By OvyOne

MICROBIOLOGIA I BIOTEHNOLOGIA
APRECIEREA ACTIVITII ANTIOXIDANTE I
ANTIRADICALICE A EXTRACTELOR DIN Porphyridium cruentum
PRIN APLICAREA METODELOR NON-SPECIFICE
L. Rudi, L. Cepoi, V. Miscu, T. Chiriac, A. Cojocari, D. Sadovnic, V. Rudic
Institutul de Microbiologie i Biotehnologie al Academiei de tiine a
Moldovei

Introducere
Antioxidanii n calitate de compui care micoreaz intensitatea
oxidrii radicalice i neutralizeaz radicalii liberi, formeaz bariere
succesive de protecie n dependen de tipul mecanismului lor de
aciune. Unul din momentele importante n aciunea antioxidanilor
este derularea n lan a reaciilor antioxidative, cu formarea radicalilor
intermediari mai puin activi care sunt anihilai prin alte reacii
antioxidative cu implicarea altor compui activi.
n prezent tot mai multe cercetri conrm rentabilitatea utilizrii
mediului acvatic n producerea materiei prime pentru obinerea
antioxidanilor naturali [8,11]. n calitate de surse de antioxidani sunt
studiate unele cianobacterii i microalge aa ca
Spirulina platensis, Chlorella vulgaris, Dunaliella salina, Haematococcus pluvialis,
Porphyridium cruentum .a. [2, 4, 5, 8, 11, 12].
Microalgele i cianobacteriile sunt purttorii unor complexe
antioxidative cu o activitate superioar, datorit crora a fost posibil
supravieuirea i evoluia lor. Impactul mediului poluat asupra puritii
ecologice a materiei prime vegetale, surs de substane antioxidante,
favorizeaz tehnologiile cologice n producerea substanelor biologic active
cu un spectru tot mai larg de utilizare [4, 8, 11]. Extractele din Spirulina platensis sunt
utilizate n medicin n scopul reducerii efectelor tratamentului radiologic
[13]. Biomasa de Porphyridium cruentum conine mai multe componente cu
proprieti pronunat antioxidante. Printre acestea sunt enzimele
antioxidante, complexul glutationic, pigmenii cobilinici i carotenoizii,
polizaharidele sulfatate, .a. Fiecare din aceste componente au mecanisme
variate de aciune antioxidativ i se includ pe ci diferite n procesele de
eliminare a radicalilor liberi. Astfel, antioxidanii obinui din biomasa algei
Porphyridium cruentum au fost testai n calitate de component antioxidativ n
procesarea alimentelor. Activitatea antioxidant a extractelor etanolice
(96%) din biomasa de Porphyridium cruentum determinat cu utilizarea sistemuluimodel -caroten-linoleat este superioar activitii antioxidanilor sintetici
BHA (hidroxianizol butilat) i BHT (hidroxitoluen butilat) [11]. Polizaharidele
sulfatate din biomasa de Porphyridium deasemenea manifest aciune
antioxidant care se realizeaz n baza activitii de eliminare a radicalilor
[14].
Scopul cercetrilor efectuate a constat n aprecierea activitii
antioxidante i antiradicalice a extractelor din Porphyridium cruentum pentru
selectarea
variantelor
optimale
de
obinere
a
preparatelor
policomponente cu activitate antioxidant i antiradicalic n baza

diverselor mecanisme de reducere i de inhibare a producerii de

radicali.
114

Materiale i metode

n
cali
tat
e
de
ma
teri
e
pri
m
a
fos
t
util
izat

bio
ma
sa
lio
li
zat

de
Por
phy
ridi
um
cru
ent
um
CN
MAR01.
Pe
ntr
u
ob
ine
rea
ext
rac
tel
or
hid
roeta

noli
ce
din
bio
ma
sa
alg
al
au
fos
t
sel
ect
ate
con
cen
tra
iile
de
eta
nol
:
de
10
%,
20
%,
40
%,
55
%,
65
%,
75
%
i
96
%.
Ext
rac
tel
e
hid
roeta
noli
ce
au
fos
t
ob
inu
te

