Crioconservarea este un proces n cazul n care celule sau esuturi ntregi sunt conservate prin rcire, sub-zero

temperaturi sczute, cum ar fi (de obicei) 77 K sau -196 C (punctul de fierbere de azot lichid). La aceste
temperaturi sczute, orice activitate biologic, inclusiv reacii biochimice care ar conduce la moartea celulelor,
este efectiv oprit. Cu toate acestea, atunci cand solutiile crioprotector nu sunt utilizate, celulele fiind conservate
sunt de multe ori avariate din cauza congelarii n timpul abordarea la temperaturi sczute sau nclzirea la
temperatura camerei.
Temperatura
Deozitarea produselor criogenate la temperaturi foarte sczute presupune a oferi o durat nedeterminat, dac
nu chiar n apropierea de infinit, longevitatea la celule, dei real "termenul de valabilitate", este destul de dificil
de dovedit. n experimentele cu uscate, semine, cercettorii au constatat c nu a existat variabilitate
,deteriorare evident n cazul n care probele au fost inute diferit "ngheate" la temperaturi ultra-chiar i cele
rece. Temperaturi sub punctul de tranziie de sticl (Tg) de ap (n jur de minus 136 C), par a fi acceptate ca
limite n care activitatea biologic foarte substanial ncetinete, i minus 196 C (fazei lichide de azot lichid) este
temperatura preferat pentru depozitare a exemplarelor importante. n timp ce frigidere, congelatoare profund i
extra congelatoare rece adncime, toate similare cu cele interne, sunt utilizate pentru multe elemente, n general,
ultra rece de azot lichid la -196 C este necesar pentru conservarea cu succes a structurilor mai complexe
biologice pentru a opri aproape toate activitiile biologice.
Riscuri
Fenomene care pot cauza deteriorarea celulelor n timpul crioconservari au loc n principal n timpul etapei de
congelare, i includ: soluie de efecte, formarea extracelulara de ghea, deshidratare i formarea intracelular
de ghea. Multe dintre aceste efecte pot fi reduse prin cryoprotectants.
Atunci cnd au ajuns n faza de congelate, materialul este relativ conservat n condiii de siguran fata de
viitoarele daune(distrugeri). Cu toate acestea, estimri bazate pe acumularea de radiaii induse de deteriorarea
ADN-ului n timpul depozitrii criogenice au sugerat o perioad maxim de depozitare de 1000 de ani .

Efecte si soluii
Deoarece cristalele de ghea cresc dizolvarea substanelor n ap de congelare- sunt excluse,pt ca le
determin s devin concentrate n ap rmasa lichid. Concentraii ridicate din unele substane dizolvate poate
fi foarte duntoare.
Formarea extracelular de ghea
Atunci cnd esuturile sunt rcite lent, apa migreaz din celule i forme de ghea n spaiul extracelular. Prea
mult ghea extracelulara poate provoca leziuni mecanice membranei celulelor din cauza de zdrobire.
Deshidratarea
Migraia de ap care cauzeaz formarea extracelulara de ghea poate provoca, de asemenea, deshidratarea
celulelor. Asociate pe celul pot provoca daune n mod direct.
Formarea intracelular de ghea
n timp ce unele organisme i esuturi pot tolera ceva ghea extracelulara, orice ghea semnificativ
intracelulara este aproape ntotdeauna fatala n celule.
Prevenirea riscurilor
Vitez controlat-i congelare lent sunt bine stabilite tehnici de pionier la nceputul anilor 1970, care a permis
embrionului uman prima natere congelata (Zoe Leyland) n 1984. De atunci, mainile care congeleaza probe
biologice utiliznd paii programabili, sau ratele controlate, au fost utilizat n ntreaga lume pentru a oamenilor,
animalelor i biologiei celulare- "nghearea joasa" o prob pentru o mai bun pstrare, pentru decongelare n
cele din urm, nainte de a fi congelate, sau crioconservate, n azot lichid. Aceste maini sunt utilizate pentru
nghearea ovocitului, a pielii, a produselor din snge, embrionilor, spermei , celulelor stem i conservarea
general de esut n spitale,in practicile de uz veterinar iin laboratoarele de cercetare din ntreaga lume. Ca un
exemplu, estimrile au pus numrul de nateri vii de la lent ngheate ", la aproximativ 300.000 de la 400.000 sau
20 de embrioni congelai '% din cele aproximativ 3 milioane nateri din fertilizarea in vitro.
