Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
CUPRINS
1. Proteine
2. Enzime
3. Vitamine
4. Energetica biochimic
5. Metabolismul glucidic
6. Metabolismul lipidic
7. Metabolismul proteic
8. Metabolismul nucleotidelor purinice si pirimidinice
9. Metabolismul cromoproteinelor
9.1. Biosinteza hemoglobinei
9.2. Degradarea hemoglobinei (bilirubinogenez
Abrevieri folosite n text
1. PROTEINE
1.1.AMINOACIZII
Prin hidroliza proteinelor se formeaz 20 de -aminoacizi. Acetia sunt compui
cu greutate molecular mic care conin dou grupri funcionale, carboxil i amino,
legate de acelai atom de carbon ( C ).
Formula general a unui aminoacid este:
R
CH COOH
NH2
Glicina (Glicocol)
Gly (G)
Acid aminoacetic
NH2
CH3 CH COOH
NH2
Alanina
Ala (A)
Acid amino-propionic
Valina
Val (V)
Acid amino-izovalerianic
Leucina
Leu (L)
Acid -amino-izocaproic
Izoleucina
Ile (I)
Acid -amino--metilvalerianic
CH3 CH CH COOH
CH3 NH2
NH2
Asparagina
Asn (N)
-amida acidului
amino-succinic
Acid glutamic
Glu (E)
Acid -amino-glutaric
Glutamina
Gln (Q)
-amida acidului
amino-glutaric
CH COOH
NH2
H2N
Lizina
Lys (L)
Acid ,-diaminocarpoic
H2N
Hidroxilizina
Hyl
Acid --diamino-hidroxi-n-carpoic
CH2
CH2
H2N
(CH2)3 CH COOH
NH2
CH
(CH2)2 CH COOH
OH
NH2
Histidina
Hys (H)
Acid -amino-imidazolil-propionic
CH2 CH COOH
HN
NH2
Treonina
Thr (T)
Acid -amino--hidroxin-butiric
CH3 CH CH COOH
OH NH2
NH2
CH2 CH COOH
SH
Acid --ditio-(-aminopropionic)
NH2
CH2 CH COOH
NH2
S CH2 CH COOH
NH2
Metionina
Met (M)
Acid -amino--metiltio-n-butiric
NH2
CH3
Fenilalanina
Phe (F)
Acid -amino--fenilpropionic
CH2 CH COOH
NH2
Tirozina
Tyr (Y)
HO
CH2 CH COOH
NH2
Triptofan
Trp (W)
Acid -amino--(3)
indolil-propionic
CH2 CH COOH
NH2
VII. Iminoacizi
Prolina
Pro (P)
Acid
carboxilic
pirolidin-2N
H
COOH
HO
Hidroxiprolina
Hyp
N
H
Acid 4-hidroxi-pirolidin2-carboxilic
COOH
L glicerinaldehida
COOH
H2N C H
R
L aminoacid
+
H3N C H
R
Cnd un astfel de ion se dizolv n ap, el poate aciona fie ca un acid (donor de
protoni), fie ca o baz (acceptor de protoni):
Ca un acid: H3N+-CH(R)-COOH+ + H2N-CH(R)- COOCa o baza:
H3N+-CH(R)-COO- + H+
H3N+-CH(R)-COOH
Substanele care au astfel de proprieti se numesc amfotere sau amfolii.
Existenta ionului bipolar explic utilizarea soluiilor de aminoacizi drept soluii tampon.
Dac la soluia unui aminoacid se adaug un acid tare, protonii si vor fi neutralizai de
gruprile carboxil ale aminoacidului, iar dac se adaug o baza tare, gruprile hidroxil
vor fi neutralizate de gruprile NH3+, astfel nct pH-ul soluiei nu se modific.
c) Toi aminoacizii izolai din proteine absorb slab radiaiile din domeniul
ultraviolet (220 nm). Triptofanul, tirozina i fenilalanina, datorit nucleului aromatic,
dau absorbie specific la 280 nm, proprietate ce st la baza unei metode de dozare a
proteinelor.
1.1.2. Proprieti chimice
Proprietile chimice ale aminoacizilor sunt datorate att celor doua grupri
funcionale ct i prezenei radicalului R. Unele din aceste reacii se petrec i n
organism, altele sunt utilizate n studiul proteinelor (identificarea aminoacizilor din
hidrolizatele proteice, stabilirea secvenei de aminoacizi n proteine, identificarea
aminoacizilor specifici pentru funcia proteinelor, modificarea chimic a resturilor de
aminoacizi din moleculele proteice n vederea modificrii activitii lor biologice),
precum i pentru sinteza lanurilor polipeptidice n laborator.
1- Reacia cu acidul azotos, din care rezulta hidroxiacizi (reacie utilizat
pentru dozarea aminoacizilor prin metoda van Slyke).
R
CH COOH + HNO2
HCl
NH2
CH COOH + H2O + N2
OH
COOH + 3 CH3I
R CH COO
+N(CH )
3 3
CH
NH2
COOH + HCHO
CH
COOH + H2O
N CH2
CH2
CH2
NH2
CO
NH
CH CO
CH2
NH CH2 COOH
SH
9
R1
(CO
CH
R
NH) n
;
+
H3N
CH
NH
R3
CH
CH
CH .............CH
R2
R4
COO
Structura secundar
Structura secundar reprezint cel de-al doilea nivel de organizare structural a
proteinelor, reprezentnd aranjarea spaial a moleculei proteice pe o singur\ ax\. Acest
lucru este posibil datorit legturilor de hidrogen formate ntre resturile carboxil i
amino aparinnd legturilor peptidice.
Cea mai mare contribuie la elucidarea structurii secundare a proteinelor au avut-o
lucrrile lui Pauling si Corey care au elaborat dou modele teoretice: modelul helicoidal
(spiralat) i modelul straturilor pliate, modele care explic destul de bine proprietile
fizico-chimice i biologice ale moleculelor proteice.
Structura sau modelul helicoidal rezult prin spiralarea catenei
polipeptidice n jurul unui cilindru imaginar.
n funcie de orientarea aminoacizilor, elicea poate fi de tip -dreapta, care are
sensul de rotaie al unui urub cu filetul spre dreapta i de tip -stnga cu sensul de
rotaie spre stnga. n ambele forme radicalii R ai aminoacizilor sunt proiectai spre
exteriorul elicei; n elicea dreapta radicalul R se afl n poziie trans fa de oxigen,
motiv pentru care aceasta forma este mai stabil.
Helixul de tip are forma unei scri n spiral. nalimea fiecrei trepte este de
1,5 , iar o spir conine 3,6 resturi de aminoacizi, ceea ce face ca distana dintre spire
s fie de 5,6 .
10
n modelul paralel (a) toate lanurile polipeptidice sunt aezate paralel, cu gruprile R
orientate n acelai sens, n timp ce n straturile antiparalele (b) catenele polipeptidice sunt
aezate fa n fa. Spre deosebire de -helix, n structura de tip , legturile de hidrogen sunt
aproape perpendiculare pe axa lanului polipeptidic.
Structura . Colagenul.
n afara celor dou modele caracteristice pentru structura secundar a proteinelor
descrise mai sus , mai exist o structur particular ntalnit n colagen, o proteina fibrilar,
insolubil i elastic prezent n esuturile animale (esut conjunctiv, tendoane, ligamente,
cartilagii, piele, oase etc.) i care reprezint aproximativ 25% din proteinele corpului.
11
polipeptidic.
Coninutul n iminoacid (prolina i hidroxiprolina) este important pentru
stabilirea termic a colagenului; colagenul animalelor cu snge cald, cel mai bogat
n prolin i hidroxiprolin, este i cel mai stabil termic.
Capetele lanurilor polipeptidice sunt nespiralate i datorit flexibilitii pot
forma legturi specifice ntlnite numai n aceste tipuri de proteine.
Ca i n cazul fibrinei, molecula de colagen este stabilizat prin legturi
ncruciate realizate intramolecular i intermolecular ntre resturile de lizin situate
n poriunile nespiralate ale moleculei de tropocolagen.
Numrul acestor legturi variaz cu funcia fiziologic i vrsta colagenului.
Astfel, colagenul din tendonul lui Achile, la obolanii maturi, are un numr foarte
12
mare de astfel de legturi, n timp ce n colagenul din coad care este flexibil,
numrul legturilor este mai mic.
O caracteristic interesant a structurii colagenului este faptul c ntre
capetele moleculelor de colagen se gsesc spaii libere care joac un rol nsemnat n
formarea osului, ntruct n aceste spaii se fixeaz calciu, sub form de
hidroxiapatit (fosfat bazic de calciu).
Elastina, constituentul major al pereilor vaselor sanguine i al ligamentelor,
are un coninut ridicat de glicin, prolin i acizi aminai cu grupri nepolare
(alanin, valin, leucin i izoleucin), dar conine foarte puin hidroxiprolin i
acizi aminai polari i nu conine deloc hidroxilizin. Elastina matur con ine multe
legturi ncruciate ce o face aproape insolubil i din acest motiv, foarte greu de
analizat.
Structura teriar reprezint interaciunea spaial ntre segmente care
nu sunt vecine n lanul polipeptidic, avnd ca rezultat o structur tridimens ional,
globular. Ea este caracteristic n special proteinelor globulare, a cror catene
macromoleculare sunt strnse sub forma unor cilindri elipsoidali cu o lungime care
nu depete de 2-6 ori diametrul lor. Este rezultatul interaciunii dintre radicalii R
ai resturilor de aminoacid din lanul polipeptidic. Forele de atracie implicate n
formarea structurii teriare sunt datorate urmtoarelor tipuri de legturi:
a) Legturi de hidrogen care pot fi stabilite ntre gruparea fenolic a tirozinei
i o grupare carboxil de la acidul glutamic sau acidul aspartic, sau ntre radicalul
imidazolic al histidinei i gruparea hidroxilic a serinei.
b) Legturi ionice ntre grupele carboxil ale acizilor dicarboxilici i grupele
amino ale acizilor diaminai. Realizarea acestor legturi este posibil atunci cnd
distanele dintre atomi sunt cuprinse ntre 2 i 3,1 . Studii de difracie a razelor X
au evideniat c n realitate se formeaz un numr mai mic de legturi ionice,
datorit faptului c majoritatea gruprilor care ar putea realiza aceste legturi intr
n interaciune cu solventul. ntr-adevr, n soluie, gruprile polare ale proteinelor
sunt orientate spre exteriorul moleculei, ceea ce face ca proteinele s fie solubile i
s se comporte ca electroliii.
c) Legturi nepolare prin fore van der Waals care se stabilesc ntre radicalii
hidrocarbonai al alaninei, fenilalaninei, leucinei etc. Distanele dintre atomii care
particip la astfel de legturi sunt cuprinse ntre 3,1 i 4,1 . Aceste legturi sunt
cele mai importante pentru meninerea proteinei n structura teriar. Resturile
nepolare, hidrofobe se gsesc n interiorul ghemului rezultat prin ncolcirea
lanului polipeptidic avnd ca efect stabilizarea din punct de vedere termodinamic a
moleculei, mai mult dect n cazul n care aceste resturi ar fi orientate spre mediul
exterior. Din acest motiv lanurile peptidice introduse n soluie apoas se
ncoltcesc spontan aa fel nct resturile nepolare se situeaz n interiorul
ghemului, iar gruprile polare rmn pe suprafaa moleculei.
d) Legturi disulfidice S-S-, covalente, pot contribuie la meninerea
structurii teriare a proteinelor globulare limitnd tendina de depliere a moleculei,
ns contribuia lor este mic, deoarece sunt puine.
13
14
15
Asamblarea
subunitilor
n structura cuaternar este posibil datorit
existenei unor zone complementare spaial si electric pe suprafeele subunitilor.
Interaciunile dintre subuniti prin suprafeele complementare sunt caracterizate
prin fenomenul de cooperare, adic primele contacte odat realizate, favorizeaz
formarea celorlalte.
Modificarea unui dintre protomeri (combinarea cu un compus oarecare) se
resimte la nivelul ntregii molecule oligomere, fiind deranjat structura cuaternar i
deci, funcia biologic a proteinei. Acest fenomen st la baza mecanismului de reglare
alosteric a activitii enzimelor.
Formarea proteinelor complexe confer proteinelor proprieti noi, fiecare
subunitate catalizeaz o etap dintr-o cale metabolic. Eficiena crete mult deoarece
intermediarii nu sunt pierdui n reacii colaterale, procesul desfurndu-se n flux
continuu. De exemplu, piruvat dehidrogenaza este format din patru subuniti: trei
subuniti catalitice (trei enzime distincte) i a patra este subunitate reglatoare.
O protein oligomer important este hemoglobina, responsabil de transportul
oxigenului la vertebrate. Structura hemoglobinei a fost elucidat de Perutz prin difracia
razelor X i spectre ORD (dispersia rotaiei optice).
Dou lanuri polipeptidice din hemoglobin sunt foarte asemntoare cu cel al
mioglobinei att n privina structurii primare ct i teriare. Lanul din hemoglobin
conine 141 resturi de aminoacizi, iar lanul conine 146 resturi de aminoacizi.
ntre lanurile identice se realizeaz legturi polare ntre gruprile terminale
+
NH3 i COO , iar ntre lanurile diferite, legturi de hidrogen i Van der Waals pe
poriuni mai mari.
16
17
18
Proprietile
biochimice
i imunologice. Proteinele ndeplinesc n
organism diferite roluri cum ar fi, rol catalitic, de rezerv, transportor, protector, structural
etc.
1.3.3. Clasificarea proteinelor
Proteinele se clasific n general dup forma moleculelor i dup compoziia lor
chimic.
n clasificarea proteinelor dup forma molecular deosebim:
proteine globulare (sferoproteine) care au form aproape sferic (ovoidal) i
sunt, n general, solubile n ap, n soluii diluate de acizi, baze i sruri. Din aceast clas
fac parte albuminele, globulinele, histonele, protaminele i prolaminele;
proteine fibrilare (scleroproteine), caracterizate prin structur fibroas, de
forma unui elipsoid ntins cu raportul dintre axe de cel puin 1 : 100, sunt foarte greu
solubile n ap, au vscozitate mare i putere de difuzie mic. Aceste proprieti explic
prezena lor n esuturile de susinere. Din aceast clas fac parte colagenul, elastina,
fibrinogenul, miozina, actina, keratina etc.
Dup compoziia chimic, proteinele se pot clasifica n:
proteine simple (holoproteine), constituite din aminoacizi;
proteine conjugate (heteroproteine), conin pe lng aminoacizi i o grupare
prostetic. n funcie de natura acestei grupri, heteroproteinele se mpart n fosfoproteine,
glicoproteine, lipoproteine, metaloproteine, nucleoproteine i cromoproteine.
