoacizi din molecula proteic. Din acest motiv, citocromii nu pot participa la
transportul O 2, dar particip la transportul electronilor prin modificarea reversibil
a valenei atomului de fier:

Se cunosc mai multe grupe de citocromi notate a, b i c. n forma lor


redus, citocromii dau benzi de absorbie caracteristice (, i ) n spectrul
vizibil. Marea majoritate a citocromilor sunt puternic legai de membrana
mitocondrial i nu pot fi separai cu uurin.

25

sunt reprezentate de catalaze i peroxidaze


care catalizeaz reacia de descompunere a apei oxigenate dup ecuaia:
Hemenzimele

AH2 + H2O2 2 H2O + A


Cloroplastele sunt pigmeni fr funcie respiratorie care conin drept

grupare prostetic clorofila. Clorofila are o structur porfirinic avnd n centrul ei


ionul de Mg legat prin dou covalene de dou nuclee pirolice.
Nucleoproteine
Nucleoproteinele sunt o clas de heteroproteine care au drept grupare
prostetic un acid nucleic ataat la o histon sau o protamin. Ele se gsesc n
toate esuturile animale i vegetale i pot fi izolate cu uurin din drojdii i unele
esuturi ale cror celule au nuclee mari, cum este glanda timus.
Nucleoproteinele sunt constituenii principali ai nucleului celular (de unde
vine i numele lor), dar pot fi gsite i n citoplasm asociate cu ribozomii.
Virusurile sunt constituite aproape numai din nucleoproteine.
Nucleoproteine
Proteine simple
(Histone, protamine)

Acizi nucleici
(Polinucleotide)
Nucleaze
Mononucleotide
Mononucleotidaze

Nucleozide

Acid fosforic

Nucleozidaze

Baze azotate
(Purinice, pirimidinice)

Pentoze
(Riboz\, Deoxiriboz\)

Nucleoproteinele pot fi izolate din esuturi prin extracie (cu ap, soluii alcaline
diluate, soluii de clorur de sodiu i soluii tampon cu pH = 4,0-11,0), urmat de
precipitarea cu acizi, soluie saturat de sulfat de amoniu sau soluie diluat de CaCl2.
Prin hidroliz acid sau bazic, nucleoproteinele se descompun n baze azotate,
pentoze, acid fosforic i proteine.
Nucleotide. Un nucleotid, unitatea structural a acizilor nucleici, este format
dintr-un nucleozid fosforilat la una din gruprile OH din riboz sau deoxiriboz.
Baza azotat\ ^ pentoz\ ^ acid fosforic
Nucleozid
Nucleotid

26

De exemplu: Adenina + Riboza


Guanina + Riboza
Citozina + Riboza
Uracil + Riboza
Timina + d-Riboza

+ Acid fosforic Acid adenilic (AMP)


+ Acid fosforic Acid guanilic (GMP)
+ Acid fosforic Acid citidilic (CMP)
+ Acid fosforic Acid uridilic (UMP)
+ Acid fosforic Acid timidilic (TMP)

Exist dou tipuri generale de nucleotide: ribonucleotide, care conin riboz i


intr n structura acizilor ribonucleici i deoxiribonucleotide, care conin deoxiriboz i
intr n structura acizilor deoxiribonucleici.
Radicalul fosfat se ataeaz n poziia 5 sau 3 (notaia atomilor din ciclul
pentozei se face de la 1 la 5, acesta fiind ciclul secundar n molecula acestor compui).

NH2

NH2
N

5'

O
H

N
CH2OH

H H
O

H H
3'

HO P OH
O

Acid adenilic
3'-AMP

Acid deoxiadenilic
3'-dAMP

O
HN

N
H

CH2OH

HO P OH
O

NH2

H H

3'

OH

5'

CH3
N

CH2OH

H H

OH

HO P OH
O
Acid citidilic
3'-CMP

H H

CH2OH
H H

O
H
HO P OH
O
Acid timidilic
3'-dTMP

27

Nucleozidele purinice i pirimidinice pot fi esterificate cu o singur molecul de


acid fosforic, formnd nucleozid-monofosfai (MP), cu dou molecule de acid fosforic,
nucleozid-difosfai (DP) i cu trei molecule de acid fosforic, nucleozid-trifosfai (TP).
De exemplu, adenina formeaz adenozin-5-monofosfat (AMP), adenozin-5-difosfat
(ADP) i adenozin-5-trifosfat (ATP).
NH2
N

H2C

OH

OH

P
O-

O
O

P
O-

O-

O-

AM P
ADP

ATP

Nucleozid-trifosfaii ndeplinesc n organism funcii importante. Astfel, ATP


poate transporta i ceda resturi de fosfat i pirofosfat n acele reacii enzimatice care
necesit energie. Cedarea energiei se face prin hidroliza legturilor fosforice cu
energie mare din molecula acestui compus, legturile dintre gruprile fosforice sunt
macroergice deoarece sunt legturi de anhidrid. Refacerea moleculei de ATP se
realizeaz prin refosforilarea ADP-ului n procesul de fosforilare oxidativ.
De asemenea, GPT, UTP i CTP pot furniza energie pentru unele ci de
biosintez (UTP n sinteza polizaharidelor, GTP n sinteza proteinelor, iar CTP n
sinteza lipidelor). n unele reacii de fosforilare particip IDP i ITP n structura
crora intr hipoxantina.

28

2. ENZIME
Organismele vii, mono- i pluricelulare sunt caracterizate prin unele activiti ca:
micare, producere de energie, lumin etc., activiti care au la baz reacii chimice.
Organismele vii sunt supuse primului principiu al termodinamicii, adic legii conservrii
masei i energiei. Energia pentru sinteza moleculelor complexe din elemente sau
molecule mai mici este furnizat prin degradarea moleculelor complexe n intermediari
i compui mai simpli. n consecin este necesar cuplarea celor dou aspecte ale
metabolismului (anabolism i catabolism) printr-un transfer de energie. O reacie
chimic de forma
A+B

C+D
poate avea loc cnd o parte din moleculele A i B se gsesc ntr-o stare de energie
ridicat, stare activat (stare de tranziie) n care exist o mai mare probabilitate ca
legturilor din compuii A i B s se rup i s se formeze produii C i D. starea de
tranziie este o barier nalt de energie care delimiteaz reactanii de produii de reacie.
Viteza unei astfel de reacie este proporional cu moleculele aflate n stare de tranziie
(activat). Exist dou posibiliti de accelerare a reaciei chimice:
- creterea temperaturii ce favorizeaz agitaia molecular, creterea numrului
de molecule activate i accelerarea vitezei de reacie care n cele mai multe reacii este
aproximativ dubl pentru o cretere a temperaturii cu 10oC;
- utilizarea catalizatorilor.
Catalizatorul se combin temporar cu reactanii determinnd scderea energiei de
activare. Cu ct energia de activare va fi mai mic cu att catalizatorul va fi mai eficace.
De exemplu, descompunerea apei oxigenate:
2 H2O2 2 H2O + O2
Necatalitic, are loc cu un consum de energie, G = 18 Kcal/mol; n prezena
catalizatorului de Pt coloidal, G = 13 Kcal/mol; iar n prezena enzimei, catalaza,
numai 2 kcal/mol.
O reacie chimic este endergonic (endoterm) dac variaia energiei libere este
pozitive, deci necesit un aport de energie i exergonic (exoterm) cnd variaia
energiei libere va fi negativ, deci va rezulta energie.
n timpul unei reacii, catalizatorul sufer o serie de modificri, dar odat reacia
terminat, acesta revine la starea iniial.
Enzimele sunt catalizatori proteici pentru reaciile chimice care se petrec n
sistemele biologice. n absena enzimelor, majoritatea reaciilor din celula vie
s-ar
petrece cu viteze foarte mici.
Spre deosebire de catalizatorii neproteici (ioni metalici, H+, OH-) fiecare enzim
catalizeaz un numr mic de reacii, de cele mai multe ori, una singur.
Exist un numr foarte mare de enzime; pentru fiecare compus organic, ct i
pentru muli compui anorganici, exist mcar o enzim capabil s reacioneze cu
acesta i s catalizeze o anumit modificare chimic.

29

2.1 Nomenclatura i clasificarea enzimelor


Numele tiinific al unei enzime se formeaz astfel: Donor: Acceptor reacia
catalizat. De exemplu: enzima responsabil de oxidarea alcoolului etilic se numete
Alcool: NAD+-oxireductaz.
Pe lng denumirea tiinific, se utilizeaz acea denumire uzual, care este n
acord cu numele tiinific. Denumirea uzual este format din dou pri: prima parte
indic substratul sau substratelor asupra crora acioneaz enzima, iar partea a doua
indic reacia catalizat. De exemplu, alcool: NAD+-oxireductaza se numete curent
alcool-dehidrogenaza (ADH).
innd seama de reacia catalizat, enzimele se clasific n ase clase:
1. Oxidoreductaze catalizeaz reaciile de oxido-reducere; n funcie de
acceptorul de electroni se pot distinge:
oxidaze transfer electronii de la un substrat direct la oxigen;
dehidrogenaze transfer electronii de la un substrat la alt substrat (altul
dect oxigenul);
oxigenaze ncorporeaz direct oxigenul n substrat;
peroxidaze transfer electronii de la substrat la H2O2 ca acceptor.
2. Transferaze catalizeaz transferul de grupri de pe un substrat (donor) pe alt
substrat (acceptor).
C1-transferaze transfer uniti de un atom de carbon ntre substrate
(exemplu: metil-transferaze);
amino-transferaze transfer gruparea amino de pe un aminoacid pe un
cetoacid (transaminazele);
kinaze transfer un radical fosfat din ATP pe un substrat;
fosforilaze transfer radicalul fosfat din fosfat anorganic (Pa) pe un
substrat.
3. Hidrolaze catalizeaz scindarea legturilor chimice cu ajutorul apei:
fosfataze ndeprteaz radicalul PO3H2- de pe un substrat;
fosfodiesteraze cliveaz legturile fosfatdiesterice, cum ar fi cele din acizii
nucleici;
proteaze scindeaz legturile peptidice din proteine.
4. Liaze catalizeaz scindarea nehidrolitic a unei grupri de pe un substrat cu
formarea unei duble legturi sau fixeaz o grupare la o dubl legtur:
decarboxilaze ndeprteaz CO2 de pe substrat;
aldolaze formeaz aldehide n reacii de eliminare;
sintaze leag dou molecule fr implicarea ATP-ului.
5. Izomeraze catalizeaz reaciile de interconversiune a izomerilor optici,
geometrici i de caten:
racemaze i epimeraze catalizeaz interconversiunea stereoizomerilor L i
D;
mutaze transfer grupri ntre atomii aceleiai molecule;
cis-trans-izomeraze interconversiunea izomerilor geometrici;
izomeraze care catalizeaz reacia aldoz
cetoz.

30

6. Ligaze sau sintetaze unirea a doi compui utiliznd energia eliberat prin
hidroliza unei molecule de ATP.
2.2. Structura enzimelor
Specificitatea mare a unei enzime este strns legat de structura ei fizic i
chimic specific. Din punct de vedere chimic, o enzim este format dintr-o parte
proteic apoenzima i o parte neproteic coenzima sau cofactor.
Partea proteic este termolabil i este responsabil de specificitatea enzimei, de
aciune, dar mai ales de substrat, iar coenzima este termostabil i dializabil.
Apoenzima. Enzimele simple i apoproteinele enzimelor complexe sunt
formate din catene lungi polipeptidice, avnd aceleai nivele de organizare structural ca
i alte proteine: primar, secundar, teriar i cuaternar.
Dei toate enzimele au structuri primare, secundare i teriare, structura
cuaternar nu este obligatorie.
Coenzime. Coenzima este partea neproteic, care particip efectiv la reacia
catalitic (se modific temporar n timpul reaciei). Frecvent, coenzimele conin n
structura lor vitamine din grupul B.
2.3. Izoenzime forme moleculare multiple ale aceleai enzime. Ele catalizeaz
aceeai reacie enzimatic, dar difer ntre ele n privina proprietilor fizice, chimice i
imunologice.
Interesul medical pentru izoenzime a fost stimulat prin descoperirea n 1957, n
serul uman, a mai multor izoenzime LDH, a cror proporii relative se modific
semnificativ n anumite stri patologice.
Cele 5 izoenzime LDH difer ntre ele n ceea ce privete structura cuaternar.
Molecula activ de LDH este un tetramer (130.000) format din dou tipuri de subuniti
H i M luate cte patru (fiecare subunitate are 34.000).
Subunitatea H (heart) este caracteristic muchiului inimii i n general
esuturilor cu metabolism aerob, iar subunitatea M (muscle) este caracteristic
muchiului scheletic i n general organelor i esuturilor cu metabolism anaerob.
Excepie fac ficatul i eritrocitul.
Structura celor 5 izoenzime LDH este:
LDH1
- H4
LDH2
- H3M1
LDH3
- H2M2
LDH4
- HM3
LDH5
- M4
Sinteza celor dou tipuri este coordonat de dou gene diferite.
Ulterior au fost evideniate izoenzime i pentru alte enzime creatin-kinaza
CK1(BB); CK2(MB) i CK3 (MM), hexo-kinaza, fosfataza alcalin etc.

31

2.4. Specificitatea enzimelor


Dup specificitate de aciune enzimele pot fi grupate n: enzime cu specificitate
absolut, enzime cu specificitate relativ i enzime cu specificitate optic sau
stereochimic.
Specificitatea absolut. Unele enzime acioneaz numai asupra unui singur
substrat, cataliznd o singur reacie, de exemplu ureaza:
H2N C NH2 + H2O

ureaza

2 NH3 + CO2

Aceast enzim este total inactiv fa de compui foarte asemntori structural


tioureea H2N-CS-NH2. De asemenea, arginaza enzima care catalizeaz hidroliza Largininei la uree i ornitin nu poate cataliza hidroliza esterul metilic al argininei sau
scindarea agmatinei, amina rezultat prin decarboxilarea argininei.
Specificitatea relativ. Multe enzime sunt specifice numai pentru anumite
tipuri de legturi chimice indiferent de structura moleculelor respective.
Din acest grup fac parte esterazele care fac posibil scindarea mono-, ditrigliceridelor i chiar ali esteri cu structur chimic mult mai complicat. De exemplu,
acetilcolinesteraza, specific pentru acetil-colin, poate scinda i ali esteri ai colinei cu
acizii propionic, butiric etc. Butiril-colina pare a fi substratul de elecie, fiind hidrolizat
mai rapid dect ali esteri ai colinei.
Enzimele proteolitice care hidrolizeaz legturile peptidice din proteine i din
ali compui neproteici, fac parte tot din acest grup.
Specificitatea optic. Enzimele catalizeaz transformarea numai a unui
stereoizomer; specificitatea optic este de obicei absolut, cellalt antipod optic
rmnnd neschimbat. Excepie fac racemazele care catalizeaz interconversiunea
antipozilor optici.
Enzimele care recunosc substrate cu izomeri geometrici au o specificitate
geometric.
Fumaraza, de exemplu, permite hidratarea acidului fumaric (izomer trans) i nu a
acidului maleic (izomer cis) cu formarea acidului malic ca produs final:
H
HOOC C

C COOH
H

Fumaraza
H2O

HOOC

CH CH2 COOH
OH

2.5. Centrul catalitic al enzimei


Structura binar a enzimelor este indispensabil aciunii catalitice. Luate separat,
att coenzima ct i apoenzima nu au activitate catalitic.
Centrul catalitic a fost conceput mult vreme ca un tipar rigid, preformat,
substratul potrivindu-se n enzim ca i cheia n broasc (lock and key) sau template
(modelul Fischer). Dei n acest model centrul activ este rigid, el se mai folosete nc

32

pentru
explicarea
unor
proprieti enzimatice, cum ar fi legarea ntr-o
anumit ordine a substratelor sau curba de saturare cu substrat.

Un model mai perfecionat este cel imaginat de Koshland, numit induced fit
(fixare indus), modelul cu cel mai puternic suport experimental. Principala
caracteristic a acestui model este flexibilitatea centrului activ. n absena substratului
gruprile catalitice i de legare a substratului sunt deprtate unele de altele, separate de
mai multe resturi de aminoacizi. Apropierea substratului induce o modificare
conformaional a enzimei nct gruprile care particip la legarea substratului sau la
reacia catalitic se apropie spaial.

Situsul (centrul) activ dintr-o enzim poate fi pus n eviden prin tratarea cu
anumite substane ce au capacitatea de a se combina specific cu aminoacizii centrului
catalitic, inactivnd enzima.
2.6. Factori care influeneaz activitatea enzimatic
Influena concentraiei enzimei
Dac se utilizeaz concentraii crescnde de enzim cantitatea de substrat
transformat n unitatea de timp crete proporional cu concentraia enzimei.
Influena concentraiei substratului asupra vitezei de reacie

33

Dac
se
menine
constant concentraia de enzim i se mrete
concentraia de substrat S, se constat o cretere rapid a vitezei de reacie pn la o
valoare limit (vmax). Dac [S] continu s creasc, curba capt o inflexiune i pentru
valori mari de S, viteza nu mai crete, curba tinde asimptotic ctre o valoare maxim

(vmax).
Crescnd n continuare concentraia substratului viteza reaciei rmne constant
deoarece nu mai exist enzim liber. Transformarea substratului n produs (produi) de
reacie are loc cu formarea, pentru scurt timp, a unui complex enzim-substrat.
Ipoteza formrii complexului ES a fost emis prima dat de Michaelis. Existena
acestui complex a fost demonstrat practic prin analiza spectrelor de absorbie n
ultraviolet, vizibil, rezonan magnetic nuclear, fluorescen sau prin dializ.
E + S

K1

ES

K3

E ^ P (1)

2
Cantitatea de produs P Kformat
depinde direct de concentraia complexului ES,
care depinde de viteza de descompunere a compusului ES n E + S. Aplicnd legea
aciunii maselor pentru reaciile de echilibru se obine relaia:
Cnd toat enzima a fost fixat
[E] [S]
sub form de complex ES, se atinge
K2 =
(2)
[ES]
viteza maxim a reaciei.
KM = [S] (3) care a primit numele de constanta Michaelis, definit drept
concentraia substratului pentru care se atinge jumtate din viteza maxim.
Cnd numai jumtate din enzim este trecut n form [ES] i [E] =[ES] se
atinge jumtate din viteza maxim vmax i relaia (2) devine:
Influena temperaturii asupra activitii enzimatice
Viteza de reacie crete cu creterea temperaturii, dar n anumite limite. Studiul
vitezei iniiale a unei reacii enzimatice n funcie de temperatur determin apariia a
dou faze distincte care corespuns la dou fenomene diferite:

34

- n zona de temperaturi mai mici (0 i 40oC) viteza reaciei crete cnd


temperatura crete. Aceast cretere a vitezei cu temperatura se explic printr-o cretere
a concentraiei complexului activat (intermediar) atunci cnd se furnizeaz mai mult
energie sub form termic sistemului n reacie.
- la o temperatur ce depete 45oC se asist la o denaturarea a proteinei.
Temperatura optim pentru cele mai multe enzime este de 30 oC 40oC.
Exist microorganisme termofile care triesc n ap la 70 oC 80oC i a cror
enzime sunt active la aceast temperatur. La 0 oC unele enzime i nceteaz reversibil
activitatea, aceast temperatur constituind temperatura de conservare pentru unele
enzime.
Influena pH-ului
Variaiile de pH pot avea efecte att la nivelul enzimei, ct i la nivelul
substratului. Astfel, se poate modifica gradul de ionizare a unor grupri funcionale de
pe enzim a cror sarcin pozitiv sau negativ este necesar fie formrii complexului
enzim-substrat, fie meninerii conformaiei tridimensionale native a protein-enzimei.
De asemenea, la nivelul substratului poate fi modificat gradul de ionizare mpiedicnd
sau favoriznd formarea complexului enzim-substrat. Valoarea pH-ului la care reacia
enzimatic se desfoar cu vitez maxim se numete pH optim.

35

pH-ul optim pentru cele mai multe enzime are valori cuprinse ntre 6 i 8.
Excepie fac enzimele digestive, pepsina (pH=1,5-2), arginaza (pH= 9,5-10).
Influena efectorilor asupra activitii enzimelor
Efectorii sunt substane care mresc sau scad aciunea catalitic a enzimelor.
Acetia pot fi activatori sau inhibitori.
Activatorii sunt compui de natur organic sau anorganic care n
concentraii mici mresc viteza unei reacii enzimatice atunci cnd se gsesc n mediul
de reacie.
O serie de ioni metalici, cum ar fi K, Cu, Fe, Mg, Mn, Co, Mo, au efecte pozitive
asupra unor reacii enzimatice. Fe, Mo, Cu particip n reaciile de oxido-reducere, Mg
este necesar n reaciile de transfer ale gruprii fosfat, iar Ca este necesar n reaciile
enzimatice ce intervin n coagularea sngelui.
Inhibitorii enzimatici sunt compui care diminueaz sau anihileaz
activitatea enzimelor. Ei au compoziie chimic i mod de aciune diferit. Printre
substanele capabile s se fixeze pe diferite grupri din proteine (hidroxil, sulfhidril,
carboxil) i s modifice proprietile catalitice, fie prin modificarea conformaiei, fie
prin blocarea centrului activ al enzimei, se gsesc ionii metalelor grele, sau compui
cum sunt acidul monoiodacetic sau acidul paraclormercuri-benzoic care reacioneaz cu
gruprile -SH din enzime.
- Inhibitorii competitivi sunt compui care prezint o analogie structural cu
substratul enzimei i pot intra n competiie cu acesta pentru a se fixa pe locul activ al
enzimei. Enzima se poate combina fie cu substratul, fie cu inhibitorul formnd
complexele ES i EI:
ES

E + P

E
EI

Este clar c enzima angajat n complexul EI nu poate funciona ca un


catalizator, numai complexul ES va permite formarea produilor de reacie.
Inhibiia depinde de concentraia substratului, inhibitorului, de afinitatea enzimei
pentru substrat i pentru inhibitor.
La adugarea de cantiti mari de substrat inhibitorul este deplasat din centrul
catalitic al enzimei, care va fi ocupat de substrat, iar viteza de reacie va reveni la
valoare maxim ca i n absena inhibitorului.
Inhibiia competitiv are numeroase aplicaii practice, n special n terapeutic.
Exemplul clasic este cel al sulfamidelor, analogi structurali ai acidului paraaminobenzoic:

H2N

COOH

acid para aminobenzoic

H2N

SO2 NH2
sulfonamid\

36

Sulfamidele intr n competiie cu acidul p-aminobenzoic i inhib producerea de


acid folic necesar creterii bacteriilor.
Chimioterapia anticanceroas face apel la numeroi antimetabolii, n general
analogi structurali ai bazelor purinice sau pirimidinice, permind inhibiia biosintezei
acizilor nucleici i blocarea diviziunii celulare.
- Inhibitorii necompetitivi se fixeaz fie pe enzim (dar ntr-un loc diferit de
locul activ), fie pe complexul ES pentru a forma un complex ESI, fie pe amndou.
Locul activ ale enzimei i pierd capacitatea de a reaciona cu substratul datorit
unui fenomen de mpiedicare steric. Gradul de inhibiie depinde de concentraia
inhibitorului i de afinitatea enzimei pentru inhibitor. Exemple de inhibitori
necompetitivi sunt cianurile, care se combin cu unele metale necesare activitii
enzimei (Fe2+, Fe3+) cu care formeaz complexe inactive asemntoare cu fero- sau
fericianurile.
Unele metale grele (Hg, Pb, Cu, Ag) sunt inhibitori deoarece se combin cu
gruprile SH ale enzimei formnd mercaptide
Enzim-SH + Ag+ Enzim-S-Ag + H+
Agenii chelatani de tipul acidului etilendiaminotetraacetic (EDTA) leag Mg2+
sau Ca2+.
Efectori alosterici
Activitatea catalitic a enzimelor poate fi alterat i de compui care se fixeaz
pe enzim n locuri ndeprtate de centrul activ (loc alosteric). Aceti compui pot crete
activitatea catalitic i se numesc efectori pozitivi, sau pot reduce activitatea catalitic i
se numesc efectori negativi.
Enzimele alosterice au o structur cuaternar, oligomer, formate dintr-un numr
variabil de monomeri legai prin legturi necovalente.
n afara situsului catalitic unde se fixeaz substratul, aceste enzime posed unul
sau mai multe situsuri alosterice, care pot fi situate pe acelai lan polipeptidic unde se
afl i centrul activ dar n zone diferite.
- Activatorii alosterici se fixeaz la locul alosteric determinnd o modificare a
conformaiei enzimei, numit tranziie alosteric, care antreneaz o modificare a
conformaiei la nivelul situsului catalitic. Acest situs determin o conformaie mai
propice pentru fixarea substratului, crescnd afinitatea enzimei pentru substrat.
Legarea unui inhibitor alosteric produce o modificare conformaional care
mpiedic legarea substratului la locul activ (locul activ este deformat) i enzima este
inhibat.
2.7. Reglarea metabolismului
Reaciile catalizate de enzime au loc cu viteze anumite, determinate de
concentraia enzimei, a substratului, pH-ului, temperaturii etc. Aceste reacii nu sunt
independente unele de altele, ele sunt grupate i se succed formnd ci metabolice care
funcioneaz simultan i n mod coordonat calitativ i cantitativ.

37

Principalele mecanisme prin care se moduleaz activitatea enzimelor dintr-o


cale metabolic sunt reprezentate de: reglarea alosteric, transformarea pre-enzimelor
inactive n enzime active i sinteza de noi molecule de enzime.
Reglarea alosteric este mecanismul cel mai complex al coordonrii
metabolice. Enzimele implicate n aceast reglare sunt enzime alosterice.
n unele ci metabolice, unul din produii de reacie poate inhiba prima enzim
din calea respectiv:
X activator
alosteric

E1

E2

Activare

E3

G inhibitor alosteric

Inhibi]ie

Transformarea substratului A n produsul final G are loc printr-o succesiune de


reacii catalizate de diferite enzime. Acumularea de produs G n exces, n celule,
determinnd inhibiia enzimei E1 care catalizeaz transformarea substratului A n
produsul B, considerat etap limitant a succesiunii de reacii enzimatice.
Acest tip de inhibiie se numete inhibiie prin produs final, inhibiie feed-back
sau retroinhibiie
Reglarea covalent
Un grup mare de enzime i regleaz activitatea prin adiia sau ndeprtarea unei
grupri fosfat la un rezidiu de serin, treonin, tirozin. Fosforilarea se face pe baza
ATP-ului, n prezena unei familii de enzime, denumite kinaze, iar defosforilarea se face
n prezena apei i a unor fosfataze.
ATP

Kinaz\

ADP

Enzim\
ser

Enzim\
ser O

OH

P
O

_
HPO4

fosfataze

H2O

Rspunsul la fosforilare este diferit funcie de enzima fosforilat. Astfel, n urma


fosforilrii, unele enzime se activeaz (glicogen fosforilaza), iar altele sunt inhibate
(glicogen sintetaza).
n metabolismul glicogenului, n momentul fosforilrii, sunt fosforilate simultan
dou enzime:
- glicogen fosforilaza, care este activat i declaneaz scindarea glicogenului;

38

- glicogen sintetaza, care este inhibat


i
mpiedic
reformarea
glicogenului.
Transformarea pre-enzimelor n enzime active are loc printr-un proces de
proteoliz limitat catalizat fie de enzime proteolitice, fie de H+, ca de exemplu:
H^ sau pepsin\

pepsinogen
tripsinogen

tripsin\ sau enterokinaz\

chimotripsinogen

tripsin\

pepsin\
tripsin\
chimotripsin\

Transformarea pepsinogenului i tripsinogenului poate fi catalizat de nsi


forma activ a enzimei, printr-un proces de autocataliz.
Alte procese de transformare n forme active se ntlnesc la enzimele implicate
n coagularea sngelui i fibrinoliz.
protrombin\
plasminogen

Xa, Ca^^ , fosfolipide


activatori

trombin\
plasmin\

Procesul de activare prin proteoliz limitat implic hidroliza unor legturi


peptidice, ndeprtarea unor peptide de clivare i demascarea centrului activ al
enzimei. Fenomenul se ntlnete i la unii hormoni proteici.
Reglarea sintezei de enzime reprezint un aspect particular al sintezei de
proteine i se afl sub controlul aparatului genetic al celulelor, realizndu-se prin
procese de inducie sau represie.
Inducia se refer la sinteza de novo a unei proteine ca rspuns la semnalul
transmis de o molecul de inductor care, de multe ori, este chiar substratul enzimei (de
exemplu lactoza induce sinteza de beta-galactozidaz).
Represia reprezint reprimarea sintezei de novo a unei proteine ca rspuns la
prezena din mediu a unui represor. De multe ori produii reaciei catalizate de o
anumit enzim acioneaz n calitate de represori limitnd sinteza respectivei enzime.
2.8. Importana biomedical a enzimelor rezid n utilizarea acestora n
diagnosticul unor boli i instituirea unei terapii corecte, precum i folosirea unora n
scop terapeutic.
Majoritatea proceselor enzimatice se petrec la nivel celular iar determinarea
enzimelor se face n unele lichide biologice (snge total, urin, lichid cefalorahidian,
plasm etc.).

39

Este important de cunoscut locul de producere


al
diverselor
enzime,
mecanismele prin care ajung aceste enzime din celule n snge. Din acest punct de
vedere se deosebesc:
enzime secretate activ n plasm, mai ales de ficat, care acioneaz asupra
unor substrate din plasm ndeplinind aici un rol fiziologic. Astfel de enzime specifice
plasmei se numesc enzime plasmatice funcionale. Enzimele coagulrii,
pseudocolinesteraza, sunt enzime plasmatice. Lezarea organului care produce aceste
enzime determin scderea activitii enzimelor n plasm;
enzime ale secreiilor exocrine care pot difuza pasiv n snge, fr a avea rol
specific la acest nivel. Astfel de enzime sunt: amilaza, lipaza, tripsina pancreatic,
pepsinogenul gastric, precum i fosfataza alcalin biliar i fosfataza acid prostatic.
Enzimele din aceast categorie vor scdea n snge n cazul atrofiei organului care le
sintetizeaz sau vor crete cnd apar creteri ale permeabilitii membranei celulelor ce
le sintetizeaz;
enzimele celulare acioneaz exclusiv intracelular, se mai numesc i enzimele
plasmatice nefuncionale deoarece substratele i cofactorii lor specifici nu se gsesc n
plasm. Concentraia lor n spaiul intracelular este mult mai mare dect n plasm.
Ptrunderea enzimelor celulare n snge, n condiii patologice, are loc prin
creterea permeabilitii membranei celulare sub aciunea unor factori infecioi, toxici.
n leziunile distructive, att enzimele citoplasmatice ct i cele legate de
organitele celulare, trec n snge. O alt cale de ptrundere a enzimelor celulare n snge
o constituie blocarea cilor de eliminare normal a enzimelor (unele enzime hepatice,
pancreatice) sau o cretere a concentraiei de enzime ca urmare a unei inducii
enzimatice.
Scderea activitii enzimelor n plasm poate fi datorat scderii sintezei de
enzime, consumului unor medicamente (cortizon, morfin, atropin) sau unor erori
genetice.