Letala este nghearea intracelulara, care poate fi evitat dac rcirea este destul de lenta pentru a permite

suficient apei de a prsi celula n timpul nghearii progresive a lichidului extracelular. Aceast rat difer
ntre celulele de diferite dimensiuni i o permeabilitate a apei: o rat tipic de rcire n jur de 1 C / minut este
adecvat pentru multe dintre celulele mamiferelor dup tratamentul cu crioprotectori, cum ar fi glicerolul sau
sulphoxidul de dimetil, dar rata nu este un optim universal.
Mai multe studii independente au furnizat dovezi c embrionii congelai stocati ,utiliznd tehnici de congelare
lent-ar putea, n anumite moduri s fie "mai buna" dect n stare proaspt a fertilizarii in vitro.Studiile au fost
prezentate Societatii Americane de Medicina Reproductiva la conferinta din San Francisco, SUA, 2008. Studiile
indic faptul c folosind embrioni congelai, mai degrab dect embrioni proaspei a redus riscul de ft mort i
natere prematur dei motivele exacte sunt nc explorate.
Vitrificarea
Cercettorii care au dezvoltat o nou tehnic, vitrificarea, din anul 2000 ca cerere pentru a oferi beneficiile de
crioconservare, fr deteriorri cauzate de formarea cristalelor de ghea. n crioconservarea clinica, vitrificarea
necesit de obicei adugarea de crioprotectori nainte de rcire. Crioprotectorii acioneaza ca antigel: la cele
mai mici temperaturi de congelare. Ei, de asemenea, crec viscozitatea. n loc de cristalizare, soluia siroposa
se transform ntr-o ghea amorfa, se vitrifica. Vitrificarea de ap este promovat prin rcirea rapid, i poate fi
realizata fr crioprotectori de ctre o cdere extrem de rapid a temperaturii (megakelvins pe secund). Rata
de care este necesar pentru a atinge starea sticlos n ap pur a fost considerat a fi imposibil pn n anul
2005.
Cele dou condiii de obicei necesare pentru a permite vitrificarea sunt o cretere a vscozitatii i-o depresiune
de temperatura de congelare. Multe substane dizolvate fac ambele, dar molecule mai mari, n general, au efect
mai mari, n special pe viscozitate. Rcirea rapid, de asemenea, promoveaz vitrificarea.
n stabilirea metodelor de crioconservare, substantele dizolvate trebuie s ptrund membrana celulelor, n
scopul de a realiza viscozitatea a crescut i deprim temperatura de congelare din interiorul celulei. Zaharurile
nu ptrund cu uurin prin membrana. Aceste substane dizolvate fac, cum ar fi sulfoxidul de dimetil, un
crioprotector comun,si sunt de multe ori toxice, n concentraie mare. Unul dintre compromisurile dificile cu care
se confrunt n crioconservarea este vitrificarea ,de a limita daunele produse de crioprotector insusi.
Tesuturi inghetate
n general, este mai uor de crioconservat pentru probe subtiri si tufe mici de celule individuale, pentru c
acestea pot fi rcite mai rapid i mai impun acest lucru doze mai mici de crioprotectori toxici. Prin urmare, scopul
de a crioconservare de ficat uman i inimii pentru depozitare i de transplant este nc la distan.
