Subiectul nr.1- recoltarea probelor biologice: a) 1.

pregatirea pacientului in functie de analizele recomandate - recoltarea probelor se face de catre medicul care recomanda analizele si in functie de analizele recomandate -Recoltarea se face dimineata pe nemancate in pozitie culcat - pac. Nu mananca cu 16-17 ore inainte - pac. Nu fumeaza in acea dimineata nu consuma ceai, alcool , cafea - pac. Sa nu fie dupa o masa copioasa - sa nu fie dupa un efort fizic intens - si se stopeaza medicatia cu 24 ore inainte ( vitamine , anal ezice duc la modificarea enzimelor!. 2. recoltarea sangelui venos - recoltarea se face de catre personalul medical calificat dimineata pe nemancate in poz. dd - se recomanda repaus complet min. o ora inaintea recoltarii si mana pozitionata orinzontal min. "# min - recoltarea san elui venos se face prin punctie venoasa la adult din venele de plica cotului , la copil din $u ulara si fontanela - recoltarea se face cu ac si serin a de unica folosinta - se fi%eaza aroul deasupra plicii cotului se dezinfecteaza te . la locul punctiei cu alcool sanitar - se punctioneaza vena si se recolteaza san e prin ac, fie direct din recipient in vacutainer sau in serin a si apoi olirea sa in epru&eta. - se indeparteaza aroul si se tamponeaza locul punctiei cu un tampon de vata. - recoltarea san elui venos se face pt analize &ioc'imice si enzimatice (san e inte ral, plasma sau ser !, rec san e capilar se face ptr analizele 'ematolo ice (nr elementelor fi . , formula leucocitara, dozarea '& , frotiu san vin! 3. etichetarea si notarea probelor - pro&ele sunt recoltate in vacutainere corespunzator alese in fct de tipul de analiza cu sau fara anticoa - asist medic verifica identitate pac si noteaza pe recipient urmat ( numele si prenumele pac, nr patului , nr salonului, data si ora recoltarii - apoi se completeaza recomandarea pt am&ulator iar pt spital se completeaza &ilet ce contine (datele de pe recipient, nr fo , analizele ce tr& efectuate , semnat cadrului medical . 4. obtinerea plasmei si serului - plasma ) ser * fi&rino en * fact .de coa ulare . +&tinerea plasmei se face in conditiile unui san e proaspat rec pe anti oa prin centrifu are 1# min la "### de turatii , min , la fund elemnete fi urate iar deasupra plasma - serul ) san e rec fara anticoa lasat sa se coa uleze la temp camerei timp de o ora - dupa care la temp camerei cu o &a 'eta de sticla se indeparteaza c'ea ul de pe peretii epru& - dupa care se mai lasa "# min sa se realizeze retractia c'ea ului - dupa care se decanteaza cu ri$a intr-o epru& uscata, curata si sterila, cu mare ri$a sa nu a$un a &uc de c'ea .