40

3. VITAMINE
Vitaminele sunt substane organice cu greutate molecular mic, cu structuri
chimice, proprieti fizice, chimice i biologice diferite.
Ele sunt aduse din exterior i nu constituie pentru organism surs energetic
sau plastic, dar sunt absolut indispensabile pentru funcionarea normal a
organismului. Din acest motiv, organismul are nevoie de un aport zilnic de vitamine
(cteva mg/zi) asigurat de raia alimentar. Lipsa unor vitamine din alimentaie duce
la declanarea unor stri patologice specifice, numite avitaminoze, care, dac nu sunt
de lung durat, pot fi ndeprtate prin administrarea de vitamine.
Antivitaminele sunt substane cu structur chimic asemntoare cu a
vitaminelor dar cu aciune antagonist, deoarece avnd structur asemntoare cu
vitaminele adevrate, pot intra n competiie cu acestea din urm.
Clasificarea vitaminelor se bazeaz pe criterii de solubilitate:
vitamine liposolubile (solubile n grsimi) A, D, E, K;
vitamine hidrosolubile (solubile n ap) B1, B2 B6, PP, biotina, acidul
pantotenic, acidul folic, B 12, vitamina C.
3.1. Vitaminele hidrosolubile
Vitaminele hidrosolubile aparin complexului vitaminic B (B 1, B2, B6, B12, PP,
acid pantotenic, acid folic) i vitamina C.
Fiind solubile n ap nu se acumuleaz n organism n concentraii toxice i se
elimin n principal pe cale renal.
Vitaminele hidrosolubile ndeplinesc n general rolul de coenzime.
3.1.1. Vitamina B1 (tiamina, aneurina, vitamina anti beri-beri, vitamina
antinevritic)
Structural, este alctuit dintr-un nucleu pirimidinic i un nucleu tiazolic,
substituite i unite printr-o grupare metilenic.
6'
5'

1' N

H3C

CH2

CH3

4'

N
3'

NH2.HCl 2 S 5 CH2 CH2 OH


1

Tiamina
Absorbia tiaminei se realizeaz la nivelul intestinului subire, prin procese
active i pasive; absorbia activ presupune formarea TPP (tiamin-PP).
n organism tiamina se gsete liber (plasm, LCR) i esterificat ca TPP
(80%), form sub care se stocheaz pentru scurt timp i sub care este activ biologic.

41

Tiamin\

Tiamin
pirofosforilazkinaza
ATP

CH2

H3C

NH2

CH3
S

AMP
TPP

CH2 CH2 O

O P

OH

OH

OH

Rol metabolic. Sub form de TPP particip n calitate de coenzim la


unele procese metabolice, decarboxilarea oxidativ a -ceto-acizilor (piruvic i
-cetoglutarat). De asemenea, TPP constituie coenzima transcetolazelor, enzime din
calea pentozo-fosforic.
Tulburri de aport vitaminic
Simptomele deficienei pot fi cauzate de malnutriie, defecte de absorbie,
pierderi vitaminice datorate terapiei cu diuretice, hemodializ, diaree.
Deficitul vitaminic poate conduce la boala numit beri-beri, ce se
caracterizeaz prin:
- simptome neurologice (somnolen, dureri de cap, nevrit periferic);
- simptome gastro-intestinale;
- simptome la nivelul aparatului locomotor.
Simptomele moderate ale deficienei tiaminice includ: confuzie mintal,
ataxie (inabilitatea de a realiza un control fin al funciilor motorii) i oftalmoplegie
(pierderea coordonrii micrii ochilor).
Aceste simptome se ntlnesc i n sindromul Wernicke-Korsakoff.
La animale, deficiena tiaminic conduce la pierderea coordonrii musculare,
ca retracia capului (opistotonus), caracteristic porumbeilor cu hipovitaminoz B 1.
Hipervitaminoza tiaminic nu apare n mod obinuit. Cu totul excepional pot
apare fenomene de intoleran (lein, dispnee, tahicardie).
3.1.2. Vitamina B2 (riboflavina)
Aparine clasei pigmenilor galbeni sau flavinelor naturale. Este constituit
dintr-un nucleu triciclic, derivat de izoaloxazin i o caten lateral de ribitol:
OH OH OH
CH2 CH CH CH CH2 OH
8
H3C 7

H3C 6

9
10

1 2
4 NH

n organism, riboflavina se gsete sub form liber (plasm, lapte, urin i


retin), ct i legat (FMN, FAD, enzime flavinice) n diferite esuturi ca rinichi,
ficat, inim, muchi.
Rol metabolic
Riboflavina
intr
n
structura
formelor
sale
coenzimatice,
flavinmononucleotid (FMN) i flavinadenindinucleotid (FAD). Transformarea sa n

42

ester monofosforic (FMN) are loc n toate celulele organismului, sub aciunea unei
flavokinaze:
Flavokinaz\

Riboflavin\

ATP

Flavin-adeninpirofosforilaza

FMN

ATP

ADP

FAD

PPa

Prin unirea FMN cu acidul adenozin-5-P (AMP), sub influena flavin-adeninpirofosforilazei, se formeaz FAD-ul. Dup nomenclatura strict, FMN-ul nu este un
mononucleotid, iar FAD-ul nu este un dinucleotid, deoarece n loc de pentoz au un
alcool polihidroxilic, ribitolul, iar flavina nu este o baz azotat adevrat.
NH2
O
P

CH2
H C OH
H C OH
H C OH

OH

H 3C

O
H

OH

H
OH

CH2

OH

H C H
H 3C

O
NH

O
AMP

FMN
FAD

Flavinenzimele particip la reacii de oxidoreducere deoarece ciclul


izoaloxazinic poate suferi reduceri reversibile, prin fixarea temporar la N 1 i N10, a
doi atomi de hidrogen, cu mutarea dublei legturi. Hidrogenii sunt preluai de la
diferite substrate reduse (SH 2), cu care intr n reacie i care se oxideaz (S ox):
R

R
H3C
H3C

N
1

10

O
NH

N
O
FMN sau FAD

^2H^
^2e-2H^
-2e-

H3C
H3C

N
N
H

H
N

O
NH

FMNH2 sau FADH2

FMN i FAD se gsesc n celul sub form de combinaii cu proteinele,


constituind sisteme enzimatice de mare importan n oxidrile celulare
flavinenzimele (peste 60).

43

Riboflavina intervine i n mecanismul vederii (transform lungimile


de und mici n lungimi de und mai mari, perceptibile), n fiziologia glandelor
lacrimale, n mecanismul de producere a HCl n mucoasa gastric, n activitatea altor
vitamine i hormoni (conserv activitatea vitaminei B 1 i este legat de activitatea
hormonilor corticosuprarenali i a insulinei).
Tulburri de aport vitaminic
Hipovitaminoza se manifest prin apariia unor leziuni ale mucoasei
gastrice, buco-faringiene, leziuni cutanate.
La om, carena este cunoscut sub denumirea de pelagr fr pelagr, cu
simptomele: stomatit angular, leziuni umede la colurile gurii i nasului,
conjunctivit, cataract, blefarit, creterea n volum a limbii.
Hipervitaminoza. Megadozele administrate timp ndelungat determin:
crampe musculare, poliurie, utilizarea i metabolizarea defectuoas a altor vitamine,
datorit competiiei pentru compui de fosforilare.
3.1.3. Vitamina B6 (piridoxina, adermina, factor antidermatitic)
Vitamina B6 include trei compui naturali, derivai de piridin, care se
deosebesc prin natura radicalului din poziia 4:
CHO

CH2OH

CH2NH2

OH
H 3C

CH2OH

OH
H3C

1N

CH2OH

OH
H3C

N
Piridoxal

Piridoxol

CH2OH
N
Piridoxamin\

Rolul metabolic
Piridoxalul i piridoxamina intervin n metabolism sub form fosforilat la
gruparea de alcool primar din poziia 5 (piridoxal-5-P, respectiv piridoxamin-5-P) care
se obin n reacia cu ATP.
CHO (CH2 NH2)

CHO (CH2 NH2)


4

OH
H 3C

CH2OH

Piridoxal-kinaza

H3C

6
1N

Piridoxal

OH

ATP

CH2 O PO3H2

ADP
Piridoxal fosfat

Vitamina B6 intervine n multe reacii metabolice la care particip aminoacizii:


transaminare, decarboxilare (tirozina, arginina, acid glutamic), dezaminare (serina,

44

treonina), transsulfurare (transferul sulfului de la metionin la serin pentru sinteza


cisteinei), desulfurare (cistein i homocistein), activitatea kinureninei din calea de
degradare a triptofanului, n absorbia din intestin i intrarea aminoacizilor n celul.
Transaminare
H
R
Treoninaldolaza

COOH

N
C

Decarboxilaza
H

OH
H3C

Enz
+

N
H

Tulburri de aport vitaminic


Ca semne ale deficienei se pot meniona: strile de nervozitate, insomnie,
tulburri de mers, afeciuni cutanate n jurul nasului, ochilor, gurii, limfocitopenie.
Carena vitaminei B6 favorizeaz apariia cariilor dentare, conduce la modificri
n metabolismul triptofanului, caracterizat printr-o excreie excesiv de acid xanturenic.
Medicamentul ISONIAZID (hidrazida acidului izonicotinic), uzual utilizat n
tratamentul tuberculozei, reacioneaz cu B6 pentru a forma un derivat hidrazonic, care
inhib enzimele ce conin piridoxal-5-P. Pacienii tratai mult timp cu isoniazid dezvolt
o neutropenie periferic, care rspunde foarte bine la terapia cu B6.
OH CH3
N

CO

NH

NH2 + O CH

N
CH2OH

Izoniazid

Vitamina B6

HOH

spontan

OH CH3
N

CO NH

CH

N
CH2OH

Piridoxal
hidrazona

45

De asemenea, penicilinamina (beta- dimetil-cisteina)


uzual
utilizat
n
tratamentul pacienilor cu boala Wilson, cistinurie i artrit reumatoid, reacioneaz cu
B6, pentru a forma un derivat tiazolidinic inactiv. Pacienii tratai cu penicilamin
dezvolt ocazional convulsii, care pot fi prevenite prin tratament cu vitamin B6.
3.1.4. Biotina (vitamina H)
Molecula biotinei este constituit din dou nuclee condensate, un nucleu
tetrahidro-imidazolic (A) i unul tetrahidro-tiofenic (B) la care este grefat o caten
lateral de acid n-valerianic. Se cunosc doi izomeri naturali, alfa i beta-biotina, izolai
din ficat i lapte, respectiv din glbenuul de ou:

1'

H N
4

H C
H2C

O
2'
C 3'
N H
A
3
C H
B
C H (CH2)4 COOH
1S 2

Beta-biotina

O
C
H N
N H
A
H C
CH3
C H
B
H2C
C H CH CH CH3
S
COOH
Alfa-biotina

n produsele naturale apare combinat cu lizina, compus numit biocitin:


Biotin\-CO-NH-(CH2)4-CH-COOH
NH2

Biocitinaza, enzim evideniat n plasm, ficat, pancreas, hidrolizeaz


compusul, elibernd biotin.
Enzimele care conin biotin au n centrul catalitic, resturi de lizin, prin
care se fixeaz vitamina. Cu avidina, glicoprotein termolabil din albuul de ou
crud, formeaz biotin-avidina, compus stabil, rezistent la aciunea enzimelor
proteolitice, nedisociabil prin dializ. Sub aceast form, vitamina nu se absoarbe
n tractul digestiv.
Rol metabolic
Biotina transport grupri CO 2 active, n calitate de grupare prostetic a
unor sisteme enzimatice de carboxilare (carboxilaze) care catalizeaz fixarea CO 2
pe diferite substrate. n reaciile de carboxilare, CO 2 activat de ctre ATP,
particip sub form de carboxi-biotin-enzim:

46

OH
_
HCO3 ^ ATP

Mg2^

O P OH
O

ADP

_
O

O
C
HN
NH
A
HC
CH
NH Enz.
B
H2C
C H (CH2)4 CO
S
Biotin-Enz.

Anhidrid\-Pcarbonic\

COO

O
O
C
O C N
NH
A
HC
CH
NH Enz.
B
H2C
C H (CH2)4 CO
S

Pa

CH3

C O
_
COO

CH2
COOH

Piruvat-carboxilaza

Biotin-enzima

Tulburri de aport vitaminic


Carena afecteaz aproape toate compartimentele metabolismului intermediar,
sinteza de novo a enzimelor, metabolismul glucidic, lipidic etc.
Hipovitaminoza se manifest prin tulburri nervoase, dermatit, oboseal
muscular, anemie, scderea apetitului.
Dup un consum mare de albu de ou crud, la obolani apare un sindrom
deficitar biotinic, numit boala albuului de ou, ce se manifest prin dermatit, alopecie
n jurul ochilor i paralizia membrelor posterioare.
3.1.5. Vitamina PP (niacina, factorul pelagro-preventiv)
Ca vitamin PP sunt desemnai doi compui, derivai de piridin, acidul nicotinic
(niacina) i amida acidului nicotinic (niacinamida):

n snge se gsete sub form de coenzim (80% n globulele roii) i sub form
de amid liber, n plasm.
Vitamina PP se sintetizeaz n organism din triptofan; din 60 mg triptofan rezult
1 mg acid nicotinic.
Rol metabolic
Nicotinamida acioneaz n organism sub forma a dou coenzime,
nicotinamidadenindinucleotid (NAD+) i nicotinamidadenindinucleotidfosfat (NADP+),
n reaciile de oxido-reducere.

47

NH2
CO NH2

N
O

CH2 O

OH

O
H

H2C

O
H

H
H

H
OH

OH

OH

OH

OH (PO3H2)

NAD+ (NADP+)
Acestea sunt formele oxidate ce pot fi reduse n NADH i NADPH, reducere ce
are loc la nucleul piridinic al nicotinamidei:
H
O
C
^

NH2

^2H^
2e
^2H^
2e

O
C
NH2

NAD^

NADH^H^

Aceste dou forme intervin n procesele de oxidoreducere celular, constituind


coenzima multor dehidrogenaze.
Spre deosebire de coenzimele flavinice (FMN i FAD), coenzimele piridinice
+
(NAD i NADP+) pot exista liber n celul; pot fi disociate de partea proteic. NAD +
particip n special n lanul transportorilor de H, iar NADPH n special n reaciile de
sinteze reductive (acizi grai, proteine etc.).
Tulburri de aport vitaminic
La om carena de vitamin PP se manifest prin pelagr (pella-agra piele aspr,
brun).
Pelagra se instaleaz cnd dieta este constituit n exclusivitate din porumb,
srac n triptofan i vitamin B6 (regim pelagrogen). Semne ale pelagrei oboseal,
slbiciune, indigestie, anorexie, urmat dup cteva luni de o dermatit (mai ales pe
pielea expus la soare), diaree i demen (boala celor trei D).
Dereglrile metabolice din pelagr sunt greu de definit deoarece carena de
vitamin PP poate fi indus de carena altor vitamine, n special B 6 n lipsa creia nu se
mai sintetizeaz vitamin PP din triptofan.
Pelagra poate nsoi i alte boli specifice unor defecte metabolice din
metabolismul triptofanului: boala Hartnup (defect de absorbie a triptofanului) sau
sindromul carcinoid (proliferarea malign a celulelor care sintetizeaz serotonina).

48

3.1.6. Acidul pantotenic (vitamina Bx, factor hepatic, factor antidermatitic al


ginilor)
Acidul pantotenic este format din acidul pantoic i -alanin.
O
OH O
HO CH2 C CH C NH CH2 CH2 C OH
H3C

H3C
-alanin\

Acid pantoic
Acid pantotenic

Poate fi sintetizat de plante i microorganisme.


Se absoarbe la nivelul intestinului i imediat, tot n aceste celule, este fosforilat la
gruparea de alcool primar, formnd acidul 4-fosfopantotenic.
Formele active ale acidului pantotenic sunt 4-fosfopanteteina i coenzima A
(CoASH).
H3C

OH O

CH2 C CH C NH CH2 CH2 C NH CH2 CH2 SH


4'-fosfopantetein\

H3C
Acid pantoic

CoASH

_
O

NH2
Adenina
N

O
P

tioetanolamina

Acid pantotenic

O
O

-alanin\

CH2
O

_
O
_

O H
P O

O
_

Riboza
H
OH

Rol metabolic
CoA are rol deosebit n metabolismul glucidic, lipidic i proteic fiind
transportor de grupri acil R-CO-. Legtura dintre CoA i restul acil se realizeaz prin

49

intermediul gruprii SH rezultnd un tioester (R-CO~S-CoA) n care legtura


tioesteric este echivalent ca energie cu o legtur macroergic din ATP.
4-fosfopanteteina legat prin legtur fosfo-diesteric de un rest de serin
din proteina acil transportoare ACP-(Acyl Carrier Protein), din multienzim-complexul
numit acid gras-sintetaza care catalizeaz sinteza acizilor grai.
Tulburrile de aport vitaminic la om sunt cunoscute numai experimental
dup administrarea de antagoniti. Scderea concentraiei acidului pantotenic se
caracterizeaz prin; stare de oboseal, ameeli, hipotonie muscular, tulburri
gastrointestinale (gastrite), scderea rezistenei la infecii.
3.1.7. Acidul folic (acidul pteroilglutamic, vit.M, factorul U, factorul R,
coenzima C)
Acidul pteroilglutamic, derivaii nrudii i formele conjugate constituie grupul
acidul folic.
Este constituit dintr-un heterociclu numit pteridin, acid p-amino-benzoic i acid
glutamic:
N

H2N

COOH

O
N

HN

CH2

HN

CH (CH2)2 COOH

OH
Pirimidin\

Pirazin\
Pteridin\

Acid p-NH2benzoic (PABA)

Acid glutamic

Acid pteroic
Acid pteroilglutamic

Rol metabolic
Acidul tetrahidrofolic (FH4), forma activ a acidului folic servete la transferul i
utilizarea fragmentelor de un singur carbon n diferite stri de oxidare: -CH3, -CH2-,
-CH=, -CHO, -CH=NH, care se pot fixa la N5, N10 sau ca o punte metilenic ntre
N5 i N10.
H

H2N
N

N
5

N
OH

H
H
10
CH2 NH R
H

Metabolismul folatului este complex. Sursa de un atom de carbon este


serina, care transfer gruparea sa hidroximetil la FH 4 formnd N5 , N10-metilen-FH4
din care se pot forma i alte forme active: N 5-CH3-FH4, N10-CH3-FH4 , N5 ,N10metenil-FH4 , N5-formil-FH4.

50

Coenzimele
acidului
folic particip la sinteza metioninei din
5
homoserin (N -CH 3-FH4), sinteza acidului timidilic din acid uridilic (N 5, N10metilen-FH4), n sinteza nucleului de purin (N 5, N10-metenil-FH4 i N10-formilFH4) etc.
Tulburri de aport vitaminic
Deficiena de acid folic apare din cauza unui aport alimentar sczut, stres
(sarcin), tulburri de absorbie, deficit de enzime implicate n sistemul de transport sau
terapia cu unele medicamente.
Carena se manifest exclusiv prin perturbarea hematopoezei, simptomul fiind
anemia megaloblastic (cu eritrocite mari i rare).
Datorit relaiei strnse dintre activitatea metabolismului acidului folic i cea a
vitaminei B12, este destul de greu de a diferenia simptomele clinice dintre cele dou
stri de caren.
3.1.8 Vitamina B12 (cobalamina, ciancobalamina, factor antipernicios, factor
extrinsec Castle)
Vitamina B12 este un complex organo-metalic, cu inel corinic (tetrapirolic),
similar nucleului porfirinic, la care se adaug ionul de cobalt. Nucleul corinic are
substituite grupe CH3, acetamidice i propion-amidice. n centrul acestui macrociclu se
gsete ionul Co3+, cu numrul de coordinaie 6: 4 legturi se realizeaz cu atomii de N
pirolici, o legtur cu gruparea CN, iar a 6-a legtur se realizeaz cu cea de a doua
parte a moleculei. ntregul complex, fr gruparea CN, se numete cobalamin.
Radicalul R poate fi diferit, pentru a da variate forme ale vitaminei. De exemplu:
RCN n ciancobalamin (ciancobalamina se formeaz n procesul de purificare i
reprezint forma comercial a vitaminei); ROH n hidroxicobalamin; R5deoxiadenozil n 5-deoxiadenozilcobalamin; RCH3 n metilcobalamin.
NH2 COCH2CH2 CH3 CH
3
CH2 CONH2
NH2COCH2
CH2 CH2CONH2
CH3
CN
N
N
CH3
+
Co
H
N
N
CH3
NH2 COCH2
CH3
H
CH3
CH3 CH2CH2 CONH2
O HO
H
O
CH2CH2CONHCH2 C
O P
CH3

N
N

CH3
CH3

H
H O
H
CH2 OH

Absorbia intestinal a vitaminei B12 este mediat prin receptori, n ileon,


necesitnd legarea vitaminei de o glicoprotein foarte specific, numit factor

51

intrinsec, secretat de celulele parietale ale mucoasei gastrice. Dup absorbie,


vitamina se leag de o protein plasmatic, transcobalamina II, n vederea transportului
la esuturi.
n ficat, excesul de vitamin se depoziteaz sub form de 5-deoxiadenozilcobalamin (70%), OH-cobalamin (27%) sau metil-cobalamin (3%), fixate pe proteine
celulare.
Rol metabolic
Vitamina B12 ptrunde n celul, prin endocitoz, sub form de OH-cobalamin,
metilndu-se apoi la CH3-cobalamin. O cantitate important intr n mitocondrii i se
transform n 5-deoxiadenozil-cobalamin.
Cele dou forme coenzimatice, metabolic active, ale cobalaminei sunt implicate
n fucnionarea a dou sisteme enzimatice: metilmalonil-CoA-izomeraza i respectiv
homocistein-CH3-transferaza (sau metionin-sintaza), care catalizeaz urmtoarele
reacii:
N5-CH3-FH4

Homocistein\

FH4

HomocisteinCH3-transferaza
(CH3-cobalamina)

Metionin\

Reac]ie de metilare
(citoplasm\)

OH-cobalamina

L-metilmalonil-CoA

5'-deoxiadenozilcobalamina)

Succinil-CoA

Reac]ie de rearanjament
intramolecular
(mitocondrie)

n absena cobalaminei, prima reacie se blocheaz, se acumuleaz N 5-CH3-FH4,


deturnnd folatul de la rolul su de transportor al grupelor de 1 C, constituind aa
numita capcan a folatului sau ipoteza capcanei metilului. Astfel, n primul caz,
homocisteina rmne nemetilat i se poate elimina prin urin (homocistinurie), iar n al
doilea caz, se poate acumula i elimina prin urin acidul L-metil-malonic (acidurie
metilmalonic).
Cobalamina i folatul sunt implicate n metilarea histonelor, n timpul replicrii
ADN-ului.

52

Tulburri de aport vitaminic


Sindromul tipic al carenei l constituie anemia pernicioas sau anemia Biermer,
caracterizat prin eritropoez megaloblastic, cu modificri ale leucopoezei i formrii
de trombocite.
Alterrile hematologice, caracteristice, pot fi nsoite de astenie, paloare, dispnee,
atrofia mucoaselor digestive, tulburri nervoase (scderea rspunsurilor reflexe i a
perceperii senzoriale, greutate n vorbire i mers), ct i tulburri gastro-intestinale.
Anemia rezult din perturbarea sintezei ADN, care afecteaz formarea nucleului
noilor eritrocite. n aceste cazuri globulele roii circulante sunt, n mare parte, forme
primitive i cu via scurt.
Carena de cobalamin este adesea corelat cu cea de folat i din aceast cauz
diferenierea celor dou este dificil.
3.1.9. Vitamina C (acidul ascorbic, factor antiscorbutic)
La nceput, a fost denumit acid hexuronic, avnd o structur asemntoare
monozaharidelor. Forma L este cea mai activ.

HO

HO C

O C

H C

H C

HO C

CH2OH
Forma redus\
(Acid ascorbic))

HO C

CH2OH
Forma oxidat\
(Acid dehidroascorbic)

Este sintetizat de toate plantele, de unele microorganisme i de majoritatea


animalelor, cu excepia omului, primatelor i cobaiului, care sunt tributare aportului
exogen.
n snge, durata de via a vitaminei C este de aproximativ 16 zile, la animalele
care o sintetizeaz.
Rol metabolic
Nu are rol coenzimatic tipic, dar este necesar pentru buna funcionare a
creierului, ficatului, glandelor endocrine, n hematopoez, hemoglobino-genez etc.,
participnd la numeroase reacii de oxido-reducere.
Principalele reacii la care particip vitamina C sunt: hidroxilarea prolinei i
lizinei pentru sinteza colagenului, hidroxilarea fenilalaninei, sinteza catecolaminelor,
hidroxilarea steroizilor, desaturarea acizilor grai, absorbia fierului, metabolizarea
xenobioticelor etc.

53

Tulburri de aport vitaminic


Carena vitaminei sau aportul alimentar redus poate conduce la tulburri gastrointestinale, boli infecioase, neoplazii, afeciuni metabolice caectizante i la apariia
scorbutului.
Apariia scorbutului este precedat de anemie, inapeten, scderea rezistenei la
efort, infecii, dureri articulare, uscciunea tegumentelor.
ntr-un stadiu mai avansat apar hemoragii subcutane, musculare, gingivale. Apar
leziuni ale esutului osos i cartilagiilor, ca urmare a perturbrii biosintezei colagenului.
Stocajul normal al vitaminei C este suficient pentru cel puin 3-4 luni naintea apariiei
semnelor de scorbut.
Nu sunt cunoscute efecte toxice, dar supradozarea poate conduce la litiaz
renal, datorit formrii oxalatului de Ca insolubil, ct i datorit efectului nefavorabil
asupra absorbiei vitaminei B1.

3.2. Vitamine liposolubile


Din punct de vedere chimic vitaminele liposolubile fac parte din clasa terpenelor,
compui polienici, constituii din resturi de izopren, unite cap la coad. Vitaminele
liposolubile se gsesc n mod obinuit asociate cu lipidele din alimentele naturale.
Absorbia lor se face n aceleai condiii ca i a lipidelor, adic n prezena
grsimilor, a bilei i a sucului pancreatic. Dup absorbie, vitaminele liposolubile sunt
transportate de chilomicroni pe cale limfatic n snge i apoi depozitate n ficat
(vitamina A, D, K), sau n esutul adipos (vitamina E) pentru diferite perioade de timp.
Supradozarea vitaminelor liposolubile conduce la instalarea unor stri toxice
(hipervitaminoz) mai ales n cazul vitaminelor A i D.
n snge vitaminele liposolubile sunt transportate de lipoproteine specifice,
nefiind solubile n plasm.
Nu sunt excretate n urin; n cea mai mare parte sunt eliminate pe cale biliar n
fecale.
3.2.1. Vitamina A (Retinol, axeroftol, vitamina antixeroftalmic, vitamina
liposolubil de cretere)
De fapt sunt dou vitamine, A1 i A2, care pot fi oxidate la aldehide sau acizi fr
pierderea activitii biologice.
16

H3C
2
3

17

CH3

19

CH3

20

CH3

CH2OH
1 6 7
9
11
13
15
10
12
8
14
5
CH3
4
18

Retinol (Vitamina A1)

H3C

CH3

CH3

CH3
CH2OH

CH3
3-dehidroretinol (Vitamina A2)

Vitamina A1 este un alcool polienic cu 20 atomi de carbon, cu duble legturi


conjugate, coninnd la un capt un ciclu de -ionon.

