g.

INFLUENZAVIRUS A
cu tipul de v.gripal A
g. INFLUENZAVIRUS B
cu tipul de v.gripal B
g. INFLUENZAVIRUS C
cu tipul de v.gripal C
g. THOGOVIRUS cu tipurile
Thogoto,
Dhori,
Batken
g. ISAVIRUS

GENUL INFLUENZAVIRUS
Cuprinde virusuri cu:
ARNmc cu polaritate negativ, cu 7-8
segmente
simetrie helical
infecteaz
vertebratele

MORFOLOGIE
polimorfi
forme sferice, ovale

50 120 nm diametru

forme filamentoase

80-100 nm diametru; 200 300 nm lungime

se disting urmtoarele poriuni:

nveli viral lipoproteic (anvelopa, peplos)
proteina matrice
componenta central (ribonucleoproteina
RNP, nucleocapsida)

NVELI VIRAL LIPOPROTEIC

(anvelopa, peplos)
derivat din membrana celulei gazd
dublu stratificat
prezint 2 feluri de proiecii (spiculi,

peplomere virus codificate) n raport de

5:1

hemaglutinin
neuraminidaz

NVELI VIRAL
LIPOPROTEIC
(anvelopa,
peplos)
HA (hemaglutinin)
500-1000 spiculi de HA pe fiecare virion n

funcie de specie
trimer

protein precursoare HAO clivaj HA1 + HA2

3 grupri

10 14 nm deasupra nveliului, form de

baston
dispuse

regulat pe toat suprafaa virionului

(hemaglutininesteraza)
egal pe toat suprafaa virionului
n ciorchine la unele tipuri

NVELI VIRAL LIPOPROTEIC

(anvelopa, peplos)
HA (hemaglutinin)
funcii:
permite ataarea virusului gripal la

receptorii celulelor susceptibile

aglutineaz hematiile a 22 de specii
animale (grup 0 umane, cobai, pui,
curcan)
produce fuziunea membranelor
este int pentru anticorpii
seroneutralizani

NVELI VIRAL LIPOPROTEIC

(anvelopa, peplos)
NA (neuraminidaz)
50-200 peplomere NA pe fiecare virion n
funcie de specie
form de ciuperc cu plria spre
periferia virusului
tetramer, format din 4 molecule de
glicoprotein

NVELI VIRAL LIPOPROTEIC

(anvelopa, peplos)
NA (neuraminidaz)
Funcii: de enzim
scindeaz acidul sialic
faciliteaz penetrarea i eliberarea

virionilor din celul

diger inhibitorii nespecifici, mucoproteici
de la nivelul tractului respirator

NVELI VIRAL LIPOPROTEIC

(anvelopa, peplos)
! virusul gripal C
nu are neuraminidaz

are o singur glicoprotein de suprafa

HEF (hemaglutinare, esteraz, fuziune)

Orthomyxovirus,
Paul Digard, Dept.
Pathology,

Ribonucleoproteina
Paul Digard, Dept.
Pathology,

COMPONENTA CENTRAL (RNP,

nucleocapsida)
GENOMUL VIRAL
ARN monocatenar segmentat
polaritate negativ
7 8 segmente = 8 minigene codificante

pentru:
3 polimeraze
HA
NA
Nucleoproteina (NP)
Proteina matrice (M)
Proteine nonstructurale

PROTEINE NUCLEOCAPSIDALE
1. COMPLEX

TRANSCRIPIONAL
Polimeraze
Proteina PA (proteina acid) funcie
incomplet cunoscut
Proteina PB1 (proteina bazic)

iniiaz transcrierea,
particip la elongarea ARN progen

Proteina PB2 (proteina bazic)

recunoate i se leag de structurile cap ale

ARN celular
rol de endonucleaz

PROTEINE NUCLEOCAPSIDALE
1. COMPLEX TRANSCRIPIONAL
Nucleoproteina NP
protein structural major
la ME form de bastona
suportul de nfurare a ARN genomic (nu se
vizualizeaz separat)
funcii:

parte a complexului transcriptazic

intervine n sinteza ARN genomic
transport complexe ribonucleoproteice spre i din
nucleu
int pentru limfocitele citotoxice