- su&stant coa ulante impiedica coa san elui si tr& sa indeplineasca trei conditii ( - sa nu contina su&stante de dozat - sa nu interfere cu reactivii metodei de dozat - sa se aseasca intr-o anumita proportie . - serul normal are culoarea al&en pai , este limpede si trasparent si se deose&este de plasma prin faptul ca nu mai contine fi&rino en -%p . su&stante anticao . ( florura de sodiu se foloseste ptr licemie , este in'i&itor al licolizei si al unor enzime - o%alatul de potasiu , citratul de sodiu ( vs', fi&rino en, pro&e de coa .! ,-./0, 'eparina nu modifica starea naturala a san elui efect antilipemic . b) transportul , conservarea probelor si erori produse in laborator - 1. transportul probelor ( catre la& se face imediat dupa rec cu atentie sa nu cada etic'etele si fara a fi a itate ptr a evita 'emoliza - 2 . conservarea probelor ( in en se rec ca analizele sa se efect in primele 4-6 ore dupa rec - daca nu se realizeaza in acest timp serul se pastreaza in epru& la *4 rade celsius dar nu mai mult de 2-" zile - daca tr& pastrate timp indelun at adica cateva luni se con eleaza la -2# de rade celsius - dupa decon elare pro&ele se omo enizeaza , se lucreaza imediat si nu se mai recon eleaza - ptr anumite analize e%p.( 1il.t si dir. pro&ele se patreaza la intuneric - 3. erori produse in lab ( - respectarea criteriilor de ale ere a metodei sunt( - specificitate - reproducti&ilitate - e%actitate - sensi&ilitate -alte erori ( tin de ale erea reactivilor care se face in concordanta cu metoda de lucru folosita - reactivii tr& sa fie in termeni de vala&ilitate - ptr fiecare reactiv tr& sa e%iste un ser de control - timpul de lucru tr& respectat - pri&ele recolt tr& sa fie de caliatate - sticlaria fol tr& sa fie curata &n spalata si clatita cu apa distilata , iar in unele cazuri de unica fol - aparatura de la& tr& sa fie in permanenta fol si verif - constiintiozitatea celor care lucreaza Subiectul nr. 2 electroforeza proteinelor pe hartie de filtru

a) principiul metodei proteinele sunt componenete esentiale ale materiei vii . Su& influenta curent. electric aplicat la capetele unei &enzi im&i&ate in ser , particulele de proteine plasmatice se deplaseaza spre anod (*! cu viteze de mi rare diferite specifice fiecarei fractiuni proteice , separandu-se .

are loc ulterior uscarea &enzii de 'artie , dupa care este introdusa intr-o &aie de colorant , care se fi%eaza pe proteina d.p. cu cantitatea de proteina . -valuarea fractiunilor proteice separate se face dupa intensitatea culorii o&tinute prin procedeul elutiei sau direct . !alori normale si valori patologice ( val. normala a proteinelor totale este cuprinsa intre 6-2 rame ,3 , p4-ul este de 2,6 . - proteinele plamatice in funct. de mi rarea electroforetica se impart in al&umine si lo&uline - al&umine 55 - 65 3 - lo&uline "5 - 453 , din care alfa1 (2-43 !, alfa2 ( 6-123 !, &eta 2-143 , ama 1"223. !alorile patologice ( scaderea al&uminelor se manifesta prin scaderea aportului de proteine ( mal&sor&tie de nutritie - prin scaderea sintezei 'ep. si apare in ciroza 'epatica - cresterea al&uminei apare foarte rar in primele faze ale inanitiei si in 667 8lo&ulinele ( zona alfa1 valori crescute in reactii inflamatorii acute - valori scazute in emfizem pulmonar si 'epatita neonatala - zona alfa2 val. crescute ( inflamatii acute , sindr. nefrotic , R00 , neoplazii , valori scazute apar in insufic. 'epatica , S79. , pancreatite acute severe . - zona &eta ( creste in anemia feripriva , ciroza &iliara , scade in &oli autoinmune, neoplazii, infectii acute si cronice - zona ama ( imuno lo&ulinele 0 ,8 , 4 , ., - scade in ama lo&ulinemii ('ipo ama lo&ulinemii con enitale sau do&andite ! si creste in 'iper ama lonulinemii monoclonale sau policlonale. Subiectul nr.3 proteina " reactiva #etoda $"% late& este un procedeu de a lutinare rapida prin testarea unei suspensii de particule de polistiren late% acoperite cu proteina 0 pcr in prezenta unui ser necunoscut ( pacient ! 7itirea ( prezenta a lutinarii vizi&ile macroscopic indica prezenta 0c anti pcr 0&senta a lutinarii vizi&il macroscopic indica a&senta 0c anti pcr 'ubla difuzie (uchterlon): - evidentiaza proteine patolo ice a! proteina 1en :ones normal a&sente - prezente in urina pacientilor cu mielom multipu , mai rar leucemii, limfoame, &oala 4od ;in &! proteina 7 reactiva (<7R! - evidentiaza inflamatia , sintetiz. de 'epatocite ca raspuns la lezarea sau distru erea diferitelor celule independent de etilo ia afectiunii( infectii, isc'emii, trumatism , neoplasm, inflamatie! - valoare normala #.7-2," m ,l - cresteri e%a erate in afectiuni pancreatice $rincipiul metodei( daca doua odeuri apropiate decupate intr-un el de a araza se umplu unul cu ser ce contine proteina 0 celalat cu ser ce contine proteina 0c omolo , anti enul 0 si anticorpul 0c difuzeaza unul spre celalalt , iar la pct . de intalnire se formeaza cu o linie de precipitat .