54

Vitamina A2 este 3-dehidroretinol, ce conine o legtur dubl suplimentar


ntre C3 i C4.
Gruparea de alcool primar din poziia 15 se poate oxida n organism reversibil la
aldehid (retinal) sau chiar la acid retinoic (-COOH), dar ireversibil.
15

15

15

COOH

CHO

CH2OH

Acid retinoic

Retinal

Retinol

n organism, vitamina A se formeaz n special la nivelul mucoasei intestinale i


mai puin n ficat, muchi i plmn, prin transformarea provitaminelor A (, i carotenii) prin oxidare la C15.
4'

18'
17
2

16
1

3
4

7
6

11

9
8

10

13
12

14

15

14'
15'

5 18

ionon\

caroten

12'
13' 11'

10'

5'

8'
9'

7'

6'
17'

3'
1' 2'
16'

ionon\

Ingerarea ndelungat de alimente bogate n caroten duce la depozitarea acestora


n esuturi, aprnd xantodermia nglbenirea pielii, n special a palmelor i tlpilor, cu
excepia sclerelor care, rmnnd albe, poate face diferena de icter.
Hipercarotenemia nu atrage i hipervitaminoz A.
Vitamina A se gsete n produsele de origine animal n cantitate mai mare
dect n cele vegetale: ficatul unor peti de ap dulce, glbenu de ou, lapte.
Depozitul de vitamin A din ficat poate asigura necesarul organismului pentru o
perioad lung de timp (chiar peste 1 an).
Rolurile vitaminei A
Vitamina A (retinol sau acid retinoic) este indispensabil vieii i creterii
normale (n privina staturii i greutii). n absena vitaminei, creterea animalelor mici
este oprit i cu timpul acestea mor.
Exercit aciune protectoare asupra epiteliilor, asupra mucoaselor,
mpiedicnd ptrunderea microorganismelor (aciune antiinfecioas).
Retinolul (-CH2OH) are rol n funcionarea aparatului genital i de
reproducere (spermatogenez). n acest caz acioneaz n calitate de hormon, printr-un
mecanism asemntor cu al hormonilor steroizi. Deficiena de vitamin A scade

55

gluconeogeneza (probabil ca rezultat al represiei de cortizol), scade sinteza de


glicoproteine membranare, mucopolizaharide i colesterol.
Acidul retinoic poate nlocui retinolul n creterea i diferenierea epiteliilor,
fiind considerat chiar mai activ, dar nu poate substitui retinolul sau retinalul n procesul
vederii.
Cel mai nsemnat rol al vitaminei A este n procesul vederii n care este
implicat direct 11-cis-retinal (-CHO) n calitate de grupare prostetic a tuturor
pigmenilor fotosensibili din retin.
Deficiena de vitamin A la copii i animale tinere afecteaz sistemul osos
(oprirea creterii oaselor, erupii dentare ntrziate, rdcini ru implantate, alterarea
emailului dentar) i apoi a esuturilor moi.
- Oprirea diviziunii celulare i atrofia celulelor deja formate, ntrzierea sever a
creterii inclusiv a sistemului nervos.
- Epiteliile, indiferent de originea lor, apar keratinizate, ceea ce conduce la
tulburri ale glandelor exocrine, lacrimale, piele, tractusul digestiv, respirator, urogenital
(se produce keratinizarea celulelor vaginale kolpokeratoz).
- Carena poate fi nsoit de infecii spontane.
- Carena vitaminic se manifest n principal la nivelul ochilor: scderea
capacitii de adaptare de la lumin la ntuneric (nictalopie) i hemeralopie scderea
acuitii vizuale i ngustarea spectrului vizual pentru albastru-galben, oboseal la citit.
Dac avitaminoza se accentueaz i este de lung durat apar leziuni ale epiteliului
conjunctiv xeroftalmie manifestat prin uscarea epiteliilor (xeroz), atrofia glandelor
lacrimale (cu scderea lacrimilor i deci umectarea insuficient) i lipsa de lizozim
(factor de protecie antimicrobian), corneea se opacifiaz, continund cu keratomalacie
(perforarea purulent a ochiului) proces care duce la cecitate (orbire).
Hipervitaminoza A
- Dozele excesive de vitamin A produc fenomene de intoxicaie acut,
manifestat prin ameeli, cefalee, somnolen sau intoxicare cronic (anorexie,
tegumente usacte, buze uscate, ragade comisurale).
- Megadozele de vitamin A produc reabsorbia oaselor prin stimularea
activitii proteolitice lizozomale, stimularea secreiei de parathormon (PTH) i efecte
teratogene la femeile gravide.
- Consumul exagerat de caroteni produce icterul carotenic. Cnd se depete
capacitatea de fixare a proteinei de legare a retinolului (RBC) are efecte litice asupra
membranelor biologice. Lezarea membranelor eritrocitare de ctre retinol este inhibat
de vitamina E (tocoferol).
3.2.2. Vitamina D (colecalciferol, vitamina antirahitic)
Grupul vitaminelor D este reprezentat de cinci vitamine cu structur chimic i
aciune asemntoare notate de la 2 la 6.
Provitaminele D sunt derivai sterolici cu structura urmtoare:
ciclopentanoperhidrofenantren. Ele se difereniaz dup structura radicalului R.

56

CH3

CH

18
19
2
3

HO

A
4

10
5

11

12

13
14

D 16
15

B 8
6

CH3
CH CH CH
CH3
CH3

Ergosterol, provitamina D2
(ergocalciferol)

17

CH

CH3

CH

CH2 CH2 CH2

CH3
CH
CH3

7-dehidrocolesterol, provitamina D3,


(colecalciferol)

Precursorii nu prezint activitate vitaminic. Activitatea vitaminic se


dobndete prin activare, proces care cuprinde dou etape: activarea primar i activare
secundar.

Provitamine D activarea primar\


(U.V.`n piele)

25-OH-D

vitamine D 1-a activare secundar\


(ficat)
a 2 -a activare secundar\

1,25-(OH)2-D

Activarea primar. Transformarea provitaminei n vitamina D se realizeaz


prin deschiderea inelului B ntre C9 i C10 cu apariia unei duble legturi ntre C10 i C19
sub aciunea razelor ultraviolete, rezultnd o trien care constituie structura de baz ce
confer activitate biologic comun (anhirahitic) iar catenele laterale le imprim
intensitatea activitii vitaminice.
Suprairadierea duce la compui toxici.
Deoarece prin expunere la soare se formeaz suficient vitamin D3, aceasta este
privit astzi mai mult ca un hormon dect ca o vitamin.
Activarea secundar const din dou procese de hidroxilare succesive ce au
loc n ficat i rinichi.
- Prima hidroxilare a vitaminei D3 are loc n ficat, n poziia 25 a catenei laterale,
formndu-se 25-hidroxi-D3.

57

7-Dehidrocolesterol
U.V. (piele)
R
CH2

Colecalciferol
(Vitamina D3)

HO

ficat

25

OH

25-OH-D3

CH2

HO

Rinichi

HO

25

OH

CH2

HO

1,25-Dihidroxi-D3
(calcitriol)

CH2

25
OH

OH

HO

24,25-Dihidroxi-D3
(inactiv)

- Forma hidroxilat n poziia 25 sufer o nou hidroxilare la nivelul rinichiului


printr-un proces asemntor celor din sinteza sterolilor n glandele suprarenale. Sistemul
enzimatic este localizat n membrana intern a mitocondriei i necesit pe lng
NADPH, O2 i citocromul P450. Rezult 1,25-dihidroxi-colecalciferolul sau 1,25dihidroxi-D3 care este transportat de o protein specific la intestin unde declaneaz
procesele implicate n absorbia calciului.
Derivatul monohidroxilat (25-OH-D3) este de 4-5 ori mai activ dect vitamina
D3, n prevenirea rahitismului, iar 1,25-(OH)2-D3 este de 20-30 ori mai eficient dect D3
n transportul intestinal de Ca++ i respectiv, n prevenirea rahitismului, i de de zece ori
mai activ n meninerea concentraiei sanguine de fosfor la animalele cu regim srac n
fosfai.

58

La nivelul rinichiului alturi de 1,25-(OH)2-D3 se poate forma i 24,25(OH)2-D3 mai puin activ n transportul intestinal al Ca++ i n procesul de mineralizare,
dar capabil s creasc Ca++ seric la obolanii cu depleie de fosfai dependent de
vitamina D.
Rolul metabolic al vitaminei D
1,25-(OH)2-D3 sau calcitriolul (C) regleaz metabolismul fosfo-calcic prin
aciunile exercitate asupra esuturilor int: intestin, os, rinichi.
La nivelul intestinului calcitriolul (C) este transportat la locul de aciune
unde se fixeaz pe proteine receptoare citoplasmatice i apoi este translocat la nucleu
unde printr-un mecanism puin cunoscut induce sinteza unei proteine transportoare de
calciu (Calcium Binding Protein CBP) care favorizeaz absorbia de Ca++ contra
gradientului de concentraie, mecanism de aciune similar aciunii unui hormon steroid.
La nivelul tubilor renali 1,25-(OH)2-D3 stimuleaz sinteza CaBP renale i
deci reabsorbia, prentmpinnd excreia de Ca++. n condiii fiziologice sau n doze
terapeutice 1,25-(OH)2-D3 stimuleaz reabsorbia de fosfat, mai mult dect pe cea de
Ca++, diminund excreia, economisind fosfaii.
La nivelul osului aciunea 1,25-(OH)2-D3 este mai complicat i mai puin
clar. Vitamina asigur fixarea Ca++ i PO43- n spaiile libere dintre capetele nespiralate
ale moleculelor de colagen i stimuleaz sinteza unei proteine specifice care leag Ca ++,
osteocalcina. Calciul se fixeaz n faza mineral a osului, sub form de hidroxiapatit,
Ca10(PO4)6(OH)2, alturi de cantiti mici de citrat, Na+, Mg++ i CO32-.
Tulburri de aport vitaminic
Hipovitaminoza D
Formarea defectoas n piele a vitaminei D3, aportul alimentar sczut i/sau
defecte intestinale de absorbie a vitaminei pot duce la stri de hipovitaminoz D.
Hipovitaminozele D conduc la stri de boal care se manifest prin:
- perturbri n metabolismul mineral (Ca++ i PO43-) i a secreiei de
parathormon (PTH);
- defecte n mineralizarea osului.
n deficiena de vitamin D absorbia de Ca2+ fiind perturbat apare
hipocalcemia, nsoit secundar i compensatoriu de creterea secreiei de PTH, iar PTH
determin mobilizarea Ca2+ din oase pentru normalizarea calcemiei. Se instaleaz o
hipofosfatemie accentuat mai ales n stadiile timpurii din cauza scderii absorbiei
intestinale i n principal eliminrilor renale (PTH scade pragul renal de eliminare pentru
fosfai).
Din punct de vedre biochimic hipovitaminoza D este caracterizat prin
hipocalcemie moderat sau normocalcemie, hipofosfatemie, activitate crescut a
fosfatazei alcaline, nivele crescute de parathormon i sczute de 25-(OH)2-D3.
Glucocorticoizii inhib absorbia intestinal de calciu i mineralizarea osului.
Hipovitaminoza D la copii se numete rahitism iar la adult osteomalacie. Clinic,
rahitismul este caracterizat prin scderea rezistenei mecanice a oaselor (nmuierea
oaselor). La adult, rezerva de calciu fiind mai mare, hipovitaminoza se instaleaz mai
greu. Hipocalcemia dezvolt la adult osteoporoza (reducerea masei osoase pe unitate de

59

volum la un nivel situat sub cel necesar funciei normale). Osteoporoza apare la
femei postpartum ceea ce dovedete dependena hormonal a acesteia. Tratamentul cu
estrogeni previne instalarea osteoporozei (se pare c estrogenii protejeaz osul mpotriva
agenilor care determin resorbia osului, n special PTH). Sunt descrise boli genetice
datorate unui defect n sinteza renal de 1,25-(OH)2-D3 care produc rahitismul
dependent de vitamina D (tip I) i mai rar lipsei sau deficienei de receptor citoplasmatic
pentru 1,25-(OH)2-D3 rahitism vitamina D rezistent (tip II).
De asemenea, a fost descris rahitismul hipofosfatemic indus de iradierea cu
raze X.
Hipervitaminoza D
Dup ingestia cronic, oral, a unor doze mari de vitamin D pot apare
intoxicaii cu vitamin D caracterizate prin anorexie, vrsturi, diaree, astenie, mialgie,
pierderi n greutate, hipercalcemie, hipercalciurie. Patologic are loc calcifierea
esuturilor moi i n special la nivel renal (nefrocalcinoza), cornee, aort, plmni, inim.
Prin suprimarea administrrii de vitamin D, prin aplicarea unui regim srac n
Ca i fosfat n lichide, se produce o mobilizare lent a Ca din esuturile moi i revenirea
la normal a calcemiei. Atunci cnd nu este compromis grav, funcia renal se
normalizeaz.
3.2.3. Vitaminele E (tocoferolii, vitaminele antisterilitii, vitaminele de
reproducere)
Numele de tocoferol provine de la funcia biologic de a favoriza fertilitatea
(tokos natere; phesein a purta).
Vitaminele E sunt un grup de vitamine tocoferoli formai dintr-un nucleu de
croman substituit i o caten lateral ramificat fitil.
CH3
HO
H3C

6
7

5
8

3
2
1

CH3
(CH2)3

CH3

CH3

CH3

CH (CH2)3

CH (CH2)3 CH CH3

CH3
- Tocoferol

Sunt patru tocoferoli importani: , , , - care se difereniaz ntre ei prin


numrul de grupri metil din nucleul cromanic; proprietile vitaminice sunt
proporionale cu numrul grupelor CH3, deci -tocoferolul va fi cel mai activ biologic
avnd trei grupri metil, 5, 7, 8-trimetil tocol.
Absorbia vitaminelor E din alimentaie are loc la nivelul intestinului subire, n
aceleai condiii ca i celelalte vitamine liposolubile.
De la intestin, pe cale limfatic, tocoferolii trec n snge unde sunt vehiculai de
-lipoproteinele plasmatice, apoi sunt repartizai n toate organele, depozitele fcndu-se
n esutul adipos.

60

Intracelular, vitaminele E se acumuleaz n fosfolipidele membranare


citoplasmatice i mitocondriale i n reticulul endoplasmatic. Concentraia vitaminelor E
n aceste organite este n funcie de aportul vitaminic, de peroxidani, antioxidani, de
seleniu alimentar i de aportul de aminoacizi cu sulf.
n procesele metabolice, tocoferolii sunt transformai n compui chinonici,
hidrochinonici care se elimin prin bil, 80%, iar restul prin urin, sub form conjugatp
cu acidul glicuronic.
Rol biochimic. Vitamina E nu are o funcie biologic specific pentru a
explica numeroasele consecine care apar n carena de vitamin E la animalele de
experien (este vitamina n cutarea unei boli).
Aciunea antioxidant. Vitamina E este considerat cel mai eficace
antioxidant liposolubil natural. Substanele cele mai sensibile la peroxidare sunt lipidele
celulare i lipidele din membranele organitelor subcelulare, i dintre acestea n special,
lipidele nesaturate.
Sub aciunea oxigenului molecular, acizii polinesaturai formeaz peroxizi
lipidici prin peroxidare, proces autocatalitic, care se desfoar dup un mecanism
radicalic, prin reacii nlnuite:
Ini]iere:

R-H

(Cu, Fe, U.V.)

R. ^ H .

R. ^ O 2

R-OO.

Propagare:

R-H ^ R-OO.

R-OOH ^ R.

~ntrerupere:

AH ^ R-OO.

R-OOH ^ A.

A este un radical stabil (de exemplu, provenit din tocoferol), capabil s inhibe
propagarea reaciilor radicalice n lan din peroxidarea lipidic.
.O

CH3

CH3
O

- Tocoferol

CH3

H3C

O
CH3
Radical tocoferil
pu]in reactiv

H3C

CH3
R

CH3
Tocoferil-chinon\
stabil\

Aciunea antioxidant a vitaminei E are o importan mare pentru viaa celulei,


ntruct mpreun cu vitamina C i ali antioxidani alimentari ar fi implicai n
protejarea cilor respiratorii i mai ales a esutului pulmonar de aciunea nociv a aerului
poluat (O3, N2O). Efectele nocive ale oxidanilor pot fi ilustrate prin schema urmtoare:

61

Acizii gra[i polinesatura]i din fosofolipidele membranare


_
Antioxidan]i
Fe, Cu
(vitamina E)
O2
Peroxizi lipidici

Degradarea acizilor gra[i din fosfolipidele membranare

Distrugerea membranelor

Eritrocit
(fragilitate crescut\
[i hemoliz\)

Lizozomi
(permeabilitate
crescut\)

Reticul endoplasmatic
(dezintegrarea structurilor
necesare ac]iunii enzimelor
care metabolizeaz\
medicamente [i transport\
electronii)

Eliberarea enzimelor
hidrolitice
Inactivarea enzimelor
Perturb\ri tisulare
(distrofie)

Peroxidarea lipidelor se evideniaz chiar n prezena concentraiei fiziologice de


vitamin E. Organismul dispune de alt sistem antioxidant reprezentat de o enzim cu
seleniu, glutation peroxidaz, care catalizeaz reacia:
2 GSH + H2O2 G-S-S-G + 2 H2O
Aceast reacie explic relaia dintre vitamina E, seleniu i aminoacizii cu sulf.
Tocoferolii scad necesarul de seleniu (la animalele de experien) prevenind
pierderea seleniului sau transformndu-l ntr-o form biologic activ (forma selenit din
centrul activ al enzimei).

62

Tocoferolii reduc i cantitatea de GSH-peroxidaz necesar descompunerii


peroxizilor formai.
Pe de alt parte seleniul scade necesarul de vitamin E prin asigurarea funciei
normale a pancreasului i astfel a digestiei i absorbiei lipidelor, implicit a vitaminei E.
Vitamina E i seleniul au aciune sinergic n meninerea nivelului ridicat de
CoQ (component al lanului respirator).
Vitamina E are rol n hematopoez i stabilitatea eritrocitelor; prematurii i
sugarii alimentai artificial, dezvolt anemie, prin deficit alimentar.
Necesar depinde n principal de aportul de acizi grai polinesaturai din
diet. Se gsete n plante, dar i n ficat, lapte, glbenu de ou.
Tulburti de aport vitaminic
Hipovitaminoza E
Efectele carenei de vitamin E sau hipovitaminozei E se manifest gradat i
progresiv n funcie de perioada de deficit vitaminic.
Semnele deficienei de vitamin E la om se manifest paralel cu perturbrile
absorbiei de grsimi i constau n: slbiciune muscular, fragilitate eritrocitar,
fenomene care dispar prin administrarea vitaminei E.
Independent de gradul de alterare a lipidelor, la animale, s-au evideniat tulburri
ale aparatului genital i a capacitii de reproducere la ambele sexe.
Nu sunt dovezi care s ateste c vitamina E, la om, este necesar pentru
fertilitate. Totui, sunt unele date conform crora concentraia sanguin de tocoferoli
crete progresiv n sarcin pn la 50-100% sau chiar mai mult n ultima lun fa de
primul trimestru de sarcin. Aceasta constituie o condiie pentru evoluia i dezvoltarea
ftului.
Revenirea la valori normale se face n primele 2-5 luni de la natere i crete n
lapte. La femeile cu avort habitual, concentraia tocoferolului n snge este de 2-4 ori
mai sczut dect la femeile cu sarcin normal.
Hipervitaminoza E
Administrarea ndelungat i abuziv de vitamin E, la om, duce la involuia
ovarelor, tulburri nervoase i dureri ale membrelor inferioare.
Dozele de pn la 100 mg/zi nu sunt toxice.
3.2.4. Vitaminele K (Filochinona, vitamina coagulrii, vitamina antihemoragic,
factor protrombinic)
Grupul vitaminelor K sunt derivai de naftochinon care la C3 conin sau nu un
radical variabil de atomi de carbon.

CH3

O
1

CH2 CH C CH2 (CH2 CH2 CH CH2) 3 H

CH3

CH3

6
5

Vitamina K1 (filochinona) are la C3 un lan lateral de fitil (20 atomi de carbon):

Vitamina K2 (farnochinona) conine un radical difernesil (30 atomi de carbon):


CH3
( CH2 CH C CH2)

Vitamina K3 (menadiona) n care6 radicalul R este H. Este sintetic i este


solubil n ap spre deosebire de K1 i K2.
Vitaminele din tractusul gastro-intestinal sunt de natur exogen (diet) i
endogen sintetizate de flora intestinal; din acest motiv, organismul este permanent
aprovizionat cu vitamin K.
Absorbia vitaminelor K1 i K2 (naturale) se face mpreun cu lipidele, apoi pe
cale limfatic trec n snge i de aici n ficat. Vitaminele K sintetice fiind solubile se
absorb n absena srurilor biliare.
Cea mai mare cantitate a vitaminelor K naturale se depoziteaz temporar n ficat;
vitamina K3 nu se acumuleaz, excesul este eliminat pein glucurono- sau sulfoconjugare.
Medadiona (K3) pentru a putea s-i exercite funciile metabolice este alchilat
trecnd n vitamin K2.
Rolul metabolic al vitaminei K
Vitamina K este un component al sistemului microzomial de transport de
electroni cuplat cu -carboxilarea post transcripional a restului glutamil din unele
proteine din plasm, os (osteocalcina), rinichi, splin, inclusiv a proteinelor precursoare
pentru factorii coagulrii: protrombina (factorul II), proconvertina (factorul VII),
factorul Christmas (factorul IX), factorul Stuart (factorul X).
Proteinele coagulrii sunt sintetizate n ficat sub form de precursori inactivi
(zimogeni).
Vitamina K este esenial pentru sinteza protrombinei normale i factorilor VII,
IX, X. Pentru ca aceti factori s fie transformai n formele biologic active este necesar

64

carboxilarea
posttranscripional
a resturilor glutamil din precursori la acid
carboxi glutamic.
Vitamina K prin structura 1,4 naftochinonic joac rol de transportor de
hidrogen avnd rol de coenzim n procesul carboxilrii.
OH

O
CH3

CH3

^ 2H
- 2H

R
OH

Carboxilarea restului de acid glutamic la acid -carboxil-glutamic este catalizat


de vitamina K.

COO

CH2

CO2

CH2

Vitamina K

OOC

COO
CH

CH2
C CH NH

C CH NH

Gla

Glu

Acid -carboxi-glutamic

Acid glutamic

Resturile carboxil au o mare afinitate de chelatare a ionilor de Ca 2+ care servesc


la legarea fosfolipidelor cu protrombina, interaciune specific pentru activarea
protrombinei la trombin (factorul activ al coagulrii).
_
O

_
Ca2^ O

O
C

C
CH
CH2
C CH NH
O

Reaciile de carboxilare au loc n microzomii multor esuturi n prezena O2, CO2


i formei de hicrochinon a vitaminei K.

65

Antivitaminele K, dicumarolul i warfarina (derivai cumarinici) inhib


reacia de carboxilare a acidului glutamic i sunt folosii ca ageni anticoagulani atunci
cnd exist primejdia coagulrii sngelui la nivelul vaselor sanguine (tromboze).
Tulburri de aport vitaminic
Carena de vitamin K se instaleaz cnd exist tulburri n absorbia de lipide
(deficit de bil), afeciuni intestinale, alterarea florei intestinale, afeciuni hepatice, boli
infecioase.
Carena de vitamin K duce la scderea protrombinei, prelungirea timpului de
coagulare i apariia de fenomene hemoragice spontane.
n perioada imediat postnatal, nou nscuii sunt predispui la hemoragii
deoarece se nasc fr rezerve de vitamin K, avnd intestinul steril.
Menadiona administrat n concentraie mare poate determina hemoliz i deci
poate agrava hiperbilirubinemia.
3.2.5. Acidul lipoic (acid tioctic) este un factor necesar unor sisteme
enzimatice (piruvat dehidrogenaza, -cetoglutarat dehidrogenaza). Este derivat din
acidul octanoic care prezint o punte disulfidic ntre C6 i C8.

H2C
S

CH2

C H (CH2)4

COOH

+H
-H

CH2

(CH2)4 COOH

SH
)

L
S

CH
SH

SH

S
( L

CH2

SH

Se gsete n dou forme, oxidat i redus, constituind un sistem redox,


participnd la reacii de oxidoreducere i transfer de grupri acil.

66

4. ENERGETICA BIOCHIMIC
Celula vie este considerat o main care transform continuu energia coninut n
structura moleculelor substanelor nutritive din mediu nconjurtor n energie chimic pe care
apoi o folosete n diverse scopuri cum ar fi procesele de biosintez, contracia muscular,
transportul prin membran, excitaie nervoas.
Utilizarea substanelor nutritive de ctre celul se face prin transformri metabolice,
transformri care au loc cu participarea unui numr mare de enzime.
Degradarea enzimatic a substanelor nutritive, cum sunt polizaharidele, lipidele i
proteinele, se petrece printr-un ir de reacii chimice care pot fi schematizate, n trei stadii
principale:
I. - n primul stadiu, macromoleculele substanelor nutritive sunt degradate pn la substana
simpl de baz din care sunt constituite. Astfel, polizaharidele sunt degradate la hexoze i
pentoze, lipidele n acizi grai i glicerol, iar proteinele la aminoacizii din care provin;
II n al doilea stadiu, produii formai n primul stadiu sunt transformai ntr-un numr mic de
produi intermediari, n principal ntr-un compus cu doi atomi de carbon, acetil-CoA;
III n al treilea stadiu aceti compui sunt metabolizai pe o cale comun la CO2 i H2O.
Proteine

Pentoze

Lipide

Polizaharide

Aminoacizi

Macromolecule

Hexoze

Glicerol
Acizi grasi

Glucoza

monomeri

Piruvat
II
Compus de
degradare
comun

Acetil-CoA

Ciclul
Krebs

III

NH3

H2O

CO2

Produs final
de metabolism

Biosinteza macromoleculelor de polizaharide, lipide i proteine specifice celulei


se realizeaz de asemenea n trei stadii, plecnd de la moleculele de precursor din cel de

67

al treilea stadiu care sunt convertii la moleculele de baz: aminoacizi, hexoze,


acizi grai i glicerol. n final, compuii simpli rezultai sunt asamblai n macromolecule
specifice organismului.
Aceste dou ci metabolice sunt strns legate ntre ele din punct de vedere
energetic, deoarece calea de degradare (catabolism) furnizeaz energia necesar cii de
biosintez (anabolism).
n calea catabolic, energia eliberat prin degradarea diverilor compui organici
nutritivi este recuperat n bun parte sub form de ATP (n special n stadiul III, prin
procesul de fosforilare oxidativ).
Calea anabolic sau de biosintez necesit energie pe care o obine prin hidroliza
legturii macroergice din ATP.
NH2
N

N
N

OH

CH2 O P O ~P

O
H

OH

H
OH

OH
O ~P

OH

OH HO

Molecula de ATP cedeaz energia sa prin transferarea restului fosfat unei


molecule de acceptor specific care sub aceast form este capabil s ndeplineasc unele
funcii specifice celulei: de exemplu biosinteza macromoleculelor (lucru chimic),
transportul activ prin membran a unor ioni anorganici i substane nutritive (lucru
osmotic) i contracia muscular (lucru mecanic). n timpul acestor procese ATP se
desface n ADP i Pa. ADP este apoi refosforilat pe seama energiei produs n transferul
de electroni nchiznd astfel ciclul energetic al celulei.
Procesul de fosforilare oxidativ const n transportul electronilor de la
diferii intermediari metabolici (aa numitele substrate respiratorii) pn la O 2 i captarea
energiei eliberat n acest proces sub forma unor legturi bogate n energie, n molecula
de ATP.
Reacia de fosforilare oxidativ poate fi reprezentat prin ecuaia:
AH2 + B + ADP + Pa

A + BH2 + ATP + H2O

care reprezint suma a dou reacii ireversibile :


(1) AH2 + B A + BH2 - reactii de oxido-reducere
(2) ADP + Pa ATP + H2O - reactie de fosforilare

68

Att transportul de electroni ct i reacia de fosforilare sunt prezente i


caracteristice celulelor aerobe, adic acele celule care utilizeaz drept ultim acceptor de
electroni oxigenul molecular.
Enzimele participante la acest proces sunt localizate n membrana intern a
mitocondriei, au structur complex i sunt greu de izolat i studiat.
Transportul de electroni este efectuat de trei clase principale de oxido-reductaze:
dehidrogenaze piridinice, dehidrogenaze flavinice i citocromi.
Dehidrogenazele piridinice au drept coenzim NAD+ i NADP+ (formele
active ale vitaminei PP). Ele catalizeaz reacii de tipul:
Substrat redus + NAD+(NADP+)

Substrat oxidat + NADH+H+(NADPH+H+)

(vezi rolul metabolic al vitaminei PP, p. 61)


Participarea celor dou coenzime piridinice la transferul de electroni este diferit.
NAD particip n special la procesele de transport de electroni de la un substrat la
oxigen (n cile de degradare, de eliberare de energie), n timp ce NADP + particip la
transportul de electroni n reacii reductive din procesele de sintez. Concentraia
celular de NAD+ este mult mai mare dect a NADP+. Peste 60% din NAD+ se gsete
n mitocondrie i restul n citoplasm, n timp ce aproape tot NADP + se gsete n
citoplasm, acolo unde au loc procesele de sintez.
Dehidrogenazele flavinice conin drept grupare prostetic unul din cele dou
flavin-nucleotide FMN i FAD, formele active ale vitaminei B2.
Reaciile generale catalizate de flavin-enzime sunt:
+

Substrat redus + Enz.-FMN(Enz.-FAD)

Substrat oxidat + Enz.-FMNH2(Enz.-FADH2)

(vezi rolul metabolic al vitaminei B2, p. 57)


Citocromii sunt proteine transportoare de electroni care conin fier porfirinic.

Se gsesc numai n celulele animale. Gruparea prostetic a citocromilor este hemul


(asemntor hemului din hemoglobin).
Unii citocromi sunt localizai n membrana intern a mitocondriei i particip la
transferul electronilor de la diverse sisteme dehidrogenazice la oxigen. Ali citocromi
(ex. cit.P450) se gsesc n microzomi i sunt specializai n reaciile de hidroxilare,
implicate i n metabolismul medicamentelor (vezi structura cromoproteinelor
porfirinice, p.26-28).
Participarea citocromilor la transferul de electroni se realizeaz prin modificarea
reversibil a valenei fierului:
cit.Fe2+

_
-e
_
+e

cit.Fe3+

n mitocondriile animalelor superioare au fost identificai cinci citocromi (b, c 1, c,


a i a3) care particip la transferul de electroni. Complexul cit.a+a3 se mai numete i
citocrom-oxidaza.

69

Ulterior au mai fost identificai i ali transportori de electroni, printre care


ubichinona sau CoQ, compus asemntor structural cu vitamina K.
Lanul transportatorilor de electroni poate fi prezentat ntr-o form simplificat
astfel:

SH2

NAD+
Piridine

FMNH2
Flavine

2 Fe3+
Citocromi

H2O

NADH

FMN

2 Fe2+

1/2O2

H+

2H+

H+

2H+

Substratele respiratorii provin n principal din ciclul Krebs, dar i din alte reacii
metabolice. O serie de substrate, cum ar fi izocitratul, -cetoglutaratul, malatul,
piruvatul, -hidroxi- butiratul, -hidroxi-acil CoA, prolina etc. cedeaz electronii NAD+ului.
Electronii provenii de la succinat, acil-CoA, -glicerol-fosfat sunt cedai CoQ
prin intermediul unor flavoproteine (enzime flavinice).

Izocitrat
a-cetoglutarat
Malat
-hidroxibutirat
-hidroxiacil-CoA

Piruvat

Succinat

FAD

FAD

NADH

FMN

CoQ
FAD

-glicerol-P

cit.b

cit.c

cit.a+a3

O2

FAD
Acil-CoA

Concomitent cu trecerea electronilor prin lanul respirator are loc scderea


energiei libere a sistemului. S-a stabilit c prin trecerea unei perechi de electroni de la
NADH la oxigen se elibereaz 52,5 Kcal, iar pentru sinteza unei molecule de ATP se
consum 7,3 Kcal, ceea ce nseamn c din energia eliberat pot fi sintetizate mai multe
molecule de ATP.
Experimental s-a dovedit c prin parcurgerea ntregului lan (NADH O2) se
sintetizeaz 3 molecule de ATP. Au fost identificate cele trei locuri n care diferena de
potenial ntre componenii lanului este mai mare de 0,2 V i scderea energiei libere de
9 Kcal suficient pentru sinteza a trei molecule de ATP (3 x 7,3 = 21,9 Kcal) ceea ce

70

nseamn c 42% din energia eliberat a fost nmagazinat sub form de ATP.
Diferena de energie servete la termoreglare.