PROTEINE NUCLEOCAPSIDALE
2. PROTEINE NESTRUCTURALE
Proteina NS1
protein NS unic
protein timpurie
acumulat n nucleul celulei infectate
promoveaz sinteza ARNm
Proteina NS2
protein tardiv
prezent n nucleul i citoplasma celulei
gazd
funcii incomplet cunoscute

Structura antigenic
1. antigene specifice de tip
Ag NP

stabil antigenic
exprimat i la suprafaa celulelor infectate
inta major pentru limfocitul T citotoxic
evideniat prin RFC, ELISA, teste de citotoxicitate

Ag M

stabil antigenic
identificat prin ELISA, imunoprecipitare n gel

Ag NS

specificitate nalt de tip

induce rspuns imun ncruciat (om, cal, porc)
detectat prin RT-PCR (amplificare genomic dup
reverstranscriere)

Structura antigenic

2.

Ag HA

Ag major de suprafa
15 subtipuri (H1-H15)
H1, 2, 3 proprii omului
H4 15 specifice animalelor
Induc rspuns imun protector (AC, limfocite T citotoxice)
Evideniat prin

Ag NA

antigene specifice de subtip

Reacii de HAI, SN, RFC, ELISA

Teste de citotoxicitate
RT-PCR

Ag de suprafa
9 subtipuri (N1 2 specifice omului)
identificat prin reacii enzimatice de inhibare a activitii
neuraminidazice
nu induc Ac neutralizani
activitate protectoare mai redus

Structura antigenic
3. antigene polimerazice

Ag PB1, Ag PB2, Ag PA

Identificat cu Ac monoclonali i teste de

citotoxicitate

VARIAII ANTIGENICE
COMUTARE ANTIGENIC (variaie

antigenic major, antigenic shift)

apar brusc noi subtipuri virale PANDEMII

intervale 30-40 ani

A fost identificat doar la v. gripal A circul
la om, psri, animale (patru comutri
antigenice majore au avut loc din 1933).
diferene majore de antigenitate genom
fragmentat recombinri reasortarea
subtipurilor virale la om i animale

Antigenic
shift

VARIAII ANTIGENICE
ALUNECARE ANTIGENIC(variaie antigenic

minor, antigenic drift)

apariia lent de mutante HA sau NA (mutaii

punctiforme) cirulaia v. gripal n populaii parial

imunizate
diferene minore de antigenitate ntre HA i NA
diferitelor tulpini
modificarea conformaiei spaiale
modificarea n compoziia unor aa

tulpini noi circulante n diferite sezoane EPIDEMII

toate virusurile gripale (A,B,C)
Aceti virui supravieuiesc deoarece sunt mai

puin susceptibili la anticorpii prezeni la

majoritatea populaiei.

Antigenic
drift

VARIAII ANTIGENICE
funcie de compoziia RNP(ribonucleoproteinei) exist 3

tipuri antigenice distincte de virus gripal:

tipul A

izolat n 1933
generator de pandemii sau mari epidemii
infecteaz o mare varietate de mamifere: om, cal, porc, dihor, foca,
psri
rezervor important: porcii i psrile (pui de gin, curci, rae)
poate suferi variaii antigenice minore i majore

tipul B

izolat n 1940
generator de epidemii locale sau regionale
infecteaz numai omul
nu are serotipuri
poate suferi variaii antigenice minore

tipul C

izolat n 1951
generator de cazuri sporadice sau de mici epidemii locale
infecteaz numai omul
stabil antigenic (nu prezint variaii antigenice)

Denumirea virusului
tip de virus / localitate sau ar de

izolare / numrul tulpinii / anul

descoperirii/ (hemaglutinia i
neuraminidaza)