n
con
dii
i
de
te
mp
era
tur

(18
200
C)
con
sta
nt
la
agi
tai
e
per
ma
ne
nt
.
Ra
por
tul
din
tre
bio
ma
s
i
sol
ve
nt
a
fos
t
de
1:1
0
(w:
v),
iar
tim
pul
de
ext
rag
ere


de
24
ore
.
Ext
rac
tel
e
ob
inu
te
au
fos
t
sta
nd
arti
zat
e
la
1
mg
/ml
sub
sta
n
usc
at
.
A
cti
vit
ate
a
ant
ira
dic
alic
a
ext
rac
tel
or
a
fos
t
det
er
mi
nat

spe
ctr
ofo
to
me
tric
cu
util
izar
ea
rad
ical
ilor
DP
PH
(2,
2dip
he
nil1pic
rilh
idr
azil
)
[1]
i
AB
TS
(2,
2
azi
no
bis
3ethy
lben
zoth
iazo
line
-6acid
sulf
onic
)
[10]
.
A
ctivi
tate
a
ant
iox

ida
nt
a
fos
t
det
er
mi
nat

sp
ect
rof
oto
me
tric
n
ba
za
rea
ci
ei
de
red
uc
ere
a
rea
ge
ntu
lui
fos
fo
mo
lib
de
nic
[9]
. n
cali
tat
e
de
ec
hiv
ale
nt
a
fos
t
util
iza
t

acid
ul
asc
orbi
c.
C
on
in
ut
ul
fen
olil
or
a
fos
t
de
ter
mi
na
t n
ba
za
rea
ci
ei
Fol
inCio
cal
te
u
[1
2].
n
cali
tate
de
ech
ival
ent
a
fost
utili
zat
aci
dul
gali
c.
Rezultate i discuii
P
ent
ru
ob

ine
rea
co
mp
lex
elo
r
ant
ioxi
da
nte
din
ma
teri
a
pri
m
ve
get
al
tot
ma
i
fre
cve
nt
est
e
util
izat
eta
nol
ul
n
cali
tat
e
de
sol
ve
nt.
[2].
n
caz
ul
cer
cet
ril
or
de
tes
tar

e a
co
mp
on
ent
elo
r
cu
ac
iun
e
ant
ioxi
da
nt
,
con
cen
tra
iile
var
iat
e
de
eta
nol
util
izat
e
au
per
mis
sta
bili
rea
con
cen
tra
iei
opt
im
ale
a
alc
ool
ulu
i
etil
ic
pe
ntr
u

ob
ine
rea
ext
rac
tel
or
cu
act
ivit
ate
ant
ioxi
da
nt
ma
xi
ma
l
[7].

n
ace
st
stu
diu
n
cali
tat
e
de
sol
ven
t de
ase
me
nea
a
fost
utili
zat
eta
nol
ul
de
div
ers
e
con
cen
tra
ii n
sco

pul
obi
neri
i
unu
i
pre
par
at
hidr
oeta
noli
c
co
mpl
ex
car
e
s
con
in
at
t
co
mp
one
nte
hidr
ol
e,
ct
i
lipo
le
.
Pen
tru
sta
bilir
ea
pot
eni
alul
ui
anti
oxi
dan
t i
anti
radi
cali
c al

extr
act
elor
obi
nut
e
au
fost
ada
pta
te
i
apli
cat
e
met
ode
le
uzu
ale
nes
pec
ic
e
de
det
erm
inar
e a
acti
vit
ii
anti
oxi
dan
te.
Astf
el,
pen
tru
sta
bilir
ea
acti
vit
ii
anti
oxi
dati
ve
a
extr
act

elor
a
fost
utili
zat

met
oda
red
uce
rii
rea
gen
tulu
i
fosf
om
olib
den
ic
car
e
sta
bile
te
cap
acit
ate
a
stru
ctur
ilor
co
mp
one
nte
acti
ve
de
a
par
tici
pa
n
rea
ciil
e
de
oxi
dored
uce
re

n
cali
tat
e
de
red
uc
tor.
Rez
ulta
tele
sun
t
pre
zent
ate
n
g
ura
1.