-0,4
NADH
-0,2

2e

_ Enz.-FMN
2e

0
+0,2
+0,4
+0,6

ADP+Pa
_

ATP
CoQ

cit.b

ADP+Pa
2e

ATP
cit.c
cit.a

ADP+Pa
2e

+0,8

ATP

CO
_
CN

O2
Direc]ia fluxului de electroni

Se nelege acum de ce prin oxidarea mitocondrial a substratelor care cedeaz


electronii NAD-ului se sintetizeaz trei molecule de ATP, iar prin oxidarea substratelor
care cedeaz electronii prin intermediul FAD-ului la CoQ (deci ocolete primul loc de
fosforilare) se sintetizeaz numai dou molecule de ATP.
Transportul de electroni i fosforilarea oxidativ poate fi inhibat de o serie de
compui cum ar fi monoxidul de carbon, cianura, hidrogenul sulfurat, unele antibiotice
(oligomicina), malatul etc. Inhalarea acidului cianhidric (HCN) sau ingerarea cianurii de
K (KCN) cauzeaz o rapid i puternic inhibare a lanului respirator la etapa citocromoxidazei (cit.a+a3). Ionul CN- se fixeaz la Fe3+ din cit.a3 oprind respiraia mitocondrial
i ca urmare celula moare rapid. Moartea prin cianur survine rapid prin asfixie la SNC.
Dac intoxicaia cu CN- este diagnosticat rapid, se administreaz nitrii care
oxideaz oxihemoglobina la Met-hemoglobin, reacie ce implic trecerea Fe2+ din
hemoglobin n Fe3+ din methemoglobin.
Methemoglobina concureaz cu cit.a+a3 (Fe3+) pentru ionul CN- formnd un
complex MetHb-CN. De asemenea, administrarea de tiosulfat (Na2S2O3) produce
inactivarea ionului cian la ion sulfocian, netoxic.

71

5. METABOLISMUL GLUCIDIC
5.1. Digestia i absorbia glucidelor
Aproximativ 50% din caloriile preluate zilnic de organism sunt furnizate de
glucide: amidon (160 g), zaharoz (120 g), lactoz (30 g) glucoz i fructoz libere (10
g) i urme de maltoz i trehaloz (dou molecule -glucoz unite prin legturi
(11).
Prin digestia glucidelor rezult trei monozaharide: glucoza, fructoza i galactoza.
6

CH2OH

CH2OH
O

H H

HO OH

H OH

CH2OH

CH2OH

HO OH

HOH2C

-Glucoza

H H HO CH2OH

H H

OH

OH

OH

OH

H OH

H H

-Fructoza

O
HO H

OH

OH

-Galactoza

H H

OH

-Glucoza

OH

CH2 OH

H H HO OH

H OH

H OH

HOH2C

HO H

OH
-Fructoza

-Galactoza

Amidonul este format din amiloz (20%) i amilopectin (80%).


CH2OH
O
OH

H 1

OH

CH2OH
O
4

OH

OH

CH2OH
O

CH2OH
O
O

OH

OH

Structura amilozei

OH

OH

72

O
H

CH2OH

OH
H O

HO

O
CH2OH
O

CH2OH
O
4

OH

OH

OH

OH

CH2
O

OH

OH

Structura amilopectinei
n amiloz, moleculele de -glucoz sunt unite prin legturi (1 4)
glicozidice, formnd lanuri lungi, spiralate. Amilopectina are o structur ramificat, n
care unitile de -glucoz sunt unite prin legturi (1 4) i (1 6) glicozidice.
Digestia glucidelor ncepe n cavitatea bucal i este completat n duoden.
Asupra amidonului pot aciona dou tipuri de enzime hidrolitice: -amilaza i
oligozaharidazele (dextrinaze) n care sunt incluse i dizaharidazele.
Amilaza salivar (n cavitatea bucal) i amilaza pancreatic (n intestinul
subire) hidrolizeaz amidonul ncepnd de la periferia moleculei spre centru, scindnd
numai legturile (1 4), cu excepia legturilor (1 6) i (1 4) din vecintatea
ramificaiilor.
Prin aciunea acestor amilaze, amiloza este transformat n maltoz i cantiti
mici de maltotrioz, iar amilopectina n maltoz i oligozaharide mici, de aproximativ
opt resturi de glucoz, cu una sau mai multe ramificaii (dextrine limit).
Oligozaharidazele completeaz hidroliza oligozaharidelor i dizaharidelor.
Aceste enzime, situate pe suprafaa celulelor epiteliale, ndeprteaz succesiv unitile
glicozidice din captul nereductor (captul C4 liber).
Legturile (1 6) din dextrine sunt scindate de amilo-1,6-glucozidaza.
Dizaharidele provenite direct din alimente, precum i cele rezultate prin digestia
amidonului sunt hidrolizate n intestinul subire sub aciunea dizaharidazelor. Aceste
enzime au specificitate diferit n funcie de structura dizaharidului i de legtura
glicozidic; -glucozidaza din intestinul subire este n exces i n consecin zaharoza
este rapid hidrolizat, n timp ce -galactozidaza, care acioneaz asupra lactozei, este
mai redus cantitativ.
Deficitul de oligozaharidaze sau dizaharidaze, n mucoasa intestinal, determin
trecerea glucidelor nedigerate n fecale.

73

Lactoz\

Intestin
sub]ire

Galactoz\
^
Glucoz\

L ac taz \

Vena
port\

Galactoz\
^
Glucoz\

Intestin
sub]ire

Lactoz\

Lactoz\
B ac te rii
CO2

}esut
H2O

H2
Compu[i
Co2, C2

Balonare, diaree,
deshidratare
a. Normal

b. Deficit de lactaz\

Prezena acestor compui osmotic activi determin scoaterea apei din


esuturi i trecerea ei n intestinul gros, cauznd diaree. La acestea se adaug
aciunea bacteriilor intestinale asupra glucidelor nedigerate rezultnd CO 2 + H 2
(gaze) i compui cu doi sau trei atomi de C ce irit mucoasa intestinal (acid
lactic). Mucoasa intestinal poate deveni permeabil pentru dizaharide, care se
vor elimina prin urin. Defecte ereditare de lactaz, zaharaz i dextrinaz au fost
descrise la copiii cu intoleran la dizaharide. Un defect generalizat n degradarea
dizaharidelor poate fi cauzat i de o varietate de boli intestinale, malnutriie sau
de medicamente ce lezeaz mucoasa intestinului subire.
O serie de polizaharide i ali polimeri coninui n diet sunt foarte puin
sau deloc hidrolizai n intestin. Aceti compui sunt desemnai drept fibre,
reprezentate de celuloz, hemiceluloz, lignin, pectine, gume i mucilagii. Sunt
abundente n cereale, fin integral de gru, amidon de cartofi, vegetale (varz),
unele fructe. Fibrele mresc peristaltismul intestinal reducnd timpul de stagnare
a coninutului intestinal.
Absorbia monozaharidelor se realizeaz prin sistemul port hepatic i
implic dou mecanisme: transportul activ (contra gradientului de concentraie)
i difuzia facilitat.
Sistemul de transport activ, dependent de Na + , este specific pentru
absorbia D-glucozei i D-galactozei (piranoze cu aceiai configuraie la C 2 ).

74

5.2. Metabolismul intermediar al glucidelor


n organismele vii, metabolismul glucidelor se realizeaz prin mai multe
ci:

Cile metabolice ale glucidelor

- Glicoliza oxidarea glucozei sau glicogenului pn la piruvat (prin


calea Embden-Meyerhof) i lactat;
- Glicogenogeneza sinteza glicogenului din glucoz;
- Glicogenoliza degradarea glicogenului, rezultnd glucoz;
- Ciclul acidului citric (ciclul Krebs sau ciclul acizilor tricarboxilici) n
care acetil-CoA (provenit din piruvat, acizi grai i aminoacizi) este oxidat la
CO 2 i H 2 O;
- untul hexozomonofosfat (calea oxidativ direct, calea oxidativ a
fosfogluconatului sau ciclul pentozo-fosforic) este o cale alternativ pentru calea

75

Embden-Meyerhof, avnd ca funcie principal sinteza unor intermediari


cum ar fi NADPH i riboze;
- Gluconeogeneza sinteza glucozei sau a glicogenului din compui
neglucidici aminoacizii glucogenici, lactatul, glicerolul i propionatul. Cile
implicate n gluconeogenez sunt n principal ciclul Krebs i glicoliza.
Pe lng aceste ci principale n organism se desfoar i urmtoarele ci
- Calea acizilor uronic prin care se sintetizeaz acidul glucuronic utilizat
pentru sinteza polizaharidelor complexe (mucopolizaharide) i pentru reaciile de
conjugare (detoxifiere);
- Sinteza mucopolizaharidelor (metabolismul aminozaharurilor);
- Metabolismul fructozei;
- Metabolismul galactozei.
Dup examinarea schemei generale de metabolizare a glucidelor se evideniaz
faptul c G6P joac un rol central, fiind punct de intersecie pentru toate cile
metabolice.
5.2.1. Glicoliza
Glicoliza este degradarea anaerob a glucozei la acid lactic. Acest proces se
poate petrece i n aerobioz, ns cantitatea de glucoz degradat n anaerobioz este
mult mai mare.
Caracteristic pentru calea glicolitic este generarea unei cantiti mici de energie
(2 ATP) i faptul c NADH este reoxidat prin cuplarea reaciilor de oxido-reducere, spre
deosebire de degradarea glucozei la CO2 i H2O cnd NADH este reoxidat n lanul
respirator cu formarea de energie.
Toate enzimele care catalizeaz reaciile acestui proces se gsesc n faza solubil
a celulei, n citoplasm.
Prin glicoliz este degradat glucoza alimentar, glucoza provenit din glicogen,
precum i din celelalte hexoze, galactoza, fructoza i manoza.
Procesul glicolitic se desfoar n dou faze. Prima faz este consumatoare de
energie, iar faza a doua, n care au loc reacii de oxido-reducere, este faza generatoare de
energie.
Procesul cuprinde un ansamblu de 11 etape principale.

1. - Glucoza Hexokinaza (HK)


Mg2+
ATP

ADP

CH2 O P
OH
H
OH

OH
OH

HO

Glucozo-6-fosfat
(G6P)

1 ATP

76

Prima etap a glicolizei este catalizat de hexokinaz (HK) cu formarea G6P, pe


seama energiei furnizat de ATP n prezena Mg++. HK este o enzim puin specific, ea
fiind capabil s fosforileze toate hexozele ( i glucoze, fructoza, manoza, galactoza).
Glucoza poate fi fosforilat i de glucokinaz (GK), enzim specific pentru
glucoz, activ n celulele parenchimului hepatic.
HK este o enzim a crei aciune poate fi inhibat alosteric de ctre produsul de
reacie G6P.
Fosfohexoizomeraza (PHI)
2.

O H2C

O CH2OH
H HO
OH
H
OH H

G6P

Fructozo-6-fosfat
(F6P)

Numai anomerul - al G6P este activ pentru aceast reacie.


Fosfo-fructokinaza (FFK)
3.

F6P

Mg2+
ATP

ADP

O H2C

O CH2 O
H HO
OH
H
OH H

P
- 1 ATP

Fructozo-1,6-difosfat
(F1,6DP)

Fosfofructokinaza (FFK) - este exemplu de enzim inductibil a crei activitate


joac un rol major n reglarea glicolizei. Reacia este ireversibil n condiii fiziologice.
FFK- este inhibat de citrat i de ATP i este activat de AMP i F2,6-DP.
CH2 O
C

HO C H
4.

Aldolaza

H C OH

CH2 O
F1,6DP

H C OH
CH2 O

H C OH

CH2 OH

CHO

Glicerinaldehid-3-fosfat
(GA3P)
(3%)

C O
CH2 O

Dihidroxiaceton-fosfat
(DHAP)
(97%)

77

Au fost descrise cteva aldolaze, toate coninnd cte patru subuniti.


Aldolaza A se gsete n cea mai mare parte dintre esuturi.
GA3 P

5.

Trioz-P-izomeraza

DHAP

GA3P este produsul activ care se transform mai departe. Cu aceast reacie de
izomerizare se ncheie prima faz a glicolizei, faz consumatoare de energie
(-2
ATP).
6. Prima reacie a celei de a doua faze este reacia de oxidare a GA3P la acidul
1,3-difosfogliceric (1,3-DPG), reacie catalizat de GA3PDH. n aceast reacie are loc
un proces de fosforilare cu Pa care urmeaz unui proces de oxidare.
O

Gliceraldehid-3-Pdehidrogenaza (GA-3-PDH)

CHO

O~ P
H C OH

H C OH
CH2 O

Pa

NAD^

GA3P

CH2 O
NADH^H^

1,3-Difosfoglicerat
(1,3-DPG)

Enzima poate lega i arsenitul care, n felul acesta, poate decupla oxidarea de
fosforilare deoarece compusul rezultat cu arsen n loc de P nu este macroergic; nu se
sintetizeaz ATP.
7. Energia nmagazinat la C1 a acidului 1,3-DPG este transferat pe ADP cu
formarea ATP n reacia catalizat de fosfogliceratkinaz (PGK).
O

O
Fosfogliceratkinaz\ (PGK)

O~ P
H C OH
CH2 O

OH
H C OH

Mg2^
P

ADP

CH2 O
ATP

3-Fosfoglicerat
(3-PG)

1,3-DPG

8. Reacia fosfogliceratmutazei.
O

Fosfogliceratmutaz\ (PGM)

OH
H C OH
CH2 O
3-PG

OH
H C O P
CH2 OH
2-fosfoglicerat
(2-PG)

O
C

OH
; H C O~ P
CH2 O

2,3-fosfoglicerat
(2,3-DPG)

78

Se pare c n aceast reacie intermediar este 2,3-DPG, sintetizat printro deviaie a cii principale. Acest produs se acumuleaz n eritrocite i intervine n
reglarea afinitii hemoglobinei pentru oxigen.
9. Reacia enolazei

Fosfoenolpiruvatul are energie deoarece P esterific a grupare enolic.


Enolaza este inhibat de NaF, proprietate utilizat pentru recoltarea sngelui n
vederea dozrii glicemiei (se oprete degradarea glucozei).
10. Energia din PEP este nmagazinat n ATP prin reacia cu ADP catalizat de
piruvatkinaz (PK).
Reacia este ireversibil deoarece se petrece cu pierdere nsemnat de energie.

11. n condiii anaerobe, piruvatul este redus la lactat de ctre lactat-DH cu


hidrogenii de la NADH.
COOH
C

CH3
Piruvat

Lactat dehidrogenaza
(LDH)
NADH+H+

NAD+

COOH
H

OH

CH3
Lactat

Aceast ultim reacie asigur reoxidarea NADH i regenerarea NAD+ necesar


reaciei GA3PDH. Deci n condiii fiziologice n celulele cu metabolism anaerob, aceste
dou reacii sunt cuplate prin sistemul NAD+/NADH.

79

n muchi, procesul glicolitic duce la lactat (n general n condiii de hipoxie)


dar i n eritrocit unde, dei exist aport de O2, produsul final al procesului este tot acid
lactic deoarece eritrocitul nu conine enzimele necesare oxidrii piruvatului.
Eritrocitul este celula care i asigur energia necesar numai prin glicoliz.
Acidul lactic din muchi servete pentru resinteza glucozei prin gluconeogenez
dup ce el este transportat pe cale sanguin n ficat, esut capabil s resintetizeze
glucoza.
Dintre cele 11 reacii ale glicolizei, trei sunt ireversibile: reacia catalizat de (1)
HK, (3) FFK i (10) PK.
n celulele capabile de gluconeogenez, aceste reacii sunt catalizate de alte
enzime (piruvatcarboxilaza, PEP-carboxikinaza, F-1,6-DP-aza i G-6-P-aza).
Bilan energetic:
n reaciile (1) i (3) se consum 2 molecule de ATP, iar n reaciile (7) i (10)
din faza a doua a glicolizei se genereaz 4 molecule de ATP. Bilanul energetic al
procesului va fi: 4-2=2 moli ATP, dac se degradeaz glucoza i 41=3 moli ATP dac
se degradeaz glicogenul.
5.2.2. Degradarea aerob a glucozei la CO2 i H2O
n celulele cu metabolism aerob piruvatul format din glucoz, pe calea EmbdenMeyerhof, este oxidat la CO2 i H2O, cu eliberarea integral a energiei coninut n
molecula de glucoz.
Piruvatul este transferat n mitocondrie de un transportor special, implicnd un
mecanism simport, prin care este cotransportat un proton.
Pentru a intra n ciclul Krebs, piruvatul este decarboxilat oxidativ la acetil-CoA,
prin aciunea piruvat-DH (PDH), care asigur astfel legtura ntre calea EmbdenMeyerhof i ciclul Krebs.
COO
C

CH3

O
+ NAD+

+ CoASH

PDH

C ~S CoA

+ NADH+H+ + CO2

CH3

Complexul PDH este localizat n matricea mitocondrial i este format din trei
enzime i cinci coenzime: TPP (vit.B1), acid lipoic; CoA(acid pantotenic), FAD (vit.B2)
i NAD+ (vit.PP). Enzimele sunt: piruvat dehidrogenaza (E1),
transacetilaza (E2)
i dihidrolipoil dehidrogenaza (E3).

80

O
CH3

_
COO

CO2
1
OH

E1-TPP

E1-TPP

CH CH3

E2-L

SH O
S

CoASH

E2-L

CH3
3

SH
E2-L

S
NAD+

E3-FADH2

5
E3-FAD

SH

NADH+H+

CoA-S-C-CH3

Acetil-CoA se formeaz prin decarboxilarea acidului piruvic provenit din


glucoz, dar i prin degradarea acizilor grai sau unor aminoacizi.
ntr-o cale alternativ, piruvatul este carboxilat la acid oxalacetic, necesar pentru
iniierea ciclului Krebs, sub aciunea piruvat carboxilazei.
COOH

COOH
C

CH3
Piruvat

Piruvat carboxilaza
HCO3 ,
Biotina, Mg2+
ATP
ADP+Pa
_

CH2
COOH
Oxalacetat

Ciclul acizilor tricarboxilici


Cea mai mare parte a substratelor supuse oxidrii n procesul respiraiei celulare
provine din ciclul acizilor tricarboxilici (ciclul Krebs), etap metabolic final, comun,
n care moleculele simple provenite de la toate compartimentele metabolice (glucidic,
lipidic i protidic) sunt degradate la CO2 i ap.
Din punct de vedere energetic, respiraia celular este un proces nou care a
aprut n organismele superioare, odat cu dezvoltarea aerobiozei pe planet. Respiraia
celular a nlocuit glicoliza ntlnit la organismele inferioare, dar care persist ca
proces metabolic i la organismele superioare, alturi de respiraia celular.
n esen, ciclul Krebs reprezint combinarea unei molecule de acetil-CoA cu
acidul oxalacetic formnd un compus cu 6 atomi de C, acidul citric. Urmeaz o serie de

81

reacii prin care cei doi atomi de C din restul acetil sunt eliminai ca CO2, iar din
cele patru reacii de oxidoreducere, opt atomi de H vor parcurge lanul transportorilor de
H i vor genera o mare cantitate de energie (ATP).
Acidul oxalacetic este regenerat, de aceea este necesar o mic cantitate din acest
acid pentru a transforma o mare cantitate de acetil-CoA. Oxalacetatul poate fi considerat
a fi catalizator.
n acest ciclu sunt patru reacii de oxidoreducere n care se elibereaz cei opt
atomi de H care sunt preluai de lanul transportor de electroni i transportai la O 2,
generndu-se o cantitate de energie de 18-19 ori mai mare dect n glicoliz.
Reaciile ciclului Krebs
1. Condensarea acetil-CoA cu acidul oxalacetic

Citrat-sintaza este capabil s catalizeze i reacia de condensare a


monofluoracetil-CoA cu acidul oxalacetic, cu formarea monofluorcitratului, compus
care este un inhibitor puternic al ciclului Krebs deoarece este inhibitor pentru enzima
care catalizeaz urmtoarea reacie aconitaza.
Citrat-sintaza este o enzim limitant; este inhibat de ATP i NADH. Reacia
aconitazei sau aconitat hidraza catalizeaz trecerea reversibil a citratului n izocitrat
prin intermediul acidului cisaconitic.

Dei izocitratul este ntr-o proporie mic, el este rapid oxidat mai departe n
ciclul Krebs.

82

2. Reacia izocitrat dehidrogenazei (ICDH) catalizeaz dou procese


procesul de dehidrogenare a izocitratului i de decarboxilare a acestuia cu formarea unui
compus cu 5 atomi de carbon, acidul -cetoglutaric (-KG).

CH2 COOH
CH COOH
HO

CH COOH
Acid
izocitric

Izocitrat
dehidrogenaza (ICDH)
NAD+

CH2 COOH

CH2 COOH

CH COOH
O
C
COOH
NADH+H+
Acidul
oxal-succinic

CH2
C
CO2

COOH
-cetoglutaric

3. Reacia -cetoglutarat DH catalizeaz decarboxilarea oxidativ a acidului cetoglutaric cu transformarea lui ntr-un compus cu 4 atomi de carbon succinil-CoA.

Reacia necesit acelai echipament enzimatic ca i decarboxilarea acidului


piruvic: CoASH, NAD, FAD, acidul lipoic, TPP.
4. Reacia succinil-tiokinazei catalizeaz transferul energiei din legtura
tioesteric a succinil CoA pe un acceptor specific guanozin-difosfat (GDP).
Succinil CoA + Pa + GDP acid succinic + GTP + CoASH
GPT este un compus cu energie mare ca i ATP. Deoarece ATP este compusul
care nmagazineaz energia, are loc n continuare o reacie catalizat de o
nucleoziddifosfat-kinaz care transfer energia din GTP pe ATP.
GTP + ADP GDP + ATP
Acest tip de fosforilare n afara lanului respirator se numete fosforilare la
nivelul substratului.
5. Reacia succin-dehidrogenazei catalizeaz dehidrogenarea succinatului la
fumarat. Enzima este dependent de FAD.

83

COOH

COOH

Succindehidrogenaza (Succ.DH)

CH2

CH
CH

CH2
FAD

COOH

FADH2

COOH
Acid fumaric

Acid succinic

6. Reacia fumarazei catalizeaz adiionarea unei molecule de ap la acidul


fumaric cu formarea acidului malic.
COOH

COOH
CH

Fumaraza

CH OH

CH
COOH

CH2

COOH

H2O

Acid L-malic

Acid fumaric

7. Reacia malat dehidrogenazei catalizeaz de dehidrogenare a L-malatului n


oxalacetat nchiznd astfel ciclul.
Malat dehidrogenaza este NAD dependent i se gsete sub dou forme: MDH
citoplasmatic i MDH mitocondrial ceea ce face posibil reoxidarea NADH
extramitocondrial n lanul respirator.
COOH
CH2
CH OH
COOH
Acid malic

Malat dehidrogenaza
MDH
NAD^

COOH
CH2
C

NADH^H^

COOH
Acid oxalacetic

84

Bilanul energetic al

metabolismului oxidativ al glucozei

I.

Glucoz\
(Glicogen)

Piruvat

II.

Piruvat

CO2 ^ H2O

I.1. Glucoz\

F1,6DP
F1,6DP

(Glicogen)
2. 2 GA3P

2.Ac.: 1,3-DPG(NAD) 2x3=6 ATP


2NAD+

3.

2NADH+H+

2.Ac.: 1,3-DPG(NAD)
2PEP

4.

-2 ATP
(-1 ATP)

2 Ac. 3PG

+2ATP

2 Piruvat

+2 ATP

Total

+ 8 ATP
(+9 ATP)

II. Piruvat

CO2 ^ H2O

1.

2 CH3CO-SCoA

+6 ATP

2 Oxal-succininat

+6 ATP

2 Succinil-CoA

+6 ATP

2 Acid succinic

+2 ATP

Acid fumaric

+4 ATP

2 Piruvat
2NAD+

2.

2NADH+H+

2 Izocitrat
2NAD+

3.

2NADH+H+

2 -KG
2NAD+

4.

2NADH+H+

2 Succinil-CoA
2 GDP
2 ATP

5.

2 ADP

2 Acid succinic
2 FAD

6.

2 GTP

2 FADH2

Acid malic

2 Acid oxalacetic

2NAD+

2NADH+H+
Total

Total general:
Glucoz\
Glicogen

+6 ATP

CO2 + H2O (calea malat)


CO2 + H2O

30 ATP

38 ATP
39 ATP

85

5.2.3. Metabolismul glicogenului


Glicogenoliza
Principala rezerv de glucide din organism este glicogenul depozitat n ficat (1/3)
i muchi (2/3). Glicogenul este un polimer nalt, asemntor amilopectinei dar mai
ramificat, realizat prin condensarea a numeroase molecule de -glucoz, unite n
principal prin legturi -14 glicozidice i legturi -16 glicozidice, la punctele de
ramificaie.
Glicogenul din ficat va fi degradat pentru reechilibrarea glicemiei, n timp ce
glicogenul din muchi, pentru obinerea de energie.
Degradarea glicogenului este catalizat de enzime specifice:
fosforilaza rupe fosforolitic (cu fosfat anorganic) legturile -(14)
glicozidice din lanurile laterale ale moleculei de glicogen cu eliberarea G1P.
CH2 OH
O

CH2 OH
O
O

CH2 OH
O
O

CH2
Fosfarilaza a
O

CH2 OH
O
O P

O
n
G1P

Enzima acioneaz pn cnd rmne un lan format numai din patru resturi de
glucoz pn la ramificaie.
n acest punct intervine enzima de deramifiere, care va transfera mai nti un
trizaharid din captul rmas pe un alt lan, iar
restul rmas legat prin legturi -(16) glicozidice este ndeprtat hidrolitic,
sub form de glucoz liber. Procesul este reluat prin aciunea fosforilazei.
Unii autori susin existena unei enzime cu funciie dubl: att de transferaz ct i
de 1,6-glicozidaz. Aceast enzim se mai numete i enzim de deramifiere.

Prin aciunea celor dou enzime (fosforilaza i enzima de deramifiere) are loc
degradarea aproape total a glicogenului. O mic poriune din molecul (minim patru

86

resturi de glucoz) rmne nedegradat, fragment ce va servi drept primer n


resinteza glicogenului.
G1P sub aciunea fosfoglucomutazei (PGM) trece reversibil n G6P.
n ficat i rinichi (nu i n muchi) exist o fosfataz specific G6P-aza, care va
ndeprta acidul fosforic din G6P cu formarea glucozei libere. Acesta va strbate peretele
celular trecnd n snge pentru reechilibrarea glucozei sanguine. n muchi, G 6P intr
direct n glicoliz pentru eliberarea de energie.
Etapa limitant, reglatoare, a glicogenolizei este reacia fosforilazei, enzim
controlat hormonal (adrenalin i glucagon), la nivelul ficatului. Fosforilaza se gsete
sub dou forme: fosforilaza a - activ i fosforilaza b inactiv.
Activarea enzimei se realizeaz prin intermediul AMPc, al doilea mesager care
preia mesajul adus de hormon (primul mesager), c n snge a sczut glicemia.
Adrenalin\,
Glucagon

Adenilat ciclaz\
inactiv\

Adenilat ciclaza
activ\

ATP

Protein-kinaza
inactiv\

AMPc

Protein-kinaza
activ\
4 ATP

4 ADP

Fosforilaza b
inactiv\

4 Pa
Glicogen + Pa

Fosforilaza a
activ\
4 H2O
n G1P

n acest proces nu se consum energie, deoarece fosforilarea glucozei se face cu


fosfat anorganic.

87

Glicogenogeneza
Glicogenul se sintetizeaz din glucoz, dar i din fructoz, galactoz i manoz
dup convertirea lor la glucoz. n sinteza glicogenului, glucoza este mai nti fosforilat
la G6P i apoi izomerizat la G1P. G1P reacioneaz cu UTP i sub aciunea UDPpirofosforilazei se formeaz UDP-glucoz.

UDP-G va transfera restul glicozil, sub aciunea glicogen sintazei, pe un rest


preformat de glicogen (minim patru resturi). Sub aciunea acestei enzime se realizeaz o
legtur -(14) glicozidic la captul nereductor al primerului de glicogen. Pentru
realizarea legturilor -(16) glicozidice, la ramificaii, se detaeaz 6-7 resturi de
glucoz dintr-un lan i sunt ataate n alt regiune a lanului prin legtur 16. Enzima
se numete enzim de ramificare. Cele dou lanuri vor fi alungite prin aciunea
glicogen sintazei i aa mai departe nct molecula de glicogen care rezult are aspectul
unei crengi din ce n ce mai ramificat.

88

Sinteza
glicogenului
este consumatoare
de
energie.
Pentru
ncorporarea unei molecule de glucoz n glicogen se consum dou legturi
macroergice: una la formarea G6P (ATP) i alta la obinerea UDP-G (UTP)
2 ATP.
Sinteza glicogenului este reglat de aceiai hormoni care i regleaz i
degradarea (adrenalina i glucagonul). Prin intermediul protein kinazei intermediare,
glicogen sintaza este inactivat prin fosforilare.
Coordonarea celor dou procese implicate n metabolismul glicogenului este
asigurat n primul rnd prin faptul c ambele sunt sensibile la concentraia celular de
AMPc i n al doilea rnd, prin aceea c ambele ci sunt dependente de aceeai enzim,
protein kinaza.
Activitatea fosforilazei i inactivarea glicogen-sintazei se petrece n acelai timp,
ceea ce nseamn c procesele nu se petrec n acelai timp.

Insulina favorizeaz glicogenogeneza prin activarea glicogen sintazei, enzima limitant a


procesului.
Absena unor enzime din metabolismul glicogenului, determinat genetic, conduce la
maladii foarte grave, glicogenoze, caracterizate prin acumularea n esuturi de glicogen cu structur
normal sau anormal.
Aceste afeciuni se manifest n primele zile sau sptmni de via i n cele mai multe
cazuri subiecii nu ating vrsta adult.
5.3. Reglarea glicemiei
Glucoza din snge provine din:
a. alimente dup digestie, glucoza, galactoza sau fructoza sunt absorbite i pe calea venei
porte ajung la ficat;
b. gluconeogenez din aminoacizi, propionat, glicerol i lactat;
c. din glicogen prin glicogenoliz.
n condiii fiziologice, concentraia glucozei n snge este de 4,5-5,5 mmol/L, adic 0,8-1
g/L.
n meninerea nivelului normal al glicemiei intervin mecanisme homeostatice; ficatul i
esuturile extrahepatice avnd un rol important.
Nivelul glicemiei este un parametru care determin utilizarea glucozei de ctre esuturile
extrahepatice.