A/Hong-Kong/1/68(H3N2)
A/Hong-Kong/156/97(H5N1)
B/URSS/2/87
B/Hong-Kong/5/72

REZISTENA LA AGENII FIZICI I

CHIMICI
Distrug infectivitatea:
temperatura 56C timp 20 30 minute;
radiaii UV,

Inactivate de:
solveni organici,
formol
Prezervarea infectivitii:
pt. timp scurt 4C;
ani -70C, liofilizare

CULTIVARE
culturi de celule renale de maimu

Rhesus
linii celulare MDCK (rinichi de cine);
LLC-MK2 (rinichi de maimu)
ou de gin embrionat intraalantoidian
(A,B), intraamniotic (A,B,C)
animale de laborator: dihor, hamster,
cobai, obolan, oarece, cal, psri, etc.

Replicare (8 10 ore)
NA scade vscozitatea stratului mucos,

diger inhibitorii nespecifici,

mucoproteici de la nivelul celulei
receptore
se descoper receptorii de la suprafaa
celulelor:
identici pt. VGA i VGB;
diferii pt VGC

Replicare (8 10 ore)
1. ADERARE
prin HA pt. A, B, i HEF pt C
de mucoproteinele care conin
terminaii de acid N-acetil-neuraminic
(acid sialic)
2. PTRUNDERE prin endocitoz cu

formarea endozomului

Replicare (8 10 ore)
3. DECAPSIDARE:
prin proteina M2

pH-ul n endozom scade (pH < 5)

enzime tripsin-like din endozom

scindeaz HA n monomerele HA1
i HA2 modificri de conformaie
n spiculii de HA activarea
funciei de fuziune membranar de
pe HA2 + activarea canalelor de
ioni (proteina M2) fuziunea
peplosului cu membrana
endozomului eliberarea
nucleocapsidei n citoplasm

Replicare (8 10 ore)
ECLIPSA
- translocarea nucleocapsidei n nucleul celulei gazd
- segmentele genomului sunt transcrise de 3 polimeraze asociate
fiecrui segment:
4.

- faza iniial (2 h) necesar sinteza activ a ADN celular

- PB2 se ataeaz la captul m7G a ARNm al celulei scindarea
acestei structuri din ARNm de ctre PB1 rmne lagat de
PB2
- captul servete ca primer pt. sinteza ARN sunt adugate 11-15
nucleotide complementare secvenei conservate ale captului 3
a ARNv (rol PB1) PB2 se desprinde de pe catena n cretere
- PB1 + PA completeaz sinteza catenei de ARN cu sens pozitiv

- se produc 2 clase de ARN

- incomplet ARNm n citoplasm
- complet ARNc copie (+) a ARNv (-)

- n citoplasm proteine virus specifice

- NP se ntoarce n nucleu asociere cu noile catene de ARNv =
nucleocapside noi ies n citoplasm spre membrana
celular
- la 4h de la infecie pe membrana celulei apar fragmente de
protein M1 ncorporare de HA i NA pe suprafa

Replicare (8 10 ore)
5. ELIMINARE
nmugurire treptat, n cteva ore, fr
liza celulei gazd

Patogenia
leziuni distructive ale celulelor ciliate

eliberare de produse de dezintegrare

snge aciune toxic general
descuamarea acestora n lumen,

infiltraie mononuclear, edem

submucos

BOALA LA OM
GRIPA primele epidemii n sec. XIV; pn

azi 31 pandemii
sursa de infecie: omul bolnav
rezervor animal: cai, porci, psri
ci de transmitere direct (srut); indirect

(picturi de secreie naso-faringian)

contagiozitate mare (3-5 zile); receptivitate
general
poarta de intrare cile respiratorii
superioare