1.3.3.1. Holoproteine
Albuminele (serumalbumina, lactalbumina, ovalbumina etc.) sunt solubile n
ap, coaguleaz la nclzire, au pHi mai mare dect 7 i pot fi precipitate cu o soluie
saturat de sulfat de amoniu. Greutatea molecular a albuminelor este cuprins ntre 35.000
i 75.000. Albuminele intr n constituia proteinelor plasmatice (55%), participnd la
transportul glucidelor, lipidelor, hormonilor, srurilor biliare, medicamentelor i ionilor
(HCO3-, NO3-, citrat, Ca2+, Mg2+, Zn2+ etc.). Datorit masei moleculare mici i concentraiei
mari, albuminele serice asigur 80% din presiunea coloidosmotic a plasmei.
Globulinele sunt proteine globulare insolubile n ap, solubile n soluii de NaCl
5%. Prin nclzire coaguleaz. Sunt rspndite att n regnul vegetal ct i animal. Dintre
globulinele de origine animal amintim globulinele din snge cu greutate molecular de
aproximativ 500.000. Din totalul proteinelor plasmatice, 35-45% sunt globuline. Prin
electroforez au fost separate trei fraciuni (, i ), iar prin imunoelectroforez au fost
puse n eviden peste 30 fraciuni proteice. Fiecare fraciune ndeplinete un rol bine
definit; toate particip la transportul glucidelor, -, -globulinelelor, la transportul
lipidelor, iar -globulinele au rol n imunitate, motiv pentru care se numesc i
imunoglobuline. Imunoglobulinele sau anticorpii apar n serul sanguin sau n alte celule ca
rspuns la ptrunderea n organism a unei proteine sau a unei macromolecule provenit de
la alt specie, compus care poart numele de antigen.
Structura de baz a anticorpilor a fost elucidat de Porter n 1960. Anticorpii sunt
formai din dou lanuri polipeptidice grele (H), cu greutate molecular 53.000-75.000 i
19
dou lanuri uoare (L), cu greutate molecular 23.000, unite prin legturi
disulfidice. Lanurile grele au o regiune flexibil care permite rotirea capetelor aminoterminale cu un unghi variabil, ceea ce permite legarea antigenului.
Prin digestia cu papain molecula de imunoglobulin (IgG) poate fi divizat n trei
fragmente active cu greutate molecular 50.000. Papaina cliveaz lanurile H n partea
constant (C). Dou dintre fragmentele obinute pot lega anticorpul i din acest motiv au fost
notate Fab (F de la fragment i ab de la antigen binding), iar al treilea fragment, care leag
complementul, Fc.
IgG (150.000)
Papaina
20
polipeptidice ale Ig sunt ataate resturi glucidice (IgG conine dou resturi
monozaharidice i IgM trei resturi).
Scleroproteinele sunt proteine fibrilare, de consisten solid, ntlnite numai n
regnul animal, avnd rol de susinere i protecie, au un coninut mai sczut de azot fa de
alte proteine, dar au un coninut crescut de sulf. Scleroproteinele sunt total insolubile n ap,
n soluii acide i bazice i sunt stabile fa de aciunea enzimelor proteolitice.
Dup rolul pe care l ndeplinesc i dup esutul n care au fost identificate
scleroproteinele se mpart n:
Keratine se gsesc n epiderm, pr, unghii, pene, coarne etc. i au rol de
protecie. Au un coninut mare de sulf (2-5,7%) datorit proporiei mari de cistein. Graie
prezenei legturii disulfidice keratinele au o rezisten mecanic mare, elasticitate i
rezisten la aciunea enzimelor proteolitice i sunt insolubile.
Colagenele au coninut mare de glicocol, prolin, hidroxiprolin i hidroxilizin,
avnd o structur cu totul caracteristic, adaptat funciei esuturilor din care fac parte:
tendoane, ligamente, oase, cartilagii, piele. Ele reprezint 25% din proteinele corpului
omenesc.
Colagenele sunt insolubile n ap, dar prin fierbere ndelungat se transform n
gelatin solubil, n care o parte din legturile peptidice au fost hidrolizate. Colagenele sunt
rezistente la aciunea enzimelor proteolitice (cu excepia colagenazei), n timp de gelatina
poate fi hidrolizat cu pepsin i tripsin.
Elastinele se aseamn cu colagenul, ntlnindu-se alturi de acestea n esutul
conjunctiv, dar ele nu pot fi gelificate. Coninutul ridicat de glicocol, alanin i valin
imprim acestei proteine o elasticitate comparabil cu a cauciucului. Elastinele sunt
hidrolizate specific de elastaza pancreatic.
Fibrinogenul este o protein fibrilar format din ase lanuri polipeptidice unite
prin puni disulfidice. Din cauza dimensiunilor mari ale moleculei, n condiii fiziologice,
fibrinogenul trece n cantiti foarte mici prin peretele capilarelor n lichidul interstiial. n
inflamaii, din cauza alterrii permeabilitii capilarelor, trecere fibrinogenului este mult
facilitat.
Fibrinogenul este sintetizat n ficat i este degradat n macrofage i are timpul de
njumtire de 3-5 zile. Sub aciunea enzimatic a trombinei i a ionilor de calciu,
fibrinogenul se transform ntr-o protein fibrilar insolubil, denumit fibrin. Fibrina
formeaz o reea spaial n care sunt nglobate elementele figurate ale sngelui, formnd
cheagul sanguin.
Miozina se gsete n cantitate de 40-60% n miofibrele esutului muscular.
Miozina este insolubil n ap, dar solubil n soluii alcaline diluate. n structura miozinei
intr aminoacizi diaminici i dicarboxilici ceea ce explic prezena a numeroase grupri
polare ce i confer capacitatea de a fixa ioni metalici.
Prin combinare cu actina n proporie de 3/1, formeaz actomiozina.
Actina reprezint 15% din proteinele musculare. Att miozina ct i actina au
activitate ATP-azic i joac rol esenial n contracia muscular.
Tropomiozina reprezint 2,5% din totalul proteinelor musculare, avnd rol n
contracia muscular.
21
1.3.3.2. Heteroproteine
Fosfoproteinele sunt proteine conjugate care au drept grupare prostetic acidul
fosforic legat prin legtur esteric de gruparea hidroxil a unui rest de serin din molecula
proteic. Acidul fosforic se gsete sub forma srii sale de Ca sau K.
NH CO CH NH CO
_
CH2
O
O P O Ca2+
_
O
NH CO CH NH CO
_
CH2 O K+
O P O
_
O K+
22
Ele ndeplinesc diverse funcii biologice, cum ar fi: transportul de oxigen, transportul de
electroni, cataliza enzimatic.
Specificitatea de funcie a acestor proteine se datoreaz apoproteinei legate de nucleul
porfirinic. Sunt reprezentate de mioglobin, hemoglobin, citocromi, hemenzime.
Porfirinele sunt derivai de porfirin, un compus ciclic format din patru nuclee
pirolice unite prin grupri metinice (-CH=).
Prin substituirea atomilor de hidrogen din poziiile 1-8 cu diferii radicali se obin
porfirinele, care se denumesc i se clasific n funcie de aceti substitueni n: etioporfirine,
mezoporfirine, protoporfirine i coproporfirine. Dintre acestea cel mai des ntlnite sunt
protoporfirinele care conin patru grupri metilice, dou grupri vinil i dou resturi de acid
propionic. Datorit celor trei tipuri de substitueni din molecul, pot exista 15 forme izomere
de protoporfirine. Cea mai nsemnat dintre ele este protoporfirina IX (1,3,5,8-tetrametil-2,4divinil-6,7-dipropionil-porfirina).
Porfirinele posed un sistem de duble legturi conjugate ce confer acestor compui
stabilitate, culoare roie-violet, absorbia caracteristic i fluorescen. Reducerea gruprilor
metinice duce la formarea de compui necolorai, numii porfirinogeni. Prin intermediul
azotului pirolic, porfirinele pot fixa ioni metalici cum sunt: Fe, Mg, Zn, Cd, Co, Cu, Mn, V
sub form de compleci chelatici. Un astfel de complex al protoporfirinei IX cu Fe2+ se
23
numete protohem sau hem, un complex similar cu Fe3+ poart numele de hemin sau
hematin.
Protoporfirina IX
Hem
Fierul are ase poziii de coordinare care sunt ndreptate spre vrfurile unui
octoedru regulat. n hem, atomul de Fe se leag de inelele II i IV prin legturi
ionice, realizate prin ndeprtarea celor doi atomi de H de la azot sub form de H +
i de dou legturi coordinative cu atomii de azot din ciclurile I i III. Celelalte
dou poziii, 5 i 6, sunt perpendiculare pe planul determinat de cele patru legturi
ale fierului cu nucleele pirolice i sunt libere. Dac aceste poziii sunt ocupate,
compusul rezultat se numete hemocrom sau hemocromogen.
Hemul este situat ntr-o cavitate a moleculei proteice. Cele dou resturi
propionat, ionizate la pH fiziologic, sunt orientate spre suprafa, iar restul
hemului n interiorul cavitii, nconjurat de aminoacizi nepolari, cu excepia a
dou resturi de histidin prin care se face legtura cu partea proteic. Un rest de
histidin situat n segmentul F (HisF 8) numit histidin proximal se fixeaz pe
poziia 5 de coordinare a Fe 2+ . Cellalt rest HisE 7, numit histidin distal se leag
de hem prin intermediul unei molecule de ap (formele neoxigenate de mioglobin
i hemoglobin). Legtura este labil i se desface uor n procesul de fixare a
oxigenului, acesta nlocuind molecule de ap (formele oxigenate ale mioglobinei i
hemoglobinei).
24
grupare prostetic (hemul), dar difer n privina prii proteice, globina. Globina
imprim specificitatea diferit a hemoglobinelor.
Structura hemoglobinei a fost elucidat de Perutz prin difracia razelor X i
spectre ORD (dispersia rotaiei optice). Lanurile i au o structur
asemntoare, aproximativ 70% din molecul formnd poriuni de -helix
ntrerupte de poriuni ndoite ca n molecula de mioglobin. Conformaia
tridimensional a lanurilor este asigurat prin legturi van der Waals ce se
stabilesc ntre resturile nepolare ale aminoacizilor. Legturile polare sunt orientate
spre mediul apos ceea ce explic solubilitatea hemoglobinei. Catenele
polipeptidice sunt orientate aa fel, nct, formeaz ntre ele o cavitate n care este
inclus molecula de hem. Legarea hemului de globin se face prin intermediul a
dou resturi de histidin.
Cele patru lanuri din Hb sunt asamblate ntr-un tetramer compact
(structur cuaternar), rezultnd o molecul cu dimensiunile 64/55/52 . ntre
lanurile identice se realizeaz legturi polare stabilite ntre grupele terminale
NH3 + i COO- , iar ntre lanurile diferite ( i ) se stabilesc legturi de hidrogen
i Van der Waals pe poriuni mari ale acestor lanuri.
Citocromii sunt pigmeni respiratori care au drept grupare prostetic tot
hemul, dar poziiile 5 i 6 de coordinare ale Fe sunt ocupate de resturi de
aminoacizi din molecula proteic. Din acest motiv, citocromii nu pot participa la
transportul O 2, dar particip la transportul electronilor prin modificarea reversibil
a valenei atomului de fier:
25
Acizi nucleici
(Polinucleotide)
Nucleaze
Mononucleotide
Mononucleotidaze
Nucleozide
Acid fosforic
Nucleozidaze
Baze azotate
(Purinice, pirimidinice)
Pentoze
(Riboz\, Deoxiriboz\)
Nucleoproteinele pot fi izolate din esuturi prin extracie (cu ap, soluii alcaline
diluate, soluii de clorur de sodiu i soluii tampon cu pH = 4,0-11,0), urmat de
precipitarea cu acizi, soluie saturat de sulfat de amoniu sau soluie diluat de CaCl2.
Prin hidroliz acid sau bazic, nucleoproteinele se descompun n baze azotate,
pentoze, acid fosforic i proteine.
Nucleotide. Un nucleotid, unitatea structural a acizilor nucleici, este format
dintr-un nucleozid fosforilat la una din gruprile OH din riboz sau deoxiriboz.
Baza azotat\ ^ pentoz\ ^ acid fosforic
Nucleozid
Nucleotid
26
NH2
NH2
N
5'
O
H
N
CH2OH
H H
O
H H
3'
HO P OH
O
Acid adenilic
3'-AMP
Acid deoxiadenilic
3'-dAMP
O
HN
N
H
CH2OH
HO P OH
O
NH2
H H
3'
OH
5'
CH3
N
CH2OH
H H
OH
HO P OH
O
Acid citidilic
3'-CMP
H H
CH2OH
H H
O
H
HO P OH
O
Acid timidilic
3'-dTMP
27
H2C
OH
OH
P
O-
O
O
P
O-
O-
O-
AM P
ADP
ATP
28
2. ENZIME
Organismele vii, mono- i pluricelulare sunt caracterizate prin unele activiti ca:
micare, producere de energie, lumin etc., activiti care au la baz reacii chimice.
Organismele vii sunt supuse primului principiu al termodinamicii, adic legii conservrii
masei i energiei. Energia pentru sinteza moleculelor complexe din elemente sau
molecule mai mici este furnizat prin degradarea moleculelor complexe n intermediari
i compui mai simpli. n consecin este necesar cuplarea celor dou aspecte ale
metabolismului (anabolism i catabolism) printr-un transfer de energie. O reacie
chimic de forma
A+B
C+D
poate avea loc cnd o parte din moleculele A i B se gsesc ntr-o stare de energie
ridicat, stare activat (stare de tranziie) n care exist o mai mare probabilitate ca
legturilor din compuii A i B s se rup i s se formeze produii C i D. starea de
tranziie este o barier nalt de energie care delimiteaz reactanii de produii de reacie.
Viteza unei astfel de reacie este proporional cu moleculele aflate n stare de tranziie
(activat). Exist dou posibiliti de accelerare a reaciei chimice:
- creterea temperaturii ce favorizeaz agitaia molecular, creterea numrului
de molecule activate i accelerarea vitezei de reacie care n cele mai multe reacii este
aproximativ dubl pentru o cretere a temperaturii cu 10oC;
- utilizarea catalizatorilor.
Catalizatorul se combin temporar cu reactanii determinnd scderea energiei de
activare. Cu ct energia de activare va fi mai mic cu att catalizatorul va fi mai eficace.
De exemplu, descompunerea apei oxigenate:
2 H2O2 2 H2O + O2
Necatalitic, are loc cu un consum de energie, G = 18 Kcal/mol; n prezena
catalizatorului de Pt coloidal, G = 13 Kcal/mol; iar n prezena enzimei, catalaza,
numai 2 kcal/mol.
O reacie chimic este endergonic (endoterm) dac variaia energiei libere este
pozitive, deci necesit un aport de energie i exergonic (exoterm) cnd variaia
energiei libere va fi negativ, deci va rezulta energie.
n timpul unei reacii, catalizatorul sufer o serie de modificri, dar odat reacia
terminat, acesta revine la starea iniial.