89

Celulele esuturilor extrahepatice nu sunt liber-permeabile pentru glucoz, fapt ce


constituie principalul factor care regleaz ptrunderea glucozei n aceste celule. n schimb
membrana celulei hepatice este permeabil pentru glucoz.
Intrarea glucozei n celulele extrahepatice este dependent de insulin care activeaz
hexokinaza, responsabil de fosforilarea glucozei la G6P.
Activitatea hexokinazei este inhibat de produsul de reacie, G6P, care, n acest fel, exercit
un control feed-back asupra utilizrii glucozei de ctre esuturile extrahepatice.

Membarna celulei
musculare, adipocit

Glc

Glicogen
Glc

Stimulare a
activit\]ii HK
^
Ins ulina
^
Induc]ia
de novo

HK
(enzim\
constitutiv\)

_ G1P
G 6P
_
Glicoliz\

GK (enzim\
inductibil\)

Glc

Glc

HK
(enzim\
constitutiv\)

Membrana celulei
hepatice

Intrarea glucozei n ficat nu este supus acestui control deoarece n ficat este
activ glucokinaza care lucreaz la concentraii mai mari de glucoz (KM = 2.10-2M)
dect hexokinaza (KM = 1.10-5M). Mai mult, enzima nu este inhibat de G6P i poate fi
indus de insulin.
La o concentraie normal a glucozei n snge (1 g), ficatul apare ca un
productor de glucoz, dar atunci cnd glicemia crete, producia de glucoz n ficat
scade i crete consumul de glucoz.
Cnd glicemia atinge o valoare ridicat, intervine rinichiul care i exercit rolul
reglator. Glucoza este continuu filtrat de ctre glomeruli i este reabsorbit la nivelul
tubilor renali. Procesul de reabsorbie este similar cu absorbia glucozei la intestin, adic
prin fosforilare. Procesul fiind enzimatic, consumator de ATP, capacitatea de reabsorbie
este limitat de concentraia enzimei din celulele tubulare la 350 mg/min. Cnd
concentraia glucozei n snge crete, filtratul glomerular conine mai mult glucoz

90

dect poate fi absorbit i ca urmare, excesul trece n urin. Eliminarea glucozei


prin urin, glicozuria, se produce atunci cnd glicemia atinge valoarea de 9,5-10
mmoli/L (1,7-1,8 g/L). Aceast valoare a glicemiei se numete prag renal de eliminare
pentru glucoz i este dependent att de capacitatea de reabsorbie ct i de viteza de
filtrare glomerular. Glicozuria apare n diabetul zaharat.
Sunt situaii cnd eliminarea glucozei prin urin se poate produce la valori mai
mici ale glicemiei. n acest caz este vorba fie de unele defecte nnscute n mecanismul
de reabsorbie, fie ca rezultat al unor afeciuni la nivelul tubilor renali glicozuria
renal (diabet renal).
O reducere a filtratului glomerular, n insuficiena cardiac sau n deshidratare,
permite reabsorbia unei cantiti mai mari de glucoz. n aceste situaii, dei glicemia
este mare, glicozuria este mic.
Reglarea hormonal a glicemiei
Ptrunderea glucozei n celule i eliberarea ei din glicogenul hepatic sunt supuse
aciunii hormonilor care pot avea aciune hipoglicemiant (insulina) sau
hiperglicemiant (adrenalina, glucagonul, hormonul corticotrop (ACTH), hormonul de
cretere).
Insulina este secretat de celulele din insulele Langerhans din pancreas,
stimulat de valoarea glicemiei (hiperglicemie), de unii aminoacizi (leucina, arginina),
ageni -adrenergici (adrenalina), factori intestinali (gastrina, pancreozimina, secretina),
hormoni hiperglicemiani (ACTH, glucagon, hormoni steroizi, hormon de cretere).
Aceti factori determin o cretere a secreiei de insulin att prin hiperglicemia pe care
o produc ct i prin aciunea direct asupra celulelor din pancreas.
- Prin creterea secreiei de insulin sau prin administrarea ei se produce o
scdere a glicemiei, creterea glicogenului hepatic, scderea coeficientului respirator
(numr moli CO2 format/ numr moli O2 consumat), scderea fosforului anorganic din
snge, scderea K seric, scderea concentraiei aminoacizilor liberi din snge, creterea
sintezei de NADPH.
- La nivelul muchiului i esutului adipos, insulina favorizeaz ptrunderea
glucozei prin membrana celular, stimulnd toate cile de utilizare a glucozei (sinteza
glicogenului, untul HMP, deci creterea produciei de NADPH, glicoliza, creterea
sintezei de acizi grai).
- Ptrunderea crescut a glucozei n esutul adipos, favorizat de insulin, duce
i la o producie accelerat de - glicerol-P ceea ce faciliteaz esterificarea acizilor grai
i depunerea de trigliceride n celulele adipoase; ca urmare, nivelul acizilor grai liberi
(AGL) din snge va scdea.
Efectul este foarte important deoarece acumularea de AGL favorizeaz sinteza
corpilor cetonici, stimularea gluconeogenezei i blocarea glicolizei.
- Insulina produce scderea mobilizrii AGL i prin scderea concentraiei
AMPc n celulele adipoase, compus care stimuleaz lipoliza.
Scindarea legturii acid gras glicerol din poziia din trigliceride se realizeaz
prin intervenia triglicerid-lipazei a crei activitate este controlat de hormoni. AMPc,

91

prin
intermediul
proteinkinazei, convertete lipaza inactiv n forma sa
activ. La rndul ei, proteinkinaza activ scindeaz primul rest de acid gras i posibil i
pe al doilea.
Glucoz\

Glucoz\

G6P-aza

GK

G6P

G6P

+
F6P
FFK
F1,6DP

F6P
+

_
INSULINA

F1,6DP-aza
_

F1,6DP

_
PEP
PK
Piruvat

PEP
PEP-carboxi
kinaza
Oxalacetat
Piruvat
carboxilaza
Piruvat

Insulina poate interveni la nivelul esutului adipos i prin aciunea direct asupra
unor enzime, printre care activarea hexokinazei care catalizeaz fosforilarea glucozei.
- n ficat, i exercit aciunea prin inducerea sintezei de enzime cu rol n
degradarea glucidelor (GK, FFK, PK) i represia simultan a enzimelor cu rol n
gluconeogenez (piruvat-carboxilaza, PEP-carboxikinaza, F1,6DP-aza i G6P-aza).
Hormonul de cretere secretat de hipofiza anterioar are aciune antagonist
insulinei. Secreia acestui hormon este stimulat de hipoglicemie. Mecanismul su de
aciune const n scderea utilizrii periferice a glucozei i stimularea gluconeogenezei.
Hormonii glucocorticoizi sunt secretai n urma stimulrii cu ACTH, a crui
secreie este declanat de hipoglicemie.
Adrenalina secretat de medulosuprarenal acioneaz prin activarea
glicogenolizei n ficat i muchi.
Glucagonul, produs de celulele din pancreas, are aciune asemntoare cu a
adrenalinei, la nivelul ficatului.
Adrenalina i glucagonul acioneaz prin intermediul sistemului adenilat-ciclaz
AMPc asupra fosforilazei.

92

5.4. Tulburrile metabolismului glucidic


Orice dezechilibru n mecanismele de reglare a metabolismului glucidic poate
avea drept consecin instalarea unei hipo- sau hiperglicemii.
Scderea glucozei sanguine sub 0,70 g/L indic o hipoglicemie care poate fi
cauzat de:
a) foame, inaniie;
b) perturbarea secreiei hormonilor implicai n metabolismul glucozei;
- secreie crescut de insulin (hiperinsulinemism) care duce la un consum
exagerat de glucoz la nivel celular;
- secreie sczut de adrenalin i glucagon, n hipopituitarism (hipofiz);
- defecte enzimatice G6P-az, fosforilaza hepatic, piruvat-carboxilaz, PEPcarboxikinaz, F1,6DP-az;
- boli hepatice severe;
- administrarea unor medicamente propranolol, salicilai;
- consum de alcool.
Creterea glicemiei peste 1,10 g/L este un indicator al unei stri de
hiperglicemie.
Exist o multitudine de sindroame hiperglicemice, dintre care importan
deosebit prezint diabetul zaharat, definit ca o maladie cauzat de lipsa total sau
relativ de insulin i care este caracterizat prin hiperglicemie, frecvent nsoit de
glicozurie.
Diabetul zaharat, considerat prin tradiie o maladie a metabolismului glucidic,
implic de fapt i tulburri ale metabolismului lipidic i proteic.
Exist dou tipuri majore de diabet:
I.
Diabetul insulino-dependent (tip I), denumit i diabet juvenil. Este cauzat
de incapacitatea organismului de a produce insulin din cauza lezrii celulelor din
pancreas. Se manifest de timpuriu, nainte de 40 de ani, cu simptome mai severe;
II. Diabetul insulino-independent (tip II), diabetul adultului cauzat de
deficitul sau defecte ale receptorilor pentru insulin. Se manifest dup vrsta de 40 de
ani, pacienii fiind de obicei hiperponderali i avnd n familie ascendeni diabetici.
Modificrile metabolice n diabetul insulino-dependent
Deoarece producia de insulin este perturbat, nivelul insulinei este foarte
sczut comparativ cu al glucagonului, indiferent de nivelul glucozei din snge.
Modificrile sunt foarte asemntoare cu cele observate n inaniie, n ciuda abundenei
compuilor nutritivi.Acestea sunt:
1. Captarea glucozei de ctre esuturi este perturbat dei ficatul elibereaz
glucoz;
2. Glicoliza este diminuat prin scderea activitii enzimelor cheie hexo-kinaz,
fosfofructo-kinaz i piruvat-kinaz dependente de insulin;
3. Depozitele de glicogen sunt sczute din cauza inactivrii glicogen sintazei n
deficit de insulin. n mod fiziologic, raportul glucagon/insulin este mai important
dect nivelele fiecrui hormon n parte, deoarece metabolismul glicogenului este
puternic influenat de hormonul predominant. Cnd predomin insulina (post prandial)

93

este favorizat depunerea glicogenului, iar cnd glucagonul este predominant (cnd
glucoza scade n snge) este favorizat mobilizarea glicogenului din depozite.
4. Gluconeogeneza din aminoacizi este stimulat prin activitatea crescut a
enzimelor specifice (piruvat-carboxilaza, PEP-carboxi-kinaza, F1,6DP-aza, F6P-aza
induse de glucagon) rezultnd eliminare crescut de uree;
5. Hidroliza trigliceridelor este stimulat (diabet slab);
6. Degradarea acizilor grai prin -oxidare este activat;
7. Sinteza acizilor grai i a trigliceridelor din glucoz pe calea acetil CoA este
reprimat (la animalele sntoase 1/3 din glucidele ingerate sunt transformate n acizi
grai i trigliceride i depozitate n esutul adipos);
8. La nivel hepatic din excesul de acetil CoA se sintetizeaz n exces corpi
cetonici (cetonemie cetonurie acidoz prin scderea capacitii de tamponare);
9. Proteinele organismului sunt degradate i aminoacizii sunt utilizai drept
combustibil;
10. Excesul de glucoz glicozileaz hemoglobina i posibil i alte proteine
eritrocitare.
Manifestrile clinice i paraclinice n diabetul netratat includ:
1. hiperglicemie;
2. glicozurie;
3. creterea acizilor grai liberi;
4. deshidratare i dereglarea balanei electrolitice (poliurie i polidipsie);
5. acidoz prin creterea nivelelor corpilor cetonici. Acetoacetatul, hidroxibutiratul sunt acizi ce conduc la modificarea echilibrului acido-bazic, cu scderea
pH-ului sanguin. Aceasta conduce la com i deces, dac nu este corectat (vezi
metabolismul corpilor cetonici, p. 124).
6. neuropatii, datorit acumulrii de sorbitol n celulele Schwann ce duce la
lezarea celulelor sistemului nervos;
7. retinopatii i orbire (cataract) acumulare de sorbitol n cristalin;
8. defecte renale.
Pentru diagnostic se practic proba de toleran la glucoz sau proba
hiperglicemiei provocate:
- la subiectul sntos revenirea la valoarea normal a glucozei n snge se
realizeaz n aproximativ 2 ore i nu este nsoit de glicozurie;
- la subiectul diabetic, revenirea la valoare iniial se realizeaz n 5-7 ore i este
nsoit de glicozurie.

94

6. METABOLISMUL LIPIDIC
6.1. Digestia i absorbia lipidelor
Lipidele reprezint un grup eterogen de molecule organice insolubile n
ap, care pot fi separate prin extracie cu solveni organici. Lipidele sunt alctuite
din urmtoarele clase de compui: acizi grai liberi (neesterificai);
triacilgliceroli (trigliceride); fosfolipide; sfingolipide; glicolipide; steroizi.
Funciile pe care lipidele le ndeplinesc n organism sunt urmtoarele:
- reprezint sursa major de energie;
- procur componentele necesare formarii barierelor hidrofobe ce separ
coninutul apos al celulelor i structurilor celulare;
-prezint activitate reglatorie sau coenzimatic (hormoni steroizi,
vitamine).
Un adult consuma ntre 60-150 g de lipide zilnic din care 90% sunt
trigliceride, restul fiind colesterol liber, colesterol esterificat, fosfolipide i acizi
grai liberi.
Digestia lipidelor este un proces care consta n hidroliza (n prezena
unor enzime specifice fiecrei clase de lipide) i emulsionarea lor adic
meninerea n stare solubilizat a unor componente hidrofobe ntr -un mediu apos
(n prezena bilei i a srurilor biliare).
Hidroliza este realizat de enzime specifice. Astfel, lipazele acioneaz
asupra trigliceridelor, fosfolipazele (PL) asupra fosfatidelor, colesterolesteraza
asupra esterilor de colesterol. De exemplu:

Hidroliza lecitinei (fosfolipid) sub aciunea fosfolipazelor specifice


b. Emulsionarea nseamn solubilizarea componentelor hidrofobe. Lipidele

sunt prezente n mediul apos sub forma unor picturi i hidroliza enzimatic se petrece la
interfaa picturii lipid-ap. Agenii emulsionani interacioneaz deopotriv cu aceste

95

picturi i cu apa, aciune ce are ca urmare ruperea picturilor n altele mai mici,
stabilizarea acestora din urma i mpiedicarea reunirii lor. Ca urmare are loc o mrire a
suprafeei picturii astfel ca enzimele s poat aciona ct mai eficient. Emulsionarea
este realizat prin dou mecanisme: folosirea proprietilor srurilor biliare care au rol
detergent i amestecarea mecanic dat de peristaltism.
Digestia lipidelor ncepe n stomac i este catalizat de o lipaz (care se crede c
este de origine lingual) i de o lipaz gastric, care hidrolizeaz n special trigliceridele
ce conin acizi grai cu caten scurt i medie (prezente n special n lapte). Viteza cu
care are loc hidroliza este excesiv de mic deoarece lipidele sunt neemulsionate i
enzimele pot hidroliza doar trigliceridele situate la interfaa. De aceea se poate spune c
lipidele trec n intestin aproape intacte.
Digestia masiv a lipidelor are loc n intestin unde trigliceridele, esterii de
colesterol i fosfolipidele sunt degradate la produi primari.
Trigliceridele avnd molecule mari nu pot trece prin peretele celulelor mucoasei
intestinale. De aceea asupra lor acioneaz lipaza pancreatic care hidrolizeaz
preferenial acizii grai din poziia 1 i 3 rezultnd n principal 2-monoacilglicerol i
acizi grai liberi.
Hidroliza esterilor de colesterol este realizat de colesterolaza pancreatic cnd
se produc colesterol liber i acizi grai liberi.
Hidroliza fosfolipidelor este realizat de fosfolipaza A2 (prezent n concentraie
mare n sucul pancreatic), enzim activat n intestin de tripsin. Fosfolipaza A 2
ndeprteaz acidul gras din poziia 2 rezultnd lysofosfolipid i bineneles acidul gras.
Acidul gras rmas n poziia 1 poate fi ndeprtat de ctre lysofosfolipase obinndu-se
n final glicerilfosforilcolina i acid gras liber.
Absorbia lipidelor
Acizii grai liberi, colesterolul liber i 2-monoacilglicerolul sunt produii primari
de degradare in jejun. Acetia mpreun cu srurile biliare formeaz micelii de lipide
amfipatice care sunt orientate cu poriunea hidrofob n interior i cu poriunea hidrofil
spre exterior, fiind astfel solubile n mediul apos din lumenul intestinal. Miceliile se
apropie de marginea n perie a celulelor mucoasei intestinale (care constituie locul
primar de absorbie a lipidelor) i sunt absorbite.
n enterocite aceti produi sunt supui unui proces invers, de reconstituire a
produilor iniiali i anume trigliceride, colesterol esterificat, fosfatide, care mpreun cu
cantiti mici de proteine formeaz particule lipoproteice denumite chilomicroni.
Chilomicronii sunt secretai de enterocite i prin sistemul limfatic ajung n circulaia
sanguin; reprezint forma de distribuire a lipidelor exogene.
Resinteza trigliceridelor, a esterilor colesterolului i a fosfolipidelor se realizeaz
n dou trepte, activarea acizilor grai (despre care se va vorbi la metabolismul acizilor
grai) realizat de tiokinaze urmat de esterificarea realizat de aciltransferaze specifice.

96

Trebuie notat c acizii grai cu lanuri mici i medii parcurg un traseu diferit de
cel al celorlalte lipide. Astfel ei sunt absorbii direct de mucoasa intestinal (nu necesit
formarea miceliilor pentru absorbie), i sunt distribuii prin sistemul portal hepatic (nu
prin cel limfatic). Acest considerent trebuie avut n vedere n dieta persoanelor care
prezint malabsorbie pentru alte tipuri de lipide.
6.2. Metabolismul acizilor grai
Acizii grai exist n organism n form liber (neesterificat) sau sub form de
esteri n molecule complexe cum sunt trigliceridele. Acizii grai au un numr par de
atomi de carbon, saturai sau nesaturai, cu 4-24 atomi de carbon.
Acizii grai liberi pot fi oxidai n multe esuturi (ficat, muchi) pentru a furniza
energie.
Trigliceridele reprezint forma de stocare a rezervelor energetice ale
organismului i de aceea funcia lor principal este aceea energogen. Aceste rezerve se
formeaz pe baza excesului de glucide care este convertit n acizi grai, ce sunt
ncorporai n trigliceride i depozitai n esutul adipos.
6.2.1. Biosinteza acizilor grai (acidul palmitic).
Acizii grai din organism provin din urmtoarele procese:

97

sinteza de novo a acidului palmitic;


elongarea acidului palmitic nou sintetizat sau a unor acizi grai endogeni;
biosinteza acizilor grai nesaturai.
Acizii grai ncorporai n trigliceride sunt sintetizai din acetil-CoA format din
glucoz.
Biosinteza acizilor grai este un proces de ncorporare a unitii acetil din
malonil-CoA ntr-un lan crescnd de acid gras, utiliznd ATP i NADPH.
Pentru a putea ajunge n citosol acetil-CoA trebuie s traverseze membrana
mitocondrial. Poriunea coenzima A din acetil-CoA nu poate traversa membrana
mitocondrial ci doar poriunea acetil este transferat (sub forma de citrat) n citosol.
Aici din citrat este refcut acetil-CoA care va pune la dispoziie gruparea acetil pentru
sinteza acizilor grai superiori.

Acid gras sintaza: a, b subuniti structurale;


1, 2 subuniti funcionale
Sinteza acestora are loc n prezena unui complex multienzimatic denumit acidgras sintetaz care este un dimer. Fiecare monomer prezint 7 proteine care catalizeaz
fiecare cte o etap (reacie) n procesul de sintez i un domeniu denumit ACP (acyl
carrier protein) care are rol n transportul unitii acil. Poriunea ACP a monomerului
cuprinde fosfopanteteina (una din formele coenzimatice ale acidului pantotenic) de a
crei grupare SH se fixeaz ca tioesteri acili intermediari. La celalalt capt monomerul
conine o grupare SH furnizat de un rest cisteinil din -cetoacilsintetaza.

98

Complexul enzimatic este alctuit din cei doi monomeri structurali (a i b)


aezai fa n fa aa fel nct gruparea ACP-SH a unui monomer s conlucreze cu
gruparea Cis-SH a celuilalt, formnd dou subuniti funcionale (1 i 2), ntruct se
sintetizeaz concomitent dou molecule de acid palmitic.
Acizii cu caten mai lung de 16 atomi de carbon se sintetizeaz din acid
palmitic printr-un proces de elongare (ataarea fragmentelor de doi atomi de carbon,
provenii de la malonil-CoA).
Acizii grai nesaturai sunt sintetizai prin introducerea n molecula acidului gras
saturat corespunztor a dublelor legturi prin intervenia unor enzime specifice, numite
desaturaze.
n organism poate fi sintetizat pe aceast cale numai acidul oleic (cu o singur
dubl legtur), din acidul stearic (18 atomi de C).
Organismul are nevoie i de ali acizi grai nesaturai, cu dou, trei i patru
legturi. Acetia nu pot fi sintetizai din acidul gras saturat corespunztor deoarece
lipsesc desaturazele respective. Din acest motiv, grupul acizilor grai nesaturai cu dou,
trei i patru duble legturi, cunoscui drept acizi grai eseniali; trebuie adui prin aport
exogen.

Totui, dac n organism se introduce acidul linoleic se poate sintetiza acidul


arahidonic prin combinarea procesului de elongare cu procesul de desaturare.
6.2.2. Degradarea acizilor grai
acizii grai eliberai prin hidroliza trigliceridelor n esutul adipos trec n plasm
unde se fixeaz pe albumine, sunt transportate la esuturile capabile s-i oxideze, ficat,
rinichi, inim, muchi, plmn, creier, esut adipos (majoritatea esuturilor au capacitatea
de a oxida lanul lung de acid gras).
Catabolismul acizilor grai se desfoar n trei etape:
Activarea acizilor grai are loc n microzomi sau pe membrana extern a
mitocondriei i este catalizat de enzime specifice tiokinaze.

99

Transferul acil-CoA n mitocondrie se realizeaz prin transferul gruprii acil

pe carnitin n ficat i muchi. Acil-CoA cu lan lung de atomi de carbon reacioneaz cu


carnitina, avnd loc transferul gruprii acil pe gruparea OH a carnitinei, sub activarea
carnitil-acil-transferazei I prezent n membrana extern a mitocondriei.

Complexul acil-carnitin este transferat n mitocondrie prin intervenia unei


translocaze. n mitocondrie, restul acil este trecut pe o CoA din mitocondrie cu
eliminarea carnitinei care, transferat n exterior de aceiai translocaz, va participa la
transferul altui rest acil.

-oxidarea

n mitocondrie, acil-CoA particip la procesul de -oxidare, un ansamblu de


patru reacii prin care se ndeprteaz fragmente de doi atomi de carbon sub form de
acetil-CoA.
1. Dehidrogenarea const n ndeprtarea a doi atomi de hidrogen de la C i
C, sub aciunea acil-CoA-DH, rezultnd o acil-CoA nesaturat; cei doi hidrogeni sunt
preluai de FAD i cedai lanului respirator cu generarea final a 2 ATP.
O
R CH2

CH2

C ~S

CoA

Acil-CoA
Acil-CoA
dehidrogenaza

FAD

O
2

R C

FADH2

C ~S

CoA

H
2-trans-enoil-CoA

2 ATP

100

2. Hidratarea. n reacia a doua are loc adiia unei molecule de ap la dubla


legtur, adiie mediat de enoil-CoAhidrataza (crotonaza), cu formarea -hidroxi-acilCoA.

3. Dehidrogenarea la C sub aciunea -hidroxi-acil-CoA-DH pentru a forma ceto-acil-CoA. n acest caz acceptorul de H este NAD+.
NAD+

-hidroxiacil-CoA
dehidrogenaza

NADH+H+

3 ATP

O
R CO

CH2

C ~S

CoA

-cetoacil-CoA

4. Scindarea tiolitic este realizat de -cetotiolaz cu participarea altei


molecule de CoA-SH. Ca rezultat, din lanul lung se desprinde un fragment de doi
atomi de carbon sub form de acetil-CoA, iar restul de acid gras rmas este deja
activat (acil-CoA cu doi atomi de carbon mai puin) care poate participa la un nou
proces de -oxidare.
Acil-CoA:
aciltransferaza
(tiolaza)

CoA
CH3

O
C ~S
Acil-CoA

O
C ~S

CoA

CoA

(n-2) atomi de carbon

101

Procesul continu pn tot lanul hidrocarbonat al acidului gras este


fragmentat n molecule de acetil-CoA. Acetil-CoA format este degradat la CO 2
i H2O n ciclul Krebs.
Prin degradarea acizilor grai se formeaz o mare cantitate de energie.
Considernd acidul palmitic, cu 16 atomi de carbon, pentru degradarea sunt
necesare apte -oxidri, cu eliberarea a 7 x 5 = 35 moli ATP.
Din cei 16 atomi de carbon ai acidului palmitic rezult 8 moli de acetil CoA, care degradate n ciclul Krebs, vor genera 8 x 12 = 96 moli de ATP.
total 35 + 96 = 131 moli de ATP.
din care se scade un mol ATP consumat la activare (sau dou legturi macroergice de
ATP) ceea ce nseamn c prin degradarea acidului palmitic la CO 2 i H2O se
formeaz 130 moli ATP sau 129 legturi macroergice=656 KJ.

6.3. Metabolismul trigliceridelor


Trigliceridele sunt esteri ai acizilor grai cu glicerina. Ele reprezint forma
de depozitare a excesului energetic al organismului. Energia potenial a
trigliceridelor rezid n catenele bogate n hidrogen ale resturilor acil (R-CO-).
I. Sinteza trigliceridelor
Pentru sinteza trigliceridelor organismul utilizeaz glicerolul i acizii grai
superiori, care sunt mai nti activai la acil-CoA.
Biosintaza trigliceridelor (TG) are loc prin dou mecanisme:
Calea monogliceridelor, activ n celula intestinal:
Funcioneaz n enterocit i reprezint o cale de resintez a trigliceridelor
din produii de digestie, conform reaciei:

Aceste trigliceride mpreun cu colesterolul liber i esterificat, fosfolipide


i proteine sunt ncorporate n particule lipoproteice denumite chilomicroni care
trec n circulaie prin sistemul limfatic.
Calea glicerol fosfatului, activa in ficat si alte tesuturi, capabile de
sinteza:

102

Cu toate c majoritatea esuturilor sintetizeaz trigliceride, cele sintetizate


n ficat i n esutul adipos au mare importan n balana energetic a
organismului.
Acizii grai necesari sintezei trigliceridelor provin fie din sinteza de novo
din acetil-CoA (rezultat n urma oxidrii glucozei), fie din acizii grai liberi
circulani.
Trebuie notat c ficatul nu este un organ de depozitare a trigliceridelor aa
cum este esutul adipos. Trigliceridele sintetizate n ficat sunt exportate la
esuturile extrahepatice sub forma de lipoproteine de densitate foarte mic
(VLDL). Ajunse acolo trigliceride cuprinse n VLDL sunt hidrolizate (sub aciunea
lipoprotein lipazei) i acizii grai sunt reinui. Acetia din urma sunt rencorporai
n trigliceride i depozitai (n special n esutul adipos).
esutul adipos reprezint locul de stocare a excesului caloric sub form de
lipide.
Glicerol-fosfatul necesar sintezei provine din dihidroxiaceton-fosfatul
provenit din glucoz i din glicerolul eliberat prin hidroliza trigliceridelor. Acest
fapt evideniaz dependena sintezei trigliceridelor de nivelele glicemiei i indirect
al insulinemiei.
II. Degradarea trigliceridelor
Degradarea tisular a trigliceridelor are loc prin hidroliz cnd se pun n
libertate acizi grai i glicerol sub aciunea unei lipaze hormon-sensibile, conform
schemei:

103

Glicerolul rezultat difuzeaz n plasm i constituie un indicator al vitezei de


hidroliz a trigliceridelor.
Acizii grai rezultai sunt utilizai n principal ca surs de energie.
Trebuie notat faptul c n organism exist dou mari fluxuri plasmatice de
trigliceride:
- circulaia trigliceridelor exogene de la intestin n restul organismu lui sub
form de chilomicroni;
- circulaia trigliceridelor endogene de la ficat spre restul organismului sub
form de VLDL.

6.4. Metabolismul glicerolului. Sinteza fosfolipidelor


Glicerolul provine din hidroliza trigliceridelor fiind un produs al metabolismului
esutului adipos. El poate fi utilizat doar de esuturile ce posed glicerol-kinaza care l
poate fosforila i reintroduce n fluxul metabolic. De aceea el difuzeaz din esutul
adipos care nu conine aceast enzim i pe cale plasmatic ajunge n ficat i rinichi
(esuturi ce posed glicerol-kinaz) unde este fosforilat la
glicerol-3-fosfat.
Glicerolul este un punct de plecare spre sinteza de trigliceride i/sau
fosfogliceride.