A
cti
vit
ate
a
ant
iox
ida
nt
n
ext
rac
tel
e
hid
roeta
nol
ice
var
iaz

de
la
1,0
6
m
mo
l
p
n
la
8,2

9
m
mo
l
aci
d
asc
orb
ic/
mg
su
bst
an

act
iv
.
Put
em
a
rm
a
exi
ste
na
un
ei
cor
el
ri
line
are
(R2
=
0,8
62
2)
din
tre
co
nc
ent
rai
a
eta
nol
ulu
i
util
iza
t i
act
ivit

ate
a
ant
iox
ida
nt
.
Da
tel
e
ob
inu
te
vor
be
sc
n
fav
oar
ea
util
iz
rii
co
nc
ent
rai
ilor
ma
i
ma
ri
de
alc
ool
etil
ic
n
caz
ul
det
er
mi
nr
ii
act
ivit
ii
ant
iox
ida
tiv
e

pri
n
me
tod
a
red
uc
erii
rea
ge
ntu
lui
fosf
om
olib
deni
c.
P
ent
ru
sta
bilir
ea
abil
iti
i
co
mp
one
ntel
or
acti
ve
din
extr
act
ele
obi
nut
e
de
a
par
tici
pa
la
rea
ciil
e
de
ani
hila
re a

radi
calil
or
prin
me
can
ism
ul
anti
radi
cali
c
don
or
de
hidr
oge
n, a
fost
utili
zat
radi
cal
ul
DPP
H.
Rez
ulta
tele
test
ului
anti
radi
cali
c
(g
.2)
au
ar
tat
cap
acit
ate
a
extr
act
elor
eta
noli
ce
cu
con
cen

tra
ia
eta
nol
ului
de
1020
%
de
a
red
uce
radi
cal
ul
DPP
H n
pro
por
ie
de
40
%.
Ext
ract
ele
de
55
%
i
70
%
eta
nol
red
uc
radi
cal
ul
DPP
H
cu
apr
oxi
mat
iv
20
%,
iar
extr
act
ele

de
40
%,
65
%
i
96
%
eta
nol
au
acti
vita
te
anti
radi
cali
c
de
la
10
%
la
13
%
inhi
bii
e.
Coe
ci
entu
l de
core
lare
dintr
e
acti
vitat
ea

115

ant
ira
dic
alic
a
ext
rac
telo
r i
con
cen
tra
ia
eta
nol
ului
est
e
des
tul
de
mic
R2=
0,54
17.
Sc
der
ea
acti
vit
ii
ant
ira
dic
alic
e a
avu
t
loc
bru
sc,
(cu
70
%
fa

de
ext
rac
tul

de
10
%)
la
niv
elul
ext
rac
tul
ui
de
40
%
eta
nol.
Rea
bilit
are
a
acti
vit
ii
ant
ira
dic
alic
e n
con
tin
uar
e,
oda
t
cu
cre
te
rea
con
cen
tra
iei
eta
nol
ului
, a
fost
ne
nse
mn
at
.
Pri
n

ur
ma
re,
extr
acte
le
din
bio
mas
a de
Por
phy
ridi
um
au
capa
citat
ea
de a
redu
ce
radi
calii
liber
i, iar
com
pon
ente
le
ant
ira
dic
alic
e
acti
ve
se
con
in
n
ext
rac
tel
e
cu
con
in
ut
min
im
de
eta
nol.

F
ig
.
1.
A
ct
iv
it
at
e
a
a
n
ti
o
xi
d
a
n
t
(
m
m
ol
a
ci
d
a
s
c

o
r
bi
c/
m
g
s
u
b
st
a
n

a
ct
iv
)
a
e
xt
ra
ct
el
o
r
di
n
P
or
ph
yr
idi
u
m
d
et
er
m
in
at

p
ri
n
m
et
o
d

a
re
d
u
c
er
ii
re
a
g
e
n
t
ul
ui
fo
sf
o
m
ol
ib
d
e
ni
c.