"

#ateriale necesare ( lama microscop, stanta de decupat odeuri , el de a araza , antiser monospecific , ser de referinta (contine pcr! , pro&a ser ( pacient!. *ehnica de lucru ( 1. pre atire lame cu el( pe o lama de microscop se toarna ".5 ml el de a araza 13 topit pe &aie de apa care se lasa 15-2# min. in poz. orizontala sa se solidifice - se introduce intr-o cutie <etrie umeda timp de 24 ore - cu a$utorul unei 'artii model ( sa&lon! se decupeaza cu stanta odeurile cu diametru de "mm , unul central si 6 periferic si se noteaza 2.umplerea odeurilor ( odeul central se umple cu antiserul , iar cele periferice 1 si 4 cu ser de referinta, iar 2 , ", 5 si 6 cu ser pacient -se incu&eaza 24 ore la "7 rade celsius in cutie <etrie ".citire rezultate ( pe fond ne ru cu lupa in fata unei surse de lumina , - apar linii de precipitata in cazul pro&elor pozitive la distante constante ptr. fiecare comple% 0 0c format - liniile sunt vi&ile dupa 2 ore , clare dupa 4 , mult mai concludente la 24 ore. Subiectul nr.4 transaminaze *+$,*+(

/8+ transaminaza lutam o%alica sau asat (0S/! /8< transaminaza lutam piruvica sau alat (06/! <rincipiul determinarii /8< ( su&straturile principale in reactia catalizata de t p sau alt sunt 6- alanina si o%o lutaratul - piruvatul format va rectiona cu N0.4 4* in prezenta 6.4 rezultand N0.* si 6lactat - varianta a&sor&antei masurata la "65 nm este proportionala cu activitatea alat <rincipiul determinarii /8+ (su&straturile principale in reactia catalizata de t o (0S/! sunt ( 6aspartat si o%o lutaratul - o%al acetatul format va reactiona la fel cu N0.4 4* in prezenta malat de'idro enazei rezultand N0.* si 6 malat - varianta a&sor&antei masurata la "65 nm este proportionala cu activitatea asat /e'nica de lucru ( - amestec de reactivi - pro&a ( ser ne'emolizat sau plasma din san e recoltat pe -./0 sau 'eparina , apa distilata - amestecare si incu&are 1 min. la "7 rade celsius - se citeste a&sor&anta la "65 nm in cuve de 1cm fata de apa distilata - se urmareste variatia a&sor&antei pe min. timp de " min. =alori normale /8+ ( adulti intre 2-2#>9 , copii su& " luni pana la 4# >9 , copii de la " luni -1 an pana la 22 >9 =alori normale /8< ( adulti intre 2-16,5 >9 , copii pana 5 ani intre #,2- 1" >9 - /8+ creste in infarct miocardic , interventii c'irur icale cord, cateterism cardiac , 'epatita , ciroza 'ep. - /8< creste in 'epatita acuta si cronica a resiva , puseu decompensare ciroza 'epatica , icter o&structiv , mononucleoza.