104
CH2

OH

Glicerol
kinaza

CH OH
CH2 OH
Glicerol

Difosfatidil glicerol
(cardiolipina)

ATP

CH2

CH2

CH OH

Acil-CoA

ADP

O CO

O CO

R1

CH O CO

R2

CH2 O CO

Fosfatidil-inozitol

CH2 O

CH2 O P
Glicerol-3-fosfat

PPa

R1

CH O CO
CH2

Glicerol-3-fosfat
aciltransferaza

OH

CH O CO

Citidina

R1

CMP

R2

+
CH2 O P O CH2 CH N(CH
2
3)3
Lecitina (Fosfatidil-colina)
CH2

O CO

O CO

CH2 O P
1-Acilglicerol-3-fosfat
Acil-CoA
1 Acil glicerol-3-fosfat
aciltransferaza
CoA
CH2

O CO

R2

CH2 O CO

R3

R1
R2

CH2 O P
1,2 Diacil glicerol fosfat
(fosfatidat)
H2O
Fosfatidat
CDP-colina
fosfohidrolaza
Pi
CH2 O CO R1
CH O CO

R1

CH O CO

R1

CH OH

CH O CO

CDP-Diacilglicerol

O CO

CTP

R2

inozitol
CH2

CoA

CH2

R2

CH2 OH
Aciltransferaza

1,2 Diacilglicerol

R3-COOH

Trigliceride

Glicerofosfolipidele reprezint o clasa de lipide foarte importante ele fiind


componente principale ale membranelor biologice. Cea mai important caracteristic a
lor este caracterul amfipatic. Aceasta nseamn c fosfolipidele prezint o poriune (un
cap) hidrofil, care conine gruparea fosfat cu diferii substitueni ca serina, etanolamina,
colina i o poriune (o coad) hidrofob alctuit din lanurile a doi acizi grai. Aceast
configuraie este ideal deoarece partea hidrofob le permite asocierea cu ali
constitueni ai membranei celulare cum ar fi proteine, colesterol, glicolipide, n timp ce
parte hidrofil permite asocierea cu moleculele de ap asigurndu-se solubilizarea lor.
6.5. Corpii cetonici
Prin corpi cetonici se neleg urmtorii trei compui aceto-acetatul, 3hidroxibutiratul i acetona:

Sinteza acetoacetatului (cetogeneza) are loc n mitocondriile hepatice din acetilCoA rezultat din -oxidarea acizilor grai.
Corpii cetonici reprezint o important surs de energie pentru esuturile
extrahepatice deoarece:

105

- sunt solubili deci nu necesit un sistem de transport (ncorporare n


lipoproteine, cuplare cu albumina);
- sunt sintetizai n ficat atunci cnd cantitatea de acetil-CoA prezent depete
posibilitile ficatului de a o metaboliza, pe alte ci;
- pot fi utilizai ca surs de energie n esuturi extrahepatice (muchi scheletic i
cardiac, cortex renal, creier).
Dei ficatul produce n mod constant corpi cetonici, cantiti semnificative apar
n special n perioadele de inaniie ndelungat. Ficatul ns nu poate reconverti acetoacetatul la acetoacetil-CoA deci nu poate folosi acest compus drept surs de energie.
esuturile extrahepatice pot ns obine energie prin conversia corpilor cetonici la acetilCoA via acetoacetil-CoA.
Cnd rata formrii corpilor cetonici depete rata metabolizrii lor, nivelele
acestora cresc n snge (cetonemia) i n urin (cetonuria). Aceti doi parametri sunt de
obicei ntlnii n inaniie i n diabetul zaharat (mellitus). Acidul aceto-acetic i hidroxibutiratul sunt eliminai ca sruri, ei epuiznd rezerva alcalin din snge i n
consecin, duc la scderea pH-ului. Pe de alta parte fiind substane osmotice antreneaz
pierderi mari de ap (poliurie) i deshidratarea organismului. Cuplarea celor dou efecte
duce la instalarea acidozei (cetoacidoza).
6.6. Metabolismul colesterolului
Colesterolul este sintetizat de aproape toate esuturile umane: ficat, cortexul
adrenalei, ovare, testicule, placent.
El prezint o serie de funcii eseniale n organism: este component al
membranelor celulare, precursor al acizilor biliari, al hormonilor steroizi, i al vitaminei
D.
Colesterolul se prezint sub dou forme: colesterolul liber i colesterolul
esterificat.
Biosinteza colesterolului
Toi atomii constitueni ai colesterolului provin din acetil-CoA. Sinteza sa are loc
n citoplasm i cuprinde mai multe etape:
a) formarea hidroxi, metil - glutaril CoA (HMG-CoA) din acetil-CoA;
b) transformarea (HMG-CoA) n izopren biologic activ
c) condensarea a 6 uniti izoprenice cu formarea squalen-ului (hidrocarbur cu
30 atomi de carbon)
d) ciclizarea squalen-ului cu formarea colesterolului.
a. HMG-CoA, intermediar n sinteza steroizilor, se sintetizeaz la fel ca

precursorul sintezei corpilor cetonici dar n citoplasm. Acetil CoA necesar sintezei
provine din metabolizarea glucozei, a acizilor grai (n cea mai mare parte) i a unor
aminoacizi.

106

b. Transformarea HMG-CoA n acid mevalonic este etapa reglatorie a

procesului i reprezint prima etap specific a colesterologenezei i este un proces


dependent de NADPH.

c. Prin condensarea cap-coad a dou uniti izoprenice se obine geranil-PP un


compus C10, la care se adaug o nou molecul de izopren activ cu formare de farnesilpirofosfat (C15). Apoi dou molecule de farnesil prin condensare coad-coad formeaz
squalen-ul (C30).

107

d. Sub aciunea unui sistem enzimatic complex squalenul este transformat n

lanosterol. Acesta, prin pierderea a 3 grupri CH3 (legturile punctate) prin oxidare la
COOH i decarboxilare, hidrogenarea unei duble legturi si migrarea alteia, conduce
la colesterol:

Reglarea sintezei de colesterol are loc la nivelul HMG-CoA-reductazei, etapa


limitant a procesului.
Factorii reglatori sunt:
a. colesterolul alimetar. Cnd dieta este srac n colesterol, este activat
sinteza n ficat, intestin i suprarenale. O diet bogat n colesterol diminueaz sinteza
endogen;

108

b. valoarea caloric a dietei. O diet bogat n glucide sau lipide crete


sinteza hepatic de colesterol;
c. hormonii
- insulina stimuleaz sinteza de colesterol prin stimularea HMG-CoA-reductazei;
- glucagonul reduce sinteza de colesterol prin scderea activitii HMG-CoAreductazei.
n plasma uman colesterolul se gsete ntr-o concentraie de
120220 mg/dL; crete cu vrsta i prezint variaii de la individ la individ. La adulii tineri
sntoi colesterolul plasmatic este de 175 mg/dL.
Degradarea colesterolului. Biosinteza acizilor biliari
Colesterolul din organism este utilizat astfel:
1. n cea mai mare parte este transformat la nivelul ficatului n acizi biliari;
2. n piele, este trecut n vitamin D3;
3. n glandele endocrine, la nivelul corpului galben din placent i capsulele
suprarenale, se sintetizeaz hormoni steroizi;
4. este utilizat pentru sinteza de membrane.
Colesterol nu poate fi degradat la CO2 i H2O i de aceea inelul sterolic este
eliminat din organism ca atare sau mai corect foarte puin modificat. Calea principal de
excreie este bila care cuprinde att colesterolul ct i acizii biliari, catabolii ai acestuia.
inndu-se cont de cele spuse mai sus rezult c trecerea colesterolului prin ficat este
obligatorie n vederea eliminrii.
Bila contine colesterol n majoritate neesterificat care este meninut n soluie
apoas de ctre substane amfipatice cum sunt lecitina (fosfatidilcolina) i srurile
biliare.
Solubilitatea colesterolului depinde de un raport bine determinat ntre colesterollecitina-sruri biliare. Modificarea acestui raport duce la cristalizarea colesterolului n
jurul unor nuclee de proteine i bilirubin formnd calculii biliari (pietre) care pot bloca
total sau parial fluxul bilei.
Calea urmat de colesterol pentru eliminare este urmtoarea: colesterolul biliar
mpreun cu cel rezultat din descuamarea intestinal i cel exogen se amestec n
intestin. Din acest amestec colesterolul biliar fiind n form micelar este absorbit
preferenial fa de cel exogen. Colesterolul neabsorbit se elimin prin fecale sub forma
a doi compui rezultai n urma aciunii bacteriilor intestinale i anume colestanol i
coprostanol.
Colesterolul absorbit ajunge n ficat unde este transformat n acizi biliari i
anume acidul colic i chenodezoxicolic.

109

nainte ca ei s prseasc ficatul, sunt conjugai cu glicolul sau cu taurina


rezultnd acizii glicocolic, taurocolic, glicochenodezoxicolic i taurochenodezoxicolic.
Acetia sunt total ionizai la pH-ul fiziologic i se prezint sub form de sruri. Srurile
biliare au caracter detergent mai puternic dect acizii. Acizi biliari i srurile biliare sunt
secretai n caniculele biliare i dup un tranzit prin vezica biliar sunt deversai
mpreun cu bila n duoden.

110

n segmentul distal al ileonului acizi biliari sunt reabsorbii printr-un mecanism


activ i prin sistemul port ajung din nou la ficat unde refac circuitul anterior, realiznduse aa-numitul circuit enterohepatic al acizilor biliari. n intestin, dup ce particip la
emulsionarea lipidelor alimentare, acizii biliari formai sunt supui aciunii bacteriilor
rezultnd acizi biliari secundari, prin dehidroxilare n poziia 7 i deconjugare, acidul
dezoxicolic din acidul colic i acidul litocolic din acidul chenodezoxicolic. Dup
efectuarea a mai multor circuite enterohepatice ei sunt total eliminai.
Trecerea colesterolului din ficat n bil este nsoit de secreia simultan a
fosfolipidelor i srurilor biliare. Dac acest fenomen cuplat este viciat i intr n bil
mai mult colesterol dect poate fi solubilizat de srurile i lecitina prezente, atunci
colesterolul precipit formnd calculii biliari i declannd litiaza biliar.

6.7. Lipoproteine plasmatice


Lipidele plasmatice (5-8 g/L) reprezint un amestec complex de fosfolipide (PL)
35%, trigliceride (TG) 10-25%, colesterol liber (C) 7,5%, colesterol esterificat (CE)
39% i acizi grai liberi (AGL) 2,5%.
Deoarece sunt insolubile n ap, lipidele sunt transportate sub forma unor
complexe lipoproteice, particule globulare cu greutate mare, cu miez nepolar constituit
din lipide neutre (TG i CE) nconjurat de o pelicul polar de PL care stabilizeaz
particula i asigur solubilitatea ei n ap. Pe lng fosfolipide, suprafaa polar mai
conine colesterol liber i cantiti mici de proteine specifice, numite apolipoproteine sau
apoproteine (A, B, C, E).

111

Deoarece particulele lipoproteice conin toate componentele lipidice n proporii


diferite i diferite apoproteine, aceste particule vor prezenta i proprieti fizico-chimice
diferite: mrimea particulei, densitate, mobilitate n cmp electric.
Lipoproteinele cu coninut ridicat de TG au densitatea mai mic i molecula mai
mare dect cele cu coninut mare de PL i proteine.
ncrcarea electric este conferit de partea proteic.
Pe baza acestor proprieti au fost perfectate dou metode de separare a
lipoproteinelor plasmatice: ultracentrifugarea i electroforeza.
Ultracentrifugarea se bazeaz pe viteza de sedimentare a particulelor n cmp
gravitaional ntr-o soluie de NaCl cu greutate specific 1,063 n funcie de densitatea i
mrimea particulei.
Electroforeza se bazeaz pe capacitatea de migrare n cmp electric n funcie de
ncrcarea electric i greutatea particulei.
Prin aceste metode s-au separat, din plasma subiecilor sntoi, patru clase de
lipoproteine:
- CM chilomicroni;
- LDL lipoproteine cu densitate joas sau -lipoproteine;
- VLDL lipoproteine cu densitate foarte joas sau pre--lipoproteine;
- HDL lipoproteine cu densitate nalt sau -lipoproteine;

112

Trigliceridele predomin n chilomicroni i VLDL n timp ce


colesterolul n LDL i HDL.
Apoproteinele reprezint aproape 60% din particulele HDL i mai puin de 1% n
chilomicroni.
Asamblarea lipidelor sub forma particulelor lipoproteice asigur pstrarea
lipidelor n soluie i un mecanism eficient pentru aprovizionarea esuturilor cu lipide.
Metabolismul chilomicronilor (CM)
Chilomicronii sunt particulele lipoproteice cele mai mari (751200 nm) sunt sintetizai n celulele mucoasei intestinale din lipidele
alimentare Apo B48 i secretate n limfa mesenteric. n circulaie
primesc de la particulele HDL, Apo C i Apo E.
n timpul circulaiei, trigliceridele din chilomicroni sunt hidrolizate de
lipoprotein-lipaze (LPL) din endoteliul capilarelor esuturilor extrahepatice (muchi
scheletic, muchi cardiac, esut adipos). Acizii grai eliberai prin aciunea LPL activat
de apo CII, servesc drept surs de energie pentru diverse celule, sau sunt preluai de
adipocite i stocai sub form de trigliceride. Particulele rmase sunt chilomicroni
remaneni sau deeuri, bogai n apo E dar lipsii de apo C care a fost pierdut (preluat
de HDL) aproape n ntregime. Deeurile de chilomicroni sunt rapid captai de ficat fiind
recunoscute de receptorii specifici prin combinaia apo B i apo E. n celulele
parenchimale sunt degradai.
Metabolismul fraciunii VLDL
Particulele VLDL ( 30-90 nm) sunt secretate de ficat pe seama trigliceridelor
sintetizate n celula hepatic. n circulaie particulele VLDL sunt modificate prin
degradarea trigliceridelor de ctre lipoprotein-lipaz. Particulele devin mai dense, pierd
fosfolipidele, colesterolul i apo E, care sunt transferate pe HDL i primesc n schimb
colesterol esterificat. Prin aceste modificri, particulele VLDL devin particule LDL,
trecnd prin faza intermediar de particule IDL (lipoproteine cu densitate intermediar).

113

n condiii patologice (hepatit, diabet necontrolat sau n ingestia excesiv


de alcool) cnd este deranjat raportul ntre sinteza hepatic de trigliceride i secreia
VLDL, apare ficatul gras.
Metabolismul fraciunii LDL
Particulele LDL (20 nm) rezultate prin metabolizarea VLDL sunt bogate n
colesterol i colesterol esterificat, n special cu acidul oleic. Funcia primar a fraciunii
LDL este de a furniza colesterol celulelor periferice.
Colesterolul liber adus n celul particip la: sinteza de membrane celulare;
sinteza altor steroli; reglarea sintezei de colesterol n celula respectiv prin inhibarea
activitii HMGCoA-reductazei.
Colesterolul n exces (care depete necesarul imediat al celulei) este esterificat
cu acizi grai de ctre ACAT (acil-CoA:colesterol-acil transferaza) i stocat n celul
pentru nevoile viitoare. Activitatea ACAT crete cnd concentraia colesterolului
intracelular este crescut.
Particulele LDL ptrund n celul prin recunoaterea combinaiei apo B i apo E
de ctre receptori specifici.
Afinitatea receptorilor pentru LDL este foarte mare; se consider c ei
funcioneaz la capacitate maxim la o concentraie a colesterolului-LDL de 25 mg/dL.
Nivelul LDL-colesterolului plasmatic este de 120 mg/dL; diferena dintre aceste dou
valori reprezentnd valoarea LDL-colesterolului preluat de ctre receptorii scavenger
de pe macrofage. Rezult aa numitele celule spumoase.
Fraciunea LDL este considerat fraciune de risc aterogen.
Metabolismul fraciunii HDL
HDL ( 8-12 nm) sunt particule foarte heterogene n ceea ce privete
compoziia i originea.
Sunt sintetizate n ficat i intestin din nveliul excedentar din chilomicroni i
VLDL dup ce miezul lor nepolar de trigliceride a fost degradat de ctre lipoproteinlipaz.
HDL nascente au o form bidiscoidal (dou straturi suprapuse formate din
colesterol, fosfolipide (n special lecitin), apo AI, apo E i apo C. Sunt rapid convertite
la particule sferice prin colectarea colesterolului de pe suprafaa celulelor esuturilor
periferice i de la alte particule lipoproteice, trecnd n particule HDL3, sferice, apoi
HDL2 care sunt captate de celulele hepatice i degradate.
Fraciunea HDL ndeplinete un numr de funcii importante:
- constituie rezerv circulant de apo CII care este transferat pe chilomicroni i
VLDL pentru activarea LPL;
- ndeprteaz colesterolul liber din esuturile extrahepatice i l esterific n
plasm cu LCAT (lecitin:colesterol-acil-transferaz), enzim ataat de
particulele HDL.

114

- transport colesterolul esterificat la ficat unde este metabolizat la acizi biliari


n celulele parenchimale.
Studii epidemiologice au evideniat c spre deosebire de LDL, colesterolul din
HDL este corelat negativ cu prevalena aterosclerozei, HDL fiind considerat
fraciunea cu rol protector, antiaterogen. Aceasta deoarece ndeprteaz colesterolul
din esuturi i chiar din intima vascular i l cedeaz ficatului care l transform n acizi
biliari, principala form de eliminare a colesterolului din organism.
Tulburrile metabolismului lipidic. Dislipidemii
Termenul general de dislipidemie semnific modificrile calitative i cantitative
ale lipidelor din plasm. Unii indivizi prezint defecte nnscute n metabolismul
lipoproteinelor plasmatice, defecte ce conduc la hipo- sau hiperlipoproteinemii. Ali
indivizi, cu diverse afeciuni, cum ar fi diabet zaharat, hipotiroidism sau ateroscleroz,
prezint modele lipoproteice anormale, foarte asemntoare cu una sau alta dintre
afeciunile primare nnscute.
Numeroase cercetri au evideniat corelaia dintre creterea concentraiei
lipidelor serice i incidena bolilor coronare i a aterosclerozei.
Pacienii cu boli coronare pot prezenta cel puin una din urmtoarele anomalii:

115

1) creterea concentraiei VLDL (n


principal
trigliceride),
cu
concentraii normale a LDL (n principal colesterol);
2) creterea concentraiei LDL (colesterol) cu VLDL normale (trigliceride);
3) creterea ambelor fraciuni lipoproteice (colesterol + trigliceride).
Exist o relaie invers ntre HDL i bolile coronare i se consider c cele mai
bune indicaii n aprecierea acestei situaii pot fi obinute din valorile raportului
LDL/HDL, innd seama de rolul celor dou fraciuni.

116

7. METABOLISMUL PROTEIC
n organism are loc un permanent transfer proteic intertisular. La fondul comun
de aminoacizi contribuie att aminoacizii de origine alimentar, ct i cei provenii din
degradarea proteinelor tisulare. Fondul comun de aminoacizi va fi utilizat pentru sinteza
de proteine, pentru sinteza de produi specializai (serotonina, adrenalina, tiroxina), sau
pentru degradare n scopuri energetice.
Cantitatea minim de proteine necesar organismului este de aproximativ 30
g/zi. Cnd consumul de proteine este inadecvat, ficatul nu poate sintetiza suficiente
proteine plasmatice pentru meninerea balanei ntre fluide i esuturi, favoriznd apariia
edemelor.
Valoarea biologic a unei proteine alimentare depinde de compoziia sa n
aminoacizi. Valoarea este cu att mai mare cu ct coninutul n aminoacizi este mai
bogat, mai variat i mai apropiat de compoziia proteinelor proprii organismului. Msura
acestei valori este dat de coeficientul de utilizare a proteinelor care se exprim prin
raportul:
N ingerat N urinar
N ingerat
Coeficientul indic n ce msur o protein ingerat este ncorporat n
proteinele proprii. Atunci cnd, dup administrarea unei proteine, eliminarea urinar de
azot este crescut, nseamn c aminoacizii din proteina respectiv au fost n principal
degradai i nu ncorporai n proteinele proprii organismului.
Proteinele de origine vegetal, n special fina de porumb, care este lipsit de
triptofan, tirozin i lizin, au valoare biologic redus. Proteinele de origine animal au
valoare biologic ridicat.
Balana azotat nu poate fi meninut dac din alimentaie lipsesc urmtorii
aminoacizi: fenilalanina, valina, triptofanul, treonina, lizina, leucina, histidina, arginina,
izoleucina i metionina, aa numii aminoacizi eseniali. Arginina i histidina sunt
considerai aminoacizi semieseniali deoarece n perioada de cretere, necesarul pentru
arginin i histidin este crescut i sinteza endogen nu asigur ntreaga cantitate
necesar.
Cnd unul dintre aminoacizii eseniali lipsete, sinteza proteinelor n componena
crora intr aceti aminoacizi nu mai are loc, iar ceilali aminoacizi sunt dezaminai i
degradai; bilanul azotat devine negativ.
Valoarea biologic a unei proteine depinde i de digestibilitatea ei; proteinele din
plante, fiind protejate de un nveli de celuloz, sunt mai greu digestibile. Un caz aparte
l constituie albuul de ou crud i fasolea soia, care conin factorii antitriptici ce se opun
digestiei.
7.1.Digestia i absorbia proteinelor
n tubul digestiv, proteinele nu pot fi absorbite ca atare i de aceea sunt supuse
aciunii unor enzime numite peptidaze sau proteaze, care le scindeaz pn la
aminoacizi.

117

Dup specificitate, peptidazele se mpart n endopeptidaze i exopeptidaze.


Ele sunt capabile s scindeze legturile peptidice situate fie n mijlocul unui lan
polipeptidic (endopeptidaze), fie la capetele acestuia (exopeptidaze). La rndul lor,
exopeptidazele sunt aminopeptidaze i carboxipeptidaze dup cum detaeaz un
aminoacid din captul N-terminal sau C-terminal:
R1
H2N

CH

R5

R3
CO

Aminopeptidaza

NH

CH

CO NH

CH

CO

NH CH CO

R2

Endopeptidaza

R4

NH CH

CO

OH

Carboxipeptidaza

Peptidazele digestive sunt elaborate sub form inactiv n scopul de a proteja


celulele i canalele secretoare de aciunea lor proteolitic. Aceti precursori (proenzime
sau zimogeni) devin activi n lumenul tubului digestiv. Activarea lor se realizeaz prin
hidroliza unor legturi peptidice care fie c detaeaz anumite peptide sau aminoacizi,
fie c modific plierea lanului polipeptidic, demascnd centrul activ al enzimei. De
multe ori acest proces se petrece autocatalitic.
Tripsinogen
Ente ro p e p tid az a

Val-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys

T rip s ina
Chimotripsinogen

Proelastaza
Elas taz a
Procarboxipeptidaza

C himo trip s ina


C arb o x ip e p tid az a

Digestia proteinelor alimentare ncepe n stomac. Principala enzim proteolitic


gastric este pepsina.
Pepsina, o endopeptidaz, este secretat de celulele mucoasei gastrice
sub form de pepsinogen. Activarea are loc sub aciunea acidului clorhidric din
stomac, sau autocatalitic. Pepsina acioneaz optim la pH 1-2 i prezint
specificitate pentru legturile peptidice a cror grupare NH- provine de la
tirozin i fenilalanin.
Enzimele pancreatice (tripsina, chimotripsina, elastaza, carboxipeptidaza)
acioneaz asupra proteinelor neatacate de pepsina gastric ct i asupra produilor

118

de digestie ale acesteia. Sub aciunea combinat a proteazelor pancreatice


rezult di- sau oligopeptide.
Tripsina endopeptidaz pancreatic, rezult din tripsinogenul activat
de enterokinaz sau autocatalitic. Activarea implic detaarea unui hexapeptid din
captul N-terminal. Are pH optim la 7-8 i specificitate pentru legturile peptidice
a cror grupare carboxil provine de la un aminoacid bazic, cum ar fi arginina.
Chimotripsina endopeptidaz pancreatic secretat sub forma inactiv
de chimotripsinogen i activat de tripsin care detaeaz patru aminoacizi sub
forma a dou dipeptide. Chimotripsina are specificitate pentru legturile peptidice
n care sunt implicate gruprile carboxil ale fenilalaninei, tirozinei i triptofanului.
Absorbia aminoacizilor prin mucoasa intestinal este n parte o difuzie
pasiv, dar n cea mai mare msur este un transport intermediat de proteinele
transportoare specifice (translocaze). Translocazele seamn cu enzimele: prezint
fenomenul de saturare cu substrat, sunt specifice, sunt susceptibile la aciunea
unor inhibitori. Proteinele transportoare de aminoacizi sunt determinate genetic i
defecte genetice ale acestor proteine altereaz capacitatea de absorbie a mucoasei
intestinale pentru unul sau mai muli aminoacizi. Erorile ereditare de absorbie a
aminoacizilor determin tulburri grave de nutriie i metabolism (boala Hartnup,
cistinuria, glicinuria).
Peptidele mici absorbite, sunt rapid hidrolizate de ctre peptidazele
localizate chiar n celulele care fac absorbia, nct n circulaia portal sunt
eliberai numai aminoacizi.
7.2. Metabolismul aminoacizilor
Metabolismul aminoacizilor se desfoar n strns legtur cu ciclul
acizilor tricarboxilici. Astfel, scheletul de atomi de carbon pentru biosinteza celor
mai muli aminoacizi este furnizat de ciclul Krebs, care fiind un proces amfibolic,
va asigura i degradarea scheletului de carbon din aminoacizi.
7.2.1. Biosinteza aminoacizilor
Digestia proteinelor nu asigur ntreaga cantitate de aminoacizi necesar
organismului. n consecin, proporia de aminoacizi trebuie reechilibrat prin
sintez. Organismul uman nu poate realiza acest lucru deoarece nu poate sintetiza
toi cei 20 aminoacizi, nedispunnd de unele enzime necesare. De exemplu
aminoacizii aromatici (Phe, Trp) nu pot fi sintetizai, iar alii, cum ar fi arginina
poate fi sintetizat n ciclul ureei, dar nu n cantiti suficiente.
Totui, un numr de 12 aminoacizi neeseniali pot fi sintetizai din
intermediari metabolici, iar trei (Cys, Tyr,Hys) se sintetizeaz din aminoacizi
eseniali.
n biosinteza aminoacizilor, un rol central l ocup glutamatdehidrogenaza, glutamin-sintetaza i transaminazele; prin aciunea lor combinat,
amoniacul anorganic este transformat n grupare amino din aminoacizi.

119

7.2.2.
Catabolismul aminoacizilor
Spre deosebire de acizii grai i glucoz, aminoacizii nu pot fi stocai n
organism. Surplusul de aminoacizi care depete necesarul pentru sinteza de
proteine i alte biomolecule, este supus degradrii.
7.2.2.1. Catabolismul gruprii amino
Animalele superioare, printre care i omul, , excret azotul proteic sub
form de uree, compus solubil n ap i netoxic. Prin catabolizarea aminoacizilor,
gruparea -amino eliberat sub form de ion NH 4+, este convertit la uree, iar
scheletul de C rmas este transformat n acetil CoA, piruvat sau alt intermediar din
ciclul acizilor tricarboxilici. Aceti din urm compui sunt utilizai drept surs de
energie i pentru sinteza de acizi grai, corpi cetonici i glucoz.
ndeprtarea gruprii -amino se realizeaz prin dou procese:
1. transaminarea, n care gruprile amino de la diveri aminoacizi sunt
colectate sub form de glutamat;
2. desaminarea oxidativ a glutamatului, prin care se elibereaz NH4 ,
convertit ulterior n uree.

Transaminarea const n transferul gruprii amino de la un aminoacid la un


cetoacid fr formarea amoniacului liber; aminoacidul devine cetoacid, iar cetoacidul
(-KA) devine aminoacid.
Reacia general a acestui proces este:
R1 CH COO + R2 C COO
+
NH3

R1 C
O

COO- + R2 CH COO
+
NH3

120

Enzimele care catalizeaz transaminarea se numesc aminotransferaze i au drept


coenzim piridoxal-5-fosfatul (P-5-P), forma activ a vitaminei B6.
Transaminazele acioneaz reversibil i prezint specificitate pentru una sau
ambele perechi de aminoacid-cetoacid. Acceptor principal de grupri amino este acidul
-cetoglutaric, care se transform n acid glutamic. Ca donor de grupare amino pot
funciona majoritatea aminoacizilor, nct procesul de transaminare poate fi ilustrat prin
reacia:
COOR CH COO +
+

C O

NH3

CH2

-AA

CH2

COO
R C

COO

CH NH3

CH2

-KA

CH2
COO-

COO-

-cetoglutarat
Transaminarea are
loc cu viteze diferite dup naturaGlutamat
aminoacidului. Cel mai
activ donor de grupare amino este acidul aspartic, dup care urmeaz alanina, valina,
leucina, izoleucina, tirozina, fenilalanina, metionina, triptofanul, arginina cisteina.
Glicocolul, serina, histidina reacioneaz mai greu, iar lizina, treonina i iminoacizii
(prolina i hidroxiprolina) nu particip la transaminare.
Dintre cele 13 aminotransferaze identificate, cele mai importante sunt:
aspartat transaminaza (AST sau GOT) care are afinitate pentru perechea
oxalacetat-glutamat:
COO
COO
CH2
C O

CH2
+

CH2
HC

COO

CH2
+

NH3

COO

COO
HC NH2

CH2
+

C O

COO

COOH
glutamat

oxalacetat

CH2
COOH
-cetoglutarat

aspartat

alanin transaminaza (ALT sau GPT), care catalizeaz selectiv reacia:

COO

COO
COO
C O
CH3
piruvat

CH2

COO

CH2

CH NH2

HC

NH3

COO
glutamat

CH3
alanin\

CH2
+

CH2
C O

COO
-cetoglutarat

121

Ambele
transaminaze
sunt eliberate n snge n urma lezrii
esuturilor sau prin moartea celulelor. n consecin dozarea activitii lor n plasm este
utilizat n diagnosticul bolilor de inim i ficat, cum ar fi infarctul miocardic i hepatita,
respectiv.
Prin transaminare se acumuleaz gruprile amino de la majoritatea aminoacizilor
pe acidul glutamic care, prin desaminare oxidativ va elibera NH4+ i acidul cetoglutaric necesar unui nou proces de transaminare.
Dezaminarea oxidativ - pierderea gruprii amino sub form de amoniac cu
formarea unui cetoacid. Reacia este catalizat de D- sau L-aminoacidoxidaze, active n
ficatul i rinichiul animalelor superioare, a altor animale i n microorganisme.
n acest proces, aminoacidul este dehidrogenat la iminoacid de ctre o
flavoprotein (Fp), apoi iminoacidul format, spontan, n prezena apei, pierde amoniacul
i trece n cetoacid.
Singura aminoacid-oxidaz cu activitate destul de mare este glutamat
dehidrogenaza (Glu-DH) distribuit n toate esuturile i n special n ficat. Enzima din
ficat este modificat alosteric de ATP, GTP, NADP+ care o inhib i de ADP care o
activeaz. Poate lucra fie cu NAD+ fie cu NADP+.
L-glutamat-DH catalizeaz reacia:

-cetoglutarat

L-Glutamat

Glu-DH

H2O

NH4

NAD(P)+

NAD(P)H+H+

Reacia este reversibil i poate lucra fie spre formarea de amoniac din glutamat
(catabolism), fie fixarea lui pe alfa-cetoglutarat (biosinteza), funcie cu importan n
plante i bacterii, care sintetizeaz aminoacizi din glucoz i amoniac.