Enzimele sunt catalizatori proteici pentru reaciile chimice care se petrec n
sistemele biologice. n absena enzimelor, majoritatea reaciilor din celula vie
s-ar
petrece cu viteze foarte mici.
Spre deosebire de catalizatorii neproteici (ioni metalici, H+, OH-) fiecare enzim
catalizeaz un numr mic de reacii, de cele mai multe ori, una singur.
Exist un numr foarte mare de enzime; pentru fiecare compus organic, ct i
pentru muli compui anorganici, exist mcar o enzim capabil s reacioneze cu
acesta i s catalizeze o anumit modificare chimic.
29
30
6. Ligaze sau sintetaze unirea a doi compui utiliznd energia eliberat prin
hidroliza unei molecule de ATP.
2.2. Structura enzimelor
Specificitatea mare a unei enzime este strns legat de structura ei fizic i
chimic specific. Din punct de vedere chimic, o enzim este format dintr-o parte
proteic apoenzima i o parte neproteic coenzima sau cofactor.
Partea proteic este termolabil i este responsabil de specificitatea enzimei, de
aciune, dar mai ales de substrat, iar coenzima este termostabil i dializabil.
Apoenzima. Enzimele simple i apoproteinele enzimelor complexe sunt
formate din catene lungi polipeptidice, avnd aceleai nivele de organizare structural ca
i alte proteine: primar, secundar, teriar i cuaternar.
Dei toate enzimele au structuri primare, secundare i teriare, structura
cuaternar nu este obligatorie.
Coenzime. Coenzima este partea neproteic, care particip efectiv la reacia
catalitic (se modific temporar n timpul reaciei). Frecvent, coenzimele conin n
structura lor vitamine din grupul B.
2.3. Izoenzime forme moleculare multiple ale aceleai enzime. Ele catalizeaz
aceeai reacie enzimatic, dar difer ntre ele n privina proprietilor fizice, chimice i
imunologice.
Interesul medical pentru izoenzime a fost stimulat prin descoperirea n 1957, n
serul uman, a mai multor izoenzime LDH, a cror proporii relative se modific
semnificativ n anumite stri patologice.
Cele 5 izoenzime LDH difer ntre ele n ceea ce privete structura cuaternar.
Molecula activ de LDH este un tetramer (130.000) format din dou tipuri de subuniti
H i M luate cte patru (fiecare subunitate are 34.000).
Subunitatea H (heart) este caracteristic muchiului inimii i n general
esuturilor cu metabolism aerob, iar subunitatea M (muscle) este caracteristic
muchiului scheletic i n general organelor i esuturilor cu metabolism anaerob.
Excepie fac ficatul i eritrocitul.
Structura celor 5 izoenzime LDH este:
LDH1
- H4
LDH2
- H3M1
LDH3
- H2M2
LDH4
- HM3
LDH5
- M4
Sinteza celor dou tipuri este coordonat de dou gene diferite.
Ulterior au fost evideniate izoenzime i pentru alte enzime creatin-kinaza
CK1(BB); CK2(MB) i CK3 (MM), hexo-kinaza, fosfataza alcalin etc.
31
ureaza
2 NH3 + CO2
C COOH
H
Fumaraza
H2O
HOOC
CH CH2 COOH
OH
32
pentru
explicarea
unor
proprieti enzimatice, cum ar fi legarea ntr-o
anumit ordine a substratelor sau curba de saturare cu substrat.
Un model mai perfecionat este cel imaginat de Koshland, numit induced fit
(fixare indus), modelul cu cel mai puternic suport experimental. Principala
caracteristic a acestui model este flexibilitatea centrului activ. n absena substratului
gruprile catalitice i de legare a substratului sunt deprtate unele de altele, separate de
mai multe resturi de aminoacizi. Apropierea substratului induce o modificare
conformaional a enzimei nct gruprile care particip la legarea substratului sau la
reacia catalitic se apropie spaial.
Situsul (centrul) activ dintr-o enzim poate fi pus n eviden prin tratarea cu
anumite substane ce au capacitatea de a se combina specific cu aminoacizii centrului
catalitic, inactivnd enzima.
2.6. Factori care influeneaz activitatea enzimatic
Influena concentraiei enzimei
Dac se utilizeaz concentraii crescnde de enzim cantitatea de substrat
transformat n unitatea de timp crete proporional cu concentraia enzimei.
Influena concentraiei substratului asupra vitezei de reacie
33
Dac
se
menine
constant concentraia de enzim i se mrete
concentraia de substrat S, se constat o cretere rapid a vitezei de reacie pn la o
valoare limit (vmax). Dac [S] continu s creasc, curba capt o inflexiune i pentru
valori mari de S, viteza nu mai crete, curba tinde asimptotic ctre o valoare maxim
(vmax).
Crescnd n continuare concentraia substratului viteza reaciei rmne constant
deoarece nu mai exist enzim liber. Transformarea substratului n produs (produi) de
reacie are loc cu formarea, pentru scurt timp, a unui complex enzim-substrat.
Ipoteza formrii complexului ES a fost emis prima dat de Michaelis. Existena
acestui complex a fost demonstrat practic prin analiza spectrelor de absorbie n
ultraviolet, vizibil, rezonan magnetic nuclear, fluorescen sau prin dializ.
E + S
K1
ES
K3
E ^ P (1)
2
Cantitatea de produs P Kformat
depinde direct de concentraia complexului ES,
care depinde de viteza de descompunere a compusului ES n E + S. Aplicnd legea
aciunii maselor pentru reaciile de echilibru se obine relaia:
Cnd toat enzima a fost fixat
[E] [S]
sub form de complex ES, se atinge
K2 =
(2)
[ES]
viteza maxim a reaciei.
KM = [S] (3) care a primit numele de constanta Michaelis, definit drept
concentraia substratului pentru care se atinge jumtate din viteza maxim.
Cnd numai jumtate din enzim este trecut n form [ES] i [E] =[ES] se
atinge jumtate din viteza maxim vmax i relaia (2) devine:
Influena temperaturii asupra activitii enzimatice
Viteza de reacie crete cu creterea temperaturii, dar n anumite limite. Studiul
vitezei iniiale a unei reacii enzimatice n funcie de temperatur determin apariia a
dou faze distincte care corespuns la dou fenomene diferite:
34
35
pH-ul optim pentru cele mai multe enzime are valori cuprinse ntre 6 i 8.
Excepie fac enzimele digestive, pepsina (pH=1,5-2), arginaza (pH= 9,5-10).
Influena efectorilor asupra activitii enzimelor
Efectorii sunt substane care mresc sau scad aciunea catalitic a enzimelor.
Acetia pot fi activatori sau inhibitori.
Activatorii sunt compui de natur organic sau anorganic care n
concentraii mici mresc viteza unei reacii enzimatice atunci cnd se gsesc n mediul
de reacie.
O serie de ioni metalici, cum ar fi K, Cu, Fe, Mg, Mn, Co, Mo, au efecte pozitive
asupra unor reacii enzimatice. Fe, Mo, Cu particip n reaciile de oxido-reducere, Mg
este necesar n reaciile de transfer ale gruprii fosfat, iar Ca este necesar n reaciile
enzimatice ce intervin n coagularea sngelui.
Inhibitorii enzimatici sunt compui care diminueaz sau anihileaz
activitatea enzimelor. Ei au compoziie chimic i mod de aciune diferit. Printre
substanele capabile s se fixeze pe diferite grupri din proteine (hidroxil, sulfhidril,
carboxil) i s modifice proprietile catalitice, fie prin modificarea conformaiei, fie
prin blocarea centrului activ al enzimei, se gsesc ionii metalelor grele, sau compui
cum sunt acidul monoiodacetic sau acidul paraclormercuri-benzoic care reacioneaz cu
gruprile -SH din enzime.
- Inhibitorii competitivi sunt compui care prezint o analogie structural cu
substratul enzimei i pot intra n competiie cu acesta pentru a se fixa pe locul activ al
enzimei. Enzima se poate combina fie cu substratul, fie cu inhibitorul formnd
complexele ES i EI:
ES
E + P
E
EI
H2N
COOH
H2N
SO2 NH2
sulfonamid\
36
37
E1
E2
Activare
E3
G inhibitor alosteric
Inhibi]ie
Kinaz\
ADP
Enzim\
ser
Enzim\
ser O
OH
P
O
_
HPO4
fosfataze
H2O
38
pepsinogen
tripsinogen
chimotripsinogen
tripsin\
pepsin\
tripsin\
chimotripsin\
trombin\
plasmin\
39
40
3. VITAMINE
Vitaminele sunt substane organice cu greutate molecular mic, cu structuri
chimice, proprieti fizice, chimice i biologice diferite.
Ele sunt aduse din exterior i nu constituie pentru organism surs energetic
sau plastic, dar sunt absolut indispensabile pentru funcionarea normal a
organismului. Din acest motiv, organismul are nevoie de un aport zilnic de vitamine
(cteva mg/zi) asigurat de raia alimentar. Lipsa unor vitamine din alimentaie duce
la declanarea unor stri patologice specifice, numite avitaminoze, care, dac nu sunt
de lung durat, pot fi ndeprtate prin administrarea de vitamine.
Antivitaminele sunt substane cu structur chimic asemntoare cu a
vitaminelor dar cu aciune antagonist, deoarece avnd structur asemntoare cu
vitaminele adevrate, pot intra n competiie cu acestea din urm.
Clasificarea vitaminelor se bazeaz pe criterii de solubilitate:
vitamine liposolubile (solubile n grsimi) A, D, E, K;
vitamine hidrosolubile (solubile n ap) B1, B2 B6, PP, biotina, acidul
pantotenic, acidul folic, B 12, vitamina C.
3.1. Vitaminele hidrosolubile
Vitaminele hidrosolubile aparin complexului vitaminic B (B 1, B2, B6, B12, PP,
acid pantotenic, acid folic) i vitamina C.
Fiind solubile n ap nu se acumuleaz n organism n concentraii toxice i se
elimin n principal pe cale renal.
Vitaminele hidrosolubile ndeplinesc n general rolul de coenzime.
3.1.1. Vitamina B1 (tiamina, aneurina, vitamina anti beri-beri, vitamina
antinevritic)
Structural, este alctuit dintr-un nucleu pirimidinic i un nucleu tiazolic,
substituite i unite printr-o grupare metilenic.
6'
5'
1' N
H3C
CH2
CH3
4'
N
3'
Tiamina
Absorbia tiaminei se realizeaz la nivelul intestinului subire, prin procese
active i pasive; absorbia activ presupune formarea TPP (tiamin-PP).
n organism tiamina se gsete liber (plasm, LCR) i esterificat ca TPP
(80%), form sub care se stocheaz pentru scurt timp i sub care este activ biologic.
41
Tiamin\
Tiamin
pirofosforilazkinaza
ATP
CH2
H3C
NH2
CH3
S
AMP
TPP
CH2 CH2 O
O P
OH
OH
OH
H3C 6
9
10
1 2
4 NH
42
ester monofosforic (FMN) are loc n toate celulele organismului, sub aciunea unei
flavokinaze:
Flavokinaz\
Riboflavin\
ATP
Flavin-adeninpirofosforilaza
FMN
ATP
ADP
FAD
PPa
Prin unirea FMN cu acidul adenozin-5-P (AMP), sub influena flavin-adeninpirofosforilazei, se formeaz FAD-ul. Dup nomenclatura strict, FMN-ul nu este un
mononucleotid, iar FAD-ul nu este un dinucleotid, deoarece n loc de pentoz au un
alcool polihidroxilic, ribitolul, iar flavina nu este o baz azotat adevrat.
NH2
O
P
CH2
H C OH
H C OH
H C OH
OH
H 3C
O
H
OH
H
OH
CH2
OH
H C H
H 3C
O
NH
O
AMP
FMN
FAD
R
H3C
H3C
N
1
10
O
NH
N
O
FMN sau FAD
^2H^
^2e-2H^
-2e-
H3C
H3C
N
N
H
H
N
O
NH
43
CH2OH
CH2NH2
OH
H 3C
CH2OH
OH
H3C
1N
CH2OH
OH
H3C
N
Piridoxal
Piridoxol
CH2OH
N
Piridoxamin\
Rolul metabolic
Piridoxalul i piridoxamina intervin n metabolism sub form fosforilat la
gruparea de alcool primar din poziia 5 (piridoxal-5-P, respectiv piridoxamin-5-P) care
se obin n reacia cu ATP.
CHO (CH2 NH2)
OH
H 3C
CH2OH
Piridoxal-kinaza
H3C
6
1N
Piridoxal
OH
ATP
CH2 O PO3H2
ADP
Piridoxal fosfat
44
COOH
N
C
Decarboxilaza
H
OH
H3C
Enz
+
N
H
CO
NH
NH2 + O CH
N
CH2OH
Izoniazid
Vitamina B6
HOH
spontan
OH CH3
N
CO NH
CH
N
CH2OH
Piridoxal
hidrazona
45
1'
H N
4
H C
H2C
O
2'
C 3'
N H
A
3
C H
B
C H (CH2)4 COOH
1S 2
Beta-biotina
O
C
H N
N H
A
H C
CH3
C H
B
H2C
C H CH CH CH3
S
COOH
Alfa-biotina
46
OH
_
HCO3 ^ ATP
Mg2^
O P OH
O
ADP
_
O
O
C
HN
NH
A
HC
CH
NH Enz.
B
H2C
C H (CH2)4 CO
S
Biotin-Enz.
Anhidrid\-Pcarbonic\
COO
O
O
C
O C N
NH
A
HC
CH
NH Enz.
B
H2C
C H (CH2)4 CO
S
Pa
CH3
C O
_
COO
CH2
COOH
Piruvat-carboxilaza
Biotin-enzima
n snge se gsete sub form de coenzim (80% n globulele roii) i sub form
de amid liber, n plasm.
Vitamina PP se sintetizeaz n organism din triptofan; din 60 mg triptofan rezult
1 mg acid nicotinic.
Rol metabolic
Nicotinamida acioneaz n organism sub forma a dou coenzime,
nicotinamidadenindinucleotid (NAD+) i nicotinamidadenindinucleotidfosfat (NADP+),
n reaciile de oxido-reducere.
