Calea de semnalizare Notch

Doina Colac, grupa 1311, facultatea Medicin General

Coordonator: Eugen Simionic, dr. n biologie

Subiecte abordate:
1

Calea de semnalizare Notch. Generaliti. Funcii

Componentele de baz ale cii. Proteinele cheie.

Mecanismul de transmitere a semnalului

Notch i procesele de dezvoltare ale organismului

Patologiile cu implicarea defectelor Notch

Concluzii i bibliografie

Calea de semnalizare Notch. Funcii.

Notch cale de transducie celular conservat
evolutiv n genomul organismelor pluricelulare.

Stabilete modele de comunicare intercelular, cu

reglarea expresiei genelor i a diferenierii celulare
n diferite etape ale dezvoltrii intra i
extrauterine.
Are rol decisiv n diferenierea celulelor binare i
meninerea populaiilor de celule-stem i asigur:
inhibiia lateral ,
asimetria specializrii celulare i
formarea frontierelor tisulare.

Componentele de baz
1.

Receptorii Notch 1-4:

Glicoproteine transmembranare heterodimerice
Se deosebesc prin nr. de secvene repetitive EGFlike i dimensiunile NICD
Conin:
domenii extracelulare(interaciunea cu ligandul),
domenii transmembranare (clivate specific)
domenii intracelulare n componena NICD
(factor de transcripie).
4 situsuri de clivare specific S 1-4

!!!Calea Notch nu include mesageri secunzi.

!!!Concentraia citoplasmatic NICD este factorul
principal de reglare.

Secvene repetitive
EGF(epidermal growth factor)-like
(29-36)

EC

IC
NICDDomeniul
Notch
Intracelular
(factor de
transcripie)

Lin-12(regiune bogat n cistein)

Domenii de heterodimerizare(leg.necovalente)
MP
RAM - domeniu de asociere
intranuclear la CBF1
Secvene repetitive de ankirin(6)mediaz interaciunea dintre NICD i CBF1
TAD-domeniu de transactivare
PEST(Prolin, Acid Glutamic,
Serin i Treonin)domeniu de degradare

2. Liganzii Notch
Delta 1, 3-4; Jagged 1-2:
Glicoproteine transmembranare

Diferena: Jagged conine n domeniul

extracelular un numr mai mare de secvene
repetitive EGF i o regiune bogat n cistein
n apropierea membranei.
Proteinele fac parte din familia DSL(DSL- boxa
de interaciune cu receptorii Notch n
regiunea secvenelor EGF repetitive 11 i 12).

!!!Concentraiile mari de ligand determin efectul inhibitor al Notch.

Concentraiile mici de ligand au efect activator.
!!! n aceeasi celula se pot contine att receptorii Notch, ct i liganzii
Delta i Jagged.

Liganzii Delta i Jagged

SP- peptid de semnalizare
DSL interaciunea
cu Notch

Secvene repetitive EGF

CRD domeniu
bogat n
cistein

Proteine-cheie i rolul lor funcional

Notch 1-4

Receptori transmembranari glicoproteici i factori de transcripie

Delta 1, Delta 3-4, Jagged 1-2

Liganzi transmembranari specifici receptorilor Notch

CBF1 (C-promoter binding factor1)

Factor de transcripie al ADN

Mastermind 1-3

Co-activator al transcripiei

POFUT - 1

O-fucoziltransferaza GDP-fucozei pe proteine, modific

receptorii i liganzii

Fringe lunatic, manic i radical

O-fucozilpeptid -1,3-N-acetilglucozaminiltransferaza,
modific receptorii i liganzii

