Sunteți pe pagina 1din 45

UNIVERSITATEA DE STAT DE MEDICIN

I FARMACIE Nicolae Testemianu


Catedra de Microbiologie, Virusologie, Imunologie
LUCRARE DE LABORATOR NR.30
TEMA: DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL GRIPEI,
PARAGRIPEI, RUJEOLEI I A PAROTIDEI EPIDEMICE

ELABORAT DE: CORINA BRNZ


DIANA ANDRUCA
DOINA CODREANU
CTLINA OLARU
GR UPA 1 2 1 0, FAC . MED . NR .1

C O O R D O N ATO R : VAL E N T I N A V O R O J B I T

CHIINU, 2015

Cuprins
1.Familia Ortho- i Paramyxovirusurilor
2.Virusul gripal ( scrii despre ce faci, ex meu mai jos)
2.1
2.2
3.Virusul paragripal
3.1 Clasificarea
3.2 Caractere de cultur
3.3 Structura antigenic
3.4 Patogenez.Factori de patogenitate
3.5 Diagnostic de laborator
3.6 Clinic
3.7 Imunitate
3.8 Tratament
4.Virusul parotidei epidemice
4.1 Generaliti
4.2 Caractere morfobiologice
4.3 Patogeneza
4.4-4.5 Tabloul clinic . Complicaii
4.6 Diagnosticul de laborator
4.7 Imunitate.Profilaxie
4.8 Tratament
5.Virusul rujeolei
5.1 Caractere morfobiologice
5.2Patogeneza rujeolei
5. 3 Diagnosticul de laborator
5. 4 Tratament si profilaxie
6.Bibliografie

Puteti aici sa continuati


cuprinsul

Mixovirusurile reunesc virusuri ARN- cu


afinitate pentru mucoproteine (myxo mucus)
repartizate n 2 familii:

FAMILIA

ORTHOMYXOVIRIDAE
FAMILIA
PARAMYXOVIRIDAE

Familia Orthomyxoviridae

genul Influenzavirus A
virusul gripal A

genul Influenzavirus B
virusul gripal B

genul Influenzavirus C
virusul gripal C

genul Thogotovirus
virusurile Dhori i Thogoto

Virusul Gripal

Familia Paramyxoviridae
SUBFAMILIA PARAMYXOVIRINAE :

genul Paramyxovirus
v. paragripale (tip 1 i 3);

genul Rubulavirus
v. parotiditei epidemice (v. urlian);
v. paragripale (tip 2 i 4);

genul Morbillivirus
v. rujeolic

SUBFAMILIA PNEUMOVIRINAE :

genul Pneumovirus
v. respirator sinciial (VRS).

genul Metapneumovirus

Virusul Paragripal

V I R U S U R I L E P A RA GR IP A L E 1 , 2 , 3 , 4 :
D E T E R M I NA I N FE CT I I AL E T R A CT U L U I
RESPIRATOR,
CU E V O L U T I E E ND E MO - E P I D E M I CA .

CARACTERISTICA GENERAL A
PARAMYXOVIRUSURILOR
Morfologic
Virusuri nvelite, sferice, uneori filamentoase, 150-400 nm.
Genomul ARN- nesegmentat (transcriptaza asociat)
Capsida de simetrie helicoidal, constituit din proteina NP.
Supercapsida dublu strat lipidic, proteina intern matrice
M, spiculi glicoproteici nserai n membran:
HN asigur adeziunea la celula-int
F asigur fuziunea supercapsidei cu membrana celular n
timpul penetrrii virusului n celul (provoac formarea de
sinciii n culturi de celule)
Reproducerea are loc n citoplasm.
Rezisten sensibil la eter i inactivat prin nclzire i
expunere la dezinfectani.

3.1 Clasificare
Familia Paramyxoviridae

Subfamilia Paramyxovirinae
Genul Paramyxovirus( 1,3),
Rubulavirus (2,4),
Specia Virusul paragripal 1,2,3,4
Virusul paragripal are 4 serovaruri (1-4)
Este o specie uman, agent cauzal al paragripei
Genomul - ARN monocatenar liniar, nesegmentat,
cu polaritate pozitiv sau negativ.
Reproducerea are loc in citoplasm.