47
NH2
CO NH2
N
O
CH2 O
OH
O
H
H2C
O
H
H
H
H
OH
OH
OH
OH
OH (PO3H2)
NAD+ (NADP+)
Acestea sunt formele oxidate ce pot fi reduse n NADH i NADPH, reducere ce
are loc la nucleul piridinic al nicotinamidei:
H
O
C
^
NH2
^2H^
2e
^2H^
2e
O
C
NH2
NAD^
NADH^H^
48
H3C
-alanin\
Acid pantoic
Acid pantotenic
OH O
H3C
Acid pantoic
CoASH
_
O
NH2
Adenina
N
O
P
tioetanolamina
Acid pantotenic
O
O
-alanin\
CH2
O
_
O
_
O H
P O
O
_
Riboza
H
OH
Rol metabolic
CoA are rol deosebit n metabolismul glucidic, lipidic i proteic fiind
transportor de grupri acil R-CO-. Legtura dintre CoA i restul acil se realizeaz prin
49
H2N
COOH
O
N
HN
CH2
HN
CH (CH2)2 COOH
OH
Pirimidin\
Pirazin\
Pteridin\
Acid glutamic
Acid pteroic
Acid pteroilglutamic
Rol metabolic
Acidul tetrahidrofolic (FH4), forma activ a acidului folic servete la transferul i
utilizarea fragmentelor de un singur carbon n diferite stri de oxidare: -CH3, -CH2-,
-CH=, -CHO, -CH=NH, care se pot fixa la N5, N10 sau ca o punte metilenic ntre
N5 i N10.
H
H2N
N
N
5
N
OH
H
H
10
CH2 NH R
H
50
Coenzimele
acidului
folic particip la sinteza metioninei din
5
homoserin (N -CH 3-FH4), sinteza acidului timidilic din acid uridilic (N 5, N10metilen-FH4), n sinteza nucleului de purin (N 5, N10-metenil-FH4 i N10-formilFH4) etc.
Tulburri de aport vitaminic
Deficiena de acid folic apare din cauza unui aport alimentar sczut, stres
(sarcin), tulburri de absorbie, deficit de enzime implicate n sistemul de transport sau
terapia cu unele medicamente.
Carena se manifest exclusiv prin perturbarea hematopoezei, simptomul fiind
anemia megaloblastic (cu eritrocite mari i rare).
Datorit relaiei strnse dintre activitatea metabolismului acidului folic i cea a
vitaminei B12, este destul de greu de a diferenia simptomele clinice dintre cele dou
stri de caren.
3.1.8 Vitamina B12 (cobalamina, ciancobalamina, factor antipernicios, factor
extrinsec Castle)
Vitamina B12 este un complex organo-metalic, cu inel corinic (tetrapirolic),
similar nucleului porfirinic, la care se adaug ionul de cobalt. Nucleul corinic are
substituite grupe CH3, acetamidice i propion-amidice. n centrul acestui macrociclu se
gsete ionul Co3+, cu numrul de coordinaie 6: 4 legturi se realizeaz cu atomii de N
pirolici, o legtur cu gruparea CN, iar a 6-a legtur se realizeaz cu cea de a doua
parte a moleculei. ntregul complex, fr gruparea CN, se numete cobalamin.
Radicalul R poate fi diferit, pentru a da variate forme ale vitaminei. De exemplu:
RCN n ciancobalamin (ciancobalamina se formeaz n procesul de purificare i
reprezint forma comercial a vitaminei); ROH n hidroxicobalamin; R5deoxiadenozil n 5-deoxiadenozilcobalamin; RCH3 n metilcobalamin.
NH2 COCH2CH2 CH3 CH
3
CH2 CONH2
NH2COCH2
CH2 CH2CONH2
CH3
CN
N
N
CH3
+
Co
H
N
N
CH3
NH2 COCH2
CH3
H
CH3
CH3 CH2CH2 CONH2
O HO
H
O
CH2CH2CONHCH2 C
O P
CH3
N
N
CH3
CH3
H
H O
H
CH2 OH
51
Homocistein\
FH4
HomocisteinCH3-transferaza
(CH3-cobalamina)
Metionin\
Reac]ie de metilare
(citoplasm\)
OH-cobalamina
L-metilmalonil-CoA
5'-deoxiadenozilcobalamina)
Succinil-CoA
Reac]ie de rearanjament
intramolecular
(mitocondrie)
52
HO
HO C
O C
H C
H C
HO C
CH2OH
Forma redus\
(Acid ascorbic))
HO C
CH2OH
Forma oxidat\
(Acid dehidroascorbic)
53
H3C
2
3
17
CH3
19
CH3
20
CH3
CH2OH
1 6 7
9
11
13
15
10
12
8
14
5
CH3
4
18
H3C
CH3
CH3
CH3
CH2OH
CH3
3-dehidroretinol (Vitamina A2)
54
15
15
COOH
CHO
CH2OH
Acid retinoic
Retinal
Retinol
18'
17
2
16
1
3
4
7
6
11
9
8
10
13
12
14
15
14'
15'
5 18
ionon\
caroten
12'
13' 11'
10'
5'
8'
9'
7'
6'
17'
3'
1' 2'
16'
ionon\
55
56
CH3
CH
18
19
2
3
HO
A
4
10
5
11
12
13
14
D 16
15
B 8
6
CH3
CH CH CH
CH3
CH3
Ergosterol, provitamina D2
(ergocalciferol)
17
CH
CH3
CH
CH3
CH
CH3
25-OH-D
1,25-(OH)2-D
57
7-Dehidrocolesterol
U.V. (piele)
R
CH2
Colecalciferol
(Vitamina D3)
HO
ficat
25
OH
25-OH-D3
CH2
HO
Rinichi
HO
25
OH
CH2
HO
1,25-Dihidroxi-D3
(calcitriol)
CH2
25
OH
OH
HO
24,25-Dihidroxi-D3
(inactiv)
58
La nivelul rinichiului alturi de 1,25-(OH)2-D3 se poate forma i 24,25(OH)2-D3 mai puin activ n transportul intestinal al Ca++ i n procesul de mineralizare,
dar capabil s creasc Ca++ seric la obolanii cu depleie de fosfai dependent de
vitamina D.
Rolul metabolic al vitaminei D
1,25-(OH)2-D3 sau calcitriolul (C) regleaz metabolismul fosfo-calcic prin
aciunile exercitate asupra esuturilor int: intestin, os, rinichi.
La nivelul intestinului calcitriolul (C) este transportat la locul de aciune
unde se fixeaz pe proteine receptoare citoplasmatice i apoi este translocat la nucleu
unde printr-un mecanism puin cunoscut induce sinteza unei proteine transportoare de
calciu (Calcium Binding Protein CBP) care favorizeaz absorbia de Ca++ contra
gradientului de concentraie, mecanism de aciune similar aciunii unui hormon steroid.
La nivelul tubilor renali 1,25-(OH)2-D3 stimuleaz sinteza CaBP renale i
deci reabsorbia, prentmpinnd excreia de Ca++. n condiii fiziologice sau n doze
terapeutice 1,25-(OH)2-D3 stimuleaz reabsorbia de fosfat, mai mult dect pe cea de
Ca++, diminund excreia, economisind fosfaii.
La nivelul osului aciunea 1,25-(OH)2-D3 este mai complicat i mai puin
clar. Vitamina asigur fixarea Ca++ i PO43- n spaiile libere dintre capetele nespiralate
ale moleculelor de colagen i stimuleaz sinteza unei proteine specifice care leag Ca ++,
osteocalcina. Calciul se fixeaz n faza mineral a osului, sub form de hidroxiapatit,
Ca10(PO4)6(OH)2, alturi de cantiti mici de citrat, Na+, Mg++ i CO32-.
Tulburri de aport vitaminic
Hipovitaminoza D
Formarea defectoas n piele a vitaminei D3, aportul alimentar sczut i/sau
defecte intestinale de absorbie a vitaminei pot duce la stri de hipovitaminoz D.
Hipovitaminozele D conduc la stri de boal care se manifest prin:
- perturbri n metabolismul mineral (Ca++ i PO43-) i a secreiei de
parathormon (PTH);
- defecte n mineralizarea osului.
n deficiena de vitamin D absorbia de Ca2+ fiind perturbat apare
hipocalcemia, nsoit secundar i compensatoriu de creterea secreiei de PTH, iar PTH
determin mobilizarea Ca2+ din oase pentru normalizarea calcemiei. Se instaleaz o
hipofosfatemie accentuat mai ales n stadiile timpurii din cauza scderii absorbiei
intestinale i n principal eliminrilor renale (PTH scade pragul renal de eliminare pentru
fosfai).
Din punct de vedre biochimic hipovitaminoza D este caracterizat prin
hipocalcemie moderat sau normocalcemie, hipofosfatemie, activitate crescut a
fosfatazei alcaline, nivele crescute de parathormon i sczute de 25-(OH)2-D3.
Glucocorticoizii inhib absorbia intestinal de calciu i mineralizarea osului.
Hipovitaminoza D la copii se numete rahitism iar la adult osteomalacie. Clinic,
rahitismul este caracterizat prin scderea rezistenei mecanice a oaselor (nmuierea
oaselor). La adult, rezerva de calciu fiind mai mare, hipovitaminoza se instaleaz mai
greu. Hipocalcemia dezvolt la adult osteoporoza (reducerea masei osoase pe unitate de
59
volum la un nivel situat sub cel necesar funciei normale). Osteoporoza apare la
femei postpartum ceea ce dovedete dependena hormonal a acesteia. Tratamentul cu
estrogeni previne instalarea osteoporozei (se pare c estrogenii protejeaz osul mpotriva
agenilor care determin resorbia osului, n special PTH). Sunt descrise boli genetice
datorate unui defect n sinteza renal de 1,25-(OH)2-D3 care produc rahitismul
dependent de vitamina D (tip I) i mai rar lipsei sau deficienei de receptor citoplasmatic
pentru 1,25-(OH)2-D3 rahitism vitamina D rezistent (tip II).
De asemenea, a fost descris rahitismul hipofosfatemic indus de iradierea cu
raze X.
Hipervitaminoza D
Dup ingestia cronic, oral, a unor doze mari de vitamin D pot apare
intoxicaii cu vitamin D caracterizate prin anorexie, vrsturi, diaree, astenie, mialgie,
pierderi n greutate, hipercalcemie, hipercalciurie. Patologic are loc calcifierea
esuturilor moi i n special la nivel renal (nefrocalcinoza), cornee, aort, plmni, inim.
Prin suprimarea administrrii de vitamin D, prin aplicarea unui regim srac n
Ca i fosfat n lichide, se produce o mobilizare lent a Ca din esuturile moi i revenirea
la normal a calcemiei. Atunci cnd nu este compromis grav, funcia renal se
normalizeaz.
3.2.3. Vitaminele E (tocoferolii, vitaminele antisterilitii, vitaminele de
reproducere)
Numele de tocoferol provine de la funcia biologic de a favoriza fertilitatea
(tokos natere; phesein a purta).
Vitaminele E sunt un grup de vitamine tocoferoli formai dintr-un nucleu de
croman substituit i o caten lateral ramificat fitil.
CH3
HO
H3C
6
7
5
8
3
2
1
CH3
(CH2)3
CH3
CH3
CH3
CH (CH2)3
CH (CH2)3 CH CH3
CH3
- Tocoferol
60
R-H
R. ^ H .
R. ^ O 2
R-OO.
Propagare:
R-H ^ R-OO.
R-OOH ^ R.
~ntrerupere:
AH ^ R-OO.
R-OOH ^ A.
A este un radical stabil (de exemplu, provenit din tocoferol), capabil s inhibe
propagarea reaciilor radicalice n lan din peroxidarea lipidic.
.O
CH3
CH3
O
- Tocoferol
CH3
H3C
O
CH3
Radical tocoferil
pu]in reactiv
H3C
CH3
R
CH3
Tocoferil-chinon\
stabil\
61
Distrugerea membranelor
Eritrocit
(fragilitate crescut\
[i hemoliz\)
Lizozomi
(permeabilitate
crescut\)
Reticul endoplasmatic
(dezintegrarea structurilor
necesare ac]iunii enzimelor
care metabolizeaz\
medicamente [i transport\
electronii)
Eliberarea enzimelor
hidrolitice
Inactivarea enzimelor
Perturb\ri tisulare
(distrofie)
62
CH3
O
1
CH3
CH3
6
5
64
carboxilarea
posttranscripional
a resturilor glutamil din precursori la acid
carboxi glutamic.
Vitamina K prin structura 1,4 naftochinonic joac rol de transportor de
hidrogen avnd rol de coenzim n procesul carboxilrii.
OH
O
CH3
CH3
^ 2H
- 2H
R
OH
COO
CH2
CO2
CH2
Vitamina K
OOC
COO
CH
CH2
C CH NH
C CH NH
Gla
Glu
Acid -carboxi-glutamic
Acid glutamic
_
Ca2^ O
O
C
C
CH
CH2
C CH NH
O
65
H2C
S
CH2
C H (CH2)4
COOH
+H
-H
CH2
(CH2)4 COOH
SH
)
L
S
CH
SH
SH
S
( L
CH2
SH
66
4. ENERGETICA BIOCHIMIC
Celula vie este considerat o main care transform continuu energia coninut n
structura moleculelor substanelor nutritive din mediu nconjurtor n energie chimic pe care
apoi o folosete n diverse scopuri cum ar fi procesele de biosintez, contracia muscular,
transportul prin membran, excitaie nervoas.
Utilizarea substanelor nutritive de ctre celul se face prin transformri metabolice,
transformri care au loc cu participarea unui numr mare de enzime.
Degradarea enzimatic a substanelor nutritive, cum sunt polizaharidele, lipidele i
proteinele, se petrece printr-un ir de reacii chimice care pot fi schematizate, n trei stadii
principale:
I. - n primul stadiu, macromoleculele substanelor nutritive sunt degradate pn la substana
simpl de baz din care sunt constituite. Astfel, polizaharidele sunt degradate la hexoze i
pentoze, lipidele n acizi grai i glicerol, iar proteinele la aminoacizii din care provin;
II n al doilea stadiu, produii formai n primul stadiu sunt transformai ntr-un numr mic de
produi intermediari, n principal ntr-un compus cu doi atomi de carbon, acetil-CoA;
III n al treilea stadiu aceti compui sunt metabolizai pe o cale comun la CO2 i H2O.
Proteine
Pentoze
Lipide
Polizaharide
Aminoacizi
Macromolecule
Hexoze
Glicerol
Acizi grasi
Glucoza
monomeri
Piruvat
II
Compus de
degradare
comun
Acetil-CoA
Ciclul
Krebs
III
NH3
H2O
CO2
Produs final
de metabolism
67
N
N
OH
CH2 O P O ~P
O
H
OH
H
OH
OH
O ~P
OH
OH HO
68
_
-e
_
+e
cit.Fe3+
69
SH2
NAD+
Piridine
FMNH2
Flavine
2 Fe3+
Citocromi
H2O
NADH
FMN
2 Fe2+
1/2O2
H+
2H+
H+
2H+
Substratele respiratorii provin n principal din ciclul Krebs, dar i din alte reacii
metabolice. O serie de substrate, cum ar fi izocitratul, -cetoglutaratul, malatul,
piruvatul, -hidroxi- butiratul, -hidroxi-acil CoA, prolina etc. cedeaz electronii NAD+ului.