Subiectul nr. ,

uree , creatinina , acid uric

0!.ozarea ureei ureea rep. compusul prin care se elimina amoniacul din or s. ?etoda de dozare enzimatica a ureei cu ureaza ( met. specifica! - ureea este produsul final al eliminarii &azelor pirimidinice <rincipiul metodei ( ureea este 'idrolizata su& actiunea ureazei si este transformata in amoniac si dio%id de car&on - se pre atesc " epru&ete martor, standard , pro&a - se pipeteaza , se amesteca si se incu&eaza 5 min. la "7 rade celsius - se citesc e%tinctiile -p si -s fata de martor la lun imea de unda de 572 nm in cuva de 1 cm =alori normale pt uree ( in san e intre 4# m ,3 , in urina intre 24-"# ,24 ore . =ariatii patolo ice ( - valori crescute a! cauza renala ( lomerulonefrite acute si cronice , nefropatii tu&ulare to%ice , /17 renala , tumori renale, rinic'i polic'istic , 'idronefroze , 'ipertrofia prostatei , calculoza renala &! cauza e%trarenala ( 'ipercata&olism proteic , starile de to%icoza si soc datorate 'emora ii, arsuri , traumatisme . - valori scazute in insuficienta 'epatica rava. 1!'ozarea acidului uric ( rep . la om produsul final al cata&olismului o%idativ al &azelor purinice . ?etoda de dozare a acidului uric cu uricaza (metoda specifica! <rincipiul metodei ( acidul uric este transformat de uricaza la alantoina si apa o%i enata care su& actiunea pero%idazei o%ideaza 2,4 diclor fenol sulfonatul si 4 amino antipirina formand un derivat de c'inona de culoare rosu violet - se pre atesc cele " epru&ete martor, standard, pro&a - se pipeteaza - se amesteca si se incu&eaza 5 min . la "7 rade celsius sau 1# min. 6a 25 rade celsius - se masoara e%tinctiile -p si -s fata de martor la lun imea de unda de 52# nm in cuva de 1 cm =alori normale ( in san e 2-5m ,3, la &ar&ati ",5-7,5 m ,3 , femei 2,5 6,5m ,3, copii intre 1-"m ,3 - in urina( la adulti #,25-#,2 ,24 ore , copii su& un 1 an pana la 25m pe ; ,24 ore . =ariatii patolo ice( cresteri de acid uric apar in (enzimopatii , uta , poli lo&ulii, leucemie acuta si cronica , mielom multiplu , into%icatii cu plum& si mercur , mononucleoza infectioasa , insuficienta renala cr. , lomerulonefrita cr., pielonefrita - scad de acid uric sunt mai rare si apar in defect tu&ular renal ereditar , consum inadecvat de medicamente , afectiuni 'epatice severe , mielom multiplu, sarcina . 7! 'ozarea creatininei ( creatinina rep. un deseu meta&olic care se aseste in cantitate mai mare in urina deca in plasma . .eterminarea creatininei serice cu metoda :affe ( <rincipiul metodei (

- creatinina , in mediu puternic alcalin reduce acidul picric la acid picramic de culoare al&en portocalie, fotometra&il - intensitatea culorii este d.p. cu concentratia ureei ?od de lucru ( - se pipeteaza in 2 epru&ete de centrifu a - se omo enizeaza si se centrifu 'eaza timp de 5 min. la "### turatii,min. - se pre atesc " epru&ete , se pipeteaza iarasi - se mesteca &n , dupa 2# min. se citesc e%tinctiile -p si -s fata de martor la lun imea de unda de 5"# nm in cuve de 1cm =alori normale ( san e( #,5 -1,2 m ,3 (la &ar&ati #,6-1,1m ,3, la femei #,5-#,@ m ,3 si urina 1-1,5 pe 24 ore =ariatii patolo ice ( valori crescute in ( insuficienta cardiaca con estiva , des'idratari masive , dia&et za'arat , dia&et insipid , insuficienta renala acuta sau cr., neoplasm , litiaza renala , adenom de prostata , iar valori scazute apar in insuficienta renala cronica. Subiectul nr.dozarea functiilor de colesterol