ADAM10, ADAM17

Metaloproteaze, cliveaz Notch n S2

Presenilin 1-2, nicastrin, APH1,

PEN2

Proteine ale complexului -secretaz, cliveaz Notch n

S3,S4

Fbw7/Sel10

Protein F-box care ubiquitineaz situsurile fosforilate ale

NICD, urmnd degradarea

Mind bomb, skeletropin,

neuralized 1-2

E3-ubiquitin-protein ligaze ce intesc Delta/Jagged liganzii i

regleaz endocitoza lor

Mecanismul de transmitere a semnalului

Dinamica receptorului Notch n

transmiterea semnalului
Sinteza pre Notch i fucozilarea

Reticul Endoplasmatic

E-O-fucoziltransferaza

Glicozilarea i clivarea n situsul S1

Aparatul Golgi

E1-Fringe, E2-Furin

Heterodimerizarea i integrarea membranar a Notch matur

Citoplasm

Interaciunea Ligand(Delta-Jagged) Receptor Notch

Spaiul extracelular

DSL-EGF 11-12

Clivarea receptorului n situsul S2

Spaiul extracelular

ADAM proteinaza

Clivarea receptorului n S3 i S4, eliberarea NICD

Membrana plasmatic

-secretaza

Tranziia liber a NICD spre nucleu

Citoplasm, membrana nuclear

Interaciunea cu factorul de transcripie CSL i co-activatorul Mastermind

Nucleu

Eliberarea co-represorilor i activarea transcripiei genelor-int

Nucleu-Promotorul genei

Co-activatori

Fosforilarea NICD n domeniile TAD i PEST

Nucleu

Kinaze specifice

Tranziia liber spre citoplasm

Membrana nuclear

Ubiquitinarea situsurilor fosforilate i degradarea NICD

Citoplasm

E1-Sel10, E2- proteosom

Notch i procesele de dezvoltare

Diferenierea celulelor n
dezvoltarea cristalinului.

Morfogeneza palatului dur.

Dezvoltarea dinilor.
Diferenierea celulelor ciliate
ale organului Corti i a
celulelor bazale.
Adeziunea dintre epiteliocite.
Proliferarea epiteliului.
Diferenierea foliculului
pielos.
Homeostazia epitelial.

Notch2 determin
diferenierea podocitelor i a
celulelor tubulare proximale.

Echilibrul gliogenez/neurogenez.
Meninerea celulelor-stem. Polaritatea
celulelor neuroepiteliale.
Diferenierea precursorilor
miogeni nalt proliferativi i a
mioblatilor. Previne diferenierea
mioblatilor n miotubuli dup
traumatisme.
Stabilirea modelului cardiac.
Diferenierea
cardiomiocitelor.Dezvoltarea
valvelor, trabeculelor ventriculare,
aortei i trunchiului pulmonar.
Diferenierea epiteliocitelor
prostatice (Notch 1)
Supravieuirea celulelor stromale
ale prostatei(Notch 2, Delta-like 1)

Patologii cu implicaii ale Notch

Boala

Manifestare

Cauzele genetice

Sindromul
Alagille

Defecte de dezvoltare ale

rinichilor, ochilor, inimii i
scheletului i ductului biliar

Mutaii n gena Jagged 1

(transmitere autosomal
dominant)

Sindromul
CADASIL

Substituia miocitelor netede

arteriolare cu granulaii
eozinofile

Mutaii n gena Notch 1 i 3

(transmitere autosomal
dominant)

Leucemie
limfoblastic
acut (LT)

Defecte de recombinare a
receptorului limf. T i formare
a Notch1
hipersemnalare
ligand-independent
Defecte ale coastelor ce
cauzeaz anomalii de
segmentare vertebral i a
dezvoltrii trunchiului
Tulburri psihice

Mutaii n domeniul de
heterodimerizare al Notch1 sau
n domeniul PEST al NICD.
Hiperactivitatea cii

(arteriopatie
cerebral)

Disostoz
spondilocostal

Schizofrenia

Mutaii ale Delta-like 3. Mutaii

ale genei Lunatic Fringe.

Mutaii n gena Notch 4.

Concluzii

Elucidarea complexitii interaciunilor ligand-receptor i

a interferenelor cii Notch cu alte ci de semnalizare este
crucial pentru o abordare terapeutic corect a
patologiilor n care este implicat, inclusiv n
cancerogenez.

n prezent, sunt elaborate strategii de reglare exogen a

diferitor etape din semnalizarea Notch, inclusiv peptide de
interferen cu proteina MAML nuclear i anticorpi ce
blocheaz receptorii Notch, aciunea specific a crora
prezint un mare potenial terapeutic.

O direcie de studiere ulterioar este aprecierea rolului

unei localizri membranare stricte i concrete a
receptorilor Notch, fiind intuit un efect profund al acesteia
asupra transmiterii semnalului.

Bibliografie
http://www.genome.jp/keggbin/show_pathway?hsa04330
http://ebooks.unibuc.ro/biologie/oncogene/11.htm
http://www.theprincessmargaret.ca/en/Global/ForMedia/Press

Releases/Pages/companion-prognostic-test.aspx

Cell and molecular biology of Notch. Review.

U.Fiuza, A.M.Arias. Journal of Endocrinology(2007), p.

459-474
Notch

signalling: a simple pathway becomes

complex. S. Bray. 2006. www.nature.com/reviews/molcellbio
Notch signalling: simplicity in design,
versatility in function.E. Anderson, R. Sandberg, U.
Lendahl. Development 138, p. 3593-3612