3.2 Caractere de cultur


Se dezvolt bine n culturi celulare din epiteliul renal

de maimue i de embrion uman, precum i pe


fibroblastele embrionului uman.
!!! Nu se reproduc n embion de gin.

3.3 Structura antigenic


Antigene:
1. Ag S solubile, legat cu nucleoproteina,
2. Ag V complex de proteine de structur variat, aflat n
membrana lipoproteic a virusului.
4 tipuri independente:
3. Tipul 1 provoac la copii crup, faringit, bronhiolite sau
pneumonii,
4. Tipul 2 condiioneaz laringotrahiobronite sau
afeciuni acute ale cilor respiratorii superioare.
5. Tipul 3 hemadsorbant.
Crup i afeciuni pulmonare la copii
6. Tipul 4 tulpina M-25

3.4 Patogenez
Factori de patogenitate:
Hemaglutinin ligand al virusului la epiteliul respirator,
Neuraminidaza favorizeaz accesul virionilor la receptorii
epiteliali.
Calea de ptrundere: - aerogen,
- picturi Flugge.
Ptrunde n organism pe cale respiratorie;
Replic la nivelul celulelor epiteliale ale mucoasei tractului

respirator superior. Condiioneaz distrucia epiteliului (permite


ptrunderea microflorei bacteriene), procese inflamatorii i edem
laringian.
Invadeaz fluxul sangvin i cauzeaz intoxica ia general a
organismului, cu complicaii.

3.5 Diagnostic de laborator


o Prelevate: secreii nazo-faringiene sau exudat nazal (necongelat),sput,

NB! Prelevatul se conserveaz cu un volum de glicerin 50% tamponat la pH 7.2


Examen direct: consta n identificarea antigenelor virale n produsele patologice, prin:

Imunofluorescen (anticorpi monoclonali),

ELISA sau RIF ( identificarea rapid a Ag viral n secre iile respiratorii):

o Cultivare:

- se realizeaz n culturi celulare primare din rinichi de maimu sau embion uman,
- se urmrete apariia i caracterul efectului citopatic :
celule granulare( serovarurile 1,4) i sinciii (serovarurile 2,3)

RN, RIHAds (identificarea serovarurilor izolate, cu utilizarea eritrocitelor de cobai)

Serologic : Diagnosticul poate fi pus prin eviden ierea cre terii de 4 ori sau mai mult a titrului de

anticorpi n probele de ser, din faza de convalescen a bolii n comparatie cu faza acuta, precum si prin
teste de:

Inhibare a hemaglutinrii;

Fixarea complementului;

ELISA.

3.6 Clinic
Paragripa: boal respiratorie acut,

caracterizat prin:
- febr,
- tuse,
- intoxicare moderat a organismului,
- afectarea laringelui i bronhiilor,
Frecvent la copii:
broniolite, faringite, laringotraheobronite,
crup, pneumonii.
Grav n primul an de via:

- laringotraheit cu crup (serovar 2),


- broniolite cu pneumonii interstiiale (serovar 3).
La maturi cauzeaz leziuni de form uoar n cile respiratorii.

!!!Infeciile cu serovarul 4 sunt rare i genigne.

3.7 Imunitatea

Nu este nc pe deplin neleas


Se presupune c imunitatea fa de infeciile cu

serotipurile 1 i 2 este mediat la nivelul tractului


respirator de Ac locali IgA.
Ac serici neutralizai dobndii pasiv pot oferi,
protecie mpotriva infeciei cu tipul 1 , 2 mai puin 3.
!!! Se utilizeaz imunoglogulin placentar pentru imunizare
paziv n colectiviti de copii.Se administreaz 3-6 ml
intramuscular, cnd apar cazuri de paragrip.

3.8 Tratament
n afectarea tractului respirator superior,
tratamentul este simptomatic.
Tratamentul antibiotic este indicat doar n prezena
complicaiilor, cum ar fi otit, sinuzit sau
bronit suprainfectat bacterian.
Cazurile mai severe necesit spitalizare i supraveghere atent.
Cazurile care evolueaz cu insuficien respiratorie necesit
administrarea de oxigen umidificat, epinefrin racemic i
doze mari de glucocorticoizi sistematici, etc.
Nu exista un tratament etiologic.
!Nu a fost realizat nca un vaccin
eficient mpotriva virusului paragripal.