'eterminarea .'/ colesterol prin metoda enzimatica ( <rincipiul metodei( acidul fosfoAolframic precipita din ser lipoproteinele cu densitate foarte mica ( =6.6 ! si lipoproteinele cu densitate mica (6.6! - in prezenta ionilor de ma neziu precipita ;ilomicronii , iar proteinele cu densitate mare (4.6! raman in supernatant - 4.6 colesterolul din supernatant se determina prin metoda enzimatica . =alori normale 4.6 colesterol ( la &ar&ati "5-55 m ,dl si 45-65 m ,dl la femei - 6.6 colesterol valori normale ( 1"#-16# m ,dl B colesterol total - valori normale (16#2## m ,3 . 6a 6.6 su& 1"# risc scazut , peste 16# risc crescut . -9ar la 4.6 colesterol la &ar&ati peste 55m ,dl risc mediu , su& "5m ,dl risc crescut , iar la femei peste 65m ,dl risc mediu , su& 45m ,dl risc ridicat. =alori patolo ice ( valori crescute ( 'iperlipoproteinemii , 'ipotiroidie , ateroscleroza , sdr. Nefrotic , anore%ie nervoasa, uta , dia&et za'arat, alcoolism ,. - valori scazute ( mala&sor&tie , maldi estie , inanitie, carente alimentare , casec%ie , afectiuni 'epatice, 'ipertiroidie . Subiectul nr.0 e&amenul biochimic al urinei

1) recoltarea urinei ( - urina ( - prosus final al activ. renale - e%plica functionalitate si im&olnavirile renale - urina se recolt. usor la orice ora seriat la nevoie - urina de dimineata ( recolt. spontana! ) a doua urina ( nu cea concentrata din timpul noptii ! - urina din 24 ore ) &olnavul urineaza dimineata si arunca urina de noapte , recolt. >rina de la ora 7 pana a doua zi la aceeasi ora - vasele t& sa fie curate si dezinfectate

!olumul sau direza : - la &ar&ati 12##-15##ml ,24 ore - la femei 1###-12##ml,24ore - la nou-nascut intre "#-6#ml,24 ore 1bateri ( - <oliurie diureza peste 12## ml,24 ore - in estie crescuta de lic'ide , dupa emotii, fri , in dia&et za'arat , in dia&et insipid, &oli infectioase . - +li urie ( diureza su& 5##ml,24 ore ( in re im alimentar sec ( fara apa! , transpiratii a&undente , efort crescut , stari fe&rile, pneumonie , 'epatita , ciroza 'epatica , pierderi lic'idiene etc. - +li oanurie ( diureza intre 2##-5##ml,24 ore - 0nurie ( su& 1##ml,24 ore ( colici renale, insuf. ren . acuta 1spect( urina proaspata tr& sa fie ( limpede, clara , transparenta , se poate tul&ura pe parcursul pastrarii - poate fi tul&ure ( in elimnare de saruri , - <iurie ( cand se elim. urina cu puroi , cu mucus , cu flora micro&iana , cu saruri, fosfati , car&onati, urati, o%alati - 6ipurie ) urina cu lipide - Cilurie ) urina cu limfa "uloare ( normal ( urina al&en pai - urina din timpul noptii este mai concentrata - mai inc'isa la culoare #irosul : - caracteristic la emisie , sla& , usor amoniacal sau fad care se modif. 9n timpul pastrarii - poate fi fetid in infectii, cistite , infectii cu proteus , - miros de acetona , mere putrede in dia&et za'arat decompensat , acidoza dia&etica - p4-ul urinei normal , sla& acida p4 6 ( limite 5,2 2,2 ! - p4-ul alcalin apare in ( alimentatie ve etariana , afectiuni cr . urinare , infectii urinare, varsaturi etc. - p4-ul acid apare in ( &oli infectioase , fe&rile , /17 renal, dia&et za'arat cu acidocetoza, ir rava 'ensitatea ( normal 1#15-1#25 cu valori limita - 1#1#- 1#"5 ) normostenurie - densitate crescuta in dia&etul za'arat - densitate scazuta in polurie, in dia&etul insipid , scleroza renala 2) identificarea proteinelor urinare : - in mod normal nu e%ista proteine in urina ?etoda cu acid sulfosalicilic ( - reactiv( solutie acid sulfosalicilic 2#3 /e'nica de lucru ( - se pre atesc 2 epru&ete cu cate "-4 ml urina filtrata - in una dintre epri&ete se adau a 2-1# picaturi de acid sulfosalicilic 2#3 , se a ita si se e%amineaza pe fond ne ru , iar cea de-2 a epru&eta se foloseste drept martor 9nterpretarea rezultatelor ( aparitia unui precipitat ( usoara opalescenta ! indica prezenta proteinelor