Electronii provenii de la succinat, acil-CoA, -glicerol-fosfat sunt cedai CoQ
prin intermediul unor flavoproteine (enzime flavinice).
Izocitrat
a-cetoglutarat
Malat
-hidroxibutirat
-hidroxiacil-CoA
Piruvat
Succinat
FAD
FAD
NADH
FMN
CoQ
FAD
-glicerol-P
cit.b
cit.c
cit.a+a3
O2
FAD
Acil-CoA
70
nseamn c 42% din energia eliberat a fost nmagazinat sub form de ATP.
Diferena de energie servete la termoreglare.
-0,4
NADH
-0,2
2e
_ Enz.-FMN
2e
0
+0,2
+0,4
+0,6
ADP+Pa
_
ATP
CoQ
cit.b
ADP+Pa
2e
ATP
cit.c
cit.a
ADP+Pa
2e
+0,8
ATP
CO
_
CN
O2
Direc]ia fluxului de electroni
71
5. METABOLISMUL GLUCIDIC
5.1. Digestia i absorbia glucidelor
Aproximativ 50% din caloriile preluate zilnic de organism sunt furnizate de
glucide: amidon (160 g), zaharoz (120 g), lactoz (30 g) glucoz i fructoz libere (10
g) i urme de maltoz i trehaloz (dou molecule -glucoz unite prin legturi
(11).
Prin digestia glucidelor rezult trei monozaharide: glucoza, fructoza i galactoza.
6
CH2OH
CH2OH
O
H H
HO OH
H OH
CH2OH
CH2OH
HO OH
HOH2C
-Glucoza
H H HO CH2OH
H H
OH
OH
OH
OH
H OH
H H
-Fructoza
O
HO H
OH
OH
-Galactoza
H H
OH
-Glucoza
OH
CH2 OH
H H HO OH
H OH
H OH
HOH2C
HO H
OH
-Fructoza
-Galactoza
H 1
OH
CH2OH
O
4
OH
OH
CH2OH
O
CH2OH
O
O
OH
OH
Structura amilozei
OH
OH
72
O
H
CH2OH
OH
H O
HO
O
CH2OH
O
CH2OH
O
4
OH
OH
OH
OH
CH2
O
OH
OH
Structura amilopectinei
n amiloz, moleculele de -glucoz sunt unite prin legturi (1 4)
glicozidice, formnd lanuri lungi, spiralate. Amilopectina are o structur ramificat, n
care unitile de -glucoz sunt unite prin legturi (1 4) i (1 6) glicozidice.
Digestia glucidelor ncepe n cavitatea bucal i este completat n duoden.
Asupra amidonului pot aciona dou tipuri de enzime hidrolitice: -amilaza i
oligozaharidazele (dextrinaze) n care sunt incluse i dizaharidazele.
Amilaza salivar (n cavitatea bucal) i amilaza pancreatic (n intestinul
subire) hidrolizeaz amidonul ncepnd de la periferia moleculei spre centru, scindnd
numai legturile (1 4), cu excepia legturilor (1 6) i (1 4) din vecintatea
ramificaiilor.
Prin aciunea acestor amilaze, amiloza este transformat n maltoz i cantiti
mici de maltotrioz, iar amilopectina n maltoz i oligozaharide mici, de aproximativ
opt resturi de glucoz, cu una sau mai multe ramificaii (dextrine limit).
Oligozaharidazele completeaz hidroliza oligozaharidelor i dizaharidelor.
Aceste enzime, situate pe suprafaa celulelor epiteliale, ndeprteaz succesiv unitile
glicozidice din captul nereductor (captul C4 liber).
Legturile (1 6) din dextrine sunt scindate de amilo-1,6-glucozidaza.
Dizaharidele provenite direct din alimente, precum i cele rezultate prin digestia
amidonului sunt hidrolizate n intestinul subire sub aciunea dizaharidazelor. Aceste
enzime au specificitate diferit n funcie de structura dizaharidului i de legtura
glicozidic; -glucozidaza din intestinul subire este n exces i n consecin zaharoza
este rapid hidrolizat, n timp ce -galactozidaza, care acioneaz asupra lactozei, este
mai redus cantitativ.
Deficitul de oligozaharidaze sau dizaharidaze, n mucoasa intestinal, determin
trecerea glucidelor nedigerate n fecale.
73
Lactoz\
Intestin
sub]ire
Galactoz\
^
Glucoz\
L ac taz \
Vena
port\
Galactoz\
^
Glucoz\
Intestin
sub]ire
Lactoz\
Lactoz\
B ac te rii
CO2
}esut
H2O
H2
Compu[i
Co2, C2
Balonare, diaree,
deshidratare
a. Normal
b. Deficit de lactaz\
74
75
ADP
CH2 O P
OH
H
OH
OH
OH
HO
Glucozo-6-fosfat
(G6P)
1 ATP
76
O H2C
O CH2OH
H HO
OH
H
OH H
G6P
Fructozo-6-fosfat
(F6P)
F6P
Mg2+
ATP
ADP
O H2C
O CH2 O
H HO
OH
H
OH H
P
- 1 ATP
Fructozo-1,6-difosfat
(F1,6DP)
HO C H
4.
Aldolaza
H C OH
CH2 O
F1,6DP
H C OH
CH2 O
H C OH
CH2 OH
CHO
Glicerinaldehid-3-fosfat
(GA3P)
(3%)
C O
CH2 O
Dihidroxiaceton-fosfat
(DHAP)
(97%)
77
5.
Trioz-P-izomeraza
DHAP
GA3P este produsul activ care se transform mai departe. Cu aceast reacie de
izomerizare se ncheie prima faz a glicolizei, faz consumatoare de energie
(-2
ATP).
6. Prima reacie a celei de a doua faze este reacia de oxidare a GA3P la acidul
1,3-difosfogliceric (1,3-DPG), reacie catalizat de GA3PDH. n aceast reacie are loc
un proces de fosforilare cu Pa care urmeaz unui proces de oxidare.
O
Gliceraldehid-3-Pdehidrogenaza (GA-3-PDH)
CHO
O~ P
H C OH
H C OH
CH2 O
Pa
NAD^
GA3P
CH2 O
NADH^H^
1,3-Difosfoglicerat
(1,3-DPG)
Enzima poate lega i arsenitul care, n felul acesta, poate decupla oxidarea de
fosforilare deoarece compusul rezultat cu arsen n loc de P nu este macroergic; nu se
sintetizeaz ATP.
7. Energia nmagazinat la C1 a acidului 1,3-DPG este transferat pe ADP cu
formarea ATP n reacia catalizat de fosfogliceratkinaz (PGK).
O
O
Fosfogliceratkinaz\ (PGK)
O~ P
H C OH
CH2 O
OH
H C OH
Mg2^
P
ADP
CH2 O
ATP
3-Fosfoglicerat
(3-PG)
1,3-DPG
8. Reacia fosfogliceratmutazei.
O
Fosfogliceratmutaz\ (PGM)
OH
H C OH
CH2 O
3-PG
OH
H C O P
CH2 OH
2-fosfoglicerat
(2-PG)
O
C
OH
; H C O~ P
CH2 O
2,3-fosfoglicerat
(2,3-DPG)
78
Se pare c n aceast reacie intermediar este 2,3-DPG, sintetizat printro deviaie a cii principale. Acest produs se acumuleaz n eritrocite i intervine n
reglarea afinitii hemoglobinei pentru oxigen.
9. Reacia enolazei
CH3
Piruvat
Lactat dehidrogenaza
(LDH)
NADH+H+
NAD+
COOH
H
OH
CH3
Lactat
79
CH3
O
+ NAD+
+ CoASH
PDH
C ~S CoA
+ NADH+H+ + CO2
CH3
Complexul PDH este localizat n matricea mitocondrial i este format din trei
enzime i cinci coenzime: TPP (vit.B1), acid lipoic; CoA(acid pantotenic), FAD (vit.B2)
i NAD+ (vit.PP). Enzimele sunt: piruvat dehidrogenaza (E1),
transacetilaza (E2)
i dihidrolipoil dehidrogenaza (E3).
80
O
CH3
_
COO
CO2
1
OH
E1-TPP
E1-TPP
CH CH3
E2-L
SH O
S
CoASH
E2-L
CH3
3
SH
E2-L
S
NAD+
E3-FADH2
5
E3-FAD
SH
NADH+H+
CoA-S-C-CH3
COOH
C
CH3
Piruvat
Piruvat carboxilaza
HCO3 ,
Biotina, Mg2+
ATP
ADP+Pa
_
CH2
COOH
Oxalacetat
81
reacii prin care cei doi atomi de C din restul acetil sunt eliminai ca CO2, iar din
cele patru reacii de oxidoreducere, opt atomi de H vor parcurge lanul transportorilor de
H i vor genera o mare cantitate de energie (ATP).
Acidul oxalacetic este regenerat, de aceea este necesar o mic cantitate din acest
acid pentru a transforma o mare cantitate de acetil-CoA. Oxalacetatul poate fi considerat
a fi catalizator.
n acest ciclu sunt patru reacii de oxidoreducere n care se elibereaz cei opt
atomi de H care sunt preluai de lanul transportor de electroni i transportai la O 2,
generndu-se o cantitate de energie de 18-19 ori mai mare dect n glicoliz.
Reaciile ciclului Krebs
1. Condensarea acetil-CoA cu acidul oxalacetic
Dei izocitratul este ntr-o proporie mic, el este rapid oxidat mai departe n
ciclul Krebs.
82
CH2 COOH
CH COOH
HO
CH COOH
Acid
izocitric
Izocitrat
dehidrogenaza (ICDH)
NAD+
CH2 COOH
CH2 COOH
CH COOH
O
C
COOH
NADH+H+
Acidul
oxal-succinic
CH2
C
CO2
COOH
-cetoglutaric
3. Reacia -cetoglutarat DH catalizeaz decarboxilarea oxidativ a acidului cetoglutaric cu transformarea lui ntr-un compus cu 4 atomi de carbon succinil-CoA.
83
COOH
COOH
Succindehidrogenaza (Succ.DH)
CH2
CH
CH
CH2
FAD
COOH
FADH2
COOH
Acid fumaric
Acid succinic
COOH
CH
Fumaraza
CH OH
CH
COOH
CH2
COOH
H2O
Acid L-malic
Acid fumaric
Malat dehidrogenaza
MDH
NAD^
COOH
CH2
C
NADH^H^
COOH
Acid oxalacetic
84
Bilanul energetic al
I.
Glucoz\
(Glicogen)
Piruvat
II.
Piruvat
CO2 ^ H2O
I.1. Glucoz\
F1,6DP
F1,6DP
(Glicogen)
2. 2 GA3P
3.
2NADH+H+
2.Ac.: 1,3-DPG(NAD)
2PEP
4.
-2 ATP
(-1 ATP)
2 Ac. 3PG
+2ATP
2 Piruvat
+2 ATP
Total
+ 8 ATP
(+9 ATP)
II. Piruvat
CO2 ^ H2O
1.
2 CH3CO-SCoA
+6 ATP
2 Oxal-succininat
+6 ATP
2 Succinil-CoA
+6 ATP
2 Acid succinic
+2 ATP
Acid fumaric
+4 ATP
2 Piruvat
2NAD+
2.
2NADH+H+
2 Izocitrat
2NAD+
3.
2NADH+H+
2 -KG
2NAD+
4.
2NADH+H+
2 Succinil-CoA
2 GDP
2 ATP
5.
2 ADP
2 Acid succinic
2 FAD
6.
2 GTP
2 FADH2
Acid malic
2 Acid oxalacetic
2NAD+
2NADH+H+
Total
Total general:
Glucoz\
Glicogen
+6 ATP
30 ATP
38 ATP
39 ATP
85
CH2 OH
O
O
CH2 OH
O
O
CH2
Fosfarilaza a
O
CH2 OH
O
O P
O
n
G1P
Enzima acioneaz pn cnd rmne un lan format numai din patru resturi de
glucoz pn la ramificaie.
n acest punct intervine enzima de deramifiere, care va transfera mai nti un
trizaharid din captul rmas pe un alt lan, iar
restul rmas legat prin legturi -(16) glicozidice este ndeprtat hidrolitic,
sub form de glucoz liber. Procesul este reluat prin aciunea fosforilazei.
Unii autori susin existena unei enzime cu funciie dubl: att de transferaz ct i
de 1,6-glicozidaz. Aceast enzim se mai numete i enzim de deramifiere.
Prin aciunea celor dou enzime (fosforilaza i enzima de deramifiere) are loc
degradarea aproape total a glicogenului. O mic poriune din molecul (minim patru
86
Adenilat ciclaz\
inactiv\
Adenilat ciclaza
activ\
ATP
Protein-kinaza
inactiv\
AMPc
Protein-kinaza
activ\
4 ATP
4 ADP
Fosforilaza b
inactiv\
4 Pa
Glicogen + Pa
Fosforilaza a
activ\
4 H2O
n G1P
87
Glicogenogeneza
Glicogenul se sintetizeaz din glucoz, dar i din fructoz, galactoz i manoz
dup convertirea lor la glucoz. n sinteza glicogenului, glucoza este mai nti fosforilat
la G6P i apoi izomerizat la G1P. G1P reacioneaz cu UTP i sub aciunea UDPpirofosforilazei se formeaz UDP-glucoz.
88
Sinteza
glicogenului
este consumatoare
de
energie.
Pentru
ncorporarea unei molecule de glucoz n glicogen se consum dou legturi
macroergice: una la formarea G6P (ATP) i alta la obinerea UDP-G (UTP)
2 ATP.
Sinteza glicogenului este reglat de aceiai hormoni care i regleaz i
degradarea (adrenalina i glucagonul). Prin intermediul protein kinazei intermediare,
glicogen sintaza este inactivat prin fosforilare.
Coordonarea celor dou procese implicate n metabolismul glicogenului este
asigurat n primul rnd prin faptul c ambele sunt sensibile la concentraia celular de
AMPc i n al doilea rnd, prin aceea c ambele ci sunt dependente de aceeai enzim,
protein kinaza.
Activitatea fosforilazei i inactivarea glicogen-sintazei se petrece n acelai timp,
ceea ce nseamn c procesele nu se petrec n acelai timp.
89
Membarna celulei
musculare, adipocit
Glc
Glicogen
Glc
Stimulare a
activit\]ii HK
^
Ins ulina
^
Induc]ia
de novo
HK
(enzim\
constitutiv\)
_ G1P
G 6P
_
Glicoliz\
GK (enzim\
inductibil\)
Glc
Glc
HK
(enzim\
constitutiv\)
Membrana celulei
hepatice
Intrarea glucozei n ficat nu este supus acestui control deoarece n ficat este
activ glucokinaza care lucreaz la concentraii mai mari de glucoz (KM = 2.10-2M)
dect hexokinaza (KM = 1.10-5M). Mai mult, enzima nu este inhibat de G6P i poate fi
indus de insulin.