Cu toate acestea, combinaii adecvate de crioprotectori i regimuri de rcire i cltire n timpul nclzirii de
crioconservare permite de multe ori cu succes a materialelor biologice, suspensii special de celule sau probe de
esuturi subire. Exemplele includ:
Material seminal
Snge
Celule speciale pentru transfuzie
Celulele stem
Sngele ombilical din cordonul ombilical (mai multe informaii: Cord banca de snge # Crioconservare)
Probe de esuturi cum ar fi tumori i seciuni transversale histologice
Ou (ovocitelor) A se vedea crioconservarea ovocitului
Embrionii care sunt 2, 4 sau 8 celule cand sunt inghetate
esut ovarian
Semine de plante sau lstarilor poate fi crioconservati n scopuri de conservare.
n plus, eforturile sunt n curs de a pstra om criogenic, cunoscut sub numele de cryonics. n astfel de eforturi, fie
a creierului n cadrul cap sau ntregul corp pot fi supuse procesului de mai sus. Cryonics este ntr-o categorie
diferit de exemplele menionate anterior, cu toate acestea, n timp ce pentru nenumrate celule crioconservate ,
vaccinuri, esut i alte probe biologice au fost decongelate i folosite cu succes, acest lucru nu a fost nc cazul,
la toate pentru creier crioconservat sau organisme. n cauz sunt criteriile de definire a "victoriei". Sustinatorii
cryonics fac un caz care crioconservare folosind tehnologia actual, n special vitrificare a creierului, poate fi
suficient pentru pstrarea persoanelor ntr-o informare "teoretica", sensul, astfel nct acestea ar putea fi
renviat i a fcut foarte mult n ansamblu, prin avansarea tehnologiei in viitor

.
Material seminal
materialul seminal poate fi folosit cu succes practic la infinit, dup crioconservare. Cea mai lung raportate de
stocare de succes este de 21 de ani. El poate fi folosit pentru donarea de sperma n cazul n care beneficiarul
dorete tratament ntr-un timp diferite sau de loc, sau pentru barbatii care trec printr-o vasectomie, de a avea n
continuare posibilitatea de a avea copii.
Crioprotector mass-media pot fi completat cu glbenu de ou, fie sau lecitin de soia, cu cele dou care nu au
diferene semnificative statistic n comparaie cu reciproc cu privire la motilitate, morfologie, capacitatea de a lega
de Hialuronat in vitro, sau integritatea ADN-ului, dup decongelare.
ovocitelor
crioconservarea ovocitului la om
crioconservarea ovocitului este o tehnologie nou, n care oule unei femei (ovocitelor) sunt extrase, congelate
i depozitate. Mai trziu, cnd ea este gata s s rmnei gravid, oule pot fi decongelate, fertilizat, i
transferate n uter ca embrioni.

E Embrionii
Crioconservarea pentru embrionii sunt utilizate pentru depozitarea de embrioni, de exemplu, atunci cnd
fertilizarea in vitro a avut drept rezultat embrioni mai mult dect este necesar n prezent.
Sarcini au fost raportate de la embrioni stocate timp de 16 de ani. Multe studii au evaluat copiii nscui de la
embrioni congelai, sau "inghetati". Rezultatul a fost uniform pozitiv cu nici o cretere de malformaii congenitale
sau anomalii de dezvoltare.
De la 1 octombrie 2009 embrioni umani au permisiunea de a fi stocati timp de 10 ani din Marea Britanie, n
funcie de fertilizare a omului i Embriologie Actul 2008.
Datele utilizate mondial sunt greu de gasit, dar a fost raportat ntr-un studiu din 23 de ri care aproape 42000 de
embrioni congelai transferuri omului s-au efectuat n cursul anului 2001 n Europa.
Un studiu de mai mult de 11.000 crioprotectori de embrioni umani nu au artat nici un efect semnificativ de timp,
de stocare de pe supravieuire dupa dezghetare pentru fertilizarea in vitro sau cicluri donaiei ovocitului, sau
pentru embrioni congelai n etapele de pronuclear sau de clivaj. n plus, durata de stocare nu a avut nici efecte
semnificative asupra sarcinii clinice, avort spontan, implantare, sau rata natalitii n direct, fie de la fertilizarea in
vitro sau cicluri de donare a ovocitului. mai degrab, de vrst ovocitului, proporia de supravieuire, precum i
numrul de embrioni transferati sunt predictori ai rezultatului sarcinii.