F
ig
.
2.

A
c
ti
v
it
a
t
e
a
a
n
ti
r
a
d
i
c
a
li
c

(
%
i
n
h
i
b
i
i
e
)
a
e
x
t
r
a
c
t
e
l
o
r
d
i
n
P
o
r
p
h
y
ri

di
u
m
p
ri
n
m
et
o
d
a
d
e
re
d
u
ce
re
a
r
a
di
c
al
ul
ui
D
P
P
H
U
na
din
cel
e
mai
uzu
ale
met
ode
de
det
erm
inar
e a
acti
vit
ii
anti
radi
cali
ce
est

e
rea
cia
de
red
uce
re a
radi
cal
ului
cati
on
ABT
S+.
Pen
tru
extr
act
ele
obi
nut
e
din
bio
ma
sa
de
Por
phyr
idiu
m
car
e
pre
zint

un
co
mpl
ex
de
prin
cipi
i
biol
ogi
c
acti
vi,
est
e
imp
ort

ant

pos
ibili
tat
ea
det
erm
inr
ii
cap
acit
ii
de
a
par
tici
pa
la
rea
ciil
e
de
ani
hila
re a
radi
calil
or
libe
ri
prin
me
can
ism
ul
rea
cie
i de
red
uce
re
(do
nor
de
ele
ctro
ni).
Test
ul
est
e
spe

ci
c
at
t
pen
tru
co
mp
one
ntel
e
lipo
sol
ubil
e,
ct
i
pen
tru
cel
e
hidr
oso
lubi
le.
Rez
ulta
tele
obi
nut
e
(
gur
a 3)
de
mo
nstr
eaz
o
acti
vita
te
anti
radi
cali
c
sup
erio
ar
a
tut
uro
r

extr
act
elor
fa
de
radic
alul
ABT
S.
Ext
ract
ul
de
10
%
eta
nol
inhi
b
65
%
din
radi
cal
ul
ABT
S,
iar
extr
actu
l de
20
%
alc
ool
pro
duc
e
45
%
inhi
bii
e.
Ca
i
n
caz
ul
test
ului
DPP
H,
extr

act
ul
de
40
%
eta
nol
est
e
mai
pui
n
acti
v,
ma
nife
st
nd
un
efe
ct
anti
radi
cali
c
de
doa
r
33
%
inhi
bii
e.
Ext
ract
ele
de
55
%
i
70
%
eta
nol
au
acti
vita
te
anti
radi
cali
c
sim

ilar

de
40
%
inhi
bii
e.

116

F
i
D
D
T
a
10
2,14
0,02

Extrac
etano
20
4
1,60
1
0,06

D
T
a

Spirulina
Nostoc

10
2,180,02
3,220,05

E
e
20
1,52
1,52

D
atel
e
pre
zen
tat
e
au
de
mo
nstr
at o
acti
vita
te
anti
oxi
dan
t
ase
m
nt
oar
e,
cu
exc
epi
a
extr
act
elor
din
cia
nob
act
erii
obi
nut
e
cu
utili
zar
ea
con
cen
tra
iilor
mar
i
ale
eta

nol
ului
,
und
e
val
oril
e
TEA
C
sun
t
sup
erio
are.
Prin
ur
mar
e,
extr
act
ele
obi
nut
e
din
bio
ma
sa
cia
nob
act
eriil
or
au
acti
vita
te
anti
oxi
dan
t
mai
mar
e.
Coe
ci
entu
l
TEA
C
dete
rmin

at
pent
ru
Por
phyr
idiu
m
crue
ntu
m
este
mai
apro
ape
de
TEA
C
stabi
lit
pent
ru
unel
e
plan
te

