Tehnologii criogenice

-crioconservarea-

Lupse Mihai
TCM eng
Anul lV
Subiecte abordate

• Definirea conceptului
• Generalitati
• Crioprotectantii
• Riscuri ale procesului
• Material biologic care poate fi folosit
Definirea conceptului

• Crioconservare – proces prin care organismele, tesuturile, sau

orice alte constructii biologice, care pot suferi leziuni datorate
proceselor biologice, sunt racite la temperature foarte scazute (
-80˚C – dioxid de carbon, -196 ˚C – azot lichid)
• La temperaturi atat de scazute, orice activitate biologica sau
chimica care poate produce leziuni materialului organic este
oprita
Generalitati

• Rolul crioconservarii este de a conserva materia biologica fara a cauza

leziuni ulterioare datorate formarii ghetii in timpul inghetarii
• Elvitarea formarii ghetii se realizeaza prin folosirea crioprotectantilor, dar
se studiaza noi metode de inghetare fara folosirea acestora
• Unele microorganisme se folosesc de aceasta tehnica pentru a supravietui
iernilor, prin inlocuirea apei din interiorul organismului cu trehaloza, care
previne distrugerea tesuturilor din cauza cristalizarii
• Unele specii de broaste se pot folosi natural de aceeasi metoda daca
cantitatea apei din organism care ingheata este sub 65%
Crioprotectantii

• Monstrele organice sunt asezate intr-un recipient cu un

cryoprotectant, unde prin controlarea racirii monstrelor, ajuta la
ajungerea unei stari de echilibru osmotic, scazand de asemenea
si temperature de inghet, dupa care se poate continua racirea
organismului, de obicei, la o viteza de 1 ˚C /min
• Actioneaza pe baza cresterii concentratiei de sare din celule
• In general, acestia altereaza sau compromit structura si functiile
celulelor
• Glicolii si dimetil sufloxidul se folosesc in majoritatea cazurilor
Riscuri ale procesului

• Formarea particulelor de gheata extracelulare – in timpul

inghetarii, particulele de apa din interiorul celulei migreaza
inspre exteriorul acesteia, inghetand. Prea multa gheata formata
in spatial extracellular poate duce la zdrobirea membranelor
celulelor
• In timpul inghetarii apei, substantele solubile din cellule se
concentreaza in particulele de apa ramase lichide, ceea ce in
unele cazuri poate distruge celula
• Dezhidratarea si formarea particulelor de gheata in interiorul
celulelor pot duce de asemenea la distrugerea acestora
Material biologic care poate fi folosit

• In general, se prefera folosirea monstrelor formate din aglomerari

de cellule, intrucat procesul este rapid si nu e nevoie de o
cantitate mare de crioprotectanti (din aceasta cauza
crioconservarea organelor interne umane pentru pastrare si
transplant este inca impractic)
• Monstre folosite: sperma, cellule stem, monster de tesut ale unor
tumori, embrioni, seminte ale unor plante
Va multumesc pentru atentie!