tesutul ovarian
Crioconservarea de esut ovarian este de interes pentru femeile care vor s pstreze funcia lor de reproducere,
dincolo de limita naturala sau al cror potenial de reproducere este ameninat de terapie de cancer. copil mai
nti s fie nscui de o femeie dup un transplant de esut ovarian congelat, i n ciuda ca mama fiind ntr-o
stare de menopauza premature provocate de chimioterapie, a fost efectuat de profesorul Jacques Donnez i
echipa sa de la Cliniques Universitaires Saint-Luc, Belgia. O parte din ovar stnga a fost eliminat, iar tesutul a fost
lent congelat nainte de a fi depozitat n terapia de azot lichid n acelai timp, a fost realizat. esutul sase ani
mai trziu a fost implantat n apropiere de trompele uterine i ou au fost n scurt timp produse, care s permit
concepie normal s aib loc .
crioconservarea naturala
Apa poart (Tardigrada), organisme multicelulare microscopice, poate supravieui congelarii la temperaturi
sczute, prin nlocuirea cea mai mare parte a apei lor interne cu trehaloz de zahr. Zaharuri i a substanelor
dizolvate, altele care nu cristalizeaz uor au ca efect de limitare subliniaz faptul c prejudiciul membranelor
celulare. Trehaloz este un zahar care nu cristaliza uor. Amestecuri de dizolvate poate obine efecte similare.
Unele substanelor dizolvate, inclusiv srurile, au dezavantajul c acestea pot fi toxice la concentraii mari.
Istorie
Una dintre cele mai importante lucrri devreme pe teoria de crioconservarea a fost James Lovelock de faima
teoriei Gaia. Locul de munc Dr. Lovelock's a sugerat c deteriorarea celulelor roii din snge n timpul de
congelare s-a datorat subliniaz osmotic. Lovelock la nceputul anilor 1950 au sugerat, de asemenea, c

creterea concentraiilor de sare ntr-o celul n care se deshidrateaza pentru a pierde ap la ghea externe, ar
putea cauza daune la celul. Crioconservarea de esut n ultima vreme a inceput cu nghearea spermatozoizilor
de la psri, care, n 1957 a fost crioprotectori , de o echip de oameni de tiin n Regatul Unit, condus de Dr.
Christopher Polge. Procesul sa mutat n lumea uman n anii 1950, cu sarcini obinute dup inseminarea
spermei congelate. Cu toate acestea, imersiunea rapid a probelor n azot lichid nu a fcut-o, pentru unele dintre
aceste probe, cum ar fi tipurile de embrioni, mduvei osoase i celulele stem-produc viabilitatea necesare pentru
a le face mai uor de utilizat la decongelare. nelegerea sporit a mecanismului de prejudiciu congelare la celule
a subliniat importana controlarii sau lent de rcire pentru a obine maxim de supravieuire pe dezgheare a
celulelor vii. O rat de controlat a procesului de rcire, care s permit s se echilibreze probe biologice pentru a
optimza parametri fizici osmotici ntr-un crioprotector (o form de anti-blocare) nainte de rcire ntr-un
predeterminat, mod controlat dovedit necesar. Capacitatea de crioprotectorilor , n cazurile nceputul glicerol,
pentru a proteja celulele de la un prejudiciu de ngheare a fost descoperit accidental. Un prejudiciu de congelare
are dou aspecte-daune directe din cristale de ghea i daunele secundare, cauzate de creterea concentraiei
de substanelor dizolvate ca treptat mai mult de ghea se formeaz. n 1963 Peter Mazur, la Oak Ridge National
Laboratory din SUA, a artat c nghearea letalea intracelular ar putea fi evitate dac rcirea a fost destul de
lenta pentru a permite apei suficient pentru a prsi celula n timpul nghearii progresive a lichidul extracelular.
Aceast rat difer ntre celulele de diferite dimensiuni i o permeabilitate a apei: o rat de tipic de rcire n jur de
1 C / minut este adecvat pentru multe dintre celulele de mamifere dup tratamentul cu crioprotectori cum ar fi
glicerolul sau sulphoxide de dimetil, dar rata nu este un optim universal.