") identificarea glucidelor urinare ( in mod normal urina nu contine decat cantitati e%trem de mici de lucide - in urinele patolo ice cel mai frecvent lucid intalnit este lucoza , prezenta ei purtand nume le de lucozurie - in afara de lucoza se mai pot asi si alte lucide ca( alactoza, fructoza , lactoza , maltoza si diferite pentoze - in acest caz termenul corect este de meliturie , care semnifica prezenta unui za'ar reducator in urina 1.%eactia 2enedict : <rincipiul metodei ( lucoza , prin functia sa alde'idica , reduce 7uS+4, in mediu alcalin la cald , la 'idro%id cupric de culoare al&ena , care trece ulterior in o%id cupros de culoare rosu caramiziu . /e'nica de lucru ( - la 5ml reactiv 1enedict se adau a 2 picaturi de urina de proteinizata - se a ita - se incalzeste pe &aie de apa timp de 5 min. - se raceste la temp. camerei - se pre ateste si un martor numai cu reactiv 1enedict 9nterpretarea rezulatului ( apreciere cantitativa . 2.%eactia 3ehling: <rincipiul metodei(- lucoza , prin functia sa alde'idica, reduce la cald in mediu alcalin 'idro%idul de cupru de culoare al&astra la su&o%id de cupru de culoare rosu-caramiziu. /e'nica de lucru (- la 5 ml de urina deproteinizata - se adau a 2ml amestec de reactivi De'lin 9 si 99 - se a ita - se incalzeste epru&eta in &aie de apa la fier&ere. 9nterpretarea rezultatului ( - o&tinerea unui precipitat rusu-caramiziu ne indica prezenta lucozei - culoarea si a&undenta precipitatului variaza cu concentratia lucozei in urina. 3.%eactia 4)lander ')5dentificarea compusilor cetonici in urina: - compusii cetonici sunt rezultatul cata&olismului acizilor rasi care se asesc in cantitati foarte mici in urina normala , nedecela&ile (mai ales su& forma de acetona!. - compusii cetonici sunt acetona, acidul acetilacetic, acidul &eta 'idro%i&utiric . a!Reactia 6e al 9m&ert ( <rincipiul metodei (- acetona in mediu de acid acetic , in prezenta amoniacului da cu nitroprusiatul de sodiu o culoare rosu-violacee. /e'nica de lucru ( intr-o epru&eta se adau a 5 ml urina filtrata - 5 picaturi acid acetic lacial - 5 picaturi solutie nitroprusiat de sodiu - se a ita usor - se inclina epru&eta adau and 2# de picaturi de amoniac , care tr& sa cada cu ri$a la suprafata lic'idului, astfel incat sa formeze un strat deasupra continutului epru&etei - se lasa in repaus timp de 5 min.