BOALA LA OM
incubaie 1-3 zile
debut: brusc, frisoane, febr (39

40C), mialgii puternice, artralgii

severe, cefalee, astenie marcat
perioada de stare

semne generale toxice: febr 3-5 zile,

facies congestionat, lcrimare,

fotofobie,cefalee constant, dureri n globii
oculari, mialgii (muchii cefei, lombalgii,
rahialgii), adinamie
manifestri respiratorii: catar nazal,
hiperemie faringian, laringo-traheit
tablou sanguin: leucopenie cu limfocitoz
(neutropenie), trombocitopenie

convalescen: astenie, stare

depresiv, irascibilitate, tuse seac

BOALA LA OM
complicaii:
pneumonie, miocardit, meningit,

suprainfecii bacteriene etc.

!! SINDROM REYE: encefalopatie,

degenerescena gras a ficatului i a

altor organe dup grip tratat cu
salicilai (ASPIRIN)

Imunitate
specific de tip, de scurt durat

Ac anti HA neutralizeaz virusul

gripal
Ac anti NA mpiedic rspndirea
virusului la celulele neinfectate
Ac tip IgM primoinfecie gripal HAI,
RFC
Ac tip IgG rspuns imun secundar HAI
Ac tip IgA ac virulicizi din secreia cilor
respiratorii
!! interferon prima linie de aprare

Tratament
amantadin; rimantadin pt. VGA
inhibitori de neuraminidaz pt VGA i

VGB: TAMIFLU; RALENZA (ZANAVIR)

Profilaxie
nespecific
specific
OMS supraveghere continu a gripei pe

glob
vaccinare

 1918
-

EPIDEMI
I

2 miliarde mbolnviri
20 milioane decese
SUA, Europa Africa
3 valuri succesive
30 40 ani
gena NP comun cu cea porcin

1957 / 1958
-

afectat 1/3 populaie

4 milioane decese
China apoi SUA
5 19 ani
genele HA,NA, PB1 de la tulpina
parental aviar

1968
- 2 milioane decese
- China apoi Australia, America de
Nord, Europa
- genele HA i PB1 de la tulpina
aviar

1977
- China, rapid n Rusia, Europa, SUA,
Australia
- sub 20 ani
- originea nu se cunoate

n prezent H1N1 i H3N2

Influenza virus tip A

Lungimea liniei = 100

nm
Imagine electronomicroscopic;
Produs colorat cu PTA 2%
Mrire 29.700 ori
Universitatea Laval,
Facultatea de Medicin,
Quebec, Canada, (Dr.
Hans Ackermann)

Influenza virus tip A

tulpin utilizat pentru

obinerea vaccinului
Coloraie cu uranilacetat 2%
Virus purificat prin
centrifugare n gradient
de zaharoz
Institutul Robert Koch,
Berlin, Germania
(Dr. Stephan Biel)

Influenza virus tip A

tulpin utilizat pentru

obinerea vaccinului
Coloraie cu uranilacetat 2%
Virus purificat prin
centrifugare n gradient
de zaharoz
Institutul Robert Koch,
Berlin, Germania
(Dr. Stephan Biel)

Influenza virus tip A

Virioni de sferici de 200nm
nveliul extern conine

spiculi rigizi de
hemaglutinin i
neuraminidaz care formeaz
un halou caracteristic n jurul
particulei virale colorat
negativ
Universitatea Cape Town,
Africa de Sud (Dr. Linda
Stannard)

Influenza virus tip A

Genomul viral este alctuit

din 8 segmente de ARN

monocatenar.
Ribonucleoproteina helical
nu este ntodeauna vizibil;
uneori n particula viral se
vd componentele interne
helicate.
Universitatea Cape Town,
Africa de Sud (Dr. Linda
Stannard)

Influenza virus tip A

Veterinary Sciences
QueenUniversity,
Belfast, UK
(Prof. Steward McNulty)

Influenza virus tip A2,

Asia

Research School of Biological

Sciences
Australian National University,
Canberra, Australia
(Dr. Cornelia Bchen-Osmond)