[3]
i
ind
ic
val
ori
su
per
ioa
re
pe
ntr
u
ext
rac
tel
e
cu
co
nc
ent
rai
ile
mi
ci
ale
alc
ool
ulu

i
etili
c.
P
rin
ur
ma
re,
a
fos
t
de
mo
nst
rat

po
sibi
lita
tea
util
iz
rii
ext
rac
tel
or
din
mi
cro
alg
e
ca
pot
en
iali
ant
iox
ida
ni
nat
ura
li
ec
olo
gic
ino
fen
sivi
.

n
ext
rac

tel
e
ob
inu
te
a
fos
t
det
er
mi
nat
co
ni
nut
ul
fen
olil
or.
Pe
ntr
u
ac
ea
sta
a
fos
t
util
iza
t
me
tod
a
red
uc
erii
rea
gen
tulu
i
Foli
nCio
calt
eu.
D
in
rezu
ltate
le
prez
enta
te n

g
ura
4
se
sta
bile
te
dep
end
en
a
inv
ers

dint
re
con
cen
tra
ia
eta
nol
ului
i
con
cen
tra
ia
fen
olil
or,
coe
ci
entu
l de
core
lare
in
d
R2=
0,67
97.
Con
cen
tra
ia
fen
olil
or
sca
de
oda
t

cu
cre
ter
ea
con
cen
tra
iei
etan
olul
ui.
n
prin
cipi
u,
rea
gent
ul
Foli
nCio
calt
eu
nu
este
spe
ci
c
num
ai
pent
ru
cua
nti
c
are
a
com
pon
ente
lor
feno
lice
deo
arec
e el
poat
e
red
us
i
de
une

le
co
mp
one
nte
ca
pro
tein
ele,
aci
dul
asc
orbi
c
.a.
Con
cen
tra
iile
mar
i
ale
eta
nol
ului
extr
ag
une
le
co
mp
one
nte
fen
olic
e
car
e
au
acti
vita
te
anti
oxi
dan
t
mar
e
dar
car
e
se
ma

nife
st
prin
me
can
ism
e
dife
rite
de
cel
al
tra
nsf
erul
ui
de
ele
ctro
ni
car
e
est
e
real
izat
de
car
ote
n i
toc
ofer
ol.

F
i
g
.
4
.
A
c
ti
vi
t
a
t
e
a
a
n
ti
o
xi
d
a
n
t

(
m
m
o
l
a
ci
d
g
a
li
c/
m
g
s
u
b
s
t
a
n

a
c
ti
v


)
a
e
x
tr
a
c
t
e
l
o
r
di
n
P
or
p
h
yr
id
iu
m
p
ri
n
m
et
o
d
a
d
e
re
d
u
ce
re
a
re
a
ge
nt
ul
ui
F
ol
in
C
io
ca
lt
e
u

D
ac
co
mp
ar
m
me
tod
a
det
er
min
rii
con
in
utu
lui
fen
olil
or
ca
me
tod

de
det
er
min
are
a
cap
acit
ii
de
red
uce
re
a
rea
gen
tul
ui
Foli
nCio
aclt
eu
cu
me
tod
a
de

tes
tar
e a
cap
acit
ii
de
red
uce
re
a
rad
ical
ului
AB
TS
(te
stul
TE
AC)
,
ob
ine
m
o
cor
elar
e
vd
it
car
e
se
exp
rim

pri
n
coe
ci
ent
ul
de
cor
elar
e
de
R2=
0,9
563
(g
ura

5).