La o concentraie normal a glucozei n snge (1 g), ficatul apare ca un
productor de glucoz, dar atunci cnd glicemia crete, producia de glucoz n ficat
scade i crete consumul de glucoz.
Cnd glicemia atinge o valoare ridicat, intervine rinichiul care i exercit rolul
reglator. Glucoza este continuu filtrat de ctre glomeruli i este reabsorbit la nivelul
tubilor renali. Procesul de reabsorbie este similar cu absorbia glucozei la intestin, adic
prin fosforilare. Procesul fiind enzimatic, consumator de ATP, capacitatea de reabsorbie
este limitat de concentraia enzimei din celulele tubulare la 350 mg/min. Cnd
concentraia glucozei n snge crete, filtratul glomerular conine mai mult glucoz
90
91
prin
intermediul
proteinkinazei, convertete lipaza inactiv n forma sa
activ. La rndul ei, proteinkinaza activ scindeaz primul rest de acid gras i posibil i
pe al doilea.
Glucoz\
Glucoz\
G6P-aza
GK
G6P
G6P
+
F6P
FFK
F1,6DP
F6P
+
_
INSULINA
F1,6DP-aza
_
F1,6DP
_
PEP
PK
Piruvat
PEP
PEP-carboxi
kinaza
Oxalacetat
Piruvat
carboxilaza
Piruvat
Insulina poate interveni la nivelul esutului adipos i prin aciunea direct asupra
unor enzime, printre care activarea hexokinazei care catalizeaz fosforilarea glucozei.
- n ficat, i exercit aciunea prin inducerea sintezei de enzime cu rol n
degradarea glucidelor (GK, FFK, PK) i represia simultan a enzimelor cu rol n
gluconeogenez (piruvat-carboxilaza, PEP-carboxikinaza, F1,6DP-aza i G6P-aza).
Hormonul de cretere secretat de hipofiza anterioar are aciune antagonist
insulinei. Secreia acestui hormon este stimulat de hipoglicemie. Mecanismul su de
aciune const n scderea utilizrii periferice a glucozei i stimularea gluconeogenezei.
Hormonii glucocorticoizi sunt secretai n urma stimulrii cu ACTH, a crui
secreie este declanat de hipoglicemie.
Adrenalina secretat de medulosuprarenal acioneaz prin activarea
glicogenolizei n ficat i muchi.
Glucagonul, produs de celulele din pancreas, are aciune asemntoare cu a
adrenalinei, la nivelul ficatului.
Adrenalina i glucagonul acioneaz prin intermediul sistemului adenilat-ciclaz
AMPc asupra fosforilazei.
92
93
este favorizat depunerea glicogenului, iar cnd glucagonul este predominant (cnd
glucoza scade n snge) este favorizat mobilizarea glicogenului din depozite.
4. Gluconeogeneza din aminoacizi este stimulat prin activitatea crescut a
enzimelor specifice (piruvat-carboxilaza, PEP-carboxi-kinaza, F1,6DP-aza, F6P-aza
induse de glucagon) rezultnd eliminare crescut de uree;
5. Hidroliza trigliceridelor este stimulat (diabet slab);
6. Degradarea acizilor grai prin -oxidare este activat;
7. Sinteza acizilor grai i a trigliceridelor din glucoz pe calea acetil CoA este
reprimat (la animalele sntoase 1/3 din glucidele ingerate sunt transformate n acizi
grai i trigliceride i depozitate n esutul adipos);
8. La nivel hepatic din excesul de acetil CoA se sintetizeaz n exces corpi
cetonici (cetonemie cetonurie acidoz prin scderea capacitii de tamponare);
9. Proteinele organismului sunt degradate i aminoacizii sunt utilizai drept
combustibil;
10. Excesul de glucoz glicozileaz hemoglobina i posibil i alte proteine
eritrocitare.
Manifestrile clinice i paraclinice n diabetul netratat includ:
1. hiperglicemie;
2. glicozurie;
3. creterea acizilor grai liberi;
4. deshidratare i dereglarea balanei electrolitice (poliurie i polidipsie);
5. acidoz prin creterea nivelelor corpilor cetonici. Acetoacetatul, hidroxibutiratul sunt acizi ce conduc la modificarea echilibrului acido-bazic, cu scderea
pH-ului sanguin. Aceasta conduce la com i deces, dac nu este corectat (vezi
metabolismul corpilor cetonici, p. 124).
6. neuropatii, datorit acumulrii de sorbitol n celulele Schwann ce duce la
lezarea celulelor sistemului nervos;
7. retinopatii i orbire (cataract) acumulare de sorbitol n cristalin;
8. defecte renale.
Pentru diagnostic se practic proba de toleran la glucoz sau proba
hiperglicemiei provocate:
- la subiectul sntos revenirea la valoarea normal a glucozei n snge se
realizeaz n aproximativ 2 ore i nu este nsoit de glicozurie;
- la subiectul diabetic, revenirea la valoare iniial se realizeaz n 5-7 ore i este
nsoit de glicozurie.
94
6. METABOLISMUL LIPIDIC
6.1. Digestia i absorbia lipidelor
Lipidele reprezint un grup eterogen de molecule organice insolubile n
ap, care pot fi separate prin extracie cu solveni organici. Lipidele sunt alctuite
din urmtoarele clase de compui: acizi grai liberi (neesterificai);
triacilgliceroli (trigliceride); fosfolipide; sfingolipide; glicolipide; steroizi.
Funciile pe care lipidele le ndeplinesc n organism sunt urmtoarele:
- reprezint sursa major de energie;
- procur componentele necesare formarii barierelor hidrofobe ce separ
coninutul apos al celulelor i structurilor celulare;
-prezint activitate reglatorie sau coenzimatic (hormoni steroizi,
vitamine).
Un adult consuma ntre 60-150 g de lipide zilnic din care 90% sunt
trigliceride, restul fiind colesterol liber, colesterol esterificat, fosfolipide i acizi
grai liberi.
Digestia lipidelor este un proces care consta n hidroliza (n prezena
unor enzime specifice fiecrei clase de lipide) i emulsionarea lor adic
meninerea n stare solubilizat a unor componente hidrofobe ntr -un mediu apos
(n prezena bilei i a srurilor biliare).
Hidroliza este realizat de enzime specifice. Astfel, lipazele acioneaz
asupra trigliceridelor, fosfolipazele (PL) asupra fosfatidelor, colesterolesteraza
asupra esterilor de colesterol. De exemplu:
sunt prezente n mediul apos sub forma unor picturi i hidroliza enzimatic se petrece la
interfaa picturii lipid-ap. Agenii emulsionani interacioneaz deopotriv cu aceste
95
picturi i cu apa, aciune ce are ca urmare ruperea picturilor n altele mai mici,
stabilizarea acestora din urma i mpiedicarea reunirii lor. Ca urmare are loc o mrire a
suprafeei picturii astfel ca enzimele s poat aciona ct mai eficient. Emulsionarea
este realizat prin dou mecanisme: folosirea proprietilor srurilor biliare care au rol
detergent i amestecarea mecanic dat de peristaltism.
Digestia lipidelor ncepe n stomac i este catalizat de o lipaz (care se crede c
este de origine lingual) i de o lipaz gastric, care hidrolizeaz n special trigliceridele
ce conin acizi grai cu caten scurt i medie (prezente n special n lapte). Viteza cu
care are loc hidroliza este excesiv de mic deoarece lipidele sunt neemulsionate i
enzimele pot hidroliza doar trigliceridele situate la interfaa. De aceea se poate spune c
lipidele trec n intestin aproape intacte.
Digestia masiv a lipidelor are loc n intestin unde trigliceridele, esterii de
colesterol i fosfolipidele sunt degradate la produi primari.
Trigliceridele avnd molecule mari nu pot trece prin peretele celulelor mucoasei
intestinale. De aceea asupra lor acioneaz lipaza pancreatic care hidrolizeaz
preferenial acizii grai din poziia 1 i 3 rezultnd n principal 2-monoacilglicerol i
acizi grai liberi.
Hidroliza esterilor de colesterol este realizat de colesterolaza pancreatic cnd
se produc colesterol liber i acizi grai liberi.
Hidroliza fosfolipidelor este realizat de fosfolipaza A2 (prezent n concentraie
mare n sucul pancreatic), enzim activat n intestin de tripsin. Fosfolipaza A 2
ndeprteaz acidul gras din poziia 2 rezultnd lysofosfolipid i bineneles acidul gras.
Acidul gras rmas n poziia 1 poate fi ndeprtat de ctre lysofosfolipase obinndu-se
n final glicerilfosforilcolina i acid gras liber.
Absorbia lipidelor
Acizii grai liberi, colesterolul liber i 2-monoacilglicerolul sunt produii primari
de degradare in jejun. Acetia mpreun cu srurile biliare formeaz micelii de lipide
amfipatice care sunt orientate cu poriunea hidrofob n interior i cu poriunea hidrofil
spre exterior, fiind astfel solubile n mediul apos din lumenul intestinal. Miceliile se
apropie de marginea n perie a celulelor mucoasei intestinale (care constituie locul
primar de absorbie a lipidelor) i sunt absorbite.
n enterocite aceti produi sunt supui unui proces invers, de reconstituire a
produilor iniiali i anume trigliceride, colesterol esterificat, fosfatide, care mpreun cu
cantiti mici de proteine formeaz particule lipoproteice denumite chilomicroni.
Chilomicronii sunt secretai de enterocite i prin sistemul limfatic ajung n circulaia
sanguin; reprezint forma de distribuire a lipidelor exogene.
Resinteza trigliceridelor, a esterilor colesterolului i a fosfolipidelor se realizeaz
n dou trepte, activarea acizilor grai (despre care se va vorbi la metabolismul acizilor
grai) realizat de tiokinaze urmat de esterificarea realizat de aciltransferaze specifice.
96
Trebuie notat c acizii grai cu lanuri mici i medii parcurg un traseu diferit de
cel al celorlalte lipide. Astfel ei sunt absorbii direct de mucoasa intestinal (nu necesit
formarea miceliilor pentru absorbie), i sunt distribuii prin sistemul portal hepatic (nu
prin cel limfatic). Acest considerent trebuie avut n vedere n dieta persoanelor care
prezint malabsorbie pentru alte tipuri de lipide.
6.2. Metabolismul acizilor grai
Acizii grai exist n organism n form liber (neesterificat) sau sub form de
esteri n molecule complexe cum sunt trigliceridele. Acizii grai au un numr par de
atomi de carbon, saturai sau nesaturai, cu 4-24 atomi de carbon.
Acizii grai liberi pot fi oxidai n multe esuturi (ficat, muchi) pentru a furniza
energie.
Trigliceridele reprezint forma de stocare a rezervelor energetice ale
organismului i de aceea funcia lor principal este aceea energogen. Aceste rezerve se
formeaz pe baza excesului de glucide care este convertit n acizi grai, ce sunt
ncorporai n trigliceride i depozitai n esutul adipos.
6.2.1. Biosinteza acizilor grai (acidul palmitic).
Acizii grai din organism provin din urmtoarele procese:
97
98
99
-oxidarea
CH2
C ~S
CoA
Acil-CoA
Acil-CoA
dehidrogenaza
FAD
O
2
R C
FADH2
C ~S
CoA
H
2-trans-enoil-CoA
2 ATP
100
3. Dehidrogenarea la C sub aciunea -hidroxi-acil-CoA-DH pentru a forma ceto-acil-CoA. n acest caz acceptorul de H este NAD+.
NAD+
-hidroxiacil-CoA
dehidrogenaza
NADH+H+
3 ATP
O
R CO
CH2
C ~S
CoA
-cetoacil-CoA
CoA
CH3
O
C ~S
Acil-CoA
O
C ~S
CoA
CoA
101
102
103
104
CH2
OH
Glicerol
kinaza
CH OH
CH2 OH
Glicerol
Difosfatidil glicerol
(cardiolipina)
ATP
CH2
CH2
CH OH
Acil-CoA
ADP
O CO
O CO
R1
CH O CO
R2
CH2 O CO
Fosfatidil-inozitol
CH2 O
CH2 O P
Glicerol-3-fosfat
PPa
R1
CH O CO
CH2
Glicerol-3-fosfat
aciltransferaza
OH
CH O CO
Citidina
R1
CMP
R2
+
CH2 O P O CH2 CH N(CH
2
3)3
Lecitina (Fosfatidil-colina)
CH2
O CO
O CO
CH2 O P
1-Acilglicerol-3-fosfat
Acil-CoA
1 Acil glicerol-3-fosfat
aciltransferaza
CoA
CH2
O CO
R2
CH2 O CO
R3
R1
R2
CH2 O P
1,2 Diacil glicerol fosfat
(fosfatidat)
H2O
Fosfatidat
CDP-colina
fosfohidrolaza
Pi
CH2 O CO R1
CH O CO
R1
CH O CO
R1
CH OH
CH O CO
CDP-Diacilglicerol
O CO
CTP
R2
inozitol
CH2
CoA
CH2
R2
CH2 OH
Aciltransferaza
1,2 Diacilglicerol
R3-COOH
Trigliceride
Sinteza acetoacetatului (cetogeneza) are loc n mitocondriile hepatice din acetilCoA rezultat din -oxidarea acizilor grai.
Corpii cetonici reprezint o important surs de energie pentru esuturile
extrahepatice deoarece:
105
precursorul sintezei corpilor cetonici dar n citoplasm. Acetil CoA necesar sintezei
provine din metabolizarea glucozei, a acizilor grai (n cea mai mare parte) i a unor
aminoacizi.
106
107
lanosterol. Acesta, prin pierderea a 3 grupri CH3 (legturile punctate) prin oxidare la
COOH i decarboxilare, hidrogenarea unei duble legturi si migrarea alteia, conduce
la colesterol:
108
109
110
111
112
113
114
115
116
7. METABOLISMUL PROTEIC
n organism are loc un permanent transfer proteic intertisular. La fondul comun
de aminoacizi contribuie att aminoacizii de origine alimentar, ct i cei provenii din
degradarea proteinelor tisulare. Fondul comun de aminoacizi va fi utilizat pentru sinteza
de proteine, pentru sinteza de produi specializai (serotonina, adrenalina, tiroxina), sau
pentru degradare n scopuri energetice.
Cantitatea minim de proteine necesar organismului este de aproximativ 30
g/zi. Cnd consumul de proteine este inadecvat, ficatul nu poate sintetiza suficiente
proteine plasmatice pentru meninerea balanei ntre fluide i esuturi, favoriznd apariia
edemelor.