COO+

CH NH3

Gl-DH

COO Glutamat

COO

NH

NAD+(P)

NAD(P)++H+

CH2

CH2

CH2

CH2
CH2

COO

H2O

COO Iminoacid

CH2
+
NH4

COO -cetoglutarat

122

n lezarea funciei hepatice sau n ciroz cnd se dezvolt o comunicare


colateral ntre vena port i circulaia sistemic, sngele portal poate ocoli ficatul.
Amoniacul din intestin va trece n sngele sistemic unde va atinge nivele toxice..
La nivel renal, se fabric amoniac fie pentru meninerea echilibrului acido-bazic,
fie pentru conservarea cationilor. Aceast producie este crescut mult n acidoz i
sczut n alcaloz. Amoniacul se formeaz pe seama aminoacizilor intracelulari, n
particular glutamin, sub aciunea glutaminazei, conform reaciei:

O
C

H2O

NH2

NH3

(CH2)2

COOH
(CH2)2

+
NH3
_
COO

+
NH3
_
COO
glutamat

CH

CH

glutamin\

Pe lng amoniacul format prin transaminare desaminare, cantiti apreciabile


de amoniac se formeaz sub aciunea bacteriilor intestinale, fie din proteinele
alimentare, fie din ureea prezent n fluidele secretate n tractul gastrointestinal. Din
intestin, amoniacul este absorbit de sngele venos portal care conine cantiti mai mari
de amoniac dect sngele sistemic.
Amoniacul produs constant n esuturi este continuu transformat n glutamat,
glutamin i uree, nct sngele care prsete ficatul este practic lipsit de amoniac (1020 g%). Acest lucru este esenial deoarece amoniacul este toxic pentru SNC.
Glutamin-sintetaza este o enzim mitocondrial prezent n cantiti mari n esutul
renal. Sinteza legturilor amidice se realizeaz cu consum de ATP, ceea ce face ca
echilibrul acestei reacii s fie deplasat spre sintez.
O
COO

+ NH3

(CH2)2
+

CH NH3
-

COO
Glutamat

Glutamin-sintetaza
Mg++

NH2

(CH2)2
+

CH NH3

ATP
ADP+Pa

COO
Glutamin\

123

Acest mecanism este preponderent n creier. n ficat, calea principal de


ndeprtare a amoniacului este formarea ureei.
Glutamina se formeaz n creier i pe seama amoniacului din sngele
arterial. Cum sinteza glutaminei se realizeaz pe seama acidului glutamic sintetizat
prin transaminare din KG, atunci cnd concentraia amoniacului n creier crete,
cantitatea de glutamat necesar detoxifierii este insuficient i n aceste condiii se
sintetizeaz cantiti suplimentare de glutamat din -cetoglutaratul format n ciclul
Krebs, propriu creierului, ceea ce poate conduce la scderea concentraiei
intermediarilor din ciclu. Pentru reechilibrare, se apeleaz la reacia de carboxilare
a piruvatului la oxalacetat care, intrat n ciclul Krebs va genera cantiti
suplimentare de -cetoglutarat.
Calea principal de ndeprtare a amoniacului din organism este
convertirea acestuia la uree.
7.2.2.1.1. Ureogeneza
Un adult ce presteaz o activitate moderat consum zilnic aproximativ 300
g glucide, 100 g grsimi i 100 g proteine i excret 16,5 g azot; 95% azot este
eliminat la nivelul rinichiului, iar 5% prin materiile fecale.
Calea major de eliminare a azotului la om este ureea. Ureea este
sintetizat n ficat, trecut n snge i filtrat la rinichi.
Pentru sinteza unui mol de uree dintr-un mol de amoniac sunt necesari 3
moli de ATP (2 moli sunt trecui n ADP, iar un mol n AMP) i participarea a 5
enzime.
Etapele sintezei ureei:
1. Sinteza carbamoil-fosfatului
Condensarea amoniacului, bioxidului de carbon i fosfatului (din ATP) cu
formarea carbamoil-P este catalizat de carbamoil-P-sintetaz, prezent n
mitocondriile din ficatul tuturor animalelor ureolitice. n aceast reacie se
consum 2 moli de ATP pentru realizarea legturii amidice dintre NH 3 i CO2 i a
legturii anhidridice mixte ntre gruparea carboxil i gruparea fosforic din
carbamoil-P. n plus este necesar prezena Mg ++ i a unui acid dicarboxilic, i
anume, N-acetilglutamic. Rolul exact al acestui aminoacid nu este cunoscut. Se
pare c prin legarea lui, se produc modificri comformaionale profunde n
molecula enzimei, prin care sunt demascate unele grupri sulfhidrilice i este
modificat afinitatea enzimei pentru ATP.
2. Sinteza citrulinei
Transferul restului carbamoil de pe carbamoil-P la ornitin, cu formarea
citrulinei este catalizat de ornitil-carbamoil-P-transferaza (OCT), o enzim care
se gsete n mitocondriile hepatice. Enzima este foarte specific pentru ornitin i
echilibrul este deplasat spre formarea citrulinei.

124

3. Sinteza argininosuccinatului catalizat de arginino-succinatsintetaza, utilizeaz energia furnizat de ATP, echilibrul reaciei fiind deplasat
spre sinteza argininosuccinatului.
4. Clivarea argininosuccinatului la arginin i fumarat.
Clivarea reversibil este catalizat de argininosuccinaz, o enzim
stereospecific identificat n mitocondriile de ficat i rinichi.
Fumaratul format poate fi convertit la oxalacetat prin aciunea fumarazei i
malatdehidrogenazei din ciclul Krebs, iar oxalacetatul prin transaminare
regenereaz aspartatul.
5. Clivarea argininei la ornitin i uree este reacia ce nchide ciclul ureei
regenernd ornitina, substratul pentru reacia 2.

CO2

+
+ NH
4

Carbamoil-Psintetaza
Mg ++

2ATP

O
H2 N C

O
O

P
O

NH3

CH2

carbamoil-P

2 ADP+Pa

OCT

Pa

(CH2 )2
+

CH
COO

NH3
-

Ornitin\
NH2
C

Argininosuccinat-sintetaza

CH2 NH

Mg ++

(CH2 )2
CH

NH3

COO

Citrulin\

COO -

NH

COO
CH

C NH CH
CH2 NH

CH2

(CH2 )2

COO

CH

ATP
AMP+PPa

COO

Arginino-

4 succinaza
-

NH2
-

CH

NH3

COO -

Argininosuccinat

CH

CH2

-OOC

COO -

Fumarat

Aspartat
NH2
C
CH2 NH

NH

Arginaz\

(CH2 )2
CH

NH3

COO-

Arginin\

NH2
NH2

H2 O
Ornitin\

Uree

125

Clivarea hidrolitic a restului de guanidin din arginin este catalizat de


arginaz, care este prezent n ficatul tuturor animalelor ureotelice. Cantiti foarte mici
de arginaz se ntlnesc i n alte esuturi rinichi, creier, glanda mamar, piele.
Arginaza nalt purificat (din ficat) este activat de Ca++ sau Mg++.
Ornitina i lisina sunt inhibitori competitivi pentru arginin.
Reglarea sintezei ureei

Sinteza carbamil-fosfatului asigur fluxul continuu de amoniac ntre aminoacizi


i uree. Cu toate c echilibrul reaciei Glu-DH este deplasat spre formarea glutamatului,
datorit faptului c ndeprtarea amoniacului se face prin carbamoil-P i -cetoglutaratul
rezultat este degradat de enzimele ciclului Krebs situate n matricea mitocondrial,
echilibrul este de fapt deplasat spre degradarea glutamatului.

Dintre cele 5 enzime care particip la acest proces, reacia arginazei este specific
acestei ci metabolice i deci specific animalelor ureotelice. Ea se gsete numai n ficat,
organ unde are loc sinteza ureei.
OCT este, de asemenea, o enzim strict hepatic i apariia ei n plasm va constitui un
indicator de lezare a parenchimului hepatic.

126

Cantiti mici de uree se pot forma i n creier i rinichi, dar fr semnificaie pentru
metabolismul amoniacului.
Anomalii genetice n ciclul ureei
Au fost descrise defecte pentru toate cele 5 enzime implicate n sinteza ureei:
1. Defectul de carbamil-fosfat-sintetaz, hiperamonemia tip I;
2. Defectul de OCT , hiperamonemia tip II;
3. Defectul de argininosuccinat-sintetaz , citrulinemie;
4. Defectul de argininosuccinaz, argininosuccinaturie;
5. Defectul de arginaz, hiperargininemie.
Oricare dintre aceste defecte se manifest prin simptome specifice intoxicaiei cu
amoniac a crui concentraie seric poate crete de la 10-20 g% la 500 g%.
Subiecii cu astfel de defecte genetice au o intoleran i o repulsie fa de alimentele
bogate n proteine.
Intoxicaia cu amoniac se manifest prin tremurturi ale membrelor, dificulti n
vorbire, tulburri de vedere, iar n cazuri severe, coma i moartea. Simptomele se instaleaz
atunci cnd nivelurile hepatice i cerebrale de amoniac sunt crescute. Intoxicaia cu amoniac
este considerat factor important n etiologia comei hepatice, motiv pentru care tratamentul, n
asemenea situaii, este orientat spre scderea amoniacului sanguin.
7.2.2.2. Catabolismul scheletului de carbon al aminoacizilor
n funcie de compuii ce pot fi sintetizai din produii finali ai cilor de degradare,
aminoacizii pot fi grupai n trei categorii:
1. aminoacizii glucogenici care sunt degradai la piruvat sau la intermediari din ciclul
Krebs, compui ce vor fi convertii la glucoz, via fosfoenolpiruvat (alanina,
arginina, acidul aspartic, cisteina, acidul glutamic, glicina, histidina, hidroxiprolina,
metionina, prolina, serina, treonina i valina);
2. aminoacizi cetogenici care sunt catabolizai fie la acetil-CoA, fie la acetoacetilCoA, din care vor rezulta corpi cetonici (leucina);
3. aminoacizi glucogenici i cetogenici care pot genera att glucoz ct i corpi
cetonici (izoleucina, lisina, fenilalanina, triptofanul i tirozina).
Punctele de intrare n ciclul Krebs sunt acetil-CoA, -cetoglutarat,
succinil-CoA,
fumarat i oxalacetat:

127

Ala
Gly
Cys
Ser
Thr

Glucoz\
Fosfoenol piruvat

Piruvat

Leu

Ile
Trp

Acetil-CoA

Phe
Lys
Trp
Leu Tyr
Acetoacetil-CoA
Glucogenici

Asp
Asn
Phe
Tyr
Asp

Cetogenici

Oxalacetat

Gluco-, cetogenici

Citrat
Fumarat
Succinil-CoA
Ile

Met
Val

Alfa-Cetoglutarat

Glu
Gln
His
Pro
Arg

7.2.2.3. Metabolismul individual al unor aminoacizi


7.2.2.3.1. Metabolismul glicocolului
Glicocolul este un aminoacid neesenial care poate participa la numeroase
sinteze n organism:
- transformarea reversibil n serin prin intervenia serin, hidroximetiltransferazei, reacie la care particip n calitate de coenzim acidul folic sub
forma N5-N10-metilen-FH4. Reacia poate continua cu formarea final a
acidului piruvic;
- sinteza hemului, mpreun cu succinil-CoA;
- sinteza glutationului;
- sinteza creatinei;
- sinteza purinelor;
- sinteza hemului.
7.2.2.3.1.1. Creatinogeneza
Creatina se gsete n special n muchi i creier, att liber ct i fosforilat
(fosfocreatin). Sinteza ei se realizeaz cu participarea a trei aminoacizi, glicocolul,
arginina i metionina prin urmtoarele etape:
transamidinarea transferul gruprii amidinice din arginin pe glicocol cu
formarea glicociaminei (acid guanidin-acetic). Reacia are loc n rinichi dar nu n ficat i
muchi.

128

NH2
HN C
NH

CH2

+
NH3
CH2 COO

Arginin-glicintransamidinaza

(rinichi)

(CH2 )2
CH
COO

NH2
HN C
NH

CH2

_
COO

Ornitin\

+
NH3
_

Glicocol

Glicociamin\
(Guanidinacetat)

Arginin\
transmetilarea transferul gruprii metil de pe metionina activat (S-

adenozil-metionina, SAM) pe glicociamin. Reacia are loc n ficat concomitent cu


fosforilarea:
ADP

ATP
Guanidin acetatmetil-transferaza

NH P
HN C

(ficat)
S-Adenozilmetionin\

_
CH2 COO

CH3
S-Adenozilhomocistein\

creatin- P

NH C O
neenzimatic HN C
(mu[chi)
N H2 C
Pa + H2 O

CH3

creatinin\

n muchi, creatin-fosfatul previne depleia rapid de ATP, fiind un compus


macroergic ce asigur regenerarea ATP i creatinei atunci cnd muchiul este relaxat i
necesarul de ATP nu este prea mare. Fosforilarea creatinei este catalizat de creatinfosfo-kinaz (CPK), o enzim specific muscular, cu utilizare clinic n detectarea
afeciunilor musculare acute sau cronice.
Forma de excreie a creatinei este creatinina (anhidrida creatinei) care rezult
prin eliminarea neenzimatic a apei i fosfatului anorganic din creatin-fosfat. Cantitatea
de creatinin excretat prin urin n 24 de ore este constant pentru un subiect dat,
depinznd de masa muscular i nu de alimentaie.
Creterea creatinei n snge i eliminarea ei crescut prin urin se constat n
urmtoarele situaii:
- creterea produciei de creatin;
- distrugerea celulelor musculare;
- perturbarea captrii de ctre muchi a creatinei sintetizat n ficat.
Ultimele dou mecanisme se ntlnesc n miastenia grav, miotonia congenital,
miotonia atrofic, poliomielit, diverse miozite (inclusiv dermatomiozite).
7.2.2.3.1.2. Biosinteza glutationului
Glutationul, un tripeptid cu grupare sulfhidric, este un important derivat al
aminoacizilor, avnd funcii fiziologice nsemnate.

129
O
_
OOC

CH
+

NH3

CH2

CH2 C

O
HN CH

C NH CH2

COO

CH2
SH

-Glutamil-cisteinil-Glicin\
Glutation (GSH)

Glutationul, prezent n celulele animale n concentraii nalte (aproximativ


5
mM) reprezint un important sistem redox, trecnd reversibil din forma redus (GSH) n
forma oxidat (GSSG), n care dou molecule de tripeptid se leag prin legtur
disulfidic.
-Glu-Cys-Gly
S
S
-Glu-Cys-Gly

GSSG este redus la GSH prin glutation-reductaz, o flavoprotein ce utilizeaz


NADPH ca surs de electroni. n cele mai multe celule raportul GSH/GSSG este mai
mare ca 500.
Glutationul ndeplinete unele funcii importante:
- Glutationul protejeaz proteinele celulare (enzime, hemoglobin) mpotriva
agenilor oxidani, jucnd rol cheie n degradarea peroxidului de hidrogen i peroxizilor
organici, compui toxici pentru organism.
Glutation peroxidaza (GSH-PX), enzima ce catalizeaz reacia, conine un atom
de seleniu. n centrul activ al enzimei se gsete un analog al cisteinei ce conine seleniu
n locul sulfului.
- Particip la transportul aminoacizilor n celule ;
- La nivelul ficatului GSH, compus nucleofil, particip la reacia de conjugare
prin care unele toxice electrofile (cum ar fi ageni cancerigeni) sunt
neutralizai prin aciunea unor glutation-S-transferaze conform reaciei:
RH + GSH

GS-R + 2 H

- Particip la biosinteza leucotrienelor.


Reacia de conjugare
Muli metabolii i medicamente hidrofobe sunt conjugate, n ficat, cu
glicocolul, fiind transformate n compui hidrosolubili care se pot elimina di n
organism.
De exemplu, benzoatul, compus ce este utilizat pentru conservarea
alimentelor, n ficat se conjug cu glicocolul rezultnd acid hipuric.

130

Capacitatea ficatului de a converti benzoatul la acid hipuric este utlizat pentru


evaluarea funciei hepatice.
Acizii biliari n reacia cu glicina se transform n acizi biliari conjugai
(acizi biliari primari)caresub form de sruri biliare (ageni tensioactivi) intervin n
absorbia lipidelor.

7.2.2.3.3. Metabolismul metioninei


Metionina, aminoacid esenial, este metabolizat n organism pe calea succinatului
printr-o secven de reacii ce includ activarea metioninei la S-adenozil metionin, urmat de
formarea n faz intermediar a homocisteinei.
COO
CH

_
NH3

(CH2)2
S

Metionin-adenoziltransferaza

ATP

CH3

Metionina

NH2
N

N
N

N
O

Pa+PPa

Hipermetioninuria

COO

+
CH2 S

CH2 CH2 CH
+
CH3
NH3

HO OH

S-Adenozilmetionin\
("metionin\ activat\";SAM)

COO

Transmetilaz\

CH

_
+
NH3

CH2

Acceptor

Acceptor-CH3

Succinil-CoA

CH2
SH

Homocistein\

Acceptorii de grupri metil din reacia 2 pot fi etanolamina pentru sinteza


colinei, noradrenalinei pentru sunteza adrenalinei, glicociamina pentru sinteza creatinei
etc.

131

Anomalii n metabolismul metioninei


Homocistinuria apare n cazul unor defecte motenite, din calea de degradare
a metioninei.
Zilnic se excret pn la 300 mg homocistein uneori nsoit de
Sadenozilmetionin i nivele crescute de metionin n plasm. Simptomele clinice includ:
tromboze, osteoporoz, dezlipire de retin i frecvent, ntrziere mintal.
Unele forme ale bolii rspund la tratamentul cu vitamina B6, altele nu.
Utilizarea unei diete srac n metionin i bogat n cistin, din primele luni de
via, previne instalarea modificrilor patologice.
7.2.2.3.4. Metabolismul fenilalaninei
Fenilalanina, aminoacid
esenial, este convertit la tirozin prin aciunea
fenilalaninhidroxilazei, o oxidaz cu funcie mixt, prezent n ficat i absent n alte esuturi.
NADPH+H+

NADP+
II
Tetrahidrobiopterin\
O2

Dihidrobiopterin\
I

CH2 CH COO

H2O

HO

CH2 CH COO

NH3

NH3

Fenilalanina
Fenilcetonuria
(PKU)

Tirozina

Reacia implic ncorporarea unui atom de oxigen n poziia para a fenilalaninei,


iar cel de al doilea atom de oxigen, n ap.
Agentul reductor este NADPH care cedeaz hidrogenii prin intermediul
tetrahidroxibiopterinei, compus asemntor acidului folic.
7.2.2.3.4.1. Anomalii n metabolismul fenilalaninei:
Fenilcetonuria prin defect de fenilalanin-hidroxilaz:
Fenilalanina ce nu poate fi hidroxilat la tirozin este desaminat la acid
fenilpiruvic i acesta prin reducere formeaz acid fenillactic, iar prin oxidare i
decarboxilare, acid fenilacetic. Acidul fenilacetic se elimin prin urin n principal sub
form conjugat cu glutamina.
Consecina major n fenilcetonurie este retardarea mintal.
Fenilcetonuria (PKU) este cea mai frecvent boal metabolic, avnd o inciden
de 1/10.000 nateri.

132

7.2.2.3.5. Metabolismul tirozinei


Degradarea tirozinei se face pe calea acetoacetil-CoA i acidului fumaric.
OH

Alfa-KG

OH
7

Glu

1
CH2

Tirozintransaminaz\

O2

4
3 CH2

+
CH NH
3
COO

CO2

Hidroxilaz\
(dioxigenaz\ )

T i ro z i n e mi a
t i p II

p-hidroxifenil-piruvat

Fe2+

2 9 3
CH2 COO

4
OH

T i ro z i n e mi a
ne o natal \

O
Homogentizat
oxidaz\

OH
7

Homogentizinc
(dihidroxifenilacetat)

2 CH O
1 COO

Tirozina

vit.C,
Cu 2+

8
C 8
Fumaril-acetoacetat
7 CH2
Izomeraz\ 6
CH2
2 - 4 hidrolaz\
2 3
3
9
9
C CH2 COO
O C CH2 COO
5
- 4
COO
O
OOC
4
C
7

Maleilacetoacetat

Fumarilacetoacetat

A l c a p t o n u ri a

-OOC4

5
C

6
H C

H
7 COO

Ti ro z i n e mi a t i p I
( t i ro z i n o s i s )

2
8
9 3
CH3 C CH2 COOH

Beta-cetotiolaz\

O
CoASH

Fumarat

SCoA

CH3 CO

CH3 COO-

Acetilacetat

Glucoz\

7.2.2.3.5.1.Anomalii n catabolismul tirozinei


- Alcaptonuria
Cea mai important etap n calea metabolic de degradare a tirozinei
este deschiderea nucleului aromatic catalizat de homogentisinatoxidaza
(reacia 3). Absenta ei conduce la acumularea acidului homogentisinic n
esuturi i eliminarea lui prin urin. Urina care conine homogentisinat se

133

nnegrete n prezena aerului prin transformare


n
acid
benzochinonacetic i polimerizarea acestuia la pigmentul brun alcapton.
Alcaptonuria a fost descris nc din 1649 i definit ca defect enzimatic de
Archibald Garrod n 1902.
Depunerea de alcapton n cartilagii duce la colorarea acestora n brun
(ocronoz) asociat clinic cu simptome de artroz.
Tirozina servete drept precursor pentru civa compui biologic activi:
catecolamine, melanine, hormoni tiroidieni.
L-Dopa

Tirozina

L-Dopa

Dopamina

Dopamina
Tiroxina
Norepinefrina

Melanina

Epinefrina

7.2.2.3.5.2.Biosinteza catecolaminelor
Celulele neuronale convertesc tirozina la norepinefrin i epinefrin prin
urmtoarea succesiune de reacii:

OH
1
CH2

+
CH NH3
_
COO
Tirozina

OH

Tirozinhidroxilaza

OH

Tetrahidrobiopterin\

CH2

Dihidrobiopterin\

DOPAdecarboxilaza
2
(PLP)
CO2

+
CH NH3
_
COO

OH

O2

CH OH

OH 4

Norepinefrina

CH2
NH2
Dopamina

Fenol-etanolaminaN-metil-transferaz\

S-Adenozilmetionina

OH
OH

CH OH
CH2 NH

CH2
NH2

OH

CH2

DOPA

Dopamin3 beta-oxidaza
(Cu2+ , O2 )

OH

S-Adenozilhomocisteina

Epinefrina

CH3

134

n medulosuprarenal, noradrenalina este metilat la azot cu


S-adenozilmetionin ca donor de grupri metil. Sinteza transmetilazei este
indus de glucocorticoizi i inhibat de epinefrin.
7.2.2.3.5.3.Sinteza melaninei are loc n melanocite pe calea DOPA,
reacia de hidroxilare fiind catalizat de o tirozin-hidroxilaz dependent de
cupru.Dopa este apoi oxidat la Dopa-chinon i n final prin polimerizare trece
n melanin.
- Albinismul reprezint un grup de sindroame clinice caracterizate prin
deficit de melanin, localizate la ochi i piele. Semnele clinice comune pentru
toate cele zece forme de albinism uman oculocutanat includ scderea
pigmentrii pielii i ochilor; diferenierea se bazeaz pe caracteristicile lor
clinice, biochimice, ultrastructurale sau genetice.
Enzima defectiv n albinism este tirozin-hidroxilaza din melatocite.
7.2.2.3.5.4.Biosinteza hormonilor tiroidieni
Glanda tiroid secret doi derivai derivai ai tirozinei: tiroxina sau T 4
(3,3,5,5-tetraiodtironin) i T 3 (3,35-triiodtironin).
Hormonii se formeaz n celulele foliculare din glanda tiroid prin
iodurarea resturilor de tirozin din tiroglobulin.
Monoiodtirozina (MIT) i diiodtirozina (DIT) formai reacioneaz
pentru a forma T 3 i T 4 .
DIT

I
HO

CH2

CH
+
NH3

_
COO

HO

CH2

MIT

CH COO
+
NH3

T3

Tirozina
DIT

I
HO

CH2

I
DIT

CH
+
NH3

_
COO

I
HO

CH2

I
T4

CH COO
+
NH3

135

Tiroglobulina iodurat este pstrat n lumenul foliculilor tiroidieni i


hidrolizat pentru eliberarea T 3 i T 4 care trec n circulaie.
T 3 este forma activ fiind apt s se fixeze pe receptorii din nucleii
celulari. Aproximativ 2/3 din T 3 plasmatic rezult prin deiodurarea T 4 n
esuturile periferice.

7.2.2.3.6. Metabolismul triptofanului


Triptofanul se degradeaz pe calea kinurenin - acid antranilic, prin care
patru atomi de carbon sunt convertii la acetoacetil -CoA i doi, la acetil-CoA.
Calea este important deoarece servete att pentru degradare ct i pentru
convertirea triptofanului la nicotinamid.
O
CH2
N
H

CH COO
+
NH3

Triptofan oxigenaza
Fe
O2

COO

CH2 CH

NH3

NHCHO

N-Formil-kinurenina

Triptofan
O
Kinureninformilaza

C
N H2

_
HCOO

H2 O

COO

CH2 CH

Kinureninhidroxilaza
NADPH

NH3

O2

Kinurenina
O
C
COO

CH2 CH
N H2

NH3

OH

COO

Kinureninaza
P5 P

NH2

Alanin\

H2 O

O2

OHC

OH

3-Hidroxi-antranilat

3-Hidroxi-kinurenin\

3-Hidroxi-antranilatoxidaza

Vit.PP
(NAD^ )

_
COO

CH
C
HC
_
OOC
NH3

3%

2-Acroleil-3-aminofumarat

97%

Acetoacetil-CoA

CO2

Sub aciunea triptofan oxigenazei (triptofan-pirolaz) are loc clivarea nucleului


indolic prin oxidare rezultnd N-formil-kinurenina, care prin hidroliz pierde radicalul
formil i trece n kinurenin. Aceasta prin hidroxilare formeaz 3-hidroxi-kinurenin.
Kinureninaza care ndeprteaz hidrolitic alanina din 3-hidroxi-kinurenin este
dependent de piridoxal-5-fosfat (P-5-P). n deficit de vitamina B6, kinurenina nu se mai
degradeaz pe cale normal, ci este convertit la acid xanturenic, compus identificat n
urin.

136

O
C
NH2
OH

OH
CH2

CH
_
COO
+
NH3

+
NH4

COO

OH

Acid xanturenic

3-Hidroxi-kinurenin\

Triptofanul este precursor pentru NAD, serotonin i melatonin.


7.2.2.3.6.1.Biosinteza nicotinamidei (vitamina PP)
Biosinteza vitaminei PP este comun cu calea de degradare pn la acidul 2-acroleil3-amino fumaric. Mai departe 97% din compus se degradeaz la acetil-CoA i numai 3% este
convertit la acid nicotinic. Din 60 mg triptofan se sintetizeaz 1 mg acid nicotinic.
Deficitul de vitamin B6 afecteaz biosinteza biosinteza vitaminei PP prin blocarea
aciunii kinureninazei, condiie ce favorizeaz pelagra.
7.2.2.3.6.2.Biosinteza serotoninei
Serotonina este sintetizat n neuroni, n glanda epifiz i n celulele cromafine
din tractul gastrointestinal.

CH2
N
H

CH

COOH

NH2

Triptofanhidroxilaza
O

NADPH+H+

Triptofan
HO

CO2

CH2

HO

CH2
N
H

NADP+

CH

COOH

NH2

5-Hidroxi-triptofan

CH2 NH2

N
H

Serotonin\

Triptofan-hidroxilaza este etapa limitant a sintezei necesitnd


tetrahidrobiopterin.
Decarboxilarea este realizat de aceeai enzim care decarboxileaz Dopa la
dopamin.
Serotonina este stocat n granule asociat cu ATP. Serotonina (enteramina sau
trombocitina) este vasoconstrictor i stimulator al musculaturii netede. Ea particip la
reglarea activitii nervoase superioare.

137

Catabolismul serotoninei duce la formarea de derivai indolici care sunt


excretai prin urin sub form de sulfo i glucuronoconjugai.

Serotonina

Monoaminoxidaz\ (MAO)

HO

CH2 COOH

O2

N
H

NH3

Acid 5-OH-indol-acetic

CH3
H3 CO

CH2 COOH
N
H

Acid 5-Metoxi-indolacetic

7.2.2.3.6.3.Biosinteza melatoninei
Melatonina este un hormon produs de glanda epifiz care are efecte asupra sistemului
hipotalamus-hipofiz.
Se formeaz prin acetilarea la azot a serotoninei, urmat de metilarea la gruparea
OH din poziia 5.
HO
CO2

HO

CH2 CH2 NH2

Trp
N
H

CH2
N
H

Acetil CoA
CoA

serotonin\

NH
C O
CH3

5-HO,N-acetiltriptamin\
SAM
SAH
H3CO

CH2
N
H

NH
C O
CH3

Melatonin\

7.2.2.3.6.4.Anomalii n metabolismul triptofanului


- Sindromul carcinoid (argenta carcinoma) este produs de o proliferare benign
sau malign a celulelor argentofine (care produc serotonin) din intestin i se
caracterizeaz prin producerea de cantiti mari de serotonin.

138

Sindromul este considerat ca o anomalie n metabolismul triptofanului


deoarece o cantitate mai mare de triptofan este metabolizat pe calea hidroxiindolului.
8. METABOLISMUL NUCLEOTIDELOR PURINICE SI PIRIMIDINICE
Nucleoproteinele sunt heteroproteine formate din acizi nucleici
(polinucleotide) ataai la histone sau protamine.
Nucleotidele sunt componeni eseniali ai celulei, fcnd parte din
componena multor biomolecule fundamentale i participnd la numeroase
procese metabolice. Astfel, nucleotidele intr n structura acizilor nucleici ARN
i ADN, n componena unor coenzime (NAD(P) +, FAD, CoASH), particip ca
donori de energie n reaciile metabolice (ATP), ca transportori de intermediari n
reaciile de biosintez (CDP, UDP) etc.
Fondul metabolic de nucleotide necesar celulei poate fi asigurat prin dou
procese: sinteza de novo a nucleotidelor i reutilizarea bazelor azotate i a
nucleotidelor ce rezult prin degradarea celular a acizilor nucleici.
8.1. Metabolismul purinnucleotidelor
8.1.1. Biosinteza purinnucleotidelor
8.1.1.1 Biosinteza de novo a purinnucleotidelor
Pentru biosinteza nucleului purinic, doi atomi de azot, N 3 i N9, provin din
gruparea amidic ai glutaminei, N 1 , din aspartat, azotul N 7 mpreun cu C 4 i C5,
din glicin, C 2 i C8 din formiat, sub form de N10-formil-FH4 i respectiv N 5,
N10-metenil-FH4, iar C 6 din CO2 .
CO2
Glicin\
C

N1 6 5C

Aspartat

C
N10-Formil-FH

N
7

8C

N5-N10-Metenil-FH4

N
H

Glutamin\

Cile de sintez ale acizilor adenilic (AMP) i guanilic (GMP) sunt


comune de la riboz-5-P (R-5P) pn la acid inozinic.