C
oe
c
ien
tul
de
cor
ela
re
ma
re
per
mit
e
intr
od
uc
ere
a
me
tod
ei
dat
e
n
list
a
me
tod
elo
r
uz
ual
e,
si
mp
le
n
util
iza
re
i
n
ad
apt
are
la
tip
ul
ext
rac
tel
or,

pe
ntr
u
det
er
mi
nar
ea
act
ivit
ii
ant
iox
ida
nte
[6]
.
S
tudi
ul
dat
a
sta
bilit
c
extr
act
ele
eta
noli
ce
de
10
%20
%
au
cea
mai
mar
e
cap
acit
ate
de
a
red
uce
rea
gen
tul
Foli
nCio

calt
eu,
car
e
est
e
de
5-6
mm
ol
aci
d
gali
c/m
g
sub
sta
n
acti
v.
Acti
vita
tea
anti
oxi
dan
t
sca
de
pen
tru
extr
ace
tle
eta
noli
ce
de
40
% 96
%,
val
oar
ea
min
im
in
d
de
2,8
9
mm
ol

aci
d
gali
c/m
g
sub
sta
n
acti
v
pen
tru
extr
actu
l de

96
%
etan
ol.
118

F
i

R
1
.
A
n

1
9

2
3
4
5

C
h

6
7
.
1

8
.
P
laza
M.,
Cifu
ente
s A.,
Ib
ez
E. In
the
searc
h of
new
funct
ional
food
ingre
dient
s
from
algae
. //
Tren
ds in
Food
Scie
nce
&
Tech
nolo
gy,
2008
, vol.
19,
p.
3139.

9
.

P
rieto
P.,
Pine
da
M.,
Agui
lar
M.
Spec
trop
hoto
metri
c
Qua
ntitat
ion
of
Anti
oxid
ant
Capa
city

thro
ugh
the
For
mati
on
of a
Pho
sph
omo
lybd
enu
m
Co
mpl
ex:
Spe
ci
c
Appl
icati
on
to
the
Det
ermi
nati
on
of
Vita
min
E1.
Anal
ytica
l
Bioc
hem
istry,
199
9,
vol.
269,
p.
337

341.

1
0
.
R
e R.,
Pell
egri
ni
N.,
Prot
egge
nte
A.,
Pan
nala
A.,
Yang
M.,
Rice

Eva
ns
C.
Anti
oxid
ant
activ
ity
appl
ying
an
impr
oved
ABT
S
radic
al
catio
n
deco
loriz
ation
assay
.
//Fre
e
Radi
cal
Biol
ogy
&
Medi
cine,
1999
, vol.
26(9
/10),
p.
1231
1237
.

1
1
.
R
odri
guez
Gar
cia
I.,
Guil
Gue
rrer
o
J.L.
Eval
uatio
n of
the
antio
xida

nt
activ
ity
of
three
micr
oalg
al
speci
es
for
use
as
dieta
ry
supp
leme
nts
and
in
the
prese
rvati
on of
food
s.
Food
Che
mistr
y
108
(200
8)
102
3
102
6.

1
2
.
R
ogin
sky
V.,
Lissi
E.A.
Revi
ew
of
meth
ods
to
deter
mine
chai
nbrea
king
antio
xida
nt
activ
ity
in
food
.

//Fo
od
Che
mist
ry,
200
5,
vol.
92,
p.
235254.

1
3
.
S
ama
rth
R.,P
anw
ar
M.,
Kum
ar
M.,
Soni
A.,
Kum
ar
M,
Kum
ar.
Eval
uatio
n of
antio
xida
nt
and
radic
alscav
engi
ng
activ
ities
of
certa
in
radi
opro
tecti
ve
plant
extra
cts. /
/Foo
d
Che
mist
ry ,
200
8,
vol.
106,

p.
868

873.

1
4
.
T
anni
nSpitz
T.,
Berg
man
M.,
vanMop
pes
D.,
Gros
sman
S.
Anti
oxida
nt
activi
ty of
polys
acch
aride
of
the
red
micr
oalga
Porp
hyrid
ium
Sp. //
Journ
al of
Appl
ied
Phyc
ology
,
2005
, v
17,
p.
215222.