9nterpretarea rezultatului ( - reactia este pozitiva cand la limita de separare a celor doua lic'ide apare un inel rosu violet ce indica prezenta acetonei - intensitatea culorii inelului este direct proportionala cu concentratia corpilor cetonici in urina - daca inelul dispare dupa fie&erea urinei acesta s-a datorat acetonei - reactii fals pozitive dau aspirina , salicilatul. 6)"ercetarea pigmentilor biliari in urina : - se cerceteaza ( &iliru&ina, uro&ilino enul , uro&ilina, acizi si saruri &iliare a) 7robilinogen ( - urina normala , proaspat emisa contine numai uro&ilino en in cantitai mici care prin o%idare la aer si lumina se transforma in uro&ilina - de aceea in urina proaspat emisa se cauta uro&ilino en, iar in urina pastrata mai multe ore se cauta uro&ilina. 1. #etoda 6rlich : <rincipiul metodei (- uro&ilino enul in prezenta paradimetilamino&enzalde'idei (reactiv -rlic'! si in mediu acid dezvolta o coloratie rosie- caramizie. /e'nica de lucru ( - intr-o epru&eta se masoara 5ml de urina proaspata si se adau a 1# picaturi de reactiv -rlic' - se amesteca si se lasa in repaus 5 min. 9nterpretarea rezultatului ( - prezenta uro&ilino enului ) coloratie rosie- caramizie - culoarea apare imediat si la rece ) reactie intens pozitiva - culoarea apare la 1# min. si la rece ) reactie pozitiva - culoarea nu apare nici la rece si nic la cald ) reactie ne ativa - in cazul in care a aparut culoare rosie-caramizie se adau a 1-2ml cloroform si se a ita - produsul de culoare rosie-caramizie este e%tracti&il in cloroform daca este datorat uro&ilino enului. Normal( #,#5-2,5 m ,24ore >ro&ilino enurie crescuta(- producere e%cesiva pi menti &iliari ('emoliza! - afectiuni 'epatice ( 'ep. virala ac., 'ep. cr. a resiva, ciroza 'epatica - perioada su&icterica ) importanta deose&ita ptr dia nostic >ro&ilino enurie scazuta( o&structia cailor &iliare (intra si e%tra'epatice! - reducerea florei &acteriene intestinale - productie insuficienta de &iliru&ina (anemii are enerative! - tul&urari de e%cretie urinara a pi mentului b)7robilina ( - metoda Sc'lessin er- fluorescenta verde a uro&ilinei cu sare de En in alcool - normal fluorescenta esre invizi&ila c!1iliru&ina(- este a&senta in urina normala - urina care contine pi menti &iliari prezinta o culoare &runa - aspect de &ere nea ra

1. ?etoda 6u ol ( <rincipiul metodei ( - o%idarea &iliru&inei in &iliverdina cu a$utorul iodului /e'nica de lucru ( - intr-o epru&eta se pipeteaza 1#-15ml de urina si cu o pipeta efilata - se lasa sa se scur a la fundul epru&etei 2ml din solutia 6u ol 9nterpretarea rezultatului(- reactia pozitiva aparitia unui inel verde la limita de separare a celor doua lic'ide indica prezenta uro&ilinei. - reactii fals pozitive apar daca persoana a consumat piramidon. 1iliru&inemie apare in ( icter mecanic - icter 'epatocelular su& forma de 1. ( licuronocon$u ata! coloreaza &run urina 3)1cizi si saruri biliare : 1.Reactia 4aF cu floare de sulf ( <rincipiul metodei (- acizii &iliari au proprietatea de a reduce tensiunea superficiala a lic'idelor in care sunt dizolvati - prezenta acizilor &iliari in urina face ca tensiunea superficiala sa scada , iar floarea de sulf sedimenteaza. /e'nica de lucru(- intr-un cilindru de sticla se masoara 2# ml de urina - se adau a cateva picaturi de fenolftaleina - se neutralizeaza cu Na+4 - se a ita si se lasa cateva ore la rece - deasupra urinei se presara prin tifon floarea de sulf fin pulverizata. 9nterpretarea rezultatelor( - daca floarea de sulf cade imediat la fundul vasului ( urina contine cel putin #,#1 3 acizi &iliari - daca floarea de sulf cade la fund dupa o usoara a itare ( urina contine #.##5 3 acizi &iliari - daca floarea de sulf continua sa plutaesca si dupa a itare ( acizii &iliari sunt a&senti . - prezenta acizilor &iliari si a sarurilor &iliare poarta numele de colalurie care se intalneste in urmatoarele situatii( - ocluzia canalului coledoc (icter o&structiv! - leziuni anatomice si alterari functionale 'epatice (icter parenc'imatos! - nu se aseste in icterul 'emolitic Subiectul nr.8 determinarea glicemiei prin metoda enzimatica 9metoda specifica)

