LUCRAREA NR.

COLORAIA VITAL
Coloraiile vitale sunt utilizate pentru evidenierea aspectelor morfologice, dar i pentru
studiul mecanismelor celulare de permeabilitate membranar, transport, acumulare
intracitoplasmatic, excreie, etc. Coloranii folosii trebuie s ndeplineasc urmtoarele condiii:
- s nu fie toxici;
- s coloreze n diluii mari;
- s nu produc moartea celulei prin reacii fizice sau chimice;
Ei solv lichidele din membrana celular, ptrunznd prin interstiiile citoplasmei. Dup
ncrcarea electric i dup mecanismul de aciune, exist 3 categorii de colorani vitali:
a. Colorani vitali electropozitivi: albastru de metilen, albastru de toluidin, rou neutru
(pentru granulaiile citoplasmatice), verde Janus B,violet de metil, albastru de Nil, brun Bismark.
b. Colorani vitali electronegativi: albastru tripan, rou tripan, albastru Tirol, albastru
izamin, alizarina, carminul litinat, aurul i argintul coloidal, tu de China, rou de Congo.
c. Colorani vitali neutri: civa colorani din grupa Sudanului, pentru evidenierea
lipidelor.
Coloranii vitali se administreaz subcutanat, intravenos, intraperitoneal, astfel nct
anumite celule nglobeaz aceste suspensii (fenomenul de ultrafagocitoz sau coloidopexie).
Aceste celule sunt: celule ale endoteliului vascular, celulele Kuppfer din ficat, din splin i din
ganglionii limfatici.
Confecionarea preparatului din raclat de mucoas bucal i observarea caracterelor
celulare la microscopul optic
Interiorul cavitii bucale este tapetat de celule aparinnd esutului epitelial
pluristratificat care se gsesc ntr-o permanent rennoire; dinspre membrana bazal spre suprafa a
epiteliului aceste celule se dispun pe mai multe straturi, de la celulele tinere aezate pe membrana
bazal, la celulele mbtrnite i moarte la nivelul suprafe ei mucoasei bucale. Celulele moarte
situate superficial se exfoliaz, n timp ce alte celule din straturile subjacente le vor nlocui. Prin
raclare blnd, celulele mbtrnite i moarte sunt uor de prelevat i de examinat la microscop.
Materiale necesare: lame, lamele, pipete pentru ser fiziologic i colorant, ser fiziologic,
albastru de metilen 1%, hrtie de filtru.
Mod de lucru:
1. se cltete cavitatea bucal cu ap de la robinet de 2-3 ori;
2. pe o lam curat i degrasat se pune o pictur de ser fiziologic;
3. cu ajutorul unei lamele (sau spatul) se recolteaz celulele bucale prin raclajul uor al
feei interne a mucoasei jugale;
4. celulele astfel prelevate se depun pe lam peste pictura de ser fiziologic i se
emulsioneaz prin micri de du-te-vino ale lamelei;
5. lamela este lsat s cad peste materialul biologic;
6. se elimin serul fiziologic dintre lam i lamel cu ajutorul hrtiei de filtru;
7. se depune o pictur de albastru de metilen la marginea lamelei i se a teapt
dispersia colorantului ntre lam i lamel;
8. se elimin excesul de colorant cu ajutorul hrtiei de filtru;
9. se examineaz la microscop.

De urmrit n observaia celulelor mucoasei bucale:

-

a) pe preparatele necolorate:
fcnd parte din esutul epitelial, celulele apar de form geometric, poligonal;
nucleul este mic, aezat central, de form rotund ovalar;
raportul nucleo-citoplasmatic este n favoarea citoplasmei;
celulele apar delimitate de o membran celular refringent.
b) pe preparatele colorate:
celulele apar delimitate de o membran plasmatic bine evideniat;
nucleul este intens bazofil, colorat n albastru, limitat de o anvelop nuclear i coninnd
unul sau mai muli nucleoli rotunzi-ovalari;
citoplasma apare colorat n bleu i conine numeroase granulaii localizate cu predilecie
n zona perinuclear; aceste granulaii corespund organitelor citoplasmatice.