Virusul Parotidei Epidemice


( Oreionul)

4.1 Generaliti
Familia: Paramyxoviridae
Genul: Paramyxovirus
Specia: Virusul urlian
Agentul parotiditei epidemice, virusul urlian a fost descoperit de C. Johnson i E.
Goodpasture n 1934; Un studiu mai amplu al acestei patologii n Republica
Moldova a fost efectuat de confereniarul V. Negrescu i coautorii prin anii 19661976.
Oreion (fr.-oreiller - pern) sau oreillons - caschet cu prelungiri care
protejeaz urechile. Capul bolnavului, dac sunt afectate ambele glande
parotidiene, se aseamn cu o par (prsad).
Oreionul este o boal infecioas acut, contagioas, produs de virusul
urlian, care determin inflamarea glandelor salivare. Cea mai frecvent
localizare fiind la nivelul parotidelor.

4.2. Caractere morfobiologice


Morfobiologie: Virionii au o forma sferic

neregulat cu un diametru ce variaz ntre 90


i 300 nm.
Anvelopa virusului este alcatuit din 3 straturi:
suprafaa extern prezint glicoproteine cu activitate neuraminidazic, hemaglutininic i
de fuziune celular; stratul mijlociu este un bistrat lipidic dobndit de la celulele gazd pe
masur ce virusul nmugurete din membrana citoplasmatic, iar stratul intern este o
membran proteic neglicozilat care menine structura extern a virusului.
Nucleocapsida conine genomul viral, format dintr-o molecul de ARN monocatenar.
Caractere de cultur: virusurile se reproduc n ou embrionate, n culturi renale
primare embrionare umane.
Structura antigenic: Virusul urlian nu are variante serologice, contine 2 Ag- Ag S
(solubil, legat de o ribonucleoprotein) i Ag V ( format din structuri virale superficiale).
Rezistena: virsul se pstreaz la t joase (-25 -70C) civa ani, puin rezistent la
aciunea agenilor fizici i chimici. Inactivat la 55-60C timp de 22 min.i foarte rapid de
razele UV.

4.3 Patogeneza:
Sursa

de infecie:
*persoane bolnave,
*cei cu infecii inaparente.
Transmiterea:
- direct, aerogen prin picturi Pflgge,n timpul tusei, strnutului,graiului,srutului..
- indirect, prin obiecte proaspt contaminate.
poate avea loc infectarea pe cale vertical (transplacentar) de la mam la ft
Receptivitate:
Mai frecvent copiii intre 5-14 ani,
Mai rar sugarii i vrstnicii, protectie fiind asigurata de prezenta anticorpilor materni.
Patogeneza: ( Perioada de incubaie: 14-21 zile)
Poarta de intrare - mucoasa faringian, respiratorie , unde se multiplic
Ptrunde n torent sangvin
virusemie primar, cu simpome de intoxicaie

disemineaz SNC ( meningite)

- organe cu esut glandular: - glandele salivare,

- testicul,

- ovar,

- glandele lacrimale,

- pancreas,

- tiroid.

Virusul se elimin prin saliv.

4.4 Tabloul clinic:


Debut:
brusc, febr (38-40C), frison, cefalee, mialgii, inapeten, senzaie de tensiune

dureroas a lojii parotidiene, cu afectarea gl. parotidiene:


-se mresc n volum, devin dureroase, au o consisten semidur ,fr hiperemia
pielii
-glanda mbrac unghiul mandibulei i ramura ascendent (osul nu se poate palpa)
- tegumentul este neted, destins, lucios, de culoare normal.

4.5 Complicaii:
*Afectarea SNC (meningit, encefalit);
*orhitei urliene uni sau bilateral la baiei,(o tumefiere dureroas a

testiculelor), poate determina sterilitatea;


*la fete -oforita, cu dureri n abdomenul inferior prin inflamarea ovarului.
*pancreatit (<5% din cazuri);
*miocardita si pericardita urliana (cazuri destul de rare);
*artrita, ce poate simula un reumatism articular acut.
*surditate...