Valoarea biologic a unei proteine alimentare depinde de compoziia sa n
aminoacizi. Valoarea este cu att mai mare cu ct coninutul n aminoacizi este mai
bogat, mai variat i mai apropiat de compoziia proteinelor proprii organismului. Msura
acestei valori este dat de coeficientul de utilizare a proteinelor care se exprim prin
raportul:
N ingerat N urinar
N ingerat
Coeficientul indic n ce msur o protein ingerat este ncorporat n
proteinele proprii. Atunci cnd, dup administrarea unei proteine, eliminarea urinar de
azot este crescut, nseamn c aminoacizii din proteina respectiv au fost n principal
degradai i nu ncorporai n proteinele proprii organismului.
Proteinele de origine vegetal, n special fina de porumb, care este lipsit de
triptofan, tirozin i lizin, au valoare biologic redus. Proteinele de origine animal au
valoare biologic ridicat.
Balana azotat nu poate fi meninut dac din alimentaie lipsesc urmtorii
aminoacizi: fenilalanina, valina, triptofanul, treonina, lizina, leucina, histidina, arginina,
izoleucina i metionina, aa numii aminoacizi eseniali. Arginina i histidina sunt
considerai aminoacizi semieseniali deoarece n perioada de cretere, necesarul pentru
arginin i histidin este crescut i sinteza endogen nu asigur ntreaga cantitate
necesar.
Cnd unul dintre aminoacizii eseniali lipsete, sinteza proteinelor n componena
crora intr aceti aminoacizi nu mai are loc, iar ceilali aminoacizi sunt dezaminai i
degradai; bilanul azotat devine negativ.
Valoarea biologic a unei proteine depinde i de digestibilitatea ei; proteinele din
plante, fiind protejate de un nveli de celuloz, sunt mai greu digestibile. Un caz aparte
l constituie albuul de ou crud i fasolea soia, care conin factorii antitriptici ce se opun
digestiei.
7.1.Digestia i absorbia proteinelor
n tubul digestiv, proteinele nu pot fi absorbite ca atare i de aceea sunt supuse
aciunii unor enzime numite peptidaze sau proteaze, care le scindeaz pn la
aminoacizi.
117
CH
R5
R3
CO
Aminopeptidaza
NH
CH
CO NH
CH
CO
NH CH CO
R2
Endopeptidaza
R4
NH CH
CO
OH
Carboxipeptidaza
Val-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys
T rip s ina
Chimotripsinogen
Proelastaza
Elas taz a
Procarboxipeptidaza
118
119
7.2.2.
Catabolismul aminoacizilor
Spre deosebire de acizii grai i glucoz, aminoacizii nu pot fi stocai n
organism. Surplusul de aminoacizi care depete necesarul pentru sinteza de
proteine i alte biomolecule, este supus degradrii.
7.2.2.1. Catabolismul gruprii amino
Animalele superioare, printre care i omul, , excret azotul proteic sub
form de uree, compus solubil n ap i netoxic. Prin catabolizarea aminoacizilor,
gruparea -amino eliberat sub form de ion NH 4+, este convertit la uree, iar
scheletul de C rmas este transformat n acetil CoA, piruvat sau alt intermediar din
ciclul acizilor tricarboxilici. Aceti din urm compui sunt utilizai drept surs de
energie i pentru sinteza de acizi grai, corpi cetonici i glucoz.
ndeprtarea gruprii -amino se realizeaz prin dou procese:
1. transaminarea, n care gruprile amino de la diveri aminoacizi sunt
colectate sub form de glutamat;
2. desaminarea oxidativ a glutamatului, prin care se elibereaz NH4 ,
convertit ulterior n uree.
R1 C
O
COO- + R2 CH COO
+
NH3
120
C O
NH3
CH2
-AA
CH2
COO
R C
COO
CH NH3
CH2
-KA
CH2
COO-
COO-
-cetoglutarat
Transaminarea are
loc cu viteze diferite dup naturaGlutamat
aminoacidului. Cel mai
activ donor de grupare amino este acidul aspartic, dup care urmeaz alanina, valina,
leucina, izoleucina, tirozina, fenilalanina, metionina, triptofanul, arginina cisteina.
Glicocolul, serina, histidina reacioneaz mai greu, iar lizina, treonina i iminoacizii
(prolina i hidroxiprolina) nu particip la transaminare.
Dintre cele 13 aminotransferaze identificate, cele mai importante sunt:
aspartat transaminaza (AST sau GOT) care are afinitate pentru perechea
oxalacetat-glutamat:
COO
COO
CH2
C O
CH2
+
CH2
HC
COO
CH2
+
NH3
COO
COO
HC NH2
CH2
+
C O
COO
COOH
glutamat
oxalacetat
CH2
COOH
-cetoglutarat
aspartat
COO
COO
COO
C O
CH3
piruvat
CH2
COO
CH2
CH NH2
HC
NH3
COO
glutamat
CH3
alanin\
CH2
+
CH2
C O
COO
-cetoglutarat
121
Ambele
transaminaze
sunt eliberate n snge n urma lezrii
esuturilor sau prin moartea celulelor. n consecin dozarea activitii lor n plasm este
utilizat n diagnosticul bolilor de inim i ficat, cum ar fi infarctul miocardic i hepatita,
respectiv.
Prin transaminare se acumuleaz gruprile amino de la majoritatea aminoacizilor
pe acidul glutamic care, prin desaminare oxidativ va elibera NH4+ i acidul cetoglutaric necesar unui nou proces de transaminare.
Dezaminarea oxidativ - pierderea gruprii amino sub form de amoniac cu
formarea unui cetoacid. Reacia este catalizat de D- sau L-aminoacidoxidaze, active n
ficatul i rinichiul animalelor superioare, a altor animale i n microorganisme.
n acest proces, aminoacidul este dehidrogenat la iminoacid de ctre o
flavoprotein (Fp), apoi iminoacidul format, spontan, n prezena apei, pierde amoniacul
i trece n cetoacid.
Singura aminoacid-oxidaz cu activitate destul de mare este glutamat
dehidrogenaza (Glu-DH) distribuit n toate esuturile i n special n ficat. Enzima din
ficat este modificat alosteric de ATP, GTP, NADP+ care o inhib i de ADP care o
activeaz. Poate lucra fie cu NAD+ fie cu NADP+.
L-glutamat-DH catalizeaz reacia:
-cetoglutarat
L-Glutamat
Glu-DH
H2O
NH4
NAD(P)+
NAD(P)H+H+
Reacia este reversibil i poate lucra fie spre formarea de amoniac din glutamat
(catabolism), fie fixarea lui pe alfa-cetoglutarat (biosinteza), funcie cu importan n
plante i bacterii, care sintetizeaz aminoacizi din glucoz i amoniac.
COO+
CH NH3
Gl-DH
COO Glutamat
COO
NH
NAD+(P)
NAD(P)++H+
CH2
CH2
CH2
CH2
CH2
COO
H2O
COO Iminoacid
CH2
+
NH4
COO -cetoglutarat
122
O
C
H2O
NH2
NH3
(CH2)2
COOH
(CH2)2
+
NH3
_
COO
+
NH3
_
COO
glutamat
CH
CH
glutamin\
+ NH3
(CH2)2
+
CH NH3
-
COO
Glutamat
Glutamin-sintetaza
Mg++
NH2
(CH2)2
+
CH NH3
ATP
ADP+Pa
COO
Glutamin\
123
124
3. Sinteza argininosuccinatului catalizat de arginino-succinatsintetaza, utilizeaz energia furnizat de ATP, echilibrul reaciei fiind deplasat
spre sinteza argininosuccinatului.
4. Clivarea argininosuccinatului la arginin i fumarat.
Clivarea reversibil este catalizat de argininosuccinaz, o enzim
stereospecific identificat n mitocondriile de ficat i rinichi.
Fumaratul format poate fi convertit la oxalacetat prin aciunea fumarazei i
malatdehidrogenazei din ciclul Krebs, iar oxalacetatul prin transaminare
regenereaz aspartatul.
5. Clivarea argininei la ornitin i uree este reacia ce nchide ciclul ureei
regenernd ornitina, substratul pentru reacia 2.
CO2
+
+ NH
4
Carbamoil-Psintetaza
Mg ++
2ATP
O
H2 N C
O
O
P
O
NH3
CH2
carbamoil-P
2 ADP+Pa
OCT
Pa
(CH2 )2
+
CH
COO
NH3
-
Ornitin\
NH2
C
Argininosuccinat-sintetaza
CH2 NH
Mg ++
(CH2 )2
CH
NH3
COO
Citrulin\
COO -
NH
COO
CH
C NH CH
CH2 NH
CH2
(CH2 )2
COO
CH
ATP
AMP+PPa
COO
Arginino-
4 succinaza
-
NH2
-
CH
NH3
COO -
Argininosuccinat
CH
CH2
-OOC
COO -
Fumarat
Aspartat
NH2
C
CH2 NH
NH
Arginaz\
(CH2 )2
CH
NH3
COO-
Arginin\
NH2
NH2
H2 O
Ornitin\
Uree
125
Dintre cele 5 enzime care particip la acest proces, reacia arginazei este specific
acestei ci metabolice i deci specific animalelor ureotelice. Ea se gsete numai n ficat,
organ unde are loc sinteza ureei.
OCT este, de asemenea, o enzim strict hepatic i apariia ei n plasm va constitui un
indicator de lezare a parenchimului hepatic.
126
Cantiti mici de uree se pot forma i n creier i rinichi, dar fr semnificaie pentru
metabolismul amoniacului.
Anomalii genetice n ciclul ureei
Au fost descrise defecte pentru toate cele 5 enzime implicate n sinteza ureei:
1. Defectul de carbamil-fosfat-sintetaz, hiperamonemia tip I;
2. Defectul de OCT , hiperamonemia tip II;
3. Defectul de argininosuccinat-sintetaz , citrulinemie;
4. Defectul de argininosuccinaz, argininosuccinaturie;
5. Defectul de arginaz, hiperargininemie.
Oricare dintre aceste defecte se manifest prin simptome specifice intoxicaiei cu
amoniac a crui concentraie seric poate crete de la 10-20 g% la 500 g%.
Subiecii cu astfel de defecte genetice au o intoleran i o repulsie fa de alimentele
bogate n proteine.
Intoxicaia cu amoniac se manifest prin tremurturi ale membrelor, dificulti n
vorbire, tulburri de vedere, iar n cazuri severe, coma i moartea. Simptomele se instaleaz
atunci cnd nivelurile hepatice i cerebrale de amoniac sunt crescute. Intoxicaia cu amoniac
este considerat factor important n etiologia comei hepatice, motiv pentru care tratamentul, n
asemenea situaii, este orientat spre scderea amoniacului sanguin.
7.2.2.2. Catabolismul scheletului de carbon al aminoacizilor
n funcie de compuii ce pot fi sintetizai din produii finali ai cilor de degradare,
aminoacizii pot fi grupai n trei categorii:
1. aminoacizii glucogenici care sunt degradai la piruvat sau la intermediari din ciclul
Krebs, compui ce vor fi convertii la glucoz, via fosfoenolpiruvat (alanina,
arginina, acidul aspartic, cisteina, acidul glutamic, glicina, histidina, hidroxiprolina,
metionina, prolina, serina, treonina i valina);
2. aminoacizi cetogenici care sunt catabolizai fie la acetil-CoA, fie la acetoacetilCoA, din care vor rezulta corpi cetonici (leucina);
3. aminoacizi glucogenici i cetogenici care pot genera att glucoz ct i corpi
cetonici (izoleucina, lisina, fenilalanina, triptofanul i tirozina).
Punctele de intrare n ciclul Krebs sunt acetil-CoA, -cetoglutarat,
succinil-CoA,
fumarat i oxalacetat:
127
Ala
Gly
Cys
Ser
Thr
Glucoz\
Fosfoenol piruvat
Piruvat
Leu
Ile
Trp
Acetil-CoA
Phe
Lys
Trp
Leu Tyr
Acetoacetil-CoA
Glucogenici
Asp
Asn
Phe
Tyr
Asp
Cetogenici
Oxalacetat
Gluco-, cetogenici
Citrat
Fumarat
Succinil-CoA
Ile
Met
Val
Alfa-Cetoglutarat
Glu
Gln
His
Pro
Arg
128
NH2
HN C
NH
CH2
+
NH3
CH2 COO
Arginin-glicintransamidinaza
(rinichi)
(CH2 )2
CH
COO
NH2
HN C
NH
CH2
_
COO
Ornitin\
+
NH3
_
Glicocol
Glicociamin\
(Guanidinacetat)
Arginin\
transmetilarea transferul gruprii metil de pe metionina activat (S-
ATP
Guanidin acetatmetil-transferaza
NH P
HN C
(ficat)
S-Adenozilmetionin\
_
CH2 COO
CH3
S-Adenozilhomocistein\
creatin- P
NH C O
neenzimatic HN C
(mu[chi)
N H2 C
Pa + H2 O
CH3
creatinin\
129
O
_
OOC
CH
+
NH3
CH2
CH2 C
O
HN CH
C NH CH2
COO
CH2
SH
-Glutamil-cisteinil-Glicin\
Glutation (GSH)
GS-R + 2 H
130
_
NH3
(CH2)2
S
Metionin-adenoziltransferaza
ATP
CH3
Metionina
NH2
N
N
N
N
O
Pa+PPa
Hipermetioninuria
COO
+
CH2 S
CH2 CH2 CH
+
CH3
NH3
HO OH
S-Adenozilmetionin\
("metionin\ activat\";SAM)
COO
Transmetilaz\
CH
_
+
NH3
CH2
Acceptor
Acceptor-CH3
Succinil-CoA
CH2
SH
Homocistein\
131
NADP+
II
Tetrahidrobiopterin\
O2
Dihidrobiopterin\
I
CH2 CH COO
H2O
HO
CH2 CH COO
NH3
NH3
Fenilalanina
Fenilcetonuria
(PKU)
Tirozina
132
Alfa-KG
OH
7
Glu
1
CH2
Tirozintransaminaz\
O2
4
3 CH2
+
CH NH
3
COO
CO2
Hidroxilaz\
(dioxigenaz\ )
T i ro z i n e mi a
t i p II
p-hidroxifenil-piruvat
Fe2+
2 9 3
CH2 COO
4
OH
T i ro z i n e mi a
ne o natal \
O
Homogentizat
oxidaz\
OH
7
Homogentizinc
(dihidroxifenilacetat)
2 CH O
1 COO
Tirozina
vit.C,
Cu 2+
8
C 8
Fumaril-acetoacetat
7 CH2
Izomeraz\ 6
CH2
2 - 4 hidrolaz\
2 3
3
9
9
C CH2 COO
O C CH2 COO
5
- 4
COO
O
OOC
4
C
7
Maleilacetoacetat
Fumarilacetoacetat
A l c a p t o n u ri a
-OOC4
5
C
6
H C
H
7 COO
Ti ro z i n e mi a t i p I
( t i ro z i n o s i s )
2
8
9 3
CH3 C CH2 COOH
Beta-cetotiolaz\
O
CoASH
Fumarat
SCoA
CH3 CO
CH3 COO-
Acetilacetat
Glucoz\
133
Tirozina
L-Dopa
Dopamina
Dopamina
Tiroxina
Norepinefrina
Melanina
Epinefrina
7.2.2.3.5.2.Biosinteza catecolaminelor
Celulele neuronale convertesc tirozina la norepinefrin i epinefrin prin
urmtoarea succesiune de reacii:
OH
1
CH2
+
CH NH3
_
COO
Tirozina
OH
Tirozinhidroxilaza
OH
Tetrahidrobiopterin\
CH2
Dihidrobiopterin\
DOPAdecarboxilaza
2
(PLP)
CO2
+
CH NH3
_
COO
OH
O2
CH OH
OH 4
Norepinefrina
CH2
NH2
Dopamina
Fenol-etanolaminaN-metil-transferaz\
S-Adenozilmetionina
OH
OH
CH OH
CH2 NH
CH2
NH2
OH
CH2
DOPA
Dopamin3 beta-oxidaza
(Cu2+ , O2 )
OH
S-Adenozilhomocisteina
Epinefrina
CH3
134
I
HO
CH2
CH
+
NH3
_
COO
HO
CH2
MIT
CH COO
+
NH3
T3
Tirozina
DIT
I
HO
CH2
I
DIT
CH
+
NH3
_
COO
I
HO
CH2
I
T4
CH COO
+
NH3
135
CH COO
+
NH3
Triptofan oxigenaza
Fe
O2
COO
CH2 CH
NH3
NHCHO
N-Formil-kinurenina
Triptofan
O
Kinureninformilaza
C
N H2
_
HCOO
H2 O
COO
CH2 CH
Kinureninhidroxilaza
NADPH
NH3
O2
Kinurenina
O
C
COO
CH2 CH
N H2
NH3
OH
COO
Kinureninaza
P5 P
NH2
Alanin\
H2 O
O2
OHC
OH
3-Hidroxi-antranilat
3-Hidroxi-kinurenin\
3-Hidroxi-antranilatoxidaza
Vit.PP
(NAD^ )
_
COO
CH
C
HC
_
OOC
NH3
3%
2-Acroleil-3-aminofumarat
97%
Acetoacetil-CoA
CO2
136
O
C
NH2
OH
OH
CH2
CH
_
COO
+
NH3
+
NH4
COO
OH
Acid xanturenic
3-Hidroxi-kinurenin\
CH2
N
H
CH
COOH
NH2
Triptofanhidroxilaza
O
NADPH+H+
Triptofan
HO
CO2
CH2
HO
CH2
N
H
NADP+
CH
COOH
NH2
5-Hidroxi-triptofan
CH2 NH2
N
H
Serotonin\
137
Serotonina
Monoaminoxidaz\ (MAO)
HO
CH2 COOH
O2
N
H
NH3
Acid 5-OH-indol-acetic
CH3
H3 CO
CH2 COOH
N
H
Acid 5-Metoxi-indolacetic
7.2.2.3.6.3.Biosinteza melatoninei
Melatonina este un hormon produs de glanda epifiz care are efecte asupra sistemului
hipotalamus-hipofiz.