$rincipiul metodei :- in prezenta enzimei lucozo%idaza (8+.! , lucoza este o%idata la acid luconic - apa o%i enata reactioneaza cu un donor de 42 in prezenta pero%idazei (<+.! rezultand un comple% colorat fotometra&il - intensitatea culorii este d.p. cu concentratia lucozei - amestecare - incu&are 1# min la "7 rade celsius - citire -s si -p fata de martor la lun imea de unda ) 5#5 nm in cuve de 1cm !alori normale( - in san e total, plasma , ser - 65-1##m , a$eune - 125 m 3 la 1-2 ore dupa un pranz &o at in car&o'idrati - difera in functie de metoda folosita

1#

!ariatii fiziologice ( functie de ( creste peste 4#-5# ani - sarcina ( scade licemia cu 15-2# 3 (este utilizata de catre fat! - efortul muscular usoara 'ipo licemie !ariatii patologice ( 4iper licemie ( valori crescute in ( - dia&et za'arat - 'ipertiroidie - acrome alie - sdr 7us'in - tumori SN7 - accident vascular cere&ral - feocronocitom - infarct miocardic - insuficienta renala - into%icatie 7+ - soc - administrare diuretice , contranceptive, fenotiazine, lucocorticoizi 4ipo licemie ( valori scazute in( foame - mala&sor&tie - efort - fe&ra licozurie de cauza renala - alcoolism - insuficienta 'epatica lico enoze - insuficienta 'ipofizara, coticosuprarenaliana - 'ipotiroidie - administrare de antidia&etice, &eta&locante. Subiectul nr.: hemoglobina

din san e capilar sau venos determinare fotometrica ca cian'emi lo&ina (4i7N!- metoda standard de 'emo lo&inemetrie <rincipiul metodei ( - fericianura de potasiu o%ideaza De 2* (feros! din 'emo lo&ina le De "* (feric! , toate tipurile de 'emo lo&ina din or s. (e%ceptand verdo4&! rezultand met'emo lo&ina (4i! care pe masura formarii se com&ina cu C7N rzultand cianat de met'emo lo&ina (4i7N! derivatul cel mai sta&il. %eactivi: 1. Reactiv .ra&;in( - fericianura C #,2 - C7N #,#5 - Dosfat monopotasic #,14 - 0pa distilata 1###ml - se filtreaza prin 'artia de filtru apoi se depoziteaza in sticla &runa cu dop - se pastreaza 2l la fri ider

11

- parametri o&li atori ai solutiei .ra&;in ( p4)7,"-7,5B limpede si sta&ila 2. -talon de 'emo lo&ina ) solutie de 7nmet4& cu concentratia de pe flacon /e'nica ( - se recolteaza #,#2 ml san e cu pipeta de 'emo lo&ina - se adau a intr-un flacon (epru&eta! cu 5 ml reactiv .ra&;in - se spala de 2-" ori , cu ri$a fara &ar&otare - se lasa "# min - se citeste la fotometru in &anda de 54#nm, in cuva de 1#mm fata de apa distilata =alori normale( - &ar&ati 1"-15-17 ,dl - femei 11-1"-15 ,dl - scade in anemii - creste in poli lo&ulii

12