4.6 Diagnosticul de laborator:


Prelevate: urin, saliv, lichid cefalorahidian
Izolarea virusului: n oul embrionat de gin, de 7-8 zile i pe culturi de

celule din rinichi de maimu, embrion uman. Virusul e infectat n cav.


amniotic. Incubare 6-7 zile 35C. Virusul poate fi depistat prin RIHA, RIF,
RN, RFC, RIHads
Diagnosticul serologic: se examineaz seruri pereche, se determin
creterea de cel puin 4 ori a Ac n ser, sau prezena Ac Ig M.
Se efectueaz RFC sau RIHA, utiliznd lichid amniotic sau alantoid din ou
embrionat, infectat cu virus.
Titrul Ac n RIHA- 1:320 / RFC-1:64
Intradermoreacia: Alergen-lichid alantoidian, din oul embrionat infectat cu
virus urlian, cu titrul 1:128. Se injecteaz 0,1 ml.Peste 24-48h apare hiperemie
i infiltrat cu 10mm. Reacia e poz dup 2-3 spt de la debut bolii.

4.7 Imunitate.Profilaxie
n profilaxie are o importan depistarea precoce a bolnavilor i izolarea lor la
domiciliu ori spital. n focar se efectueaz msuri de dezinfecie i ventilare.
Persoanele ce ngrijesc de bolnavi trebuie s poarte mti de tifon.
Cea mai radical msur n combaterea oreionului, rmne aplicarea regulat a
vaccinului antiurlian, ncepnd din fraged copilrie. Deseori acest vaccin se
utilizeaz mpreun cu cel antirujeolic i antirubeolic.
Priorix contine forme vii, atenuate, ale virusurilor rujeolic,
urlian, rubeolic. Cnd unei persoane i se administreaz
vaccinul, sistemul imunitar produce Ac mpotriva
virusurilor rujeolic, urlian i rubeolic, protejnd organismul.
Acest vaccin poate fi administrat atat copiilor ct
i adulilor.

Imunitatea post-infecioas e stabil i se menine

pe parcursul ntregii viei. n serul sangv. Apar Ac,


care fixeaz complementul i stopeaz reacia de
hemaglutinare.

4.8 Tratament:
repaus la pat 10-14 zile, cu evitarea eforturilor fizice
izolarea la domiciliu
diet lejer cu lichide n cantitate crescut (supe, ceaiuri, ap, sucuri naturale

de fructe ), mncruri semisolide


n caz de febr: administrarea de ibuprofen, paracetamol
toaleta mucoasei bucale cu gargara, administrare de soluie de glicerina cu
stamicin
n cazul vrsturilor se administreaz metoclopramid, emetiral, nsa numai la
indicaia medicului
n cazul orhitei, se pot administra corticosteroizi, dar numai la indicaia
medicului.

Virusul rujeolei

Familia Paramyxoviridae
Genul Morbillivirus- virusul rujeolei
1. ARN virus, monocatenar, negativ- alctuit din 6 gene, care codific pentru 8
proteine
2. Nucleocapsida- simetrie helicoidal, alctuit: proteinele N, L, P, formeaz
mpreun complexul de transcriere al ARN (RNP)
3. Supercapsida:
Proteina de fuziune F- asigur fuziunea virusului cu MCP a celulei, cu 2
subunitati F1, F2, determin formarea de simplaste prin unirea celulelor
infectate ntre ele
Hemaglutinina H- glicoprotein, fixarea de celula gazd
Proteina M- matricial, acoper din interior supercapsida, face parte din RNP
4. Dimensiune-: 120- 250 nm
5. Proteine nestructurale:
Proteina V- inhib rspunsul imun al gazdei; se fixeaz de o helicaz, care
blocheaz sinteza de interferon
Proteina C: inhib semnalizarea celular, care se face pe calea interferonilor

6. Caractere de cultur:
Cultivarea se face pe epiteliu renal uman,
simian,canin, amnios uman; la microscop se
observ formarea de simplaste i incluziuni
eozinofile n citoplasm i nucleul celuleor
infectate
7. Rezistent la temperaturi joase
foarte sensibil la razele solare
Inactivarea la 58 C
Nu rezist n afara gazdei mai mult de 30 min

Patogeneza rujeolei
Sursa de infectie: purttorul bolnav, perioada

contagioas 8-10 zile (din 1 zi a peroadei


prodromale- 4 zi dup apariia erupiilor).
! Extrem de contagioas, cu risc de complicaii la
femeile nsrcinate, persoanele imunosupresive sau cu
deficit nutriional