ST
AN
DA
RDI
ZA
RE
A

PR
OC
ED
URI
I
DE
CO
NS
ER
VA
RE
A

T
U
L
P
I
N
I
L
O
R
D
E
A
C
T
I
N
O
M
I
C
E
T
E
P

S
T
R
A
T
E

N
C
O
L

E
C

I
A
N
A

I
O
N
A
L

D
E
M
I
C
R
O
O
R
G
A
N
I
S
M
E
N
E
P
A
T
O
G
E
N
E
.
I
I
.
I
N
F
L
U
E

A
U
N
O
R
M
E
T
O
D
E
D
E
C
O
N
S
E
R
V
A
R
E
A
S
U
P
R
A
M
E
N

I
N
E
R
I
I
C
A
R
A
C
T
E

R
E
L
O
R
C
U
L
T
U
R
A
L
E

I
P
R
O
P
R
I
E
T

I
L
O
R
A
N
T
I
M
I
C
R
O
B
I
E
N
E
P
E
N
T
R
U

T
U
L
P
I
N
I
L
E
D
E
S
T
R
E
P
T
O
M
I
C
E
T
E
D
I
N
C
O
L
E
C

I
E
Stepan
ov
Vitalie,
Bureva
Svetlan
a,
Postola
chi
Olga,
Srbu
Tamara,
Tolocich
ina
Svetlana

, Slanina
Valerina
I
n
s
t
i
t
u
t
u
l
d
e
M
i
c
r
o
b
i
o
l
o
g
i
e

i
B
i
o
t
e
h
n
o
l
o
g
i
e
a
l
A
c
a
d
e
m
i
e
i

d
e

t
i
i
n

e
a
M
o
l
d
o
v
e
i

Inroducere
P
str
are
a
via
bilit
ii
i
sta
biliz
are
a
par
ticu
larit
il
or
tax
ono
mic
e
pen
tru
tulp
inil
e
con
ser
vat
e n
cad

rul
col
eci
ilor
nai
ona
le
de
mic
roo
rga
nis
me
pre
zint

un
mar
e
inte
res
at
t
din
pun
ct
de
ved
ere
fun
da
me
ntal
,
ct
i
pra
ctic
.
Cer
cet
to
rii
mic
robi
olo
gi
per
ma
nen
t
stu
dia

z
e
caci
tat
ea
dife
ritel
or
met
ode
de
con
ser
var
e
nd
elu
nga
t
asu
pra
me
nin
erii
car
act
erel
or
mor
folo
gocult
ural
e i
acti
vit
ii
pro
duc
eni
lor
de
sub
sta
ne
biol
ogi
c
acti
ve

[1,
6,
16,

17,
18,
19,
20,
21].
A
cti
no
mic
ete
le
rep
rezi
nt
o
sur
s
bo
gat

de
ant
ibio
tic
e i
alt
e
sub
sta
ne
biol
ogi
c
act
ive.
Ps
trar
ea
via
bili
ti
i i
me
ni
ner
ea
car
act
ere
lor
zi
olo
go-

bio
chi
mic
e a
act
ino
mic
ete
lor
n
con
dii
i
de
an
abi
oz
rep
rezi
nt
un
pro
ces
des
tul
de
di
ci
l de
real
izat
,
ace
ast

gru
p
de
mic
roo
rga
nis
me
car
act
eri
zn
duse
pri
ntrun
gra

d
nal
t
de
var
iabi
lita
te
[8,
9,
11,
15,
20,
23]
. n
pra
ctic
a
de
lab
ora
tor
sun
t
cu
nos
cut
e
ma
i
mu
lte
me
tod
e
de
ps
trar
e a
tul
pin
ilor
de
act
ino
mic
ete
,
din
tre
car
e
pot


en
um
era
te
ur
m
toa
rel
e:
ps
trar
ea
pe
me
dii
nut
riti
ve
ag
ari
zat
e
[20
],
n
sta
re
ng
he
at
la
t0
-20300
C
[3],
n
glic
eri
n
de
15,
0%
[1],
sub
un
str
at
de
ulei
mi
ner

al
[6,
19,
20,
21,
22,
23]
,
lio
li
zat

[4,
18]
,
cri
oco
nse
rva
t
[5,
7].

12
0

PDF to Word