O H 2C

O
H

H
OH
R5P

H
H
OH
OH

PRPPAmido139
PO H2C
O NH2 3
PO H2C
H
1 sintetaza
2
transferaza
O
H
H
H
H
Mg2+
H
H
O
P
H
P Gln
ATP
OH
OH
Glu
AMP
OH OH
PPa
5'-FosfoPRPP
Ribozil-Amino
O

..........................

11

HN
N

AMP

ADP

ATP

GMP

GDP

GTP

R5P
Acid inozinic

n calea de sintez a nucleotidelor, mai multe etape pot fi inhibate specific de


unii ageni terapeutici: azaserina, un antagonist al glutaminei, diazonorleucina, 6mercaptopurinele i acidul micofenolic.
Reglarea sintezei purinnucleotidelor se exercit n principal la nivelul
primei reacii, catalizat de PRPP-fosforibozil-pirofosfat a crei activitate depinde att
de capacitatea de utilizare a ribozei-5P (R-5P) (ce depinde de concentraia R-5P) ct i
de concentraia purin-nucleotidelor care acioneaz ca reglatori alosterici. Activitatea ei
este reglat prin mecanism feed-back de ctre produii finali: AMP, ADP, GMP i
GDP.
Sinteza de novo a purinnucleotidelor are loc n ficat, organ care reprezint
furnizorul de baze purinice i nucleozide pentru esuturile ce nu au capacitatea de sintez
sau au numai calea de reutilizare a lor.
8.1.1.2. Reutilizarea purinelor (Purine Salvage Pathways) se petrece prin dou
mecanisme generale:
Mecanismul principal const n fosforilarea bazelor purinice libere, ce
necesit PRPP, proces realizat de dou enzime: prima, adeninfosforibozil-transferaza
(APRT), fosforileaz adenina cu PRPP pentru a forma AMP.
APRT

Adenina
PRPP

AMP
PPa

A doua enzim, hipoxantin-guanin-fosforibozil-transferaza (HGPRT), mult mai


activ, catalizeaz fosforilarea hipoxantinei i guaninei:

140

PPa

PRPP
Hipoxantina

IMP
HGPRT

Guanina

GMP
PPa

PRPP

Absena total sau aproape total a HGPRT determin sindromul LESCHNYHAN, care se manifest prin tulburri neurologice foarte grave, deficien mental,
agresivitate, hiperuricemie, tendin la automutilare.
Reutilizarea ribonucleozidelor este realizat la om numai de adenozinkinaz,
enzim ce nu este capabil s fosforileze guanozina i inozima.

Adenozina

Adenozin-kinaza
ATP

AMP

ADP

Spre deosebire de aceasta, deoxicitidinkinaza fosforileaz att deoxicitidina, ct


i deoxiadenozina i deoxiguanozina la dCMP, dAMP i dGMP.
8.1.1.3. Biosinteza deoxiribonucleotidelor se poate realiza prin reducerea
direct la C2 al ribozei. Reacia se petrece dup ce au fost sintetizai nucleoziddifosfaii
purinici sau pirimidinici, numai atunci cnd are loc sinteza de ADN pentru diviziunea
celular.
8.1.2. Catabolismul purinnucleotidelor
Produsul final al catabolismului purinnucleotidelor, n organismul uman, este
acidul uric. Peste 99% din acidul uric se formeaz din inozina i guanozina ce nu sunt
fosforilate de purinnucleotid fosforilaz din calea de reutilizare.
Guanina i hipoxantina ce rezult din nucleozidele respective prin pierderea
gruprii amino i a ribozei-1-P (R-1-P) sunt convertite la acid uric pe calea xantinei prin
reacii catalizate de guanaz i xantinoxidaz.

141

NH2
N

N
5'
HOH2C

Adenozindeaminaz\

NH3

N
H

Pa

R1P

Hipoxantina

HO OH

Purinnucleotidfosforilaza

R1P

xantinoxidaza
(Mo,Fe)

O2

Inozina

Pa

HOH2C

O
Purin-ribonucleotidfosforilaza
HN

1'

H 2N

HN

HOH2C

HO OH
Adenozina

HN

O
HN
H2N

O
N

Guanaza

N
H

NH3

Guanina

HN
O

N
H

Xantina

HO OH
Guanozina

O mic cantitate de acid uric se formeaz prin degradarea acizilor nucleici


sub aciunea florei microbiene intestinale de unde este absorbit i trecut n snge.
Primatele inferioare i alte animale posed o enzim, numit uricaz, care
hidrolizeaz acidul uric la alantoin, compus mult mai solubil.
Aciunea antioxidant a acidului uric la om se exercit prin trecerea
neenzimatic la alantoin. Se consider c uratul ar nlocui acidul ascorbic pe care
primatele i omul nu-l pot sintetiza, el fiind aproximativ la fel de eficace ca i
vitamina C.
Acidul uric este un acid destul de tare care la pH fiziologic se gsete sub
form de monourat de Na.

Acidul uric este foarte puin solubil la pH acid. Sarea sa de Na este mai
solubil (7 mg% dl ser la 37 0C). Concentraia plasmatic de acid uric este de
aproximativ 6 mg% dL.

142

La nivelul tubilor renali, acidul uric este iniial reabsorbit din filtratul
glomerular, fiind apoi eliminat prin secreie tubular.
Afeciunea caracteristic dereglrii metabolismului purinnucleotidelor este
guta, o maladie destul de rspndit, caracterizat prin hiperuricemie
7 mg
% dL ser.
Creterea concentraiei de acid uric duce la depunerea de cristale de acid uric
n articulaii (artrita gutoas), n rinichi (nefrolitiaza uratic) i n alte esuturi sub
form de tofi.
Hiperuricemia poate fi cauzat de un consum exagerat de carne sau de o
tulburare genetic n sinteza ribonucleotidelor.
Guta metabolic primar. Cauza poate fi activitatea crescut a PRPPsintetazei, fie insuficiena mecanismelor de reglare a sintezei (datorit rezistenei
PRPP-amino transferazei la inhibiia feed-back), fie perturbrii reutilizrii
purinelor.
n unele cazuri, producia de urai este normal dar exist un defect nnscut
n mecanismele de secreie tubular a acidului uric guta primar renal.
Guta metabolic secundar este asociat unor boli ca urmare a unui
metabolism intens al acizilor nucleici cum ar fi leucemii, iradierea cu raze X, defect
de glucoz-6-fosfataz (glicogenoza de tip I sau boala von Gierke).
Cele mai bune rezultate n tratarea gutei se obin prin administrarea
allopurinolului, inhibitor competitiv pentru xantin-oxidaz (XO).

O
HN

N
N

N
H

Allopurinol

8.2. Metabolismul pirimidinnucleotidelor


8.2.1. Biosinteza de novo a pirimidin nucleotidelor
Calea de sintez a pirimidinnucleotidelor se deosebete de a
purinnucleotidelor prin faptul c D-riboza se ataeaz dup ce inelul de pirimidin a
fost sintetizat.

143

Gln

C
N1
C2

CO2

5C
4

Asp

Sinteza este iniiat prin formarea carbamoil-P-ului din glutamin, ATP i


CO2, reacie ce are loc n citoplasm.
O serie de compui ce pot inhiba sinteza nucleotidelor pirimidinice sunt
utilizai ca ageni terapeutici n tratamentul neoplasmului, avnd n vedere
turnoverul
ridicat
al
nucleotidelor
n
esuturile
canceroase
.
Astfel, 5-fluoruracilul, analog structural al uracilului, reacioneaz direct cu
PRPP, formnd 5-fluoruridin-5-monofosfat (F-UMP) sau poate fi mai nti
convertit la fluoruridin i apoi fosforilat la F-UMP.
Reglarea biosintezei pirimidinnucleotidelor. Primele dou enzime
implicate n biosinteza pirimidinnucleotidelor sunt modulate alosteric de UTP,
nucleotide purinice, fosforibozil-pirofosfat (PRP) i CTP.
Calea de reutilizare a pirimidinnucleotidelor
Reutilizarea pirimidinelor libere este puin important n celulele animale.
n schimb au fost identificate enzime active ce pot converti pirimidin ribonucleozidele la nucleotidele respective.
Deoarece produii de catabolism ai pirimidinelor sunt foarte solubili n ap, n
foarte puine situaii poate fi evideniat o hiperproducie de pirimidine.
Tulburri n biosinteza pirimidinnucleotidelor
Aciduria orotic ereditar tip I este determinat de deficiena a dou enzime:
orotidil-fosforibozil-transferaza i orotidil-decarboxilaza.
Aciduria orotic ereditar tip II este determinat numai de defectul de
orotidil-decarboxilaz
Manifestrile clinice constau ntr-o anemie sever, rezistent la vitamina B12,
acid folic, vitamin B6 i vitamin C. Ca urmare a dublului blocaj are loc o acumulare
masiv de acid orotic care poate ajunge n urin pn la 1000 ori valoarea normal.
Ambele tipuri rspund la tratamentul oral cu uridin sau UMP i CMP.
8.2.2. Catabolismul pirimidinnucleotidelor are loc n principal n ficat,
rezultnd o serie de produi foarte solubili: CO2 i NH3, -alanin i acid aminoizobutiric (BAIB).
Excreia de acid BAIB crete n leucemie i dup iradierea cu raze X, datorit
distruciei de ADN.

144

9. METABOLISMUL CROMOPROTEINELOR
Cromoproteinele porfirinice sunt formate dintr-o protein i o grupare
prostetic, reprezentat de o structur porfirinic.
Porfirinele sunt compui ciclici, formai din patru nuclee pirolice unite prin
legturi metenil (-C). O proprietate caracteristic a porfirinelor este formarea de
complexe cu ionii metalici, care se leag de atomii de azot din nucleele pirolice.
Printre porfirinele naturale care ndeplinesc funcii biologice importante se
numr: hemoglobina, mioglobina, citocromii, catalaza, peroxidazele, triptofanpirolaza, clorofila etc., hemoglobina fiind porfirina major din organism.
9.1. Biosinteza hemoglobinei
Sinteza hemoglobinei are loc n celulele eritropoietice din mduva osoas,
ficat i splin.
Biosinteza hemului se realizeaz din succinil-CoA i glicocol. ntr-o
prim reacie, n mitocondrie, are loc condensarea succinil-CoA cu glicocolul sub
aciunea -aminolevulinat-sintazei (ALA-sintaza) concomitent cu eliminarea CO 2 i
formarea acidului -aminolevulinic (ALA). Reacia necesit vitamina B 6 pentru
activarea glicinei (este posibil ca glicina s se fixeze la piridoxal-5-fosfat (P-5-P)
prin legtur de baz Schiff). Activitatea -ALA controleaz ntreaga sintez. n
continuare, prin condensarea a dou molecule de acid -amino-levulinic (reacia 2),
se formeaz un nucleu pirolic, porfobilinogen (PBG).
Din patru molecule de porfobilinogen (reacia 3) se formeaz un tetrapirol
linear care rmne legat de enzim.
Tetrapirolul linear se ciclizeaz, prin pierderea gruprii amino la
uroporfirinogen III, n care aranjamentul lanului este asimetric (reacia 4). Reacia
se petrece prin cooperarea a dou enzime, uroporfirinogen sintaza i cosintaza.
Rolul cosintazei este de a izomeriza unul din nucleele pirolice pentru a se
forma uroporfirinogen III. n aceast reacie se formeaz i mici cantiti de izomer
simetric, uroporfirinogen I, biologic inactiv.

145

_
COO
CH2
CH2
C

_
COO

+
H3N
+

CH2
_
COO

SCoA

1 -ALA-sintaz\
(P5P)

CH2
C

CO2

HSCoA

C O

(CH2)2
+

O C

CH2

H N

NH2

_
COO CH2
CH2
CH2

2 ALA-dehidrataz\

C
CH2 N
H
NH2

-ALA

CH

Porfobilinogen (PBG)

Uroporfibilinogen
3
sintaz\

2 H2O

H CH

-ALA

4PBG

_
COO

_
COO

CH2
C H2

Acid-Aminolevulinic (ALA)

Glicocol

_
COO

CH2 NH2

O
Succinil-CoA

CH2

H2N CH2
3NH3

P
N
H

CH2

P
N
H

CH2

P
N
H

CH2

P
N
H

Tetrapirol liniar

A
P
Uroporfirinogen
sintaz\
C
C H2
^
A H2
N
A
H
4 cosintaz\
NH HN
H
N
P
C H2 P
NH3
H2C
P
A
Uroporfirinogen III

Uroporfirinogen- M
decarboxilaza
4 CO2

P
N
H

NH

M
HN

H
N

P
P

P
M

Coproporfirinogen III

146

M
Coproporfirinogen- M
6 oxidaza
2 CO2

4 H2

M Protoporfirinogen- M
7 oxidaza

HN

NH
N

6H

M
M
8

Ferochelataz\
Fe2^

Fe2+

HN

NH
N

V
M

Protoporfirina IX

M
N

V
N

Protoporfirinogen IX

A - acid acetic
P - acid propionic
M - metil
V - vi

M
Hem

Prin decarboxilarea resturilor de acid acetic din uroporfirinogen III se ajunge


la coproporfirinogen III (reacia 5), apoi prin decarboxilarea i dehidrogenarea a
dou resturi de acid propionic (reacia 6) protoporfirinogenul IX, sub aciunea
porfirinogen-oxidazei (reacia 7) se formeaz protoporfirina IX care fixeaz Fe 2
sub aciunea hem-sintetazei (ferochelatazei) (reacia 8) se ajunge la hem. Ultimele
dou reacii, formarea protoporfirinei IX i a hemului, au loc n mitocondrie, ionul
de Fe2 necesar activitii ferochelatazei este transportat n plasm de transferin, o
protein care leag doi ioni ferici.
Reglarea sintezei hemoglobinei
Activitatea -ALA-sintetazei este reglat n principal prin inhibiia feed-back
exercitat de hem care represeaz sinteza enzimei.
9.1.1.Tulburrile metabolismului hemului. Porfirii
Porfiriile constituie un grup heterogen de afeciuni, caracterizate prin
excreia de porfirine sau precursori porfirinici. Unele dintre porfirii sunt motenite,
altele dobndite.
Porfiriile se clasific n porfirii eritropoietice, hepatice, eritropoietice i
hepatice, n funcie de organul cel mai afectat.
Au fost descrise ase tipuri de porfirii datorate defectelor enzimelor de la
etapa 3-8.

147

Succinil-CoA ^ Glicocol
1

ALA-sintaza

ALA
ALA-dehidrataza
Porfobilinogen (PBG)
Uroporfirinogen I - I Porfiria acut\ intermitent\, PAI (hepatic\)
sintaza
dureri abdominale, simptome neuropsihice

urin\: PBG^
uroporfirinogen^

Tetrapirol liniar
4

Uroporfirinogen IIIcosintaza

II Porfiria eritropoietic\ congenital\ (eritropoietic\) urin\: PBGuroporfirinogen^


f\r\ fotosensibilitate

Uroporfirinogen III
Uroporfirinogendecarboxilaza

III Porfiria cutanat\ tardiv\ (hepatic\)


Fotosensibilitate

urin\: uroporfirin\^
PBG-

Coproporfirinogen III
Coproporfirinogenoxidaza

IV Coproporfiria ereditar\ (hepatic\)


Fotosensibilitate, dureri abdominale,
deregl\ri neuropsihice

Protoporfirinogen III
V Porfiria mixt\ (hepatic\)
7 ProtoporfirinogenFotosensibilitate, dureri abdominale,
oxidaza
deregl\ri neuropsihice

urin\: uroporfirinogen^
PBG^
fecale: coproporfirinogen^

urin\: PBG^
uroporfirinogen^
fecale: protoporfirinogen^

Protoporfirina III (IX)


8

Ferochelataza
Fe2^

VI Protoporfiria (eritropoietic\)
Fotosensibilitate

fecale: protoporfirin\^
eritrocite: protoporfirin\^

Hem
Protein\
Hemoprotein\

9.2. Degradarea hemoglobinei (Bilirubinogenez)


Bilirubina se formeaz n organism prin desfacerea oxidativ a inelului
porfirinic din Hb i alte hemoproteine. Locul de formare al bilirubinei este
reprezentat de celulele sitemului reticuloendotelial din splin, ficat (celulele
Kupfer), ganglioni limfatici i macrofagele din diverse esuturi.
Sursa principal de bilirubin este Hb hematiilor mbtrnite.
Mecanismul enzimatic al formrii bilirubinei implic mai nti aciunea
unui sistem enzimatic microsomal hemoxigenaza microsomal, care n prezena
oxigenului molecular i a NADPH desface nucleul porfirinic din hem cu eliberarea

148

Fe, C sub form de CO i biliverdin. n activarea O 2 intervine citocromul


P450, iar pentru transferul H de pe NADPH intervine o flavoprotein. Fe este
preluat de feritin n vederea reutilizrii lui n resinteza hemoproteinelor. Feritina
poate stoca pn la 4.500 Fe 3+/molecul.
Biliverdina, compus colorat intens n verde, este n continuare redus sub
aciunea biliverdin-reductazei la bilirubin. Alturi de bilirubin se formeaz i
mici cantiti de compui mono- i dipirolici bilifuxina i mezobilifuxina.
Viteza de formare a bilirubinei depinde de activitatea hemoxigenazei
microsomale, care este etapa limitant a procesului. Biliverdin-reductaza este
totdeauna n exces, de aceea nu se acumuleaz biliverdin (pigment verde).

Bilirubina format n celulele sitemului reticulo-endotelial este un pigment


galben, insolubil n ap. Fiind liposolubil, poate ptrunde cu uurin prin
membranele celulare de natur lipoproteic.
Bilirubina difuzeaz din celule n snge unde se fixeaz pe albumin,
formnd fracia plasmatic a bilirubinei cunoscut sub denumirea de bilirubin
indirect sau neconjugat.
Prin fixarea pe albuminele serice, bilirubina este reinut n lumenul vaselor
i transportat la ficat. Aici, datorit fenestraiilor largi ale capilarelor sinusoidale,
bilirubina este preluat de pe albumin de ctre celulele hepatice. Procesul de
captare este facilitat de existena unor proteine transportoare ligandine proteina
I i proteina Z. Datorit faptului c bilirubina este liposolubil, ea ar putea difuza
prin membrana hepatocitului i s se rentoarc n plasm. Acest proces este blocat
n momentul n care bilirubina este conjugat cu acidul glicuronic. Conjugarea este
catalizat de bilirubin-glucurono-transferaza, enzim care particip la reacie sub
form activ, localizat la nivelul microzomilor din hepatocit. Acidul glucuronic,
sintetizat din glucoz se activeaz la acid UDP-glucuronic (UDPGA).

149

Formarea bilirubin-diglucuronidului poate avea loc i n regiunea


canalicular biliar a membranei hepatocitare printr-o UDP-glucuronil-transferaz
similar.
O mic parte din bilirubin rmne sub form de monoglucuronid. Prin
conjugare bilirubina devine hidrosolubil, fapt ce favorizeaz eliminarea ei prin bil
i meninerea ei n soluie pe cile biliare intra- i extrahepatice.
Secreia bilei n canaliculele biliare este un proces biologic activ,
energodependent i saturabil. Preluarea bilirubinei conjugate se realizeaz tot prin
participarea unei proteine acceptoare specifice. Eliminarea bilirubinei n bil, mai
ales curgerea ei prin cile biliare, depinde i de fluxul apos al bilei.
Un adult sntos elimin zilnic prin bil 200 300 mg bilirubin (1,0-1,2
mg/dL ser). n poriunea final a ileonului i mai ales n colon are loc un proces de
hidroliz a bilirubinei conjugate sub aciunea unei -glicuronidaze bacteriene i n
acelai timp are loc o reducere a bilirubinei rezultnd o serie de compui
tetrapirolici incolori urobilinogeni (stercobilinogeni). Urobilinogenul este forma
de eliminare care n contact cu aerul este oxidat la urobilin (stercobilin),
colorat.

150

La nivelul colonului, o mic cantitate de urobilinogen se reabsoarbe, este


trecut n circulaie, ajunge la ficat i excretat n bil, proces dependent de energie
(circuit enterohepatic). O mic parte (0-4 mg/24h) scap n vena suprahepatic i
apare n urin, unde prin oxidare trece n urobilin. Cantitile acestea de
urobilinogen nu pot fi decelate cu reactiv Erlich.
n cazul formrii de bilirubin n exces (icter hemolitic) i a eliminrii
crescute de pigmeni biliari n intestin se formeaz cantiti mari de urobilinogen
care pot depi capacitatea de captare i excreie a hepatocitelor i n consecin,
apar n urin cantiti detectabile. Urobilinogenuria apare i n caz de afeciuni
hepatocelulare, cnd mecanismul activ de captare i transport a urobilinogenului de
ctre hepatocite este perturbat. Creteri ale eliminrilor urinare de urobilinogen au
loc i n cazuri de proliferare microbian intestinal, n unele cazuri de constipaie,
cnd prin stagnarea coninutului intestinal, crete posibilitatea de absorbie a
urobilinogenului din colon.
Cantitatea maxim de urobilinogen urinar se depisteaz ntre orele 14-16
probabil datorit faptului c dup masa de prnz se ajunge la concentraia cea mai
mare de bil n intestin.
Eliminarea urinar de urobilinogen se face prin filtrare glomerular i
secreie tubular. Se poate spune deci c urobilinogenuria depinde de cantitatea
absorbit n intestin, de funcia hepatic i de funcia renal.
Bilirubina direct i indirect
Msurarea bilirubinei directe i indirecte servete pentru stabilirea naturii
icterului.
- Icter prehepatic (icter hemolitic) - n unele boli sau n intoxicaii se
produce degradarea unor cantiti mai mari de eritrocite i deci eliberarea unei
cantiti mai mari de hemoglobin. Bilirubina indirect care se formeaz n exces,
transportat la ficat depete capacitatea de conjugare a celulei hepatice. Rezultatul
este creterea concentraiei de bilirubin n plasm, nsoit de creterea produciei
de urobilinogen, ce apare n cantiti mari n urin. Astfel de situaii se ntlnesc i
la nou-nscuii cu incompatibilitate de Rh. De obicei aceti copii sunt prematuri i

151

pe lng problemele hemolitice de cele mai multe ori prezint i deficit de


enzime necesare pentru glucuronoconjugare. Creterea bilirubinei poate depi de
16-20 ori valoarea normal i este n principal indirect.
- Icter hepatic. n bolile difuze ale ficatului, cum ar fi hepatitele i cirozele,
celulele hepatice pierd capacitatea de captare a bilirubinei din snge i capacitatea
de conjugare i de aceea nivelele bilirubinei sunt de obicei crescute, cu creterea
fraciunii indirecte, dar uneori poate crete i bilirubina direct deoarece lezarea
celulei hepatice permite totui trecerea glucuronidului n circulaie. Urobilinogenul
este crescut.
- Icter posthepatic (icter prin obstrucie) Blocarea cilor biliare mpiedic
bilirubina de a prsi celula hepatic. Consecina primar este diminuarea formrii
urobilinogenului i astfel absena lui n urin. Fecalele sunt decolorate din cauza
lipsei stercobilinei. Formarea continu a bilirubinei duce la creterea bilirubinei
totale n ser (la nceput, bilirubina direct, care apare i n urin), ducnd la apariia
unui pigment brun n urin. n snge se va gsi att bilirubin direct ct i
indirect.
Bilirubina care apare n urin este n cea mai mare parte direct, probabil din
cauza faptului c n urin se excret numai bilirubin conjugat, mai solubil. De
subliniat c bilirubina n urin apare atunci cnd exist o cretere a bilirubinei
directe n ser.
Dozarea bilirubinei totale este considerat util i n detectarea unui icter
latent, cnd valorile sunt cuprinse ntre 1,5-2 mg/dL ser.
Hiperbilirubinemia poate fi ntlnit i n alte stri de boal care implic
hemoliza, cum ar fi bolile infecioase, anemia pernicioas, sau hemoragiile.
Evoluia unui icter manifest poate fi urmrit prin dozri repetate ale
bilirubinei n ser:
- creterea concentraiei bilirubinei n ser este semn nefavorabil,
- scderea progresiv a bilirubinei serice indic o ameliorare a bolii
hepatice sau a obstruciei cilor biliare.

152

Abrevieri folosite in text


A = Adenin
-AA = Amino acid
ACAT = Acil-CoA: Colesterol-acil-transferaza
ACP = Proteina transportoare de acil (Acyl carrier protein)
ACTH = Corticotropin
ADN = Acizi deoxiribonulcleic
ADH = Alcool dehidrogenaz
ADP = Acid adenozin difosforic
AGL = Acizi grai liberi
Ala = Alanin
ALT (GPT) = Alanin transaminaz
AMP = Acid adenozin monofosforic
AMPC = Adenozin monofosfatul ciclic (35-AMP)
APRT = Adenozin-fosforibozil transferaz
Arg = Arginin
ARN = Acizi ribonulcleic
ARNm = ARN mesager
ARNr = ARN ribozomal
ARNt = ARN de transfer
AST (GOT ) = Aspartat transaminaz
Asn = Asparagin
Asp = Acid aspartic
ATP = Acid adenozin trifosforic
BAIB = Acid aminoizobutiric
C = Citozin
CBP = Proteina care leag calciul (Calcium binding protein )
CDP = Citidin difosfat
Cit. = Citocrom
CoA (CoASH) = Coenzima A
CoQ = Coenzima Q (ubichinon)
CPK (CK) = Creatin fosfo kinaz
CTP = Citidin trifosfat
Cys = Cistein
1,25-(OH)2-D3 = Calcitriol (1,25 dihidroxi D3)
DIT = Diiodotirozin
DOPA = Dihidroxifenilalanin
1,3 DPG = 1,3 Difosfoglicerat

153

DHAP = Dihidroxiaceton fosfat


F1,6 DP = Fructoz 1,6 difosfat
F1,6 DP-aza = Fructoz 1,6 difosfataz
F6P = Fructoz-6-fosfat
F6P-aza = Fructoza-6-fosfataz
FAD = Flavin adenin dinucleotidul
FADH2 = Flavin adenin dinucleotidul forma redus
FFK = Fosfo-fructo kinaz
FH4 = Acid tetrahidrofolic
FMN = Flavin adenin mononucleotid
G = Guanin
GA3P = Gliceraldehid-3 fosfat
GA3-PDH = Gliceraldehid-3 fosfat dihidrogenaz
G6P = Glocoza-6-fosfat
G6P aza = Glocoz-6-fosfataz
GDP = Guanozin difosfat
Glu-DH = Glutamat dehidrogenaz
Gln = Glutamin
Glu = Acid glutamic
Gla = Acid -carboxi glutamic
Gly = glicin
GK = glucokinaz
GOT (AST) = Glutamic oxalacetic transaminaz
GPT (ALT) = Glutamic piruvic transaminaz
GSH = Glutation (forma redus)
GSSG = Glutation (forma oxidat)
GSH -Px= Glutation peroxidaz
GTP = Guanozin trifosfat
Hb = Hemoglobin
HDL = Lipoproteine cu densitate mare
HGPRT = Hipoxantin-fosforibozil-transferaz
HK = Hexokinaz
HMG-CoA = Hidroxi-metil-glutaril-CoA
Hyl = Hidroxilizin
Hyp = Hidroxiprolin
Hys = Histidin
ICDH = Izocitrat dehidrogenaz
Ile = Izoleucin
IgA = Imunoglobulina A

154

IgD = Imunoglobulina D
IgE = Imunoglobulina E
IgG = Imunoglobulina G
IgM = Imunoglobulina M
-KA = Ceto acid
-KG = Acid ceto glutaric
-KGDH = Cetoglutarat dehidrogenaz
LCAT = Lecitin:Colesterol- acil-transferaza
Leu = Leucin
LDL = lipoproteine cu densitate scazut
LDH = Lactat dehidrogenaz
Lys = Lizin

MAO = Monoamin-oxidaz
MDH = Malat dehidrogenaz
Met = Metionin
MIT = Monoiod tirozin
N5-CH3-FH4 = N5-CH3-tetrahidrofolat
N5-formil-FH4 = N5-formil-FH4-tetrahidrofolat
N10-CH3-FH4 = N10-CH3-FH4 -tetrahidrofolat
N10-metenil-FH4 = N10-metenil-FH4 tetrahidrofolat
NAD (NAD+) = Nicotin adenin dinucleotid(forma oxidat)
NADH (NADH + H+) = Nicotin adenin dinucleotid (forma redus)
NADP (NADP+) = Nicotin adenin dinucleotid fosfat (forma oxidat)
NADPH (NADPH + H+) = Nicotin adenin dinucleotid fosfat (forma redus)
Pa = Fosfat anorganic
PDH = Piruvat dehidrogenaz
PEP = Fosfoenol piruvat
PEP-carboxikinaza = Fosfoenol piruvat-carboxikinaza
3-PG = Acid 3-fosfogliceric
PGK = Fosfoglicerat kinaz
PGM = Fosfogliceratmutaz
Phe = Fenilalanin
PHI = Fosfohexo-izomeraz
PK = Piruvat-kinaz
PKU = Fenilcetonurie
Pro = Prolin
PRPP= Fosforibozil-pirofosfat

155

PTH = Parathormon
OCT = Ornitin carbamoil-transferaz
QPRT = Chinoleat-fosforibozil-transferaz
RBP = Proteina de legare a retinolului(Retinol binding protein)
R-1-P = Riboz-1-fosfat
SAM = Sulf-adenozil-metionin
SAH = Sulf-adenozil-homocistein
Ser = Serin
SHMP = untul hexoz-monofosfatilor
SNC = Sistem nervos central
Succ.DH = Succinil dehidrogenaz
T = Timin
Thr = Treonin
Trp = Triptofan
TPP = Tiamin pirofosfat
Tyr = Tirozin
U = Uracil
UDP = Uridin difosfat
UDP-G = Uridin difosfat-glucoza
UTP = Uridin trifosfat
U.V. = Radiaii ultraviolete
Val = Valin
VLDL = lipoproteine cu densitate foarte scazut
XO = Xantin oxidaz