Mecanismul de infectare:
1. Virusul ptrunde n organism prin mucoasa cilor
respiratorii superioare, aerogen prin secre ii
nazofaringiene
2. Penetrarea n celule se face prin fuziune sau
endocitoz- transcrierea ARN
3. Are loc replicarea n macrofagele alveolare i
celulele dendritice
4. Celulele infectate ajung n ganglionii limfatici, unde
sunt infectate alte celule imune- infectia ptrunde
n organele limfocitare secundare- n stadii tardive,
cnd celule imune infectate circul prin snge,
infecia este transmis epiteliului respirator

Tabloul clinic
Perioada de incubaie de 10 zile
2. Debut:
Stadiul preeruptiv/ perioasa cataral: 3-5 zile, febr,
catar nazal (strnut, rinoree, epistaxis), ocular
(hiperemie conjunctival), catar bronic, intestinal
cu diaree
Apariia de micropapule albicioase- ca boabele de
gri, la nivelul utimilor 2 molari, gingivit
eritematoas
Limba sabural cu descuamare insular
1.

3. Perioada de stare:
Corespunde apariiei exantemului, cu o nou
ascensiune febril
Apariia erupiilor, iniial retroauricular, frunte
obraji- timp de 3 zile generalizat
Erupiile sunt maculopapuloase, care timp de 1
sapt. dispar cu descuamarea pielii
4. Perioada de convalescen: ameliorarea strii
generale

Complicaii
n timpul sarcinii poate cauza avort spontan sau
natere prematur
2. Complicaii pulmonare- pneumonia
3. Complicaii neurologice- encefalomielita, encefalita,
nevrita retro-bulbar
- Panencefalita sclerozanta subacuta (PESS)- apare dup
5-6 ani de la infectare cu un virus al rujeolei rezistent la
mecanismele imune de aprare ale organismului, se
caracterizeaza prin deteriorare intelectuala, convulsii,
afectarea nervului optic, ataxie cerebeloasa, coma i
moarte n 2-5 ani.
1.

Sindromul rujeolei atipice: Spre deosebire de rujeola


clasica, eruptia debuteaza periferic si poate fi de tip
urticarian, maculopapular, vezicular sau hemoragic.
Rujeola mitigata (modificata)- apare la persoanele cu
un grad de imunitate pasiv fa de virus: copiii sub
varsta de 1 an care au dobndit pasiv anticorpi specifici
materni i unele persoane susceptibile la care s-a
administrat imunoglobulina dupa expunerea la virus.
In acest forma de infectie lipsesc simptomele si
semnele clasice ale bolii.

Diagnosticul de laborator
Prelevatele: exudatul nazofaringian, lichidul din
elementele eruptive, cutanate; snge
Examenul rapid:
1. RIF- pentru depistarea antigenului viral din
lichidul din erupii
2. Examenul citologic al secreiei nazale pt a observa
formarea simplastelor (celule mari multinucleate )
n faza prodromal

Izolarea virusului: din snge, exudat cu inoculare n


culturi celulare. Se observ n 72- 96 ore efectul
citopatic al virusului cu formarea sinciiilor i
apariia de incluziuni eozinofile.
Identificarea se face prin RIF, RN, RHAI cu
suspensie de 0,5 % eritrocite de maimu.
Diagnosticul serologic: RFC, RN, RHAI
Identificarea IgM prin ELISA, cu ser anti-IgM, dup
1-2 zile de la apariia erupiilor.
Prezenta Ig G indic o mbolnvire mai veche, cu
imunizarea persoanei

Imunitatea, profilaxie, tratament


Tratament: se efectueaz cu antibiotice (peniciline)
Imunitatea: umoral Ig G, Ig M timp de o luna;
Celular: Tm
Profilaxie: se efectueaz vaccinarea ROR (rujeol,
otit, rubeol)- trivaccin viu atenuat
Imunoglobulin antirujeoloas pt profilaxie pasiv,
n doz de 1,5- 3,0 ml

Bibliografie
1.Curs Microbiologie.Virusologie.Imunologie. Lucrare
de Laborator nr.30
2.Protocol Clinic. IRA
http://www.terapiamedicala.ro/infectia-cu-virus-par
agripal
http://
www.mediculmeu.com/boli-infectioase/virusuri-respir
atorii-adn-si-arn/infectii-cu-virus-paragripal.php