Se formeaz prin acetilarea la azot a serotoninei, urmat de metilarea la gruparea
OH din poziia 5.
HO
CO2
HO
Trp
N
H
CH2
N
H
Acetil CoA
CoA
serotonin\
NH
C O
CH3
5-HO,N-acetiltriptamin\
SAM
SAH
H3CO
CH2
N
H
NH
C O
CH3
Melatonin\
138
N1 6 5C
Aspartat
C
N10-Formil-FH
N
7
8C
N5-N10-Metenil-FH4
N
H
Glutamin\
O H 2C
O
H
H
OH
R5P
H
H
OH
OH
PRPPAmido139
PO H2C
O NH2 3
PO H2C
H
1 sintetaza
2
transferaza
O
H
H
H
H
Mg2+
H
H
O
P
H
P Gln
ATP
OH
OH
Glu
AMP
OH OH
PPa
5'-FosfoPRPP
Ribozil-Amino
O
..........................
11
HN
N
AMP
ADP
ATP
GMP
GDP
GTP
R5P
Acid inozinic
Adenina
PRPP
AMP
PPa
140
PPa
PRPP
Hipoxantina
IMP
HGPRT
Guanina
GMP
PPa
PRPP
Absena total sau aproape total a HGPRT determin sindromul LESCHNYHAN, care se manifest prin tulburri neurologice foarte grave, deficien mental,
agresivitate, hiperuricemie, tendin la automutilare.
Reutilizarea ribonucleozidelor este realizat la om numai de adenozinkinaz,
enzim ce nu este capabil s fosforileze guanozina i inozima.
Adenozina
Adenozin-kinaza
ATP
AMP
ADP
141
NH2
N
N
5'
HOH2C
Adenozindeaminaz\
NH3
N
H
Pa
R1P
Hipoxantina
HO OH
Purinnucleotidfosforilaza
R1P
xantinoxidaza
(Mo,Fe)
O2
Inozina
Pa
HOH2C
O
Purin-ribonucleotidfosforilaza
HN
1'
H 2N
HN
HOH2C
HO OH
Adenozina
HN
O
HN
H2N
O
N
Guanaza
N
H
NH3
Guanina
HN
O
N
H
Xantina
HO OH
Guanozina
Acidul uric este foarte puin solubil la pH acid. Sarea sa de Na este mai
solubil (7 mg% dl ser la 37 0C). Concentraia plasmatic de acid uric este de
aproximativ 6 mg% dL.
142
La nivelul tubilor renali, acidul uric este iniial reabsorbit din filtratul
glomerular, fiind apoi eliminat prin secreie tubular.
Afeciunea caracteristic dereglrii metabolismului purinnucleotidelor este
guta, o maladie destul de rspndit, caracterizat prin hiperuricemie
7 mg
% dL ser.
Creterea concentraiei de acid uric duce la depunerea de cristale de acid uric
n articulaii (artrita gutoas), n rinichi (nefrolitiaza uratic) i n alte esuturi sub
form de tofi.
Hiperuricemia poate fi cauzat de un consum exagerat de carne sau de o
tulburare genetic n sinteza ribonucleotidelor.
Guta metabolic primar. Cauza poate fi activitatea crescut a PRPPsintetazei, fie insuficiena mecanismelor de reglare a sintezei (datorit rezistenei
PRPP-amino transferazei la inhibiia feed-back), fie perturbrii reutilizrii
purinelor.
n unele cazuri, producia de urai este normal dar exist un defect nnscut
n mecanismele de secreie tubular a acidului uric guta primar renal.
Guta metabolic secundar este asociat unor boli ca urmare a unui
metabolism intens al acizilor nucleici cum ar fi leucemii, iradierea cu raze X, defect
de glucoz-6-fosfataz (glicogenoza de tip I sau boala von Gierke).
Cele mai bune rezultate n tratarea gutei se obin prin administrarea
allopurinolului, inhibitor competitiv pentru xantin-oxidaz (XO).
O
HN
N
N
N
H
Allopurinol
143
Gln
C
N1
C2
CO2
5C
4
Asp
144
9. METABOLISMUL CROMOPROTEINELOR
Cromoproteinele porfirinice sunt formate dintr-o protein i o grupare
prostetic, reprezentat de o structur porfirinic.
Porfirinele sunt compui ciclici, formai din patru nuclee pirolice unite prin
legturi metenil (-C). O proprietate caracteristic a porfirinelor este formarea de
complexe cu ionii metalici, care se leag de atomii de azot din nucleele pirolice.
Printre porfirinele naturale care ndeplinesc funcii biologice importante se
numr: hemoglobina, mioglobina, citocromii, catalaza, peroxidazele, triptofanpirolaza, clorofila etc., hemoglobina fiind porfirina major din organism.
9.1. Biosinteza hemoglobinei
Sinteza hemoglobinei are loc n celulele eritropoietice din mduva osoas,
ficat i splin.
Biosinteza hemului se realizeaz din succinil-CoA i glicocol. ntr-o
prim reacie, n mitocondrie, are loc condensarea succinil-CoA cu glicocolul sub
aciunea -aminolevulinat-sintazei (ALA-sintaza) concomitent cu eliminarea CO 2 i
formarea acidului -aminolevulinic (ALA). Reacia necesit vitamina B 6 pentru
activarea glicinei (este posibil ca glicina s se fixeze la piridoxal-5-fosfat (P-5-P)
prin legtur de baz Schiff). Activitatea -ALA controleaz ntreaga sintez. n
continuare, prin condensarea a dou molecule de acid -amino-levulinic (reacia 2),
se formeaz un nucleu pirolic, porfobilinogen (PBG).
Din patru molecule de porfobilinogen (reacia 3) se formeaz un tetrapirol
linear care rmne legat de enzim.
Tetrapirolul linear se ciclizeaz, prin pierderea gruprii amino la
uroporfirinogen III, n care aranjamentul lanului este asimetric (reacia 4). Reacia
se petrece prin cooperarea a dou enzime, uroporfirinogen sintaza i cosintaza.
Rolul cosintazei este de a izomeriza unul din nucleele pirolice pentru a se
forma uroporfirinogen III. n aceast reacie se formeaz i mici cantiti de izomer
simetric, uroporfirinogen I, biologic inactiv.
145
_
COO
CH2
CH2
C
_
COO
+
H3N
+
CH2
_
COO
SCoA
1 -ALA-sintaz\
(P5P)
CH2
C
CO2
HSCoA
C O
(CH2)2
+
O C
CH2
H N
NH2
_
COO CH2
CH2
CH2
2 ALA-dehidrataz\
C
CH2 N
H
NH2
-ALA
CH
Porfobilinogen (PBG)
Uroporfibilinogen
3
sintaz\
2 H2O
H CH
-ALA
4PBG
_
COO
_
COO
CH2
C H2
Acid-Aminolevulinic (ALA)
Glicocol
_
COO
CH2 NH2
O
Succinil-CoA
CH2
H2N CH2
3NH3
P
N
H
CH2
P
N
H
CH2
P
N
H
CH2
P
N
H
Tetrapirol liniar
A
P
Uroporfirinogen
sintaz\
C
C H2
^
A H2
N
A
H
4 cosintaz\
NH HN
H
N
P
C H2 P
NH3
H2C
P
A
Uroporfirinogen III
Uroporfirinogen- M
decarboxilaza
4 CO2
P
N
H
NH
M
HN
H
N
P
P
P
M
Coproporfirinogen III
146
M
Coproporfirinogen- M
6 oxidaza
2 CO2
4 H2
M Protoporfirinogen- M
7 oxidaza
HN
NH
N
6H
M
M
8
Ferochelataz\
Fe2^
Fe2+
HN
NH
N
V
M
Protoporfirina IX
M
N
V
N
Protoporfirinogen IX
A - acid acetic
P - acid propionic
M - metil
V - vi
M
Hem
147
Succinil-CoA ^ Glicocol
1
ALA-sintaza
ALA
ALA-dehidrataza
Porfobilinogen (PBG)
Uroporfirinogen I - I Porfiria acut\ intermitent\, PAI (hepatic\)
sintaza
dureri abdominale, simptome neuropsihice
urin\: PBG^
uroporfirinogen^
Tetrapirol liniar
4
Uroporfirinogen IIIcosintaza
Uroporfirinogen III
Uroporfirinogendecarboxilaza
urin\: uroporfirin\^
PBG-
Coproporfirinogen III
Coproporfirinogenoxidaza
Protoporfirinogen III
V Porfiria mixt\ (hepatic\)
7 ProtoporfirinogenFotosensibilitate, dureri abdominale,
oxidaza
deregl\ri neuropsihice
urin\: uroporfirinogen^
PBG^
fecale: coproporfirinogen^
urin\: PBG^
uroporfirinogen^
fecale: protoporfirinogen^
Ferochelataza
Fe2^
VI Protoporfiria (eritropoietic\)
Fotosensibilitate
fecale: protoporfirin\^
eritrocite: protoporfirin\^
Hem
Protein\
Hemoprotein\
148
149
150
151
152
153
154
IgD = Imunoglobulina D
IgE = Imunoglobulina E
IgG = Imunoglobulina G
IgM = Imunoglobulina M
-KA = Ceto acid
-KG = Acid ceto glutaric
-KGDH = Cetoglutarat dehidrogenaz
LCAT = Lecitin:Colesterol- acil-transferaza
Leu = Leucin
LDL = lipoproteine cu densitate scazut
LDH = Lactat dehidrogenaz
Lys = Lizin
MAO = Monoamin-oxidaz
MDH = Malat dehidrogenaz
Met = Metionin
MIT = Monoiod tirozin
N5-CH3-FH4 = N5-CH3-tetrahidrofolat
N5-formil-FH4 = N5-formil-FH4-tetrahidrofolat
N10-CH3-FH4 = N10-CH3-FH4 -tetrahidrofolat
N10-metenil-FH4 = N10-metenil-FH4 tetrahidrofolat
NAD (NAD+) = Nicotin adenin dinucleotid(forma oxidat)
NADH (NADH + H+) = Nicotin adenin dinucleotid (forma redus)
NADP (NADP+) = Nicotin adenin dinucleotid fosfat (forma oxidat)
NADPH (NADPH + H+) = Nicotin adenin dinucleotid fosfat (forma redus)
Pa = Fosfat anorganic
PDH = Piruvat dehidrogenaz
PEP = Fosfoenol piruvat
PEP-carboxikinaza = Fosfoenol piruvat-carboxikinaza
3-PG = Acid 3-fosfogliceric
PGK = Fosfoglicerat kinaz
PGM = Fosfogliceratmutaz
Phe = Fenilalanin
PHI = Fosfohexo-izomeraz
PK = Piruvat-kinaz
PKU = Fenilcetonurie
Pro = Prolin
PRPP= Fosforibozil-pirofosfat
155
PTH = Parathormon
OCT = Ornitin carbamoil-transferaz
QPRT = Chinoleat-fosforibozil-transferaz
RBP = Proteina de legare a retinolului(Retinol binding protein)
R-1-P = Riboz-1-fosfat
SAM = Sulf-adenozil-metionin
SAH = Sulf-adenozil-homocistein
Ser = Serin
SHMP = untul hexoz-monofosfatilor
SNC = Sistem nervos central
Succ.DH = Succinil dehidrogenaz
T = Timin
Thr = Treonin
Trp = Triptofan
TPP = Tiamin pirofosfat
Tyr = Tirozin
U = Uracil
UDP = Uridin difosfat
UDP-G = Uridin difosfat-glucoza
UTP = Uridin trifosfat
U.V. = Radiaii ultraviolete
Val = Valin
VLDL = lipoproteine cu densitate foarte scazut
XO = Xantin oxidaz